JP2012515754A - 神経栄養因子介在疾患の治療 - Google Patents

Abstract

Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン及びスピロステンステロイド性サポゲニン及びそのエステル、エーテル、ケトン及びグリコシル化型から選択された薬剤を、例えばＢＤＮＦ及び／又はＧＤＮＦなどの神経栄養因子（ＮＦｓ）の自己制御恒常性を、恒常性を制御した状態で非毒性態様で対象の天然ＮＦｓを調整することによって、制限された対処可能な副作用で、誘発する。有効量の少なくとも一の薬剤は、ある範囲のＮＦ介在疾患、特に、神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、免疫性、及び腫瘍性疾患の治療又は予防に、及び、組織（例えば皮膚、骨、眼及び筋肉）の治癒、及び通常の皮膚、骨、眼、及び筋肉の健康を支援する場合を含む、ダメージを受けたあるいは異常な組織における又はこれに関連するニューロン又はその他の機能の回復又は正常化において、対象に投与される。
【選択図】図１

Description

本発明は、神経栄養因子介在疾患の治療及び予防に関するものであり、特に、神経疾患、精神疾患、炎症性疾患、アレルギー性疾患、免疫疾患、及び腫瘍性疾患、及び、損傷を受けたあるいは異常な組織内のあるいはこれに関連するニューロン機能及びその他の機能の回復あるいは正常化に関し、組織（例えば、皮膚、骨、目、及び筋肉）治癒と、通常の皮膚、骨、目及び筋肉の健康を支援する場合を含み、非治療的方法、及び、この方法に使用する化合物及び組成物に関する。

天然の神経栄養因子（ＮＦｓ）には、ニューロトロフィン、形質転換増殖因子βスーパーファミリー、ＮＦｓ及びニューロカインがあり、例えば、神経成長因子（ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、毛様神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、ニューロトロフィン３（ＮＴ−３）、ニューロトロフィン４（ＮＴ−４）、及び神経膠細胞由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）がある。神経栄養因子は、神経栄養因子受容体（ＮＦｒｓ）として知られている細胞受容体に結合する。ＮＦｒ ＴｒｋＡは、ＮＧＦの効果を介在する。ＮＦｒ ＴｒｋＢは、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、及びＮＴ−４によって活性化される。ＮＦｒ ＴｒｋＣは、ＮＴ−３によって活性化される。ＮＦｒ低親和性ＮＧＦ受容体（ＬＮＧＦＲ又はｐ５７）は、ニューロトロフィンファミリーのすべての員に結合する。ＧＤＮＦ用のＮＦｒは、ＧＤＮＦ結合ドメイン（ＧＤＮＦ受容体α１（ＧＲＦα１））と、その受容体チロシン成分Ｒｅｔ．の二つの成分からなる。ＧＤＮＦのＧＦＲα１への結合は、Ｒｅｔ．を活性化する。

天然のＮＦｓの異常発現は、様々な疾患に関連しており、小分子非ペプチド治療薬の想定されるＮＦ様活性あるいはＮＦ活性化活動に基づいて、治療が考案されている。原理的には、小分子非ペプチド治療薬（非ポリペプチド及び非たんぱく質を含む）治療薬は、ペプチドに比較して、一般的に低コストであること、比較的製造が容易であること、取扱いと保存が容易であること、固有の毒性が低いこと、患者、特に脳への送達が比較的容易であること、研究開発段階における最適化が比較的容易であること、を含めてペプチド薬剤を超える様々な利点がある。ペプチドＮＦｓ、ＮＦ模倣体、及びＮＦエンハンサに潜在的な薬剤として相当の関心があるにもかかわらず、これらの固有の開発上の困難性、潜在的な毒性、及びその他の問題が見つかり、これらの可能性を大きく制限している。

数々の低分子非ペプチドが、ある種の神経疾患や精神疾患の治療用に提案されている。以下の段落は、いくつかの公開された文献に注目している。しかしながら、これらの従来の提案はすべて、その薬剤の実質的な副作用によって特徴づけられており、この副作用が有効投与量の投与を妨げているため、すべてのケースにおいて、この化合物を開発して、神経疾患及び精神疾患の治療あるいは予防する市販薬を提供することができない。

例えば、キサリプロデン（サノフィ・アベンティス社）（１−（２−ｎａｐｈｔｈａｌｅｎ−２−ｙｌｅｔｈｙｌ）−４−［３−（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｅｎｙ１］−３，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−２Ｈ−ｐｙｒｉｄｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；塩のＭＷ：４１７．５；遊離塩基のＭＷ：３８１））、セロトニン５−ＨＴ_１Ａ受容体アゴニストが後に発見され、これもある程度ＮＧＦを活性化する。キサリプロデンは、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の潜在的な治療として段階ＩＩＩの治験を完了したと報告されており（Ｄｒｕｇｓ ＲＤ．２００３，４（６），ｐｐ．３８６−３８８）、最近では、アルツハイマー病への可能性があるとして段階ＩＩＩで評価を受けている。しかしながら、５−ＨＴ_１Ａアゴニスト活性が、投与量依存型副作用を生じさせ、これがキサリプロデンの医薬としての使用を制限している。

４−メチルカテコール（ＭＷ１２４）は、ニューロトロフィン合成を刺激し、従って、理論的には、神経変性の治療へのアプローチを提供する旨が報告されている。（Ｆｕｋｕｋａｗａ ｅｔ ａｌ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，５３，ｐｐ．２３３−２３６）。しかしながら、この薬剤は、おそらく神経成長因子（ＮＧＦ）の発現を過剰に刺激することにより、毒性のある副作用を生じることがわかっている。

レチノイン酸は、ＮＧＦの血清と神経レベルを上げて糖尿病マウスの神経疾患を防止することがわかっており（Ａｒｒｉｅｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，２００５，３５．Ｐｐ．２０１−２０７）、及び、神経変性疾患において可能性のある治療的役割を有することが提言されている（Ｍｅｙ ａｎｄ ＭｃＣａｆｆｅｒｙ，Ｔｈｅ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｔｉｓｔ，２００４，１０，ｐｐ．４０９−４２０）。しかしながら、この薬剤は、深刻な容量制限毒性副作用があることが知られている。

ＡＭＰＡ受容体増強剤（ＡＭＰＡｋｉｎｅｓ）は、グルタミン酸受容体修飾因子であり、インビボでＢＤＮＦ発現を強化することを示している（Ｍａｃｋｏｗｉａｋ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００２，４３，ｐｐ．１−１０）。更に、二つのＡＭＰＡｋｉｎｅｓ（ＣＸ６１４とＣＸ５４６）は、ＡＭＰＡｋｉｎｅｓの連続的露出にも関わらず、ＢＤＮＦ ｍＲＮＡレベルを、投与後６−１２時間まで最大限に上げて、次いで、投与後４８時間まではほぼ対照レベルに下がることを示している（Ｌａｕｔｅｒｂｏｒｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２００３，３０７，ｐｐ．２９７−３０５）。いくつかのＡＭＰＡｋｉｎｅｓは神経性疾患のために、開発された、あるいは、現在開発されている（Ｐｒｉｃｅ ｅｔ ａ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２００７，１１５，ｐｐ．２９２−３０６）。しかしながら、これらの薬剤の少なくともいくつかは毒性副作用がある。

セロトニン選択的再取り込み阻害薬（ＳＳＲＩｓ）やモノアミン酸化酵素阻害薬（ＭＡＯＩｓ）としての一次作用を有するものを含む、ある種の抗鬱剤も、インビボでＢＤＮＦ ｍＲＮＡレベルを上げることが示されている（Ｍａｌｂｅｒｇ ａｎｄ ｂｌｅｎｄｙ，Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００５，２６，ｐｐ．６３１−６３８；Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｔｕｒｒｉｌｌａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００５，４９，ｐｐ．１１７８−１１８８）。また、“Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ ｄｒｕｇｓ”ｂｙ，Ｃａｓｔｒｅｎ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００４，４，ｐｐ．５８−６４も参照されたい。しかしながら、これらの薬剤はすべて、多くの望ましくない副作用を有することが良く知られている。

イムノフィリンは、あるクラスの免疫抑制剤であり、神経栄養因子の活性を高めることが示されている（Ｐｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２００７，１１５，ｐｐ．２９２−３０６）。ＦＫ５０６（タクロリムス）は、インビボで、ＢＤＮＦ ｍＲＮＡレベルを高めること（Ｚａｗａｄｚｋａ ａｎｄ Ｋａｍｉｎｓｋａ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００３，２２，ｐｐ．２０２−２０９）、及び、ＢＤＮＦとＧＤＮＦたんぱく質レベルを高めること（Ｔａｎａｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，９７０，ｐｐ．２５０−２５３）が示されている。しかしながら、このクラス全体が、重大な容量制限毒性副作用があることが知られている。

ＧＦＲ_＊−１受容体アゴニストであるＮ^４−（７−クロロ−２−［（Ｅ）−２−クロロ−フェニル−ビニル）］−キノリン−４−イル）−Ｎ，Ｎ’−ジエチル−ペンタン−１，４−ジオン（ＸＩＰ４０３５）は、濃度依存態様で神経突起伸長を促進すると報告されている（Ｔｏｋｕｇａｗａ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，４２，１，Ｊａｎｕａｒｙ ２００３，ｐｐ．８１−８６）。しかしながら、この分子は、容量制限毒性副作用が多すぎる。

従って、これらの公知の小分子薬剤は、ＮＦ様効果あるいはＮＦ活性化効果をいくらか有しているが、前臨床モデル、あるいは臨床モデルにおいて、容量依存性副作用を有する。この副作用は、通常、明らかな毒性が自体に現れる。このことが、治療におけるこの薬剤の潜在的な利用を大きく制限している。

神経疾患及び精神疾患のための、改良された、特に非毒性の、小分子非ペプチド生物活性薬剤の開発が一般的に必要とされている。

ＷＯ−Ａ−９９／１６７８６、ＷＯ−Ａ−９９／４８４８２、ＷＯ−Ａ−９９／４８５０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０８、ＷＯ−Ａ−０２／０７９２２１、ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３、ＷＯ−Ａ−２００５／１０５１０８、ＷＯ−Ａ−２００５／１０５８２５、及びＷＯ−Ａ−２００６／０４８６６５は、その開示がここに引用によって組み込まれており、認知機能障害及びある種のその他の神経疾患及び精神疾患の治療におけるある種の小分子ステロイドの使用に関する。一般的に、これらの活性薬剤は、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型である。「サポゲニン」の表現は、例えば、前記サポゲニンの疑似サポゲニン型とジヒドロ疑似サポゲニンといった、Ｅ及びＦ開環誘導体をすべて含むと解される。この化合物の不飽和型では、一又はそれ以上の二重結合が、Ａ／Ｂ−ｃｉｓモチーフに影響しない位置に存在する。

ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３、第２５頁、第５行乃至１８行には、少なくともいくつかの化合物が、有害な細胞体の変化と神経突起の委縮を逆転させる、神経栄養因子、ＴＧＦ−β−スーパーファミリーＮＦｓ及び、ニューロカインなどのＮＦｓの放出を低減する、及び、神経毒性と神経細胞アポトーシスを低減することを含む、ある種の神経変性を遅らせる又は逆転させることが分かっていると、報告されている。この記載は、また、神経防護作用と受容体喪失効果の逆転が能動的に調整された効果であり、過去の劣化が、連続的な劣化に対して防護することで正常な状態あるいは若い状態に戻ることが報告されている。

同じ文献の第２６頁、第８乃至１５行には、更に、活性剤の一生理作用が、ＮＦｓ又はその受容体の合成又は放出を増やす能力、あるいは、劣化率を低減する能力であると考えられると、報告されている。成長因子についてのこれらの効果は、「細胞質受容体あるいは核内受容体上の化合物の効果、あるいは成長因子のｍＲＮＡ生成率についての直接的な当然の効果を用いて化合物を促進剤領域に結合させる効果、あるいは別の重要な要素の生成を増やすことによって生じた結果としての効果によるかもしれない」と、理論づけている。

同じ文献の第２０頁、第４行以降は、自閉症症候群、鬱病、及び統合失調症の精神疾患を治療するこの活性薬剤の使用について述べている。

Ｚｈａｎｇ Ｙ，ｅｔ ａｌ，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９ Ｍａｒｃｈ ２００８，５８２，Ｉｓｓｕｅ ６，ｐｐ．９５６−９６０は、ここに引用により組み込まれているが、スミラゲニンは、１−メチル−４−フェニルピリジニウム（ＭＰＰ^＋）によって損傷したラットの中脳ドーパミン神経細胞中のＧＤＮＦ ｍＲＮＡ発現を、培地におけるＧＤＮＦの容量と同様に増加させるように見えると報告している。また、スミラゲニンは、これらのニューロン中のＭＰＰ^＋が誘発する神経損傷及び委縮を防止するように見えるとも報告している。この刊行物は、本発明者のものであり、指定国すべてにおいて従来技術ではない。

免疫システムの恒常性におけるＮＦｓの役割は、近年の多くの研究主題であった（例えば、Ｖｅｇａ，Ｊ Ａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｎａｔ．２００３，２０３，ｐｐ．１−１９、及びここにあげた引用例を参照。これらはすべて引用によりここに組み込まれている）。Ｖｅｇａ ｅｔ ａｌの刊行物により詳細に説明されており、第８頁の表２に要約されているように、ＮＦｓは免疫システム、特に、Ｂ−リンパ球、Ｔ−リンパ球、単核白血球／マクロファージ、好中球、好酸球、好塩基球、マスト細胞及び造血細胞、並びに血小板及び脈管組織に関係している様々な細胞に関連する様々な活性を有することが示されている。ＮＦｓの恒常性調整は、免疫システム疾患治療あるいは予防に関する価値のある技術を提供する。

炎症や炎症性疾患、及びアレルギィにおけるＮＦｓの役割も、多くの注目を集めている。炎症やアレルギィ反応の間、並びに免疫システムに疾患がある場合は、ＮＦＧレベルが上がることが知られている（Ｓｔａｎｉｓｚ，ＡＭ ＆ Ｓｔａｎｉｓｚ，ＪＡ，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２０００，９１７，ｐｐ．２６８−２７２；Ｏｔｅｎ，Ｕ ｅｔ ａｌ，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，２０００，９１７，ｐｐ．３２２−３３０；Ｖｅｇａ ｅｔ ａｌの第１０頁、第２欄、及び第１１頁、第１欄と第２欄に挙げられた引例も参照）。ＮＦｓの恒常性調整は、炎症や炎症性疾患及びアレルギィ反応の治療あるいは予防に関する価値のある技術を提供する。

良く知られているように、炎症反応、アレルギィ反応、及び免疫反応は、例えば、自己免疫疾患や、毒性、パラサイト、及びその他の感染体による課題に応答して、同時に、相関して生じることがある。ＮＦｓの恒常性調整は、これらの症状の治療あるいは予防に関する価値のある技術を提供する。

ＮＧＦは、血管炎誘発性関節リュウマチに有益な効果を有することが示されており（Ｔｕｖｅｒｉ，Ｍ．ｅｔ ａｌ，Ｌａｎｃｅｔ，２０００ Ｎｏｖ．１８，３５６，ｐａｇｅｓ １７３９−１７４０；Ａｌｏｅ，Ｌ．，ａｒｃｈ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００１，１０９，ｐａｇｅｓ ３５４−３５６）、アレルギィ性又は炎症性プロセスにおけるＮＦ過剰発現の阻害における新しい治療的戦略と考えられていることが報告されている（上述のＶｅｇａ ｅｔ ａｌ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ，ｐａｇｅ １２，ｃｏｌｕｍｎ １）。神経疾患に関する上記に説明した理由によって、ＮＧＦたんぱく質の使用は、小分子の使用より要望が少ない。ＮＦ過剰発現調整用小分子薬剤は、非常に望ましいであろう。

ＷＯ−Ａ−０１／６４２４７は、その開示がここに引用によって組み込まれており、癌細胞表面、特にｔｒｋ＋癌細胞におけるＮＦ受容体の発現によって特徴づけられる腫瘍性疾患（癌）の治療あるいは予防方法を記載している。この方法は、例えば、抗ＮＦ抗体、抗ＮＦアンチセンスポリヌクレオチド、あるいは抗ＮＦｔｒｋ突然変異体など、有効量の抗ＮＦ薬剤（この文献では、抗神経栄養因子、あるいは、抗ＮＴ薬剤と呼ばれている）を投与するステップを含む。胸、甲状腺、大腸、肺、子宮、皮膚、筋肉、膵臓、前立腺、腎臓、生殖器官、血液、免疫システム組織（例えば、脾臓、胸線、骨髄）、脳及び末端神経系組織、を含む様々な癌をこの方法で治療あるいは予防できることが記載されている。この薬剤のＮＦｓへの非常に特別な結合を介する動作モードが記載されており、活性化ＮＦ配位子を中性化することによるｔｒｋ受容体の抑制につながっている（第５頁、第８乃至１０行）。

Ｉｎｎｏｍｉｎａｔｏ，Ｐ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．，２００１，１９４，ｐａｇｅｓ ９５−１００は、その内容がここに引用によって組み込まれており、メラノーマ細胞表面上のＮＦｓとＮＦ受容体の発現について述べている。従って、皮膚癌細胞、特にメラノーマ細胞は、ＮＦ受容体陽性癌細胞の上記リストに含まれる。

神経疾患に関する上記に説明した理由で、抗体、ポリヌクレオチド及び抗ＮＦ受容体突然変異たんぱく質の使用は、小分子の使用より望ましくない（ＬｅＳａｕｔｅｕｒ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１９９６，１４，ｐａｇｅ １１２０参照）。受容体、すなわち、ＮＦたんぱく質の作用形態に類似するものの結合パートナーの制御を通じて、ＮＦｓの恒常性制御に小分子薬剤を使用して癌細胞のｔｒｋ受容体を抑制することは、非常に望ましい。

本発明は、上述のＡ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型が、以下に述べるように、非毒性態様でのＮＦｓの修飾につながり、対象の恒常性制御プロセスを正常なままにしておくという我々の新規発見に基づいている。このように、この薬剤は、わずかな副作用でＮＦｓの恒常性自己制御を誘発する。副作用がある場合は、それに対処することができ、有効量の投与を妨げない。自己制御恒常性を誘発する、本質的に非毒性、非ペプチドである小分子を発見し、使用することにより、不健康状態において、一又はそれ以上のＮＦｓが、副作用を起こすことなく健康な状態に向けて修復（高レベルあるいは低レベルで）されることは、予期しないことで、驚くべきことであり、以下に詳細に説明するように有意な利益を提供する。

更に、我々は、この薬剤が、副作用を起こすことなく一以上のＮＦ、例えば、ＢＤＮＦとＧＤＮＦの自己制御恒常性を誘発することを発見した。一の活性薬剤による、副作用を伴うことのない一以上のＮＦの自己制御恒常性の達成は驚くべきことであり、我々の知識では、あらゆる小分子薬剤において唯一のことである。ニューロンは、最適な神経防護作用と神経修復作用のためには、通常、一以上のＮＦを必要とすることがわかっているので、本発明によるこの発見は、ＮＦ介在疾患とこれに関連する症状の実質的に改善された治療と予防を提供する。

ＮＦｓが、皮膚、角膜組織、骨及び筋肉を含む組織を治癒する役割を果たしており、一般的に、皮膚、骨、及び筋肉の健康に有益であることも知られている。例えば、Ａｌｂｅｒｓ，Ｋ．Ｍ．ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｔｉｓｔ ２００７，１３，ｐａｇｅｓ ３１７−３８２；Ａｓａｕｍｉ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｏｎｅ，２６（６），Ｊｕｎｅ ２０００，ｐａｇｅｓ ６２５−６３３；Ｙｏｕ，Ｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ ＆Ｖｉｓｕａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２００１，４２（１１），ｐａｇｅｓ ２４９６−２５０４；Ｃｒｕｉｓｅ，Ｂ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２７１，（２００４），ｐａｇｅｓ １−１０；Ｊｕｒｊｕｓ，Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｕｒｎｓ ３３（２００７），８９２−９０７；Ｍａｔｓｕｄａ，Ｈ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８７（３），２ Ｆｅｂｒｕａｒｙ １９９８，ｐａｇｅｓ ２９７−３０６；Ｍｅｎｅｔｒｅｙ，Ｊ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｊｏｉｎｔ Ｓｕｒｇ Ｂｒ），８２−Ｂ（１），Ｊａｎｕａｒｙ ２０００，ｐａｇｅｓ １３１−１３７；Ｍｉｃｅｒａ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ＆ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ ｒｅｖｉｅｗｓ，１８，（２００７），ｐａｇｅｓ ２４５−２５６；Ｎｉｔｈｙａ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ，Ａｃｔａ，１６２０，（２００３），ｐａｇｅｓ ２５−３１； Ｍａｔｓｕｄａ，Ｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９８，１８７，ｐａｇｅｓ ２９７−３０６；Ｌａｍｂｉａｓｅ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓｉｏｎ Ｓｃｉ．，２０００，４１，ｐａｇｅｓ １０６３−１０６９参照。これらの刊行物の内容は、ここに引用により組み込まれている。

本発明の基本的な発見は、従って、皮膚、骨、筋肉、及び角膜組織などの眼組織を含む組織の治癒と健康に適用することもできる。従って、本発明は、また、損傷を受けたあるいは異常な組織の、あるいはこれに関連する神経機能の修復又は正常化に関するものであり、組織（例えば、皮膚、骨、眼、及び筋肉）治癒の支援及び、運動、労働あるいは消耗からの筋肉や組織の回復、日光への露出、風への露出、雨への露出、寒さへの露出、老化、しわからの皮膚の回復、持久力の改善、疲労感の低減を含む、一般的な皮膚、骨及び筋肉の健康に関する。限定することなく、本発明が支援する組織治癒には、以下により詳細に述べるように、創傷や火傷の治癒が含まれる。

本発明の第１の態様によれば、対象の天然ＮＦｓを恒常性を制御した非毒性態様で制御することによって、対象の神経栄養因子（ＮＦｓ）の自己制御恒常性を誘発する方法が提供されており、この方法は、対象に、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型から選択した一又はそれ以上の有効量の薬剤投与するステップを具える。対象の天然ＮＦｓは、ＢＤＮＦとＧＤＮＦの一方あるいは両方であっても良い。

本発明の第１の態様の方法は、ＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、制限された、対処可能な副作用を伴って行われる。

本発明の第１の態様の特に好ましい一実施例では、誘発された恒常性が、例えば、ＢＤＮＦとＧＤＮＦなど、対象の二又はそれ以上の天然ＮＦｓを共に制御する。

本発明の第２の態様によれば、対象の天然ＮＦｓを、恒常性を制御した非毒性態様で制御することによって対象のＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型から選択した薬剤が提供されている。

本発明の第２の態様による使用のための薬剤は、ＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、制限された対処可能な副作用を伴って生じる薬剤である。

本発明の第３の態様によれば、対象の天然ＮＦｓを、恒常性を制御した非毒性態様で制御することによって対象のＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型から選択した薬剤を含む組成物が提供されている。

本発明の第３の態様による使用のための組成物は、ＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、制限された対処可能な副作用を伴って生じる。

本発明の第４の態様によれば、対象の天然ＮＦｓを、恒常性を制御した非毒性態様で制御することによって対象のＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する薬剤の製造における、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型から選択した薬剤の使用が提供されている。

本発明の第４の態様による使用は、ＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、制限された対処可能な副作用又は有害な副作用を伴って生じる。

本発明は、有害な副作用、特に、例えば、ＮＧＦなどのＮＦｓの過剰誘発、過剰刺激あるいは過剰増強に関連する副作用、受容体アゴニスト（アンタゴニスト）作用に関連する副作用、及び酵素結合作用に関連する副作用を制限する。

本発明は、ＮＦｓ介在疾患、特に、神経性疾患、精神性疾患、炎症性疾患、アレルギィ性疾患、免疫疾患、及び腫瘍性疾患の治療方法と共に使用され、ヒト及び非ヒト動物の対象における、組織（例えば、皮膚、骨、眼、及び筋肉）治癒の支援及び、一般的な皮膚、骨、眼及び筋肉の健康、及び非治療的方法に関連する場合を含めて、損傷を受けたあるいは異常な組織中の、あるいはこの組織に関連する神経作用及びその他の作用の修復又は正常化に使用することができる。

ここで用いられている用語「ＮＦ介在」とは、一般的な意味に解するべきであり、神経栄養因子が、疾患あるいは症状の進展、進行、あるいは効果に寄与する役割を果たしていると理解される場合の疾患及び症状を含む。従って、例えば、現在の兆候がＮＦ受容体、そのアゴニスト（アンタゴニスト）、あるいはＮＦｓのその他の活性化因子又は抑制因子に関係している疾患あるいは症状は、本発明の「ＮＦ介在」疾患又は症状であると解するべきである。このような疾患及び症状は、本発明によるヒト又は非ヒト動物対象の天然ＮＦｓの恒常性制御に応答することが予期される。

このように、本発明は、例えば、けがによって、血液不足によって、老化によって、あるいは（皮膚の場合は）しわによって、あるいは日光、風、雨、冷気にさらすことによって、あるいはその他の障害媒体によって損傷を受けた組織（脳組織、あるいは、皮膚、骨、眼、及び筋肉などのその他の組織にかかわらず）内の、あらゆる損傷を受けた組織あるいは異常組織の、神経機能及びその他の機能回復と併用して用いることができる。本発明による正常な神経機能の回復は、通常、神経再生と、血流の改善、並びに、中枢神経系（ＣＮＳ）又は末梢神経系（ＰＮＳ）における炎症などの神経疾患の症状の正常化あるいはニューロンの異常、につながるＮＦｓの自己制御恒常性の誘発によって達成される。

このように、本発明は、創傷治癒の支援と共に使用することができ、特に、ヒト及びその他の哺乳動物の皮膚創傷治癒の速度と質を向上させることができる。このコンテキストにおいて、「創傷」は、例えば、切り傷、擦り傷、ナイフによる傷、外科的外傷、あざ、やけど、潰瘍、痛みなどの損傷といった、あらゆる器官のすべての損傷を含む。慢性及び急性の両創傷を本発明によって治療することができる。

本発明は、胎児細胞、幹細胞あるいはその他の細胞治療や、組織移植と共に、特に、移植した材料の生存、あるいは治療の効果、あるいはこの両方を改善するために使用することができる。例には、脳又は身体のその他の器官の機能を改善する細胞治療が含まれる。

更に、本発明は、皮膚、骨、眼、及び筋肉などの組織の健康状態を促進するあるいは支援する非治療的方法に使用することができ、このような組織におけるＮＦｓの自己制御恒常性の利益によって、運動、労働あるいは消耗からの筋肉と組織の回復を促進し、老化現象、しわ、あるいは日光、風、雨、冷気、あるいはその他の損傷を与える媒体への露出からの皮膚の回復を促進し、持久力と筋肉の耐久性（例えば、競技スポーツ又は非競技スポーツにおいて）を改善し、疲労感を低減する。

本発明によれば、薬剤を作用部位に送達することが一般的に良いことが分かっているので、薬剤を全身あるいは局所的に投与することができる。特に、以下により詳細に述べるように、限定することなく、経口及び非経口（例えば、局所）投与ルートが適していることがわかっている。

