JP2015200674A - 粒子の検出・特徴付のための装置 - Google Patents
粒子の検出・特徴付のための装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015200674A JP2015200674A JP2015134994A JP2015134994A JP2015200674A JP 2015200674 A JP2015200674 A JP 2015200674A JP 2015134994 A JP2015134994 A JP 2015134994A JP 2015134994 A JP2015134994 A JP 2015134994A JP 2015200674 A JP2015200674 A JP 2015200674A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- particles
- sensor
- pixel
- peq
- stable equilibrium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000002245 particle Substances 0.000 title claims abstract description 216
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 116
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 46
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 claims abstract description 37
- 238000004720 dielectrophoresis Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 claims abstract 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 35
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 26
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims description 19
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 claims description 9
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 6
- 230000005653 Brownian motion process Effects 0.000 claims description 3
- 238000005537 brownian motion Methods 0.000 claims description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 3
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 abstract description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 81
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 13
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 12
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NILQLFBWTXNUOE-UHFFFAOYSA-N 1-aminocyclopentanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CCCC1 NILQLFBWTXNUOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 3
- 238000007562 laser obscuration time method Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000011805 ball Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000011192 particle characterization Methods 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 description 2
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 2
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 2
- 101100504411 Arabidopsis thaliana GH3.6 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 238000013528 artificial neural network Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000009028 cell transition Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003989 dielectric material Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000005370 electroosmosis Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000008570 general process Effects 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 238000001566 impedance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000001465 metallisation Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000011807 nanoball Substances 0.000 description 1
- 208000020588 necrotizing soft tissue infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002353 niosome Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000513 principal component analysis Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/36—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of biomass, e.g. colony counters or by turbidity measurements
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
【解決手段】力場は、粒子(固体、液体、または気体)の安定平衡点のセットによって特徴付けられる、正もしくは負の誘電泳動の場、電気泳動の場、または電気流体力学的運動の場である。力場を、非アクティブ化・アクティブ化のステップを繰り返し、光センサにより階調レベルを測定することにより、力場平衡点が粒子によって占有されている事を検出する。
【選択図】図4
Description
1.単一粒子のカウントまたは定量化
2.識別および/または特徴付け
3.位置特定
粒子を移動させるための場を、基板上に提供された電極(EL)のアレイを通じて生成するための方法として、既知の技術にしたがった様々な方法が挙げられる(図1)。一般に、カバー(LID)が使用される。これは、電極であってよく、液体懸濁液に含まれた状態の粒子(BEADS)を一般に内部に有するマイクロチャンバの範囲を定める。様々な力の様子が図1に示されている。誘電泳動(DEP)の場合、印加される電圧は、加算符号(+)で示された同相周期電圧(Vphip)と、減算符号(−)で示された異相周期電圧(Vphin)である。異相電圧とは、180度位相が異なる電圧を意味する。場は、粒子に作用する力を生成し、粒子は、平衡点(CAGE)に引き付けられる。負のDEP(NDEP)の場合、もしカバー(LID)が導電性の電極であるならば、既知の技術にしたがって、閉じられた力のケージを生成することが可能である。この場合に、もし隣接する電極が逆位相Vphip(+)につながれなおかつカバー(LID)が位相Vphin(−)につながれているならば、平衡点(CAGE)は、Vphin(−)につながれた各電極に対応して提供される。このような平衡点(CAGE)は、通常、電極から隔てられて液体中に存在するので、粒子(BEAD)は、定常状態において、浮遊している。正のDEP(PDEP)の場合、平衡点(CAGE)は、通常、電極を提供された表面に対応して位置しており、粒子(BEADS)は、定常状態において、表面に接触している。PDEPの場合、PDEPの平衡点は、電場の極大に対応するので、カバーにさらなる電極を設ける必要がない。誘電泳動では、荷電粒子を異極性の電極へと引き付けるために、電極のアレイを使用することができる。電気流体力学的(EHD)運動の場合、電極の構成は、流れが最小の点へと粒子を追い立てる何らかの流れを生成する。EWODの場合は、誘電体を塗布された電極を含むカバー(LID)が一般に使用され、電極のマトリックスは、粒子(一般に空気中の液滴である)を引き付ける必要がある点において、カバーに対して異相の信号によって通電される。粒子をその上に存在させてはならない電極は、反対に、浮動状態にとどまる。EWODの場合は、電極のアレイの上方において空気中の液滴を操作することによって、カバーの代わりに一連のワイヤを使用することが可能である。
常に簡潔を期するため、以下では、電極を一体化されたフォトダイオードに入射する光パワーを検出可能にする光センサの場合についてのみ言及される。当業者ならば、以下で説明される方法および装置を、様々な場合に、光センサに代わるまたは光センサと組み合わせた一体型インピーダンス計センサの使用に合わせてどのように一般化するかが明らかである。
光センサの場合、一般に、暗視野(BF)タイプの照明の場合について言及される。この場合、照明は、センサに当たる。暗視野(DF)照明法、または蛍光に基づく方法もまた可能であり、本発明の目的の範囲内である。しかしながら、簡単を期するため、以下で扱われるどの方法でも取り上げられず、ここに記載されるにとどまる。
> 励起として発せられる放射の波長のために、フィルタ層(DFL)を使用する。
> 光センサ(PIXEL)が低い量子効率を有するような(すなわちその波長に対し比較的鈍感であるような)励起周波数を使用する。これは、例えば、比較的高い深さにおいてp−n接合を、そして好ましくはUV範囲内の波長の励起放射を使用することによって可能である。波長は、380nm未満であるとなお良い。
図12は、ケージ自体を移動させる必要なくどのケージが満で(少なくとも1つの粒子が封入されている)どのケージが空であるかを検出するための、本発明にしたがった方法の、考えられる一連のステップを示している。この方法は、電極への適用パターンがケージの移動を可能にしないほどに密集している場合にとりわけ適している。さらに、ケージを移動させるための回路がデバイス内に存在しない場合に好都合である。
1. (数秒程度から何分の数秒程度の時間に及ぶ)ケージの交互操作(アクティブ化または非アクティブ化)によって、そして(例えば100msなど何分の1秒程度から数十秒程度の時間に及ぶ)1つまたは複数の画像の感知によって、一連の画像が取得される(感知される)。
