JP2012514633A - 非経口用医薬組成物及びその非経口用医薬組成物の製造方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体とトロメタミンとを含む安定な非経口用医薬組成物に関する。

Description

本発明は、Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸とトロメタミンとを含む新規非経口用医薬組成物に関する。凍結乾燥形態のかかる組成物は、室温にて安定であり、再構成すると、少なくとも１２時間にわたり安定な水溶液を生ずる。

ボルテゾミブは、Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸である。

固形のボルテゾミブは、０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウム液中で、１ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解しない。これは、ベルケイド（Ｖｅｌｃａｄｅ）注射用（登録商標）の商品名で市販されている。これは静脈内投与のみとされ、ボルテゾミブのマンニトールエステルを含有する。これは、凍結乾燥形態で入手可能であり、これを再構成すると、ボルテゾミブと平衡状態にあるマンニトールエステルからなる溶液が生成される。ベルケイド（Ｖｅｌｃａｄｅ）（登録商標）は、０．９％塩化ナトリウムを用いて１ｍｇ／ｍＬのボルテゾミブ最終濃度になるように再構成される。マンニトールを使用することにより、所望の溶解性が得られるようになる。処方情報（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、Ｔｈｏｍｓｏｎ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅより刊行、第６２版、２００８年、ｐｐ．２１５１−２１５７）には、再構成品は無色透明でなければならず、粒状物質及び変色について目視すべきであり、変色のない透明な溶液のみ、調製後８時間以内に使用すべきであると記載されている。この指針は、薬物を直接静脈系に投与する際に求められる細心の注意事項を考慮している。粒子形成は望ましくなく、調製は、高純度という要件を満たすべきである。

米国特許第６，７１３，４４６号明細書には、ＨＰＬＣ分析により測定した場合、−２℃から−２０℃で保管すると、ボルテゾミブが２年を超えて安定である（純度＞９７％）ことが知られている、と記載されている。しかし、２℃から８℃で保存した場合、この製品は３−６ヶ月を過ぎると安定ではなくなる。米国特許第６，７１３，４４６号明細書（本明細書中で以後‘４４６と呼ぶ。）は、ボルテゾミブを含む安定で医薬的に許容可能な組成物を提供する。この特許の請求項の範囲は、市販のベルケイド（Ｖｅｌｃａｄｅ）注射用（登録商標）を包含する。‘４４６特許の発明者らは、ボロン酸化合物及び少なくとも２つのヒドロキシル基を有する化合物を含む混合物水溶液の凍結乾燥によって安定な組成物がもたらされることを発見した。凍結乾燥物は最高で６ｍｇ／ｍＬの濃度で容易に溶解した。

米国特許第６，６１７，３１７号明細書（本明細書中で以後特許‘３１７と呼ぶ。）は、ある種のボロン酸エステル及び酸化合物と動物の細胞を接触させることを含む、動物においてタンパク質分解速度を低下させるための方法を開示する。また、新規ボロン酸エステル及び酸化合物、それらの合成及び使用も開示する。この特許は、さらに、この発明のボロン酸（Ｚ¹及びＺ²は両者ともＯＨ）の溶液を医薬的に許容可能な無毒性の塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウムなど）又はアミノ化合物（例えば、コリンヒドロキシド、トリス、ビス−トリス、Ｎ−メチルグルカミン又はアルギニンなど）の溶液と混合することによって、新規ボロン酸エステル及び酸化合物をそれらの塩基性塩に変換することができることを開示する。水溶性の塩が好ましい。列挙される適切な塩には、アルカリ金属塩（ナトリウム、カリウムなど）、アルカリ土類金属塩（マグネシウム、カルシウムなど）、アンモニウム塩及び医薬的に許容可能なアミンの塩（テトラメチルアンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、フェネチルアミン、ピペリジンモノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミン、リジン、アルギニン及びＮ−メチル−Ｄ−グルカミン）が含まれる。

Ｓａｒａ Ｗｕら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ ８９；７５８−７６５、２０００、ｐｐ．７５９−７６５において、ボルテゾミブの非経口用製剤の化学的安定性及び安定性に関する問題が報告されている。この参考文献は、ボルテゾミブがある種の溶媒中で不規則な挙動を示し非常に不安定であったことを示している。この著者はまた、その安定性におけるアスコルビン酸及びＥＤＴＡの影響に関するいくつかの所見も報告した。酸性及び塩基性条件下で、不純物Ｄ（酸化力のある不純物）が主要な分解生成物であることが観察された。この論文は、ボルテゾミブの分解及びプレフォーミュレーション研究が非常に複雑であることが分かったことに言及している。

