JP2013057547A - 光学的測定装置、フローサイトメーター及び光学的測定方法 - Google Patents
光学的測定装置、フローサイトメーター及び光学的測定方法 Download PDFInfo
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Abstract
【解決部】本技術では、流路を通流中の試料に対して光を照射する光照射部と、該光照射部による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出部と、前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するレート情報付加部と、が少なくとも備えられた光学的測定装置を提供する。
【選択図】図1
Description
水流系では、分析対象となる微小粒子をフローセル(流路)中で一列に整列させる。より具体的には、シース流を一定の流速でフローセル内に流入させ、その状態で微小粒子を含むサンプル流をフローセル中央部にゆっくりと注入する。この時、laminar flowの原理によりそれぞれの流れは互いに混合されず、層を成した流れ(層流)が形成される。そして、分析対象となる微小粒子の大きさ等に応じて、シース流とサンプル流の流入量を調節し、微小粒子を一つ一つが整列した状態で通流させる。
光学系では、分析対象となる微小粒子にレーザーなどの光を照射し、微小粒子から発せられる蛍光や散乱光を検出する。微小粒子を、前記水流系(1)において、一つ一つが整列した状態でレーザー照射部を通流させ、一つ一つの微小粒子が通過する毎に、微小粒子から発せられる蛍光や散乱光を、パラメータ毎に光学検出器を用いて検出し、微小粒子一つ一つの特性を分析する。
電気・解析系では、光学系において検出した光学的情報を、電気的信号(電圧パルス)に変換する。変換された電気的信号はアナログ−デジタル変換され、このデータをもとに解析用コンピューターとソフトウェアでヒストグラムを抽出し、解析を行う。
分取系では、測定を終えた微小粒子を分離し、回収する。代表的な分取方法としては、測定を終えた微小粒子にプラス又はマイナスの電荷を加え、フローセルを、電位差を有する2つの偏向板で挟み込み、帯電された微小粒子はその電荷に応じていずれかの偏向板に引き寄せられることにより、分取する方法がある。
該光照射部による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出部と、
前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するレート情報付加部と、
が少なくとも備えられた光学的測定装置を提供する。
本技術に係る光学的測定装置では、波形データグラフ上、即ち、波形データグラフ内に、流れてくる試料の頻度を表示することができる。
本技術に係る光学的測定装置には、前記レート情報付加部により付加されたレート情報に基づいて、光軸調整を行う光軸調整部を更に備えることも可能である。
本技術に係る光学的測定装置において、前記レート情報付加部が波形データグラフ上に付加する表示は、試料の頻度が直観的に認識できる表示であれば特に限定されないが、例えば、波形データグラフ上に所定のメーターバーを付加する方法、所定の色情報を付加する方法などが挙げられる。
所定の色情報を付加する場合、その具体的な方法も特に限定されないが、例えば、波形データ自体に色情報を付加する方法、前記メーターバーに色情報を付加する方法などが挙げられる。
本技術に係る光学的測定装置には、前記光学的情報から得られた前記試料の種類に対応した所定の色情報を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加する種類情報付加部を更に備えることも可能である。
より具体的には、本技術に係る光学的測定装置に、前記光検出部により検出された前記光学的情報に基づいて、前記試料を分取する分取部を加えることで、フローサイトメーターとして用いることが可能である。
1.光学的測定装置1
(1)流路2
(2)光照射部11
(3)光検出部12
(4)レート情報付加部13
(5)光軸調整部14
(6)種類情報付加部15
2.フローサイトメーター10
(1)分取部16
3.光学的測定方法
(1)通流工程I
(2)光照射工程II
(3)光検出工程III
(4)レート情報付加工程IV
(5)光軸調整工程V
(6)種類情報付加工程VI
(7)分取工程VII
図1は、本技術に係る光学的測定装置1の第1実施形態を模式的に示す模式概念図である。
本技術に係る光学的測定装置1は、流路2内を通流する試料Sを光学的に検出する装置であって、大別すると、光照射部11、光検出部12、レート情報付加部13、を少なくとも備える。また、必要に応じて、図示しないが、光軸調整部14、種類情報付加部15、などを備えることも可能である。以下、各部について、詳細に説明する。
本技術に係る光学的測定装置1は、流路2内を通流する試料Sを光学的に検出する装置である。流路2は、本技術に係る光学的測定装置1に予め備えていてもよいが、市販の流路2や流路2が設けられた使い捨てのチップなどを、光学的測定装置1に設置して測定を行うことも可能である。
光照射部11は、流路2を通流中の試料Sに対して光Lを照射するために備える。
光検出部12は、光照射部11による光照射によって、試料Sから発せられた光学的情報を検出するために備える。
レート情報付加部13は、前記光学的情報から得られた前記試料Sの単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するために備える。即ち、レート情報付加部13は、流路2を流れてくる試料Sの頻度を、波形データグラフ上で直観的に認識することができるように、所定の表示を波形データグラフ上に付加するために機能する。
光軸調整部14は、前記レート情報付加部13により付加されたレート情報に基づいて、光軸調整を行うために備える。この光軸調整部14は、本技術に係る光学的測定装置1には、必須の部ではないが、各種測定の精度を更に向上させるためには、設けることが好ましい。
種類情報付加部15は、前記光学的情報から得られた前記試料Sの種類に対応した所定の色情報を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するために備える。即ち、種類情報付加部15は、流路2を流れてくる試料Sの種類を、波形データグラフ上で直観的に認識することができるように、所定の色情報を波形データグラフ上に付加するために機能する。この種類情報付加部15は、本技術に係る光学的測定装置1には、必須の部ではないが、各種測定の精度を更に向上させるため、また、各種測定の更なる効率化のために、設けることが好ましい。
