JP2015501796A - 感染性疾患の予防および治療のために有用なマンノシル化された化合物 - Google Patents
感染性疾患の予防および治療のために有用なマンノシル化された化合物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015501796A JP2015501796A JP2014541639A JP2014541639A JP2015501796A JP 2015501796 A JP2015501796 A JP 2015501796A JP 2014541639 A JP2014541639 A JP 2014541639A JP 2014541639 A JP2014541639 A JP 2014541639A JP 2015501796 A JP2015501796 A JP 2015501796A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- formula
- integer
- manα
- linker
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 0 CC(C)(CCOC(C)(C)CC(NC(C)(C)CCOC(C)(C)CCO[C@](C(C1O)O[Rn])OC(CO)[C@]1O)=O)NC(*)=O Chemical compound CC(C)(CCOC(C)(C)CC(NC(C)(C)CCOC(C)(C)CCO[C@](C(C1O)O[Rn])OC(CO)[C@]1O)=O)NC(*)=O 0.000 description 16
- UUYDDYWVUYYHQU-UHFFFAOYSA-O CONC(C[OH2+])(COCCC=O)NC=O Chemical compound CONC(C[OH2+])(COCCC=O)NC=O UUYDDYWVUYYHQU-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/08—Polyoxyalkylene derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F6/00—Contraceptive devices; Pessaries; Applicators therefor
- A61F6/02—Contraceptive devices; Pessaries; Applicators therefor for use by males
- A61F6/04—Condoms, sheaths or the like, e.g. combined with devices protecting against contagion
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/06—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical being a hydroxyalkyl group esterified by a fatty acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/10—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical containing unsaturated carbon-to-carbon bonds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Orthopedics, Nursing, And Contraception (AREA)
Abstract
Description
樹状細胞(DC)は、病原体に対する特異的な免疫応答の誘導において重要な役割を果たす、必須の抗原提示細胞(APC)である。身体全体にわたって末梢粘膜組織に局在する、未熟DCは、病原体の存在についてモニターする監視員である。病原体を検出および内部移行した後に、DCは、感染部位から流入領域リンパ器官に遊走する。この遊走の間、DCは、深部成熟を受け、これがとりわけ、病原体からの抗原のプロセシング、および膜の主要組織適合性複合体(MHC)によるそれらの提示をもたらす。一旦リンパ節内になれば、DCは、あまり循環していない抗原特異的なリンパ球の選択、および、引き続いて、リンパ球増大および分化を可能にする(概説については、Banchereauら、2000を参照のこと)。
本発明は、式(I)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはエステルに関しており、
式中、
−R1は、C17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキルであって、任意的に1つ以上のC1−C3アルキルラジカルによって置換されており、
−M2−Q2およびM3−Q3は任意的に存在し、
−M1は、マンノシル、ジマンノシルおよびトリマンノシルからなる群より選択され、
−M2およびM3は独立して、マンノシル、ジマンノシル、トリマンノシルおよび治療剤部分、好ましくは抗感染剤部分からなる群より選択され、最大で800g/mol−1の分子量を有しており、
−Q1、Q2およびQ3は独立してオリゴエーテル−ベースのスペーサーの群から選択され、これは、少なくとも1つの−(OR8)n−部分を含んでおり、ここでR8は、直鎖のまたは分岐したC1−C4アルキルであり、かつnは、2〜10の整数であり、
−リンカー(LINKER)は、1〜20個の炭素原子、ならびにN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子の骨格を有する、二官能性、三官能性および四官能性のリンカーのなかから選択される。
(i)−(CH2)pCH3(式中pは16〜29の整数);
(ii)−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中Mは、CH=CHまたはC≡Cであり、かつpおよびqは、0〜27の整数であり、ただし14≦p+q≦27)、
(iii)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中KおよびMは独立してCH=CHおよびC≡Cから選択され、ならびにp、qおよびrは0〜25の整数であり、ただし12≦p+q+r≦25);
(iv)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中K、MおよびPは独立してCH=CHおよびC≡Cから選択され、ならびにp、q、rおよびsは、0〜23の整数であり、ただし10≦p+q+r+s≦23);ならびに
(v)−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中pおよびqは、0〜26の整数であり、ただし13≦p+q≦26)。
−W−(O−CH2−CH2)a−(X’−(O−CH2−CH2)d)b−(II)
式中:
−Wは、NH−(CH2)f、O−(CH2)fおよびS−(CH2)fから選択され、ここでfは1〜5の整数であり、
−aが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−bが、0または1であり、
−dが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、かつ
−X’が、−NH−C(O)−(CH2)e−または−O−C(O)−(CH2)e−であり、ここでeは、1〜4の整数である化合物に関する。
であり、
式中
−R6は、−NHC(O)−または−OC(O)−であり、かつ
−R3、R4およびR5は独立して、−NHC(=O)(CH2)nO−および−OC(=O)(CH2)nO−から選択され、nは、1〜10の整数である。
式中:
−リンカー(LINKER)が、1〜20個の炭素原子の骨格、ならびにN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子を有している二官能性リンカーであり、
−R1が、C17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキルであり、任意的に1つ以上のC1−C3アルキルラジカルで置換されており、
−M1が、マンノシルまたはジマンノシルであり、
−Wが、−NH−(CH2)f−、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−から選択され、ここでfは1〜5、好ましくは2の整数であり、
−X’が、−NH−C(O)−(CH2)e−または−O−C(O)−(CH2)e−であり、ここでeが1〜4の整数であり、
−aが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−bが1であり、かつ
−dが2〜10、好ましくは2〜5の整数である、化合物、
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関連する。
式中:
−リンカー(LINKER)が、1〜20個の炭素原子の骨格を有しており、かつN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子を含んでいる四官能性リンカーであり、
−R1が、C17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキルであって、任意的に、1つ以上のC1−C3アルキルラジカルで置換されており、
−M1が、マンノシルまたはジマンノシルであり、
−M2およびM3が独立して、最大で800g/mol−1の分子量を有する、マンノシル、ジマンノシルおよび治療剤部分、好ましくは抗感染剤部分からなる群より選択され、
−W1、W2およびW3が独立して、−NH−(CH2)f−、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−から選択され、ここでfが1〜5、好ましくは2の整数であり、
−X’1、X’2およびX’3が独立して、式(II)で上記されたようなX’から、すなわち、−NH−C(O)−(CH2)e−および−O−C(O)−(CH2)e−からなる群より選択され、ここでeが1〜4の整数であり、
−a1、a2、a3、d1、d2およびd3が、2〜10、好ましくは、2〜5の範囲の整数から独立して選択される整数であり、
−b1、b2およびb3が独立して、0〜1から選択される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
式中、
−R2が、Hまたはα−マンノシル残基であり、
−R1が、式1の化合物について規定されるとおりであり、
−aが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、かつ
−dが、2〜10、好ましくは2〜5の整数である、
化合物に関する。
式中:
−R2がHまたはα−マンノシル残基であり、
−R1が式(I)の化合物について上記で規定されるとおりであり、かつ
−aが1〜10、好ましくは1〜5の整数である、化合物に関する。
−式(IIIa)の化合物であって、式中、R2がHであり、R1が−(CH2)16CH3であり、aが3であり、かつbが4である、化合物;
−式(IIIa)の化合物であって、式中、R2がHであり、R1が−(CH2)23CH3であり、aが3であり、かつbが4である化合物;
−式(IIIa)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がHであり、aが3であり、かつbが4である化合物;
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)23CH3であり、R2がHであり、かつaが3である化合物;
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)23CH3であり、R2がα−マンノシルであり、かつaが3である化合物;
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がHであり、かつaが3である化合物;および
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がα−マンノシルであり、かつaが3である化合物、
からなる群より選択されてもよい。
本発明は、DC−SIGNへの高い親和性を提示する新規な両親媒性化合物を提供し、これを、HIV感染を含む感染性疾患の予防および治療のための抗感染剤として用いてもよい。この化合物は、(i)1〜3個のマンノシルまたはジマンノシル部分を有する極性の頭部であって、(ii)少なくとも17個の炭素の単一脂質鎖に対して、(iii)適切なリンカーを通じてカップリングされる、極性の頭部を備える。
本発明は、以下からなる化合物に関する:
(i)1〜3個のマンノース、ジマンノース、またはトリマンノース部分を有する極性の頭部であって、(ii)に対して適切なリンカーを通じてカップリングされる、
極性の頭部、
(ii)少なくとも17個の炭素長の単一脂質鎖。
式中
−R1は、C17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキルであって、任意的に1つ以上のC1−C3アルキルラジカルによって置換されており、
−M2−Q2およびM3−Q3は任意的に存在しており、
−M1は、マンノシル、ジマンノシルおよびトリマンノシルからなる群より選択され、
−M2およびM3は独立して、マンノシル、ジマンノシル、トリマンノシルおよび治療剤部分、好ましくは抗感染剤部分(最大で800g/mol−1の分子量を有する)からなる群より選択され、
−Q1、Q2およびQ3は独立して、少なくとも1つの−(OR8)n−部分を含んでいるオリゴエーテル−ベースのスペーサーの群から選択され、ここでR8は、直鎖のまたは分岐したC1−C4アルキルであり、かつnは2〜10の整数であり、
−リンカー(LINKER)は、二官能性、三官能性および四官能性リンカーであって、1〜20個の炭素原子、ならびにN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子の骨格を有している、リンカーの中から選択される。
のうちの1つを有することを意味している。
(i)−(CH2)pCH3(式中、pは16〜29の整数である);