ボルテゾミブの安定な非経口用組成物を調製する試みにおいて、本発明の発明者らは、様々な可溶化剤を用いて溶液を調製した。ある一定の可溶化剤を用いて、１ｍｇボルテゾミブ／ｍＬの濃度で透明な溶液が得られた。透明な溶液は得られたが、このような溶液中で粒子の急激な生成が観察された。発明者らが粒子形成の防止に成功した例において、溶液を凍結乾燥した場合、即時使用できる透明な水溶液になるように凍結乾燥製剤を再構成することが困難であることが分かった。本発明の発明者らは、驚くべきことに、ｐＨを６．８から８．４の範囲に調整してボルテゾミブ及びトロメタミンを含む組成物を調製することによって、これらの問題が解決されることを発見した。発明者らはまた、乾燥形態ならびに再構成形態の医薬組成物の不安定性の問題がボルテゾミブの原末中に存在する不純物レベルに関係することも確認した。例えば、注射用組成物を調製するために総不純物レベルが約３％であるボルテゾミブの原末を使用した場合、ｐＨを７．６−８．４に調整すると、組成物は所望の期間にわたり安定であり続け、一方、総不純物レベルが０．５１％未満であるボルテゾミブの原末を使用した場合、この組成物のｐＨを約６．８−８．２に調整すると、組成物は所望の期間にわたり安定であり続けた。

本発明は、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体と、トロメタミンと、を含む安定な非経口用医薬組成物を提供する。

本発明はまた、
（ａ）（ｉ）Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体と、
（ｉｉ）トロメタミン及び場合によっては増量剤と、
を含む混合物水溶液を調製し、
（ｂ）その溶液のｐＨを約６．８から８．２のｐＨに調製し、
（ｃ）（ｂ）の溶液を凍結乾燥する、
工程を含む、Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体の治療的有効量を処方するための方法も提供する。

本発明は、特に、ｐＨが６．８から８．４、好ましくは７．０から８．２の範囲である、治療的有効量のボルテゾミブ又はその塩又はその誘導体とトロメタミンとを含む医薬組成物を提供する。

本発明はまたさらに、ｐＨが６．８から８．４、好ましくは７．０から８．２の範囲である、治療的有効量のボルテゾミブとトロメタミンとを含む凍結乾燥医薬組成物を提供する。

本発明の実施例１及び実施例２による凍結乾燥組成物のＩＲスペクトルを記録し、それぞれ図１及び図２に示す。

「凍結乾燥組成物」という用語は、本明細書中で使用される場合、混合物水溶液の凍結乾燥すわなちフリーズドライにより得られる任意の固形物を指す。これは、凍結乾燥塊とも呼ばれ得る。

「安定な組成物」とは、医薬品として有用となるのに十分な安定性を有する任意の組成物を意味する。好ましくは、本製剤は、好都合な温度、好ましくは０℃から４０℃の間で、妥当な期間にわたり、好ましくは１ヵ月を超えて、より好ましくは３ヶ月を超えて、さらにより好ましくは６ヶ月を超えて、最も好ましくは１年を超えて保管可能とするのに十分な安定性を有する。また、「安定な組成物」という用語は、本明細書中で使用される場合、医薬組成物が、凍結乾燥ケーキ又粉末の形態である（即ち本組成物が再構成されていない。）とき、様々な保管条件下で、遮光性又は非遮光性の何れかの容器中に収納された場合に、長期間にわたり物理学的及び化学的パラメーターに関して不変であり続けることを意味する。例えばバイアルなどの容器を開封せずに約１５から３０℃（５９°Ｆから８６°Ｆ）の範囲での変動がある制御室温２５℃（７７°Ｆ）で保管した場合、本発明の医薬組成物は６ヶ月間にわたり安定であり続ける。本医薬組成物を注射用水などの適切な再構成溶媒で再構成した場合、再構成溶液は、少なくとも１２時間、好ましくは２４時間にわたり顕著な化学的分解がなく、この期間にわたり室温で保管した際に透明な溶液中で沈殿又は粒子出現の兆候がない場合、安定であると言われる。

