JP2014520253A5

JP2014520253A5 -

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Publication number: JP2014520253A5
Application number: JP2014509320A
Authority: JP
Filing date: 2012-04-26
Publication date: 2015-05-21
Anticipated expiration: 2032-04-26

Claims

蛍光染料で染色されている血液試料の好塩基球分析を行うための血液分析器であって、前記蛍光染料が、細胞膜透過性および核酸結合性であり、
前記血液試料内の粒子を励起するように配置された励起源；（１）前記励起血液試料からの軸方向光損失を測定するように配置された軸方向光損失検出器、（２）前記励起血液試料からの中間角散乱を測定するように配置された中間角散乱検出器、（３）前記励起血液試料からの９０°側方散乱を測定するように配置された側方散乱検出器、および（４）前記励起血液試料から発光した蛍光を測定するように配置された蛍光検出器、を含む複数の検出器；ならびに
（ａ）前記複数の検出器から（１）軸方向光損失、（２）中間角散乱、（３）９０°側方散乱、および（４）蛍光の測定値を受け、
（ｂ）４つ全ての測定値に基づいて、前記血液試料の好塩基球クラスター分析を行うように構成されたプロセッサ；
を含む血液分析器。
前記好塩基球クラスター分析が、前記受けた測定値の粗クラスタリングを含む、請求項１に記載の血液分析器。
前記好塩基球クラスター分析が、類似クラスターを組み合わせるための決定要因として、多次元確率距離尺度を利用した、前記受けた測定値の密クラスタリングを含む、請求項２に記載の血液分析器。
前記側方散乱検出器が、前記励起血液試料からの９０°偏光側方散乱を測定するように配置された偏光側方散乱検出器である、請求項１に記載の血液分析器。
前記プロセッサが、（１）軸方向光損失、（２）中間角散乱、（３）９０°偏光側方散乱、および（４）蛍光の測定値に基づいて、前記血液試料内のリンパ球から血液試料内の好塩基球を識別するようにさらに構成される、請求項４に記載の血液分析器。
前記励起血液試料からの９０°偏光解消側方散乱を測定するように配置された偏光解消側方散乱検出器をさらに含む、請求項４に記載の血液分析器。
前記プロセッサが、（１）軸方向光損失、（２）中間角散乱、および（３）９０°側方散乱の測定値に基づいて、前記血液試料内の好中球、単球、および好酸球から前記血液試料内の好塩基球を識別するようにさらに構成される、請求項１に記載の血液分析器。
前記プロセッサが、（１）軸方向光損失、（２）中間角散乱、（３）９０°偏光側方散乱、および（４）蛍光の測定値に基づいて、前記血液試料内の好中球、単球、および好酸球から前記血液試料内の好塩基球を識別するようにさらに構成される、請求項１に記載の血液分析器。
前記プロセッサが、前記受けた測定値を予備選別して、前記蛍光閾値に適合しないいずれの粒子も検討対象から外すようにさらに構成される、請求項１に記載の血液分析器。
前記軸方向光損失検出器が、０°散乱で軸方向光損失を測定する、請求項１に記載の血液分析器。
前記中間角散乱検出器が、約３°〜約１５°で光角度散乱を測定する、請求項１に記載の血液分析器。
前記複数の検出器が、１つまたは複数の光電子増倍管を含む、請求項１に記載の血液分析器。
前記励起源が、レーザーである、請求項１に記載の血液分析器。
前記血液試料を試薬で希釈するためのインキュベーションサブシステムをさらに含む、請求項１に記載の血液分析器。
前記試薬が、蛍光染料および溶解薬剤を含む、請求項１４に記載の血液分析器。
前記試薬が、（ａ）少なくとも１つの界面活性剤、（ｂ）少なくとも１つの緩衝液または少なくとも１つの塩、（ｃ）少なくとも１つの抗菌剤、および（ｄ）前記蛍光染料を含む、請求項１４に記載の血液分析器。
前記インキュベーションサブシステムが、前記血液試料を試薬と共に、約３０秒未満の時間、インキュベートするように構成される、請求項１４に記載の血液分析器。
前記インキュベーションサブシステムが、前記血液試料を試薬と共に、約３０℃〜約５０℃の温度範囲でインキュベートするように構成される、請求項１４に記載の血液分析器。
前記インキュベーションサブシステムが、前記血液試料を試薬と共に、約４０℃の温度でインキュベートするように構成される、請求項１４に記載の血液分析器。
自動化血液分析器で好塩基球分析を行う方法であって、
（ａ）全血試料を、赤血球（ＲＢＣ）溶解薬剤および細胞膜透過性核酸結合蛍光染料を含む試薬で希釈すること；
（ｂ）ステップ（ａ）の希釈血液試料を、約３０秒未満のインキュベーション時間、約３０℃〜約５０℃の範囲の温度でインキュベートすること；
（ｃ）ステップ（ｂ）でインキュベートした試料を、前記血液分析器のフローセルに送り出すこと；
（ｄ）前記インキュベートした試料が前記フローセルを通過する間に、ステップ（ｃ）でインキュベートした試料を励起源で励起すること；
（ｅ）励起試料からの複数の光散乱シグナルおよび蛍光発光シグナルを収集すること；および
（ｆ）ステップ（ｅ）で集めた全シグナルに基づいて好塩基球クラスター分析を行うこと、
を含む方法。
前記好塩基球クラスター分析が、前記収集したシグナルの粗クラスタリングを含む、請求項２０に記載の方法。
前記好塩基球クラスター分析が、類似のクラスターを組み合わせるための決定要因として多次元確率距離尺度を利用した、前記収集したシグナルの密クラスタリングをさらに含む、請求項２１に記載の方法。
前記試薬が、（ａ）少なくとも１つの界面活性剤、（ｂ）少なくとも１つの緩衝液または少なくとも１つの塩、（ｃ）少なくとも１つの抗菌剤、および（ｄ）少なくとも１つの蛍光染料を含む、請求項２０に記載の方法。
前記励起源が、約３５０ｎｍ〜約７００ｎｍの波長である、請求項２０に記載の方法。
励前記起源が、約４８８ｎｍの波長である、請求項２０に記載の方法。
前記複数の光散乱シグナルが、（１）軸方向光損失、（２）中間角散乱、および（３）９０°側方散乱を含む、請求項２０に記載の方法。
前記複数の光散乱シグナルが、（１）軸方向光損失、（２）中間角散乱、（３）９０°偏光側方散乱、および（４）９０°偏光解消側方散乱を含む、請求項２０に記載の方法。
蛍光染料で染色されている血液試料の好塩基球分析を行うための血液分析器であって、前記蛍光染料が細胞膜透過性および核酸結合性であり、
前記血液試料内の粒子を励起するように配置された励起源；
前記励起血液試料からの光散乱および前記励起血液試料から発光される蛍光を測定するように配置された複数の検出器；および
（ａ）前記複数の検出器からの光散乱および蛍光の測定値を受け、さらに
（ｂ）前記血液試料の多次元好塩基球クラスター分析を行う
ように構成されたプロセッサ；
を含む、血液分析器。