JP2012519162A

JP2012519162A - 酵素阻害剤

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Publication number: JP2012519162A
Application number: JP2011551519A
Authority: JP
Inventors: ドナルド，アラステア，デイヴィッド，グラハム; モファット，デイヴィッド，フェスタス，チャールズ; ベルフィールド，アンドリュー，ジェームズ; ノース，カール，レスリー; ジョーンズ，スチュアート，アンドリュー，ウェイン
Original assignee: Chroma Therapeutics Ltd
Current assignee: Chroma Therapeutics Ltd
Priority date: 2009-02-27
Filing date: 2010-02-25
Publication date: 2012-08-23
Anticipated expiration: 2030-02-25
Also published as: US20140155439A1; US20120149736A1; EP2401257A1; GB0903480D0; US20130303576A1; JP5732408B2; WO2010097586A1

Abstract

ＨＤＡＣ活性を阻害する、式（Ｉ）の化合物類：

（式中、Ａ、ＢおよびＤは独立して＝ＣＨ−または＝Ｎ−を表し；Ｗは−ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ₂ＣＨ₂−であり；Ｒ₁はカルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、または１以上の分子内カルボキシエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基であり；Ｒ₂またはＲ₃のいずれもが水素でないという条件で、Ｒ２およびＲ３は天然または非天然のアルファアミノ酸の側鎖から選択されるか、あるいはＲ₂およびＲ₃はそれらが結合している炭素と一緒になって、３−６員の飽和シクロアルキルまたはヘテロサイクリル環を形成してもよく；Ｙは、結合手、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）₂−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’−、−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ’、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ’または−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ−（ここで、Ｒ’は水素または任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルである）であり；Ｌ¹は式−（Ａｌｋ¹）_m（Ｑ）_n（Ａｌｋ²）_p−の２価の基［ここで、ｍ、ｎ、ｐ、Ｑ、Ａｌｋ¹およびＡｌｋ²は請求項で定義したとおりである］であり；Ｘ₁は、結合手；−Ｃ（＝Ｏ）；または−Ｓ（＝Ｏ）₂−；−ＮＲ₄Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₄−、−ＮＲ₄Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₅−、−ＮＲ₄Ｓ（＝Ｏ）₂−もしくは−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ₄−（ここで、Ｒ₄およびＲ₅は、独立して水素または任意に置換されていてもよい、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルである）を表し；そしてｚは０または１である）。

Description

本発明は、酵素のヒストン脱アセチル化酵素ファミリーのメンバーを阻害する化合物、ならびに癌を含む細胞増殖性疾患、ポリグルタミン病、例えばハンチントン病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、自己免疫性疾患、例えば慢性関節リウマチ、糖尿病、血液疾患、炎症性疾患、心臓血管系疾患、アテローム性動脈硬化症および感染症の炎症性後遺症の治療におけるそれらの使用に関する。

真核細胞中で、ＤＮＡはクロマチンを形成するためにヒストンでパッケージされている。ＤＮＡのおよそ１５０の塩基対が、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームを形成するために、ヒストン・オクタマー(ヒストン２Ａ、２Ｂ、３および４のそれぞれ２つ)の周囲で２重に包まれている。

クロマチンの規則正しい構造は、関連する遺伝子の転写を可能とするために修飾される必要がある。転写の調節は、分化、増殖およびアポトーシスへの鍵であり、それ故に厳密に制御される。クロマチン構造中での変化の制御(および転写の結果)は、ヒストン、最も顕著にはＮ−末端尾への共有結合修飾により仲介される。

アミノ酸の側鎖の共有結合修飾(例えばメチル化、アセチル化、リン酸化およびユビキチン化)は、酵素的に仲介される（ヒストンの共有結合修飾および転写の調節でのそれらの役割の総説は、S.L. Berger,Oncogene,2001,20,3007-3013で見られる。ヒストンのアセチル化および転写の総説については、M. Grunstein,Nature,1997,389,349-352;A.P. Wolffe,Science,1996,272,371-372;およびP.A.Wadeら,Trends Biochem.Sci.,1997,22,128-132を参照）。

ヒストンのアセチル化は転写的に活性なクロマチンの領域と関連し、それ故に低アセチル化度のヌクレオソームは典型的には転写的に不活性である。ヒストンのアセチル化の状態は、反対の活性の、２つの酵素のクラス：ヒストン・アセチルトランスフェラーゼ(ＨＡＴ)およびヒストン脱アセチル化酵素(ＨＤＡＣ)により制御される。

形質転換された細胞内で、ＨＤＡＣの不適切な発現は、腫瘍抑制遺伝子の沈黙をもたらすと信じられている（腫瘍形成におけるＨＤＡＣの潜在的役割の総説については、S.G. GrayおよびB.T.The,Curr.Mol.Med.,2001,1,401-429を参照）。

ＨＤＡＣ酵素の阻害剤は文献に記載され、動物における癌細胞増殖の阻害、アポトーシスの誘発および腫瘍の成長の阻害をもたらす、特定の遺伝子の転写の再活性化を誘発することが示されている（総説として、W.K.Kellyら,Expert Opin.Investig.Drugs,2002,11,1695-1713を参照）。

そのような発見は、ＨＤＡＣ阻害剤が、癌のような増殖性疾患の治療において、治療の可能性を有することを提案している（O.H.Kramerら,Trends Endocrinol.,2001,12,294-300,;D.M.VigushinおよびR.C.Coombes,Anticancer Drugs,2002,13,1-13）。

さらに、その他のものは、異常なＨＤＡＣの活性またはヒストンのアセチル化が次の疾患および障害；炎症性疾患（F. Leoniら, Proc. Soc. Natl. Acad. Sci.,2002, 99, 2995-3000）、ポリグルタミン病、例えばハンチントン病(R.E.Hughes,Curr Biol,2002,12,R141-R143;A.McCampbellら,Proc.Soc.Natl.Acad.Sci.,2001,98,15179-15184;E.Hocklyら,Proc.Soc.Natl.Acad.Sci.,2003,100,2041-2046)、その他の神経変性疾患、例えばアルツハイマー病(B.HempenおよびJ.P.Brion,J.Neuropathol.Exp.Neurol.,1996,55,964-972)、自己免疫性疾患および臓器移植拒絶(S.Skovら,Blood,2003,101,1430-1438;N.Mishraら,J.Clin.Invest.,2003,111,539-552)、糖尿病(A.L.MosleyおよびS.Ozcan,J.Biol.Chem.,2003,278,19660-19666)および糖尿病合併症、感染症(原虫感染を含む(S.J.Darkin-Rattrayら,Proc.Soc.Natl.Acad.Sci.,1996,93,13143-13147))、ならびにサラセミアを含む血液疾患(O.Wittら,Blood,2003,101,2001-2007)に関係していると提案していた。

これらの文献に含まれる知見は、ＨＤＡＣ阻害がこれらおよびその他の関連する疾患における治療上の恩恵を有するであろうと提案している。

多くのタイプのＨＤＡＣ阻害剤の化合物が癌治療のために提案され、いくつかのそのようなの化合物が、癌の治療のために現在臨床評価されている。例えば、次の特許文献がそのような化合物を開示している。

US 5,369,108 WO 02/22577 WO 03/092686
WO 01/18171 WO 03/075929 WO 03/066579
US 4,254,220 WO 03/076395 WO 03/011851
WO 01/70675 WO 03/076400 WO 04/013130
WO 01/38322 WO 03/076401 WO 04/110989
WO 02/30879 WO 03/076421 WO 04/092115
WO 02/26703 WO 03/076430 WO 04/224991
WO 02/069947 WO 03/076422 WO 04/076386
WO 02/26696 WO 03/082288 WO 05/014588
WO 03/082288 WO 03/087057 WO 05/018578
WO 05/019174 WO 05/030704 WO 05/026907
WO 05/004861 WO 05/013958 WO 06/016680
WO 05/007091 WO 05/028447

当技術分野において知られている多くのＨＤＡＣ阻害剤は、式（Ａ）：
（式中、環Ａは任意の置換基Ｒを有する炭素環式または複素環式の環系であり、[リンカー]は様々なタイプのリンカー基である。）
として表され得る、構造的なテンプレートを有する。

ヒドロキサメート基は、折り畳まれた酵素の構造内の、ポケットの底に存在する、ＨＤＡＣ酵素の活性部位で金属イオンと相互作用する金属結合基として機能する。環または環系Ａは、金属イオンを含むポケットの内部またはポケットの入口に存在し、それはＡを金属結合性ヒドロキサム酸基と結合する、前記ポケットの中へより深く広がる−[リンカー]−基を有する。

当技術分野、時には本明細書において、環または環系Ａは非公式に阻害剤の「ヘッド基」と言われることもある。

標的臓器および標的組織への送達を高めるため、または親薬剤の貧弱な薬物動態特性を克服するためのプロドラッグの使用は、よく知られた医薬品化学的なアプローチである。例えば、インビボで血清カルボキシエステラーゼにより活性な親化合物の酸に加水分解されるエステルのプロドラッグの投与は、親化合物の酸それ自体の投与より親の酸のより高い血清レベルをもたらすことができる。

発明の簡単な説明
我々は、今、ＨＤＡＣ酵素に対して強力でかつ選択的な阻害剤である一群の化合物を見出した。従って、これらの化合物は、例えばＨＤＡＣが治療介入のための認識された標的である、疾患の治療用医薬において使用される。

その化合物類は、α，α−２置換グリシンエステルモチーフ、または細胞内カルボキシエステラーゼにより加水分解され得るα，α−２置換グリシンエステルモチーフの分子内の存在による特徴付けられる。親油性のα，α−２置換グリシンエステルモチーフを有する本発明の化合物類は、細胞膜を通過し、細胞内カルボキシエステラーゼ類により酸に加水分解される。

極性の加水分解生成物は、細胞膜をたやすく通過しないので細胞内に蓄積する。よって、化合物のＨＤＡＣ阻害活性は、細胞内で長期に亘り、かつ強化される。

本発明の化合物類は、国際特許出願番号ＷＯ２００８／０４０９３４中の開示に含まれるＨＤＡＣ阻害剤に関連する。後者の化合物は、前記化合物が細胞内へ細胞膜を通過することを可能にもするα−１置換グリシンエステルモチーフを有し、そしてそこでそれらは細胞内カルボキシエステラーゼによって対応する酸に加水分解される。しかしながら、前記公報は、α，α−２置換グリシンエステル共役物(conjugates)が、細胞内カルボキシエステラーゼによって加水分解され得ることを示唆していない。実際、細胞内カルボキシエステラーゼ、主にｈＣＥ−１、ｈＣＥ−２およびｈＣＥ−３のα，α−２置換グリシンエステルを加水分解する能力は以前に研究されていなかったと思われる。

カルボン酸加水分解生成物の細胞内蓄積の恩恵を得るために、α−１置換グリシンエステルモチーフを細胞内酵素またはレセプターの調節剤にコンジュゲートさせる(conjugating)一般的概念は、我々の国際特許出願ＷＯ２００６／１１７５６７に開示されている。しかしながら、この公報は、α，α−２置換グリシンエステル共役物が、細胞内カルボキシエステラーゼによって加水分解され得ることを示唆していない。前記のように、細胞内カルボキシエステラーゼ、主にｈＣＥ−１、ｈＣＥ−２およびｈＣＥ−３のα，α−２置換グリシンエステルを加水分解する能力は以前に研究されていなかったと思われる。

それ故、本発明は、細胞壁を介する作用物質の浸透を容易とし、その結果、細胞内カルボキシエステラーゼ活性に親化合物の酸を放出するためのエステルの加水分解を可能ならしめるα，α−２置換グリシンエステルグループを有する化合物であり、ＨＤＡＣの細胞内での阻害から恩恵を受け、癌または炎症のような疾患の治療における医薬的な有用性を有する、ＨＤＡＣ阻害剤の新たなクラスを入手可能とする。

帯電しているとき、前記の酸は細胞から直ちには移動せず、それ故に蓄積して活性なＨＤＡＣ阻害剤の細胞内の濃度を増す。このことは、作用の効力および持続の強化を引き起こす。

本発明の化合物類は、同時係属中の国際特許出願番号ＷＯ２００８／０４０９３４号中に記載されているものとは異なったものであり、後者の化合物のアミノ酸エステルの共役部分はアルファ炭素上で１置換され、他方、本化合物類においては、アルファ炭素は２置換されている。

本発明のα，α−２置換されたグリシンエステル共役物はそれらのモノ−アルファ置換された対応物よりも低ＨＤＡＣ阻害活性を有する傾向があるため、この構造上の相違は有益であり、そのような場合、その結果、本化合物類のＨＤＡＣ阻害活性は、一般的な全身的な効果としてよりもむしろそれらの加水分解生成物が蓄積する、細胞内で主に発揮される。

発明の詳細な説明
本発明によれば、式（Ｉ）の化合物が提供される：

（式中、
Ａ、ＢおよびＤは独立して＝ＣＨ−または＝Ｎ−を表し；

Ｗは２価の基−ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ₂ＣＨ₂−であり；

Ｒ₁はカルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、または１以上の分子内カルボキシエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基であり；

Ｒ₂またはＲ₃のいずれもが水素でないという条件で、Ｒ₂およびＲ₃は天然または非天然のアルファアミノ酸の側鎖から選択されるか、あるいはＲ₂およびＲ₃はそれらが結合している炭素と一緒になって、３−６員の飽和スピロシクロアルキルまたはヘテロサイクリル環を形成してもよく；

Ｙは、結合手、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）₂−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’−、−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ’、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ’または−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ’−（ここで、Ｒ’は水素または任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルである）であり；

Ｌ¹は式−（Ａｌｋ¹）_m（Ｑ）_n（Ａｌｋ²）_p−の２価の基

[ここで、ｍ、ｎおよびｐは独立して０または１であり、

Ｑは、（ｉ）任意に置換されていてもよい、５−１３員環の、２価の単環式もしくは２環式の炭素環式基または複素環式基であるか、あるいは（ｉｉ）ｍおよびｐが共に０である場合、式−Ｘ²−Ｑ¹−または−Ｑ¹−Ｘ²−の２価の基｛ここで、Ｘ²は−Ｏ−、Ｓ−またはＮＲ^A−（ここで、Ｒ^Aは水素もしくは、任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルである）であり、Ｑ¹は任意に置換されていてもよい、５−１３員環の、２価の単環式もしくは２環式の炭素環式または複素環式基である｝であり、

Ａｌｋ¹およびＡｌｋ²は、独立して、任意に置換されていてもよい、２価の（Ｃ₃−Ｃ₇）シクロアルキル基、または任意に置換されていてもよい、直鎖状もしくは分枝鎖状の（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニレンもしくは（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニレン基を表し、これらの基はエーテル（−Ｏ−）、チオエーテル（−Ｓ−）もしくはアミノ（−ＮＲ^A−）結合（ここで、Ｒ^Aは水素または任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルである）を任意に含んでいてもよいか、あるいは末端としていてもよい]であり；

Ｘ₁は、結合手；−Ｃ（＝Ｏ）；または−Ｓ（＝Ｏ）₂−；−ＮＲ₄Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₄−、−ＮＲ₄Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₅−、−ＮＲ₄Ｓ（＝Ｏ）₂−、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ₄−（ここで、Ｒ₄およびＲ₅は、独立して水素または任意に置換されていてもよい、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルである）を表し；そして

ｚは０または１である）。

前記の式（Ｉ）の化合物類は、それらの塩類、特に医薬的に許容な塩類、Ｎ−オキサイド類、水和物類、溶媒和物類および多形相類の形態で製造されてもよい。本明細書における化合物についてのいずれの請求項、または本明細書で用いる場合、「本発明の化合物類」、「本発明に係る化合物類」、「式（Ｉ）の化合物類」等の記載は、そのような化合物類の塩類、Ｎ−オキサイド類、水和物類、溶媒和物類および多形相類を含む。

本明細書で用いる場合「本発明のエステル化合物類」、「本発明に係るエステル化合物類」、「式（Ｉ）のエステル化合物類」等の記載は、Ｒ₁が１以上の分子内カルボキシエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基である、式（Ｉ）の化合物類に関し、そのような化合物の塩類、Ｎ−オキサイド類、水和物類、溶媒和物類および多形相類を含む。

前記の定義は高分子量の分子を潜在的に含み得るが、医薬品化学の実務での一般的な原則に従い、本発明に係る化合物は６００以下の分子量を有することが好ましい。

本発明のエステル化合物類は、細胞壁への浸透後、分子内カルボキシエステラーゼ酵素により加水分解され、対応するカルボン酸に変換される。後者は、それらが細胞内に放出されたときに活性なＨＤＡＣ阻害剤であるため、本発明の一部を形成するが、一般的にそれらはそれら自身を対象物に投与する薬物として役に立たない。投与に有用であると考えられるのは本発明のエステル化合物類である。

