JP2015508155A - 膵臓β細胞障害における可溶性MANF - Google Patents
膵臓β細胞障害における可溶性MANF Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015508155A JP2015508155A JP2014554800A JP2014554800A JP2015508155A JP 2015508155 A JP2015508155 A JP 2015508155A JP 2014554800 A JP2014554800 A JP 2014554800A JP 2014554800 A JP2014554800 A JP 2014554800A JP 2015508155 A JP2015508155 A JP 2015508155A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- subject
- pancreatic
- level
- pancreatic beta
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/473—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. acridines, phenanthridines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/185—Nerve growth factor [NGF]; Brain derived neurotrophic factor [BDNF]; Ciliary neurotrophic factor [CNTF]; Glial derived neurotrophic factor [GDNF]; Neurotrophins, e.g. NT-3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1136—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against growth factors, growth regulators, cytokines, lymphokines or hormones
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
- G01N33/5038—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects involving detection of metabolites per se
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/507—Pancreatic cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/475—Assays involving growth factors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
- G01N2500/10—Screening for compounds of potential therapeutic value involving cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/04—Endocrine or metabolic disorders
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/04—Endocrine or metabolic disorders
- G01N2800/042—Disorders of carbohydrate metabolism, e.g. diabetes, glucose metabolism
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
Abstract
Description
本願は、2012年1月24日に出願した米国特許出願第61/590,021号への優先権を主張するものである。米国特許出願第61/590,021号は、その全体を参照により本明細書に援用する。
膵臓β細胞障害は、対象の膵臓β細胞機能不全または膵臓β細胞量の段階的な減少を特徴とする疾患の分類である。膵臓β細胞障害に罹患している対象において減少の可能性のある膵臓β細胞機能としては、限定するものではないが、インスリンの産生および分泌、Cペプチドの産生および分泌、ならびに膵島アミロイドポリペプチド(IAPP)の産生および分泌が挙げられる。膵臓β細胞障害の非限定的な例としては、1型糖尿病(真性糖尿病)、2型糖尿病、およびウルフラム症候群が挙げられる。膵臓β細胞障害は、すべての年齢のヒト、例えば幼児、小児、成人および高齢の対象において発症し得る。例えば、膵臓β細胞障害は、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85または90歳を超える年齢の対象で発症し得る。
本願に記載されている、可溶性MANFタンパク質の内因性レベルは、例えば、膵臓β細胞障害を診断するためのマーカー、対象の膵臓β細胞障害を発症するリスクを予測するためのマーカー、対象(例えば、膵臓β細胞障害を発症するリスクのある対象)における膵臓β細胞機能または膵臓β細胞量をモニターするためのマーカー、膵臓β細胞障害を発症するリスクが高い対象を同定するためのマーカー、膵臓β細胞障害を処置するための対象を選択するためのマーカー、臨床試験に参加する対象を選択するためのマーカー、および膵臓β細胞における小胞体ストレスを検出するためのマーカーとして、本願に記載されているいずれかの方法で検出することができる。精製、単離し、かつ/または組換え型である可溶性MANFタンパク質はまた、対象の膵臓β細胞障害を処置するかその発症を遅延させ、膵臓β細胞における小胞体ストレスを減少し、2個以上の膵臓β細胞の集団における小胞体ストレス由来アポトーシス細胞死を減少するか遅延させる方法において使用することができる。
MRRMWATQGLAVALALSVLPGSRALRPGDCEVCISYLGRFYQDLKDRDVTFSPATIENELIKFCREARGKENRLCYYIGATDDAATKIINEVSKPLAHHIPVEKICEKLKKKDSQICELKYDKQIDLSTVDLKKLRVKELKKILDDWGETCKGCAEKSDYIRKINELMPKYAPKAASARTDL
LRPGDCEVCISYLGRFYQDLKDRDVTFSPATIENELIKFCREARGKENRLCYYIGATDDAATKIINEVSKPLAHHIPVEKICEKLKKKDSQICELKYDKQIDLSTVDLKKLRVKELKKILDDWGETCKGCAEKSDYIRKINELMPKYAPKAASARTDL
ggaggcggtg cggcgcggcg ggtgcggttc agtcggtcgg cggcggcagc ggaggaggag gaggaggagg aggaggagga ggatgaggag gatgtgggcc acgcaggggc tggcggtggc gctggctctg agcgtgctgc cgggcagccg ggcgctgcgg ccgggcgact gcgaagtttg tatttcttat ctgggaagat tttaccagga cctcaaagac agagatgtca cattctcacc agccactatt gaaaacgaac ttataaagtt ctgccgggaa gcaagaggca aagagaatcg gttgtgctac tatatcgggg ccacagatga tgcagccacc aaaatcatca atgaggtatc aaagcctctg gcccaccaca tccctgtgga gaagatctgt gagaagctta agaagaagga cagccagata tgtgagctta agtatgacaa gcagatcgac ctgagcacag tggacctgaa gaagctccga gttaaagagc tgaagaagat tctggatgac tggggggaga catgcaaagg ctgtgcagaa aagtctgact acatccggaa gataaatgaa ctgatgccta aatatgcccc caaggcagcc agtgcacgga ccgatttgta gtctgctcaa tctctgttgc acctgagggg gaaaaaacag ttcaactgct tactcccaaa acagcctttt tgtaatttat tttttaagtg ggctcctgac aatactgtat cagatgtgaa gcctggagct ttcctgatga tgctggccct acagtacccc catgagggga ttcccttcct tctgttgctg gtgtactcta ggacttcaaa gtgtgtctgg gattttttta ttaaagaaaa aaaatttcta gctgtccttg cagaattata gtgaatacca aaatggggtt ttgccccagg aggctcctaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaa
LRQGDCEVCISYLGRFYQDLKDRDVTFSPASIEKELIKFCREARGKENRLCYYIGATEDAATKIINEVSKPLSHHIPVEKICEKLKKKDSQICELKYDKQIDLSTVDLKKLRVKELKKILDDWGETCKGCAEKSDYIRKINELMPKYAPKAASSRTDL
LRPGDCEVCISYLGRFYQDLKDRDVTFSPATIEEELIKFCREARGKENRLCYYIGATDDAATKIINEVSKPLAHHIPVEKICEKLKKKDSQICELKYGECD
LRPGDCEVCISYLGRFYQDLKDRDVTFSPATIEEELIKFCREARGKENRLCYYIGATDDAATKIINEVSKPLAHHIPVEKICEKLKKKDSQICELKYDKQIDLSTVDLKKLRVKELKKILDDWGEMCKGCAEKSDYIRKINELMPKYAPKAASARTDL
LRPGDCEVCISYLGRFYQDLKDRDVTFSPASIEKELTKFCREARGKENRLCYYIGATDDAATKIINEVSKPLAHHIPVEKICEKLKKKDSQICELKYDKQIDLSTVDLKKLRVKELKKILDDWGETCKGCAEKSDYIRKINELMPKYAPKAASSRTD
LKEEDCEVCVKTVRRFADSLDDSTKKDYKQIETAFKKFCKAQKNKEHRFCYYLGGLEESATGILNELSKPLSWSMPAEKICEKLKKKDAQICDLRYEKQIDLNSVDLKKLKVRDLKKILNDWDESCDGCLEKGDFIKRIEELKPKYSRSEL
LKDGECEVCVGFLQRLYQTIQENNVKFDSDSIEKALLKSCKDAKGKENRFCYYIGATSDAATKITNEVSKPMSYHVPVEKICEKLKKKDSQICELKYDKQVDLSSVDLKKLKVKDLKKILEEWGESCKGCVEKSDFIRKINELMPKYAPSAAKARTDL
本願は、対象における膵臓β細胞障害を診断する方法を提供する。これらの方法は、対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)することと、生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較することとを含む。これらの方法において、可溶性MANFの基準レベルと比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが増加したということは、対象が膵臓β細胞障害に罹患していることを示し、また、可溶性MANFの基準レベルと比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが減少したか有意な変化がないということは、対象が膵臓β細胞障害に罹患していないことを示す。
さらに、対象の膵臓β細胞障害を発症するリスクを予測する方法を提供する。これらの方法は、対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)し、生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較することを含む。可溶性MANFの基準レベルと比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが増加したということは、対象が膵臓β細胞障害を発症するリスクが高いことを示し、また、基準レベルと比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが減少したか有意な変化がないということは、対象が膵臓β細胞障害を発症するリスクが低いか有意なリスクがないことを示す。本願に記載の可溶性MANFの任意の基準レベルを、これらの方法で使用することができる。一部の実施形態は、対象由来の生体試料を取得することをさらに含む。
さらに、対象(例えば、膵臓β細胞障害を発症するリスクのある対象、膵臓β細胞障害に罹患している対象、または膵臓β細胞移植を受けた対象)の膵臓β細胞機能不全をモニターする方法を提供する。これらの方法は、第1の時点での対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)し、第2の時点での対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)し、第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルを第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較することを含む。第1の時点での可溶性MANFのレベルと比較して第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルが増加したということは、膵臓β細胞機能が減少している(例えば、有意な、観察可能な、または検出可能な減少)、または対象の膵臓β細胞量が減少していることを示す。第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較して第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルが減少したか有意な変化がないということは、対象の膵臓β細胞機能または膵臓β細胞量に変化がない、または増加していることを示す。
さらに、対象(例えば、膵臓β細胞障害に罹患していると診断された対象)における膵臓β細胞機能不全の処置の有効性をモニターする方法を提供する。これらの方法は、第1の時点での対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)し、第2の時点での対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)し、第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルを第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較することを含むものであって、(i)第1の時点が処置前であり、第2の時点が処置開始後の任意の時点であるか、(ii)第1の時点が処置開始後であり、第2の時点が処置中または処置後のより遅い時点であり;第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較した第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルの減少は、対象において処置が有効であったことを示す。一部の実施形態において、膵臓β細胞障害の処置は、インスリン(例えば、本願に記載のインスリンのいずれかの形態)、ピオグリタゾンおよびTUDCAの1つまたは複数の投与である。一部の実施形態において、処置は、対象(例えば、本願に記載のような対象)への膵臓β細胞の移植である。
さらに、膵臓β細胞障害を処置するための対象を選択する方法を提供する。これらの方法は、対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定(アッセイ)し;生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較し;基準レベルと比較して生体試料の可溶性MANFのレベルが増加した対象を膵臓β細胞障害の処置のために選択することを含む。これらの方法において、基準レベルと比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが減少しているか、有意な変化がない対象は、膵臓β細胞障害の処置のために選択されない。
さらに、膵臓β細胞障害を発症するリスクのある対象を同定する方法を提供する。これらの方法は、対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定し;対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較することを含む。対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルが基準レベルと比較して増加した場合、対象は、膵臓β細胞障害を発症するリスクが高いと同定される。基準レベルと比較して、対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルが減少したか有意に変化していない場合、対象は膵臓β細胞障害を発症するリスクが低いと同定される。
