JP2015139389A - 糖リン酸化剤 - Google Patents

Abstract

【課題】ドナー基質の種類に関係なく、活性が高い糖リン酸化剤の提供。【解決手段】以下の（ａ）〜（ｄ）の少なくとも１つを含むことを特徴とする糖リン酸化剤。（ａ）特定のアミノ酸配列を含むタンパク質（ａ１）又は該アミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸からなり、糖リン酸化活性を有するタンパク質（ａ２）（ｂ）前記タンパク質（ａ１）又は前記タンパク質（ａ２）をコードする核酸（ｃ）上記（ｂ）の核酸を含む組換えベクター（ｄ）上記（ｃ）の組換えベクターで形質転換された形質転換体。糖がＮ−アセチルグルコサミンであり、糖リン酸化剤がＮ−アセチルヘキソサミンキナーゼ活性である糖リン酸化剤。前記タンパク質（ａ１）及び（ａ２）並びに（ｂ）の核酸がビフィドバクテリウム・ビフィダム由来である、糖リン酸化剤。【選択図】なし

Description

本発明は、糖リン酸化剤に関する。

キナーゼはアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）等のリン酸基を有する化合物のリン酸を他の分子に転移する反応を触媒する酵素の総称である。
従来、糖にリン酸基を転移し、糖のリン酸エステルを合成するキナーゼ（糖リン酸化剤）としてガラクトキナーゼが一般的に知られている（特許文献１）。ガラクトキナーゼはガラクトース及びＡＴＰを基質とし、α−ガラクトース−１−リン酸及びＡＤＰを生成するものである。

また、最近、Ｎ−アセチルグルコサミンから直接Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸への変換を触媒する新規な糖リン酸化剤（Ｎ−アセチルヘキソサミンキナーゼ）が発見されている（特許文献２）。しかしながら、この酵素はＡＴＰ以外のドナー基質（糖にリン酸基を与えるもの）で反応すると、生成物（Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸）の量が５０％以下に減少する問題がある。

特表平１０−５０６５２９号公報 特開２００７−９７５１７号公報

本発明の目的は、ドナー基質の種類に関係なく、活性が高い糖リン酸化剤を提供することにある。

本発明者らは、上記の目的を達成するべく検討を行った結果、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、以下の（ａ）〜（ｄ）の少なくとも１つを含むことを特徴とする糖リン酸化剤である。
（ａ）配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むタンパク質（ａ１）又は該アミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸からなり、糖リン酸化活性を有するタンパク質（ａ２）
（ｂ）前記タンパク質（ａ１）又は前記タンパク質（ａ２）をコードする核酸
（ｃ）上記（ｂ）の核酸を含む組換えベクター
（ｄ）上記（ｃ）の組換えベクターで形質転換された形質転換体

本発明の糖リン酸化剤は、ドナー基質の種類に関係なく、活性が高い。

本発明の糖リン酸化剤は、以下の（ａ）〜（ｄ）の少なくとも１つを含むことを特徴とする糖リン酸化剤である。
（ａ）配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むタンパク質（ａ１）又は該アミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸からなり、糖リン酸化活性を有するタンパク質（ａ２）
（ｂ）前記タンパク質（ａ１）又は前記タンパク質（ａ２）をコードする核酸
（ｃ）上記（ｂ）の核酸を含む組換えベクター
（ｄ）上記（ｃ）の組換えベクターで形質転換された形質転換体

本発明において、糖リン酸化剤とは、Ｎ−アセチルヘキソサミンキナーゼ活性を有し、糖であるＮ−アセチルヘキソサミンとドナー基質であるリン酸基を有する化合物｛例えば、アデノシン三リン酸（以下、ＡＴＰと記載）等｝とを用いてＮ−アセチルヘキソサミンをリン酸化し、糖リン酸（Ｎ−アセチルヘキソサミン−１−リン酸）を生成する反応を触媒するものである。

Ｎ−アセチルヘキソサミンとしては、ヘキソースが有するヒドロキシル基のうち１つがアミノ基に置換されたヘキソサミンのアミノ基がアセチル化されたものが含まれ、具体的には、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン及びＮ−アセチルマンノサミン等が挙げられる。

リン酸基を有する化合物としては、ヌクレオシド三リン酸｛ＡＴＰ、グアノシン三リン酸（以下、ＧＴＰと記載）、ウリジン三リン酸（以下、ＵＴＰと記載）及びシチジン三リン酸（以下、ＣＴＰと記載）等｝等が挙げられる。
ＡＴＰは、アデニンとリボースからなるアデノシンにおいて、５位の炭素に結合したヒドロキシル基が三リン酸エステル化されたものである。
ＧＴＰは、グアニンとリボースからなるグアノシンにおいて、５位の炭素に結合したヒドロキシル基が三リン酸エステル化されたものである。
ＵＴＰは、ウラシルとリボースからなるウリジンにおいて、５位の炭素に結合したヒドロキシル基が三リン酸エステル化されたものである。
ＣＴＰは、シトシンとリボースからなるシチジンにおいて、５位の炭素に結合したヒドロキシル基が三リン酸エステル化されたものである。

リン酸基を有する化合物としては、活性の観点から、ヌクレオシド三リン酸が好ましい。
リン酸基を有する化合物は、１種を用いてもよく、２種以上を併用してもよい。

本発明において、タンパク質（ａ）は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むタンパク質（ａ１）又は該アミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸からなり、Ｎ−アセチルヘキソサミンキナーゼ活性を有するタンパク質（ａ２）である。

配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むタンパク質（ａ１）は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を少なくとも１つ含んでいればよいが、活性の観点から、１〜５個が好ましい。
タンパク質（ａ１）は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むことにより、ドナー基質の種類に関係なく、活性が高い。

また、タンパク質（ａ１）を構成するアミノ酸配列中の配列番号１のアミノ酸配列以外のアミノ酸の数は、活性の観点から、１〜１００個が好ましく、さらに好ましくは１〜５０個である。

タンパク質（ａ２）は、配列番号１のアミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸からなり、糖リン酸化活性を有するタンパク質である。
欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸の個数は、活性の観点から、１〜１０個が好ましく、さらに好ましくは１〜５個である。
タンパク質（ａ２）は、配列番号１に示されるアミノ酸配列と同等であるので、タンパク質（ａ１）と同様にドナー基質の種類に関係なく、活性が高い。

タンパク質（ａ１）又は（ａ２）であるかは、ペプチドマッピング法等の一般的な方法によってアミノ酸配列を決定することにより確認することができる。
また、天然物から抽出したタンパク質が、タンパク質（ａ１）又は（ａ２）に該当するかどうかは、ペプチドマッピング法等の一般的な方法によって、抽出したタンパク質のアミノ酸配列を決定し、ＤＮＡデータバンクジャパンの提供する配列比較プログラム「ＣｌｕｓｔａｌＷ」（ｈｔｔｐ：／／ｃｌｕｓｔａｌｗ．ｄｄｂｊ．ｎｉｇ．ａｃ．ｊｐ／ｔｏｐ−ｊ．ｈｔｍｌ）を用いてタンパク質（ａ１）又は（ａ２）の配列と相同部分を検索することにより決定できる。

本発明の糖リン酸化剤である上記タンパク質（ａ１）及びタンパク質（ａ２）は、タンパク質（ａ１）をコードする核酸又はタンパク質（ａ２）をコードする核酸を微生物等の宿主に導入し、宿主を培養液中で培養し、培養液中から（ａ１）又は（ａ２）を採取及び精製することによって生産することができる。なお、タンパク質（ａ１）又はタンパク質（ａ２）をコードする核酸は、自然界等から得ることも可能ではあるが、更に部位特異的突然変異誘発法等の公知の手法を利用して調製することもできる。

宿主としては、動物細胞、昆虫細胞、微生物及び植物細胞等が挙げられる。
動物細胞としては、特に限定されないが、サル細胞ＣＯＳ−７、Ｖｅｒｏ、マウスＬ細胞、ラットＧＨ３、ヒトＦＬ細胞及びＣＨＯ細胞等が挙げられる。
昆虫細胞としては、特に限定されないが、Ｓｆ９細胞及びＳｆ２１細胞等が挙げられる。
微生物としては、特に限定されないが、細菌及び酵母等が挙げられる。
細菌としては、真正細菌及び古細菌が含まれる。
真正細菌には、グラム陰性菌及びグラム陽性菌が含まれる。グラム陰性細菌としては、エシェリチア属菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、サーマス属菌（Ｔｈｅｒｍｕｓ）、リゾビウム属菌（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）、シュードモナス属菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、シュワネラ属菌（Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ）、ビブリオ属菌（Ｖｉｂｒｉｏ）、サルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、アセトバクター属（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ属）、シネコシスティス属（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ属）等が挙げられる。グラム陽性菌としては、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ属）、ストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｅｓ属）、コリネバクテリウム属（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属）、ブレビバチルス属（Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ属）、ビフィドバクテリウム属 (Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属)、ラクトコッカス属 (Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ属)、エンテロコッカス属 (Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属)、ペディオコッカス属(Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ属)、リューコノストック属 (Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属)、ストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属）等が挙げられる。
植物細胞としては、特に限定されないが、ＢＹ−２細胞等が挙げられる。

宿主としては、クローニングの容易さの観点から、微生物が好ましく、さらに好ましくはエシェリチア属菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、サーマス属菌（Ｔｈｅｒｍｕｓ）、リゾビウム属菌（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）、シュードモナス属菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、シュワネラ属菌（Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ）、ビブリオ属菌（Ｖｉｂｒｉｏ）、サルモネラ属菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、アセトバクター属（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ属）、シネコシスティス属（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ属）であり、特に好ましくはエシェリチア属菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、シュワネラ属菌（Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ属）、ブレビバチルス属（Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ属）である。

培養は微生物の資化可能な炭素源、窒素源その他の必須栄養素を含む培地に接種し、常法に従って行えばよい。

本発明において、培養液からタンパク質（ａ１）又は（ａ２）を採取及び精製する方法としては、常法に準じて行うことができる。例えば、培養物から遠心分離又は濾過することで菌体を除き、得られた培養上清液から常法手段により目的酵素を濃縮することができる。このようにして得られた酵素液又は乾燥粉末はそのまま用いることもできるが、さらに公知の方法により結晶化や造粒化することができる。

本発明において、（ｂ）の核酸は、上記タンパク質（ａ１）又は上記タンパク質（ａ２）をコードする核酸である。

本発明の（ｂ）の核酸をクローニングする方法は、例えばＭｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ−ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ ２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）に記載の方法等が挙げられる。

本発明において、（ａ）のタンパク質（ａ１）、（ａ）のタンパク質（ａ２）又は（ｂ）の核酸は、活性が高い観点から、ビフィドバクテリウム・ビフィダム由来であることが好ましい。

本発明において、ベクター（ｃ）は、上記（ｂ）の核酸を含む組換えベクターである。
組換えベクターは、適当なベクターに上記（ｂ）の核酸を挿入することによって得ることができる。
ベクターは種々のものが公知であり、市販品も多く存在する。当業者であれば、宿主の種類に応じて適切なベクターを容易に選択することができる。ベクターの具体例としては、ｐＥＴシリーズ、ｐＵＣシリーズなどが挙げられる。
組換えベクターの調製方法自体は周知の常法である。適当なベクターに変異遺伝子を挿入し、宿主を形質転換する具体的な方法としては、エレクトロポレーション法及びカルシウム法等が挙げられる。

本発明において、（ｄ）の形質転換体は、上記（ｃ）の組換えベクターを用いて宿主を形質転換した組換えベクター（ｃ）を含む形質転換体である。形質転換体（ｄ）を培養することで、培養液からタンパク質（ａ１）又は（ａ２）を採取できる。

以下の実施例、比較例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

＜実施例１＞
配列番号１のアミノ酸配列をコードする遺伝子（配列番号２）（５‘末端側に制限酵素ＮｃｏＩ，３’末端側に制限酵素ＸｈｏＩ認識配列を付加し、ライフテクノロジーズジャパン株式会社に人工合成を依頼したもの）を制限酵素ＮｃｏＩ、ＸｈｏＩで処理し、ｐＥＴ−２２ｂプラスミド（Ｎｏｖａｇｅｎ社製）のＮｃｏＩ制限酵素サイトとＸｈｏＩ制限酵素サイトに結合し、配列番号１のタンパク質を発現するプラスミド（Ｐ１）を作成した。その後、ＡＧ１（ＤＥ３）大腸菌株へ形質転換を行い、配列番号１のタンパク質（ａ１）を発現する大腸菌（α）を作成した。
大腸菌（α）をＬＢ培養液（アンピシリン １００ｍｇ／Ｌ含有）１ｍＬに植菌して３０℃で１２時間培養を行い、終夜培養液を作成し、０．５ｍｌをＬＢ培養液（アンピシリン １００ｍｇ／Ｌ含有）５ｍｌに植菌して３０℃３時間振とう培養を行い前培養液を作成した。前培養液を５０ｍＬの培養液（酵母エキス（日本製薬（株）製）１．２ｇ、ポリペプトン（日本製薬（株）製）０．６ｇ、リン酸２カリウム０．４７ｇ、リン酸１カリウム０．１１ｇ、硫酸アンモニウム０．３５ｇ、リン酸２ナトリウム１２水和物０．６６ｇ、クエン酸ナトリウム２水和物０．０２ｇ、グリセロール０．２ｇ、ラクトアルブミン水解物１．５ｇ、消泡剤（信越化学工業（株）製、「ＫＭ−７０」）０．３ｇ、１ｍＭ 硫酸マグネシウム、微量金属溶液（塩化カルシウム１８．９μｇ、塩化鉄（ＩＩＩ）５００μｇ、硫酸亜鉛７水和物９．０μｇ、硫酸銅５．１μｇ、塩化マンガン４水和物６．７μｇ、塩化コバルト４．９μｇ、エチレンジアミン４酢酸４ナトリウム２００μｇ）、１００ｍｇ／Ｌアンピシリン）に植菌し微生物培養装置（エイブル社製、製品名「ＢｉｏＪｒ．８」）を用いてｐＨ６．８、３０℃を維持したまま培養を行った。培養開始後１Ｍ ＩＰＴＧを０．１５ｍＬを加えた。培養開始１４時間後から、グリセリン／タンパク質溶液（５０％ グリセリン、５０ｇ／Ｌ ラクトアルブミン水解物、３３ｇ／Ｌ 消泡剤（信越化学工業（株）製、「ＫＭ−７０」）、１００ｍｇ／Ｌ アンピシリン）の滴下を開始した。培養開始後、４８時間目に培養液（Ｒ−１）を回収した。

得られた培養液（Ｒ−１）から遠心分離機（ＫＵＢＴＡ社製「５９２２」、４℃、６０００×ｇ、１０分）を用いて菌体を分離し上清のみを回収し、タンパク質（ａ１）を得た。

＜製造例１＞
＜ＵＤＰ−アセチルグルコサミンウリジルトランスフェラーゼの製造＞
実施例１において、「配列番号１のアミノ酸配列をコードする遺伝子（配列番号２）（５‘末端側に制限酵素ＮｃｏＩ，３’末端側に制限酵素ＸｈｏＩ認識配列を付加）」に代えて、「配列番号３のアミノ酸配列をコードする遺伝子（配列番号４）（５‘末端側に制限酵素ＭｓｃＩ，３’末端側に制限酵素ＸｈｏＩ認識配列を付加）」を用いる以外は同様にして、１ｇ／ＬのＵＤＰ−アセチルグルコサミンウリジルトランスフェラーゼ溶液を得た。

＜タンパク質（ａ１）のＧＴＰに対する活性＞
１．５ｍＬのチューブ中でタンパク質（ａ１）の１ｇ/Ｌ溶液を５μＬ、製造例１で得た１ｇ/ＬのＵＤＰ−アセチルグルコサミンウリジルトランスフェラーゼ溶液５μＬ、バッファー１［５ｍＭ 塩化マグネシウム、１００ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０、２５℃）水溶液］１６０．５μＬ、バッファー１で溶かした１００ｍＭ Ｎ−アセチルグルコサミン（シグマ社製）溶液１０μＬ、１００ｍＭ ＧＴＰ（和光純薬工業（株）製）溶液１０μＬ、バッファー１で溶かした１００ｍＭ ＵＴＰ（ナカライテスク（株）製）溶液１０μＬ、超純水で溶かした２Ｍ 塩化マグネシウム水溶液１．５μＬを混合した。混合液を恒温槽で、３０℃、３０分間反応させた。
反応後、１５ｗｔ％トリクロロ酢酸水溶液を１１０μＬ加え、反応を停止した。遠心分離器（ＫＵＢＯＴＡ社製「５９２２」、４℃、１３，０００×ｇ、５分）を用いて遠心し、不溶物を沈殿させ、上清を回収し、７５０ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液５６μＬを加え、さらに超純水を２００μＬ加えた。この溶液を液体クロマトグラフィー（（株）島津製作所製 Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ３００ Ｃ１８カラム、ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣシステム及びＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＴＵＶ検出器）に供し、ウリジン二リン酸−アセチルグルコサミンのピーク面積から、反応液中のＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸を算出したところ、０．４４ｍＭであった。
本方法においては、タンパク質（ａ１）とＧＴＰとが反応することにより、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸が生成する。しかしながら、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸を直接ＨＰＬＣにより検出することができないため、生成したＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸とＵＴＰとを、極めて活性の高いＵＤＰ−アセチルグルコサミンウリジルトランスフェラーゼを触媒として反応させ、生成したＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸の全てをウリジン二リン酸−アセチルグルコサミンに変換し、ウリジン二リン酸−アセチルグルコサミンの量をＨＰＬＣにより検出することにより、生成したＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸の量を算出した。

＜タンパク質（ａ１）のＣＴＰに対する活性＞
「タンパク質（ａ１）のＧＴＰに対する活性」において、「１００ｍＭ ＧＴＰ（和光純薬工業（株）製）溶液１０μＬ」に変えて「１００ｍＭ ＣＴＰ（和光純薬工業（株）製）溶液１０μＬ」とする以外は同様にして酵素反応させた。反応後の反応液中のＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸を算出したところ、０．２７ｍＭであった。

＜タンパク質（ａ１）のＵＴＰに対する活性＞
「Ｎ−アセチルヘキソサミンキナーゼのＧＴＰに対する活性」において、「１００ｍＭ ＧＴＰ（和光純薬工業（株）製）溶液１０μＬ」に変えて「１００ｍＭ ＵＴＰ（ナカライテスク（株）製）溶液１０μＬ」とする以外は同様にして酵素反応させた。反応後の反応液中のＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸を算出したところ、０．３３ｍＭであった。

＜タンパク質（ａ１）のＡＴＰに対する活性＞
「Ｎ−アセチルヘキソサミンキナーゼのＧＴＰに対する活性」において、「１００ｍＭ ＧＴＰ（和光純薬工業（株）製）溶液１０μＬ」に変えて「１００ｍＭ ＡＴＰ（和光純薬工業（株）製）溶液１０μＬ」とする以外は同様にして酵素反応させた。反応後の反応液中のＮ−アセチルグルコサミン−１−リン酸を算出したところ、０．２８ｍＭであった。

本発明の糖リン酸化剤を用いた場合、ＡＴＰ以外のドナー基質（ＧＴＰ、ＣＴＰ及びＵＴＰ）に対しても高い活性を示すことがわかる。
また、ドナー基質としてＧＴＰを用いた場合、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸の生成量が一番多く、０．４４ｍＭであった。ＡＴＰを用いた場合、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸の生成量が一番少なく０．２８ｍＭであった。したがって、ドナー基質を変更しても、ＧＴＰを用いた場合の生成量を基準として、最少でも６４％であり、ドナー基質の種類に関係なく、活性が高いことが分かる。

本発明の糖リン酸化剤は、ドナー基質の種類に関係なく、活性が高い。また、本発明の糖リン酸化剤を用いて得られる糖１リン酸は、糖ヌクレオチドのドナー基質であり、糖ヌクレオチドは多様な生物機能を持つ糖鎖の合成に必要である。したがって、本発明の糖リン酸化剤は、糖鎖関連分野、研究用試薬などの化学品などとして有用である。

Claims (4)

1. 以下の（ａ）〜（ｄ）の少なくとも１つを含むことを特徴とする糖リン酸化剤。
   （ａ）配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むタンパク質（ａ１）又は該アミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換及び／又は付加されたアミノ酸からなり、糖リン酸化活性を有するタンパク質（ａ２）
   （ｂ）前記タンパク質（ａ１）又は前記タンパク質（ａ２）をコードする核酸
   （ｃ）上記（ｂ）の核酸を含む組換えベクター
   （ｄ）上記（ｃ）の組換えベクターで形質転換された形質転換体
2. 糖がＮ−アセチルグルコサミンである請求項１に記載の糖リン酸化剤。
3. 糖リン酸化活性がＮ−アセチルヘキソサミンキナーゼ活性である請求項１又は２に記載の糖リン酸化剤。
4. （ａ）のタンパク質（ａ１）、（ａ）のタンパク質（ａ２）又は（ｂ）の核酸がビフィドバクテリウム・ビフィダム由来である請求項１〜３のいずれかに記載の糖リン酸化剤。