(ii)−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中、MはCH=CHまたはC≡Cであり、pおよびqは、0〜27の整数であり、ただし14≦p+q≦27である)
(iii)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中、KおよびMは独立して、CH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、qおよびrは0〜25の整数であり、ただし12≦p+q+r≦25である);
(iv)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中、K、MおよびPは独立して、CH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、q、rおよびsは0〜23の整数であり、ただし10≦p+q+r+s≦23である);および
(v)−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中、pおよびqは、0〜26の整数であり、ただし13≦p+q≦26である)。
a.−(CH2)pCH3(式中pは、16〜29の整数である);
b.−(CH2)p−C≡C−C≡C−(CH2)r−CH3(式中、pおよびrは0〜25の整数であり、ただし12≦p+r≦25である);および
c.−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中、pおよびqは、0〜26の整数であり、ただし13≦p+q≦26である)。
(i)−(CH2)pCH3(式中、pは、19〜29の整数である);
(ii)−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中、Mは、CH=CHまたはC≡Cであり、かつpおよびqは、0〜27の整数であり、ただし17≦p+q≦27である)。
(iii)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中、KおよびMは独立して、CH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、qおよびrは0〜25の整数であり、ただし15≦p+q+r≦25である);
(iv)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中、K、MおよびPは独立して、CH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、q、rおよびsは0〜23の整数であり、ただし13≦p+q+r+s≦23である);ならびに
(v)−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中、pおよびqは、0〜26の整数であり、ただし16≦p+q≦26である)。
(i)−(CH2)pCH3(式中、pは、16〜25の整数である);
(ii)−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中、Mは、CH=CHまたはC≡Cであり、かつpおよびqは、0〜23の整数であり、ただし14≦p+q≦23である)
(iii)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中、KおよびMは独立して、CH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、qおよびrは、0〜21の整数であり、ただし12≦p+q+r≦21である);
(iv)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中、K、MおよびPは独立して、CH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、q、rおよびsは、0〜19の整数であり、ただし10≦p+q+r+s≦19である);ならびに
(v)−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中、pおよびqは、0〜22の整数であり、ただし13≦p+q≦22である)。
−M1は、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)ManαおよびManα(1−>6)Manαからなる群より選択され、かつ
−M2および/またはM3が存在する場合、このようなラジカル(単数または複数)は、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)Manα、Manα(1−>6)Manαおよび抗感染剤部分、好ましくは抗ウイルス剤部分(最大で800g.mol−1という最大分子重量を有する)からなる群より選択される。
(i)M1は、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)Manα、およびManα(1−>6)Manαからなる群より選択され;
(ii)M2および/またはM3が存在する場合、このようなM2および/またはM3は、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)Manα、およびManα(1−>6)Manαからなる群より選択され;かつ
(iii)R1は、以下からなる群より選択される:
−(CH2)pCH3(式中、pは16〜29の整数である);
−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中、Mは−CH=CH−または−C≡C−であり、かつpおよびqは、0〜27の整数であり、ただし14≦p+q≦27である)
−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中、KおよびMは独立して、−CH=CH−および−C≡C−から選択され、かつp、qおよびrは0〜25の整数であり、ただし12≦p+q+r≦25である);
−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中、K、MおよびPは独立して、−CH=CH−および−C≡C−から選択され、かつp、q、rおよびsは、0〜23の整数であり、ただし10≦p+q+r+s≦23である);ならびに
−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中、pおよびqは、0〜26の整数であり、ただし13≦p+q≦26である)。
−W−(O−CH2−CH2)a−(X’−(O−CH2−CH2)d)b−(II)
式中、:
−Wは、−NH−(CH2)f、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−(式中、fは1〜5の整数である)から選択され、
−aは、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−bは、0または1であり、
−dは、1〜10の整数であり、かつ
−X’は、−NH−C(O)−(CH2)e−または−O−C(O)−(CH2)e−であり、式中、eは1〜4の整数である。
−W−(O−CH2−CH2)a−(X’−(O−CH2−CH2)d)b−(II)
式中:
−Wは、−NH−(CH2)f、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−から選択され、式中、fは、1〜5の整数であり、
−aは、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−bは、0または1であり、
−dは、1〜10の整数であり、かつ
−X’は、−NH−C(O)−(CH2)e−または−O−C(O)−(CH2)e−であり、式中、eは1〜4の整数であり、
ただし、bは、M2Q2およびM3Q3が存在しない場合、0ではない。
いくつかの特定の実施形態では、式(I)の化合物は、以下の特徴を全て有する:
(i)M1は、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)ManαおよびManα(1−>6)Manαからなる群より選択される;
(ii)M2および/またはM3が存在する場合、このようなM2および/またはM3は、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)Manα、およびManα(1−>6)Manαからなる群より選択される;
(iii)Q1および、存在する場合Q2およびQ3は独立して式(II):−W−(O−CH2−CH2)a−(X’−(O−CH2−CH2)d)b−のラジカルからなる群より選択される(式中、W、a、X’、dおよびbは、前に記載のとおりである);かつ
(iv)R1は、以下からなる群より選択される:
−(CH2)pCH3(式中、pは、16〜29の整数である);
−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中、Mは、−CH=CH−または−C≡C−であり、かつpおよびqは、0〜27の整数であり、ただし14≦p+q≦27である)、
−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中、KおよびMは独立して、−CH=CH−および−C≡C−から選択され、かつp、qおよびrは0〜25の整数であり、ただし12≦p+q+r≦25である);
−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中、K、MおよびPは独立して、−CH=CH−および−C≡C−から選択され、かつp、q、rおよびsは0〜23の整数であり、ただし10≦p+q+r+s≦23である);ならびに
−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中、pおよびqは、0〜26の整数であり、ただし13≦p+q≦26である)。
(i)アミノ酸残基、例えば、グリシン、アラニン、バリン、イソロイシン、およびロイシン、
(ii)2〜10個のアミノ酸残基、好ましくは2〜5個のアミノ酸残基を有するペプチド、
(iii)X1−(CH2)n−Y1(式中、(i)nは、1〜10の整数であり、かつ(ii)X1およびY1は独立して、−NH−、−S−、−C(=O)−、−O−、−NH−C(=O)−、−C(=O)−NH−、−O−C(=O)−、−C(=O)−O−、−NH−(C=NH)−NH−、−NH−(C=O)−NH−および(C=O)−O−(C=O)から選択される);ならびに
(iv)−NH−、−S−、−O−、−C(=O)−、−NH−C(=O)−、−C(=O)−NH−、−O−C(=O)−、−C(=O)−O−、NH−(C=NH)−NH−、−NH−(C=O)−NH−および−(C=O)−O−(C=O)−。
式中:
−R2は、Hまたはα−マンノシル残基、好ましくは(1−>2)連結を通じて接続され、
−R1は、本明細書において上記で詳細に記載されたとおりであり、
−aは、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、かつ
−dは、2〜10、好ましくは2〜5の整数である。
−a1、a2、d1およびd2は独立して、2〜10、好ましくは、2〜5におよぶ整数から選択される整数であり、
−b1およびb2は独立して、0および1から選択され、
−X’1およびX’2は独立して、式(II)で上記されるX’から、すなわち、−NH−C(O)−(CH2)e−および−O−C(O)−(CH2)e−(式中、eは1〜4の整数である)からなる群より選択され、かつ
−W1およびW2は独立して、式(II)において上記されるWから、すなわち、−NH−(CH2)f、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−(式中、fは1〜5の整数である)から選択される。
−a1=a2であって、好ましくは2〜5の範囲であり、
−d1=d2であって、好ましくは2〜5の範囲であり、
−b1=b2であり、
−M1およびM2は、同一であり、好ましくはマンノシルおよびジマンノシルから選択され、
−W1およびW2は、同一であり、好ましくは−O−CH2−CH2−であり;かつ
−X’1およびX’2は、同一であり、好ましくは、−NH−C(O)−(CH2)−である。
−b1、b2およびb3は独立して、0および1から選択され、
−X’1、X’2およびX’3は独立して、式(II)で上記されるX’から、すなわち、−NH−C(O)−(CH2)e−および−O−C(O)−(CH2)e−(式中、eは1〜4の整数である)からなる群より選択され、および
−W1、W2およびW3は独立して、式(II)で上記されるWから、すなわち、−NH−(CH2)f、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−(式中、fは1〜5の整数である)から選択される。
式中:
−R6は、−NHC(O)−または−OC(O)−、好ましくは−NH(C=O)−であり、かつ
−R3、R4およびR5は独立して、−NHC(=O)−(CH2)nO−および−OC(=O)−(CH2)nO−から選択され、nは、1〜10の整数であり、好ましくは−NH−C(=O)−(CH2)2O−である。
−a1=a2=a3であり、好ましくは2〜5の範囲であり、
−d1=d2=d3であり、好ましくは2〜5の範囲であり、
−b1=b2=b3であり、
−M1、M2およびM3は同一であり、好ましくはマンノシルおよびジマンノシルから選択され、
−W1、W2およびW3は同一であり、好ましくは−O−CH2−CH2−であり;かつ
−X’1,X’2およびX’3は同一であり、好ましくは−NH−C(O)−(CH2)−である。
式中:
−R2はHまたはα−マンノシル残基であり、好ましくは(1−>2)連結を通じて接続され、
−R1は、本明細書において上記で詳細に記載されたとおりであり、かつ
−aは、2〜10、好ましくは2〜5の整数である、
化合物から選択される。
−式(IIIa)の化合物(式中、R2がHであり、R1が−(CH2)16CH3であり、aが3であり、かつbが4である);
−式(IIIa)の化合物(式中、R2がHであり、R1が−(CH2)23CH3であり、aが3であり、かつbが4である);
−式(IIIa)の化合物(式中、R1は−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2はHであり、aが3であり、かつbが4である);
