CN104039804A

CN104039804A - 可用于预防和治疗感染性疾病的甘露糖基化的化合物

Info

Publication number: CN104039804A
Application number: CN201280062498.3A
Authority: CN
Inventors: 拉奇德·贝蒂; 劳雷·德海瑟; 克里斯托弗·米勒; 埃弗利娜·舍费尔; 阿兰·瓦格纳
Original assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Universite de Strasbourg
Current assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Universite de Strasbourg
Priority date: 2011-11-15
Filing date: 2012-11-14
Publication date: 2014-09-10
Also published as: JP2015501796A; EP2594575A1; JP6295202B2; ES2657752T3; WO2013072355A1; EP2780352A1; US9522928B2; EP2780352B1; US20140349952A1

Abstract

本发明涉及由以下部分组成的新抗传染化合物：(i)极性头，其具有1-3个甘露糖、二甘露糖或三甘露糖部分，(ii)至少17个碳原子长度的单个脂质链，所述(i)通过适当接头与所述(ii)偶联。还提供了药物组合物及其治疗用途。

Description

可用于预防和治疗感染性疾病的甘露糖基化的化合物

技术领域

本发明涉及可用于预防或治疗感染性疾病(具体地为登革病毒和HIV感染)以及相关的疾病的新化合物。

背景技术

树突细胞(DC)是必需的抗原呈递细胞(APC)，其在针对病原体的特异性免疫应答的诱导中起重要作用。未成熟的DC(局部化在遍布全身的周围粘膜组织中)是监测病原体存在的哨兵。在检测到和内化病原体以后，DC从感染部位迁移至排液淋巴样器官。在该迁移过程中，DC经历深度成熟，所述深度成熟尤其导致来自病原体的抗原的加工和膜主要组织相容性复合物(MHC)对它们的呈递。一旦进入淋巴结中，DC就能选择罕见的循环的抗原特异性的淋巴细胞，并随后进行淋巴细胞繁殖和分化(关于综述，参见Banchereau等人,2000)。

显而易见，DC对病原体的识别是保护性免疫的诱导中的关键步骤之一。DC表达众多受体，包括Toll-样受体和C-型凝集素。C-型凝集素识别存在于病原体的细胞壁上的特定碳水化合物部分。通过C-型凝集素-碳水化合物相互作用实现的病原体的结合通常会导致病原体的内化。

在C-型凝集素中，可以观察到DC-SIGN(DC-特异性的抓住细胞间粘附分子3[ICAM-3]的非整联蛋白)，其在DC的表面上高度表达。DC-SIGN是具有短氨基端细胞质尾巴、颈区域和单个C-端糖识别结构域(CRD)的II型膜蛋白。细胞外的CRD是被α-螺旋秆稳定化的四聚体，其特异性地识别携带高甘露糖寡糖的糖基化的蛋白和配体。在这方面，证实了DC-SIGN会结合HIV-1外壳糖蛋白gp120(其展示几种高甘露糖N-聚糖结构)以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)ManLAM的甘露糖帽化的细胞壁组分(脂质阿拉伯甘露聚糖)。还观察到在不同端基异构连接中含有岩藻糖残基的Lewis-组抗原对DC-SIGN的高结合亲和力。最后，证实了DC-SIGN与存在于糖蛋白上的高甘露糖部分的相互作用是多价的和钙依赖性的(Feinberg,等人,2001；Mitchell,等人,2001)。(关于综述，参见Kooyk和Geijtenbeek,Nat Rev Immunol.,2003,3,697-709)。

DC-SIGN结合宽范围的病原体，包括病毒、细菌、真菌和寄生虫(Kooyk和Geijtenbeek,出处同上)。几项研究表明，一些病原体会破坏DC-SIGN功能以便逃避免疫监督、促进它们的散布和/或调节免疫应答。关于不同的病毒诸如埃博拉病毒(Alvarez等人、2002)、禽H5N1流感病毒(Wang等人.2008)、巨细胞病毒(CMV)、丙型肝炎病毒(Kooyk和Geijtenbeek,2004)和登革病毒(Tassaneetrithep,2003)观察到这样的机制，DC-SIGN涉入所述病毒的传播早期和在某些情况下的免疫调节。细菌诸如结核分枝杆菌(Geijtenbeek等人,2003)也利用DC-SIGN来阻断受感染的DC的成熟和诱导免疫抑制。

关于1型人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染，确立了DC是被感染的首要细胞(Gurney,等人,2005；Hu,等人,2000；Shen,等人,2010；Wilkinson和Cunningham,2006)。它们极大地促进早期阶段HIV散布和传播，这通过它们的捕获、运输病毒粒子和感染新靶细胞的能力来实现(Geijtenbeek,等人,2000；Piguet和Steinman,2007；Wu和KewalRamani,2006)。由DC介导的反式感染(trans-infection)可以通过不同的途径发生，但是主要的重要机制是由DC-SIGN介导。由于DC-SIGN对HIV-1外壳糖蛋白gp120的高结合亲和力，HIV-1病毒粒子被在DC上表达的DC-SIGN捕获。被捕获的HIV-1病毒粒子不会经历溶酶体降解且因而保持感染性。随后，在它们迁移进淋巴结中以后，DC诱导被捕获的HIV-1病毒粒子对靶CD4+细胞的反式感染(通过被称作感染性突触的细胞-细胞连接部)(Wu和KewalRamani,2006)。根据新近的资料，绝大部分横向传播的病毒粒子源于细胞质膜而不是细胞内囊泡(Cavrois,等人,2007)。

因为DC-SIGN可能在病毒感染的早期阶段中所起的重要作用，进行了几项研究来鉴别要用在人类治疗(尤其是用于预防或治疗病毒感染诸如HIV-1感染)中的合成的DC-SIGN配体。

Frison等人(2003)描述称，被1-4个甘露二糖部分取代的寡赖氨酸所构成的糖簇不能结合DC-SIGN且不会被表达DC-SIGN的HeLa细胞内化，这不同于Man-BSA(即携带25±3个甘露糖残基的牛血清白蛋白)和被Lewis寡糖取代的寡簇。

由于DC-SIGN与表现出高甘露糖结构的病原体糖蛋白的相互作用是多价的，提示甘露糖基寡糖在模仿存在于病原体糖蛋白中的天然甘露糖结构的适当支架上的多价呈递是结合DC-SIGN所必需的(Tabarani等人,2006,FEBS Lett.,2006,580,2402-2408)。因此，几项新近的研究已经报道了含有多价甘露糖的分子的合成。发现甘露糖超支化的树枝状聚合物会干扰重组DC-SIGN和gp120蛋白之间的结合(Tabarani,等人,2006；Wang,等人,2008)。金甘露糖-纳米颗粒(mannoglyco-nanoparticle)抑制由Raji-DC-SIGN细胞介导的HIV反式感染(Martinez-Avila,等人,2009)。但是，因为它们的毒性，不可预见到它们作为体内抗HIV剂的用途。最后，基于第二代和第三代用甘露糖官能化的Boltorn超支化树枝状聚合物的甘露糖基糖树枝状结构会抑制由THP-1/DC-SIGN细胞介导的HIV反式感染(Sattin,等人,2010)。但是，尽管具有良好的活性，这样的化合物显示出几个缺点：它们难以制备和昂贵，且可能在生物介质中表现出低溶解度。

仍然需要表现出对DC-SIGN的高亲和力的新化合物，其可以用作用于预防和治疗感染性疾病(诸如HIV感染)的抗感染剂。

发明内容

本发明涉及式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或酯，

其中

-R₁是C₁₇-C₃₀饱和的或不饱和的直链烷基，其任选地被一个或多个C₁-C₃烷基基团取代，

-M₂-Q₂和M₃-Q₃任选地存在，

-M₁选自：甘露糖基、二甘露糖基和三甘露糖基，

-M₂和M₃独立地选自：甘露糖基、二甘露糖基、三甘露糖基和具有至多800g/mol^-1的分子量的治疗剂部分、优选抗感染剂部分。

-Q₁、Q₂和Q₃独立地选自包含至少一个-(OR₈)_n-部分的基于寡醚的隔离物，其中R₈是直链或支链C₁-C₄烷基，且n是2-10的整数。

-接头选自双官能的、三官能的和四官能的接头，其具有1-20个碳原子的主链和至少2个独立地选自N、S和O的杂原子。

在本发明的某些实施方案中，R₁选自：

(i)-(CH₂)_pCH₃，其中p是16-29的整数；

(ii)-(CH₂)_p-M-(CH₂)_q-CH₃，其中M是CH＝CH或C≡C，且p和q是0-27的整数，条件是，14≤p+q≤27

(iii)-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-CH₃，其中K和M独立地选自CH＝CH和C≡C，且p、q和r是0-25的整数，条件是，12≤p+q+r≤25；

(iv)-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-P-(CH₂)_s-CH₃，其中K、M和P独立地选自CH＝CH和C≡C，且p、q、r和s是0-23的整数，条件是，10≤p+q+r+s≤23；和

(v)-(CH₂)_p-C＝C＝C-(CH₂)_q-CH₃，其中p和q是0-26的整数，条件是，13≤p+q≤26

在某些更具体的实施方案中，本发明涉及这样的式(I)的化合物，其中R₁是-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-CH₃，其中K和M是C≡C且q是0。

在一些其它的实施方案中，M₁、M₂和M₃独立地选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα。

本发明另外涉及式(I)的化合物，其中Q₁、Q₂和Q₃独立地选自式(II)的基团：

-W-(O-CH₂-CH₂)_a-(X’-(O-CH₂-CH₂)_d)_b-(II)，其中：

-W选自NH-(CH₂)_f、O-(CH₂)_f和S-(CH₂)_f，其中f是1-5的整数。

-a是2-10、优选2-5的整数，

-b是0或1

-d是2-10、优选2-5的整数，且

-X’是-NH-C(O)-(CH₂)_e-或-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数。

在某些实施方案中，M₂-Q₂和M₃-Q₃不存在，且接头是-OC(O)-、-C(O)O-、-NHC(O)-或-C(O)NH-。在这样的一个实施方案中，b优选地是1。

在一些其它的实施方案中，M₂Q₂和M₃Q₃存在，且与M₁-Q₁相同，且接头是

其中

-R₆是-NHC(O)-或-OC(O)-且

-R₃、R₄和R₅独立地选自-NHC(＝O)(CH₂)_nO-和-OC(＝O)(CH₂)_nO-，n是1-10的整数。

在某些实施方案中，本发明涉及下式(III)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物

其中：

-接头是双官能的接头，其具有1-20个碳原子的主链和至少2个独立地选自N、S和O的杂原子，

-M₁是甘露糖基或二甘露糖基，

-W选自-NH-(CH₂)_f-、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5、优选2的整数，

-X’是-NH-C(O)-(CH₂)_e-或-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数，

-a是2-10、优选2-5的整数，

-b＝1，且

-d是2-10、优选2-5的整数。

在一些其它的实施方案中，本发明涉及式(V)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物

其中：

-接头是四官能的接头，其具有1-20个碳原子的主链且包含至少2个独立地选自N、S和O的杂原子，

-M₁是甘露糖基或二甘露糖基，

-M₂和M₃独立地选自：甘露糖基、二甘露糖基和具有至多800g/mol^-1的分子量的治疗剂部分、优选抗感染剂部分，

-W₁、W₂和W₃独立地选自-NH-(CH₂)_f-、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5、优选2的整数，

-X’₁、X’₂和X’₃独立地选自上面在式(II)中描述的X’，即选自-NH-C(O)-(CH₂)_e-和-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数。

-a1、a2、a3、d1、d2和d3是整数，其独立地选自在2-10、优选2-5范围内的整数，且

-b1、b2和b3独立地选自0和1。

在一个更具体的实施方案中，本发明涉及选自式(IIIa)化合物的化合物

其中

-R₂是H或α-甘露糖基残基，

-R₁如关于式(I)化合物所定义，

-a是2-10、优选2-5的整数，且

-d是2-10、优选2-5的整数

在另一个具体实施方案,本发明涉及选自式(Va)化合物的化合物：

其中：

-R₂是H或α-甘露糖基残基，

-R₁如上文关于式(I)化合物所定义，且

-a是1-10、优选1-5的整数

更具体地，本发明的化合物可以选自：

-式(IIIa)的化合物，其中R₂是H，R₁是-(CH₂)₁₆CH₃，a是3且b是4；

-式(IIIa)的化合物，其中R₂是H，R₁是-(CH₂)₂₃CH₃，a是3且b是4；

-式(IIIa)的化合物，其中R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是H，a是3，且b是4；

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₂₃CH₃，R₂是H，且a是3；

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₂₃CH₃，R₂是α-甘露糖基，且a是3；

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是H，且a是3；和

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是α-甘露糖基，且a是3。

在另一个方面，本发明涉及用作药物、优选地用于预防或治疗感染性疾病的上面公开的任意化合物。所述感染性疾病可以由选自以下的病原体造成：细菌诸如结核分枝杆菌和幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)，真菌诸如白假丝酵母(Candida albicans)，寄生虫诸如利什曼原虫属(Leishmania)和病毒诸如埃博拉病毒、马尔堡病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)、登革病毒、西尼罗病毒、奥拉病毒、单纯疱疹病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒、麻疹病毒、禽H5N1流感病毒和巨细胞病毒。

在某些实施方案中，所述病原体选自免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)、登革病毒和埃博拉病毒。

本发明的另一个主题是药物组合物，其包含(i)本发明的化合物作为活性成分、(ii)至少一种药学上可接受的赋形剂和(iii)任选的治疗剂。所述药物组合物可以意图用于粘膜递送。所述任选的治疗剂可以是抗-HIV药物。

本发明也涉及用如上定义的化合物或药物组合物涂布的避孕套。

附图说明

图1:TriMan_C24与gp120竞争对DC的结合。

图1A显示了通过流式细胞计量术分析的、DC-SIGN在单核细胞和DC上的细胞表面表达。黑色和灰色直方图分别代表抗原染色和同种型对照。指示了平均荧光强度(MFI)的值。Y-坐标：计数，X-坐标：荧光强度。

图1B解释了通过流式细胞计量术测得的、在37℃温育45min以后gp120-FITC与单核细胞和DC的相互作用(黑色直方图)。灰色直方图代表在有IgG1-FITC同种型对照存在下的未处理的细胞。Y-坐标：计数，X-坐标：荧光强度。

图1C显示了通过流式细胞计量术测得的、gp120-FITC与DC上的甘露聚糖(中图)和TriMan_C24(右图)的结合竞争。左图显示了对照实验，其中没有将DC暴露于TriMan_C24或甘露聚糖。将DC暴露于TriMan_C24(100μM)或甘露聚糖(100μg/ml)30min或保持不处理，随后与gp120-FITC一起在37℃温育45min。在中图和右图中，空直方图对应于在没有预处理(即用甘露聚糖或用TriMan_C24的预处理)存在下与gp120-FITC结合的细胞，实心直方图显示了在有预处理存在下与gp120-FITC结合的细胞。结果得自一个重复3次的代表性实验。指示了平均荧光强度(MFI)的值。Y-坐标：计数，X-坐标：荧光强度。

图2：由DC介导的HIV-1反式感染的抑制。

将DC用指定的化合物在37℃预处理30min，然后用HIV-1(R5或X4，如指示的)感染。充分洗涤以后，将DC与MAGI-CCR5细胞一起共培养2天。通过光学显微术计数蓝色细胞，定量病毒的反式感染。相对于用单独培养基得到的100％感染，将值标准化。值是至少得自3个独立实验的数据的平均值±SE。

图2A显示了在没有或有目标化合物存在下，与预先暴露于HIV-1的DC一起温育的MAGI-CCR5细胞的反式感染的相对百分比。从左至右：培养基(没有添加化合物)：阴性对照，100μg/ml的甘露聚糖，250μg/ml的甘露聚糖(阳性对照)，10μM(白色条)、50μM(灰色条)、250μM(黑色条)的ManC1(比较)，10μM(白色条)、50μM(灰色条)、250μM(黑色条)的Man_C11(比较)，10μM(白色条)、50μM(灰色条)、250μM(黑色条)的Man_C17(本发明)和10μM(白色条)、50μM(灰色条)、250μM(黑色条)的Man_C24(本发明)。Y-坐标：反式感染相对于阴性对照的相对百分比。

图2B显示了当将DC与Man_C24(空正方形)或与TriMan_C24(实心正方形)一起预温育时，关于HIV-1R5对MAGI-CCR5的反式感染的相对百分比的剂量-响应曲线。Y-坐标：反式感染的相对百分比，X-坐标：化合物的浓度(μM)。

图2C显示了当将DC与TriMan_C24(实心正方形)或与TriDiMan_C24(实心圆形)一起预温育时，关于HIV-1R5对MAGI-CCR5的反式感染的相对百分比的剂量-响应曲线。Y-坐标：反式感染的相对百分比，X-坐标：化合物的浓度(μM)。

图2D显示了当将DC与TriMan_C24一起预温育时，关于HIV-1X4对MAGI-CCR5的反式感染的相对百分比的剂量-响应曲线。Y-坐标：反式感染的相对百分比，X-坐标：化合物的浓度(μM)。

图2E显示了当将DC与TriMan_insatC24(实心圆形)或与Man_insatC24(空心圆形)一起预温育时，关于HIV-1R5对MAGI-CCR5的反式感染的相对百分比的剂量-响应曲线。Y-坐标：反式感染的相对百分比，X-坐标：化合物的浓度(μM)。

