JP2013526485A

JP2013526485A - ＩＬ−１β関連病態の治療のための方法

Info

Publication number: JP2013526485A
Application number: JP2013509314A
Authority: JP
Inventors: アランエム．ソリンガー; アーメットグル
Original assignee: ゾーマテクノロジーリミテッド
Priority date: 2010-05-07
Filing date: 2011-05-06
Publication date: 2013-06-24
Anticipated expiration: 2031-05-06
Also published as: EP2566520A4; BR112012028557A2; WO2011140522A1; CA2797846A1; CN102883748A; EA201201526A1; US8551487B2; ZA201208172B; SG2014014724A; MX337586B; IL222890A0; JP5904645B2; KR20130065662A; SG185473A1; MX2012012901A; US20140242090A1; EP2566520A1; NZ603191A; US9139646B2; US20120014966A1

Abstract

抗IL-1β結合分子(例えば、IL-1β結合抗体またはその結合断片)を使用して、難治性ぶどう膜炎を含む対象におけるぶどう膜炎を阻害する(例えば、治療するかまたは予防する)ための方法および材料を開示する。

Description

関連出願
本出願は、2011年2月18日に出願された米国特許仮出願第61/444,638号、2010年5月12日に出願された米国特許仮出願第61/334,125号、および2010年5月7日に出願された米国特許仮出願第61/332,658号の恩典を主張し、それらの開示は全体として参照により本明細書に組み入れられる。

発明の分野
本開示は、難治性ぶどう膜炎を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療または予防するための方法および材料に関する。

発明の背景
ぶどう膜炎は一般的に眼内の炎症を指し、例えばぶどう膜の前方部分および/またはぶどう膜の後方部分を侵す場合がある。ぶどう膜炎は、多くの国々において視力障害の一般的な原因である。ぶどう膜の前方部分は、虹彩および毛様体を含む。ぶどう膜の後方部分は脈絡膜を含む。ぶどう膜は、眼内構造の血液供給の大部分を提供することに加えて、免疫細胞、特にリンパ球が眼に侵入するための導管として働く。結果として、ぶどう膜は、多くの眼内炎症過程に直接関与する。

国際ぶどう膜炎研究会は、病変のある眼(すなわち、片側または両側)、経過(すなわち、12週間未満しか持続しない急性または12週間を超えて持続する慢性)、および眼内の解剖学的位置(Bloch-Michel et al., Am J Ophthalmol., 103:234-235, 1987(非特許文献1))の観点からぶどう膜炎を分類している。ぶどう膜炎の特徴づけおよび命名法のさらなる標準化は、SUNワーキンググループによって提供されている(Jabs, et al., Am J Ophtalmol., 140:509-516, 2005(非特許文献2))。前部ぶどう膜炎には、例えば、虹彩炎、前部毛様体炎、ならびに虹彩および/または毛様体ひだ部(前部毛様体)を侵す虹彩毛様体炎が含まれる。中間部ぶどう膜炎には、例えば、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、硝子体炎、ならびに毛様体扁平部(後部毛様体)および/または隣接する周辺部網膜の炎症を指す基底脈絡網膜炎が含まれる。後部ぶどう膜炎には、限局性、多巣性、またはびまん性の脈絡膜炎；網膜炎；視神経網膜炎、網脈絡膜炎；および脈絡網膜炎が含まれ；後者の2つの用語は、その組織が主として侵されるらしいことを示す。汎ぶどう膜炎とは、前部および後部の両方を侵す炎症を指す。ぶどう膜炎は、「豚脂様」角膜後面沈着物、虹彩結節、および/または脈絡膜肉芽腫によって特徴づけられる肉芽腫性炎症の有無によってさらに分類され得る。

ぶどう膜炎は、西欧諸国における視覚障害の約10％(Nussenblatt, Int Ophthalmol., 14:303-308, 1990(非特許文献3))、および米国における全盲の全症例の最大15％まで(Rothova et al., Br J Ophthalmol., 80:332-336, 1996(非特許文献4))を占め得ることが、推定から示されている。法的盲は、全ぶどう膜炎患者の22％において、および眼内手術を必要とするすべての人の約23％において、少なくとも片方の眼で生じる。加えて、少なくとも片方の目における6/18よりも悪くなる視力喪失は、主に持続的な黄斑浮腫の結果として、ぶどう膜炎患者の35％において起こる(Rothova et al.、前記(非特許文献4))。ぶどう膜炎の眼の合併症は、一般的に視力の減退に関与する。

IL-1βは、単球およびマクロファージを含むいくつかの異なる細胞型によって分泌される炎症誘発性サイトカインである。IL-1βは炎症反応の一部として放出されると、主にコルチコトロピン、血小板第4因子、プロスタグランジンE2(PGE2)、IL-6、およびIL-8などの他の炎症性メディエータの誘導を通して媒介される一連の生物学的作用を引き起こす。IL-1βは、ほぼすべての細胞型に見出されるIL-1受容体の活性化を通して、局所的および全身的炎症作用の両方を誘導する。インターロイキン-1(IL-1)ファミリーのサイトカインは、いくつかの疾患状態に関連づけられている。IL-1ファミリーメンバーには、IL-1α、IL-1β、およびIL-1Raが含まれる。IL-1受容体(IL-1R1およびIL-1R2)に結合する能力によって関連しているが、これらのサイトカインはそれぞれ異なり、異なる遺伝子によって発現され、異なる一次アミノ酸配列を有する。さらに、これらのサイトカインの生理的活性も互いに区別され得る。

炎症所見の完全な解消を伴う、急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃、ぶどう膜炎発作)を含むぶどう膜炎の有効な治療は、より良い視覚予後にとって重要である。ぶどう膜炎増悪が長く解消されなければされないほど、より重篤な続発症、不完全な解消、および/または視力の喪失の可能性はより高くなる。難治性ぶどう膜炎の治療、およびリスクのある対象などにおけるぶどう膜炎増悪の予防を含む、ぶどう膜炎を治療および予防する有効な方法の必要性が依然として存在している。

Bloch-Michel et al., Am J Ophthalmol., 103:234-235, 1987 Jabs, et al., Am J Ophtalmol., 140:509-516, 2005 Nussenblatt, Int Ophthalmol., 14:303-308, 1990 Rothova et al., Br J Ophthalmol., 80:332-336, 1996

本開示は、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を阻害する(例えば、治療するまたは予防する)ための材料および方法に関する。驚くべきことに、本明細書に開示される方法は、例えば非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、および/またはステロイドなどの付加的薬学的組成物の使用を伴うかまたは伴わずに、難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎を阻害する(例えば、治療するまたは予防する)ための有効な手段を提供する。そのような材料および方法を用いて、ぶどう膜炎疾患(例えば、難治性ぶどう膜炎)に罹患している哺乳動物(例えば、ヒト)対象を治療すること、またはリスクのある対象において該疾患の発生を予防するか、もしくはその頻度および/もしくは重症度を軽減することができる。

本開示は、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を阻害する方法を提供し、ぶどう膜炎は難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎である。いくつかの態様において、対象におけるぶどう膜炎を阻害する方法は、対象におけるぶどう膜炎を予防する方法である。いくつかの態様において、対象におけるぶどう膜炎を阻害する方法は、対象におけるぶどう膜炎を治療する方法である。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象におけるぶどう膜炎の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪を阻害することである。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様においては、対象におけるぶどう膜炎の阻害によって、急性ぶどう膜炎増悪の間隔が延びる。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様においては、対象におけるぶどう膜炎の阻害によって、急性ぶどう膜炎増悪の頻度が減少する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様においては、対象におけるぶどう膜炎の阻害によって、急性ぶどう膜炎増悪を経験する可能性が減少する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象におけるぶどう膜炎の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪を予防する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象におけるぶどう膜炎の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪を治療する。前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様においては、対象におけるぶどう膜炎の阻害によって、急性ぶどう膜炎増悪の重症度が軽減する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン、メチルプレニゾロン(methylprenisolone)、プレドニゾロン、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイド(例えば、デキサメタゾン)からなる群より選択されるステロイドホルモンである。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つ(例えば、1つまたは2つ)の薬学的組成物の投与を同時に受けている。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つの薬学的組成物の投与を同時に受けている。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物、およびステロイドを含む薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎のための治療を以前に受けたことがある。いくつかの態様において、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の治療に対する有害反応または過敏性を有していた。いくつかの態様において、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の治療に失敗した。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイド(例えば、デキサメタゾン)からなる群より選択されるステロイドホルモンである。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つの薬学的組成物の投与を同時に受けており、該方法は、該少なくとも1つの薬学的組成物の投与量の低下を提供する。いくつかの態様において、投与量の低下は、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の用量と比較した場合の、該少なくとも1つの薬学的組成物の用量の低下である。いくつかの態様において、投与量の低下は、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の投与頻度と比較した場合の、該少なくとも1つの薬学的組成物の投与頻度の低下である。いくつかの態様においては、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与量が低下する。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤はアザチオプリンまたはメトトレキサートである。いくつかの態様においては、ステロイドを含む薬学的組成物の投与量が低下する。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、ぶどう膜炎と診断された対象における急性ぶどう膜炎増悪を阻害する方法であり、急性ぶどう膜炎増悪は、SUN基準に従い少なくとも2段階増加した眼内炎症の重症度を有する。

本開示は、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療する方法を提供し、ぶどう膜炎は難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎である。いくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法を提供し、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つ(例えば、1つまたは2つ)の薬学的組成物の投与を同時に受けている。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つの薬学的組成物の投与を同時に受けている。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法を提供し、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、インターフェロン(例えば、IFN-α)を含む薬学的組成物の投与を同時に受けている。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法を提供し、ぶどう膜炎は難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎であり、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物、およびステロイドを含む薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、ステロイドを含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物および非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物およびステロイドを含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物およびステロイドを含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない。いくつかの態様において、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物、およびステロイドを含む薬学的組成物のいずれの投与も同時に受けていない。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物、およびステロイドを含む薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、ステロイドを含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象における急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃)を阻害する方法を提供し、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎のための治療を以前に受けたことがある。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。いくつかの態様において、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の治療に対する有害反応または過敏性を有していた。いくつかの態様において、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の治療に失敗した。いくつかの態様において、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の治療に対して部分的に反応した。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪は、SUN基準に従い少なくとも2段階増加した眼内炎症の重症度を有する。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象における急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃)を阻害する方法を提供し、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つ(例えば、1つまたは2つ)の薬学的組成物によるぶどう膜炎のための同時治療を受けている。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪は、SUN基準に従い少なくとも2段階増加した眼内炎症の重症度を有する。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象における急性ぶどう膜炎増悪を阻害する方法を提供し、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、インターフェロン(例えば、IFN-α)を含む薬学的組成物の投与を同時に受けている。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪(例えば、2回またはそれ以上の急性ぶどう膜炎増悪)の間隔の延長である。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪の頻度の減少である。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪を経験する可能性の減少である。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪を予防することである。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪を治療することである。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪の阻害は、急性ぶどう膜炎増悪の重症度を軽減することである。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法を提供し、対象は、ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つの薬学的組成物の投与を同時に受けており、該方法は、該少なくとも1つの薬学的組成物の投与量の低下(漸減)を提供する。いくつかの態様において、投与量の低下は、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の用量と比較した場合の、該少なくとも1つの薬学的組成物の用量の低下である。いくつかの態様において、投与量の低下は、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の投与頻度と比較した場合の、該少なくとも1つの薬学的組成物の投与頻度の低下である。いくつかの態様において、投与量の低下は、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前のある期間(例えば、数日、数週間、数カ月)にわたる該少なくとも1つの薬学的組成物に対する累積曝露と比較した場合の、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与した後の同様の期間にわたる累積曝露の低下である。いくつかの態様において、累積曝露の低下は曲線下面積(例えば、AUC)の低下である。いくつかの態様において、曲線下面積の低下は、(例えば、時間対薬物用量の)時間調整積分平均に関する、少なくとも1つの薬学的組成物の平均血中濃度の低下によって示される。いくつかの態様においては、ステロイドを含む薬学的組成物の投与量が低下する。いくつかの態様においては、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与量が低下する。いくつかの態様においては、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物の投与量が低下する。いくつかの態様においては、ステロイド、非ステロイド性免疫抑制剤、または非ステロイド性抗炎症剤を含む少なくとも2つの薬学的組成物の投与量が低下する。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイド(例えば、デキサメタゾン)からなる群より選択されるステロイドホルモンである。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、ぶどう膜炎と診断された対象における急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃)を阻害する方法を提供し、ぶどう膜炎は難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎であり、急性ぶどう膜炎増悪は、SUN基準に従い少なくとも2段階増加した眼内炎症の重症度を有する。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、ぶどう膜炎と診断された対象における急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃)を阻害する方法を提供し、ぶどう膜炎は難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎であり、急性ぶどう膜炎増悪は網膜炎の新たな領域を有する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、急性ぶどう膜炎増悪のリスクがある対象である。

本開示はまた、少なくとも約0.5μg/mL、少なくとも約1.0μg/mL、少なくとも約1.5μg/mL、少なくとも約2.0μg/mL、少なくとも約3.0μg/mL、少なくとも約4.0μg/mL、または少なくとも約5.0μg/mLの抗IL-1β抗体またはその結合断片の全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で、抗IL-1β抗体またはその結合断片を対象に投与する段階を含む、対象におけるぶどう膜炎を阻害する(例えば、治療する、予防する)方法を提供する。いくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、約0.5μg/mL〜約5μg/mL、約1μg/mL〜5μg/mL、または約2μg/mL〜5μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で投与される。

本開示はまた、(1) 対象においてぶどう膜炎を診断する段階、および(2) 抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を段階(1)の対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法を提供し、該方法は前部ぶどう膜炎または後部ぶどう膜炎の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法は、前部ぶどう膜炎および後部ぶどう膜炎の両方の改善をもたらす。いくつかの態様において、ぶどう膜炎と診断される対象は、汎ぶどう膜炎と診断される対象である。いくつかの態様において、該方法は、中間部ぶどう膜炎の改善をさらにもたらす。

本開示はまた、(1) 対象においてぶどう膜炎を診断する段階、および(2) 抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を段階(1)の対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法を提供し、該方法は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、血管漏出(例えば、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、二重フルオレセイン血管造影およびインドシアニングリーン血管造影スコア)、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、視神経網膜炎、網膜機能不全、および眼圧亢進より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、および視神経網膜炎より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法はBen Ezraスコアの改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、および網膜染色より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法はBen Ezraスコアの改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜滲出斑、網膜血管炎、および視神経乳頭過蛍光より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法はBen Ezraスコアの改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、および網膜血管炎より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ)の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、および網膜血管炎より選択される少なくとも2つのパラメータの改善をもたらす。例えば、1つのパラメータの改善は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、または網膜血管炎の改善であってよい。例えば、2つのパラメータの改善は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、または網膜血管炎のうちの2つの改善であってよい。前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法はBen Ezraスコアの改善をもたらす。

本開示はまた、(1) 対象においてぶどう膜炎を診断する段階、および(2) 抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を段階(1)の該対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法を提供し、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、および網膜血管炎のうちの少なくとも1つの改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、ぶどう膜炎は非感染性ぶどう膜炎である。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、ベーチェット病、脊椎関節炎(例えば、強直性脊椎炎、反応性関節炎)、乾癬性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、サルコイドーシス、尿細管間質性腎炎およびぶどう膜炎(TINU)症候群、関節リウマチ、川崎病、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス、多発性動脈炎、ライター病、ウェゲナー肉芽腫症、フォークト・小柳・原田症候群、全身性若年性特発性関節炎、および肉芽腫性血管炎より選択される疾患または病態と診断されている。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、サイトメガロウイルス感染症、トキソプラズマ症、梅毒、結核、猫ひっかき病、ライム病、ウエストナイルウイルス感染症、単純ヘルペスウイルス感染症、ヒト免疫不全ウイルス感染症、真菌感染症、または水痘帯状疱疹感染症と診断されている。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、対象は、周辺部ぶどう膜炎、多発性硬化症、交感性眼炎、散弾状(birdshot)脈絡膜症、免疫回復ぶどう膜炎(例えば、免疫再構築炎症反応症候群)、リンパ腫、および特発性ぶどう膜炎より選択される疾患または病態と診断されている。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるベーチェット病を治療する方法を提供し、対象はぶどう膜炎と診断されており、ぶどう膜炎は難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎である。いくつかの態様において、難治性ぶどう膜炎は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。

本開示はまた、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含み、かつ急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃)を治療する段階をさらに含む、対象におけるベーチェット病を治療する方法を提供し、対象はぶどう膜炎と診断されており、ぶどう膜炎は難治性ぶどう膜炎であり、対象は、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは2つの薬学的組成物による急性ぶどう膜炎増悪のための同時治療を受けている。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである。いくつかの態様において、DNA合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである。いくつかの態様において、急性ぶどう膜炎増悪は、SUN基準に従い少なくとも2段階増加した眼内炎症の重症度を有する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、前部ぶどう膜炎または後部ぶどう膜炎の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法は、前部ぶどう膜炎および後部ぶどう膜炎の両方の改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、血管漏出(例えば、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、二重フルオレセイン血管造影およびインドシアニングリーン血管造影スコア)、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、視神経網膜炎、網膜機能不全、および眼圧亢進より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、および視神経網膜炎より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、および網膜染色より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜滲出斑、網膜血管炎、および視神経乳頭過蛍光より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ、少なくとも5つのパラメータ)の改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、および網膜血管炎より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータ(例えば、少なくとも3つのパラメータ、少なくとも4つのパラメータ)の改善をもたらす。いくつかの態様において、該方法は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、および網膜血管炎より選択される少なくとも2つのパラメータの改善をもたらす。例えば、1つのパラメータの改善は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、または網膜血管炎の改善であってよい。例えば、2つのパラメータの改善は、視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、または網膜血管炎のうちの2つの改善であってよい。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、該方法はBen Ezraスコアの改善をもたらす。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、前記抗体または抗体断片は、約1 nMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約250 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約50 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約10 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約1 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約0.3 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は中和抗体である。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、結合した該抗体または該断片によってIL-1βのIL-1受容体I(IL-1RI)への結合が実質的に可能になるように、IL-1βエピトープに結合する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、IL-1α、IL-1R、またはIL-1Raに検出可能な程度には結合しない。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体の結合と競合する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体が結合するエピトープと実質的に同じIL-1βのエピトープに結合する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、IL-1βのGlu64を取り込むエピトープに結合する。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、前記抗体または抗体断片は、IL-1βのN末端のアミノ酸1〜34位に結合する。

いくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片のそれぞれまたはいずれかは、ヒト型に遺伝子操作されているかまたはヒト化されている。

いくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片のそれぞれまたはいずれかはヒトである。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、約3 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約1 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約0.3 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約0.1 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約0.03 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または抗体断片は、約0.01 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、1回用量または複数回用量は、少なくとも約0.01 mg/kgの抗体または断片である。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、対象体重当たりの用量比とは無関係に、固定用量として投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、500 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、250 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、100 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、50 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、25 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、10 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、1.0 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、少なくとも1.0 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、少なくとも10 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、約5 mg〜約150 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、約10 mg〜約75 mgの抗体または断片(例えば、20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg、または70 mg)の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、約20 mg〜約50 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。いくつかの態様において、該抗体または断片は、約30 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で投与される。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様においては、前記抗体または抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量が投与される。いくつかの態様においては、該抗体または抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量が投与され、かつ次の該1回用量または該複数回用量は、該初回用量とほぼ同じかまたはそれよりも少ない量である。いくつかの態様においては、該抗体または抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量が投与され、かつ次の該1回用量または該複数回用量は、初回用量よりもおよそ10％少ない、該初回用量よりも20％少ない、該初回用量よりも30％少ない、該初回用量よりも40％少ない、該初回用量よりも50％少ない、該初回用量よりも60％少ない、該初回用量よりも70％少ない、該初回用量よりも80％少ない、または該初回用量よりも90％少ない量である。例えば、40 mgの初回用量が投与される場合、次の1回用量または複数回用量は、20％少ない(32 mg)、30％少ない(28 mg)、40％少ない(24 mg)、50％少ない(20 mg)、60％少ない(16 mg)などでよい。別の例として、50 mgの初回用量が投与される場合、次の1回用量または複数回用量は、20％少ない(40 mg)、30％少ない(35 mg)、40％少ない(30 mg)、50％少ない(25 mg)、60％少ない(20 mg)などでよい。さらなる別の例として、60 mgの初回用量が投与される場合、次の1回用量または複数回用量は、20％少ない(48 mg)、30％少ない(42 mg)、40％少ない(36 mg)、50％少ない(30 mg)、60％少ない(24 mg)などでよい。いくつかの態様においては、該抗体または抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量が投与され、かつ該次の用量の少なくとも1つは該初回用量よりも多い量である。いくつかの態様においては、該抗体または抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量が投与され、かつ該次用量の少なくとも1つは、該初回用量よりも少なくとも10％多い、20％多い、30％多い、40％多い、50％多い、75％多い、または100％多い量である。例えば、20 mgの初回用量が投与される場合、次の1回用量または複数回用量は、20％多い(24 mg)、30％多い(26 mg)、40％多い(28 mg)、50％多い(30 mg)、100％多い(40 mg)などでよい。別の例として、30 mgの初回用量が投与される場合、次の1回用量または複数回用量は、20％多い(36 mg)、30％多い(39 mg)、40％多い(42 mg)、50％多い(45 mg)、100％多い(60 mg)などでよい。さらなる別の例として、40 mgの初回用量が投与される場合、次の1回用量または複数回用量は、20％多い(48 mg)、30％多い(52 mg)、40％多い(56 mg)、50％多い(60 mg)、100％多い(80 mg)などでよい。

前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、少なくとも約0.5μg/mL、少なくとも約1.0μg/mL、少なくとも約1.5μg/mL、少なくとも約2.0μg/mL、少なくとも約3.0μg/mL、少なくとも約4.0μg/mL、または少なくとも約5.0μg/mLの抗IL-1β抗体またはその結合断片の全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で投与される。いくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、約0.5μg/mL〜約5μg/mL、約1μg/mL〜5μg/mL、または約2μg/mL〜5μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で投与される。前述の方法のそれぞれまたはいずれかのいくつかの態様において、抗IL-1β抗体またはその結合断片は、IL-8のIL-1β誘導性産生を測定するヒト全血IL-1β阻害アッセイ法において、IL-1β受容体拮抗物質よりも低いIC₅₀を有する。いくつかの態様において、IL-1β受容体拮抗物質はアナキンラである。

本開示はまた、ぶどう膜炎の治療において使用するための組成物の製造における抗IL-1β抗体またはその結合断片の使用を提供し、該抗IL-1β抗体またはその結合断片が、IL-8のIL-1β誘導性産生を測定するヒト全血IL-1β阻害アッセイ法において、IL-1β受容体拮抗物質よりも低いIC₅₀を有し、該ぶどう膜炎が、難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎である。いくつかの態様において、IL-1β受容体拮抗物質はアナキンラである。

本明細書が、特定の特性(Kd値またはIC₅₀値など)を有する抗体またはその結合断片を使用する治療方法に言及する場合、これはまた、これらの方法において使用するための医薬品の製造におけるそのような抗体またはその断片の使用を具体化する意図があることが理解されるべきである。さらに、本発明はまた、これらの特性を有する抗体またはその結合断片、および以下に考察する治療方法で使用するための、これらの抗体またはその結合断片を含む薬学的組成物も包含する。

試験への登録前に受けた治療薬物に関する情報を備えた、IL-1β抗体臨床治験の対象7名を示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1001に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1002に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1003に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1004に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1005に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1006に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体により治療を受けた対象1007に関する臨床データを示す表である。 IL-1β抗体による治療後の前房蓄膿の解消を示す画像である。 IL-1β抗体による治療後の硝子体混濁の解消を示す画像である。