−式(Va)の化合物(式中、R1は−(CH2)23CH3であり、R2はHであり、かつaは3である);
−式(Va)の化合物(式中、R1は−(CH2)23CH3であり、R2はα−マンノシルであり、かつaが3である);
−式(Va)の化合物(式中、R1は−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2はHであり、かつaが3である);
および
−式(Va)の化合物(式中、R1は−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2はα−マンノシルであり、かつaが3である)
本発明はまた、薬物としての使用のための、特に、感染性疾患の治療または予防における使用のための、式(I)、(III)、(IIIa)、(IV)、(V)もしくは(Va)のいずれか1つの化合物または本明細書に開示の任意の特定の化合物に関する。
−式(IIIa)の化合物(式中、R2がHであり、R1が−(CH2)16CH3であり、aが3であり、かつbが4である)(本明細書においてはManC17と呼ばれる);
−式(IIIa)の化合物(式中、R2がHであり、R1が−(CH2)23CH3であり、aが3であり、かつbが4である)(本明細書においてはManC24と呼ばれる);
−式(IIIa)の化合物(式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がHであり、aが3であり、かつbが4である)(本明細書においてはManinsatC24と呼ばれる);
−式(Va)の化合物(式中、R1が−(CH2)23CH3であり、R2がHであり、かつaが3である)(本明細書においてはTriManC24と呼ばれる);
−式(Va)の化合物(式中、R1が−(CH2)23CH3であり、R2がα−マンノシルであり、かつaが3である)(本明細書においてはDiTriManC24と呼ばれる);
−式(Va)の化合物(式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がHであり、かつaが3である);(本明細書においてはTriManinsatC24と呼ばれる)、ならびに
−式(Va)の化合物(式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がα−マンノシルであり、かつaが3である)(本明細書においてはTriDiManinsatC24と呼ばれる)。
−ヒト樹状細胞(DC)と試験されるべき化合物とをインキュベートすること、次いで、この樹状細胞をHIV−1ビリオンで感染させること、
−徹底的に洗浄した後、DCとMAGI−CCR5細胞(またはTリンパ球)とを同時培養すること、および
−MAGI−CCR5細胞(またはTリンパ球)のウイルストランス感染を定量すること。
−0.01重量%〜50重量%の本発明の化合物、および
−50重量%〜99.99重量%の賦形剤、
このパーセンテージは、この組成物の総重量と比較して表現されている。
−0.1重量%〜25重量%の本発明の化合物、および
−75重量%〜99.9重量%の賦形剤。
−0.01重量%〜50重量%の本発明の化合物、
−0重量%〜50重量%の追加の治療成分、および
−50重量%〜99.99重量%の賦形剤、
を含んでもよく、このパーセンテージは、薬学的組成物の総重量に比較して表現されている。
(i)逆転写阻害薬、例えば、テノフォビル、ジドブジン、ジダノシン、ザルシタビン、スタブジン、ラミブジン、アバカビル、エムトリシタビン(amtricitabine)、ネビラピン、エファビレンツ、デラビルジン、
(ii)プロテアーゼ阻害薬、例えば、サキナビル、インジナビル、リトナビル、ネフィナビル、アンプレナビル、ロピナビル、アタザナビル、フォサムプレナビル、ダルナビル、およびブレカナビル、
(iii)成熟阻害薬、例えば、ベビリマットおよび
(iv)インテグラーゼ阻害薬、例えば、ラルテグラビル、エルビテグラビルが挙げられる。
本発明のさらなる目的は、式(I)の化合物を調製するための方法である。
式中:
−R2は、Hまたはα−マンノシルであり、
−aは、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−dは、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、かつ
−R1は、本明細書において上記で詳細に記載される不飽和または飽和のC17−C30アルキルである、化合物、
またはその薬学的に許容される塩、エステルもしくは溶媒和物を調製するための方法に関し、
この方法は:
(i)式(VII)の化合物:H−(O−CH2−CH2)(a+1)N3と、式(VIa)の化合物または式(VIb)の化合物とを反応させ
(式中、R7がPr1または保護されたα−マンノシルであり、かつ各々のPr1が独立してヒドロキシルの保護基から選択される)
それによって式(VIII)の化合物を形成する工程と;
(ii)式(VIII)の化合物のアジド基をNH2基に還元する工程と;
(iii)工程(ii)で得られる化合物と、式(IX)の化合物:HOOC−CH2(O−CH2−CH2)(d)N3とを反応させて、式(X)の化合物を形成する工程と;
(iv)式(X)の化合物のアジド基をNH2に還元する工程と;
(v)工程(iv)で得られた化合物と、R1COOHとを反応させる工程と;
(vi)工程(v)で得られた化合物のマンノシルヒドロキシル基を脱保護して、それによって式(IIIa)の化合物を得る工程と、を包含する。
−カルボジイミドとの、および任意的に2−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール(HOBt)もしくは1−ヒドロキシ−7−アザ−ベンゾトリアゾール(HOAt)との反応によって、または
−ホスホニウムまたはウラニウム塩、例えば(ベンゾトリアゾール−1−イルオキシ)トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(BOP)またはO−(7−アザベンゾトリアゾール−1−イル)−N,N,N’,N’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート(HATU)との反応によって、
カルボン酸官能基を活性化することによって、先行技術文献に記載の任意の従来の手順によって行ってもよい。
式中:
−R2がHまたはα−マンノシルであり、
−aが2〜10の整数、好ましくは2〜5の整数であり、かつ
−R1が不飽和または飽和のC17−C30アルキルである化合物、
またはその薬学的に許容される塩、エステルまたは溶媒和物
を調製するための方法に関し、
この方法は:
(i)R1COOHと式(XI)の化合物とを反応させ
(式中、Pr2は、カルボキシル基の保護基、好ましくはエチル基である)、
それによって式(XII)の化合物を提供する工程と、
(ii)エステル基のけん化によってカルボキシル基を脱保護する工程と、
(iii)工程(ii)で得られた化合物と式(XIII)の化合物とを反応させ
(式中、各々のPr1がヒドロキシルの保護基、好ましくはアセチルである)、
それによって式(XIV)の化合物を形成する工程と、
および;
(iv)このマンノシルヒドロキシル基を脱保護し、それによって式(Va)の化合物を得る工程とを包含する。
a.材料および方法
化学合成:本明細書に記載される化合物の合成のための一般的な実験条件
過アシル化アジドの調製(化合物12)
化合物12は、Su Y.ら、(2010)に記載される手順に従って調製した。
アミンベースのO−マンノース13(15mg、0.28mmol、1当量)を、1mLの無水テトラヒドロフラン中に溶解した。この反応混合物を、0℃まで冷却し、塩化アセチル(30μL、0.42mmol、1.5当量)を滴下した。この溶液を、室温まで温めて、かつ終夜攪拌した。溶媒を減圧下で除去して、その粗残渣を、フラッシュクロマトグラフィーによってシリカゲルカラム上で精製し、これは、DCM/アセトン(8/2,v/v)で溶出して、過アセチル化アセトアミド14(39mg,25%)を、無色の油状物として得た。Rf:0.36(DCM/アセトン:80/20,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,300MHz)5.36−5.23(m,3H)、4.85(s,1H)、4.28(dd,1H,J=4.8Hz,J=13.0Hz)、4.10−4.02(m,2H)、3.83−3.55(m,16H)、2.42(s,3H)、2.13(s,3H)、2.08(s,3H)、2.02(s,3H)、1.97(s,3H)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,75MHz)170.4,170.1,98.0,71.1,71.0,70.9,70.8,70.4,69.4,68.8,67.7,66.5,62.8,45.5,26.9,21.1。IR(そのままのフィルム,cm−1):2922,1744,1694,1428,1368,1213,1133,1082,1043,1012,978,800。LC−MS(ESI)m/z[M+H]+:566。
化合物13(613mg、1.07mmol、1.2当量)、カルボン酸9(200mg、0.86mmol、1当量)およびHOBt(164mg、1.21mmol、1.5当量)を、10mLの無水テトラヒドロフランと、10mLの無水アセトニトリルとの混合物中に溶解した。DCC(249mg、1.21mmol、1.5当量)を添加して、その混合物を終夜、還流下で撹拌した;TLC分析(DCM/アセトン,6/4,v/v)によって、出発材料の1つの生成物への完全な変換が明らかになった。この沈殿物を、濾過して、濾液を、減圧下で取り出した。得られた油状物を、150mLのDCM中に希釈して、有機相を、最初に、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液で洗浄し、次いで、塩化アンモニウムの飽和水溶液で洗浄した。その有機層を、Na2SO4上で乾燥し、濾過して、真空中でエバポレートした。粗混合物を、シリカゲルカラム上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、最初にAcOEt/シクロヘキサン(8/2,v/v)で溶出して不純物を除去し、次いでDCM/アセトン(6/4,v/v)で溶出し、アジド15(95mg、14%)を無色の油状物として得た。Rf:0.67(DCM/アセトン:6/4,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,300MHz)6.33(s,1H,NH)、5.33−5.24(m,3H)、4.84(s,1H)、4.26(dd,1H,J=5.1Hz,J=13.6Hz)、4.08−3.98(m,4H)、3.81−3.35(m,28H)、2.13(s,3H)、2.07(s,3H)、2.01(s,3H)、1.96(s,3H)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,75MHz)171.2,170.7,170.5,170.1,98.1,71.3,71.1,71.0,70.9,70.6,70.3,69.9,69.4,68.8,67.7,66.5,62.8,51.0,39.0,21.0。IR(そのままのフィルム,cm−1):2873,2106,1746,1671,1540,1437,1369,1224,1133,1085,1047,979。LC−MS(ESI)m/z[M+H]+:739。
基質16(15mg、18μmol、1.2当量)、ラウリン酸17(4mg、16μmol、1当量)およびHOBt(4mg、24μmol、1.5当量)を、0.5mLの無水テトラヒドロフラン中に溶解した。DCC(5mg、24μmol、1.5当量)を添加して、その混合物を終夜、還流して攪拌した。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去して、その粗残渣を、フラッシュクロマトグラフィーによってシリカゲルカラム上で精製し、最初はAcOEt/シクロヘキサン(8/2,v/v)で溶出して不純物を除去し、次いでDCM/MeOH(9/1,v/v)で溶出して、化合物20(16mg、98%)を無色の油状物として得た。Rf:0.37(DCM/MeOH:90/10,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,400MHz)6.39(s,1H,NH)、6.30(s,1H,NH)、5.33−5.24(m,3H)、4.86(d,1H,J=0.8Hz)、4.27(dd,1H,J=5.2Hz,J=12.2Hz)、4.11−3.96(m,4H)、3.82−3.42(m,28H)、2.15−2.03(m,14H)、1.60(bs,2H)、1.26−1.24(m,16H)、0.87(t,3H,J=6.4Hz)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,100MHz)173.5,170.7,170.2,170.1,169.9,169.7,97.7,70.9,70.7,70.6,70.5,70.4,70.3,70.2,70.1,70.0,69.9,69.8,69.6,69.1,68.5,67.4,66.2,62.4,39.2,38.7,36.6,33.9,31.9,29.7,29.6,29.5,29.4,29.3,25.8,24.9,22.6,20.9,20.8,20.7,20.6,14.7。IR(そのままのフィルム,cm−1):2926,2857,1747,1656,1537,1369,1228,1136,1081,1048。LC−MS ESIm/z[M+H]+:896。
化合物21および22は、ラウリン酸をそれぞれ、ステアリン酸18またはペンタコサン酸19に置き換えたこと以外は、生成物20に記載の同じ手順を用いて合成した。