2. CAGE_IJに関連した各センサPIXEL_IJについて、一連の画像NIMGに関し、次式として定義される階調レベルの非正規化標準偏差(この具体的ケースではセンサに入射する光パワーに比例する)が計算される。
i. 力場(F)を非アクティブ化する。
ii. 非アクティブ化に続き、なおかつ非アクティブ化された場にある粒子が受ける沈降運動および/またはブラウン運動の力学の関数として選択される、少なくとも一つの時間間隔において、安定平衡点(PEQ)に関連した第1のセンサ(PIXEL_IJ)によって生成される階調レベル、および力場(F)の電流構成ゆえに絶対に粒子によって占有されえないような空間領域に関連した第2のセンサ(PIXEL_REF)によって生成される階調レベルを測定する。
iii. 力場(F)を再びアクティブ化する。
iv. i)からiii)までのステップを、基準とみなされる第2のセンサ(PIXEL_REF)において測定される階調レベルの値の分散量が漸近値に向かう収束速度と実質的に同程度の回数にわたって繰り返す。
v. 想定される時間的に一連の測定において、とある平衡点(PEQ)に関連した第1のセンサにおいて検出される階調レベル値の標準偏差が既定の閾値(THR)を上回る結果となる場合に、そのような平衡点を粒子によって占有されているものとして分類する。
図10は、満のケージを、その運動と階調レベルの静的値の解析とを通じて検出するための、本発明にしたがった一連の操作ステップを示している。
1. 第1の時点(t0)において、ケージ(CAGE)は、対応する初期の光センサ(PIXEL_STA)のセット上に粒子(BEADS)を配されている。この構成に対応する階調レベルを有する画像が取得される。
2. 続く時点(t1)において、ケージの運動に結び付いた過渡現象が終わると、粒子は、最終的な光センサ(PIXEL_TGT)に対応して自身を配置する。この構成に対応する階調レベルを有する新しい画像が取得される。
3. 時点1および時点2の画像に関連した階調レベルの差分画像が決定される。
4. 差分画像の絶対値が決定される。
5. 各ケージの開始位置および最終位置に関連したピクセル対(PIXEL_STA,PIXEL_TGT)についての階調レベル結果が決定される。
6. ステップ1〜4がNDIFF回にわたって繰り返され、ステップ5において決定された絶対変化に関連する各ケージに関する階調レベルが蓄積される。
7. ケージのアクティブ化/非アクティブ化による分類について上述されたのと同様に、取得された全ての差分画像NDIFFについて、この場合は、確実に空のセンサ(ピクセル)(例えばケージのロウ間のピクセルなど)に対応する差の絶対値の平均および標準偏差を考慮して、分類の閾値THRが決定される。
i) 先ず、安定平衡点(PEQ)に関連した第1のセンサ(PIXEL_STA)によって生成される階調レベル、および力場(F)のこの第1の電流構成では絶対に粒子に占有されえないような空間領域に関連した基準センサ(PIXEL_REF)によって生成される階調レベルを測定する。
ii) 次に、第2の電流構成を付与するために、力場(F)を変更する。このとき、安定平衡点は、第1のセンサとは異なる第2のセンサ(PIXEL_TGT)に対応して移動される。
iii) 次に、第2のセンサ(PIXEL_TGT)によって生成される階調レベル、および力場(F)のこの第2の電流構成では絶対に粒子に占有されえないような空間領域に関連した基準センサ(PIXEL_REF)によって生成される階調レベルを測定する。
iv) 先行する時点において検出された階調レベル値の間の差(DIFF_IMG)を決定する。
v) ステップi)〜iv)を繰り返す。
vi) 安定平衡点(PEQ)を粒子に占有されたものと占有されていないものとに分類するために、示差階調レベル値を処理する。
図2は、ケージ自体の移動を通じてケージ中の粒子の存在を動的に検出するための方法のステップにおける波形を示している。
i) 粒子(BEADS)をそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移させることによって安定平衡点(PEQ)が移動されるように、力場(F)を変更する。
ii) 異なる安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって生成される階調レベルを、新しい平衡位置への粒子の沈降時間を大幅に上回る頻度で測定する。
iii) センサによって生成される階調レベルの測定の時間的進展の特性パラメータの測定を通じて、粒子が存在するかまたは欠如しているかの分類を行う。階調レベルは、例えば光センサの場合、入射する光パワーに基づいて生成される。
上述された方法によって、満のケージの数が決定される。本発明の狙いは、ケージ中の細胞をカウントするための方法を見いだすことにもある。これによって、想定される試料の体積がわかるうえ、細胞の濃度も得られる。
1. 細胞は、単位体積あたりに均一に分布される。この仮定は、試料が空のマイクロチャンバに注入される場合は全面的に立証される。反対に、予め緩衝材で満たされたマイクロチャンバに試料が注入される場合は、試料のフロープロファイルに結び付いた細胞密度の変化ゆえに、試料は、局所的にのみ均一である可能性がある。
2. ケージあたりの最大細胞数に結び付いた束縛は、無視することができる。
NCAGES=チップ(または想定される部分)内のケージの数
n=NCELLS=チップ(または想定される部分)内の細胞の数
として定義するものとする。ここで、「チップ」とは、電極ELのアレイによって形成されたセットを意図しており、これは、通常、センサPIXELとともに単一の多層チップ内に正確に一体化される。
p=1/NCAGES
である。
a) 電極(EL)のアレイによって生成される場(F)の中に存在している、いかなる粒子(BEAD)も含まない、以下ではケージとも称される安定平衡点(PEQ)の数(ECmeasure)が、センサによって測定される。
b) 粒子(BEAD)のカウント(NCELLS)が、安定平衡点(PEQ)の数(NCAGES)の対数といかなる粒子も含まない安定平衡点(PEQ)の測定数(ECmeasure)の対数との差の、安定平衡点(PEQ)の数(NCAGES)の対数と安定平衡点(PEQ)の数から1を引いた数(NCAGES−1)の対数との差に対する比率として決定される。
図3に示されるように、球(例えば図3(a))、ある種類の細胞(例えば図3(b)にあるようなK562)、または別の種類の細胞(例えば図3(c)にあるような赤血球)は、異なる寸法、形状、吸光度プロファイル、および屈折率を有するので、ケージにセンサの上を通らせることによって、それが満であるかどうかを検出するのみならず、本発明のさらなる一態様にしたがえば、もし粒子が存在する場合はその粒子の種類を特徴付けることが可能である。
第一近似として、移動速度は、誘電泳動移動度に比例し、v ∝ k・R2となる。したがって、第一近似としての階調レベルの変化の長さは、次式の通りである。
図7は、透明でない球、または上記の「レンズ」効果よりも吸光度の効果のほうが支配的であるような小細胞について期待される一般的な過程を示している。
図8は、ケージの移動に続く10μm、6μm、および3μmのポリスチレンの球の推移に際して検出された階調値の時間的進展を示している。
a. 上記粒子(BEADS)をそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移させることによって上記安定平衡点(PEQ)を移動させるように、力場(F)を変更する。
b. 粒子を含む異なる安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって検出可能な階調レベルを、新しい平衡位置への粒子の沈降時間を大幅に上回る頻度で測定する。
c. 粒子の性質を推定するために、階調レベル測定の時間的進展の特性パラメータを処理する。
i. 粒子に作用する場をアクティブ化する。
ii. 場を非アクティブ化し、入射する光パワーを測定する。
を交互に行うことによって実施される、あるいは、ケージ中の粒子の存在を動的に検出するためのものとして上述されたのと同じ好ましいシステムを使用して実施される。光パワーの測定の時間的進展のパラメータは、上述された内容に基づいて、
i. 力場(F)の変化と、光パワーの第1の変化との間の遅延(td)、
ii. 光パワーの一過性の変化の長さ(tw)、
iii. 光パワー値の正ピーク(Gpp)の振幅、および
iv. 光パワー値の負ピーク(Gnp)の振幅、
からなる群より選択される少なくとも1つのパラメータを含む。
本発明にしたがうと、単一集団の細胞をカウントするための方法論を、単一ケージ中の粒子を特徴付けるための方法論と組み合わせることによって、異種の粒子からなる試料の組成を決定することが可能である。
a. 上記粒子(BEADS)をそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移させることによって上記安定平衡点(PEQ)を移動させるように、力場(F)を変更する。
b. 粒子を含む異なる安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって検出可能な階調レベルを、新しい平衡位置への粒子の沈降時間を大幅に上回る頻度で測定する。
c. 関連のケージが空であるか、またはある種の粒子を含むかもしくはより多くの粒子を含むかを検出するために、各安定平衡点(PEQ)に関連した階調レベル測定の時間的進展の特性パラメータを処理する。
d. 各種の単一粒子をともなうケージの測定値(Pt_1_MEAS)および空のケージの測定値(EC_MEAS)により良く近似される、各種の粒子のカウント(NCELLSt)の組み合わせを数値的に決定する。
本発明にしたがうと、これまでに説明されてきた動的検出方法の解像度を高めるためには、より高い空間解像度によって特徴付けられるフォトダイオード(PIXEL_V1,…,PIXEL_VN)に関連した一連の電極(EL)を組み合わせる(図15)ことによって、粒子を様々な電極の上で順次移動させ、粒子の様々な断面を順次解析することが可能である。
こうして、ケージの移動速度の自動制御による操作の方法は、上述のように、細胞の推移検出の使用に基づくことが可能である。軌跡に沿った次のステップを直ちに開始させるため、(電極のアレイをともなう)チップ上で運動している細胞を有するケージについて、階調レベルの進化を監視するとともに、新しい平衡点への沈降遷移の終わりを検出することができる。異なる瞬間における異なる粒子の速度に時間を動的に適応させることによる、時間の最適化のほかに、このようなアプローチもまた、各細胞がブロックされたままにないように保証することができる。
図16には、水平方向の運動決定のためのセンサ(PIXEL_H)および垂直方向の運動決定のためのセンサ(PIXEL_V)の両方のセンサ(ピクセル)を有する装置の図である。このような装置は、ケージの移動速度の1つに統合されたかたちで実施される閉鎖制御によって粒子の操作を実現するのに有利である。この装置を使用すれば、1×1のケージによる水平移動も可能である。なぜならば、いかなる場合も、細胞/粒子は、2つの電極間に水平軸に沿って配されたセンサ(PIXEL_H)上を推移するからである。
細胞の蛍光検出および/または蛍光特徴付けを目的として、本発明にしたがったいくつかの好ましい実装形態が報告されている。これらの実装形態は、蛍光発光は通過させるが励起は軽減させるようなフィルタ素子を一体化されている。これらのフィルタ素子は、ダイクロイックフィルタの実現に適した屈折率を有する材料を薄膜状に堆積させるなどの、チップの実行よりも下流のプロセスステップによって、一体化することができる。フィルタ効果は、センサ(PIXEL)によって検出される励起帯中の光パワーの一部を軽減させることによって、センサ自体のダイナミックレンジに結び付けられた必要条件を減らすことができる。
装置は、解析対象となる各蛍光に合わせて(外部で)励起源がフィルタリングされ最適化されるという事実をうまく活用してもよいし、しなくてもよい。これは、デバイスに一体化されていないフィルタによって容易に実現することができる。これに加えて、あるいはこの代わりに、チップの蓋に、チップのピクセルごとに異なってもよいし異ならなくてもよい下位のダイクロイックフィルタに対応した励起フィルタリングの一部を一体化することも可能である。
上述された全ての方法において、光センサが使用される場合、粒子の検出または特徴付けのための信号は、照明のパワーに依存する。したがって、この種の変化は、検出される光パワーのレベルに、信号(粒子の存在および/または位置)に結び付かない何らかの変化を生じさせる可能性がある。これは、普通は問題にならないが、これらの方法は、このような変化を基準ピクセル(入射する光パワーが照明のパワーによってのみ影響される空のケージに確実に対応するピクセル)の平均検出に対して正規化された値を使用して補償することによって、性能を向上させる(精度を上げる、速度を上げる)ことが可能である。
上述された全ての方法において、インピーダンス計センサが使用される場合、粒子の検出および特徴付けのための信号は、粒子の懸濁培地の導電率および誘電率に依存し、これらは、ひいては、例えば温度、塩濃度、他の分子その他に依存する。したがって、これらの変化は、検出されるインピーダンスのレベルに、信号(粒子の存在および/または位置)に結び付かない何らかの変化を生じさせる可能性がある。これは、普通は問題にならないが、これらの方法は、このような変化を基準ピクセル(インピーダンスが懸濁培地の導電率および誘電率によってのみ影響される空のケージに確実に対応するピクセル)の平均検出に対して正規化された値を使用して補償することによって、性能を向上させる(精度を上げる、速度を上げる)ことが可能である。
これまでに説明されてきた方法および装置は、一般的な使用に関するものであり、複数の用途を見いだすことができる。本発明を限定しない例として、最も重要ないくつかの用途が挙げられる。
○ 血液試料を解析する:(例えば閉じられた誘電泳動ケージを使用している)チップ上に試料を導入することによって、赤血球は、占有されている全てのケージを第一近似としてカウントすることによって、その数をカウントすることができる(実際は、存在の可能性があるその他の細胞は非常に濃度が小さいので、通常必要とされる精度の場合は無視できる)。
○ Emochroma:血液中の細胞の数および種類を特徴付ける:この場合、存在する各単一細胞の正確な特徴付けを実施するための上述された方法が用いられ、その細胞を赤血球、血小板、リンパ球などに分類する。
○ 試料中に存在するバクテリアをカウントする:既知の量の試料を(閉じられたDEPケージを有する)チップ上に注入することによって、存在する全てのバクテリアが検出され、もし光センサによって検出される特性サインを通じて区別可能であるならば、必要に応じてバクテリアの種類が検出される。
○ 混合集団から、蛍光で標識された細胞を分離する/カウントする。この種の問題は、研究および診断の両方に広く普及している。
Claims (26)
- 電極(EL)のアレイによって生成され粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)に存在する可能性がある前記粒子(BEADS)の存在を検出するための方法であって、
i. 力場(F)を非アクティブ化するステップと、
ii. 非アクティブ化に続き、なおかつ非アクティブ化された場にある前記粒子が受ける沈降運動および/またはブラウン運動の力学の関数として選択される、少なくとも一つの時間間隔において、前記安定平衡点(PEQ)に関連した第1のセンサ(PIXEL_IJ)によって生成される階調レベル、および前記力場(F)の電流構成ゆえに絶対に粒子によって占有されえないような空間領域に関連した第2のセンサ(PIXEL_REF)によって生成される階調レベルを測定するステップと、
iii. 力場(F)を再びアクティブ化するステップと、
iv. i)からiii)までのステップを、基準とみなされる前記第2のセンサ(PIXEL_REF)において測定される階調レベルの値の分散が漸近値に向かう収束速度と実質的に同程度の回数にわたって繰り返すステップと、
v. 想定される時間的に一連の測定において、とある平衡点(PEQ)に関連した第1のセンサにおいて検出される階調レベルの値の標準偏差が既定の閾値(THR)を上回る結果となる場合に、そのような平衡点を粒子によって占有されているものとして分類するステップと、
を備える方法。 - 請求項1に記載の方法であって、
前記閾値(THR)は、粒子によって占有されえないような前記空間領域に関連した前記第2のセンサ(PIXEL_REF)において検出される階調レベル値の平均値を、前記第2のセンサ(PIXEL_REF)において検出される階調レベルの標準偏差値に比例する係数で増大させたものに相当することを特徴とする、方法。 - 電極のアレイ(EL)によって生成され粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)に存在する可能性がある前記粒子(BEADS)の存在を検出するための方法であって、
i) 前記安定平衡点(PEQ)に関連した第1のセンサ(PIXEL_STA)によって生成される階調レベル、および前記力場(F)の第1の電流構成では絶対に粒子に占有されえないような空間領域に関連した基準センサ(PIXEL_REF)によって生成される階調レベルを測定するステップと、
ii) 第2の電流構成を付与するために、前記力場(F)を変更するステップであって、前記安定平衡点は、第1のセンサとは異なる第2のセンサ(PIXEL_TGT)に対応して移動される、ステップと、
iii) 第2のセンサ(PIXEL_TGT)によって生成される階調レベル、および前記力場(F)の前記第2の電流構成では絶対に粒子に占有されえないような空間領域に関連した基準センサ(PIXEL_REF)によって生成される階調レベルを測定するステップと、
iv) 先行する時点i)およびiii)において検出された階調レベル値の間の差(DIFF_IMG)を決定するステップと、
v) ステップi)〜iv)を繰り返すステップと、
vi) 安定平衡点(PEQ)を粒子に占有されたものと占有されていないものとに分類するために、示差階調レベル値を処理するステップと、
を備える方法。 - 請求項3に記載の方法であって、
このような処理は、階調レベルの差の絶対値を決定するステップと、場(F)の前記第1および第2の電流構成では粒子に占有されえないような前記基準センサに関連した階調レベルの平均的変化を大幅に上回る変化を有するセンサに関連した平衡点を、占有されたものとして分類するステップと、を含むことを特徴とする、方法。 - 電極(EL)のアレイによって生成され粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)に存在する可能性がある前記粒子(BEADS)の存在を検出するための方法であって、
i) 前記安定平衡点(PEQ)を移動させ、前記粒子(BEADS)をそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移させるように、前記力場(F)を変更するステップと、
ii) 前記異なる安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって生成される階調レベルを、新しい平衡位置への前記粒子の沈降時間を大幅に上回る頻度で測定するステップと、
iii) 前記センサ(PIXEL_IJ)によって測定される階調レベルの時間的進展の少なくとも一つの特性パラメータの測定を通じて、粒子が存在するかまたは欠如しているかの分類を行うステップと、
を備える方法。 - 請求項5に記載の方法であって、
前記センサ(PIXEL_IJ)における階調レベルの測定の時間的進展の前記特性パラメータは、ピークツーピーク振幅を含むことを特徴とする、方法。 - 請求項6に記載の方法であって、
分類は、想定される力場(F)の構成では粒子によって占有されえないような基準センサにおける階調レベルのピークツーピーク測定を、前記基準センサの前記ピークツーピーク値の標準偏差に比例する係数で増大させることによって決定される、閾値との比較を通じて行われることを特徴とする、方法。 - 請求項1ないし7のいずれかに記載の方法であって、さらに、
存在を検出された粒子の総数をカウントするステップを備え、
前記カウントするステップは、統計的基礎に基づく推定方式によって、
i 電極(EL)のアレイによって生成される場(F)の中に存在する、いかなる粒子(BEAD)も含まない安定平衡点の数(ECmeasure)が、センサによって測定され、
ii) 粒子(BEAD)のカウント(NCELLS)が、安定平衡点(PEQ)の数(NCAGES)の対数といかなる粒子も含まない安定平衡点(PEQ)の測定数(ECmeasure)の対数との差の、安定平衡点(PEQ)の数(NCAGES)の対数と安定平衡点(PEQ)の数から1を引いた数(NCAGES−1)の対数との差に対する比率として決定される、
ように行われることを特徴とする、方法。 - 電極(EL)のアレイによって生成され粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)に存在する前記粒子(BEADS)を特徴付けるための方法であって、
i. 前記粒子(BEADS)をそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移させることによって前記安定平衡点(PEQ)を移動させるように、前記力場(F)を変更するステップと、
ii. 粒子を含む異なる安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって生成される階調レベルを、新しい平衡位置への前記粒子の沈降時間を大幅に上回る頻度で測定するステップと、
iii. 前記粒子の性質を推定するために、階調レベル測定の時間的進展の特性パラメータを処理するステップと、
を備える方法。 - 請求項9に記載の方法であって、
階調レベルの時間的進展の前記パラメータは、
i. 力場(F)の変化と、階調レベルの第1の変化との間の遅延(td)、
ii. 階調レベルの一過性の変化の長さ(tw)、
iii. 階調レベルの正ピーク(Gpp)の幅、および
iv. 階調レベルの負ピーク(Gnp)の幅、
からなる群より選択される少なくとも1つのパラメータを含むことを特徴とする、方法。 - 電極(EL)のアレイによって生成され粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)に存在する多様な種類(NTP)の前記粒子(BEADS)の数を、
i. 前記粒子(BEADS)をそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移させることによって前記安定平衡点(PEQ)を移動させるように、前記力場(F)を変更するステップと、
ii. 粒子を含む異なる安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって検出可能な階調レベルを、新しい平衡位置への粒子の沈降時間を大幅に上回る頻度で測定するステップと、
iii. 関連のケージが空であるか、またはある種の粒子を含むかもしくはより多くの粒子を含むかを検出するために、各安定平衡点(PEQ)に関連した階調レベル測定の時間的進展の特性パラメータを処理するステップと、
iv. 各種の単一粒子をともなうケージの測定値(Pt_1_MEAS)および空のケージの測定値(EC_MEAS)により良く近似される、各種の粒子のカウント(NCELLSt)の組み合わせを数値的に決定するステップと、
の実行を通じてカウントするための方法。 - 請求項5、9、または11に記載の方法であって、
前記安定平衡点(PEQ)は、前記粒子(BEADS)が複数のそれぞれのセンサ(PIXEL_IJ)に対応して推移されるように移動され、前記センサ(PIXEL_IJ)は、光センサであり、粒子の寸法を大幅に下回る空間部分に入射する光パワーを検出するようにシールドされることを特徴とする、方法。 - 請求項5、9、または12に記載の方法であって、
新しい平衡位置への前記粒子の沈降遷移の終わりを決定し、この測定から、前記安定平衡点(PEQ)の移動速度へと戻るために、粒子を含む前記安定平衡点(PEQ)の推移に関連したセンサ(PIXEL_IJ)によって検出可能な階調レベルの変化の過程が制御されることを特徴とする、方法。 - 請求項13に記載の方法であって、
