JP2014528963A

JP2014528963A - 新規のアポトーシス誘導化合物

Info

Publication number: JP2014528963A
Application number: JP2014533898A
Authority: JP
Inventors: ロペス、マルク; コレット、イヴ; メジール、リンダ; ジャンミシェルブルネル; コンベ、セバスチャン
Original assignee: L'institut Paoli Calmettes; Aix Marseille Universite; Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Current assignee: L'institut Paoli Calmettes; Aix Marseille Universite; Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
Priority date: 2011-10-04
Filing date: 2012-10-04
Publication date: 2014-10-30
Also published as: WO2013050476A1; KR20140072894A; CN103998435A; EP2763972A1; US20140296227A1; US9193699B2

Abstract

本発明は、下記化学式（I）の化合物であり、上記化学式において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、特に、Ｈ、選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ１‐Ｃ１２アルキル、ハロゲン原子、およびＣ１‐Ｃ１２ハロアルキルからなる群より独立的に選択され、Ａは単結合、または選択的に置換されたＣ１‐Ｃ６アルキレンラジカルを表し、ヒト腫瘍の治療に特に有用である、化学式（I）の化合物に関する。【選択図】なし

Description

本発明は、スルホニルチオモルホリン−３−カルボキサミド（ｓｕｌｆｏｎｙｌｔｈｉｏｍｏｒｐｈｏｌｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）化合物、その調製方法、およびヒト腫瘍の治療へのその使用に関する。

放射線治療および／または抗癌剤を用いる癌治療は、アポトーシスの増加メカニズムとしばしば関連する。しかしながら、治療への耐性は癌治療における共通の特徴である。これは、アポトーシスを経験する癌細胞の機能低下に関し得る。

アポトーシスは精細に調整された生物学的プロセスである。癌細胞の場合、アポトーシスの均衡は細胞生存の利益になる。アポトーシスへの耐性は、主に、アポトーシスカスケードに係るタンパク質における量的な（発現量）および／または質的な（変異）変化によるものである。最大限のアポトーシスに達するには、相違する非排他的信号経路が関連する。これらの経路は、異なる因子により制御されるが、共通の終末点を有する。すなわちそれは、プロカスパーゼ−３およびプロカスパーゼ−７を、エフェクターカスパーゼであるカスパーゼ−３およびカスパーゼ−７へとそれぞれ活性化することである。これらのカスパーゼは、一度活性化されると、アポトーシスプロセスを引き起こす他の基質を切断する。

また、癌細胞のアポトーシスを誘導する異なる方法が試みられてきている。一般に、これらの方法では小分子が用いられる。

しかし、正常な細胞もまたアポトーシスに感応性が高いので、これらの小分子は正常な細胞をも殺傷してしまい、不都合を生じ得る。診療所でこのような分子を用いるには、この点に最大の注意を払わなくてはならない。

このように、正常細胞への作用を低減した腫瘍アポトーシス誘導が可能である新規の化合物の開発は、腫瘍治療分野において際立った関心事である。

先行技術において、スルホニルチオモルホリン−３−カルボキサミド構造を持つ数種の化合物は、特にその抗癌作用について研究されている。

例えば、米国特許第２００２／０１５６０７４号、国際公開第２０１０／００７０２７号および国際公開第９８／３４９１８号では、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）酵素に媒介される疾患の治療に役立つ化合物が記載されている。Ａｌｍｓｔｅａｄ、他（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９９年、Ｖｏｌ．４２、ｎ°２２、４５４７−４５６２）には、チアジンおよびチアゼピン系ＭＭＰ阻害剤が記載されている。他の一部の先行技術文献には、ＴＡＣＥ／ＭＭＰ阻害剤として知られ、スルホニルチオモルホリン−３−カルボキサミド構造を示すＴＭＩ−１およびアプラタスタット（ａｐｒａｔａｓｔａｔ）化合物が記載されている。

しかしながら、前術のいずれの化合物もアポトーシス誘導活性を示してはいない。

本発明の目的の１つは、腫瘍細胞に対し、ナノモルの領域で、強力なアポトーシス誘導活性を有する新規のアポトーシス誘導化合物を提供することである。

本発明の別の目的の１つは、正常な細胞に対して、細胞毒性を低減した、または細胞毒性をも有しない新規のアポトーシス誘導化合物を提供することである。

本発明の他の目的の１つは、プロカスパーゼ−３およびプロカスパーゼ−７を活性化することができる化合物を提供することである。

本発明は化学式（Ｉ）に関し、
（Ｉ）は、

であり、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１−Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２−Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１−Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａにおいて、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、
‐‐ＯＲ^ａ１であり、Ｒ^ａ１は選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される、ＯＲ^ａ１ならびに、
‐‐Ｒ^ａ２であり、Ｒ^ａ２は選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される、Ｒ^ａ２
からなる群より選択される、（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、および、
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂにおいて、ｂは０〜１２を含み、そして、Ｒ^ｂは、
‐‐ＣＮ、
‐‐ＯＨ、
‐‐Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｂ１およびＳＯ_２Ｒ^ｂ１であり、Ｒ^ｂ１はＨ、ＯＨ、選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される、Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｂ１およびＳＯ_２Ｒ^ｂ１、ならびに、
‐‐ＮＨＲ^ｂ２およびＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^ｂ２であり、Ｒ^ｂ２はＨ、選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より選択される、ＮＨＲ^ｂ２およびＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^ｂ２
からなる群より選択される、（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、
からなる群より選択され、
Ｒ_３は、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２‐Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａにおいて、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、
‐‐ＯＲ^ａ１であり、Ｒ^ａ１は選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキルからなる群より選択されるＯＲ^ａ１、ならびに、
‐‐Ｒ^ａ２であり、Ｒ^ａ２は選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択されるＲ^ａ２
からなる群より選択される、（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂにおいて、ｂおよびＲ^ｂは上述で規定される、（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、
からなる群より選択され、
そして、Ａは単結合、またはＣ_１‐Ｃ_６アルキルまたはＣ_６‐Ｃ_１０アリール基により選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_６アルキレンラジカルを表す。

本発明において、Ｒ_３は、式−Ｏ−アルキル−アリールの基ではない。

本発明において、Ｒ_３は、式−Ｏ−アルキル−ヘテロアリールの基ではない。

本発明のひとつの実施形態において、ａは１〜１０を含み、より具体的には１〜６を含み、１〜３を含むと有利である。

別の実施形態において、ａは１または２である。

別の実施形態において、ｂは０〜１０を含み、より具体的には０〜６を含み、０〜３を含むと有利である。

別の実施形態において、ｂは０である。

別の実施形態において、ｂは１または２である。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３＝Ｈである。

別の実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３はＨとは異なる。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３は
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２‐Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａにおいて、ａは１〜１２を含み、そしてＲ^ａは、
選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される、（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、ならびに、
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂにおいて、ｂおよびＲ^ｂは上述で規定される、（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、
からなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３は
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２‐Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａにおいて、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、
選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキルからなる群より選択される、（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、ならびに、
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂにおいて、ｂおよびＲ^ｂは上述で規定される、（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、
からなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３はＨ、選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、ハロゲン原子、およびＣ_１‐Ｃ_１２ハロアルキルからなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３は選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルであり、より具体的には１〜６個の炭素原子を含み、１〜３個の炭素原子を含むと有利である。

別の実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３はＣ_１‐Ｃ_１２ハロアルキルであり、より具体的には１〜６個の炭素原子を含み、１〜３個の炭素原子を含むと有利である。

別の実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_３はハロゲン原子であり、例としてはフッ素原子である。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、Ｈ、および選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、Ｈおよびメチルからなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、メチルである。

別の実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、独立的に、Ｈ、および選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、独立的に、Ｈ、メチルおよびイソプロピルからなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１＝Ｒ_５である。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_２＝Ｒ_４である。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１＝Ｒ_３＝Ｒ_５である。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ａは単結合、またはフェニル基により置換されたＣ_２アルキレンラジカルを表す。

本発明に記載の化学式（Ｉ）の化合物は、腫瘍細胞に対し、強力なアポトーシス誘導活性を示し、そしてプロカスパーゼ−３およびプロカスパーゼ−７活性化を促進する。

本発明において、用語「プロカスパーゼ活性化」は、不活性プロカスパーゼを切断し、アポトーシスプロセスを引き起こす活性カスパーゼを提供することに関連する。

さらに、本発明に記載の化学式（Ｉ）の化合物は、正常な細胞に対して、細胞毒性を低減した、または細胞毒性をも有しないという点で有利である。それゆえ本発明の化合物は、癌、特に薬剤治療に耐性を示す癌の処置に適する。

本発明において、用語「アルキル」は、分岐または直鎖の、飽和炭化水素基を指し、特に１〜１２、好ましくは１〜１０個、より具体的には１〜４個の炭素原子を有する。例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシル、ウンデシル、ドデシルなどである。

本発明において、用語「アルケニル」は、部分不飽和で、非芳香族の、炭化水素基を指し、２〜１２個、好ましくは２〜６個の炭素原子、より具体的には２〜４個の炭素原子を有する。例としては、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、クロチル、ブテニルなどである。

本発明において、用語「シクロアルキル」は、環系、二環系、三環系、または多環系飽和炭化水素基を指し、３〜１２個、好ましくは５〜１０個の炭素原子を有し、置換基により置換可能な任意の環原子を置換することができる。シクロアルキル部分の例として、非限定的に、シクロヘキシル、およびアダマンチルを含む。

本発明において、用語「ハロ」は、周期表の第１７族（ハロゲン）の原子に関し、特に、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を含む。

本発明において、用語「ハロアルキル」は、少なくとも１つの水素原子をハロゲン原子に置換している、Ｃ_１‐Ｃ_１２におけるアルキル基に関し、例えばブロモメチル、フルオロメチル、ヨードメチル、クロロメチル、トリフルオロメチルなどである。また、用語「ハロアルキル」は、すべての水素原子をハロゲン原子に置換している、Ｃ_１‐Ｃ_１２におけるアルキル基に関し、例えばパーフルオロアルキル基などである。

本発明において、用語「アリール」は、環系、二環系、または三環系の芳香族炭化水素環系に関し、６〜１０個、好ましくは６個の炭素原子を有し、置換基により置換可能な任意の環原子を置換することができる。アリール部分の例として、非限定的に、フェニル、およびナフチルを含む。

本発明において、用語「ヘテロアリール」は、５〜８員単環系、８〜１２員二環系、または１１〜１４員三環系の芳香族環系に関し、単環系なら１〜３個のヘテロ原子、二環系なら１〜６個のヘテロ原子、または三環系なら１〜９個のヘテロ原子を有する。前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、またはＳより選択され、置換基により置換可能な任意の環原子を置換することができる。（例えば、単環系、二環系、または三環系の場合、それぞれが炭素原子および１〜３個、１〜６個、または１〜９個の、Ｎ、Ｏ、またはＳであるヘテロ原子である。）
本発明において、用語「ヘテロシクロアルキル」は、５〜７員単環系の非芳香族環系に関し、１〜３個のヘテロ原子を有する。前記ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、またはＳより選択され、置換基により置換可能な任意の環原子を置換することができる。（例えば、炭素原子および１〜３個のＮ、Ｏ、またはＳであるヘテロ原子である。）
本発明において、用語「置換基」は、アルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール基上に、その基の任意の原子において、「置換された」基に関する。適切な置換基として、非限定的に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ＳＯ_３Ｈ、硫酸塩、リン酸塩、パーフルオロアルキル、パーフルオロアルコキシ、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、カルボキシル、オキソ、チオキソ、イミノ（アルキル、アリール、アラルキル）、Ｓ（Ｏ）ｎアルキル（ｎは０〜２）、Ｓ（Ｏ）ｎアリール（ｎは０〜２）、Ｓ（Ｏ）ｎヘテロアリール（ｎは０〜２）、Ｓ（Ｏ）ｎヘテロシクロアルキル（ｎは０〜２）、アミン（モノ−、ジ−、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、およびその組合せ）、エステル（アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル）、アミド(モノ−、ジ−、アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、およびその組合せ）、スルホンアミド（モノ−、ジ−、アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、およびその組合せ）、非置換のアリール、非置換のヘテロアリール、非置換のヘテロシクロアルキル、ならびに、非置換のシクロアルキルを含む。

本発明において、用語「アシル」は、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロシクロアルキルカルボニル、またはヘテロアリールカルボニル置換基に関し、そのいずれも置換基によりさらに置換することができる。

本明細書に記載されている化合物は不斉中心を有し得る。また、不斉置換原子を含む本発明の化合物を光学活性体またはラセミ体に単離することが可能である。光学活性体の調製方法は先行技術においてよく知られており、ラセミ体分割、または光学活性の出発物質からの合成などによりおこなわれる。化合物として、キラル、ジアステレオマーのあらゆるラセミ体、およびあらゆる幾何異性体が意図されているが、これは特に立体化学または異性体が示されている場合を除く。

また、本発明の化合物は、その立体異性体（ジアステレオマー、エナンチオマー）、純粋または混合物、ラセミ混合物、幾何異性体、互変異性体、塩、水和物、溶媒和物、固体形態、およびその混合物を含む。

本発明は、本発明による化合物の「薬学的に許容される」塩に関する。一般に、該用語は有機または無機の塩基または酸から得られる、わずかな毒性のまたは無毒性の塩を指す。これらの塩は、本発明の化合物の最終精製段階で、または塩を精製した化合物に取り込むことで得ることができる。

本発明の一部の化合物およびその塩は、いくつかの固体形態で安定可能である。本発明は、本発明による化合物のあらゆる固体形態を含み、これは非晶質、多形、単結晶および多結晶の形態を含む。本発明の化合物は、例えば、水（水和物）またはエタノールなどの薬学的に許容される溶媒とともに、非溶媒和または溶媒和形態で存在可能である。

「薬学的に許容される」とは、過剰な有毒性、刺激作用、アレルギー反応などがなく、適切な医学的良識の範囲内で、ヒトおよび下等動物の細胞に接触して使用可能であり、そして適切な効果／リスク比に対応するということを意味する。

「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の化合物の生物学的作用および性質を有し、そして、生物学的にあるいはその他の点で望ましくないものではない塩に関する。本発明の化合物は、多くの場合、アミノおよび／もしくはカルボキシル基またはそれらと類似の基の存在下で、酸性および／または塩基性塩を形成可能である。薬学的に許容される酸付加塩は、無機および有機酸より調製可能である。一方、薬学的に許容される塩基付加塩は無機および有機塩基より調製可能である。薬学的に許容される塩に関する先行文献においては、Ｂｅｒｇｅ他の（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｄ、ｖｏｌ．６６、１、１９７７年）がある。「無毒性の薬学的に許容される塩」という表現は、無毒性であり、薬学的に許容される、無機もしくは有機酸、または無機もしくは有機塩基で形成される無毒性の塩に関する。例として、塩とは、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸由来の塩を含み、また、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、フマル酸、メタンスルホン酸、およびトルエンスルホン酸などの有機酸から調製される塩を含む。

