JP2015522018A

JP2015522018A - フェノキシエチルピペリジン化合物

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Publication number: JP2015522018A
Application number: JP2015520304A
Authority: JP
Inventors: アレンシフラー，マシュー; シュレンバーグヨーク，ジェレミー
Original assignee: イーライリリーアンドカンパニー
Priority date: 2012-06-29
Filing date: 2013-06-20
Publication date: 2015-08-03
Anticipated expiration: 2033-06-20
Also published as: AR091429A1; CN104411684A; JO3296B1; DOP2014000287A; US20140005226A1; IL236219A0; LT2867207T; JP6127136B2; RS56452B1; HK1203937A1; AU2013280875A1; PH12015500009B1; PE20150182A1; DK2867207T3; NZ701933A; EP2867207B1; CR20140553A; CA2875569C; MA37686B1; TN2014000501A1

Abstract

本発明は、以下の式ＩＩの化合物：（式中、Ｘは、であり、Ｒ１は、Ｈ、−ＣＮまたはＦであり、Ｒ２は、Ｈまたはメチルであり、Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、Ｈ、メチルまたはエチルであり、あるいはＲ３およびＲ４は一緒に結合して、シクロプロピル環を形成する）またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。【選択図】なし

Description

本発明は、新規フェノキシエチルピペリジン化合物、その化合物を含む医薬組成物、生理的障害を治療するためにその化合物を使用する方法、ならびに化合物の合成に有用な中間体およびプロセスに関する。

本発明は、変形性関節症（osteoarthritis）および関節リウマチを含み、さらにこれらの病態に関連した疼痛を含む、関節炎などの炎症性病態の治療の分野である。関節炎は米国のみにおいて数百万人の患者に影響を与えており、身体障害の主要な原因である。治療は、多くの場合、ＮＳＡＩＤ（非ステロイド系抗炎症薬）またはＣＯＸ−２阻害剤を含み、それらは有害な心臓血管および／または胃腸の副作用を生じる場合がある。したがって、高血圧などの不十分な心臓血管プロファイルを有する患者は、ＮＳＡＩＤまたはＣＯＸ−２阻害剤を使用することを除外され得る。したがって、好ましくは現在の治療の副作用を有さない、変形性関節症および関節リウマチの代替の治療についての必要性が存在する。

４種のプロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）受容体サブタイプが以下のように識別されている：ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３およびＥＰ４。ＥＰ４は、関節リウマチおよび変形性関節症の齧歯動物モデルにおける関節炎症疼痛に関与する主要な受容体であることが開示されている（例えば、非特許文献１を参照のこと）。したがって、選択的ＥＰ４アンタゴニストは、関節痛を含む、関節炎を治療するのに有用であり得る。さらに、ＥＰ４拮抗作用は、ＰＧＩ_２およびＴｘＡ_２などのプロスタノイドの生合成を干渉しないので、選択的ＥＰ４アンタゴニストは、ＮＳＡＩＤおよびＣＯＸ−２阻害剤で見られる潜在的な心臓血管副作用を有し得ないことが示唆されている（例えば、非特許文献２を参照のこと）。

特許文献１はＥＰ４受容体アンタゴニストとして環状アミン誘導体を開示している。特許文献２は鎮痛作用を有するＥＰ４受容体選択的アンタゴニストである特定のオルト置換アリールおよびヘテロアリールアミド化合物を開示している。さらに、特許文献３はＩＬ−２３介在性疾患を治療するのに有用である選択的ＥＰ４アンタゴニストである特定の化合物を開示している。

国際公開第２０１３／００４２９０号米国特許出願公開第２００５／０２５０８１８号国際公開第２０１１／１０２１４９号

Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、３２５、４２５（２００８）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙＬｅｔｔｅｒｓ、２１、４８４（２０１１）

本発明は、ＥＰ１、ＥＰ２およびＥＰ３と比較してＥＰ４の選択的阻害剤である新規化合物を提供する。さらに、本発明は、従来のＮＳＡＩＤと比較して心臓血管または胃腸副作用を減少させる可能性を有する新規化合物を提供する。

したがって、本発明は、以下の式ＩＩの化合物：

（式中、Ｘは、

であり、
Ｒ^１は、Ｈ、−ＣＮまたはＦであり、
Ｒ^２は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ^３は、Ｈであり、
Ｒ^４は、Ｈ、メチルまたはエチルであり、あるいは
Ｒ^３およびＲ^４は一緒に結合して、シクロプロピル環を形成する）
またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

本発明はさらに、以下の式Ｉの化合物：

またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

本発明はまた、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における関節炎を治療する方法を提供する。本発明はまた、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節症を治療する方法を提供する。さらに、本発明はまた、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における関節リウマチを治療する方法を提供する。本発明はまた、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における関節炎に関連する疼痛を治療する方法を提供する。本発明はさらに、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節症または関節リウマチに関連する疼痛を治療する方法を提供する。

さらに、本発明は、治療、特に変形性関節症の治療に使用するための式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。さらに、本発明は、関節リウマチの治療に使用するための式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明はまた、変形性関節症または関節リウマチに関連する疼痛の治療に使用するための化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。さらに、本発明は、変形性関節症を治療するための医薬を製造するための式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明は、関節リウマチを治療するための医薬を製造するための式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はまた、変形性関節症または関節リウマチに関連する疼痛を治療するための医薬を製造するための式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。

本発明はさらに、１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、組成物はさらに、１種以上の他の治療剤を含む。本発明はまた、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を合成するための新規中間体およびプロセスを含む。

さらに、本発明は、ＢＬＴ−１、ＢＬＴ−２、ＡＬＸ／ＦＰＲ１、ＧＰＲ３２、ＣｙｓＬＴ１、ＣｙｓＬＴ２、またはＣｈｅｍＲ２３の調節因子などの、リポキシンまたはレゾルビン受容体の調節因子の有効量と組み合わせて、ＥＰ４アンタゴニストなどの炎症性プロスタグランジンのアンタゴニストの有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節症および関節リウマチを含む、関節炎などの炎症性病態を治療する方法を含む。

本発明のさらなる態様は、ＢＬＴ−１、ＢＬＴ−２、ＡＬＸ／ＦＰＲ１、ＧＰＲ３２、ＣｙｓＬＴ１、ＣｙｓＬＴ２またはＣｈｅｍＲ２３の調節因子などの、リポキシンまたはレゾルビン受容体の調節因子の有効量と組み合わせて、ｍＰＧＥＳ−１阻害剤などの、炎症性プロスタグランジンシンターゼの阻害剤の有効量を、このような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節症および関節リウマチを含む、関節炎などの炎症性疾患を治療する方法を含む。