前記沈降遷移の終わりでは、前記安定平衡点(PEQ)の新たな移動を生じさせるために、前記力場(F)の変化が起こされることを特徴とする、方法。 - 請求項1ないし11のいずれかに記載の方法であって、
前記センサは、光センサであり、前記階調レベルは、センサに当たる光パワーに相当することを特徴とする、方法。 - 請求項1ないし11のいずれかに記載の方法であって、
前記センサは、インピーダンス計センサであることを特徴とする、方法。 - 請求項1ないし16のいずれかに記載の方法であって、
前記センサ(PIXEL_IJ)によって検出される階調レベルの値の補償は、前記力場(F)の前記電流構成では粒子によって絶対に占有されえないような空間領域に関連した基準センサ(PIXEL_REF)の平均検出に正規化された値を使用して行われることを特徴とする、方法。 - 請求項1ないし17のいずれかに記載の方法であって、
階調レベルの前記測定は、前記力場(F)を一時的に非アクティブ化することによって行われることを特徴とする、方法。 - 請求項1ないし18のいずれかに記載の方法であって、
前記力場(F)は、一般に、正の誘電泳動、負の誘電泳動、エレクトロウェッティング・オン・ディエレクトリック、電気流体力学的フロー、および電気泳動より選択されることを特徴とする、方法。 - 粒子(BEADS)の検出および/または特徴付けのための装置であって、
電極(EL)のアレイによって生成され前記粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)を生成するための手段と、
前記電極に関連した光センサ(PIXELS)と、
を備え、前記光センサは、粒子の寸法を大幅に下回るセンサ部分に入射する光パワーを検出するように作成されることを特徴とする、装置。 - 請求項20に記載の装置であって、
前記センサのシールド手段と、
各センサについて少なくとも1つの数の開口であって、前記シールド手段を通して得られ、検出される/特徴付けられる粒子よりも小さい既定の寸法を有する、開口と、
を備えることを特徴とする装置。 - 粒子(BEADS)の検出および/または特徴付けのための装置であって、
電極(EL)のアレイによって生成され前記粒子に作用する力場(F)の安定平衡点(PEQ)を生成するための手段と、
前記電極に関連した光センサ(PIXELS)と、
を備え、各電極(EL)には、前記粒子の垂直方向への推移を検出するための第1のセンサ(PIXEL_V)と、前記粒子の水平方向への推移を検出するための第2のセンサ(PIXEL_H)とが関連付けられることを特徴とする、装置。 - 請求項20ないし22のいずれかに記載の装置であって、
光センサである前記センサ(PIXEL)を少なくとも部分的にシールドするように構成された、既定の通過帯をともなう少なくとも一つのダイクロイックフィルタを備えることを特徴とする装置。 - 請求項23に記載の装置であって、
異なる通過帯のセットから選択された通過帯をそれぞれ有し、間で重なり合わないようになおかつ前記センサ(PIXEL)をいかなる場合も少なくとも部分的にシールドするように配置された、複数のダイクロイックフィルタを備えることを特徴とする装置。 - 請求項23または24に記載の装置であって、
前記少なくとも一つのダイクロイックフィルタは、前記電極(EL)を覆うように配置され、前記電極の各自の少なくとも一部に対応して設けられた割り込み開口を備えていることを特徴とする、装置。 - 請求項23ないし25のいずれかに記載の装置であって、
前記粒子を含む流体試料の受け取りおよび内包に適したチャンバまたはマイクロチャンバを前記電極のアレイと協働して定めるカバー(LID)に対応して配置された、既定の通過帯を有する少なくとも一つのダイクロイックフィルタを備えることを特徴とする装置。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IT000646A ITBO20050646A1 (it) | 2005-10-26 | 2005-10-26 | Metodo ed apparato per la caratterizzazione ed il conteggio di particelle |
ITBO2005A000646 | 2005-10-26 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012072149A Division JP5798077B2 (ja) | 2005-10-26 | 2012-03-27 | 粒子の存在を検出するための方法および装置 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015200674A true JP2015200674A (ja) | 2015-11-12 |
JP6058088B2 JP6058088B2 (ja) | 2017-01-11 |
Family
ID=36764443
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008537211A Active JP5538720B2 (ja) | 2005-10-26 | 2006-03-22 | 具体的に生物学的粒子などの粒子の特徴付けおよびカウントのための方法ならびに装置 |
JP2012072149A Active JP5798077B2 (ja) | 2005-10-26 | 2012-03-27 | 粒子の存在を検出するための方法および装置 |
JP2015134990A Active JP6055875B2 (ja) | 2005-10-26 | 2015-07-06 | 粒子の検出・特徴付のための装置 |
JP2015134994A Active JP6058088B2 (ja) | 2005-10-26 | 2015-07-06 | 粒子の検出・特徴付のための装置 |
Family Applications Before (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008537211A Active JP5538720B2 (ja) | 2005-10-26 | 2006-03-22 | 具体的に生物学的粒子などの粒子の特徴付けおよびカウントのための方法ならびに装置 |
JP2012072149A Active JP5798077B2 (ja) | 2005-10-26 | 2012-03-27 | 粒子の存在を検出するための方法および装置 |
JP2015134990A Active JP6055875B2 (ja) | 2005-10-26 | 2015-07-06 | 粒子の検出・特徴付のための装置 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8679315B2 (ja) |
EP (3) | EP2881458B1 (ja) |
JP (4) | JP5538720B2 (ja) |
CN (1) | CN101389747B (ja) |
CA (1) | CA2627347C (ja) |
DK (3) | DK2881458T3 (ja) |
ES (3) | ES2638065T3 (ja) |
HU (1) | HUE046717T2 (ja) |
IT (1) | ITBO20050646A1 (ja) |
PL (1) | PL3045545T3 (ja) |
PT (2) | PT2881458T (ja) |
SI (1) | SI3045545T1 (ja) |
WO (1) | WO2007049103A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019213469A (ja) * | 2018-06-11 | 2019-12-19 | シャープ株式会社 | 生体粒子観察装置および生体粒子観察方法 |
Families Citing this family (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7329545B2 (en) | 2002-09-24 | 2008-02-12 | Duke University | Methods for sampling a liquid flow |
US6911132B2 (en) | 2002-09-24 | 2005-06-28 | Duke University | Apparatus for manipulating droplets by electrowetting-based techniques |
ITBO20040420A1 (it) | 2004-07-07 | 2004-10-07 | Type S R L | Macchina per taglio e formatura di piattine metalliche |
KR101198038B1 (ko) | 2005-01-28 | 2012-11-06 | 듀크 유니버서티 | 인쇄 회로 기판 위의 액적 조작을 위한 기구 및 방법 |
ITBO20050481A1 (it) | 2005-07-19 | 2007-01-20 | Silicon Biosystems S R L | Metodo ed apparato per la manipolazione e/o l'individuazione di particelle |
ITBO20050646A1 (it) | 2005-10-26 | 2007-04-27 | Silicon Biosystem S R L | Metodo ed apparato per la caratterizzazione ed il conteggio di particelle |
ITTO20060226A1 (it) | 2006-03-27 | 2007-09-28 | Silicon Biosystem S P A | Metodo ed apparato per il processamento e o l'analisi e o la selezione di particelle, in particolare particelle biologiche |
ITTO20060273A1 (it) | 2006-04-12 | 2007-10-13 | Silicon Biosystem S P A | Metodi ed apparati per la selezione e/o il processamento di particellle, in particolare per la lisi selettiva e/o ottimizzata di cellule |
ITTO20060278A1 (it) | 2006-04-13 | 2007-10-14 | Silicon Biosystem S P A | Metodo per la selezione e/o il processamento di particelle, in particolare cellule |
WO2009021233A2 (en) | 2007-08-09 | 2009-02-12 | Advanced Liquid Logic, Inc. | Pcb droplet actuator fabrication |
US20100193358A1 (en) * | 2007-09-18 | 2010-08-05 | Panasonic Corporation | Microparticle measuring apparatus and microparticle measuring method |
ITTO20070771A1 (it) | 2007-10-29 | 2009-04-30 | Silicon Biosystems Spa | Metodo e apparato per la identificazione e manipolazione di particelle |
