JP2020064064A5 - - Google Patents
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Claims (53)
- 自動血液分析装置を用いて白血球(WBC)分析を実施する方法であって、
(a)WBC分析試薬を用いて全血の試料を希釈することであって、前記WBC分析試薬が、
前記試料中の複数の核含有細胞を標識する膜透過性蛍光色素と、
前記血液分析装置を用いて分析した場合に複数のWBC亜集団を互いに分離するモル浸透圧濃度調整成分と、を含み、このときモル浸透圧濃度調整成分が約0.1%〜約0.5%の濃度の塩化アンモニウムである、希釈することと、
(b)ステップ(a)の前記希釈された血液試料を一定時間インキュベートすることと、
(c)ステップ(b)からの前記インキュベートされた試料を前記血液分析装置内のフローセルに送達することと、
(d)ステップ(c)からの前記インキュベートされた試料を励起源で励起させることと、
(e)前記励起した試料から複数の光散乱信号及び少なくとも1つの蛍光放射信号を収集することと、
(f)前記少なくとも1つの蛍光放射信号に基づいて、蛍光閾値を満たさない前記希釈された血液試料内のいずれの粒子も、血液分析装置内に構成された蛍光閾値のみを用いて、考慮から除去しつつ、ステップ(e)で収集される全ての前記信号に基づいてWBC差異分析を実施することと、を含む、方法。 - 前記励起源が、約350nm〜約700nmの波長を有する、請求項1に記載の方法。
- 前記蛍光放射信号が、バンドパスフィルタまたはロングパスフィルタによって約360nm〜約750nmの波長で収集される、請求項1または2のいずれかに記載の方法。
- 前記膜透過性蛍光色素が、アクリジンオレンジ、ヨウ化ヘキシジウム、SYTO RNA Select、SYTO 12、またはSYTO 14である、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記試薬中の前記膜透過性蛍光色素の濃度が、約0.0001%〜約0.0005%の範囲である、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記試薬中の前記膜透過性蛍光色素の濃度が、約0.01μM〜約15μMの範囲である、請求項1から5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モル浸透圧濃度調整成分が、塩化ナトリウムをさらに含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記塩化ナトリウムの濃度が、約0.1%〜約0.5%である、請求項1から7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記試薬が、WBC保護剤をさらに含む、請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記WBC保護剤が、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、ブトキシエタノール、フェノキシエタノール、またはイソプロピルアルコールである、請求項9に記載の方法。
- 前記WBC保護剤の濃度が、約0.1%〜約1.0%の範囲である、請求項9または10に記載の方法。
- 前記WBC分析試薬が、界面活性剤をさらに含む、請求項1から11のいずれか一項に記載の方法。
- 前記界面活性剤が、サポニンである、請求項12に記載の方法。
- 前記界面活性剤の濃度が、約0.01%〜約0.05%の範囲である、請求項12または13に記載の方法。
- 前記試薬が、pH緩衝成分をさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
- 前記pH緩衝成分が、酢酸ナトリウムまたは重炭酸ナトリウムである、請求項15に記載の方法。
- 前記pH緩衝成分の濃度が、約0.01%〜約0.5%の範囲である、請求項15または16に記載の方法。
- 前記試薬が、抗菌剤をさらに含む、請求項1から17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記抗菌剤の濃度が、約0.01%〜約0.1%の範囲である、請求項18に記載の方法。
- 前記WBC分析試薬のpHが、約2.5〜約12.5pH単位の範囲である、請求項1から19のいずれか一項に記載の方法。
- 前記WBC分析試薬の前記モル浸透圧濃度が、約25〜約350mOsmである、請求項1から20のいずれか一項に記載の方法。
- 全血の試料に白血球(WBC)差異分析を行うためのシステムであって、前記システムが、
(a)血液分析装置であって、
前記血液試料内の粒子を励起させるように位置付けられた励起源と、
(1)前記励起された血液試料から軸方向光損失を測定するように位置付けられた軸方向光損失検出器、(2)前記励起された血液試料から中間角度散乱を測定するように位置付けられた中間角度散乱検出器、(3)前記励起された血液試料から大角度偏光側方散乱を測定するように位置付けられた偏光側方散乱検出器、(4)前記励起された血液試料から大角度偏光解消側方散乱を測定するように位置付けられた偏光解消側方散乱検出器、及び(5)前記励起された血液試料から放射された蛍光を測定するように位置付けられた蛍光検出器、を含む、複数の検出器と、
プロセッサであって、
(I)前記複数の検出器から(1)軸方向光損失、(2)中間角度散乱、(3)大角度偏光側方散乱、(4)大角度偏光解消側方散乱、及び(5)蛍光の測定値を受け取ることと、
(II)5つすべての測定値に基づいて、蛍光閾値を超える蛍光を放射する粒子について、前記血液試料のWBC差異分析を実施することと、を行うように構成されるプロセッサと、を備える、血液分析装置と、
(b)前記試料内のWBCを分析するための試薬であって、
前記試料中の一又は複数の核含有細胞を標識する膜透過性蛍光色素と
約0.1%〜約0.5%の濃度の塩化アンモニウムであるモル浸透圧濃度調整成分と、を含む、試薬と、を含み、
前記モル浸透圧濃度調整成分の濃度が、前記血液分析装置を用いて、前記試料内のWBCの複数の亜集団の識別を容易にするのに十分である、システム。 - 前記膜透過性蛍光色素が、アクリジンオレンジ、ヨウ化ヘキシジウム、SYTO RNA Select、SYTO 12、またはSYTO 14である、請求項22に記載のシステム。
- 前記試薬中の前記膜透過性蛍光色素の濃度が、約0.0001%〜約0.0005%の範囲である、請求項22または23に記載のシステム。
- 前記試薬中の前記膜透過性蛍光色素の濃度が、約0.01μM〜約15μMの範囲である、請求項22から24のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記モル浸透圧濃度調整成分が、塩化ナトリウムをさらに含む、請求項22から25のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記塩化ナトリウムの濃度が、約0.1%〜約0.5%である、請求項22から26のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記試薬が、WBC保護剤をさらに含む、請求項22から27のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記WBC保護剤が、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、ブトキシエタノール、フェノキシエタノール、またはイソプロピルアルコールである、請求項28に記載のシステム。
- 前記WBC保護剤の濃度が、約0.1%〜約1.0%の範囲である、請求項28または29に記載のシステム。
- 前記試薬が、界面活性剤をさらに含む、請求項22から30のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記界面活性剤が、サポニンである、請求項31に記載のシステム。
- 前記界面活性剤の濃度が、約0.01%〜約0.05%の範囲である、請求項31または32に記載のシステム。
- 前記試薬が、pH緩衝成分をさらに含む、請求項22から33のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記pH緩衝成分が、酢酸ナトリウムまたは重炭酸ナトリウムである、請求項34に記載のシステム。
- 前記pH緩衝成分の濃度が、約0.01%〜約0.5%の範囲である、請求項34または35に記載のシステム。
- 前記試薬が、抗菌剤をさらに含む、請求項22から36のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記抗菌剤の濃度が、約0.01%〜約0.1%の範囲である、請求項37に記載のシステム。
- 前記試薬のpHが、約2.5〜約12.5pH単位の範囲である、請求項22から38のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記試薬の前記モル浸透圧濃度が、約25〜約350mOsmである、請求項22から39のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記プロセッサが、前記蛍光閾値を満たさないいずれの粒子も考慮から除去するように前記受け取られた測定値を事前選別するようにさらに構成される、請求項22から40のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記軸方向光損失検出器が、0°散乱で軸方向光損失を測定する、請求項22から41のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記中間角度散乱検出器が、約3°〜約15°で光角度散乱を測定する、請求項22から42のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記複数の検出器が、1つ以上の光電子増倍管を含む、請求項22から43のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記励起源が、レーザである、請求項22から44のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記レーザが、前記蛍光色素に対応する波長で光を放射する、請求項45に記載のシステム。
- 前記蛍光色素が、前記励起源に対応するように選択される、請求項22から46のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記試薬を用いて前記血液試料を希釈するためのインキュベーションサブシステムをさらに含む、請求項22から47のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記インキュベーションサブシステムが、約25秒未満である時間にわたり前記試薬を用いて前記血液試料をインキュベートするように構成される、請求項48に記載のシステム。
- 前記インキュベーションサブシステムが、約17秒未満である時間にわたり前記試薬を用いて前記血液試料をインキュベートするように構成される、請求項48または49に記載のシステム。
- 前記インキュベーションサブシステムが、約9秒未満である時間にわたり前記試薬を用いて前記血液試料をインキュベートするように構成される、請求項48から50のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記インキュベーションサブシステムが、約30℃〜約50℃の範囲の温度で前記試薬を用いて前記血液試料をインキュベートするように構成される、請求項48から51のいずれか一項に記載のシステム。
- 前記インキュベーションサブシステムが、約40℃の温度で前記試薬を用いて前記血液試料をインキュベートするように構成される、請求項48から52のいずれか一項に記載のシステム。
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