さらに、臨床試験に参加する対象を選択する方法を提供する。これらの方法は、対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定し;対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較し、臨床試験に参加するための、基準レベル(例えば、本願に記載の可溶性MANFのいずれかの基準レベル)と比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが増加したか、または減少したかもしくは有意な変化のない対象を選択することを含む。
さらに、膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルを決定し、産生される可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベル(例えば、本願に記載の可溶性MANFのいずれかの基準レベル)と比較することを含む、膵臓β細胞の小胞体ストレスを検出する方法を提供する。可溶性MANFの基準レベルと比較して、膵臓β細胞により産生される可溶性MANFのレベルが増加したということは、膵臓β細胞における小胞体ストレスの増加を示す。可溶性MANFの基準レベルと比較して、膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルが減少したか有意な変化がないということは、膵臓β細胞が検出可能なレベルの小胞体ストレスを受けていないことを示す。
さらに、対象に有効量の可溶性MANF(例えば、精製、単離し、または組換え型である可溶性MANFタンパク質(例えば、本願に記載のいずれかの可溶性MANFタンパク質))および/またはアポモルヒネを投与することを含む、対象の膵臓β細胞障害を処置するかその発症を遅延させる方法を提供する。一部の実施形態において、処置によって、対象の膵臓β細胞障害の症状(例えば、本願に記載のいずれかの症状)の数が減少するか、または、膵臓β細胞障害の1つもしくは複数の症状(例えば、本願に記載のいずれかの症状)の重症度、強度もしくは頻度が減少する可能性がある。一部の実施形態において、処置によって、発症または1つもしくは複数の症状を遅延させることができる(処置を受けている対象と比較して、処置を受けていない対象における1つまたは複数の症状の実際的な発症の時間が増加)。例えば、処置によって下記の1つまたは複数が生じ得る:対象の血糖レベル(複数可)の減少、対象の糖化ヘモグロビンのレベルの減少、対象のインスリン産生の喪失割合の減少、対象の膵臓β細胞機能の喪失割合の減少、および対象の膵臓β細胞量の喪失割合の減少。一部の実施形態において、例えば、本方法がアポモルヒネ(apomorpine)の投与を含んでいる場合、対象は勃起不全またはパーキンソン病に罹患していない。
例えば、一部の実施形態において、対象に投与される可溶性MANFは、配列番号2および4〜7のいずれか1つ、すなわち、配列番号2または4〜7の完全長に少なくとも80%同一(例えば、少なくとも85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%または100%同一)である配列を含有し、場合によっては、(本願に記載の)可溶性MANFタンパク質の生物活性を有していてもよい。一部の実施形態において、対象に投与される可溶性MANFは、配列番号2(ヒト可溶性MANF)に、すなわち、配列番号2の完全長に少なくとも95%同一(例えば、少なくとも96%、97%、98%、99%または100%同一)である配列を含有し、場合によっては、(本願に記載の)可溶性MANFタンパク質の生物活性を有していてもよい。一部の実施形態において、対象に投与される可溶性MANFは、配列番号2または可溶性MANFの内因性形態(野性型)である。これらのいずれかの実施形態において、可溶性MANFは精製または単離することができる。これらのいずれかの実施形態において、可溶性MANFは組換え型タンパク質であり得る。
さらに、膵臓β細胞における小胞体ストレスを減少する方法を提供する。これらの方法は、膵臓β細胞を有効量の1つまたは複数の(例えば2または3つの)の可溶性MANF(例えば、本願に記載のいずれかの可溶性MANFタンパク質、例えば、配列番号2に少なくとも80%同一である配列を含有する、組換え型、精製、または単離された可溶性MANFタンパク質)、アポモルヒネ、およびピオグリタゾンと接触させることを含む。一部の実施形態において、膵臓β細胞はインビトロにある(組織培養物)。一部の実施形態において、膵臓β細胞は対象内にあり得る。これらの実験において使用される膵臓β細胞は、本願に記載のいずれかの膵臓β細胞であり得る。
小胞体ストレスのある膵臓β細胞は、細胞内のアポトーシス経路を活性化し得る。本願はまた、膵臓β細胞の集団を有効量の1つまたは複数の(例えば2または3つの)可溶性MANF(例えば、本願に記載のいずれかの可溶性MANFタンパク質)、アポモルヒネおよびピオグリタゾンと接触させることを含む、2個以上の膵臓β細胞の集団における小胞体ストレス由来アポトーシスを減少するか遅延させる方法を提供する。
さらに、本願は、少なくとも1つの可溶性MANF(例えば、本願に記載のいずれかの可溶性MANFタンパク質、例えば、精製、単離された、または組換え型である可溶性MANF)および/またはアポモルヒネと、膵臓β細胞障害に対する少なくとも1つの他の処置(例えば、本願に記載のいずれかの膵臓β細胞障害の処置、例えばピオグリタゾン、TUDCA、および本願に記載のいずれかのインスリンの1つまたは複数)とを含有する医薬組成物を提供する。
さらに、可溶性MANFタンパク質(例えば、本願に記載のいずれかの可溶性MANFタンパク質)に特異的に結合する、少なくとも1つの抗体または抗原結合性抗体フラグメント(例えば、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv、di−scFv、またはsdAb)と、膵臓β細胞障害の1つの別のマーカー(例えば、インスリン、Cタンパク質およびIAPP)に特異的に結合する少なくとも1つの(例えば2、3または4つの)抗体または抗原結合性抗体フラグメントを含有するキットを提供する。一部の実施形態において、キットに含まれる抗体または抗原結合性抗体フラグメントは、基質上に局在している(例えば酵素免疫吸着測定法)。一部の実施形態において、キットは、単離、精製された、または組換え型である可溶性MANFタンパク質(例えば、本願に記載のいずれかの可溶性MANFタンパク質)をさらに含むことができる。一部の実施形態において、1つまたは複数の抗体または抗原結合性抗体フラグメントは標識化されている(例えば、放射性同位元素、フルオロフォア、または結合性タンパク質(例えばアビジン))。これらのキットは、例えば、膵臓β細胞障害の診断、対象における膵臓β細胞を発症するリスクにある対象の同定、または対象の膵臓β細胞機能もしくは膵臓β細胞量のモニタリングに有用であり得る。一部の実施形態において、キットは、本願に記載のいずれかの方法を実施するための説明書をさらに含有することができる。
本願で提供する方法は、結合タンパク質(BiP)シグナル配列(例えば、マウスまたはヒトBiPシグナル配列)、酸化還元感受性蛍光タンパク質(例えば、酸化還元感受性緑色蛍光タンパク質および酸化還元感受性黄色蛍光タンパク質)、およびアミノ酸配列KDEL(Lys−Asp−Glu−Leu)を含有するレポータータンパク質を使用する。一部の実施形態において、BiPのシグナル配列はN末端にあり、酸化還元感受性蛍光タンパク質はBiPシグナル配列に対してC末端側であり、アミノ酸配列KDELは酸化還元感受性蛍光タンパク質に対してC末端側である。一部の実施形態において、レポータータンパク質に存在する2つ以上の個別のタンパク質エレメント(例えば、BiPのシグナル配列、酸化還元感受性蛍光タンパク質、およびKDEL配列)の間に、1〜100個のアミノ酸(例えば、1〜50、1〜40、1〜30、1〜25、1〜20、1〜15および1〜10個のアミノ酸)がある。酸化還元感受性緑色蛍光タンパク質のアミノ酸配列を下記に記載する。
MSKGEELFTG VVPILVELDG DVNGHKFSVS GEGEGDATYG KLTLKFIVTT GKLPVPWPTL VTTFXLQCFA RYPDHMKRHD FFKSAMPEGY VQERTIFFKD DGNYKTRAEV KFEGDTLVNR IELKGIDFKE DGNILGHKLE YNYNSHCVYI VADKQKNGIK VNFKIRHNIE DGSVQLADHY QQNTPIGDGP VLLPDNHYLC YQSALSKDPN EKRDHMVLLE FVTAAGITHG MDELYK
MKLSLVAAMLLLLSAARA
MMKFTVAAALLLLGAVRA