图3：TriMan_insatC24对DC的登革病毒顺式感染的抑制。

将人DC用不同浓度的化合物或单独的培养基在37℃预处理30min。然后将它们在37℃暴露于登革病毒2(DV2)2小时。洗涤细胞以除去多余的病毒粒子和化合物，并在没有(条件1)或有(条件2)TriMan_insatC24存在下进一步培养。48小时以后，对细胞进行病毒抗原的细胞内检测。

图3A显示了在没有或有TriMan_insatC24存在下在条件1下温育的感染的DC的相对百分比。从左至右:阴性对照(没有添加化合物)(斜线条)，与10μM TriMan_insatC24(白色条)、50μM TriMan_insatC24(灰色条)和100μM TriMan_insatC24(黑色条)一起温育。Y-坐标：感染的DC相对于阴性对照的相对百分比。

图3B显示了在没有或有TriMan_insatC24存在下在条件2下温育的感染的DC的相对百分比。从左至右:阴性对照(没有添加化合物)(斜线条)，与10μM TriMan_insatC24(白色条)、50μM TriMan_insatC24(灰色条)和100μM TriMan_insatC24(黑色条)一起温育。Y-坐标：感染的DC相对于阴性对照的相对百分比。

图4：合成路线图。

图4A：Man_C1、Man_C11、Man_C17和Man_C24的合成。条件：(i)TMSOTf，DCM，0℃至RT，过夜，47％；(ii)PPh₃，THF，H₂O，RT，过夜，81％；(iii)CH₃COCl，THF，0℃，过夜，25％；(iv)NaOCH₃，MeOH，RT，定量收率(v)DCC，HOBT，THF，回流，过夜，9，(14％)；(vi)PPh₃，THF，H₂O，RT，过夜，(49％)；(vii)DCC，HOBT，THF，回流，过夜；月桂酸17(98％)；硬脂酸18(78％)，二十五酸19(88％)；(viii)NaOCH₃，MeOH，RT，过夜，定量收率。

图4B：三价甘露糖苷TriMan_C24的合成。条件：(i)二十五酸19，HOBt，DCC，THF，回流，过夜，(77％)；(ii)NaOH4N，THF/EtOH，RT，过夜，(94％)；(iii)HOBt，HBTU，THF，DIPEA，回流，过夜，(63％)；(iv)NaOCH₃，MeOH，RT，过夜，定量收率。

图4C：三价二甘露糖苷TriDiMan_C24的合成。条件：(i)8，TMSOTf，NIS，MS4A，DCM，RT，过夜，(76％)；(ii)K₂CO₃(催化)，MeOH，RT，过夜，96％(iii)29，TMSOTf，NIS，MS4A，DCM/Et2O，RT，过夜，(58％)；(iv)PPh₃，THF，H₂O，RT，过夜，(61％)；(v)26，HOBt，HBTU，DIPEA，THF，回流，过夜，(27％)；(vi)K₂CO₃(催化)，MeOH，RT，过夜，定量收率；(vii)H₂，Pd(OH)₂/C，MeOH，RT，过夜，(97％)。

图4D：Man_insatC24的合成。条件：60％；(i)Ac₂O，NEt₃，AcOEt，DMAP(催化)，TA，2h，93％；(ii)BnNH₂，THF，TA，14h，66％；(iii)Cl₃CCN，DBU，DCM，TA，14h，69％；(iv)TMSOTf，DCM，-50℃至TA，18h，47％；(v)PPh₃，THF，TA，16h，81％；(vi)HOBt，DCC，THF，回流，16h，14％；(vii)PPh₃，THF，TA，16h，49％；(viii)HOBt，DCC，THF，回流，18h，60％；(ix)NaOCH₃，MeOH，TA，14h，91％。

图4E：TriMan_insatC24的合成。条件：(i)HOBt，DCC，THF/MeCN，回流，16h，57％；(ii)NaOH4N，THF/EtOH，TA，14h，94％；(iii)HOBt，HBTU，THF，DIPEA，回流，16h，65％；(iv)NaOCH₃，MeOH，TA，18h，定量收率。

图4F：TriDiMan_insatC24的合成。条件：(i)Boc₂O，THF，TA，14h，83％；(ii)H₂，Pd(OH)₂/C，MeOH，TA，18h；(iii)Ac₂O，NEt₃，DMAP，TA，14h；(iv)TFA，DCM，0℃puis TA，14h；(v)HOBt，HBTU，THF，回流，16h，15％；(vi)K₂CO₃(催化)，MeOH，TA，16h，定量收率。

图5：三甘露糖苷糖脂对树突细胞(DC)中的HIV-1R5顺式感染的影响。

值是得自一式两份地进行的2个独立实验(2种不同的人单核细胞供体)的数据的平均值±SE。从下至上：100μM的TriMan_C24ins，100μM的TriMan_C24，10μM的TriMan_C24ins，10μM的TriMan_C24，抗-DC-SIGN，对照。Y-坐标：在上清液中检测出的p24Gag水平(ng/ml)。X-坐标：感染后的天数。

具体实施方式

本发明提供了表现出对DC-SIGN的高亲和力的新两亲化合物，其可以用作用于预防和治疗感染性疾病(包括HIV感染)的抗感染剂。所述化合物包含：(i)极性头，其具有1-3个甘露糖基或二甘露糖基部分，(ii)至少17个碳的单个脂质链，(iii)适当接头，所述(i)通过所述(iii)与所述(ii)偶联。

令人惊奇地，申请人证实，为了得到对DC-SIGN具有高结合亲和力的化合物，不需要这样的支架：其提供多价甘露糖呈现从而模仿在糖蛋白中存在的高甘露糖结构。

在这方面，申请人证实，通过将甘露糖部分与至少17个碳的脂质链偶联，可以显著增加所述甘露糖部分对DC-SIGN的细胞外结构域的亲和力。如在下文实验部分中举例说明的，Man_C1和Man_C11(它们由分别与C₁-链和C₁₁-链连接的单个α-D-甘露糖部分组成)不能结合DC-SIGN的糖识别结构域(CRD)(参见下面实验部分的表1)。相反，证实了ManC₁₇和ManC₂₄(它们由分别与C₁₇-链和C₂₄-链连接的单个α-D-甘露糖部分组成)对DC-SIGN CRD具有分别为约10²μM和10^-1μM的解离常数(Kd)。

还观察到化合物TriMan_C24和TriDiman_C24对DC-SIGN的亚微摩尔Kd，所述化合物TriMan_C24和TriDiman_C24对应于这样的化合物：其具有(i)分别包含3个甘露糖部分或3个二甘露糖部分的支链极性头，和(ii)C₂₄脂质链。还证实，Triman_C24化合物会竞争可溶性的gp120糖蛋白与树突细胞上表达的DC-SIGN的结合。

这样的结果强调了以下两方面的关联：(i)所述化合物的脂质链长度，和(ii)它们的结合DC-SIGN的CRD的能力。

令人瞩目的是，本发明的化合物在体外对DC-SIGN的高亲和力与它们在体外的抗病毒活性相关联。

在这方面，申请人证实，Man_C17和Man_C24以剂量依赖性的方式抑制暴露于HIV-1病毒粒子的人树突细胞对MAGI-CCR5细胞的反式感染(在有所述化合物存在下)。关于Triman_C24、Triman_insatC24和TriDiman_C24得到了类似的结果。对于这5种化合物，IC₅₀范围为10²μM至10^-2μM。相反，Man_C1和Man_C11对体外HIV反式感染产生非常低的抑制(参见图2)。

申请人还证实，TriMan_insatC24和TriMan_C24会抑制登革病毒和HIV-1病毒粒子对DC的顺式生产性感染。

申请人进一步证实，本发明的化合物是可溶于水，且表现出低(和甚至无)细胞毒性。

不受任何理论约束，申请人认为，本发明的化合物的生物活性(即它们的结合DC-SIGN的CRD和抑制HIV-1反式感染的能力)主要源自(i)它们的脂质链和(ii)它们的甘露糖部分之间的合作。

令人瞩目的是，本发明的所有化合物在低于它们的临界胶束浓度(CMC)(其在10²μM的范围内)的浓度表现出生物活性。申请人坚信，本发明的化合物作为单个分子与DC-SIGN直接地相互作用，不必自装配成胶束从而提供多价甘露糖呈现。

换而言之，申请人坚信，本发明的化合物不需要自装配成胶束即可发挥它们的生物活性。

I.本发明的化合物

本发明涉及由以下部分组成的化合物：

(i)具有1-3个甘露糖、二甘露糖或三甘露糖部分的极性头，所述极性头通过适当接头与(ii)偶联；

(ii)至少17个碳原子长度的单个脂质链。

在一个更具体的方面，本发明涉及式(I)的化合物或药学上可接受的盐、溶剂合物或其衍生物，

其中

-R₁是C₁₇-C₃₀饱和的或不饱和的直链烷基，其任选地被1个或多个C₁-C₃烷基基团取代，

-M₂-Q₂和M₃-Q₃任选地存在，

-M₁选自：甘露糖基、二甘露糖基和三甘露糖基，

“M₂-Q₂和M₃-Q₃任选地存在”表示，M₂-Q₂和M₃-Q₃是任选的基团，这意味着式(I)的化合物具有下式(Ia)、(Ib)和(Ic)之一：

接头表示，能够使R₁与M₁Q₁并任选地与M₂Q₂和/或M₃Q₃连接的任意适当接头。

接头表示式(Ia)中的双官能接头、式(IIa)中的三官能接头和式(IIa)中的四官能接头。

优选地，接头既不是有机磷酸酯也不是-(CH₂-CH₂-O)_m-，其中m是1-10的整数。

作为双官能试剂，接头可以选自：氨基酸残基、肽；-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-、-(C＝O)-O-(C＝O)-和X₁-(CH₂)_n-Y₁，其中(i)n是1-10的整数且(ii)X₁和Y₁独立地选自-NH-、-S-、-C(＝O)、-O-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-和-(C＝O)-O-(C＝O)-。

本文中使用的“氨基酸残基”是指20种天然存在的氨基酸以及非天然类似物中的任一种。氨基酸残基包括甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸残基。在某些实施方案中，所述氨基酸残基选自丙氨酸、缬氨酸和甘氨酸。

本文中使用的肽包含2-10个氨基酸残基，更优选2-5个氨基酸残基。

作为三官能接头，接头可以选自这样的化合物：其具有含有1-20个碳原子的带分支的主链和至少3个选自-NH-、-S-、-C(＝O)-、-O-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-和(C＝O)-O-(C＝O)的官能团。

例如，接头可以选自：氨基酸残基诸如精氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、丝氨酸和苏氨酸，以及具有2-10个氨基酸残基、优选2-5个氨基酸残基的肽。

作为四官能接头，接头可以选自这样的化合物：其具有含有1-20个碳原子的带分支的主链和至少4个官能团，所述官能团选自NH-、-S-、-C(＝O)-、-O-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-、-C(＝NH)-NH-、-NH-C(＝O)-NH-和-C(＝O)-O-C(＝O)-，优选地选自-NH-、-NHC(O)-、-C(O)NH-、-OC(O)-、-C(O)O-和-O-。

例如，接头可以选自具有2-10个氨基酸、优选2-5个氨基酸残基的肽。例如，接头可以选自二肽基团，所述二肽基团包含选自赖氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、丝氨酸和苏氨酸的氨基酸。接头也可以选自氨丁三醇、甘油、季戊四醇基团及其衍生物。

本文中使用的术语“溶剂合物”或“药学上可接受的溶剂合物”表示，一个或多个根据本发明的化合物分子与一个或多个溶剂分子的结合所形成的溶剂合物。术语溶剂合物包括水合物诸如半水合物、一水合物、二水合物等。

本文中使用的术语式(I)化合物的“衍生物”或“药物衍生物”表示，通过微小化学修饰(诸如酯化和烷基化，例如甘露糖基的一个或几个羟基的甲基化)从式I的化合物衍生出且表现出与所述化合物类似的体内生物活性的任意化合物。本文中使用的术语“衍生物”包括式I化合物的酯、烷氧基衍生物和前药。

在一个优选的实施方案中，本发明的化合物选自式(I)化合物和它们的药学上可接受的溶剂合物、酯和盐。

本文中使用的“C₁₇-C₃₀烷基”是指具有17-30个碳的线性烃链。“C₁₇-C₃₀烷基”包括C₁₇、C₁₈、C₁₉、C₂₀、C₂₁、C₂₂、C₂₃、C₂₄、C₂₅、C₂₆、C₂₇、C₂₈、C₂₉和C₃₀烷基。

“C₁₇-C₃₀饱和烷基”是指具有17-30个碳的线性烃链，所述烃链不包含任何不饱和(即任意双键或三键)。

“C₁₇-C₃₀不饱和烷基”是指具有17-30个碳的线性烃链，其包含至少一个不饱和(即至少一个双键和/或至少一个三键)。“至少一个不饱和”包括1、2、3、4、5、6、7、8、9和10个不饱和，优选1、2、3和4个不饱和。

在包含几个不饱和的“C₁₇-C₃₀不饱和烷基”的情况下，每个不饱和可以是三键或双键，也就是说，“C₁₇-C₃₀不饱和烷基”包括：(i)具有至少一个双键且没有三键的C₁₇-C₃₀烷基，(ii)具有至少一个双键且没有双键的C₁₇-C₃₀烷基，和(iii)具有至少一个双键和至少一个三键的C₁₇-C₃₀烷基。存在于“C₁₇-C₃₀烷基”中的双键可以不同地具有反式构象(Z)或顺式构象(E)。

上文提及的“C₁₇-C₃₀饱和的或不饱和的烷基”可以被一个或多个“C₁-C₃烷基基团”取代。“C₁-C₃烷基基团”是指甲基、乙基、丙基或异丙基。“一个或多个C₁-C₃烷基基团”包括1、2、3、4、5、6、7、8、9和10个C₁-C₃烷基基团。优选地，R₁包含至多3个C₁-C₃烷基取代基，优选地选自乙基和甲基。

本文中使用的“甘露糖基”、“吡喃型甘露糖基”或“Man”是指基团α-D-甘露糖基。因此，二甘露糖基残基表示α-D-甘露糖基的二聚体。二甘露糖基包括Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα。以相同的方式，三甘露糖基表示α-D-甘露糖基的三聚体，且包括、但不限于，Manα(1->2)Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα(1->3)Manα和Manα(1->6)Manα(1->6)Manα。

优选地，二甘露糖基是Manα(1->2)Man基团，且三甘露糖基是Manα(1->2)Manα(1->2)Manα。

更精确地，本文中使用的“甘露糖基”表示下述基团：

例如，Manα(1->2)Manα基团表示下式：

本文中使用的“治疗剂部分”是指通过微小化学修饰从治疗剂分子衍生出的基团，所述微小化学修饰能够引入适当基团用于共价地结合所述抗感染剂和式(I)化合物的邻近隔离物Q₂或Q₃。

本文中使用的“治疗剂”是指，可以用于治疗或预防疾病、用于治愈或减少与疾病有关的征状以及改善患者的一般状况的任意分子。实际上，“治疗剂”表示任意种类的治疗分子，且因而包括、但不限于维生素、抗感染剂、抗肿瘤剂、镇痛剂、抗炎剂、抗糖尿病剂等。

具有至多800g.mol^-1的分子量的分子包括，具有至多200g.mol^-1、至多300g.mol^-1、至多400g.mol^-1、至多500g.mol^-1、至多600g.mol^-1、至多700g.mol^-1的分子量的分子。

本文中使用的“抗感染剂”是指，可以用于治疗或预防由病原体(诸如病毒、真菌、细菌和寄生虫)造成的感染的任意化合物。抗感染剂包括、但不限于抗生素和抗病毒剂。

抗生素包括、但不限于异烟肼、甲硝唑、克拉霉素、荧光喹诺酮类(诸如环丙沙星)、利福平和β-内酰胺抗生素类(诸如阿莫西林)和碳青霉烯类(包括亚胺培南)。

抗病毒剂包括、但不限于抗丙型肝炎剂(诸如波普瑞韦和利巴韦林)和抗-HIV药物。抗-HIV药物包括：(i)逆转录酶抑制剂诸如替诺福韦、齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、奈韦拉平、依法韦仑、地拉韦啶，(ii)蛋白酶抑制剂诸如沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、氨普那韦、洛匹那韦、阿扎那韦、呋山那韦、达芦那韦和布瑞那韦，(iii)整合酶抑制剂诸如拉替拉韦、艾维雷韦，(iv)CCR5趋化因子的拮抗剂诸如马拉韦罗、维立韦罗、阿拉韦罗，(vi)成熟抑制剂诸如贝韦立马。关于抗-HIV药物的综述，参见例如Flexner,Nat.Rev.Drug Discov,2007,6,959-966；和de Clercq,E；Nat.Rev.Drug Discov.2007,6,1001-1018。

如上所述，Q₁、Q₂和Q₃独立地选自基于寡醚的隔离物。所述隔离物包含至少一个式-(OR₈)_n-的寡醚部分，其中R₈是直链或支链C₁-C₄烷基，且n是2-10的整数。“至少一个寡醚”是指，所述隔离物可以包含一个或几个基团(OR₈)_n。在一个优选的实施方案中，Q₁、Q₂和Q₃独立地选自包含1-5个(OR₈)_n基团、优选1-5个-(O-CH₂-CH₂)_n-基团的基于寡醚的隔离物。