本明細書で使用される場合、「治療する」または「治療するため」という用語は、存在する症状または障害の進行または重症度を制止、抑制、遅延、停止または反転することを含む。

本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、マウス、モルモット、ブタ、ラット、イヌまたはヒトなどの哺乳動物を指す。好ましい患者はヒトであると理解される。

本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、患者に単回または複数回用量が投与されると、診断または治療下の患者において所望の効果を与える、本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の量または用量を指す。

有効量は、公知の技術を使用することによって、および同様の状況下で得られた結果を観察することによって当業者としての担当の診断医によって容易に決定され得る。患者の有効量を決定する際に、限定されないが、哺乳動物の種；その大きさ、年齢および全体的な健康；関連する特定の疾患または障害；疾患または障害の程度または関係または重症度；個々の患者の反応；投与される特定の化合物；投与様式；投与される製剤の生物学的利用能；選択される投与計画；併用薬の使用；および他の関連状況を含む、多くの要因が担当の診断医によって考慮される。

式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、全体的に広範囲にわたって有効である。例えば、１日当たりの用量は通常、約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内である。一部の場合、上述の範囲の下限値未満の投薬レベルが十分以上であってもよく、一方、他の場合、さらに多くの投薬量が許容可能な副作用で利用されてもよく、したがって、上記の投薬範囲は本発明の範囲を決して限定するものではない。

本発明の化合物は好ましくは、化合物を生物学的に利用可能にする任意の経路によって投与される医薬組成物として製剤化される。最も好ましくは、このような組成物は経口投与用である。このような医薬組成物およびそれらを調製するプロセスは当該分野において周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ（Ｄ．Ｂ．Ｔｒｏｙ、編者、第２１版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、２００６を参照のこと）。

式Ｉおよび式ＩＩの化合物は本発明の治療方法に特に有用であるが、特定の基、置換基および構造が好ましい。以下の段落は、このような好ましい基、置換基および構造を記載する。これらの選択は本発明の治療方法および新規化合物の両方に適用可能であることは理解される。

Ｒ^１がＨであり、Ｒ^２がＨであり、Ｒ^３がＨであり、Ｘが

であることが好ましい。

Ｒ^３がＨである場合、Ｒ^４がメチルであることがさらに好ましい。

Ｘが

であることがさらに好ましい。

以下の構造：

の４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］安息香酸およびその薬学的に許容可能な塩が特に好ましい。

４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］安息香酸塩酸塩がさらに特に好ましい。

本明細書で使用される場合、「ｋＰａｇ」とは、キロパスカル基準を指し；「Ｂｏｃ」とは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を指し；「ＤＭＥＭ」とは、ダルベッコ改変イーグル培地を指し；「ＡＣＮ」とは、アセトニトリルを指し；「ＤＭＳＯ」とは、ジメチルスルホキシドを指し；「ＤＭＦ」とは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指し；「ＥｔＯＨ」とは、エタノールを指し；「ＴＨＦ」とは、テトラヒドロフランを指し；「ＭｅＯＨ」とは、メタノールを指し；「ＥｔＯＡｃ」とは、酢酸エチルを指し；「Ｅｔ_２Ｏ」とは、ジエチルエーテルを指し；「ＴＢＭＥ」とは、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを指し；「ＢＯＰ」とは、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを指し；「ＮａＨＭＤＳ」とは、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドを指し；「ＰＧＥ_２」とは、プロスタグランジンＥ_２を指し；「ＦＢＳ」とは、ウシ胎児血清を指し；「ＩＢＭＸ」とは、（３−イソブチル−１−メチルキサンチン）を指し；「ＭＥＳ」とは、（２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸を指し；「ＨＥＰＥＳ」とは、（２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］エタンスルホン酸）を指し；「ＨＴＲＦ」とは、均質時間分解蛍光技術を指し；「ＨＥＫ」とは、ヒト胎児腎臓を指し；「ＨＢＳＳ」とは、ハンクス液を指し；「ＥＣ_８０」とは、その薬剤について可能な８０％の最大効果を生じる薬剤の濃度を指し；「ＩＣ_５０」とは、その薬剤について可能な５０％の最大阻害反応を生じる薬剤の濃度を指す。

薬学的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的な技術は当該分野において周知である。例えば、Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．、「Ｓａｌｔｓｅｌｅｃｔｉｏｎｆｏｒｂａｓｉｓｄｒｕｇｓ」、ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、３３：２０１−２１７（１９８６）；Ｂａｓｔｉｎ，Ｒ．Ｊ．ら、「ＳａｌｔＳｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎＰｒｏｃｅｄｕｒｅｓｆｏｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＮｅｗＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｔｉｔｉｅｓ」、ＯｒｇａｎｉｃＰｒｏｃｅｓｓＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、４：４２７−４３５（２０００）；およびＢｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．ら、「ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳａｌｔｓ」、ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、６６：１−１９（１９７７）を参照のこと。合成の当業者は、式Ｉおよび式ＩＩの化合物が、当業者に周知の技術および条件を使用して、塩酸塩などの薬学的に許容可能な塩に容易に変換され、単離され得ることを理解するであろう。さらに、合成の当業者は、式ＩおよびＩＩの化合物が、対応する薬学的に許容可能な塩からの対応する遊離塩基または遊離酸として容易に変換され、単離され得ることを理解するであろう。

本発明は、ラセミ体を含む前記化合物の全ての個々の鏡像異性体またはジアステレオマーおよび鏡像異性体とジアステレオマーの混合物を意図する。個々の異性体、鏡像異性体またはジアステレオマーは、選択的結晶化技術またはキラルクロマトグラフィーなどの方法によって本発明の化合物の合成における任意の簡便な点において当業者により分離または分解され得る（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄＲｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，Ｉｎｃ．、１９８１、ならびにＥ．Ｌ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ、「ＳｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＯｒｇａｎｉｃＣｏｍｐｏｕｎｄｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、１９９４を参照のこと）。

