JP2012522222A5 - - Google Patents
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Description
Claims (28)
- PrPScの存在又は不在の、それを有することが疑われる生物試料における検出のための方法であって、
a.試料マトリックスからPrPScを実質的に分離することによって、該試料中に存在しうるPrPScを濃縮する工程、
b.濃縮したPrPScを少なくとも1つの分子標識で標識して、標識したPrPScを生成させる工程、及び
c.アトモル量の標識したPrPScを検出することができる装置上で、標識したPrPScを検出する工程
を含む、方法。 - 前記PrPScを消化しない、請求項1に記載の方法。
- 前記PrPScの濃縮及び標識したPrPScの検出の間の時間が、48時間以下である、請求項1に記載の方法。
- 前記PrPScの濃縮及び標識したPrPScの検出の間の時間が、24時間以下である、請求項1に記載の方法。
- 前記試料が、脳組織、神経組織、血液、尿、リンパ液、髄液、又はそれらの組合せを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記試料が、標識したPrPScの約0.1アトモル〜約200アトモルを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記試料が、シード重合を受けない、請求項1に記載の方法。
- 前記分子標識が、蛍光標識、リン光標識、放射性同位体標識、又はそれらの組合せである、請求項1に記載の方法。
- 前記分子標識が、蛍光標識した、抗PrP抗体である、請求項8に記載の方法。
- 前記分子標識が、さらに、ビオチン化抗PrP抗体を含む、請求項9に記載の方法。
- 前記PrPSc を濃縮する工程が、抗体、免疫沈降、磁気ビーズ、又はそれらの組合せを使用する、請求項1に記載の方法。
- PrPScの存在又は不在の、それを有することが疑われる生物試料における検出のための方法であって、
a.sPMCAによって前記試料中に存在するPrPScを増幅する工程、
b.試料マトリックスからPrPScを実質的に分離することによって、該試料中に存在しうるPrPScを濃縮する工程、
c.濃縮したPrPScを少なくとも1つの分子標識で標識して、標識したPrPScを生成させる工程、及び
d.アトモル量の標識したPrPScを検出することができる装置上で、標識したPrPScを検出する工程
を含む、方法。 - 前記PrPSc を濃縮する工程が、分子抗体、免疫沈降、磁気ビーズ、又はそれらの組合せを使用する、請求項12に記載の方法。
- 前記PrPScを消化しない、請求項12に記載の方法。
- 前記PrPScの増幅及び標識したPrPScの検出の間の時間が、48時間以下である、請求項12に記載の方法。
- 前記PrPScの増幅及び標識したPrPScの検出の間の時間が、24時間以下である、請求項12に記載の方法。
- 前記試料が、脳組織、神経組織、血液、尿、リンパ液、髄液、又はそれらの組合せを含む、請求項12に記載の方法。
- 前記試料が、標識したPrPScの約0.1アトモル〜約200アトモルを含む、請求項12に記載の方法。
- 前記分子標識が、蛍光標識、リン光標識、放射性同位体標識、又はそれらの組合せである、請求項12に記載の方法。
- 前記PrPScを濃縮する工程が、モノクローナル抗体又はそれらの抗原−結合部によって生じ、その際該抗体が、ハイブリドーマ08−1/8E9によって産生された抗体と実質的に同一である、重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を有する、請求項12に記載の方法。
- 前記PrPScを標識する工程が、
a.モノクローナル抗体又はそれらの抗原−結合部、その際該抗体が、ハイブリドーマ08−1/11F12によって産生された抗体と実質的に同一である、重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を有し、
b.ビオチン化モノクローナル抗体又はそれらの抗原−結合部でキャプチャーされたPrPScを標識すること、その際該抗体が、ハイブリドーマ08−1/5D6によって産生された抗体と実質的に同一である、重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を有する、
によって生じる、請求項12に記載の方法。 - PrPScに結合し、かつモノクローナル第二抗体のPrPScへの結合を高める、モノクローナル抗体又はそれらの抗原−結合部。
- モノクローナル第二抗体のPrPScへの結合後に高められて通常PrPScに結合する、モノクローナル抗体又はそれらの抗原−結合部。
- モノクローナル第二抗体のPrPScへの結合後に結合することができない、通常PrPScに結合する、モノクローナル抗体又はそれらの抗原−結合部。
- PrPScの検出のためのキットであって、
a.PrPScに結合し、かつモノクローナル第二抗体のPrPScへの結合を高める、モノクローナル第一抗体又はそれらの抗原−結合部、及び
b.モノクローナル第一抗体のPrPScへの結合後に高められてPrPScに結合する、モノクローナル第二抗体又はそれらの抗原−結合部
を含む、キット。 - 前記第一抗体が、ハイブリドーマ08−1/11F12によって産生された抗体と実質的に同一である、重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を有し、かつ前記第二抗体が、ハイブリドーマ08−1/5D6によって産生された抗体と実質的に同一である、重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を有する、請求項25に記載のキット。
- さらに、PrPScを免疫沈降することができるモノクローナル第三抗体を含む、PrPScの検出のための請求項25に記載のキット。
- さらに、標識したPrPScのアトモル量を検出することができる装置での協同のための、少なくとも1つのバイアル、キュベット又はキャピラリーを含む、PrPScの検出のための請求項25に記載のキット。
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