US10895575B2 (en) | 2008-11-04 | 2021-01-19 | Menarini Silicon Biosystems S.P.A. | Method for identification, selection and analysis of tumour cells |
IT1391619B1 (it) | 2008-11-04 | 2012-01-11 | Silicon Biosystems Spa | Metodo per l'individuazione, selezione e analisi di cellule tumorali |
CA2782123C (en) | 2009-03-17 | 2017-05-02 | Silicon Biosystems S.P.A. | Microfluidic device for isolation of cells |
JP2011232328A (ja) * | 2010-04-09 | 2011-11-17 | Hitachi Ltd | 生体物質検出アレイ、計測装置および計測方法 |
IT1403518B1 (it) | 2010-12-22 | 2013-10-31 | Silicon Biosystems Spa | Dispositivo microfluidico per la manipolazione di particelle |
US8828336B2 (en) * | 2011-02-02 | 2014-09-09 | Sharp Kabushiki Kaisha | Active matrix device |
TWI419738B (zh) * | 2011-03-18 | 2013-12-21 | Ind Tech Res Inst | 微粒子輸送器 |
KR20130009504A (ko) | 2011-07-15 | 2013-01-23 | 삼성전자주식회사 | 개구 조절 방법 및 개구 조절 소자 |
US20130062205A1 (en) * | 2011-09-14 | 2013-03-14 | Sharp Kabushiki Kaisha | Active matrix device for fluid control by electro-wetting and dielectrophoresis and method of driving |
ITTO20110990A1 (it) * | 2011-10-28 | 2013-04-29 | Silicon Biosystems Spa | Metodo ed apparato per l'analisi ottica di particelle a basse temperature |
ITBO20110766A1 (it) | 2011-12-28 | 2013-06-29 | Silicon Biosystems Spa | Dispositivi, apparato, kit e metodo per il trattamento di un campione biologico |
US9981273B2 (en) | 2012-09-28 | 2018-05-29 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Negative dielectrophoresis for selective elution of immuno-bound particles |
US9403172B2 (en) * | 2012-11-08 | 2016-08-02 | Berkeley Lights, Inc. | Circuit based optoelectronic tweezers |
US9366647B2 (en) * | 2013-03-14 | 2016-06-14 | Taiwan Semiconductor Manufacturing Company, Ltd. | Optical detection for bio-entities |
US9239328B2 (en) | 2012-12-17 | 2016-01-19 | Taiwan Semiconductor Manufacturing Company, Ltd. | Systems and methods for an integrated bio-entity manipulation and processing semiconductor device |
KR101356933B1 (ko) * | 2012-12-28 | 2014-01-29 | 고려대학교 산학협력단 | 표면탄성파를 이용한 미세유동 크로마토 그래피 기반 미세입자 분리 장치 및 방법 |
CA2830810A1 (en) | 2013-01-14 | 2014-07-14 | The Governing Council Of The University Of Toronto | Impedance-based sensing of adherent cells on a digital microfluidic device |
US11313757B2 (en) | 2013-07-12 | 2022-04-26 | Hill-Rom Services, Inc. | Methods and apparatus for detecting a position of liquid |
US9719951B1 (en) | 2013-07-12 | 2017-08-01 | Helvetia Wireless Llc | Method and apparatus for moisture detection |
US10634579B1 (en) | 2013-07-12 | 2020-04-28 | Hill-Rom Services, Inc. | Methods and apparatus for detecting position of a liquid |
EP3042179B1 (en) * | 2013-09-03 | 2020-08-05 | Izon Science Limited | Measurement of particle charge |
CN104075977A (zh) * | 2014-07-18 | 2014-10-01 | 苏州大学 | 一种细胞吸吐测量装置 |
US10191003B1 (en) | 2014-12-18 | 2019-01-29 | Helvetia Wireless Llc | Methods and apparatus for a moisture detector |
US11067535B2 (en) | 2016-10-27 | 2021-07-20 | Sharp Kabushiki Kaisha | Fluorescent testing system, dielectrophoresis device, and molecular testing method |
TWI605252B (zh) * | 2016-11-16 | 2017-11-11 | 中原大學 | 用以量測目標物運動狀態及其磁性粒子含量之磁泳量測系統 |
BR112019027770A2 (pt) * | 2017-06-21 | 2020-07-07 | Base4 Innovation Limited | dispositivo para investigar um analito de ácido nucleico e uso |
JP6941840B2 (ja) * | 2018-07-11 | 2021-09-29 | シャープ株式会社 | 粒子分別装置 |
JPWO2022113677A1 (ja) * | 2020-11-25 | 2022-06-02 | ||
CN112871229B (zh) * | 2021-01-21 | 2022-06-28 | 中国科学技术大学 | 一种用于水体介电泳细菌分选的芯片 |
CN117218586B (zh) * | 2023-09-21 | 2024-07-26 | 北京市自来水集团有限责任公司技术研究院 | 测定悬浮物沉降速度的图像识别方法、装置、设备及介质 |
CN118153411B (zh) * | 2024-05-09 | 2024-07-23 | 中国海洋大学 | 基于深度学习的电学监测反演深海采矿羽流浓度剖面方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05240872A (ja) * | 1991-11-29 | 1993-09-21 | Canon Inc | サンプル測定デバイス及びサンプル測定システム |
JP2002536167A (ja) * | 1999-02-12 | 2002-10-29 | ボード オブ リージェンツ, ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム | プログラム可能な微小流体処理のための方法および装置 |
JP2002543972A (ja) * | 1999-05-18 | 2002-12-24 | シリコン・バイオシステムズ・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ | 誘電泳動により粒子を操作するための方法及び装置 |
US20050014146A1 (en) * | 2001-08-07 | 2005-01-20 | Nicolo Manaresi | Method and device for integrated biomolecular analyses |
Family Cites Families (96)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS58211272A (ja) | 1982-06-02 | 1983-12-08 | Hitachi Ltd | 閾値決定法 |
US5252493A (en) | 1986-09-22 | 1993-10-12 | Nippon Telegraph And Telephone Corporation | Laser magnetic immunoassay method and apparatus therefor |
DE3931851A1 (de) | 1989-09-23 | 1991-04-11 | Heinrich Joern Dipl Chem | Computergesteuerter potentialdifferenz-leitfaehigkeitsscanner fuer traegerfreie elektrophorese |
EP0500727B1 (en) | 1989-11-13 | 1998-01-21 | Children's Medical Center Corporation | Non-invasive method for isolation and detection of fetal dna |
US5641628A (en) | 1989-11-13 | 1997-06-24 | Children's Medical Center Corporation | Non-invasive method for isolation and detection of fetal DNA |
GB8926781D0 (en) | 1989-11-27 | 1990-01-17 | Nat Res Dev | Identification of micro-organisms |
US5840482A (en) | 1990-10-10 | 1998-11-24 | The Regents Of The University Of California | Y chromosome specific nucleic acid probe and method for determining the Y chromosome in situ |
US6149789A (en) | 1990-10-31 | 2000-11-21 | Fraunhofer Gesellschaft Zur Forderung Der Angewandten Forschung E.V. | Process for manipulating microscopic, dielectric particles and a device therefor |