詳細な説明
ぶどう膜炎の治療または予防において使用するための有効な治療法には、依然として重要な医学的必要性がある。本開示は、抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、難治性(例えば、治療抵抗性)ぶどう膜炎を含む、対象におけるぶどう膜炎を治療または予防するための方法および材料ならびに関連製品を提供する。そのような材料および方法を用いて、本明細書に提供されるその他の薬学的アプローチに取って代わるか、または該アプローチを補完することができる。

IL-1βは、単球およびマクロファージを含むいくつかの異なる細胞型によって分泌される炎症誘発性サイトカインである。IL-1βは炎症反応の一部として放出されると、主にコルチコトロピン、血小板第4因子、プロスタグランジンE2(PGE2)、IL-6、およびIL-8などの他の炎症性メディエータの誘導を通して媒介される一連の生物学的作用を引き起こす。IL-1βは、ほぼすべての細胞型に見出されるIL-1受容体の活性化を通して、局所的および全身的炎症作用の両方を誘導する。

インターロイキン-1(IL-1)ファミリーのサイトカインは、関節リウマチ(RA)、変形性関節症、クローン病、潰瘍性大腸炎(UC)、敗血症性ショック、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、喘息、移植片対宿主病、アテローム性動脈硬化、成人T細胞白血病、多発性骨髄腫、多発性硬化症、卒中発作、およびアルツハイマー病などのいくつかの疾患状態に関連づけられている。IL-1ファミリーメンバーには、IL-1α、IL-1β、およびIL-1Raが含まれる。IL-1受容体(IL-1R1、IL-1R2)に結合する能力によって関連しているが、これらのサイトカインはそれぞれ異なる遺伝子によって発現され、異なる一次アミノ酸配列を有する。さらに、これらのサイトカインの生理的活性も互いに区別され得る。

IL-1受容体シグナル伝達を破壊する化合物が、例えば上記の疾患のいくつかなどのIL-1介在性疾患を治療する治療薬として検討されてきた。これらの化合物には、組換えIL-1Ra(Amgen Inc.、カリフォルニア州、サウザンドオークス)、IL-1受容体「捕捉」ペプチド(Regeneron Inc.、ニューヨーク州、タリタウン)に加えて、動物由来IL-1β抗体および組換えIL-1β抗体ならびにそれらの断片が含まれる。

上記したように、IL-1受容体アンタゴニスト(IL-1Ra)ポリペプチドが、通風の治療における使用に提案されたが(So et al., 2007、前記；McGonagle et al., 2007、前記)、通風を治療するための有効な手段、特に毎日の反復注射を必要としない手段の必要性が依然として残る。IL-1受容体アンタゴニストに基づく治療薬のさらなる課題は、そのような治療薬が多数の受容体を占有する必要性であり、これらの受容体は赤血球を除くすべての細胞で広く発現されていることから、これは厄介な課題である(Dinarello, Curr. Opin. Pharmacol. 4:378-385, 2004)。本明細書に開示する疾患などの大部分の免疫介在性疾患において、体液中で測定可能な、または活性化細胞と会合しているIL-1βサイトカインの量は比較的少ない。したがって、IL-1βリガンドを直接標的化する治療および/または予防方法は、特に高親和性を有するIL-1β抗体を投与する場合、優れた戦略である。

本発明は、IL-1βに特異的な抗体またはその断片を使用する、対象(例えば、哺乳動物、ヒト)における痛風の治療および/または予防のための方法ならびに関連する組成物および製品を提供する。

以下の実施例1に示されるように、本発明者らは驚くべきことに、そのような抗体(例えば、非常に高い親和性を有する)がIL-Ra(例えば、Kineret(登録商標))よりもはるかに強力なIL-1経路の阻害剤となり得、組換えIL-1Raなどのその他の薬物に必要であるよりもより少ない用量で、および/またはより低頻度の投与で治療効果を達成する機会を提供することを見出した。

IL-1β抗体または断片による本明細書に記載されるとおりのそのような方法は、痛風(例えば、急性痛風、慢性痛風、難治性痛風)に罹患している対象の治療を含み得る。本方法はまた、リスクのある対象における痛風(例えば、急性痛風、慢性痛風、難治性痛風)の発生の予防も含み得る。

抗体、ヒト化抗体、およびヒト型に遺伝子操作された抗体
本開示のIL-1（例えばIL-1β）結合抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体(mAb)、組換え抗体、キメラ抗体、CDR移植抗体、完全なヒト抗体、一本鎖抗体、および/または二重特異性抗体、ならびに酵素的切断、ペプチド合成、もしくは組換え技法を含むがこれらに限定されない公知の技法によって提供されるそれらの変種および誘導体を含む断片として提供され得る。

抗体は一般に重鎖ポリペプチド2本および軽鎖ポリペプチド2本を含むが、重鎖1本および軽鎖1本を有する単一ドメイン抗体、ならびに軽鎖を欠く重鎖抗体もまた意図される。重鎖定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと称される5種類の重鎖が存在する。これらの異なる種類の重鎖により、IgGの4つのサブクラス、すなわちIgG₁、IgG₂、IgG₃、およびIgG₄を含む5つのクラスの抗体、それぞれIgA(IgA₁およびIgA₂を含む)、IgD、IgE、IgG、およびIgMが生じる。同様に、定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、カッパ(κ)またはラムダ(λ)と称される2種類の軽鎖が存在する。全長抗体は、定常ドメインおよび可変ドメインを含む。抗体の抗原結合断片に、定常領域が存在する必要はない。本明細書に開示する抗体の抗原結合断片には、Fab、Fab'、F(ab')₂、およびF(v)抗体断片が含まれ得る。以下にさらに詳述するとおり、IL-1β結合断片は、IL-1βと結合する抗体断片および抗原結合ポリペプチドを包含する。

抗体またはその抗原結合断片の重鎖および軽鎖配列はそれぞれ、3つの相補性決定領域(CDR)および非CDRフレームワーク領域(FR)を有する可変領域を含む。本明細書で使用する「重鎖」および「軽鎖」という用語は、特記しない限り、それぞれ重鎖可変領域および軽鎖可変領域を意味する。重鎖CDRは、本明細書においてCDR-H1、CDR-H2、およびCDR-H3と称する。軽鎖CDRは、本明細書においてCDR-L1、CDR-L2、およびCDR-L3と称する。抗体配列中の可変領域およびCDRは、(i) 当技術分野において開発された一般規則に従って、または(ii) 公知の可変領域のデータベースに対して配列を整列させることによって同定することができる。これらの領域を同定する方法は、Kontermann and Dubel, eds., Antibody Engineering, Springer, New York, NY, 2001、およびDinarello et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley and Sons Inc., Hoboken, NJ, 2000に記載されている。抗体配列のデータベースは、www.bioinf.org.uk/absの「Kabatman」データベース(ロンドン大学ユニバーシティーカレッジ、生化学および分子生物学学科、英国、ロンドンのA.C. Martinによって維持されている)、およびRetter et al., Nucl. Acids Res., 33(Database issue): D671-D674 (2005)に記載されているwww.vbase2.orgのVBASE2に記載されており、これらを通じてアクセスすることができる。「Kabatman」データベースウェブサイトはまた、CDRを同定するための一般的経験則も含んでいる。本明細書で使用する「CDR」という用語は、特記しない限り、Kabat et al., Sequences of Immunological Interest, 5^th ed., U.S. Department of Health and Human Services, 1991において定義されるものと同様である。

ポリクローナル抗体は好ましくは、関連抗原およびアジュバントを複数回皮下(sc)または腹腔内(ip)注射することによって動物で産生される。二官能性剤または誘導体化剤、例えばマレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル(システイン残基による結合)、N-ヒドロキシスクシンイミド(リジン残基による)、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、または当技術分野で公知の他の薬剤を用いて、免疫する種において免疫原性であるタンパク質、例えばキーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、またはダイズトリプシンインヒビターに関連抗原を結合させることによって、向上した抗体応答を得ることができる。

例えばタンパク質またはコンジュゲート100μgまたは5μg(それぞれ、ウサギまたはマウスの場合)を3倍量のフロイント完全アジュバントと混合し、この溶液を複数部位に皮内注射することによって、動物を抗原、免疫原性コンジュゲート、または誘導体に対して免疫する。1カ月後、フロイント完全アジュバント中の初回量の1/5〜{割合(1/10)}のペプチドまたはコンジュゲートを複数部位に皮下注射することにより、動物を追加免疫する。追加免疫注射の7〜14日後に、動物から採血し、血清を抗体価についてアッセイする。力価がプラトーに達するまで、動物を追加免疫する。好ましくは、同じ抗原のコンジュゲートであるが、異なるタンパク質に、および/または異なる架橋試薬によって結合させたコンジュゲートで、動物を追加免疫する。コンジュゲートは、タンパク質融合物として組換え細胞培養で作製することもできる。また、免疫応答を増強させるために、ミョウバンなどの凝集剤も適切に用いられる。

モノクローナル抗体とは、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体を指す。モノクローナル抗体は一般的に高度に特異的であり、典型的に異なる決定基(エピトープ)に対する異なる抗体を含む従来の(ポリクローナル)抗体調製物とは対照的に、単一の抗原性部位に対して指向され得る。その特異性に加えて、モノクローナル抗体は、均一な培養により合成され、異なる特異性および特徴を有するその他の免疫グロブリンが混入していないという点で有利である。

モノクローナル抗体は、Kohler et al., (Nature, 256:495-7, 1975)により最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製することもできるし、または組換えDNA法によって作製することもできる(例えば、米国特許第4,816,567号を参照されたい)。モノクローナル抗体は、例えばClackson et al., (Nature 352:624-628, 1991)、Marks et al., (J. Mol. Biol. 222:581-597, 1991)、Hoogenboom (Nat Biotechnol. 23:1105-16, 2005)およびMondon et al., (Front Biosci., 13:1117-1129, 2008)に記載されている技法を用いて、ディスプレイライブラリー(例えば、酵母ライブラリー、ファージ抗体ライブラリー)から単離することもできる。

ハイブリドーマ法では、マウスまたはその他の適切な宿主動物、例えばハムスターもしくはマカクザルなどを本明細書に記載する通りに免疫して、免疫化に使用したタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生し得るリンパ球を誘発する。または、リンパ球をインビトロで免疫してもよい。次いで、ポリエチレングリコールなどの適切な融合剤を用いて、リンパ球を骨髄腫細胞と融合させて、ハイブリドーマ細胞を形成させる(Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986))。

このようにして調製したハイブリドーマ細胞を、好ましくは融合していない親骨髄腫細胞の増殖または生存を阻害する1つまたは複数の物質を含む適切な培養液に播種し、増殖させる。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(HGPRTまたはHPRT)を欠く場合には、ハイブリドーマ用の培養液は典型的に、HGPRT欠損細胞の増殖を妨げる物質であるヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジンを含む(HAT培地)。

好ましい骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベル産生を支持し、培地に対して感受性のある細胞である。ヒト骨髄腫細胞株およびマウス-ヒトヘテロ骨髄腫細胞系もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生に関して記載されている(Kozbor, J. Immunol., 133: 3001 (1984)；Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987))。例示的なマウス骨髄腫株には、Salk Institute Cell Distribution Center、米国、カリフォルニア州、サンディエゴから入手可能なMOP-21およびM,C.-11マウス腫瘍に由来する株、ならびにアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション、米国、メリーランド州、ロックビルから入手可能なSP-2またはX63-Ag8-653細胞が含まれる。

ハイブリドーマ細胞が増殖している培養液を、抗原に対するモノクローナル抗体の産生についてアッセイする。好ましくは、ハイブリドーマ細胞により産生されたモノクローナル抗体の結合特異性を、免疫沈降により、または放射性免疫測定法(RIA)もしくは酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)などのインビトロ結合アッセイ法により決定する。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えばスキャッチャード解析により決定することができる(Munson et al., Anal. Biochem., 107:220 (1980))。

所望の特異性、親和性、および/または活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞が同定された後、限界希釈手順によりクローンをサブクローニングし、標準的な方法により増殖させることができる(Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986))。この目的に適した培養液には、例えばDMEMまたはRPMI-1640培地が含まれる。加えて、ハイブリドーマ細胞は、動物において腹水腫瘍としてインビボで増殖させることもできる。サブクローンにより分泌されたモノクローナル抗体は、例えばプロテインA-セファロース、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、またはアフィニティークロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順により、培養液、腹水、または血清から適切に分離する。

当技術分野で周知でありかつ本明細書に記載される抗体のより小さな抗原結合断片として抗体を使用できることがさらに意図される。

本開示は、全長重鎖2本および全長軽鎖2本を含むIL-1（例えばIL-1β）結合抗体を包含する。あるいは、IL-1β結合抗体は、IL-1βに対する結合活性を保持する一本鎖抗体または「ミニ」抗体のなどの構築物であってよい。そのような構築物は、例えば、大腸菌(E. coli)で発現させるための一本鎖抗体のPCRによるクローニングおよび組み立てなど、当技術分野において公知の方法により調製することができる(Antibody Engineering, The practical approach series, J. McCafferty, H. R. Hoogenboom, and D. J. Chiswell, editors, Oxford University Press, 1996に記載されている)。この種の構築物では、抗体分子の重鎖および軽鎖の可変部分をcDNAからPCR増幅する。次いで、得られた単位複製配列を、例えば第2PCR段階において、アミノ酸GlyおよびSerから構成される可動性のタンパク質リンカーをコードするリンカーDNAを介して組み立てる。このリンカーによって、抗原結合ポケットが再生されて、多くの場合に親の全長二量体免疫グロブリン分子に匹敵する親和性で抗原に結合するように、重鎖および軽鎖の可変部分が折りたたまれる。

本開示のIL-1（例えばIL-1β）結合抗体および結合断片は、本明細書に開示する例示的な抗体、断片、および配列の変種を包含する。変種には、本明細書に開示する例示的な抗体、断片、および配列の1つまたは複数と同じまたは実質的に同じ親和性およびエピトープ結合の特異性を有する、1つまたは複数のアミノ酸配列置換、欠失、および/または付加を含むペプチドおよびポリペプチドが含まれる。したがって、変種には、本明細書に開示する例示的な抗体、断片、および配列に対する、親和性およびエピトープ結合の特異性に実質的な変化をもたらさない1つまたは複数のアミノ酸配列置換、欠失、および/または付加を含むペプチドおよびポリペプチドが含まれる。例えば、抗体または断片の変種は、抗体または断片に対する1つまたは複数の変化に由来してよく、この場合、変化した抗体または断片は開始配列と同じまたは実質的に同じ親和性およびエピトープ結合の特異性を有する。変種は、対立遺伝子変種もしくはスプライス変種のように天然に生じるものであってよく、または人為的に構築することもできる。変種は、そのような変種をコードする対応する核酸分子から調製することができる。本抗体およびIL-1β結合断片の変種は、軽鎖および/または重鎖アミノ酸配列中に、天然に生じた、または組換えDNA技法を用いる天然配列のインビトロ操作によって導入された変化を有し得る。天然に生じる変種には、外来抗原に対する抗体応答の生成中に、対応する生殖系列ヌクレオチド配列においてインビボで生成される「体細胞」変種が含まれる。

IL-1（例えばIL-1β）結合抗体および結合断片の変種はまた、突然変異誘発技法によって調製することも可能である。例えば、抗体コード領域の至るところにアミノ酸変化を無作為に導入することができ、得られた変種をIL-1βに対する結合親和性または別の特性に関してスクリーニングすることができる。あるいは、軽鎖および/もしくは重鎖CDR、ならびに/またはフレームワーク領域などの、IL-1β抗体の選択される領域にアミノ酸変化を導入することができ、得られた抗体をIL-1βに対する結合または他の何らかの活性に関してスクリーニングすることができる。アミノ酸変化は、単一のアミノ酸相違から、CDR3のなどの所与のCDR内へのアミノ酸の複数置換の導入に及ぶ、CDRにおける1つまたは複数のアミノ酸置換を包含する。別の方法では、CDR内の少なくとも1つの残基をアラニンで置換することによって、CDR内の各残基のIL-1β結合に対する寄与を評価することができる。Lewis et al. (1995), Mol. Immunol. 32: 1065-72。次いで、より最適な配列を決定するために、IL-1βに対する結合に最適でない残基を変化させることができる。CDR3などのCDRの大きさを増加させるために、アミノ酸を挿入することによって作製された変種もまた包含する。例えば、大部分の軽鎖CDR3配列は9アミノ酸長である。9残基より短い抗体中の軽鎖配列は、CDRの長さを増加させるために適切なアミノ酸を挿入することによって、IL-1βに対する結合に関して最適化することができる。

軽鎖または重鎖の「鎖シャフリング」によって変種を調製することも可能である。Marks et al. (1992), Biotechnology 10: 779-83。単一の軽鎖(または重鎖)を、重鎖(または軽鎖)のレパートリーを有するライブラリーと組み合わせることができ、得られた集団を、IL-1βに対する結合などの所望の活性に関してスクリーニングする。これによって、重鎖および軽鎖両方のレパートリーを含むライブラリーで可能であるよりも、単一の軽鎖(または重鎖)と組み合わせた異なる重鎖(または軽鎖)のより多くの試料をスクリーニングすることが可能になる。

本開示のIL-1（例えばIL-1β）結合抗体および結合断片は、本明細書に開示する例示的な抗体、断片、および配列の誘導体を包含する。誘導体には、化学的に修飾されたポリペプチドもしくはペプチド、またはその変種、断片、もしくは誘導体が含まれる。例には、1つもしくは複数のポリマー、例えば水溶性ポリマー、N結合型もしくはO結合型の糖鎖、糖類、リン酸、および/または、他のこのような分子の共有結合が含まれる。誘導体は、結合する分子の種類または位置が天然のまたは開始のペプチドまたはポリペプチドと異なるように修飾される。誘導体は、ペプチド上またはポリペプチド上に天然に存在する1つまたは複数の化学基の欠失をさらに含む。

IL-1β結合抗体および結合断片は二重特異性であってよい。二重特異性抗体または断片は、いくつかの立体配置のものであってよい。例えば、二重特異性抗体は、単一の抗体(または抗体断片)に似ているが、2つの異なる抗原結合部位(可変領域)を有し得る。二重特異性抗体は、化学的技法によって(Kranz et al. (1981), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78: 5807)、「ポリドーマ(polydoma)」技法によって(米国特許第4,474,893号)、または組換えDNA技法によって作製することができる。二重特異性抗体は、その少なくとも1つがIL-1βのエピトープである、少なくとも2つの異なるエピトープに対する結合特異性を有し得る。IL-1β結合抗体および結合断片はまた、ヘテロ抗体であってもよい。ヘテロ抗体とは、互いに連結された、それぞれ異なる特異性を有する2つまたはそれ以上の抗体または抗体結合断片(Fab)である。

モノクローナル抗体の作製を回避して、抗体分子の抗原結合領域の組換えDNA型を作製する技法が、本IL-1（例えばIL-1β）結合抗体および結合断片に関して意図される。DNAを細菌発現システムにクローニングする。本発明の実施に適したこのような技法の一例では、発現されたFabタンパク質を細胞膜周辺腔(細菌細胞膜と細胞壁の間)に移行させるかまたは分泌させるリーダー配列を有するバクテリオファージλベクターシステムを用いる。IL-1βと結合するものに関して、多数の機能的Fab断片を迅速に作製し、スクリーニングすることができる。このようなIL-1β結合剤(IL-1βポリペプチドに対する特異性を有するFab断片)は、本開示のIL-1β結合抗体および結合断片の範囲内に明確に包含される。

本IL-1（例えばIL-1β）結合抗体および結合断片は、ヒト化抗体またはヒト型に遺伝子操作された抗体であってよい。本明細書で使用するヒト化抗体またはその抗原結合断片とは、非ヒト抗体に由来する抗原結合部位の部分、ならびにヒト抗体のフレームワークおよび/または定常領域の部分を含む組換えポリペプチドである。ヒト型に遺伝子操作された抗体または抗体断片とは、ヒトにおける改変抗体の検出可能な免疫原性を減少させるまたは除去するために、特定の位置のアミノ酸を改変する(例えば、欠失、挿入、または置換する)ことによって遺伝子操作された非ヒト(例えば、マウス)抗体である。

ヒト化抗体には、キメラ抗体およびCDR移植抗体が含まれる。キメラ抗体とは、ヒト定常領域に連結された非ヒト抗体可変領域を含む抗体である。したがってキメラ抗体では、可変領域は主に非ヒトであり、定常領域はヒトである。キメラ抗体およびそれらを作製する方法は、Morrison, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81: 6841-6855 (1984)、Boulianne et al., Nature, 312: 643-646 (1984)、および国際公開公報 WO 86/01533に記載されている。キメラ抗体はマウスモノクローナル抗体よりも免疫原性が低いと考えられるが、キメラ抗体の投与は、抗体の非ヒト部分に対するヒト抗マウス抗体応答(HAMA)と関連している。キメラ抗体はまた、適切な抗原結合特異性を有するマウス抗体分子由来の遺伝子と、ヒト補体を活性化するおよびADCCを媒介する能力などの適切な生物活性を有するヒト抗体分子由来の遺伝子をつなぎ合わせることによって作製することもできる。Morrison et al. (1984), Proc. Natl. Acad. Sci., 81: 6851；Neuberger et al. (1984), Nature, 312: 604。一例として、Fc領域の、異なるアイソタイプのFc領域との置換が挙げられる。

CDR移植抗体とは、ヒト「レシピエント」抗体のフレームワーク領域に連結された、非ヒト「ドナー」抗体由来のCDRを含む抗体である。一般に、CDR移植抗体は、ヒト抗体に由来する定常領域配列および可変領域(フレームワーク)配列の両方を含むため、キメラ抗体よりも多くのヒト抗体配列を含む。したがって、例えば、本発明のCDR移植ヒト化抗体は、ヒト抗体のフレームワーク領域(例えば、ヒト抗体のFR-1、FR-2、またはFR-3)に由来する連続したアミノ酸配列(例えば、約5個もしくはそれ以上、10個もしくはそれ以上、またはさらには15個もしくはそれ以上の連続したアミノ酸残基)を含んでよく、任意には、ヒト抗体の全フレームワーク領域の大部分またはすべてを含み得る。CDR移植抗体およびそれらを作製する方法は、Jones et al., Nature, 321: 522-525 (1986)、Riechmann et al., Nature, 332: 323-327 (1988)、およびVerhoeyen et al., Science, 239: 1534-1536 (1988)に記載されている。ヒト化抗体を作製するために使用できる方法はまた、米国特許第4,816,567号、同第5,721,367号、同第5,837,243号、および同第6,180,377号に記載されている。CDR移植抗体は、非ヒト抗体部分に対する免疫応答を誘導する可能性がキメラ抗体よりも低いと考えられる。しかし、おそらくはこれらのフレームワーク配列がドナー抗体の抗原結合部分の折りたたみに影響するために、ドナー抗体の結合親和性および/または特異性にはドナー抗体のフレームワーク配列が必要であることが報告されている。したがって、ドナーの非ヒトCDR配列を未改変のヒトフレームワーク配列に移植すると、得られたCDR移植抗体は、場合によって元の非ヒトドナー抗体と比較して結合親和性の減少を示し得る。例えば、Riechmann et al., Nature, 332: 323-327 (1988)、およびVerhoeyen et al., Science, 239: 1534-1536 (1988)を参照されたい。