その結果、もう1つの広汎な観点では、本発明はヒストン脱アセチル化酵素活性を阻害するための組成物の調製における、本発明のエステル化合物の使用を提供する。

本発明に係るエステル化合物類は、エクスビボまたはインビボでの、ヒストン脱アセチル化酵素活性の阻害のために用いられ得る。

本発明のある観点では、本発明のエステル化合物類は、細胞増殖性疾患、例えば癌細胞増殖および自己免疫性疾患の治療のための組成物の調製に使用され得る。

もう1つの観点では、本発明は、前記疾患を患う対象者に本発明のエステル化合物の有効量を投与することを含む、前記疾患の種類の治療方法を提供する。

用語
用語「エステル」または「エステル化されたカルボキシ基」は、観念的にアルコールＲ₉ＯＨから誘導される、Ｒ₉がエステルを特徴付ける基である、基Ｒ₉Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−を意味する。

ここで用いられている用語「（Ｃ_a−Ｃ_b）アルキル」（ここで、ａおよびｂは整数である）は、ａ−ｂの炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状のアルキル基をいう。従って、ａが１であり、ｂが６であるとき、例えば、この用語はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを含む。

ここで用いられている用語「２価の（Ｃ_a−Ｃ_b）アルキレン基」（ここで、ａおよびｂは整数である）は、ａ−ｂの炭素原子および２つの遊離の価を有する、飽和炭化水素鎖をいう。

ここで用いられている用語「（Ｃ_a−Ｃ_b）アルケニル」（ここで、ａおよびｂは整数である）は、適用できる場合にはＥまたはＺいずれかの立体化学の少なくとも1つの２重結合を有し、ａ−ｂの炭素原子を有する、直鎖状または分枝鎖状のアルケニル部分をいう。この用語は、例えば、ビニル、アリル、１−および２−ブテニルならびに２−メチル−２−プロペニルを含む。

ここで用いられている用語「２価の（Ｃ_a−Ｃ_b）アルケニレン基」は、ａ−ｂの炭素原子、少なくとも１つの２重結合および２つの遊離の価を有する炭化水素鎖を意味する。

ここで用いられている用語「（Ｃ_a−Ｃ_b）アルキニル」（ここで、ａおよびｂは整数である）は、ａ−ｂの炭素原子を有し、かつ加えて１つの３重結合を有する直鎖状または分枝鎖状の炭化水素基をいう。この用語は、例えばエチニル、１−プロピニル、１−および２−ブチニル、２−メチル−２−プロピニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニルおよび５−ヘキシニルを含む。

ここで用いられている用語「２価の（Ｃ_a−Ｃ_b）アルキニレン基」（ここで、ａおよびｂは整数である）は、ａ−ｂの炭素原子および少なくとも１つの３重結合を有する２価の炭化水素鎖をいう。

ここで用いられている用語「炭素環式基」は、全て炭素であり、１６までの環原子数を有する、１、２または３環式の基をいい、アリールおよびシクロアルキルを含む。

ここで用いられている用語「シクロアルキル」は、３−８の炭素原子を有する単環式の飽和炭素環式基をいい、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含む。

ここで用いられる非限定の用語「アリール」は、１、２または３環式の炭素環式芳香族基をいい、共有結合により直接結合した２つの単環式の炭素環式芳香族環を有する基を含む。そのような基の具体例は、フェニル、ビフェニルおよびナフチルである。

ここで用いられる非限定の用語「ヘテロアリール」は、Ｓ、ＮおよびＯから選択される１−４のヘテロ原子を含む１、２または３環式の芳香族基をいい、共有結合により直接結合している、２つのそのような単環式環、または１つのそのような単環式環と１つの単環式アリール環を有する基を含む。

そのような基の具体例は、チエニル、ベンズチエニル、フリル、ベンズフリル、ピロリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンズチアゾリル、イソチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、ベンズオキサゾリル、イソオキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、ベンズトリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニリル、インドリルおよびインダゾリルである。

ここで用いられる非限定の用語「ヘテロサイクリル」または「複素環式」は、前記で定義されたような「ヘテロアリール」を含み、非芳香族という意味では、Ｓ、ＮおよびＯから選択される１−４のヘテロ原子を含む、１、２または３環式の非芳香族基、およびその他のそのような基または単環式の炭素環式基に共有結合している、１以上の前記のようなヘテロ原子を含む、単環式の非芳香族基からなる基に関する。

そのような基の具体例は、ピロリル、フラニル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピリミジニル、モルホリニル、ピペラジニル、インドリル、モルホリニル、ベンズフラニル、ピラニル、イソオキサゾリル、ベンズイミダゾリル、メチレンジオキシフェニル、エチレンジオキシフェニル、マレイミドおよびスクシンイミド基である。

文中で特に規定されていない限り、ここでのいずれかの部分に適用される「置換された」という用語は、４つまでの矛盾のない置換基で置換されていることを意味し、置換基のそれぞれは独立して、例えば（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルコキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、メルカプト、メルカプト（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルチオ、フェニル、（フッ素、臭素および塩素を含む）ハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ニトリル（−ＣＮ）、オキソ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲ^A、−ＣＯＲ^A、−ＳＯ₂Ｒ^A、−ＣＯＮＨ₂、−ＳＯ₂ＮＨ₂、−ＣＯＮＨＲ^A、−ＳＯ₂ＮＨＲ^A、−ＣＯＮＲ^AＲ^B、−ＳＯ₂ＮＲ^AＲ^B、−ＮＨ₂、−ＮＨＲ^A、−ＮＲ^AＲ^B、−ＯＣＯＮＨ₂、−ＯＣＯＮＨＲ^A、−ＯＣＯＮＲ^AＲ^B、−ＮＨＣＯＲ^A、−ＮＨＣＯＯＲ^A、−ＮＲ^BＣＯＯＲ^A、−ＮＨＳＯ₂ＯＲ^A、−ＮＲ^BＳＯ₂ＯＨ、−ＮＲ^BＳＯ₂ＯＲ^A、−ＮＨＣＯＮＨ₂、−ＮＲ^AＣＯＮＨ₂、−ＮＨＣＯＮＨＲ^B、−ＮＲ^AＣＯＮＨＲ^B、−ＮＨＣＯＮＲ^AＲ^Bまたは−ＮＲ^AＣＯＮＲ^AＲ^Bであってもよい（ここで、Ｒ^AおよびＲ^Bは独立して、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、フェニルまたは５もしくは６の環原子を有する単環式ヘテロアリールであるか、またはＲ^AおよびＲ^Bが同じ窒素原子に結合しているとき、Ｒ^AおよびＲ^Bは環状アミノ基（例えばモルホリノ、ピペリジニル、ピペラジニルまたはテトラヒドロピロリル）を形成する）。「任意の置換基」は、前記の置換基の１つであり得る。

ここで用いられる用語「窒素置換基」は、窒素原子上の置換基を意味し、次のものから選択される。アミノ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えばアミノエチル、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアミノ−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₃）ジアルキルアミノ−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えばヒドロキシエチル、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルコキシ−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えばメトキシエチル、メルカプト（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルメルカプト−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、カルボキサミド（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えば−ＣＨ₂ＣＯＮＨ₂、アミノスルホニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えば−ＣＨ₂ＳＯ₂ＮＨ₂、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアミノスルホニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えば−ＣＨ₂ＳＯ₂ＮＨＭｅ、（Ｃ₁−Ｃ₃）ジアルキルアミノスルホニル−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えば−ＣＨ₂ＳＯ₂ＮＭｅ₂、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルカノイル、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルスルホニル、アミノスルホニル（−ＳＯ₂ＮＨ₂）、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルアミノスルホニル、例えば−ＳＯ₂ＮＨＭｅ、（Ｃ₁−Ｃ₆）ジアルキルアミノスルホニル、例えば−ＳＯ₂ＮＭｅ₂、任意に置換されていてもよいフェニルアミノスルホニル、カルボキシアミド（−ＣＯＮＨ₂）、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルアミノカルボニル、（Ｃ₁−Ｃ₆）ジアルキルアミノカルボニル、モルホリニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、イミダゾリル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、トリアゾリル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、またはイミダゾリル、トリアゾリルもしくはヘテロサイクリル環において任意に置換されていてもよい単環式複素環式アルキル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、例えばピペリジニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、ピペラジニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルもしくは４−（（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル）ピペラジニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル。

用語「天然または非天然のアルファ−アミノ酸の側鎖」は、式ＮＨ₂−ＣＨ（Ｒ¹）−ＣＯＯＨの天然または非天然のアミノ酸の基Ｒ¹をいう。

天然のアルファ−アミノ酸の側鎖の例は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、ヒスチジン、５−ヒドロキシリシン、４−ヒドロキシプロリン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、ａ−アミノアジピン酸、α−アミノ−ｎ−酪酸、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、ホモセリン、β−メチルセリン、オルニチン、ピペコリン酸およびチロキシンのものを含む。

特徴的な側鎖に、官能性の置換基、例えばアミノ、カルボキシ、ヒドロキシ、メルカプト、グアニジル、イミダゾリル、またはインドリル基を含む天然のアルファ−アミノ酸は、アルギニン、リシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、トリプトファン、ヒスチジン、セリン、トレオニン、チロシンおよびシステインを含む。本発明の化合物類中のＲ₂がこれらの側鎖の１つであるとき、官能性の置換基は任意に保護されていてもよい。

用語「保護された」は、天然のアルファ−アミノ酸の側鎖中の官能性の置換基に関連して用いられるとき、実質的には非官能性であるそのような置換基の誘導体を意味する。例えば、カルボキシ基はエステル化されていてもよく（例えば（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルエステルのように）、アミノ基はアミド（例えばＮＨＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルアミドのように）、またはカルバメート（例えば、ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルまたはＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂Ｐｈカルバメートのように）に変換されていてもよく、ヒドロキシ基はエーテル（例えばＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルまたはＯ（（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル）フェニルエーテル）またはエステル（例えばＯＣ（＝Ｏ）（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルエステル）に変換されていてもよく、またチオール基はチオエーテル（例えばｔｅｒｔ−ブチルまたはベンジルチオエーテル）またはチオエステル（例えばＳＣ（＝Ｏ）（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルチオエステル）に変換されていてもよい。

非天然のアルファ−アミノ酸の側鎖の例は、本発明の化合物類中で用いられる好適なＲ₂およびＲ₃基の考察中で、以下に言及される側鎖が含まれる。

本発明の化合物類は、非限定的に、シス−およびトランス−の形態、Ｅ−およびＺ−の形態、Ｒ−、Ｓ−およびメソ−の形態、ケト−ならびにエノールの形態を含む、１以上の幾何学的、光学的、エナンチオマー、ジアステレオマーおよび互変異性の形態で存在してもよい。その他の記載がなければ、特定の化合物の関連には、ラセミおよびそれらの他の混合物を含む、すべてのそのような異性体の形態を含む。

適当なときには、そのような異性体をそれらの混合物から公知の方法の適用または適合により分離するこができる（例えば、クロマト技術および再結晶技術）。適当なときには、そのような異性体を公知の方法の適用または適合により調製してもよい（例えば、不斉合成）。

ここで用いられている用語「塩」は、塩基付加物、酸付加物およびアンモニウムの塩類を含む。前で簡単に述べたように、酸性である本発明の化合物類は、水酸化アルカリ金属、例えば水酸化ナトリウムおよびカリウム；水酸化アルカリ土類金属、例えば水酸化カルシウム、バリウムおよびマグネシウムのような塩基と；有機塩基、例えば、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、コリントリス（ヒドロキシメチル）アミノ−メタン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−リシン、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミン等と、医薬的に許容な塩類を含む、塩類を形成することができる。

塩基性である本発明の化合物類は無機酸と、例えば塩酸または臭化水素酸のようなハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸等と、ならびに有機酸と、例えば酢酸、トリフルオロ酢酸、酒石酸、琥珀酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、安息香酸、ベンゼンスルホン酸、グルタミン酸、乳酸およびマンデル酸等と、医薬的に許容な塩類を含む、塩類を形成することができる。

塩基性の窒素を有する化合物（Ｉ）類は、クロライド、ブロマイド、アセテート、ホルメート、ｐ−トルエンスルホネート、スクシネート、ヘミ−スクシネート、ナフタレンビススルホネート、メタンスルホネート、トリフルオロ酢酸塩、キシナホエート等のような医薬的に許容なカウンターイオンとの四級アンモニウム塩を形成することもできる。塩の総説については、StahlおよびWermuthによるHandbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)を参照。

本発明の化合物類は、水和物類または溶媒和物類の形態で製造され得ることが予測される。本請求項を含む、ここでの「本発明に係る化合物類」、「本発明の化合物類」、「本化合物類」等のあらゆる言及は、そのような化合物の塩類、水和物類および溶媒和物類の言及を含む。

用語「溶媒和物」は、ここでは、本発明の化合物および化学量論的な量の１以上の医薬的に許容な溶媒分子、例えばエタノールを含む、分子複合体を指すのに用いられる。用語「水和物」は前記の溶媒が水であるときに用いられる。

本発明の個々の化合物は、非晶質の形態および／または多形の形態で存在してもよく、異なった晶癖で得られてもよい。本請求項を含む、ここでの「本発明に係る化合物類」、「本発明の化合物類」、「本化合物類」等のあらゆる言及は、非晶質または多形の形態と関係のない化合物の言及を含む。

芳香環中に窒素原子を有するいくつかの本発明の化合物類はＮ−オキサイド類を形成してもよく、本発明はＮ−オキサイドの形態の本発明の化合物を含む。

前記のように、本発明のエステルは、主として、細胞内のエステラーゼにより対応するカルボン酸に変換されるプロドラッグである。しかしながら、それらが加水分解されないままである間、前記エステルはそれら自身でＨＤＡＣ阻害活性を有してもよい。本発明の化合物類は、エステルだけでなく対応するカルボン酸の加水分解物も含むが、患者への投与が意図されるのはエステルである。

本発明の化合物類において、任意の適合可能な組み合わせで、６００未満の分子量を有する化合物が好ましいことを念頭に置く本発明の化合物類は、以下のとおりである。

ヒドロキサメート基−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ
本発明の化合物類において、ヒドロキサメート基は、折り畳まれた酵素の構造内のポケットの底に存在するＨＤＡＣ酵素の活性部位で、金属イオンと相互に作用する金属結合基として機能する。

Ａ、ＢおよびＤを含む環
Ａ、ＢおよびＤはそれぞれ−ＣＨ＝であってもよく、またはＡ、ＢおよびＤの少なくとも１つが−Ｎ＝であってもよい。例えばＡは−ＣＨ＝であってよく、またはＢおよびＤがそれぞれ−Ｎ＝であってもよい。多くの実施態様において、Ａ、ＢおよびＤのそれぞれが−ＣＨ＝であるか、あるいはＡおよびＤのそれぞれが−ＣＨ＝であり、他方のＢが−Ｎ＝である。

基−Ｙ−Ｌ¹−Ｘ¹−[ＣＨ₂]_z−
Ｌ¹は、次のものから選択され得る：
（ｉ）結合手；

（ｉｉ）−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）₂−、−ＮＲ¹⁰−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ¹⁰−、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ¹⁰−、−ＮＲ¹⁰Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ¹⁰Ｓ（＝Ｏ）₂−、−ＮＲ¹⁰（ＣＨ₂）_m−、−ＮＲ¹⁰Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_m−、−ＮＲ¹⁰Ｓ（＝Ｏ）₂（ＣＨ₂）_m−、−ＮＲ²⁰Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ¹⁰−、−ＮＲ¹⁰Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ₂）_mＡｒ−または−ＮＲ¹⁰Ｓ（＝Ｏ）₂（ＣＨ₂）_mＡｒ−（ここで、Ｒ¹⁰および²⁰は独立して、水素、（Ｃ₁−Ｃ₄）アルキルまたは窒素置換基であり、ｍは０、１、２または３であり、Ａｒは２価のフェニル基または５−１３員環の単環式もしくは２環式ヘテロアリール基である）；および

（ｉｉｉ）エーテル（−Ｏ−）、チオエーテル（−Ｓ−）あるいはアミノ（−ＮＲ^A−）結合（ここで、Ｒ^Aは水素、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルまたは窒素置換基である）を任意に含んでいてもよく、あるいは末端としていてもよい、任意に置換されていてもよい、直鎖状または分枝鎖状の、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニレンもしくは（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニレン基；

基Ｌ¹において、存在するとき、Ａｌｋ¹およびＡｌｋ²は、例えば−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ₂Ｏ−、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−ならびに２価のシクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル基から選択されてもよい。