DE4214320C1 (ja) | 1992-05-04 | 1993-06-03 | Erwin Halder Kg, 7958 Laupheim, De | |
DE19500660B4 (de) | 1994-12-10 | 2007-12-27 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Vorrichtung und Verfahren zur Manipulation mikroskopisch kleiner Partikel sowie deren Verwendung |
US5856174A (en) | 1995-06-29 | 1999-01-05 | Affymetrix, Inc. | Integrated nucleic acid diagnostic device |
US5888370A (en) | 1996-02-23 | 1999-03-30 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and apparatus for fractionation using generalized dielectrophoresis and field flow fractionation |
US5945281A (en) | 1996-02-02 | 1999-08-31 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for determining an analyte from a sample fluid |
GB9615775D0 (en) | 1996-07-26 | 1996-09-04 | British Tech Group | Apparatus and method for characterising particles using dielectrophoresis |
JP2002503334A (ja) | 1996-09-04 | 2002-01-29 | テクニカル ユニバーシティ オブ デンマーク | 粒子の分離と分析用のマイクロフローシステム |
WO1999017883A1 (en) | 1997-10-06 | 1999-04-15 | California Institute Of Technology | Electrostatic particle transportation |
AU758407B2 (en) | 1997-12-24 | 2003-03-20 | Cepheid | Integrated fluid manipulation cartridge |
US6830729B1 (en) | 1998-05-18 | 2004-12-14 | University Of Washington | Sample analysis instrument |
US6203683B1 (en) | 1998-11-09 | 2001-03-20 | Princeton University | Electrodynamically focused thermal cycling device |
US20030228565A1 (en) | 2000-04-26 | 2003-12-11 | Cytokinetics, Inc. | Method and apparatus for predictive cellular bioinformatics |
US6942776B2 (en) * | 1999-05-18 | 2005-09-13 | Silicon Biosystems S.R.L. | Method and apparatus for the manipulation of particles by means of dielectrophoresis |
WO2000069525A1 (en) | 1999-05-19 | 2000-11-23 | Qualcomm Incorporated | Apparatus and method for interfacing personal electronics to exercise equipment |
JP4022069B2 (ja) | 1999-05-28 | 2007-12-12 | シーフィード | 細胞破壊装置および方法 |
US6824664B1 (en) | 1999-11-04 | 2004-11-30 | Princeton University | Electrode-less dielectrophorises for polarizable particles |
EP1716926A3 (en) | 2000-04-13 | 2007-08-29 | Wako Pure Chemical Industries Ltd | Electrode for dielectrophoretic apparatus, dielectrophoretic apparatus, method for manufacturing the same, and method for separating substances using the electrode or dielectrophoretic apparatus |
US6899849B2 (en) | 2000-07-28 | 2005-05-31 | The Regents Of The University Of California | Integrated sensor |
AU2000274922A1 (en) | 2000-08-08 | 2002-02-18 | Aviva Biosciences Corporation | Methods for manipulating moieties in microfluidic systems |
US6833542B2 (en) | 2000-11-13 | 2004-12-21 | Genoptix, Inc. | Method for sorting particles |
WO2002041999A1 (en) | 2000-11-24 | 2002-05-30 | Novo Nordisk A/S | Decondenser unit |
DE10059152C2 (de) | 2000-11-29 | 2003-03-27 | Evotec Ag | Mikrosystem zur dielektrischen und optischen Manipulierung von Partikeln |
US6764583B2 (en) | 2000-12-13 | 2004-07-20 | The Regents Of The University Of California | Using impedance measurements for detecting pathogens trapped in an electric field |
JP3868788B2 (ja) | 2001-10-15 | 2007-01-17 | 株式会社東芝 | 電気泳動表示装置 |
JP2002311461A (ja) | 2001-04-17 | 2002-10-23 | Sharp Corp | 表示素子 |
ITTO20010411A1 (it) * | 2001-05-02 | 2002-11-02 | Silicon Biosystems S R L | Metodo e dispositivo per l'esecuzione di test e saggi ad alta processivita' ed alto valore biologico su cellule e/o composti. |
US20050009101A1 (en) | 2001-05-17 | 2005-01-13 | Motorola, Inc. | Microfluidic devices comprising biochannels |
US20030073110A1 (en) | 2001-07-03 | 2003-04-17 | Masaharu Aritomi | Method for isolating nucleic acid and a cartridge for chemical reaction and for nucleic acid isolation |
CN1307480C (zh) | 2001-08-23 | 2007-03-28 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 电泳显示设备 |
BR0213520A (pt) | 2001-10-26 | 2006-05-23 | Immunivest Corp | método para diagnosticar a gravidade de uma doença em um indivìduo de teste, e, kit de teste para triagem de uma amostra de paciente quanto à presença de células cancerosas circulantes |
WO2003045556A2 (en) | 2001-11-26 | 2003-06-05 | Keck Graduate Institute | Method, apparatus and article for microfluidic control via electrowetting, for chemical, biochemical and biological assays and the like |
JP3845583B2 (ja) | 2002-01-09 | 2006-11-15 | 株式会社東芝 | 電気泳動表示装置及びその製造方法 |
DE10203636B4 (de) * | 2002-01-30 | 2004-02-12 | Testo Gmbh & Co | Vorrichtung zum Nachweis von Partikeln in einem Fluid |
DE60322350D1 (de) * | 2002-02-19 | 2008-09-04 | Koninkl Philips Electronics Nv | Elektrophoretische anzeigevorrichtung |
US7147763B2 (en) | 2002-04-01 | 2006-12-12 | Palo Alto Research Center Incorporated | Apparatus and method for using electrostatic force to cause fluid movement |
DE10221564A1 (de) * | 2002-05-15 | 2003-11-27 | Evotec Ag | Vorrichtung und Verfahren zur Untersuchung chemischer und/oder biologischer Proben |
US8168139B2 (en) | 2002-06-24 | 2012-05-01 | Fluidigm Corporation | Recirculating fluidic network and methods for using the same |
US20040011652A1 (en) | 2002-07-16 | 2004-01-22 | Bressler Vincent Edward | Separation of particles using multiple conductive layers |
US6911132B2 (en) | 2002-09-24 | 2005-06-28 | Duke University | Apparatus for manipulating droplets by electrowetting-based techniques |
US7329545B2 (en) | 2002-09-24 | 2008-02-12 | Duke University | Methods for sampling a liquid flow |