Rf:0.35(DCM/MeOH:90/10,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,400MHz)5.33−5.26(m,3H)、4.86(d,1H,J=0.8Hz)、4.27(dd,1H,J=5.2Hz,J=12.2Hz)、4.10−3.96(m,4H)、3.68−3.44(m,28H)、2.15−1.98(m,14H)、1.60(bs,2H)、1.26−1.24(m,28H)、0.87(t,3H,J=6.4Hz)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,100MHz)172.5,169.7,169.1,169.0,168.9,168.7,96.7,69.9,69.7,69.6,69.5,69.4,69.3,69.2,69.1,69.0,68.8,68.6,68.1,67.5,66.4,65.2,61.4,38.2,37.6,35.6,30.9,28.7,28.6,28.5,28.4,28.3,24.8,21.7,19.9,19.8,19.7,19.6,13.1。IR(そのままのフィルム,cm−1):2923,2854,1748,1664,1369,1226,1086,1047。LC−MS ESIm/z[M+H]+:980。
Rf:0.43(DCM/MeOH:90/10,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,400MHz)5.36−5.23(m,3H)、4.87(s,1H)、4.28(dd,1H,J=2.8Hz,J=11.8Hz)、4.11−3.96(m,4H)、3.83−3.43(m,28H)、2.16−1.98(m,14H)、1.59(bs,2H)、1.26(bs,42H)、0.87(t,3H,J=6.8Hz)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,100MHz)173.5,170.7,170.3,170.0,169.7,97.7,70.9,70.8,70.7,70.6,70.5,70.4,70.3,70.2,70.1,70.0,69.8,69.6,69.1,68.5,67.4,66.2,62.4,39.4,39.2,38.7,36.7,33.9,31.9,29.7,29.6,29.5,29.4,29.3,29.2,25.8,25.6,22.7,20.9,20.8,20.7,14.1。IR(そのままのフィルム,cm−1):2916,2849,1744,1655,1541,1369,1228,1085,1046,910,729。LC−MS ESIm/z[M+Na]+:1100。
化合物20(17mg、14μmol、1当量)を、0.5mLの無水メタノール中に溶解した。ナトリウムメトキシド(1mg、11μmol、0.75当量)を添加して、その反応混合物を、室温で、全ての反応物が加水分解されるまで撹拌した。次いで、この溶液を、樹脂アンバーライト(Amberlite)IR120水素型(H+)を用いて、酸性のpH(約4〜5)になるまでクエンチした。その樹脂をメタノールとともに濾過して、濾液を減圧下で濃縮した。その残渣を、メタノールを用いて溶出するSephadex G25上で精製して、化合物ManC112(14mg、97%)を黄色の油状物として得た。
1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.70(d,1H,J=1.6Hz)、3.91(s,2H)、3.75−3.71(m,3H)、3.63−3.44(m,24H)、3.35(t,2H,J=5.6Hz)、3.29−3.25(m,2H)、2.09(t,2H,J=7.6Hz)、1.50(bs,2H)、1.22−1.19(m,18H)、0.80(t,3H,J=6.8Hz)。13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)176.4,172.9,101.8,74.7,72.6,72.2,72.1,72.0,71.9,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.2,71.1,70.7,70.6,70.5,68.7,67.8,62.9,40.4,39.9,37.1,34.7,33.1,30.8,30.7,30.5,30.3,27.1,23.7,14.5.IR(そのままのフィルム,cm−1):3337,2924,2854,1653,1541,1458,1105,1035。LC−MS ESIm/z[M+H]+:728。
1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.76(s,1H)、3.91(d,2H,J=2.0Hz)、3.76−3.72(m,3H)、3.63−3.42(m,24H)、3.35(t,2H,J=5.2Hz)、3.30−3.25(m,2H)、2.09(t,2H,J=7.6Hz)、1.50(bs,2H)、1.22−1.19(m,28H)、0.80(t,3H,J=6.4Hz)。13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)176.6,172.9,101.8,74.6,72.6,72.2,72.0,71.9,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.2,70.7,70.6,68.7,67.8,63.0,40.5,39.9,37.0,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.3,27.1,23.8,14.5。IR(そのままのフィルム,cm−1):3342,2922,2853,1651,1552,1464,1350,1222,1127,1036,1010。LC−MS ESIm/z[M+H]+:812。
1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.72(d,1H,J=1.2Hz)、3.94(s,2H)、3.79−3.74(m,3H)、3.65−3.44(m,24H)、3.36(t,2H,J=4.0Hz)、3.30−3.24(m,2H)、2.09(t,2H,J=7.6Hz)、1.52(bs,2H)、1.21(bs,42H)、0.82(t,3H,J=6.8Hz)。13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)172.9,169.5,101.8,74.6,72.6,72.1,72.0,71.9,71.7,71.6,71.4,71.3,71.2,70.6,70.5,68.7,67.8,62.9,40.4,39.9,37.1,34.7,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.3,27.1,23.8,14.5。IR(そのままのフィルム,cm−1):3342,2922,2853,1651,1552,1464,1350,1222,1127,1036,1010。LC−MS ESIm/z[M+H]+:910。
化合物24は、Kikkeriら、(2009)に記載の手順に従って調製した。簡潔には、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンをまず、アクリロニトリルと、1,4−ジオキサン中で、室温で24時間反応させて、対応するトリシアニドを、ヒドロキシル基のマイケル付加によって得る。HCl(37%)中で4時間のシアノ基の加水分解、続いて、エタノールの影響下(還流,36時間)でのエステル化によって、所望のエチルトリメスター24を得た。
トリエステル25(176mg、0.23mmol、1当量)を、テトラヒドロフラン(2mL)と無水エタノール(2mL)との混合物中に溶解した。この溶液に、水酸化ナトリウムの水溶液(2mL、4N)を添加した。その混合物を、終夜撹拌して、TLC分析(シクロヘキサン/AcOEt,7/3,v/v)によって、出発物質の完全な消失が示された。溶媒を、減圧下でエバポレートして、その混合物を、HCl,1Nの水溶液の添加によって酸性にした。水を添加して(50mL)、得られた混合物を、50mLのAcOEtを用いて3回抽出した。合わせた有機抽出物を、Na2SO4で乾燥し、濾過して、真空中で濃縮して、26を白色固体として得た(145mg、94%)。その粗物質を、十分きれいにして、さらに精製することなく、次の工程に用いた。1H NMR δ(ppm)(C5D5N,300MHz)12.53(s,3H,3 COOH)、4.15(s,6H)、3.95−3.86(m,6H)、2.80−2.74(m,6H)、2.30(t,2H,J=7.5Hz)、1.71−1.19(m,44H)、0.86(t,3H,J=6.9Hz)。13C NMR δ(ppm)(C5D5N,75MHz)176.3,174.9,77.9,77.8,69.8,67.0,60.1,38.0,35.2,32.3,30.0,29.9,29.7,29.6,29.4,29.3,29.2,28.7,26.0,23.0,19.5,14.5。IR(そのままのフィルム,cm−1):2917,2850,1718,1554,1467,1308,1194,1109,1069,973,829,534。LC−MS(ESI)m/z[M−H]−:701。
化合物27(50mg、23μmol、1当量)を、1mLの無水メタノール中に溶解した。ナトリウムメトキシド(3mg、45μmol、2当量)を添加して、その反応混合物を、室温で、全ての反応物が加水分解されるまで撹拌した。TLC分析(DCM/MeOH,9/1,v/v)によって、新規な生成物の出現と、出発材料の1つの生成物への消失とが明らかになった。次いで、この溶液を樹脂アンバーライト(Amberlite)IR120水素型(H+)を用いて、酸性のpH(約4〜5)に達するまでクエンチした。その樹脂をメタノールとともに濾過して、その濾液を減圧下で濃縮した。その残渣を、Sephadex G25カラム上で精製して、これはメタノールを用いて溶出し、化合物TriManC245(37mg、96%)を黄色の油状物として得た。1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.71(d,3H,J=1.2Hz)、3.77−3.72(m,12H)、3.60−3.49(m,54H)、3.46(t,6H,J=5.6Hz)、3.29(t,6H,J=5.6Hz)、2.36(t,6H,J=6.4Hz)、2.09(t,2H,J=8.0Hz)、1.27−1.14(m,44H)、0.80(t,3H,J=6.8Hz)。13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)176.5,174.1,101.8,74.6,72.6,72.1,71.6,71.4,71.3,70.7,70.2,68.7,68.6,67.8,62.9,61.5,40.5,37.8,37.5,33.1,30.9,30.8,30.7,30.6,30.5,30.4,27.1,23.8,14.5。IR(そのままのフィルム,cm−1):3324,2922,2853,1649,1462,1349,1204,1179,1123,1100,974,801,722,680。HRMS ESIm/z:C80H152N4O34[M+2H]2+についての理論値:1713.0288。実測値:1713.0331。
アセチル化マンノース30(150mg、0.22mmol、1当量)を、1mLの無水メタノール中に溶解して、触媒性の炭酸カリウムK2CO3(2mg、0.01mmol、0.05当量)を添加した。この反応混合物を、室温で、全ての反応物が加水分解されるまで撹拌した(シクロヘキサン/AcOEt,5/5,v/v)。次いで、この溶液を、樹脂アンバーライト(Amberlite)IR120水素型(H+)を用いて、酸性のpH(約4〜5)に達するまで、クエンチした。その樹脂を、メタノールとともに濾過して、その濾液を減圧下で濃縮した。その残渣を、メタノールを用いて溶出するSephadex G25カラム上で精製して、化合物31(135mg、96%)を黄色の油状物として得た。Rf:0.43(シクロヘキサン/AcOEt:5/5,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,300MHz)7.37−7.27(m,13H)、7.21−7.18(m,2H)、4.98(d,1H,J=1.5Hz)、4.85(d,1H,J=10.8Hz)、4.76−4.66(m,3H)、4.57−4.51(m,2H)、4.12−4.11(m,1H)、3.91−3.63(m,19H)、3.37(t,2H,J=5.1Hz)、2.66(s,1H,OH)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,75MHz)138.8,138.7,138.4,128.9,128.7,128.4,128.3,128.2,128.1,128.0,99.8,80.6,75.5,74.8,73.9,72.3,71.5,71.1,71.0,70.5,70.4,69.4,68.7,67.0,51.1。IR(そのままのフィルム,cm−1):2867,2101,1453,1362,1284,1210,1096,1059,1027,842,735,697。HRMS(ESI)m/z:C35H45N3O9[M+Na]+についての理論値:674.3053。実測値:674.3080。
マンノース誘導体29(63mg、0.12mmol、1当量)および脱保護したマンノース31(91mg、0.14mmol、1.1当量)を、1mLの無水ジクロロメタンおよび1mLの無水Et2Oの混合物中に溶解した。分子ふるい(3Å,0.7g)を添加した。その懸濁物を、室温で30分間撹拌し、NIS(39mg、0.17mmol、1.4当量)を一度に添加し、続いてTMSOTf(2μL、11μmol、0.09当量)を直ちに添加した。この反応混合物を、室温で終夜撹拌し、次いでセライトを通してEt2Oを用いて濾過した。その濾液を減圧下で濃縮し、100mLのEt2O中で希釈した。有機層を、チオ硫酸ナトリウムの飽和溶液を用いて2回洗浄し、Na2SO4で乾燥して、濾過し、真空中でエバポレートした。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによってシリカゲルカラム上で精製し、これはシクロヘキサン/AcOEt(7/3,v/v)で溶出して、所望の化合物32(76mg、58%)を無色の油状物として得た。Rf:0.15(シクロヘキサン/AcOEt:7/3,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,300MHz)7.41−7.18(m,30H)、5.60−5.58(m,1H)、5.14(d,1H,J=1.2Hz)、4.96(d,1H,J=1.2Hz)、4.91(d,1H,J=2.4Hz)、4.88(d,1H,J=2.7Hz)、4.73−4.69(m,4H)、4.63−4.43(m,5H)、4.11−4.09(m,1H)、4.06−3.51(m,25H)、3.38(t,2H,J=5.1Hz)、2.16(s,3H)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,75MHz)170.5,138.9,138.8,138.6,138.4,128.8,128.7,128.6,128.5,128.2,128.1,128.0,127.9,127.8,100.0,99.2,80.1,78.6,75.6,75.4,75.2,75.1,74.8,73.8,73.7,72.4,72.3,71.1,71.0,70.5,70.4,69.7,69.5,69.2,67.0,51.1,21.6。IR(そのままのフィルム,cm−1):2865,2102,1743,1496,1453,1363,1284,1234,1137,1078,1053,1027,978,910,844。HRMS(ESI)m/z:以下についての理論値C64H75N3O15[M+Na]+:1143.5542。実測値:1143.5559。