本技術に係る光学的測定装置1は、その解析精度の高さおよび高効率性を利用してフローサイトメーター10に好適に用いることができる。図8は、本技術に係るフローサイトメーター10の一実施形態を模式的に示す模式概念図である。
分取部16は、前記光検出部12により検出された前記光学的情報に基づいて、前記試料を分取するために備える。例えば、分取部16では、光学的情報から解析された試料Sの大きさ、形態、内部構造等の解析結果に基づいて、流路2の下流において、試料Sの分取が行われる。
図9は、本技術に係る光学的測定方法のフロー図である。
本技術に係る光学的測定方法は、大別して、通流工程I、光照射工程II、光検出工程III、レート情報付加工程IV、を少なくとも行う方法である。また、必要に応じて、光軸調整工程V、種類情報付加工程VI、分取工程VII、をそれぞれ行うことも可能である。以下、各工程について、詳細に説明する。
通流工程Iは、流路2に試料Sを通流させる工程である。
光照射工程IIは、流路2を通流中の試料Sに対して、光を照射する工程である。
光検出工程IIIは、光照射工程IIで光Lを照射することにより、流路2を通流中の試料Sから発せられる光学的情報を、光検出部12を用いて検出する工程である。
レート情報付加工程IVは、前記光学的情報から得られた前記試料Sの単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するために行う。即ち、レート情報付加工程IVは、流路2を流れてくる試料Sの頻度を、波形データグラフ上で直観的に認識することができるように、所定の表示を波形データグラフ上に付加する工程である。なお、レート情報付加工程IVで行う具体的なレート情報付加方法およびその効果などは、前記光学的測定装置1と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
光軸調整工程Vは、前記レート情報付加工程IVにより付加されたレート情報に基づいて、光軸調整を行うために行う。この光軸調整工程Vは、本技術に係る光学的測定方法では、必須の工程ではないが、各種測定の精度を更に向上させるためには、行うことが好ましい。なお、光軸調整工程Vで行う具体的な光軸調整方法およびその効果などは、前記光学的測定装置1と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
種類情報付加工程VIは、前記光学的情報から得られた前記試料Sの種類に対応した所定の色情報を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するために行う。即ち、種類情報付加工程VIは、流路2を流れてくる試料Sの種類を、波形データグラフ上で直観的に認識することができるように、所定の色情報を波形データグラフ上に付加する工程である。この種類情報付加工程VIは、本技術に係る光学的測定方法では、必須の工程ではないが、各種測定の精度を更に向上させるため、また、各種測定の更なる効率化のためには、行うことが好ましい。なお、種類情報付加工程VIで行う具体的な種類情報付加方法およびその効果などは、前記光学的測定装置1と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
分取工程VIIは、前記光検出工程IIIにおいて検出された前記光学的情報に基づいて、試料Sを分取する工程である。本技術では必須の工程ではないが、分取工程VIIIを行うことで、本技術に係る光学的測定方法をフローサイトメトリーの一工程として行うことが可能である。例えば、分取工程VIIIでは、前記光学的情報から解析された試料Sの大きさ、形態、内部構造等の解析結果に基づいて、流路2の下流において、試料Sの分取が行われる。なお、分取工程VIIIで行う具体的な分取方法は、前記光学的測定装置1と同様であるため、ここでは説明を割愛する。
2 流路
11 光照射部
12 光検出部
13 レート情報付加部
14 光軸調整部
15 種類情報付加部
10 フローサイトメーター
16 分取部
161 振動素子
162 荷電部
163 対向電極
L 光
S 試料
T 基板
F101 サンプル流
F102 シース流
I 通流工程
II 光照射工程
III 光検出工程
IV レート情報付加工程
V 光軸調整工程
VI 種類情報付加工程
VII 分取工程
Claims (9)
- 流路を通流中の試料に対して光を照射する光照射部と、
該光照射部による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出部と、
前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するレート情報付加部と、
が少なくとも備えられた光学的測定装置。 - 前記レート情報付加部により付加されたレート情報に基づいて、光軸調整を行う光軸調整部が更に備えられた請求項1記載の光学的測定装置。
- 前記レート情報付加部では、前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応して、所定のメーターバーを付加する請求項1記載の光学的測定装置。
- 前記レート情報付加部では、前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応して、所定の色情報を付加する請求項1記載の光学的測定装置。
- 前記レート情報付加部では、前記波形データに前記色情報を付加する請求項4記載の光学的測定装置。
- 前記レート情報付加部では、前記メーターバーに前記色情報を付加する請求項4記載の光学的測定装置。
- 前記光学的情報から得られた前記試料の種類に対応した所定の色情報を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加する種類情報付加部が更に備えられた請求項1記載の光学的測定装置。
- 流路を通流中の試料に対して光を照射する光照射部と、
該光照射部による光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出部と、
前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するレート情報付加部と、
前記光検出部により検出された前記光学的情報に基づいて、前記試料を分取する分取部と、
が少なくとも備えられたフローサイトメーター。 - 流路に試料を通流させる通流工程と、
前記試料に対して光を照射する光照射工程と、
該光照射工程における光照射によって、前記試料から発せられる光学的情報を検出する光検出工程と、
前記光学的情報から得られた前記試料の単位時間当たりの通流量に対応した所定の表示を、前記光学的情報から得られた波形データグラフ上に付加するレート情報付加工程と、
を少なくとも行う光学的測定方法。
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