EP2359689B1 (en) | 2002-09-27 | 2015-08-26 | The General Hospital Corporation | Microfluidic device for cell separation and use thereof |
US6888721B1 (en) | 2002-10-18 | 2005-05-03 | Atec Corporation | Electrohydrodynamic (EHD) thin film evaporator with splayed electrodes |
US7932098B2 (en) | 2002-10-31 | 2011-04-26 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Microfluidic system utilizing thin-film layers to route fluid |
US7445926B2 (en) | 2002-12-30 | 2008-11-04 | The Regents Of The University Of California | Fluid control structures in microfluidic devices |
US7338637B2 (en) | 2003-01-31 | 2008-03-04 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Microfluidic device with thin-film electronic devices |
US6814222B2 (en) | 2003-02-03 | 2004-11-09 | Fki Logistex Automation Inc. | Narrow belt non-pneumatically actuated accumulation conveyor |
DE10304653B4 (de) | 2003-02-05 | 2005-01-27 | Evotec Technologies Gmbh | Mehrparametrige Detektion in einem fluidischen Mikrosystem |
GB0303305D0 (en) | 2003-02-12 | 2003-03-19 | Secr Defence | Apparatus for collecting particles |
WO2004074913A2 (en) | 2003-02-19 | 2004-09-02 | Bioarray Solutions Ltd. | A dynamically configurable electrode formed of pixels |
MX347048B (es) | 2003-03-28 | 2017-04-07 | Inguran Llc * | Aparato de muestreo digital y métodos para separar partículas. |
US20050181429A1 (en) | 2003-04-03 | 2005-08-18 | Monaliza Medical Ltd. | Non-invasive prenatal genetic diagnosis using transcervical cells |
US20070015289A1 (en) | 2003-09-19 | 2007-01-18 | Kao H P | Dispenser array spotting |
TW200527101A (en) * | 2003-10-07 | 2005-08-16 | Koninkl Philips Electronics Nv | Electrophoretic display panel |
US7476360B2 (en) | 2003-12-09 | 2009-01-13 | Genefluidics, Inc. | Cartridge for use with electrochemical sensor |
US7160425B2 (en) | 2004-03-25 | 2007-01-09 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Cell transporter for a biodevice |
DE102004017474A1 (de) | 2004-04-08 | 2005-10-27 | Evotec Technologies Gmbh | Messeinrichtung zur Impedanzspektroskopie und zugehöriges Messverfahren |
ITBO20040420A1 (it) | 2004-07-07 | 2004-10-07 | Type S R L | Macchina per taglio e formatura di piattine metalliche |
EP1796768A2 (en) | 2004-07-12 | 2007-06-20 | Bioservice S.p.A. | Tracheostomy apparatus |
DE102004047752B3 (de) | 2004-09-30 | 2006-01-26 | Infineon Technologies Ag | Halbleiterbauteil mit Temperatursensor |
US20060177815A1 (en) | 2004-11-29 | 2006-08-10 | The Regents Of The University Of California | Dielectrophoretic particle sorter |
WO2006059622A1 (ja) | 2004-12-03 | 2006-06-08 | Da Vinci Co., Ltd. | 磁性対流熱循環ポンプ |
JP2008533487A (ja) | 2005-03-14 | 2008-08-21 | イムニベスト・コーポレイション | 循環腫瘍細胞を用いる転移性乳癌患者の療法中の各追跡期間ポイントでの無増悪および全生存を予測する方法 |
US20060223178A1 (en) | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Tom Barber | Devices and methods for magnetic enrichment of cells and other particles |
US20070026413A1 (en) | 2005-07-29 | 2007-02-01 | Mehmet Toner | Devices and methods for enrichment and alteration of circulating tumor cells and other particles |
US20070026415A1 (en) | 2005-07-29 | 2007-02-01 | Martin Fuchs | Devices and methods for enrichment and alteration of circulating tumor cells and other particles |
US7998328B2 (en) | 2005-06-27 | 2011-08-16 | Cfd Research Corporation | Method and apparatus for separating particles by dielectrophoresis |
JP2007017163A (ja) | 2005-07-05 | 2007-01-25 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 粒状製品の評価方法 |
ITBO20050481A1 (it) | 2005-07-19 | 2007-01-20 | Silicon Biosystems S R L | Metodo ed apparato per la manipolazione e/o l'individuazione di particelle |
EP1928603A1 (en) | 2005-09-02 | 2008-06-11 | California Institute Of Technology | Method and apparatus for the mechanical actuation of valves in fluidic devices |
US20070059683A1 (en) | 2005-09-15 | 2007-03-15 | Tom Barber | Veterinary diagnostic system |
US7518723B2 (en) | 2005-09-19 | 2009-04-14 | Jmar Technologies, Inc. | Systems and methods for detecting radiation, biotoxin, chemical, and biological warfare agents using a multiple angle light scattering (MALS) instrument |
US8449837B2 (en) | 2005-10-11 | 2013-05-28 | The Johns Hopkins University | Microfluidic device for high-throughput cellular gradient and dose response studies |
ITBO20050643A1 (it) | 2005-10-24 | 2007-04-25 | Si Bio S R L | Metodo ed apparato per la manipolazione di particelle in soluzioni conduttive |
ITBO20050646A1 (it) | 2005-10-26 | 2007-04-27 | Silicon Biosystem S R L | Metodo ed apparato per la caratterizzazione ed il conteggio di particelle |
GB2435925A (en) | 2006-03-09 | 2007-09-12 | Cytokinetics Inc | Cellular predictive models for toxicities |
ITTO20060226A1 (it) | 2006-03-27 | 2007-09-28 | Silicon Biosystem S P A | Metodo ed apparato per il processamento e o l'analisi e o la selezione di particelle, in particolare particelle biologiche |
ITTO20060273A1 (it) | 2006-04-12 | 2007-10-13 | Silicon Biosystem S P A | Metodi ed apparati per la selezione e/o il processamento di particellle, in particolare per la lisi selettiva e/o ottimizzata di cellule |
US20080090239A1 (en) | 2006-06-14 | 2008-04-17 | Daniel Shoemaker | Rare cell analysis using sample splitting and dna tags |
EP2024512A4 (en) | 2006-06-14 | 2009-12-09 | Artemis Health Inc | METHODS FOR THE DIAGNOSIS OF ABNORMAL F CHARACTERS |
KR100818274B1 (ko) | 2006-09-05 | 2008-04-01 | 삼성전자주식회사 | 미세유동 시스템 제어장치 및 그 방법, 및 미세유동 시스템 |