トリカルボン酸26(9mg、13μmol、1当量)、アミンジマンノース33(45mg、41μmol、3.2当量)、DIPEA(25μL、142μmol、10.5当量)およびHOBt(7mg、50μmol、3.5当量)を、1mLの無水テトラヒドロフラン中に溶解した。この溶液に、HBTU(18mg、50μmol、3.5当量)を添加した。還流下で終夜撹拌して反応させた。TLC分析(DCM/MeOH,95/5,v/v)によれば、反応は完了していた。その混合物を、室温まで冷却して、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物を、シリカゲルカラムに加えて、最初にDCM/アセトン(5/5,v/v)を溶出液として用いて、不純物を除去し、次いで、DCM/MeOH(95/5,v/v)を用いて、完全に保護された(ベンジル化およびアセチル化した)期待の生成物(14mg、27%)を黄色の油状物として得た。Rf:0.13(DCM/MeOH:95/5,v/v)。1H NMR δ(ppm)(CDCl3,400MHz)7.28−7.06(m,90H)、6.56(s,3H,NH)、5.93(s,1H,NH)、5.46−5.44(m,3H)、5.01−5.00(m,3H)、4.83(d,3H,J=1.6Hz)、4.78(d,3H,J=1.6Hz)、4.75(d,3H,J=1.6Hz)、4.60−4.56(m,12H)、4.49−4.31(m,15H)、3.96(t,3H,J=2.0Hz)、3.90(dd,4H,J=2.8Hz,J=9.4Hz)、3.87−3.82(m,5H)、3.76(dd,4H,J=2.8Hz,J=9.4Hz)、3.73−3.35(m,80H)、2.42(t,2H,J=6.0Hz)、2.33(t,6H,J=5.2Hz)、2.04(s,9H)、1.27−1.13(m,44H)、0.81(t,3H,J=6.8Hz)。13C NMR δ(ppm)(CDCl3,100MHz)171.5,170.1,138.4,138.3,138.2,138.0,128.4,128.3,128.2,128.1,127.8,127.7,127.6,127.5,127.4,99.6,98.8,79.6,78.1,75.2,75.1,74.9,74.6,74.4,73.4,73.3,72.0,71.9,71.8,70.6,70.4,70.1,70.0,69.9,69.3,69.1,68.7,67.4,66.7,59.6,39.2,37.2,31.9,29.8,29.7,29.6,29.5,29.4,25.7,22.7,21.1,14.1。IR(そのままのフィルム,cm−1):2922,2853,1743,1454,1365,1235,1099,1058,1028,737,698。HRMS(ESI)m/z:以下についての理論値C230H296N4O52[M+H]+:3946.0641。実測値:3946.0631。
化合物TriManC245(2mg、8.3 10−4mmol、1当量)およびNHS−Alexa Fluor 633(0.1mg、mmol、0.1当量)を、0.1mLの水に溶解した。触媒量のDMAPをこの溶液に添加して、その反応混合物を、暗所で終夜撹拌した。次いで、その溶液を、正確な容積の水を用いてSephadex G25カラムで精製した。最初に単離された画分は、Alexa Fluor 633標識トリマンノシド5−AFに相当する。第一に、UV滴定を行って、NHS−Alexa 633の較正曲線を得た。次いで、Sephadexによって精製した画分を、UVによって滴定し、蛍光色素の固定についてのパーセンテージを決定した:1%の値を、この方法で評価した。
ManinsatC24は、ラウリン酸を、10,12−ペンタコサジイン酸で置き換えたこと以外は、ManC11の調製に関して記載されたのと同じ手順に従って調製した。
1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.70(d,1H,J=1.2Hz)、3.90(s,2H)、3.75−3.72(m,4H)、3.63−3.45(m,26H)、3.36−3.25(m,4H)、2.16−2.08(m,6H)、1.51−1.19(m,32H)、0.79(t,3H,J=6.8Hz)。
13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)176.5,172.8,101.8,78.0,77.9,74.6,72.6,72.2,72.0,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.2,71.1,70.7,70.6,70.5,68.7,67.8,66.5,63.0,40.3,40.2,37.1,33.1,30.8,30.7,30.6,30.3,30.2,30.1,30.0,29.9,29.8,29.6,27.0,23.4,19.7,14.5。
IR(そのままのフィルム,cm−1):3366,2925,2855,1654,1541,1507,1458,1101,669,650。
Rf:0.57(DCM/MeOH:7/3,v/v)。
MS ESIm/z[M+K]+:942。
TriManinsatC24は、ペンタコサン酸を、10,12−ペンタコサジイン酸で置き換えたこと以外は、TriManC24の調製について記載されたのと同じ手順に従って調製した。
1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.64(d,3H,J=1.6Hz)、3.70−3.64(m,12H)、3.57−3.40(m,60H)、3.31(t,3H,J=8.4Hz)、3.26(t,3H,J=4.4Hz)、2.37(t,6H,J=6.4Hz)、2.11−2.06(m,6H)、1.44−1.09(m,32H)、0.74(t,3H,J=6.0Hz)。
13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)174.7,168.9,101.8,78.0,77.9,74.6,72.6,72.2,71.6,71.4,71.3,70.4,70.2,69.6,68.7,68.6,67.8,63.0,62.0,41.9,40.9,37.1,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.3,302,30.1,29.9,29.6,27.2,23.8,19.7,14.4。
IR(そのままのフィルム,cm−1):3353,2924,1716,1636,1350,1182,1095,1035,1009,837,669。
Rf:0.18(DCM/MeOH:90/10,v/v)。
HRMS ESIm/z:以下についての理論値C80H144N4O34[M+H]+:1705.9735。実測値:1705.9759。
DiManinsatC24は、以下の点以外は、TrDiManC24の調製について用いたのと同様の手順によって調製した:
−ペンタコサン酸を、10,12−ペンタコサジイン酸で置き換えたこと、および
−10,12−ペンタコサジイン酸とのカップリングの前に、化合物33のベンジル基を、アセチル基で置き換えて、それによって化合物108を得たこと(図3Eに図示されるとおり)。
1H NMR δ(ppm)(MeOD,400MHz)4.87(s,3H)、4.73(s,3H)、3.64−3.50(m,14H)、3.46−3.20(m,76H)、2.97−2.93(m,6H)、2.33(t,6H,J=6.8Hz)、2.09−1.96(m,6H)、1.08−1.05(m,32H)、0.66(t,3H,J=6.8Hz)。
13C NMR δ(ppm)(MeOD,100MHz)173.7,168.8,104.2,101.2,80.6,80.4,75.1,74.7,72.5,72.2,72.1,71.9,71.8,71.7,71.6,71.4,69.4,69.1,68.9,68.7,68.6,68.0,63.2,63.1,42.2,37.0,34.8,33.7,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.4,30.2,29.5,28.1,27.0,26.0,23.7,19.7,14.4。
IR(そのままのフィルム,cm−1):3353,2924,1716,1636,1350,1182,1095,1035,1009,837,669
糖脂質のミセルの水力学的な直径を、Zetasizer Nano ZSシステム(Malvern Instruments)を用いて水の中で測定した。CMCを、外因性の蛍光プローブとしてピレンを用いて測定し、記載どおり行った(Perinoら、2011)。簡潔には、ある範囲の糖脂質サンプルを、水(1ml)の中に、1.0〜0.001mg/mlの範囲の濃度で溶解した。ピレン(1mM)のストック溶液を、ジメチルスルホキシド中で調製し、各々のサンプルに添加した。ピレンの蛍光放射を、25℃で、Fluorolog分光蛍光光度計(Jobin Yvon,Horiba)を用いて測定した。蛍光放射の強度は、374nm(I374)および383nm(I383)で、339nmの波長での励起によって決定した。I374/I383の比を算出して、糖脂質濃度に対してプロットした。CMC値は、2つの直線の交差で決定した。
SPR実験を、Biacore3000を用いて行った。ヒトDC−SIGN(Lys62−Ala404、R§D Systemsより)のCM5センサーチップ(GE−Healthcare,Uppsala,スウェーデン)への固定化を、70μLのDC−SIGN(50μg/mlのギ酸緩衝液,pH4.3)を、N−エチル−N’−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド(EDC)/N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)で活性化した表面上(これによって、およそ8000RUのシグナルを得た)に注入し、続いて20μLのエタノールアミン塩酸塩(pH8.5)を注入することによって行い、このマトリックスの遊離の活性化部位を飽和した。バイオセンサーアッセイを、泳動緩衝液として、0.005%のsurfactantP20および5mMのCaCl2を含有している、HEPES−緩衝化生理食塩水(10mMのHEPES,150mM塩化ナトリウム,pH7.4)を用いて行った。全ての結合実験を、25℃で、20μL/分の一定流速で行った。泳動緩衝液中に溶解された種々の化合物(0.39〜50μM)を、3分間注入し、続いて、3分の解離段階に進んだ。このセンサーチップ表面を、各々の実験後に、10μLのEDTA 0.5M(pH8.0)を注入することによって再生した。EDC/NHSによって活性化し、エタノールアミンで不活性化する単一のチャネルをコントロールとして用いた。動的パラメーターを、BIAeval4.1ソフトウェアを用いて算出した。分析は、別々のka/kd(kon/koff)を有する単純なラングミュア(Langmuir)結合モデルを用いて行った。コントロールのチャネルからおよびブランク−緩衝液注入から、応答シグナルを差引きした後に、特定の結合プロフィールが得られた。各々のモデルに対する適合は、理論モデルに比較した、カイ二乗値、および残留分布のランダム性によって判定した(ラングミュア結合1:1)。
MAGI−CCR5細胞は、CXCR4およびCCR5の両方の共レセプターを発現するHeLa−CD4−LTR−LacZ細胞である(NIH AIDS Research and Reference Programから、Julie Overbaugh博士より受領(Chackerianら、1997))。HEK293T細胞を、HIV−1産生のために用いた。MCF−7細胞を生存度の試験のために用いた。これらの細胞株を37℃かつ5%CO2で、ゲンタマイシンおよび10%(v/v)の熱不活性化ウシ胎仔血清(FBS)を補充した、ダルベッコ変法イーグル培地(DMEM;Lonza)で培養した。
エルトリエーションされたヒト単球を、French Blood Bank(Etablissement Francais du Sang,Strasbourg,フランス)から入手した。単球由来樹状細胞を生成するため、単球を、37℃で5%CO2で、RPMI 1640培地(Lonza)(10%のFBS、ゲンタマイシン、50ng/mlの組み換えヒト顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM−CSF;ImmunoTools)および10ng/mlの組み換えヒトインターロイキン−4(rhIL−4;ImmunoTools)を補充)で培養し、3日目にサイトカインを再添加した。細胞を、5日目に回収して、特定の細胞マーカー発現(CD1a,DC−SIGN)を、フローサイトメトリーによって、FACS Caliburフローサイトメーター(Beckton−Dickinson)によって特徴づけて、CellQuest Proソフトウェア(BD Biosciences)を用いて分析した。