不受任何理论约束，申请人认为，基于寡醚的隔离物的存在能够增加式(I)化合物的亲水特性，同时减少M₁、M₂和/或M₃部分上的空间效应。

当M₂Q₂和M₃Q₃不存在时，Q₁含有1-5个-(O-CH₂-CH₂)_n-、优选2-3个-(O-CH₂-CH₂)_n-，其中n范围为2-10，优选2-5。

当M₂Q₂和/或M₃Q₃存在时，Q₁、Q₂和Q₃独立地选自基于寡醚的隔离物，其含有1-5个-(O-CH₂-CH₂)_n-、优选1-2个-(O-CH₂-CH₂)_n-，其中n范围为2-10，优选2-5。

在第一个实施方案中，本发明涉及这样的式(I)的化合物，其中R₁选自未取代的、饱和的且直链的C₁₇-₃₀烷基和未取代的、不饱和的且直链的C₁₇-C₃₀烷基。换而言之，R₁选自不包含取代基、具体地不包含C₁-C₃烷基取代基的C₁₇-C₃₀烷基。在某些实施方案中，本发明的化合物选自式(I)化合物，其中R₁是具有0、1或2个不饱和的直链的且未被取代的C₁₇-C₃₀烷基。

在一个更具体的实施方案中，本发明的化合物选自这样的式(I)化合物，其中R₁选自：

(i)-(CH₂)_pCH₃，其中p是16-29的整数；

(v)-(CH₂)_p-C＝C＝C-(CH₂)_q-CH₃，其中p和q是0-26的整数，条件是，13≤p+q≤26。

如在实施例中举例说明的，不包含不饱和的、具有R₁基团的式(I)化合物可特别有效地抑制体外HIV-1反式感染。申请人还证实，包含2个邻近三键(-C≡C-C≡C-)的、具有R₁基团的式(I)化合物能够以非常低的IC₅₀(半数最大抑制浓度)抑制体外HIV反式感染。对于其中R₁包含2个邻近双键(-C＝C＝C-)的式(I)化合物，预见到相同的结果。

因此，在某些具体实施方案中，本发明的化合物选自这样的式(I)化合物，其中R₁选自：

a.-(CH₂)_pCH₃，其中p是16-29的整数；

b.-(CH₂)_p-C≡C-C≡C-(CH₂)_r-CH₃，其中p和r是0-25的整数，条件是，12≤p+r≤25；且

c.-(CH₂)_p-C＝C＝C-(CH₂)_q-CH₃，其中p和q是0-26的整数，条件是，13≤p+q≤26。

在一些其它的实施方案中，R₁是(CH₂)_p-C≡C-C≡C-(CH₂)_r-CH₃，其中p和r是0-25的整数，条件是，12≤p+r≤25。这样的R₁与上面在项目(iii)中描述的基团相关联，其中q等于0。

在一些其它的实施方案中，R₁选自饱和的或不饱和的直链C₂₀-C₃₀烷基。在这样的一个实施方案中，R1可以选自：

(i)-(CH₂)_pCH₃，其中p是19-29的整数；

(ii)-(CH₂)_p-M-(CH₂)_q-CH₃，其中M是CH＝CH或C≡C，且p和q是0-27的整数，条件是，17≤p+q≤27

(iii)-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-CH₃，其中K和M独立地选自CH＝CH和C≡C，且p、q和r是0-25的整数，条件是，15≤p+q+r≤25；

(iv)-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-P-(CH₂)_s-CH₃，其中K、M和P独立地选自CH＝CH和C≡C，且p、q、r和s是0-23的整数，条件是，13≤p+q+r+s≤23；和

(v)-(CH₂)_p-C＝C＝C-(CH₂)_q-CH₃，其中p和q是0-26的整数，条件是，16≤p+q≤26。

在一些其它的实施方案中，R₁选自饱和的或不饱和的直链C₁₇-C₂₆烷基。在这样的一个实施方案中，R₁可以选自：

(i)-(CH₂)_pCH₃，其中p是16-25的整数；

(ii)-(CH₂)_p-M-(CH₂)_q-CH₃，其中M是CH＝CH或C≡C，且p和q是0-23的整数，条件是，14≤p+q≤23

(iii)-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-CH₃，其中K和M独立地选自CH＝CH和C≡C，且p、q和r是0-21的整数，条件是，12≤p+q+r≤21；

(iv)-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-P-(CH₂)_s-CH₃，其中K、M和P独立地选自CH＝CH和C≡C，且p、q、r和s是0-19的整数，条件是，10≤p+q+r+s≤19；和

(v)-(CH₂)_p-C＝C＝C-(CH₂)_q-CH₃，其中p和q是0-22的整数，条件是，13≤p+q≤22。

如上面所解释的，由于亲脂尾巴R₁，为了得到对DC-SIGN具有高亲和力且能够抑制或阻止HIV反式感染或登革病毒顺式感染的化合物，不需要高甘露糖结构的存在。

因此，在另一个实施方案中，本发明涉及这样的式(I)的化合物，其中：

-M₁选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα，且

-当M₂和/或M₃存在时，所述基团选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα、Manα(1->6)Manα和至多具有至多800g.mol^-1的分子量的抗感染剂部分、优选抗病毒剂部分。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是这样的式(I)化合物，其中M₁和任选的M₂和M₃独立地选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα。

在另一个实施方案中，本发明的化合物是这样的式(I)化合物，其中M₁和任选的M₂和M₃独立地选自Manα和Manα(1->2)Manα。

在某些具体实施方案中，式(I)化合物具有所有以下特征：

(i)M₁选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα；

(ii)当M₂和/或M₃存在时，所述M₂和/或M₃选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα；且

(iii)R₁选自：

--(CH₂)_pCH₃，其中p是16-29的整数；

--(CH₂)_p-M-(CH₂)_q-CH₃，其中M是-CH＝CH-或-C≡C-，且p和q是0-27的整数，条件是，14≤p+q≤27

--(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-CH₃，其中K和M独立地选自-CH＝CH-和-C≡C-，且p、q和r是0-25的整数，条件是，12≤p+q+r≤25；

--(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-P-(CH₂)_s-CH₃，其中K、M和P独立地选自-CH＝CH-和-C≡C-，且p、q、r和s是0-23的整数，条件是，10≤p+q+r+s≤23；和

--(CH₂)_p-C＝C＝C-(CH₂)_q-CH₃，其中p和q是0-26的整数，条件是，13≤p+q≤26。

在一些其它的实施方案中，本发明涉及这样的式(I)的化合物，其中Q₁和任选地存在的Q₂和Q₃独立地选自式(II)的基团：

-W-(O-CH₂-CH₂)_a-(X’-(O-CH₂-CH₂)_d)_b-(II)，其中：

-W选自-NH-(CH₂)_f、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5的整数，

-a是2-10、优选2-5的整数，

-b是0或1，

-d是1-10的整数，且

-X’是-NH-C(O)-(CH₂)_e-或-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数。

-W-(O-CH₂-CH₂)_a-(X’-(O-CH₂-CH₂)_d)_b-(II)，其中：

-W选自-NH-(CH₂)_f、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5的整数。

-a是2-10、优选2-5的整数，

-b是0或1，

-d是1-10的整数，且

-X’是-NH-C(O)-(CH₂)_e-或-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数，

条件是，当M₂Q₂和M₃Q₃不存在时，b不是0。

2-10的整数包括等于2、3、4、5、6、7、8、9或10的整数。“b是0”是指，-(X’-(O-CH₂-CH₂)_d)-不存在。

在某些具体实施方案中，式(I)化合物具有所有以下特征：

(ii)当M₂和/或M₃存在时，所述M₂和/或M₃选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα；

(iii)Q₁和任选地存在的Q₂和Q₃独立地选自式(II)的基团:-W-(O-CH₂-CH₂)_a-(X’-(O-CH₂-CH₂)_d)_b-，其中W、a、X’、d和b如前所述；和

(iv)R₁选自：

--(CH2)_pCH₃，其中p是16-29的整数；

--(CH₂)_p-M-(CH₂)_q-CH₃，其中M是-CH＝CH-或-C≡C-，且p和q是0-27的整数，条件是，14≤p+q≤27，

在一个具体的方面，本发明涉及式(Ia)的化合物，即这样的式(I)化合物，其中M₂-Q₂和M₃-Q₃不存在。

在某些实施方案中，本发明涉及式(III)的化合物：

其中M₁、W、a、X’、d、b、接头和R₁如上文中充分描述。

优选地，W是-O-CH₂-CH₂-。优选地，b是1。

如前面描述的，在这样的一个实施方案中，接头是双官能接头，其可以选自：

(i)氨基酸残基诸如甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和亮氨酸，

(ii)肽，其具有2-10个氨基酸残基，优选2-5个氨基酸残基，

(iii)X₁-(CH₂)_n-Y₁，其中(i)n是1-10的整数且(ii)X₁和Y₁独立地选自-NH-、-S-、-C(＝O)-、-O-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-和(C＝O)-O-(C＝O)；和

(iv)-NH-、-S-、-O-、-C(＝O)-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、NH-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-和-(C＝O)-O-(C＝O)-。

在本发明的某些具体实施方案中，接头是-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NHC(＝O)-或-C(＝O)NH-，优选-NHC(＝O)-或-C(＝O)NH-，且更优选-NHC(＝O)-。

在某些更具体的实施方案中，本发明的化合物选自式(IIIa)的化合物:

其中：

-R₂是H或α-甘露糖基残基，优选地通过(1->2)连接相连，

-R₁如上文中充分描述，

-_a是2-10、优选2-5的整数，且

-d是2-10、优选2-5的整数

在某些具体实施方案中，本发明的化合物选自式(IV)的化合物：

其中M₁、M₂、接头和R₁如前所述。

-a1、a2、d1和d2是整数，其独立地选自在2-10、优选2-5范围内的整数，

-b1和b2独立地选自0和1，

-X’₁和X’₂独立地选自上面在式(II)中描述的X’，即选自-NH-C(O)-(CH₂)_e-和-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数，且

-W₁和W₂独立地选自如上面在式(II)中描述的W，即选自-NH-(CH₂)_f、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5的整数。

如前面描述的，在这样的一个实施方案中，接头是三官能接头，其可以选自这样的化合物：所述化合物具有含1-20个碳原子的带分支的主链和至少3个选自-NH-、S、-C(＝O)-、-O-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-和-(C＝O)-O-(C＝O)-的官能团。

在某些实施方案中，本发明涉及这样的式(I)的化合物，其中M₂-Q₂存在，M₃-Q₃不存在，且M₂-Q₂与M₁-Q₁相同。在一个更具体的实施方案中，本发明涉及式(IV)的化合物，其中：

-a1＝a2且优选地范围为2-5，

-d1＝d2且优选地范围为2-5，

-b1＝b2，

-M₁和M₂是相同的，且优选地选自甘露糖基和二甘露糖基，

-W1和W2是相同的，且优选地是-O-CH₂-CH₂-；且

-X₁’和X₂’是相同的，且优选地是-NH-C(O)-(CH₂)-。

在某些其它具体实施方案中，本发明的化合物选自式(V)的化合物

其中M₁、M₂、接头和R₁如前所述。

-a1、a2、a3、d1、d2和d3是整数，其独立地选自在2-10、优选2-5范围内的整数，

-b1、b2和b3独立地选自0和1，

-X’₁、X’₂和X’₃独立地选自上面在式(II)中描述的X’，即选自-NH-C(O)-(CH₂)_e-和-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数，且

-W₁、W₂和W₃独立地选自如上面在式(II)中描述的W，即选自-NH-(CH₂)_f、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5的整数。

如前面描述的，在这样的一个实施方案中，接头是四官能接头，其可以选自这样的化合物：所述化合物具有含有1-20个碳原子的带分支的主链和至少4个选自-NH-、-S-、-C(＝O)-、-O-、-NH-C(＝O)-、-C(＝O)-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-NH-、-(C＝NH)-NH-、-NH-(C＝O)-NH-和-(C＝O)-O-(C＝O)-的官能团。

优选地，接头是式(VI)的基团

其中：

-R₆是-NHC(O)-或-OC(O)-，优选-NH(C＝O)-，且

-R₃、R₄和R₅独立地选自-NHC(＝O)-(CH₂)_nO-和-OC(＝O)-(CH₂)_nO-，n是1-10的整数，优选-NH-C(＝O)-(CH₂)₂O-。

在某些实施方案中，本发明涉及这样的式(I)的化合物，其中M₂-Q₂和M₃-Q₃存在，且与M₁-Q₁相同。在一个更具体的实施方案中，本发明涉及式(V)的化合物，其中：

-a1＝a2＝a3且优选地范围为2-5，

-d1＝d2＝d3且优选地范围为2-5，

-b1＝b2＝b3，

-M₁、M₂和M₃是相同的，且优选地选自甘露糖基和二甘露糖基，

-W₁、W₂和W₃是相同的，且优选地是-O-CH₂-CH₂-；且

-X₁’,X₂’和X’₃是相同的，且优选地是-NH-C(O)-(CH₂)-。

在某些其它的具体实施方案中，本发明的化合物选自式(Va)的化合物:

其中：

-R₂是H或α-甘露糖基残基，优选地通过(1->2)连接相连，

-R₁如上文中充分描述，且

-a是2-10、优选2-5的整数。

在一个特定实施方案中，本发明涉及以下化合物中的一种或几种：

(在本文中被称作Man_C17)

(在本文中被称作ManC₂₄)

(在本文中被称作Man_insatC24)

(在本文中被称作TriMan_C24或TriMan)

(在本文中被称作DiTriMan_C24或DiTriMan)

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是H，且a是3；

(在本文中被称作TriMan_insatC24)，和

(在本文中被称作TriDiMan_insatC24)

II.化合物及其药物组合物的治疗用途

本发明也涉及用作药物、具体地用于治疗或预防感染性疾病的任一个式(I)、(III)、(IIIa)、(IV)、(V)或(Va)的化合物或本文中公开的任何具体化合物。

本发明也涉及本发明的化合物用于制备药物的用途，更具体地，所述药物用于治疗和预防感染性疾病。

本发明的另一个主题是，一种用于治疗患者的方法，所述方法包括：给所述患者施用有效量的在本说明书中定义的化合物。更精确地，本发明涉及一种用于治疗或预防患者的感染性疾病的方法，所述方法包括：给所述患者施用治疗有效量的如本文中定义的化合物。

在一个非常具体的实施方案中，所述化合物选自：

-式(IIIa)的化合物，其中R₂是H，R₁是-(CH₂)₁₆CH₃，a是3且b是4(在本文中被称作Man_C17)；

-式(IIIa)的化合物，其中R₂是H，R₁是-(CH₂)₂₃CH₃，a是3且b是4(在本文中被称作Man_C24)；

-式(IIIa)的化合物，其中R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是H，a是3，且b是4(在本文中被称作Man_insatC24)；

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₂₃CH₃，R₂是H，且a是3(在本文中被称作TriMan_C24)；

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₂₃CH₃，R₂是α-甘露糖基，且a是3(在本文中被称作DiTriMan_C24)；

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是H，且a是3(在本文中被称作TriMan_insatC24)，和

-式(Va)的化合物，其中，R₁是-(CH₂)₈-C≡C-C≡C-(CH₂)₁₁-CH₃，R₂是α-甘露糖基，且a是3(在本文中被称作TriDiMan_insatC24)。

“感染性疾病”包括病原体在受试者中造成的任意疾病或任意障碍。病原体包括细菌、病毒、真菌和寄生虫。感染性疾病包括、但不限于细菌性疾病和病毒性疾病。

本文中使用的“治疗有效量”是指本发明的化合物在哺乳动物(包括人类)中预防、除去、减慢感染性疾病、或者减轻或延迟由所述感染性疾病造成的或相关的一种或几种征状或障碍的量。本发明的化合物及其药物组合物的有效量和更一般的剂量方案，可以由本领域技术人员容易地确定和改进。

通过使用常规技术，并通过观察在类似情况下得到的结果，可以确定有效剂量。本发明的化合物的治疗有效剂量将随诸如以下因素而变化：要治疗(包括预防)的病理学状况、施用方法、涉及的任何共同治疗、患者的年龄、重量、一般医学病症、医疗史等。通常，要施用给患者的化合物的量可以在约0.01mg/天/kg至50mg/天/kg体重、优选0.1mg/天/kg至25mg/天/kg体重的范围内。例如，对于具有60kg体重的患者，本发明的化合物的日剂量范围为0.6mg至3g，优选6mg至1.5g。

具体地，本发明的化合物可以用于治疗或预防由病原体造成的感染性疾病，其中所述病原体的体内散布和/或细胞传播涉及与DC-SIGN的相互作用。所述病原体可以是细菌、病毒、真菌或寄生虫。

这样的感染性疾病包括、但不限于由选自以下的病原体造成的感染性疾病：结核分枝杆菌(Tuberculosis mycobacterium)、幽门螺杆菌、白假丝酵母、利什曼原虫属种、丙型肝炎病毒(HCV)、埃博拉病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)(包括HIV-1)、登革病毒、马尔堡病毒、西尼罗病毒、奥拉病毒、单纯疱疹病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒、麻疹病毒、禽H5N1流感病毒和巨细胞病毒。

在某些实施方案中，所述病原体选自：丙型肝炎病毒(HCV)、埃博拉病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)(包括HIV-1)、登革病毒、马尔堡病毒、西尼罗病毒、奥拉病毒、单纯疱疹病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒、麻疹病毒、禽H5N1流感病毒和巨细胞病毒。

更具体地，本发明的化合物可以在病毒性疾病的治疗或预防中用于抑制和/或减轻顺式感染或反式感染，所述病毒性疾病包括由丙型肝炎病毒(HCV)、埃博拉病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)(包括HIV-1)、登革病毒、马尔堡病毒、西尼罗病毒、奥拉病毒、单纯疱疹病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒、麻疹病毒、禽H5N1流感病毒和巨细胞病毒造成的疾病。

“反式感染”是指从已经捕获病原体的细胞(主要是树突细胞)传播所介导的靶细胞的感染。

“顺式-转染”是指病原体对细胞的直接感染。

通过本领域技术人员众所周知的常规实验，可以评估顺式感染和反式感染的抑制。要使用的方法取决于要试验的病毒。

例如，在HIV-1的情况下，可以如在本文实施例所述，评估反式感染的抑制，简而言之：

-将人树突细胞(DC)与要试验的化合物一起温育，然后用HIV-1病毒粒子感染所述树突细胞，

-充分洗涤以后，将DC与MAGI-CCR5细胞(或T淋巴细胞)共培养，和

-定量MAGI-CCR5细胞(或T淋巴细胞)的病毒反式感染。

在这方面，可以引用2个研究，所述研究已经描述了关于测量从表达DC-SIGN的细胞系至T淋巴细胞的HIV-1反式感染的方案：Martinez-Avila等人,2009,和Sattin等人,2010。

在一个特定实施方案中，根据本发明的化合物可以用作药物，所述药物用于抑制由DC介导的CD4+淋巴细胞的HIV反式感染。

在另一个实施方案中，根据本发明的化合物可以用作药物，所述药物用于抑制登革病毒对DC的顺式感染。

本发明的另一个主题是一种药物组合物，其包含(i)本发明的化合物作为有效成分和(ii)至少一种药学上可接受的赋形剂。

根据标准方法，诸如在以下文献中描述的那些方法，可以配制本发明的药物组合物：Remington:The Science and Practice of Pharmacy(Lippincott Williams & Wilkins；第21版,2005)。根据期望的剂型(galenic form)和施用途径可以使用的药学上可接受的赋形剂描述在，例如，Handbook of Pharmaceuticals Excipients,American PharmaceuticalAssociation(Pharmaceutical Press；第6次修订版,2009)。

通过将具有适当纯度的本发明化合物与至少一种诸如下述的常规赋形剂(或载体)混合，可以得到本发明的药物组合物：(a)填充剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羧甲纤维素、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些复杂的硅酸盐和碳酸钠；(e)溶液缓凝剂，例如石蜡；(f)吸收促进剂，诸如季铵化合物；(g)润湿剂，诸如单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，诸如高岭土和皂粘土；(i)润滑剂，诸如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，(j)抗氧化剂，(k)缓冲剂，诸如柠檬酸钠或磷酸钠，(l)防腐剂，(m)调味剂和香料等。

不言而喻，要与(ii)活性成分组合的(i)赋形剂可以随以下因素变化：(i)物理化学性质，包括所述活性成分的稳定性，(ii)所述活性成分的期望的药代动力学分布，(iii)剂型，和(iv)施用途径。

可以用包衣剂和壳(诸如肠溶包衣或其它合适的包衣剂或壳)制备固体剂型诸如片剂、胶囊剂、丸剂和颗粒。几种这样的包衣剂和/或壳是本领域众所周知的，且可以含有遮光剂，并且也可以是这样的组合物：它们在肠道的某个部分中和/或以延迟方式释放一种或多种活性化合物。可以使用的包埋组合物的例子是聚合的物质和蜡类。所述活性化合物还可以以微囊化形式使用，如果合适，与一种或多种上述赋形剂一起。

用于口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶液、混悬液、糖浆剂和酏剂。除了活性化合物以外，所述液体剂型还可以含有：本领域中常用的惰性稀释剂诸如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯或这些物质的混合物等。如果需要的话，所述组合物还可以包括佐剂，诸如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、矫味剂和/或芳香剂。

除了本发明的化合物以外，混悬液还可以含有助悬剂，例如，乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、氢氧化铝氧化物、皂粘土、琼脂等。

通过将本发明的化合物与合适的非刺激性的赋形剂或载体(诸如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合，可以制备阴道或直肠栓剂，所述赋形剂或载体在常温为固体，但是在体温为液体，并因此在直肠或阴道腔中熔化和释放活性成分。

例如，通过在净化水中将本发明的化合物与依地酸钠、柠檬酸、甘油、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和羟基纤维素一起混合，可以制备阴道凝胶组合物。

除本发明的活性化合物以外，所述软膏剂、糊剂、乳膏剂和凝胶剂还可以含有赋形剂诸如动物和植物脂肪、油、蜡类、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、有机硅、皂粘土、硅酸、滑石和氧化锌或其混合物。

所述药物组合物可以包含：

-0.01％至50重量％的本发明的化合物，和

-50％至99.99重量％的赋形剂，

所述百分比相对于组合物的总重量来表示。

优选地，所述药物组合物可以包含：

-0.1％至25重量％的本发明的化合物，和

-75％至99.9重量％的赋形剂。

所述药物组合物中的本发明的化合物的量可以取决于所述组合物的剂型。

例如，在口服片剂的情况下，本发明的化合物可以占所述口服片剂的总重量的5％至25重量％。

在凝胶的情况下，本发明的化合物可以占所述凝胶的总重量的1％至20％。

通过任意常规途径，包括通过肠内途径(即口服)例如以片剂、胶囊剂的形式，通过非肠道途径例如以可注射的溶液或混悬液的形式，和通过局部途径例如以凝胶、软膏剂、洗剂、贴剂、栓剂等的形式，可以施用本发明的化合物和药物组合物。

本文中使用的‘局部途径’包括、但不限于真皮途径和粘膜途径，例如阴道、直肠、舌下和眼途径。

在某些具体实施方案中，通过粘膜途径，且具体地通过阴道或直肠途径，施用本发明的化合物和组合物。在这样的一个实施方案中，可以将药物组合物配制为凝胶、阴道片剂、阴道胶囊剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂或粘膜粘着贴剂，或者将其掺入递送系统(诸如阴道环、子宫托)中或避孕套(例如女用或男用避孕套)中。

例如，本发明的组合物可以是用于避孕套的润滑剂凝胶。本发明的另一个主题是，用根据本发明的化合物或组合物涂布的避孕套。在某些实施方案中，用根据本发明的组合物润滑所述避孕套。

本发明的药物组合物可以包含其它活性成分(即其它治疗剂)。本文中使用的“治疗剂”或“活性成分”表示任意种类的治疗分子，且因而包括、但不限于维生素、抗感染剂、抗肿瘤剂、镇痛剂、抗炎剂、抗糖尿病剂等。

换而言之，本发明涉及一种药物组合物，其包含：(i)本发明的化合物作为活性成分，(ii)至少一种药学上可接受的赋形剂，和任选的(iii)其它治疗剂。

这样的药物组合物可以包含：

-0.01％至50重量％的本发明的化合物，

-0％至50重量％的其它治疗成分，和

-50％至99.99重量％的赋形剂，

所述百分比相对于药物组合物的总重量来表示。

在一个优选的实施方案中，所述其它治疗剂选自抗感染剂，例如，抗病毒剂和抗生素类药剂。

当所述组合物意图用于治疗或预防由细菌(诸如结核分枝杆菌或幽门螺杆菌)造成的疾病时，所述其它活性成分可以选自抗生素，优选地选自：抗生素诸如异烟肼、甲硝唑、克拉霉素、荧光喹诺酮类(包括环丙沙星)、利福平、β-内酰胺抗生素(诸如阿莫西林)和碳青霉烯类(包括亚胺培南)。

当所述组合物意图用于治疗或预防丙型肝炎时，所述其它活性成分可以选自抗-丙型肝炎病毒(抗-HCV)剂。抗-HCV剂包括、但不限于聚乙二醇化的干扰素-α、利巴韦林和波普瑞韦。

当所述组合物意图用于治疗或预防HIV感染和有关的疾病时，所述其它活性成分可以选自抗HIV剂，优选地选自能够抑制顺式感染的抗HIV剂。

在某些具体实施方案中，当所述组合物意图用于治疗或预防HIV感染和有关的疾病时，所述其它活性治疗剂可以选自：(i)能够阻止细胞感染(即病毒粒子进入细胞)的抗HIV剂，和(ii)能够抑制病毒复制的抗病毒剂。

能够阻止细胞感染(即病毒粒子进入细胞)的抗病毒剂包括、但不限于CCR5拮抗剂诸如马拉韦罗、维立韦罗、阿拉韦罗和融合抑制剂诸如恩夫韦肽。

能够抑制病毒复制的抗病毒剂包括、但不限于，

(i)逆转录酶抑制剂诸如替诺福韦、齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、奈韦拉平、依法韦仑、地拉韦啶，

(ii)蛋白酶抑制剂诸如沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、氨普那韦、洛匹那韦、阿扎那韦、呋山那韦、达芦那韦和布瑞那韦，

(iii)成熟抑制剂诸如贝韦立马，和

(iv)整合酶抑制剂诸如拉替拉韦、艾维雷韦。

关于抗-HIV药物的综述，参见例如Flexner,Nat.Rev.Drug Discov,2007,6,959-966,Oversteegen等人.Nat.Rev.Drug Discov.2007,951-952和Tilton and Doms,Antiviral Res.2010,85,91-100。

在一个更一般的方面，所述其它治疗剂可以是能够抑制HIV顺式转染的抗病毒剂。

本发明的另一个主题是，用于预防或治疗感染性疾病的治疗组合，其包括：(i)本发明的化合物和(ii)治疗剂，它们用于同时、分开或连续施用给有此需要的患者。

可以通过相同途径或通过不同途径将本发明的治疗组合和化合物施用给患者。例如，可以通过粘膜途径将本发明的化合物施用给患者，然而可以口服地施用所述治疗剂。

所述治疗剂可以属于任意种类，且优选地选自抗病毒剂、抗生素和抗炎剂。

在一个具体实施方案中，所述治疗组合意图用于预防或治疗感染性疾病，优选地由选自以下的病原体造成：结核分枝杆菌、幽门螺杆菌、白假丝酵母、利什曼原虫属种、埃博拉病毒、马尔堡病毒、人免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、登革病毒、西尼罗病毒、奥拉病毒、单纯疱疹病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒、麻疹病毒、禽H5N1流感病毒和巨细胞病毒。

当所述组合意图用于治疗或预防丙型肝炎时，所述治疗剂可以选自抗-丙型肝炎病毒(抗-HCV)剂。抗-HCV剂包括、但不限于聚乙二醇化的干扰素-α、利巴韦林和波普瑞韦。

当所述组合意图用于治疗或预防HIV感染和有关的疾病时，所述治疗剂可以选自抗HIV剂，优选地选自能够抑制顺式感染的抗HIV剂。

在某些具体实施方案中，当所述组合物意图用于治疗或预防HIV感染和有关的疾病时，所述治疗剂可以选自：(i)能够阻止细胞感染(即病毒粒子进入细胞)的抗HIV剂，和(ii)能够抑制病毒复制的抗病毒剂。

上文提供了能够阻止细胞感染的抗HIV剂的例子和能够抑制病毒复制的抗HIV剂的例子。

III.用于制备本发明的化合物的方法

本发明的另一个主题是，一种用于制备式(I)化合物的方法。

在一个具体实施方案中，本发明涉及一种用于制备式(IIIa)的化合物或其药学上可接受的盐、酯或溶剂合物的方法：

其中：

-R₂是H或α-甘露糖基，

-a是2-10、优选2-5的整数，

-d是2-10、优选2-5的整数，且

-R₁是如上文充分描述的不饱和的或饱和的C₁₇-C₃₀烷基，

所述方法包括：

(i)使式(VII)的化合物H-(O-CH₂-CH₂)(_a+1)N₃与式(VIa)的化合物或式(VIb)的化合物反应

或

其中R₇是Pr₁或受保护的α-甘露糖基，且每个Pr₁独立地选择自羟基的保护基，

从而形成式(VIII)的化合物；

(ii)将式(VIII)的化合物的叠氮基还原成NH₂基团；

(iii)使在步骤(ii)得到的化合物与式(IX)的化合物HOOC-CH₂(O-CH₂-CH₂)_(d)N₃反应，

从而形成式(X)的化合物；

(iv)将式(X)的化合物的叠氮基还原成NH₂；

(v)使在步骤(iv)得到的化合物与R₁COOH反应；和

(vi)将在步骤(v)得到的化合物的甘露糖基羟基去保护，从而得到式(IIIa)的化合物。

本文中使用的“受保护的α-甘露糖基”是指α甘露糖基基团，其中羟基被任意适当的保护基诸如苄基(Bn)或乙酸根(Ac)保护。类似地，每个Pr1独立地选自羟基的保护基，尤其是苄基和乙酰基。

化合物(VIa)可以如在Su,2010中所述如下从甘露糖得到：保护羟基，使甘露糖与Ac₂O在有Et₃N和DMAP存在下反应，然后用三氯乙酰亚氨酸酯部分替换在端基异构位置上引入的乙酰基基团。

例如，化合物(VIb)可以根据在Duffels,2000中描述的操作得到。简而言之，使对应的完全乙酰化的糖基溴(参见Banoub1986)与2,6-二甲基吡啶在二氯甲烷/甲醇中反应，从而立体选择性地得到全乙酰化的1,2-外-原乙酸酯。然后在有HgBr₂和分子筛存在下用乙硫醇处理得到的化合物。

式(VII)的化合物可以如在Khiar2009中所述如下得到：在用甲磺酰氯活化羟基以后，使适当的寡乙二醇与NaN₃反应。

就化合物(VIa)与化合物(VII)的反应而言，步骤(i)通常如在Su,2010中所述在有路易斯酸诸如三氟甲磺酸三甲基甲硅烷酯(TMSOTf)存在下进行。

叠氮基的还原通常使用经典的Staudinger氏条件来进行，即，通过使包含叠氮基的化合物与三苯基膦在室温反应过夜。

化合物(IX)可以通过氧化反应从化合物(VII)得到，例如使用Jone氏试剂(其为三氧化铬或重铬酸钠在稀硫酸中的混合物，其原位形成铬酸)。

在步骤(iii)和(v)中的酰胺键(肽键)形成可以通过现有技术中描述的任意常规操作来执行，例如通过如下活化羧酸官能团：

-与碳二亚胺反应，并任选地与2-羟基-苯并三唑(HOBt)或1-羟基-7-氮杂-苯并三唑(HOAt)反应，或

-与鏻或铀盐诸如(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)反应。

羟基的去保护可以通过常规操作来进行。苄基可以通过碳载钯(Pd/C)催化的氢化来除去，而乙酰基可以通过在甲醇中与MeONa反应来除去。

关于与有机化学中的保护基有关的标准操作，可以参考Greene,“Greene's Protective Groups in Organic Synthesis”,2006,John Wiley &Sons Inc；第4次修订版。

所述用于制备式(IIIa)的化合物的方法可以包括一个或多个额外步骤，例如实现适当保护基的除去和/或引入的步骤。

例如，如果R₁含有不饱和诸如双键和/或三键，不言而喻，步骤(vi)不包含可以还原R₁的不饱和的反应诸如氢化。因此，如果式(VIa)或(VIb)的化合物含有被苄基保护的羟基，那么所述苄基可以在步骤(v)之前除去并最终用另一个保护基替代。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种用于制备式(Va)的化合物或其药学上可接受的盐、酯或溶剂合物的方法：

其中：

-R₂是H或α-甘露糖基，

-a是2-10、优选2-5的整数，且

-R₁是不饱和的或饱和的C₁₇-C₃₀烷基，

所述方法包括：

(i)使R₁COOH与式(XI)的化合物反应

其中Pr₂是羧基的保护基，优选乙基

从而得到式(XII)的化合物

(ii)通过酯基的皂化，将羧基去保护

(iii)使在步骤(ii)中得到的化合物与式(XIII)的化合物反应

其中每个Pr1是羟基的保护基，优选乙酰基

从而形成式(XIV)的化合物

；和

(iv)将甘露糖基羟基去保护，从而得到式(Va)的化合物。

式(XII)的化合物可以根据Kikkeri,2009得到。简而言之，首先使三(羟基甲基)氨基甲烷与丙烯腈在1,4-二噁烷中反应，通过羟基的迈克尔加成得到对应的三氰化物。使氰基在HCl(37％)中水解，随后酯化，从而得到期望的三酯。然后通过在HOBt/DCC条件下使胺与期望的羧酸在THF中偶联，实现酰胺键形成，从而得到化合物(XII)。

以前关于涉及保护基的式(IIIa)化合物的合成和酰胺键的形成提供的评论，也适用于式(Va)化合物的合成。

令人瞩目的是，化合物(XIII)可以通过上文所述的式(VIII)的化合物的还原来得到。

以下实施例进一步举例说明、而不是限制本发明。

IV.实施例

a.材料和方法

●化学合成：用于合成在本说明书中描述的化合物的一般实验条件

所有化学试剂和溶剂都是试剂级，并不经进一步纯化地使用。除非指出，否则在氩气氛下在火焰干燥的玻璃器皿中在磁力搅拌下进行反应。将分子筛储存在恒温器(T＝130℃)中并在真空中冷却。使用的酸性离子交换树脂是Amberlite IR120(氢形式)。NHS-Alexa633由Invitrogen提供。通过薄层色谱法(TLC)监测所有反应和柱色谱法的进展。使用Merck硅胶60F₂₅₄预包被的平板进行TLC，并通过紫外吸收显影和/或用香草醛或磷钼酸的溶液染色。在Bruker Avance DPX300波谱仪(分别运行在300和75MHz)或ultrashield plus400波谱仪(分别运行在400和100MHz)或ultrashield plus500波谱仪(分别运行在500和125MHz)上记录¹H和¹³C NMR谱。使用残余溶剂质子的信号(CDCl₃为7.24，MeOD为3.31，C₅D₅N为7.22)作为参照，以百万份数为单位报告¹H NMR化学位移。使用残余溶剂质子的信号作为参照(CDCl₃为77.23，MeOD为48.95，C₅D₅N为123.87)，以百万份数为单位报告¹³CNMR化学位移。如下呈现数据：化学位移，多重态(s＝单峰，bs＝宽单峰，d＝双峰，dd＝双重双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰和m＝多重峰)，积分和耦合(J，以Hz为单位)。使用LC/MSD/SL AgilentTechnologies得到LC-MS数据；离子化源为APCI/ESI,Agilenttechnologies1200自动采样器；泵agilent1200二元系统；柱ThermoScientific(58282):30x1mm,19μ,hypersil gold C18,AgilentTechnology1200DAD检测器；以APCI/ESI模式运行的Agilenttechnology MS四极质谱仪。使用Agilent Q-TOF(飞行时间)6520，得到高分辨率质谱图(HRMS)。从在CHCl₃或MeOH中的溶液得到红外波谱，记录在得自Thermo Electron Corporation的Nicolet380FT-IR上。

本文描述的不同化合物的合成路线图显示在图4中。化合物的编号是指在图4A-4F中使用的编号。

●全酰化叠氮化物(化合物12)的制备

根据Su Y.等人,(2010)描述的操作，制备化合物12。

●化合物13的制备.

将全乙酰化的甘露糖叠氮化物12(1.71g,2.63mmol,1当量)溶解在15mL四氢呋喃中。加入三苯基膦(898mg,2.90mmol,1.1当量)和水(85μL,3.88mmol,1.5当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜。在减压下除去溶剂，并通过硅胶柱上的快速色谱法直接纯化粗残余物，首先用DCM/MeOH(9/1,v/v)洗脱以消除杂质，然后用混合物DCM/MeOH/NEt₃(80/19/1,v/v/v)洗脱，得到作为黄色油的产物13(1.32g,81％)。R_f:0.15(DCM/MeOH/NEt₃:80/19/1,v/v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)5.07-4.95(m,3H),4.60(s,1H),3.98(dd,1H,J＝5.4Hz,J＝12.9Hz),3.83-3.79(m,2H),3.57-3.37(m,12H),3.27-3.22(m,2H),2.59-2.56(m,2H),2.29-2.24(m,2H,NH₂),1.87(s,3H),1.78(s,3H),1.74(s,3H),1.70(s,3H)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)170.6,170.0,169.9,169.8,97.7,70.8,70.7,70.3,70.1,69.6,69.2,68.5,67.4,66.2,62.5,41.8,21.0,20.8.IR(纯膜,cm^-1):2872,1742,1669,1437,1368,1218,1133,1081,1043,977,916,729,600.LC-MS(ESI)m/z[M+H]⁺:524。

●化合物Man _C1 1(比较)的制备

将基于胺的O-甘露糖13(15mg,0.28mmol,1当量)溶解在1mL无水四氢呋喃中。将反应混合物冷却至0℃，并逐滴加入乙酰氯(30μL,0.42mmol,1.5当量)。将溶液在室温温热，并搅拌过夜。在减压下除去溶剂，并通过硅胶柱上的快速色谱法纯化粗残余物，用DCM/丙酮(8/2,v/v)洗脱，得到作为无色油的全乙酰化的乙酰胺14(39mg,25％)。R_f:0.36(DCM/丙酮:80/20,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)5.36-5.23(m,3H),4.85(s,1H),4.28(dd,1H,J＝4.8Hz,J＝13.0Hz),4.10-4.02(m,2H),3.83-3.55(m,16H),2.42(s,3H),2.13(s,3H),2.08(s,3H),2.02(s,3H),1.97(s,3H).¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)170.4,170.1,98.0,71.1,71.0,70.9,70.8,70.4,69.4,68.8,67.7,66.5,62.8,45.5,26.9,21.1.IR(纯膜,cm^-1):2922,1744,1694,1428,1368,1213,1133,1082,1043,1012,978,800.LC-MS(ESI)m/z[M+H]⁺:566。

将中间体14(38mg,67μmol,1当量)溶解在0.5mL无水甲醇中。加入甲醇钠(3mg,50μmol,0.75当量)，并将反应混合物在室温搅拌，直到通过TLC分析(DCM/MeOH,80/20,v/v)监测到所有反应物水解。然后用树脂Amberlite IR120氢形式(H⁺)淬灭溶液，直到达到酸性的pH(约≈4-5)。将树脂与甲醇一起过滤，并在减压下浓缩滤液。在Sephadex G25柱上纯化残余物，用甲醇洗脱，得到作为黄色油的化合物Man_C11(26mg,97％)。¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.70(d,1H,J＝1.2Hz),3.74-3.71(m,3H),3.63-3.44(m,16H),3.29(t,3H,J＝5.2Hz),1.91(s,3H)。¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)174.0,101.8,74.7,72.6,72.1,71.6,71.4,71.3,70.3,68.7,67.8,63.0,40.9,22.2.IR(纯膜,cm^-1):3362,2924,1647,1220,1129,1090,1034,1009.LC-MS(ESI)m/z[M+H]⁺:398。

●化合物16的制备

将化合物13(613mg,1.07mmol,1.2当量)、羧酸9(200mg,0.86mmol,1当量)和HOBt(164mg,1.21mmol,1.5当量)溶解在10mL无水四氢呋喃和10mL无水乙腈的混合物中。加入DCC(249mg,1.21mmol,1.5当量)，并将混合物回流搅拌过夜；TLC分析(DCM/丙酮,6/4,v/v)揭示起始原料完全转化成一种产物。滤出沉淀物，并在减压下除去滤液。将得到的油稀释进150mL DCM中，并将有机相首先用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后用饱和氯化铵水溶液洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下蒸发。通过硅胶柱上的快速色谱法纯化粗制的混合物，首先用AcOEt/环己烷(8/2,v/v)洗脱以消除杂质，然后用DCM/丙酮(6/4,v/v)洗脱，得到作为无色油的叠氮化物15(95mg,14％)。R_f:0.67(DCM/丙酮:6/4,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)6.33(s,1H,NH),5.33-5.24(m,3H),4.84(s,1H),4.26(dd,1H,J＝5.1Hz,J＝13.6Hz),4.08-3.98(m,4H),3.81-3.35(m,28H),2.13(s,3H),2.07(s,3H),2.01(s,3H),1.96(s,3H).¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)171.2,170.7,170.5,170.1,98.1,71.3,71.1,71.0,70.9,70.6,70.3,69.9,69.4,68.8,67.7,66.5,62.8,51.0,39.0,21.0.IR(纯膜,cm^-1):2873,2106,1746,1671,1540,1437,1369,1224,1133,1085,1047,979.LC-MS(ESI)m/z[M+H]⁺:739。

然后将叠氮化物15(95mg,0.11mmol,1当量)溶解在1mL四氢呋喃中。然后加入三苯基膦(37mg,0.14mmol,1.1当量)和水(4μL,0.17mmol,1.5当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜。在减压下除去溶剂，并通过硅胶柱上的快速色谱法直接纯化粗残余物，首先用DCM/MeOH(9/1,v/v)洗脱以消除杂质，然后用混合物DCM/MeOH/NEt₃(80/19/1,v/v/v)洗脱，得到作为无色油的产物16(45mg,49％)。R_f:0.26(DCM/MeOH/NEt₃:80/19/1,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)5.30-5.22(m,3H),4.84(s,1H),4.25(dd,1H,J＝4.8Hz,J＝12.0Hz),4.09-3.96(m,4H),3.81-3.45(m,26H),2.95(t,2H,J＝4.5Hz),2.12(s,3H),2.07(s,3H),2.00(s,3H),1.95(s,3H)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)170.5,170.1,169.9,169.8,169.7,97.7,72.3,70.9,70.7,70.6,70.3,70.1,69.7,69.5,69.2,68.5,67.3,66.2,62.5,41.4,38.7,20.9,20.8.IR(纯膜,cm^-1):3368,2873,1742,1661,1540,1440,1369,1225,1085,1045,978.LC-MS(ESI)m/z[M+H]⁺:713。

●化合物20(乙酰化的Man_C11)的制备

将底物16(15mg,18μmol,1.2当量)、月桂酸17(4mg,16μmol,1当量)和HOBt(4mg,24μmol,1.5当量)溶解在0.5mL无水四氢呋喃中。加入DCC(5mg,24μmol,1.5当量)，并将混合物回流搅拌过夜。反应结束以后，在减压下除去溶剂，并通过硅胶柱上的快速色谱法纯化粗残余物，首先用AcOEt/环己烷(8/2,v/v)洗脱以消除杂质，然后用DCM/MeOH(9/1,v/v)洗脱，得到作为无色油的化合物20(16mg,98％)。R_f:0.37(DCM/MeOH:90/10,v/v).¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,400MHz)6.39(s,1H,NH),6.30(s,1H,NH),5.33-5.24(m,3H),4.86(d,1H,J＝0.8Hz),4.27(dd,1H,J＝5.2Hz,J＝12.2Hz),4.11-3.96(m,4H),3.82-3.42(m,28H),2.15-2.03(m,14H),1.60(bs,2H),1.26-1.24(m,16H),0.87(t,3H,J＝6.4Hz).¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,100MHz)173.5,170.7,170.2,170.1,169.9,169.7,97.7,70.9,70.7,70.6,70.5,70.4,70.3,70.2,70.1,70.0,69.9,69.8,69.6,69.1,68.5,67.4,66.2,62.4,39.2,38.7,36.6,33.9,31.9,29.7,29.6,29.5,29.4,29.3,25.8,24.9,22.6,20.9,20.8,20.7,20.6,14.7.IR(纯膜,cm^-1):2926,2857,1747,1656,1537,1369,1228,1136,1081,1048.LC-MS ESI m/z[M+H]⁺:896。

●化合物21(乙酰化的Man _C17 )和22(乙酰化的Man _C24 )的制备

使用关于产物20描述的相同操作，但是分别用硬脂酸18或二十五酸19替代月桂酸，合成化合物21和22。

化合物21的数据：

R_f:0.35(DCM/MeOH:90/10,v/v).¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,400MHz)5.33-5.26(m,3H),4.86(d,1H,J＝0.8Hz),4.27(dd,1H,J＝5.2Hz,J＝12.2Hz),4.10-3.96(m,4H),3.68-3.44(m,28H),2.15-1.98(m,14H),1.60(bs,2H),1.26-1.24(m,28H),0.87(t,3H,J＝6.4Hz)。¹³CNMRδ(ppm)(CDCl₃,100MHz)172.5,169.7,169.1,169.0,168.9,168.7,96.7,69.9,69.7,69.6,69.5,69.4,69.3,69.2,69.1,69.0,68.8,68.6,68.1,67.5,66.4,65.2,61.4,38.2,37.6,35.6,30.9,28.7,28.6,28.5,28.4,28.3,24.8,21.7,19.9,19.8,19.7,19.6,13.1.IR(纯膜,cm^-1):2923,2854,1748,1664,1369,1226,1086,1047.LC-MS ESI m/z[M+H]⁺:980。

化合物22的数据：

R_f:0.43(DCM/MeOH:90/10,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,400MHz)5.36-5.23(m,3H),4.87(s,1H),4.28(dd,1H,J＝2.8Hz,J＝11.8Hz),4.11-3.96(m,4H),3.83-3.43(m,28H),2.16-1.98(m,14H),1.59(bs,2H),1.26(bs,42H),0.87(t,3H,J＝6.8Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,100MHz)173.5,170.7,170.3,170.0,169.7,97.7,70.9,70.8,70.7,70.6,70.5,70.4,70.3,70.2,70.1,70.0,69.8,69.6,69.1,68.5,67.4,66.2,62.4,39.4,39.2,38.7,36.7,33.9,31.9,29.7,29.6,29.5,29.4,29.3,29.2,25.8,25.6,22.7,20.9,20.8,20.7,14.1.IR(纯膜,cm^-1):2916,2849,1744,1655,1541,1369,1228,1085,1046,910,729.LC-MS ESI m/z[M+Na]⁺:1100。

●化合物Man _C11 2(比较)、Man _C17 3(本发明)和Man _C24 4(本发明) 的制备

将化合物20(17mg,14μmol,1当量)溶解在0.5mL无水甲醇中。

加入甲醇钠(1mg,11μmol,0.75当量)，并将反应混合物在室温搅拌，直到所有反应物水解。然后用树脂Amberlite IR120氢形式(H⁺)淬灭溶液，直到达到酸性的pH(约≈4-5)。将树脂与甲醇一起过滤，并在减压下浓缩滤液。在Sephadex G25上纯化残余物，用甲醇洗脱，得到作为黄色油的化合物Man_C112(14mg,97％)。

使用相同操作分别从化合物21和22开始定量地合成化合物Man_C173和Man_C244。

化合物Man_C112(比较)的数据：

¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.70(d,1H,J＝1.6Hz),3.91(s,2H),3.75-3.71(m,3H),3.63-3.44(m,24H),3.35(t,2H,J＝5.6Hz),3.29-3.25(m,2H),2.09(t,2H,J＝7.6Hz),1.50(bs,2H),1.22-1.19(m,18H),0.80(t,3H,J＝6.8Hz).¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)176.4,172.9,101.8,74.7,72.6,72.2,72.1,72.0,71.9,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.2,71.1,70.7,70.6,70.5,68.7,67.8,62.9,40.4,39.9,37.1,34.7,33.1,30.8,30.7,30.5,30.3,27.1,23.7,14.5.IR(纯膜,cm^-1):3337,2924,2854,1653,1541,1458,1105,1035.LC-MS ESI m/z[M+H]⁺:728。

化合物Man_C173的数据：

¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.76(s,1H),3.91(d,2H,J＝2.0Hz),3.76-3.72(m,3H),3.63-3.42(m,24H),3.35(t,2H,J＝5.2Hz),3.30-3.25(m,2H),2.09(t,2H,J＝7.6Hz),1.50(bs,2H),1.22-1.19(m,28H),0.80(t,3H,J＝6.4Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)176.6,172.9,101.8,74.6,72.6,72.2,72.0,71.9,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.2,70.7,70.6,68.7,67.8,63.0,40.5,39.9,37.0,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.3,27.1,23.8,14.5.IR(纯膜,cm^-1):3342,2922,2853,1651,1552,1464,1350,1222,1127,1036,1010.LC-MS ESI m/z[M+H]⁺:812。

化合物Man_C244的数据：

¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.72(d,1H,J＝1.2Hz),3.94(s,2H),3.79-3.74(m,3H),3.65-3.44(m,24H),3.36(t,2H,J＝4.0Hz),3.30-3.24(m,2H),2.09(t,2H,J＝7.6Hz),1.52(bs,2H),1.21(bs,42H),0.82(t,3H,J＝6.8Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)172.9,169.5,101.8,74.6,72.6,72.1,72.0,71.9,71.7,71.6,71.4,71.3,71.2,70.6,70.5,68.7,67.8,62.9,40.4,39.9,37.1,34.7,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.3,27.1,23.8,14.5.IR(纯膜,cm^-1):3342,2922,2853,1651,1552,1464,1350,1222,1127,1036,1010.LC-MS ESI m/z[M+H]⁺:910。

●化合物24的制备

根据Kikkeri,等人(2009)描述的操作，制备化合物24。简而言之，首先使三(羟基甲基)氨基甲烷与丙烯腈在1,4-二噁烷中在室温反应24h，通过羟基的迈克尔加成得到对应的三氰化物。使氰基在HCl(37％)中水解4h，随后在乙醇影响下酯化(回流,36h)，得到期望的三甲酸乙酯(ethyl trimester)24。

●化合物25的制备

将三(羧基乙氧基乙基)氨基甲烷24(302mg,0.72mmol,1.2当量)、二十五酸19(229mg,0.60mmol,1当量)和HOBt(121mg,0.90mmol,1.5当量)溶解在10mL无水乙腈中。加入DCC(186mg,0.90mmol,1.5当量)，并将混合物回流搅拌过夜。然后将混合物冷却至室温并过滤。将滤液在减压下浓缩并溶解于200mL二氯甲烷中。将有机层首先用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，然后用饱和氯化铵水溶液洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下蒸发。通过硅胶柱上的快速色谱法纯化粗残余物，用环己烷/AcOEt(7/3,v/v)洗脱，得到作为白色固体的25(364mg,77％)。R_f:0.31(环己烷/AcOEt:7/3,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)5.88(s,1H,NH),4.04(q,6H,J＝7.2Hz),3.65-3.57(m,12H),2.42(t,6H,J＝6.3Hz),2.04(t,2H,J＝7.5Hz),1.50-1.41(m,53H),0.78(t,3H,J＝3.6Hz).¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)173.7,171.8,69.5,67.1,60.6,59.9,37.5,35.3,32.2,30.0,29.9,29.8,29.7,29.5,26.0,23.0,14.5,14.3.IR(纯膜,cm^-1):2918,2850,1734,1676,1466,1372,1258,1182,1107,1070,1031.LC-MS(ESI)m/z[M+H]⁺:788。

●化合物26的制备(化合物25的去保护)