PL2412828T3 (pl) | 2007-03-13 | 2013-11-29 | Amgen Inc | Mutacje K-ras i B-raf i terapia przeciwciałami anty-EGFr |
US20100233694A1 (en) | 2007-04-16 | 2010-09-16 | On-O-ity, Inc | Devices and methods for diagnosing, prognosing, or theranosing a condition by enriching rare cells |
ITBO20070588A1 (it) | 2007-08-13 | 2009-02-14 | Silicon Biosystems Spa | Metodo per legare uno strato di silicone ad un substrato di polimero metacrilico |
ITTO20070771A1 (it) | 2007-10-29 | 2009-04-30 | Silicon Biosystems Spa | Metodo e apparato per la identificazione e manipolazione di particelle |
JP5456689B2 (ja) | 2007-12-07 | 2014-04-02 | ミルテンイ バイオテック ゲーエムベーハー | 試料を少なくとも2つの成分に分離する遠心分離機 |
IT1391619B1 (it) | 2008-11-04 | 2012-01-11 | Silicon Biosystems Spa | Metodo per l'individuazione, selezione e analisi di cellule tumorali |
CA2782123C (en) | 2009-03-17 | 2017-05-02 | Silicon Biosystems S.P.A. | Microfluidic device for isolation of cells |
GB0910330D0 (en) | 2009-06-16 | 2009-07-29 | Univ Leiden | A biological microfluidics chip and related methods |
-
2005
- 2005-10-26 IT IT000646A patent/ITBO20050646A1/it unknown
-
2006
- 2006-03-22 ES ES06727347.4T patent/ES2638065T3/es active Active
- 2006-03-22 DK DK15150411.5T patent/DK2881458T3/en active
- 2006-03-22 ES ES15203254T patent/ES2754218T3/es active Active
- 2006-03-22 EP EP15150411.5A patent/EP2881458B1/en active Active
- 2006-03-22 JP JP2008537211A patent/JP5538720B2/ja active Active
- 2006-03-22 PT PT15150411T patent/PT2881458T/pt unknown
- 2006-03-22 CN CN2006800492476A patent/CN101389747B/zh active Active
- 2006-03-22 US US12/091,438 patent/US8679315B2/en active Active
- 2006-03-22 PL PL15203254T patent/PL3045545T3/pl unknown
- 2006-03-22 EP EP15203254.6A patent/EP3045545B1/en active Active
- 2006-03-22 DK DK06727347.4T patent/DK1941021T3/en active
- 2006-03-22 CA CA2627347A patent/CA2627347C/en active Active
- 2006-03-22 PT PT152032546T patent/PT3045545T/pt unknown
- 2006-03-22 EP EP06727347.4A patent/EP1941021B1/en active Active
- 2006-03-22 ES ES15150411.5T patent/ES2686271T3/es active Active
- 2006-03-22 WO PCT/IB2006/000636 patent/WO2007049103A1/en active Application Filing
- 2006-03-22 SI SI200632351T patent/SI3045545T1/sl unknown
- 2006-03-22 HU HUE15203254A patent/HUE046717T2/hu unknown
- 2006-03-22 DK DK15203254.6T patent/DK3045545T3/da active
-
2012
- 2012-03-27 JP JP2012072149A patent/JP5798077B2/ja active Active
-
2014
- 2014-02-20 US US14/185,693 patent/US8992754B2/en active Active
- 2014-12-19 US US14/577,189 patent/US9310334B2/en active Active
-
2015
- 2015-07-06 JP JP2015134990A patent/JP6055875B2/ja active Active
- 2015-07-06 JP JP2015134994A patent/JP6058088B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05240872A (ja) * | 1991-11-29 | 1993-09-21 | Canon Inc | サンプル測定デバイス及びサンプル測定システム |
JP2002536167A (ja) * | 1999-02-12 | 2002-10-29 | ボード オブ リージェンツ, ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム | プログラム可能な微小流体処理のための方法および装置 |
JP2002543972A (ja) * | 1999-05-18 | 2002-12-24 | シリコン・バイオシステムズ・ソシエタ・ア・レスポンサビリタ・リミタータ | 誘電泳動により粒子を操作するための方法及び装置 |
US20050014146A1 (en) * | 2001-08-07 | 2005-01-20 | Nicolo Manaresi | Method and device for integrated biomolecular analyses |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019213469A (ja) * | 2018-06-11 | 2019-12-19 | シャープ株式会社 | 生体粒子観察装置および生体粒子観察方法 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6055875B2 (ja) | 粒子の検出・特徴付のための装置 | |
Green et al. | Dielectrophoresis of submicrometer latex spheres. 1. Experimental results | |
Ying et al. | Programmable delivery of DNA through a nanopipet | |
FI94646B (fi) | Mikro-organismien ja muiden hiukkasten dielektroforeettinen määritys | |
AU2004273783A1 (en) | Sensitive and rapid biodetection | |
GB2479687A (en) | Device and method for measuring fine particles | |
EP2042852B1 (en) | Method for evaluating strength of dielectrophoresis of fine particles | |
Laux et al. | Dielectrophoretic immobilization of proteins: Quantification by atomic force microscopy | |
JP2013057547A (ja) | 光学的測定装置、フローサイトメーター及び光学的測定方法 | |
Altamore et al. | Dual channel detection of ultra low concentration of bacteria in real time by scanning fluorescence correlation spectroscopy | |
Reale et al. | A simple electrical approach to monitor dielectrophoretic focusing of particles flowing in a microchannel | |
EP2310133A1 (en) | Detections of microorganisms by dielectrophoresis. | |
US20150338335A1 (en) | Particle detection apparatus and particle detection method | |
Cottet et al. | Single-cell electrical characterization | |
Choi et al. | Measuring the electrophoretic mobility and size of single particles using microfluidic transverse AC electrophoresis (TrACE) | |
US20040060820A1 (en) | Characterization of particles by position in an electric field | |
Hoettges et al. | Combined Dielectrophoretic/Electrohydrodynamic/Evanescence based biosensor devices | |
GB2476663A (en) | Detection of microorganisms | |
McCanna | Low level optical detection of nanoparticles in blood |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20160622 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160705 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20161004 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20161115 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20161206 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6058088 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |