JP2012158537A - 嚥下障害改善剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 植物繊維質原料を含む培地を用いて担子菌の菌糸体を培養し、その培養物から抽出して得た、糖質、蛋白質、及び水溶性リグニンを含む抽出物を、嚥下障害改善剤の有効成分とする。その植物繊維質原料としては、禾本科植物から調製されたものであることが好ましく、バガス、トウモロコシの茎葉、小麦ふすま、米糠、稲藁、茅、熊笹、及び竹から選ばれた1種又は2種以上から調製されたものであることがより好ましい。担子菌としてはマンネン茸、ブクリョウ、コフキサルノコシカケ、カワラ茸、椎茸、ヒラ茸、マイ茸、エノキ茸、シメジ茸、ヤマブシ茸、アガリクス等が用いられる。
【選択図】 なし
Description
(2) 化学組成:
・糖質:30〜50質量%
・蛋白質:8〜20質量%
・水溶性リグニン:20〜40質量%
・ラット単回経口投与 雄:22,500mg/Kg 以上
雌:22,500mg/Kg 以上
・マウス単回経口投与 雄:2,000mg/Kg 以上
雌:2,000mg/Kg 以上
(B) ラット3か月反復経口投与試験(最大無作用量)
雄:3,610mg/Kg
雌:4,190mg/Kg
<調製例1>(バガスを用いたマンネン茸菌の固体培養)
バガス90質量部と、脱脂米糠10質量部とを配合し、水分70%となるように調整して固形培地を作り、常法通り高圧蒸気滅菌した。この固体培地にマンネン茸の菌糸を接種し、25℃に温度調節した培養室内で3か月培養し、培地中に菌糸体が蔓延した後、温度処理室に移して35℃で24時間加温し、次いで10℃の低温室で3日間処理した。その後、上記培養室で3日間培養し、培地を破砕機で親指程度の大きさに破砕した。破砕した培地を40℃で6時間処理し、自己消化を促進させた後、抽出タンクに詰め、60℃の温水を循環させながら16時間抽出した。得られた抽出液をカートリッジフィルターで濾過し、更にメンブランフィルターで濾過除菌後、濃縮し、凍結乾燥により褐色の粉末を得た。その成分を分析した結果は以下の通りであった。
・蛋白質 :12質量%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :30質量%(アセチルブロマイド法)
・無機質 :13質量%(直接灰化法)
上記調製例1の方法で得たマンネン茸の菌糸体培養培地抽出物(以下、「MAK」という。)について、ラット(Sprague-Dawley、三協ラボサービス)を利用した動物試験により、その嚥下障害の改善の効果を検討した。
基礎検討として蒸留水、クエン酸(1、3、又は10mM)、又はカプサイシン(100nM)の溶液を注入して咽喉頭を刺激したとき嚥下回数を、目視により測定した。すなわち、刺激用ポリエチレン製カニューレをマイクロシリンジポンプ(KD SCIENTIFIC社)につなげて流速を調整し、3.3μL/秒の流速で各試験液50μLを注入し、それを3回繰り返して、その間の嚥下回数を目視により観察した。試験では、同じラットに対し、試験液を、蒸留水、1mMクエン酸、3mMクエン酸、10mMクエン酸、100nMカプサイシンの順番で繰り返し注入して、それぞれの試験液による刺激に対する嚥下回数を測定した。
目視により測定した嚥下回数と筋電図を用いた嚥下に伴う筋収縮回数との相関について検討した。そのために、手術後2週間のラットに対して、試験例1と同様にして、蒸留水、クエン酸(1、3、又は10mM)、又はカプサイシン(100nM)の溶液を注入して咽喉頭を刺激し、各試験液において、目視により測定した嚥下回数と、筋電図に基づく筋収縮回数との測定結果を比較した。
MAK投与の効果を調べた。そのために、総頚動脈を結紮しない偽手術を施してその後2週間蒸留水を投与したラットと、両側総頚動脈に結紮を施してその手術後2週間蒸留水を投与したラットと、両側総頚動脈に結紮を施してその手術後2週間MAKを投与したラットに対して、試験例1と同様にして、蒸留水、クエン酸(1、3、又は10mM)、又はカプサイシン(100nM)の溶液を注入して咽喉頭を刺激し、各試験液における嚥下回数を測定した。
総頚動脈結紮による嚥下障害にはチロシンヒドロキシラーゼ(ドパミン神経系)が関与しているとの報告がある。そこで本試験では、総頚動脈を結紮しない偽手術を施してその後2週間蒸留水を投与したラット(図中、「1」で示す。)と、両側総頚動脈に結紮を施してその手術後2週間蒸留水を投与したラット(図中、「2」で示す。)と、両側総頚動脈に結紮を施してその手術後2週間MAKを投与したラット(図中、「3」で示す。)について、線条体を含む脳冠状切片を作成し、免疫組織染色法により、チロシンヒドロキシラーゼの発現の状態を調べた。具体的には、正常ヤギ血清でブロッキングを行った後抗チロシンヒドロキシラーゼ抗体 (1:1,000希釈, Chemicon社製) と反応させ、アビジン・ビオチンペルオキシダーゼ法にて二次抗体反応を行い、ジアミノベンチジンにて発色させ、顕微鏡観察した。図5にその顕微鏡写真を示す。
<調製例2>(バガスを用いた椎茸菌の固体培養)
バガス80質量部と、脱脂米糠20質量部とを配合し、水分70%となるように調整して固体培地を作り、常法通り高圧蒸気滅菌した。この固体培地に椎茸の菌糸を接種し、22〜24℃に温度調節した培養室内で4か月間培養し、培地中に菌糸体が蔓延した後、温度処理室に移して32〜34℃で24時間加温し、次いで10℃の低温室で5日間処理した。その後、上記培養室で2日間培養し、培地を破砕機で2回破砕した。破砕した培地を50℃で4時間処理し、自己消化を促進させた後、抽出タンクに詰め、60℃の温水を循環させながら16時間抽出した。得られた抽出液を珪藻土のフィルターケーキで予備濾過し、更にメンブランフィルターで濾過除菌後、濃縮し、凍結乾燥により褐色の粉末を得た。その成分を分析した結果は以下の通りであった。
・蛋白質 :12%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :35%(アセチルブロマイド法)
・無機質 :13%(直接灰化法)
トウモロコシの茎を水洗いし乾燥した後、破砕し、米糠を質量比で2割加え、水分70%となるように調整して固体培地を作り、常法通り高圧蒸気滅菌した。この固体培地に椎茸の菌糸を接種し、調製例2と同様にして培養抽出物を得た。その成分を分析した結果は以下の通りであった。
・蛋白質 :12%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :35%(アセチルブロマイド法)
・無機質 :12%(直接灰化法)
熊笹の色素、香りをエチルアルコールで抽出した繊維残渣を破砕したものに米糠を質量比で1割加え、水分70%となるように調整して固体培地を作り、常法通り高圧蒸気滅菌した。この固体培地にマンネン茸の菌糸を接種し、調製例2と同様にして培養抽出物を得た。その成分を分析した結果は以下の通りであった。
・蛋白質 :15%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :35%(アセチルブロマイド法)
・無機質 :10%(直接灰化法)
水1L(リットル)に対し、ミキサーで細かく破砕したバガス60g、乾燥オカラ20g、米糠20g、イーストエキス2gを加え、常法通り高圧蒸気滅菌した。この液体培地に椎茸の菌糸を接種し、23℃で3週間通気培養した後、培養液を60℃で1時間、80℃で2時間加温し、菌糸の酵素による自己消化反応を進行させると共に代謝物を抽出させた。培養液は3,000rpmで30分間遠心分離し、沈殿物を除き、褐色の液を得た。この抽出液を凍結乾燥し、分析した結果は、以下の通りであった。
・蛋白質 :16%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :35%(アセチルブロマイド法)
・その他 :11%
熊笹の色素、香りをエチルアルコールで抽出した繊維残渣をミキサーで細かく破砕したものを水1Lに対し90g、米糠10g、イーストエキス5gを加え、常法通り高圧蒸気滅菌した。この液体培地にマンネン茸の菌糸を接種して、23℃で2週間通気培養を行った。培養物は、調製例4と同様の方法で加熱、遠心処理し、濃褐色の液を得た。この抽出液を凍結乾燥し、分析した結果は、以下の通りであった。
・蛋白質 :18%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :40%(アセチルブロマイド法)
・その他 : 9%
バガス65質量部、小麦ふすま20質量部、米糠10質量部、乾燥イースト5質量部を配合し、水分70%となるように調整して固体培地を作り、常法通り高圧蒸気滅菌した。この固体培地にヤマブシ茸の菌糸を接種し、調製例2と同様にして培養抽出物を得た。その成分を分析した結果は以下の通りであった。
・蛋白質 :12%(セミミクロケルダール法)
・水溶性リグニン :28%(アセチルブロマイド法)
・無機質 :10%
Claims (5)
- 植物繊維質原料を含む培地を用いて担子菌の菌糸体を培養し、その培養物から抽出して得た、糖質、蛋白質、及び水溶性リグニンを含む抽出物を有効成分として含有することを特徴とする嚥下障害改善剤。
- 前記抽出物は、前記培養物から、担子菌の自己消化を行って得られたものである請求項1記載の嚥下障害改善剤。
- 前記植物繊維質原料が、禾本科植物から調製されたものである請求項1又は2記載の嚥下障害改善剤。
- 前記植物繊維質原料が、バガス、トウモロコシの茎葉、小麦ふすま、米糠、稲藁、茅、熊笹、及び竹から選ばれた1種又は2種以上から調製されたものである請求項1又は2記載の嚥下障害改善剤。
- 前記担子菌が、マンネン茸、ブクリョウ、コフキサルノコシカケ、カワラ茸、椎茸、ヒラ茸、マイ茸、エノキ茸、シメジ茸、ヤマブシ茸、及びアガリクスから選ばれたものである請求項1〜4のいずれか1つに記載の嚥下障害改善剤。
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CN104109008A (zh) * | 2014-07-22 | 2014-10-22 | 肥东县丰宝种养殖有限责任公司 | 一种青草为原料的香菇培养基及其制备方法 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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JP2008266177A (ja) * | 2007-04-19 | 2008-11-06 | Noda Shokukin Kogyo Kk | 脳保護剤 |
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- 2011-01-31 JP JP2011018030A patent/JP5751849B2/ja active Active
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JPN6014040805; 順天堂医学 第55巻第3号, 2009, pp.263-272 * |
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CN104109008A (zh) * | 2014-07-22 | 2014-10-22 | 肥东县丰宝种养殖有限责任公司 | 一种青草为原料的香菇培养基及其制备方法 |
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