MMKFTVVAAALLLLGAVRAEEEDPPVATMSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTLKFISTTGKLPVPWPTLVTTFSYGVQCFSRYPDHMKRHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDDGNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNCHKVYIMADKQKNGIKVNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLKTCSALSKDPNEKRDHMVLLERVTAAGITHGMDELYKTSGGPPPTGEEDTSEKDEL
atgatgaagttcactgtggtggcggcggcgttgctgctgctgggcgcggtgcgggccgaggaggaggatccaccggtcgccaccatgagtaaaggagaagaacttttcactggagttgtcccaattcttgttgaattagatggtgatgttaatgggcacaaattttctgtcagtggagagggtgaaggtgatgcaacatacggaaaacttacccttaaatttatttccactactggaaaactacctgttccatggccaacacttgtcactactttcagttatggtgttcaatgcttttcaagatacccagatcatatgaaacggcatgactttttcaagagtgccatgcccgaaggttatgtacaggaaagaactatatttttcaaagatgacgggaactacaagacacgtgctgaagtcaagtttgaaggtgatacccttgttaatagaatcgagttaaaaggtattgattttaaagaagatggaaacattcttggacacaaattggaatacaactataactgccacaaggtatacatcatggcagacaaacaaaagaatggaatcaaagttaacttcaaaattagacacaacattgaagatggaagcgttcaactagcagaccattatcaacaaaatactccaattggcgatggccctgtccttttaccagacaaccattacctgaagacatgctctgccctttcgaaagatcccaacgaaaagagagaccacatggtccttcttgagcgcgtaacagctgctgggattacacatggcatggatgaactatacaaaactagtggaggccctcccccaactggtgaagaggatacatcagaaaaagatgagttgtag
また、以下の1つまたは複数について有用な候補化合物のスクリーニング方法を提供する:対象の膵臓β細胞障害を処置するかその発症を遅延させること、膵臓β細胞における小胞体ストレスを減少すること、および膵臓β細胞における小胞体ストレス由来アポトーシス細胞死を減少するか遅延させること。これらの方法は、膵臓β細胞を提供し、膵臓β細胞と候補化合物と接触させ、候補化合物の存在下で膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルを決定し、可溶性MANFの基準レベルと膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルを比較することを含む。これらの方法において、基準レベルと比較した膵臓β細胞により産生される可溶性MANFのレベルの増加は、試験化合物が、以下の1つまたは複数に有用であり得る:対象の膵臓β細胞障害を処置するかその発症を遅延させること、膵臓β細胞における小胞体ストレスを減少すること、および膵臓β細胞における小胞体ストレス由来アポトーシス細胞死を減少するか遅延させること。
実施例
実験は、可溶性MANFの発現が小胞体ストレスに応答して膵臓β細胞で誘発されるかどうかを決定するために行った。これらの実験は、齧歯類膵臓β細胞株(INS−1 832/13およびMIN6)、初代マウスおよびヒト膵島、ならびに小胞体ストレスを誘発する2つの異なる化学薬剤(タプシガルギンおよびツニカマイシン)を使用して行った。INS−1 832/13細胞を、10%ウシ胎児血清、ペニシリン、ストレプトマイシン、ピルビン酸ナトリウム、および0.1%β−メルカプトエタノールを含有するRPMI−1640中で培養した。初代膵島はProdoから取得し、804G細胞によって産生されるラミニンVでプレコートした6ウェルプレートにプレーティングし、ウシ胎児血清、非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、および抗生物質を補充したCMRL培地中で培養した。
細胞内のERの酸化還元状態をモニターするための新規システムを開発した。このシステムでは、マウスBiPのシグナル配列および哺乳動物ER回収シグナル(KDEL)を、酸化還元感受性緑色蛍光タンパク質(GFP)のN末端およびC末端のそれぞれに付加した(図9A)。組換えタンパク質はMEROS−GFPと命名した(哺乳動物小胞体局在型酸化還元感受性GFP)。蛍光顕微鏡検査の使用により、MEROS−GFPがERに局在していることが確認された(図9B)。MEROS−GFPは、394nmおよび473nmにて極大で、NSC34細胞の完全酸化型および還元型種の個別の励起スペクトルを示す(図10A)。NSC34細胞は、10%ウシ胎児血清、ペニシリン、およびストレプトマイシンを含有するDMEMで培養した。
個別の2つの細胞の集団について、パルミチン酸塩(膵臓β細胞に対する強力ER誘発剤)でINS−1 832/13細胞を処理した後に、フローサイトメトリーにより観察した:1つは酸化型ER状態を維持することができ、もう1つは高度還元型ERであった(図25および26)。細胞のこれらの不均一群をさらに研究するため、MEROS−GFP比が2よりも大きい細胞を「還元型細胞」として分類した。さらに、これらの異なる2つの細胞の集団についても、慢性高グルコース(図27)、血清欠乏およびグルコース除去(図28)、ならびにヒトIAPP(図29)をはじめとする、膵臓β細胞に対する別の既知のERストレス誘発剤で処理した後に観察した。ストレス誘発剤のうち、パルミチン酸塩処理は、高度還元型ERのある細胞の集団を最大限に増加する。興味深いことに、パルミチン酸塩誘発細胞機能不全に対して保護的であることがこれまでに明らかにされてきた、不飽和脂肪酸、オレイン酸およびリノール酸は、還元型ERを形成するパルミチン酸塩の能力を有意に抑制した(図30)。これらのデータは、ERストレス細胞がそれらの酸化還元状態で不均一であることを示唆している。
UPRと酸化還元状態の不均一性との関係を研究するために実験を行った。これらの実験において、酸化還元状態とUPRの活性化レベルの両方を同一細胞内でモニターした。これを達成するため、ヒトBiPプロモーターによって作動される、赤色蛍光タンパク質mCherryをコードするUPRレポーター遺伝子を構築した。BiPプロモーターは3つの小胞体ストレス応答エレメント(UPRE)を含有し、UPRの活性化レベルを効率的に反映することが明らかにされている。このBiP−mCherryレポータープラスミドをMEROS−GFPを発現するINS−1 832/13細胞へトランスフェクトし、FACS分析を用いて、同一細胞におけるMEROS−GFP比とBiP−mCherryを介したUPRの活性化レベルをモニターした(図31)。BiP−mCherryの活性化レベルとMEROS−GFP比は、ERストレス誘発後にモニターした。これらの実験において、MEROS−GFPを発現するINS−1 832/13細胞を6ウェルのプレート上にプレーティングし、提示した時間に各化合物で処理し、次いで、トリプシン処理することによって回収した。リン酸緩衝生理食塩水で洗浄した後、細胞を11mMのグルコース−ハンクス緩衝食塩溶液に再懸濁した。フローサイトメトリー分析は、LSRII(BD)で行った。
上記のデータは、酸化環境に向けてERをシフトする化学化合物および生物製剤がERストレスおよびER機能不全に関連する疾患の処置に有効であり得ることを示唆している。この可能性の調査については、2つのFDA承認薬、ピオグリタゾン(Actos)とタウロウルソデオキシコール酸(TUDCA)がERの酸化還元状態に影響を及ぼし、ER疾患の細胞モデルにおける細胞死を改善する可能性がある。ピオグリタゾンは、2型糖尿病患者を処置するために承認され、ウォルフラム症候群のマウスモデルにおける膵臓β細胞機能を維持することが示されている。ピオグリタゾンは、タプシガルギン(で処理した膵臓β細胞において酸化環境にERをシフトし図38、右図)、細胞死からこれらの細胞を保護する(図38、左図)ことを示した。別の小分子、TUDCAは、胆石の処置および胆汁性肝硬変のために使用され、糖尿病のマウスモデルにおいてERストレスを緩和することが示されている。TUDCAはまた、酸化環境に向けてERをシフトし(図38、右図)、ERストレス条件下で細胞を死滅から保護する(図38、左図)ことを示した。
さらなる実験を行って、アポモルヒネが還元環境から酸化環境へERをシフトすることができることを確認した。これらの実験において、MEROS−GFPを発現するINS−1 832/13細胞をアポモルヒネで24時間処理し、次いで、24時間パルミチン酸塩で刺激した。データからは、アポモルヒネ処理が還元型ERの細胞の集団を減少したことが明らかである(図40)。パルミチン酸塩で処理したINS−1 832/13細胞における細胞生存率とミトコンドリア膜ポテンシャルは、ヨウ化プロピジウム(PI)およびMitoProbe(Invitrogen)染色をそれぞれ使用して測定した。アポモルヒネは、ミトコンドリア膜ポテンシャルの低い細胞の集団を減少し(図41)、ERストレス由来細胞死を抑制した(図42)。さらにアポモルヒネは、強力ERストレス誘発剤のタプシガルギンによって誘発されたERストレス介在性細胞死からINS−1 832/13細胞を保護した(図43)。総体として、これらのデータは、アポモルヒネが酸化環境に向けてERをシフトし、ERストレスに対する保護を付与することを示す。
上記のデータからは、アポモルヒネおよびピオグリタゾンが、酸化環境に向けてERをシフトし、ERストレスに対する保護を付与する能力を有していることは明らかである。さらなる実験を行って、アポモルヒネとピオグリタゾンがERストレス介在性細胞死からヒト膵島を保護することができるか否かを決定した。データは、アポモルヒネとピオグリタゾンの両方がタプシガルギン介在性細胞死からヒト膵島を保護できたことを示す(図44、左図)。
可溶性MANFが、小胞体ストレス誘発剤に暴露した際に、膵臓β細胞の小胞体における酸化還元環境の変動を防止することができるか否かを決定するため、さらなる実験を行った。実験は、MEROS−GFPを発現するレンチウイルスベクターでトランスフェクトしたINS−1 832/13細胞(膵臓β細胞株)を用いて行った。細胞は11mMまたは25mMのグルコース中で培養し、未処理のままとするか、0.5μg/mLの可溶性MANFで処理した。次いで、トランスフェクト細胞中の還元型EroGFP由来の蛍光性発光を特異的に検出することができる、460〜495nmの間の励起スペクトルと520〜570nmの間の発光スペクトル(FITC−A光学フィルター)を用いてFACS分析により細胞を分析した。データからは、可溶性MANF処理によって、検出可能なレベルの還元型MEROS−GFPを含有する細胞数が減少したことが明らかである(図45;右下図対左下図)。上記のデータと一致して、これらのデータは、可溶性MANFで膵臓β細胞を処理すると、酸化環境に向けてERをシフトすることができ、しかも、対象の膵臓β細胞障害の処置またはその進行の防止に使用することができることを示す。
本発明をその詳細な説明と併せて説明してきたが、前述の説明は例示であり、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。他の態様、利点、および変更は、以下の特許請求の範囲内にある。
Claims (26)
- 対象における膵臓β細胞障害を診断する方法であって、
対象由来の生体試料中の可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)のレベルを決定し;
生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較する
ことを含み、
基準レベルと比較した生体試料中の可溶性MANFのレベルの増加は、対象が膵臓β細胞障害に罹患していることを示す、方法。 - 対象の膵臓β細胞障害を発症するリスクを予測する方法であって、
対象由来の生体試料中の可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)のレベルを決定し;
生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較する
ことを含み、
基準レベルと比較した生体試料中の可溶性MANFのレベルの増加は、対象が膵臓β細胞障害を発症するリスクが高いことを示し、基準レベルと比較した生体試料中の可溶性MANFのレベルの減少または有意な差がないことは、対象が、膵臓β細胞障害を発症するリスクが普通であるか低いことを示す、方法。 - 対象の膵臓β細胞機能または膵臓β細胞量をモニターする方法であって、
第1の時点での対象由来の生体試料中の可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)のレベルを決定し、
第2の時点での対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定し、
第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルを第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較する
ことを含み、
第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較した第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルの増加は、対象の膵臓β細胞機能の減少または膵臓β細胞量の減少を示し、第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較した第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルの減少または有意な変化がないことは、対象の膵臓β細胞機能に変化がないか増加を示し、または膵臓β細胞量に変化がないか増加を示す、方法。 - 膵臓β細胞障害を処置するための対象を選択する方法であって、
対象由来の生体試料中の可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)のレベルを決定し;
生体試料中の可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較し;
基準レベルと比較して生体試料中の可溶性MANFのレベルが増加した対象を、膵臓β細胞障害を処置するために選択する
ことを含む、方法。 - 膵臓β細胞障害が1型糖尿病、2型糖尿病およびウルフラム症候群からなる群から選択される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 基準レベルが可溶性MANFの閾値である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 基準レベルが健康な対象の可溶性MANFのレベルである、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 対象に、配列番号2に少なくとも80%同一である配列を含む可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)またはアポモルヒネの有効量を投与することを含む、対象の膵臓β細胞障害を処置するかその発症を遅延させる方法。
- 膵臓β細胞における小胞体ストレスを減少する方法であって、
膵臓β細胞を、配列番号2に少なくとも80%同一である配列を含む可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)またはアポモルヒネの有効量と接触させることを含む、方法。 - 膵臓β細胞が対象内にある、請求項9に記載の方法。
- 2個以上の膵臓β細胞の集団における小胞体ストレス由来アポトーシス細胞死を減少するか遅延させる方法であって、膵臓β細胞の集団を、配列番号2に少なくとも80%同一である配列を含む可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)またはアポモルヒネの有効量と接触させることを含む、方法。
- 膵臓β細胞の集団が対象内にある、請求項11に記載の方法。
- 対象がヒトである、請求項1〜4、8、10および12のいずれか1項に記載の方法。
- 対象における膵臓β細胞障害の処置の有効性をモニターする方法であって、
第1の時点での対象由来の生体試料中の可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)のレベルを決定し、
第2の時点での対象由来の生体試料中の可溶性MANFのレベルを決定し、
第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルを、第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較する
ことを含み、
(i)第1の時点が処置前であり、第2の時点が処置開始後の任意の時点であるか、(ii)第1の時点が処置開始後であり、第2の時点が処置中または処置後のより遅い時点であり、
第1の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルと比較した第2の時点での生体試料中の可溶性MANFのレベルの減少が、対象での処置が有効であったことを示す、方法。 - 対象の膵臓β細胞障害の処置またはその発症の遅延に有用な候補化合物をスクリーニングする方法であって、
膵臓β細胞を準備し;
膵臓β細胞を試験化合物と接触させ;
試験化合物の存在下で膵臓β細胞によって産生される可溶性中脳星状細胞由来神経栄養因子(MANF)のレベルを決定し;
膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルを可溶性MANFの基準レベルと比較し;
基準レベルと比較した膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルの増加に関連している化合物を、対象の膵臓β細胞障害を処置またはその発症を遅延させるための候補化合物として選択する
ことを含む、方法。 - 基準レベルが候補薬剤の非存在下における膵臓β細胞によって産生される可溶性MANFのレベルである、請求項15に記載の方法。
- 基準レベルが可溶性MANFの閾値である、請求項15に記載の方法。
- 対象の膵臓β細胞障害を処置またはその発症を遅延に有用な候補化合物をスクリーニングする方法であって、
BiPシグナル配列、酸化還元感受性蛍光タンパク質、およびアミノ酸配列KDELを含有するレポータータンパク質を発現する哺乳動物細胞を準備し;
細胞を試験化合物と接触させ;
細胞に存在する酸化型レポータータンパク質の量の決定し;
細胞に存在する酸化型レポータータンパク質の量を基準レベルと比較し;
基準レベルと比較して細胞中の酸化型レポータータンパク質のレベルの増加に関連する試験化合物を、対象の膵臓β細胞障害を処置またはその発症を遅延させるための候補化合物として選択する
ことを含む、方法。 - 基準レベルが候補薬剤の非存在下における哺乳動物細胞に存在する酸化型レポータータンパク質の量である、請求項18に記載の方法。
- 基準レベルが酸化型レポータータンパク質の閾値である、請求項18に記載の方法。
- 対象の膵臓β細胞障害の処置またはその発症の遅延に有用な候補化合物をスクリーニングする方法であって、
BiPシグナル配列、酸化還元感受性蛍光タンパク質、およびアミノ酸配列KDELを含有するレポータータンパク質を発現する哺乳動物細胞を準備し;
細胞を試験化合物と接触させ;
細胞に存在する還元型レポータータンパク質の量の決定し;
細胞に存在する還元型レポータータンパク質の量を基準レベルと比較し;
基準レベルと比較して細胞中の還元型レポータータンパク質のレベルの減少に関連する試験化合物を、対象の膵臓β細胞障害を処置またはその発症を遅延させるための候補化合物として選択する
ことを含む、方法。 - 基準レベルが候補薬剤の非存在下における哺乳動物細胞に存在する還元型レポータータンパク質の量である、請求項21に記載の方法。
- 基準レベルが還元型レポータータンパク質の閾値である、請求項21に記載の方法。
- 可溶性MANFに特異的に結合する抗体または抗原結合性抗体フラグメントと;
インスリン、Cタンパク質および膵島アミロイドポリペプチドの群から選択されるタンパク質に結合する、少なくとも1つの抗体または抗原結合性抗体フラグメントと
を含むキット。 - 配列番号2に少なくとも80%同一である配列を含む可溶性MANFタンパク質またはアポモルヒネと;
膵臓β細胞障害を処置するための少なくとも1つの追加薬剤と
を含む医薬組成物。 - 少なくとも1つの追加薬剤がインスリンである、請求項25に記載の組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261590021P | 2012-01-24 | 2012-01-24 | |
US61/590,021 | 2012-01-24 | ||
PCT/US2013/022768 WO2013112602A1 (en) | 2012-01-24 | 2013-01-23 | Soluble manf in pancreatic beta-cell disorders |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017086473A Division JP6465923B2 (ja) | 2012-01-24 | 2017-04-25 | 膵臓β細胞障害における可溶性MANF |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015508155A true JP2015508155A (ja) | 2015-03-16 |
Family
ID=48873871
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014554800A Withdrawn JP2015508155A (ja) | 2012-01-24 | 2013-01-23 | 膵臓β細胞障害における可溶性MANF |
JP2017086473A Expired - Fee Related JP6465923B2 (ja) | 2012-01-24 | 2017-04-25 | 膵臓β細胞障害における可溶性MANF |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017086473A Expired - Fee Related JP6465923B2 (ja) | 2012-01-24 | 2017-04-25 | 膵臓β細胞障害における可溶性MANF |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9891231B2 (ja) |
EP (1) | EP2820424B1 (ja) |
JP (2) | JP2015508155A (ja) |
KR (1) | KR20140121449A (ja) |
CN (1) | CN104204811B (ja) |
AU (1) | AU2013212284A1 (ja) |
BR (1) | BR112014018204A8 (ja) |
CA (1) | CA2861541C (ja) |
EA (1) | EA201491411A1 (ja) |
HK (1) | HK1204364A1 (ja) |
IL (1) | IL233721A0 (ja) |
WO (1) | WO2013112602A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB201217296D0 (en) | 2012-09-27 | 2012-11-14 | Alta Innovations Ltd | Method of treatment and/or prevention |
WO2014191630A2 (en) * | 2013-05-28 | 2014-12-04 | Helsingin Yliopisto | Non-human animal model encoding a non-functional manf gene |
US20170252403A1 (en) * | 2014-10-06 | 2017-09-07 | Amarantus Bioscience Holdings, Inc. | Methods and compositions for treating retinal disorders |
JP7341888B2 (ja) | 2017-09-27 | 2023-09-11 | 株式会社リブドゥコーポレーション | 吸収性物品 |
US20200408779A1 (en) * | 2018-02-09 | 2020-12-31 | City Of Hope | Doc2b as a biomarker for type 1 diabetes |
CN110499330A (zh) * | 2018-05-16 | 2019-11-26 | 上海市同济医院 | 重组腺相关病毒载体及其应用 |
CN113292656B (zh) * | 2020-02-21 | 2022-10-25 | 四川大学华西医院 | 用于防治肥胖的中脑星形胶质细胞源性神经营养因子的融合蛋白 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110212465A1 (en) * | 2008-12-22 | 2011-09-01 | Markus Roessler | Armet as a marker for cancer |
Family Cites Families (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5994392A (en) * | 1988-02-26 | 1999-11-30 | Neuromedica, Inc. | Antipsychotic prodrugs comprising an antipsychotic agent coupled to an unsaturated fatty acid |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
US5574010A (en) * | 1994-11-14 | 1996-11-12 | The Regents Of The University Of California | Treatment of pancreatic tumors with peptide YY and analogs thereof |
US5716928A (en) | 1995-06-07 | 1998-02-10 | Avmax, Inc. | Use of essential oils to increase bioavailability of oral pharmaceutical compounds |
US5858401A (en) | 1996-01-22 | 1999-01-12 | Sidmak Laboratories, Inc. | Pharmaceutical composition for cyclosporines |
US6007839A (en) | 1996-02-16 | 1999-12-28 | The Liposome Company, Inc. | Preparation of pharmaceutical compositions containing etherlipid-containing multiple lipid liposomes |
US6630137B1 (en) | 1997-04-28 | 2003-10-07 | Eli Lilly And Company | Activated protein C formulations |
AU8285998A (en) | 1997-07-02 | 1999-01-25 | Sdg, Inc. | Targeted liposomal constructs for diagnostic and therapeutic uses |
AU785007B2 (en) * | 1999-11-24 | 2006-08-24 | Mcs Micro Carrier Systems Gmbh | Polypeptides comprising multimers of nuclear localization signals or of protein transduction domains and their use for transferring molecules into cells |
US20020182198A1 (en) | 2001-03-20 | 2002-12-05 | Commissiong John W. | Dopaminergic neuronal survival-promoting factors and uses thereof |
US20040077679A1 (en) * | 2002-07-29 | 2004-04-22 | Cincotta Anthony H. | Therapeutic treatment for the metabolic syndrome and type 2 diabetes |
US20080200453A1 (en) * | 2002-07-29 | 2008-08-21 | Cincotta Anthony H | Methods of treating metabolic syndrome using dopamine receptor agonists |
US9655865B2 (en) * | 2002-07-29 | 2017-05-23 | Veroscience, Llc | Therapeutic treatment for metabolic syndrome, type 2 diabetes, obesity, or prediabetes |
DE10330235A1 (de) | 2003-07-04 | 2005-01-20 | Bayer Healthcare Ag | Neues Eimeria Gen und Protein sowie deren Verwendung |
US20050215558A1 (en) * | 2004-03-25 | 2005-09-29 | Cincotta Anthony H | Methods of identifying responders to dopamine agonist therapy |
CN102083456B (zh) * | 2008-03-25 | 2015-12-02 | 阿姆拉特斯治疗公司 | 神经退行性障碍 |
CA2719385A1 (en) | 2008-04-21 | 2009-10-29 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Pancreatic beta-cell mass biomarker |
FI20080326A0 (fi) * | 2008-04-30 | 2008-04-30 | Licentia Oy | Neurotroofinen tekijä MANF ja sen käytöt |
ES2332169B1 (es) | 2008-07-24 | 2010-10-25 | Universidad Del Pais Vasco | Empleo de microparticulas que comprenden celulas modificadas geneticamente en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas. |
US9119843B2 (en) * | 2009-12-04 | 2015-09-01 | Caliper Life Sciences, Inc. | Method of using dopamine reuptake inhibitors and their analogs for treating diabetes symptoms and delaying or preventing diabetes-associated pathologic conditions |
EP2571897B1 (en) * | 2010-05-17 | 2014-11-05 | Betta Pharmaceuticals Co., Ltd. | Novel glucagon like peptide analogs, composition, and method of use |
KR101208955B1 (ko) * | 2010-06-01 | 2012-12-06 | 주식회사 셀트리온제약 | 피페라진 다이티옥트산염 및 글리메피리드를 포함하는 약제학적 조성물 |
BR112012031103A2 (pt) * | 2010-06-08 | 2017-06-20 | Veroscience Llc | método para tratar um paciente sofrendo de um distúrbio metabólico, método para tratar pelo menos um desarranjo não-metabólico em um paciente, método para tratar pelo menos em desarranjo metabólico e pelo menos em desarranjo não-metabólico em um paciente, método para tratar pelo menos uma doença vascular em um paciente e composição farmacêutica efetiva para tratar a síndrome metabólica, diabetes tipo 2, obesidade, ou pré-diabetes |
FI20115870A0 (fi) | 2011-09-05 | 2011-09-05 | Urmas Arumaee | Neuroprotektiiviset soluihin tunkeutuvat peptidit |
-
2013
- 2013-01-23 JP JP2014554800A patent/JP2015508155A/ja not_active Withdrawn
- 2013-01-23 EA EA201491411A patent/EA201491411A1/ru unknown
- 2013-01-23 KR KR1020147023270A patent/KR20140121449A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-01-23 EP EP13741203.7A patent/EP2820424B1/en active Active
- 2013-01-23 US US14/374,190 patent/US9891231B2/en active Active
- 2013-01-23 CA CA2861541A patent/CA2861541C/en active Active
- 2013-01-23 AU AU2013212284A patent/AU2013212284A1/en not_active Abandoned