本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩は、当該分野において公知の様々な手順によって調製され得、それらの一部は以下のスキーム、調製例および実施例に例示される。記載される経路の各々についての特定の合成工程は、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を調製するために異なる方法で、または異なるスキームからの工程と共に組み合わされてもよい。以下のスキームにおける各工程の生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、濾過、粉砕および結晶化を含む、従来の方法によって回収され得る。試薬および出発物質は当業者に容易に入手可能である。他に特定されない限り、全ての置換基は上記の通りである。これらのスキーム、調製例および実施例は本発明の範囲を限定することを決して意図していないことは理解される。

調製例１
（Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−（４−ブロモフェニル）エチルアミンの合成

スキーム１、工程Ａ：０℃にてジクロロメタン（１０ｍＬ）中の（−）−１−（４−ブロモフェニル）エチルアミン（１．００ｇ、５．０ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．０９ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を室温に加温し、次いで２時間撹拌する。撹拌した混合物に、１Ｍの塩酸水溶液（２５ｍＬ）、続いてＥｔ_２Ｏ（２５ｍＬ）を加える。層を分離し、水層をＥｔ_２Ｏ（２×２５ｍＬ）で抽出する。有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過して固体を除去し、減圧下で濾液を濃縮して、白色固体（１．５０ｇ、９９％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２４４／２４６（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）^＋，３２２／３２４（Ｍ＋Ｎａ）^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．４６−７．４３（ｍ，２Ｈ），７．１９−７．１５（ｍ，２Ｈ），４．８１−４．６５（ｍ，１Ｈ），１．４８−１．３６（ｍ，１２Ｈ）。

以下の化合物を、（−）−１−（４−ブロモフェニル）エチルアミンの代わりに１−（４−ブロモフェニル）シクロプロパンアミンを使用して実質的に調製例１の方法によって調製する。

調製例３
メチル（Ｓ）−４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンゾエートの合成

スキーム１、工程Ｂ：機械的に撹拌しながらＰａｒｒオートクレーブに、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（１２０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（３５５ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−（４−ブロモフェニル）エチルアミン（１．５０ｇ、５．０ｍｍｏｌ）、無水ＣＨ_３ＣＮ（４５ｍＬ）、無水ＣＨ_３ＯＨ（３０ｍＬ）およびトリエチルアミン（１．９ｍＬ、１３．６３ｍｍｏｌ）を加える。容器を密閉し、一酸化炭素で７２４ｋＰａｇまで加圧する。容器を８５℃に加熱し、混合物を一晩撹拌する。反応容器（注意−毒ガス！）を通気し、丸底フラスコに移し、ＣＨ_３ＯＨでリンスする。混合物を減圧下で濃縮して、橙色の残渣を得る。水（５０ｍＬ）を加え、次いでＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、次いで層を分離し、有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過して、固体を除去し、濾液を減圧下で濃縮して、粗生成物を得る。０％〜６０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって生成物を精製する。減圧下で所望の生成物を含有する画分を濃縮して、白色固体（１．００ｇ、７２％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２２４（Ｍ＋２Ｈ−ｔ−Ｂｕ）^＋，３０２（Ｍ＋Ｎａ）^＋，５８１（２Ｍ＋Ｎａ）^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ７．８９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），４．６４（ｄｑ，Ｊ＝７．４，６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），１．３４（ｂｒｓ，９Ｈ），１．２８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。

以下の化合物を、（Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１−（４−ブロモフェニル）エチルアミンの代わりにｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−（４−ブロモフェニル）シクロプロピル］カルバメートを使用して実質的に調製例３の方法によって調製する。

調製例５
メチル（Ｓ）−４−（１−アミノエチル）ベンゾエート塩酸塩の合成

スキーム１、工程Ｃ：メチル（Ｓ）−４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンゾエート（１．００ｇ、３．５８ｍｍｏｌ）に、塩化水素（ジオキサン中に４Ｍ、５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温にて１時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して、白色固体（７５０ｍｇ、９７％収率）として標題化合物を得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ８．５７（ｂｒｓ，３Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．４７（ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。

以下の化合物を、メチル（Ｓ）−４−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンゾエートの代わりにメチル４−［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロプロピル］ベンゾエートを使用して実質的に調製例５の方法によって調製する。

調製例７
１−（２，２−ジメトキシエトキシ）−４−フルオロベンゼンの合成

スキーム２、工程Ａ：４−フルオロフェノール（５．５ｇ、４９．１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（４９ｍＬ）に溶解し、２−ブロモ−１，１−ジメトキシエタン（１１．６ｍＬ、９８．１ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（１６．９５ｇ、１２２．７ｍｍｏｌ）で溶液を処理する。溶液を５日間撹拌しながら還流で加熱する。混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮する。得られた粗物質を、０％〜５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーに供する。減圧下で所望の生成物を含有する画分を濃縮して、無色の油（５．８５ｇ、６０％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２１８（Ｍ＋ＮＨ_４），２２３（Ｍ＋Ｎａ）^＋。

調製例８
（２，２−ジメトキシエトキシ）シクロヘキサンの合成

スキーム３、工程Ａ：シクロヘキサノール（２．００ｍＬ、１９．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（９．６ｍＬ）に溶解し、次いでＮａＨＭＤＳ（ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、２１．０ｍＬ、２１．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温にて５分間撹拌する。２−ブロモ−１，１−ジメトキシエタン（２．２６ｍＬ、１９．１ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を窒素雰囲気下で３日間、室温にて撹拌する。混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＣｌ水溶液（２×２５０ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濾液を濃縮する。得られた粗物質を０％〜１０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーに供する。所望の生成物を含有する画分を減圧下で濃縮して、淡黄色の油（１．１０ｇ、３１％収率）として標題化合物を得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ４．４７（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．４９（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．３９（ｓ，６Ｈ），３．２５（ｔｔ，Ｊ＝９．２，３．７Ｈｚ，１Ｈ），１．９４−１．８７（ｍ，２Ｈ），１．７６−１．６９（ｍ，２Ｈ），１．５５−１．４９（ｍ，１Ｈ），１．３４−１．１７（ｍ，５Ｈ）。

調製例９
２−（４−フルオロフェノキシ）アセトアルデヒドの合成

スキーム４、工程Ａ：１−（２，２−ジメトキシエトキシ）−４−フルオロベンゼン（１．００ｇ、４．９９ｍｍｏｌ）をクロロホルム（５．０ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．７５５ｍＬ、９．９９ｍｍｏｌ）で混合物を処理する。混合物を室温で２日間撹拌し、次いで６５℃で加熱し、４時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して、^１ＨＮＭＲ分析（５５０ｍｇ、７１％非補正収率）に示されるように約７０％純度で無色の油として標題化合物を得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ９．８５（ｔ，Ｊ＝０．５Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝８．９，８．５Ｈｚ，２Ｈ），６．８５（ｄｄ，Ｊ＝９．５，４．３Ｈｚ，２Ｈ），４．５５（ｂｒｓ，２Ｈ）。

調製例１０
２−（シクロヘキシルオキシ）アセトアルデヒドの合成

スキーム５、工程Ａ：（２，２−ジメトキシエトキシ）シクロヘキサンおよび水（３０ｍＬ）の混合物を硫酸（９．０Ｍ水溶液）で１．０のｐＨに酸性化し、混合物を短経路蒸留ヘッドに接続する。圧力を２６．７ｋＰａに低下させ、混合物を１００℃で１時間加熱する。混合物を室温に冷却し、次いでＴＢＭＥ（２×７５ｍＬ）で水層を抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（７５ｍＬ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、標題化合物（６３４ｍｇ、５１％収率）を得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ９．７３（ｔ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０６（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３１（ｔｔ，Ｊ＝９．２，３．９Ｈｚ，１Ｈ），１．９５−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．７９−１．６８（ｍ，２Ｈ），１．５７−１．５０（ｍ，１Ｈ），１．３９−１．２０（ｍ，５Ｈ）。

調製例１１
メチル（Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボキシレートの合成

スキーム６、工程Ａ：メチル（Ｒ）−ピペリジン−２−カルボキシレート（５．００ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８７ｍＬ）に溶解し、Ｋ_２ＣＯ_３（１４．４８ｇ、１０４．８ｍｍｏｌ）およびβ−ブロモフェネトール（ｂｒｏｍｏｐｈｅｎｅｔｏｌｅ）（７．１６ｇ、３４．９ｍｍｏｌ）で処理する。混合物を１００℃にて一晩撹拌する。混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）を加える。有機相を水（４×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（１００ｍＬ）で洗浄する。有機相をＫ_２ＣＯ_３で乾燥させ、濾過して固体を除去し、濾液を減圧下で濃縮して、黄色の油を得る。この粗物質を、２０％〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供する。減圧下で所望の生成物を含有する画分を濃縮して、^１ＨＮＭＲ分析（６．５０ｇ、６４％収率）により約９０％の純度で無色の油として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２６４（Ｍ＋Ｈ）^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．３Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ａｐｐｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．２９（ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．０Ｈｚ，１Ｈ），３．１４（ａｐｐｄｔ，Ｊ＝１１．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．９５（ａｐｐｄｔ，Ｊ＝１３．７，６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ａｐｐｄｔ，Ｊ＝１３．７，６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．９，３．７Ｈｚ，１Ｈ），１．９０−１．８２（ｍ，１Ｈ），１．７９（ａｐｐｔｄ，Ｊ＝８．９，３．８Ｈｚ，１Ｈ），１．６７−１．５９（ｍ，３Ｈ），１．３９（ａｐｐｔｄ，Ｊ＝８．８，４．０Ｈｚ，１Ｈ）。

調製例１２
（Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジンカルボン酸塩酸塩の合成

スキーム６、工程Ｂ：室温にて、メチル（Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボキシレート（６．５０ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１１．１ｍＬ）に溶解し、ＮａＯＨ（５Ｍ水溶液、８．８９ｍＬ、４４．４ｍｍｏｌ）を加え、６５℃で一晩撹拌しながら加熱する。水相のｐＨが１．０に到達するまで、塩化水素（５Ｍ水溶液）を加える。水相をＣＨ_２Ｃｌ_２（３×７５ｍＬ）で洗浄する。水相を減圧下で濃縮して白色固体を得る。固体をＥｔＯＨ（５０ｍＬ）で粉砕し、濾過して、懸濁した塩を除去し、濾液を減圧下で濃縮して、白色固体（５．１７ｇ、８１％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２５０（Ｍ＋Ｈ）^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ７．３１（ｄｄ，Ｊ＝８．８，７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．０２−６．９７（ｍ，３Ｈ），４．４７（ＡＢ−ｃｏｕｐｌｅｄｄｄｄ，Ｊ＝１１．５，７．１，３．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３８（ＡＢ−ｃｏｕｐｌｅｄｄｄｄ，Ｊ＝１１．８，６．３，３．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７３−３．６８（ｍ，２Ｈ），３．２９（ａｐｐｔｄ，Ｊ＝１３．２，３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．３５（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．００−１．８０（ｍ，４Ｈ），１．６８（ａｐｐｔ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，１Ｈ）。

調製例１３
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートの合成

スキーム７、工程Ａ：（Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジンカルボン酸塩酸塩（７５０ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）およびメチル（Ｓ）−４−（１−アミノエチル）ベンゾエート塩酸塩（５６６ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）を室温にてＤＭＦ（５．２５ｍＬ）に溶解する。トリエチルアミン（１．６５ｍＬ、１１．８１ｍｍｏｌ）、次いでＢＯＰ（１．５１ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて３時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈する。混合物を飽和ＬｉＣｌ水溶液（２×２５ｍＬ）で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過して、固体を除去し、減圧下で濃縮する。得られた黄−橙色の油を、０％〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出する、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供する。所望の生成物を含有する画分を減圧下で濃縮して、白色固体（９３０ｍｇ、８６％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）４１１（Ｍ＋Ｈ）^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ８．１３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，７．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８９（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．０Ｈｚ，２Ｈ），４．９６（ａｐｐｐｅｎｔｅｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０５−３．９８（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．１１（ａｐｐｄｔ，Ｊ＝１１．４，３．７Ｈｚ，１Ｈ），２．８１（ｄｄ，Ｊ＝７．２，２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．７７（ａｐｐｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５０（ａｐｐｄｔ，Ｊ＝１１．２，６．８Ｈｚ，１Ｈ），２．１５（ａｐｐｔｄ，Ｊ＝１１．６，２．８Ｈｚ，１Ｈ），１．６８−１．６１（ｍ，２Ｈ），１．５９−１．４０（ｍ，３Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．２７−１．１８（ｍ，１Ｈ）。