本発明の文脈において、用語「治療する」または「治療」とは、本明細書で用いられているように、前記用語が適用される疾患もしくは状態、または１つもしくはより多くの前記疾患もしくは状態の、症状の進行の反転、軽減、抑制、またはそれらの予防を意味する。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐ハロゲン原子、および
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
からなる群より選択される。

アルキル基としてはＣ_１‐Ｃ_６、有利にはＣ_１‐Ｃ_４アルキル基を挙げることができる。

アルキル基としてはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、およびドデシル、有利にはメチルおよびイソプロピルを挙げることができる。

ハロゲン原子としてはフッ素原子を挙げることができる。

ハロアルキル基としてはブロモメチルおよびトリフルオロアルキルを挙げることができる。

本発明の第１の実施形態では、Ａは単結合を表す。

本実施形態による化学式（Ｉ）の化合物は、フェニルスルホニルチオモルホリン−３−カルボキサミド化合物である。

また、本発明は化学式（ＩＩ）の化合物に関し、

ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は上記化学式（Ｉ）にて規定される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐ハロゲン原子、および
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
からなる群より選択される。

ハロゲン原子としてはフッ素原子を挙げることができる。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）または（ＩＩ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５はＨである。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）の化合物は下記化学式（ＩＩ−１）を有し、

ここで、Ｒ_３は上記化学式（Ｉ）にて規定される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はＨである。

別の実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はＨ以外である。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はＨ、選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、ハロゲン原子、およびＣ_１‐Ｃ_１２ハロアルキルからなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３は選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルであり、より具体的には、１〜６の炭素原子、有利には１〜３の炭素原子を含む。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はＣ_１‐Ｃ_１２ハロアルキルであり、より具体的には、１〜６の炭素原子、有利には１〜３の炭素原子を含む。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はハロゲン原子であり、例えば、フッ素原子である。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ドデシル、ブロモメチル、トリフルオロメチル、およびフッ素からなる群より選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−１）において、Ｒ_３はイソプロピルである。

化学式（ＩＩ−１）の化合物として、下記化合物を挙げることができる。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）または（ＩＩ）において、Ｒ_３はＨである。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）の化合物は下記化学式（ＩＩ−２）を有し、

ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は上記化学式（Ｉ）にて規定される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−２）において、Ｒ_２＝Ｒ_４である。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−２）において、Ｒ_１＝Ｒ_３である。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−２）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、Ｈおよび選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より独立的に選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−２）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、Ｈおよびメチルからなる群より独立的に選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−２）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５はメチルである。

化学式（ＩＩ−２）の化合物として、下記化合物を挙げることができる。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）または(II)において、Ｒ_２およびＲ_４はＨである。

化学式（ＩＩ）の化合物として、下記化学式（ＩＩ−３）を有する化合物を挙げることができ、

ここで、Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は上記化学式（Ｉ）にて規定される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−３）において、Ｒ_１＝Ｒ_５である。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−３）において、Ｒ_１＝Ｒ_３＝Ｒ_５である。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−３）において、Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、Ｈおよび選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より独立的に選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−３）において、Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より独立的に選択される。

ひとつの実施形態では、化学式（ＩＩ）または（ＩＩ−３）において、Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、Ｈ、メチル、およびイソプロピルからなる群より独立的に選択される。

化学式（ＩＩ−３）の化合物として、下記化合物を挙げることができる。

本発明の別の実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５はいずれもＨではない。

ひとつの実施形態では、Ｒ_１＝Ｒ_２＝Ｒ_３＝Ｒ_４＝Ｒ_５である。

ひとつの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、メチルなどの、選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキルから選ばれる。

これによる化合物として、下記化合物を挙げることができる。

本発明の別の実施形態では、化学式（Ｉ）において、Ａは、置換されたＣ_１‐Ｃ_６アルキレンラジカルを表す。

ひとつの実施形態では、Ａは、フェニル基などの、アリール基により置換されたエチレンラジカルである。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、ラジカルＡについてオルト位にて配置される２つの基は一致する、すなわちＲ_１＝Ｒ_５である。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）において、ラジカルＡについてメタ位にて配置される２つの基は一致する、すなわちＲ_２＝Ｒ_４である。

また、本発明は下記化合物に関する。

また、本発明は上述で規定される化学式（Ｉ）の化合物を含む薬剤に関する。

また、本発明は上述で規定される化学式（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）または（ＩＩ−３）の化合物を含む薬剤に関する。

また、本発明は上述で規定されるあらゆる化合物を含む薬剤に関する。

また、本発明は、薬剤として使用するための、上述で規定される化学式（Ｉ）の化合物に関する。

また、本発明は、薬剤として使用するための、上述で規定される化学式（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）または（ＩＩ−３）の化合物に関する。

また、本発明は、薬剤として使用するための、上述で規定される化合物に関する。

また、本発明は、１つもしくはより多くの薬学的に許容し得る賦形剤との混合物において、上述で規定される化学式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物に関する。

また、本発明は、１つもしくはより多くの薬学的に許容し得る賦形剤との混合物において、上述で規定される化学式（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）または（ＩＩ−３）の化合物を含む医薬組成物に関する。

また、本発明は、少なくとも１つの薬学的に許容し得る賦形剤と関連して、上述で規定される化合物のうちのいずれかひとつを含む医薬組成物に関する。

また、本発明は、アポトーシス誘導化合物として使用するための、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物、または上述で規定されるあらゆる化合物に関する。

また、本発明は、プロカスパーゼ−３および／またはプロカスパーゼ−７活性剤として使用するための、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物、または上述で規定されるあらゆる化合物に関する。

ひとつの実施形態では、前記化学式（Ｉ）の化合物は抗腫瘍剤とともに投与される。

ひとつの実施形態では、前記化学式（Ｉ）の化合物は放射線治療シーケンスの前、その間、または後に、投与される。

また、本発明は、上述で規定される化学式（Ｉ）の化合物および抗腫瘍剤を含む組合せに関する。

また、本発明は、薬剤として使用するための、化学式（Ｉ）の化合物と抗腫瘍剤の組合せに関する。

化学式（Ｉ）を有する本発明の化合物は単独で投与することが可能だが、医薬組成物として提供することが好ましい。動物およびヒトの両方の使用に有益な、本発明による医薬組成物は、１つもしくはより多くの薬学的に許容し得る担体および任意の他の治療成分とともに、上述で規定される化学式（Ｉ）を有する少なくともひとつの化合物を含む。

然る実施形態では、同時に投与するため、組合せ治療に必要な有効成分を単一の医薬組成物内で組み合わせることができる。

本明細書において、用語「薬学的に許容し得る」およびその文法上の変化形は、組成物、担体、希釈剤および試薬に関して、互換可能に用いられ、そしてそれらの物質が、悪心、めまい、胃のむかつきなどの望ましくない生理的作用をおこすことなく哺乳類に投与可能であることを示す。

薬理組成物において、溶解または分散した有効成分を含む薬理組成物の調製は、当該技術においてよく理解されており、製剤に基づくとは限らない。そのような組成物は典型として、液剤または懸濁剤のいずれかで注射剤として調製される。しかしまた、液剤または懸濁剤に適した固形剤形は、使用に先立ち液体内で調製され得る。また、乳化して調製され得る。本医薬組成物は、特に、固形投与剤形で製剤可能であり、例としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、糖衣剤、または顆粒剤である。

ビヒクルの選択およびビヒクルにおける活性物質の含有量は、一般に活性化合物の溶解性および化学的性質、特定の投与方法、および薬務の規定によって決定される。例として、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムなどの賦形剤、デンプン、アルギン酸などの崩壊剤、ならびにステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクなどの潤滑剤と組み合わせた然る複合ケイ酸塩を、錠剤の調製に用いるとよい。カプセル剤の調製にはラクトースおよび高分子量ポリエチレングリコールの使用が有利である。水性懸濁剤が用いられるときは、乳化剤または懸濁を促進する薬剤を含むとよい。また、ショ糖、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンおよびクロロフォルム、またはそれらの混合物などの希釈剤を用いてもよい。

本医薬組成物は、経口、直腸、鼻、口腔、眼球、舌下、経皮、直腸、局所、膣、非経口（皮下、動脈内、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内および硬膜外を含む）、槽内、および腹腔内を含む局所または全身投与により、ヒトおよび動物に適切な製剤において投与することができる。好ましい経路は、例えば、受容者の状態などで変わり得るということが認められるであろう。

薬学において既知のいずれかの方法により、単位投与剤形にて処方を調製することが可能である。このような方法は、活性成分と１つもしくはより多くの副成分を構成する担体とを関連させるステップを含む。一般的には、活性成分を、液体担体、微粒子状の固体担体またはその両方と均一かつ十分に混合することにより処方を調製する。そして、必要であれば成形する。

本発明の化合物の１日あたりの総投与量は、１回または分割して対象に投与され、例えば体重に対して１日あたり、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの量であるとよい。好ましくは、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの量であるとよい。単位投与組成物は、1日分の用量を賄うのに用いられ得る、その分量を含んでもよい。

しかし、いずれの患者においても、具体的な投与量は様々な要因に依存し、その要因とは、体重、一般的な健康状態、性別、食生活、投与時間および経路、排出および吸収率、他の薬剤との組合せ、および治療する疾患の重症度を含む、ということを理解されたい。

また、本発明は、良性腫瘍、癌腫および癌などのヒト腫瘍の治療および／または予防のために使用される、上述の化学式（Ｉ）の化合物に関する。

また、本発明は、良性腫瘍、癌腫および癌などのヒト腫瘍の治療および／または予防のために使用される、化学式（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物、または上述のいずれかの化合物に関する。

また、本発明は、細胞の異常な増殖を阻害するために使用される、上述の化学式（Ｉ）の化合物に関する。

また、本発明は、細胞の異常な増殖を阻害するために使用される、化学式（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物、または上述のいずれかの化合物に関する。

ひとつの実施形態では、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物、または上述のいずれかの化合物は、プロカスパーゼ−３および／またはプロカスパーゼ−７の活性化に関連する疾患の治療および／または予防に用いられる。

また、本発明は、良性腫瘍、癌腫および癌などのヒト腫瘍の治療および／または予防のために使用される、１つもしくはより多くの薬剤および／または医薬組成物と、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物、または上述のいずれかの化合物との組合せに関する。

また、本発明は、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物または上述のいずれかの化合物を必要とする患者に投与するステップを含む、アポトーシス誘導方法に関する。

また、本発明は、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物または上述のいずれかの化合物を必要とする患者に投与するステップを含む、良性腫瘍、癌腫および癌などのヒト腫瘍の治療および／または予防の方法に関する。

また、本発明は、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩ−１）、（ＩＩ−２）もしくは（ＩＩ−３）の化合物または上述のいずれかの化合物を必要とする患者に投与するステップを含む、細胞の異常な増殖を治療および／または予防する方法に関する。

また、本発明は、本発明による化合物を調製する方法に関する。

上述の化学式（Ｉ）の化合物を調製する方法は、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および化学式（ＩＩＩ）の化合物をカップリングするステップを含み、

化学式（ＩＶ）の化合物を提供するステップを含み、

ここで、Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、上述の化学式（Ｉ）である。

ひとつの実施形態では、カップリング反応はシリル化剤の存在下で行われる。

化学式（Ｉ）の化合物の調製は、下記の方法によって行うことが可能である。

ひとつの実施形態では、Ａは単結合である。

このカップリング反応は、例えば、無水ジクロロメタンなどの無水溶媒中において行われるが、クロロフォルム、ＴＨＦまたはトルエンなどの他の溶媒中で行うことも可能である。

ひとつの実施形態では、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸およびシリル化剤を、例えば、前記溶媒中に溶解し、そしてその混合物を少なくとも１時間還流する。

適切なシリル化剤として、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド（ＢＳＴＦＡ）またはクロロトリメチルシランを挙げることができる。

そして、第３級アミン基およびスルホニルクロリド（ＩＩＩ）の溶液（例として、上記溶媒と同様の溶媒において）を、例えば低温で、例えば−２０℃〜２０℃で、例えば約０℃で、前記混合物に加える。その後、前記混合物を少なくとも１時間撹拌する。

適切な第３級アミン基として、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＯ）を挙げることができる。

カップリングのステップに続き、本発明による調製方法は、化学式（ＩＶ）に対応する酸塩化物の調製を介して化学式（ＩＶ）を化学式（Ｉ）に変換するステップも含む。

本発明の方法によると、下記化学式（ＩＶ−１）

の酸塩化物の組成およびヒドロキシルアミンと前記酸塩化物の反応を介して、化学式（ＩＶ）の化合物を化学式（Ｉ）の化合物に変換することができる。

化学式（ＩＶ）の化合物の化学式（Ｉ）の化合物への変換は、下記の方法によって行うことが可能である。

化学式（ＩＶ）を化学式（ＩＶ−１）の酸塩化物に変換する反応は、例えば、塩化オキサリルおよび触媒量のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を、例えば約０℃で、カップリングのステップ後に得た混合物に添加することにより行われる。その後、得られた混合物を少なくとも１時間撹拌する。

そして、ヒドロキシルアミン溶液（例として水中で５０％）を、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）および水などの溶媒または溶媒の混合物に溶解する。その後、上記で調製した酸塩化物を添加し、化学式（Ｉ）化合物を得る。

ひとつの実施形態では、本発明の調製方法は、例えば下記の方法で示されるように「ワンポット」になる。

図１は、化合物１、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４の存在下（１０μＭ濃度）での、ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞の細胞増殖率（インビトロで）を示す。

図２〜図９において、化合物１はひし形の点で示され、化合物３は四角の点で示され、化合物４は三角の点で示される。
図２は、薬剤濃度（μＭ）による、ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞の細胞増殖率（インビトロで）を示す。図３は、薬剤濃度（μＭ）による、ヒト乳房の腫瘍Ｌ２２６細胞の細胞増殖率（インビトロで）を示す。図４は、薬剤濃度（μＭ）による、正常ヒト乳腺上皮細胞ＨＭＥ−１細胞の細胞増殖率（インビトロで）を示す。図５は、薬剤濃度（μＭ）による、正常ヒト乳腺上皮細胞ＭＣＦ−１０Ａ細胞の細胞増殖率（インビトロで）を示す。図６は、薬剤濃度（μＭ）による、ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞における活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７の割合（インビトロで）を示す。図７は、薬剤濃度（μＭ）による、ヒト乳房の腫瘍Ｌ２２６細胞における活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７の割合（インビトロで）を示す。図８は、薬剤濃度（μＭ）による、正常ヒト乳腺上皮細胞ＨＭＥ−１細胞における活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７の割合（インビトロで）を示す。図９は、薬剤濃度（μＭ）による、正常ヒト乳腺上皮細胞ＭＣＦ−１０Ａ細胞における活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７の割合（インビトロで）を示す。図１０は、Ｚ−ＶＡＤ処理ありまたはなしで、薬剤濃度（μＭ）による、アネキシンＶ陽性細胞（ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９）の割合を示す（白の棒グラフは化合物３、斜線の棒グラフは化合物４）。図１１は、ウシ胎児血清あり（推奨培地、黒い三角の点）またはなし（合成培地、白い三角の点）で、化合物４の薬剤濃度（μＭ）による、ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞の細胞増殖の割合（インビトロで）を示す。図１２Ａは、負の対照群としてＤＭＳＯ内においてジエチルアミノベンズアルデヒド（ＤＥＡＢ）で処理、ＤＭＳＯ単独で処理、またはＤＭＳＯ内の化合物１２（０．６μＭ）で処理をし、そして、癌幹細胞の割合を測定するためのＡＬＤＨ基質を含むＡｌｄｅｆｌｕｏｒアッセイ緩衝剤内でインキュベートした細胞のＦＡＣＳ分析結果を示す。図１２Ｂは、化合物１２（Ｃ１２）またはドキソルビシンで処理した細胞集団におけるＡＬＤＨ＋細胞の割合と、ＤＭＳＯ内細胞集団におけるＡＬＤＨ＋細胞の割合との比を表すヒストグラムを示す。

＜実施例＞
化合物１〜１４の合成に使用した反応物および溶媒（実施例１）は、ＴＣＩＥｕｒｏｐｅおよびＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈから市販品を購入した。

すべての生物学的実験（実施例２〜９）は、推奨の細胞株特異的培地にて行った。ＳＵＭ１４９およびＬ２２６では、培地に１０％のウシ胎児血清を添加した。また、ＨＭＥ−１およびＭＣＦ−１０Ａでは、培地に５％のウマ血清を添加した。

＜実施例１：化合物１〜１４の合成＞
＜＜化合物１＞＞
冷却器を備えた三つ口丸底フラスコ内で、無水ＣＨ_２ＣＩ_２（０．７ｍＬ）内の２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸（１ｍｍｏｌ）を室温に置いた。前記混合物を撹拌下に置き、１０分間還流した。Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド（ＢＳＴＦＡ）（２．０５ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物をさらに２時間還流した。続けて、ＣＨ_２ＣＩ_２（０．３５ｍＬ）に溶解したＮ−メチルモルホリン（ＮＭＯ）（１５５μＬ）およびフェニルスルホニルクロリド（１ｍｍｏｌ）を、０°Ｃで添加した。前記反応混合物を室温まであたため、撹拌を一晩中行った。

得られた該溶液を、０°Ｃで、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（３０μＬ）および塩化オキサリル（２．４ｍｍｏｌ）に添加した。前記反応混合物を室温まであたため、撹拌を１４時間行った。

ヒドロキシルアミン溶液（水中で５０％、１．４５ｍＬ）をＴＨＦ（５ｍＬ）およびＨ_２０（０．３５ｍＬ）に溶解し、そして、室温まであたため、さらに１２時間撹拌した前記反応混合物に、０°Ｃで、速やかに添加した。

相分離を可能にするため水を添加した。下相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。溶媒を除去した後、ＣＨ_２ＣＩ_２／酢酸エチル（１／１）溶出剤を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、粗残渣を精製し、望んだ物質である（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−（ベンゼンスルホニル)−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（１）を得た。

白色固体；¹H NMR (DMSO d6):δ = 10.78 (s, 1H), 8.01-7.37 (m, 5H),4.08-3.86 (m, 2H), 2.95-2.56 (m, 5H), 2.14(s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.23 (s,3H). ¹³C (DMSO d6): δ = 163.93,139.13, 132.81, 129.24, 126.52, 58.70, 41.15, 30.64, 28.40, 26.52, 23.96. C₁₃H₁₈N₂O₄S₂m/z 331.0781 (100%,(M+H⁺)).
化合物２〜１４は、スルホニルクロリドを出発物質として用い、この手順によって得られた。

＜＜化合物２＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および４−メチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−メチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（２）を得た。

白色固体； ¹H NMR (acetone d6):δ = 10.29 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.66 (d, J = 7.9Hz, 2H), 7.37 (d, J =7.9Hz, 2H), 4.21 (s, 1H), 3.99 (td, J = 12.6 and 2.7Hz, 1H), 3.90 (dt, J= 12.6 and 3.5Hz, 1H), 3.04 (ddd, J = 13.7, 12.6 and 3.5Hz, 1H),2.52 (dt, J = 13.7 and 2.7Hz, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.26 (s,3H). ¹³C (acetone d6): δ = 165.18, 144.15, 137.82, 130.39, 127.86,60.73, 42.33, 40.34, 29.06, 27.17, 25.27, 21.39. C₁₄H₂₀N₂O₄S₂m/z 345.0943 (100%, (M+H⁺)).
＜＜化合物３＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸およびイソプロピルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−イソプロピルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（３）を得た。

白色固体；¹H NMR (DMSO d6):δ = 10.70 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.64-7.62 (d, 2H), 7.45-7.43 (d, 2H), 3.97 (t,J = 6Hz, 2H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.00-2.87 (m, 2H), 2.51 (s, 4H), 1.40(s, 3H), 1.23 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.17 (m,3H). ¹³C (DMSO d6): δ =164.11, 153.49, 136.80, 127.16, 126.78, 58.62, 41.06, 33.28, 28.43, 26.53,23.96, 2342, 23.35.
＜＜化合物４＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および２，３，５，６−テトラメチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（２，３，５，６−テトラメチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（４）を得た。

白色固体；¹H NMR (acetone d6):δ = 10.09 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.22 (td, J =13.5 and2.6Hz, 1H), 4.08 (s, 1H), 3.63 (dt, J = 13.8 and 2.9Hz, 1H), 3.11 (ddd, J= 13.5, 12.9 and 3.4Hz, 1H), 2.49 (s, 6H), 2.47 (dt, J = 13.7 and 2.4Hz,1H), 2.28 (s, 6H), 1.53 (s, 3H), 1.25 (s, 3H). ¹³C (acetone d6): δ =166.14, 137.19, 137.10, 136.77, 59.64, 41.81, 9.93, 29.42, 27.62, 24.62, 20.99,17.95. C₁₇H₂₆N₂O₄S₂ m/z387.1412 (100%,(M+H⁺)).
＜＜化合物５＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸およびブロモメチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−ブロモメチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（５）を得た。

黄色固体；¹H NMR (DMSOd6): δ = 9.02 (m, 2H), 8.12-8.10 (m, 2H), 7.53-7.51 (m, 2H), 4.41 (s, 2H),2.93-2.67 (m, 2H), 1.48 (s, 3H), 1.27 (s, 3H). ¹³C (DMSO d6): δ =166.30, 144.09, 142.54, 131.26, 128.42, 68.31, 56.44, 49.13, 33.00, 27.26,25.38, 22.51.
＜＜化合物６＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および４−トリフルオロメチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−トリフルオロメチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（６）を得た。

白色固体；1H NMR (DMSO d6): δ =10.71 (s, 1H), 9.83 (s, 1H), 8.06-7.06 (m, 4H), 3.98-3.78 (m, 3H), 2.99-2.55(m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.17 (s, 3H). 13C (DMSO d6): δ = 163.55, 159.55, 142.66,132.59, 130.32, 129.08, 128.76, 127.54, 126.43, 126.11, 124.77, 122.06, 119.94,117.65, 65.27, 58.91, 54.29, 41.46, 28.33, 26.48, 23.92.
＜＜化合物７＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および４−フルオロフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（７）を得た。

白色固体；¹H NMR (DMSOd6): δ = 9.65 (s, 2H), 8.00-7.97 (m, 2H), 7.19-7.15 (m, 3H), 4.62-3.89 (m, 2H),2.81-2.67 (m, 2H), 1.48 (s, 3H), 1.39 (s, 3H). ¹³C (DMSO d6): δ =165.54, 163.72, 159.62, 135.24, 130.11, 130.01, 129.66, 129.56, 116.50, 116.27,116.17, 115.95, 64.51, 58.78, 48.56, 28.38, 26.51, 23.97.
＜＜化合物８＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および４−エチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−エチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（８）を得た。

白色固体；¹H NMR (DMSOd6): δ= 10.72 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 7.62 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 6.0Hz, 2H), 4.05 (s, 1H), 3.99-3.71 (m, 4H), 2.86-2.66 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 1.38(s, 3H), 1.16 (s, 3H). ¹³C (DMSO d6): d = 164.09, 149.04, 136.53,128.53, 126.70, 58.64, 41.04, 28.39, 27.92, 26.50, 23.94, 14.93.
＜＜化合物９＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸およびジフェニルエタンフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（ジフェニルエタンスルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（９）を得た。

白色固体；¹H NMR (DMSOd6): δ= 7.80 (s, 1H), 7.27-7.02 (m,10H), 5.54 (s, 1H), 4.53-4.47 (m, 2H), 3.90(d, J = 6Hz, 2H), 3.72-3.65 (m, 1H), 2.87 (td, J = 13.5 and 2.6Hz, 1H),2.55-2.49 (m, 1H),2.06-1.95 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.01 (m, 3H). ¹³C(DMSO d6): δ=160.91, 142.28, 141.90, 140.66, 128.84, 128.69, 127.59, 126.96, 126.74,57.15, 51.31, 46.52, 46.15, 43.27, 39.69, 26.39, 26.26, 15.03.
＜＜化合物１０＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および４−ドデシルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−ドデシル）フェニルスルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（１０）を得た。

淡黄色粘性油；¹H NMR (DMSOd6): δ=7.80 (d, 2H), 7.24 (d, 2H), 6.75 (s, 1H), 4.37 (d, J = 6Hz, 1H),3.90-3.51 (m, 1H), 3.12-2.39 (m, 2H), 1.56-0.73 (m, 35H). ¹³C (DMSOd6): δ= 165.37, 154.82, 153.57, 133.03, 128.72, 128.36, 127.75, 65.95, 61.27, 48.01,46.23, 40.09, 39.71, 38.08, 36.59, 31.83, 29.64, 29.28, 27.53, 26.49, 22.66,21.88, 19.33, 15.05, 14.10, 12.08.
＜＜化合物１１＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および２，４，６−トリメチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（２，４，６−トリメチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（１１）を得た。

白色固体；¹H NMR (acetoned6): δ= 10.15 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.05 (s, 2H), 4.22 (td, J= 13.2 and 2.3Hz,1H), 4.07 (s, 1H), 3.68 (dt, J= 13.2 and 2.7Hz, 1H), 3.12 (ddd, J= 13.9, 13.2and 2.7Hz, 1H), 2.57 (s, 6H), 2.51 (dt, J= 13.9 and 2.3Hz, 1H), 2.30 (s, 3H),1.52 (s, 3H), 1.26 (s, 3H). ¹³C (acetone d6): δ= 165.94, 143.54,140.98, 132.77, 60.14, 41.94, 39.99, 29.46, 27.56, 24.79, 22.98, 20.82. C₁₆H₂₄N₂0₄S₂m/z 372.1177 (100%, (M+H⁺)).
＜＜化合物１２＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および２，３，４，５，６−ペンタメチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（２，３，４，５，６−ペンタメチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（１２）を得た。

白色固体；¹H NMR (acetone d6):δ= 10.10 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.19 (td, J= 13.0 and 2.6Hz, 1H), 4.11 (s, 1H),3.59 (dt, J= 13.6 and 3.3Hz, 1H), 3.09 (ddd, J= 13.6, 13.0 and 3.3Hz, 1H), 2.52(s, 6H), 2.45 (dt, J = 13.6 and 2.6Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.25 (s, 6H), 1.55(s, 3H), 1.25 (s, 3H). ¹³C (acetone d6): δ= 165.87, 140.84, 138.48,135.68, 135.42, 59.74, 41.95, 40.00, 29.56, 27.59, 24.75, 19.02, 17.87, 17.12.C₁₈H₂₈N₂0₄S₂ m/z400.1490 (100%, (M+H⁺)).
＜＜化合物１３＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および４−プロピルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（４−プロピルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（１３）を得た。

白色固体；¹H NMR (acetoned6): δ = 10.29 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.69 (d, J= 8.3Hz, 2H), 7.39 (d, J =8.3Hz, 2H), 4.21 (s, 1 H), 4.00 (td, J= 12.3 and 2.5Hz, 1H), 3.90 (dt, J = 12.3and 4.0Hz, 1H), 3.09 (ddd, J = 13.8, 12.3 and 4.0Hz, 1H), 2.69 (t, J = 7.5Hz,2H), 2.52 (dt, J = 13.8 and 2.5Hz, 1H), 1.67 (quint, J = 7.5Hz, 2H), 1.50 (s,3H), 1 .26 (s, 3H), 0.94 (t, J = 7.5Hz, 3H), .¹³C (acetone d6): δ =165.23, 148.73, 138.05, 129.86, 127.91 , 60.73, 42.36, 40.31 , 38.24, 29.54,27.19, 25.27, 24.86, 13.88. C₁₆H₂₄N₂0₄S₂m/z 372.1177 (100%, (M+H⁺)).
＜＜化合物１４＞＞
上述の手順により、２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および３，５−ジメチルフェニルスルホニルクロリドから（３Ｓ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−［（３，５−ジメチルフェニル）スルホニル］−２，２−ジメチル−３−チオモルホリンカルボキサミド（１４）を得た。

白色固体；¹H NMR (acetone d6): δ=10.35 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.26 (s, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.97(td, J = 12.2 and 2.8Hz, 1H), 3.90 (ddd, J = 12.2, 4.3 and 2.8Hz, 1H), 3.04(ddd, J = 13.6, 12.2 and 4.3Hz, 1H), 2.51 (dt, J = 13.6 and 2.8Hz, 1H), 2.37(s, 6H), 1.52 (s, 3H), 1.25 (s, 3H). ¹³C (acetone d6): δ= 165.01 ,140.30, 139.85, 124.92, 125.36, 60.79, 42.36, 40.39, 29.32, 27.24, 25.33,21.19. C₁₅H₂₂N₂0₄S₂ m/z358.1021 (100%, (M+H⁺)).
＜実施例２：腫瘍細胞増殖の阻害＞
ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞（ｂａｓａｌサブタイプの炎症性乳癌（ＩＢＣ））を、３０００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目および３日目に、化合物１、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４を１０μＭで添加した。５日目に、１０μＬのアラマーブルー（ａｌａｍａｒｂｌｕｅ）染色液において、３７℃で、２時間インキュベートすることにより、３連での生細胞数を測定した（図１）。

＜実施例３：腫瘍細胞増殖の阻害＞
ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞を、３０００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目および３日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５日目に、１０μＬのアラマーブルー染色液において、３７℃で、２時間インキュベートすることにより、３連での生細胞数を測定した（図２）。

ヒト乳房の腫瘍Ｌ２２６細胞（ＥＲＢ−Ｂ２サブタイプの炎症性乳癌（ＩＢＣ））を、３０００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目および３日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５日目に、１０μＬのアラマーブルー染色液において、３７℃で、２時間インキュベートすることにより、３連での生細胞数を測定した（図３）。

＜実施例４：正常細胞の増殖における作用＞
正常ヒト乳腺上皮細胞ＨＭＥ−１を、３０００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目および３日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５日目に、１０μＬのアラマーブルー染色液において、３７℃で、２時間インキュベートすることにより、３連での生細胞数を測定した（図４）。

正常ヒト乳腺上皮細胞ＭＣＦ−１０Ａを、３０００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目および３日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５日目に、１０μＬのアラマーブルー染色液において、３７℃で、２時間インキュベートすることにより、３連での生細胞数を測定した（図５）。

＜実施例５：腫瘍細胞における活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７の誘導＞
ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞を、１００００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５０μＬのＣａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ３／７試薬において、２５℃で、６０分間インキュベートすることにより、活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７を、２４時間の処理後に、３連で測定した。この試薬は、細胞溶解バッファー（Ｐｒｏｍｅｇａ）内に発光前（ｐｒｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ）テトラペプチド配列ＤＥＶＤを含む。（図６）。

ヒト乳房の腫瘍Ｌ２２６細胞を、１００００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５０μＬのＣａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ３／７試薬において、２５℃で、６０分間インキュベートすることにより、活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７を、２４時間の処理後に、３連で測定した。この試薬は、細胞溶解バッファー（Ｐｒｏｍｅｇａ）内に発光前テトラペプチド配列ＤＥＶＤを含む。（図７）。

＜実施例６：正常細胞における活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７の誘導＞
正常ヒト乳腺上皮細胞ＨＭＥ−１を、１００００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５０μＬのＣａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ３／７試薬において、２５℃で、６０分間インキュベートすることにより、活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７を、２４時間の処理後に、３連で測定した。この試薬は、細胞溶解バッファー（Ｐｒｏｍｅｇａ）内に発光前テトラペプチド配列ＤＥＶＤを含む。（図８）。

正常ヒト乳腺上皮細胞ＭＣＦ−１０Ａを、１００００細胞／１００μＬで、３７℃、５％のＣＯ_２中において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目に、２０μΜ〜３００ｎＭの範囲の、段階希釈薬剤（化合物１、３または４）を添加した。５０μＬのＣａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ３／７試薬において、活性カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７を、２５℃で、６０分間インキュベートすることにより、２４時間の処理後に、３連で測定した。この試薬は、細胞溶解バッファー（Ｐｒｏｍｅｇａ）内に発光前テトラペプチド配列ＤＥＶＤを含む。（図９）。

＜実施例７：化合物３および化合物４が誘導するアポトーシスを完全に遮断するカスパーゼの阻害＞
ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞を、１０^６細胞／５μＬの濃度で、ディッシュにプレーティングした。全カスパーゼ阻害剤であるＺ−ＶＡＤ−ＦＭＫありまたはなしで、細胞を化合物３または化合物４（２．５μΜ〜２０μΜ）で４８時間処理した。細胞アポトーシスを測定する目的で、細胞をａｎｎｅｘｉｎＶ−ＦＩＴＣおよび７−ＡＡＤで２重染色した。Ｚ−ＶＡＤ処理により化合物３および化合物４誘導アポトーシスを完全に障害した（図１０）。

＜実施例８＞
ＳＵＭ１４９およびＬ２２６腫瘍細胞増殖の阻害のための化合物１〜１４のＩＣ５０値を測定した（実施例２および３の実験手順による）。

ＩＣ５０値は細胞増殖阻害をもとに算出した。

（−）テストなし
また、ＭＣＦ−１０ＡおよびＨＭＥ−１正常細胞増殖の阻害のための化合物１〜１４のＩＣ５０値も測定した（実施例４および５の実験手順による）。

ＩＣ５０値は細胞増殖阻害をもとに算出した。

（−）テストなし
これらの結果において、本発明の化合物１〜１４は、正常細胞の増殖に影響することなく、選択的に腫瘍細胞の増殖を阻害することを示す。

＜実施例９＞
ＳＵＭ１４９およびＬ２２６腫瘍細胞におけるカスパーゼ−３／７の活性化を測定した。

相対発光単位（ＲＬＵ）の算出値Ｒは、未処理細胞から倍増した（Ｒ＝２０μΜでのＲＬＵ／０μΜでのＲＬＵ）。

（−）テストなし
また、ＭＣＦ−１０ＡおよびＨＭＥ−１正常細胞におけるカスパーゼ−３／７の活性化も測定した。

（−）テストなし
これらの結果は、本発明の化合物１〜１６は、正常細胞よりも腫瘍細胞においてより高いカスパーゼ−３／７活性を誘導することを示す。

＜実施例１０：腫瘍細胞増殖の阻害と培地構成の影響＞
ヒト乳房の腫瘍ＳＵＭ１４９細胞を、３０００細胞／１００μＬ、３７℃、５％のＣＯ_２中で、１０％のＦＣＳを含む推奨培地またはＦＣＳを含まない合成培地において、９６ウェルプレートにプレーティングした。０日目および３日目に、１０μΜ〜０．１６μΜの範囲の段階希釈薬剤（化合物４）を添加した。５日目に、１０μＬのアラマーブルー染色液において、３７℃で、２時間インキュベートすることにより、３連での生細胞数を測定した（図１１）。１０％のＦＣＳを含む推奨培地において、２μΜでＩＣ５０値を測定し、また、ＦＣＳなしの場合では、０．６μΜでＩＣ５０値を測定した。

＜実施例１１：３３の異なる細胞モデルにおける１４の化合物の高スループット細胞増殖分析＞
ＢＸＰＣ３細胞、ＤＵ１４５細胞、ＯＰＭ２細胞、Ｕ−２−ＯＳ細胞、ＰＬＣＰＲＦ５細胞、Ａ５４９細胞、ＳＵＭ１４９細胞、ＨｅｐＧ２細胞、Ｌ３８９細胞、ＨＧＣ２７細胞、ＴＯＶ−１１２Ｄ細胞、Ｍｅｓｓａ細胞、Ｋａｒｐａｓ２９９細胞、Ａ４９８細胞、ＨＣＴ−１１６細胞、Ｈ１２９９細胞、Ｈｅｐ２細胞、ＤＬＤ１細胞、ＨＵＴ７８細胞、ＡＧＳ細胞、Ａ４５７３細胞、ＡＣＨＮ細胞、Ｐａｎｃ−１細胞、Ａ３７５細胞、ＢＴ−２０細胞、Ｌ２２６細胞、ＭＤＡＭＢ２３１細胞、Ｕ１１８細胞、ＰＣ−３細胞、ＳＷ５７９細胞、ＣＬＳ３５４−４細胞、Ｃａｌｕ−６細胞、Ｕ８７ＭＧ細胞、ＭｅＷＯ細胞、ＨＵＶＥＣ、ＨＭＥ−１細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、および線維芽細胞を含む、バリデーションをした３８の細胞株を、３０００細胞／１００μＬ、３７℃、５％のＣＯ_２中で、１０％のＦＣＳを含む推奨培地にプレーティングした。

上記実施例に記載の化合物１２、４、１１、３、１３、６、８、１４、１および７、ならびに対照としてのＤＭＳＯを様々な濃度でテストした。そして、１０μΜでの細胞増殖の阻害率を特に研究した。

これらの結果の教師なし階層的クラスタリングを測定し、細胞株感受性によるこれらの化合物の可変性効率を示した。特に、化合物１２は質的（ＩＣ５０＜１μΜ）および量的（調査した細胞株の８６％に感受性があった）ともに最も効果的であると認められた。

さらに、非腫瘍細胞株（ＨＵＶＥＣ、ＨＭＥ−１細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、および線維芽細胞）は研究したすべての化合物に耐性があることが有利に認められた。

＜実施例１２：化合物１２の癌幹細胞コンパートメントの阻害＞
癌幹細胞（ＣＳＣｓ）は、腫瘍発生、維持、治療への耐性、および転移進行に寄与すると考えられている。薬剤での治療はＣＳＣｓの耐性を高める。乳癌幹細胞は、インビトロにおいて、市販の分析を用いて検出可能な（ＣＳＣｓは「Ａｌｄｅｆｌｕｏｒ」陽性である）アルデヒドデヒドロゲナーゼ−１（ＡＬＤＨ１）を高レベルで発現する。簡潔に説明をすると、ＡＬＤＨ基質（ＢＡＡＡ（ＢＯＤＩＰＹ(R)−アミノアセトアルデヒド），１μｍｏｌ／Ｌｐｅｒ１ｘ１０^６細胞）を含むＡｌｄｅｆｌｕｏｒアッセイバッファ内で細胞をインキュベートし、ＡＬＤＨ特異的阻害剤であるジエチルアミノベンズアルデヒド（ＤＥＡＢ）の存在下で陰性対照を行った。その後、細胞を、３７℃で、４０分間インキュベートし、ＬＳＲＩＩフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で分析した。生細胞をゲートするためにＰＩ（ヨウ化プラリドキシム）排除を用いた。

０．６μΜでの処理はＣＳＣのプールを２．６％から０．４％に低減した（図１２Ａ）。全体的な結果を、処理後ＡＬＤＨ＋細胞の割合とＤＭＳＯ内ＡＬＤＨ＋細胞の割合との比として示す。前述したように、化合物１２はＡｌｄｅｆｌｕｏｒ比を低減するが、ドキソルビシンでの処理はＡｌｄｅｆｌｕｏｒ比を増加させる（図１２Ｂ）。

＜実施例１３：ＭＭＴＶ−ＥｒＢ２／ｎｅｕマウスにおいて腫瘍アポトーシスを誘導する化合物＞
アポトーシス性細胞におけるＤＮＡ断片化をＴＵＮＥＬ分析（ＡｐｏｐＴａｇ検出キット、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）により、製造者の推奨に従って分析した。

簡潔に説明をすると、ビヒクルまたは化合物１２、４もしくは８（１００ｍｇ／ｋｇ）で３０日間処理をしたＭＭＴＣ−ＥｒＢ２／ｎｅｕマウス由来の腫瘍より、パラフィン包埋固定をした組織の４μｍ切片から、継続的なｈｉｓｔｏｌｅｍｏｎおよびエタノール洗浄でパラフィンを取り除き、そして、室温で１５分間、２０μｇ／ｍＬのプロテイナーゼＫで処理をした。内在性のペルオキシダーゼを３％過酸化水素でクエンチした。ジゴキシゲニン−ｄＮＴＰｓは、末端デオキシヌクレオチドトランスフェラーゼ（ＴｄＴ）によって遊離３’ＯＨＤＮＡ末端に酵素的に添加され、そしてペルオキシダーゼ抗ジゴキシゲニン抗体によりあらわれる。ジアミノベンジジン混合基質（Ｄａｋｏ）を用いて呈色を行った。１％メチルグリーン溶液で、室温において５分間対比染色を行った。蒸留水およびＮ−ブタノール洗浄後、試料をＰｅｒｔｅｘｍｅｄｉｕｍ（ＣｅｌｌＰａｔｈ）に設置した。そして、ＬｅｉｃａＤＭＤ１０８デジタル顕微鏡（ＬｅｉｃａＭｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓＧｍｂＨ）にて観察した。

発明者は、それぞれの条件で、ＴｄＴ陽子核を有する細胞の割合を測定した。ＴｄＴ陽子核の割合は、ビヒクルまたは化合物８で処理したマウスの腫瘍では稀であるが、化合物４で処理したマウスの腫瘍では５０％、さらに化合物１２で処理したマウスの腫瘍では７０％に達するということが観察された。

Claims

下記化学式（I）の化合物であって、
（I）

上記化学式において、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１−Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２−Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１−Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、
（但し、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、ＯＲ^ａ１およびＲ^ａ２からなる群より選択され、
Ｒ^ａ１は選択的に置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルキル、選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１−Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択され、
Ｒ^ａ２は選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１−Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される。）、ならびに
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、からなる群より選択され、
（但し、ｂは０〜１２を含み、そして、Ｒ^ｂは、ＣＮ、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｂ１およびＳＯ_２Ｒ^ｂ１、ならびにＮＨＲ^ｂ２およびＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^ｂ２からなる群より選択され、
Ｒ^ｂ１はＨ、ＯＨ、選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択され、
Ｒ^ｂ２はＨ、選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキルからなる群より選択される。）、
Ｒ_３は、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２‐Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、
（但し、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、ＯＲ^ａ１およびＲ^ａ２からなる群より選択され、
Ｒ^ａ１は選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキルからなる群より選択され、
Ｒ^ａ２は選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される。）、ならびに
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、からなる群より選択され、
（但し、ｂおよびＲ^ｂは上記の定義通りである。）、
そして、Ａは単結合、またはＣ_１‐Ｃ_６アルキルまたはＣ_６‐Ｃ_１０アリール基により選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_６アルキレンラジカルを表す、化学式（I）の化合物。
Ｒ_３は、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２‐Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、
（但し、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、選択的に置換されたＣ_６‐Ｃ_１０アリール、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_１‐Ｃ_１０ヘテロアリールからなる群より選択される。）、ならびに、
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、
（但し、ｂおよびＲ^ｂは請求項１の定義通りである。）
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_３は、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_２‐Ｃ_１２アルケニル、
‐ハロゲン原子、
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル、
‐（ＣＨ_２）_ａＲ^ａ、
（但し、ａは１〜１２を含み、そして、Ｒ^ａは、選択的に置換されたＣ_３‐Ｃ_１２シクロアルキル、および選択的に置換されたＣ_２‐Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、からなる群より選択される。）、ならびに、
‐（ＣＨ_２）_ｂＲ^ｂ、
（ｂおよびＲ^ｂは請求項１の定義通りである。）
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、
‐Ｈ、
‐選択的に置換された、分岐の、または直鎖のＣ_１‐Ｃ_１２アルキル、
‐ハロゲン原子、および
‐Ｃ_１‐Ｃ_１２ハロアルキル
からなる群より選択される請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
下記化学式（ＩＩ）の化合物であって、

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、請求項１〜４のいずれかの定義通りである、
請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
下記化学式（ＩＩ−１）の化合物であって、

Ｒ_３は、請求項１〜４のいずれかの定義通りである、
請求項１〜５のいずれかに記載の化合物。
Ｒ_３は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ドデシル、ブロモメチル、トリフルオロメチル、およびフッ素からなる群より選択される、
請求項１〜６のいずれかに記載の化合物。
下記化学式（ＩＩ−２）の化合物であって、

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、請求項１〜４のいずれかの定義通りである、
請求項１〜６のいずれかに記載の化合物。
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４およびＲ_５は、独立的に、Ｈおよびメチルからなる群より選択される、
請求項８に記載の化合物。
下記化学式（ＩＩ−３）の化合物であって、

Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、請求項１〜４のいずれかの定義通りである、
請求項１〜５のいずれかに記載の化合物。
Ｒ_１、Ｒ_３およびＲ_５は、独立的に、Ｈ、メチルおよびイソプロピルからなる群より選択される、
請求項１０に記載の化合物。
Ｒ_１＝Ｒ_５である、請求項１〜５および請求項８〜１１のいずれかに記載の化合物。
Ｒ_２＝Ｒ_４である、請求項１〜５および請求項８〜１１のいずれかに記載の化合物。
下記化合物より選択される請求項１〜１３のいずれかに記載の化合物。
請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物を含む薬剤。
ヒト腫瘍の治療および／または予防に用いられる、請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物。
２，２−ジメチル−３−チオモルホリン酸および下記化学式（ＩＩＩ）の化合物をカップリングするステップを含み、

下記化学式（ＩＶ）の化合物を提供し、

Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＲ_５は、請求項１〜４のいずれかの定義通りである、
請求項１〜１４のいずれかに記載の化合物の調製方法。