細胞生存度に対するマンノシド糖脂質の効果を、MTTホルマザンへのMTT還元後に、MTT(3−(4,5−ジメチルチアゾール−2−イル)−2,5−ジフェニルテトラゾリウムブロミド)比色手順を用いて、ミトコンドリアデヒドロゲナーゼの活性をモニタリングすることによって評価した。簡潔には、96ウェル培養プレート中に入れた、コンフルエントなMCF−7細胞を、異なる濃度の化合物(0.1% DMSO)で、培地単独(陽性コントロール)、0.1%のDMSOで、またはアミタール(30mM;陽性コントロール)のいずれかで処理した。24時間後、細胞培養培地中のMTT溶液(300μg/mL)を2時間、37℃で添加した。次いで、培地を取り出して、ホルマザン結晶を、100μLのDMSO中に溶解した。得られた溶液の光学密度は、マイクロプレートリーダー(BioTek EL808)を用いて595nmで比色的に決定した。このアッセイでは、コントロールの生存細胞は、100という生存指数を有したが、細胞傷害性化合物に曝された細胞の生存度は、100未満である。一次的なヒト細胞に対するマンノシド糖脂質の効果を評価するために、DCを、示した濃度の化合物を用いて処理して、37℃で24時間インキュベートした。細胞を、PBS中に再懸濁して、633nm励起用のSytox Red死細胞染色剤(20nM;Invitrogen)を、フローサイトメトリーによる分析前に添加した。
細胞マーカー(CD1a,DC−SIGN)の発現は、FACS緩衝液(PBS中1%FBS)の中で、4℃で20分間、特定の抗体およびそれらの対応するアイソタイプコントロール(BD−Pharmingenより):CD1a−アロフィコシアニン(APC)(HI149)、CD209/DC−SIGN−PerCP−Cy5.5(DCN46)を用いて決定した。
ヒトDC(100μl中に1×105)を、FBSなしのRPMI 1640培地中で96ウェルマイクロタイタープレート中でアリコートした。HIV−1糖タンパク質120の結合を評価するために、FITC複合体化組み換えgp120 HIV−1 IIIB(ImmunoDiagnostics Inc,Woburn、MA,米国)を、細胞に添加し(最終濃度5μg/ml)、45分間37℃でインキュベートした。競合アッセイのために、細胞を、マンナン(最終が100μg/ml)またはTriManC24(100μM)のいずれかを用いて30分間37℃で前処理し、続いてgp120−FITCとともに45分間37℃でインキュベーションした。HBSS緩衝液(Lonza)での洗浄後、蛍光強度の発現を、FACS Caliburフローサイトメーターで、CellQuest Proソフトウェアを用いて分析した。
ヒトDC(100μlのRPMI培地中に1×105)を、Alexa633標識TriManC24(最終が100μM)に10分間37℃で曝した。示した場合、トランスフェリン−Alexa488(Invitrogen)を、また、10分間37℃で添加した。次いで、細胞を洗浄し、4%のパラホルムアルデヒドを用いて室温で15分間固定した。核を、DAPI(最終が1μg/ml)を用いて5分間標識した。スライドを、Prolong−Antifade(Molecular Probes)を用いて装着した。サンプルを、共焦点顕微鏡(Zeiss LSM 700)で画像化して、画像をAdobe Photoshopで分析した。
HIV−1 NL4−3の分子クローン(X4株)およびNL4−3 R5−向性バージョン(Schaefferら、2004)を、HEK293T細胞にトランスフェクトして、ウイルスを、48時間後に上清から回収した。全てのトランスフェクションは、DNAの沈殿のためのリン酸カルシウムを用いて行った。ウイルスストックは、それらのp24 Gag含量に基づいて正規化し、Innotest HIV抗原mAbキット(Innogenetics)を用いて、酵素連結免疫吸着アッセイ(ELISA)で測定した。ストックのウイルス感染性を、指標MAGI−CCR5細胞株で制御して、光学顕微鏡でブルーの細胞を数え上げた。
ManC1、ManC17(比較)および本発明の化合物(ManC24、ManC17,TriManC24,TriDiManC24,TriManinsatC24およびManinsatC24)を、水の中で連続希釈した。ヒトDC(200μl中に1×105)を、種々の濃度の化合物、またはマンナン(Sigma)、または培養培地単独で、10%FBSを含有するRPMI 1640培地中で、45分間37℃で前処理した後に、HIV−1(100ngのp24Gag)を用いて3時間、感染させた。過剰の遊離のウイルスおよび分子を、3回の洗浄によって除去した。次いで、DCを、MAGI−CCR5細胞(1×105)とともに37℃で48ウェルのプレート中に入れて共培養した。2日後、MAGI−CCR5細胞のウイルス感染を、βガラクトシダーゼアッセイ後に定量して、光学顕微鏡によってブルーの細胞を数え上げた。
IC50は、各々の化合物の連続希釈によって決定した。トランス感染アッセイを、最低3回繰り返し、IC50は、Kaleidagraphを用いて決定した。
プラスミドpDV2、株16681(5μg)(米国、バークレー、カリフォルニア大学、E.Harris博士より贈呈)を、XbaIで直線化し、フェノール−クロロホルム抽出し、エタノールおよびNaClで沈殿し、RNaseなしの水に再懸濁した。RNAを、インビトロ転写によって産生し、これは製造業者の指示に従って、追加の7mG(ppp)A RNA Cap Structure Analog(New England BioLabs)を含む、T7 RiboMax LargeスケールRNA産生システム(Promega)を用いて50μlの反応物中で行った。この混合物を、37℃で4時間インキュベートした。これを、さらなる精製なしに用いて、リポフェクタミン(Lipofectamine)RNAiMaxキット(Invitrogen)を用いて、6ウェルプレート中で、BHK−21細胞(106細胞/ウェル)をトランスフェクトした:Opti−MEM(200μl)中のRNA混合物(50μl)を、リポフェクタミン(Lipofectamine)(50μl)が含有されるOpti−MEM(200μl)に添加し、20分間インキュベートして、106個の細胞に添加した。3時間後、その上清を取り出して、細胞を完全L15培地中で培養した。3日、4日および5日目に、上清を収集して、スピンダウンして、細胞を取り出して、−80℃でアリコートにて保管した。
DV2は、BHK細胞由来のウイルス上清での感染によって、28℃で培養したC6/36蚊細胞中で産生した。C6/36上清を、2日毎に、16日目まで採取して、アリコートにて−80℃で保管した。
本発明の化合物(TriManC24,TriManinsatC24)を、水の中で連続希釈した。ヒトDC(200μl中に2.5×105)を48ウェルのプレート中で、種々の濃度の化合物または培養培地単独で、FBSなしのRPMI 1640培地中で、30分間37℃で前処理した。それらを、1.0という感染の多重度でDV−2に対して、37℃で2時間曝した。細胞を、洗浄して、完全RPMI培地(条件1)または完全培地(試験された化合物(TriManC24,TriManinsatC24)(条件2)を含有)中で培養した。48時間後、上清を滴定して、細胞を、ウイルス抗原の細胞内検出に供した。DCを4%(v/v)のパラホルムアルデヒドで固定して、0.1%(v/v)のTriton X−100を用いて3分間室温で透過化処理した。洗浄後、それらを、マウス抗DV2型モノクローナル抗体(3H5.1、Millipore)で標識し、APC複合体化ラット抗マウスIgG1で染色した。細胞の蛍光強度は、Cell Quest Proソフトウェアを用いてフローサイトメトリー(FACS Calibur,Becton Dickinson)によって分析した。
細胞上清中のウイルス産生は、記載されるような(Lambethら、2005)フローサイトメトリー−ベースのアッセイを用いて滴定された。細胞を固定して、0.1%のTriton X−100を用いて室温で5分間透過化した。洗浄後、それらを、マウスの抗DV2型モノクローナル抗体(3H5.1、Millipore)を用いてウイルスエンベロープタンパク質の細胞内発現について標識して、APCラット抗マウスIgG1(BD Pharmingen)で染色した。
本発明の化合物の溶解度、臨界ミセル濃度(CMC)および細胞毒性
本発明の全ての合成された化合物は、単純な攪拌によって水中に溶解された。これらの分子は、不飽和化合物については125μM未満の濃度で、および飽和化合物については少なくとも最大で500μMまでの濃度での、ヒト細胞株に対する生存度アッセイによって、およびDCの死細胞染色によって示されるように、細胞に対する細胞毒性を示さなかった。
DC−SIGNの糖鎖認識ドメイン(CRD)に対するマンノシド誘導体の結合親和性は、表面プラズモン共鳴(SPR)によって評価した。
TriManC24が、HIV−1 gp120と、DCの表面で発現されるDC−SIGNとの相互作用を阻害する能力。未熟なDCは、サイトカインのカクテルの存在下で、ヒト単球の分化によって調製された。DC−SIGNの発現レベルは、フローサイトメトリーによって制御した。予想どおり、結果は、DC上で高レベルの発現を示し、コントロールの単球上では発現を示さなかった(図1A)。細胞を、蛍光標識したgp120とともにインキュベートした場合、単球との低い相互作用と比較して、DCに対するgp120の強力な結合が観察された(図1B)。これは、gp120が、DC上で発現されたDC−SIGNに対して最も結合したが、他の細胞表面タンパク質との相互作用も可能であることを示した(Crubletら、2008;Vivesら、2005)。
競合アッセイを、TriManC24またはマンナンのいずれかとともにDCをプレインキュベートし、続いて、gp120−FITCを添加することによって行った(図1C)。フローサイトメトリーの結果、TriManC24は、DCに対するgp120−FITCの結合を阻害できたことが示された。競合は完全ではないが、100μMの濃度では、これらの結果、TriManC24の、DCに対するgp120の結合を、マンナンよりも良好に妨害する能力が実証された。
TriManC24とDCによって発現されるDC−SIGNとの相互作用をさらに洞察するため、Alexa Fluor−633をマンノース単位のヒドロキシル基に結合することによって、蛍光標識されたTriManC24を調製した。DCを、標識されたTriManC24に対して暴露し、共焦点蛍光顕微鏡によって可視化した。画像によって、細胞膜でのTriManC24の期待した結合、および細胞の細胞質への内部移行が明らかになった(データ示さず)。クラスリン媒介性のエンドサイトーシスの特定のマーカーである、標識されたトランスフェリンを用いるさらなる実験(Hansenら、1992)によって、早期エンドソームにおけるTriManC24とトランスフェリンとの間の同時局在が示された。まとめると、これらのデータで、TriManC24は、細胞膜に結合し、クラスリン媒介性のエンドサイトーシスを介してDCによって内部移行され得ることが示された。
本発明の化合物の、HIV−1トランス感染を阻害する能力を検討するために、本発明者らは、インビボの条件を最高に模倣するためにヒトDCを感染させることを選択する。ヒトDCを、種々の化合物(すなわち、マンナン(コントロール)、ManC1(比較)、ManC11(比較)、ManC17、ManC24,TriManC24,TriDiManC24、ManinsatC24およびTriManinsatC24)に対して、45分間37℃で暴露した後、HIV−1(株R5およびX4)を3時間、接種した。未結合のビリオンおよびマンノシドを除去するための徹底的な洗浄後、DCをMAGI−CCR5細胞と同時培養した。この手順によって、βガラクトシダーゼ活性の検出による、レポーターMAGI−CCR5細胞におけるHIV−1複製の正確な定量が可能になる。これらの細胞は、βガラクトシダーゼレポーター遺伝子に融合したHIV末端反復配列(LTR)の組み込まれたコピーを発現し、そしてそれぞれHIV−1 R5およびX4の侵入に必要な、CD4レセプター、ならびにCCR5およびCXCR4共レセプターを発現する。ウイルスTat発現およびLTRの活性化をもたらすウイルス侵入の際に、これらの細胞は、HIVトランス感染の定量を2日後に可能にする。
デングウイルス(DV)は、Aedesという蚊を介して伝播されるフラビウイルスであり、蚊の咬傷によって皮膚に導入される。樹状細胞(DC)は、DV複製に対して極めて許容的である。なぜなら、DVは、DC−SIGNへの結合後にDCに感染するからである(Navarro−Sanchezら;2003;Tassaneetrithepら、2003)。従って、このウイルスは、シス感染によってDCに感染する。
10%のFBSを含有するRPMI 1640培地中のヒト単球由来樹状細胞(2×105;300μL)を、抗DC−SIGN抗体(クローンAZND1,Beckman−Coulter;10μg/mL)または化合物TriManC24、TriManC24insat(10および100μM)のいずれかで、30分間37℃で前処理し、その後にHIV−1(R5株;100ngのp24Gag)を接種した。3時間後、細胞を、ペレットにして、徹底的に洗浄して過剰のウイルスおよび化合物を除去した。感染後2、4および7日目、細胞をペレットにして、上清のアリコートを取り出して、−20℃で維持し、上清の半分を新鮮な培地で置き換えた。ウイルス複製を、酵素連結免疫吸着アッセイ(ELISA,Innogenetics)によって培養上清中でp24Gagレベルを測定することによってモニターした。結果を図5に示す。DCのTriManC24およびTriManC24insatとのプレインキュベーションにより、HIV R5複製の量が減少することが明らかにわかる。デングウイルスの場合に示されるように、本発明の化合物はまた、HIVシス感染を妨げ得る。本出願人はさらに、本発明の化合物が、HIVによるDC以外の細胞株の感染を防止できることを示した(データ示さず)。
現在のところ、AIDSの汎流行の開始以来、治療用に承認された抗レトロウイルス薬は32ある。それらは全てが、ウイルスの部位、例えば、侵入、逆転写、組み込みおよび成熟を標的とする(De Clercq,2007;Flexner,2007)。それらの欠点は、ウイルス誘導性の薬物耐性および薬物誘導性の副作用である。相補的なアプローチは現在、粘膜感染および伝播を妨げることができる阻害薬の探索に向けられている。さらに、宿主細胞を標的とするストラテジーはまた、ウイルス変異および薬物耐性を妨げるべきである。デング熱、デング出血熱(DHF)またはデングショック症候群をもたらし得る、デングウイルス感染の場合、現在は利用できる特異的な抗ウイルス薬もワクチンもない。十分な支持療法および治療のみがその罹患率を制御する。世界的な発現頻度は、1年あたり5千万〜1億例のデング熱、および数十万例のDHFであると推定され、DHFについては約5%の致死率である。
Alvarezら、(2002),.J.Virol.76,6841−6844.
Baleuxら、(2009).Nat.Chem.Biol.5,743−748.
Banchereauら、(2000)Annu.Rev.Immunol.,18,767−811
Banoubら、1986,Tet.Lett.27,4145−4148
Canardら、(2011).Immunol.Lett.135,165−172.
Cavroisら、(2007).PLoS Pathog.3,e4.
Chackerianら、(1997).J.Virol.71,3932−3939.
Crubletら;(2008).J.Biol.Chem.283,15193−15200.
Davidら;(2001).AIDS Res.Hum.Retroviruses 17,59−68.
De Clercq,E.(2007).Nat.Rev.Drug Discov.6,1001−1018.
Duffels,A.ら、D.(2000).Chem.Eur.J.6,1416−1430.
Engering,A.ら、(2002).J.Immunol.168,2118−2126.
Feinberg,H.ら、(2001),.Science294,2163−2166.
Flexner,C.(2007),Nat.Rev.Drug Discov.6,959−966.
Frisonら、(2003),Journal of Biological Chemistry,278,23922−23929
Geijtenbeek,T.B.ら、(2000).Cell 100,587−597.
Geijtenbeek,およびvan Kooyk(2003).Curr.Top.Microbiol.Immunol.276,31−54.
Geijtenbeekおよびvan Kooyk(2003).APMIS 111,698−714.
Geijtenbeekら、(2003),J.Exp.Med.197,7−17.
Grivelら、(2011),J.Transl.Med.9 Suppl 1,S6.
Gurney,K.B.ら、(2005),J.Virol.79,5762−5773.
Hansenら、(1992).Exp.Cell Res.199,19−28.
Hatchら、(2008).ChemBioChem.9,2433−2442.
Hu,J.ら、(2000)J.Virol.74,6087−6095.
Kikkeriら、(2009).Chem.Com.235−237.
Khiarら、(2009).Chem.Com.4121−4123.
KooykおよびGeijtenbeek,(2003),Nat Rev Immunol.,3,697−709
Kooyk,およびGeijtenbeek,(2004).J.Virol.78,8322−8332.
Lambeth,C.R.ら、(2005),J.Clin.Microbiol.43:3267−3272.
Martinez−Avilaら、(2009).Chemistry 15,9874−9888.
Mitchell,ら、(2001).J.Biol.Chem.276,28939−28945.
Navarro−Sanchezら、(2003),EMBO Rep.4:723−728.
Oversteegenら、(2007)Nat.Rev.Drug Discov.2007,951−952
Perinoら、(2011).Macromol.Chem.Phys.212(2),111−117.
PiguetおよびSteinman,(2007).Trends Immunol.28,503−510.
Sattinら、(2010).ACS Chem.Biol.5,301−312.
Schaefferら、(2004)J.Virol.78,1375−1383.
Shenら、(2010).J.Leukoc.Biol.87,663−670.
Sidobreら、(2002).Biochem J365,89−97.
Suら、(2010).Eur.J.Med.Chem.45,2713−2718.
Tabaraniら、(2006).FEBS Lett.580,2402−2408.
Tassaneetrithepら、(2003).J.Exp.Med.197,823−829.
TiltonおよびDoms,(2010), Antiviral Res.,85,91−100.
Wangら、(2004).Chin.Med.J.(Engl)117,1395−1400.
Wang,(2008).Biochem.Biophys.Res.Commun.373,561−566.
Wangら、(2008).Proc.Natl.Acad.Sci. USA 105,3690−3695.
Wiley,およびGummuluru,(2006).Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103,738−743.
Wilkinson,およびCunningham,.(2006).Curr.Drug Targets 7,1563−1569.
Wu,およびKewalRamani,(2006).Nat.Rev.Immunol.6,859−868.
Yamamotoら、(2009).PLoS Pathog.5,e1000279.
Claims (19)
- 薬物としての使用のための、式(I)の化合物
であって、
式中、
−R1は、C17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキルであって、任意的に1つ以上のC1−C3アルキルラジカルによって置換されており、
−M2−Q2およびM3−Q3は任意的に存在し、
−M1は、マンノシル、ジマンノシルおよびトリマンノシルからなる群より選択され、
−M2およびM3は独立して、マンノシル、ジマンノシル、トリマンノシルおよび治療剤部分、好ましくは抗感染剤部分からなる群より選択され、最大で800g/mol−1の分子量を有しており、
−Q1、Q2およびQ3は独立してオリゴエーテル−ベースのスペーサーの群から選択され、これは、少なくとも1つの−(R8O)n−部分を含んでおり、ここでR8は、直鎖のまたは分岐したC1−C4アルキルであり、かつnは、2〜10の整数であり、
−リンカー(LINKER)は、1〜20個の炭素原子、ならびにN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子の骨格を有する、二官能性、三官能性および四官能性のリンカーのなかから選択される、化合物、
または、その薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくはエステル。 - 薬物としての使用のための請求項1に記載の化合物であって、ここでR1が、以下からなる群より選択される化合物:
(i)−(CH2)pCH3(式中pが16〜29の整数);
(ii)−(CH2)p−M−(CH2)q−CH3(式中Mが、CH=CHまたはC≡Cであり、かつpおよびqが、0〜27の整数であり、ただし14≦p+q≦27)、
(iii)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3(式中KおよびMが独立してCH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、qおよびrは0〜25の整数であり、ただし12≦p+q+r≦25);
(iv)−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−P−(CH2)s−CH3(式中K、MおよびPが独立してCH=CHおよびC≡Cから選択され、かつp、q、rおよびsが、0〜23の整数であり、ただし10≦p+q+r+s≦23);ならびに
(v)−(CH2)p−C=C=C−(CH2)q−CH3(式中pおよびqが、0〜26の整数であり、ただし13≦p+q≦26)。 - 薬物としての使用のための請求項2に記載の化合物であって:
R1が、−(CH2)p−K−(CH2)q−M−(CH2)r−CH3であり、ここでKおよびMがC≡Cであり、かつqは0である、化合物。 - 薬物としての使用のための請求項1〜3のいずれか1項に記載の化合物であって、式中M1、M2およびM3が独立して、Manα、Manα(1−>2)Manα、Manα(1−>3)Manα、Manα(1−>4)ManαおよびManα(1−>6)Manαからなる群より選択される、化合物。
- 薬物としての使用のための請求項1〜4のいずれか1項に記載の化合物であって、ここでQ1、Q2およびQ3が独立して式(II):
−W−(O−CH2−CH2)a−(X’−(O−CH2−CH2)d)b−(II)
のラジカルの群から選択され、式中:
−Wが、−NH−(CH2)f−、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−から選され、ここでfは1〜5の整数であり、
−aが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−bが、0または1であり、
−dが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、かつ
−X’が、−NH−C(O)−(CH2)e−または−O−C(O)−(CH2)e−であり、式中eは、1〜4の整数である、化合物。 - 薬物としての使用のための請求項5に記載の化合物であって、式中:
−M2−Q2およびM3−Q3が存在せず、かつ
−リンカー(LINKER)が、−O−C(O)−、−C(O)O−、−NH−C(O)−または−C(O)−NH−である、化合物。 - 薬物としての使用のための請求項8または9のいずれかに記載の化合物であって、該化合物が、以下:
−式(IIIa)の化合物であって、式中、R2がHであり、R1が−(CH2)16CH3であり、aが3であり、かつbが4である、化合物;
−式(IIIa)の化合物であって、式中、R2がHであり、R1が−(CH2)23CH3であり、aが3であり、かつbが4である化合物;
−式(IIIa)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がHであり、aが3であり、かつbが4である化合物;
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)23CH3であり、R2がHであり、かつaが3である化合物;
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)23CH3であり、R2がα−マンノシルであり、かつaが3である化合物;
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がHであり、かつaが3である化合物;および
−式(Va)の化合物であって、式中、R1が−(CH2)8−C≡C−C≡C−(CH2)11−CH3であり、R2がα−マンノシルであり、かつaが3である化合物、
からなる群より選択される、化合物。 - 感染性疾患の治療または予防における使用のための請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物。
- Tuberculosis mycobacterium、Helicobacter pylori、Candida albicans、Leishmania種、エボラウイルス、マールブルグウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、C型肝炎ウイルス、デングウイルス、西ナイルウイルス、アウラウイルス、単純ヘルペス、重症急性呼吸器症候群(SARS)ウイルス、麻疹、トリH5N1インフルエンザ、およびサイトメガロウイルスからなる群より選択される病原体によって生じる感染性疾患の治療または予防における使用のための請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物。
- 薬学的組成物であって(i)請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物を活性成分として、(ii)少なくとも1つの薬学的に許容される賦形剤および(iii)任意の治療剤、を含んでいる薬学的組成物。
- 粘膜投与のための請求項13に記載の薬学的組成物。
- 前記任意の治療剤が抗HIV剤である、請求項13または14に記載の薬学的組成物。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
- 請求項16に記載の化合物であって、以下の式(III)を有し:
式中:
−リンカー(LINKER)が、1〜20個の炭素原子の骨格を有しており、かつN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子を含んでいる二官能性リンカーであり、
−R1が、C17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキルであり、任意的に1つ以上のC1−C3アルキルラジカルで置換されており、
−M1が、マンノシルまたはジマンノシルであり、
−Wが、−NH−(CH2)f−、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−から選択され、ここでfは1〜5の整数、好ましくは2であり、
−X’が、−NH−C(O)−(CH2)e−または−O−C(O)−(CH2)e−であり、ここでeは1〜4の整数であり、
−aが、2〜10、好ましくは2〜5の整数であり、
−bが1であり、かつ
−dが2〜10、好ましくは2〜5の整数である、化合物、
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。 - 請求項16に記載の化合物であって、以下の式(V)を有し
式中:
−リンカー(LINKER)が、1〜20個の炭素原子の骨格を有しており、かつN、SおよびOから独立して選択される少なくとも2つのヘテロ原子を含んでいる四官能性リンカーであり、
−R1がC17−C30の飽和または不飽和の直鎖のアルキル鎖であって、任意的に、1つ以上のC1−C3アルキルラジカルで置換されており、
−M1が、マンノシルまたはジマンノシルであり、
−M2およびM3が独立して、最大で800g/mol−1の分子量を有する、マンノシル、ジマンノシルおよび治療剤部分、好ましくは抗感染剤部分からなる群より選択され、
−W1、W2およびW3が独立して、−NH−(CH2)f−、−O−(CH2)f−および−S−(CH2)f−から選択され、ここでfが1〜5の整数、好ましくは2であり、
−X’1、X’2およびX’3が独立して、−NH−C(O)−(CH2)e−および−O−C(O)−(CH2)e−から選択され、ここでeは1〜4の整数であり、
−a1、a2、a3、d1、d2およびd3が、2〜10、好ましくは、2〜5の範囲の整数から独立して選択される整数であり、
−b1、b2およびb3が独立して、0〜1から選択される、化合物、
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。 - 請求項1〜10のいずれか1項に規定されるような化合物で、または請求項13〜15のいずれか1項に規定されるような薬学的組成物でコーティングされるコンドーム。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP11306493.5A EP2594575A1 (en) | 2011-11-15 | 2011-11-15 | Mannosylated compounds useful for the prevention and the treatment of infectious diseases |
EP11306493.5 | 2011-11-15 | ||
PCT/EP2012/072592 WO2013072355A1 (en) | 2011-11-15 | 2012-11-14 | Mannosylated compounds useful for the prevention and the treatment of infectious diseases |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015501796A true JP2015501796A (ja) | 2015-01-19 |
JP6295202B2 JP6295202B2 (ja) | 2018-03-14 |
Family
ID=47191741
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014541639A Expired - Fee Related JP6295202B2 (ja) | 2011-11-15 | 2012-11-14 | 感染性疾患の予防および治療のために有用なマンノシル化された化合物 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9522928B2 (ja) |
EP (2) | EP2594575A1 (ja) |
JP (1) | JP6295202B2 (ja) |
CN (1) | CN104039804A (ja) |
ES (1) | ES2657752T3 (ja) |
WO (1) | WO2013072355A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10046068B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-08-14 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Saccharide conjugates |
AU2014233404A1 (en) | 2013-03-15 | 2015-10-08 | Chandraball BHATTACHARYA | Sugar-linker-drug conjugates |
US10808246B2 (en) * | 2013-07-11 | 2020-10-20 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide-ligand conjugates and process for their preparation |
CN106467612B (zh) * | 2015-08-21 | 2019-08-20 | 北京大学 | 糖簇化合物及其药学上可接受的盐、它们的用途和一种药物组合物 |
FR3041345B1 (fr) * | 2015-09-18 | 2019-06-14 | Nanomedsyn | Composes polysaccharides multi-fonctionnalises et leur utilisation pour cibler le recepteur du mannose 6-phosphate cation-independant |
EP3981777A1 (en) * | 2020-10-08 | 2022-04-13 | Universität Basel | Antiviral compounds and polymers |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010054406A1 (en) * | 2008-11-10 | 2010-05-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Novel lipids and compositions for the delivery of therapeutics |
JP2011505426A (ja) * | 2007-12-04 | 2011-02-24 | アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド | 標的化脂質 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1738637A (zh) * | 2002-11-05 | 2006-02-22 | 巴斯德研究院 | Dc-sign阻断剂及其在预防或治疗病毒感染中的用途 |
WO2007033329A1 (en) * | 2005-09-14 | 2007-03-22 | University Of Maryland Biotechnology Institute Off. Of Research Admin./ Tech.Dev. | Synthetic polyvalent carbohydrates as components of microbicides |
-
2011
- 2011-11-15 EP EP11306493.5A patent/EP2594575A1/en not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-11-14 EP EP12787706.6A patent/EP2780352B1/en not_active Not-in-force
- 2012-11-14 US US14/358,157 patent/US9522928B2/en active Active
- 2012-11-14 JP JP2014541639A patent/JP6295202B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-11-14 ES ES12787706.6T patent/ES2657752T3/es active Active
- 2012-11-14 WO PCT/EP2012/072592 patent/WO2013072355A1/en active Application Filing
- 2012-11-14 CN CN201280062498.3A patent/CN104039804A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011505426A (ja) * | 2007-12-04 | 2011-02-24 | アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド | 標的化脂質 |
WO2010054406A1 (en) * | 2008-11-10 | 2010-05-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Novel lipids and compositions for the delivery of therapeutics |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
CHEM. REV., vol. 60, JPN6016037467, 1960, pages 541 - 553, ISSN: 0003574441 * |
COLLOIDS AND SURFACES, vol. 35, JPN6016037457, 2004, pages 41 - 44, ISSN: 0003408613 * |
J. COLL. INTER. SCI., vol. 207, JPN6016037459, 1998, pages 303 - 308, ISSN: 0003574439 * |
KHIAR, N. ET AL., CHEMICAL COMMUNICATIONS, JPN7018000093, 2009, pages 4121 - 4123, ISSN: 0003721286 * |
LANGMUIR, vol. 15, JPN6016037455, 1999, pages 5623 - 5629, ISSN: 0003574442 * |
LI, Y. ET AL.: "Molecular recognition of functionalized polydiacetylene and its biosensor", PROCEEDINGS OF SPIE, vol. 4077, JPN7017001824, 2000, pages 242 - 245, ISSN: 0003574440 * |
ZHANG, Y. ET AL.: "Enhanced affinochromism of polydiacetylene monolayer in response to bacteria by incorporating CdS na", COLLOIDS AND SURFACES B: BIOINTERFACES, vol. 35, JPN6017020867, 2004, pages 41 - 44, ISSN: 0003574438 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104039804A (zh) | 2014-09-10 |
US20140349952A1 (en) | 2014-11-27 |
EP2780352B1 (en) | 2017-11-08 |
US9522928B2 (en) | 2016-12-20 |
EP2780352A1 (en) | 2014-09-24 |
JP6295202B2 (ja) | 2018-03-14 |
ES2657752T3 (es) | 2018-03-06 |
WO2013072355A1 (en) | 2013-05-23 |
EP2594575A1 (en) | 2013-05-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6295202B2 (ja) | 感染性疾患の予防および治療のために有用なマンノシル化された化合物 | |
EP3197907B1 (en) | Vaccines against streptococcus pneumoniae serotype 8 | |
EP2841107B1 (en) | Cytotoxic-drug delivering molecules targeting hiv (cdm-hs), cytotoxic activity against the human immunodeficiency virus and methods of use | |
US7365221B2 (en) | Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof | |
JP2014111609A (ja) | 新規硫酸化オリゴ糖誘導体 | |
CA3140411C (en) | Saponin conjugate and vaccine or pharmaceutical composition comprising the same | |
JP4099234B2 (ja) | 抗ウイルス活性を有する新規化合物 | |
KR102250099B1 (ko) | 스트렙토코커스 뉴모니에 1형에 대한 합성 백신 | |
US20090215710A1 (en) | Carbohydrate based toll-like receptor (tlr) antagonists | |
EP3274358B1 (en) | Vaccine against carbapenem-resistantklebsiella pneumoniae | |
JP2019504017A (ja) | ストレプトコッカス ニューモニアエ(Streptococcus pneumoniae)血清型2に対する合成ワクチン | |
AU2007222135A1 (en) | Immunomodulatory compounds and treatment of diseases related to an overproduction of inflammatory cytokines | |
CN101935335B (zh) | 一类克洛皂苷及其制法与抗高致病h5n1流感病毒的应用 | |
AU2019383549A1 (en) | Stable vaccine against Clostridium difficile | |
US4866036A (en) | Dipeptidyl 5-0,6-0-acyl-2-amino-2-deoxy-D-glucofuranose compositions and methods of use in aids-immunocompromised human hosts | |
WO2011013398A1 (ja) | Cd22分子に対する高親和性を有しb細胞の増殖を増強する化合物 | |
JP3800434B2 (ja) | 擬似糖脂質 | |
CA3231261A1 (en) | Acetylated sialic acid glycoclusters and their uses for treating infectious diseases | |
JP5283033B2 (ja) | シアリルα(2→6)ラクトース含有化合物及びその使用 | |
EP3000820A1 (en) | Synthetic vaccines against Streptococcus pneumoniae serotype 8 | |
Ambre | Synthesis of carbohydrate antigens of the human immunodeficiency virus-1 | |
WO2004037272A1 (ja) | デング熱ウィルス感染阻害剤 | |
AU2012202597A1 (en) | Immunomodulatory compounds and treatment of diseases related to an overproduction of inflammatory cytokines | |
KR20000010969A (ko) | 항바이러스 활성을 가진 신규화합물 | |
KR20070031888A (ko) | 3-0-(3',3'-다이메틸숙시닐)베툴린산의 약리학적염 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20150312 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20151113 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20161004 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20161207 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170221 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170613 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170901 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20171031 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171110 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180123 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180219 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6295202 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |