JP2014118402A - 組換えタンパク質の精製方法 - Google Patents
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Abstract
【解決の手段】 タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターで大腸菌を形質転換して得られる組換え大腸菌の抽出物に第四級アンモニウム塩を添加後、陽イオン交換クロマトグラフィーによる精製を少なくとも含むクロマトグラフィーにより前記タンパク質を精製する方法により、前記課題を解決する。
【選択図】 なし
Description
(i)タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターで大腸菌を形質転換して得られる組換え大腸菌の抽出物から、クロマトグラフィーにより前記タンパク質を精製する方法であって、前記抽出物に第四級アンモニウム塩を添加してから前記クロマトグラフィーによる精製を行ない、かつ前記クロマトグラフィーによる精製が陽イオン交換クロマトグラフィーによる精製を少なくとも含む、前記精製方法。
(i)配列番号1に記載のアミノ酸配列のうち少なくとも16番目のグルタミンから289番目のバリンまでのアミノ酸を含むタンパク質や、
(ii)配列番号1に記載のアミノ酸配列のうち少なくとも16番目のグルタミンから289番目のバリンまでのアミノ酸を含み、かつ前記アミノ酸のうちの一つ以上が他のアミノ酸に置換、挿入または欠失したタンパク質、
があげられる。前記(ii)の具体例としては、特開2011−206046号公報に開示のヒトFc結合性タンパク質があげられる。
(1)ヒトFc結合性タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターで大腸菌を形質転換して得られた組換え大腸菌を、特開2012−034591号公報に記載の方法で培養することで、前記タンパク質を発現させた。
(2)組換え大腸菌の培養液より菌体を回収後、抽出液(650mM NaCl、1mM EDTA、6mM MgSO4、250U/L Benzonase(商品名)、0.05g/L Lysozyme、0.4% Triton X−100(商品名)および50mM CaCl2を含む50mM Tris−HCl(pH8.0))を添加して回収した菌体を懸濁させ、さらに臭化セチルトリメチルアンモニウム塩(CTAB)を終濃度で0.5%(w/v)添加して撹拌することで、菌体内に発現した前記タンパク質を抽出した。
(3)(2)で得られた菌体抽出液に、酢酸を、液のpHが3.5となるよう、撹拌しながら滴下することで酸処理を行ない、遠心分離により回収した上清を酸処理液とした。
(4)酸処理液に尿素を終濃度1mol/Lとなるよう添加後、あらかじめ平衡化緩衝液A(1mol/L 尿素を含む20mmol/L リン酸緩衝液(pH 6.0))で平衡化した、陽イオン交換クロマトグラフィー用ゲル(TOYOPEARL CM−650、東ソー製)を充填したカラムに添加し、平衡化緩衝液Aで十分洗浄後、1mol/L NaClを含む平衡化緩衝液AでFc結合性タンパク質を溶出した。
(5)(4)の溶出液を、特開2011−126827号に記載の疎水クロマトグラフィーを用いた方法によりヒトFc結合性タンパク質を精製した。
(6)あらかじめ平衡化緩衝液B(脱エンドトキシン化した20mM リン酸緩衝液(pH7.0))で平衡化した、陽イオン交換クロマトグラフィー用ゲル(TOYOPEARL CM−650、東ソー製)を充填したカラムに、(5)で精製したFc結合性タンパク質溶液を添加した。
(7)平衡化緩衝液Bで十分量洗浄後、脱エンドトキシン化した1M NaClを含む平衡化緩衝液Bで溶出することで、高度に精製したヒトFc結合性タンパク質を含む溶液を得た。
(8)タンパク質濃度をProtein Assay Reagent(バイオラッド社製)で、エンドトキシン濃度をEndosafe−PTS(和光純薬社製)で、それぞれ測定したところ、タンパク質あたりのエンドトキシン含有量は3.4EU/mgであった(EU:エンドトキシン活性単位)。
実施例1の(2)で添加するCTABを終濃度で0.1%(w/v)とした他は、実施例1と同様の実験を行なった。結果、7.5EU/mgであった。
実施例1の(2)で添加するCTABを終濃度で1%(w/v)とした他は、実施例1と同様の実験を行なった。結果、5.9EU/mgであった。
実施例1(2)でCTABを添加しない他は、実施例1と同様の実験を行なった。結果、エンドトキシン含有量は>100EU/mgであった。
実施例1(4)および実施例1(6)に記載の陽イオン交換クロマトグラフィーによる精製を行なわない他は、実施例1と同様の実験を行なった。結果、エンドトキシン含有量は>10000EU/mgであった。
Claims (7)
- タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターで大腸菌を形質転換して得られる組換え大腸菌の抽出物から、クロマトグラフィーにより前記タンパク質を精製する方法であって、
前記抽出物に第四級アンモニウム塩を添加してから前記クロマトグラフィーによる精製を行ない、かつ前記クロマトグラフィーによる精製が陽イオン交換クロマトグラフィーによる精製を少なくとも含む、前記精製方法。 - 第四級アンモニウム塩が臭化セチルトリメチルアンモニウム塩である、請求項1に記載の精製方法。
- 陽イオン交換クロマトグラフィーによる精製が、カルボキシメチル基を導入した担体を用いた精製である、請求項1または2のいずれかに記載の精製方法。
- タンパク質がヒトFc結合性タンパク質である、請求項1から3のいずれかに記載の精製方法。
- ヒトFc結合性タンパク質が、
(1)配列番号1に記載のアミノ酸配列のうち少なくとも16番目のグルタミンから289番目のバリンまでのアミノ酸を含むタンパク質、または
(2)配列番号1に記載のアミノ酸配列のうち少なくとも16番目のグルタミンから289番目のバリンまでのアミノ酸を含み、かつ前記アミノ酸のうちの一つ以上が他のアミノ酸に置換、挿入または欠失したタンパク質である、
請求項4に記載の精製方法。 - ヒトFc結合性タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターで大腸菌を形質転換して得られる組換え大腸菌の抽出物に第四級アンモニウム塩を添加後、陽イオン交換クロマトグラフィーによる精製を少なくとも含むクロマトグラフィーによる精製を行なうことで得られた、ヒトFc結合性タンパク質。
- 請求項6に記載のヒトFc結合性タンパク質を担体に固定化して得られる、免疫グロブリン吸着剤。
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0819736A (ja) * | 1994-07-07 | 1996-01-23 | Sunstar Inc | エンドトキシンの吸着除去剤 |
JP2000072659A (ja) * | 1998-08-25 | 2000-03-07 | Nippi:Kk | エンドトキシンの不活化法 |
US20050080245A1 (en) * | 2003-10-08 | 2005-04-14 | Hung William M. | Water-soluble chitosan having low endotoxin concentration and methods for making and using the same |
JP2008528035A (ja) * | 2005-01-31 | 2008-07-31 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | プラスミドdnaの精製方法 |
JP2011515387A (ja) * | 2008-03-18 | 2011-05-19 | ノバルティス アーゲー | インフルエンザウイルスワクチン抗原の調製における改良 |
JP2011153152A (ja) * | 1999-11-24 | 2011-08-11 | Danisco As | タンパク質を精製する方法 |
JP2011206046A (ja) * | 2010-03-10 | 2011-10-20 | Sagami Chemical Research Institute | 改良Fc受容体およびその製造方法 |
-
2012
- 2012-12-19 JP JP2012276858A patent/JP6136236B2/ja active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0819736A (ja) * | 1994-07-07 | 1996-01-23 | Sunstar Inc | エンドトキシンの吸着除去剤 |
JP2000072659A (ja) * | 1998-08-25 | 2000-03-07 | Nippi:Kk | エンドトキシンの不活化法 |
JP2011153152A (ja) * | 1999-11-24 | 2011-08-11 | Danisco As | タンパク質を精製する方法 |
US20050080245A1 (en) * | 2003-10-08 | 2005-04-14 | Hung William M. | Water-soluble chitosan having low endotoxin concentration and methods for making and using the same |
JP2008528035A (ja) * | 2005-01-31 | 2008-07-31 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | プラスミドdnaの精製方法 |
JP2011515387A (ja) * | 2008-03-18 | 2011-05-19 | ノバルティス アーゲー | インフルエンザウイルスワクチン抗原の調製における改良 |
JP2011206046A (ja) * | 2010-03-10 | 2011-10-20 | Sagami Chemical Research Institute | 改良Fc受容体およびその製造方法 |
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