将三酯25(176mg,0.23mmol,1当量)溶解在四氢呋喃(2mL)和绝对乙醇(2mL)的混合物中。向该溶液中加入氢氧化钠的水溶液(2mL,4N)。将混合物搅拌过夜，TLC分析(环己烷/AcOEt,7/3,v/v)表明起始原料完全消失。在减压下蒸发溶剂，并通过加入1N的HCl水溶液将混合物酸化。加入水(50mL)，并将得到的混合物用50mL AcOEt萃取3次。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩，得到作为白色固体的26(145mg,94％)。粗制物质足够干净，不经进一步纯化地用于下一步。¹H NMRδ(ppm)(C₅D₅N,300MHz)12.53(s,3H,3COOH),4.15(s,6H),3.95-3.86(m,6H),2.80-2.74(m,6H),2.30(t,2H,J＝7.5Hz),1.71-1.19(m,44H),0.86(t,3H,J＝6.9Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(C₅D₅N,75MHz)176.3,174.9,77.9,77.8,69.8,67.0,60.1,38.0,35.2,32.3,30.0,29.9,29.7,29.6,29.4,29.3,29.2,28.7,26.0,23.0,19.5,14.5.IR(纯膜,cm^-1):2917,2850,1718,1554,1467,1308,1194,1109,1069,973,829,534.LC-MS(ESI)m/z[M-H]^-:701。

●化合物27的制备

将化合物26(87mg,0.12mmol,1当量)、胺甘露糖13(477mg,0.76mmol,6当量)、DIPEA(0.23mL,1.31mmol,10当量)和HOBt(61mg,0.45mmol,3.5当量)溶解在8.5mL无水四氢呋喃中。向该溶液中加入HBTU(169mg,0.45mmol,3.5当量)。将反应物回流搅拌过夜。根据TLC分析(DCM/MeOH,9/1,v/v)，反应结束。将混合物冷却至室温，并在减压下浓缩。将混合物溶解于100mL二氯甲烷中，首先用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，然后用饱和氯化铵水溶液洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下蒸发。将得到的油应用于硅胶柱，首先使用DCM/丙酮(5/5,v/v)洗脱以消除杂质，然后用DCM/MeOH(9/1,v/v)洗脱，得到作为黄色油的27(173mg,63％)。R_f:0.47(DCM/MeOH:90/10,v/v)。¹HNMRδ(ppm)(CDCl₃,400MHz)6.47(t,3H,J＝6.0Hz,3NH),6.25(s,1H,NH),5.32-5.14(m,9H),4.84-4.77(m,3H),4.23(dd,3H,J＝4.8Hz,J＝14.6Hz),4.05-3.94(m,6H),3.77-3.55(m,48H),3.51-3.47(m,6H),3.39-3.35(m,6H),2.11-1.92(m,44H),1.45-1.06(m,44H),0.81(t,3H,J＝6.4Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,100MHz)171.2,170.8,170.7,170.6,170.5,170.4,170.3,170.2,170.0,169.9,169.8,169.7,169.6,97.7,97.5,97.4,72.3,71.6,71.5,70.7,70.6,70.5,70.4,70.3,70.1,70.0,69.9,69.8,69.7,69.5,69.0,68.4,67.3,66.1,62.4,61.5,59.6,39.3,39.2,31.9,29.6,29.5,29.3,20.8,20.7,20.6,14.1.IR(纯膜,cm^-1):2922,1740,1652,1545,1435,1369,1226,1133,1073,1040,977,919.LC-MS(ESI)m/z[M-2甘露糖+K]⁺:1591。

●化合物TriMan _C24 5(本发明)的制备

将化合物27(50mg,23μmol,1当量)溶解在1mL无水甲醇中。加入甲醇钠(3mg,45μmol,2当量)，并将反应混合物在室温搅拌，直到所有反应物水解。TLC分析(DCM/MeOH,9/1,v/v)揭示新产物的出现和起始原料转化成一种产物。然后用树脂Amberlite IR120氢形式(H⁺)淬灭溶液，直到达到酸性的pH(约≈4-5)。将树脂与甲醇一起过滤，并在减压下浓缩滤液。在Sephadex G25上纯化残余物，将柱用甲醇洗脱，得到作为黄色油的化合物TriMan_C245(37mg,96％)。¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.71(d,3H,J＝1.2Hz),3.77-3.72(m,12H),3.60-3.49(m,54H),3.46(t,6H,J＝5.6Hz),3.29(t,6H,J＝5.6Hz),2.36(t,6H,J＝6.4Hz),2.09(t,2H,J＝8.0Hz),1.27-1.14(m,44H),0.80(t,3H,J＝6.8Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)176.5,174.1,101.8,74.6,72.6,72.1,71.6,71.4,71.3,70.7,70.2,68.7,68.6,67.8,62.9,61.5,40.5,37.8,37.5,33.1,30.9,30.8,30.7,30.6,30.5,30.4,27.1,23.8,14.5.IR(纯膜,cm^-1):3324,2922,2853,1649,1462,1349,1204,1179,1123,1100,974,801,722,680.HRMS ESI m/z：C₈₀H₁₅₂N₄O₃₄[M+2H]²⁺的计算值：1713.0288。实测值：1713.0331。

化合物29的制备

如在Duffels等人,2000中所述，制备化合物29。简而言之，在室温在二氯甲烷/甲醇(1/1,v/v)中用2,6-二甲基吡啶处理已知的完全乙酰化的糖基溴(见Banoub,1986)持续14h，以88％收率得到立体选择性地全乙酰化的1,2-外-原乙酸酯。在甲醇中用催化剂K₂CO₃处理(14h,室温,90％)后进一步脱乙酰化，并随后在DMF中苄基化(BnBr,NaH,TBAI,0℃,14h,60％)，得到全苄基化的1,2-外-原乙酸酯。用HgBr₂和EtSH(MS4埃,60℃,16h)在MeCN中的溶液处理后一种化合物，得到上述化合物29。

●化合物30的制备

将化合物29(111mg,0.21mmol,1当量)和寡乙二醇8(83mg,0.38mmol,1.8当量)溶解在4mL无水二氯甲烷中，并加入分子筛(0.9g)。将混悬液在室温搅拌30分钟，并一次性加入NIS(61mg,0.27mmol,1.3当量)，随后立即加入TMSOTf(3μL,16μmol,0.07当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后与Et₂O一起穿过硅藻土(Celite)过滤。将滤液在减压下浓缩，并在50mL Et₂O中稀释。将有机层用饱和硫代硫酸钠溶液洗涤2次，经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下蒸发。通过硅胶柱上的快速色谱法纯化粗制物，用环己烷/AcOEt(6/4,v/v)洗脱，得到作为无色油的30(109mg,76％)。R_f:0.26(环己烷/AcOEt:6/4,v/v)。¹HNMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)7.40-7.18(m,15H),5.46-5.44(m,1H),4.92-4.87(m,2H),4.76-4.70(m,2H),4.58-4.50(m,2H),4.04(dd,1H,J＝3.0Hz,J＝8.6Hz),3.96-3.63(m,19H),3.36(t,2H,J＝5.1Hz),2.17(s,3H)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)170.8,138.8,138.7,138.5,128.8,128.7,128.4,128.3,128.2,128.1,128.0,98.3,78.6,75.6,74.7,73.9,72.2,71.8,71.1,70.5,69.3,69.1,51.0,21.6.IR(纯膜,cm^-1):2866,2101,1742,1453,1367,1285,1234,1077,1027,978,736,697.MS(ESI)m/z[M+NH₄]⁺:712。

●化合物31的制备(乙酰基的切割)。

将乙酰化的甘露糖30(150mg,0.22mmol,1当量)溶解在1mL无水甲醇中，并加入催化剂碳酸钾K₂CO₃(2mg,0.01mmol,0.05当量)。将反应混合物在室温搅拌，直到所有反应物水解(环己烷/AcOEt,5/5,v/v)。然后用树脂Amberlite IR120氢形式(H⁺)淬灭溶液，直到达到酸性的pH(约≈4-5)。将树脂与甲醇一起过滤，并在减压下浓缩滤液。在Sephadex G25上纯化残余物，将柱用甲醇洗脱，得到作为黄色油的化合物31(135mg,96％)。R_f:0.43(环己烷/AcOEt:5/5,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)7.37-7.27(m,13H),7.21-7.18(m,2H),4.98(d,1H,J＝1.5Hz),4.85(d,1H,J＝10.8Hz),4.76-4.66(m,3H),4.57-4.51(m,2H),4.12-4.11(m,1H),3.91-3.63(m,19H),3.37(t,2H,J＝5.1Hz),2.66(s,1H,OH)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)138.8,138.7,138.4,128.9,128.7,128.4,128.3,128.2,128.1,128.0,99.8,80.6,75.5,74.8,73.9,72.3,71.5,71.1,71.0,70.5,70.4,69.4,68.7,67.0,51.1.IR(纯膜,cm^-1):2867,2101,1453,1362,1284,1210,1096,1059,1027,842,735,697.HRMS(ESI)m/z：C₃₅H₄₅N₃O₉[M+Na]⁺的计算值：674.3053。实测值：674.3080。

●化合物32的制备

将甘露糖衍生物29(63mg,0.12mmol,1当量)和去保护的甘露糖31(91mg,0.14mmol,1.1当量)溶解在1mL无水二氯甲烷和1mL无水Et₂O的混合物中。加入分子筛(0.7g)。将混悬液在室温搅拌30分钟，并一次性加入NIS(39mg,0.17mmol,1.4当量)，随后立即加入TMSOTf(2μL,11μmol,0.09当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后与Et₂O一起穿过硅藻土(Celite)过滤。将滤液在减压下浓缩，并在100mL Et₂O中稀释。将有机层用饱和硫代硫酸钠溶液洗涤2次，经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下蒸发。通过硅胶柱上的快速色谱法纯化粗制物，用环己烷/AcOEt(7/3,v/v)洗脱，得到作为无色油的期望的化合物32(76mg,58％)。R_f:0.15(环己烷/AcOEt:7/3,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)7.41-7.18(m,30H),5.60-5.58(m,1H),5.14(d,1H,J＝1.2Hz),4.96(d,1H,J＝1.2Hz),4.91(d,1H,J＝2.4Hz),4.88(d,1H,J＝2.7Hz),4.73-4.69(m,4H),4.63-4.43(m,5H),4.11-4.09(m,1H),4.06-3.51(m,25H),3.38(t,2H,J＝5.1Hz),2.16(s,3H)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)170.5,138.9,138.8,138.6,138.4,128.8,128.7,128.6,128.5,128.2,128.1,128.0,127.9,127.8,100.0,99.2,80.1,78.6,75.6,75.4,75.2,75.1,74.8,73.8,73.7,72.4,72.3,71.1,71.0,70.5,70.4,69.7,69.5,69.2,67.0,51.1,21.6.IR(纯膜,cm^-1):2865,2102,1743,1496,1453,1363,1284,1234,1137,1078,1053,1027,978,910,844.HRMS(ESI)m/z：C₆₄H₇₅N₃O₁₅[M+Na]⁺的计算值：1143.5542。实测值：1143.5559。

●化合物33的制备

将化合物32(76mg,67μmol,1当量)溶解在0.75mL四氢呋喃中。加入三苯基膦(20mg,76μmol,1.1当量)和水(2μL,111μmol,1.5当量)。将反应混合物在室温搅拌过夜，并在减压下浓缩以消除THF和水。通过硅胶柱上的快速色谱法纯化残余物，首先用DCM/MeOH(9/1,v/v)洗脱以除去杂质，然后用混合物DCM/MeOH/NEt₃(80/19/1,v/v/v)洗脱，得到作为无色油的化合物33(45mg,61％)。R_f:0.30(DCM/MeOH/NEt₃:80/19/1,v/v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,300MHz)7.36-7.16(m,30H),5.58-5.55(m,1H),5.12-5.11(m,1H),4.94(s,1H),4.88(d,1H,J＝2.1Hz),4.85(d,1H,J＝2.1Hz),4.71-4.67(m,4H),4.60-4.40(m,5H),4.09-4.07(m,1H),4.03-3.48(m,25H),3.14(s,2H,NH₂),2.87(t,2H,J＝4.5Hz),2.14(s,3H)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,75MHz)170.5,138.9,138.8,138.6,138.4,128.7,128.6,128.5,128.2,128.0,127.9,127.8,100.0,99.2,80.1,78.5,75.6,75.4,75.2,75.0,74.7,73.8,73.7,72.9,72.4,72.3,72.2,71.0,70.6,70.5,69.7,69.4,69.1,67.1,41.8,21.5.IR(纯膜,cm^-1):2866,1743,1496,1453,1364,1286,1234,1137,1078,1055,1028,980,912,843.HRMS(ESI)m/z：C₆₄H₇₇N₁O₁₅[M+H]⁺的计算值：1100.5371。实测值：1100.5395。

●化合物TriDiMan _C24 6的制备

将三羧酸26(9mg,13μmol,1当量)、胺二甘露糖33(45mg,41μmol,3.2当量)、DIPEA(25μL,142μmol,10.5当量)和HOBt(7mg,50μmol,3.5当量)溶解在1mL无水四氢呋喃中。向该溶液中加入HBTU(18mg,50μmol,3.5当量)。将反应物回流搅拌过夜。根据TLC分析(DCM/MeOH,95/5,v/v)，反应结束。将混合物冷却至室温，并在减压下浓缩。将得到的粗制物应用于硅胶柱，首先使用DCM/丙酮(5/5,v/v)洗脱以消除杂质，然后用DCM/MeOH(95/5,v/v)洗脱，得到作为黄色油的完全保护的(苄基化的和乙酰化的)期望产物(14mg,27％)。R_f:0.13(DCM/MeOH:95/5,v/v)。¹H NMRδ(ppm)(CDCl₃,400MHz)7.28-7.06(m,90H),6.56(s,3H,NH),5.93(s,1H,NH),5.46-5.44(m,3H),5.01-5.00(m,3H),4.83(d,3H,J＝1.6Hz),4.78(d,3H,J＝1.6Hz),4.75(d,3H,J＝1.6Hz),4.60-4.56(m,12H),4.49-4.31(m,15H),3.96(t,3H,J＝2.0Hz),3.90(dd,4H,J＝2.8Hz,J＝9.4Hz),3.87-3.82(m,5H),3.76(dd,4H,J＝2.8Hz,J＝9.4Hz),3.73-3.35(m,80H),2.42(t,2H,J＝6.0Hz),2.33(t,6H,J＝5.2Hz),2.04(s,9H),1.27-1.13(m,44H),0.81(t,3H,J＝6.8Hz)。¹³C NMRδ(ppm)(CDCl₃,100MHz)171.5,170.1,138.4,138.3,138.2,138.0,128.4,128.3,128.2,128.1,127.8,127.7,127.6,127.5,127.4,99.6,98.8,79.6,78.1,75.2,75.1,74.9,74.6,74.4,73.4,73.3,72.0,71.9,71.8,70.6,70.4,70.1,70.0,69.9,69.3,69.1,68.7,67.4,66.7,59.6,39.2,37.2,31.9,29.8,29.7,29.6,29.5,29.4,25.7,22.7,21.1,14.1.IR(纯膜,cm^-1):2922,2853,1743,1454,1365,1235,1099,1058,1028,737,698.HRMS(ESI)m/z：C₂₃₀H₂₉₆N₄O₅₂[M+H]⁺的计算值：3946.0641。实测值：3946.0631。

将该中间体(24mg,4μmol)溶解在0.5mL无水甲醇中，并加入催化剂碳酸钾K₂CO₃。将反应混合物在室温搅拌，直到新产物出现(DCM/MeOH,95/5,v/v)。然后用树脂Amberlite IR120氢形式(H⁺)淬灭溶液，直到达到酸性的pH(约≈4-5)。将树脂与甲醇一起过滤，并在减压下浓缩滤液。将残余物直接用在氢解步骤中。在氩气氛下，向溶解在0.5mL无水甲醇中的先前粗制物中，加入Pd/C20％(5mg)。将得到的混合物在氩气氛下脱气30分钟。然后，使它处于1大气压的氢气氛下过夜。将最终的混合物与甲醇一起穿过硅藻土(Celite)垫过滤，并在减压下浓缩滤液。TLC分析(DCM/MeOH,9/1,v/v)揭示新产物的出现和起始原料转化成一种产物。然后用树脂Amberlite IR120氢形式(H⁺)淬灭残余物，直到达到酸性的pH(约≈4-5)。将树脂与甲醇一起过滤，并在减压下浓缩滤液。在Sephadex G25上纯化残余物，将柱用甲醇洗脱，得到作为黄色油的化合物TriDiMan_C246(13mg,经2步97％)。¹HNMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)5.04(s,3H),4.90(s,3H),3.78-3.71(m,14H),3.62-3.48(m,76H),3.31(t,6H,J＝4.8Hz),2.37(t,6H,J＝5.6Hz),2.10(t,2H,J＝7.6Hz),1.29-1.14(m,44H),0.82(t,3H,J＝6.0Hz)。¹³CNMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)172.7,169.1,101.8,100.2,81.0,80.6,76.0,75.7,75.0,74.7,74.4,72.6,72.5,72.1,71.9,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.1,70.7,70.5,70.2,69.1,68.9,68.7,68.1,68.0,63.1,62.2,40.5,37.6,36.1,35.7,33.1,30.8,30.7,30.0,29.6,23.7,14.5.IR(纯膜,cm^-1):3408,2924,2853,1716,1647,1404,1195,1128,1042,1013,770,696,642,576.HRMS ESI m/z：C₉₈H₁₈₂N₄O₄₉[M+2H]²⁺的计算值：1102.6069。实测值：1102.5831。