以下の化合物を、メチル（Ｓ）−４−（１−アミノエチル）ベンゾエート塩酸塩の代わりに適切なアンモニウム塩を使用して実質的に調製例１３の方法によって調製する。

調製例１７
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートの合成

スキーム８、工程Ａ：（Ｒ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペコリン酸（２０．０ｇ、８７．２ｍｍｏｌ）およびＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ）の０℃の混合物に、トリエチルアミン（１３．４ｍＬ、９６．０ｍｍｏｌ）を加える。次いで、クロロギ酸イソブチル（１２．５ｍＬ、９６．０ｍｍｏｌ）を滴下形式で加え、２０分間撹拌する。メチル４−［（Ｓ）−アミノエチル］ベンゾエート（１７．２ｇ、９６．０ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を室温まで加温し、１時間撹拌する。水（３００ｍＬ）を加え、次いで層を分離し、有機層を１ＭのＫＨＳＯ_４（２００ｍＬ）、続いて飽和ＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、次いで濾過して固体を除去し、減圧下で濾液を濃縮して、無色の油（３４．０ｇ、１００％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２９１（Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ）^＋、４１３（Ｍ＋Ｎａ）^＋。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．９９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），５．１４（ａｐｐｐｅｎｔｅｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．４０（ｄｄ，Ｊ＝６．２，５．８Ｈｚ，１Ｈ），２．６３（ａｐｐｔｄ，Ｊ＝６．９，２．４Ｈｚ，１Ｈ），２．２５（ｂｒｓ，１Ｈ），１．７５（ａｐｐｔｑ，Ｊ＝１３．４，６．７Ｈｚ，１Ｈ），１．６３−１．５０（ｍ，３Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．３８（ａｐｐｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。

調製例１８
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートの合成

スキーム８、工程Ｂ：ＥｔＯＡｃ（１３６ｍＬ）およびＥｔＯＨ（５５．８ｍＬ）の０℃の混合物に、塩化アセチル（６２．０ｍＬ、８７１ｍｍｏｌ）を滴下形式で加え、次いで混合物を３０分の時間にわたって室温まで加温する。ＥｔＯＡｃ（１３６ｍＬ）中のメチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート（３４．０ｇ、８７．１ｍｍｏｌ）の溶液を加え、次いで反応混合物を室温にて１時間撹拌する。混合物を水（２×１００ｍＬ）で抽出し、次いでｐＨが１０になるまで３２％アンモニア水溶液を合わせた水層に加える。混合物をＴＢＭＥ（２×２００ｍＬ）で抽出し、次いで合わせた有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過して固体を除去し、濾液を減圧下で濃縮して、白色固体（２０．２ｇ、８０％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２９１（Ｍ＋Ｈ）^＋、５８１（２Ｍ＋Ｈ）^＋。^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．００（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．１５（ｂｒｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ａｐｐｐｅｎｔｅｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．２３（ｄｄ，Ｊ＝９．９，３．３Ｈｚ，１Ｈ），３．０１（ａｐｐｄｔ，Ｊ＝１１．８，３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．６８（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．１，１０．７，３．０Ｈｚ，１Ｈ），１．９８−１．９０（ｍ，１Ｈ），１．６１−１．５２（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４３−１．３４（ｍ，２Ｈ）。

調製例１９
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートの合成

スキーム８、工程Ｃ：室温にてＣＨ_２Ｃｌ_２（７０５ｍＬ）中のシリカゲル（１００ｇ）の懸濁液に、ＮａＩＯ_４（３５．０ｇ、１６１．９ｍｍｏｌ）の水溶液（２３５ｍＬ）を滴下形式で加える。混合物を３０分間撹拌し、次いで１，２−ジヒドロキシ−３−フェノキシプロパン（２１．５ｇ、１２１．４ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに３０分間撹拌する。混合物を濾過して固体を除去し、濾液の層を分離する。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過して固体を除去する。濾液に、メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート（２３．５ｇ、８０．９ｍｍｏｌ）、続いてナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３５．７ｇ、１６１．９ｍｍｏｌ）を少しずつ加える。室温にて１時間撹拌し、次いでｐＨが１０になるまで３２％のアンモニア水溶液を加える。層を分離し、有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させる。濾過して固体を除去し、次いで濾液を減圧下で濃縮して粗物質を得る。その物質をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）に溶解し、シリカゲル（３０ｇ）のパッドで濾過する。濾液を減圧下で濃縮して、３６ｇの物質を得る。ＴＢＭＥ（１８０ｍＬ）を加え、５０℃で加熱する。温度を５０℃に維持しながら、ヘキサン（３６０ｍＬ）を１５分にわたって加え、次いで１時間撹拌する。混合物を室温に冷やし、次いで濾過によって固体を単離し、減圧下で乾燥させて、白色固体（１６．７ｇ、５０％収率）として標題化合物を得る。

調製例２０
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート塩酸塩の合成

スキーム９、工程Ａ：メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート（７．８０ｇ、１９．９８ｍｍｏｌ）を塩酸（１，４−ジオキサン中の４Ｍ溶液、２５．０ｍＬ、９９．９ｍｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を室温にて１時間撹拌する。混合物を減圧下で濃縮して、白色固体（６．０ｇ、９２％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）２９１（Ｍ＋Ｈ）^＋、５８１（２Ｍ＋Ｈ）^＋、６０３（２Ｍ＋Ｎａ）^＋。

調製例２１
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−（４−フルオロフェノキシ）エチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートの合成

スキーム９、工程Ｂ。ＤＣＥ（９．９ｍＬ）中のメチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート塩酸塩（６５０ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ）および２−（４−フルオロフェノキシ）アセトアルデヒド（３３７ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ）の混合物を室温にて３０分間撹拌する。酢酸（０．１１３ｍＬ、１．９９ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（５９０ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３日間撹拌する。反応物を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２５ｍＬ）でクエンチし、水層をＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、次いで有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた油を、０％〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供する。所望の生成物を含有する画分を減圧下で濃縮して、白色固体（６００ｍｇ、７０％収率）として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）４２９（Ｍ＋Ｈ）^＋、４５１（Ｍ＋Ｎａ）^＋。

以下の化合物を、２−（４−フルオロフェノキシ）アセトアルデヒドの代わりに適切なアルデヒドを使用して実質的に調製例２１の方法によって調製する。

調製例２５
メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（１−メチル−２−フェノキシエチル）ピペリジニウム−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートトリフルオロアセテートの合成

スキーム１０、工程Ａ：メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート塩酸塩（１５０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）、１−フェノキシ−２−プロパノン（６９μＬ、０．５０ｍｍｏｌ）、ＤＣＥ（２．３ｍＬ）、酢酸（２６μＬ、０．４６ｍｍｏｌ）、およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１３６ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の混合物を６５℃にて２日間、撹拌する。反応物を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）でクエンチし、水層をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）で抽出する。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗物質を、５％〜５０％ＡＣＮ／水の勾配における０．１％ＴＦＡで溶出するＣ１８シリカゲル上の逆相クロマトグラフィーに供する。所望の生成物を含有する画分を減圧下で濃縮して、ジアステレオマー（２４ｍｇ、１０％収率）の２：１混合物において淡黄色の油として標題化合物を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）４２５（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例１
４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］安息香酸塩酸塩の合成

スキーム１１、工程Ａ：メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエート（９３０ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を室温にてＴＨＦ（４．０ｍＬ）およびＣＨ_３ＯＨ（４．０ｍＬ）に溶解する。ＮａＯＨ（１Ｍ水溶液、４．５ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）を加え、次いで得られた混合物を室温にて３日間撹拌する。反応混合物を減圧下で濃縮してゴム状の固体を得る。塩化水素（ジオキサン中の４Ｍ溶液、２ｍＬ、８ｍｍｏｌ）を加え、１０分間激しく撹拌する。懸濁した固体を濾過によって除去し、濾液を減圧下で濃縮して白色固体を得る。固体を煮沸ジエチルエーテル（２５ｍＬ）中に粉砕し、懸濁した固体を濾過により単離して白色固体として標題化合物（６５０ｍｇ、６６％収率）を得る。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：３９７（Ｍ＋Ｈ）^＋。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ１２．８９（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０８（ｂｒｓ，１Ｈ），９．４１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．９６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），５．０２（ａｐｐｐｅｎｔｅｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），４．３４−４．２１（ｍ，２Ｈ），４．０３（ａｐｐｔ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５７（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４８−３．３９（ｍ，１Ｈ），３．３７−３．１８（ｍ，２Ｈ），２．１５（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），１．８２−１．６６（ｍ，４Ｈ），１．５０−１．４３（ｍ，１Ｈ），１．３９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。

以下の化合物を、メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（２−フェノキシエチル）ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートの代わりに適切なメチルエステルを使用して実質的に実施例１の方法によって調製する。

実施例９
４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（１−メチル−２−フェノキシエチル）ピペリジニウム−２−カルボニル］アミノ］エチル］安息香酸トリフルオロアセテートの合成

スキーム１２、工程Ａ：メチル４−［（１Ｓ）−１−［［（２Ｒ）−１−（１−メチル−２−フェノキシエチル）ピペリジニウム−２−カルボニル］アミノ］エチル］ベンゾエートトリフルオロアセテート（２４ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２２６μＬ）に溶解し、混合物をメタノール（２２６μＬ）および水酸化ナトリウム（１Ｎ水溶液、１７０μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）で処理する。混合物を室温にて一晩撹拌し、次いで減圧下で濃縮してゴム状の固体を得る。粗物質を、５％〜５０％ＡＣＮ／水の勾配において０．１％ＴＦＡで溶出するＣ１８シリカゲル上の逆相クロマトグラフィーに供して、２つの別個の画分を得、各々は生成物の別個のジアステレオマーを含有する。各々の画分を減圧下で濃縮し、各々を最小体積のメタノールに溶解し、各々をジエチルエーテル（５ｍＬ）で粉砕し、各々を減圧下で濃縮して、白色固体として標題化合物の異性体１（３．０ｍｇ、１３％収率）および異性体２（１．１ｍｇ、５％収率）を得る。

実施例９ａ：主要な異性体（異性体１）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４１１（Ｍ＋Ｈ）^＋。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ９．７５（ｂｒｓ），９．３０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３３−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．０４−６．９５（ｍ，３Ｈ），５．０３（ａｐｐｐ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．３５−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．０７（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７４−３．６５（ｍ，１Ｈ），３．５２（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１１−２．９９（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），１．８９−１．７１（ｍ，４Ｈ），１．５２−１．４５（ｍ，１Ｈ），１．４０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．３３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。
実施例９ｂ：微量の異性体（異性体２）。質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４１１（Ｍ＋Ｈ）^＋。

実施例１〜９のＨＣｌ塩は、当該技術分野で周知の条件を利用して、対応する遊離塩基に容易に変換されることは当業者により容易に理解される。

ヒトＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３およびＥＰ４に対するインビトロ結合
ｈＥＰ１およびｈＥＰ４膜を、ヒトＥＰ１（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４７０）またはＥＰ４（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ４２９１０９）受容体を安定に発現する組換えＨＥＫ２９３細胞から調製する。ｈＥＰ２およびｈＥＰ３膜を、ＥＰ２（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４７１）またはＥＰ３（アイソフォームＶＩ：Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ４２９１０８）受容体プラスミドで一過的にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞から調製する。凍結した細胞ペレットを、テフロン（登録商標）／ガラスホモジナイザーを使用して均質化緩衝液中で均質化する。膜タンパク質をアリコートし、−８０℃で保存する前に乾燥氷上で急速冷凍する。均質化緩衝液は、ＲｏｃｈｅＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ（カタログ番号１６９７４９８）から得たＥＤＴＡと共に、１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、２５０ｍＭのスクロース、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．３ｍＭのインドメタシンおよびさらにＣｏｍｐｌｅｔｅ（商標）を含んだ。

各受容体に対する［３Ｈ］−ＰＧＥ_２結合についてのＫ_ｄ値を、飽和結合試験または同種競合によって決定する。１０点曲線を生成するために３倍希釈シリーズを使用して化合物を９６ウェルフォーマット中で試験する。希釈した化合物を、０．３〜０．５ｎＭの［^３Ｈ］−ＰＧＥ_２（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、１１８〜１８０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）の存在下で２５℃にて９０分間、２０μｇ／ウェルのＥＰ１、１０μｇ／ウェルのＥＰ２、１μｇ／ウェルのＥＰ３または１０〜２０μｇ／ウェルのＥＰ４膜とインキュベートする。０．５ｍＬのポリスチレン９６ウェルディープウェルプレートを使用して結合反応を２００μＬのＭＥＳ緩衝液（ＫＯＨを含む１０ｍＭのＭＥＳｐＨ６．０、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２および１ｍＭのＥＤＴＡ）中で実施する。２μＭのＰＧＥ_２の存在および非存在下で結合を比較することによって非特異的結合を算出する。膜を濾過（ＴｏｍＴｅｋ収集器）によって収集し、冷緩衝液（ＫＯＨを含む１０ｍＭのＭＥＳ、ｐＨ６．０、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２）で４回洗浄し、６０℃のオーブン中で乾燥させ、ＴｏｐＣｏｕｎｔ検出器を使用したカウント毎分（ＣＰＭ）として放射線を定量する。任意の阻害剤の非存在下での結合のパーセントとして特異的結合のパーセントを算出し、２μＭのＰＧＥ_２の存在下での結合を補正した。示されるように４パラメータ非線形ロジスティック方程式（ＡＢａｓｅＥｑｕａｔｉｏｎ２０５）を使用してデータを分析する：ｙ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ））））、式中、ｙ＝特異的阻害％、Ａ＝曲線の下部；Ｂ＝曲線の上部；Ｃ＝相対ＩＣ_５０＝上部から下部までのデータの範囲に基づいて５０％阻害を引き起こす濃度；Ｄ＝ヒル勾配（Hill Slope）＝曲線の傾き。Ｋ_ｉはＩＣ_５０値から変換する（Ｋ_ｉ＝ＩＣ_５０／（１＋［Ｌ］／Ｋ_ｄ）、式中、［Ｌ］はリガンド濃度である）。本明細書における実施例１〜９の化合物を実質的に上記のように試験すると、約１μＭ未満のｈＥＰ４についてのＫ_ｉ値を示す。

より具体的には、実質的に上記の手順に従って、表１のデータは、実施例１の化合物が低いナノモル濃度でｈＥＰ４に結合することを実証している。表１のデータはまた、実施例１の化合物が、ｈＥＰ１、ｈＥＰ２およびｈＥＰ３より強力にｈＥＰ４に結合することを実証しており、ｈＥＰ４受容体に対する選択性を示す。

インビトロでのヒトＥＰ４機能的アンタゴニスト活性
ヒトＥＰ４受容体を安定に発現する組換えＨＥＫ２９３細胞においてアッセイを実施する。１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５００μｇ／ｍｌのジェネティシンおよび２ｍＭのＬ−グルタミンを補足した高グルコースおよび塩酸ピリドキシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を有するＤＭＥＭ中で培養することによって細胞株を維持する。コンフルエントな培養物を、５％ＣＯ_２を含む雰囲気下で３７℃にて増殖させる。細胞を２．５％のトリプシン−ＥＤＴＡを使用して収集し、１０^７個の細胞／ｍＬにて凍結培地（６％ＤＭＳＯを含むＦＢＳ）中に懸濁し、アリコートを液体窒素中に保存する。アッセイの直前に、細胞をＤＭＥＭ中で解凍し、遠心分離し、ｃＡＭＰ緩衝液中で再懸濁する。

ＨＴＲＦ（Ｃｉｓｂｉｏカタログ番号６２ＡＭ４ＰＥＢ）を使用してＥＰ４アンタゴニストによるＰＧＥ_２刺激性ｃＡＭＰ産生の阻害を測定する。４０００個の細胞と当量のアリコートを、室温にて２０分間、ＥＣ_８０を生じる規定の濃度のＰＧＥ_２（Ｓｉｇｍａ製の０．１８８ｎＭのＰＧＥ_２、カタログ番号Ｐ５６４０−１０ｍｇ）を含有する５０μＬのｃＡＭＰアッセイ緩衝液およびＥＰ４アンタゴニストとインキュベートする。ｃＡＭＰアッセイ緩衝液は、５００ｍＬのＨＢＳＳ、０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳおよび２００μＭのＩＢＭＸ（ＳｉｇｍａＩ５８７９）を含有する。ＣＪ−０４２７９４（４−｛（１Ｓ）−１−［（｛５−クロロ−２−［（４−フルオロフェニル）オキシ］フェニル｝カルボニル）アミノ］エチル｝安息香酸）は陽性対照として役立つ。ｃＡＭＰレベルを測定するために、溶解緩衝液中のｃＡＭＰ−ｄ２コンジュゲートおよび抗ｃＡＭＰ−クリプテートコンジュゲートを、室温にて１時間、処理した細胞とインキュベートする。ＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）プレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）を使用してＨＴＲＦ信号を検出して、６６５ｎｍ対６２０ｎｍの蛍光の比を算出する。生データを、各実験について生成したｃＡＭＰ標準曲線を使用してｃＡＭＰ量（ｐｍｏｌ／ウェル）に変換する。示されるように４パラメータ非線形ロジスティック方程式（ＡＢａｓｅＥｑｕａｔｉｏｎ２０５）を使用してデータを分析する：ｙ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／ｘ）＾Ｄ））））、式中、ｙ＝特異的阻害％、Ａ＝曲線の下部；Ｂ＝曲線の上部、Ｃ＝相対ＩＣ_５０＝上部から下部までのデータの範囲に基づいて５０％阻害を引き起こす濃度、Ｄ＝ヒル（Hill）、勾配（Slope）＝曲線の傾き。

実質的に上記の手順に従って、本明細書の実施例１〜９の化合物を実質的に上記のように試験すると、約１μＭ未満のＩＣ_５０を示す。より具体的には、実質的に上記の手順に従って、実施例１はヒトＥＰ４にて測定すると６．９±２．５ｎＭ（ｎ＝５）のＩＣ_５０を有する。これは、実施例１〜９の化合物がインビトロでヒトＥＰ４の強力なアンタゴニストであることを実証している。

インビトロでのラットＥＰ４機能的アンタゴニスト活性
ラットＥＰ４ｃＤＮＡ（Ｇｅｎｅｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３２７６）をｐｃＤＮＡ３．１ベクター内でクローニングし、続いて受容体発現についてＨＥＫ２９３細胞中でトランスフェクトする。ラットＥＰ４の安定なクローンをスケールアップし、次いでさらなる化合物スクリーニングのために細胞バンクとして凍結する。ｒＥＰ４細胞においてＥＰ４アンタゴニスト化合物を試験するために、凍結細胞を解凍し、次いで細胞をｃＡＭＰアッセイ緩衝液中に再懸濁する。ｃＡＭＰ緩衝液を、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、ＳＨ３０２３７）、０．１％のＢＳＡ（Ｇｉｂｃｏ、１５２６０）および１２５μＭのＩＢＭＸ（Ｓｉｇｍａ、Ｉ５８７９）を補足したフェノールレッド（Ｈｙｃｌｏｎｅ、ＳＨ３０２６８）無しのＨＢＳＳによって作製する。細胞を９６ウェル半分面積平底ポリスチレンブラックプレート（Ｃｏｓｔａｒ３６９４）中に播種する。化合物をＤＭＳＯで連続希釈して１０点濃度反応曲線を得る。次いで希釈した化合物を、１／１００のＤＭＳＯ／緩衝液の比にてＰＧＥ_２（ＥＣ_８０を得るための規定の濃度のＣａｙｍａｎ１４０１０）を含有するｃＡＭＰアッセイ緩衝液に加える。細胞を室温にて３０分間、ＰＧＥ_２（ＥＣ_８０濃度）の存在下で化合物により処理する。細胞から生成したｃＡＭＰレベルをｃＡＭＰＨＴＲＦアッセイキット（Ｃｉｓｂｉｏ６２ＡＭ４ＰＥＣ）によって定量する。ＨＴＲＦ最適化プロトコル（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を使用してプレートをＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダーで読み取る。ＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍ（ｖ．４）非線形回帰、シグモイド用量反応曲線フィッティングを使用してＩＣ_５０を算出する。

実質的に上記の手順に従って、本明細書の実施例１〜９の化合物を実質的に上記のように試験すると、約１μＭ未満のＩＣ_５０を示す。より具体的には、実質的に上記の手順に従って、実施例１の化合物はラットＥＰ４で測定して１５ｎＭのＩＣ_５０を有する。これは、実施例１〜９の化合物がインビトロでラットＥＰ４の強力なアンタゴニストであることを実証している。

ヒト全血におけるインビトロアンタゴニスト活性
マクロファージ／単球からのＬＰＳ誘導性ＴＮＦα産生に対するＰＧＥ_２の阻害効果はＥＰ４受容体によって媒介されると考えられる（Ｍｕｒａｓｅ，Ａ．ら、ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ、８２：２２６−２３２（２００８）を参照のこと）。ヒト全血におけるＬＰＳ誘導性ＴＮＦα産生に対するＰＧＥ_２の阻害効果を反転する実施例１の化合物の能力は機能活性の指標である。

正常なボランティアドナーから血液をヘパリンナトリウムバキュテナーチューブ中に採取する。ドナーは、４８時間以内にＮＳＡＩＤもしくはセレコキシブまたは供与の２週間以内にグルココルチコイドを摂取していない。全てのチューブ／ドナーを５０ｍＬのＦａｌｃｏｎ円錐遠心分離チューブ内にプールし、９８μＬ／ウェルを９６ウェル組織培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ３０７２）内に分散させる。化合物をＤＭＳＯ内に最終１００倍で希釈し、３連において１μＬ／ウェルを血液に加えて、７点濃度反応曲線を得る。血液を、５％ＣＯ_２湿潤雰囲気中で３７℃にて３０分間、化合物で前処理し、その後、１ｍＭのＰＧＥ_２（Ｃａｙｍａｎ１４０１０）を有するまたは有さない、両方の０．２ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／ＰＢＳ中の１ｍｇ／ｍＬのリポ多糖（ＬＰＳ）（Ｓｉｇｍａ０１１１：Ｂ４）の１μＬ／ウェルの溶液を加えて、１０ｎＭのＰＧＥ_２を有するまたは有さない、両方の１０μｇ／ｍＬの最終ＬＰＳ濃度を得る。プレートを、５％ＣＯ_２湿潤雰囲気中で３７℃にて２０〜２４時間、インキュベートする。プレートを、２２℃、１８００×ｇにて１０分間、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ５８１０Ｒ遠心分離器で遠心分離する。血漿を細胞溶解物から除去し、ｖ底ポリプロピレンプレートに移す。２μＬ血漿中のＴＮＦαレベルを、Ｉｍｍｕｌｏｎ４ＨＢＸプレート（Ｔｈｅｒｍｏ３８５５）および３，３’，５，５’テトラメチルビフェニル−４，４’−ジアミン基質（ＫＰＬ５０−７６−０３）を使用して市販の酵素免疫測定法（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓＤＹ２１０）によって定量する。ＳＯＦＴｍａｘＰＲＯ（ｖ．４．３．１）ソフトウェアを使用してプレートリーダー（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓＶｅｒｓａｍａｘ）でＡ_４５０−Ａ_６５０にてプレートを読み取る。ＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍ（ｖ．４）非線形回帰、シグモイド用量反応曲線フィッティングを使用してＩＣ_５０を算出する。結果を幾何平均±標準偏差；ｎ＝独立した実験の数として表す。

実質的に上記の手順に従って、本明細書の実施例１〜９の化合物を実質的に上記のように試験すると、約１μＭ未満のＩＣ_５０を示した。より具体的には、実質的に上記の手順に従って、実施例１の化合物は１２３±８８ｎＭ（ｎ＝１２）のＩＣ_５０を有する。これは、実施例１〜９の化合物がヒト血液ＴＮＦα誘導アッセイにおいて強力なＥＰ４アンタゴニストであることを実証している。

Claims

以下の式の化合物：

（式中、
Ｘは、

であり、
Ｒ^１は、Ｈ、−ＣＮまたはＦであり、
Ｒ^２は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ^３は、Ｈであり、
Ｒ^４は、Ｈ、メチルまたはエチルであり、あるいは
Ｒ^３およびＲ^４は一緒に結合して、シクロプロピル環を形成する）
またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｒ^２がＨである、請求項１に記載の化合物。
Ｒ^３がＨであり、Ｒ^４がメチルである、請求項１または請求項２に記載の化合物。
Ｘが

である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
である請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
である請求項５に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
である請求項６に記載の化合物の塩酸塩。
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節症を治療する方法。
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における関節リウマチを治療する方法。
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、患者における変形性関節症または関節リウマチに関連する疼痛を治療する方法。
治療に使用するための請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
変形性関節症の治療に使用するための請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
関節リウマチの治療に使用するための請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
変形性関節症または関節リウマチに関連する疼痛の治療に使用するための請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
１種以上の薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む、医薬組成物。
１種以上の他の治療剤をさらに含む、請求項１５に記載の医薬組成物。