基Ｌ¹において、Ｑ¹は例えば１，４−フェニレンであってもよい。

基Ｌ¹において、ｍおよびｐは共に０であるか、またはｎおよびｐは０であってもよく、他方のｍは１であるか、あるいはｍ、ｎおよびｐはすべて０であってもよい。

Ｘ¹は、例えば−ＮＲ₃−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₃−、−ＮＲ₃Ｃ（＝Ｏ）−または−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−であってもよい（ここで、Ｒ₃は水素、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルもしくは窒素置換基、またはその他の場合、結合手である）。

基Ｌ¹において、存在するとき、Ａｌｋ¹およびＡｌｋ²は、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−ならびに２価のシクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル基から選択され得る。

基Ｌ¹において、Ｑ¹は、例えば２価のフェニル基または１，４−フェニレンのような５−１３員環の単環式または２環式ヘテロアリール基であってもよい。

基−Ｌ¹−Ｘ¹−[ＣＨ₂]_z−の具体例は、−（ＣＨ₂）₃ＮＨ−、−ＣＨ₂Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ₂Ｓ−、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ₂）₄ＮＨ−、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｓ−、−ＣＨ₂Ｏ、−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−、：
である。

基−Ｙ−Ｌ¹−Ｘ¹−[ＣＨ₂]_z−の具体例は、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−（ＣＨ₂）_v−、−（ＣＨ₂）_vＯ−、−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ₂）_v−、−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ₂）_vＯ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ₂）_w−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ₂）_wＯ−、：
（ここで、ｖは１、２、３または４であり、ｗは１、２または３である）
である。

これらの中で、好ましい基−Ｙ−Ｌ¹−Ｘ¹−[ＣＨ₂]_z−は、−ＣＨ₂−および−ＣＨ₂Ｏ−であり、最も好ましくは−ＣＨ₂−である。

基Ｒ₁
Ｒ₁がカルボン酸基である本発明の化合物類は、対応する本発明のエステルの細胞内加水分解生成物である。そのようなカルボン酸はＨＤＡＣ阻害活性を有するにもかかわらず、それらが、細胞中で、Ｒ₁がエステル基である対応する化合物の投与後、細胞内のエステラーゼの作用により生成されることが好ましい。

エステル基Ｒ₁は、本発明の化合物において、１以上の細胞内カルボキシエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るものでなければならない。

本発明の化合物のエステル基を対応する酸に加水分解し得る細胞内カルボキシエステラーゼ酵素は、３つの公知のヒト酵素のアイソタイプ、ｈＣＥ−１、ｈＣＥ−２およびｈＣＥ−３を含む。これらは主要な酵素であると考えられているが、ビフェニルハイドロラーゼ（ＢＰＨ）のようなその他の酵素も、エステルを加水分解する役割を有している。

一般に、カルボキシエステラーゼが遊離アミノ酸エステルを親化合物の酸に加水分解すれば、阻害剤に共有結合しているときの前記エステルのモチーフも加水分解するであろう。従って、本明細書に記載の破壊細胞の分析および／または単離したカルボキシエステラーゼの分析は、必要とされる加水分解プロフィルを有するエステルのための直接的で、速やかで、簡単な第一のスクリーンを提供する。

次いでそのようにして選択されるエステルのモチーフは、選択された共役化学を介して、阻害剤にコンジュゲートされたとき、それがまだその背景にあるカルボキシエステラーゼの基質であることを確認するため、同じカルボキシエステラーゼの分析で再評価され得る。

細胞内カルボキシエステラーゼにより加水分解され得るエステルは、国際特許出願ＷＯ２００６／１１７５６７、ＷＯ２００６／１１７５４９、ＷＯ２００６／１１７５４８、ＷＯ２００６／１１７５７０、ＷＯ２００６／１１７５５２、ＷＯ２００７／１２９０３６、ＷＯ２００７／１２９０２０、ＷＯ２００７／１３２１４６、ＷＯ２００７／１２９０４０、ＷＯ２００７／１２９０４８、ＷＯ２００７／１２９００５、ＷＯ２００８／０４０９３４、ＷＯ２００８／０５００９６、ＷＯ２００８／０５００７８、ＷＯ２００８／５３１３１、ＷＯ２００８／０５３１５７、ＷＯ２００８／０５３１８５、ＷＯ２００８／０５３１８２、ＷＯ２００８／０５３１５８、ＷＯ２００８／０５３１３６、ＷＯ２００９／０６０１６０、ＷＯ２００９／１０６８４８、ＷＯ２００９／１０６８４４、およびＷＯ２００９／１３０４５３において調製される化合物中に存在するエステル基を含む。

それらが細胞内カルボキシエステラーゼ酵素により加水分解され得ることを要件とすると、具体的なエステル基Ｒ₁の例は、式−（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ₁₂のものを含む：

[式中、Ｒ₁₂は、Ｒ₇Ｒ₈ＣＲ₉−｛ここで、
（ｉ）Ｒ₇は水素、または任意に置換されていてもよい、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−（Ｚ¹）_a−[（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル]_b−または（Ｃ₂−Ｃ₃）アルケニル−（Ｚ¹）_a−[（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル]_b−（ここで、ａおよびｂは独立して０または１であり、Ｚ¹は−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＲ₁₃−（ここで、Ｒ₁₃は水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルである）である）であり；Ｒ₈およびＲ₉は、独立して水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−であるか；

（ｉｉ）Ｒ₇は水素、または任意に置換されていてもよいＲ₁₄Ｒ₁₅Ｎ−（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−（ここで、Ｒ₁₄は水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルであり、Ｒ₁₅は水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルであるか；またはＲ₁₄およびＲ₁₅はそれらが結合している窒素と一緒になって、任意に置換されていてもよい、５もしくは６の環原子の単環式複素環、または８−１０の環原子の２環式複素環系を形成する）であり、Ｒ₈およびＲ₉は独立して水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−であるか；あるいは

（ｉｉｉ）Ｒ₇およびＲ₈はそれらが結合している炭素と一緒になって、任意に置換されていてもよい、３−７の環原子の単環式炭素環または８−１０の環原子の２環式炭素環系、あるいは７−１０の環原子の架橋単環式炭素環系を形成し、Ｒ₉は水素である｝である]。

前記（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の場合、「アルキル」はフルオロアルキルを含む。

これらのクラス（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）内で、Ｒ₉はしばしば水素である。Ｒ₁₂の具体例は、メチル、トリフルオロメチル、エチル、ｎ−もしくはイソ−プロピル、ｎ−、ｓｅｃ−もしくはｔｅｒｔ−ブチル、シクロペンチル、メチル置換シクロペンチル、シクロヘキシル、アリル、ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル、フェニル、ベンジル、２−、３−もしくは４−ピリジルメチル、Ｎ−メチルピペリジン−４−イル、テトラヒドロフラン−３−イルまたはメトキシエチルを含む。今のところ、Ｒ₁₂はシクロペンチルであることが好ましい。

マクロファージが、サイトカイン、特にＴＮＦαおよびＩＬ−１の放出を介して炎症性疾患で鍵となる役割を演ずることは公知である（van Roonら Arthritis and Rheumatism, 2003, 1229-1238）。リウマチ性関節炎では、それらは関節炎および関節破壊の維持の主要な一因である。

マクロファージは、腫瘍の成長および発達にも関与する（Naldini and Carraro Curr Drug Targets Inflamm Allergy, 2005, 3-8）。従って、マクロファージ細胞の増殖を選択的に標的とする作用物質は、癌および自己免疫性疾患の治療において価値を有し得る。特異な細胞のタイプを標的とすることは、低減された副作用に到ることが期待される。

マクロファージが、その他の細胞のタイプは含まない、ヒトカルボキシエステラーゼｈＣＥ−１を含むことが見出されている。

一般式（Ｉ）において、エステラーゼのモチーフであるＲ₁Ｃ（Ｒ₂）（Ｒ₃）ＮＨ−の窒素がカルボニル（−Ｃ（＝Ｏ）−）に直接結合していないとき、すなわちＹが−Ｃ（＝Ｏ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₃−基でないとき、エステルはｈＣＥ−１によってのみで加水分解されるであろう、その結果、阻害剤はマクロファージにのみに蓄積するであろう。

ここで、「単球」または「単球類」が特定されなければ、用語マクロファージまたはマクロファージ類は（腫瘍に関連するマクロファージ類を含む）マクロファージ類および／または単球類を示すのに用いられる。

置換基Ｒ₂およびＲ₃
置換基Ｒ₂およびＲ₃は、α，α−２置換グリシンまたはα，α−２置換グリシンエステルのα−置換基として見なされ得る。それ故、これらの置換基は、グリシン以外の天然または非天然アルファ-アミノ酸の側鎖から選択され、そのような側鎖においてあらゆる官能基は保護され得る。

グリシン以外の天然および非天然のアルファ−アミノ酸の側鎖の例は、国際特許出願ＷＯ２００６／１１７５６７、ＷＯ２００６／１１７５４９、ＷＯ２００６／１１７５４８、ＷＯ２００６／１１７５７０、ＷＯ２００６／１１７５５２、ＷＯ２００７／１２９０３６、ＷＯ２００７／１２９０２０、ＷＯ２００７／１３２１４６、ＷＯ２００７／１２９０４０、ＷＯ２００７／１２９０４８、ＷＯ２００７／１２９００５、ＷＯ２００８／０４０９３４、ＷＯ２００８／０５００９６、ＷＯ２００８／０５００７８、ＷＯ２００８／５３１３１、ＷＯ２００８／０５３１５７、ＷＯ２００８／０５３１８５、ＷＯ２００８／０５３１８２、ＷＯ２００８／０５３１５８、ＷＯ２００８／０５３１３６、ＷＯ２００９／０６０１６０、ＷＯ２００９／１０６８４８、ＷＯ２００９／１０６８４４、およびＷＯ２００９／１３０４５３において調製される化合物中の、様々な酵素阻害剤にコンジュゲートしたアルファ−アミノ酸のものを含む。

Ｒ₂およびＲ₃の例は、フェニル、および式−ＣＲ_aＲ_bＲ_cの群を含む：

ここで、Ｒ_a、Ｒ_bおよびＲ_cはそれぞれ独立して、水素、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₃−Ｃ₈）シクロアルキルであるか；または、

Ｒ_cは水素であり、Ｒ_aおよびＲ_bは独立してフェニルもしくはピリジルのようなヘテロアリールであるか；または、

Ｒ_cは水素、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルもしくは（Ｃ₃−Ｃ₈）シクロアルキルであり、Ｒ_aおよびＲ_bはそれらが結合する炭素原子と一緒になって、３−８員のシクロアルキルまたは５−６員の複素環式環を形成するか；または、

Ｒ_a、Ｒ_bおよびＲ_cはそれらが結合している炭素原子と一緒になって、３環式の環（例えば、アダマンチル）を形成するか；または、

Ｒ_aおよびＲ_bは、それぞれ独立して、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、またはＲ_cについて以下で定義される水素以外の基であるか、またはＲ_aおよびＲ_bはそれらが結合する炭素原子と一緒になって、シクロアルキル環もしくは複素環を形成し、Ｒ_cは水素、−ＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯ₂Ｈ、（Ｃ₁−Ｃ₄）パーフルオロアルキル、−ＣＨ₂ＯＨ、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｏ（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、−Ｓ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＳＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＳＯ₂（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｓ（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、−ＳＯ（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、−ＳＯ₂（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニルまたは基−Ｑ−Ｗ（ここで、Ｑは結合手または−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−もしくは−ＳＯ₂−を表し、Ｗはフェニル、フェニルアルキル、（Ｃ₃−Ｃ₈）シクロアルキル、（Ｃ₃−Ｃ₈）シクロアルキルアルキル、（Ｃ₄−Ｃ₈）シクロアルケニル、（Ｃ₄−Ｃ₈）シクロアルケニルアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基を表し、基Ｗはヒドロキシ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯＮＨ₂、−ＣＯＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＣＯＮＨ（（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル）₂、−ＣＨＯ、−ＣＨ₂ＯＨ、（Ｃ₁−Ｃ₄）パーフルオロアルキル、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｓ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＳＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＳＯ₂（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＮＯ₂、−ＮＨ₂、−ＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｎ(（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル)₂、−ＮＨＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、（Ｃ₃−Ｃ₈）シクロアルキル、（Ｃ₄−Ｃ₈）シクロアルケニル、フェニルまたはベンジルから独立して選択される１以上の置換基により任意に置換されていてもよい）である。

あるいは、置換基Ｒ₂およびＲ₃は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルもしくはシクロヘキシル環のような３〜６員の飽和スピロシクロアルキル環、またはピペリジン−４−イル環のようなスピロヘテロサイクリル環を形成し得る。

ある場合に、置換基Ｒ₂およびＲ₃の少なくとも１つは（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル置換基、例えばメチル、エチルまたはｎ−もしくはイソ−プロピルである。

いくつかの実施形態において、置換基Ｒ₂およびＲ₃の一方は（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル置換基、例えばメチル、エチルまたはｎ−もしくはイソ-プロピルであり、他方はメチル、エチル、ｎ−およびイソ-プロピル、ｎ−、ｓｅｃ−およびｔｅｒｔ−ブチル、フェニル、ベンジル、チエニル、シクロヘキシルならびにシクロヘキシルメチルからなる群から選択される。

特定の事例において、置換基Ｒ₂およびＲ₃の一方はメチルであり、他方はメチルまたはベンジルである。その他の特定の事例において、Ｒ₂およびＲ₃は、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルもしくはシクロヘキシル環を形成する。

全身に投与される本発明の化合物類については、それらが前全身性の代謝に影響されにくいため、カルボキシエステラーゼの開裂速度の遅いエステルが好ましい。従って、標的組織に無傷で達するそれらの性能は増加され、エステルは標的組織の細胞内で酸物質に変換され得る。

しかしながら、エステルが直接的に標的組織に適用されるか、または例えば吸引によりそこへ向けられる局所投与については、全身への暴露およびその結果として起こる好ましくない副作用を低減するため、エステルはエステラーゼの開裂速度の速いことが望ましいこともある。

この発明の化合物において、アルファアミノ酸エステルのアルファ炭素に隣接する炭素が１置換されている、すなわちＲ₂がＣＨ₂Ｒ^z（Ｒ^zはモノ置換基である）である場合、前記エステルはＲ₂が例えばフェニルまたはシクロヘキシルである場合のように、前記炭素が２または３置換されている場合より、さらに速く開裂する傾向がある。

本発明の化合物類の１つの下位集合は、式（ＩＡ）：
（式中、Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は前記で定義され、さらに考察されたとおりである）
を有する。

本発明の化合物類のもう１つの下位集合は、式（ＩＢ）：
（式中、Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は前記で定義され、さらに考察されたとおりである）
を有する。

本発明の化合物類のさらにもう１つの下位集合は、式（ＩＣ）：
（式中、Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は前記で定義され、さらに考察されたとおりである）
を有する。

本発明の化合物類のさらにもう１つの下位集合は、式（ＩＤ）：
（式中、Ｒ₁、Ｒ₂およびＲ₃は前記で定義され、さらに考察されたとおりである）
を有する。

本発明の化合物類の現在の好ましい下位集合は、式（ＩＥ）：

（式中、Ｒ₁、ＷおよびＢは請求項１で定義されたとおりであり、Ｒ₂およびＲ₃の一方がメチルであり、他方がメチル、エチル、ｎ−もしくはイソ−プロピル、ベンジル、またはｎ、ｓｅｃもしくはｔｅｒｔブチルであるか；またはＲ₂およびＲ₃がそれらが結合する炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル環を形成する）
を有する。

この下位集合において、Ｒ₁が式Ｒ₁₂ＯＣ（＝Ｏ）−のエステル基（ここで、Ｒ₁₂はシクロペンチルである）である化合物がしばしば好ましい。また、この下位クラスにおいて、Ｗが−ＣＨ＝ＣＨ−である化合物もしばしば好ましい。

前記の各下位集合（１Ａ）−（１Ｅ）において、Ｒ₁が式（Ｉ）について定義され、議論されたようなエステル基である化合物が、エステルとして細胞に入り、対応する酸に細胞内で加水分解されるため、患者への投与のための化合物として好ましい。

本発明の具体的な化合物類は、塩の形態であるかどうかを問わず、実施例の化合物を含む。

有用性
前記のように、本発明に係る化合物類はＨＤＡＣ活性の阻害のために使用される。ＨＤＡＣ活性の阻害は、（単球細胞系統の悪性腫瘍、例えば若年性骨髄単球性白血病を含む）癌および乾癬のような細胞増殖疾患、ハンティントン病のようなポリグルタミン病、アルツハイマー病のような神経変性疾患、（全身性若年性特発性関節炎を含む）慢性関節リウマチのような自己免疫性疾患、糖尿病、血液病、炎症性の疾患、心疾患、アテローム性動脈硬化症、原発性胆汁性肝硬変、ウェグナー肉芽腫症および感染症の炎症性後遺症を含む様々な疾患の治療のメカニズムである。

自己免疫性疾患はしばしば炎症性要素を有する。そのような病状は、急性播種性全身脱毛症、ＡＮＣＡの陽性の疾患、ベーチェット病、シャーガス病、慢性疲労症候群、自律神経障害、脳脊髄炎、強直性脊椎炎、再生不良性貧血、汗腺膿瘍、自己免疫性肝炎、自己免疫性卵巣炎、セリアック病、炎症性腸疾患、クローン病、１型の糖尿病、ファンコーニ症候群、巨細胞性動脈炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン‐バレー症候群、橋本病、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、川崎病、全身性紅斑性狼瘡、微視的な大腸炎、微視的な多発動脈炎、混合性結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、眼球クローヌスのミオクローヌス症候群、視神経炎、オードの甲状腺炎（Ord's thyroiditis）、天疱瘡、結節性多発動脈炎、多筋痛、慢性関節リウマチ、ライター症候群、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、ヴェグナー肉芽腫症、温式自己免疫性溶血性貧血、間質性膀胱炎、ライム病、限局性強皮症、乾癬、サルコイドーシス、強皮症、潰瘍性大腸炎および白斑を含む。

本発明の化合物類により治療されるその他の炎症性の病状は、例えば、虫垂炎、皮膚炎、皮膚筋炎、心内膜炎、結合組織炎、歯肉炎、舌炎、肝炎、汗腺膿瘍、虹彩炎、喉頭炎、乳腺炎、心筋炎、腎炎、耳炎、膵炎、耳下腺炎、心膜炎、腹膜炎、咽頭炎、胸膜炎、肺炎、前立腺炎、腎盂腎炎、および口内炎、（腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓（例えば、島細胞）、骨髄、角膜、小腸、皮膚の同種移植片、皮膚の同種移植、および心臓弁異種移植のような器官、血清病、ならびに対宿主性移植片病を含む）移植拒絶、急性膵炎、慢性膵炎、急性呼吸促迫症候群、セクサリー症候群（Sexary's syndrome）、先天性副腎性過形成、非化膿性甲状腺炎、癌に関連する高カルシウム血症、天疱瘡、水疱性の疱疹状皮膚炎、重篤な多形紅斑、剥脱性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、季節性または通年性のアレルギー性鼻炎、気管支ぜん息、接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、薬剤過敏症反応、アレルギー結膜炎、角膜炎、眼部帯状疱疹、虹彩炎およびオイリドシクリティス（oiridocyclitis）、脈絡網膜炎、視神経炎、症候性サルコイドーシス、激症または播種性の肺結核化学療法、成人の特発性血小板減少性紫斑病、成人の続発性血小板減少症、後天性の（自己免疫性）溶血性貧血症、成人の白血病およびリンパ種、小児の急性白血病、限局性腸炎、自己免疫性脈管炎、多発性硬化症、慢性閉塞性肺疾患、実質臓器移植拒絶（solid organ transplant rejection）、敗血症、原発性胆汁性肝硬変ならびに原発性硬化性胆管炎を含む。

本発明の化合物類を使用する好ましい治療は、移植拒絶、慢性関節リウマチ、乾癬性関節炎、１型の糖尿病、ぜん息、炎症性腸疾患、全身性紅斑性狼瘡、および感染状態を伴う炎症（例えば、敗血症）、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、慢性閉塞性肺疾患、多発性硬化症、アトピー性皮膚炎ならびに対宿主性移植片病を含む。

本発明の化合物類のもう１つの好ましい使用は癌の治療においてである。

個々の患者に対する服用レベルは、用いられる特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食習慣、投与時間、投与経路、排泄速度、医薬の組合せおよび治療を受ける個々の疾患の重篤度を含む様々な要素に依存することが理解されるであろう。最適な服用レベルおよび服用頻度は、臨床試験により決定される。しかしながら、典型的な服用量は、体重のｋｇ当たり、約０．００１−５０ｍｇの範囲内であることが予測される。

本発明に係る化合物類は、それらの薬物動態学的特性と整合性がとれたいずれかの経路による投与のために調製され得る。経口投与可能な組成物は、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、トローチ剤、経口、局所もしくは無菌の非経口用の溶液もしくは懸濁液のような液体またはゲル製剤の形態であってもよい。

経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単回服用形態であってよく、結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガントまたはポリビニルピロリドン；充填剤、例えば乳糖、砂糖、とうもろこし澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン；錠剤用滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えば馬鈴薯澱粉、またはラウリル硫酸ナトリウムのような許容される湿潤剤のような通常の賦形剤を含んでいてもよい。錠剤は通常の医薬的な実務でよく知られる方法によりコーティングされていてもよい。

経口用の液体製剤は、例えば水性もしくは油性の懸濁液、溶液、乳液、シロップまたはエリキシル剤の形態であるか、または使用前に水またはその他の適切な媒体で再調製するための乾燥製品として提供される。

そのような液体製剤は、懸濁化剤、例えばソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、硬化食用油脂；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレエートまたはアカシア；非水性媒体（食用オイルを含んでいてもよい）、例えばアーモンド油、分別ヤシ油、グリセリンのような油性エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；防腐剤、例えばメチルもしくはプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルまたはソルビン酸、および所望により風味剤または着色剤のような通常の添加剤を含んでいてもよい。

皮膚への局所的な適用のため、医薬はクリーム、ローションまたは軟膏に調製されてもよい。医薬のために用いられ得るクリームまたは軟膏製剤は、例えば英国薬局方のような調剤学の標準的な教科書に記載の、当技術分野においてよく知られる通常の製剤である。

吸入による局所的な適用のため、医薬は例えば加圧式ジェット噴霧器もしくは超音波噴霧器によるか、あるいは好ましくは加圧ガス式定量エアゾル、または微粉末の非加圧ガス式投与、例えば吸入用カプセル剤またはその他の「乾燥粉末製剤」の投与システムによるエアゾル送達用に調製されてもよい。

例えば加圧ガス（例えば、定量エアゾルの場合のフリゲン）のような賦形剤、界面活性物質、乳化剤、安定化剤、防腐剤、風味剤および充填剤（例えば、粉末吸入の場合の乳糖）が、そのような吸入製剤に存在していてもよい。吸入目的のため、患者にとって適当な吸入技術を用い、最適な粒子経のエアロゾルが生成され、投与され得る多数の器具が入手可能である。

定量エアゾルのため、特に粉末吸入器の場合、アダプター（スペーサー、エクスパンダー）および洋梨型の容器（例えば、ネブレイター（Ｎｅｂｕｌａｔｏｒ（商標））、ヴォルマティック（Ｖｏｌｕｍａｔｉｃ（商標）））ならびにパファスプレーを放出する自動器具（オートヘイラー（Ａｕｔｏｈａｌｅｒ（商標）））の使用に加えて、多くの技術的な解決法が利用可能である（例えば、ディスクヘイラー（Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（商標））、ロタディスク（Ｒｏｔａｄｉｓｋ（商標））、ターボヘイラー（Ｔｕｒｂｏｈａｌｅｒ（商標））または、例えば欧州特許出願ＥＰ０５０５３２１に記載の吸入器）。

眼への局所的適用のため、医薬は適切な無菌の水性媒体または非水性媒体中の溶液または懸濁液に調製されてもよい。添加剤、例えばメタ重亜硫酸ナトリウムまたはエデト酸２ナトリウムのような緩衝剤；酢酸フェニル水銀もしくは硝酸フェニル水銀、塩化ベンザルコニウムまたはクロルヘキシジンのような殺菌剤ならびに防かび剤を含む防腐剤、およびハイプロメロース（hypromellose）のような増粘剤も含まれ得る。

無菌の媒体中の有効成分は非経口でも投与され得る。用いられる媒体および濃度により、薬剤は媒体中に懸濁または溶解され得る。有利には、局所麻酔剤、防腐剤および緩衝剤のようなアジュバントが媒体中に溶解され得る。

本発明の化合物類は、例えば、以下に記載のおよび本願実施例の方法によって製造されてもよい。

合成
本発明に係る化合物（Ｉ）を合成するために、複数の合成戦略があるが、全て有機合成化学者に知られた、公知の化学に基づくものである。従って、式（Ｉ）による化合物を標準的な文献に記載され、当業者によく知られた手順に従って合成することができる。

典型的な文献のソースは、「Advanced organic chemistry」,第４版(Wiley),J March；「Comprehensive Organic Transformation」,第２版(Wiley),R.C.Larock；「Handbook of
Heterocyclic Chemistry」,第２版(Pergamon),A.R.Katritzky；「Synthesis」,「Acc.Chem.Res」,「Chem.Rev」で見られるような総論あるいは標準的な文献の検索オンラインにより、または「Chemical Abstracts」もしくは「Beilstein」のような第２のソースから特定される第１の文献のソースである。以下の実施例の化合物の製造で用いられる合成経路は、類似する化合物の製造に適用され得る。

略語
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＥｔＯＨ＝エタノール
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
Ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル
ＤＣＭ＝ジクロロメタン

ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
ＤＣＥ＝１，２−ジクロロエタン
ＴＭＳＯＫ＝カリウムトリメチルシラノシド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキサイド
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸

ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
Ｎａ₂ＣＯ₃＝炭酸ナトリウム
Ｋ₂ＣＯ₃＝炭酸カリウム
ＨＣｌ＝塩酸
ａｑ＝水溶液

ｓａｔ＝飽和の
ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＮａＨ＝水素化ナトリウム
ＮａＯＨ＝水酸化ナトリウム
ＳＴＡＢ＝トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム

ＮａＣＮＢＨ₃＝シアノ水素化ホウ素ナトリウム
ＮａＨＣＯ₃＝炭酸水素ナトリウム
Ｐｄ／Ｃ＝パラジウム炭素
ＴＢＭＥ＝ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル
ＴＰＡＰ＝過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム

（ＣＯＣｌ）₂＝塩化オキサリル
Ｎ₂＝窒素
ＰｙＢｏｐ＝ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｎａ₂ＳＯ₄＝硫酸ナトリウム
Ｅｔ₃Ｎ＝トリエチルアミン

ＮＨ₃＝アンモニア
ＴＭＳＣｌ＝トリメチルクロロシラン
ＮＨ₄Ｃｌ＝塩化アンモニウム
ＬｉＡｌＨ₄＝水素化リチウムアルミニウム
ＰｙＢｒＯＰ＝ブロモ−トリス−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート

ＭｇＳＯ₄＝硫酸マグネシウム
ⁿＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム
ＣＯ₂＝二酸化炭素
ＥＤＣＩ＝Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩
Ｅｔ₂Ｏ＝ジエチルエーテル

ＬｉＯＨ＝水酸化リチウム
ＨＯＢｔ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィ
ＬＣＭＳ＝液体クロマトグラフィ／質量分析
ｍＬ＝ミリリットル(s)

ｇ＝グラム(s)
ｍｇ＝ミリグラム(s)
ｍｏｌ＝モル(s)
ｍｍｏｌ＝ミリモル(s)
ＨＰＬＣ＝高性能液体クロマトグラフィ

ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ＲＴ＝室温
ｈ＝時間（ｓ）

市販の試薬および溶媒(ＨＰＬＣグレード)はさらに精製を行わずに用いた。溶媒は、Ｂｕｃｈｉロータリーエバポレータを用いて除去した。マイクロ波照射は、ＢｉｏｔａｇｅＩｎｉｔｉａｔｏｒ(商標) Ｅｉｇｈｔｍｉｃｒｏｗａｖｅｓｙｎｔｈｅｔｉｓｅｒを用いて行った。フラッシュカラムクロマトグラフィによる化合物の精製は、Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍから入手した粒子サイズ４０−６３μｍ（２３０−４００メッシュ）のシリカゲルを用いて行った。

逆相カラムクロマトグラフィは、ＲｅｄｉＳｅｐＲｆＣ１８カラム（Ｐｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ，ＵＫ）を用いるＣｏｍｂｉＦｌａｓｈＣｏｍｐａｎｉｏｎ（ＴｅｌｅｄｙｎｅＩｓｃｏ，Ｎｅｂｒａｓｋａ，ＵＳＡ）での精製の前に、ＭｅｒｃｋｌｉＣｈｒｏｐｒｅｐＲＰ−１８（４０−６０μＭ）のプレカラムを用いて行った。

分取ＨＰＬＣによる化合物の精製は、逆相Ａｘｉａ(商標) ｐｒｅｐＬｕｎａＣ１８カラム（１０μｍｕ、１００×２１．２ｍｍ）、１０分にわたる勾配０〜１００％Ｂ(Ａ＝水／０．０５％ＴＦＡ、Ｂ＝アセトニトリル／０．０５％ＴＦＡ)、流速＝２５ｍｌ／分、２５４ｎｍでのＵＶ検出を用いるＧｉｌｓｏｎシステムで行った。

¹ＨＮＭＲスペクトルは、重水素化溶媒中でのＢｒｕｋｅｒ３００ＭＨｚＡＶ分光計で記録した。ケミカルシフト（δ）（δ）は百万分率である。薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）分析は、Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ６０Ｆ₂₅₄（Ｍｅｒｃｋ）プレートで行い、ＵＶ光を用いて視覚化した。

分析ＨＰＬＣ／ＭＳは、逆相ＬｕｎａＣ１８カラム(３μｍ、５０×４．６ｍｍ)、２．２５分間にわたる勾配５−９５％Ｂ(Ａ＝水／０．１％ギ酸、Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ギ酸)、流速=２．２５ｍｌ／分を用いるＡｇｉｌｅｎｔＨＰ１１００ＬＣシステムで行った。

ＵＶスペクトルは、Ｇ１３１５ＢＤＡＤ検出器を用いて２２０ｎｍおよび２５４ｎｍで記録した。質量スペクトルは、ＬＣ／ＭＳＤＳＬＧ１９５６Ｂ検出器で、Ｍ／ｚ１５０〜８００の範囲で取得した。データは、ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎおよびＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎＤａｔａＢｒｏｗｓｅｒソフトウェアを用いて積分して報告した。

かくして、一般式（８）および（９）の化合物を、以下に限定することなく、スキーム１に概略した方法により製造してもよい。

試薬: a) エチルグリオキサレート, Ac₂O b) BH3.THF c) LiOH, H₂O, EtOH d) NHORⁱⁱ, HOBT, EDC e) MnO₂ f)STAB, H₂NCRⁱⁱⁱR^ivCO₂R^v g) ジオキサン中4N HCl h) NaOH, H₂O, MeOH、次いでジオキサン中4N HCl

かくして、６−メチルニコチン酸（１）のようなヘテロ芳香族カルボン酸をエチルグリオキサレートのようなアルデヒド試薬との縮合反応において、無水酢酸の存在下、トルエンのような炭化水素溶媒中、還流条件下で使用することにより、一般式（２）のα，β−不飽和エステルを得てもよい。

（２）のカルボキシ置換基をボランＴＨＦ錯体のような還元剤を使用することによりヒドロキシメチレン基に変換し、一般式（３）のアルコールを得てもよい。一般式（４）のα，β−不飽和酸をメチルまたはエチルアルコールのような水と親和性の共溶媒の存在下、水酸化ナトリウムまたはリチウムのようなアルカリを用い、塩基性加水分解条件下で（３）から得てもよい。

一般式（５）のＯ−保護されたヒドロキサム酸を、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールおよび１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩またはＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミドのような試薬を用い、Ｏ−（１−イソブトキシエチル）ヒドロキシアミン（ＷＯ０１／０６０７８５）のような保護されたヒドロキシアミンをカップリングさせて製造してもよい。

対応するアルデヒドへの一般式（５）の化合物の酸化を、二酸化マグネシウムのような試薬を使用して行ってもよい。水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムのような試薬を使用する、（６）のようなアルデヒドのα，α−２置換アミノ酸エステルでの還元的アミノ化は、一般式（７）のアミノ酸エステル誘導体をもたらす。

一般式（８）のヒドロキサム酸を、塩酸のような酸性条件下、１，４−ジオキサンのような溶媒中、（７）を処理することにより製造してもよい。一般式（９）のアミノ酸誘導体を、水性塩基性条件下、例えば水酸化ナトリウム水溶液を用いて、メチルアルコールまたはテトラヒドロフランのような水と親和性の共溶媒の存在下で（７）を加水分解することにより製造してもよい。