- 2013-01-23 WO PCT/US2013/022768 patent/WO2013112602A1/en active Application Filing
- 2013-01-23 BR BR112014018204A patent/BR112014018204A8/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-01-23 CN CN201380016366.1A patent/CN104204811B/zh not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-07-20 IL IL233721A patent/IL233721A0/en unknown
-
2015
- 2015-05-25 HK HK15104933.5A patent/HK1204364A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2017
- 2017-04-25 JP JP2017086473A patent/JP6465923B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2018
- 2018-02-12 US US15/894,714 patent/US10845371B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110212465A1 (en) * | 2008-12-22 | 2011-09-01 | Markus Roessler | Armet as a marker for cancer |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20150198613A1 (en) | 2015-07-16 |
CN104204811A (zh) | 2014-12-10 |
EP2820424A4 (en) | 2015-10-21 |
EA201491411A1 (ru) | 2014-12-30 |
CA2861541C (en) | 2021-11-30 |
EP2820424A1 (en) | 2015-01-07 |
US10845371B2 (en) | 2020-11-24 |
JP6465923B2 (ja) | 2019-02-06 |
IL233721A0 (en) | 2014-09-30 |
BR112014018204A2 (ja) | 2017-06-20 |
CN104204811B (zh) | 2017-02-22 |
BR112014018204A8 (pt) | 2017-07-11 |
WO2013112602A1 (en) | 2013-08-01 |
AU2013212284A1 (en) | 2014-08-14 |
EP2820424B1 (en) | 2016-12-07 |
US20180321255A1 (en) | 2018-11-08 |
HK1204364A1 (en) | 2015-11-13 |
CA2861541A1 (en) | 2013-08-01 |
JP2017186342A (ja) | 2017-10-12 |
KR20140121449A (ko) | 2014-10-15 |
US9891231B2 (en) | 2018-02-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6465923B2 (ja) | 膵臓β細胞障害における可溶性MANF | |
Vergoni et al. | DNA damage and the activation of the p53 pathway mediate alterations in metabolic and secretory functions of adipocytes | |
JP6254125B2 (ja) | 蛋白尿腎疾患の病因における可溶性uPARの役割 | |
EP2854865B1 (en) | Methods of treating a metabolic syndrome by modulating heat shock protein (hsp) 90-beta | |
JP5299900B2 (ja) | 糖尿病関連肝臓由来分泌タンパク質の2型糖尿病または血管障害の診断または治療への利用 | |
EP4035680A1 (en) | Therapy for diabetes using stem cell migration agent | |
Bazzi et al. | MEN1 missense mutations impair sensitization to apoptosis induced by wild-type menin in endocrine pancreatic tumor cells | |
Anderson et al. | eIF2A‐knockout mice reveal decreased life span and metabolic syndrome | |
Zhang et al. | Mechanisms of oleic acid deterioration in insulin secretion: role in the pathogenesis of type 2 diabetes | |
US20210000855A1 (en) | Retinol-binding protein 3 (rbp3) as a protective factor in non-diabetic retinal degeneration | |
Sahajpal et al. | Deranged metabolic profile and identification of biomarkers in the vitreous humour of patients with proliferative diabetic retinopathy | |
EP4035679A1 (en) | Diabetes therapy targeting abnormal stem cells | |
Suárez-Cuenca et al. | Glucose transporter 4 (GLUT4) distribution on metabolic healthy obese (MHO) vs metabolic unhealthy obese (MUO) | |
Bosma | Exploring the Regulation of Fasting Blood Glucose by G6PC2 | |
Cen | Modulation of muscle cell insulin receptor signalling, transcription and trafficking by insulin | |
Murray | Tracking the Metabolic Signatures Associated with Spinal Muscular Atrophy | |
US20060234910A1 (en) | Methods for the treatment of insulin resistance and disease states characterized by insulin resistance | |
Leclerc et al. | Role of AMP-activated protein kinase in glucagon secretion | |
Bosch et al. | MINUTES OF THE 48th GENERAL ASSEMBLY OF THE EUROPE-AN ASSOCIATION FOR THE STUDY OF DIABETES | |
ABCA et al. | HDL-C PROFILE AND BMI IN DYSLIPIDEMIC CHILDREN | |
Freichel | Depletion of Insulin Receptors leads to Metabolic alteration and Microvascular complications in zebrafish |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160125 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20161017 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20161025 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170125 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20170620 |
|
A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20171019 |