JP2013106608A - 変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法、並びに狂犬病ワクチン製剤 - Google Patents
変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法、並びに狂犬病ワクチン製剤 Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】狂犬病ウイルスの5つの構成タンパク質のうち、1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス又はそのゲノムと、他の1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス又はそのゲノムとを細胞に共導入する変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法を提供する。この方法により、欠損させた構成タンパク質の恒常発現細胞を用いずに、構成タンパク質を欠損させた変異狂犬病ウイルスを合成できるため、恒常発現細胞の樹立などの労力を軽減できる。また、細胞への感染の手順とウイルスの回収の手順を繰り返すことにより、変異狂犬病ウイルスのスケールアップが可能であるため、変異狂犬病ウイルスを安価かつ低労力で大量増殖できる。この方法により得られた変異狂犬病ウイルス混合液は、免疫原性と安全性を備えており、狂犬病ワクチン製剤に適用できる。
【選択図】図1
Description
本発明は、狂犬病ウイルスの構成タンパク質であるGタンパク質、Mタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質の5つのタンパク質のうち、1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス又はそのゲノムと、他の1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス又はそのゲノムとを培養細胞内に共導入する手順を少なくとも含む変異狂犬病ウイルス合成又は増殖方法をすべて包含する。
例えば、上記5つの構成タンパク質のうち、1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス、及び、他の1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルスのゲノム・プラスミドをそれぞれ作製し、それらのゲノム・プラスミドを培養細胞に共トランスフェクションすることにより、互いに、一方の変異狂犬病ウイルスの発現タンパク質が、他方の欠損タンパク質を補完するため、変異狂犬病ウイルスを人工合成することができる。上述の通り、この方法では、1つの構成タンパク質を欠損した2種類の変異狂犬病ウイルスの混合液が得られる。以下、手順を例示する。なお、本発明は、2種類の変異狂犬病ウイルスのゲノムを培養細胞に共導入する手順を含むものであればよく、以下の手段で行った場合のみに狭く限定されない。
例えば、上記5つの構成タンパク質のうち、1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス、及び、他の1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルスを培養細胞などに共感染させることにより、互いに、一方の変異狂犬病ウイルスの発現タンパク質が、他方の欠損タンパク質を補完するため、変異狂犬病ウイルスを再構成・増殖することができる。上述の通り、この方法では、1つの構成タンパク質を欠損した2種類の変異狂犬病ウイルスの混合液が得られる。以下、手順を例示する。なお、本発明は、2種類の変異狂犬病ウイルスを培養細胞に共感染させる手順を含むものであればよく、以下の手段で行った場合のみに狭く限定されない。
本発明は、狂犬病ウイルスの構成タンパク質であるGタンパク質、Mタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質のうち、それぞれ1つの構成タンパク質を欠損した2種類の変異狂犬病ウイルスを少なくとも含有する狂犬病ワクチン製剤を全て包含する。
本発明は、狂犬病ウイルスの構成タンパク質であるGタンパク質、Mタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質のうち、それぞれ1つの構成タンパク質を欠損した2種類の変異狂犬病ウイルスの、狂犬病ワクチン製剤製造のための使用をすべて包含する。
本発明は、狂犬病ウイルスの構成タンパク質であるGタンパク質、Mタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質のうち、それぞれ1つの構成タンパク質を欠損した2種類の変異狂犬病ウイルスを少なくとも含有する狂犬病ワクチン製剤を投与する処置を少なくとも含む狂犬病予防・治療方法をすべて包含する。
Claims (7)
- 狂犬病ウイルスの構成タンパク質であるGタンパク質、Mタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質の5つのタンパク質のうち、1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス又はそのゲノムと、他の1つの構成タンパク質を欠損した変異狂犬病ウイルス又はそのゲノムとを培養細胞内に共導入する手順を少なくとも含む変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法。
- 前記2種類の変異狂犬病ウイルスのうち、一方がMタンパク質を欠損する変異狂犬病ウイルスである請求項1記載の変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法。
- 前記2種類の変異狂犬病ウイルスのうち、一方がMタンパク質を欠損する変異狂犬病ウイルスであり、もう一方がNタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質のいずれかを欠損する変異狂犬病ウイルスである請求項1記載の変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法。
- 前記2種類の変異狂犬病ウイルスのうち、一方がMタンパク質を欠損する変異狂犬病ウイルスであり、もう一方がPタンパク質を欠損する変異狂犬病ウイルスである請求項1記載の変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法。
- 前記Nタンパク質を発現するプラスミド、前記Pタンパク質を発現するプラスミド、及び、前記Lタンパク質を発現するプラスミドをヘルパー・プラスミドとして共導入する手順を少なくとも含む請求項4記載の変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法。
- T7 RNAポリメラーゼ恒常発現細胞に、前記変異狂犬病ウイルスのゲノムを導入する手順を少なくとも含む請求項5記載の変異狂犬病ウイルス合成・増殖方法。
- 狂犬病ウイルスの構成タンパク質であるGタンパク質、Mタンパク質、Nタンパク質、Pタンパク質、Lタンパク質のうち、それぞれ1つの構成タンパク質を欠損した2種類の変異狂犬病ウイルスを少なくとも含有する狂犬病ワクチン製剤。
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