JP2014520252A5 - - Google Patents
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Claims (24)
- 蛍光染料で染色されている血液試料の有核赤血球(nRBC)分析を行うための血液分析器であって、
蛍光染料が細胞膜透過性および、核酸に結合し、
血液試料内の粒子を励起するように配置された励起源;(1)励起血液試料からの軸方向光損失を測定するように配置された軸方向光損失検出器、(2)励起血液試料からの中間角散乱を測定するように配置された中間角散乱検出器、(3)励起血液試料からの90°側方散乱を測定するように配置された側方散乱検出器、および(4)励起血液試料からの蛍光発光を測定するように配置された蛍光検出器、を含む複数の検出器;ならびに、
(a)複数の検出器からの(1)軸方向光損失、(2)中間角散乱、(3)90°側方散乱、および(4)蛍光、の複数の測定値を受け取り、および
(b)蛍光閾値を超える蛍光を発光する粒子に対し、4つ全ての測定値に基づき血液試料のnRBC識別分析を行うように構成されたプロセッサ;
を含む血液分析器。 - 側方散乱検出器が、励起血液試料からの90°偏光側方散乱を測定するように配置された偏光側方散乱検出器である請求項1に記載の血液分析器。
- 励起血液試料からの90°偏光解消側方散乱を測定するように配置された偏光解消側方散乱検出器をさらに含む請求項2に記載の血液分析器。
- プロセッサが、蛍光閾値に適合しないいずれの粒子も検討対象から除くために受け取った測定値を予備選別するようにさらに構成される請求項1に記載の血液分析器。
- 軸方向光損失検出器が、0°散乱での軸方向光損失を測定する請求項1に記載の血液分析器。
- 中間角散乱検出器が、約3°〜約15°で光角度散乱を測定する請求項1に記載の血液分析器。
- 複数の検出器が、1つまたは複数の光電子増倍管を含む請求項1に記載の血液分析器。
- 励起源が、レーザーである請求項1に記載の血液分析器。
- レーザーが、蛍光染料に対応する波長の光を発光するように構成されている請求項8に記載の血液分析器。
- 蛍光染料が、励起源に対応するように選択される請求項1に記載の血液分析器。
- 血液試料を試薬で希釈するためのインキュベーションサブシステムをさらに含む請求項1に記載の血液分析器。
- 試薬が、蛍光染料および溶解薬剤を含む請求項11に記載の血液分析器。
- 試薬が、(a)少なくとも1つの界面活性剤、(b)少なくとも1つの緩衝液または少なくとも1つの塩、(c)少なくとも1つの抗菌剤、および(d)蛍光染料を含む請求項11に記載の血液分析器。
- インキュベーションサブシステムが、血液試料を試薬と共に、約25秒未満の時間、インキュベートするように構成される請求項11に記載の血液分析器。
- インキュベーションサブシステムが、血液試料を試薬と共に、約17秒未満の時間、インキュベートするように構成される請求項11に記載の血液分析器。
- インキュベーションサブシステムが、血液試料を試薬と共に、約9秒未満の時間、インキュベートするように構成される請求項11に記載の血液分析器。
- インキュベーションサブシステムが、血液試料を試薬と共に、約30℃〜約50℃の温度範囲でインキュベートするように構成される請求項11に記載の血液分析器。
- インキュベーションサブシステムが、血液試料を試薬と共に、約40℃の温度でインキュベートするように構成される請求項11に記載の血液分析器。
- 自動化血液分析器を使って有核赤血球nRBC分析を行う方法であって、
(a)全血試料を、赤血球(RBC)溶解薬剤および細胞膜透過性、核酸結合蛍光染料を含む試薬で希釈すること;
(b)ステップ(a)の希釈血液試料を、約25秒未満のインキュベーション時間、約30℃〜約50℃の温度範囲で、インキュベートすること;
(c)ステップ(b)でインキュベートした試料を血液分析器中のフローセルに送り出すこと;
(d)インキュベートした試料がフローセルを通過する間に、ステップ(c)でインキュベートした試料を、励起源で励起すること;
(e)励起試料からの複数の光散乱シグナルおよび一個の蛍光発光シグナルを収集すること;および
(f)蛍光発光シグナルに基づいて蛍光閾値に適合しない希釈血液試料内のいずれの粒子も検討対象から除く一方、ステップ(e)で収集した全シグナルに基づいてnRBC分析を行うこと、
を含む分析方法。 - 試薬が、(a)少なくとも1つの界面活性剤、(b)少なくとも1つの緩衝液または少なくとも1つの塩、(c)少なくとも1つの抗菌剤、および(d)少なくとも1つの蛍光染料、を含む請求項19に記載の方法。
- 励起源が、約350nm〜約700nmの波長を有する請求項19に記載の方法。
- 蛍光発光が、帯域フィルターまたはロングパスフィルターを使って、約360nm〜約750nmの波長で収集される請求項19に記載の方法。
- 複数の光散乱シグナルが、(1)軸方向光損失、(2)中間角散乱、および(3)90°側方散乱、を含む請求項19に記載の方法。
- 複数の光散乱シグナルが、(1)軸方向光損失、(2)中間角散乱、(3)90°偏光側方散乱、および(4)90°偏光解消側方散乱、を含む請求項19に記載の方法。
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