ここで用いている「サポゲニン」の表現は、例えば、上述のサポゲニンの疑似サポゲニン及びジヒドロ疑似サポゲニン型といった、Ｅ及び／又はＦ開環誘導体をすべて含み、この型はこのような誘導体の支配を受ける。この化合物の不飽和型では、一又はそれ以上の二重結合が、Ａ／Ｂｃｉｓモチーフに影響しない位置に存在する。サポゲニンのグリコシル化型は、通常、サポニンと呼ばれている。

発明の詳細な説明
序論
本明細書に提示されている証拠は、この薬剤が様々な受容体と酵素に結合していないことを示している（実施例１参照）。

ＮＦｓ又はＮＦ受容体の導入に関する活性薬剤の効果を立証する証拠が、本出願に提示されている。この証拠は（以下の実施例２及び３を参照）、その活性が、ＮＦｓとＮＦ受容体の強化型遺伝子発現を伴うことを示す。ニューロンが比較的健康である（基本培地）例２に見られるように、強化型遺伝子発現は一次的なものであり、その時間スケールは、自己制御機構を伴うことを強く示している。

より罹患が進んでいる実施例３では、データが、より長期間の強化型遺伝子発現を示しており、制御機構が無傷で残り、遺伝子発現の強化の度合いがシステムの必要性に依存していることを示す。

本出願で提示されている証拠はまた、活性薬剤が、例えば特にＢＤＮＦやＧＤＮＦといったＮＦｓの自己制御恒常性を提供することを示している（下記の実施例４乃至７及び１８参照）。非ペプチド薬剤による、例えばＢＤＮＦ又はＧＤＮＦといった、一のＮＦの自己制御ノーマライゼーションが非常に優れているのみならず、例えば、非ペプチド薬剤によるＢＤＮＦとＧＤＮＦ両方といった二つのＮＦｓの自己制御ノーマライゼーションも独自である。両ＮＦｓを互いにノーマライゼーションすることは、ＢＤＮＦとＧＤＮＦの相乗的ノーマライゼーションに結び付くように見え、これは特に有益である。

本出願に提示されている証拠は、活性薬剤が様々なＣＮＳ及びＰＮＳニューロンの神経突起生成を増やすことが示されている（実施例８を参照）。重要なことは、この神経突起生成効果は、外因性ＮＦｓの存在に依存していないことである。このことは、本発明の薬剤の効果が、ＮＦの強化というよりは、むしろ導入であることを示している。

本出願に提示されている証拠は、更に、活性薬剤が、ＮＦｓと同じ細胞間形質導入を活性化することを示している（実施例９を参照）。これは、薬剤のＮＦ調節活性の証拠を支持している。

本出願に提示されている証拠はまた、様々なＡ／Ｂ−ｃｉｓ活性薬剤が、皮質ニューロンへのグルタミン酸塩で誘発された損傷と、ドーパミン作用性ニューロンのアポトーシスを低減するが、一方で、ほぼ同じ化学構造ではあるが、Ａ／Ｂ−ｃｉｓモチーフを持たないサポゲニン（ジオスゲニン）は、不活性である（実施例１０及び１１を参照）ことを示している。

本出願に提示されている証拠はまた、この薬剤が様々なニューロンの損傷を回復に向かわせる、すなわち、この薬剤は、神経再生薬剤（ｎｅｕｒｏｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ ｏｒ ｎｅｕｒｏｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ）である（実施例１２を参照）。

本出願に提示されている証拠はまた、この薬剤が経口投与可能であることを示している（実施例１３及び１４を参照）。この例は、この薬剤の経口投与が、運動ニューロン疾患あるいは外傷後の神経損傷があるマウスモデルの神経機能の回復を改善することを示している。

本出願に提示されている証拠はまた、この薬剤が老化したラットの不安を取り除き、認知を回復することを示している（実施例１５を参照）。

本出願に提示されている証拠はまた、経口投与した薬剤が、ある範囲の身体組織に送達され（実施例１６を参照）、有効投与量において非毒性である（実施例１７を参照）ことを示している。

本出願に提示されている証拠はまた、この薬剤がマカクのパーキンソン症候群を低減することを示している（実施例１８を参照）。

本出願に提示されている証拠は、この薬剤のＮＦ又はＮＦ受容体（ＮＦｒ）を介在する活性が、ある範囲の受容体と酵素との直接結合相互作用を含まないことを示している。例えば、この活性は、エストロゲン、プロステロン、テストステロン、及びセロトニン受容体などのホルモン受容体、ニコチン受容体、ムスカリン性受容体、アドレナリン性受容体、カンナビノイドやアヘン受容体などの麻薬受容体、ＮＭＤＡ、ＡＭＰＡ及びカイナイト受容体などのグルタミン酸受容体、及び、レチノイドＸ受容体などのレチノイン酸受容体といった、様々な重要な受容体における直接結合アゴニスム、アンタゴニスト、非アゴニスト（非アンタゴニスト）直接結合に関連していない。この結果、この活性薬剤の生理学的効果は、従来の神経疾患や神経障害の治療に見られる多くの受容体介在及び酵素介在副作用と無関係である。例えば、従来の神経疾患及び精神疾患の治療の多くに見られる問題は、中毒と依存性、中毒になりやすい性格型、受容体又は酵素の副作用を持つ従来の治療、及び、中毒又は依存性を発生する現在の治療のいずれもが、神経疾患あるいは精神疾患の治療に禁忌を示すことがあるが、この薬剤によって実質的に低減される。

精神疾患の従来の治療は、その生化学モードの作用を即座に発揮するにもかかわらず、より長い時間規模で有益な精神的効果を示している。本発明の効果は、より一層即座にみられ、恒常性制御の下、非毒性態様でＮＦｓを調整する証拠を提供している。従って、本発明は、公知の精神及び神経疾患の小分子（非ペプチド）治療から区別される。

これらの実施例の試験におけるこの薬剤の容量反応プロファイルは、自己調整機構の特徴である後に安定状態が続く最大値を示している（図１を参照）。

本発明で使用する一又はそれ以上の活性薬剤は、ＧＤＮＦやＢＤＮＦなどの外因性投与神経栄養因子なしで使用することができる。

本発明に関連する新規使用
本発明は、従って、例えば（ｉ）治療するべき疾患、（ｉｉ）治療する個体のクラス、（ｉｉｉ）使用する治療の組み合わせ、及び（ｉｖ）安全な使用状況、という意味で、同定するべき活性薬剤を新規使用することができる。

（ｉ）に関する限り、例えば、ある範囲の神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、免疫性、及び腫瘍性疾患及び症状、並びに性格特性と行動特性を治療するためのこの活性薬剤の使用、及び、薬剤と機能性食品の双方を介した、ニューロンの再生あるいは正常化、ニューロンへの血流、損傷を受けた組織（例えば、皮膚、骨、眼あるいは筋肉組織）の再成長及び治癒、脳内及び脳外（例えば、皮膚、骨、眼及び筋肉組織）両方の組織の全体的な健康と良好な状態、運動、労働あるいは消耗からの筋肉や組織の回復、持久力の改善、疲労感の低減、正常な神経機能及び正常な神経ネットワークの再生の達成が、以下に詳細に述べるように、現在認識できる。この使用には、集団の正常範囲内にある個体の神経的あるいは精神的機能、あるいは個体の全体的な健康及び満足感を改善するための非治療的使用、例えば老化現象、しわ、あるいは日光への露出、風への露出、雨への露出、寒さへの露出、あるいはその他の損傷を与える媒体への露出からの皮膚の回復を促進する、皮膚、骨、眼、筋肉及びその他の組織の健康を促進するための非治療的使用、及び、運動、労働、あるいは消耗からの筋肉及び組織の回復を含む、健康と良好な状態のその他の態様を提供するための非治療的使用が含まれる。用語「障害」「症状」「特徴」は、これに従って理解される。

（ｉｉ）に関する限り、多くの受容体又は酵素の調整あるいは結合ではなく、ＮＦｓ自己制御恒常性を介した本発明の薬剤の作用によって、薬剤又は受容体アゴニスト薬を抑制するある種の酵素からの副作用に敏感な患者が治療を受けることができる。例えば、ある認知症（アルツハイマー）患者は、コリンエステラーゼ抑制剤への耐性がない。あるパーキンソン病患者は、Ｌ−ドーパへの耐性がなく、危険負担といった運動障害や神経異常の問題を含む副作用に苦しむ。

（ｉｉｉ）に関する限り、例えば、特定の障害、症状、特徴、あるいは特定のクラスの個体の治療に、この薬剤をその他の補助薬剤と組み合わせて使用することは、以下に詳細に述べるとおり、現在は確認可能である。このような多くの組み合わせの認識は、従来はせいぜい推論に過ぎなかった。この使用には、集団の正常範囲内にある個体の神経的あるいは精神的機能、あるいは個体の全体的な健康及び満足感を改善するための非治療的使用、例えば老化現象、しわ、あるいは日光への露出、風への露出、雨への露出、寒さへの露出、あるいはその他の損傷を与える媒体への露出からの皮膚の回復を促進する、皮膚、骨、眼、筋肉及びその他の組織の健康を促進するための非治療的使用、及び、運動、労働、あるいは消耗からの筋肉及び組織の回復を含む、健康と良好な状態のその他の態様を提供するための非治療的使用が含まれる。用語「障害」「症状」「特徴」は、これに従って理解される。

（ｉｖ）に関する限り、例えば、臨床及び薬学的環境外での新しい範囲の使用状況は、以下により詳細に述べるように、現在認識可能である。

新規使用（ｉ）−新しい治療
本発明は、必要に応じて、ヒト又は非ヒト哺乳動物における（ａ）神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、及び腫瘍性疾患の治療及び予防、（ｂ）ニューロン機能又はニューロンネットワークの再生を含む、ニューロン及びニューロンへの血流の再生及び／又は正常化、（ｃ）損傷を受けた組織の再成長及び治癒、（ｄ）運動、労働、あるいは消耗からの筋肉及び組織の回復、（ｅ）持久力の改善と疲労感の低減、（ｆ）異常な行動又は個体的な特徴を治療又は防止する方法に使用することができる。この神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、免疫性及び腫瘍性疾患は、上述した従来技術に開示されたものであっても良く、これらの障害と異なるものでも良い。例えば、精神性疾患は、自閉症症候群、鬱病、及び統合失調症であっても良く、あるいは、これら以外の疾患であっても良い。ニューロン及びニューロンへの血流の再生あるいは正常化、ダメージを受けた組織、神経機能、あるいは神経ネットワークの再成長と治癒のための方法には、例えば、神経の外傷後再生、移植組織片、及び神経の術後再生（例えば、四肢や指の再付着）、脳卒中、一過性脳虚血性発作（ＴＩＡｓ）、あるいはその他の虚血組織の回復支援、例えば、神経機能や、虚血組織への血流の回復支援、創傷、骨、及び筋肉の治癒支援、及び、ＣＮＳ又はＰＮＳに関する神経疾患及び炎症性症状の治療支援が含まれる。

本発明は、この活性薬剤の神経防護効作用と神経回復（神経再生）作用の点で、例えば、神経及び精神疾患用、あるいはダメージを受けたあるいは異常な組織又は機能の回復又は正常化のための、胎児細胞、幹細胞、あるいはその他の細胞治療と共に使用することができる。実施例には、脳障害を治療する細胞治療が含まれている。本発明に係る活性薬剤の使用により、例えば、移植した細胞の生存率を上げることによって、この治療における生存細胞の効率を改善することによって、あるいはこれらの組み合わせによって、細胞治療の効果を改善することができる。

本発明を、一又はそれ以上のＮＦ又はＮＦｒの異常発現に関連する疾患を患っている、あるいはこの影響を受けているヒト又は非ヒト動物における、このような疾患の治療法に使用することができる。この疾患は、上述した従来技術に開示されている疾患であっても良く、これらの疾患と異なる疾患であっても良い。例えば、神経性疾患は、自閉症、鬱病、及び統合失調症であっても良く、あるいは、これらの障害以外の障害であっても良い。神経あるいは精神疾患、異常行動、あるいは個人の特性以外のこのような障害には、例えば、睡眠不足とストレスの影響、炎症性障害、アレルギー、免疫障害、及び、ＮＦ介在の癌が含まれる。

上述したように、この出願の証拠は、本発明に使用されている活性薬剤が、脳内のＢＤＮＦとＧＤＮＦのレベルを同時に正常化あるいは強化することができることを示している。本発明は、従って、これらのＮＦｓの一方あるいは両方の異常なあるいは低下した脳レベルを患っているヒト又は非ヒト動物の脳内のＢＤＮＦとＧＤＮＦレベルの一方あるいは両方を同時に正常化する方法に使用することができる。

本発明は、ＢＤＮＦやＧＤＮＦなどのＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する方法を提供する。この方法では、ＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、制限され対処可能な副作用を伴って生じる。この出願は、この誘発が、ペプチドＮＦｓやＮＦｒｓの存在を必要としないことの証拠を具えている。従って、本発明は、公知の薬剤と対照的に、ペプチドＮＦｓやＮＦｒｓを本発明の非ペプチド活性薬剤と同時投与する必要性を排除している。

上述の各新規使用は、本発明の各態様と共に使用することができる。

本発明を実行する方法は、以下に詳細に述べるように、治療的方法でも、非治療的方法でも良く、この組成物は、薬学的組成物又は非薬学的組成物であっても良い。この活性薬剤は、以下に詳細に説明するように、その他の投与ルートが提供されているが、好ましくは経口投与される。

新規使用（ｉｉ）−治療可能な個体の新しいクラス
本発明による新しい発見は、少なくとも所定の回数、例えば、睡眠不足又はストレスを受けた人など、一又はそれ以上のＮＦｓあるいはＮＦｒｓ（例えば、ＢＤＮＦ及び／ＧＤＮＦ）を天然に過剰発現、又は異常発現する人の治療に活性薬剤を使用できることを明らかにしているが、以前はＮＦ様又はＮＦ刺激薬剤によるこのような人の治療は禁忌であった。

本発明は、低減した又は異常なＮＦ又はＮＦｒレベルに伴う疾患又は症状に罹っている又は罹りやすくなっている、一又はそれ以上のＮＦｓ又はＮＦｒｓの天然な過剰発現、又は異常発現に敏感なヒト又は非ヒト動物における、このような障害又は症状を治療又は予防する方法に使用することができる。

本発明の新しい発見はまた、この活性薬剤を用いて、ＮＦ様又はＮＦ刺激薬剤の精神的副作用に敏感な人を治療することができることを明らかにしており、これらの副作用は、典型的には、精神的、気分、不安、あるいはその他の個性、あるいは行動上の症状であり、以前は、これらの人に対してＮＦ様又は刺激薬剤による治療は禁忌であった。

本発明の薬剤が多くの受容体又は酵素への調整あるいは結合ではなく、ＮＦｓの自己制御恒常性を介して作用することの発見によって、薬剤あるいは受容体アゴニスト薬剤を抑制するある種の酵素からくる副作用に敏感な患者を治療することが可能となる。例えば、ある認知症（アルツハイマー）患者は、コリンエステラーゼ抑制剤への耐性がない。あるパーキンソン病患者は、Ｌ−ドーパに耐性がなく、危険負担といった、運動障害あるいは神経精神病の問題を含む副作用に苦しむであろう。

本発明は、低減した又は異常なＮＦ又はＮＦｒレベルに伴う障害又は症状に罹っている又は罹りやすくなっているヒト又は非ヒト動物におけるこのような障害又は症状を治療する又は予防する方法に使用することができ、このヒト又は動物は、ＮＦ様又は刺激薬剤の精神医学的あるいはその他の副作用に敏感な人である。

低減した又は異常なＮＦ又はＮＦｒレベルに伴う障害又は症状には、例えば、神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、免疫性、及び腫瘍性疾患、又は、以下に詳細に説明する、異常行動又は個体的特徴が含まれる。更に、この障害及び症状には、以下に述べる皮膚、筋肉、眼及び骨の障害及び症状が含まれ、これには、組織の良好な状態と健康に関連する症状や、筋肉やその他の組織の疲労の症状が含まれる。

本発明の新しい発見によれば、また、ある範囲のホルモン受容体やその他の受容体に対するアゴニスト（アンタゴニスト）能力あるいは結合能力を有さず、ある範囲の酵素に対する酵素結合能力を有さないこの活性薬剤を用いて、薬剤の受容体介在又は酵素介在副作用に敏感な人を治療することができる。このような人には、例えば、中毒あるいは依存性を有し、この中毒あるいは依存性に影響される受容体におけるアゴニスト（アンタゴニスト）効果によって悪化することがある人；中毒又は依存症から引き離す治療あるいは自己治療を行っている人であり、同じ理由で、中毒あるいは依存性に影響される受容体におけるアゴニスト（アンタゴニスト）効果によって引き離すプロセスが後退してしまうことがある人；例えば受容体又は酵素結合におけるアゴニスト（アンタゴニスト）又は結合に特に敏感なある種の受容体又は代謝プロセスを有する、中毒性又は依存性のある性格型を有する人；が含まれる。更に、受容体介在又は酵素介在副作用に対するぜい弱性は、例えば、ホルモン治療（例えば、治療におけるホルモン治療、成長ホルモン治療、甲状腺ホルモン治療、女性ホルモン補充治療（ＨＲＴ）、あるいは性別適合治療）を行っている人など、受容体介在又は酵素介在副作用によって干渉されるその他の臨床症状の治療を受けている人に生じる。

従って、本発明は、低減したＮＦ又はＮＦｒレベルに伴う疾患又は症状に罹っている又は罹りやすくなっているヒト又は非ヒト動物におけるこのような疾患又は症状を治療する又は予防する方法に使用することができ、このヒト又は動物は、薬剤の受容体介在又は酵素介在副作用に敏感な人である。

受容体（又は結合部位）介在副作用に対する人の感受性に関連する受容体又は結合部位は、以下の受容体の一又はそれ以上を含む：アデンソニン（ａｄｅｎｓｏｎｉｎｅ）Ａ_１受容体；アデンソニンＡ_２Ａ受容体；アデンソニン_Ａ３受容体；アドレナリン性α_１Ａ受容体、アドレナリン性α_１Ｂ受容体、又はアドレナリン性α_１Ｄ受容体を含む非選択的アドレナリン性α１受容体；アドレナリン性α_２Ａ受容体、アドレナリン性α_２Ｃ受容体、又はアドレナリン性α_２Ｄ受容体を含む非選択的アドレナリン性α２受容体；アドレナリン性β_１受容体、アドレナリン性β_２受容体、又はアドレナリン性β_３受容体を含む非選択的アドレナリン性β受容体；アドレノメズリンＡＭ_１受容体；アドレノメズリンＡＭ_２受容体；アルドステロン受容体；アナフィラトキシンＣ５ａ受容体；アンドロゲン（テストステロン）受容体ＡＲ；アンジオテンシンＡＴ_１受容体、アンジオテンシンＡＴ_２受容体；アペリン（ＡＰＪ）受容体；心房性ナトリウム利尿因子受容体；ボンベシンＢＢ１受容体；ボンベシンＢＢ２受容体；ボンベシンＢＢ３受容体；ブラジキニンＢ_１受容体；ブラジキニンＢ_２受容体；カルシトニン受容体；カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ_１）受容体；ベンゾチアゼピンＬ−型カルシウムチャネル；ジヒドロピリジンＬ−型カルシウムチャネル；フェニルアルキルアミンＬ−型チャネル；カルシウムチャネルＮ−型；カンナビノイドＣＢ_１受容体；カンナビノイドＣＢ_２受容体；ケモキンＣＣＲ１受容体；ケモキンＣＣＲ２Ｂ受容体；ケモキンＣＣＲ４受容体；ケモキンＣＣＲ５受容体；ケモキンＣＸＣＲ１受容体；ケモキンＣＸＣＲ１（ＩＬ−８Ｒ_Ｂ）受容体；コレシストキニンＣＣＫ_１（ＣＣＫ_Ａ）受容体；コレシストキニンＣＣＫ_２（ＣＣＫ_Ｂ）受容体；コルチシン受容体；コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ_１）受容体；ドーパミンＤ_１受容体；ドーパミンＤ_２Ｓ受容体；ドーパミンＤ_３受容体；ドーパミンＤ_４．_２受容体；ドーパミンＤ_５受容体；エンドセリンＥＴ_Ａ受容体；エンドセリンＥＴ_Ｂ受容体；上皮成長因子（ＥＧＦ）受容体；エリスロポエチンＥＰＯＲ受容体；エストロゲン受容体；エストロゲン（ＥＲα）受容体；エストロゲン（ＥＲβ）受容体；Ｇタンパク結合受容体ＧＰＲ１０３；Ｇタンパク結合受容体ＧＰＲ８；ＧＡＢＡ_Ａ受容体；ＴＢＯＢ塩素チャネルＧＡＢＡ_Ａ受容体；中央フルニトラゼパムＧＡＢＡ_Ａ受容体；中央ムシモールＧＡＢＡ_Ａ受容体；ＧＡＢＡ_Ｂ１Ａ受容体；ＧＡＢＡ_Ｂ１Ｂ受容体；ガバペンチン受容体；ガラニンＧＡＬ１受容体；ガラニンＧＡＬ２受容体；グルココルチコイド受容体；グルタミン酸受容体；ＡＭＰＡグルタミン酸受容体；カイニン酸グルタミン酸受容体；アゴニスムＮＭＤＡグルタミン酸受容体；グリシンＮＭＤＡグルタミン酸受容体；フェンシクリジンＮＭＤＡグルタミン酸受容体；ポリアミンＮＭＤＡグルタミン酸受容体；成長ホルモン分泌促進物（ＧＨＳ、グレリン）受容体；ヒスタミンＨ_１受容体；ヒスタミンＨ_２受容体；ヒスタミンＨ_３受容体、ヒスタミンＨ_４受容体；中央イミダゾリンＩ_２受容体；イノシトール三リン酸ＩＰ_３受容体；インスリン受容体；インターロイキンＩＬ−１受容体；インターロイキンＩＬ−２受容体；インターロイキンＩＬ−６受容体；レプチン受容体；ＢＬＴロイコトリエン（ＬＴＢ_４）受容体；システイニルロイコトリエンＣｙｓＬＴ_１受容体；システイニルロイコトリエンＣｙｓＬＴ_２受容体；メラノコルチンＭＣ_１受容体；メラノコルチンＭＣ_３受容体；メラノコルチンＭＣ_４受容体；メラノコルチンＭＣ_５受容体；メラトニンＭＴ_１受容体；メラトニンＭＴ_２受容体；モトリン受容体；ムスカリン性Ｍ_１受容体；ムスカリン性Ｍ_２受容体；ムスカリン性Ｍ_３受容体；ムスカリン性Ｍ_４受容体；ムスカリン性Ｍ_５受容体；Ｎ−ホルミルペプチド受容体ＦＰＲ１；Ｎ−ホルミルペプチド受容体様ＦＰＲ１受容体；ノイロメジンＵ ＭＮＵ_１受容体；ノイロメジンＵ ＭＮＵ_２受容体；神経ペプチドＹ Ｙ_１受容体；神経ペプチドＹ Ｙ_２受容体；ニューロテンシンＮＴ_１受容体；ニコチン性アセチルコリン受容体；ニコチン性アセチルコリンα_１、ブンガロトキシン受容体；ニコチン性アセチルコリンα_７、ブンガロトキシン受容体；アヘンδ（ＯＰ１，ＤＯＰ）受容体；アヘンκ（ＯＰ２，ＫＯＰ）受容体；アヘンμ（ＯＰ３，ＭＯＰ）受容体；オルファニンＯＲＬ_１受容体；ホルボールエステル受容体；血小板活性化因子（ＰＡＦ）受容体；血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）受容体；カリウムチャネル［Ｋ_Ａ］；カリウムチャネル［Ｋ_ＡＴＰ］；カリウムチャネル［ＳＫ_ＣＡ］；カリウムチャネルＨＥＲＧ；プロゲステロン受容体；プロゲステロンＰＲ−Ｂ受容体；プロスタノイドＣＲＴＨ２受容体；プロスタノイドＤＰ受容体；プロスタノイドＥＰ_２受容体；プロスタノイドＥＰ_４受容体；プロスタノイドトロンボキサンＡ_２（ＴＰ）受容体；プリン作動性Ｐ_２Ｘ受容体；プリン作動性Ｐ_２Ｙ受容体；レタノイドＸ受容体ＲＸＲα；ロリプラム受容体；リアノジンＲｙＲ３受容体；セロトニン５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ１受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_１Ａ受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_１Ｂ受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_２Ｂ受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_２Ｃ受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_３受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_４受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_５Ａ受容体；５−ヒドロキシトリプタミン５−ＨＴ_６受容体；シグマσ_１受容体；シグマσ_２受容体；部位２ナトリウムチャネル受容体；ソマトスタチンｓｓｔ１受容体；ソマトスタチンｓｓｔ２受容体；ソマトスタチンｓｓｔ３受容体；ソマトスタチンｓｓｔ４受容体；ソマトスタチンｓｓｔ５受容体；タキキニンＮＫ_１受容体；タキキニンＮＫ_２受容体；タキキニンＮＫ_３受容体；テストステロン受容体；甲状腺ホルモン受容体；チロトロピン遊離ホルモン（ＴＲＨ）受容体；形質転換成長因子−β（ＴＧＦ−β）受容体；アデノシン輸送体；コリン輸送体；ドーパミン輸送体（ＤＡＴ）；ＧＡＢＡ輸送体；モノアミン輸送体；ノルエピネフィリン輸送体（ＮＥＴ）；５−ヒドロキシトリプタミン輸送体（ＳＥＲＴ）；非選択的腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体；ノイロテンシンＩＩ受容体；バニロイド受容体；血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）受容体；血管活性腸管ペプチドＶＩＰ_１受容体；バソプレッシンＶ_１Ａ受容体；バソプレッシンＶ_１Ｂ受容体；バソプレッシンＶ_２受容体；及びビタミンＤ_３受容体。

副作用に対する人の感受性に関連する酵素には、以下の酵素の一又はそれ以上が含まれる：アセチルコリンステラーゼ；アセチルＣｏＡ合成酵素；コリン・アセチルトランスフェラーゼ；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＡＫＴ１（ＰＲＫＢＡ）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＡＫＴ３（ＰＲＫＢＧ）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＣＡＭＫ２Ｄ（ＫＣＣ２Ｄ）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰ２Ｋ１（ＭＥＫ１）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰＫ１（ＥＲＫ１）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰＫ１１（ｐ３８β）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰＫ１２（ｐ３８γ）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰＫ１３（ｐ３８δ）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰＫ３（ＥＲＫ１）；たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＭＡＰＫ８（ＪＮＫ１）；非選択的たんぱく質・セリン／スレオニン・キナーゼＰＫＣ；たんぱく質・セリン・キナーゼＮＴＲＫ１（ｔｒｋＡ）；たんぱく質・セリン・キナーゼＮＴＲＫ２（ｔｒｋＢ）；たんぱく質・セリン・キナーゼＳＲＣ；アルドースレアクターゼ；ＡＢＴＳラジカルフリー・ラジカルスカベンジャー酵素；ＤＰＰＨラジカルフリー・ラジカルスカベンジャー酵素；ＳＯＤ模倣薬フリー・ラジカルスカベンジャー酵素；及びＵＤＰグルクノシルトランスフェラーゼＵＧＴ１Ａ１。

従って、本発明は、この薬剤の受容体介在及び酵素介在活性から生じる副作用を起こすことなく、あるいは、少なくともこのような副作用が生じるリスクを実質的に低減して、初めてこのような個体に小分子治療薬を使用可能にする。

エストロゲン、アンドロゲン、プロゲステロン、グルココルチコイド、及びテストステロン受容体におけるある種のＡ／Ｂ−ｃｉｓスピロスタンサポゲニンとサポニンの不活性は、これまでに、ＷＯ−Ａ−９９／４８５０７、ＷＯ−Ａ−９９／４８４８２、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０８、ＷＯ−Ａ−０１／４９７０３において公開されている。ムスカリン性受容体における同じ薬剤の不活性／非結合性は、数が増えたムスカリン性受容体の合成の証拠が提示されているにもかかわらず、示されていなかった。ムスカリン性及びアドレナリン性β２受容体の数の正常化の証拠は、容量依存性あるいは活性／結合性に関連する証拠なしで、ＷＯ−Ａ−０２／０７９２２１及びＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３に提示されている。

ある種のＡ／Ｂ−ｃｉｓフルスタンサポニン、ティモサポニンＢＩＩによるニコチン性受容体の数の容量依存性強化の証拠は、以前に、ＷＯ−Ａ−９９／１６７８６（ＥＰ−Ａ−１０２４１４６；ＵＳ−Ａ−６５９３３０１）に公開されている。これらの受容体におけるこの薬剤の活性／結合性の程度は明らかに測定されていない。ここに提示されている更なる証拠は、従来技術に報告されている効果は、ＮＦｓ及び／又はその受容体の合成あるいは放出の定期的な増加、及び／又は分解速度の減少から生じたものであることを示している。

本発明は、上述の一又はそれ以上の受容体と酵素に関連する受容体介在又は酵素介在の副作用を誘発することなく、必要に応じてヒト又は非ヒトにおける神経変性を治療又は予防する方法に使用することができる。

以下により詳細に説明するように、この方法は、治療的あるいは非治療的なものであっても良く、この組成物は、薬学的あるいは非薬学的組成物であっても良い。例えば、非治療的使用は、集団の正常範囲にある個体の神経的あるいは精神的機能を改善するものであっても良い。用語「疾患」「症状」「特徴」は、これに従って理解される。以下に詳細に説明するように、他の投与ルートが提供されてはいるが、この活性薬剤は経口投与することが好ましい。

新規使用（ｉｉｉ）−薬剤の新規組み合わせ
本発明の活性薬剤は、対象に異常レベルのＮＦ又はＮＦｒを引き起こすことが公知の、あるいはその疑いがあるとされている（すなわち、異常に低い又は異常に高いレベル）その他の活性薬剤と組み合わせて使用することができ、あるいは、このような異常レベルを引き起こす可能性が知られていない、あるいは疑われていない、又はいまだ試験されていない一又はそれ以上のその他の生物学的活性薬剤を用いた予防ベースで使用することができる。このようなその他の生物学的活性薬剤には、薬剤、タンパク質又はポリ核酸（例えば、抗体、Ｆ（ａｂ）又はＦ（ａｂ）_２フラグメントなどの抗体フラグメント、ｓｉＲＮＡ、あるいはアンチセンスＤＮＡ）を抑制する特定の結合材、及び幹細胞などの活性組織といった、活性化学物質が含まれる。

このように、本発明による薬剤は、その他の生物学的活性薬剤の起こり得る副作用に対抗するように使用することができる。

本発明は、ある種の患者の疾患又は症状を治療するあるいは予防するために、ヒト又は非ヒト動物の対象に投与する組成物又は組成物のセット（配列群）に使用することができ、この組成物又は組成物セットは、この疾患又は症状を治療又は予防し、この対象に異常レベルのＮＦ又はＮＦｒを引き起こす可能性を有する第１の生物活性剤を具えており、対象に誘発されたこのような異常ＮＦ又はＮＦｒレベルに自己調整態様で対抗する本発明の活性薬剤は、これによって対象において前記異常ＮＦ又はＮＦｒレベルに対抗し、好ましくは、正常なＮＦ又はＮＦｒレベルに向ける傾向にある。

新規使用（ｉｖ）−新規使用状況
本発明は、投与プロトコルの綿密な臨床制御が得られない又は実行できない状況において使用することができる。

過剰投与に対する自己制御治療の抵抗及びその応答の時間延長特性は例えば、自己投与又は非治療的投与といった、比較的制御されていない状況の活性薬剤の好ましい投与に結び付く。本発明による自己調整治療方法のプロトコルは、対応する従来技術の治療に比べてより広い範囲で有効である。

本発明を使用するいずれの方法も、従って、特に、自己投与又は非治療的投与の状況における投与プロトコルの臨床制御がなされていない状況に適用することができる。

本発明のいずれの態様も、本発明の一又はそれ以上の他の態様と同時に実行あるいは使用することができ、本発明の一態様について述べたいずれの例あるいは好ましい例も、本発明のその他の態様と同様に適用するべきである。

「治療と予防」
ここで用いられている「治療又は予防」の表現及び類似の用語は、予防医学及び精神科診療によって入手可能な何らかの試験に従って判断した時に、予防手段、治療法、苦痛緩和治療を含めて、障害を取り除くあるいは防ぐあるいは症状を取り除くことを意図したヘルスケアのすべての形を意味する。妥当な見込みを持って特定の結果を達成することを目的とするが、常に達成するとは限らない介在は、「治療又は予防」の表現に含まれる。障害の進行を遅らせるあるいは止めることに成功する介在は、「治療又は予防」の表現に含まれる。

ある種の神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、及び免疫性疾患は、「スペクトル」状態と考えられ、この場合、個体はある範囲のあり得る症状のいくつかあるいはすべてを示しているか、軽症型の疾患のみを示している。更に、神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、及び免疫性及び腫瘍性疾患の多くは進行性であり、比較的軽症の異常な症状で始まって、より重症の異常な症状へ進行する。本発明は、タイプと段階がどのようなものであれ、ＮＦ介在型の神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、及び免疫性及び腫瘍性のすべての症状の治療と予防を含む。

「罹患しやすい」
ここで用いられている「罹患しやすい」の表現及び類似の用語は、個体あるいは疾患についての公知のリスク因子を用いて評価した時に、医学的、健康上の良好な状態、あるいは精神的異常、あるいは個体的な変化について、正常なリスクよりリスクが高い個体を特に意味する。このような個体は、例えば、薬剤の処方、及び／又は、特別な食事療法、ライフスタイル又は同様の推奨がその個体になされる程度に、一又はそれ以上の特定の疾患あるいは個体的な変化が進展する実質的なリスクを有するものとして分類される。

毒性と副作用
本発明の薬剤は、制限された、対処可能な副作用を有しており、使用に際して非毒性あるいは基本的に非毒性である。

薬学的（獣医学的使用を含む）使用のコンテキストにおいては、これは、薬剤の生理学的受容性という意味を含んでおり、音響医学及び獣医学的判断の範囲内において、この薬剤は、ヒト、哺乳動物及びその他の動物の細胞に接触させて有効投与量で、不適切な毒性、刺激、アレルギー性反応、好ましくない副作用を生じることなく使用するのに適しており、また、このような生じることがある有害事象は、過度なものであると考えられるか、あるいは副次的治療によって対処することができず、妥当なリスク／ベネフィット比につり合ったものと考えられる。

機能性食品、特に、食材、サプリメント食品（健康補助食品を含む）、飲料及びサプリメント飲料、並びに、機能性化粧品や、皮膚科及びその他の皮膚に接触する又は眼に接触する調製品といった、局所用製剤のコンテキストにおいては、これはリスク／ベネフィット及び副作用に関する相当の評価を意味しており、供給されるものの特定の成分又は調製品、及び、特定の使用についての安全性と、毒性の基準に適合している。

「非治療的方法」
非治療的使用は、一般的に、医学的監督を行うことなく、ある組成物中の生理的活性薬剤のヒト対象の選択的自己投与、典型的には経口投与によって特徴付けられる。典型的には、これから意図される利点は、症状あるいは認識された症状に関連して、良好な状態、あるいは一般的な健康に良い状態になることであり、これは、（ｉ）形式的に診断未確定、（ｉｉ）臨床診療に従って診断未確定、あるいは（ｉｉｉ）正常な範囲の健康な集団内にあり、従って、疾患があると考えられない状態である。

非治療的使用は、また、医学的介入の欠如、あるいは対象の組成物購入又は入手の段階における介助によって特徴付けられる。

更に、非治療的使用は、供給者による組成物の医学的要求の欠如によっても特徴付けられ、従って、自己投与は診断を受けた疾患を治療する特定の意図によって行われない。

例えば、非治療的に好適な影響を受けることがある神経機能には、例えば、認知（思考、理由づけ、記憶、思い出す、想像、学習を含む）、集中及び留意、特にそのスケールの症状のより穏やかな終局に対する留意、及び穏やかな異常行動、あるいは性格特性が含まれる。非治療的に好適に治療できる神経機能には、例えば、ヒトの行動、気分、人格、及び、例えば、性的行動、性的機能障害、苦悩、不安、鬱、むら気、不機嫌、ティーンエイジのむら気、睡眠パターンの乱れ、鮮明な夢、悪夢、及び夢中歩行、などの社会機能が含まれる。

本発明の非治療的方法によって治療可能な上述の神経的及び精神的機能の例に加えて、関連する行動又は思考が個体に有意な苦痛を生じないため、あるいは個体の日常の機能を破壊しないため、臨床診療によって診断不可能な、穏やかな神経疾患及び精神疾患も、本発明によって非治療的に治療可能な症状と考えられる。

穏やかな炎症性、アレルギー性及び免疫性疾患、又は、原因不明のあるいは形式的な診断を受けないその他の理由による、炎症性、アレルギー性、及び免疫性疾患も、本発明によって非治療的に治療可能な症状と考えられる。

良性の腫瘍性疾患、又は、原因不明のあるいは形式的な診断を受けないその他の理由による腫瘍性疾患も、本発明によって非治療的に治療可能な症状と考えられる。

「正常化」
ここで用いられている「正常化」及び類似の用語（「恒常性」など）の表現は、一般的に正常な健康状態の症状特性に対する生理学的調整を特に意味する。最適な正常状態は、健康な若年の成人あるいは非ヒト動物の状態によって例示できる。

従って、「正常化」とは、正常であると特徴づけられる状態に実際に達したか否かにかかわらず、正常な状態に向けた調整過程を含む。

神経性疾患
ここで用いられている「神経性疾患」及び類似の用語の表現は、例えば、神経変性（認知障害の症状を伴う神経変性と、認知障害の症状を伴わない神経変性を含む）、神経筋変性、及び運動感覚神経変性を含む。

本発明に関連する神経性疾患の例には、限定することなく、以下のものが含まれる：痴呆症、加齢に関連した認識機能障害、アルツハイマー病、アルツハイマー型老年性認知症（ＳＤＡＴ）、レヴィー小体認知症、血管性認知症、パーキンソン病、脳炎後のパーキンソン病、脳炎後及びその他のパーキンソン病以外の理由によるパーキンソン症候群、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー（ＦＳＨ）、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー及びブルース型筋ジストロフィー（Ｂｒｕｃｅ’ｓ ｍｕｓｃｕｌａｒ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、フックスジストロフィー（Ｆｕｃｈｓ’ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、筋緊張性ジストロフィー、角膜ジストロフィー、反射性交感神経性ジストロフィー症候群（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー（ｎｅｕｒｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、重症筋無力症、ランバート・イートン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を含む運動ニューロン疾患、乳児脊髄性筋萎縮症（ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｓｐｉｎａｌ ａｔｒｏｐｈｙ）、多発性硬化症、起立性低血圧、疼痛、神経痛、下記のような発作及び事故のような外傷性神経変性（例えば、外傷性の頭部又は脳の損傷、又は脊髄の損傷）、バトン病、コケーン症候群、ダウン症候群、大脳皮質基底核神経節変性症、多系統萎縮症、脳萎縮症、オリーブ橋小脳萎縮症、歯状核赤核萎縮症（ｄｅｎｔａｔｏｒｕｂｒａｌ ａｔｒｏｐｈｙ）、淡蒼球ルイ体萎縮症（ｐａｌｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ ａｔｒｏｐｈｙ）、球脊髄性萎縮症（ｓｐｉｎｏｂｕｌｂａｒ ａｔｒｏｐｈｙ）、視神経炎、硬化性全脳炎（ＳＳＰＥ）、注意欠陥障害、ポストウイルス性脳炎（ｐｏｓｔ−ｖｉｒａｌ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ）、ポリオ後症候群、ファール症候群、ジュベール症候群、ギラン・バレー症候群、無脳回症、もやもや病、神経細胞移動障害、自閉性症候群（ａｕｔｉｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ポリグルタミン病、ニーマン・ピック病、進行性多巣性白質脳症、偽脳腫瘍、レフサム病、ツェルヴェーガー症候群、核上性麻痺、フリードライヒ失調症、脊髄小脳失調症２型（ｓｐｉｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａ ｔｙｐｅ ２）、レット症候群、シャイ・ドレーガー症候群、結節性硬化症、ピック病、慢性疲労症候群、遺伝性ニューロパシーを含む神経障害、糖尿病性神経障害及び有糸分裂性神経障害、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ、新変異型ＣＪＤを含むプリオンベースの神経変性、牛海綿状脳症（狂牛病）（ＢＳＥ）、ＧＳＳ、ＦＦＩ、クールー病及びアルパーズ症候群、ジョセフ病、急性散在性脳脊髄炎、くも膜炎、中枢神経系の血管障害、四肢神経機能の喪失、シャルコー・マリー・トゥース病、クラッベ病、白質萎縮症、心不全への罹患性、喘息、てんかん、聴覚神経変性（ａｕｄｉｔｏｒｙ ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、黄斑変性症、色素性網膜症（ｐｉｇｍｅｎｔａｒｙ ｒｅｔｉｎｉｔｉｓ）、及び緑内障に起因する視神経変性。

精神疾患
「精神疾患」の表現は、個性と行動に影響する、特に、人間の思考、感覚、気分、及びその他のことに関連する能力に影響する、ヒトの精神的疾患をすべて含む。従って、「神経性」疾患と「精神性」疾患はいくらか重なっており、特に、本発明においては、本発明によって治療あるいは予防する「精神疾患」は、ＮＦｓ又はＮＦｒｓによって直接あるいは間接的に影響を受ける基本的な神経性欠陥に、直接あるいは間接的に関連する。

一般的に言って、精神疾患は、関連する行動あるいは思考が、個体に有意な苦痛を生じないかぎり、あるいは個体の日常の機能を壊さない限り、「精神異常」と診断されない。従って、診断可能な疾患と、同様ではあるが、治療が非治療的である（下記を参照）と考えられるあまり重症でない、あるいは破壊的でない精神機能との間にはボーダーラインがある。

本発明に関連する精神疾患の例には、限定することなく、以下のものが含まれる：不安障害（例えば、急性ストレス障害、パニック障害、広場恐怖症、社会恐怖症、特定恐怖症、強迫性障害、心的外傷後ストレス障害、身体醜形障害及び全般性不安障害）、性的不安障害（例えば、膣痙、男性の勃起不全、男性のオルガズム障害、女性のオルガズム障害）、小児期障害（例えば、注意欠陥・多動性障害（ＡＤＨＤ）、アスペルガー症候群、自閉性障害、行為障害、反抗的行為障害、分離不安障害及びトゥレット障害）、摂食障害（例えば、拒食症及び過食症）、気分障害（例えば、鬱病、大鬱病性障害、双極性障害（躁鬱病）、季節性情動障害（ＳＡＤ）、気分循環性障害及び気分変調性障害）、睡眠障害、認知精神障害（ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）（例えば、せん妄、健忘障害）、人格障害（例えば、妄想性人格障害、分裂病質人格障害、統合失調症性人格障害、反社会的人格障害、境界性型人格障害、演技性人格障害、自己愛性人格障害、回避性人格障害、依存性人格障害、強迫性人格障害）、精神病性障害（例えば、統合失調症、妄想性障害、短期的精神障害（ｂｒｉｅｆ ｐｓｙｃｈｏｔｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、統合失調症様障害、分裂情動性障害及び共有精神病性障害）、及び物質関連障害（例えば、アルコール依存症、覚醒剤依存症、大麻依存症、コカイン依存症、幻覚剤依存症、吸入依存症、ニコチン依存症、オピオイド依存症、フェンシクリジン依存症及び鎮静剤依存症）。

炎症性及びアレルギー性疾患
本発明によって治療可能な炎症性及びアレルギー性疾患の例には、咳、掻痒症（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ，Ｏ ｅｔ ａｌ，Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｒｅｓ．，２００２，２９３，ｐａｇｅｓ ６１４−６１９）、食物不耐性、乾癬、クループ、過敏性腸症候群、耳鳴り、メニエール病、ストレスによる潰瘍又はアセチルサリチル酸による潰瘍、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、結膜炎、炎症、炎症性大腸炎、回腸炎、膵炎、胆嚢炎、非アレルギー性鼻炎、食道炎、変形性関節炎、関節リウマチ、花粉症、家ダニアレルギー、ペットアレルギー、ハンチントン病、急性炎症性痛覚、内臓痛、歯痛及び頭痛、炎症性痛覚過敏、触知性痛覚過敏（ｔａｃｔｉｌｅ ｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａ）（例えば、Ｍａ，ＱＰ ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ １９９７，８，ｐａｇｅｓ ８０７−８１０参照）、アレルギー性皮膚反応、目のアレルギー反応、喘息（Ｂｏｎｉｎｉ，Ｓ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９６，９３，ｐａｇｅｓ １０９５５−１０９６０；Ｂｒａｕｎ，Ａ ｅｔ ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９９，２１，ｐａｇｅｓ ５３７−５４６）、アテローム性動脈硬化症、関節炎、慢性潰瘍（例えば、関節リウマチに関連する慢性の血管炎性潰瘍（ｃｈｒｏｎｉｃ ｖａｓｃｕｌｉｔｉｃ ｕｌｃｅｒ））及び湿疹が含まれる。

本発明による関連する非治療的処置には、正常な呼吸の維持、痛むのどと咳の鎮静、正常な消化を維持する目的での胃の痛みの緩和、鼻詰まりなどの風邪やインフルエンザからの回復を目的とする頭痛の鎮静、筋肉痛の軽減、軽度の痛みの緩和、歯痛の軽減、口腔内潰瘍又は胃潰瘍の軽減、及び健康な関節の維持が含まれる。

免疫性疾患
本発明によって治療可能なＮＦ介在免疫性疾患の例には、上述のＶｅｇａ ｅｔ ａｌの文献の表２（第８頁）に挙げられている免疫細胞機能に対するＮＦｓの影響の正常化によって治療可能な症状を含む。これらの疾患には、ＡＩＤＳ（この場合、ＮＦｓの正常化が対象の免疫能力を上げるであろう）、免疫活動過剰症状（この場合、ＮＦｓの正常化が対象の免疫システムを下方制御するであろう）、及び、例えば、全身性エリトマトーシス（ＳＬＥ）などの自己免疫疾患といった、低下した免疫特性の症状（この場合、ＮＦｓの正常化が外部薬剤により特異的になるよう免疫システムを支援するであろう）などの免疫不全状態が含まれる。

腫瘍性疾患
本発明によって治療可能なＮＦ介在悪性腫瘍性疾患の例には、乳、甲状腺、大腸、肺、卵巣、皮膚、筋肉、膵臓、前立腺、腎臓、生殖器、血液、免疫システム（例えば、脾臓、胸腺及び骨髄）、脳、末梢神経系及び皮膚（例えば、メラノーマ及びカポジ肉腫）の癌が含まれる。

損傷を受けたあるいは異常な組織における、あるいはこれに関連する神経機能の回復又は正常化
本発明は、一態様において、損傷を受けたあるいは異常な組織における、あるいはこれに関連する神経機能の回復又は正常化を提供する。この組織は、脳組織であっても良く、皮膚、骨、眼、あるは筋肉組織など、脳外組織であっても良い。

本発明のこの態様は、例えば、外科手術、切断、創傷、事故、痣、擦り傷、火傷、凍傷、骨折後の神経の回復に関連して使用できる。

創傷の治癒
本発明は、一態様において、創傷の治癒の支援を提供する。この創傷は、あらゆる皮膚の損傷であっても良く、慢性（例えば、潰瘍性）皮膚損傷と、急性皮膚損傷を含む。このような損傷の原因は数多く、多様である。一般的に、すべての皮膚の損傷を、本発明を用いて有益に治療することができる。

皮膚の治癒の質を評価するのに測定される創傷治癒の態様には、創傷の閉合の度合い、創傷の上の皮膚組織の再生速度、周辺の皮膚色素に対する治癒した創傷の色、周辺の皮膚強度に対する治癒した創傷の機械的強度、最大に治癒した後に創傷に残る異常な触感又は凹凸に関する組織あるいはその他の皮膚組織を損傷している度合い、創傷の滲出が止まる、又は滲出の流れが弱まるまでにかかる時間、創傷又は滲出液の物理的外観と匂い、及び、治癒過程における様々な時点での痛み、かゆみ、あるいはその他の不快感の度合い、が含まれる。

これらのすべての基準に対して、本発明は従来技術の治療に比べて利点を提供する。対象の天然ＮＦｓの自己制御恒常性は、外因性ＮＦｓを加える必要なしに、使用したすべての基準下で、ヒト及び非ヒト哺乳類の皮膚損傷に有利に影響することが期待される。

本発明による薬剤は、創傷治療のために、局所的にあるいは全身に投与することができる。局所的に投与する場合は、例えば、創傷用ドレッシング、クリーム、又は創傷に塗布するその他の調剤など、何らかの好適な組成又は構造から送達することができる。送達システムの更なる詳細は、以下に述べられている。

組織の良好な状態及び一般的な健康の促進又は支援
本発明は、別の態様において、運動、労働あるいは消耗からの筋肉や組織の回復、持久力と筋肉スタミナの回復（例えば、競技スポーツにおける、あるいは非競技スポーツにおける）、及び疲労感の低減を提供する。

より一般的には、脳内及び脳外の両方において、組織の良好な状態及び一般的な健康を、本発明によって支援することができる。

一例では、皮膚に対する、本発明による薬剤の化粧品、眼、あるいは皮膚科学的アプリケーションは、新しい皮膚細胞の補充を改善し、従って、皮膚又は眼の健康感と良好な状態を支援する。例えば、Ａｌｂｅｒ，Ｋ．Ｍ．ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｔｉｓｔ ２００７，１３，ｐａｇｅｓ ３７１−３８２を参照。本発明による方法は、皮膚ＮＦｓの自己制御恒常性を含んでおり、身体への毒性薬剤の投与を防ぎ、代わりに、処置に対して対象自身の天然なＮＦｓを調整する。

これらの使用は、一般的に、限定するものではないが、非治療的であり、健康な人々を主に対象としている。

哺乳動物
ヒトの治療に有益である他に、本発明は、やはり栄養学的及び心理学／精神的症状によって影響を受けることがある様々な哺乳動物においても有益である。このような動物には、例えば動物園の非ヒト霊長類（例えば、類人猿、猿、及びキツネザル）、猫や犬などのペット、犬、馬、仔馬などの労働及びスポーツ動物、例えばブタ、羊、山羊、鹿、牛、及び畜牛などの家畜、及び、ウサギや齧歯動物（例えば、ラット、マウス、ハムスター、スナネズミ、テンジクネズミ）などの実験動物が含まれる。

治療するべき疾患、症状、特性あるいは機能がヒトに限定されている場合、治療を受ける哺乳類はヒトであると解される。治療するべき疾患、症状、特性あるいは機能がヒト以外の哺乳類の種に限定されている場合、同じことがそれぞれの種に言える。

薬剤
ここで使用されている活性薬剤は一般的に、本質的なことではないが、約８００より少ない、例えば約７００より少ない、例えば約６００より少ない、例えば約５００より少ない、例えば約４５０より少ない分子量を有する。

ステロイド化学からの正式名称を受けて、左側の６員環は、Ａ−リングと呼ばれ、Ａ−リングに隣接するリングはＢ−リングと呼ばれる。また、ステロイド化学からの正式名称を受けて、炭素原子は以下に示すように数値が付されており、環の間の融合線が、５位及び１０位の炭素原子の間に生じる。

Ａ／Ｂ−ｃｉｓステロイド性フロスタン／エン又はスピロスタン／エン・サポゲニンでは、５位及び１０位の炭素原子における置換基又は水素原子が、その分子の面に対して（上方に）βだけ方向づけられている。

このことは、分子の面をねじって、立体図面において以下のように見える活性基を作る効果を有する。１０位の炭素原子における置換又は水素原子は、図面において、「ａ」の符号が付けられており、５位の炭素原子における置換又は水素原子には「ｂ」の符号が付けられている。Ｃ環は、部分的にのみ示されている。

これは、Ａ／Ｂ−ｃｉｓモチーフである。

ＷＯ−Ａ−９９／４８４８２、ＷＯ−Ａ−９９／４８５０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０８、ＷＯ−Ａ−０２／０７９２２１、ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３、ＷＯ−Ａ−２００５／１０５１０８及びＷＯ−Ａ−２００６／０４８６６５に開示されているＡ／Ｂ−ｃｉｓステロイド性フロスタン／エン又はスピロスタン／エン・サポゲニンの例及びこれらの誘導体の形状は、本発明に用いる活性薬剤として特に記載されている。これらの公報に開示された特定の化合物セット及び個々の化合物、Ａ／Ｂ−ｃｉｓステロイド性フロスタン／エン又はスピロスタン／エン・サポゲニンである化合物の代表的なクラス、及び、これらのエステル、エーテル、ケトン、及びグリコシル化型は、ここに引用によって組み込まれている。

Ａ／Ｂ−ｃｉｓステロイド性フロスタン／エン又はスピロスタン／エン・サポゲニンのエステル、エーテル、ケトン、及びグリコシル化型は、一又はそれ以上のエステル、エーテル、ケトン、及びグリコシル化基が分子に存在するものでも良い。一般的にエステル、エーテル、ケトン、及びグリコシル化基は、従来の化学合成法を用いて、Ａ／Ｂ−ｃｉｓスピロスタン／エン・サポゲニンの一又はそれ以上の任意のＯＨ部分に形成される。

本発明の活性薬剤の例は、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６（公開ＰＣＴ出願の第６頁）の式Ｉ、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６（公開ＰＣＴ出願の第７頁）にある式ＩＩ、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０７（公開ＰＣＴ出願の第６頁）にある式Ｉ、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０７（公開ＰＣＴ出願の第６頁）にある式ＩＩ、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０８（公開ＰＣＴ出願の第６頁）にある式Ｉ、ＷＯ−Ａ−０１／４９７０３（公開ＰＣＴ出願の第７頁）にある式Ｉ、ＷＯ−Ａ−０２／７９２２１（公開ＰＣＴ出願の第６頁）にある式ＩＩ、ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３（公開ＰＣＴ出願の第４頁）にある式Ｉ、ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３（公開ＰＣＴ出願の第４頁）にある式ＩＩ、ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３（公開ＰＣＴ出願の第５頁）にある式ＩＩＩ、ＥＰ−Ａ−１０２４１４６（公開ＥＰ出願の第４頁）にある式Ｉ、及びＥＰ−Ａ−１０２４１４６（公開ＥＰ出願の第８頁）にある式ＩＩ、で表されるＡ／Ｂ−ｃｉｓ化合物である。

例えば、サルササポゲニンとスミラゲニンの分子、及び、その対応するエステル、エーテル、ケトン、及びサポニン（グリコシル化）誘導体は、本発明の有用な活性薬剤である。Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタンサポニンである、化合物ティモサポニンＢＩＩは、本発明の有用な活性薬剤である。

本発明のその他の有用な活性薬剤には、エピサルササポゲニン、エピスミラゲニン、メタゲニン、サーモゲニン（ｓａｍｏｇｅｎｉｎ）、ジオチゲニン、イソジオチゲニン、テキソゲニン（ｔｅｘｏｇｅｎｉｎ）、ヨノゲニン、メキソゲニン（ｍｅｘｏｇｅｎｉｎ）、マルコゲニン及びそれらに対応するエステル、エーテル、ケトン及びサポニン誘導体が含まれる。

この活性薬剤は、好適な結晶あるいは非晶質の形で、及び好適な無水、水和あるいは溶媒和の形で使用することができる。サルササポゲニンとスミラゲニン及びこれらの誘導体のこのような形状の更なる詳細は、ＷＯ−Ａ−２００５／１０５８２５及びＷＯ−Ａ−２００６／０４８６６５に記載されており、これらの文献に特定の符号が付されている。

エステルには、特に、カルボン酸塩（例えば、カシレート（ｃａｔｈｙｌａｔｅ）（エゾキシカルボニロキシ）、アセテート、コハク酸、桂皮酸、フェルラ酸、プロピオナート、ブチレート、イソブチレート、吉草酸、イソ吉草酸、カプロン酸、イソカプロン酸、ジエチルアセテート、オクタノン酸、デカン酸、ラウレート、ミリステート、パルミテート、ステアレート、ベンゾアート、フェニルアセテート、フェニルプロピオナート、桂皮酸、ｐ−ニトロベンゾイルオキシ、３，５−ジニトロベンゾイルオキシ、ｐ−クロロベンゾイルオキシ、２，４−ジクロロベンゾイルオキシ、ｐ−ブロモベンゾイルオキシ、ｍ−ブロモベンゾイルオキシ、ｐ−メトキシベンゾイルオキシ、フタリル、グリシナート、アラニナート、バリナート（ｖａｌｉｎａｔｅ）、フェニルアラニナト、イソロシナート（ｉｓｏｌｅｕｃｉｎａｔｅ）、メチオニナト、アルギナート（ａｒｇｉｎｉｎａｔｅ）、アスパラギナート、アスパラギン酸、システイナート、グルタマート、ヒスチジナート、リジナート（ｌｙｓｉｎａｔｅ）、プロリナート（ｐｒｏｌｉｎａｔｅ）、セリナート（ｓｅｒｉｎａｔｅ）、トレオニナート、トリプトファナート、チロシナート、フマル酸、マレイン酸、リン酸塩、及び、スルホン酸塩エステルなど、３−位エステルが含まれる。

エーテルには、特に、アルコキシ誘導体（例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｓ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ）などの３−位エーテルが含まれる。

ケトン（サポゲノン）は、典型的には対応するサポゲニンの３−ケト誘導体であり、環システムの様々なＯＨ−ベアリング炭素原子に形成されたケト誘導体も可能である。３−ケトサポゲノンの例には、サルササポゲノン、スミラゲノン、エピサルササポゲノン、及びエピスミラゲノンが含まれる。

好適なサポニン化合物の例には、３−位の炭素原子（すなわち、Ｒ_３が付着している炭素）がＲ_３の適所にＯ−糖成分を担持している化合物、例えば、モノ−、ジ−、トリ−サッカライド又は高次のポリサッカライド、又はこれらのアシル化型が含まれる。これらの糖類の例には、グルコース、マンノース、フラクトース、ガラクトース、マルトース、セロビオース、スクロース、ラムノース、キシロース、アラビノース、フコース、キノボース、アピオース、ラクトース、ガラクトース−グルコース、グルコース−アラビノース、フコース−グルコース、ラムノース−グルコース、グルコース−グルコース−グルコース、グルコース−ラムノース、マンノース−グルコース、グルコース−（ラムノース）−グルコース、グルコース−（ラムノース）−ラムノース、グルコース−（グルコース）−グルコース、ガラクトース−（ラムノース）−ガラクトース、から選択された糖類、及びそのアシル化（例えば、アセチル化）誘導体が含まれる。

疑似サポ（ゲ）ニンは、それぞれスピロスタン／エン・サポゲニン又はサポニンの開環誘導体であり、Ｆ環が開閉する。疑似サポ（ゲ）ニンは、Ｃ２０−Ｃ２２結合において、飽和あるいは不飽和である。飽和型は、ときに、「ジハイドロ疑似サポ（ゲ）ニン」と呼ばれる。

本発明の活性薬剤は、単体で使用しても良く、所望の組み合わせで使用しても良い。

その他の補助薬剤又は補助成分
本発明に使用されている組成物は、組成物と投与ルートに関連して以下により詳細に記載するように、所望の場合、一又はそれ以上の補助薬剤及び／又は補助成分を含むものでも良い。

特に、代謝補助剤、ケトンのボディレベルを上げる化合物（ケト原生化合物）、トリカルボン酸（ＴＣＡ）回路中間体、インビボでＴＣＡ中間体に変換する化合物、エネルギィ強化化合物、あるいはこれらの混合物を使用することができる。

代謝補助剤には、ビタミン剤、（例えばビタミンＥ）、ミネラル、抗酸化剤及びその他の関連する化合物（例えば、アルコルビン酸、ビオチン、カルシトリオール、コバラミン、葉酸、ナイアシン、パントテン酸、ピリドキシン、レチノール、レチナール（レチナールデヒド）、レチノイン酸、リボフラビン、チアミン、α−トコフェロール、フィチルメナキノン、マルチプレニルメナキノン、カルシウム、マグネシウム、ナトリウム、アルミニウム、亜鉛、カリウム、クロム、バナジウム、セレン、リン、マンガン、鉄、フッ素、銅、コバルト、モリブデン、ヨウ素、あるいはこれらの組み合わせが含まれる。

ケト原生化合物は、一般的に、レシピエントによって外因性脂肪代謝（酸化）を高め、これによって、血中のケトンレベルを上げる。これには、例えば、アセトンといったＣ_３−８ケトン、Ｄ−β−ヒドロキシブチレート、Ｄ−β−ヒドロキシブチレートの代謝前駆体（例えば、アセトアセチル１−１，３−ブタンジオール、アセトアセチル−Ｄ−β−ヒドロキシブチレート及びアセトアセチルグリセロールといったアセトアセチル前駆体；一価、二価又は三価アルコールを伴うＤ−β−ヒドロキシブチレートのエステルといったエステル；ポリ−Ｄ−β−ヒドロキシブチレート、又は約２乃至約１００のリピート、例えば約３乃至約１０のリピートを有する、最終的に酸素と結合するポリ−Ｄ−β−ヒドロキシブチレートといったＤ−β−ヒドロキシブチレートのポリエステル）、アセトアセテートの前駆体、あるいはこれらの組み合わせが含まれる。

ＴＣＡ中間体には、クエン酸、アコニット酸、イソクエン酸、α−ケトグルタル酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、オキソ酢酸、あるいはこれらの組み合わせを含まれる。

インビボでＴＣＡ中間体に変換する化合物には、２−ケト−ヒドロキシプロパノル、２，４−ジヒドロキシブタノール、２−ケト−４−ヒドロキシブタノール、２，４−ジヒドロキシブチル酸、２−ケト−４−ヒドロキシブチル酸、アスパラギン酸、モノ−及びジ−アルキル−オキサロ酢酸、ピルビン酸、グルコース−６−リン酸、あるいはこれらの組み合わせが含まれる。

エネルギィ強化化合物には、例えば、コエンザイムＣｏＱ−１０、クレアチン、クレアチン誘導体、Ｌ−カルニチン、ｎ−アセチル−カルニチン、Ｌ−カルニチン誘導体、あるいはこれらの組み合わせが含まれる。これらの化合物は、いろいろな意味でエネルギィ製品を強化する。カルニチンは、脂肪酸の代謝を高める。ＣｏＱ−１０は、ミトコンドリア内での電子の移動の際に電子キャリアとして作用する。従って、中鎖脂肪酸トリグリセリド（ＭＣＴｓ）などの活性薬剤を有するこれらの化合物の添加によって、特に、栄養的に貧しい人における、代謝効率を高める。

補助薬剤が存在する場合、治療あるいは栄養的使用には、一又はそれ以上のカチオンとの錯体として、あるいは塩として代謝前駆体の形で提供することができる。カチオンと典型的な生理学的塩の例には、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩が含まれ、それぞれ、カチオンが生理学的カウンターイオンによってバランスされており、Ｌ−リシン、Ｌ−アルギニン、メチルグルカミン又はこの分野で知られているその他の塩錯体を形成している。これらの代謝前駆体の調整及び使用は、ＷＯ−Ａ−９８／４１２０１及びＷＯ−Ａ−００／１５２１６に記載されており、この開示はここに引用によって組み込まれている。

組成及び投与ルート
活性薬剤は、活性薬剤と好適な追加成分を含む組成物の形で投与することができる。この組成物は、例えば、薬学的組成物（医薬）、食材、フードサプリメント又は飲料であっても良い。このような組成物は、特定の化合物、及び／又は生理学的に受容できるエステル、アミド、塩、溶媒和物、類似体、あるいはその他の好適な誘導体の混合物を含んでいても良い。一般的に、ある組成物の一の活性薬剤及び／又はその他の成分の存在への言及は、その範囲内で、このような薬剤及び／又は成分の２又はそれ以上の混合物を示す。

薬学的組成物は、限定するものではないが、経口、経鼻胃、直腸、経皮、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、髄内、及び皮内注射又は点滴）、鼻腔内、経粘膜、インプラント、膣、局所、頬内、舌下を含む適宜のルートで投与することができる。

多くの薬物と同様に、投与部位が治療を受ける哺乳類の脳から遠隔で良いことは、小分子でいくらか親油性の薬物使用の典型的な特徴であり、この薬剤は、血流を介して及び血液−脳及び／又は血液−神経バリヤに亘って移動する。

本発明のコンテキストにおける「薬学的組成物」の用語は、投与モードの特性と投与形態に応じて、活性薬剤を含む組成物、及び、更に薬学的に許容可能な担体、希釈剤、補助薬、賦形剤、保存剤などのビークル、充填剤、崩壊剤、緩衝材、保存剤、浸透促進剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤、香料、抗菌材、抗カビ剤、潤滑剤、及び助剤を含む組成物を意味する。適当な投与形態には、例えば、タブレット、糖衣錠、粉、エリキシル剤、シロップ、懸濁液を含む液体薬剤、スプレィ、吸入抗原、タブレット、トローチ、乳化剤、溶液、流体、カプセル、座薬、並びにリポソーム調剤を含む点滴用液体薬剤、が含まれる。技術と製剤は一般的に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ｌａｔｅｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎに見ることができる。

ここで用いられている「食材」、「フードサプリメント」、「飲料」、及び「飲料サプリメント」の用語は、これらの用語の一般的な意味であり、薬学的調剤に限定されない。これらの組成物は、経口摂取に適している。サプリメントの組成物（例えば、フードサプリメントあるいは飲料サプリメント）は、食料及び飲料に添加して、これらと共に摂取するように構成されている。食物は、典型的には、脂肪、オイル、及び炭水化物などのカロリー材料、並びにタンパク質や、ミネラル源、繊維を含む。組成物の例には、乳製品、シリアル、野菜、肉、魚、鶏肉、あるいは果物ベースの食物が含まれる。飲料の例には、炭酸入り又は炭酸なしの飲料、フルーツジュース、コーヒーあるいは、ハーブティ、フルーツティ、緑茶、あるいは紅茶ィ又は中国茶などのお茶、といった浸出液の飲み物が含まれる。組成物は、牛乳、あるいは、粉ミルク及び／又はラクトース及び／又はカゼインなどの牛乳由来の成分を含んでいても良い。牛乳又は牛乳由来の成分は、好ましくは、牛又はヤギからのものが良い。豆乳などの植物由来のミルクも使用できる。食用成分は、一又はそれ以上の発酵成分を含むものでも良い。この成分は、ヨーグルトを含む。フードサプリメントは、例えば、ビタミン、ミネラル、カフェイン、エフェドリンアルカロイドを含むものでも良い。

経口組成物
好適な摂取形態の例には、限定するものではないが、液体、粉あるいは固体のコアを有する投与形態；かみ砕くことができるあるいは経口で崩壊するタブレット；薄いストリップ；グミタブレット；フォームタブレット：被覆材及び／又は粒状マトリックス中に薬剤を含む唾液分泌材で被覆した粒子が含まれる。一の実施例では、投与形態は、特定の所定量（すなわち、投与量）のある種成分、例えば、以下に規定するような活性成分を含むように設計した、固体、半固体、あるいは液体組成物である。好適な投与形態は、経口投与、頬内投与、粘膜投与用のもの、あるいはミネラル、ビタミン及びその他の栄養補給食品、口内ケア薬剤、香料、その他を送達する組成物を含む、薬剤送達システムであっても良い。一の実施例では、本発明の投与形態は、固体であると考えられるが、液体又は半固体成分を含んでいても良い。別の実施例では、投与形態は、ヒトの胃腸管へ薬学的活性成分を送達する経口投与システムである。この組成物の好適な補助薬剤は、鎮痛剤、抗炎症剤、抗関節炎薬、麻酔薬、抗ヒスタミン剤、鎮咳薬、抗生物質、抗ガン剤、抗アレルギー剤、抗感染症薬、抗ウイルス剤、抗凝血剤、抗鬱剤、抗糖尿病薬、制吐薬、整腸剤、抗真菌剤、食欲抑制剤、気管支拡張剤、心血管治療薬、中枢神経系刺激薬、免疫系刺激薬、鼻充血除去薬、利尿剤、去痰薬、胃腸薬、偏頭痛予防薬（ｍｉｇｒａｉｎｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）、ポリジメチルシロキサン、呼吸器官の薬、スリープエイド（睡眠導入剤）、尿路系の薬、及びその混合物を含んでも良い。好適な口内ケア薬剤には、例えば、息の清涼剤、歯の漂白剤、抗菌剤、歯の鉱化剤、虫歯防止剤、表面麻酔薬、粘膜保護剤（ｍｕｃｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓ）などがある。好適な香料には、メントール、ペパーミント、ミント風味、フルーツ風味、チョコレート、バニラ、風船ガム風味、コーヒー風味、お酒の風味及びこれらの組合せなどが含まれる。存在する好適な胃腸薬には、炭酸カルシウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、炭酸マグネシウム、水酸化アルミニウム、重炭酸ナトリウム、ジヒドロキシアルミニウム炭酸ナトリウム；ビサコジル、カスカラサグラダ、ダントロン、センナ、フェノールフタレイン、アロエ、ヒマシ油、リシノール酸、デヒドロコール酸といった刺激性下剤；ファモチジン、ラニチジン、シメチジン（ｃｉｍｅｔａｄｉｎｅ）、ニザチジンといったＨ２受容体アンタゴニスト、オメプラゾール又はランソプラゾールなどのプロトンポンプ阻害薬、スクラフラート及びミソプロストールのような胃腸の細胞保護薬；プルカロプライド（ｐｒｕｃａｌｏｐｒｉｄｅ） のような胃腸の消化管運動改善薬、クラリスロマイシン、アモキシシリン、テトラサイクリン及びメトロニダゾールといったピロリ菌に対する抗生物質；ジフェノキシラート及びロぺラミドのような止瀉薬；グリコピロラート；オンダンセトロンのような制吐薬;メサラミンのような鎮痛薬が含まれる。薬剤はまた、例えば、プロピオン酸誘導体を含む非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤｓ）など、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェンなどの鎮痛薬、抗炎症薬、及び解熱剤；例えば、インドメタシン、ジクロフェナク、スリンダク、トルメチンなどの酢酸誘導体；例えば、メフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸などのフェナム酸誘導体；例えば、ジフルニサール、フルフェニサールなどの２−フェニル安息香酸誘導体；例えばピロキシカム、スドキシカム、イソキシカム、メロキシカムなどのオキシカム（ｏｘｉｃａｍｓ）、から選択されても良い。一の実施例では、補助活性成分は、例えば、イブプロフェン、ナプロキセン、フルルビプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、フルプロフェン、ピルプロフェン、カルプロフェン、オキサプロジン、プラノプロフェン、スプロフェン、及び薬学的に許容される塩、誘導体及びそれらの混合物などのプロピオン酸誘導体ＮＳＡＩＤから選択されても良い。本発明の別の実施例では、活性成分は、アセトアミノフェン、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトプロフェン、フルルビプロフェン、ジクロフェナク、シクロベンザプリン、メロキシカム、ロフェコキシブ、セレコキシブ、及び薬学的に許容される塩、エステル、異性体及びそれらの混合物から選択されても良い。

別の実施例では、補助薬剤は、プソイドエフェドリン、フェニレフリン、フェニルプロパノールアミン、クロルフェニラミン、デキストロメトルファン、ジフェンヒドラミン、グアイフェネシン、アステミゾール、テルフェナジン、フェソフェナジン（ｆｅｘｏｆｅｎａｄｉｎｅ）、ロラタジン、デスロラタジン、ノラステミゾール（ｎｏｒａｓｔｅｍｉｚｏｌｅ）、セチリジン、ベンゾカイン、それらの混合物及び薬学的に許容される塩、エステル、異性体及びそれらの混合物から選択されても良い。別の実施例では、補助活性成分は、メチルフェニデート、モダフィニル、及び、注意欠陥過活動性障害又は注意欠陥障害に適したその他の活性薬剤；オキシブチニン；シデネフィル；シクロベンザプリンであっても良い。この活性成分又は成分は、本発明の投与形態で治療的に有効量で存在する。この量は、経口投与をした際に所望の治療的応答が生じる量であり、当業者は容易に決定することができる。この分野で公知の通り、このような量を決定するに当たり、投与する特定の活性成分、この活性成分のバイオアベイラビリティ特性、投与計画、患者の年齢及び体重、及びその他の要因を考慮するべきである。一の実施例では、この投与形態は、活性成分の少なくとも約８５重量パーセントを含む。この活性成分又は成分は、どのような形態の投与形態にも存在する。例えば、活性成分は、投与形態において例えば、溶けるあるいは分解するといった、分子レベルで分散できる、あるいは、粒子の形であっても良く、これは、被覆されていてもされていなくとも良い。活性成分が粒子形状である場合、その粒子（被覆されている、いないにかかわらず）は、典型的に、約１ミクロン乃至約２０００ミクロンの平均粒径を有する。一の実施例では、このような粒子は、平均粒径約１ミクロン乃至約３００ミクロンの結晶である。更に別の実施例では、この粒子は、平均粒径約５０ミクロン乃至約２０００ミクロン、例えば、約５０ミクロン乃至約１０００ミクロン、又は約１００ミクロン乃至約８００ミクロンの顆粒又はペレットである。

一の実施例では、本発明の経口組成物は、ヒト又はペットの食物といった、フード組成物である。ある実施例では、この組成物がフード組成物であり、活性成分に加えて更に、それぞれ乾燥重量で、約１５−５０％のタンパク質、約５−４０％の脂肪、約１５−６０％の炭水化物、５−１０％の灰分、及び５−２０％の含水量を具える。ある実施例では、食物は、完全に必要な食餌療法の要件で供給するように意図されている。また、スナック、ペットトリート（例えば、ビスケット）、栄養物バー、及び、食品あるいは、タブレット、カプセル、ゲル、ペースト、乳剤、カプレット、及び以下に述べる同様のものを含む栄養補助食品用のその他の形といった有用な組成物が提供されている。選択的に、このフード組成物は、乾燥組成物（例えば、ペットフード用食物）、半湿性組成物、湿潤組成物、あるいはこれらの混合物であっても良い。

本発明の組成物は、特にヒトの消費用に調整された食品である。これらは、ヒトの必要な食餌療法の条件で供給するように意図された食物及び栄養物、並びにその他のヒトの食餌療法サプリメントを含む。一の実施例では、ヒトが消費するように調整された食品は、完全であり、栄養的にバランスをが取れているが、その他の実施例では、良好にバランスが取れたあるいは調整された食事に関連して使用する食事療法サプリメントを意図している。

この組成物は、グレイビー、飲料水、飲料、濃縮液、ジェル、ヨーグルト、粉体、流体、ペースト、懸濁液、チューズ、チョコレートチップ、おやつ、スナック、ペレット、ピル、カプセル、タブレット、あるいはその他の送達形式といった、フードサプリメントであっても良い。「フードサプリメント」の用語は、食事療法サプリメントを含む。食事療法サプリメントは、特に、特定の種、あるいはペットなどの個体の動物やヒトによって消費するように調整することができる。一の実施例では、食事療法サプリメントは、比較的濃縮された投与量の活性薬剤を具えており、このサプリメントを少量で動物に投与できるようにするか、あるいは動物へ投与する前に希釈できるようにしても良い。いくつかの実施例では、食事療法サプリメント又はその他の活性薬剤含有組成物は、例えば、投与量を調整するために、よりおいしくなるように、あるいはより少量の投与量でより頻繁な投与を行えるように、動物へ投与する前に水又は水のようなものと混合する必要がある。

本発明の組成物は、冷蔵あるいは冷凍することができる。活性薬剤は、当該組成物のその他の成分と予めブレンドしておいて、必要な有益量を乳化させる、あるいはペットフード組成物、食事療法サプリメント、あるいはヒトが消費するように調整した食物の上に被覆するようにしても良く、あるいは、それを消費する前にあるいは動物に提供する前に、例えば、粉あるいはミックスを用いて、組成物に加えるようにしても良い。

一の実施例では、この組成物は、有効量の活性薬剤を含んでおり、組成物を投与した動物又はヒトの生理学的又は精神的又は行動学的所望の効果を得る。ペットフード及びヒトの消費用に調整した食物については、組成物のパーセンテージとしての活性薬剤の量は、乾燥材料ベースで組成物の約１％乃至約３０％の範囲にあるが、より少ない又はより多いパーセンテージを供給することもできる。様々な実施例では、この量は、乾燥重量ベースで組成物の、１．０％、１．５％、２．０％、２．５％、３．０％、３．５％、４．０％、４．５％、５．０％、５．５％、６％、６．５％、７％、７．５％、８％、８．５％、９％、９．５％、１０％、１０．５％、１１％、１１．５％、１２％、１２．５％、１３％、１３．５％、１４％、１４．５％、１５％、１５．５％、１６％、１６．５％、１７％、１７．５％、１８％、１８．５％、１９％、１９．５％、２０％、２０．５％、２１％、２１．５％、２２％、２２．５％、２３％、２３．５％、２４％、２４．５％、２５％、２５．５％、２６％、２６．５％、２７％、２７．５％、２８％、２８．５％、２９％、２９．５％、３０％、あるいはそれ以上である。食事療法サプリメントは、数倍濃度が高い活性薬剤を含有するように調整して、タブレット、カプセル、濃縮液の形態、あるいはその他の同様の投与形態で動物又はヒトに投与するようにでき、あるいは、水で希釈する、ペット又はヒトの食物の上にスプレイするあるいは膜、及びその他の同様の投与モードで押予の前に希釈するようにしても良い。食事療法サプリメント用に、活性薬剤を単体で、動物又はヒトに直接投与しても良く、あるいは動物又はヒトの通常の食物に直接適用しても良い。

この組成物は、選択的に、ミネラル、ビタミン、塩、香辛料、着色料、及び保存料といった補助物質を含んでいても良い。補助ミネラルの非限定的な例には、カルシウム、リン、カリウム、ナトリウム、鉄、塩化物、硼素、銅、亜鉛、マグネシウム、マンガン、ヨウ素、セレン、などが含まれる。補助ビタミンの非限定的な例には、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、及びビタミンＫが含まれ、これらの様々な塩、エステル、あるいは前述の誘導体を含む。また、更なる食事療法サプリメントには、例えば、いずれかの形のナイアシン、パントテン酸、イヌリン、葉酸、ビオチン、アミノ酸、及び同様のもの、並びにこれらの塩及び誘導体が含まれる。更に、この組成物は、（ｎ−３）及び／又は（ｎ−６）脂肪酸、アラキドン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸、並びにこれらの全ての組み合わせといった、有益な長鎖ポリ不飽和脂肪酸を含んでいても良い。

ここに提供された組成物は、選択的に、通常の神経性健康を促進又は維持する、あるいは認知機能をさらに強化する、一又はそれ以上の補助物質を含む。このような物質には、例えば、コリン、ホスファチジルセリン、α−脂肪酸、ＣｏＱ１０、アセチル−Ｌ−カルニチン、及び、例えばＧｉｎｋｏ ｂｉｌｏｂａ，ｂａｃｏｐａ ｍｏｎｎｉｅｒａ，ｃｏｎｖｏｌｖｕｌｕｓ ｐｌｕｒｉｃａｕｌｉｓ，及び／又は、Ｌｅｕｃｏｊｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍといった植物からの一又はそれ以上の成分を含有する薬草成分又はエキスを含む。

様々な実施例において、ここに提供されている食材又はフード／食事療法サプリメントの組成物は、好ましくは、乾燥重量ベースで、約１５％乃至約５０％の粗タンパク質を含む。粗タンパク質材料は、動物、植物、あるいはその他にかかわらずいずれかの源からの一又はそれ以上のタンパク質を含む。例えば、大豆、綿実、及びピーナッツなどの植物性タンパク質をここで好適に使用することができる。カゼイン、アルブミン、及び、豚、ラム、馬、鳥、魚あるいはこれらの混合物を含む食肉タンパク質などの動物性及び乳性タンパク質が有益である。

この組成物は更に、乾燥重量ベースで約５％乃至約４０％の脂肪を含んでいても良い。この組成物は、更に、炭水化物の源を含んでいても良い。この組成物は、通常、乾燥重量ベースで約１５％乃至約６０％の炭水化物を含む。このような炭水化物の例には、米、コーン、ソルガム、アルファルファ、大豆、カノーラ、大麦、小麦、あるはこれらの混合物などの穀類又はシリアルを含む。この組成物は、また、選択的に、乾燥乳清及びその他の乳製品、又は副産物といった、炭水化物を含むその他の成分を含む。

この組成物は、また、少なくとも一の繊維源を含む。食物あるいは餌用に適した様々な溶解性あるいは非溶解性の繊維を使用することができ、このような繊維は当業者に知られている。好適な繊維源には、ビートパルプ（甜菜から）、アラビアゴム、タルハゴム、サイリウム、米ぬか、イナゴマメガム、シトラスパルプ、ペクチン、短連鎖オリゴ糖付加フラクトオリゴ糖、マンナンオリゴフルクトース、大豆繊維、アラビノガラクタン、ガラクトオリゴ糖、アラビノキシラン、又はそれらの混合物が含まれる。代替的に、繊維源は、発酵性繊維であっても良い。発酵性繊維については、ペットの免疫システムに利点を提供するものとしてすでに述べられている。前生物的な組成物を提供して腸内のプロバイオティック微生物の成長を強化する、当業者に知られている発酵性繊維又はその他の組成物も、動物の免疫システムに対する本発明が提供する利点を強化する目的で組成物に組み入れることができる。更に、例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ又はＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種などのプロバイオティック微生物を、この組成物に加えることができる。

本発明の経口組成物の別の実施例は、その濃縮物を含む炭酸飲料組成物である。このような組成物は、この分野でよく知られている方法によって調整することができる。

この実施例では、二酸化炭素（水中でカルボン酸を作る）によって、飲料が通常酸性である。しかしながら、このような飲料が「酸性になる」、すなわち、「舌にぴりっとする」飲料に見られるこのタイプの追加の酸を含むように調整することができる。この例には、リン酸、及びクエン酸、マレイン酸、フマル酸、及び酒石酸などの食用酸（時に、「健全な酸」と呼ばれる）を含む。果物、果汁、果物エキスは食用酸を含んでおり、これらの成分を含む飲料は酸性になると考えられる。

この飲料はノンアルコールであっても良い。例には、コーラ飲料、オレンジ飲料、レモン飲料、レモネード、トニックウオータ、ルートビール、ジンジャーエール、及び、ジンジャービールが含まれる。

この飲料は、アルコール飲料であっても良く、典型的には３−９％ｗｔ/ｗｔのエタノールを含む。例には、サイダーや、ウオッカやその他のスピリッツと果実風味の炭酸入りブレンドである、いわゆる「アルコポップ」が含まれる。この飲料は軽いアルコール飲料であっても良く、典型的には、０．１−３％ｗｔ／ｗｔのエタノールを含む。例には、シャンディや、ある種の発酵型ルートビール、ジンジャービール、及びレモネードが含まれる。

炭酸入り飲料は、例えば牛乳又はヨーグルトが入っていない非乳製品である。炭酸入り飲料は、ほとんど脂肪が含まれていない。

この飲料はフレーバーウオータベースの飲料であっても良い。

炭酸入り飲料は、透明なものでも濁ったものでもよく、不透明なものでも良い。

炭酸入り飲料は、例えば、ビタミンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ及びＫ群の一又はそれ以上といった、ビタミンを含有していても良い。ビタミンは、フルーツジュースなどその他の成分に存在するビタミンに、更に加えることができる。水溶性ビタミンＢ及びＣは、非常に好適な飲料の成分である。脂溶性ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ及びＫは、若干低いが好適である。好ましいビタミンＥ、又はその誘導体は、飲料には存在しない。好ましいビタミンＡ及びＫ、又はその誘導体は、飲料には存在しない。

炭酸入り飲料は、甘味料を含有していても良い。甘味料は、例えば、砂糖、コーンシロップ、糖アルコール（例えば、ソルビトール、キシリトール、マンニトール、マルチトール又はイソマルト）、あるいは、強い甘味料（例えば、サッカリン、スクラロース、ネオターム、アセスルファム、ポタジウム、アスパルテーム）、あるいはこれらの組み合わせなど、天然又は合成甘味料であっても良い。

局所組成物
別の実施例では、本発明の組成物は、例えば、化粧品、眼あるいは皮膚の組成物など、局所組成物である。

活性薬剤を送達する局所組成物は、好適な方法で調整される。局所組成物は、創傷ドレッシング内あるいはその他の機械的アプリケーション内に、従来の方法で調整することができる。

ここに述べた活性薬剤化合物は、一又はそれ以上の化粧品及び／又は皮膚に受容可能なキャリアと共に、及び選択的にその他の治療成分と共に調整し、送達することができる。キャリアは、この組成物のその他の成分と相溶性があり、レシピアントを傷つけないように受け入れ可能でなくてはならない。キャリアはまた、薬剤の望ましくない副作用を低減することもある。このようなキャリア又はビークル成分は、この分野では知られている。Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｔａｙｌｏｒ ＆ Ｆｒａｎｃｉｓ Ｇｒｏｕｐ，２００６を参照。これは、全体として引用により組み込まれている。

本発明による局所投与用組成物は、その中に提供されている活性成分と投与領域及び回数に応じて、局部的に及び／又は全身的に投与しても良い。従って、局所製剤に関する以下の説明は、ある程度全身製剤について述べているものとみられ、局所投与と全身投与が可能な活性薬剤が含まれている。

本発明の組み合わせに使用されている局所投与用組成物は、通常使用されている薬剤、化粧品、眼、あるいは皮膚の調整に組み入れることができ、様々な形態で存在している。例えば、局所投与用のこの組成物は、溶液、油中水滴型エマルション、水中油滴型エマルジョン、又は水中油中水型乳剤、又は油中水中油中乳剤といった多重エマルジョン、水分散体又は油性分散液、ゲル、クリーム、固体スティック、あるいはエアロゾールであっても良い。本発明によるエマルジョンは、例えば、クリーム、ローション、あるは化粧用ミルクの形で有益であり、例えば、油脂、油、ワックス、及び／又はその他の脂質を含み、並びに、水及び一又はそれ以上の乳化剤を含む。なぜなら、エマルジョンは通常、このような形の剤形で使用されるためである。

いくつかの実施例では、本発明による局所投与用組成物は、組成に応じて、例えば、保護皮膚クリーム、クレンジングミルク、日焼け止めローション、栄養クリーム、デイクリーム、あるいはナイトクリーム、などとして使用することができる。

局所投与用組成物は、このような調整に従来使用されている化粧品用活性成分、化粧用補助成分、及び／又は化粧品用添加物を含んでいても良い。これらは、例えば、抗酸化剤、防腐剤、殺菌剤、増粘剤、充填剤、消泡剤、香料、エッセンシャルオイル、顔料（例えば、フュームシリカ、酸化剤及びオプションで被覆酸化物、酸化チタン、窒化ホウ素、及び硫酸バリウムを含むケイ酸塩のような超微粒シリカ）、セラミド（天然セラミド又は天然セラミドの機能的疑態の何れか）、界面活性剤、乳化剤、リン脂質、コレステロール、フィトスフィンゴシン、ビタミン又はタンパク質（例えば、レチニル・パルミテート又はアセテート、パンテノール及びその誘導体のようなビタミンＢ、酢酸トコフェロールのようなビタミンＥ、ガンマリノレン酸エステルのような多価不飽和脂肪酸のようなビタミンＦ）といった追加的な有効成分、日焼け止め（化学的な日焼け止め及び分散した物理的な日焼け止めを含む）、安定剤、虫除け、アルコール、可塑剤、ポリオール、重合体、気泡安定剤、電解質、有機溶媒、シリコーン誘導体、保湿剤及び／又は保湿剤、油脂、油、ワックス、水、塩、タンパク質分解性又は角質溶解性活性物質など、を含む。このような添加物は、局所投与用の皮膚又は化粧品用成分に存在する。

上述したように、局所送達用活性成分に加えて、本発明の局所組成物は、有益な効果をもたらす一又はそれ以上の追加の活性成分又は物質を含んでいても良い。例えば、特定の実施例では、局所組成物は、日焼け止め製品を含んでいても良い。これらは、好ましくは、本発明に用いる活性成分に加えて、少なくとも一の追加ＵＶＡフィルタ及び／又は少なくとも一のＵＶＢフィルタ及び／又は少なくとも一の無機顔料を含む。

ＵＶＢフィルタは油中あるいは水中に溶けるものでも良い。油中に溶ける物質の例は、例えば、３−ベンジリデンカンファー及びその誘導体、例えば３−（４−メチルベンジリデン）カンファー、４−アミノ安息香酸誘導体、好ましくは２−エチルヘキシル４−ジメチルアミノ安息香酸、アミル４−ジメチルアミノ安息香酸、桂皮酸エステル、好ましくは２−エチルヘキシル４−メトキシケイ皮酸、イソペンチル４−メトキシケイ皮酸、サリチル酸エステル、好ましくは２−エチルヘキシルサリチル酸塩、４−イソプロピルベンジルサリチル酸塩、ホモメチルサリチル酸塩；ベンゾフェノン誘導体、好ましくは２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシ−４’−メチルベンゾフェノン、２−２’−ジヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン；ベンザルマロン酸エステル、好ましくはジ（２−エチルヘキシル）４−メトキシベンザルマロン酸、２，４，６−トリアニリノ−（ｐ−カルボ−２’−エチル−１’−ヘキシルオキシ）−１，３，５−トリザン（ｔｒｉｚａｎｅ）、である。

水中に溶ける有利な物質は、２−フェニルベンゾイミダゾール−５−スルホン酸及びその塩、例えば、ナトリウム、カリウム又はトリエタノールアンモニウム塩、ベンゾフェノンのスルホン酸誘導体、好ましくは２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸及びその塩；例えば、４−（２−オキソ−３−ボルニリデンメチル）ベンゾスルホン酸、２−メチル−５−(２−オキソ−３−ボルニリデンメチル)スルホン酸及びそれらの塩のような3-ベンジリデンカンファーのスルホン酸誘導体、である。当然ながら、本発明によって使用できる上述のＵＶＢフィルタのリストは、限定を意図するものではない。

本発明によって使用できるＵＶＡフィルタの例には、ジベンゾイルメタン誘導体、特に１−（４’−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４’−メトキシフェニル） プロパン−１，３−ジエン及び１−フェニル−３−（４’−イソプロピルフェニル)プロパン−１，３−ジエンが含まれる。

本発明によって使用できる無機顔料の例には、チタン、鉛、鉄、ジルコニウム、ケイ素、マンガン、アルミニウム、セリウムの酸化物及びこれらの混合物、及び当該酸化物が活性薬剤である修飾を含む。酸化チタンに基づく含量が最も好ましい。

本発明によって使用することができる有益な抗酸化剤は、化粧品、及び／又は眼、及び／又は、皮膚への適用に適している又は通常使用しているすべての抗酸化剤である。抗酸化剤は、アミノ酸（例えば、グリシン、ヒスチジン、チロシン、トリプトファン）及びそれらの誘導体、イミダゾール（例えば、ウロカニン酸）及びそれらの誘導体、Ｄ，Ｌ０−カルノシン、Ｄ−カルノシン、Ｌ−カルノシン及びそれらの誘導体（例えば、アンセリン）などのペプチド、カロチノイド、カロチン（例えば、α−カロチン、β−カロチン、リコピン）及びそれらの誘導体、オーロチオグルコース、プロピルチオウラシル及びそれらのチオール（例えば、チオレドキシン、グルタチオン、システイン、シスチン、シスタミン及びそれらのグリコシル、Ｎ−アセチル、メチル、エチル、プロピル、アミル、ブチル及びラウリル、パルミトイル、オレイル、γ‐リノレニル、コレステリル及びグリセリルエステル）及びそれらの塩、チオジプロピオン酸ジラウリル、チオジプロピオン酸ジステアリル、チオジプロパン酸及びその誘導体（例えば、エステル、エーテル、ペプチド、脂質、ヌクレオチド、ヌクレオチド及び塩）及び、低耐性量の（例えば、ｐｍｏｌ−μｍｏｌ／ｋｇ）スルホキシミン化合物（例えば、ブチオニンスルホキシミン、ホモシステインスルホキシミン、ブチオニンスルホン、ペンタ−、ヘキサ−、ヘプタチオニンスルホキシミン）、さらに（金属）キレート剤（例えば、α‐ヒドロキシ脂肪酸、パルミチン酸、フィチン酸、ラクトフェリン）、α‐ヒドロキシ酸（例えば、クエン酸、乳酸、リンゴ酸）、フミン酸、胆汁酸、胆汁抽出物、ビリルビン、胆緑素、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ及びそれらの誘導体、不胞和脂肪酸及びそれらの誘導体（例えば、γ−リノレン酸、リノレン酸、オレイン酸）、葉酸及びその誘導体、アラニン二酢酸、フラボノイド、ポリフェノール、カテコール、ユビキノン、ユビキノール及びそれらの誘導体、ビタミンＣ及び誘導体（例えば、アスコルビン酸パルミテート、リン酸アスコルビルＭｇ、酢酸アスコルビル）、トコフェロール及び誘導体（例えば、酢酸ビタミンＥ）、及び安息香の安息香酸コニフェリル、ルチン酸及びその誘導体、フェルラ酸及びその誘導体、ブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、ノルジヒドログアイヤチク酸、ノルジヒドログアイヤレチン酸、トリヒドロキシブチロフェノン、尿酸及びその誘導体、マンノース及びその誘導体、亜鉛及びその誘導体（例えば、ＺｎＯ、ＺｎＳＯ_４）、セレン及びその誘導体（例えば、セレニウムメチオニン）、スチルベン及びその誘導体（例えば、スチルベンオキシド、トランススチルベンオキシド）及び本発明による好適な上述の有効成分のそれらの誘導体（例えば、塩、エステル、エーテル、糖類、ヌクレオチド、ヌクレオシド、ペプチド及び脂質）からなる群から有益に選択される。

溶液、エマルジョン、あるいは分散液として提供されている場合、局所投与用組成物は、以下のように例示される溶材を含んでいても良い。水又は水溶液；カプリン酸又はカプリル酸のトリグリセリドのような、好ましくはヒマシ油といった油；油脂、ワックス及び他の天然及び合成脂質、好ましくは低炭素数のアルコール、例えば、イソプロパノール、プロピレングリコール又はグリセロールを有する脂肪酸のエステル、又は低炭素数のアルカン酸又は脂肪アコード（ａｃｃｏｒｄ）を有する脂肪アルコールのエステル；アルコール、ジオール又は低炭素数のポリオール及びそれらの誘導体、好ましくは、エタノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、グリセロール、エチレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル又はエチレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル又はプロピレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル又はジエチレングリコールモノエチルエーテル、及び類似物。更に、上述した溶材の混合物を使用することができる。特に、アルコール溶材について言えば、水が更なる要素である。

本発明によるエマルジョン、アエロゲル、あるいは水分散体又は油性分散液の油相は、鎖長３乃至３０炭素原子の飽和及び／又は不飽和型分枝及び／又は非分枝アルカンカルボン酸、及び、鎖長３乃至３０炭素原子の飽和及び／又は不飽和型鎖長３乃至３０炭素原子の分枝及び／又は非分枝アルコールのエステル群から、又は、芳香族カルボン酸と、鎖長３乃至３０炭素原子の分枝及び／又は非分枝アルコールのエステル群から有益に選択される。この場合、このようなエステル油は、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、イソプロピルステアラート、オレイン酸イソプロピル、ステアリン酸ｎ−ブチル、ラウリン酸ｎ−ブチル、オレイン酸ｎ−デシル、ステアリン酸イソオクチル（ｉｓｏｃｔｙｌ ｓｔｅａｒａｔｅ）、ステアリン酸イソノニル、イソノナン酸イソノニル、パルミチン酸２−エチルヘキシル、ラウリン酸２−エチルヘキシル、ステアリン酸２−ヘキシルデシル、パルミチン酸２−オクチルドデシル、オレイン酸オレイル、エルカ酸オレイル、オレイン酸エルシル、エルカ酸エルシル、及びこのようなエステルの合成、半合成及び天然の混合物、例えばホホバオイルからなる群から有益に選択することができる。

更に、この油相は、分枝及び／又は非分枝炭化水素及び炭化水素ワックス、シリコーン油、ジアルキルエーテルからなる群、飽和及び／又は不飽和型分枝及び／又は非分枝アルコールと、脂肪酸トリグリセリド、すなわち、鎖長８乃至２４、特に１２乃至１８炭素原子の飽和及び／又は不飽和型分枝及び／又は非分枝アルカンカルボン酸のトリグリセロールエステルとからなる群から有益に選択される。例えば、脂肪酸トリグリセリドは、例えば、オリーブオイル、ひまわり油、大豆油、ピーナッツ油、菜種油、アーモンドオイル、ヤシ油、ココナツオイル、パーム核油等の合成、半合成及び天然オイルのグループからなる群から有益に選択される。これらのオイルとワックス成分の任意の混合物も本発明によって有益に使用される。適当であれば、例えば、パルミチン酸セチルなどのワックスは、唯一の油相脂質であるので、有益に使用することができる。

油相は、例えば、２−エチルヘキシルイソステアラート、オクチルドデカノール、イソノナン酸イソトリデシル、イソエイコサン（ｉｓｏｅｉｃｏｓａｎ）、２−エチルヘキシルココエート、Ｃ１２−１５−安息香酸アルキル、カプリル／カプリン酸トリグリセリド、ジカプリリルエーテルからなる群から有益に選択される。特に有利な混合物は、Ｃ１２−１５−安息香酸アルキル及び２−エチルヘキシルイソステアラートの混合物、Ｃ１２−１５−安息香酸アルキル及びイソノナン酸イソトリデシルの混合物、及びＣ１２−１５−安息香酸アルキル、及び２−エチルヘキシルイソステアラート及びイソノナン酸イソトリデシルの混合物である。炭化水素に関しては、液体パラフィン、スクワラン、及びスクワレンを本発明によって有益に使用することができる。油相は、環状又は線状シリコーンオイルを含み、あるいは、全体的にこのオイルでなるが、シリコーンオイルとは別に、その他の追加の油相成分を含むことがより有益である。シクロメチコーン（オクタメチルシクロテトラシロキサン）は、本発明によって使用するシリコーンオイルとして有益に用いられる。しかしながら、例えば、ヘキサメチルシクロトリシロキサン、ポリジメチルシロキサン、ポリ（メチルフェニルシロキサン）といったその他のシリコーンオイルも本発明によって有益に用いることができる。特に有益な混合物は更に、シクロメチコーン及びイソノナン酸イソトリデシルの混合物、及びシクロメチコーン及び２−エチルヘキシルイソステアラートの混合物である。

適当である場合は、本発明による調剤の水相は、アルコール、ジオール又は低炭素数のポリオール、及びそれらのエステル類、好ましくは、エタノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、グリセロール、エチレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル又はエチレングリコールモノブチルエーテル、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル、ポリエチレングリコールモノエチルエーテル又はポリエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル又はジエチレングリコールモノエチルエーテル及び類似物、更に、例えばエタノール、イソプロパノール、１，２−プロパンジオール、グリセロールといった低炭素数のアルコール、及び、特に、例えば、ヒアルロン酸、キサンタンゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの、二酸化シリコン、ケイ酸アルミニウム、多糖及びそれらの誘導体からなるグループから選択された一又はそれ以上の増粘剤を有益に含み、ポリアクリル酸塩からなる群、好ましくはカーボポールと呼ばれる群、例えば型番９８０、９８１、１３８２、２９８４及び５９８４のカーボポールからなるポリアクリル酸塩が、単独で又は組み合わせて特に有益である。

本発明によって使用するゲルは、通常、低炭素数のアルコール、例えば、エタノール、イソプロパノール、１，２−プロパンジオール、グリセロールと水、あるいは、増粘剤が存在する上述のオイルを含む。この増粘剤は、油性アルコールゲルの場合は、二酸化シリコン又はケイ化アルミニウムであることが好ましく、水性アルコールゲルの場合は、ポリアクリレートが好ましい。

固体スティックは、例えば、天然又は合成ワックス、脂肪アルコール又は脂肪酸エステルを含む。本発明による化粧用スティックとしての使用に適した普通の基礎材料は、液状オイル（例えば、液体パラフィン、ヒマシ油、ミリスチン酸イソプロピル）、半固体成分（例えば、ワセリン、ラノリン）、固体成分（例えば、蜜蝋、セレシン、微晶ワックス、あるはオゾケライト）、及び、高融点ワックス（例えば、カルナバワックス、カンデリラワックス）である。

本発明による化粧品及び／又は皮膚用調剤に適した、アエロゾール容器からスプレイできる高圧ガスは、通常知られている揮発性の液化高圧ガスであり、例えば、単体で、あるいは互いの混合物として使用できる炭化水素（プロパン、ブタン、イソブテン）である。加圧空気も有益に使用することができる。当業者には、もちろん、アエロゾール調剤の形で原理的に本発明の実施に適する非毒性の高圧ガスがあることは自明である。しかし、特に、フッ化炭化水素とフルオロクロロ炭化水素（ＦＣＨＣｓ）中の高圧ガスは、環境あるいはその他の付属する周囲に受け入れられない作用があるため、このガスを用いることなく対処することが推奨される。

本発明による局所投与用組成物は、有効量の本発明の活性成分と通常使用される溶材のみならず、有機増粘剤も含むゲルの形状であっても良い。このような増粘剤には、アラビアゴム、キサンタンゴム、アルギン酸ナトリウム、セルロース誘導体、好ましくはメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、又は例えばベントナイトのようなケイ酸アルミニウムといった無機増粘剤、又はポリエチレングリコール及びステアリン酸塩ポリエチレングリコール又はジステアリン酸ポリエチレングリコールの混合物が含まれる。

上述の活性成分を含有する許容できる化粧品／皮膚用キャリア剤形の一例は、以下の成分：キサンタンゴム；グリセリン９９．７％；四ナトリウムＥＤＴＡ；ステアリン酸グリセリル及びＰＥＧ−１００ステアリン酸塩（ＡＲＬＡＣＥＬ（登録商標）１６５）；セチルアルコール；パルミチン酸イソプロピル；ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）；メチルパラベン；プロピルパラベン及び純水を含むものでも良い。上述の活性成分を含有する許容できる化粧品／皮膚用キャリア剤形の別の例は、以下の成分：ステアリン酸；セチルアルコール；ラウレス４；ＣＡＲＳＯＮＯＬ（登録商標）Ｓｌｅｓ；プロピルパラベン；パルミチン酸アスコルビル；プロピレングリコール；ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）９７４Ｐ；メチルパラベン；ＫＯＨ（１０％）；及び水を含むものでも良い。

上述の組成物は、例えば、以下の工程によって調整することができる：
１．ステアリン酸、セチルアルコール、ラウレス４、プロピルパラベン、及び、パルミチン酸アスコルビルを合わせて、油相を溶かす；
２．ガラスビーカで、プロピレングリコールと水を合わせて、高速プロペラ攪拌でメチルパラベンとＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）を分散させる；
３．ＣＡＲＳＯＮＯＬ（登録商標）Ｓｌｅｓをステップ（２）の製品に加える；
４．ステップ（３）の製品を６５−７０℃に温める；
５．混合して、ステップ（１）の製品をステップ（４）の製品に加え、良くかき混ぜる；
６．混合物を４０℃に冷却する；
７．溶媒部分を加えて、手でよくかき混ぜる；
８．ＫＯＨ溶液を加えて中和する；
９．光から防護する。

概論
各ケースにおいて、組成物は一又はそれ以上の活性成分を好適に含み、この成分は、Ａ／Ｂ−ｃｉｓスピロスタン又はスピロステンステロイドサポゲニン及びこれらのエステル、エーテル、ケトン、及びこれらのグリコシル化型、その他の非サポ（ゲ）ニン活性薬剤、あるいは任意の組み合わせである。この組み合わせは、一又はそれ以上の生物学的不活性成分、例えば、希釈剤、キャリア、賦形材、を含んでいても良く、この成分が生理活性成分の提示、投与又は送達に関連する目的で作用する、あるいは、活性成分の生理学的効果とは別に対象に関連する利点を提供する。キャリアは、大豆たんぱく質などの植物材料を含んでいても良い。この組成物は、投与モードの特性と投与形態に応じて、保存剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味料、香味料、香料、抗菌材、抗カビ剤、潤滑剤、及び分散剤を含んでいても良い。

本発明に使用する組成物、特に、薬学的組成物は、単位量投与形でもよく、ここでは、ある数のこのような投与形を、治療又は予防する症状に応じて、所定の時間内に対象に投与する。代替的に、この組成物は、バルク形であっても良く、この場合、所定の重量又は容量のバルク組成物を測って、治療又は予防する症状に応じて、所定の時間内に対象に投与する。

しかしながら、高い投与量であっても、毒性はこれらの活性薬剤に付随する問題であるとは考えられない。適当な投与量の選択は、従って、過度の負担をかけることなく当業者の能力で行うことができる。約０．３ｍｇ／ｋｇ体重を超える活性薬剤の投与量は、好ましくは、１日１回投与される。より典型的には、投与量は約０．１乃至約２５ｍｇ／ｋｇ、例えば約１乃至約１０ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは１日２回投与される。成人に使用する場合は、投与量は、１日当たり約１０乃至約７００ｍｇであるのが好ましい。

本発明に使用する組成物は、上述したように、その他の治療及び／又は非治療生物活性薬剤を好適に含んでいても良い。

本発明に使用する組成物は、単位量投与形であっても良く、ある数のこのような投与形を、治療又は予防する症状に応じて、所定の時間内に対象に投与する。代替的に、この組成物は、バルク形であっても良く、この場合、所定の重量又は容量のバルク組成物を測って、治療又は予防する症状に応じて、所定の時間内に対象に投与する。

活性薬剤の必要な投与量は、治療あるいは予防する症状の重篤度に応じて広く変化する。例えば、約１ｆＭないし約５μＭといった、フェムトモルからミクロモル範囲の濃度が有効である。実施例１２に報告されている実験は、培地中の神経の損傷に対して、インビトロでＥＣ_５０１３．４ｆＭのスミラゲニンを示している。一般的に、ピコモルからミクロモルの範囲のインビボでの血漿濃度（例えばナノモルからミクロモル範囲）は、例えば約１ｍＰ以上、例えば約１ｍＰ乃至約５μＭ、例えば、約１ｐＭ乃至約３μＭ、例えば約１０ｐＭ乃至約７００ｎＭ、例えば、約０．１ｎＭ乃至約５００ｎＭ、が好ましい。ピコモル以下では、活性薬剤のインビボでの活動が減る傾向にある。ミクロモル以上では、対象の過投与に対する自己制御及び関連する抵抗は、単に、活性薬物が排出されることを意味する。しかしながら、本出願の例では、投与量が高い場合でも、毒性がこれらの活性薬剤の問題であるとは考えられない。従って、適宜の投与量の選択は、過剰な負荷をかけることなく当業者の能力の範囲で行うことができる。活性薬剤を投与した量は、例えば、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重より大きくても、約０．３ｍｇ／ｋｇ体重より大きくてもよく、好ましくは１日１回投与される。より典型的には、この投与量は、約１．０乃至約２５ｍｇ／ｋｇであり、例えば、約１乃至約１０ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは１日１回投与される。成人に使用する場合は、投与量は、１日当たり約１０乃至約７００ｍｇであるのが好ましい。

好適な組成物の形及び投与量の更なる詳細、及び、本発明によって治療可能な症状及び疾病の例については、ＷＯ−Ａ−９９／４８４８２、ＷＯ−Ａ−９９／４８５０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０７、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０８、ＷＯ−Ａ−０２／０７９２２１、ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３、ＷＯ−Ａ−２００５／１０５８２５、ＷＯ−Ａ−２００６／０４８６６５を参照されたい。

この活性薬剤は、組成物中の一又はそれ以上のキャリア、賦形剤、及び／又は希釈剤と共に調整することが好ましい。一般的には、薬学的組成物、食材、フードサプリメント、及び飲料など経口組成物、あるいは化粧品、眼あるいは皮膚の調整材など局所的組成物に使用される従来のキャリア、賦形剤及び／又は希釈剤を使用することができる。

多くの活性薬剤が比較的脂溶性であり、この場合、可溶化剤、懸濁化剤、及び／又は分散剤を好適に用いて、活性薬剤を組成物中の溶液、懸濁液あるいは分散液中に維持することができる。

特に挙げることができる二群の可溶化剤、懸濁化剤、及び／又は分散剤は、ＭＣＴｓと、中鎖脂肪酸（ＭＣＦＡｓ）である。これらは、鎖長が約４乃至１２炭素原子の脂肪酸を有する脂溶性化合物である。

ＭＣＴｓの好ましい例は、以下の一般式（Ｉ）で表わされる。

ここで、Ｒａ、Ｒｂ、及びＲｃは、互いに独立して、炭素骨格に４乃至１２炭素原子を有する飽和又は不飽和脂肪酸残渣から選択される。

ＭＣＦＡｓの好ましい例は、以下の一般式（ＩＩ）で表わされる。

ここで、Ｒｄは、炭素骨格に４乃至１２炭素原子を有する飽和又は不飽和脂肪酸残渣である。

Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ及びＲｄの例には、カプロン酸（Ｃ６：０）、カプリル酸（Ｃ８：０）、カプリン酸（Ｃ１０：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）の残渣が含まれる。標準的な命名システムでは、Ｃの文字の直後の数は、炭素鎖長を表わし、コロンの直後の数字は不飽和結合を示す。このようなＭＣＴｓや、ＭＣＦＡｓは、ココナッツ油、ヤシカーネル油、及びカンファー石果（果実）といった天然源から公知の方法で得られる。一又はそれ以上の脂肪酸の残渣は、商業的なＭＣＴｓ又はＭＣＦＡｓ製品の中に存在する。

本発明で使用するＭＣＴｓは、例えば、トリ−Ｃ６：０ＭＣＴ、トリ−Ｃ８：０ＭＣＴ、及び、トリ−Ｃ１０：０ＭＣＴから選択することができる。

産業上の利用可能性と有用性
本発明は、ヒト及び非ヒト哺乳動物における、最初の、ＮＦｓ介在の障害と機能の治療的及び非治療的治療の自己制御方法を可能とするものであり、生理学的応答が容量依存的でないが、活性薬剤の比較的広範囲にわたる容量で自己制御が行われる一方、副作用や毒性なしに、予測可能で有益な生理学的効果という点では、比較的狭い「治療窓」を提供している。従って、治療は、比較的広い制限内で過投与に耐える。この性質は、自己投与あるいは臨床設定外のその他の状況と、これまではわからなかった神経及びその他の治療の特徴を好適なものにする。薬剤が小分子であって、ペプチドではない（例えば、タンパク質）との事実は、さらに、脳あるいはＣＮＳ内へペプチド活性薬剤を直接投与する複雑な送達装置が入手できない臨床設定外で、本発明の潜在的有用性を支持している。

神経性、精神性、炎症性、アレルギー性、免疫性、あるいは腫瘍性疾患を患っている多くの患者は比較的年をとっている、あるいは健康状態があまり良くないので、これらの患者は、これらのカテゴリィ以外の病気にかかりやすいことがある。しばしば、どの範囲のその他の病気又は症状が生じるのかは、確実に予測することができない。本発明以前には、このようなその他の疾患又は症状、あるいはこれらへの個々の感染しやすさは、このような患者のこのような他の疾患又は症状を促進する実質的リスクを治療が運ぶことが非常に多いため、主疾患の治療と矛盾するものであった。従って、以前より簡単で単純な方法であり、より広い患者群にこの方法で適用可能な、疾患及び症状を治療する本発明の有用性は、ヒト及び動物の健康のこれらの重要な領域における医学及びヘルスケア実施を実質的に前進させる。

更なる説明のために、本発明を支持するデータを、純粋に例示により、限定することなく以下に述べる。
図１は、ＭＭＰ^＋誘発損傷に対するニューロンの保護に関する、ニューロンのスミラゲニン予治療の効果を示す。 図２は、（ａ）複合筋活動電位（ＣＭＡＰ）の振幅、（ｂ）グリッド試験、（ｃ）進行性運動ニューロン疾患（ｐｍｍ）マウスの生存率、に関するサルササポゲニンの効果を示す。 図３は、ＣＭＡＰの（ａ）振幅、（ｂ）待ち時間、（ｃ）時間の経過につれて神経が損傷したマウスの期間、に関するサルササポゲニン、スミラゲニン、及び４−メチルカテコールの効果を示す。

実施例と図面の詳細な説明
以下の実施例と図面の説明において、以下の略語を用いる。ｈ＝時間；ｍｉｎ＝分；ｓ＝秒；ｓ．ｃ．＝皮下；ｐ．ｏ＝経口。固体内固体、液体内固体、あるいは固体内液体である組成物の成分のパーセンテージは、重量パーセンテージである。液体内液体である組成物の成分のパーセンテージは、体積パーセンテージである

実施例１
いくつかの酵素及び受容体に結合しないサルササポゲニン及びスミラゲニン
以下の表１に挙げた酵素の活性に関するサルササポゲニンの効果及び、以下の表１に挙げた受容体へのサルササポゲニンの結合を調査した。

酵素の活性調節を以下の方法を用いて調査した。サルササポゲニンを各酵素と、各酵素用の特別な基体を用いてインキュベートした。インキュベーション期間経過後、反応が止まり、サルササポゲニンの欠如下及び存在下での特別な基体の減少あるいは特別な生成物の増加を測定し、サルササポゲニンの存在下における反応抑制のパーセンテージを計算した。使用した酵素の量、インキュベーション条件、使用した物質及び定量方法は、特定の各アッセイによって変わる。

以下の方法を用いて、受容体の結合を調査した。サルササポゲニンを、対象の受容体を発現する組織又は細胞均等質と、既知の濃度の、対象の受容体に対して親和性のある放射性標識化合物と共にインキュベートした。インキュベーションの後、非結合放射性標識化合物を除去し、特定の結合量を定量した。サルササポゲニンの欠如及び存在下での特定の結合量を比較して、サルササポゲニンによる放射性標識化合物の結合抑制のパーセンテージを計算した。受容体源、インキュベーション条件、使用する放射性標識化合物は、各特定のアッセイによって変わる。

結果を表１に示す。
表１ 酵素及び受容体結合アッセイのサルササポゲニンの効果

上述したものと同じ方法を用いて、以下の表２に挙げた受容体に対するスミラゲニン（１μＭ）の結合、及び、以下の表２に挙げた酵素の活性についてのスミラゲニンの効果を調査した。

表２ 受容体結合アッセイと酵素のスミラゲニンの効果

サルササポゲニンとスミラゲニンは、ある範囲の受容体には結合せず、ある範囲の酵素の活性は変化しない。これらの受容体と酵素は、神経経路、感覚経路、及び運動経路に含まれることが分かっているので、これらの実験で得られた知識の制限内において、神経、感覚及び運動に源をもつ症状及び疾患に対するサルササポゲニンとスミラゲニンの活性は、受容体の結合あるいは酵素の変化を通じて生じるものではない、と推定される。

実施例２
サルササポゲニンとスミラゲニンは、インビトロでの基本条件下で培養したニューロンにおける神経栄養因子ｍＲＮＡを一次的に増やす
特殊化した媒体と条件を用いて、新鮮な単離したニューロンをインビトロで培養することができる。このインビトロ環境は、生理学的なものとは異なり、ニューロンがより大きなストレスを受けて、神経損傷が生じる。神経損傷のレベルは、使用する詳細な条件に応じて、培地によって異なる。従って、神経損傷のレベルは、病理学的物質（例えば、β−アミロイド又はＭＰＰ^＋）を加えることによって有意に増加する。

ラットの皮質ニューロンを、上述した方法（Ｓｉｎｇｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９６，２１２，ｐｐ．１３−１６）の変形によって培養した。培養開始後１２日目に、サルササポゲニン（３０ｎＭ）、スミラゲニン（３０ｎＭ）、４−メチルカテコール（０．５ｍＭ）、ＮＦＧ及びＢＤＮＦの誘導物質放出（Ｓａｐｏｒｉｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．，１９９３，１２３，ｐｐ．２９５−３０２；Ｎｉｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１９９９，２９１，１２７６−１２８３）又はビークル（ジメチル・スルホキシド、ＤＭＳＯ、０．２５％）を加えて、１時間、３時間、あるいは６時間おいた。インキュベーション後、全ての伝令リボ核酸（ｍＲＮＡ）を、リアルタイムで逆転写ポリメラーゼ連鎖反応法（ｒｔＲＴ−ＰＣＲ）を用いて定量した。

この結果を以下の表３に示す。
表３ インキュベーションの１、３及び６時間後の、ラット皮質ニューロンにおけるＢＤＮＦ及びｔｒｋＢ ｍＲＮＡ発現についての、サルササポゲニン、スミラゲニン、及び４−メチルカテコールの効果

サルササポゲニンとスミラゲニンの両方とも、新鮮な単離した皮質ニューロンにおいて、ＢＤＮＦとＢＤＮＦ受容体ｔｒｋ−Ｂ（チロシン受容体キナーゼニューロトロフィン受容体）のｍＲＮＡのレベルを一時的に上げた（３時間後）。

別の実験において、ラットの皮質ニューロンを、上述の方法を変形して培養した（Ｅｃｋｅｎｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｓｏｆｒｏｎｉｅｗ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９８３，３，ｐｐ．２２８２６−２２９１）。８日目に、培地を、ビークル（ＤＭＳＯ、０．５％）又はスミラゲニン（１０μＭ）を含む媒体に４８時間交換して、皮質ニューロンのＢＤＮＦ ｍＲＮＡのレベルを、ｒｔＲＴ−ＰＣＲで評価した。

その結果を以下の表４に示す。

表４ ラットの皮質ニューロンにおけるＢＤＮＦ ｍＲＮＡのサルササポゲニンを用いた４８時間インキュベーションの効果

スミラゲニン（１０μＭ）を用いた４８時間インキュベーションは、新鮮な遊離皮質ニューロン中のＢＤＮＦ ｍＲＮＡレベルを上げなかった。これは、スミラゲニンとサルササポゲニンが６時間ではなく、３時間でＢＤＮＦ ｍＲＮＡを上げたことを示す表３のデータと一致している。更に、スミラゲニンの一時的効果（表３）は高濃度のスミラゲニン（表４）によっては克服されなかった。

実施例３
スミラゲニンはインビトロで病原体に露出させた培養ニューロンにおいて神経栄養因子ｍＲＮＡを有意に増加させる
スミラゲニンは予めβ−アミロイドに露出させた皮質ニューロン中のＢＤＮＦ ｍＲＮＡを増加させる。

ラットの皮質ニューロンを、上述の方法（Ｅｃｋｅｎｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｓｏｆｒｏｎｉｅｗ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９８３，３，ｐｐ．２２８６−２２９１）の変形によって培養した。８日目に、培地をビークル（ＤＭＳＯ、０．５％）あるいはスミラゲニン（１０μＭ）を含む培地に交換した。１０日目に、ラットの主な皮質ニューロンをβ−アミロイド（１０μｇ／ｍｌ）に、最大４８時間３７℃で露出させ、続く４８時間中、皮質ニューロン中のＢＤＮＦ ｍＲＮＡを、ｒｔ ＲＴ−ＰＣＲによって評価した。

その結果を表５に示す。

表５ β−アミロイドへ露出した後４８時間スミラゲニンでの予インキュベーションがラットの皮質ニューロン中のＢＤＮＦ ｍＲＮＡを増加させる

β−アミロイドへの露出に続く４８時間のスミラゲニンによる予処理によって、ラットの皮質ニューロンにおけるＢＤＮＦ ｍＲＮＡの発現が有意かつ持続的に増えた。
スミラゲニンは、ＭＰＰ^＋に予め露出させたドーパミン作動性ニューロン中のＢＤＮＦ ｍＲＮＡを増加させる。

ラットのドーパミン作動性ニューロンは、上述の方法（Ｂｒｏｕａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９２，１２，ｐｐ．１４０９−１４１５）を若干変形させて調整した。培地ＭＰＰ^＋（２μＭ）中で、５日後に、特定のドーパミン作動性神経毒、あるいはビークル（食塩水）を加えて４８時間置いた。次いで、培地を、スミラゲニン（１０μＭ）又はビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）を含有する新鮮な培地と交換して、１０分後、２時間後、２４時間後、４８時間後、及び７２時間後に、ｒｔ ＲＴ−ＰＣＲによってドーパミン作動性ニューロン中のＧＤＮＦ ｍＲＮＡを評価した。

この結果を以下の表６に示す。

表６ スミラゲニンは、ＭＰＰ^＋に露出させた後に、ラットドーパミン作動性ニューロン中のＧＤＮＦ ｍＲＮＡの発現を増加させる

ＭＰＰ^＋に露出させた後４８時間スミラゲニンで処理を行うことによって、ラットのドーパミン作動性ニューロン中のＧＤＮＦ ｍＲＮＡが有意に増加した。この増加は、２４時間で最大であり、次いで４８時間、７２時間後は減少した。

実施例２及び３は、スミラゲニンとサルササポゲニンが、神経栄養因子ｍＲＮＡの発現を増加させることを示している。更に、神経栄養因子ｍＲＮＡ発現に対するスミラゲニンとサルササポゲニンの効果は、ニューロンの状況に応じてある程度（期間と大きさ）変化する。基本条件下で培養した神経では、スミラゲニンとサルササポゲニンが、神経栄養因子ｍＲＮＡレベルを一次的に増加（最大で、コントロールの１４０％）させ、これは、６時間（表３）又は４８時間（表４）ではなく、３時間（表３）で観察された。反対に、病原体（例えばβ−アミロイドあるいはＭＰＰ^＋）に露出させた培養したニューロンでは、スミラゲニンが、神経栄養因子ｍＲＮＡの発現をより明確に（最大でコントロールの３３１９％）かつより長い期間（最大７２時間）増加させた（表５及び６）。この結果は、サルササポゲニンとスミラゲニンの神経栄養誘導因子効果が、システムの損傷の度合いに基づいて、自己制御すること、すなわち、サルササポゲニンとスミラゲニンは、神経栄養因子の自己制御メカニズムを壊すあるいはこれに優先することがない、ことを示している。

実施例４
スミラゲニンは、インビトロでの基本条件下で培養したニューロン中の神経栄養因子の発現を変えない
ラットの皮質ニューロンを、上述の方法（Ｅｃｋｅｎｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｓｏｆｒｏｎｉｅｗ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９８３，３，ｐｐ．２２８６−２２９１）の変形によって培養した。８日目に、培地をビークル（ＤＭＳＯ、０．５％）あるいはスミラゲニン（１０μＭ）を含む培地に交換した。１２日目に、培地中のＢＤＮＦ濃度を測定した。

この結果を以下の表７に示す。

表７ スミラゲニンを用いたインキュベーションは、インビトロでの基本条件下で培養したニューロン中のＢＤＮＦたんぱく質レベルを変えない

スミラゲニンは、インビトロでの基本条件下で培養したニューロン中のＢＤＮＦレベルを増加させない。

実施例５
サルササポゲニンとスミラゲニンは、インビトロで病原体に発現した、培養したニューロン中の神経栄養因子タンパク質発現を増加させる
サルササポゲニンとスミラゲニンは、ＢＤＮＦたんぱく質を増やし、β−アミロイドに予め露出させた皮質ニューロンにおけるニューロンの生存と神経突起伸長を増加させる。

ラットの皮質ニューロンを、上述の方法（Ｅｃｋｅｎｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｓｏｆｒｏｎｉｅｗ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９８３，３，ｐｐ．２２８６−２２９１）の変形によって培養した。８日目に、培地をビークル（ＤＭＳＯ、０．５％）あるいはスミラゲニン（１０μＭ）を含む培地に交換した。１０日目に、ラットの主な皮質ニューロンをβ−アミロイド（１０μｇ／ｍｌ）に、最大４８時間３７℃で露出させ、培地中のＢＤＮＦ濃度、コリンアセチルトランスフェラーゼ（ＣｈＡＴ）が溶性の細胞の数、及び、神経突起成長を測定した（スミラゲニンのみ）。

この結果を以下の表８に示す。

表８ スミラゲニン又はサルササポゲニンで４８時間予インキュベーションした後β−アミロイドに露出させることで、ＢＤＮＦたんぱく質レベルがあがり、インビボでニューロン損傷とニューロン委縮が防止される

サルササポゲニンとスミラゲニンは、ＢＤＮＦレベルをコントロールのレベルより上げて、皮質ニューロンにおけるβ−アミロイド誘発ニューロン損傷を防止する。

スミラゲニンは、ＧＤＮＦたんぱく質を上げて、予めＭＰＰ^＋に露出させたドーパミン作動性ニューロンにおけるニューロンの生存と神経突起伸長を増やす。

ラットのドーパミン作動性ニューロンは、上述の方法（Ｂｒｏｕａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９２，１２，ｐｐ．１４０９−１４１５）を若干変形させて調整した。６日後に培地を、スミラゲニン（１０μＭ）又はビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）を含有する新鮮な培地と交換した。８日目にＭＰＰ^＋（２μＭ）あるいはビークル（食塩水）を加えて、４８時間後にドーパミン作動性ニューロン中を染色して、培地中のＧＤＮＦ濃度、ニューロン損傷、及び神経突起伸長を評価した。

この結果を以下の表９に示す。

表９ スミラゲニンは、培地中のＧＤＮＦの量を増やし、ＭＰＰ^＋に露出させた後のラットのドーパミン作動性ニューロンにおけるニューロン損傷とニューロン委縮を防止する

スミラゲニンは、ＧＤＮＦの量を増やし、ドーパミン作動性ニューロン中のＭＰＰ^＋誘発性のニューロン損傷を防止する。

実施例４に示すデータは、インビトロで基本条件下では培養したニューロンにおける神経栄養因子タンパク質発現を増やさないことを示す。反対に、実施例５は、サルササポゲニンとスミラゲニンが、インビトロで病原体に露出させた培養したニューロン中の神経栄養因子タンパク質発現を増やすことを示している。従って、神経栄養因子タンパク質についてのサルササポゲニンとスミラゲニンの効果は、神経栄養因子ｍＲＮＡについての効果と同じである。すなわち、サルササポゲニンとスミラゲニンは、神経栄養因子の自己制御メカニズムを壊すあるいはこれに優先することがないが、実際は、ニューロンの必要性に応じて、その影響を受ける。

ＢＤＮＦ、ｔｒｋ−Ｂ及びＧＤＮＦは、神経経路、感覚経路及び運動経路に関係することが知られているので、これらの実験から得られた知識の制限内で、神経源、感覚源及び運動源に対するサルササポゲニンとスミラゲニンの活性が、神経栄養因子とその受容体の強化された遺伝的発現を具えると推定される。

実施例６
サルササポゲニンとスミラゲニンは、老化した動物中のＢＤＮＦ濃度を回復させる
老齢のスプラーグドーリー（ＳＤ）ラット（２０月令）に、サルササポゲニンとスミラゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日）を３ヶ月間経口で投与した。若いラットの脳に比べて、年取ったラットの脳においてＢＤＮＦが有意に低減した。若いＳＤラット（４月令）を健康な陽性対象として使用した。処理の終盤において、脳を除去してＥＬＩＳＡを用いてＢＤＮＦの定量した。

その結果を以下の表１１に示す。

表１１ サルササポゲニンとスミラゲニンは、老齢のラットにおけるＢＤＮＦレベルの低下を反転させ、ＢＤＮＦレベルを若い状態に戻す

サルササポゲニンとスミラゲニンを、３ヶ月間老齢のラットに経口投与し、老齢の動物のＢＤＮＦの低下を、若く健康なラットに観察されるレベルに戻した。すなわち、この薬剤は、老齢のコントロールラットに比べてＢＤＮＦレベルを有意に上げる。

このデータは、ＢＤＮＦ発現に関するこの薬剤の効果が、長期投与における正常化効果であることを示している。すなわち、ほぼ正常な状態に戻ることを制限することによって、処置を行った動物を薬剤への過剰露出に対して保護する長期の調節作用がある。

この実施例は、ここで引用により組み込まれているＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例９の実験に合致している。この実験は、加齢に関連するＢＤＮＦ、ドーパミン受容体、及びムスカリン性アセチルコリン受容体のラットにおける低下が、スミラゲニン又はサルササポゲニンによって有意に低減する、あるいは回復することを示した。

実施例７
スミラゲニンは、ＭＰＴＰ−障害マウスの線条体におけるＢＤＮＦとＧＤＮＦ濃度を上げる
７週令のオスＣ５７ｂｌ／マウス（Ｃ５７マウス）に毎日、１−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ、２５ｍｇ／ｋｇ／日、腹腔内、連続５日間）を注射し、スミラゲニン（１０ｍｇ／ｋｇ／日）又はビークル（ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ツイーン８０ ０．２％ ｖ／ｖを含有するＨＰＭＣ ０．５％ ｗ／ｖ）を６０日間経口投与し、その後、脳を切り取って、ＥＬＩＳＡを用いて、ＧＤＮＦとＢＤＮＦの線条体レベル、及び、[Ｉ^１２５]−ＲＴＩ結合を用いてドーパミン輸送体（ＤＡＴ）レベルの定量化を行った。ＤＡＴはドーパミン作用性ニューロンに対するニューロン損傷のマーカーである。

神経毒ＭＰＰ^＋によって生じた損傷、すなわちＭＰＴＰの代謝産物は、パーキンソン病などの神経変性疾患に観察される黒質線条体ドーパミン作用性ニューロンの変性に似ている（Ｍｙｔｉｎｌｉｎｅｏｕ ｅｔ ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２５，５２９−５３１（１９８４））。この毒性によって誘発される最も顕著な生化学的変化には、ドーパミンレベルの上昇、及び中脳黒質緻密部と尾状核におけるこの代謝物質（Ｂｕｒｎｓ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８０，４５４６−４５５０（１９８３））と、黒質線条体シナプトソーム生成におけるドーパミン摂取の低減（Ｈｅｉｋｋｉｌａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，４４，３１０−３１３（１９８５））が含まれる。

このように、この実験で用いたＭＰＴＰで処理したマウスは、パーキンソン病と同様の運動感覚神経変性症状の受容モデルを提供している。

この結果を以下の表１２と１３に示す。

表１２ スミラゲニンは、ＭＰＴＰ障害マウスにおける線条体ＧＤＮＦとＢＤＮＦを増やす

表１３ スミラゲニンは、ＭＰＴＰ障害マウスにおける線条体ＤＡＴレベルを増やす

ＭＰＴＰ障害マウスへ６０日間経口投与したスミラゲニンは、線条体ＧＤＮＦ及びＢＤＮＦレベルを大幅に上げて、ＭＰＴＰが誘発したＤＡＴ結合のロスを有意に防止する。

この実施例は、ここで引用により組み込まれているＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例６及び７の実験に合致している。これらの実験は、スミラゲニン又はサルササポゲニンで、中脳ドーパミン作用性ニューロンをラットに予め処理することで、インビトロでＭＰＰ^＋誘発神経変性を有意に防止あるいは回復させることを示した。

同様の実験で、１０週令のオスＣ５７マウスに毎日、ＭＰＴＰ（２５ｍｇ／ｋｇ／日、腹腔内）を連続５日間（１−５日）注射し、スミラゲニン（１０ｍｇ／ｋｇ／日）又はビークル（ツイーン８０ ０．２％ ｖ／ｖを含有するＰＭＣ ０．５％ ｗ／ｖ）を６１日間（１２−７２日）、又は７１日間（２−７２日）経口投与し、その後、脳を切り取って、ＤＡＴの線条体レベルの定量化を行った。ＤＡＴはドーパミン作用性ニューロンに対するニューロン損傷の範囲のマーカーである。

その結果を以下の表１４に示す。

表１４ スミラゲニンは、マウスの線条体ＤＡＴレベルにおけるＭＰＴＰ誘発の低下を回復させる

コントロールマウスに７１日間経口投与したスミラゲニンは、ビークルのみを投与されたコントロールマウスに比べて、線条体ＤＡＴレベルを変えない。ＭＰＴＰ障害マウスに６１日又は７１日間経口投与したスミラゲニンは、ＭＰＰ誘発線条体ＤＡＴレベルの低下を有意に回復させる。

実施例８
サルササポゲニンとスミラゲニンは、皮質ニューロン、脊髄運動ニューロン、及び感覚ニューロンにおける神経突起生成を増やす

皮質ニューロン
ラットの皮質ニューロンを、上述の方法（Ｓｉｎｇｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９６，２１２，ｐｐ．１３−１６）の変形によって培養する。細胞を、サルササポゲニン、スミラゲニン、ビークル（ＤＭＳＯ ０．２５％）、ＧＤＮＦ、ＢＤＮＦ、あるいはＮＧＦで２４時間培養した。各群について、神経突起を示しているニューロンを示す１５枚の写真を各フィールドで任意に選択して、各ニューロンについて最も長い神経突起を測定した。神経突起を示しているニューロンの数と、神経突起を示していないニューロンの数と、各フィールドにおける総ニューロン数を計数することで神経突起の数を測定した。各ウエルにつき６つのフィールドを調べた。

この結果を以下の表１５に示す。フィールドごとの線条体があるニューロンの数は、フィールドごとの総ニューロン数のパーセンテージで表わしている。

表１５ サルササポゲニンとスミラゲニンは、皮質ニューロン中の神経突起生成を増やす

サルササポゲニンとスミラゲニンは、ラットの主な皮質ニューロンにおいて、存在する神経突起の長さと、神経突起を表わすニューロンのパーセンテージを有意に増やす。サルササポゲニンとスミラゲニンへの露出に続く神経突起の伸長の効果は、陽性コントロール、ＧＤＮＦ、ＢＤＮＦ及びＮＧＦに観察される効果と比較できる。

この実施例は、ここで引用により組み込まれているＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例５の実験に合致している。この実験は、ラットの主な皮質ニューロンをサルササポゲニン又はスミラゲニンで処理することが、存在する神経突起の長さと、神経突起を表わすニューロンのパーセンテージを有意に増やすことを示した。

サルササポゲニンとスミラゲニンの神経栄養活性、神経保護活性、及び神経回復活性が、ＢＤＮＦやＧＤＮＦといった神経栄養因子の存在に依存するかどうかを試験するために、以下の実験を行った。

以下に示す方法に従って、ラットの皮質ニューロンを培養した。

上述した考察とは異なり、ウシ胎児血清（ＦＢＳ）又はウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を培地に加えておらず、これは培地中に神経栄養因子が存在しないことを意味する。試験化合物を２４時間加えた。

ラットの皮質ニューロンをＦＢＳあるいはＦＣＳの入っていない、サルササポゲニン、スミラゲニン（３０ｎＭ）又はビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）に、一日露出させた。皮質ニューロンを、希釈したモノクロナール抗体抗β−チューブリンと、希釈した抗マウス免疫グロブリンＧを用いて染色した。これらの抗体が、ニューロン細胞本体（神経保護効果を定量する）と神経突起（神経栄養効果を定量する）とを染色した。カメラ付落射蛍光顕微鏡（倍率×２０）で、ウエルごとに２枚写真を撮った（各症状につき１０枚）。抗β−チューブリンで標識化した細胞の数と、細胞総数の分析を、ＬＵＣＩＡ６．０ソフトウエアを用いて行った。

この結果を以下の表１６に示す。

表１６ 血清がなく、追加の神経栄養因子がない状態で培養した皮質ニューロンのニューロン生存及び神経突起伸長に対するサルササポゲニンとスミラゲニンの効果

サルササポゲニンとスミラゲニンは、その神経栄養、神経保護、及び神経回復活性を発揮するために、追加の神経栄養因子を必要としない。

脊髄運動ニューロン
キサリプロデン（１−［２−（ｎａｐｈｔｈａ−２−ｙｌ）ｅｔｈｙｌ］−４−（３−ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）−１，２，５，６−ｔｅｔｒａ−ｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）は、ＳＲ５７７４６Ａとしても知られており、サノフィ・アベンティス社によって、神経変性障害の治療用に開発された、経口活性の、合成、非ペプチド化合物である。キサリプロデンは、血液脳関門を貫通して、インビトロで神経栄養活性を有し、ここで、ＰＣ１２細胞における神経突起の伸長に関するＮＧＦの効果を促進し（Ｆｏｕｒｎｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９３，５５，ｐｐ．６２９−６４１；Ｐｒａｄｉｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９５，６４，ｐｐ．１９５４−１９６４）、マウスの脊髄運動ニューロンの生存を高める（Ｄｕｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９９，１２８，ｐｐ．１３８５−１３９２）。更に、キサリプロデンは、進行性運動ニューロン疾患マウスの平均生存時間と運動能力を上げる（Ｄｕｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９８，１２４，ｐｐ．８１１−８１７）。キサリプロデンの行動モードは、不明のところが多い。しかしながら、キサリプロデンの神経保護効果は、５−ヒドロキシトリプタミン_１Ａ受容体におけるアゴニスト行動から独立しているように見える（Ｌａｂｉｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９９，１２７，ｐｐ．１３９−１４４）。

以下の実験は、サルササポゲニン又はスミラゲニンの、キサリプロデンに対する、神経及び神経突起の効果を比較している。

ラットの脊髄運動ニューロンを、上述の方法に従って調整した（Ｍａｒｔｉｎｏｕ ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｎ，８，７３７−７４４，１９９２）。サルササポゲニン、スミラゲニン、ビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）、キサリプロデン、又はＢＤＮＦで培養した３日後に、脊髄運動ニューロンをＰＢＳで２回洗浄して、冷たいアルコール溶液（９５％）と酢酸（５％）中で５分間固定し、ＰＢＳで３回すすいだ。モノクロナール抗体抗β−チューブリンと、抗マウス免疫グロブリンＧを用いて、ニューロンを染色した。これらの抗体は、染色ニューロン細胞本体（神経保護効果を定量する）と神経突起（神経栄養効果を定量する）を染色した。細胞の核は、蛍光マーカーによって染色された。培養の１時間後に、細胞をＰＢＳで３回洗浄した。倍率２０倍の落射蛍光顕微鏡で培養体を観察した。コンピュータソフトウエアで制御されたカメラを用いて、一連の写真を撮った。すべての画像は、同じ条件下で撮影された。抗β−チューブリンで標識化した細胞の数と、細胞総数（染色された細胞核の数）の分析を、ＬＵＣＩＡ６．０ソフトウエアを用いて行った。

この結果を以下の表１７に示す。

表１７ サルササポゲニンとスミラゲニンは、脊髄運動ニューロンの神経新生と神経突起生成を増やす

このデータは、キサリプロデンへの露出が、コントロールに比べてニューロンの生存と神経突起伸長を有意に増やしたことを示している。サルササポゲニンとスミラゲニンも、ラットの主な脊髄運動ニューロンにおけるニューロンの生存と神経突起伸長を有意に増やした。神経突起生成を増やす効果は、陽性コントロールＢＤＮＦで観察される効果と比較できる。

サルササポゲニンとスミラゲニンの神経新生を促進する効果は、キサリプロデンの効果より若干顕著であるように見える。ただし、サルササポゲニンとスミラゲニンの効果は、従来の研究に比較すると、この研究では低減しているように見える。

キサリプロデン（１及び２ｍｇ／日）の効力と安全性は、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）患者を用いて、２つの段階ＩＩＩ臨床試験において評価した（Ｍｅｉｎｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ Ｌａｔｅｒａｌ Ａｃｌｅｒｏｓｉｓ ａｎｄ Ｏｔｈｅｒ Ｍｏｔｏｒ Ｎｅｕｒｏｎ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，２００４，５，ｐｐ．１０７−１１７）。更に、近年、キサリプロデンを、アルツハイマー病の可能性として段階ＩＩＩ試験において、評価した。そのキサリプロデンについての表示は、現在はもはや進行していない。投与量に依存する副作用は、キサリプロデンの５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ）アゴニスト特性に大きくかかわっている。

この実施例では、サルササポゲニンとスミラゲニンは、キサリプロデンに比較して、改善したあるいは同様の活性プロファイルを示した。重要なことは、サルササポゲニンとスミラゲニンは、５−ＨＴアゴニストではなく、キサリプロデンに対応する副作用を示していないことである。

この実施例は、ここで引用により組み込まれているＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例８のインビトロでの実験に合致している。この実験は、インビトロでラットの主な脊髄運動ニューロンのグルタミン酸誘発神経変性が、サルササポゲニン又はスミラゲニンによって有意に低減した、あるいは戻ったことを示した。

感覚ニューロン
妊娠１５日目のＷｉｓｔａｒラットの胚からラットの感覚ニューロンを得た。５％ＣＯ_２／９５％空気の雰囲気中で３７℃にて細胞を培養した。サルササポゲニン、スミラゲニン、ビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）、又はＮＧＦで培養した２日後に、感覚ニューロンをＰＢＳで２回洗浄して、ＰＢＳ中のパラホルムアルデヒド（４％）に４℃で３０分間固定した。細胞をＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００（０．１％）で透過性にし、非特定部位をウシ胎仔血清を用いて飽和させた。染色する前に、一次抗体の混合物である、抗ニューロフィラメント６８及び２００との混合物を用いて、ウシ胎仔血清５％を含むＰＢＳ中で、室温で２時間インキュベートした。洗浄する前に、スライドをはずして、細胞をＰＢＳで５分間、２回洗浄し、暗室に１時間置いて、二次抗体であるシアニン３と結合した抗マウス抗体（Ｃｙ３；１／１６００）とふっ化イソチアン酸スズ（ｆｌｕｏｒｏｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）とインキュベートした結合した抗ウサギ抗体を用いて、ウシ胎仔血清５％を含むＰＢＳ中でインキュベートした。スライドをＰＢＳで５分間、２回洗浄し、Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ（０．２ｍＭ；ｐＨ８．５）で緩衝化したグリセロール（２２％）中の抗酸化性溶液（９％ ｗ/ｖ）であるＭｏｗｉｏｌを用いてカバースリップ上に装填した。スライドを室温で一晩置いて、固め、遮光状態で保存した。ａ×２０対物レンズ付ＤＡＰＩ／ＦＩＴＣ／Ｃｙ３トリプルフィルタ顕微鏡を用いて、スライドを見た。デジタルカメラを用いて、ウエルごとの一連の写真をランダムに撮影した。

この結果を以下の表１８に示す。

表１８ サルササポゲニンとスミラゲニンは、感覚ニューロンのニューロン生存を増やす

サルササポゲニンとスミラゲニンは、ラットの主な感覚ニューロンのニューロン生存を増やす。

実施例９
サルササポゲニンとスミラゲニンは、神経栄養因子と同じ細胞間変換経路を活性化する
サルササポゲニンとスミラゲニン誘発神経突起生成は、ｔｒｋ抑制剤であるＫ２５２ａによって抑制され、サルササポゲニンとスミラゲニンの神経栄養効果がｔｒｋ受容体によって直接的にあるいは間接的に介在されていることを提言している。この抑制実験を以下に説明し、結果を以下の表１９に示す。

皮質ニューロンを上述の詳細に従って培養した。ニューロンをビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）又はＫ２５２ａ（１００ｎＭ）に１時間露出させた。１時間後、ビークル、サルササポゲニン、スミラゲニン（３０ｎＭ）又はＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）を、Ｋ２５２ａの存在を維持した状態で、媒体に加えた。サルササポゲニン又はスミラゲニン（３０ｎＭ）、ビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）又はＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）へ２４時間露出させた後、ニューロンをリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を用いて洗浄し、ＰＢＳ中のグルタルアルデヒド（２．５％）に固定した。神経突起を表わしている４０−６０のニューロンの写真を、顕微鏡に固定したカメラ（対物レンズ ×２０、ニコン）で撮像した。写真を分析して神経突起長を測定した。

この結果を以下の表１９に示す。

表１９ ラットの主な皮質ニューロンのサルササポゲニンとスミラゲニン誘発神経突起伸長の抑制

皮質及び中脳ニューロンにおけるＫ２５２ａ、抗ＢＤＮＦ又は抗ＧＤＮＦ抗体を用いた個別実験で、同様の結果が得られた。

ｔｒｋ受容体の活性化を行った後、ニューロンの生存を導く特定の信号変換経路を活性化させ、この経路にＭＥＫ１／２が含まれることが示された（Ｆｉｎｋｂｅｉｎｅｒ，Ｎｅｕｒｏｎ，２０００，２５，ｐｐ．１１−１４）。スミラゲニン誘発神経突起生成は、ＭＥＫ１／２抑制剤である、ＰＤ９８０５９によって部分的に抑制され、スミラゲニンの神経栄養効果がＭＥＫ１／２を介して部分的に介在されることを示唆している。この抑制実験について以下に述べ、結果を以下の表２０に示す。

皮質ニューロンを上述の詳細に従って培養した。ニューロンをビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）又はＰＤ９８０５９（１０μＭ）に１時間露出させた。１時間後、ビークル、スミラゲニン（３０ｎＭ）又はＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）を、ＰＤ９８０５９の存在を維持した状態で、媒体に加えた。スミラゲニン（３０ｎＭ）、ビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）又はＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）へ２４時間露出させた後、ニューロンをＰＢＳを用いて洗浄し、ＰＢＳ中のグルタルアルデヒド（２．５％）に固定した。神経突起を表わしている４０−６０のニューロンの写真を、顕微鏡に固定したカメラ（対物レンズ ×２０、ニコン）で撮像した。写真を分析して神経突起長を測定した。

この結果を以下の表２０に示す。

表２０ ラットの主な皮質ニューロンのスミラゲニン誘発神経突起伸長の抑制

サルササポゲニンを用いて同様の実験を行って、同様の結果となった。

環状アデノシン一リン酸応答要素結合蛋白（ＣＲＥＢ）は、転写因子族に属し、ニューロン生存の調整に重要である。更に、ｔｒｋ受容体活性化を行った後、ＣＲＥＢを上方制御した（Ｆｉｎｋｂｅｉｎｅｒ，Ｎｅｕｒｏｎ，２０００，２５，ｐｐ１−１４）。サルササポゲニンは、チャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞中のリン酸化ＣＲＥＢ（ｐＣＲＥＢ、ＣＲＥＢの活性型）の量を有意に増やした。この実験について以下に述べ、結果を以下の表２１に示す。

ＣＨＯをＤＭＳＯ（０．５％）又はサルササポゲニン（１０μＭ）で２４時間インキュベートした。次いで、細胞を冷たいＰＢＳで洗浄し、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）緩衝液中に溶解させ、５分間ボイルして、ブラッドフォールド法によってたんぱく質の含有量を測定した。次いで、サンプルをＳＤＳポリアクリルアミドゲルの上で分離して、ＰＶＤＦ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）膜に移した。５％のスキムミルク粉に1時間露出させた後、膜を一晩、４℃で、一次抗体である、ｐＣＲＥＢ（Ｕｐｓｄａｔｅ： １：１０００）とマウスβ−アクチン（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，１：１０００）中でインキュベートした。次いで、膜をぺルオキシダーゼ接合二次抗体（Ｗｕｈａｎ Ｂｏｓｔｅｒ ｂｉｏｌｏｇｙ Ｔｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎａ．１：２０００）で1時間室温でインキュベートして、ＥＣＬ試薬（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いて発現させた。２−メルカプトエタノール（１００ｍＭ）、ＳＤＳ（２％）、Ｔｒｉｓ ＨＣｌ（６２．５ｍＭ）中で、ｐＨ６．８、５０℃で３０分間インキュベートさせることで、膜をストリップさせた。画像分析器（Ｇｅｌ Ｄｏｃ ２０００．，Ｂｉｏ−Ｒａｄ）付のＩｍａｇｅ Ｊ分析システムを用いて、免疫染色の濃度測定定量化を行った。ｐＣＲＥＢの各帯域の免疫染色の相対量を、同じ実験のβ−アクチンバンドランに正規化して、任意の単位で表わした。

表２１ ＣＨＯ細胞中のあるサルサポゲニンに２４時間露出させた後のリン酸化ＣＲＥＢの発現

実施例１０
サルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン、及びエピスミラゲニンでの予処理が、皮質ニューロンへのグルタミン酸誘発損傷を低減する
ラットの主な皮質ニューロンのグルタミン酸への露出は、グルタミン酸の露出後２４時間で測定した乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）活性を増加させ、ニューロンの有意な損傷を示している。ラットの皮質ニューロンを、上述した方法（Ｓｉｎｇｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９６，２１２，ｐｐ．１３−１６）の変形によって培養した。培養後１０目に、媒体を血清を含まない既知の媒体に交換した。１２日目に、培地を洗浄して、２４時間テスト化合物又はビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）を含む新鮮な媒体においた。１３日目にニューロンをグルタミン酸（１００μＭ；１０分）に、３７℃で露出させた。次いで、培地を、テスト化合物又はビークルを補充した新鮮な媒体で洗浄して、ＬＤＨを測定する前にその中に更に２４時間おいた。グルタミン酸に露出させた後２４時間で、この媒体中のＬＤＨ活性を測定することで、ニューロンの損傷を評価した。

この結果を以下の表２２乃至２６に示す。

表２２ サルササポゲニンは、皮質ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を低減する

表２３ スミラゲニンは、皮質ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を低減する

表２４ エピサルササポゲニンは、皮質ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を低減する

表２５ エピスミラゲニンは、皮質ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を低減する

表２６ ジオスゲニンは、皮質ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を低減しない

ラットの主な皮質ニューロンにおいて、グルタミン酸に露出させる２４時間前にサルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン（１−１００ｎＭ）、及びエピスミラゲニン（３−３００ｎＭ）で予処理を行うことで、グルタミン酸のみに露出させたニューロンに比べてグルタミン酸誘発ＬＤＨの放出が有意に少なくなる。

反対に、グルタミン酸に露出させる２４時間前にジオスゲニン（３−３００ｎＭ）で予処理を行うことは、ニューロンの損傷を防止しなかった。

サルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン、及びエピスミラゲニンの活性は、毒性を生じさせることなく、ナノモル濃度で安定域に達した。これらの実験条件におけるマイクロモル濃度のテスト化合物は、溶液から凝固する。

この実施例は、ここで引用により組み込まれているＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例２乃至４のインビトロでの実験に合致している。これらの実験は、サルササポゲニン、エピサルササポゲニン、スミラゲニン、エピスミラゲニン、又はこれらの３−ケトン又は３−エステルでラットの主な皮質ニューロンを予処理することが、グルタミン酸誘発神経変性を有意に防止あるいは回復する一方、ジオスゲニンはこのような活性がないことを示した。

実施例１１
ドーパミン作用性ニューロンにおけるサルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン、及びエピスミラゲニンの抗アポトーシス作用
ラットのドーパミン作用性ニューロンを上述のように培養した（Ｓｃｈｉｎｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８８，５０，ｐｐ．１９００−１９０７）。５日目に、培養体を洗浄して、テスト化合物（３０ｎＭ）、ビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）又はＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）とＧＤＮＦ（０．１７ｎＭ）の組み合わせを含む新鮮な媒体に２４時間置いた。

ラットの主なドーパミン作用性ニューロンをＭＰＰ^＋（２μＭ、２４時間）に露出させることで、コントロールに比べて、ドーパミン作用性ニューロンの数が有意に減少した。６日目に、テスト化合物、ビークル、あるいはＢＤＮＦとＧＤＮＦの組み合わせの存在下で、ＭＰＰ^＋（２μＭ）を培養体に加えて、更に４８時間置いた。ＭＰＰ^＋は、ミトコンドリア中の錯体Ｉの抑制と続くＡＴＰの欠乏を介して神経細胞の死を誘発し、その結果フリーラジカルが生じて、アポトーシスを誘発する。インキュベーション期間後に、培養体をＰＢＳ（４％）中のパラフォルムアルデヒドに固定した。固定後、Ｔｒｉｔｏｎ×１００（０．０５％）で３０分間透過性にした。次いでニューロンを、抗−チロシン水酸化酵素（ＴＨ）で、３７℃で２時間インキュベートした。ニューロンをＰＢＳで３回洗浄し、次いで、ヤギ抗マウス／Ｃｙ３で、３７℃で２時間インキュベートした。ニューロンを経口顕微鏡に装填して、検査した。

この結果を以下の表２７に示す。

表２７ サルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン、及びエピスミラゲニンは、ＭＰＰ^＋誘発の中脳ドーパミン作用性ニューロンの喪失を低減する

サルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン、及びエピスミラゲニンは、ＭＰＰ^＋誘発ドーパミン作用性ニューロンの低減を有意に防止する。神経栄養因子、ＢＤＮＦ及びＧＤＮＦの組み合わせに露出させることも、ＭＰＰ^＋誘発ドーパミン作用性ニューロンの低減を有意に防止する。

実施例１２
サルササポゲニンとスミラゲニンは、グルタミン酸又はＭＰＰ ^＋ 誘発損傷後に神経を再生する

皮質ニューロン
神経変性疾患の治療の重要なゴールは、進行を防ぐことのみならず、患者に生じるニューロンの喪失を回復することである。ラットの主な皮質ニューロンをグルタミン酸（１００μＭ；１０分）に露出させた後、サルササポゲニンとスミラゲニン（３０ｎＭ）が、治療後２４時間でグルタミン酸誘発損傷を有意に回復させた。この実施例は、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例２乃至４に報告されている研究の発展形である。

ラットの皮質ニューロンを上述した詳細に従って調整した。１３日目に、培養体をグルタミン酸（１００μＭ）に、１０分間、３７℃で、５％ＣＯ_２／９５％空気の雰囲気中で、既知の媒体において露出させた。インキュベーション期間後、培養体を洗浄して、サルササポゲニン、スミラゲニン、又はビークルを含む新鮮な媒体中に維持した。グルタミン酸に露出させた後、細胞を更に２４時間培養して、上述した詳細に従って、ニューロン損傷を評価した。

その結果を以下の表２８に示す。

表２８ サルササポゲニンとスミラゲニンは、皮質ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を回復させる

脊髄運動ニューロン
ラットの脊髄運動ニューロンを上述した詳細に従って調整した。１０日目に、媒体を除去して、培養体をグルタミン酸（４μＭ）に、１０分間、３７℃で、５％ＣＯ_２／９５％空気の雰囲気中で、既知の媒体において露出させた。グルタミン酸に露出させた後、培養体をＤＭＥＭで３７℃で洗浄して、サルササポゲニン、スミラゲニン、ビークル、又はＢＤＮＦを含む新鮮な培養媒体中に置いた。４８時間後、運動ニューロンの障害の程度を上述の詳細に従って測定した。この実施例は、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例８に報告されている研究の発展形である。

その結果を以下の表２９に示す。

表２９ サルササポゲニンとスミラゲニンは、脊髄運動ニューロンにおけるグルタミン酸誘発損傷を回復させる

ラットの主な脊髄運動ニューロンのグルタミン酸（４μＭ；１０分）への露出は、グルタミン酸への露出後４８時間で測定したＬＤＨ活性を増加させ、有意なニューロン損傷を示している。サルササポゲニンとスミラゲニン（０．０３−３００μＭ）は、治療後４８時間のグルタミン酸誘発損傷を有意に回復させた。

しかしながら、最も濃度の低いサルササポゲニンとスミラゲニンによって提供された障害の回復は、培地間で異なり、このモデルにおける活性の最も低いリミットでは０．０３μＭであることを示唆している。脳由来の神経栄養因子（３ｎＭ）を陽性コントロールとして用いて、グルタミン酸のみに露出させた脊髄運動ニューロンに比べた場合に、グルタミン酸誘発ＬＤＨ活性を有意に回復させた。

ドーパミン作用性ニューロン
ラットの主なドーパミン作用性ニューロンを上述した詳細に従って調整した。５日目に、培養体にＭＰＰ^＋（２μＭ）を加えて、２４時間、３７℃で、５％ＣＯ_２／９５％空気の雰囲気中に置いた。ラットの主なドーパミン作用性ニューロンをＭＰＰ^＋（２μＭ、２４時間）露出させることで、コントロールに比較してドーパミン作用性ニューロンの数を有意に低減させた。６日目に、媒体を除去して、ビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）、サルササポゲニン、スミラゲニン、又はＢＤＮＦとＧＤＮＦの組み合わせを含む新鮮な媒体を加えた。４８時間後、ドーパミン作用性障害の程度を上述の詳細に従って測定した。

その結果を以下の表３０に示す。

表３０ サルササポゲニンとスミラゲニンは、ドーパミン作用性ニューロンにおけるＭＰＰ^＋誘発損傷を回復させる

このデータは、サルササポゲニンとスミラゲニン（３０ｎＭ）がドーパミン作用性ニューロンにおけるＭＰＰ^＋誘発損傷を有意に回復させたことを示す。神経栄養因子、ＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）とＧＤＮＦ（０．１７ｎＭ）の組み合わせに露出させることも、ドーパミン作用性ニューロンにおけるＭＰＰ^＋誘発損傷を有意に回復させた。

同様の実験では、結果を図１に示すが、ラットの主なドーパミン作用性ニューロンにおけるＭＰＰ^＋（２μＭ、２４時間）誘発ニューロン損傷を回復させる様々な濃度のスミラゲニンの効果を調べた。ＢＤＮＦ、ＧＤＮＦ、及びビークルの濃度は上述した通りである。ドーパミン作用性培養体を、スミラゲニン（０．３ｆＭ乃至３０ｎＭ）、ＢＤＮＦ（１．８５ｎＭ）とＧＤＮＦ（０．１７ｎＭ）の組み合わせ、又はビークル（ＤＭＳＯ、０．２５％）を含む媒体中で２４時間インキュベートした。次いで、ＭＰＰ^＋（２μＭ）又はビークルを媒体に加えて、培養体を更に４８時間インキュベートした。フィールドあたりのドーパミン作用性（ＴＨ−陽性）ニューロンの数を、免疫組織化学と蛍光顕微鏡によって定量化し、次いで、データを組み合わせるようにするべく自体のコントロールに正規化した。ＭＰＰ^＋に２４時間露出させた後のスミラゲニン（３ｆＭ−３０ｎＭ）を用いた４８時間の処理は、１３．４ｆＭのＥＣ_５０を用いたＭＰＰ^＋誘発ニューロン損傷を有意に回復させた。

実施例１３
サルササポゲニンとスミラゲニンの経口投与は、神経を損傷したマウスモデル（ｐｍｎマウス）における神経機能の回復を改善する
進行性の運動神経疾患（ｐｍｎ）マウスは、変性運動ニューロン障害の遺伝モデルであり、遠位軸索変性と、近位軸索と細胞体の相対保護を伴う後退性プロセスを含む（Ｓｃｈｍａｌｂｒｕｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９１，５０，ｐｐ．１９２−２０４）。ｐｍｎ／ｐｍｎホモ接合性は、運動軸索のｃａｕｄｉｏ−ｃｒａｎｉａｌ変性を患い、おそらく呼吸筋の脱神経によって生後数週間で死にいたる（Ｓｃｈｍａｌｂｒｕｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，１９９２，３５８，ｐｐ．５０２−５０４）。ｐｍｎマウスは、特別なヒト運動ニューロン疾患と同等の正しい動物モデルと考えることはできない（Ｋｅｎｎｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ，１９９６，３，ｐｐ．１３７−１４７）が、神経変性疾患の新しい薬剤候補の可能性を評価する有益なモデルに相当する。このマウスモデルは、ＡＬＳ、進行性筋委縮症、脊髄性筋委縮症、進行性球まひ、仮性球まひ、原発性側索硬化症、などの運動ニューロン変性の原因となっている病理学的機構を決定するために（Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９５，１５，ｐｐ．７７２７−７７３３）、及び、運動ニューロン障害の治療のための潜在的な治療戦略を評価するために（Ｈａａｓｅ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９９７，３，ｐｐ．４２９−４３６；Ｓｅｎｄｔｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９２，３５８，ｐｐ．５０２−５０４；Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９５，１５，ｐｐ．７７２７−７７３３；Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，１６，ｐｐ．２３３５−２３４１）既に使用されている。この実施例は、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ−Ａ−０３／０８２８９３号の実施例１１に報告されている研究の発展形である。

罹患したホモ接合性＋／＋ｐｍｎ（「ｐｍｎマウス」）マウスを、Ｎｅｕｒｏｆｉｔ（Ｉｌｌｋｉｒｃｈ，Ｆｒａｎｃｅ）に維持されているエキストラトウ遺伝子座（Ｘｔ）＋／＋ｐｍｎ二重ホモ接合性マウスの繁殖コロニーから得た。生後１０日目から、疾患の最初の症状が現れる直後まで、ｐｍｎマウスに経口強制飼養を行った。サルササポゲニン（０．０３、０．３、及び３μｇ／ｋｇ／日）を、油中懸濁液（１０ｍｌ／ｋｇ）としてｐｍｎマウスに投与した。米国電気診断医学協会のガイドラインに従って、標準形Ｎｅｕｒｏｍａｔｉｃ２０００Ｍ筋電図装置を用いて筋電図（ＥＭＢ）の記録を取った。８日目から標準行動試験（グリッド、ロータロッド、ハンギングテスト）を行って、ｐｍｎマウスの運動能力を評価した。

運動機能に関するサルササポゲニンの効果を、腓腹筋誘発運動反応の大きさを記録することによって評価した（ＣＭＡＰ、機能性運動ニューロン数の関節測定）。

この結果を図２に示す。

ｐｍｎコントロール群は、１２日令で、ＣＭＡＰの大きさの急激な減少を示した。ｐｍｎマウスへサルササポゲニン（０．３μｇ／ｋｇ／日）を毎日経口投与することが、運動機能の劣化を遅らせた（ｐ＜０．００１）。コントロールマウスのつまずきの回数は、１２日令から急激に多くなった。ｐｍｎマウスへサルササポゲニン（０．３μｇ／ｋｇ／日）を毎日経口投与することが、ｐｍｎコントロール群と比較して、ロータロッド及びグリッドテストパフォーマンスにおける劣化を有意に遅らせた（ｐ＝０．０２ 多変量分散（ＭＡＮＯＶＡ）分析）。サルササポゲニン（０．３μｇ／ｋｇ／日）の毎日の経口投与によって、ｐｍｎコントロール群に比較して、ｐｍｎマウスの生存率を有意に増やした（コントロールに比べて最大６２％、ｌｏｇ ｒａｎｋ，χ^２＝７．３６，Ｐ＝０．００６）。

反対に、臨床症状が発症した後に、最も低いテスト投与量（０．０３μｇ／ｋｇ／日）でサルササポゲニンを毎日経口投与することでは、この遺伝子モデルにおける運動ニューロン変性の進行を遅らせることはない。

これらの結果は、経口活性、非ペプチド神経栄養因子誘発体であるサルササポゲニンが、この遺伝子モデルにける運動ニューロン変性の進行を遅らせることができることを示唆している。神経栄養因子（毛様体神経栄養因子；ＣＮＴＦ；Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９５，１５，ｐｐ．７７２７−７７３３）及びＧＤＮＦ（Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，１６，ｐｐ．２３３５−２３４１）は、ｐｍｎマウスモデルで試験を行った。これらの研究は、ＣＮＴＦ（腹腔内、ＣＮＴＦ−分泌細胞の投与）が生存時間を４０％伸ばし、運動機能を改善する一方、ＧＤＮＦ派運動ニューロン生存を改善したが、疾病を遅らせることはなかったことを示した（Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，１６，ｐｐ．２３３５−２３４１）。神経栄養因子は、運動ニューロン疾患の有望な治療として考えられてきたが、タンパク質として広く知られた臨床使用は非常に問題である。非ペプチド神経栄養組成物ＳＲ５７７４６Ａ（キサリプロデン）を、ｐｍｎマウスに生後から経口投与することは、運動神経変性の進行を遅らせて、マウスの運動能力を改善し生存期間を改善した（〜５０％；Ｄｕｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９８，１２４，ｐｐ．８１１−８１７）。更に、疾病開始時点におけるＣＧＰ３４６６Ｂ（抗アポトーシス剤）の経口投与は、その疾病の進行を遅らせ、ｐｎｍマウスの生存期間を５７％改善した（Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０００，１３１，ｐｐ．７２１−７２８）；分子ＢＮ８０９３３（抑制剤ニューロン酸化窒素シンターゼ及び脂質過酸化反応）は、ｐｍｎマウスの生存期間を４０％改善した（Ｓａｇｏｔ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０００，１３１，ｐｐ．７２１−７２８）。

重要なことは、サルササポゲニンは、疾患の症状が現れた後に経口投与した場合、その疾患の進行を遅らせて、このモデルにおいてｐｍｎマウスの生存期間をインビボで最大６２％改善したことである。同様の結果がスミラゲニンでも得られた。

実施例１４
サルササポゲニンとスミラゲニンの経口投与は、神経疾患のある別のマウスモデル（神経挫滅モデル）における神経機能の回復を改善する
坐骨神経挫滅モデルは、運動ニューロン障害及び外傷後の神経損傷の良く特徴づけられた可逆モデルである（ＭｃＭａｈｏｎ ａｎｄ Ｐｒｉｅｓｔｌｅｙ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９９５，５，ｐｐ．６１６−６２４）。この神経損傷は、止血鉗子を用いて、マウスの右の坐骨神経が３つにわかれる部分近傍５ｍｍに機械的圧力を２回かけて作る。この結果、２週間に亘って神経変性が生じ、続いて神経の局所的炎症が最大４週間続く。神経機能の喪失は、機械的損傷後４−５週間に亘って徐々に回復する。

坐骨神経損傷後、Ｃ５７マウスへの６週間に亘るサルササポゲニン（３ｍｇ／ｋｇ／日、油中経口強制飼養）とスミラゲニン（０．３及び３ｍｇ／ｋｇ／日、油中経口強制飼養）の経口投与は、腓腹筋のＣＭＡＰパラメータ（振幅、待ち時間及び期間、活性運動ファイバの間接マーカ、運動神経伝導速度、及び神経繊維の機能性）と、坐骨神経の形態学的分析（変性した神経線維の比率）で測定した場合の神経機能の回復を有意に改善した。４−メチルカテコール（１０μｇ／ｋｇ／日、腹腔)を陽性コントロールとして用いた（Ｋａｅｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１９９５，２７２，ｐｐ．１３００−１３０４）。

この結果を図３に示す。

Ｃ５７ｂｌ／６ ＲＪマウスに塩酸ケタミン（６０ｍｇ／ｋｇ、腹腔）で麻酔をかけた。大腿つけねの皺と膝の中間レベルで座骨神経を外科的に露出させて、坐骨神経が３つにわかれる部分近傍５ｍｍをつぶした。この神経は、止血鉗子を用いて、それぞれの間で９０度回転させて、３０秒間２回つぶした。この結果、二週間に亘って、神経変性が生じ、次いで神経の局所的炎症が機械的損傷の後４週間続いた。神経機能の喪失は、機械的損傷後４−５週間に亘って徐々に回復した。筋電図の記録を上述したように評価した。

この結果を以下の表３１に示す。

表３１ サルササポゲニンとスミラゲニンは、神経を損傷したマウスモデルにおける変性した神経繊維の数を減らす

サルササポゲニンとスミラゲニンは、経口活性であり、神経機能の回復を改善し、座骨神経損傷モデルにおける神経再生を刺激する。

実施例１５
サルササポゲニンとスミラゲニンは、老化した動物の不安を低減し、認知能力とＢＤＮＦの減少を回復する
老齢のＳＤラット（２０月令）に３ヶ月間サルササポゲニン又はスミラゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日）を経口投与した。若いＳＤラット（４月令）を健康な陽性コントロールとして用い、老齢のＳＤラット（２０月令）を神経変性コントロールとして用いた。Ｙ字迷路を用いて、学習と記憶を評価し、動物を疲れさせるテストの特徴を考慮して不安モデルとした。Ｙ字迷路の各アームの床は、銅性ロッドでできたアレイであり（２ｍｍ×１４０ｍｍ）、これに調整可能な電圧で、必要に応じて電流を流した。各アームは４５０ｍｍの長さであり、端部に１５ワットのランプが付いている。２カ月の処置の後、各ラットを、１日１回、連続７日間訓練した。各訓練期間中、ラットをＹ字迷路の一方のアームにおいて、２分後に反時計回り方向のアームの銅製ロッドに電流を流し、時計回り方向のアームのランプを点灯させ、電流の通ってない領域を表示した。ラットがランプが点灯しているアームへ行った場合に、正しい反応を記録して、そうでない場合は誤った反応を記録した。この刺激−応答試験を、各試験の間に５秒の休止を入れて、一日２０回繰り返した。正しい応答数と、２０回の試験のトータル時間を記録した。トータル応答時間で割った正しい応答回数の割合を計算して学習能力の指標として用い、この割合が高いほど学習能力が良好であった。学習テストの１カ月後（３か月の処置）、Ｙ字迷路試験を再度行って、得られた割合を記憶能力の指標として用いた。処置の最後に、ラットを殺して、脳を取り出して、ＥＬＩＳＡを用いてＢＤＮＦの定量化を行った（上述の実施例３に提示されているＢＤＮＦのデータ）。

Ｙ字迷路実験の結果を以下の表３２に示す。

表３２ サルササポゲニンとスミラゲニンは、老齢ラットの認知能力（学習及び記憶）とＢＤＮＦレベルの減少を回復させる

老齢のラットに最大３カ月間経口投与したサルササポゲニンとスミラゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日）は、認知能力（学習及び記憶能力）を若いラットに見られる能力に回復させる。

実施例１６
経口投与したサルササポゲニンとスミラゲニンは、様々な身体組織に送達される
サルササポゲニンとスミラゲニンは、経口的に活性であることが示されており、齧歯動物及び非齧歯動物における経口投与後に血漿、脳、脊髄（及びその他の組織）の濃度を測定した。

この結果を以下の表３３に示す。

表３３ サルササポゲニンとスミラゲニンは、単回の経口投与後に血漿、脳、及び脊髄に分配される

経口投与したサルササポゲニンとスミラゲニンは、身体のニューロン部位及び血漿へ移動する。

実施例１７
経口投与したサルササポゲニンとスミラゲニンは、有効投与量において非毒性である
サルササポゲニンとスミラゲニンは、インビトロではナノ分子濃度で活性であるが、より低い濃度では不活性であるか、あるいはニューロンにおいて可変活性を示す。より高い濃度では、サルササポゲニンとスミラゲニンは、インビトロでより高い濃度の神経栄養因子で観察される毒性を示さない。

高い投与量で経口投与した後の長期に亘る毒性の研究をサルササポゲニン（ラットで最大２６週間、非齧歯動物で３９週間）とスミラゲニン（マウスと非齧歯｛げっし｝動物で最大５２週間）について行ったが、高レベルの神経栄養因子が到達したときに見られた毒性あるいは副作用の兆候は示さなかった。

実施例１８
スミラゲニンは、ＭＰＴＰ障害のあるマカクのパーキンソン病を低減し、被殻中のＧＤＮＦとＢＤＮＦ濃度を調整する
１９匹のカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ，３．０−４．５ｋｇ、４−６歳）を３ヶ月間実験環境と工程に慣れさせて、すべての動物の基準行動を評価した。１４匹のメスのマカクに、著しく、安定的なパーキンソン症状が発現するまで、ＭＰＴＰ（０．２ｍｇ／ｋｇ／日、皮下注射）を与えた。動物（ｎ＝７／群）をランダムに２群に振り分けて、スミラゲニン（２０ｍｇ／ｋｇ／日、経口）投与群又はビークルコントロール（ＨＰＭＣ、０．５％ｗ／ｖ、ツイーン８００．２％ｖ／ｖ含有）とした。ＭＰＴＰを与えられなかった５匹のマカクは、ビークルを投与して、コントロール群とした。

スミラゲニン又はビークルを１８週間投与した後、ＭＰＴＰ投与後にパーキンソン性障害の評価を行った。パーキンソン性障害を、この処置に正しい判断ができない神経学者によって、ＤＶＤ記録の事後分析によって評価した。研究の最後に、脳を取り出して、被殻中の非結合ＧＤＮＦとＢＤＮＦのレベルを、Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ＥＬＩＳＡ／Ａｕｓｈｏｎアッセイを用いて測定した。このように、この実験で用いたＭＰＴＰで処置したマカクは、パーキンソン病及び同様の運動−感覚神経変性症状の受け入れモデルを提供している。

この結果を以下の表３４に示す。

表３４ スミラゲニンは、ＭＰＴＰ障害マカクにおける行動を改善し、被殻のＧＤＮＦとＢＤＮＦのレベルを調整する

ＭＰＴＰ障害マカクに１８週間経口投与したスミラゲニンは、ＭＰＴＰ障害マカクのパーキンソン性レベルを有意に低減する。スミラゲニンはまた、ビークルを投与したマカクに比べて、ＭＰＴＰ障害マカクの被殻におけるＧＤＮＦとＢＤＮＦのレベルを、コントロールの障害がないマカクのものとほぼ変わらないレベルにまで、有意に低減させる。

このデータは、ＧＤＮＦとＢＤＮＦの発現に関するスミラゲニンの効果が、長期投与の下での正常化効果である、すなわち、このレベルをほぼ正常レベルに戻すことによって、ＧＤＮＦとＢＤＮＦへの過剰投与に対して動物を保護する、長期に亘る定期的な効果がある。この変化は、重要であり、マカクのパーキンソン性レベルの有意な低減に関連する。

考察
上述の実施例は、Ａ／Ｂ−ｃｉｓスピロスタンステロイド性サポゲニンである、サルササポゲニンとスミラゲニンは、インビトロ及びエクスビトロのデータで示すように、神経栄養因子誘発剤である。これらは、経口投与後にインビトロであるいはインビボで神経保護及び神経回復可能である。これらは、誘発材としての神経栄養因子の存在を必要とせず、ＮＦ強化剤ではなくむしろ、真のＮＦ誘発剤であるように見える。

神経栄養因子（例えば、ＢＤＮＦやＧＤＮＦ）の投与は、鬱病、統合失調症、パーキンソン病及びその他の疾病における疾病調整の戦略であり、この戦略は、強力な科学的論拠を有していた。しかしながら、この科学的根拠を臨床に持ち込むことが困難であるとされてきた。これは、神経栄養因子のたんぱく質特性と、外科的、ウイルスベクタによる、及び細胞ベースの遺伝子／たんぱく質送達アプローチに固有の困難性に起因する。ニューロンの栄養に関する複雑な条件が、単一因子によって達成される効果を制限しており、臨床的利益を達成するための神経栄養因子の量及び必要な期間も、現在のところわかっていない。

経口活性神経栄養因子誘発剤であるサルササポゲニンとスミラゲニンと、この出願で規定されている関連する分子は、これらの困難の多くを克服する。ここで、サルササポゲニンとスミラゲニンが、インビトロで、ピコ分子及びナノ分子濃度で活性であることを示した。これらは、インビトロでの高濃度神経栄養因子に見られる毒性を示していない。

本出願の証拠は、ここで引用されている引用例にすでに公開されている証拠と共に、例えばＢＤＮＦ及び／又はＧＤＮＦなどのＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、制限された対処できる副作用で、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタンとスピロステンステロイド性サポゲニン及びこのエステル、エーテル、ケトン及びグリコシル化型から選択された、有効量の少なくとも一の薬剤を対象に投与して達成されること、及び、神経症状、精神症状、炎症、アレルギー症状、免疫症状、腫瘍症状、及び関連する症状などのＮＦ介在障害及び症状を治療及び予防する様々な治療及び非治療方法において、新規な予期しない利点を提供すること、を示している。

上記は、限定することなく本発明の広く述べている。この分野の当業者に明らかなように、変形例や変更例は、特許請求の範囲に規定されている発明の範囲に含まれることを意図している。

Claims (22)

1. 対象における例えばＢＤＮＦ及び／又はＧＤＮＦなどの神経栄養因子（ＮＦｓ）の自己制御恒常性を、恒常性を制御した状態で、非毒性態様で対象の天然ＮＦｓを調整することによって誘発する方法において、当該方法が、前記対象に、Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタンとスピロステンステロイド性サポゲニン及びこのエステル、エーテル、ケトン及びグリコシル化型から選択された、有効量の一又はそれ以上の薬剤を投与するステップを具えることを特徴とする方法。
2. 請求項１に記載の方法において、前記ＮＦｓの自己制御恒常性の誘発が、例えばＮＧＦなどのＮＦｓの過剰誘発、過剰刺激、又は過剰増強に関連する、及び、受容体のアンタゴニスト又はアゴニスト作用に関連する、及び酵素結合作用に関連する、制限された対処可能な副作用で生じることを特徴とする方法。
3. 請求項１に記載の方法において、当該方法が、例えば：
   （ａ）例えば、痴呆症、加齢に関連した認識機能障害、アルツハイマー病、アルツハイマー型老年性認知症（ＳＤＡＴ）、レヴィー小体認知症、血管性認知症、パーキンソン病、脳炎後のパーキンソン病、脳炎後及びその他のパーキンソン病以外の理由によるパーキンソン症候群、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー（ＦＳＨ）、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー及びブルース型筋ジストロフィー（Ｂｒｕｃｅ’ｓ ｍｕｓｃｕｌａｒ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、フックスジストロフィー（Ｆｕｃｈｓ’ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、筋緊張性ジストロフィー、角膜ジストロフィー、反射性交感神経性ジストロフィー症候群（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー（ｎｅｕｒｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、重症筋無力症、ランバート・イートン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）を含む運動ニューロン疾患、乳児脊髄性筋萎縮症（ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｓｐｉｎａｌ ａｔｒｏｐｈｙ）、多発性硬化症、起立性低血圧、疼痛、神経痛、下記のような発作及び事故のような外傷性神経変性（例えば、外傷性の頭部又は脳の損傷、又は脊髄の損傷）、バトン病、コケーン症候群、ダウン症候群、大脳皮質基底核神経節変性症、多系統萎縮症、脳萎縮症、オリーブ橋小脳萎縮症、歯状核赤核萎縮症（ｄｅｎｔａｔｏｒｕｂｒａｌ ａｔｒｏｐｈｙ）、淡蒼球ルイ体萎縮症（ｐａｌｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ ａｔｒｏｐｈｙ）、球脊髄性萎縮症（ｓｐｉｎｏｂｕｌｂａｒ ａｔｒｏｐｈｙ）、視神経炎、硬化性全脳炎（ＳＳＰＥ）、注意欠陥障害、ポストウイルス性脳炎（ｐｏｓｔ−ｖｉｒａｌ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ）、ポリオ後症候群、ファール症候群、ジュベール症候群、ギラン・バレー症候群、無脳回症、もやもや病、神経細胞移動障害、自閉性症候群（ａｕｔｉｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ポリグルタミン病、ニーマン・ピック病、進行性多巣性白質脳症、偽脳腫瘍、レフサム病、ツェルヴェーガー症候群、核上性麻痺、フリードライヒ失調症、脊髄小脳失調症２型（ｓｐｉｎｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ａｔａｘｉａ ｔｙｐｅ ２）、レット症候群、シャイ・ドレーガー症候群、結節性硬化症、ピック病、慢性疲労症候群、遺伝性ニューロパシーを含む神経障害、糖尿病性神経障害及び有糸分裂性神経障害、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、変異型ＣＪＤ、新変異型ＣＪＤを含むプリオンベースの神経変性、牛海綿状脳症（狂牛病）（ＢＳＥ）、ＧＳＳ、ＦＦＩ、クールー病及びアルパーズ症候群、ジョセフ病、急性散在性脳脊髄炎、くも膜炎、中枢神経系の血管障害、四肢神経機能の喪失、シャルコー・マリー・トゥース病、クラッベ病、白質萎縮症、心不全への罹患性、喘息、てんかん、聴覚神経変性（ａｕｄｉｔｏｒｙ ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、黄斑変性症、色素性網膜症（ｐｉｇｍｅｎｔａｒｙ ｒｅｔｉｎｉｔｉｓ）、及び緑内障に起因する視神経変性から選択される、神経性疾患の治療又は予防；
   （ｂ）例えば、不安障害（例えば、急性ストレス障害、パニック障害、広場恐怖症、社会恐怖症、特定恐怖症、強迫性障害、心的外傷後ストレス障害、身体醜形障害及び全般性不安障害）、性的不安障害（例えば、膣痙、男性の勃起不全、男性のオルガズム障害、女性のオルガズム障害）、小児期障害（例えば、注意欠陥・多動性障害（ＡＤＨＤ）、アスペルガー症候群、自閉性障害、行為障害、反抗的行為障害、分離不安障害及びトゥレット障害）、摂食障害（例えば、拒食症及び過食症）、気分障害（例えば、鬱病、大鬱病性障害、双極性障害（躁鬱病）、季節性情動障害（ＳＡＤ）、気分循環性障害及び気分変調性障害）、睡眠障害、認知精神障害（ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）（例えば、せん妄、健忘障害）、人格障害（例えば、妄想性人格障害、分裂病質人格障害、統合失調症性人格障害、反社会的人格障害、境界性型人格障害、演技性人格障害、自己愛性人格障害、回避性人格障害、依存性人格障害及び強迫性人格障害）、精神病性障害（例えば、統合失調症、妄想性障害、短期的精神障害（ｂｒｉｅｆ ｐｓｙｃｈｏｔｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、統合失調症様障害、分裂情動性障害及び共有精神病性障害）、及び物質関連障害（例えば、アルコール依存症、覚醒剤依存症、大麻依存症、コカイン依存症、幻覚剤依存症、吸入依存症、ニコチン依存症、オピオイド依存症、フェンシクリジン依存症及び鎮静剤依存症）から選択される、精神疾患の治療又は予防；
   （ｃ）例えば、咳、掻痒症、食物不耐性、乾癬、クループ、過敏性腸症候群、耳鳴り、メニエール病、ストレスによる潰瘍又はアセチルサリチル酸による潰瘍、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、結膜炎、炎症、炎症性大腸炎、回腸炎、膵炎、胆嚢炎、非アレルギー性鼻炎、食道炎、変形性関節炎、関節リウマチ、花粉症、家ダニアレルギー、ペットアレルギー、ハンチントン病、急性炎症性痛覚、内臓痛、歯痛及び頭痛、炎症性痛覚過敏、触知性痛覚過敏、アレルギー性皮膚反応、目のアレルギー反応、喘息、アテローム性動脈硬化症、関節炎、慢性潰瘍（例えば、関節リウマチに関連する慢性の血管炎性潰瘍（ｃｈｒｏｎｉｃ ｖａｓｃｕｌｉｔｉｃ ｕｌｃｅｒ））、湿疹、正常な呼吸の維持、喉痛及び咳の軽減、正常な消化の維持の補助、胃のむかつきの緩和、鼻炎薬としての風邪及びインフルエンザからの回復の補助、頭痛の軽減、筋肉痛の緩和、軽い痛みの緩和、歯痛からの回復の提供、口内炎又は胃潰瘍からの回復の提供、及び健康な関節の維持から選択される、炎症性又はアレルギー性疾患の治療及び予防；
   （ｄ）例えば、ＡＩＤＳなどの免疫不全状態、免疫活動過剰症状、及び、例えば、全身性エリトマトーシス（ＳＬＥ）などの自己免疫疾患といった、低下した免疫特性の症状から選択される、免疫性疾患の治療及び予防；及び
   （ｅ）例えば、乳、甲状腺、大腸、肺、卵巣、皮膚、筋肉、膵臓、前立腺、腎臓、生殖器、血液、免疫システム（例えば、脾臓、胸腺及び骨髄）、脳、末梢神経系及び皮膚（例えば、メラノーマ及びカポジ肉腫）の癌から選択される、ヒト及び必要に応じて非ヒト哺乳動物における、腫瘍性疾患の治療及び予防；
   から選択された、ＮＦ介在疾患の治療又は予防方法と共に使用されることを特徴とする方法。
4. 請求項１に記載の方法において、当該方法が、ニューロン、ニューロン機能又はニューロンネットワークの回復又は再生法、ニューロンへの血流の再生又は正常化を行う方法、例えば外傷後の神経の再構築、組織移植、術後の神経の再構築など、障害を受けた組織の再生及び治癒方法、心臓発作、ＴＩＡｓあるいはその他の虚血からの回復を支援する方法、創傷、骨及び筋肉の治癒を支援する方法、神経病症状あるいはニューロンの異常を正常化する方法、あるいは、移植した細胞の生存率を上げて、生存細胞効率を改善するための胎児細胞、幹細胞、又はその他の細胞治療方法、又はこれらの組み合わせ、と共に使用されることを特徴とする方法。
5. 請求項１に記載の方法において、前記方法が異常行動あるは個体的特徴を治療又は予防する方法と共に使用されることを特徴とする方法。
6. 請求項１に記載の方法において、前記方法が創傷治癒の支援と共に使用されることを特徴とする方法。
7. 請求項１に記載の方法において、前記方法が、例えば老化、しわ、あるいは日光、風、雨、冷気又はその他のダメージを与える媒体に露出させる効果から皮膚の回復を促進する、といった皮膚、骨、眼、筋肉及びその他の組織の健康を改善する非治療的方法と共に、あるいは、運動、労働あるいは消耗からの筋肉と組織の回復を含み、持久力を改善し、疲労感を低減する、健康で良好な状態に関するその他の態様を提供する非治療的使用と共に、使用されることを特徴とする方法。
8. 請求項１に記載の方法において、当該方法が、人口の正常範囲内にあり、診断可能でない疾患である、神経症状及び精神症状の治療及び予防のための非治療的方法と共に使用されることを特徴とする方法。
9. 請求項１乃至８のいずれか１項に記載の方法において、前記方法が、天然にＢＤＮＦ又はＧＤＮＦを過剰発現している、あるいは、ＮＦ様あるいは刺激の精神的副作用にかかりやすい、又は、受容体アンタゴニスト、受容体アゴニスト又は酵素相互作用薬剤の受容体介在又は酵素介在副作用にかかりやすい個体である、ヒト又は動物に使用されることを特徴とする方法。
10. 請求項１乃至９のいずれか１項に記載の方法において、前記活性薬剤が外部から投与された神経栄養因子を伴うことなく使用されることを特徴とする方法。
11. 請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の方法において、前記方法が、対象への投与プロトコルの臨床制御を伴わない状況で使用されることを特徴とする方法。
12. 請求項１乃至１１のいずれか１項に記載の方法において、前記活性薬剤が、サルササポゲニン、スミラゲニン、エピサルササポゲニン、エピスミラゲニン、チモサポニンＢＩＩ、メタゲニン、サモゲニン、ジオチゲニン、イソジオチゲニン、テクソゲニン、ヨノゲニン、メクソゲニン、及びマルコゲニン、及びこれらの対応するエステル、エーテル、ケトン、及びサポニン（グリコシル化）誘導体から選択されることを特徴とする方法。
13. 請求項１乃至１２のいずれか１項に記載の方法において、前記活性薬剤が、サルササポゲニン、スミラゲニン、及びこれらの対応するエステル、エーテル、ケトン、及びサポニン（グリコシル化）誘導体から選択されることを特徴とする方法。
14. 請求項１乃至１３のいずれか１項に記載の方法において、前記一又はそれ以上の活性薬剤が、代謝アジュバント、ケトンの本体レベルを上げる化合物（ケト原生化合物）、トリカルボキシル酸（ＴＣＡ）サイクル中間体、インビボでＴＣＡ中間体に変換可能な化合物、エネルギィ強化化合物、及びこれらの混合物から選択された一又はそれ以上の補助薬剤と共に使用されることを特徴とする方法。
15. 請求項１乃至１４のいずれか１項に記載の方法において、前記一又はそれ以上の活性薬剤が、当該活性薬剤と、例えば医薬組成物（薬剤）、フードスタッフ、フードサプリメント、又は飲料（例えば、炭酸入り飲料）、又は、化粧品、眼又は皮膚（皮膚科）組成物などの局所組成物といった、適宜の好適な追加成分を含む組成物において投与されることを特徴とする方法。
16. 請求項１３に記載の方法において、前記一又はそれ以上の活性薬剤が、一又はそれ以上の可溶化剤及び／又は懸濁化剤及び／又は分散化剤を伴う組成物中に存在しており、前記活性薬剤が前記組成物中の、例えば、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴｓ）又は中鎖脂肪酸（ＭＣＦＡｓ）などの、溶液、又は、懸濁液、又は分散液中に維持されていることを特徴とする方法。
17. Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン及びスピロステンステロイド性サポゲニン及びそのエステル、エーテル、ケトン及びグリコシル化型から選択され、恒常性を制御した状態で非毒性態様の対象の天然ＮＦｓを調整し、一又はそれ以上の前記薬剤の有効量を対象に投与することによって、対象のＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する方法に使用する薬剤。
18. 請求項２乃至１６のいずれか１項に記載の方法に使用する、請求項１７に記載の薬剤。
19. Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン及びスピロステンステロイド性サポゲニン及びそのエステル、エーテル、ケトン及びグリコシル化型から選択された一又はそれ以上の活性薬剤を含み、恒常性を制御した状態で非毒性態様の対象の天然ＮＦｓを調整し、一又はそれ以上の前記薬剤の有効量を対象に投与することによって、対象のＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する方法に使用する組成物。
20. 請求項２乃至１６のいずれか１項に記載の方法に使用する、請求項１５に記載の組成物。
21. Ａ／Ｂ−ｃｉｓフロスタン、フロステン、スピロスタン及びスピロステンステロイド性サポゲニン及びそのエステル、エーテル、ケトン及びグリコシル化型から選択された一又はそれ以上の薬剤の、恒常性を制御した状態で非毒性態様の対象の天然ＮＦｓを調整することによって、対象におけるＮＦｓの自己制御恒常性を誘発する薬物の製造における使用。
22. 請求項２１に記載の使用において、前記薬物が請求項２乃至１６のいずれか１項に記載の方法に使用されることを特徴とする使用。

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