ヒト型に遺伝子操作された抗体には、例えば「張り合わせ(veneered)」抗体およびHUMAN ENGINEERING(商標)技術(例えば米国特許第5,766,886号および同第5,869,619号を参照されたい)を用いて調製された抗体が含まれる。HUMAN ENGINEERING(商標)技術は市販されており、これは、ヒトにおける免疫原性が低減されるが、それでもなお元の非ヒト抗体の所望の結合特性を保持する改変抗体を生じるように、抗体のアミノ酸配列に対して特定の変化をもたらすことによって、マウスもしくはキメラ抗体または抗体断片などの非ヒト抗体または抗体断片を改変する段階を含む。一般に、この技法は、非ヒト(例えば、マウス)抗体のアミノ酸残基を「低リスク」、「中程度リスク」、または「高リスク」残基に分類する段階を含む。分類は、置換が、得られた抗体の折りたたみおよび/または抗原結合特性に影響するリスクに対して、特定の置換を作製することの予測される利点(例えば、ヒトにおける免疫原性に関して)を評価する全体的なリスク/恩恵算出を用いて行う。したがって、低リスク位置とは、抗原結合特性に有意に影響することなく免疫原性が低減されることが予測されるために、置換が有利であると予測される位置である。中程度リスク位置とは、置換によって免疫原性が低減されると予測されるが、タンパク質折りたたみおよび/または抗原結合に影響する可能性がより高い位置である。高リスク位置は、適切な折りたたみまたは抗原結合に関与する可能性が最も高い残基を含む。一般に、非ヒト抗体における低リスク位置をヒト残基で置換し、高リスク位置はめったに置換することなく、中程度リスク位置におけるヒト化置換は、無差別ではないにしても行う場合もある。非ヒト抗体可変領域配列内のプロリンを有する位置は通常、少なくとも中程度リスク位置として分類される。

非ヒト(例えば、マウス)抗体配列の所与の低リスクまたは中程度リスク位置において置換する特定のヒトアミノ酸残基は、非ヒト抗体の可変領域に由来するアミノ酸配列を、特定のまたは共通のヒト抗体配列の対応する領域と整列させることによって選択することができる。非ヒト配列における低リスクまたは中程度リスク位置におけるアミノ酸残基は、整列化に従ってヒト抗体配列中の対応する残基と置換することができる。ヒト型に遺伝子操作されたタンパク質を作製する技法は、Studnicka et al., Protein Engineering, 7: 805-814 (1994)、米国特許第5,766,886号、同第5,770,196号、同第5,821,123号、および同第5,869,619号、ならびにPCT出願公報 WO 93/11794にさらに詳述されている。

「張り合わせ（veneered）」抗体とは、免疫原性をさらに減少させるまたは機能を増強するために、特定の溶媒露出アミノ酸残基を置換するよう遺伝子操作された非ヒトまたはヒト化(例えば、キメラまたはCDR移植抗体)抗体である。キメラ抗体の表面残基は正確な抗体折りたたみに影響する可能性が低く、免疫応答を誘発する可能性が高いと推定されるため、キメラ抗体の張り合わせは、例えば、キメラ抗体の非ヒトフレームワーク領域における溶媒露出残基を同定する段階、およびそれらのうちの少なくとも1つをヒトフレームワーク領域に由来する対応する表面残基で置換する段階を含み得る。張り合わせは、上記のHUMAN ENGINEERING(商標)技術の使用を含む、任意の適切な遺伝子操作技法によって達成することができる。

異なるアプローチでは、CDR移植抗体を「脱ヒト化」することによって、結合親和性の回復を達成することができる。脱ヒト化は、ドナー抗体のフレームワーク領域に由来する残基をCDR移植抗体に復帰させる段階を含み、それによって正確な折りたたみが復元され得る。同様の「脱ヒト化」は、(i) 「レシピエント」抗体中に「ドナー」フレームワーク領域の一部を含めるか、または(ii) レシピエント抗体に「ドナー」抗体フレームワーク領域の一部を移植する(移植するドナーCDRと共に)ことによって達成することができる。

抗体、ヒト化抗体、ヒト型に遺伝子操作された抗体、およびそれらを調製する方法のさらなる考察に関しては、Kontermann and Dubel, eds., Antibody Engineering, Springer, New York, NY, 2001を参照されたい。

例示的なヒト化抗体またはヒト型に遺伝子操作された抗体には、IgG、IgM、IgE、IgA、およびIgD抗体が含まれる。本抗体は、任意のクラス(IgG、IgA、IgM、IgE、IgDなど)またはアイソタイプのものであってよく、カッパまたはラムダ軽鎖を含み得る。例えば、ヒト抗体は、アイソタイプ、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4のうちの少なくとも1つのなどの、IgG重鎖または既定の断片を含み得る、さらなる例として、本抗体または断片はIgG1重鎖およびIgG1軽鎖を含み得る。

本抗体および断片は、IL-1βポリペプチドと結合し、かつヒト生殖系列免疫グロブリン核酸配列の天然体細胞変種である核酸配列によってコードされる抗体のなどのヒト抗体、ならびにその断片、合成変種、誘導体、および融合物であってよい。このような抗体は、哺乳動物染色体において天然免疫グロブリンレパートリーがヒトV-遺伝子で置換されているトランスジェニック哺乳動物(トランスジェニックマウスなど)を使用するなど、当技術分野において公知である任意の方法によって産生され得る。このような哺乳動物は、正常な様式でヒト生殖系列抗体遺伝子のVDJ組換えおよび体細胞超変異を起こすと考えられ、よって完全なヒト配列を有する高親和性抗体が産生される。

標的タンパク質に対するヒト抗体は、内因性免疫グロブリン産生を有さず、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を含むように遺伝子操作されたトランスジェニック動物を用いて産生させることもできる。例えば、WO 98/24893はヒトIg遺伝子座を有するトランスジェニック動物を開示しており、この動物は内因性の重鎖および軽鎖遺伝子座の不活化のために機能的な内因性免疫グロブリンを産生しない。WO 91/00906もまた、免疫原に対する免疫応答を開始することができるトランスジェニック非霊長類哺乳動物宿主を開示しており、この場合、抗体は霊長類定常領域および/または可変領域を有し、内因性免疫グロブリンをコードする遺伝子座は置換されるかまたは不活化されている。WO 96/30498および米国特許第6,091,001号は、定常領域または可変領域のすべてまたは一部を置換して改変抗体分子を形成するためなど、哺乳動物における免疫グロブリン遺伝子座を改変するためのCre/Lox系の使用を開示している。WO 94/02602号は、不活化内因性Ig遺伝子座および機能的ヒトIg遺伝子座を有する非ヒト哺乳動物宿主を開示している。米国特許第5,939,598号は、内因性重鎖を欠き、1つまたは複数の異種定常領域を含む外因性免疫グロブリン遺伝子座を発現するトランスジェニックマウスを作製する方法を開示している。米国特許第6,114,598号、同第6,657,103号、および同第6,833,268号も参照されたい。

上記のトランスジェニック動物を使用して、選択された抗原性分子に対して免疫応答を生じさせることができ、抗体産生細胞を動物から取り出して、ヒトモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマを作製するために使用することができる。免疫化プロトコール、アジュバント等は当技術分野で公知であり、例えばWO 96/33735に記載されているようにトランスジェニックマウスの免疫化において使用される。この公開は、IL-6、IL-8、TNFa、ヒトCD4、Lセレクチン、gp39、および破傷風毒素を含む様々な抗原性分子に対するモノクローナル抗体を開示している。モノクローナル抗体は、対応するタンパク質の生物活性または生理的効果を阻害または中和する能力について試験することができる。WO 96/33735は、IL-8で免疫したトランスジェニックマウスの免疫細胞に由来するIL-8に対するモノクローナル抗体が、好中球のIL-8誘導性機能を阻止したことを開示している。トランスジェニック動物を免疫するために使用した抗原に対する特異性を有するヒトモノクローナル抗体は、WO 96/34096および米国特許出願第20030194404号；ならびに米国特許出願第20030031667号にも開示されている。

モノクローナル抗体を作製するために有用なさらなるトランスジェニック動物には、米国特許第5,770,429号およびFishwild, et al. (Nat. Biotechnol. 14:845-851, 1996)に記載されている、ヒト抗体の重鎖および軽鎖をコードする非再編成ヒト抗体遺伝子に由来する遺伝子配列を含むMedarex HuMAb-MOUSE(登録商標)が含まれる。HuMAb-MOUSE(登録商標)の免疫化により、標的タンパク質に対する完全ヒトモノクローナル抗体の産生が可能になる。

また、Ishida et al. (Cloning Stem Cells. 4:91-102, 2002)は、ヒトDNAのメガ塩基サイズのセグメントを含み、ヒト免疫グロブリン(hIg)遺伝子座全体を組み入れたTransChromo Mouse(TCMOUSE(商標))を記載している。TCMOUSE(商標)は、IgGのすべてのサブクラス(IgG1〜G4)を含む、hIgの十分に多様なレパートリーを有する。種々のヒト抗原でTC MOUSE(商標)を免疫すると、ヒト抗体を含む抗体応答が生じる。

Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993)；Jakobovits et al., Nature, 362:255-258 (1993)；Bruggermann et al., Year in Immunol., 7:33 (1993)；および米国特許第5,591,669号、米国特許第5,589,369号、米国特許第5,545,807号；および米国特許出願公開第20020199213号も参照されたい。米国特許出願公開第20030092125号は、所望のエピトープに対する動物の免疫応答にバイアスをかける方法を記載している。ヒト抗体はまた、インビトロ活性化B細胞により作製してもよい(米国特許第5,567,610号および同第5,229,275号を参照されたい)。

ヒト抗体はまた、抗体ディスプレイライブラリーのインビトロスクリーニングにより作製することもできる。Hoogenboom et al. (1991), J. Mol. Biol. 227: 381；およびMarks et al. (1991), J. Mol. Biol. 222: 581を参照されたい。種々の抗体含有ファージディスプレイライブラリーが記載されており、容易に調製することができる。ライブラリーは、適切な標的に対してスクリーニングすることができる、ヒトFab、Fv、およびscFv断片などの多様なヒト抗体配列を含み得る。ファージディスプレイライブラリーは、IL-1βの選択的結合剤を同定するためにスクリーニングすることができる抗体以外のペプチドまたはタンパク質を含んでもよい。

組換えヒト抗体遺伝子のレパートリーを作製する技術の開発、およびコードされる抗体断片の糸状バクテリオファージの表面上での提示により、ヒト抗体を直接作製するための手段が提供された。ファージ技術によって作製される抗体は、細菌において抗原結合断片‐通常はFvまたはFab断片‐として産生され、したがってエフェクター機能を欠いている。エフェクター機能は、2つの戦略のうちの1つによって導入することができる：哺乳動物細胞における発現のために、断片を完全抗体になるよう遺伝子操作するか、またはエフェクター機能を誘発できる第2の結合部位を用いて二重特異性抗体断片に遺伝子操作することができる。

本開示は、ヒト抗体のライブラリーをファージ上で合成する段階、標的タンパク質またはその部分を用いてライブラリーをスクリーニングする段階、標的に結合するファージを単離する段階、およびファージから抗体を獲得する段階を含む、標的特異的抗体またはその抗原結合部分を作製する方法を意図する。一例として、ファージディスプレイ技法で使用するための抗体ライブラリーを調製する1つの方法は、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を含む非ヒト動物を標的抗原またはその抗原性部分で免疫して免疫応答を生じさせる段階、免疫した動物から抗体産生細胞を採取する段階；採取した細胞からRNAを単離する段階、RNAを逆転写してcDNAを作製する段階、プライマーを用いてcDNAを増幅する段階、および抗体がファージ上で発現されるようにcDNAをファージディスプレイベクターに挿入する段階を含む。本発明の組換え標的特異的抗体は、このようにして得ることができる。

ファージディスプレイ過程は、糸状バクテリオファージの表面上に抗体レパートリーを提示し、続いて選択された抗原に対するその結合によってファージを選択することにより、免疫選択を模倣する。1つのそのような技法はWO 99/10494に記載されており、これは、そのようなアプローチを使用した、MPLおよびmsk受容体に対する高親和性かつ機能的アゴニスト抗体の単離を記載している。本発明の抗体は、組換えコンビナトリアル抗体ライブラリー、好ましくは、ヒトリンパ球由来のmRNAから調製されたヒトV_LおよびV_HのcDNAを用いて調製したscFvファージディスプレイライブラリーをスクリーニングすることにより単離することができる。このようなライブラリーを調製およびスクリーニングするための方法論は、当技術分野で公知である。例えば、米国特許第5,969,108号を参照されたい。ファージディスプレイライブラリーを作製するためのキットが市販されている(例えば、Pharmacia Recombinant Phage Antibody System、カタログ番号27-9400-01；およびStratagene SurfZAP(商標)ファージディスプレイキット、カタログ番号240612)。抗体ディスプレイライブラリーを作製およびスクリーニングする際に使用することができる他の方法および試薬も存在する(例えば、Ladner et al. 米国特許第5,223,409号；Kang et al. WO 92/18619；Dower et al. WO 91/17271；Winter et al. WO 92/20791；Markland et al. WO 92/15679；Breitling et al. WO 93/01288；McCafferty et al. WO 92/01047；Garrard et al. WO 92/09690；Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9：1370-1372；Hay et al. (1992) Hum. Antibod. Hybridomas 3:81-85；Huse et al. (1989) Science 246:1275-1281；McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554；Griffiths et al. (1993) EMBO J 12:725-734；Hawkins et al. (1992) J. Mol. Biol. 226:889-896；Clackson et al. (1991) Nature 352:624-628；Gram et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:3576-3580；Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9:1373-1377；Hoogenboom et al.(1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137；およびBarbas et al. (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88：7978-7982を参照されたい)。

1つの態様では、所望の特徴を有する標的抗原に特異的なヒト抗体を単離するために、ヒトV_HおよびV_Lライブラリーをスクリーニングして、所望の特異性を有する抗体断片を選択する。この方法で使用する抗体ライブラリーは、好ましくは、本明細書および当技術分野で記載される通りに調製およびスクリーニングされるscFvライブラリーである(McCafferty et al.、WO 92/01047、McCafferty et al., (Nature 348：552-554, 1990)；およびGriffiths et al., (EMBO J 12：725-734, 1993))。scFv抗体ライブラリーは、好ましくは標的タンパク質を抗原として用いてスクリーニングする。

または、抗体のFd断片(V_H-C_H1)および軽鎖(V_L-C_L)をPCRにより別々にクローニングし、コンビナトリアルファージディスプレイライブラリーにおいてランダムに組換え、その後特定の抗原に対する結合について選択することができる。Fab断片をファージ表面上で発現させ、すなわちそれらをコードする遺伝子に物理的に関連づける。したがって、抗原結合によりFabを選択すると、Fabコード配列も同時に選択され、続いてこれを増幅することができる。パニングと称される手順である抗原結合および再増幅を数ラウンド行うことにより、抗原に特異的なFabが濃縮され、最終的に単離される。

1994年に、「誘導選択(guided selection)」と称される、抗体をヒト化するためのアプローチが記載された。誘導選択は、マウスモノクローナル抗体をヒト化するためにファージディスプレイ技法の威力を利用する(Jespers, L. S., et al. Bio/Technology 12, 899-903 (1994)を参照されたい)。このために、マウスモノクローナル抗体のFd断片をヒト軽鎖ライブラリーと組み合わせて提示することができ、次いで生じたハイブリッドFabライブラリーを抗原で選択することができる。こうして、マウスFd断片は、選択を誘導するための鋳型を提供する。その後、選択されたヒト軽鎖をヒトFd断片ライブラリーと組み合わせる。生じたライブラリーを選択することにより、完全なヒトFabが得られる。

ファージディスプレイライブラリーからヒト抗体を導出するための様々な手順が記載されている(例えば、Hoogenboom et al., J. Mol. Biol., 227:381 (1991)；Marks et al., J. Mol. Biol, 222:581-597 (1991)；米国特許第5,565,332号および同第5,573,905号；Clackson, T., and Wells, J. A., TIBTECH 12, 173-184 (1994)を参照されたい)。特に、ファージディスプレイライブラリーに由来する抗体のインビトロでの選択および進化は、強力な手段となっている(Burton, D. R., and Barbas III, C. F., Adv. Immunol. 57, 191-280 (1994)；Winter, G., et al., Annu. Rev. Immunol. 12, 433-455 (1994)；米国特許出願公開第20020004215号およびWO 92/01047；米国特許出願公開第20030190317号；ならびに米国特許第6,054,287号および同第5,877,293号を参照されたい)。

Watkins, 「Screening of Phage-Expressed Antibody Libraries by Capture Lift,」 Methods in Molecular Biology, Antibody Phage Display: Methods and Protocols 178: 187-193、および2003年3月6日に公開された米国特許出願公開第20030044772号は、固体支持体への候補結合分子の固定化を含む方法である捕獲リフト(capture lift)により、ファージ発現抗体ライブラリーまたは他の結合分子をスクリーニングする方法を記載している。

Fv断片は、ファージタンパク質融合物(例えば、M13遺伝子IIIとの)として発現される1本鎖と、可溶性断片として発現される相補鎖の会合により、ファージの表面上に提示される。ファージは、クラスIファージ：fd、M13、f1、If1、1ke、ZJ/Z、Ffのうちの1つ、ならびにクラスIIファージXf、Pf1、およびPf3のうちの1つなどの糸状ファージであってよいことが意図される。ファージは、M13もしくはfdまたはその誘導体であってもよい。

最初のヒトV_LおよびV_Hセグメントが選択されると、「混合および適合(mix and match)」実験を行い、最初に選択されたV_LおよびV_Hセグメントの様々な対を標的結合についてスクリーニングして、好ましいV_L/V_H対の組み合わせを選択する。加えて、抗体の質をさらに改善するために、天然の免疫応答において抗体の親和性成熟を担うインビボ体細胞変異過程に類似した過程で、好ましいV_L/V_H対のV_LおよびV_Hセグメントを、好ましくはV_Hおよび/またはV_LのCDR1、CDR2、またはCDR3領域のいずれかの内部でランダムに変異させることができる。このインビトロ親和性成熟は、それぞれV_H CDR1、CDR2、およびCDR3またはV_L CDR1、CDR2、およびCDR3に相補的なPCRプライマーを用いて、V_LおよびV_H領域を増幅することによって達成することができる。これらのプライマーには、結果として生じるPCR産物が、V_Hおよび/またはV_L CDR3領域中にランダムな変異が導入されたV_LおよびV_Hセグメントをコードするように、特定の位置に4種のヌクレオチド塩基のランダムな混合物が添加してある。これらのランダムに変異させたV_LおよびV_Hセグメントを、標的抗原への結合について再度スクリーニングすることができる。

組換え免疫グロブリンディスプレイライブラリーから標的特異的抗体をスクリーニングおよび単離した後、選択された抗体をコードしている核酸をディスプレイパッケージから(例えば、ファージゲノムから)回収し、標準的な組換えDNA技法により他の発現ベクターにサブクローニングすることができる。必要に応じて、後述するように核酸をさらに操作して、本発明の他の抗体形態を作製することもできる。コンビナトリアルライブラリーのスクリーニングにより単離した組換えヒト抗体を発現させるには、本明細書に記載するように、抗体をコードするDNAを組換え発現ベクターにクローニングし、哺乳動物宿主細胞に導入する。

細菌または宿主細胞の突然変異誘発株でファージディスプレイ法を実施できることが意図される。突然変異誘発株は、その内部で複製されるDNAをその親DNAに関して変異させる遺伝子欠陥を有する宿主細胞である。例示的な突然変異誘発株は、NR9046mutD5およびNR9046 mut T1である。

ヘルパーファージを用いてファージディスプレイ法を実施できることも意図される。これは、欠陥ファージゲノムを含む細胞に感染させるために用いられ、欠陥を補足するように機能するファージである。欠陥ファージゲノムは、何らかの機能をコードする遺伝子配が除去されているファージミドまたはファージであってよい。ヘルパーファージの例は、M13K07、M13K07遺伝子III no. 3；およびキャプシドタンパク質に融合された結合分子を提示またはコードするファージである。

抗体はまた、WO 92/01047に開示されているとおりの階層的二重組み合わせアプローチを使用するファージディスプレイスクリーニング法により作製される。この方法では、H鎖またはL鎖クローンのいずれかを含む個々のコロニーを使用して、他方の鎖(LまたはH)をコードするクローンの完全なライブラリーを感染させ、結果として生じた2鎖の特異的結合メンバーを、その文献に記載されているものなどのファージディスプレイ技法に従って選択する。この技法は、Marks et al, (Bio/Technology, 10:779-783, 1992)にも記載されている。

抗原特異的抗体を同定するために、酵母および微生物細胞の表面上にペプチドを提示させるための方法も用いられている。例えば、米国特許第6,699,658号を参照されたい。抗体ライブラリーを凝集素などの酵母タンパク質に結合させて、免疫系におけるB細胞による抗体の細胞表面提示を効果的に模倣することができる。

ファージディスプレイ法に加えて、抗体は、リボソームmRNAディスプレイ法および微生物細胞ディスプレイ法を用いて単離することもできる。リボソームディスプレイを使用するポリペプチドの選択は、Hanes et al., (Proc. Natl Acad Sci USA, 94:4937-4942, 1997)、ならびにKawasakiに発行された米国特許第5,643,768号および同第5,658,754号に記載されている。リボソームディスプレイは、抗体の迅速大規模突然変異解析にも有用である。選択的突然変異誘発アプローチもまた、リボソームディスプレイ技法を用いて選択することができる活性が向上した抗体を作製する方法を提供する。

IL-1（例えばIL-1β）結合抗体および結合断片は、IL-1βと結合しないが、代わりに循環半減期、直接的細胞毒性効果、検出可能な標識、またはレシピエントの内因性補体カスケードもしくは内因性細胞傷害性の活性化などのその他の機能に関与する1つまたは複数の部分を含み得る。抗体または断片は、抗体の定常領域のすべてまたは一部を含んでよく、IgA(例えば、IgA1またはIgA2)、IgD、IgE、IgG(例えば、IgG1、IgG2、IgG3、またはIgG4)、またはIgMを含む任意のアイソタイプのものであってよい。定常領域を含むことに加えてまたはその代わりに、本発明の抗原結合化合物は、エピトープタグ、サルベージ受容体エピトープ、診断もしくは精製目的のための標識部分、または放射性核種もしくは毒素などの細胞毒性部分を含み得る。

本抗体および断片の定常領域(存在する場合)は、γ1、γ2、γ3、γ4、μ、β2、またはδ、またはε型のもであってよく、好ましくはγ型、より好ましくはy型のものであってよく、ヒト軽鎖の定常部分はκまたはλ型(λ₁、λ₂、およびλ₃サブタイプを含む)のものであってよいが、好ましくはκ型のものである。

変種には、野生型Fc領域と比較して少なくとも1つのアミノ酸改変を含む改変されたFc領域を含む抗体または断片もまた含まれる。変種Fc領域は、野生型Fc領域を含む匹敵する分子と比較して、より高いまたはより低い親和性でFc受容体に結合するように設計することができる。

例えば、本IL-1β結合抗体および結合断片は、改変Fc領域を含み得る。Fc領域とは、IgGのパパイン消化によって生成される、IgG C末端ドメインと相同的な天然または合成ポリペプチドを指す。IgG Fcは、約50 kDの分子量を有する。本抗体および断片では、全Fc領域を用いることもできるし、または半減期延長部分のみを用いることもできる。さらに、天然の活性がすべての場合において必要であるとも望ましいとも限らないため、アミノ酸配列中の多くの改変も許容される。

Fc領域は、必要に応じて、補体を結合する能力およびFc受容体と高親和性で結合する能力を阻害するために、変異させることができる。マウスIgG Fcでは、Glu 318、Lys 320、およびLys 322をAla残基と置換すると、このタンパク質はADCCを引き起こすことができなくなる。Leu 235をGluに置換すると、高親和性でFc受容体に結合するこのタンパク質の能力は阻害される。ヒトIgGに関する種々の変異もまた知られている(例えば、Morrison et al., 1994, The Immunologist 2: 119 124、およびBrekke et al., 1994, The Immunologist 2: 125を参照されたい)。