本発明のある実施形態において、再構成した際に非経口用医薬組成物は少なくとも１２時間、好ましくは２４時間にわたり安定でした状態を保ち、透明溶液中の総不純物は、４０℃及び７５％相対湿度で保管した場合、１ヵ月で０．６８未満であることが分かる。

好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物には保存剤は全く添加されない。驚くべきことに、本組成物が乾燥形態又は再構成後の何れであっても、保存剤不含であるにもかかわらず、本組成物は長時間にわたり安定であり続け、即ち、乾燥形態である場合、本組成物は周囲温度で６ヶ月間にわたり安定であるか又は適切な再構成溶媒で再構成された場合、少なくとも２４時間、好ましくは１２時間安定であることが分かった。投与期間中、再構成組成物が物理学的及び化学的に安定した状態を保つことは非常に重要である。通常、この再構成組成物は、静脈内又は経口投与の何れかによりその他の活性成分とともに患者に投与され得る。一般に、本発明の再構成組成物はボーラス静脈内注射として投与される。時に、非経口組成物の投与中、全血球計算値（ＣＢＣ）を監視することが求められ得る。本発明は、ｐＨが６．８から８．４、好ましくは７．０から８．２の範囲である、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体とトロメタミンとを含む安定な医薬組成物を提供する。

本発明は、ｐＨが６．８から８．４、好ましくは７．０から８．２の範囲である、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体とトロメタミンとを含む凍結乾燥医薬組成物を提供する。

本発明はまた、ｐＨが７．６から８．４、好ましくは７．９から８．１の範囲である、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体とトロメタミンとを含む医薬組成物も提供する。

ある実施形態において、本発明は、ｐＨが７．６から８．４、好ましくは７．９から８．１の範囲である、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体とトロメタミンとを含む凍結乾燥医薬組成物を提供する。

発明者らは、さらに、安定性の問題及びこの問題に対する解決法が、本発明の非経口用医薬組成物の調製において使用されるボルテゾミブの供給源と関連することを確認した。例えば、注射用組成物を調製するためにボルテゾミブのある１つの供給源を使用した場合、組成物のｐＨを７．６−８．４に調整すると、その組成物は所望の期間にわたり安定であり続け、一方で、ボルテゾミブの原末の別の供給源を使用し、組成物のｐＨを約６．８−８．２のｐＨに調整した場合、その組成物は所望の期間にわたり安定であり続けた。従って、活性医薬成分だけでなく、その中に存在する不純物のタイプ及び量も、乾燥ならびに再構成組成物の安定性の達成に関与するようであった。

本発明で使用されるボルテゾミブ原末（ＡＰＩ）は、様々な合成法により合成することができる。ある実施形態において、発明者らは、ボルテゾミブが約−５３．４°の比旋光度を有し、残存溶媒含量が１００ｐｐｍ未満であり、総不純物が０．５１％未満であり、不純物Ｂなどの既知の同定されている不純物が約０．１％未満であり、不純物Ｈが約０．０４％未満であり、任意の単一の最大未知不純物が０．１１％未満である場合、溶液のｐＨを約７．０から約７．５の範囲に調整することによって、このようなボルテゾミブの供給源を含む注射用組成物を調製できることが分かった。しかし、これらの不純物の制限を満たしていない任意のその他のグレードのボルテゾミブを使用した場合、約７．９から約８．４の範囲にｐＨを調整することによって、安定な注射用組成物を調製できることが分かった。

不純物Ａ：キラル異性体：［（１Ｒ）−３−メチル−１−［［（２Ｓ）−１−オキソ−３−フェニル−２−［（ピラジニルカルボニル）アミノ］プロピル］アミノ］ブチル］ボロン酸

不純物Ｈ：３−フェニル−２−［（ピラジン−２−カルボミ）アミノ］−プロピオニオンアミド

不純物Ｂ：Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸

不純物Ｉ：３−フェニル−２−［（ピラジン−２−カルボミル）アミノ］−プロピオン酸

本医薬組成物は、治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体を含む。本発明の医薬組成物中のボルテゾミブの量は、約０．１ｍｇ／ｍＬから約５ｍｇ／ｍＬの範囲、好ましくは約０．５ｍｇ／ｍＬから約２ｍｇ／ｍＬ及び最も好ましくは約１ｍｇ／ｍＬである。

本医薬組成物は、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）プロパン−１，３−ジオールとして化学的に公知であるトロメタミンを含む。特に、非経口グレード又はＵＳＰ基準を満たすグレードのトロメタミンは、本医薬組成物に適切である。本発明の医薬組成物中のトロメタミンの量は、約０．１ｍｇ／ｍＬから約５ｍｇ／ｍＬの範囲、好ましくは約０．５ｍｇ／ｍＬから約２ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは約１ｍｇ／ｍＬである。１モルのボルテゾミブに対して約３モルのトロメタミンが、ボルテゾミブに対して良好な溶解度をもたらすという所見が得られた。

本発明のある実施形態において、トロメタミン及び注射用水の他に、本溶液は、本組成物のｐＨを所望の範囲に調整するために、さらに酸、例えば、塩酸などを含み得る。本溶液のｐＨを７．６から８．４の範囲に調整することが重要である。本組成物のｐＨを指定された範囲外に調整した場合、粒子が出現し（ボルテゾミブの沈殿を意味する）及び／又は凍結乾燥ケーキの再構成が困難となることが分かった。６．８から８．２の範囲、好ましくは７．０から８．１の範囲に本組成物のｐＨを調整した場合、凍結乾燥ケーキが迅速かつ完全に再構成されることが分かった。本発明の実施例１及び実施例２による凍結乾燥組成物のＩＲスペクトルを記録し、図１及び図２に示す。本組成物のＩＲ分光法から、強いＢ−Ｎ結合が示され、このことから、ボルテゾミブのトロメタミン塩の形成が示される。特定の理論に縛られることを望むものではないが、塩形成の遂行は、凍結乾燥ケーキをより迅速に再構成するために重要であり得ると言える。好ましい医薬組成物は約３０秒で容易に再構成され得る。「容易に」とは、超音波処理などの任意の外部エネルギーを使用しないことを意味する。ケーキ又は粉塊を再構成するために本組成物が保管される容器を単純に回転させるか又は動かすこともまた、容易に再構成するためのものである。

さらに、本組成物は、等張化剤、増量剤など及びそれらの混合物を含み得る。等張化剤の例としては、塩化ナトリウム、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、トレハロースなど及びそれらの混合物が挙げられるがこれらに限定されるものではない。ある実施形態において、等張化剤及び／又は増量剤として塩化ナトリウムが使用される。本発明の医薬組成物中で使用され得る塩化ナトリウムの量としては、０ｍｇから約１００ｍｇ／ｍＬの溶液、好ましくは約１５ｍｇから４５ｍｇの溶液が挙げられるがこれらに限定されるものではない。糖、糖アルコールなどの任意の他の適切な等張化剤を使用することもできる。

ある実施形態において、本発明は、ｐＨが７．６から８．４、好ましくは７．９から８．１の範囲である、治療的有効量のボルテゾミブ（使用されるボルテゾミブの供給源は約２．５％の総不純物を含む。）とトロメタミンとを含む凍結乾燥医薬組成物を提供する。

別の実施形態において、本発明は、ｐＨが６．８から８．４、好ましくは７．０から８．１の範囲である、治療的有効量のボルテゾミブ（使用されるボルテゾミブの供給源は約０．５％の総不純物を含む。）とトロメタミンとを含む凍結乾燥医薬組成物を提供する。

ある実施形態において、本発明の組成物が凍結乾燥形態である場合、本組成物中に増量剤を添加することができる。本明細書中で使用される場合、「増量剤」という用語は、凍結乾燥品の体積を大きくするために及び／又は凍結乾燥中のその製剤の特性の調節を促進するために使用される化合物を意味するものとする。使用され得る増量剤の例としては、デキストラン、トレハロース、スクロース、ポリビニルピロリドン、塩化ナトリウム、ラクトース、イノシトール、ソルビトール、アルブミン、ラクトビオン酸カルシウム及び当業者にとって公知のその他のものが挙げられるがこれらに限定されるものではない。

本医薬組成物が凍結乾燥品の形態である場合、本組成物は、等張化剤以外に、増量剤、氷晶防止剤を含み得る。使用される「氷晶防止剤」という用語は、凍結乾燥中に物理学的又は化学的分解から活性治療薬を保護するために使用される化合物を意味するものとする。使用され得る氷晶防止剤の例としては、炭水化物、例えば単糖類、二糖類及び糖アルコールなどが挙げられるがこれらに限定されるものではない。使用し得る炭水化物の例としては、マンニトール、スクロース及び当業者にとって公知のその他のものが挙げられるがこれらに限定されるものではない。

本発明の医薬組成物は、必要量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸及びトロメタミンを単純に混合し、撹拌を継続しながら注射用水を添加することによって調製することができる。透明な溶液を生成させるために、この溶液を４５℃から５０℃で温めてよい。次に、この溶液を０．２から０．８ミクロンシリンジフィルター、好ましくは０．４５ミクロンフィルターを通じてろ過することができ、次いでｐＨを測定する。この透明な溶液のｐＨを、７．６から８．４の範囲、好ましくは７．９から８．１の範囲に塩酸でさらに調整する。ある実施形態によると、ｐＨ調整済みの透明な溶液を凍結乾燥又はフリーズドライ処理に供することができる。

一般に、凍結乾燥は２つの工程、即ち、真空を適用しない熱処理工程及び真空を適用する実際の第一の乾燥工程、を含む。凍結乾燥に供する溶液を専用のストッパー付きのバイアルに満たす。乾燥させようとする溶液を満たしたバイアルを凍結乾燥器に入れる。熱処理工程で、溶液を満たしたバイアルを入れた凍結乾燥器の棚温度を２０℃から−４０℃に徐々に低下させる。次に凍結させた溶液を乾燥段階に供する。例えば、この例において、約１００から２００ｍＴｏｒｒの真空下にて、約５から６時間の時間周期で温度を−４０℃から−１５℃に設定する。この時間及び温度で氷を乾燥させる。次に、約５０ｍＴｏｒｒの真空下にて、材料の温度を＋１０℃から約＋２５℃に上昇させる（残存溶媒があれば除去）。次いで、バイアル中の凍結乾燥組成物又は一般に凍結乾燥ケーキと呼ばれるものを上記工程において再構成に供し得る。

本発明の医薬組成物の凍結乾燥ケーキの再構成は、水浴−超音波処理を全く必要とせず、要する時間は９０秒未満であることが分かった。また、再構成溶液は、少なくとも１２時間にわたり粒子形成に関しての観点では安定であり、即ち粒子が観察されず、また化学的にも安定であることが分かった。

本発明の精神から逸脱することなく多くの変更をなし得ることは、当業者により理解されよう。従って、次の実施例は単なる例示であり、本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではないことを明確に理解されたい。

［比較実施例Ｘ］
実質的な残留溶媒量があり、総不純物が約２．７５％であるボルテゾミブ（３．５ｍｇ）を使用した。ボルテゾミブの原末を正確に秤量し、５ｍＬバイアルに入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水（１ｍＬにするために十分な量）を添加した。溶液を４５℃から５０℃で温め、透明溶液を生成させた。この溶液を冷却し、塩化ナトリウム３０ｍｇを冷却溶液に添加した。０．４５ミクロンシリンジフィルターを通じてこの溶液をろ過し、ｐＨを測定した。透明溶液のｐＨが８．５１であることが分かった。この透明溶液を凍結乾燥させた。この固体塊を再構成に供した場合、再構成に要する時間は１２０秒を超えることが分かった。凍結乾燥ケーキを砕き、溶液を得るために、水浴超音波処理が必要であった。再構成後、この溶液が２４時間にわたり粒子形成に関して安定であることが分かった。

［比較実施例ＸＩ］
この組成物中では、総不純物が約２．７５％であるボルテゾミブ（３．５ｍｇ）を使用した。ボルテゾミブの原末を正確に秤量し、５ｍＬバイアルに入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水（１ｍＬにするために十分な量）を添加した。溶液を４５℃から５０℃で温め、透明溶液を生成させた。この溶液を冷却し、塩化ナトリウム３０ｍｇを冷却溶液に添加した。０．４５ミクロンシリンジフィルターを通じてこの溶液をろ過し、ｐＨを測定した。透明溶液のｐＨは８．６３であり、これを１％塩酸で７．２８に調整した。この透明溶液を凍結乾燥させた。凍結乾燥ケーキの再構成に要した時間は１２０秒を超えた。再構成後、この溶液は２４時間にわたり粒子形成に関して不安定であることが分かった（即ち粒子が観察された。）。

［比較実施例Ｘ］
総不純物が約２．７５％であるボルテゾミブ（３．５ｍｇ）を使用して本組成物を処方した。ボルテゾミブを正確に秤量し、５ｍＬバイアルに入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水（１ｍＬにするために十分な量）を添加した。溶液を４５℃から５０℃で温め、透明溶液を生成させた。０．４５ミクロンシリンジフィルターを通じてこの溶液をろ過し、ｐＨを測定した。透明溶液のｐＨは８．６３であり、これを１％塩酸で７．５にさらに調整した。この透明溶液を凍結乾燥させた。凍結乾燥ケーキの再構成に要した時間は１２０秒を超えた。再構成後、この溶液は２４時間にわたり粒子形成に関して不安定であることが分かった（即ち粒子が観察された。）。

［実施例Ｉ］
総不純物が約２．７５％である、３．５ｍｇのボルテゾミブを取った。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水（１ｍＬにするために十分な量）を添加した。溶液を４５℃から５０℃で温め、透明溶液を生成させた。この溶液を冷却し、塩化ナトリウム３０ｍｇをその冷却溶液に添加した。０．４５ミクロンシリンジフィルターを通じてこの溶液をろ過し、ｐＨを測定した。透明溶液のｐＨは８．６８であり、これを５％塩酸で８．０１に調整した。この透明溶液を凍結乾燥させた。凍結乾燥ケーキの再構成は、水浴超音波処理を必要とせず、要した時間は３０秒未満であった。再構成後、この溶液が２４時間にわたり粒子形成に関して安定であることが分かった（即ち粒子が観察されなかった。）。凍結乾燥組成物のＩＲスペクトルを記録した。このＩＲスペクトルを図１に示す。公式のＩＲ分光度から、強いＢ−Ｎ結合を有するトロメタミン塩の形成が示される。

［実施例ＩＩ］
総不純物が約２．７５％である、３．５ｍｇのボルテゾミブを取った。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し（総不純物は０．５１％未満、旋光度は−５３．４°）、不純物Ａを正確に秤量し、５ｍＬバイアルに入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水（１ｍＬにするために十分な量）を添加した。溶液を４５℃から５０℃で温め、透明溶液を生成させた。この溶液を冷却し、塩化ナトリウム３０ｍｇを冷却溶液に添加した。０．４５ミクロンシリンジフィルターを通じてこの溶液をろ過し、ｐＨを測定した。透明溶液のｐＨは８．６８であり、これを５％塩酸で８．０１に調整した。この透明溶液を凍結乾燥させた。凍結乾燥ケーキの再構成は、水浴超音波処理を必要とせず、再構成に要した時間は３０秒未満であった。再構成後、この溶液が２４時間にわたり粒子形成に関して安定であることが分かった（即ち粒子が観察されなかった。）。凍結乾燥組成物のＩＲスペクトルを記録した。このＩＲスペクトルを図１に示す。公式のＩＲ分光度から、強いＢ−Ｎ結合を有するトロメタミン塩の形成が示される。

［実施例ＩＩＩ］
約２．７５％の総不純物を有する、３．５ｍｇのボルテゾミブを取った。ボルテゾミブ（３．５ｍｇ）を正確に秤量し、５ｍＬバイアルに入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水（１ｍＬにするために十分な量）を添加した。溶液を４５℃から５０℃で温め、透明溶液を生成させた。０．４５ミクロンシリンジフィルターを通じてこの溶液をろ過し、ｐＨを測定した。透明溶液のｐＨは８．７５であり、これを５％塩酸で７．８９に調整した。この透明溶液を凍結乾燥させた。凍結乾燥ケーキの再構成は、水浴超音波処理を必要とせず、再構成に要した時間は３０秒未満であった。再構成後、この溶液が２４時間にわたり粒子形成に関して安定であることが分かった（即ち粒子が観察されなかった。）。凍結乾燥組成物のＩＲスペクトルを記録した。このＩＲスペクトルを図２に示す。公式のＩＲ分光度から、強いＢ−Ｎ結合を有するトロメタミン塩の形成が示される。

［実施例ＩＶ］
総不純物約０．５１％、単一の最大未知不純物約０．１１％、比旋光度約−５３．４°、残存溶媒量１００ｐｐｍ未満であるボルテゾミブ３．５ｍｇを５ｍＬバイアル中に入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水を添加した。混合物を３５℃から４０℃で温めた。この混合物を撹拌し、透明溶液が得られるまで水浴超音波処理に供した。正確に秤量した塩化ナトリウム量（３０ｍｇ）をこのバイアル中に添加し、溶液中で溶解させた。透明溶液のｐＨを５％塩酸で８．０に調整した。体積を補い、次いで、０．２から０．８ミクロンシリンジフィルターを通じて溶液をろ過した。この透明溶液をバイアル中で凍結乾燥した。この凍結乾燥ケーキを様々な安定条件でバイアル中にて保管し、化学的及び物理学的安定性に供した。安定性の結果を下記表に示す。

［実施例Ｖ］
総不純物約０．５１％、単一の最大未知不純物約０．１１％、比旋光度約−５３．４°、残存溶媒量１００ｐｐｍ未満であるボルテゾミブ３．５ｍｇを５ｍＬバイアル中に入れた。トロメタミン（３．３１ｍｇ）を秤量し、このバイアル中で混合した。撹拌を継続しながら注射用水を添加した。混合物を３５℃から４０℃で温めた。この混合物を撹拌し、透明溶液が得られるまで水浴超音波処理に供した。正確に秤量した塩化ナトリウム量（３０ｍｇ）をこのバイアル中に添加し、この溶液中で溶解させた。透明溶液のｐＨを５％塩酸で７．０に調整した。体積を補い、次いで、０．２から０．８ミクロンシリンジフィルターを通じて溶液をろ過した。バイアル中でこの透明溶液を凍結乾燥させた。様々な安定性条件で凍結乾燥ケーキをバイアル中にて保管し、化学的及び物理学的安定性に供した。安定性の結果を下記表に示す。

３．５ｍＬの注射用水でバイアル中の凍結乾燥ケーキを再構成した。この再構成は迅速であり、再構成に要した時間は９０秒未満であった。最終的な再構成溶液は透明であった。この再構成溶液を４８時間、２℃から８℃で保管した。この再構成溶液を２０℃から２５℃の保管温度にも供した。関連物質、即ち未知の不純物及び総不純物ならびにボルテゾミブ含量について保管溶液を分析した。

アッセイを行い、ＨＰＬＣによって不純物を調べた。この溶液は４８時間にわたり安定であることが分かった。

Claims (11)

1. 治療的有効量のＮ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸又はその塩又はその誘導体と、トロメタミンとを含み、安定である非経口用医薬組成物。
2. 請求項１に記載の非経口用医薬組成物において、ｐＨが６．８から８．２の範囲に調整されている非経口用医薬組成物。
3. 請求項２に記載の非経口用医薬組成物において、ｐＨが約７．０のｐＨに調整されている非経口用医薬組成物。
4. 請求項３に記載の非経口用医薬組成物において、乾燥形態である場合に、４０℃及び７５％の相対湿度で１ヵ月間保管した時点で０．６８未満の総不純物を示し、再構成されると、溶液形態で少なくとも１２時間安定である非経口用医薬組成物。
5. 請求項２に記載の非経口用医薬組成物において、乾燥形態である非経口用医薬組成物。
6. 請求項５記載の非経口用医薬組成物において、凍結乾燥形態であり、周囲条件で６ヶ月にわたり安定した状態を保つ非経口用医薬組成物。
7. 請求項１に記載の非経口用組成物において、Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸とトロメタミンとのモル比が約１：３である非経口用組成物。
8. 請求項１に記載の非経口用組成物において、塩化カリウム、塩化ナトリウム、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、トレハロース及びそれらの混合物からなる群から選択される増量剤を含む非経口用組成物。
9. （ａ）（ｉ）Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸と、
   （ｉｉ）トロメタミン及び場合によって選択される増量剤と、
   を含む混合物水溶液を調製することと、
   （ｂ）約６．８から８．２のｐＨに該溶液のｐＨを調整することと、
   （ｃ）（ｂ）の溶液を凍結乾燥することと、
   を含む、Ｎ−（２−ピラジン）カルボニル−Ｌ−フェニルアラニン−Ｌ−ロイシンボロン酸を処方するための方法。
10. 請求項９に記載の方法において、前記混合物水溶液が、水混和性共溶媒をさらに含む方法。
11. 請求項１０に記載の方法において、酸の添加によって前記ｐＨが約６．９から７．２の範囲に調整される方法。

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