●用荧光染料Alexa Fluor633标记的三甘露糖苷5-AF的制备

将化合物TriMan_C245(2mg,8.310^-4mmol,1当量)和NHS-AlexaFluor633(0.1mg,mmol,0.1当量)溶解在0.1mL水中。将催化量的DMAP加入溶液中，并将反应混合物在暗处搅拌过夜。然后使用精确体积的水在Sephadex G25柱上纯化溶液。首先洗脱的级分对应于AlexaFluor633标记的三甘露糖苷5-AF。首先，进行UV滴定来得到NHS-Alexa633的校正曲线。然后通过UV来滴定从Sephadex纯化的级分，并确定荧光染料的固定百分比：通过该方法评价出1％的值。

●Man _insatC24 的制备

根据关于Man_C11的制备描述的相同操作，但是用10,12-二十五碳二炔酸替代月桂酸，制备Man_insatC24。

¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.70(d,1H,J＝1.2Hz),3.90(s,2H),3.75-3.72(m,4H),3.63-3.45(m,26H),3.36-3.25(m,4H),2.16-2.08(m,6H),1.51-1.19(m,32H),0.79(t,3H,J＝6.8Hz)。

¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)176.5,172.8,101.8,78.0,77.9,74.6,72.6,72.2,72.0,71.7,71.6,71.5,71.4,71.3,71.2,71.1,70.7,70.6,70.5,68.7,67.8,66.5,63.0,40.3,40.2,37.1,33.1,30.8,30.7,30.6,30.3,30.2,30.1,30.0,29.9,29.8,29.6,27.0,23.4,19.7,14.5。

IR(纯膜,cm^-1):3366,2925,2855,1654,1541,1507,1458,1101,669,650。

R_f:0.57(DCM/MeOH:7/3,v/v)。

MS ESI m/z[M+K]⁺:942。

●TriMan_insatC24 的制备

根据关于TriMan_C24的制备描述的相同操作，但是用10,12-二十五碳二炔酸替代二十五酸，制备TriMan_insatC24。

¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.64(d,3H,J＝1.6Hz),3.70-3.64(m,12H),3.57-3.40(m,60H),3.31(t,3H,J＝8.4Hz),3.26(t,3H,J＝4.4Hz),2.37(t,6H,J＝6.4Hz),2.11-2.06(m,6H),1.44-1.09(m,32H),0.74(t,3H,J＝6.0Hz)。

¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)174.7,168.9,101.8,78.0,77.9,74.6,72.6,72.2,71.6,71.4,71.3,70.4,70.2,69.6,68.7,68.6,67.8,63.0,62.0,41.9,40.9,37.1,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.3,302,30.1,29.9,29.6,27.2,23.8,19.7,14.4。

IR(纯膜,cm^-1):3353,2924,1716,1636,1350,1182,1095,1035,1009,837,669。

R_f:0.18(DCM/MeOH:90/10,v/v)。

HRMS ESI m/z：C₈₀H₁₄₄N₄O₃₄[M+H]⁺的计算值：1705.9735。实测值：1705.9759。

●TriDiMan _insatC24 的制备

除了以下方面以外，根据与用于制备TrDiMan_C24的操作类似的操作，制备DiMan_insatC24：

-用10,12-二十五碳二炔酸替代二十五酸，和

-在与10,12-二十五碳二炔酸偶联之前，用乙酰基替代化合物33的苄基，从而得到化合物108(如图3E所示)。

¹H NMRδ(ppm)(MeOD,400MHz)4.87(s,3H),4.73(s,3H),3.64-3.50(m,14H),3.46-3.20(m,76H),2.97-2.93(m,6H),2.33(t,6H,J＝6.8Hz),2.09-1.96(m,6H),1.08-1.05(m,32H),0.66(t,3H,J＝6.8Hz)。

¹³C NMRδ(ppm)(MeOD,100MHz)173.7,168.8,104.2,101.2,80.6,80.4,75.1,74.7,72.5,72.2,72.1,71.9,71.8,71.7,71.6,71.4,69.4,69.1,68.9,68.7,68.6,68.0,63.2,63.1,42.2,37.0,34.8,33.7,33.1,30.8,30.7,30.6,30.5,30.4,30.2,29.5,28.1,27.0,26.0,23.7,19.7,14.4。

IR(纯膜,cm^-1):3353,2924,1716,1636,1350,1182,1095,1035,1009,837,669

-临界胶束浓度(CMC)的确定和颗粒的尺寸

使用Zetasizer Nano ZS系统(Malvern Instruments)，在水中测量糖脂的胶束的流体动力学直径。使用芘作为外部荧光探针来测量CMC，并如以前所述进行(Perino等人,2011)。简而言之，将一定范围的糖脂样品溶解在水(1ml)中，浓度范围为1.0-0.001mg/ml。在二甲亚砜中制备芘的储备溶液(1mM)，并加入每个样品中。使用Fluorolog荧光分光光度计(Jobin Yvon,Horiba)，在25℃测量芘的荧光发射。在374nm(I₃₇₄)和在383nm(I₃₈₃)确定荧光发射的强度，在339nm波长激发。计算比率I₃₇₄/I₃₈₃，并相对于糖脂浓度绘图。在2条直线的交叉点处确定CMC值。

-表面等离子体共振(SPR)

使用Biacore3000进行SPR实验。如下将人DC-SIGN(Lys62-Ala404，得自R§D Systems)固定在CM5传感器芯片(GE-Healthcare,Uppsala,瑞典)上：将70μL DC-SIGN(50μg/ml的在甲酸盐缓冲液(pH4.3)中的溶液)注射到用N-乙基-N’-二甲基氨基丙基碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化的表面上，这产生大约8000RU的信号，随后注射20μL乙醇胺盐酸盐(pH8.5)，以饱和基质的游离活化位点。用含有0.005％表面活性剂P20和5mM CaCl₂的HEPES缓冲盐水(10mM HEPES,150mM氯化钠,pH7.4)作为运行缓冲液，进行生物传感器测定。以20μL/min的恒定流速，在25℃进行所有结合实验。将溶解在运行缓冲液(0.39-50μM)中的不同化合物注射3min，继之以3min的解离阶段。在每个实验以后，通过注射10μL的0.5M EDTA(pH8.0)，再生传感器芯片表面。用EDC/NHS活化并用乙醇胺去活化的简单通道用作对照。使用BIAeval4.1软件计算动力学参数。使用简单的Langmuir binding模型(含单独的k_a/k_d(k_on/k_off))进行分析。从对照通道和从空白缓冲液注射减去应答信号以后，得到特异性结合曲线。通过相对于理论模型(Langmuir结合1:1)的残基分布的卡方值和随机性，判断与每个模型的拟合。

-细胞系

MAGI-CCR5细胞是表达CXCR4和CCR5共受体的HeLa-CD4-LTR-LacZ细胞(得自NIH AIDS Research and ReferenceProgram,Julie Overbaugh博士(Chackerian,等人,1997))。将HEK293T细胞用于HIV-1生产。将MCF-7细胞用于生存力试验。在补充了庆大霉素和10％(v/v)热灭活的胎牛血清(FBS)的Dulbecco氏改良的伊格尔培养基(DMEM；Lonza)中在37℃和5％CO₂下培养这些细胞系。

在含有10％FBS的Glasgow MEM(Gibco)中在37℃培养BHK-21仓鼠肾细胞。在补充了5％FBS和10％胰蛋白胨的Leibovitz L15培养基(Gibco)中在22℃在没有CO₂存在下培养C6/36白纹伊蚊(Aedesalbopictus)细胞系，并在5％CO₂中在28℃感染。

-人单核细胞衍生的树突细胞的制备

从French Blood Bank(Etablissementdu Sang,Strasbourg,法国)得到淘选的人单核细胞。为了制备单核细胞衍生的树突细胞，在补充了10％FBS、庆大霉素、50ng/ml重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF；ImmunoTools)和10ng/ml重组人白介素-4(rhIL-4；ImmunoTools)的RPMI1640培养基(Lonza)中在37℃和5％CO₂下培养单核细胞，并在第3天重新添加细胞因子。在第5天收获细胞，并通过流式细胞计量术在FACS Calibur流式细胞计(Beckton-Dickinson)上表征特异性的细胞标志物表达(CD1a,DC-SIGN)，并用CellQuest Pro软件(BD Biosciences)进行分析。

-细胞生存力测定

通过监测线粒体脱氢酶的活性，评估甘露糖苷糖脂对细胞生存力的影响，其中使用MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物)比色测量操作，随后将MTT还原为MTT甲臢。简而言之，与单独培养基(阳性对照)、0.1％DMSO或阿密妥(30mM；阳性对照)一起，用不同浓度的化合物(0.1％DMSO)处理铺板在96-孔培养板中的汇合的MCF-7细胞。24h以后，加入在细胞培养基中的MTT溶液(300μg/mL)在37℃保持2小时。然后除去培养基，并将甲臢晶体溶解在100μL DMSO中。使用微量培养板读数器(BioTek EL808)，在595nm通过比色测量法确定得到的溶液的光密度。在该测定中，对照活细胞具有100的生存力指数，而暴露于细胞毒性化合物的细胞的生存力指数小于100。为了评价甘露糖苷糖脂对原代人细胞的影响，用指定浓度的化合物处理DC，并在37℃温育24h。将细胞再悬浮于PBS中，并在通过流式细胞计量术分析之前加入Sytox Red死细胞染色剂用于633nm激发(20nM；Invitrogen)。

-流式细胞计数分析

使用特异性抗体和它们的对应同种型对照(得自BD-Pharmingen)：CD1a-别藻蓝蛋白(APC)(HI149)、CD209/DC-SIGN-PerCP-Cy5.5(DCN46)，在FACS缓冲液(1％的FBS在PBS中的溶液)中在4℃确定细胞标志物(CD1a,DC-SIGN)的表达20min。

-在TriMan _C24 和HIV-1gp120之间的竞争测定

将人DC(1x10⁵/100μl)在96-孔微孔滴定板内在不含FBS的RPMI1640培养基中等分。为了评估HIV-1糖蛋白120的结合，将FITC-缀合的重组gp120HIV-1IIIB(ImmunoDiagnostics Inc,Woburn,MA,USA)加给细胞(终浓度为5μg/ml)，并在37℃温育45min。对于竞争测定，将细胞用甘露聚糖(100μg/ml终浓度)或TriMan_C24(100μM)在37℃预处理30min，随后与gp120-FITC一起在37℃温育45min。用HBSS缓冲液(Lonza)洗涤以后，在FACS Calibur流式细胞计上用CellQuestPro软件分析荧光强度的表达。

-共焦显微术

将人DC(1x10⁵/100μl RPMI培养基)在37℃暴露于Alexa633-标记的TriMan_C24(100μM终浓度)10min。在指定时，还加入转铁蛋白-Alexa488(Invitrogen)在37℃保持10min。然后将细胞洗涤，并用4％低聚甲醛在室温固定15min。将细胞核用DAPI(1μg/ml终浓度)标记5min。使用Prolong-Antifade(Molecular Probes)固定载玻片。用共焦显微镜(Zeiss LSM700)获取样品的图像，并用Adobe Photoshop分析图像。

为了观察对DC-SIGN的影响，将细胞保持不处理或在37℃暴露于TriMan(100μM终浓度)45min，用4％低聚甲醛在室温固定15min，洗涤，用0.1％Triton X-100在20℃渗透化处理3min，洗涤，并用抗-DC-SIGN第一单克隆抗体克隆111H2(Canard,等人,2011)标记，随后用第二FITC-标记的抗-小鼠-IgG(Southern Biotech)标记。将细胞核用DAPI标记。如上固定和处理载玻片。

-HIV-1生产

将HIV-1NL4-3(X4染色剂)和NL4-3R5-向性形式(Schaeffer,等人,2004)的分子克隆转染进HEK293T细胞中，并在48h以后从上清液收获病毒。使用用于沉淀DNA的磷酸钙进行所有转染。基于它们的p24Gag含量(使用Innotest HIV抗原mAb试剂盒(Innogenetics)在酶联免疫吸附测定(ELISA)中测量)，将病毒储备物标准化。用指示剂MAGI-CCR5细胞系控制储备物的病毒侵染性，并通过光学显微术计数蓝色细胞。

-HIV-1反式感染测定

在水中系列稀释Man_C1、Man_C17(比较)和本发明的化合物(Man_C24、Man_C17、TriMan_C24、TriDiMan_C24、TriMan_insatC24和Man_insatC24)。在含有10％FBS的RPMI1640培养基中，将人DC(1x10⁵/200μl)用不同浓度的化合物或甘露聚糖(Sigma)或单独培养基在37℃预处理45min，然后用HIV-1(100ng p24Gag)感染3h。通过3次洗涤，除去多余的游离病毒和分子。然后将DC与MAGI-CCR5细胞(1x10⁵)一起在37℃共培养，铺板在48-孔板中。2天后，在β-半乳糖苷酶测定中定量MAGI-CCR5细胞的病毒感染，并通过光学显微术计数蓝色细胞。

-IC ₅₀ 确定

通过每种化合物的系列稀释，确定IC₅₀。将反式感染测定重复最小3次，并使用Kaleidagraph确定IC₅₀。

-登革病毒(DV2)生产.

将质粒pDV2品系16681(5μg)(E.Harris博士赠送,University ofCalifornia,Berkeley,USA)用XbaI线性化，用苯酚-氯仿提取，用乙醇和NaCl沉淀，并再悬浮于不含RNA酶的水中。通过体外转录生产RNA，使用T7RiboMax大规模RNA生产系统(Promega)用其它7mG(ppp)ARNA Cap Structure Analog(New England BioLabs)根据生产商的说明书在50μl反应物中进行。将混合物在37℃温育4h。将它不经进一步纯化地用于在6-孔板中转染BHK-21细胞(10⁶个细胞/孔)，其中使用Lipofectamine RNAiMax试剂盒(Invitrogen):将在Opti-MEM(200μl)中的RNA混合物(50μl)加入到在Opti-MEM(200μl)中的Lipofectamine(50μl)中，温育20min，并加给10⁶细胞。3h以后，除去上清液，并在L15完全培养基中培养细胞。在第3、4和5天，收集上清液，离心以除去细胞，并在-80℃储存等分试样。

通过用得自BHK细胞的病毒上清液进行感染，在培养于28℃的C6/36蚊子细胞中生产DV2。每2天收集C6/36上清液直到第16天，并在-80℃储存等分试样。

-化合物对DV2感染的影响

在水中系列稀释本发明的化合物(TriMan_C24,TriMan_insatC24)。在48-孔平板中在不含FBS的RPMI1640培养基中将人DC(2.5x10⁵/200μl)用不同浓度的化合物或单独培养基在37℃预处理30min。以1.0的感染复数，将它们在37℃暴露于DV-2保持2h。将细胞洗涤并在RPMI完全培养基中(条件1)或在含有试验化合物(TriMan_C24,TriMan_insatC24)的完全培养基中(条件2)培养。48h以后，滴定上清液，并对细胞进行病毒抗原的细胞内检测。将DC用4％(v/v)低聚甲醛固定，并用0.1％(v/v)Triton X-100在室温渗透化处理3min。洗涤以后，将它们用小鼠抗-DV2型单克隆抗体(3H5.1,Millipore)标记，并用APC-缀合的大鼠抗-小鼠IgG1染色。使用Cell Quest Pro软件，通过流式细胞计量术(FACSCalibur,Becton Dickinson)分析细胞的荧光强度。

-DV2滴定

使用如所述的基于流式细胞计量术的测定(Lambeth等人,2005)，滴定细胞上清液中的病毒生产。将细胞固定，并用0.1％Triton X-100在室温渗透化处理5min。洗涤以后，将它们用小鼠抗-DV2型单克隆抗体(3H5.1,Millipore)标记，并用APC大鼠抗-小鼠IgG1(BDPharmingen)染色，用于确定病毒包膜蛋白的细胞内表达。

b.结果

-本发明的化合物的溶解度、临界胶束浓度(CMC)和细胞毒性

通过简单搅拌，将所有合成的本发明的化合物溶解在水中。如通过人细胞系上的生存力测定和通过DC的死细胞染色所证实的，在低于125μM(对于不饱和的化合物)和至少高达500μM(对于饱和的化合物)的浓度，这些分子没有表现出对细胞的细胞毒性。

当以0.5mg/ml将化合物溶解在水中时，分子Man_C17、Man_C24和TriMan_C24能够自己组构成胶束，临界胶束浓度(CMC)分别为112、97和109μM(如在补充数据中所述)。这些胶束的流体动力学直径分别为17、17和39nm。令人瞩目的是，TriDiMan_C24和比较分子Man_C1和Man_C11不能形成胶束。

-对DC-SIGN CRD的结合亲和力

通过表面等离子体共振(SPR)，评估了甘露糖苷衍生物对DC-SIGN的糖识别结构域(CRD)的结合亲和力。

将CM5传感器芯片用DC-SIGN CRD官能化，并将递增浓度的不同化合物、甘露聚糖(作为阳性对照)和辛乙二醇(OEG)(作为阴性对照)注射到芯片表面上。确定每种评估的化合物的结合(kon)和解离(koff)速率常数和得到的解离平衡常数(Kd＝koff/kon)(参见下文表1)。如预期的，甘露聚糖有效地结合至表面，而OEG不能结合。Man_C1和Man_C11were不能结合，Man_C17以低亲和力结合，而Man_C24表现出在亚微摩尔范围内的最佳亲和力。这些数据指示，合成的甘露糖苷衍生物对DC-SIGN的亲和力与脂质链的长度有关，这提示，脂质部分以协作方式增强甘露糖极性头的结合能力。TriMan_C24和TriDiMan_C24也以在低微摩尔范围内的Kd有效地结合DC-SIGN,尽管它们没有呈现出胜过Man_C24的改善。关于包含2个邻近三键的、具有24个碳原子的烷基链的化合物TriMan_insatC24和Man_insatC24，也观察到相同的结果。这些体外数据一起证实，含有与1个、3个或6个甘露糖单元共价地连接的C₂₄-脂质链的甘露糖苷衍生物以良好亲和力结合DC-SIGN的CRD。

表1：通过SPR确定的甘露糖衍生物对DC-SIGN CRD的kon、koff和Kd(No＝没有结合).