いくつかの態様においては、例えば血清半減期またはインビトロアッセイ法によって測定される半減期といった、生物環境における抗体または断片の半減期が延長されるように天然Fc領域が改変された改変Fc領域を有する本抗体または断片が提供される。IgGのFc領域の元の形態を改変する方法もまた、米国特許第6,998,253号に記載されている。

特定の態様では、例えば、半減期を延長するためにPEGまたは多糖ポリマーを含むその他の水溶性ポリマーなどの分子を抗体断片に付加するなど、血清半減期を延長するために抗体または断片を改変することが望ましい場合がある。これはまた、例えば抗体断片にサルベージ受容体結合エピトープを組み入れることによって(例えば、抗体断片中の適切な領域の変異により、またはペプチドタグにエピトープを組み入れ、次いでこれを抗体断片のいずれかの末端または中央に融合させることにより、例えば、DNAまたはペプチド合成により、達成することができる(WO96/32478を参照されたい)。サルベージ受容体結合エピトープとは、IgG分子のインビボ血清半減期の延長に関与する、IgG分子(例えば、IgG₁、IgG₂、IgG₃、またはIgG₄)のFc領域のエピトープを指す。

サルベージ受容体結合エピトープは、Fcドメインの1つまたは2つのループに由来する任意の1つまたは複数のアミノ酸残基が、抗体断片の類似の位置に移行される領域を含み得る。さらにより好ましくは、Fcドメインの1つまたは2つのループに由来する3つまたはそれ以上の残基を移行させる。さらにより好ましくは、Fc領域(例えばIgGの)のCH2ドメインからエピトープを得て、抗体のCH1、CH3、もしくはV_H領域、または複数のそのような領域に移行させる。あるいは、Fc領域のCH2ドメインからエピトープを得て、抗体断片のC_L領域もしくはV_L領域またはその両方に移行させる。Fc変種およびそれらのサルベージ受容体との相互作用について記載しているWO 97/34631およびWO 96/32478もまた参照されたい。

Fc受容体結合部位内の残基の変異は、ADCCもしくはCDC活性の変化または半減期の変化など、エフェクター機能の変化をもたらし得る。可能な変異には、アラニンとの置換、保存的置換、非保存的置換、または異なるIgGサブクラスに由来する同じ位置の対応するアミノ酸残基との置換(例えば、IgG1残基を、その位置の対応するIgG2残基で置換する)を含む、1つまたは複数の残基の挿入、欠失、または置換が含まれる。例えば、IgG4のアミノ酸241位におけるセリンをプロリン(IgG1およびIgG2のその位置に見出される)に変異させることによって、均一な抗体が産生され、元のキメラIgG4と比較して血清半減期が延長され、組織分布が改善されることが報告されている(Angal et al., Mol Immunol. 30:105-8, 1993)。

抗体断片とは、無傷の抗体の抗原結合領域または可変領域などの、無傷の全長抗体の一部である。抗体断片の例には、Fab、Fab'、F(ab')₂、およびFv断片；ダイアボディ(diabody)；直鎖状抗体：一本鎖抗体分子(例えば、scFv)；二重特異性、三重特異性、および多特異性抗体などの多特異性抗体断片(例えば、ダイアボディ、トリアボディ(triabody)、テトラボディ(tetrabody))；ミニボディ(minibody)；キレート化組換え抗体；トリボディ(tribody)またはバイボディ(bibody)；イントラボディ(intrabody)；ナノボディ(nanobody)；小モジュール免疫薬剤(SMIP)、アドネクチン、結合ドメイン免疫グロブリン融合タンパク質；ラクダ化抗体；V_HH含有抗体；および抗体断片から形成される任意の他のポリペプチドが含まれる。

本開示は、上記の重鎖または軽鎖配列のいずれかを含み、かつIL-1βと結合するIL-1β結合抗体断片を包含する。本明細書で使用する断片という用語は、抗体の任意の3個またはそれ以上の連続したアミノ酸(例えば、4個もしくはそれ以上、5個もしくはそれ以上、6個もしくはそれ以上、8個もしくはそれ以上、またはさらには10個もしくはそれ以上の連続したアミノ酸)を指し、Fab、Fab'、F(ab')₂、およびF(v)断片、または個々の軽鎖もしくは重鎖可変領域またはその一部を包含する。IL-1β結合断片には、例えば、Fab、Fab'、F(ab')₂、Fv、およびscFvが含まれる。これらの断片は無傷の抗体のFc断片を欠いており、無傷の抗体よりも迅速に循環から除去され、非特異的組織結合が低い可能性がある。Wahl et al. (1983), J. Nucl. Med., 24: 316-25を参照されたい。これらの断片は、例えば、パパイン(Fab断片を生成するため)またはペプシン(F(ab')₂断片を生成するため)などの酵素でタンパク質切断するなど、周知の方法を用いて無傷の抗体から生成することができる。

I型IL-1受容体（IL-1R1）に対するIL-1βの結合を測定する際に用いるインビトロアッセイ法および細胞に基づくアッセイ法は、IL-1βまたはIL-1RIに結合する分子(抗体、アンタゴニスト、またはその他のインヒビターなど)の存在下で測定するアッセイ法を含め、当技術分野において十分に記載されている。(例えば、Evans et al., (1995), J. Biol. Chem. 270:11477-11483；Vigers et al., (2000), J. Biol. Chem. 275:36927-36933；Yanofsky et al., (1996), Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:7381-7386；Fredericks et al., (2004), Protein Eng. Des. Sel. 17:95-106；Slack et al., (1993), J. Biol. Chem. 268:2513-2524；Smith et al., (2003), Immunity 18:87-96；Vigers et al., (1997), Nature 386:190-194；Ruggiero et al., (1997), J. Immunol. 158:3881-3887；Guo et al., (1995), J. Biol. Chem. 270:27562-27568；Svenson et al., (1995), Eur. J. Immunol. 25:2842-2850；Arend et al., (1994), J. Immunol. 153:4766-4774を参照されたい)。そのようなアッセイ法のための、ヒトI型IL-1受容体を含む組換えI型IL-1受容体は、様々な市販供給元(例えば、R&D Systems、SIGMAを参照されたい)から容易に入手することができる。I型IL-1受容体はまた、標準的な分子生物学および当技術分野で公知のトランスフェクション技法を用いて、適切な宿主細胞に導入された発現構築物またはベクターから発現させることもできる。次いで、発現されたI型IL-1受容体を、結合アッセイ法において使用するために単離および精製することができ、またはあるいは細胞結合型として直接使用することもできる。

例えば、I型IL-1受容体に対するIL-1βの結合は、IL-1β結合抗体を固定化し、IL-1βを固体化抗体と接触させて、IL-1βが抗体に結合したかどうかを決定し、可溶型IL-1RIを結合しているIL-1β/抗体複合体と接触させて、可溶性IL-1RIが複合体に結合したかどうかを決定することによって判定することができる。この手順はまた、可溶性IL-1RIを、IL-1βと接触させる前に固定化抗体と接触させて、可溶性IL-1RIが固定化抗体に結合しないことを確認する段階をさらに含み得る。この手順は、結合相互作用の反応速度解析用のBiacore(登録商標)装置を用いて行うことができる。このような手順を用いて、抗体またはその他の分子が、IL-1βのI型IL-1受容体への結合を可能にするかまたは遮断するかを判定することもできる。

その他のIL-1β/IL-1RI結合アッセイ法に関しては、IL-1β抗体またはそのIL-1β結合断片の存在下または非存在下において、IL-1RIに対するIL-1βの結合を比較することによって、I型IL-1受容体に対するIL-1β結合を可能にすることまたはIL-1β結合の遮断を判定できる。遮断は、アッセイ読み取り値において、対応する緩衝液または希釈液を含むがIL-1β抗体またはそのIL-1β結合断片を含まない対照試料と比較した場合の、抗IL-1β抗体またはそのIL-1β結合断片の存在下におけるI型IL-1受容体に対するIL-1β結合の減少表示として同定される。アッセイ読み取り値は、遮断の存在もしくは非存在を示して定性的と見なされてもよいし、または抗体もしくは断片の存在に起因する結合のパーセント減少もしくは減少倍率を示して定量的と見なされてもよい。

あるいはまたはさらに、IL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片がIL-1RIに対するIL-1β結合を実質的に遮断する場合、IL-1RIに対するIL-1β結合は、抗体または断片の非存在下における同濃度のIL-1βとIL-1RIの結合と比較して、少なくとも10分の1、あるいは少なくとも約20分の1、あるいは少なくとも約50分の1、あるいは少なくとも約100分の1、あるいは少なくとも約1000分の1、あるいは少なくとも約10000分の1、またはそれ以上に低下する。別の例として、IL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片がIL-1RIに対するIL-1β結合を実質的に可能にする場合、IL-1RIに対するIL-1β結合は、抗体または断片の非存在下における同濃度のIL-1βとIL-1RIの結合の少なくとも約90%、あるいは少なくとも約95%、あるいは少なくとも約99%、あるいは少なくとも約99.9%、あるいは少なくとも約99.99%、あるいは少なくとも約99.999%、あるいは少なくとも約99.9999%、あるいはその結合と実質的に同一である。

本開示は、特定の態様において、本明細書に記載される例示的な抗体の1つまたは複数と同じエピトープまたは実質的に同じエピトープに結合するIL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片を包含し得る。あるいはまたはさらに、IL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片は、米国特許出願第11/472813号またはWO 2007/002261に記載されるAB7の可変領域配列(配列は以下に表示)を有する抗体の結合と競合する。一例として、IL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片が、SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体の結合と競合する場合には、SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体のIL-1βへの結合は、IL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片の存在下で結合が測定される場合に、少なくとも約2分の1、あるいは少なくとも約5分の1、あるいは少なくとも約10分の1、あるいは少なくとも約20分の1、あるいは少なくとも約50分の1、あるいは少なくとも約100分の1、あるいは少なくとも約1000分の1、あるいは少なくとも約10000分の1、またはそれ以上に低下し得る。IL-1β結合抗体またはIL-1β結合断片は、SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体よりも過剰に、例えば、少なくとも約2倍、あるいは少なくとも約5倍、あるいは少なくとも約10倍、あるいは少なくとも約20倍、あるいは少なくとも約50倍、あるいは少なくとも約100倍、あるいは少なくとも約1000倍、あるいは少なくとも約10000倍過剰に存在してよい。あるいはまたはさらに、本開示は、成熟IL-1βタンパク質の残基83〜105に相当するアミノ酸配列

(米国特許出願第11/472813号、WO 2007/002261)中に含まれるエピトープに結合するIL-1β結合抗体および断片を包含する。本明細書において意図されるように、当技術分野におけるいくつかの公知の方法のいずれかを用いて、IL-1β結合抗体または断片が、例えばAB7と命名された抗体のなどの例示的な抗体の1つまたは複数と同じエピトープまたは実質的に同じエピトープに結合するかどうかを容易に判定することができる。

例えば、IL-1β結合抗体または断片が結合する重要なアミノ酸残基(エピトープ)は、例えばPepSpot(商標)ペプチドアレイ(JPT Peptide Technologies、ドイツ、ベルリン)などのペプチドアレイを用いて決定することができる。PepSpot(商標)ペプチドアレイでは、全IL-1βアミノ酸配列に及び、各ペプチドが前のペプチドと11アミノ酸重複する12アミノ酸ペプチドのスキャンが膜上に直接合成される。次いでペプチドを保有する膜を、エピトープ結合情報を探索する例えば2μg/ml濃度の抗体で、室温で2時間プロービングする。膜結合ペプチドに対する抗体の結合は、二次HRP結合ヤギ抗ヒト(またはしかるべき場合にはマウス)抗体、次いで高感度化学発光(ECL)を用いて検出することができる。抗体結合に関して陽性を表す、成熟IL-1βタンパク質の特定のアミノ酸残基または配列に対応するペプチドスポットが、特定の抗体が結合したエピトープを示す。

あるいはまたはさらに、抗体競合実験を行うことができ、このようなアッセイ法は当技術分野において周知である。例えば、特異性が未知である抗体を、本開示の例示的な抗体(例えば、AB7)のいずれかと比較することができる。結合競合アッセイ法は、例えば、結合相互作用の反応速度解析用のBiacore(登録商標)装置を用いて、またはELISAによって行うことができる。そのようなアッセイ法では、エピトープ特異性が未知である抗体を、公知の比較抗体(例えば、AB7)に対する結合を競合する能力について評価する。特定のエピトープに対する結合の競合は、公知の比較抗体(例えば、AB7)のIL-1βエピトープに対する結合の少なくとも約50%、または少なくとも約70%、または少なくとも約80%、または少なくとも約90%、または少なくとも約95%、または少なくとも約99%、または約100%の減少によって決定される。

例示的な抗体におけるIL-1β結合領域および/または開示する抗体によって認識されるエピトープの本開示における同定を考慮して、本開示の態様に匹敵する、類似の結合特性および治療または診断有用性を有するさらなる抗体を作製できることが意図される。

抗体の抗原結合断片には、一般に抗体の抗原結合部分を維持することによって、抗原に特異的に結合する能力を保持する断片が含まれる。抗体の抗原結合機能が全長抗体の断片によって遂行され得ることが十分に確立されている。抗原結合部分の例には、(i) VL、VH、CL、およびCH1ドメインからなる一価の断片であるFab断片；(ii) ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結された2つのFab断片を含む二価の断片であるF(ab')²断片；(iii) VHおよびCH1ドメインであるFd断片；(iv) 抗体の単一アームのVLおよびVHドメインであるFv断片、(v) VHドメインであるdAb断片(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546)；および(vi)単離された相補性決定領域(CDR)が含まれる。一本鎖抗体もまた、抗体の抗原結合部分という用語の範囲内に含まれる。本発明のIL-1β結合抗体および断片はまた、一価もしくは多価、または単量体もしくは多量体(例えば四量体)、足場(例えば、タンパク質または炭水化物足場)を含むもしくは含まないCDR由来結合ドメインもまた包含する。

本発明のIL-1β結合抗体または結合断片は、抗体または抗体部分と1つまたは複数の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合または非共有結合によって形成された、より大きな免疫接着分子の一部であってよい。そのような免疫接着分子の例には、四量体scFv分子を作製するためのストレプトアビジンコア領域の使用(Kipriyanov, S. M., et al. (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6:93-101)、ならびに二価およびビオチン化scFv分子を作製するためのシステイン残基、マーカーペプチド、およびC末端ポリヒスチジンタグの使用(Kipriyanov, S. M., et al. (1994) Mol. Immunol. 31:1047-1058)が含まれる。免疫接着分子を含む抗体および断片は、本明細書に記載する標準的な組換えDNA技法を用いて得ることができる。好ましい抗原結合部分は、完全なドメインまたは完全なドメインの対である。

IL-1β結合抗体および結合断片はまた、V_Hドメインからなるドメイン抗体(dAb)断片(Ward et al., Nature 341:544-546, 1989)を包含してもよい。本発明のIL-1β結合抗体および断片はまた、ダイアボディを包含する。ここでダイアボディとは、V_HおよびV_Lドメインを単一のポリペプチド鎖上に発現するが、同一鎖上の2つのドメイン間の対形成を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、そのドメインを別の鎖の相補的ドメインと対形成させて、2つの抗原結合部位を作製する二価抗体である(例えば、EP 404,097；WO 93/11161；Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448, 1993、およびPoljak et al., Structure 2:1121-1123, 1994を参照されたい)。ダイアボディは二重特異性または単一特異性であってよい。

本開示のIL-1β結合抗体および結合断片はまた、IL-1βに結合する一本鎖抗体断片(scFv)を包含する。scFvは、抗体軽鎖可変領域(V_L)に機能的に連結された抗体重鎖可変領域(V_H)を含み、重鎖可変領域および軽鎖可変領域は一緒にまたは個別に、IL-1βと結合する結合部位を形成する。scFvはアミノ末端にV_H領域を含み、カルボキシ末端にV_L領域を含み得る。あるいは、scFvはアミノ末端にV_L領域を含み、カルボキシ末端にV_H領域を含み得る。さらに、Fv断片の2つのドメイン、V_LおよびV_Hは別個の遺伝子によってコードされているものの、組換え法を用いて、それらをV_LおよびV_H領域が対形成して一価分子を形成する単一のタンパク質鎖とすることのできる合成リンカーにより、それらを結合することができる(一本鎖Fv(scFv)として知られている；例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426；およびHuston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照されたい)。

scFvは任意に、重鎖可変領域と軽鎖可変領域の間にポリペプチドリンカーをさらに含み得る。そのようなポリペプチドリンカーは一般に、1〜50アミノ酸、あるいは3〜12アミノ酸、あるいは2アミノ酸を含む。scFvにおける重鎖と軽鎖を連結するためのリンカーペプチドの例は、5アミノ酸配列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(SEQ ID NO:2)を含む。その他の例は、リンカーを作製するために、この配列の1回または複数回の縦列反復(例えば、Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(SEQ ID NO:2)の2〜4回の反復を含むポリペプチド)を含む。

本発明のIL-1β結合抗体および結合断片はまた、重鎖抗体(HCAb)を包含する。通常の抗体のH₂L₂構造の例外は、ラクダ科動物(ラクダ、ヒトコブラクダ、およびラマ；Hamers-Casterman et al., 1993 Nature 363: 446；Nguyen et al., 1998 J. Mol. Biol. 275: 413)、オオセザメ(wobbegong shark)(Nuttall et al., Mol Immunol. 38:313-26, 2001)、コモリザメ(nurse shark)(Greenberg et al., Nature 374:168-73, 1995；Roux et al., 1998 Proc. Nat. Acad. Sci. USA 95: 11804)、およびスポッテッドラットフィッシュ(spotted ratfish)(Nguyen, et al., 「Heavy-chain antibodies in Camelidae; a case of evolutionary innovation」, 2002 Immunogenetics 54 (1): 39-47)に見出される免疫グロブリンのいくつかのアイソタイプで生じる。これらの機能的抗体は重鎖のみの二量体であることから、これらの抗体は明らかに、重鎖のみを用いて抗原結合領域を形成し得る（「重鎖抗体」または「HCAb」と称される）。したがって、本IL-1β結合抗体および断片のいくつかの態様は、IL-1βに特異的に結合する重鎖抗体であってよい。例えば、IgGのクラスであり軽鎖を欠いている重鎖抗体は、ラクダ、ヒトコブラクダ、およびラマを含むラクダ科属の動物によって産生される(Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993))。HCAbは、通常のIgG抗体の分子量が約160 kDaである代わりに、約 95 kDaという分子量を有する。その結合ドメインは重鎖可変ドメインのみからなり、多くの場合、通常のV_Hと区別するためにV_HHと称される。Muyldermans et al., J. Mol. Recognit. 12:131-140 (1999)。重鎖抗体の可変ドメインは、場合によってナノボディと称される(Cortez-Retamozo et al., Cancer Research 64:2853-57, 2004)。Conrath et al., (Antimicrob Agents Chemother 45: 2807-12, 2001)に記載されているように、免疫化したヒトコブラクダから、または組換え法を用いて、ナノボディライブラリーを作製することができる。

第1定常ドメイン(C_H1)が存在しないため(スプライス共通シグナルがないために、mRNAプロセシング中にスプライス除去される)、可変ドメイン(V_HH)の後にすぐヒンジ領域、C_H2およびC_H3ドメインが続く(Nguyen et al., Mol. Immunol. 36:515-524 (1999)；Woolven et al., Immunogenetics 50:98-101 (1999))。報告によれば、ラクダ科動物V_HHは、ヒンジ、CH2、およびCH3ドメインを含みCH1ドメインを欠くIgG2およびIgG3定常領域と組み合わさる(Hamers-Casterman et al.、前記)。例えば、ラマIgG1は、V_Hがヒンジ、CH1、CH2、およびCH3ドメインを含む定常領域と組み合わさる通常の(H₂L₂)抗体アイソタイプであるが、ラマIgG2およびIgG3は、CH1ドメインを欠き、かつ軽鎖を含まない重鎖のみのアイソタイプである。

HCAbは軽鎖を欠いているが、抗原結合レパートリーを有する。HCAbの遺伝子生成機構は、Nguyen et al. Adv. Immunol 79:261-296 (2001)、およびNguyen et al., Immunogenetics 54:39-47 (2002)に概説されている。コモリザメを含むサメも、抗原受容体を含む同様の単一の単量体Vドメインを示す。Irving et al., J. Immunol. Methods 248:31-45 (2001)；Roux et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:11804 (1998)。

V_HHは、小さな無傷の抗原結合断片(例えば、約15 kDa、118〜136残基である断片)を含む。ラクダ科動物V_HHドメインは高親和性で抗原に結合することが認められており(Desmyter et al., J. Biol. Chem. 276:26285-90, 2001)、V_HHの親和性は典型的にナノモルの範囲であり、FabおよびscFv断片に匹敵する。V_HHは非常に可溶性が高く、scFvおよびFab断片の対応する誘導体よりも安定である。V_H断片は可溶型として生成することが比較的難しかったが、フレームワーク残基をよりV_HH様に改変することで溶解度および特異的結合が改善され得る。(例えば、Reichman et al., J Immunol Methods 1999, 231:25-38を参照されたい)。V_HHは、V_HHをより親水性にし、通常は折りたたみおよび会合の際に小胞体(ER)内でH鎖に結合し、その後L鎖に置き換えられるBiP(免疫グロブリン重鎖結合タンパク質)との相互作用の持続を妨げるアミノ酸置換を有する。V_HHは親水性が高いため、ERからの分泌が改善される。

機能的なV_HHは、免疫化したラクダ科動物のHCAbのタンパク質切断により、免疫化したラクダ科動物のB細胞からV_HH遺伝子を直接クローニングして組換えV_HHをもたらすことにより、またはナイーブもしくは合成ライブラリーから得ることができる。所望の抗原特異性を有するV_HHはまた、ファージディスプレイ法によって得ることもできる。ファージディスプレイにおいてV_HHを用いることは、機能的な抗原結合断片を得るために1つのドメインしかクローニングして発現させる必要がないため、FabまたはscFvと比較して非常に簡単でかつより効率的である。Muyldermans, Biotechnol. 74:277-302 (2001)；Ghahroudi et al., FEBS Lett. 414:521-526 (1997)；およびvan der Linden et al., J. Biotechnol. 80:261-270 (2000)。ラクダ科動物重鎖を有する抗体を作製する方法はまた、米国特許出願公開第20050136049号および同第20050037421号に記載されている。

リボソームディスプレイを用いて、所望の結合活性および親和性を有するscFvおよび/またはV_HH分子を同定および単離することもできる。Irving et al., J. Immunol. Methods 248:31-45 (2001)。リボソームの提示および選択は、大きなライブラリー(10¹⁴)を作製し提示する可能性を有する。

他の態様は、溶解度を改善し非特異的結合を防ぐために、ヒトV_HHなどの非ラクダ科V_Hを改変することにより、ラクダ化の過程を通して作製されたV_HH様分子を提供する。これは、V_HのV_L側の残基をV_HH様残基で置換して、より溶解度の高いV_HH断片を模倣することによって達成される。ラクダ化V_H断片、特にヒトのフレームワークに基づくものは、インビボで患者に投与した場合に免疫応答が大幅に低減されると考えられ、したがって治療用途に著しく有利であると考えられる。Davies et al., FEBS Lett. 339:285-290 (1994)；Davies et al., Protein Eng. 9:531-537 (1996)；Tanha et al., J. Biol. Chem. 276:24774-24780 (2001)；およびRiechmann et al., Immunol. Methods 231:25-38 (1999)。

Fab断片、scFv、およびV_HHを含むIL-1β断片の産生には、多種多様な発現システムが利用可能である。例えば、原核生物および真核生物起源の発現システムを、抗体断片および抗体融合タンパク質の大量生産に用いることができる。特に有利であるのは、大量の抗体断片を培地に分泌させることができる発現システムである。

二重特異性Fab-scFv(「バイボディ」)および三重特異性Fab-(scFv)(2)(「トリボディ」)の作製は、Schoonjans et al. (J Immunol 165:7050-57, 2000)、およびWillems et al. (J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 786:161-76, 2003)に記載されている。バイボディまたはトリボディでは、scFv分子がVL-CL(L)鎖およびVH-CH₁(Fd)鎖の一方または両方に融合されており、例えばトリボディを作製するには、2つのscFvをFabのC末端に融合し、バイボディの場合には、1つのscFvをFabのC末端に融合する。ペプチドリンカー(ヒンジなし)を介して、またはIgGヒンジを介してCH3に融合されたscFvからなる「ミニボディ」は、Olafsen, et al., Protein Eng Des Sel. 2004 Apr;17(4)315-23に記載されている。

イントラボディとは、細胞内発現を示し、細胞内タンパク質機能を操作できる一本鎖抗体である(Biocca, et al., EMBO J. 9:101-108, 1990；Colby et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 101:17616-21, 2004)。細胞内領域に抗体構築物を保持する細胞シグナル配列を含むイントラボディは、Mhashilkar et al (EMBO J 14:1542-51, 1995)、およびWheeler et al. (FASEB J. 17:1733-5. 2003)に記載されているように作製することができる。トランスボディとは、タンパク質導入ドメイン(PTD)を一本鎖可変断片(scFv)抗体と融合させた細胞透過性抗体である Heng et al., (Med Hypotheses. 64:1105-8, 2005)。

IL-1β結合抗体および結合断片はまた、標的タンパク質に特異的なSMIPまたは結合ドメイン免疫グロブリン融合タンパク質である抗体を包含する_。これらの構築物は、抗体エフェクター機能を実行するのに必要な免疫グロブリンドメインに融合された抗原結合ドメインを含む一本鎖ポリペプチドである。例えば、WO03/041600、米国特許出願公開第20030133939号、および米国特許出願公開第20030118592号を参照されたい。

本開示のIL-1β結合抗体および結合断片はまた、イムノアドヘシンを包含する。1つまたは複数のCDRを共有結合または非共有結合により分子内に組み入れることによって、その分子をイムノアドヘシンにすることができる。イムノアドヘシンは、より大きなポリペプチド鎖の一部としてCDRを組み入れてもよく、CDRを別のポリペプチド鎖に共有結合させてもよく、または非共有結合によりCDRを組み入れてもよい。本明細書に開示するCDRによって、イムノアドヘシンがIL-1βに特異的に結合できるようになる。

IL-1β結合抗体および断片はまた、有機または分子足場(タンパク質または炭水化物足場など)上に構築された1つまたは複数のIL-1β結合部分を含む抗体模倣物を包含する。一般にタンパク質足場と称される、比較的明確な三次元構造を有するタンパク質を、抗体模倣物を設計するための試薬として用いることができる。これらの足場は典型的に、特定のまたは無作為な配列変化を受け入れる1つまたは複数の領域を含み、そのような配列の無作為化は多くの場合、そこから所望の生成物を選択することができるタンパク質のライブラリーを作製するために行われる。例えば、抗体模倣物は、各ループに挿入された親抗体由来の異なるCDRを含む2つまたはそれ以上の溶媒露出ループを有する足場を含む免疫グロブリン様ドメインを有し、かつ親抗体が結合するリガンドに対して選択的結合活性を示すキメラ非免疫グロブリン結合ポリペプチドを含み得る。非免疫グロブリンタンパク質足場は、新規結合特性を有するタンパク質を得るために提唱された。(Tramontano et al., J. Mol. Recognit. 7:9, 1994；McConnell and Hoess, J. Mol. Biol. 250:460, 1995)。他のタンパク質もフレームワークとして試験されており、αヘリックス表面上の無作為化された残基(Nord et al., Nat. Biotechnol. 15:772, 1997；Nord et al., Protein Eng. 8:601, 1995)、αヘリックス束中のαヘリックス間のループ(Ku and Schultz, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:6552, 1995)、および小さいプロテアーゼインヒビターのループのなどのジスルフィド架橋により拘束されたループ(Markland et al., Biochemistry 35:8045, 1996；Markland et al., Biochemistry 35:8058, 1996；Rottgen and Collins, Gene 164:243, 1995；Wang et al., J. Biol. Chem. 270:12250, 1995)を提示するために用いられている。抗体模倣物に足場を用いる方法は、米国特許第5,770,380号、ならびに米国特許出願公開第2004/0171116号、同第2004/0266993号、および同第2005/0038229号に開示されている。

本発明に従って使用するための好ましいIL-1β抗体または抗体断片は一般的に、例えば、約10 nMもしくはそれ未満、約5 nMもしくはそれ未満、約2 nMもしくはそれ未満、または好ましくは約1 nMもしくはそれ未満、約500 pMもしくはそれ未満、またはより好ましくは約250 pMもしくはそれ未満、約100 pMもしくはそれ未満、約50 pMもしくはそれ未満、約25 pMもしくはそれ未満、約10 pMもしくはそれ未満、約5 pMもしくはそれ未満、約3 pMもしくはそれ未満、約1 pMもしくはそれ未満、約0.75 pMもしくはそれ未満、約0.5 pMもしくはそれ未満、または約0.3 pMもしくはそれ未満のIL-1βに対する平衡結合解離定数(K_D)といった高親和性で(例えば、BIACOREで決定される、KinExAで決定される)、ヒトIL-1βに結合する。解離定数は例えばBiacore(GE Healthcare)を用いて測定することができ、解離定数が約10 pMを上回る場合には、Biacoreを用いた測定が好ましいと考えられる。あるいはまたはさらに、解離定数はKinExA(Sapidyne Instruments, Inc)を用いて測定することもでき、解離定数が約10 pMを下回る場合には、KinExAを用いた測定が好ましいと考えられる。

本発明の抗体または断片は、例えば、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)により測定して、約10 nMもしくはそれ未満、約5 nMもしくはそれ未満、約2 nMもしくはそれ未満、約1 nMもしくはそれ未満、約0.75 nMもしくはそれ未満、約0.5 nMもしくはそれ未満、約0.4 nMもしくはそれ未満、約0.3 nMもしくはそれ未満、またはさらには約0.2 nMもしくはそれ未満のIC₅₀でIL-1βに結合し得る。好ましくは、本発明の抗体または抗体断片は、IL-1以外のいかなる標的とも交差反応しない。例えば、本抗体および断片はIL-1βに結合し得るが、IL-1αには検出可能な程度には結合しないか、またはIL-1αのその結合に対してIL-1βのその結合において少なくとも約100倍(例えば、少なくとも約150倍、少なくとも約200倍、またはさらには少なくとも約250倍)高い選択性を有する。本発明に従って使用する抗体または断片は、特定の態様において、本発明の抗体または断片を投与していないIL-1β刺激動物における血清IL-6のレベルと比較して、動物における血清IL-6のIL-1β誘導性発現を少なくとも50%(例えば、少なくとも60%、少なくとも70%、またはさらには少なくとも80%)阻害する。抗体はIL-1βと結合し得るが、結合したIL-1βリガンドのIL-1受容体I型(IL-1RI)への結合を可能にし得るか、または実質的に可能にし得る。IL-1βのIL-1RIへの結合を阻止するかまたは実質的に妨げる多くの公知のIL-1β結合抗体とは対照的に、AB5およびAB7と命名された抗体(米国特許第7,531,166号)は、IL-1βリガンドに選択的に結合するが、結合したIL-1βリガンドのIL-1RIへの結合を可能にする。例えば、AB7と命名された抗体は、IL-1βエピトープに結合するが、結合したIL-1βのIL-1RIに対する結合をなお可能にする。特定の態様において、抗体は、結合したIL-1βのIL-1RIに結合する相互作用の親和性を減少させ得る。したがって、本開示は関連局面において、上記の特徴の少なくとも1つを有するIL-1β結合抗体またはIL-1β結合抗体断片の使用を提供する。本発明の前述の抗体、抗体断片、またはポリペプチドはいずれも、本明細書に記載するようにヒト化またはヒト型に遺伝子操作できる。

例えば、以下の特許および特許出願に記載されるか、または記載される方法を用いて導出された抗体および抗体結合断片(例えば、V領域配列)を含む、当技術分野で公知の様々なIL-1(例えば、IL-1β)抗体および断片を、本明細書における開示によって提供されるように使用することができる：US 4,935,343；US 2003/0026806；US 2003/0124617(例えば、抗体AAL160)；U.S. 7,566,772(例えば、抗体9.5.2)；WO 03/034984；WO 95/01997(例えば、抗体SK48-E26 VTKY)；U.S. 7,446,175(例えば、抗体ACZ 885)；WO 03/010282(例えば、抗体Hu007)；WO 03/073982(例えば、抗体N55S)、U.S. 7,541,033(例えば、W17、U43、W13、W18、W20)、U.S. 7,491,392、WO 2004/072116、WO 2004/067568、EP 0 267 611 Bl、EP 0 364 778 Bl、および米国特許出願第11/472813号。非限定的な例として、抗体AB5およびAB7(U.S. 7,531,166)を本発明に従って使用することができる。AB5およびAB7(XOMA 052とも称される)の可変領域配列は以下の通りである。

AB5
軽鎖

下線の配列は、(左側から右側に向かって)CDR 1、2、および3を示す。

重鎖

AB7
軽鎖

重鎖

本明細書に記載する抗体および抗体断片は、任意の適切な方法により調製することができる。そのような抗体および抗体断片を調製する適切な方法は、当技術分野において公知である。抗体および抗体断片を調製する他の方法は、本明細書の一部として本明細書に記載されている。本明細書に記載する本発明の抗体、抗体断片、またはポリペプチドは、任意の程度まで単離または精製することができる。本明細書で使用する単離された化合物とは、その天然環境から取り出された化合物である。精製された化合物とは、その化合物が(i) その天然環境において、または(ii) 実験室条件下で最初に合成および/もしくは増幅された際に存在するよりも純粋な形態で存在するように、純度が増加した化合物であり、「純度」とは相対語であって、必ずしも「絶対純度」を意味する必要はない。

組成物
IL-1(例えば、IL-1β)結合抗体および結合断片は、本明細書で開示される方法において使用するための組成物、特に薬学的組成物に製剤化することができる。そのような組成物は、適切な担体、例えば薬学的に許容される薬剤との混合物中に、IL-1β結合抗体若しくは抗体断片の治療的または予防的有効量を含む。典型的に、IL-1β結合抗体および結合断片は、動物(例えばヒト)への投与のために十分に精製してから薬学的組成物中に製剤化する。

薬学的に許容される薬剤には、例えば、担体、賦形剤、希釈剤(diluent)、抗酸化剤、保存剤、着色剤、香味剤、および希釈剤(diluting agent)、乳化剤、懸濁剤、溶媒、増量剤、膨張剤、緩衝液、送達ビヒクル、等張化剤、共溶媒、湿潤剤、錯化剤、緩衝剤、抗菌剤、および界面活性剤が含まれる。

中性緩衝生理食塩水またはアルブミンと混合した生理食塩水は、例示的な適切な担体である。薬学的組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤；低分子量ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む単糖類、二糖類、およびその他の炭水化物；EDTAなどのキレート剤；マンニトールもしくはソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩形成対イオン；ならびに/またはTween、プルロニック、もしくはポリエチレングリコール(PEG)などの非イオン性界面活性剤を含み得る。同様に一例として、適切な等張化増進剤には、ハロゲン化アルカリ金属(好ましくは、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム)、マンニトール、ソルビトールなどが含まれる。適切な保存剤には、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸などが含まれる。過酸化水素もまた、保存剤として用いることができる。適切な共溶媒には、グリセリン、プロピレングリコール、およびPEGが含まれる。適切な錯化剤には、カフェイン、ポリビニルピロリドン、β-シクロデキストリン、またはヒドロキシ-プロピル-β-シクロデキストリンが含まれる。適切な界面活性剤または湿潤剤には、ソルビタンエステル、ポリソルベート80などのポリソルベート、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサポールなどが含まれる。緩衝液は、酢酸、ホウ酸、クエン酸、リン酸、炭酸水素、またはTris-HClなどの従来の緩衝液であってよい。酢酸緩衝液はpH 約4〜5.5であってよく、Tris緩衝液はpH 約7〜8.5であってよい。さらなる薬学的薬剤が、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, A. R. Gennaro, ed., Mack Publishing Company, 1990に記載されている。

組成物は、液体形態であっても、または凍結乾燥もしくはフリーズドライ形態であってもよく、1つまたは複数の凍結乾燥保護剤、賦形剤、界面活性剤、高分子量構造添加物、および/または膨張剤を含み得る(例えば、米国特許第6,685,940号、同第6,566,329号、および同第6,372,716号を参照されたい)。1つの態様においては、スクロース、ラクトース、またはトレハロースなどの非還元糖である凍結保護剤を含める。一般的に含める凍結保護剤の量は、再構成した際に生じる製剤が等張になるようなものであるが、高張なまたはわずかに低張な製剤もまた適している場合がある。さらに、凍結保護剤の量は、凍結乾燥時のタンパク質の許容できない量の分解および/または凝集を防ぐのに十分であるべきである。凍結乾燥前の製剤中の糖類(例えば、スクロース、ラクトース、トレハロース)の例示的な凍結保護剤濃度は、約10 mM〜約400 mMである。別の態様においては、例えば、ポリソルベート(例えば、ポリソルベート20、ポリソルベート80)；ポロキサマー(例えば、ポロキサマー188)；ポリ(エチレングリコール)フェニルエーテル(例えば、Triton)；ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)；ラウリル硫酸ナトリウム；オクチルグリコシドナトリウム；ラウリル-、ミリスチル-、リノレイル-、またはステアリル-スルホベタイン；ラウリル-、ミリスチル-、リノレイル-、またはステアリル-サルコシン；リノレイル-、ミリスチル-、またはセチル-ベタイン；ラウロアミドプロピル-、コカミドプロピル-、リノールアミドプロピル-、ミリスタミドプロピル-、パルミドプロピル-、またはイソステアラミドプロピル-ベタイン(例えば、ラウロアミドプロピル)；ミリスタミドプロピル-、パルミドプロピル-、またはイソステアラミドプロピル-ジメチルアミン；ナトリウムメチルココイル-、または二ナトリウムメチルオフェイル-タウレート；ならびにMONAQUAT(商標)系(Mona Industries, Inc.、ニュージャージー州、パターソン)、ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、およびエチレンとプロピレングリコールの共重合体(例えば、Pluronic、PF68など)などの非イオン性界面活性剤およびイオン性界面活性剤といった界面活性剤を含める。凍結乾燥前の製剤中に存在し得る界面活性剤の例示的な量は、約0.001〜0.5%である。高分子量構造添加物(例えば、増量剤、結合剤)には、例えば、アカシア、アルブミン、アルギン酸、リン酸カルシウム(二塩基性)、セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、結晶セルロース、デキストラン、デキストリン、デキストレート、スクロース、チロース、アルファ化デンプン、硫酸カルシウム、アミロース、グリシン、ベントナイト、マルトース、ソルビトール、エチルセルロース、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二ナトリウム、ピロ硫酸二ナトリウム、ポリビニルアルコール、ゼラチン、グルコース、グアーガム、液体グルコース、圧縮糖、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、マルトデキストリン、ポリエチレンオキシド、ポリメタクリル酸、ポビドン、アルギン酸ナトリウム、トラガカント結晶セルロース、デンプン、およびゼインが含まれ得る。高分子量構造添加物の例示的な濃度は、0.1重量%〜10重量%である。他の態様においては、膨張剤(例えば、マンニトール、グリシン)を含めてもよい。

組成物は、非経口投与に適切であってよい。例示的な組成物は、関節内経路、皮下経路、静脈内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、脳内(実質内) 経路、脳室内経路、筋肉内経路、眼内経路、動脈内経路、病巣内経路、直腸内経路、経皮的経路、経口経路、および吸入経路などの当業者に利用可能な任意の経路によって、動物に注射または注入するのに適している。非経口製剤は典型的に、薬学的に許容される保存剤を任意に含んで、無菌であり発熱物質を含まない等張水溶液である。

非水性溶媒の例には、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルがある。水性担体には、水、アルコール/水溶液、乳濁液、または生理食塩水および緩衝培地を含む懸濁液が含まれる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、ブドウ糖加リンゲル液、ブドウ糖および塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル液、または固定油が含まれる。静脈内ビヒクルには、液体および栄養補充剤、電解質補充剤、例えばブドウ糖加リンゲル液に基づくものなどが含まれる。例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガスなどの保存剤およびその他の添加剤もまた存在してよい。一般的には、参照により本明細書に組み入れられる、Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th Ed., Mack Eds., 1980を参照されたい。

本明細書に記載する薬学的組成物は、持続放出性の産物の局所濃度(例えば、ボーラス、デポー効果)、および/または特定の局所環境における安定性もしくは半減期の増加を提供する様式で、制御または持続送達用に製剤化することができる。本発明は、特定の態様において、そのような組成物は最初の貯蔵物中に有意に大量の抗体または断片を含み得るが、任意の時点で実際に放出され利用可能な抗体または断片の有効量は、本明細書の開示に従って、最初の貯蔵物よりもはるかに少ない量であることを意図する。組成物は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸などのポリマー化合物、ならびに生分解性マトリックス、注射用微粒子、マイクロカプセル粒子、マイクロカプセル、生浸食性粒子ビーズ、リポソーム、および後にデポー注射として送達することができる、活性薬剤の制御または持続放出を提供する埋め込み型送達装置のなどの薬剤と共に、本発明のIL-1β結合抗体、抗体断片、核酸、またはベクターの製剤を含み得る。そのような持続または制御送達手段を製剤化する技法は公知であり、種々のポリマーが開発され、薬物の制御放出および送達に用いられている。そのようなポリマーは典型的に生分解性であり、かつ生体適合性である。鏡像体ポリマーまたはポリペプチドの部分と、温度またはpH感受性特性を有するヒドロゲルとの複合体形成によって形成されるものを含むポリマーヒドロゲルは、生物活性タンパク質剤(例えば、抗体)の捕捉に関与する穏やかな水性条件に起因して、薬物デポー効果を提供するのに望ましいと考えられる。例えば、PCT出願公報 WO 93/15722における薬学的組成物を送達するための制御放出多孔性ポリマー微粒子の記載を参照されたい。

この目的に適した物質には、ポリ乳酸(例えば、米国特許第3,773,919号を参照されたい)、ポリ-D-(-)-3-ヒドロキシ酪酸(EP 133,988A)などのポリ-(a-ヒドロキシカルボン酸)のポリマー、L-グルタミン酸とγエチル-L-グルタミン酸の共重合体(Sidman et al., Biopolymers, 22: 547-556 (1983))、ポリ(2-ヒドロキシエチル-メタクリル酸)(Langer et al., J. Biomed. Mater. Res., 15: 167-277 (1981)、およびLanger, Chem. Tech., 12: 98-105 (1982))、エチレン酢酸ビニル、またはポリ-D(-)-3-ヒドロキシ酪酸が含まれる。その他の生分解性ポリマーには、ポリ(ラクトン)、ポリ(アセタール)、ポリ(オルトエステル)、およびポリ(オルト炭酸)が含まれる。持続放出組成物はまたリポソームを含んでもよく、リポソームは当技術分野で公知のいくつかの方法のいずれかによって調製することができる(例えば、Eppstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688-92 (1985)を参照されたい)。担体自体またはその分解産物は、標的組織において非毒性であるべきであり、状態をさらに悪化すべきでない。これは、標的疾患の動物モデルにおいて、またはそのようなモデルが利用できない場合には正常動物において、日常的なスクリーニングにより決定することができる。

持続放出のための組換えタンパク質のマイクロカプセル化は、ヒト成長ホルモン(rhGH)、インターフェロン-(rhIFN--)、インターロイキン-2、およびMN rgp120で行われ成功している。Johnson et al., Nat. Med., 2:795-799 (1996)；Yasuda, Biomed. Ther., 27:1221-1223 (1993)；Hora et al., Bio/Technologv. 8:755-758 (1990)；Cleland, 「Design and Production of Single Immunization Vaccines Using Polylactide Polyglycolide Microsphere Systems」, Vaccine Design: The Subunit and Adjuvant Approach, Powell and Newman, eds, (Plenum Press: New York, 1995), pp. 439-462；WO 97/03692、WO 96/40072、WO 96/07399；および米国特許第5,654,010号。これらのタンパク質の持続放出製剤は、その生体適合性および広範囲の生物分解性特性に起因して、ポリ乳酸-グリコール酸共重合体(PLGA)ポリマーを用いて開発された。PLGAの分解産物である乳酸およびグリコール酸は、ヒトの身体から速やかに除去され得る。さらに、このポリマーの分解性はその分子量および組成に依存する。Lewis, 「Controlled release of bioactive agents from lactide/glycolide polymer」, M. Chasin and R. Langer (Eds.), Biodegradable Polymers as Drug Delivery Systems (Marcel Dekker: New York, 1990), pp. 1-41。持続放出組成物のさらなる例には、例えば、EP 58,481A、米国特許第3,887,699号、EP 158,277A、カナダ特許第1176565号、U. Sidman et al., Biopolymers 22, 547 [1983]、R. Langer et al., Chem. Tech. 12, 98 [1982]、Sinha et al., J. Control. Release 90, 261 [2003]、Zhu et al., Nat. Biotechnol. 18, 24 [2000]、およびDai et al., Colloids Surf B Biointerfaces 41, 117 [2005]が含まれる。

生体接着ポリマーもまた、本発明の組成物中でのまたは組成物との使用に意図される。生体接着剤とは、長期間にわたり生体基質に接着することができる合成物質および天然物質である。例えば、カルボポールおよびポリカルボフィルはいずれも、ポリ(アクリル酸)の合成架橋誘導体である。天然物質に基づく生体接着送達システムは、例えば、ヒアルロナンとしても知られるヒアルロン酸を含む。ヒアルロン酸は、D-グルクロン酸およびN-アセチル-D-グルコサミンの残基からなる天然ムコ多糖である。ヒアルロン酸は、結合組織、さらに滑液ならびに眼球の硝子体液および房水を含む、脊椎動物の細胞外組織基質に見出される。ヒアルロン酸のエステル化誘導体は、生体適合性かつ生分解性である、送達に使用するための微粒子を生成するために用いられている(例えば、Cortivo et al., Biomaterials (1991) 12:727-730；欧州公報番号517,565；WO 96/29998；Illum et al., J. Controlled Rel. (1994) 29:133-141を参照されたい)。本発明の組成物を含む例示的なヒアルロン酸は、ヒアルロン酸ポリマーに対してIL-1β結合抗体または断片が約0.1%〜約40% (w/w)という量のヒアルロン酸エステルポリマーを含む。

本発明にしたがって組成物を送達するために生分解性および非生分解性ポリマーマトリックスを用いることができ、このようなポリマーマトリックスは天然または合成ポリマーを含み得る。生分解性マトリックスが好ましい。放出が起こる時間はポリマーの選択に基づく。典型的に、数時間から3〜12ヵ月の期間にわたる放出が最も望ましい。生分解性送達システムを形成するために使用できる例示的な合成ポリマーには、乳酸とグリコール酸のポリマー、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリ-ビニルハロゲン化物、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリ無水物、ポリウレタン、およびそれらの共重合体、ポリ(酪酸)、ポリ(吉草酸)、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、アクリルエステルとメタクリルエステルのポリマー、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ-プロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、硫酸セルロースナトリウム塩、ポリ(メタクリル酸メチル)、ポリ(メタクリル酸エチル)、ポリ(メタクリル酸ブチル)、ポリ(メタクリル酸イソブチル)、ポリ(メタクリル酸ヘキシル)、ポリ(メタクリル酸イソデシル)、ポリ(メタクリル酸ラウリル)、ポリ(メタクリル酸フェニル)、ポリ(アクリル酸メチル)、ポリ(アクリル酸イソプロピル)、ポリ(アクリル酸イソブチル)、ポリ(アクリル酸オクタデシル)、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ(エチレングリコール)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(エチレンテレフタレート)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ならびにポリビニルピロリドンが含まれる。例示的な天然ポリマーには、アルギン酸ならびにデキストランおよびセルロースを含むその他の多糖類、コラーゲン、その化学的誘導体(例えばアルキル、アルキレンといった化学基の置換、付加、水酸化、酸化、および当業者により日常的に行われるその他の修飾)、アルブミンおよびその他の親水性タンパク質、ゼインならびにその他のプロラミン類および疎水性タンパク質、それらの共重合体および混合物が含まれる。一般に、これらの物質は、インビボにおいて酵素的加水分解または水への曝露によって、表面浸食またはバルク浸食により分解する。ポリマーは任意に、水中でその重量の約90%まで吸収し得るヒドロゲル(例えば、WO 04/009664、WO 05/087201、Sawhney, et al., Macromolecules, 1993, 26, 581-587を参照されたい)の形態であり、さらに、任意に多価イオンまたはその他のポリマーと架橋されている。

送達システムにはまた、コレステロール、コレステロールエステルなどのステロール、ならびに脂肪酸、またはモノグリセリド、ジグリセリド、およびトリグリセリドなどの中性脂肪を含む脂質である非ポリマーシステム；ヒドロゲル放出システム；シラスティックシステム；ペプチドに基づくシステム；ワックスコーティング；従来の結合剤および賦形剤を用いる圧縮錠剤；部分的に融解した植込錠などが含まれる。具体例には、これらに限定されないが、(a) 米国特許第4,452,775号、同第4,675,189号、および同第5,736,152号に記載されているものなどの、産物がマトリックスに収まる形態で含まれている浸食システム、ならびに(b) 米国特許第3,854,480号、同第5,133,974号、および同第5,407,686号に記載されているものなどの、産物が制御された速度でポリマーから浸透する拡散システムが含まれる。産物を含むリポソームは、例えば(DE 3,218,121；Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688-3692 (1985)；Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 4030-4034 (1980)；EP 52,322；EP 36,676；EP 88,046；EP 143,949；EP 142,641；日本国特許出願第83-118008号；米国特許第4,485,045号および同第4,544,545号；ならびにEP 102,324)などの公知の方法によって調製することができる。

IL-1β結合抗体または結合断片を含む薬学的組成物は、例えば乾燥粉末としてなど、吸入用に製剤化することができる。吸入用溶液を、エアロゾル送達のための液化噴霧剤中に製剤化することもできる。さらなる別の製剤では、溶液が噴霧され得る。肺投与のためのさらなる薬学的組成物には、例えば、化学修飾されたタンパク質の肺送達について開示しているWO 94/20069に記載されているものが含まれる。肺送達するためには、粒子の大きさは、遠位肺への送達に適したものでなければならない。例えば、粒子の大きさは1μm〜5μmであってよいが、各粒子がかなり多孔性である場合には、より大きい粒子を用いることも可能である。

本発明のIL-1β結合抗体または抗体断片を含む特定の製剤は、経口投与することができる。この様式で投与する製剤は、錠剤およびカプセルなどの固体剤形の配合に通例用いられる担体を伴いまたは伴わずに製剤化することができる。例えば、カプセルは、生物学的利用能が最大となり、全身移行前の分解が最小限に抑えられる時点で、消化管の所定の箇所において製剤の活性部分を放出するように設計することができる。選択的結合剤の吸収を促進するために、さらなる薬剤を含めることができる。希釈剤、香味剤、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁剤、錠剤崩壊剤、および結合剤を用いることもできる。

別の調製物は、錠剤の製造に適した非毒性添加剤との混合物中に、本発明のIL-1β結合抗体または抗体断片の有効量を含み得る。錠剤を滅菌水または別の適切なビヒクル中に溶解することにより、溶液を単位剤形として調製することができる。適切な賦形剤には、これらに限定されないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウムもしくは炭酸水素ナトリウム、ラクトース、またはリン酸カルシウムなどの不活性希釈剤；またはデンプン、ゼラチン、もしくはアカシアなどの結合剤；またはステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、もしくはタルクなどの潤滑剤が含まれる。

適切なおよび/または好ましい薬学的組成物は、意図する投与経路、送達形式、および所望の投与量に応じて、本開示および製剤化技術の一般的知識を考慮して決定することができる。投与様式にかかわらず、患者の体重、体表面積、または臓器の大きさに従って有効量を計算することもできる。本明細書中に記載の製剤をそれぞれ含む治療に適した投与量を決定するための計算のさらなる微調整は、当技術分野において日常的に行われ、これは当技術分野において日常的に行われる仕事の範囲内である。適切な用量-応答データを用いて、適切な投与量を確認することができる。

本開示に照らしてさらなる製剤が明らかになると考えられ、これには、1つまたは複数の他の治療薬と組み合わせて、IL-1β結合抗体および抗体断片を含む製剤が含まれる。例えば、いくつかの製剤では、本発明のIL-1β結合抗体(例えば結合断片)、抗体断片、核酸、またはベクターを、IL-1シグナル伝達経路の第2のインヒビターと共に製剤化する。代表的な第2のインヒビターには、これらに限定されないが、例えばUS 6899878、US 2003022869、US 20060094663、US 20050186615、US 20030166069、WO/04022718、WO/05084696、WO/05019259に記載されているものなどの抗体、抗体断片、ペプチド、ポリペプチド、化合物、核酸、ベクター、および薬学的組成物が含まれる。例えば、組成物は、別のIL-1β結合抗体、断片、またはそのような抗体もしくは断片をコードする核酸もしくはベクターと組み合わせて、本発明のIL-1β結合抗体、抗体断片、核酸、またはベクターを含み得る。

薬学的組成物は、他の活性薬剤(例えば、IL-1β結合抗体または結合断片以外)と組み合わせて、IL-1β結合抗体またはその結合断片を含み得る。あるいは、薬学的組成物は、例えば1つまたは複数の活性薬剤(例えば、IL-1β結合抗体または結合断片以外)を含む薬学的組成物を含むその他の薬学的組成物と組み合わせて、IL-1β結合抗体またはその結合断片を含み得る。このような組み合わせは、それらの意図される目的に有用なものである。本発明の一部である組み合わせは、例えば本明細書で開示されるものなどのIL-1β抗体および断片と、少なくとも1つの付加的薬剤であってよい。以下に記載される、組み合わせにおいて使用され得る活性薬剤の例は、例示を目的としており、限定を意図するものではない。組み合わせはまた、形成された組成物がその意図される機能を果たし得るような組み合わせである場合には、複数の付加的薬剤、例えば2つまたは3つの付加的薬剤を含み得る。

本開示は、1つまたは複数の他の活性薬剤を含む付加的薬学的組成物を、IL-1β結合抗体または断片と別々に投与することができ(例えば、同時治療計画、同時治療を受けている対象)、そのような別々の投与が、例えば同じ日もしくは別の日または同じ日の異なる時点など、同じ時点または異なる時点で実施できることをさらに意図する。その他の薬学的組成物および/または活性薬剤の投与は、当技術分野で公知の標準的な医療行為に従ってよく、または本明細書に開示されるものなどのIL-1β結合抗体もしくは結合断片の投与と併用する場合には、投与を変更することができる(例えば、投与の間隔の延長、投与量レベルの低減、開始の遅延)。

本開示において意図される薬学的組成物には、例えば、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、および/またはステロイドを含む1つまたは複数の活性薬剤を含む薬学的組成物が含まれる。いくつかの態様において、非ステロイド性免疫抑制剤は、核酸(例えば、DNA)合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、およびコルヒチンより選択される。いくつかの態様において、核酸(例えば、DNA)合成阻害剤は、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤(例えば、メトトレキサート)、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである。いくつかの態様において、ステロイドは、プレドニゾン(例えば、メチルプレニゾロン、プレドニゾロン)、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドより選択されるステロイドホルモンである。いくつかの態様において、非ステロイド性抗炎症剤は、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である。

その他の活性薬剤には、例えば、インドメタシン、例えばアスピリン、イブプロフェン、およびその他のプロピオン酸誘導体(アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロクス酸、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルプロフェン、フルルビプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミロプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸、およびチオキサプロフェン)、酢酸誘導体(インドメタシン、アセメタシン、アルクロフェナック、クリダナク、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、フェンクロジン酸、フェンチアザク、フイロフェナク、イブフェナク、イソキセパック、オキシピナク、スリンダク、チオピナク、トルメチン、ジドメタシン、およびゾメピラック)、フェナム酸誘導体(フルフェナム酸、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ニフルム酸、およびトルフェナム酸)、ビフェニルカルボン酸誘導体(ジフルニサルおよびフルフェニサール)、オキシカム(イソキシカム、ピロキシカム、スドキシカム、およびテノキシカム)、サリチル酸(アセチルサリチル酸、スルファサラジン)、ならびにピラゾロン(アパゾン、ベズピペリロン、フェプラゾン、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン)などの非ステロイド性抗炎症薬(NSAID)が含まれる。その他の組み合わせは、シクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)阻害薬、水利尿薬、経口グルココルチコイド、関節内グルココルチコイド、コルヒチン、キサンチンオキシダーゼ阻害薬、アロプリノール、尿酸排泄促進薬、スルフィンピラゾン、フェブキソスタット、プロベネシド、フェノフィブラート、ベネミド、アンジオテンシンII受容体拮抗物質、ロサルタン、チアジド、PEG-ウリカーゼ、炭酸水素ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸を含む。組み合わせるためのその他の活性薬剤には、プレドニゾロン、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、ベタメタゾン、デキサメタゾン、またはヒドロコルチゾンなどのステロイドが含まれる。本抗体および断片と組み合わせて患者を治療する場合に必要なステロイド用量を漸減することによって、ステロイドの1つまたは複数の副作用が軽減され得るまたはさらには除去され得るために、そのような組み合わせは特に有利であると考えられる。

薬学的組成物(例えば、活性薬剤を含む)は、例えば、例えばメトトレキサート、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル、ピリミジン類似体、プリン類似体、葉酸拮抗剤などの代謝拮抗剤；例えばシクロスポリン、ミコフェノレート、FK506/タクロリムスなどのT細胞阻害薬/カルシニューリン阻害薬；例えばシクロホスファミド、クロラムブシルなどのアルキル化剤/細胞毒性薬；静脈内免疫グロブリン；例えばインフリキシマブ、アダリムマブ、エタネルセプトなどの生物学的製剤；例えばダクリズマブなどのインターロイキン2受容体拮抗物質；およびインターフェロンαを含み得る。

本開示に従って対象に投与される抗IL-1β抗体または結合断片は、例えば前述の活性薬剤のいずれかなどの少なくとも1つの付加的活性組成物(例えば、活性薬剤を含む)による治療と併用して(例えば、同時に)投与できることがさらに意図される。1つの態様では、少なくとも1つの活性薬剤による治療が維持される。別の態様では、IL-1β抗体治療の過程において(例えば、抗IL-1β抗体または断片は一定の投与計画で維持されている)、少なくとも1つの活性薬剤による治療が減らされる(例えば、漸減される)かまたは中止される(例えば、対象が安定している場合)。別の態様では、少なくとも1つの活性薬剤による治療が減らされる(例えば、漸減される)かまたは中止され(例えば、対象が安定している場合)、抗IL-1β抗体または断片による治療も減らされる(例えば、用量の低減、投与頻度の低減、治療計画の短縮)。別の態様では、少なくとも1つの活性薬剤による治療が減らされる(例えば、漸減される)かまたは中止され(例えば、対象が安定している場合)、抗IL-1β抗体または断片による治療が増やされる(例えば、用量の増加、投与頻度の増加、治療計画の延長)。さらに別の態様では、少なくとも1つの活性薬剤による治療が維持され、抗IL-1β抗体または断片による治療が減らされるかまたは中止される(例えば、用量の低減、投与頻度の低減、治療計画の短縮)。さらに別の態様では、少なくとも1つの活性薬剤による治療および抗IL-1β抗体または断片による治療が減らされるかまたは中止される(例えば、用量の低減、投与頻度の低減、治療計画の短縮)。

いくつかの態様において、少なくとも1つの活性薬剤(例えば、抗IL-1β抗体または結合断片以外)による治療を減らすことは、治療過程において投与される活性薬剤の累積量の低下である。いくつかの態様において、少なくとも1つの活性薬剤(例えば、抗IL-1β抗体または結合断片以外)による治療を減らすことは、投与される活性薬剤の実際の投与量の低下である。いくつかの態様において、少なくとも1つの活性薬剤による治療を減らすことは、全身免疫抑制の低下を提供する。

本開示において使用される薬学的組成物は、IL-1β結合抗体または結合断片の治療的有効量または予防的有効量を含み得る。治療的有効量とは、必要な投与量および期間で、所望の治療結果を達成するのに有効な量を指す。抗体または抗体部分の治療的有効量は、個体の病状、年齢、性別、および体重などの要因、ならびに個体において所望の応答を誘発する抗体または抗体部分の能力に応じて異なり得る。治療的有効量とはまた、治療上有益な効果が、抗体または抗体部分のいかなる毒性または有害効果も上回るものでもある。予防的有効量とは、必要な投与量および期間で、所望の予防結果を達成するのに有効な量を指す。

IL-1β結合抗体または断片を含む薬学的組成物の治療的または予防的有効量は、例えば、組成物を用いる対象となる徴候などの治療目的、投与経路、および対象の状態に依存する。薬学的組成物は、IL-1関連状態を治療するために、治療的または予防的有効量で投与する。

使用方法
例えば難治性ぶどう膜炎を含むぶどう膜炎の治療および/または予防のために、治療有効量の抗IL-1β結合抗体またはその結合断片を、本明細書において開示されるように使用することができる。本開示はまた、抗IL-1β抗体または断片の代替物として、またはこれに加えて、その他のIL-1経路阻害剤の使用も意図する。

本明細書で使用される「予防」、「予防する」、「予防すること」、「抑制」、「抑制する」、「抑制すること」という用語は、例えばぶどう膜炎(例えば、急性ぶどう膜炎増悪)などの事象、疾患、または病態の臨床症状または所見の発生(例えば、リスクのある対象における、以前の事象、疾患、または病態の病歴を有する対象における)を、一時的にまたは永久に、部分的にまたは完全に予防すること、抑制すること、遅延させること、または軽減することを指す。そのような予防または抑制は、絶対的に有用である必要はない。

本明細書に記載される方法に関して使用される「治療」、「治療する」、および「治療すること」という用語は、例えばぶどう膜炎(例えば、急性ぶどう膜炎増悪)などの事象、疾患、または病態の臨床症状、所見、または進行(例えば、事象、疾患、または病態の診断された症状、所見、または進行)を、一時的にまたは永久に、部分的にまたは完全に除去すること、軽減すること、抑制すること、または改善することを指す。そのような治療は、絶対的に有用である必要はない。

記載される方法に関して使用される「阻害する」、「阻害すること」、および「阻害」という用語は、例えばぶどう膜炎(例えば、急性ぶどう膜炎増悪)などの事象、疾患、または病態の臨床症状または所見を、一時的にまたは永久に、部分的にまたは完全に予防すること、遅延させること、抑制すること、軽減すること、治療すること、除去すること、または改善することを指す。そのような予防、治療、抑制、または軽減は、絶対的に有用である必要はない。

本明細書で使用される「治療を必要とする」という用語は、患者が治療を必要とするかまたは治療から恩恵を受けるという、介護者によってなされた判断を指す。この判断は、介護者の専門知識の域にあるが、本開示の方法または化合物によって治療可能な病態の結果として患者が病気であるかまたは病気になるという知識を含む様々な要因に基づいてなされる。

本明細書で使用される「有効量」という用語は、対象に投与された場合に(例えば、1回用量または複数回用量として)、例えば本明細書で言及されるぶどう膜炎パラメータの改善を含む、疾患状態または病態の任意の症状、局面、パラメータ、または特徴に任意の検出可能なプラスの効果を及ぼし得る、単独のまたは薬学的組成物の一部としての化合物(例えば、IL-1β抗体)の量を指す。そのような効果は、絶対的に有益である必要はない。

本明細書で使用される「難治性」および「治療抵抗性」ぶどう膜炎という用語は、例えば非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含むが、IL-1β抗体または結合断片を含まない1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎のための治療を以前に受けたことがある対象における慢性または再発性のぶどう膜炎(例えば、急性ぶどう膜炎増悪、ぶどう膜炎再燃)を指す。難治性および治療抵抗性ぶどう膜炎には、以前の治療に対する有害反応もしくは過敏性を有していた可能性がある対象、またはあるいはもしくは加えて、以前の治療に失敗したかもしくは部分的に反応した可能性がある対象(例えば、不適切なまたは部分的な治療効果、不適切な反応、不十分な反応、不完全な反応、部分的な反応)におけるぶどう膜炎が含まれる。

本明細書で使用される「投与量の低下(reduction in the dosage)」、「投与量の低下(reduction in dosage)」、「投与量低下」、および「低下した投与量」という用語は、薬学的組成物の以前の予防または治療計画(例えば、抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前)と比較した場合の、同じ薬学的組成物の予防または治療計画の変化を指す。好ましくは、予防または治療計画のそのような変化は、例えば、用量(例えば、量)の減少(例えば、低下)、投与頻度の減少(例えば、低下)、またはある期間にわたる累積曝露(例えば、曲線下面積、AUC)の減少(例えば、低下)などの、予防または治療計画のいくつかの局面における減少である。薬学的組成物の予防または治療計画のそのような変化は、同じ対象における以前の予防もしくは治療計画と比較した場合の予防もしくは治療計画の変化、またはあるいはもしくは加えて、抗IL-1β抗体もしくはその結合断片と同時に使用しなかった場合と比較した場合の、抗IL-1β抗体もしくはその結合断片と同時に使用した場合の薬学的組成物の予防もしくは治療計画の変化であってよい。

本明細書で使用される「急性ぶどう膜炎増悪」という用語は、対象におけるぶどう膜炎の1つまたは複数の臨床症状または所見(例えば、パラメータ)の発生を指す。あるいはまたは加えて、対象は、1つまたは複数のぶどう膜炎症状が臨床的に有意に改善した介在期間(例えば、症状の減少および/または臨床的管理、寛解期)を有して、ぶどう膜炎の1つまたは複数の臨床症状または所見(例えば、パラメータ)を以前に経験した対象(例えば、リスクのある対象)であってよい。例えば、急性ぶどう膜炎増悪は、最初のぶどう膜炎増悪であってもよいし、またはぶどう膜炎増悪の再発であってもよい。急性ぶどう膜炎増悪中の1つまたは複数のぶどう膜炎症状は、以前に経験した1つまたは複数のぶどう膜炎症状と類似している場合もあれば、同じ場合もあれば、または異なる(例えば、異なる組み合わせの)場合もある。ぶどう膜炎再燃は、急性ぶどう膜炎増悪と見なされ得る。

本明細書で言及される疾患状態または病態の症状、局面、パラメータ、または特徴の存在および/または変化を検出するための様々な方法および技法が、当業者に公知であり、かつ許容されている。例えば、本開示のぶどう膜炎を治療または予防する方法において、変化に関して調べられ得るぶどう膜炎パラメータ(例えば、症状)の代表例は、視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、血管漏出(例えば、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、二重フルオレセイン血管造影およびインドシアニングリーン血管造影スコア)、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、視神経網膜炎、網膜機能不全、および眼圧亢進のいずれかまたはすべてを含み得る。

変化(例えば、改善)の検査は、例えば、視力(例えば、ETDRSによるBCVA)、眼圧、および硝子体混濁の測定を含む詳細な眼科的評価；網膜所見(滲出斑、炎症性鞘形成、出血/閉塞性血管炎、および網膜静脈分枝閉塞症)の評価；生体顕微鏡検査(例えば、細隙灯生体顕微鏡検査)；検眼鏡検査(例えば、後部の間接検眼鏡検査およびその後の眼底撮影)；視力およびその他の眼性成分(例えば、炎症)の変化を追跡するためのレーザーフレアセル測光の読み取り；フルオレセイン血管造影(例えば、眼底フルオレセイン血管造影検査、二重フルオレセイン血管造影(FA)およびインドシアニングリーン血管造影(ICGA))などの、当技術分野で公知の標準的な医学的に許容される診療によってなされ得る。

対象のぶどう膜炎の臨床状態は、ぶどう膜炎の評価を5つの成分：前部、硝子体、眼底、視力、およびフルオレセイン血管造影に分類するぶどう膜炎スコアリングシステム(BenEzra, et al., Uveitis Scoring System, Springer-Verlag, Berlin, 1991)を用いて測定され得る。このシステムは、眼内炎症を追跡する上で最初の3つの成分の重要性を強調する。成分は、累積的ではなく別々にスコア化される。例えば以下である。
・前部は、細隙灯生体顕微鏡検査により等級づけされる。細胞およびフレアの両方が、無から重度まで等級づけされる。
・炎症によって生じる硝子体混濁は、双眼間接検眼鏡によって調べられる。スコアは、後極の可視性に応じて無から重度に及ぶ。
・眼底は、各眼を四分円(例えば、4つの前赤道部および4つの後赤道部)に分割し、各部位を網膜血管炎、脈絡網膜病変、および乳頭の血管新生について調べる図式に従って等級づけされる。
・視力スコアは、SnellenまたはETDRS検査チャートのいずれかを用いて、標準分数の小数版で表される。
・フルオレセイン血管造影図は、網膜炎症の程度を判定するのに役立つ。眼を、眼底の等級づけのために先に用いられた四分円(例えば、4つの前赤道部および後赤道部)に図式的に分割して、BenEzraシステムにより、11の基準に従って各部位の炎症を評価する。

いくつかの態様において、本開示の方法は、ぶどう膜炎スコアリングシステムによって測定される、Ben Ezraスコアの改善を提供し得る。例えば、該方法は、1もしくはそれ以上、2もしくはそれ以上、3もしくはそれ以上、4もしくはそれ以上、5もしくはそれ以上、6もしくはそれ以上、7もしくはそれ以上、8もしくはそれ以上、9もしくはそれ以上、または10もしくはそれ以上のスコアの改善(例えば、減少)を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、0よりも大きな任意のスコアからスコア0までの、Ben Ezraスコアの改善を提供し得る。

いくつかの態様において、視力(例えば、最良矯正視力、BCVA)は、客観的測定値を提供する標準的なBailey-Lovie logMAR、Snellen、またはETDRS検査チャートを用いて測定(例えば、等級づけ)され得る。例えば、本開示の方法は、Snellenチャート検査により測定される、および/または以下の表に示される、視力の少なくとも1行、少なくとも2行、少なくとも3行、少なくとも4行、または少なくとも5行の改善を提供し得る。

あるいはまたは加えて、本開示の方法は、ETDRSチャート(Ferris et al., 1982, Am. J. Ophthalmol., 94:91-6)により測定される、視力の少なくとも1行(例えば、5文字)、少なくとも2行(例えば、10文字)、少なくとも3行(例えば、15文字)、少なくとも4行(例えば、20文字)、または少なくとも5行(例えば、25文字)の改善を提供し得る。いくつかの態様において、1メートルの位置で検査した場合に最も大きなチャート文字を読むことができないほど、対象の視力が悪い場合には、対象の、指を数える、手の動きを検出する、または光覚を有する能力が評価され得る。

前房内細胞所見は、SUNワーキンググループ等級づけスキーム(Jabs, et al., Am J Ophthalmol. 140:509-16, 2005)を用いて評価され得る。いくつかの態様においては、前部が生体顕微鏡検査(例えば、細隙灯生体顕微鏡検査)により評価され得、前房内細胞スコアが測定(例えば、スコア化)され得る。いくつかの態様において、前房内細胞は、以下に示されるように、SUNワーキンググループ等級づけスキームを用いてスコア化される。

例えば、本開示の方法は、少なくとも1等級(例えば、3+から2+、1+から0.5+)、少なくとも2等級、少なくとも3等級、または少なくとも4等級の、前房内細胞スコアの改善を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、等級1+〜4+のいずれかから等級0.5+またはそれよりも良好になるまでの、前房内細胞スコアの改善を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、等級0.5+〜4+のいずれかから等級0までの、前房内細胞スコアの改善を提供し得る。

前房内細胞のSUNワーキンググループ等級づけスキーム

²視野サイズは、1 mm×1 mmスリットビームである。

いくつかの態様において、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)は、例えばLadas et al.(Survey of Ophthalmology, 50: 27-47, 2005)によって記載されているとおりのレーザーフレアセル測光を用いて測定され得る。例えば、本開示の方法は、最初の(例えば、治療前)レベルと比較して、少なくとも10％、少なくとも20％、少なくとも30％、少なくとも40％、少なくとも50％、少なくとも60％、少なくとも70％、少なくとも80％、またはそれ以上の、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)の改善(例えば、低下)を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、10もしくはそれ以上、20もしくはそれ以上、30もしくはそれ以上、40もしくはそれ以上、50もしくはそれ以上、60もしくはそれ以上、70もしくはそれ以上、80もしくはそれ以上、90もしくはそれ以上、または100もしくはそれ以上のスコアが少なくとも減少する、レーザーフレアセルカウント(例えば、フレアスコア)の改善(例えば、低下)を提供し得る。

いくつかの態様において、硝子体混濁は、例えば検眼鏡検査(例えば、双眼間接検眼鏡による)によるなど、標準的な方法を用いて測定され、例えばNussenblatt分類(Nussenblatt et al., 1985, Ophthalmol. 92:467-71)および/または硝子体混濁を等級づけするための米国立眼研究所(National Eye Institute)システムのSUNワーキンググループの適合化(Jabs et al, 2005, Am. J. Ophthalmol. 140:5009-16)に従って等級づけされ得る。例えば、本開示の方法は、少なくとも1等級(例えば、3+から2+、1+から0.5+)、少なくとも2等級、少なくとも3等級、または少なくとも4等級の、硝子体混濁の改善(例えば、低下)を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、等級1+〜4+のいずれかから等級0.5+またはそれよりも良好になるまでの、硝子体混濁の改善を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、等級0.5+〜4+のいずれかから等級0までの、硝子体混濁の改善を提供し得る。

例えば、二重フルオレセイン血管造影(FA)に関して、視神経乳頭過蛍光、黄斑浮腫、網膜血管染色および/または漏出、毛細血管漏出、網膜毛細血管非灌流、視神経乳頭の血管新生、他所での血管新生、ピンポイント漏出、ならびに網膜染色および/または網膜下貯留を含み、かつインドシアニングリーン血管造影(ICGA)に関して、早期角膜実質血管過蛍光、脈絡膜血管炎、黒い点または領域(萎縮を除く)、および/または視神経乳頭過蛍光を含み得るFAおよびICGAなどの、任意に評価され得る付加的スコアリング測定値が、ぶどう膜炎ワーキンググループの血管造影スコアリングにより定義される(Tugal-Tutkun et al., Int Ophthalmol, 2010 30(5):529-552; Epub ahead of print 2008 Sept 16)。

いくつかの態様において、眼圧は、例えばゴールドマン眼圧測定によるなど、標準的な許容される医療行為を用いて評価され得る。血管および/または神経系合併症もまた追跡され得る。例えば、動脈瘤または深部静脈血栓症などの臓器病変を有する対象については、臨床所見が追跡され得、造影スパイラルコンピュータ断層撮影(CT)画像法が行われ得る。実質性神経病変を有する対象については、完全な神経学的検査、造影頭部磁気共鳴画像法(MRI)、および/または脳脊髄液(CSF)解析が行われ得る。

あるいはまたは加えて、以下のものが評価され得る。
・カラー眼底撮影。カラー眼底撮影は、後部病態の存在を実証するのに有用である。カラー撮影はわずかな臨床所見を強調し得る場合が多く、これは、ベースラインを定め、経時的な疾患進行を検出するのに特に有用である。
・フルオレセイン血管造影。フルオレセイン血管造影(FA)は、CMEおよび乳頭炎などを引き起こし得る、血液網膜関門における破綻などの変化を評価するのに有用である。FAはまた、血管炎から、後部ぶどう膜炎および脈絡膜炎の多くの原因の結果であり得る血管閉塞を検出することに加え、網膜または脈絡膜血管新生(CNV)などの合併症を検出するのにも有用である。
・インドシアニングリーン血管造影。インドシアニングリーン(ICG)血管造影は主に、脈絡膜血管系の評価を助けるために、FAの補助として使用される。最も有用な情報は、ICG研究の後期に得られる。Herbortとその同僚らは1997年に、ICGを用いた後部ぶどう膜炎の管理および解釈のための標準化プロトコールを開発した。散弾状脈絡網膜炎などのいくつかの病態は、ICG血管造影を用いた場合に、はるかにより顕著である。
・自己蛍光。自己蛍光(AF)画像法は、網膜色素上皮(RPE)におけるリポフスチンの存在を強調する。多くの後部ぶどう膜炎病態、特に白斑症候群は、外側網膜-RPE-脈絡毛細血管複合体を侵すため、AFは特に有用な非侵襲的診断ツールとなり得る。例えば、MEWDSの多くの点および斑点は、眼底AFを用いた場合に、認識するのがはるかにより容易である。
・Bスキャン超音波検査。Bスキャン超音波検査は、混濁した媒体を伴う眼内障害を評価するのに最も有用である。混濁した媒体は、眼内炎症およびその合併症、ならびに角膜混濁、前房出血または蓄膿、縮瞳を伴う虹彩後癒着、白内障、硝子体出血、および網膜剥離を含むがこれらに限定されないその他の病態によって起こり得る。超音波はまた、フォークト・小柳・原田(VKH)症候群、交感性眼炎、ならびに強膜炎による強膜および脈絡膜の複合肥厚を含む慢性ぶどう膜炎において起こるような、脈絡膜の炎症性浸潤を評価するために使用され得る。このような状態において、超音波は、治療を開始するかまたは手術を計画する前に患者を評価するのに有用となる。透明な媒体の存在下において、高周波超音波または超音波生体顕微鏡検査(UBM)は、特に、中間部ぶどう膜炎を有する患者に関与する場合が多く、かつ臨床的に可視化することが困難であり得る毛様体および毛様体扁平部の領域の検査のためにさらに役立ち得る。UBMはまた、外傷後に起こる慢性ぶどう膜炎の症例において、隠れた異物を同定することができる。
・光コヒーレンス断層撮影。光コヒーレンス断層撮影(OCT)は、現在、ぶどう膜炎の研究において使用される最も重要な画像化技法の1つである。これは、非接触かつ非侵襲的様式で、視神経頭、神経線維層、網膜、脈絡膜、および硝子体網膜界面の画像化を可能にする。OCT検査には重篤な副作用がないため、これは必要な時に何度でも反復され得る。OCTを用いて黄斑厚を定量することができるため、これはCMEを診断するおよび治療の有効性をモニターする優れた方法である。OCTは、網膜上膜、黄斑円孔、および硝子体黄斑牽引などの硝子体網膜界面障害を検出することができ、管理に役立ち得る。OCTはまた、異なる型の網膜剥離、ならびに関連する滲出液の役割、位置、および密度の研究においても有益である。OCTの最も重要な限界は、有用な画像の比較的透明な媒体におけるその信頼性である。OCTの有用性を限定する第2の要因は、眼球運動の固定および制御による患者の協力の必要性である。これらの限界は、羞明対象にとって困難をきたし得る。

いくつかの態様において、本開示の方法は、ぶどう膜炎スコアリングシステム(BenEzra, et al., Uveitis Scoring System, Springer-Verlag, Berlin, 1991)によって測定される、Ben Ezraスコアの改善を提供し得る。例えば、該方法は、1もしくはそれ以上、2もしくはそれ以上、3もしくはそれ以上、4もしくはそれ以上、5もしくはそれ以上、6もしくはそれ以上、7もしくはそれ以上、8もしくはそれ以上、9もしくはそれ以上、または10もしくはそれ以上のスコアの改善(例えば、減少)を提供し得る。あるいはまたは加えて、本開示の方法は、0よりも大きな任意のスコアからスコア0までの、Ben Ezraスコアの改善を提供し得る。

あるいはまたは加えて、その他のベーチェット病パラメータの評価も行われ得る。

あるいはまたは加えて、評価は、例えば以下などの非眼性パラメータを含む生物活性および臨床活性の測定を含み得る。
・炎症マーカー(CRPおよびESRの両方)。
・アディポネクチン、レジスチン、レプチン、ビスファチン、PAI-1、TNFα、IFNγ、IL-1、IL-1Ra、IL-6、IL-8、RANTES、IL-1α、およびMCP-1を含むがこれらに限定されないサイトカイン(例えば、炎症性サイトカインなどのサイトカインのマーカー)の解析。

加えて、本開示の方法は、C反応性タンパク質(CRP)レベルの改善(例えば、減少)を提供し得る。CRPレベルの低下は、標準的なアッセイ法(例えば、高感度CRP、超高感度CRP)を用いて容易に測定される。本明細書に開示される方法によって提供されるC反応性タンパク質レベルの減少は、例えば、治療前レベルからの≧0.2、≧0.4、≧0.6、≧0.8、≧1.0、≧1.4、≧1.8、≧2.2、≧2.6、≧3.0 mg/Lの減少であってよい。あるいは、C反応性タンパク質レベルの減少は、例えば、治療前レベルからの＞20％、＞30％、＞40％、＞50％、＞60％、＞70％、＞80％、＞90％、＞95％の減少であってよい。

さらに、本開示の方法は、例えば生活の質(QOL)評価(例えば、SF-36V2健康調査、眼科QOL質問票)によって判定されるなどの、生活の質の1つまたは複数の局面の改善を提供し得る。

いくつかの態様において、本開示による疾患または病態を治療または予防する方法は、抗体または断片の投与に所定のまたは「日常的な」スケジュールを使用することができる。本明細書で使用する日常的なスケジュールとは、用量投与間の所定の指定された期間を指す。日常的なスケジュールは、スケジュールが予め定められている限り、同じ長さまたは異なる長さの期間を包含し得る。適切なスケジュールが特定の日における投与を含むことが前もって決定されている限り、任意の特定の組み合わせが日常的なスケジュールによって網羅されると考えられる。

以下の実施例は、本発明の実施をさらに説明することを単に意図しており、その範囲をいかようにも限定するものと解釈されるべきでない。本明細書内に引用するすべての特許および科学文献の開示は、参照により全体として本明細書に明白に組み入れられる。

実施例1
IL-1β抗体による難治性ぶどう膜炎の治療を評価するための臨床試験
ぶどう膜炎(例えば、急性ぶどう膜炎増悪)と診断されたヒト対象においてIL-1β抗体による治療を評価するために、臨床治験を試みた。より具体的には、例えば非ステロイド性免疫抑制剤(例えば、アザチオプリン、コルヒチン、シクロスポリン、ミコフェノレート)および/またはステロイド(例えば、プレドニゾロン)などの、1つまたは複数の標準治療薬物に対して難治性(例えば、抵抗性)のぶどう膜炎を有する対象において、高親和性IL-1β抗体の安全性、PK、および臨床活性を調べるために、非盲検臨床試験を実施した。この臨床治験において複数のぶどう膜炎パラメータを測定した。

本臨床治験に登録された対象には、少なくとも急性後部ぶどう膜炎もしくは汎ぶどう膜炎または網膜血管炎を有するぶどう膜炎増悪を伴い、かつまた国際研究グループ分類基準を満たしてベーチェット病と診断された対象が含まれた。治験に参加するためのさらなる基準には、以下のものも含まれた。
・アザチオプリン、コルヒチン、および/またはシクロスポリン治療に対して抵抗性がある。
・0日目前の少なくとも14日間にわたり、一定用量のアザチオプリン(2 mg/kg)および/または一定のシクロスポリン治療計画を受けている。
・0日目および試験期間中に、いかなるアザチオプリン、コルヒチン、および/またはシクロスポリン治療も中止することへの同意。

対象は、以下の基準のいずれかを満たす場合に、本試験から除外された。
・重度のぶどう膜炎、および視力のSnellen/ETDRS基準による0.1未満の潜在的視力。
・対象が白内障を有し、かつそのぶどう膜の後部の評価が不良であるまたは不可能である。
・以下の薬物の使用：
‐0日目の28日前から試験終了時までのNSAID治療(アスピリン≦100 mg/日以外)。
‐0日目の28日前から試験終了時までのステロイド＞10 mg/日、ただし20 mg/日のプレドニゾロンの投与を受けている対象1名の参加を可能にするようにその後プロトコールを修正。
‐0日目の28日前から試験終了時までのインターフェロン。

主要転帰尺度は、視力およびその他の眼性成分(例えば、Ben-Ezraぶどう膜炎スコアリングシステムおよびレーザーフレアメーター読み取りを用いて測定される)の改善の程度を含む、0日目および28日目における対象のぶどう膜炎の重症度であり、98日目まで定期的な追跡評価を行った。

本非盲検試験に登録された患者7名の治療前プロファイルを図1に示す。対象は全員、アザチオプリン(AZA)およびステロイドによる治療を以前に受けており、加えて、一部の対象は、コルヒチンおよび/またはシクロスポリン(CysA)による治療を以前に受けていた。プレドニゾロンまたはメチルプレドニゾロンによるステロイド治療の投与量は、図中ではプレドニゾロン(図1中のPRD)当量(例えば、8 mgメチルプレドニゾロン＝10 mgプレドニゾロン；16 mgメチルプレドニゾロン＝20 mgプレドニゾロン)に変換してある。対象は、レスキュー薬物療法として後の時点(28日以降)でボーラス投与が必要とされた場合を除いて、表示のプレドニゾロン投与量で、試験中にステロイド治療を継続した。

IL-1β抗体AB7の単回用量を、登録された対象に0.3 mg/kgの用量で静脈内投与した。対象は、定期的な追跡評価を受けた。安全性は、バイタルサインの治療前および治療後の連続的測定、臨床検査評価、ならびに有害臨床事象の記録によって評価した。PKデータを収集し、解析した。ぶどう膜炎の臨床状態の変化を評価して、Sfikakis et al.(Lancet 28:358, 2001)に類似のアプローチを用いて、長期および平均疾患管理を計測した。本試験は、ぶどう膜炎症状がアザチオプリン、シクロスポリン、および/またはコルヒチンに既に反応しなくなり(例えば、難治性)、かつ試験過程においてこれらの治療を一時中断した対象を含んだため、本治験の過程における対象の眼疾患の迅速な改善は、試験薬物に起因する。

主要転帰尺度は、0日目から28日目までのぶどう膜炎の進行であり、98日目まで定期的な追跡評価を行った。ぶどう膜炎の臨床的評価は、例えば、視力、眼圧、および硝子体混濁の測定を含む詳細な眼科的評価；網膜所見(滲出斑、炎症性鞘形成、出血/閉塞性血管炎、および網膜静脈分枝閉塞症)の評価；細隙灯生体顕微鏡検査；ならびに後部の間接検眼鏡検査およびその後の眼底撮影などの、当技術分野で公知の標準的な医学的に許容される診療によって、病院訪問(例えば、0日目、1日目、4日目、7日目、14日目、21日目、28日目、56日目、98日目)ごとに評価した。レーザーフレアセル測光の読み取りを記録して、視力およびその他の眼性成分の変化を追跡した。0日目(投与前)および98日目においてのみ、眼底フルオレセイン血管造影検査も実施した。

対象のぶどう膜炎の臨床状態は、ぶどう膜炎スコアリングシステム(BenEzra, et al., Uveitis Scoring System, Springer-Verlag, Berlin, 1991)を用いて測定した。BenEzraぶどう膜炎スコアリングシステムは、ぶどう膜炎の評価を以下のとおりの5つの成分に分類する：前部、硝子体、眼底、視力、およびフルオレセイン血管造影。このシステムは、眼内炎症を追跡する上で最初の3つの成分の重要性を強調する。成分は、累積的ではなく別々にスコア化される。
・前部は、細隙灯生体顕微鏡検査により等級づけされる。細胞およびフレアの両方が、無から重度まで等級づけされる。
・炎症によって生じる硝子体混濁は、双眼間接検眼鏡によって調べられる。スコアは、後極の可視性に応じて無から重度に及ぶ。
・眼底は、各眼を4つの部位に分割し、各部位を網膜血管炎、脈絡網膜病変、および血管新生について調べる図式に従って等級づけされる。
・視力スコアは、SnellenまたはETDRS検査チャートのいずれかを用いて、標準分数の小数版で表される。
・フルオレセイン血管造影図は、網膜炎症の程度を判定するのに役立つ。眼を、眼底の等級づけのために先に用いられた4つの部位に図式的に分割して、BenEzraシステムにより、11の基準に従って各部位の炎症を評価する。

加えて、以下のように、SUNワーキンググループ等級づけスキーム(Jabs, et al., Am J Ophthalmol. 140:509-16, 2005)を用いて、前房内細胞所見を評価した。

前房内細胞のSUNワーキンググループ等級づけスキーム

²視野サイズは、1 mm×1 mmスリットビームである。

フルオレセイン血管造影(FA)およびインドシアニングリーン血管造影(ICGA)によるなどの付加的スコアリング測定値は、ぶどう膜炎ワーキンググループの血管造影スコアリングにより定義される(Tugal-Tutkun et al., Int Ophthalmol, 2010 30(5):529-552; Epub ahead of print 2008 Sept 16)。妥当な対象において、臨床プロトコールはまた、血管および/または神経系合併症の追跡の評価を提供した。動脈瘤または深部静脈血栓症などの臓器病変を有する対象については、プロトコールは、各来診中に追跡される臨床所見を提供し、0日目(ベースライン)および98日目に造影スパイラルコンピュータ断層撮影(CT)画像法が行われた。実質性神経病変を有する対象については、プロトコールは、各来診中に行われる完全な神経学的検査、ならびに0日目(ベースライン)、28日目、および98日目に行われる造影頭部磁気共鳴画像法(MRI)および脳脊髄液(CSF)解析を提供した。付加的評価は、例えば以下などの非眼性パラメータを含む生物活性および臨床活性の測定を含んだ。
・炎症マーカー(CRPおよびESRの両方)。
・アディポネクチン、レジスチン、レプチン、ビスファチン、PAI-1、TNFα、IFNγ、IL-1、IL-1Ra、IL-6、IL-8、RANTES、IL-1α、およびMCP-1を含むがこれらに限定されないサイトカインの解析。

その他のベーチェット病パラメータ(例えば、非眼性)の付加的評価も行われ得る。

実施例2
IL-1β抗体による難治性ぶどう膜炎の治療
実施例1に記載される試験から得られたデータにより、IL-1β抗体の投与によって生じる、複数のパラメータの改善を伴う、全対象の難治性ぶどう膜炎における臨床的有用性が実証される。図2〜8は、視力、前房内細胞スコア、フレアスコア、硝子体混濁、およびBen Ezraスコアのパラメータに関する、98日目時点までの個々の対象データを示す。図9および10は、IL-1β抗体による治療後の、前房蓄膿の解消および硝子体混濁の解消の特定の例を示す画像を含む。全体的に見て、これらの対象では、注入後1日目から始まって全患者において眼内炎症の所見が解消し、網膜所見および硝子体混濁の解消は7〜21日間で達成された。

実施例3
IL-1β抗体による難治性ぶどう膜炎の治療
実施例1および2に記載される試験において先に登録され、治療を受けた対象において、追跡試験を試みる。先行する試験は、ぶどう膜炎症状が、例えばアザチオプリン、シクロスポリン、および/またはコルヒチンを含む、1つまたは複数の標準治療薬物に既に反応しなくなった(例えば、難治性、治療抵抗性)対象を含み、これらの薬物は試験の過程において排除された。本実施例に記載される試験では、例えば非ステロイド性免疫抑制剤(例えば、アザチオプリン、シクロスポリン、コルヒチン)および/またはステロイド(例えば、プレドニゾン)を含む、1つまたは複数の標準治療薬物は、抗IL-1β抗体治療と同時に許容される。

これらの対象は、長期間にわたりIL-1β抗体の付加的な投与を受け得る(例えば、急性ぶどう膜炎増悪の再発の予防に及ぼす効果を評価するため)。より具体的には、0日目、14日目、および28日目にIL-1β抗体を対象に投与し、その後最長で2年まで4週間ごとに投与する。最初に、対象は全員、0日目にAB7の静脈内0.3 mg/kg用量、ならびに14日目、28日目、56日目、および84日目に皮下0.3 mg/kg用量の投与を受ける。これら最初の5回の投与後に安定している対象では、次の4回の投与に関して、4週間ごとに用量を減じた(例えば、0.2 mg/kgまで)。これら4回の投与(例えば、0.2 mg/kg)後に安定したままである対象では、4週間ごとに、抗体の付加的投与に関して再度用量を減じた(例えば、0.1 mg/kgまで)。

対象が、低用量レベル(例えば、0.1または0.2 mg/kg)のいずれかで投与を受けた後に、ぶどう膜炎の急性増悪(例えば、再燃)または治療に対する不適切な反応を経験する場合には、プレドニゾロン(経口またはIV)などのステロイドをボーラスおよび漸減として投与することができる。加えて、対象の、IL-1β抗体の次に予定される用量を、以前の用量レベルのいずれかまで増やすことができる。用量レベルをそのように増加した後、対象がその高用量レベルにおいて4回の投与を通して安定したままである場合には、用量レベルを再度低下させることができる。

対象は、定期的な追跡評価を最長で111週間まで受ける。安全性は、バイタルサインの治療前および治療後の連続的測定、臨床検査評価、ならびに有害臨床事象の記録によって評価する。PKデータを収集し、解析する。ぶどう膜炎および任意の血管および/または神経系合併症の臨床的進行は、先に記載されるように評価する。ベーチェット病と診断された対象におけるぶどう膜炎の臨床状態の変化を評価して、Sfikakis et al.(Lancet 28:358, 2001)によって使用されるアプローチと類似のアプローチを用いて、長期および平均疾患管理を計測する。主要転帰尺度は、本延長試験の2年間におけるぶどう膜炎の進行または安定性(例えば、急性ぶどう膜炎増悪の再発の予防)である。ぶどう膜炎の臨床的評価(各病院訪問時に評価される)には、視力および硝子体混濁の測定を含む詳細な眼科的評価；網膜所見(滲出斑、炎症性鞘形成、出血/閉塞性血管炎、および網膜静脈分枝閉塞症)の評価；前部の細隙灯生体顕微鏡検査；ならびに後部の間接検眼鏡検査およびその後の眼底撮影が含まれる。レーザーフレアセル測光の読み取りを記録して、視力およびその他の眼性成分の変化を追跡する。0日目、112日目、224日目、336日目、448日目、560日目、672日目、および756日目には、眼科的評価は、網膜炎症の程度を評価するための眼底フルオレセイン血管造影検査を含む。対象のぶどう膜炎の臨床状態は、先に記載される方法を用いて測定し、スコア化する。

妥当な対象においては、血管および/または神経系合併症を追跡する。動脈瘤または深部静脈血栓症などの臓器病変を有する対象については、各来診中に臨床所見を追跡し、臨床的に必要であれば、造影スパイラルCT画像法を行う。実質性神経病変を有する対象については、各来診中に完全な神経学的検査を行い、臨床的に必要であれば、造影頭部MRIおよび脳脊髄液(CSF)解析を行う。抗体の生物活性の付加的尺度として、炎症マーカー(CRP、ESR、およびサイトカイン)を収集する。

