JP2012207036A - 血管内皮増殖因子に対する抗体と、2型ヒト上皮成長因子受容体に対する抗体を用いた腫瘍治療 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、抗HER2抗体を含んで成る医薬組成物であって、有効な量の抗HER2抗体及び抗VEGF抗体が前記患者に投与される、医薬組成物を提供する。
【選択図】図1
Description
本発明は、抗VEGF抗体を用いた事前の治療に失敗した患者の乳癌疾患を治療するための医薬品の製造のための抗HER2抗体及び抗VEGF抗体の使用であって、治療上有効な量の抗HER2抗体及び抗VEGF抗体を前記患者に投与することを含めた前記使用を含む。
本発明による用語「VEGF」は、血管内皮細胞増殖因子(Swiss-Prot番号P15692)、その選択的スプライシング型(例えば、Leung, D. W., et al., Science, 246(1989)1306-1309;及びHouck, K. A., et al., Mol. Endocrin. 5(1991)1806-1814を参照のこと)、及び活性断片、好ましくは、N末端断片を指す。
奏功(RE):CR又はPRは、CT-RECIST基準(表1)によって定められ、それと同時に、CMR又はPMRは、FDG-PET(表2)によって定められる。これにより、奏功(RE)は、組み合わせられたCTとPETの測定に関する以下の4つのケース:CRとCMR、PRとPMR、CRとPMR、及びPRとCMR、の中のいずれかを意味する。
本発明による抗体の投与のための投薬量は、1回以上の別々の投与によるか、又は連続点滴による約1μg/kg〜50mg/kg(例えば、0.1〜20mg/kg)の抗体である。代表的な1日投与量は、約1μg/kg〜約100mg/kgの範囲におよんでもよい。好ましい側面において、抗体は、約1mg/kg〜約15 mg/kgの範囲におよぶ用量にて、2〜3週間毎に投与される。ベバシズマブの好ましい用量は、疾病の進行が検出されるまで、IV注入として14日間に1回、5mg/kgである。トラスツズマブの好ましい用量は、越えるのに90分間にわたって投与される4mg/kgの負荷投与量と、その後の30分間にわたり投与される2mg/kgの毎週の注入である。
この研究は、ヒト乳房異種移植モデルにおける単独ベバシズマブ治療の失敗後のベバシズマブとトラスツズマブの併用に関する抗腫瘍活性を調べた。本研究のさらなる目的は、転移に対する治療効果を調べることである。
トラスツズマブを、ヒスチジン-HCl、α-αトレハロース(60mM)、0.01%のPolysorb、pH6.0中、25mg/mlの原液として提供した(Herceptin(登録商標))。ベバシズマブを、Na-リン酸、α-αトレハロース(60mM)、0.01%のPolysorb、pH6.0中、25mg/mlの原液として提供した(Avastin(登録商標))。両方の溶液を、注射用にPBSにより適切に希釈した。
ヒト乳癌細胞株KPL-4を、炎症性皮膚転移を患っている乳癌患者の悪性胸水から株化したところ、これはErbBファミリー受容体を過剰発現している(Kurebayashi, J., et al., Br. J. Cancer 79(1999)707-17)。腫瘍細胞を、水飽和雰囲気中、5%のCO2、37℃にて、10%のウシ胎仔血清(PAA)及び2mMのL-グルタミン(Gibco)を補ったDMEM培地(PAA Laboratories, Austria)中、ごく普通に培養する。培養物の継代を、トリプシン/EDTA 1×(PAA)を用いて実施し、2倍/週に分ける。細胞継代P6を、生体内研究に使用する。
SCIDベージュ(C.B.-17)マウス;10〜12週齢;体重18〜20g(Charles River, Sulzfeld, Germany)を、国際的なガイドライン(GV-Solas;Felasa;TierschG)に従って12h明/12h暗の一日サイクルを用いて、特定病原体を含まない条件下で維持する。到着後に、動物を、新しい環境に慣れさせ、そして、観察するために、動物飼育施設の隔離部分に1週間収容する。連続した健康状態の観察を、定期的におこなう。減量食(Alltromin)と水(pH2.5〜3に酸性化)を自由にとらせる。
腫瘍細胞を、培養フラスコ(Greiner TriFlask)から採取し(トリプシン-EDTA)、50mlの培地中に移し、1回洗浄し、そして、PBS中に再懸濁した。追加のPBSでの洗浄ステップと濾過(細胞濾過器;Falcon 100μm)の後に、最終的な細胞価を、0.75×108/mlに調整した。腫瘍細胞懸濁液を、細胞凝集を避けるようにホールピペットを用いて慎重に混合する。麻酔を、閉鎖型循環装置内、プレインキュベーション・チャンバー(プラキシガラス)、個別のマウス鼻マスク(シリコン)、及びイソフルラン(Pharmacia-Upjohn、Germany)を用いた小動物用Stephens吸入ユニットを使用して実施した。注射の2日前に、動物の毛皮を剃った。乳腺脂肪体内(i.f.m.p.)注射に関しては、細胞を、20μlの容量にて、それぞれの麻酔下マウスの右側の2番目の鼠径部乳腺脂肪体へと同所に注射した。同所性移植に関しては、前記細胞懸濁液を、乳頭下に皮膚を貫いて注射した。腫瘍細胞注射は、実験の1日目に相当する。
悪影響の臨床的症状の検出のために、動物を毎日管理した。実験中の観察に関しては、動物の体重を週2回記録し、且つ、腫瘍体積を週2回、カリパスによって計測した。原発腫瘍体積を、NCIプロトコールに従って計算した(TW=1/2ab2、ここで、aとbは、mm単位による腫瘍サイズの長径と短径である、Teicher, B., Anticancer drug development guide, Humana Press 5(1997)92)。計算値を、平均値及び標準偏差値として記録した。
腫瘍体積が、約100mm3になったときに、腫瘍を持つマウスを、無作為化した(各群に関してn=10)。各群を治療前によく一致させた。治療は腫瘍細胞注射の20日後に開始した。溶媒群(第1群)には、週1回、腹腔内(i.p.)に10ml/kgのPBSバッファーを与えた。トラスツズマブ(第2群)には、30mg/kgの初回負荷量にてi.p.に投与し、それに続いて、週1回、15mg/kg(維持量)の用量にて投与した。抗VEGF抗体であるベバシズマブを、週2回、5mg/kgの投薬量にてi.p.に与えた(第3群)。40日目に、第3群の治療を、トラスツズマブ(i.p.に週1回、15mg/kg)を伴うベバシズマブ(i.p.に週2回、5mg/kg)の併用療法に切り換えた。
肺内への腫瘍細胞の拡散は、屠殺した動物で測定した。転移はSchneider, T., et al., Clin. Exp. Metastasis 19(2002)571-582に従って計測した。要約すると、肺組織を採取し、そして、ヒトAlu配列をリアルタイムPCR法によって定量化した。リアルタイムPCR法によって定量化された、より高いヒトDNAレベルは、より高い転移レベルに相当する。
原発腫瘍の増殖に対する治療効果を、図1と表3に示す。溶媒群(第1群)の腫瘍は急速に増殖したので、腫瘍による潰瘍形成と臨床的症状の進行のため、腫瘍細胞注射の38日後にマウスを屠殺した。トラスツズマブによる単独療法(第2群)は、腫瘍体積に対して有意な効果を発揮しなかったので、そのため、44日目にマウスを屠殺した。ベバシズマブを用いた治療は、腫瘍増殖を有意に抑制した;しかしながら、44日目前後に腫瘍が再発し始めた。55日目に開始したベバシズマブとトラスツズマブの併用療法は、実験期間(99日目)の間、腫瘍増殖の完全な阻害をもたらし、且つ、治療は良好な耐容性を示した。
Claims (18)
- 抗VEGF抗体を用いた事前の治療に失敗した患者の乳癌疾患を治療するための医薬品の製造のための抗HER2抗体及び抗VEGF抗体の使用であって、治療上有効な量の抗HER2抗体及び抗VEGF抗体を前記患者に投与することを含む使用。
- 前記医薬品で使用される抗VEGF抗体がベバシズマブである、請求項1に記載の使用。
- 前記患者がヒトである、請求項1又は2に記載の使用。
- 抗HER2抗体がトラスツズマブである、請求項1〜3のいずれか1項に記載の使用。
- 前記乳癌疾患がHER2受容体タンパク質の過剰発現を特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の使用。
- 抗VEGF抗体を用いた事前の治療に失敗した患者の乳癌疾患を治療する方法であって、治療上有効な量の抗HER2抗体及び抗VEGF抗体を前記患者に投与することを含む方法。
- 前記抗VEGF抗体がベバシズマブである、請求項6に記載の方法。
- 前記患者がヒトである、請求項7又は8に記載の方法。
- 前記抗HER2抗体がトラスツズマブである、請求項6〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 前記乳癌疾患がHER2受容体タンパク質の過剰発現を特徴とする、請求項6〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 容器、当該容器内の抗VEGF抗体を含む組成物、及び抗VEGF抗体を用いた事前の治療に失敗した、乳癌疾患にかかっている患者に抗VEGF抗体と抗HER2抗体を投与することを前記組成物の使用者に指図する添付文書、を含む製品。
- 前記抗VEGF抗体がベバシズマブである、請求項11に記載の製品。
- 前記抗HER2抗体がトラスツズマブである、請求項11又は12に記載の製品。
- 容器、当該容器内の抗HER2抗体を含む組成物、及び抗VEGF抗体を用いた事前の治療に失敗した、乳癌疾患にかかっている患者に抗HER2抗体及び抗VEGF抗体を投与することを前記組成物の使用者に指図する添付文書、を含む製品。
- 前記抗VEGF抗体がベバシズマブである、請求項14に記載の製品。
- 前記抗HER2抗体がトラスツズマブである、請求項14又は15に記載の製品。
- 抗HER2抗体及び抗VEGF抗体を含む、抗VEGF抗体を用いた事前の治療に失敗した乳癌疾患の治療において有用な医薬組成物。
- 前記抗VEGF抗体がベバシズマブであり、前記抗HER2抗体がトラスツズマブである、請求項17に記載の医薬組成物。
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