化合物	Kon(M^-1.s^-1)	Koff(s^-1)	KD(μM)
				Man_C1	没有结合	-	-
Man_C11	没有结合	-	-
				Man_C17	低结合	-	769
Man_C24	273	0.09x10^-3	0.32
				TriMan_C24	295	0.94x10^-3	3.19
TriDiMan_C24	396	1.20x10^-3	3.25
				Man_insatC24	538	1.38x10^-3	2.57
TriMan_insatC24	2410	1.13x10^-3	0.47

-TriMan _C24 抑制gp120与DC的结合

TriMan_C24的抑制HIV-1gp120与在DC的表面上表达的DC-SIGN的相互作用的能力.通过在有细胞因子的混合液存在下人单核细胞的分化，制备未成熟的DC。通过流式细胞计量术，控制DC-SIGN的表达水平。如预期的，结果表明在DC上的高水平表达和在对照单核细胞上的不表达(图1A)。当将细胞与荧光地标记的gp120一起温育时，相对于与单核细胞的较低相互作用，观察到gp120与DC的强结合(图1B)。这表明，gp120主要结合在DC上表达的DC-SIGN，但是与其它细胞表面蛋白的相互作用也是可能的(Crublet,等人,2008；Vives,等人,2005)。

通过将DC与TriMan_C24或甘露聚糖一起预温育，随后加入gp120-FITC，进行竞争测定(图1C)。流式细胞计量术结果指示，TriMan_C24能够抑制gp120-FITC与DC的结合。尽管竞争在100μM浓度是不完全的，这些结果证实了TriMan_C24比甘露聚糖更好地干扰gp120与DC的结合的能力。

-TriMan _C24 诱导部分DC-SIGN内化

为了进一步洞察TriMan_C24与DC所表达的DC-SIGN的相互作用，通过将Alexa Fluor-633连接至甘露糖单元的羟基，制备荧光标记的TriMan_C24。将DC暴露于标记的TriMan_C24，并通过共焦荧光显微术显影。图像揭示预期的TriMan_C24在细胞膜处的结合和它在细胞的细胞质中的内化(数据未显示)。使用标记的转铁蛋白(网格蛋白介导的胞吞作用的一种特异性标志物)的其它实验(Hansen,等人,1992)证实了在初级内体中TriMan_C24和转铁蛋白之间的共局部化。这些数据一起表明，TriMan_C24结合细胞膜且可以经由网格蛋白介导的胞吞作用被DC内化。

此外，通过共焦荧光显微术，用荧光地标记的抗体观察DC-SIGN的表达。在未处理的细胞中，DC-SIGN大部分位于细胞膜处，这与以前的报道一致(Engering,等人,2002)。在暴露于TriMan_C24以后，在细胞膜处和在细胞质内都检测到DC-SIGN。尽管内化受体的量随观察到的细胞而变化，图像清楚地揭示，TriMan_C24会触发DC-SIGN内化(数据未显示)。通过在没有或有TriMan_C24存在下对DC的流式细胞计量术分析，评估了TriMan_C24对DC-SIGN细胞局部化的影响。结果证实，在细胞表面处表达的DC-SIGN以剂量依赖性的方式部分地减量调节；约20％的受体在100μM浓度被内化。这些数据一起证实TriMan_C24诱导的DC-SIGN的内化，后者可以促进HIV gp120与DC的结合的抑制。

-本发明的化合物抑制由DC介导的HIV-1反式感染

为了研究本发明的化合物抑制HIV-1反式感染的能力，我们选择感染人DC以便最佳地模仿体内条件。将人DC暴露于不同的化合物(即，甘露聚糖(对照)、Man_C1(比较)、Man_C11(比较)、Man_C17、ManC₂₄、TriMan_C24、TriDiMan_C24、Mani_nsatC24和TriMan_insatC24)在37℃保持45min，然后接种HIV-1(菌株R5和X4)3小时。充分洗涤以除去未结合的病毒粒子和甘露糖苷以后，再将DC与MAGI-CCR5细胞共培养。该操作允许通过检测β-半乳糖苷酶活性来精确定量报告细胞MAGI-CCR5细胞中的HIV-1复制。这些细胞表达与β-半乳糖苷酶报道基因融合的HIV长末端重复序列(LTR)的整合拷贝，并且表达CD4受体以及HIV-1R5和X4各自进入所需的CCR5和CXCR4共受体。在病毒进入导致病毒Tat表达和LTR活化以后，这些细胞允许在2天后定量HIV反式感染。

首先在有每种待测化合物存在下将DC暴露于HIV R5菌株，后者主要涉入粘膜感染(David,等人,2001；Grivel,等人,2011；Yamamoto,等人,2009)。尽管分子Man_C1和Man_C11没有呈现比甘露聚糖更好的抑制活性，Man_C17和Man_C24二者以剂量依赖性的方式减少反式感染(参见图2A)。该抑制是在高微摩尔范围内，具有120μM的IC₅₀。进一步进行剂量-响应实验，以对比Man_C24、TriMan_C24和TriDiMan_C24的抑制能力。当与Man_C24对比时，TriMan_C24表现出在亚微摩尔范围(0.5μM的IC₅₀)内的最高抑制活性。对于最高浓度，反式感染急剧下降，低至20％的残余水平(图2B)。令人感兴趣的是，这些发现揭示了TriMan_C24比在以前体外测定中与gp120竞争更好地抑制病毒传播的能力(参见上文)。TriDiMan_C24表现出在纳摩尔范围(38nM的IC₅₀)内的强效抑制活性，尽管令人惊讶地感染稳定在40％(图2C)。

不饱和的化合物(即Man_insatC24和TriMan_insatC24)也能够抑制DC的HIV-1R5反式感染：Man_insatC24和TriMan_insatC24阻断HIV-1R5反式感染低至15％和2％的残余水平，分别具有61μM和0.305μM的IC₅₀。令人瞩目的是，TriMan_insatC24在最高浓度几乎完全阻断HIV反式感染(参见图2E)。

还评估了TriMan_C24对HIV-1X4菌株的影响(参见图2D)。TriMan_C24也诱导HIV-1X4反式感染的抑制低至15％的残余水平，具有7μM的IC₅₀。这些发现证实，TriMan_C24能够抑制由DC介导的HIV菌株R5和X4的反式感染。

-本发明的化合物抑制DC的登革病毒感染

登革病毒(DV)是经由伊蚊属(Aedes)蚊子传播的黄病毒，并在蚊子叮咬以后导入皮肤中。树突细胞(DC)高度容许DV复制，因为DV在结合DC-SIGN以后会感染DC(Navarro-Sanchez等人；2003；Tassaneetrithep等人.2003)。因而，该病毒通过顺式感染来感染DC。

存在4种不同的登革病毒血清型(1-4)，并且我们已经使用2型DV(DV2)来进一步研究本发明的化合物(TriMan_C24和TriMan_insatC24)的抑制人DC感染的能力。将这些细胞用不同浓度的化合物或单独培养基在37℃预处理30min。然后将它们在37℃暴露于DV2持续2小时。洗涤细胞以除去多余的病毒粒子和化合物，并在没有(条件1)或有(条件2)试验化合物存在下进一步培养。48小时以后，对细胞进行病毒抗原的细胞内检测，并滴定上清液(未显示)。两种化合物都能够抑制DC的登革病毒感染。图3A和图3B分别显示了当在条件1下和在条件2下与不同浓度的TriMan_insatC24一起温育时感染的DC的百分比。直方图清楚地显示了TriMan_insatC24的保护作用，尤其是在条件2下，其中10、50和100μM的TriMan_insatC24分别能够将感染的DC的百分比降低至40％、20％和2％。

-本发明的化合物抑制DC中的HIV-1顺式感染和复制

将在含有10％FBS的RPMI1640培养基中的人单核细胞衍生的树突细胞(2x10⁵；300μL)用抗-DC-SIGN抗体(克隆AZND1，Beckman-Coulter；10μg/mL)或化合物TriMan_C24、TriMan_C24insat(10和100μM)在37℃预处理30min，然后接种HIV-1(R5菌株；100ngp24Gag)。3h以后，将细胞沉淀，并充分洗涤以除去多余的病毒和化合物。在感染后第2、4和7天，将细胞沉淀，取出上清液的等分试样并保持在-20℃，并将一半上清液用新鲜培养基替换。通过酶联免疫吸附测定(ELISA,Innogenetics)测量培养物上清液中的p24Gag水平，监测病毒复制。结果显示在图5中。它清楚地显示，将DC与TriMan_C24和TriMan_C24insat一起预温育会减少HIV R5复制的量。如在登革病毒的情况中所示，本发明的化合物也可以干扰HIV顺式感染。申请人进一步证实，本发明的化合物能够阻止HIV对除了DC以外的细胞系的感染(数据未显示)。

c.讨论

自从AIDS大流行病开始以来，现在存在32种被批准用于治疗的抗逆转录病毒药物。它们都靶向病毒的位点，诸如进入、反转录、整合和成熟(De Clercq,2007；Flexner,2007)。它们的缺点是病毒诱导的抗药性和药物诱导的副作用。现在致力于一种补充方案来寻找能够阻止粘膜感染和传播的抑制剂。另外，靶向宿主细胞的策略也会阻止病毒突变和抗药性。在登革病毒感染(其可能导致登革热、登革出血热(DHF)或登革休克综合征)的情况下，目前不可得到特异性的抗病毒药物或疫苗。适当的支持性医护和治疗仅会控制它的发病率。据估计，全世界的发病率是每年5000-10000万例登革热和数十万例DHF，其中DHF的致死率为约5％。

在这方面，本发明提供了包含脂质尾巴的新甘露糖苷衍生物，所述脂质尾巴能够与DC-SIGN的细胞外结构域相互作用，如通过表面等离子体共振(SPR)分析所证实的。一个甘露糖单元(诸如在Man_C24中)对于与DC-SIGN CRD的有效相互作用而言是足够的，具有在亚微摩尔范围内的Kd。脂质链的长度和该分子的结合亲和力之间的关联凸显了脂质部分在辅助甘露糖极性头实现最佳结合中的作用。体外SPR数据与HIV-1反式感染结果相关联，因为具有短脂质链的分子(Man_C1和Man_C11)不能结合DC-SIGN和充当抑制剂。C₁₇-链表现为活性的最小长度。尽管Man_C17和Man_C24表现出不同的体外亲和力，它们都能够在类似程度上抑制反式感染。

还证实，本发明的化合物(TriMan_C24和TriMan_insatC24)能够抑制登革病毒对DC的直接感染。具体地，当在DC感染之前和过程中使用TriMan_insatC24时，它能够在2天后抑制DC感染，具有在低微摩尔范围(低于10μM)内的IC₅₀(参见图3B)。

用本发明的化合物得到的结果是惊人的，因为以前的研究提示，高甘露糖结构(诸如树枝状聚合物的高甘露糖结构)是得到对DC-SIGN的高亲和力所必需的。

一些本发明的化合物(Man_C17、Man_C24和TriMan_C24)具有在水性介质中自己组构成胶束的性质，具有约100μM的CMC。但是，证实了本发明的化合物能够在低于它们的CMC的浓度抑制病毒反式感染。在这方面，注意到TriDiMan_C24没有形成胶束。

这样的结果强烈地提示，本发明的化合物能够作为单个分子发挥它们的生物活性，无需自装配成胶束。换而言之，本发明的化合物的生物活性(即，它们对DC-SIGN的亲和力，它们的与gp120竞争DC-SIGN结合的能力，和它们的抑制DC的HIV-1反式感染和登革病毒顺式感染的能力)可以源自它们的脂质链和它们的甘露糖部分之间的协同作用(而不是它们构造成胶束)。

令人瞩目的是，在容易且有效的步骤中合成本发明的化合物。它们是水溶性的，且不会呈现体外细胞毒性。

考虑到上述的实验测定，本发明的化合物(和尤其是TriMan_C24)可以通过不同的补充机制影响HIV反式感染。最可能的假设依赖于屏蔽策略，其中TriMan_C24与DC细胞膜处的DC-SIGN的结合会阻止HIV-1经由gp120向该受体的附着。此外，来自细胞表面的DC-SIGN的部分减量调节可以增强TriMan_C24保护作用。也可以假定TriMan_C24对病毒颗粒的直接影响。精确的抑制机制有待研究。

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Claims

1.用作药物的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或酯

其中

-M₂-Q₂和M₃-Q₃任选地存在，

-M₁选自：甘露糖基、二甘露糖基和三甘露糖基，

-M₂和M₃独立地选自：甘露糖基、二甘露糖基、三甘露糖基和具有至多800g/mol^-1的分子量的治疗剂部分、优选抗感染剂部分，

-Q₁、Q₂和Q₃独立地选自包含至少一个-(R₈O)_n-部分的基于寡醚的隔离物，其中R₈是直链或支链C₁-C₄烷基，且n是2-10的整数，

2.用作药物的根据权利要求1所述的化合物，其中R₁选自：

(i)-(CH₂)_pCH₃，其中p是16-29的整数；

3.用作药物的根据权利要求2所述的化合物，其中：

R₁是-(CH₂)_p-K-(CH₂)_q-M-(CH₂)_r-CH₃，其中K和M是C≡C且q是0。

4.用作药物的根据权利要求1-3中的任一项所述的化合物，其中M₁、M₂和M₃独立地选自：Manα、Manα(1->2)Manα、Manα(1->3)Manα、Manα(1->4)Manα和Manα(1->6)Manα。

5.用作药物的根据权利要求1-4中的任一项所述的化合物，其中Q₁、Q₂和Q₃独立地选自式(II)的基团：

-W-(O-CH₂-CH₂)_a-(X’-(O-CH₂-CH₂)_d)_b-(II)，其中：

-W选自-NH-(CH₂)_f-、-O-(CH₂)_f-和-S-(CH₂)_f-，其中f是1-5的整数，

-a是2-10、优选2-5的整数，

-b是0或1，

-d是2-10、优选2-5的整数，且

-X’是-NH-C(O)-(CH₂)_e-或-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数。

6.用作药物的根据权利要求5所述的化合物，其中：

-M₂-Q₂和M₃-Q₃不存在，且

-接头是-O-C(O)-、-C(O)O-、-NH-C(O)-或-C(O)-NH-。

7.用作药物的根据权利要求5所述的化合物，其中：

-M₂Q₂和M₃Q₃存在，且与M₁-Q₁相同，

-接头是

其中

-R₆是-NH-C(O)-或-O-C(O)-，且

-R₃、R₄和R₅独立地选自-NH-C(＝O)-(CH₂)_n-O-和-O-C(＝O)(CH₂)_n-O-，n是1-10的整数。

8.用作药物的根据权利要求6所述的化合物，所述化合物选自式(IIIa)的化合物

其中

-R₂是H或α-甘露糖基残基，

-R₁如在权利要求1-3中的任一项中所定义，

-a是2-10、优选2-5的整数，且

-d是2-10、优选2-5的整数。

9.用作药物根据权利要求7所述的化合物，所述化合物选自式(Va)的化合物：

其中：

-R₂是H或α-甘露糖基残基，

-R₁如在权利要求1-3中的任一项中所定义，且

-a是1-10、优选1-5的整数。

10.用作药物的根据权利要求8或9中的任一项所述的化合物，所述化合物选自：

11.用于治疗或预防感染性疾病的根据权利要求1-10中的任一项所述的化合物。

12.用于治疗或预防由选自以下的病原体造成的感染性疾病的根据权利要求1-10中的任一项所述的化合物：结核分枝杆菌、幽门螺杆菌、白假丝酵母、利什曼原虫属种、埃博拉病毒、马尔堡病毒、人免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、登革病毒、西尼罗病毒、奥拉病毒、单纯疱疹病毒、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒、麻疹病毒、禽H5N1流感病毒和巨细胞病毒。

13.一种药物组合物，其包含：(i)如在权利要求1-10中的任一项中定义的化合物作为活性成分、(ii)至少一种药学上可接受的赋形剂和(iii)任选的治疗剂。

14.用于粘膜施用的根据权利要求13所述的药物组合物。

15.根据权利要求13或14所述的药物组合物，其中所述任选的治疗剂是抗HIV剂。

16.如在权利要求1-10中的任一项中定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。

17.具有下式(III)的根据权利要求16所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：

其中：

-接头是双官能的接头，其具有1-20个碳原子的主链且包含至少2个独立地选自N、S和O的杂原子，

-M₁是甘露糖基或二甘露糖基，

-X’是-NH-C(O)-(CH₂)_e-或-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数，

-a是2-10、优选2-5的整数，

-b＝1，且

-d是2-10、优选2-5的整数。

18.具有下式(V)的根据权利要求16所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物

其中：

-R₁是C₁₇-C₃₀饱和的或不饱和的直链烷基链，其任选地被一个或多个C₁-C₃烷基基团取代，

-M₁是甘露糖基或二甘露糖基，

-X’₁、X’₂和X’₃独立地选自-NH-C(O)-(CH₂)_e-和-O-C(O)-(CH₂)_e-，其中e是1-4的整数，

-b1、b2和b3独立地选自0和1。

19.用如在权利要求1-10中的任一项中定义的化合物或用如在权利要求13-15中的任一项中定义的药物组合物涂布的避孕套。