替わりに、一般式（８）の化合物をスキーム２に記載の方法により得てもよい。

試薬: a) LiAlH₄, THF b) OHCCOORⁱ, Ac₂O c) (COCl)₂, DMSO, CH₂Cl₂ d) STAB, H₂NCRⁱⁱⁱR^ivCO₂R^v, THF e) NH₂OH.HCl, KOH, MeOH

かくして、メチル−６−メチルニコチネート（１０）のような化合物を、水酸化リチウムアルミニウムのようなヒドリドドナーで還元することにより活性なアルキル基を有する（１１）のようなアルコールを得てもよく、前記アルキル基はエチルグリオキサレートのようなアルデヒドとの縮合反応において、（１２）のようなα，β−不飽和エステルを得るのに利用することができる。

（１２）のような化合物を、さらに、Swern [J.Org.Chem. 1976,41,3329]により記載されたような条件下で、例えばオキサリルクロリドおよびＤＭＳＯを用いて酸化することにより、一般式（１３）のアルデヒドを得てもよい。

順に、（１３）のようなアルデヒドを、式（１４）のアミノ酸エステルへ、Borch [J Am. Chem. Soc. 1969, 91, 3006]により記載されたような還元的アミノ化の手順で、シアノ水素化ホウ素またはトリアセトキシ水素化ホウ素アニオンを用いて変換してもよい。式（８）のヒドロキサム酸を、式（１４）の化合物とヒドロキシアミン塩酸塩とを水酸化ナトリウムまたはカリウムのようなアルカリの存在下で反応させることにより製造してもよい。

一般式（２１）および（２３）の化合物を、以下に限定することなく、スキーム３に概略した方法により製造してもよい。

試薬: a) トリメチルホスホノアセテート, K₂CO₃, THF b) BH₃:THF錯体 c) KOH, MeOH, H₂O d) NHOR², HOBT, EDC e) MnO2 f) STAB, H₂NCRⁱⁱⁱR^ivCO₂R^v, THF g) NaOH, H₂O, MeOH h) 4N HCl, ジオキサン

一般式（１６）の化合物のようなα，β−不飽和エステルを、ホスホン酸カルバニオンと（１５）のようなアルデヒドとの間のホーマー−エモンズ反応により、炭酸カリウムのような無機塩基の存在下、水性条件下で製造してもよい。

替わりに、ＤＭＳＯ中の水素化ナトリウムのような他の塩基またはアセトニトリル中のＤＢＵのような有機塩基をこの変換に用いることもできる。一般式（１７）のアルコールを、（１６）のような酸の、ボランのようなヒドリドドナー試薬での、ＴＨＦのような不活性溶媒中での還元により得ることができる。一般式（１７）のエステルの一般式（１８）の酸への加水分解を、水酸化ナトリウムまたはカリウムのような無機塩基で、水性条件下、メタノールのような共溶媒の存在下で行ってもよい。

一般式（１９）のアルデヒドを、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールおよび１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩またはＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミドのような試薬の存在下、Ｏ−保護されたヒドロキシアミンとのカップリング反応により、次い得られたヒドロキサム酸中間体のアルコール置換基を二酸化マンガンのような試薬で酸化することにより（１８）から得てもよい。

次いで式（１９）のアルデヒドを、アミノ酸エステルと、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムまたはシアノ水素化ホウ素ナトリウムのような試薬での還元的アミノ化の条件下反応させることにより、一般式（２０）の化合物を得てもよい。一般式（２１）のヒドロキサム酸を、ジオキサン中４ＭＨＣｌのような酸性試薬で、タイプ（２０）の化合物（例えばＲ²が（１−イソブトキシエチル）である）を脱保護することにより製造してもよい。

（２２）のようなアミノ酸を、一般式（２０）の化合物を水酸化リチウムのような無機塩基で処理することにより製造してもよい。一般式（２３）のヒドロキサム酸を、式（２２）の化合物を酸性条件下、例えば塩酸で処理することによって製造してもよい。

替わりに、（２３）のような化合物を、スキーム４に記載したような方法により得てもよい。よって、４−ジエトキシベンズアルデヒド（２４）のような試薬を、臭化リチウムのような塩およびトリエチルアミンのような有機塩基の存在下、トリアルキルホスホノアセテートと反応させることにより、酸処理後、（２５）のようなアルデヒドを得てもよい。

順に、（２５）のようなアルデヒドを、式（２６）のアミノ酸エステルへ、Borch [J Am. Chem. Soc. 1969, 91, 3006]により記載されたような還元的アミノ化の手順で、シアノ水素化ホウ素またはトリアセトキシ水素化ホウ素アニオンを用いて変換してもよい。次いで、一般式（２３）のヒドロキサメートを、式（２６）のような化合物をヒドロキシアミン塩酸塩で、水酸化カリウムまたはリチウムのような塩基の存在下、メタノールまたはエタノールのような溶媒中で処理することにより製造してもよい。

試薬: a) トリアルキルホスホノアセテート, Et₃N, LiBr, THF、次いでメタノール中のHCl b) STAB, THF c) KOH, NH₂OH.HCl, KOH, MeOH

また、一般式（２８）のアミノ酸誘導体を、スキーム５に記載の方法により製造してもよい。

よって、一般式（２７）のエステル［Ｘ＝ＣＨまたはＮ］を、タイプ（２８）の酸［Ｘ＝ＣＨ，Ｎ］に、水酸化カリウムまたはナトリウムのようなアルカリ塩基で加水分解してもよい。もう１つの手順においては、一般式（２８）の酸［Ｘ＝ＣＨ，Ｎ］をスキーム６に記載の方法により製造してもよい。

よって、一般式（２９）のアルデヒド［Ｘ＝ＣＨ，Ｎ］およびアミノ酸を、還元的アミノ化の条件下で反応させることにより、一般式（３０）の中間体［Ｘ＝ＣＨ，Ｎ］を得る。式（３０）の保護されたヒドロキサメート［Ｘ＝ＣＨ，Ｎ］を、酸性条件下、塩酸のようなもので処理することにより、一般式（２８）の酸［Ｘ＝ＣＨ，Ｎ］を得る。

試薬: a) HO₂CⁱR²NH₂, STABまたはα−ピコリン−ボラン, MeOH b) 4N HCl,ジオキサン

一般式（３２）のアミノ酸エステルをスキーム７に記載のものを含む多くの方法により製造してもよい。かくして、式（３１）のアミノ酸を、適当なアルコール（Ｒ³ＯＨ）と共に、Ｈ₂ＳＯ₄の存在下に加熱するか、またはディ−ン−スターク（Dean-Stark）の条件下、パラ−トルエンスルホン酸のような酸の存在下、適当なアルコール（Ｒ³ＯＨ）と反応させることにより、式（３２）のエステルを得てもよい。

試薬: R₃OH, H₂SO₄ または R₃OH, PTSA, シクロヘキサン, ディ−ン−スターク

中間体
中間体１エチル（２Ｅ）−３−（５−ホルミルピリジン−２−イル）アクリレート

工程１
水素化リチウムアルミニウム（２３ｇ、１．２当量）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液を−７８℃に冷却した。メチル−６−メチルニコチネートをＴＨＦ（２００ｍＬ）中に溶解させ、−７０℃以下で反応物に投入した。反応物を０℃に１時間かけて温め、〜０℃で１時間熟成した。終了時、反応物をｓａｔ．ＮａＨＣＯ₃（２５０ｍＬ）を用い１０℃でクエンチした。反応混合物を濾過して無機物を除去し、濾過ケーキをＴＨＦで洗浄し、濾液を真空下で濃縮し、ほとんどのＴＨＦを除去した。残渣を酢酸エチルと水とに分別し、水層を３度、ＥｔＯＡｃで抽出した。組み合わせた有機物をＫ₂ＣＯ₃（ａｑ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、次いで乾燥するまで濃縮して生成物（４０．５ｇ）を得た。

¹H NMR (CDCl3): (8.35 ,1H,s), 7.61 (1H,dd), 7.13 (1H,d), 4.65 (2H,d), 2.51 (3H,d)。

水層の２度目の抽出により追加の生成物（５．５ｇ）を得、最初の抽出からの生成物と組み合わせた。

工程２
工程１からの生成物（４６ｇ、１当量）を無水酢酸（６７０ｍＬ）中に溶解させ、８０℃で約１時間攪拌した。エチルグリオキサール溶液（トルエン中、５０％）（１４７ｍＬ、２当量）を反応容器中に投入し、次いで１夜、１００℃で加熱した。エチルグリオキサール溶液の追加量（トルエン中、５０％）（３７ｍＬ、０．５当量）を還流開始後、約１６時間で加え、加熱を２時間継続した。反応物を水（１００ｍＬ）でクエンチし、〜５０℃で４０分間攪拌し、次いで真空下で濃縮した。残渣液をｐＨ９〜１０に１ＮＮａＯＨ、次いで固体のＮａＯＨで塩基性とした。ＥｔＯＡｃでの２度の抽出後、組み合わせた有機物を０．２５ＮａＯＨで洗浄し、次いで乾燥するまで濃縮した。粗残渣をエタノール（５００ｍＬ）およびｃｏｎｃ．ＨＣｌ（５０ｍＬ）の混合物中、一夜、４０℃で攪拌した。脱アセチル化の終了時、反応混合物を乾燥するまで濃縮し、ＥｔＯＡｃとＫ₂ＣＯ₃（ａｑ）とに分別し、水層をＥｔＯＡｃで洗浄した。組み合わせた有機物をＫ₂ＣＯ₃（ａｑ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、次いで真空下で乾燥するまで濃縮した。ドライ−フラッシュクロマトグラフィ（３：２−１：４ヘプタン：ＥｔＯＡｃ溶出液）により精製して、所望の生成物（２１．９ｇ）を得た。

¹H NMR (CDCl3): 8.64 (1H,s), 7.76-7.79 (1H,m), 7.74 (1H,d), 7.44 (1H,d), 6.92 (1H,d), 4.79 (2H,d), 4.29 (2H,q) および 1.36 (3H,t)。

工程３
ＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＤＭＳＯ（３．４ｍＬ、５当量）をフラスコに投入し、−７０℃以下に冷却した。オキサリルクロリド（１．４７ｍＬ、２．２当量）を−６５℃以下で滴下投入し、次いで反応液を〜０．５時間熟成した。工程２の生成物（２ｇ、１当量）をＤＣＭ（２０ｍＬ）中に溶解させ、前記反応液に投入し、次いで−７０℃以下で〜１時間熟成した。トリエチルアミン（６．７ｍＬ、５当量）を投入し、反応液を常温に温めた。水（４０ｍＬ）を反応容器に投入し、層を分離させ、水層をＤＣＭで抽出した。組み合わせた有機物を水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、次いで乾燥するまで濃縮して、中間体１（１．７ｇ）を得た。

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ(ppm):10.14 (1H,s), 9.10 (1H,d), 8.20 (1H,dd), 7.72 (1H,d), 7.60 (1H,d) 7.28 (1H,s), 7.08 (1H,d), 4.31 (2H,q), 1.37 (3H,t)。

中間体２（２Ｅ）−３−（５−ホルミルピリジン−２−イル）−Ｎ−（１−イソブトキシエトキシ）アクリルアミド
中間体２をＷＯ２００８／０４０９３４に記載の方法により製造した。

中間体３（２Ｅ）−３−（４−ホルミルフェニル）−Ｎ−（１−イソブトキシエトキシ）アクリルアミド
中間体３をＷＯ２００８／０４０９３４に記載の方法により製造した。

中間体４３−（４−ホルミルフェニル）−Ｎ−（１−イソブトキシエトキシ）プロパンアミド
中間体４をＷＯ２００８／０４０９３４に記載の方法により製造した。

中間体５シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−エトキシ−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロブタンカルボキシレート
ＳＴＡＢ（１．２ｇ、５．６ｍｍｏｌ）を、中間体１（０．７７ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）および中間体２０（１．２５ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）スラリーに投入した。反応物を１６時間、常温で攪拌し、次いでｓａｔ．ＮａＨＣＯ₃（２０ｍＬ）でクエンチした。層を分離させ、水相をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、乾燥するまで濃縮し、次いで残渣をシリカクロマトグラフィで精製して、黄色の油状物として標記化合物（０．７５ｇ）を得た。m/z = 373 [M+H]⁺

次の中間体を中間体５と同様の方法により製造した。

中間体６シクロペンチル１−｛［（６−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ピリジン−３−イル）メチル］アミノ｝シクロペンタンカルボキシレート

中間体２（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体１９（トシレート塩）（１２５．５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体６（８４．７ｍｇ）を得た。m/z 474 [M+H]⁺

中間体７シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−エトキシ−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート

中間体１（０．１ｇ）および中間体１８（０．１ｇ）から中間体７（６０ｍｇ）を得た。m/z 400 [M+H]⁺

中間体８シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−メトキシ−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボキシレート塩酸塩

中間体２９（４．４ｇ、２３ｍｍｏｌ）および中間体１９（トシレート）（８ｇ、２３ｍｍｏｌ）から、遊離塩基（８．７ｇ）の酢酸エチル（９０ｍＬ）溶液を２ＮＨＣｌのジエチルエーテル溶液（１１．７ｍＬ）で処理することにより、塩酸塩として中間体８（７．３３ｇ）を得た。

¹H NMR (300MHz, d₆-DMSO) δ(ppm): 9.99 (2H, bs), 7.81 (2H, d), 7.69 (1H, d), 7.61 (2H, d), 6.72 (1H, d), 5.23 (1H, m), 4.13 (2H, m), 3.72 (3H, s), 2.30-1.50 (16H, m)。

中間体９シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−メトキシ−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロブタンカルボキシレート塩酸塩

中間体２９（０．５７ｇ、２．９ｍｍｏｌ）および中間体２０（１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）から、遊離塩基（１．１５ｇ）の酢酸エチル（１５ｍＬ）溶液を２ＮＨＣｌのジエチルエーテル溶液（１．５５ｍＬ）で処理することにより、塩酸塩として中間体９（０．６３ｇ）を得た。アイスバス中での熟成後、生成物を濾過で回収した。得られた固体を酢酸エチルで洗浄し、乾燥した。m/z = 358 [M+H]⁺

中間体１０シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−メトキシ−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチルーＤ−アラニネート

中間体２９（３６０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）および中間体２８（２００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）から中間体１０（１０３．９ｍｇ）を得た。m/z 346 [M+H]⁺

中間体１１シクロペンチル１−［（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）アミノ］シクロプロパンカルボキシレート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体２３（５７．５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１１（５９ｍｇ）を得た。m/z 445 [M+H]⁺

中間体１２シクロペンチル１−［（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体１８（７１．７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１２（６４．９ｍｇ）を得た。m/z 487 [M+H]⁺

中間体１３シクロペンチルＮ−（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）−α−メチル−Ｌ−フェニルアラニネート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体２７（８４ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１３（８３ｍｇ）を得た。m/z 523 [M+H]⁺

中間体１４シクロペンチルＮ−（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）−２−メチル−Ｄ−ロイシネート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体２５（７２．４ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１４（７８．２ｍｇ）を得た。m/z 489 [M+H]⁺

中間体１５シクロペンチルＮ−（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）−２−メチル−Ｌ−ロイシネート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体２６（７２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１５（８４．８ｍｇ）を得た。m/z 489 [M+H]⁺

中間体１６シクロペンチルＮ−（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）−Ｌ−イソバリネート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体２４（６３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１６（４７ｍｇ）を得た。m/z 461 [M+H]⁺

中間体１７シクロペンチルＮ−（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）−３−メチル−Ｌ−イソバリネート

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体２２（６８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から中間体１７（７５．７ｍｇ）を得た。m/z 375 [M+H]⁺

中間体１８シクロペンチル１−アミノシクロヘキサンカルボキシレートトシレート

１−アミノシクロヘキサンカルボン酸（４．２ｇ、２９ｍｍｏｌ）のシクロヘキサン（２５０ｍＬ）溶液に、シクロペンタノール（５０ｍＬ）およびパラ−トスエンスルホン酸（５．８９ｇ）を加え、得られた懸濁液を還流させながら、ディ−ン−スターク装置内で、７２時間加熱した。室温に冷却し、得られた白色の固体を濾過で回収し、シクロヘキサン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥して無色の固体として中間体１８（トシレート塩）（４．１ｇ）を得た。m/z 212.3 [M+H]⁺。