実施例4
IL-1β抗体による急性ぶどう膜炎増悪の阻害
さらなる臨床治験を行うことができ、これは例えば、同じまたは別の投与量および投与計画、より長い治療および/または観察期間、群当たりより多くの対象数、現在のところ急性ぶどう膜炎発作(例えば、急性ぶどう膜炎増悪)を起こしていないが、1回または複数回のぶどう膜炎発作の前病歴(例えば、この6カ月、12カ月以内)がある対象(例えば、リスクのある対象)、1つまたは複数の付加的活性薬剤(例えば、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、アザチオプリン、ステロイド)の標準治療または漸減用量による治療を継続している対象、ならびに別の形態のぶどう膜炎(例えば、非感染性、感染性)および/または1つまたは複数のその他の疾患または病態(例えば、炎症性疾患)と診断された対象を含み得る。

例えば、急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃、重度の増悪)を阻害するためのIL-1β抗体による治療の治療効果を評価するために、再発性ぶどう膜炎(例えば、難治性ぶどう膜炎、抵抗性ぶどう膜炎)の病歴があると診断され、よってさらなるぶどう膜炎増悪のリスクある患者(例えば、ベーチェット病患者)において臨床治験を行う。再発性ぶどう膜炎の病歴(例えば、6カ月以内のぶどう膜炎再燃/増悪、12カ月以内のぶどう膜炎再燃/増悪、18カ月以内のぶどう膜炎再燃/増悪)があるが、現在のところ急性ぶどう膜炎増悪を経験しておらず(例えば、この1カ月以内、この3カ月以内)、例えば非ステロイド性免疫抑制剤(例えば、アザチオプリン、シクロスポリン、ミコフェノレート、メトトレキサート)および/またはステロイド(例えば、プレドニゾン、プレドニゾロン)を含む、1つまたは複数の標準治療薬物において現在のところ安定している対象(例えばリスクのある対象)を、本臨床試験に登録する。

対象の群(例えば、対象10名、対象25名、対象50名またはそれ以上)は、標準治療を受け続け、さらに皮下注射によりIL-1β抗体(例えば、0.03 mg/kg用量、0.3 mg/kg用量、1.0 mg/kg用量、30 mg用量、100 mg用量)またはプラセボによる治療を毎月受ける。任意に、対象は、抗体の次の用量と比較してより高く(例えば、2倍)かつ/または別の経路(例えば、IV)によって送達される抗体の初期用量の投与を受けることができる。次に、治療期間(例えば、6カ月の治療期間、12カ月の治療期間)中のぶどう膜炎の急性増悪について、例えば本明細書に(例えば、先の実施例に)記載されるように対象をモニターする。急性ぶどう膜炎増悪「事象」は、1つまたは複数の病態の悪化(例えば、視力の減退、硝子体混濁、網膜滲出斑、または血管炎の増加)のみならず、1つまたは複数のレスキュー薬物療法(例えば、ボーラスステロイド治療、新規免疫抑制療法)の開始を含み得る。

ぶどう膜炎の急性増悪を経験する群内の対象数(例えば、特定の期間内)、および/または急性ぶどう膜炎増悪までの時間に関して、抗体治療群とプラセボ治療群を比較することにより、IL-1β抗体治療の治療効果を判定する。

実施例5
IL-1β抗体によるぶどう膜炎の治療：
薬学的組成物による標準治療の漸減
急性ぶどう膜炎増悪(例えば、ぶどう膜炎再燃)を阻害するためのIL-1β抗体による治療の治療効果、および該抗体の能力を評価するために、再発性ぶどう膜炎(例えば、難治性ぶどう膜炎、抵抗性ぶどう膜炎)の病歴があると診断された患者(例えば、ベーチェット病患者)において臨床治験を行う。再発性ぶどう膜炎の病歴があり、例えば非ステロイド性免疫抑制剤(例えば、アザチオプリン)および/またはステロイド(例えば、プレドニゾロン)を含む、1つまたは複数の標準治療薬物の投与を現在受けており、急性ぶどう膜炎増悪を経験している対象を、本臨床試験に登録する。急性ぶどう膜炎増悪に関する登録基準は、例えば、硝子体混濁(例えば、≧1+、≧2+)、増悪に起因する視力の減退(例えば、20/40以下のETDRS BCVA、≧15文字のETDRSまたは≧2行のSnellenの減少)、または網膜滲出斑および/もしくは網膜血管炎などの、前述のパラメータのいずれかを含み得る。

対象は全員、標準治療を受け続け、急性増悪を解消するために、さらに静脈内投与または皮下投与によりIL-1β抗体(例えば、0.03 mg/kg用量、0.3 mg/kg用量、1.0 mg/kg用量、30 mg用量、100 mg用量)による治療を開始する。14日目に、2回目の任意の用量の抗体を投与することができる(例えば、静脈内、皮下)。IL-1β抗体治療に対する反応について患者を毎週モニターし、反応後の所定の時点で(例えば、1週間後)、一般的には28日目までに、治療に反応した対象全員を2群のうちの1群に無作為に分類し、第1群は標準治療およびIL-1β抗体の投与(例えば、毎月)を受け続け、第2群は標準治療およびさらにプラセボの投与を受け続ける。任意に、対象は、抗体の次の用量と比較してより高い(例えば、2倍)量の、かつ/または別の経路(例えば、IV)によって送達される抗体の初期用量の投与を受けることができる。

次に、第2相の治療期間(例えば、6カ月の治療期間、12カ月の治療期間)中のぶどう膜炎のさらなる急性増悪の再発について、本明細書に(例えば、先の実施例に)記載されるように対象(例えば、リスクのある対象)をモニターする。急性ぶどう膜炎増悪「事象」は、1つまたは複数の病態の悪化(例えば、視力の減退、硝子体混濁、網膜滲出斑、または血管炎の増加)のみならず、1つまたは複数のレスキュー薬物療法(例えばボーラスステロイド治療、新規免疫抑制療法)の開始を含み得る。加えて、この治療期間中に、例えば免疫抑制剤(例えば、アザチオプリン、シクロスポリン、ミコフェノレート)および/またはステロイド(例えば、プレドニゾン)などの1つまたは複数の標準治療薬物の用量レベルを、任意に減少させるまたは漸減することができる。ぶどう膜炎の急性増悪を経験する群内の対象数(例えば、特定の期間内、増悪を経験する群内の対象の特定数に基づく)、および/または急性ぶどう膜炎増悪までの時間に関して、抗体治療群とプラセボ治療群を比較することにより、さらなる急性ぶどう膜炎増悪の予防におけるIL-1β抗体治療の治療効果を判定する。

本明細書において引用した出版物、特許出願、および特許を含む参考文献はすべて、各参考文献が個別にかつ具体的に参照により組み入れられことが示され、その全体が本明細書中に記載されるのと同程度に、参照により本明細書に組み入れられる。

本願明細書（特に添付の特許請求の範囲）では、「1つの(a)」「1つの(an)」「その(the)」および類似の指示対象は、特に断りがないかぎりまたは文脈上明らかに矛盾しない限り、単一または複数のいずれも含むものと解釈されるべきである。「含む(comprising)」「有する(having)」「包含する(including)」、および「含有する(containing)」は、特に指定のない限り、オープンエンドの用語（すなわち、「含むがこれに限定されない」を意味する）として、解釈されるべきである。オープンエンドの用語を本発明の特徴および要素を記載するために使用できる場合であれば、発明の要旨および範囲から離れることなく、オープンエンドの用語の位置にクローズドエンドの用語を使用することができることが具体的に意図される。本願明細書の値の範囲の列挙は、特に断りがない限り、その範囲内に入る個々具体的な値についてそれぞれ言及する簡便な方法とすることを単に意図し、本願明細書で個別に列挙されるように、個々の値は明細書に組み入れられる。明細書に記載する全ての方法は、特に断りがない限り、あるいは明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順で実施可能である。本願明細書の任意のまたは全ての例示、または例示の用語（例えば「例えば（such as)」)の使用は、単に理解を容易にする目的であって、特に断りがない限り、本願発明の範囲を制限するものではない。本明細書中のいかなる用語も、請求項に記載されていない要素を本発明の実施に必須であると示すものとは解釈されるべきではない。

本願の好ましい態様が本願明細書に記載され、本願発明を実施するために発明者に知られる最良の態様を含む。このような好ましい態様の改変態様は、本願明細書を読めば、当業者に明らかになるだろう。このような適切な改変を当業者であれば実施しうると発明者は予測し、発明者は本願明細書に明示される以外で実施される発明を意図する。したがって、本願発明は、添付の特許請求の範囲の請求項に記載の主題の、適用される法律が許す全ての改変ならびに同等の範囲を含む。さらに、その可能な改変における上記要素の任意の組み合わせが、特に断りがない限り、または矛盾しない限り、含まれる。

Claims

抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を阻害する方法であって、該ぶどう膜炎が難治性ぶどう膜炎である方法。
対象におけるぶどう膜炎の阻害が、急性ぶどう膜炎増悪を阻害することである、請求項1記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法が、該対象におけるぶどう膜炎を予防する方法である、請求項1または2記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法が、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法である、請求項1または2記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法によって急性ぶどう膜炎増悪の間隔が延びる、請求項1または2記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法によって急性ぶどう膜炎増悪の頻度が減少する、請求項1または2記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法によって、急性ぶどう膜炎増悪を経験する可能性が減少する、請求項1または2記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法が急性ぶどう膜炎増悪を予防する、請求項1または2記載の方法。
対象におけるぶどう膜炎を阻害する前記方法によって、急性ぶどう膜炎増悪の重症度が軽減する、請求項1または2記載の方法。
難治性ぶどう膜炎が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である、請求項1〜9のいずれか一項記載の方法。
前記非ステロイド性免疫抑制剤が、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである、請求項10記載の方法。
前記DNA合成阻害剤が、アザチオプリン、アルキル化剤、代謝拮抗剤、X線療法、クロラムブシル、またはシクロホスファミドである、請求項11記載の方法。
前記非ステロイド性抗炎症剤が、TNF阻害剤、IL-6阻害剤、またはIL-17阻害剤である、請求項10記載の方法。
前記ステロイドが、プレドニゾン、メチルプレニゾロン(methylprenisolone)、プレドニゾロン、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである、請求項10記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは2つの薬学的組成物の投与を同時に受けている、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つの薬学的組成物の投与を同時に受けている、請求項15記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物、およびステロイドを含む薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物の投与を同時に受けていない、請求項1〜14のいずれか一項記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない、請求項17記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない、請求項17記載の方法。
前記対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎のための治療を以前に受けたことがある、請求項1〜19のいずれか一項記載の方法。
前記対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の前記治療に対する有害反応または過敏性を有していた、請求項20記載の方法。
前記対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の治療に失敗した、請求項20記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の阻害のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つの薬学的組成物の投与を同時に受けており、かつ前記方法が、少なくとも1つの該薬学的組成物の投与量の低下を提供する、請求項1〜16のいずれか一項記載の方法。
前記投与量の低下が、前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の用量と比較した場合の、少なくとも1つの前記薬学的組成物の用量の低下である、請求項23記載の方法。
前記投与量の低下が、前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の投与頻度と比較した場合の、少なくとも1つの前記薬学的組成物の投与頻度の低下である、請求項23記載の方法。
非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与量が低下する、請求項23〜25のいずれか一項記載の方法。
前記非ステロイド性免疫抑制剤が、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである、請求項26記載の方法。
前記DNA合成阻害剤がアザチオプリンまたはメトトレキサートである、請求項27記載の方法。
ステロイドを含む薬学的組成物の投与量が低下する、請求項23〜25のいずれか一項記載の方法。
前記ステロイドが、プレドニゾロン、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである、請求項29記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法であって、該ぶどう膜炎が難治性ぶどう膜炎である方法。
前記難治性ぶどう膜炎が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む薬学的組成物による治療に対して抵抗性であるぶどう膜炎である、請求項31記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法であって、該対象が、該ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは2つの薬学的組成物の投与を同時に受けている方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つの薬学的組成物の投与を同時に受けている、請求項33記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法であって、該ぶどう膜炎が難治性ぶどう膜炎であり、かつ該対象が、該ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物、およびステロイドを含む薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物の投与を同時に受けていない方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない、請求項35記載の方法。
前記対象が、前記ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性抗炎症剤を含む薬学的組成物の投与を同時に受けていない、請求項35記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象における急性ぶどう膜炎増悪を阻害する方法であって、該対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎のための治療を以前に受けたことがある方法。
前記対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の前記治療に対する有害反応または過敏性を有していた、請求項38記載の方法。
前記対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは複数の薬学的組成物によるぶどう膜炎の以前の前記治療に失敗した、請求項38記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象における急性ぶどう膜炎増悪を阻害する方法であって、該対象が、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む1つまたは2つの薬学的組成物による該ぶどう膜炎のための同時治療を受けている方法。
急性ぶどう膜炎増悪の前記阻害が、急性ぶどう膜炎増悪の間隔の延長である、請求項38〜41のいずれか一項記載の方法。
急性ぶどう膜炎増悪の前記阻害が、急性ぶどう膜炎増悪の頻度の減少である、請求項38〜41のいずれか一項記載の方法。
急性ぶどう膜炎増悪の前記阻害が、急性ぶどう膜炎増悪を経験する可能性の減少である、請求項38〜41のいずれか一項記載の方法。
急性ぶどう膜炎増悪の前記阻害が、急性ぶどう膜炎増悪を予防することである、請求項38〜41のいずれか一項記載の方法。
急性ぶどう膜炎増悪の前記阻害が、急性ぶどう膜炎増悪の重症度を軽減することである、請求項38〜41のいずれか一項記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療または予防する方法であって、該対象が、該ぶどう膜炎の治療または予防のために、非ステロイド性免疫抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、またはステロイドを含む少なくとも1つの薬学的組成物の投与を同時に受けており、かつ該方法が少なくとも1つの該薬学的組成物の投与量の低下を提供する方法。
前記投与量の低下が、前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の用量と比較した場合の、少なくとも1つの前記薬学的組成物の用量の低下である、請求項47記載の方法。
前記投与量の低下が、前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する前の投与頻度と比較した場合の、少なくとも1つの前記薬学的組成物の投与頻度の低下である、請求項47記載の方法。
非ステロイド性免疫抑制剤を含む薬学的組成物の投与量が低下する、請求項47記載の方法。
ステロイドを含む薬学的組成物の投与量が低下する、請求項47記載の方法。
前記非ステロイド性免疫抑制剤が、DNA合成阻害剤、シクロスポリン、ミコフェノレート、またはコルヒチンである、請求項15〜51のいずれか一項記載の方法。
前記DNA合成阻害剤がアザチオプリンである、請求項52記載の方法。
前記ステロイドが、プレドニゾロン、コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン、およびグルココルチコイドからなる群より選択されるステロイドホルモンである、請求項15〜51のいずれか一項記載の方法。
抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を対象に投与する段階を含む、ぶどう膜炎と診断された該対象における急性ぶどう膜炎増悪を阻害する方法であって、該ぶどう膜炎が難治性ぶどう膜炎であり、かつ該急性ぶどう膜炎増悪が、SUN基準に従い少なくとも2段階増加した眼内炎症の重症度を有する方法。
Ben-Ezraぶどう膜炎スコアの改善をもたらす、請求項1〜55のいずれか一項記載の方法。
前部ぶどう膜炎または後部ぶどう膜炎の改善をもたらす、請求項1〜55のいずれか一項記載の方法。
視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、視神経網膜炎、網膜機能不全、および眼圧亢進より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす、請求項1〜55のいずれか一項記載の方法。
視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、および視神経網膜炎より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす、請求項58記載の方法。
視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、および網膜染色より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす、請求項59記載の方法。
視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント、網膜滲出斑、網膜血管炎、および視神経乳頭過蛍光より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす、請求項60記載の方法。
視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント、および網膜血管炎より選択される少なくとも2つのパラメータの改善をもたらす、請求項61記載の方法。
Ben Ezraスコアの改善をもたらす、請求項57〜62のいずれか一項記載の方法。
(1) 対象においてぶどう膜炎を診断する段階、および
(2) 抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を段階(1)の対象に投与する段階
を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法であって、
前部ぶどう膜炎または後部ぶどう膜炎の改善をもたらす方法。
ぶどう膜炎と診断される前記対象が、汎ぶどう膜炎と診断される対象である、請求項64記載の方法。
中間部ぶどう膜炎の改善をさらにもたらす、請求項64記載の方法。
(1) 対象においてぶどう膜炎を診断する段階、および
(2) 抗IL-1β抗体またはその結合断片の有効量を段階(1)の対象に投与する段階
を含む、該対象におけるぶどう膜炎を治療する方法であって、
視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、視神経網膜炎、網膜機能不全、および眼圧亢進より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす方法。
視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、網膜染色、虹彩炎、虹彩毛様体炎、前部毛様体炎、周辺部ぶどう膜炎、後部毛様体炎、限局性脈絡膜炎、多巣性脈絡膜炎、びまん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、網脈絡膜炎、網膜炎、および視神経網膜炎より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす、請求項67記載の方法。
視力、硝子体混濁、前房内細胞スコア、黄斑浮腫、レーザーフレアセルカウント、網膜下貯留、網膜上膜形成、前房蓄膿、網膜下血管新生、視神経乳頭血管新生、網膜血管新生、網膜滲出斑、網膜血管炎、閉塞性血管炎、末梢血管鞘形成、炎症性鞘形成、網膜静脈分枝閉塞症、眼底フルオレセイン血管造影漏出スコア、視神経乳頭過蛍光、乳頭縁部染色、視神経乳頭漏出、嚢胞性貯留、後極アーケード、網膜毛細血管非灌流、黄斑虚血、ピンポイント漏出、および網膜染色より選択される少なくとも1つまたは2つのパラメータの改善をもたらす、請求項68記載の方法。
視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント、網膜滲出斑、網膜血管炎、および視神経乳頭過蛍光より選択される少なくとも2つのパラメータの改善をもたらす、請求項69記載の方法。
視力、硝子体混濁、レーザーフレアセルカウント、および網膜血管炎より選択される少なくとも2つのパラメータの改善をもたらす、請求項70記載の方法。
Ben Ezraスコアの改善をもたらす、請求項64〜71のいずれか一項記載の方法。
前記ぶどう膜炎が非感染性ぶどう膜炎である、請求項1〜72のいずれか一項記載の方法。
前記対象が、ベーチェット病、脊椎関節炎、乾癬性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、サルコイドーシス、尿細管間質性腎炎およびぶどう膜炎(TINU)症候群、関節リウマチ、川崎病、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス、多発性動脈炎、ライター病、ウェゲナー肉芽腫症、フォークト・小柳・原田症候群、全身性若年性特発性関節炎、および肉芽腫性血管炎より選択される疾患または病態と診断されている、請求項1〜72のいずれか一項記載の方法。
前記対象が、サイトメガロウイルス感染症、トキソプラズマ症、梅毒、結核、猫ひっかき病、ライム病、ウエストナイルウイルス感染症、単純ヘルペスウイルス感染症、ヒト免疫不全ウイルス感染症、真菌感染症、または水痘帯状疱疹感染症と診断されている、請求項1〜72のいずれか一項記載の方法。
前記対象が、周辺部ぶどう膜炎、多発性硬化症、交感性眼炎、散弾状(birdshot)脈絡膜症、免疫回復ぶどう膜炎、リンパ腫、および特発性ぶどう膜炎より選択される疾患または病態と診断されている、請求項1〜72のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、約1 nMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、約250 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する、請求項77記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、約50 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する、請求項78記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、約10 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する、請求項79記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、約1 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する、請求項80記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、約0.3 pMまたはそれ未満の解離定数でヒトIL-1βに結合する、請求項81記載の方法。
前記抗IL-1β抗体または前記抗体断片が中和抗体である、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗IL-1β抗体または前記抗体断片が、結合した該抗体または該断片によってIL-1βのIL-1受容体I(IL-1RI)への結合が実質的に可能になるように、IL-1βエピトープに結合する、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、IL-1α、IL-1R、またはIL-1Raに検出可能な程度には結合しない、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体またはその断片が、SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体の結合と競合する、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
SEQ ID NO:5の軽鎖可変領域およびSEQ ID NO:6の重鎖可変領域を有する抗体が結合するエピトープと実質的に同じIL-1βのエピトープに、前記抗体またはその断片が結合する、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、IL-1βのGlu64を取り込むエピトープに結合する、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、IL-1βのN末端のアミノ酸1〜34位に結合する、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片が、ヒト型に遺伝子操作されているかまたはヒト化されている、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片がヒトである、請求項1〜76のいずれか一項記載の方法。
約3 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記抗体断片を投与する、請求項1〜91のいずれか一項記載の方法。
約1 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記抗体断片を投与する、請求項92記載の方法。
約0.3 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記抗体断片を投与する、請求項93記載の方法。
約0.1 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記抗体断片を投与する、請求項94記載の方法。
約0.03 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記抗体断片を投与する、請求項95記載の方法。
約0.01 mg/kgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記抗体断片を投与する、請求項96記載の方法。
前記1回用量または前記複数回用量が、少なくとも0.01 mg/kgの抗体または断片である、請求項92〜97のいずれか一項記載の方法。
対象体重当たりの用量比とは無関係に、固定用量として前記抗体または前記断片を投与する、請求項1〜91のいずれか一項記載の方法。
500 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項99記載の方法。
250 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項100記載の方法。
100 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項101記載の方法。
25 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項102記載の方法。
10 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項103記載の方法。
1.0 mgまたはそれ未満の抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項104記載の方法。
少なくとも1.0 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項99〜105のいずれか一項記載の方法。
少なくとも10 mgの抗体または断片の1回用量または複数回用量で前記抗体または前記断片を投与する、請求項99〜104のいずれか一項記載の方法。
皮下注射、静脈内注射、眼内注射、または筋肉内注射によって前記抗IL-1β抗体または前記断片を投与する、請求項1〜107のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量を投与する、請求項1〜108のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片の初回用量の投与に続いて、次の1回用量または複数回用量が投与され、かつ次の該1回用量または該複数回用量が該初回用量とほぼ同じかまたはそれよりも少ない量である、請求項1〜108のいずれか一項記載の方法。
前記抗体または前記抗体断片の初回用量の投与に続いて次の1回用量または複数回用量が投与され、かつ該次の用量の少なくとも1つが該初回用量よりも多い量である、請求項1〜108のいずれか一項記載の方法。
少なくとも約0.5μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項1〜111のいずれか一項記載の方法。
少なくとも約1.0μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項112記載の方法。
少なくとも約2.0μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項113記載の方法。
約0.5μg/mL〜約5μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項112記載の方法。
少なくとも約0.5μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で抗IL-1β抗体またはその結合断片を対象に投与する段階を含む、該対象におけるぶどう膜炎を阻害する方法。
少なくとも約1.0μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項116記載の方法。
少なくとも約2.0μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項117記載の方法。
約0.5μg/mL〜約5μg/mLの全身トラフ血清濃度を維持するのに十分な投与量および投与頻度で前記抗IL-1β抗体またはその結合断片を投与する、請求項116記載の方法。
前記抗体またはその断片が、IL-8のIL-1β誘導性産生を測定するヒト全血IL-1β阻害アッセイ法においてIL-1β受容体拮抗物質よりも低いIC₅₀を有する、請求項1〜120のいずれか一項記載の方法。
ぶどう膜炎の治療において使用するための組成物の製造における抗IL-1β抗体またはその結合断片の使用であって、該抗IL-1β抗体またはその結合断片が、IL-8のIL-1β誘導性産生を測定するヒト全血IL-1β阻害アッセイ法において、IL-1β受容体拮抗物質よりも低いIC₅₀を有し、該ぶどう膜炎が難治性ぶどう膜炎である使用。
前記IL-1β受容体拮抗物質がアナキンラである、請求項120記載の方法または請求項121記載の使用。