中間体１９シクロペンチル１−アミノシクロペンタンカルボキシレート
方法Ａ

１−アミノシクロペンタンカルボン酸（２．５８ｇ、１９．９７ｍｍｏｌ）のシクロペンタノール（２０ｍｌ）溶液に、濃硫酸（２．１５ｇ、２１．９７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を一夜、７０℃で攪拌した。反応物を室温に冷却し、シクロペンタノールを減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）中に溶解させ、ｓａｔ．ＮａＨＣＯ₃（３０ｍｌ）および水（３×２０ｍｌ）で洗浄し、次いで乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、真空下で濃縮し、暗黄色油状物を得た。カラムクロマトグラフィ（１５％１．２ＭＮＨ₃／ＭｅＯＨのＥｔＯＡｃ溶液）で精製して中間体１９（１．９７ｇ）を得た。

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ(ppm): 5.21-5.17 (1H, m), 2.15-1.90 (2H, m), 1.85-1.57 (14H, m)。

方法Ｂ
中間体１８のものと同様の方法に従って、シクロペンチル１−アミノシクロペンタンカルボキシレートトシレート（２８．９ｇ、１４７ｍｍｏｌ）を１−アミノシクロペンタンカルボン酸（１０．７ｇ）およびシクロペンタノール（３７．５ｍＬ）から、パラ−トルエンスルホン酸（１７．３ｇ）の存在下で製造した。

中間体２０シクロペンチル１−アミノシクロブタンカルボキシレートトシレート
方法Ａ

１−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸（１ｇ、８．７ｍｍｏｌ）、シクロペンタノール（２．４ｍＬ）およびパラ−トルエンスルホン酸（１．８ｇ、９．６ｍｍｏｌ）をシクロヘキサン（５ｍＬ）中で攪拌し、還流させながら２３時間加熱し、その後、反応物が乾燥したので、追加のシクロヘキサン（３ｍＬ）を加えた。さらに８０分後、反応物を７０℃に手早く冷却し、シクロヘキサン（５ｍＬ）およびシクロペンタノール（２．４ｍＬ）を加え、還流させながらの加熱を反応が終了するまで継続した。反応物を常温に冷却し、メチルｔ−ブチルエーテル（５０ｍＬ）を加え、反応物を１０分間攪拌した。得られた固体を濾過で回収し、メチルｔ−ブチルエーテル（２０ｍＬ）で洗浄してトシレート塩として中間体２０（２．８３ｇ）を得た。

m/z 184 [M+H]⁺ 1H NMR (300MHz,d₆-DMSO) δ(ppm): 7.72 (2H,d), 7.25 (2H,d), 5.35 (1H,m), 2.58-2.67 (2H,m), 2.42-2.48 (2H,m), 2.41 (3H,s),2.10-2.39 (2H,m), 1.93-2.08 (2H,m), 1.71-1.86 (6H,m)。

次の中間体を中間体１９と同様の方法により製造した。

中間体２１シクロペンチル２−メチル−Ｄ，Ｌ−ロイシネート

（Ｒ，Ｓ）−α−メチルロイシン（５００ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）から中間体２１（６５０ｍｇ）を得た。214.3 [M+H]⁺。

中間体２２シクロペンチル３−メチル−Ｌ−イソバリネート

３−メチル−Ｌ−イソバリン（５００ｍｇ）からオレンジ色の油状物として中間体２２（２９２ｍｇ）を得た。m/z 200.2 [M+H]⁺。

中間体２３シクロペンチル１−アミノシクロプロパンカルボキシレート

１−アミノシクロプロパンカルボン酸（５００ｍｇ、４．９５ｍｍｏｌ）から中間体２３（３０２．９ｍｇ）を得た。m/z 170 [M+H]⁺。

中間体２４シクロペンチルＬ−イソバリネート

（Ｓ）−α−エチルアラニン（１ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）から中間体２４（１．０３ｇ）を得た。m/z 186 [M+H]⁺。

中間体２５シクロペンチル２−メチル−Ｄ−ロイシネート

（Ｒ）−α−メチルロイシン（１．０ｇ、６．９ｍｍｏｌ）から中間体２５（１．１２ｇ）を得た。m/z 214 [M+H]⁺。

中間体２６シクロペンチル２−メチル−Ｌ−ロイシネート

（Ｓ）−α−メチルロイシン（１．０ｇ、６．９ｍｍｏｌ）から中間体２６（０．６１ｇ）を得た。m/z 214 [M+H]⁺。

中間体２７シクロペンチル α−メチル−Ｌ−フェニルアラニネート

（Ｓ）−α−メチルフェニルアラニン（１．０ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）から中間体２７（０．６２ｇ）を得た。m/z 248 [M+H]⁺。

中間体２８シクロペンチル２−メチルアラニネート塩酸塩

工程１
０℃のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルアラニン（１．００ｇ、４．９２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍｌ）溶液に、シクロペンタノール（０．８３ｍｌ、９．８４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣｌ（１．０６ｇ、５．４２ｍｍｏｌ）および最後にＤＭＡＰ（６０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温に温め、１８時間攪拌した。ＤＣＭを真空下で除去し、透明な油状物を得た。粗残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）中に溶解させ、水、１ＭＮａＨＣＯ₃および食塩水で洗浄した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空下で濃縮した。粗抽出物をカラムクロマトグラフィ（１０％ＥｔＯＡｃのヘプタン溶液）で精製して、透明な油状物として所望の生成物を得た（０．２５４ｇ、収率２０％）。

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ(ppm): 5.25-5.17 (1H, m), 5.04 (1H, br s), 1.93-1.54 (8H, m), 1.49 (6H, s), 1.45 (9H, s)。

工程２
シクロペンチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルアラニネート（０．２５４ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍｌ）中に溶解させ、４ＭＨＣｌのジオキサン溶液（２ｍｌ）で処理し、反応混合物を室温で２４時間攪拌した。粗混合物を減圧下で濃縮し、Ｅｔ₂Ｏで粉砕して白色の沈殿物を得た。これをＥｔ₂Ｏでさらに洗浄して白色の粉末として中間体２８（０．１６ｇ、収率８２％）。

¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆) δ(ppm): 8.58 (3H, br s), 5.21-5.14 (1H, m), 1.93-1.78 (2H, m), 1.74-1.53 (6H, m), 1.45 (6H, s)。

中間体２９メチル（２Ｅ）−３−（４−ホルミルフェニル）アクリレート

臭化リチウム（１５９ｇ、２．５当量）をＴＨＦ（２Ｌ）中に溶解させ、＜５℃に冷却した。トリメチルホスホノアセテート（１．３当量、１３８ｍＬ）、次いでトリエチルアミン（２０４ｍＬ、２当量）を＜１０℃で投入した。４−ジエトキシベンズアルデヒド（１５２．８ｇ、１当量）を２５分間かけて投入し、反応物を２０±５℃に温め、次いで冷却し、取り去った。１時間４０分後、反応物を水でクエンチし、分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。組み合わせた有機相を３度食塩水で洗浄し、次いで真空下で乾燥するまで濃縮した。メタノール（０．５Ｌ）を残渣に投入し、再び乾燥するまで濃縮した。メタノール（０．７５Ｌ）および１ＮＨＣｌ（０．７５Ｌ）を残渣に投入し、常温で４５分間攪拌した。水（０．７５Ｌ）を投入し、生成物（１２８．５ｇ）を濾過で単離した。

¹H NMR (300MHz,CDCl₃) δ(ppm): 10.06 (1H, s), 7.93 (2H, d), 7.71 (3H, m), 6.58 (1H, d), 3.85 (3H, s)。

中間体３０１−［（４−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ベンジル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸

中間体３（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および１−アミノシクロペンタンカルボン酸（４８．３ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ）中に溶解させ、室温で１時間攪拌し、次いでα−ピコリン−ボラン（７２．０８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を加えた。４時間後、反応が終了したように見え、溶媒を減圧下で除去した。残渣をクロマトグラフィ（逆相シリカ、ＣＨ₃ＣＮの水溶液、勾配０〜１００％）により精製して中間体３０（１３．６ｍｇ）を得た。m/z 405 [M+H]⁺。

中間体３１１−｛［（６−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ピリジン−３−イル）メチル］アミノ｝シクロペンタンカルボン酸

中間体３０と同様の方法により、中間体２（２００ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）、１−アミノシクロペンタンカルボン酸（４３．８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）およびα−ピコリン−ボラン（１０９ｍｇ）から、中間体３１（７０ｍｇ）を得た。m/z 406 [M+H]⁺

中間体３２ｔ−ブチル２−メチルアラニネート

工程１
Ｎ−[（ベンジルオキシ）カルボニル]−２−メチルアラニン（１ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍｌ、無水）、シクロヘキサン（１０ｍｌ）溶液に、０℃、窒素下で、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル（７μｌ、触媒）を加えた。次いでシクロヘキサン（１０ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル２，２，２−トリクロロアセトイミデート（１．５１ｍｌ、８．４３ｍｍｏｌ）を、室温に温める前に、３０分間かけてゆっくりと加えた。反応物を室温で、１６時間攪拌した。粗反応混合物にＮａＨＣＯ₃１９０ｍｇを加え、反応物を濾過した。母液を真空下で濃縮した。粗抽出物をカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ１０％のヘプタン溶液）で精製して所望の生成物（０．８６３ｇ、７０％）を得た。

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 7.39-7.31 (5H, m), 5.46 (1H, br s), 5.10 (2H, s), 1.54 (6H, s), 1.45 (9H, s)。

工程２−ｔ−ブチル２−メチルアラニネート
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−[（ベンジルオキシ）カルボニル]−２−メチルアラニネート（０．８６ｍｇ、２．９０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）溶液に、１００ｍｇの１０％のパラジウム炭素触媒を加えた。混合物を排気し、水素雰囲気下で１８時間攪拌し、セライト（商標）で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、真空下で濃縮した。生成物を、ＥｔＯＡｃの痕跡を含む黄色の油状物（０．４５ｍｇ、９６％）として単離した。

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ: 1.48 (9H, s), 1.32 (6H ,s)。

中間体３３ｔｅｒｔ−ブチルＮ−[（６−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ピリジン−３−イル）メチル]−２−メチル−Ｄ−アラニネート

ジクロロエタン（５ｍＬ）中の中間体２（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および中間体３２（５９ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を、窒素下、室温で、２０分間攪拌した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を加え、反応物を６時間攪拌し続けた。次いでジクロロメタン（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）とで分配し、有機層を分離し、水層をさらなるジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ₂ＳＯ₄）、溶媒を真空で除去した。残渣をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル：ＥｔＯｃ０−１００％のヘプタン溶液）で精製することにより、オレンジ色の油状物として標記化合物（３０ｍｇ）を得た。m/z 436 [M+H]⁺。

中間体３４３−メチルシクロペンチルＮ−[（６−｛（１Ｅ）−３−［（１−イソブトキシエトキシ）アミノ］−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル｝ピリジン−３−イル）メチル]−２−メチル−Ｄ−アラニネート

中間体３３と同様の方法により、中間体２（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、中間体３５（６３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（３２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）から、オレンジ色の油状物として中間体３４（４２ｍｇ）を得た。m/z 462 [M+H]⁺。

中間体３５３−メチルシクロペンチル２−メチルアラニネート

２−アミノイソ酪酸（１ｇ、９．７ｍｍｏｌ）、３−メチルシクロペンタノール（３．２ｍＬ、２９．１ｍｍｏｌ）およびパラ−トルエンスルホン酸（２．０３、１０．６７ｍｍｏｌ）を１００℃に、シクロヘキサン（１００ｍＬ）中、ディ−ン−スターク装置内で、７２時間加熱した。次いで反応物を室温に冷却した。反応物を濾過し、濾液を褐色の油状物（１．２９ｇ）まで減圧下で濃縮した。油状物を中間体３５と３−メチルシクロペンタノールとの１：１の混合物であることを¹ＨＮＭＲで同定し、さらに精製することなく使用した。

実施例
実施例１シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロブタンカルボキシレート

中間体５（０．７５ｇ、１当量）およびヒドロキシアミン塩酸塩（０．４２ｇ、３当量）をメタノール（８ｍＬ）中で攪拌し、＜５℃に冷却した。水酸化カリウム（０．６８ｇ、６当量）を水（２ｍＬ）中に溶解させ、前記反応物に＜５℃で、５分間かけて投入した。反応物をさらに２０分間攪拌し、次いでｐＨ〜７に４ＮＨＣｌでクエンチした。水（２０ｍＬ）を投入し、１時間４０分間、アイスバス中で熟成させ、次いで標記化合物を濾過で固体（０．４２ｇ、５８％）として単離した。

m/z 360 [M+H]⁺ ¹H NMR (300MHz,d₆-DMSO) δ(ppm): 10.88 (1H, s), 9.10 (1H, s), 8.53 (1H,s), 7.76 (1H, d), 7.49 (2H, dd), 6.90 (1H, d), 5.07 (1H, m), 3.58 (2H, s), 2.87 (1H, bs), 2.27 (2H, m), 2.08-1.48 (12H, m)。

次の実施例を実施例１のものと同様の方法により製造した。

実施例２シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート

中間体７（６０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ヒドロキシアミン塩酸塩（４０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）から、水酸化カリウム（７０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）の存在下、標記化合物（３４ｍｇ）を得た。この場合、生成物を、クエンチした水性反応混合物から酢酸エチルで抽出し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、減圧下で溶媒を除去して精製することなく単離した。

m/z 388 [M+H]⁺, ¹H NMR (300 MHz, d₆-DMSO) δ:10.87 (1H, br s), 9.09 (1H, br s), 8.52 (1H, s), 7.75 (1H, dd), 7.51 (1H, d), 7.45 (1H, d), 6.89 (1H, d), 5.07 (1H, t), 3.58 (2H, s), 2.31-2.50 (2H, m), 1.18-1.89 (16H, m)。

実施例３シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロブタンカルボキシレート

中間体９（０．６３ｇ、１．５４ｍｍｏｌ）およびヒドロキシアミン塩酸塩（０．３２ｇ、４．６０ｍｍｏｌ）から標記化合物（０．４ｇ）を得た。この場合、標記化合物をクエンチした水性反応混合物から酢酸エチルで抽出した後、カラムクロマトグラフィ［シリカゲル、酢酸エチルのヘキサン溶液（２５−１００％）］で精製した。

m/z 359 [M+H]⁺ ¹H NMR (300MHz,d₆-DMSO) δ(ppm): 10.72 (1H,s), 9.02 (1H,s), 7.49 (2H,s), 7.44 (1H,d), 7.36 (2H,d), 6.42 (1H,d), 5.09 (1H,t), 3.55 (2H,s), 2.19-2.21 (2H,m)および1.55-2.01 (12H,m)。

実施例４シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボキシレート

中間体８（７．３ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）およびヒドロキシアミン塩酸塩（３．７ｇ、５３．２ｍｍｏｌ）から標記化合物（３．７７ｇ）を得た。

m/z = 373 [M+H]⁺ ¹H NMR,(300MHz d₆-DMSO) δ(ppm): 10.72 (1H, s), 9.02 (1H, s), 7.51 (2H,d), 7.43 (1H,d), 7.33 (2H,d), 6.43 (1H, d), 5.10 (1H, m), 3.64 (2H, s), 1.99-1.56 (16H, m)。

実施例５シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩

中間体１０（１０３．９ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、ヒドロキシアミン塩酸塩（６２．６ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（４３．２ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）から、ＨＰＬＣによる精製後、トリフルオロ酢酸塩として標記化合物（３．５ｍｇ）を得た。

m/z 347 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.71 (2H, d), 7.49 (3H, m) 6.61 (1H, m), 5.37 (1H, m) 4.35 (2H, m) 2.00 (2H, m) 1.83-1.54(12H, m)。

実施例６シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロプロパンカルボキシレートトリフルオロ酢酸塩

中間体１１（９６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン／メタノール（１１ｍＬ、１０：１ｖ／ｖ）に溶解させ、４ＭＨＣｌのジオキサン溶液（０．１７ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、溶媒を減圧下で除去し、残渣をＨＰＬＣで精製してトリフルオロ酢酸塩として標記化合物（１４．８ｍｇ）を得た。

m/z 345 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.74-7.46 (6H, m), 5.33 (1H, t), 4.44 (2H, s), 1.96-1.54 (12H, m)。

次の化合物を実施例６の化合物と同様の方法により製造した。

実施例７シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロヘキサンカルボキシレートトリフルオロ酢酸塩

中間体１２（６４．９ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）から、トリフルオロ酢酸塩として標記化合物（３７ｍｇ）を得た。

m/z 387 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.69 (2H, d), 7.58 (3H, m), 6.54 (1H, m), 5.39 (1H, m), 4.18 (2H, s), 2.36 (2H, d), 2.02-1.38 (16H, m)。

実施例８シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−α−メチル−Ｌ−フェニルアラニネートトリフルオロ酢酸塩

中間体１３（８３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）から、トリフルオロ酢酸塩として標記化合物（２２．５ｍｇ）を得た。

m/z 389 [M+H]⁺,¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.68 (2H, m), 7.63 (1H, m) 7.57 (2H, m), 7.30 (3H, m), 7.24 (2H, m), 6.56 (1H, d), 5.22 (1H, m), 4.92 (1H, d), 4.14 (1H, d), 3.35 (1H, d), 3.29 (1H, d), 1.94-1.41 (8H, m), 1.69 (3H, s)。

実施例９シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−ロイシネートトリフルオロ酢酸塩

中間体１４（７８．２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）から標記化合物（３５．７ｍｇ）を得た。

m/z 389 [M+H]^{+ 1}H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.67 (3H, m), 7.57 (2H, d), 6.55 (1H, m), 5.36 (1H, m), 4.28 (1H, d), 4.13 (1H, s), 1.98-1.54 (14H, m), 1.00 (6H, s)。

実施例１０シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｌ−ロイシネートトリフルオロ酢酸塩

中間体１５（８５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）から、トリフルオロ酢酸塩として標記化合物（３１．４ｍｇ）を得た。

m/z 389 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.67 (2H, d) 7.59 (3H, m), 6.56 (1H, d), 5.36 (1H, m), 4.28 (1H, d), 4.12 (1H, d), 2.03-1.74 (11H, m), 1.71 (3H, s), 0.98 (6H, m)。

実施例１１シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−Ｌ−イソバリネートトリフルオロ酢酸塩

中間体１６（４７ｍｇ）からトリフルオロ酢酸塩として標記化合物（１１．３ｍｇ）を得た。

m/z 361 [M+H]⁺,¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.69 (2H, d), 7.60 (1H, d) 7.56 (2H, d), 6.57 (1H, d), 5.36 (1H, m), 4.30 (1H, d), 4.16 (1H, d), 2.16-1.66 (10H, m), 1.60 (3H, s), 1.05 (3H, t)。

実施例１２シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−３−メチル−Ｌ−イソバリネートトリフルオロ酢酸塩

中間体１７（７５．７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）からトリフルオロ酢酸塩として標記化合物（１７ｍｇ）を得た。

m/z 375 [M+H]^{+ 1}H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.68 (2H, d), 7.60 (1H, d), 7.58 (2H, d), 6.57 (1H, d), 5.35 (1H, m), 4.38 (1H, d), 4.12 (1H, d), 2.38 (1H, セプテット) 1.84-1.69 (8H, m), 1.63 (3H, s), 1.13 (3H, d), 1.05 (3H, d)。

実施例１３シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロペンタンカルボキシレートトリフルオロ酢酸塩

中間体６（８４．７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）からトリフルオロ酢酸塩として標記化合物（３４．９ｍｇ）を得た。

m/z 374 [M+H]^{+ 1}H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 8.75 (1H, s), 8.06 (1H, d), 7.70 (1H, d), 7.60 (1H, d), 6.97 (1H, d), 5.39 (1H, m), 4.35 (2H, s), 2.38 (2H, m), 2.13 (2H, m), 1.97 (6H, m), 1.77 (6H, m)。

実施例１４シクロペンチル１−（｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボキシレート

中間体４（２０８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）および中間体１９（１８４ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４３０ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）および酢酸（４７μＬ）を加えた。得られた溶液を室温で５時間攪拌し、次いで飽和ＮＨ₄Ｃｌでクエンチした。反応物をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空で濃縮した。得られた残渣を４ＭＨＣｌのジオキサン溶液（５ｍＬ）中に溶解させ、室温で１時間攪拌した。反応物をｓａｔｄ．ＮａＨＣＯ₃でクエンチし、酢酸エチル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、蒸発させた。残渣をＨＰＬＣで精製して無色の固体として標記化合物（８０ｍｇ）を得た。

m/z 375 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD), δ(ppm): 7.46 (2H, d J=7.9Hz), 7.36 (2H, d J=8.1Hz), 5.40 (1H, m), 4.18 (2H, s), 2.98 (2H, t, J=7.2), 2.38 (4H, m), 2.08-1.52 (14H, m)。

次の実施例を実施例１４の標記化合物と同様の方法により作った。

実施例１５シクロペンチルＮ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−アラニネート

中間体４（１４０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）および中間体２１（８９ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）から無色の固体として標記化合物（１３０ｍｇ）を得た。

m/z 349 [M+H]⁺. ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD), δ(ppm): 7.47 (2H, d J=8.1Hz), 7.35 (2H, d J=8.1Hz), 5.38-5.34 (1H, m), 4.18 (2H, s), 2.98 (2H,t J=7.5), 2.41 (2H, t J=7.5Hz), 1.98-1.66 (8H, m), 1.60 (6H, s)。

実施例１６シクロペンチルＮ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ，Ｌ−ロイシネート

中間体４（２０９ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）および中間体２１（１４６ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）から無色の固体として標記化合物（２００ｍｇ）を得た。m/z 391.51 [M+H]⁺。

実施例１７シクロペンチルＮ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−３−メチル−Ｌ−イソバリネート

中間体４（２００ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）および中間体２２（１４０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）から無色の固体として標記化合物（２１ｍｇ）を得た。

m/z 377 [M+H]⁺. ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm): 7.43-7.48 (2H, m), 7.32-7.37(2H, m), 5.35 (1H, td, J=5.4, 2.9 Hz), 4.02-4.33 (2H, m), 2.97 (2H, t, J=7.5 Hz), 2.41 (2H, t, J=7.4 Hz), 1.67-2.05 (8H, m), 1.60 (3H, s), 1.02-1.15 (6H, m)。

実施例１８１−（｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボン酸

中間体４（２０８ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）および中間体１９（１８４ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４３０ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）および酢酸（４７μＬ）を加えた。得られた溶液を室温で５時間攪拌し、次いで飽和ＮＨ₄Ｃｌでクエンチした。反応物をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空で濃縮した。固体残渣（４０ｍｇ）を、ＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中の水酸化リチウム（４０ｍｇ、１５ｍｍｏｌ）と共に４５℃で３６時間攪拌した。反応物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を分取ＨＰＬＣで精製した。精製したカルボン酸誘導体をジクロロメタン−ＴＦＡ（１ｍＬ、１：１ｖ／ｖ）中、１時間、室温で攪拌し、反応物を減圧下で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣに付して無色の固体として標記化合物（３ｍｇ）を得た。

¹H NMR (300 MHz, CD₃OD), δ(ppm):7.47 (2H, d J=7.9Hz), 7.36 (2H, d J=8.1Hz), 4.18 (2H, s), 3.01-2.95 (2H, t J=7.5), 2.38 (4H, m), 1.97-1.59 (6H, m)。

実施例１９Ｎ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ，Ｌ−ロイシン

中間体４（１５０ｍｇ、５１ｍｍｏｌ）および（Ｒ，Ｓ）−α−メチルロイシン（７５ｍｇ、５１ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（２０ｍＬ）溶液に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３２３ｍｇ、１８３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１２時間攪拌した。反応物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をＨＰＬＣで精製して無色の固体として標記化合物（１ｍｇ）を得た。

m/z 332 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD), δ(ppm): 7.44 (2H, d J=8.1Hz), 7.35(2H, d J=8.1Hz), 4.20 (1H, d J=12.4Hz), 4.09 (1H, d, J=12.6Hz), 2.97 (2H, t J=7.3Hz), 2.41 (2H, t J=7.7Hz), 2.01-1.87 (3H, m), 1.76 (3H, s), 1.01 (6H, t J=6.3Hz)。

実施例２０１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボン酸トリフルオロ酢酸塩

中間体３０（１３．６ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ［１０：１ｖ／ｖ］（１１ｍＬ）中に溶解させ、４ＭＨＣｌ（０．０４２ｍＬ、０．１６８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をＨＰＬＣで精製して標記化合物（２．４ｍｇ）を得た。

m/z 305 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 7.67-7.59 (6H, m), 4.25 (2H, s), 2.41 (2H, d), 2.19-1.86 (6H, m)。

実施例２１１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸トリフルオロ酢酸塩

実施例２０と同様の方法で、中間体３１（７０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）からＨＰＬＣによる精製後、トリフルオロ酢酸塩として標記化合物（６３ｍｇ）を得た。

m/z 306 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ(ppm); 8.78 (1H, s), 8.12 (1H, d), 7.75 (1H, d), 7.59 (1H, d), 6.98 (1H, d) 4.37 (2H, s), 2.43 (2H, m), 2.17 (2H, m), 1.97 (4H, m)。

実施例２２１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロブタンカルボン酸

実施例１の化合物（０．１ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ）中の１ＮＮａＯＨ（１０ｍＬ）と共に１９時間攪拌した。反応物をｐＨ７に４ＮＨＣｌで酸性とし、得られた固体を濾過で回収し、水およびＥｔＯＡｃで洗浄し、次いで乾燥し、標記化合物（５２．７ｍｇ）を得た。

m/z 292 [M+H]^{+ 1}H NMR (300MHz, d₆-DMSO) δ(ppm): 10.89 (1H, s), 8.57 (1H, s), 7.81 (1H, d), 7.54 (1H, d), 7.46 (1H, d), 6.92 (1H, d), 3.68 (2H, s), 2.30-1.69 (6H, m)。

実施例２３ｔ−ブチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］−２−メチル−Ｄ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩

実施例６の手順に従って、中間体３３（３０ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）からＨＰＬＣによる精製後、標記化合物（７．７ｍｇ）を得た。

m/z 336 [M+H] ⁺ , ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δppm; 9.46 (1H, bs), 8.69 (1H, m), 7.95 (1H, m), 7.88 (1H, m), 7.69 (1H, m), 7.52 (1H, d, J = 15.6Hz), 7.08 (1H, s), 6.97 (1H, d, J = 15.6Hz), 4.21 (2H, m), 1.57 (6H, s), 1.51 (9H, s)。

実施例２４３−メチルシクロペンチルＮ−（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）−２−メチル−Ｌ−アラニネートトリフルオロ酢酸塩

実施例６の手順に従って、中間体３４（４２ｍｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）からＨＰＬＣによる精製後、白色の固体およびジアステレオ異性体の混合物として標記化合物（２．４ｍｇ）を得た。

m/z 362 [M+H]⁺ ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δppm; 10.98 (1H, s), 9.58 (2H, m), 8.67 (1H, m), 7.93 (1H, m), 7.69 (1H, d, J = 7.8Hz), 7.51 (1H, m), 7.01 (1H, m), 5.19 (1H, m), 4.22 (2H, m), 2.30-1.80 (5H, m), 1.58 (6H, m), 1.25 (2H, m), 1.02 (3H, m)。

生物学的活性の測定
ヒストン脱アセチル化酵素活性
ヒストン脱アセチル化酵素活性を阻害する化合物の性能を、バイオモル（Biomol）から市販されているＨＤＡＣ蛍光活性分析を用いて測定した。簡単に言えば、イプシロン−アミノ基をアセチル化したリシンである、ＦｌｕｏｒｄｅＬｙｓ（商標）の基質を、阻害剤の存在下または非存在下でヒストン脱アセチル化酵素活性のソース（ＨｅＬａ核抽出物）と共にインキュベートした。

基質の脱アセチル化は、基質をＦｌｕｏｒｄｅＬｙｓ（商標）のデベロッパーに増感し、これが蛍光体を発生する。従って、ＨＤＡＣ活性のソースとの基質のインキュベーションは、ＨＤＡＣ阻害剤の存在下に減少されるシグナルの増加をもたらす。

データを阻害剤の非存在下で測定し、次のようにして、
％活性＝［（Ｓⁱ−Ｂ）／（Ｓ^o−Ｂ）］×１００
全てのサンプルからバックグラウンドシグナルを差し引いた、対照のパーセントで表した（ここで、Ｓⁱは基質、酵素および阻害剤の存在下でのシグナルであり、Ｓ^oは基質、酵素および阻害剤を溶解した媒体の存在下でのシグナルであり、Ｂは酵素の非存在下で測定したバックグラウンドシグナルである）。

ＨｅＬａ細胞由来の粗核抽出物からのヒストン脱アセチル化酵素活性を、スクリーニングのために用いた。チルバイオテック（Cilbiotech）（モンス（Mons）、ベルギー）から購入した組織標本を、指数増殖期に回収したＨｅＬａ細胞から調製した。

核抽出物をＪ．Ｄ．ＤｉｇｎａｍらのNucl.Acid.Res.,1983,11,1475-1489に記載の方法に従って調製した。最終的な緩衝剤組成は、２０ｍＭＨＥＰＥＳｐＨ７．９、１００ｍＭＫＣｌ、０．２ｍＭＥＤＴＡ、０．５ｍＭＤＴＴ、０．５ｍＭＰＭＳＦおよび２０％（ｖ／ｖ）グリセロールであった。

用量応答曲線を、重複した点を使用して、８つの化合物の濃度(最高濃度１０μＭ、３倍希釈)から作製した。

ＩＣ₅₀の結果は、以下の３つの範囲の１つに当てはめた：
範囲Ａ：ＩＣ₅₀＜１００ｎＭ；範囲Ｂ：ＩＣ₅₀１０１ｎＭから１０００ｎＭ；範囲Ｃ：ＩＣ₅₀＞１００１ｎＭ、
ＮＴ＝試験せず。

Ｕ９３７およびＨＵＴ細胞阻害分析
対数期に増殖する癌細胞株（Ｕ９３７およびＨＵＴ）を回収し、９６のウェルを有する組織培養プレート中に、１０００−２０００細胞／ウェルで播種した。２４時間の増殖後に、細胞を化合物で処理した。次いで、ＷＳＴ−１細胞生存分析を供給元（ロシュ・アプライド・サイエンス）の指示書に従って実施する前に、プレートをさらに７２−９６時間再インキュベートした。

データを阻害剤の非存在下で測定し、次のようにして、
％阻害＝１００−［（Ｓⁱ／Ｓ^o）×１００］
対照のパーセント阻害で表した（ここで、Ｓⁱは阻害剤の存在下でのシグナルであり、Ｓ^oはＤＭＳＯの存在下でのシグナルである）。

用量応答曲線を、６回の反復を用いて、８つの濃度（最高最終濃度１０μＭ、３倍希釈）から得た。

ＩＣ₅₀値を、グラフパッド・プリズム・ソフトウエア(Graphpad Prism software)を用いて、結果を様々な勾配（化合物の対数濃度に対する％活性）を有するＳ字状の用量応答についての等式に適合させた後に、非線形回帰分析により判定した。

ＩＣ₅₀の結果は、以下の３つの範囲の１つに当てはめた：
範囲Ａ：ＩＣ₅₀＜１００ｎＭ；範囲Ｂ：ＩＣ₅₀１０１ｎＭから１０００ｎＭ；範囲Ｃ：ＩＣ₅₀＞１０００ｎＭ、
ＮＴ＝試験せず。

ヒト全血のＬＰＳ−刺激
全血を、ヘパリン処理された吸引器(Becton Dickinson)を用いて、静脈穿刺により採血し、等量のＲＰＭＩ１６４０組織培養媒体(Sigma)中に希釈した。１００μｌをＶ−ボトムの９６ウェル組織培養処理プレートに入れた。１００μｌのＲＰＭＩ１６４０媒体中の阻害剤を添加して２時間後、最終濃度１００ｎｇ／ｍｌで、血液をＬＰＳ（Ｅ大腸菌株００５：Ｂ５、Sigma）で刺激し、５％ＣＯ₂中、３７℃で６時間インキュベートした。サンドウィッチＥＬＩＳＡ(R&D Systems #QTA00B)により、ＴＮＦ−αレベルを細胞非含有上澄液から測定した。

ＩＣ５０の結果は、以下の３つの範囲の１つに当てはめた：
範囲Ａ：ＩＣ₅₀＜１００ｎＭ
範囲Ｂ：ＩＣ₅₀１０１ｎＭから１０００ｎＭ
範囲Ｃ：ＩＣ₅₀＞１０００ｎＭ、
ＮＴ＝試験せず。

表１−結果

破壊細胞のカルボキシエステラーゼの分析
Ｒ₁がエステル基である本発明の各化合物について、細胞内のエステラーゼにより加水分解されるという要件に合致するか否かを判定するために、以下の分析により試験を行い得る。

細胞抽出液の調製
Ｕ９３７またはＨｕｔ７８の腫瘍細胞（〜１０⁹）を、４倍の体積のダルベッコス（Dulbeccos）ＰＢＳ（〜１リットル）中で洗浄し、５２５ｇ、１０分間、４℃でペレット化した。これを２度繰り返し、最終的な細胞ペレットを、３５ｍｌの冷均質緩衝液（トリズマ（Trizma）１０ｍＭ、ＮａＣｌ１３０ｍＭ、ＣａＣｌ₂ ０．５ｍＭ、ｐＨ７．０、２５℃）中に再懸濁した。

窒素キャビテーション（７００ｐｓｉ、５０分間、４℃）によりホモジネートを製造した。氷上にホモジネートを保ち、阻害剤の混合物を以下の最終的な濃度で補った。
ロイペプチン１μＭ
アプロチニン０．１μＭ
Ｅ６４８μＭ
ペプスタチン１．５μＭ
ベスタチン１６２μＭ
キモスタチン３３μＭ
５２５ｇ、１０分間の遠心分離により細胞ホモジネートを清澄化した後、得られた上澄液をエステラーゼ活性のソースとして用い、必要となるまで−８０℃で保存した。

エステル開裂の測定
エステルの対応するカルボン酸への加水分解を、前記のとおり調製した細胞抽出液を用いて測定し得る。この効果について、細胞抽出液（〜３０μｇ／０．５ｍｌの総検定体積）を、２５℃でのｐＨが７．５である、トリス塩酸２５ｍＭ、１２５ｍＭＮａＣｌ緩衝液中、３７℃でインキュベートした。

開始時、２．５μＭの最終濃度でエステル（基質）を加え、試料を３７℃で適当な時間（通常、０または８０分）インキュベートした。３倍の体積のアセトニトリルを加えることにより、反応を停止させた。開始時の試料について、アセトニトリルをエステル化合物に先立って加えた。１２０００ｇ、５分間の遠心分離の後、エステルおよびそれに対応するカルボン酸について、ＬＣＭＳ（ＳｃｉｅｘＡＰＩ３０００、ＨＰ１１００バイナリポンプ、ＣＴＣＰＡＬ）を用いて、室温で試料を分析した。

クロマトグラフィは、ＡｃＣＮ（７５×２．１ｍｍ）カラムおよび水／０．１％ギ酸中の５−９５％アセトニトリルの移動相に基づいた。加水分解の速度をｐｇ／ｍＬ／分で表す。

ＨＣＥ−１カルボキシエステラーゼの分析
ｈＣＥ−１によるエステルの対応するカルボン酸への加水分解は以下の手順を使用して測定することができる。開始時、ホスフェート分析緩衝剤（Ｋ₂ＰＯ₄ １００ｍＭ、ＫＣｌ４０ｍＭ、ｐＨ７．４）中６μｇ／ｍｌの濃度の組換えｈＣＥ−１１００μＬを、５μＭエステル基質を含有する等量の分析緩衝剤に加えた。十分に混合した後、三連のサンプルを３７℃にて０、２０または８０分間インキュベートした。

適切な時点で、６００μＬのアセトニトリルを添加することにより加水分解を停止させた。開始時のサンプルについては、酵素より前にアセトニトリルを加えた。サンプルを、エステルおよび対応するカルボン酸について、室温にてＬＣＭＳ（ＳｃｉｅｘＡＰＩ３０００、ＨＰ１１００バイナリポンプ、ＣＴＣＰＡＬ）により分析した。クロマトグラフィは、ＡｃＣＮ（７５×２．１ｍｍ）カラムおよび水／０．１％ギ酸中の５〜９５％アセトニトリルの移動相に基づいた。８０分後の酸および加水分解産物のレベルをｎｇ／ｍＬで表す。

表２

ＮＡ＝適用できず。ＮＤ＝測定せず。

表２は、実施例１４および１６の酸が前記の酵素アッセイにおいて親化合物Ａと同様なＩＣ５０を有することを示し、酵素への結合がエステラーゼモチーフの結合によって妨げられていないことを示す。２−置換化合物は前記分析でｈＣＥ−１により加水分解され、結果として酸が細胞内に蓄積する。この酸の蓄積は、実施例１４および１６が前記Ｕ９３７細胞分析において親化合物より有意に強力であるという結果をもたらす。これらデータは、エステラーゼモチーフの結合により達成され得る効力の利益を強調する。

表３

表３は、親化合物Ａが単球細胞株（Ｕ９３７）および非単球細胞株（Ｈｕｔ７８）において同様な効力を有する一方、実施例１４および１６は単球細胞株において非単球細胞株より３０倍強力であることを示す。これらのデータは化合物のマクロファージ選択性を強調する。

Claims

式（Ｉ）の化合物：
（式中、
Ａ、ＢおよびＤは独立して＝ＣＨ−または＝Ｎ−を表し；
Ｗは−ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ₂ＣＨ₂−であり；
Ｒ₁はカルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、または１以上の分子内カルボキシエステラーゼ酵素によりカルボン酸基に加水分解され得るエステル基であり；
Ｒ₂またはＲ₃のいずれもが水素でないという条件で、Ｒ₂およびＲ₃は天然または非天然のアルファアミノ酸の側鎖から選択されるか、あるいはＲ₂およびＲ₃はそれらが結合している炭素と一緒になって、３−６員の飽和シクロアルキルまたはヘテロサイクリル環を形成してもよく；
Ｙは、結合手、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）₂−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’−、−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ’、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ’または−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ’−（ここで、Ｒ’は水素または任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルである）であり；
Ｌ¹は式−（Ａｌｋ¹）_m（Ｑ）_n（Ａｌｋ²）_p−の２価の基
［ここで、ｍ、ｎおよびｐは独立して０または１であり、
Ｑは、（ｉ）任意に置換されていてもよい、５−１３員環の、２価の単環式もしくは２環式の炭素環式基または複素環式基であるか、あるいは（ｉｉ）ｍおよびｐが共に０である場合、式−Ｘ²−Ｑ¹−または−Ｑ¹−Ｘ²−の２価の基｛ここで、Ｘ²は−Ｏ−、Ｓ−またはＮＲ^A−（ここで、Ｒ^Aは水素もしくは、任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルである）であり、Ｑ¹は任意に置換されていてもよい、５−１３員環の、２価の単環式もしくは２環式の炭素環式または複素環式基である｝であり、
Ａｌｋ¹およびＡｌｋ²は、独立して、任意に置換されていてもよい、２価の（Ｃ₃−Ｃ₇）シクロアルキル基、または任意に置換されていてもよい、直鎖状もしくは分枝鎖状の（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニレンもしくは（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニレン基を表し、これらの基はエーテル（−Ｏ−）、チオエーテル（−Ｓ−）もしくはアミノ（−ＮＲ^A−）結合（ここで、Ｒ^Aは水素または任意に置換されていてもよい（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルである）を任意に含んでいてもよいか、あるいは末端としていてもよい］であり；
Ｘ₁は、結合手；−Ｃ（＝Ｏ）；または−Ｓ（＝Ｏ）₂−；−ＮＲ₄Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₄−、−ＮＲ₄Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ₅−、−ＮＲ₄Ｓ（＝Ｏ）₂−もしくは−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ₄−（ここで、Ｒ₄およびＲ₅は、独立して水素または任意に置換されていてもよい、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルである）を表し；そして
ｚは０または１である）。
Ａ、ＢおよびＤがそれぞれ＝ＣＨ−である請求項１に記載の化合物。
Ａ、ＢおよびＤの１つが＝Ｎ−であり、その他がそれぞれ＝ＣＨ−である請求項１に記載の化合物。
基ＨＯＮＨＣ（＝Ｏ）−Ｗ−が、基Ｒ₁Ｒ₂Ｒ₃Ｃ−ＮＨＹＬ¹Ｘ¹［ＣＨ₂］_z−に対してメタ−またはパラ−位で、Ａ、ＢおよびＣを含む環に結合している請求項１〜３のいずれか１つに記載の化合物。
基Ｒ₁Ｒ₂Ｒ₃Ｃ−ＮＨＹＬ¹Ｘ¹［ＣＨ₂］_z−において、ｚが０である請求項１〜４のいずれか１つに記載の化合物。
基Ｒ₁Ｒ₂Ｒ₃Ｃ−ＮＨＹＬ¹Ｘ¹［ＣＨ₂］_z−において、Ｙが結合手である請求項１〜５のいずれか１つに記載の化合物。
基Ｒ₁Ｒ₂Ｒ₃Ｃ−ＮＨＹＬ¹Ｘ¹［ＣＨ₂］_z−において、Ｘ¹が結合手である請求項１〜６のいずれか１つに記載の化合物。
基Ｒ₁Ｒ₂Ｒ₃Ｃ−ＮＨＹＬ¹Ｘ¹［ＣＨ₂］_z−において、ｚが０であり、ＹおよびＸ¹がそれぞれ結合手であり、Ｌ¹が式−（Ａｌｋ¹）_m（Ｑ）_n（Ａｌｋ²）_p−(ここで、ｍおよびｐの一方が０であり、他方が１であり、ｎが０である)の２価の基である請求項１〜４のいずれか１つに記載の化合物。
基−ＹＬ¹Ｘ¹［ＣＨ₂］_z−が、−ＣＨ₂−である請求項１〜４のいずれか１つに記載の化合物。
Ｒ₁が、式Ｒ₁₂ＯＣ（＝Ｏ）−：
[式中、Ｒ₁₂は、Ｒ₇Ｒ₈ＣＲ₉−｛ここで、
（ｉ）Ｒ₇は水素、または任意に置換されていてもよい、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−（Ｚ¹）_a−[（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル]_b−または（Ｃ₂−Ｃ₃）アルケニル−（Ｚ¹）_a−[（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル]_b−（ここで、ａおよびｂは独立して０または１であり、Ｚ¹は−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＲ₁₃−（ここで、Ｒ₁₃は水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルである）である）であり；Ｒ₈およびＲ₉は、独立して水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−であるか；あるいは
（ｉｉ）Ｒ₇は水素、または任意に置換されていてもよいＲ₁₄Ｒ₁₅Ｎ−（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−（ここで、Ｒ₁₄は水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルであり、Ｒ₁₅は水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルであるか；またはＲ₁₄およびＲ₁₅はそれらが結合している窒素と一緒になって、任意に置換されていてもよい、５もしくは６の環原子の単環式複素環、または８−１０の環原子の２環式複素環系を形成する）であり、Ｒ₈およびＲ₉は独立して水素または（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキル−であるか；あるいは
（ｉｉｉ）Ｒ₇およびＲ₈はそれらが結合している炭素と一緒になって、任意に置換されていてもよい、３−７の環原子の単環式炭素環または８−１０の環原子の２環式炭素環系、あるいは７−１０の環原子の架橋単環式炭素環系を形成し、Ｒ₉は水素である｝であり、そして、
（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の場合、「アルキル」はフルオロアルキルを含む]
のエステル基である請求項１〜９のいずれか１つに記載の化合物。
Ｒ₁が、式Ｒ₁₂ＯＣ（＝Ｏ）−（ここで、Ｒ₁₂は、メチル、トリフルオロメチル、エチル、ｎ−もしくはイソ−プロピル、ｎ−、ｓｅｃ−もしくはｔｅｒｔ−ブチル、シクロペンチル、メチル置換シクロペンチル、シクロヘキシル、アリル、ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル、フェニル、ベンジル、２−、３−もしくは４−ピリジルメチル、Ｎ−メチルピペリジン−４−イル、テトラヒドロフラン−３−イルまたはメトキシエチルである）のエステル基である請求項１〜１０のいずれか１つに記載の化合物。
Ｒ₁が、式Ｒ₁₂ＯＣ（＝Ｏ）−（ここで、Ｒ₁₂はシクロペンチルである）のエステル基である請求項１〜１１のいずれか１つに記載の化合物。
置換基Ｒ₂およびＲ₃の一方が（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル基であり、他方がメチル、エチル、ｎ−およびイソ−プロピル、ｎ−、ｓｅｃ−およびｔｅｒｔ−ブチル、フェニル、ベンジル、チエニル、シクロヘキシル、ならびにシクロヘキシルメチルからなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ₂およびＲ₃が、それらが結合している炭素と一緒になって、３〜６員の飽和スピロシクロアルキル環を形成する請求項１〜１２のいずれか１つに記載の化合物。
Ｒ₂およびＲ₃の一方がメチルまたはエチルであり、他方がベンジルまたは（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルであるか；あるいは
Ｒ₂およびＲ₃が、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル環を形成する請求項１〜１３のいずれか１つに記載の化合物。
Ｒ₂およびＲ₃の一方がメチルであり、他方がメチル、エチル、ｎ−もしくはイソ−プロピル、ベンジルまたはｎ、ｓｅｃもしくはｔｅｒｔブチルであるか；あるいは
Ｒ₂およびＲ₃が、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル環を形成する請求項１〜１４のいずれか１つに記載の化合物。
式（ＩＥ）：
（式中、Ｒ₁、ＷおよびＢは請求項１で定義されたとおりであり、Ｒ₂およびＲ₃の一方がメチルであり、他方がメチル、エチル、ｎ−もしくはイソ−プロピル、ベンジル、またはｎ、ｓｅｃもしくはｔｅｒｔブチルであるか；あるいはＲ₂およびＲ₃が、それらが結合する炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル環を形成する）
を有する請求項１に記載の化合物。
Ｒ₁が、式Ｒ₁₂ＯＣ（＝Ｏ）−（ここで、Ｒ₁₂はシクロペンチルである）のエステル基である請求項１６に記載の化合物。
Ｗが−ＣＨ＝ＣＨ−である請求項１６または１７に記載の化合物。
医薬的に許容な塩の形態である請求項１〜１８のいずれか１つに記載の化合物。
シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロブタンカルボキシレート、
シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート、
シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロブタンカルボキシレート、
シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボキシレート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−アラニネート、
シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロプロパンカルボキシレート、
シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロヘキサンカルボキシレート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−α−メチル−Ｌ−フェニルアラニネート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−ロイシネート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｌ−ロイシネート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−Ｌ−イソバリネート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−３−メチル−Ｌ−イソバリネート、
シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロペンタンカルボキシレート、
シクロペンチル１−（｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボキシレート、
シクロペンチルＮ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−アラニネート、
シクロペンチルＮ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ，Ｌ−ロイシネート、
シクロペンチルＮ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−３−メチル−Ｌ−イソバリネート、
１−（｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボン酸、
Ｎ−｛４−［３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロピル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ，Ｌ−ロイシン、
１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボン酸、
１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロペンタンカルボン酸、
１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロブタンカルボン酸、
ｔ−ブチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］−２−メチル−Ｄ−アラニネート、
３−メチルシクロペンチルＮ−（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）−２−メチル−Ｌ−アラニネートからなる群から選択される請求項１に記載の化合物、またはそれらの医薬的に許容な塩。
シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロブタンカルボキシレート、
シクロペンチル１−［（｛６−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ピリジン−３−イル｝メチル）アミノ］シクロヘキサンカルボキシレート、
シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロブタンカルボキシレート、
シクロペンチル１−（｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝アミノ）シクロペンタンカルボキシレート、
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−２−メチル−Ｄ−アラニネート、および
シクロペンチルＮ−｛４−［（１Ｅ）−３−（ヒドロキシアミノ）−３−オキソプロプ−１−エン−１−イル］ベンジル｝−α−メチル−Ｌ−フェニルアラニネートからなる群から選択される請求項１に記載の化合物；またはそれらの医薬的に許容な塩。
請求項１〜２１のいずれか１つに記載の化合物（ここで、Ｒ₁は請求項１で定義されたエステル基である）を、医薬的に許容な担体と共に含む医薬組成物。
ＨＤＡＣ活性の阻害のための、またはそのための薬剤の調製における請求項１〜２１のいずれか１つに記載の化合物（ここで、Ｒ₁は請求項１で定義されたエステル基である）の使用。
疾患が、細胞増殖性疾患、ポリグルタミン病、神経変性疾患、自己免疫性疾患、炎症性疾患、臓器移植拒絶、糖尿病、血液疾患または感染症の炎症性後遺症である請求項２３に記載の使用。
請求項１〜２１のいずれか１つに記載の化合物（ここで、Ｒ₁は請求項１で定義されたエステル基である）の有効量をＨＤＡＣの阻害に対応する疾患を患う対象者に投与することを含む、ＨＤＡＣの阻害に対応する疾患の治療方法。
疾患が、移植拒絶、慢性関節リウマチ、乾癬性関節炎、１型の糖尿病、ぜん息、炎症性腸疾患、全身性紅斑性狼瘡、および感染状態を伴う炎症（例えば、敗血症）、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、慢性閉塞性肺疾患、多発性硬化症、アトピー性皮膚炎ならびに対宿主性移植片病である請求項２５に記載の方法。
治療が、癌細胞増殖の治療である請求項２３または２４に記載の使用、あるいは請求項２４または２５に記載の方法。
治療が、慢性関節リウマチの治療である請求項２３または２４に記載の使用、あるいは請求項２４または２５に記載の方法。