JP2012112884A - 色素成分の測定方法及び測定用試薬 - Google Patents
色素成分の測定方法及び測定用試薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2012112884A JP2012112884A JP2010263839A JP2010263839A JP2012112884A JP 2012112884 A JP2012112884 A JP 2012112884A JP 2010263839 A JP2010263839 A JP 2010263839A JP 2010263839 A JP2010263839 A JP 2010263839A JP 2012112884 A JP2012112884 A JP 2012112884A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- quantified
- reagent
- component
- pigment
- substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
抽出などの煩雑な前処理操作を必要とせずに、色素成分、特に生体試料中のβカロテンを簡易に定量する分析方法および同分析方法に用いる試薬を提供することにある。
【解決手段】
試料中の色素成分を定量する分析方法であって、定量対象とする色素成分の測定波長と重複または近接する波長に吸収を持つ、定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質を含有する試薬を添加する工程を含む、前記分析方法。
【選択図】
なし
Description
光学的手法としては、吸光度測定による比色法が広く用いられている。一般的な比色法は、定量対象となる成分を試薬や酵素と反応させ、反応前後における吸光度変化を測定するというものであり、例えば特許文献1には、ビリルビンを測定するために、試料にビリルビンオキシターゼを作用させそれにより生じる変化を光学的に測定する方法が記載されている。
(a)試料中の色素成分を定量する分析方法であって、定量対象とする色素成分の測定波長と重複または近接する波長に吸収を持つ、定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質を含有する試薬を添加する工程を含む、前記分析方法。
(c)試料が生体試料である、(a)または(b)に記載の分析方法。
(d)定量対象とする色素成分がβカロテンである、(a)〜(c)のいずれかに記載の分析方法。
(e)定量対象とする色素成分以外の色素成分が、ビリルビンである、(d)に記載の分析方法。
(g)生体試料が、ウシ由来である、請求項(c)〜(f)のいずれか一項に記載の分析方法。
(i)定量対象とする色素成分が、βカロテンである、(h)に記載の試薬。
(k)定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質が、過酸化水素、次亜塩素酸ナトリウム、過ホウ酸ナトリウム、過硫酸アンモニウムおよび過硫酸カリウムからなる群から選択される1種又は2種以上である、(h)〜(j)のいずれかに記載の試薬。
(m)(b)〜(g)のいずれかに記載の分析方法に用いる試薬であって、定量対象とする色素成分を退色させる物質を含有する、前記試薬。
(n)定量対象とする色素成分がβカロテンである、(m)に記載の試薬。
(p)定量対象とする色素成分を退色させる物質が亜硝酸ナトリウムである、(o)に記載の試薬。
(s)定量対象とする色素成分がβカロテンである、(q)または(r)に記載の試薬セット。
(t)定量対象とする色素成分以外の色素成分が、ビリルビンである、(q)〜(s)のいずれかに記載の試薬セット。
(u)定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質が過酸化水素であり、定量対象とする色素成分を退色させる物質が亜硝酸ナトリウムである、(q)〜(t)のいずれかに記載の試薬セット。
(v)自動分析装置を用いる、(a)〜(g)のいずれかに記載の方法。
したがって、本発明により、βカロテンのような色素成分の測定を容易に行えるようになり、家畜の健康状態や栄養状態の把握のために検査を必要とする現場に、大いに貢献するものである。
定量対象とする色素成分としては、あらゆる色素成分が対象となり得るが、例えばリコピン、βカロテン等が挙げられる。
定量対象とする色素成分の濃度(μg/dL)=(吸光度A×(S+R1)/T−吸光度B)×C
S:検体量、R1:第一試薬量、T:全反応液量、C:標準液濃度(μg/dL)
定量対象とする色素成分の濃度(μg/dL)=((吸光度A×(S+R1)/T−吸光度B)×T)/(E1% cm×S)×106
S:検体量、R1:第一試薬量、T:全反応液量、E1%cm:吸光係数(1%)
本発明によるβカロテンの測定は、U−3200形、U−3300形などの分光光度計、H−7170S形、H−7180形、BM−1650形などの汎用型自動分析装置などで行うことができる。
以下に示す条件で、各種物質がβカロテン及びビリルビンを退色させるかを調査した。
検体βカロテン標準液279μg/100ml(水溶性バイオカロテン 協和発酵バイオ(株)製を生理食塩水に溶解して調製)
ビリルビン標準液 2.6mg/100ml(ビリルビン標準液 関東化学(株)製を精製水で希釈して調製)
測定にはJCA-BM1650形自動分析装置を使用した。また、酸化還元電位の測定は、マルチ水質計MM60Rにより測定した。
試薬組成を表1、測定条件を表2、測定結果を表3に示す。
以下に示す条件で、以下に示す検体の測定を行った。
検体:830μg/100mL βカロテン標準液を10段階に希釈したもの 測定試薬の組成を、表4に示す。
測定にはJCA-BM1650自動分析装置を使用した。測定パラメーターは表2と同様である。
図1に示すようにβカロテンの濃度に依存して吸光度変化量が増加することが確認された。
以下に示す条件で、ウシ血清中のβカロテンの測定を行い、対照法(HPLC)法との比較を行った。
測定試薬の組成は、表4と同様である。
測定にはJCA-BM1650自動分析装置を使用した。測定パラメーターは表2と同様である。
対照法のHPLC法は、「平成13年度 家畜保健衛生所年報 第43回岐阜県家畜保健衛生業績発表会全文 ビタミンA、βカロチンおよびビタミンE定量のための血清(血漿)処理方法の検討」に記載の方法で行った。測定結果を図2に示す。
以下に示す条件で、第一試薬と第二試薬との組み合わせに対する、第二試薬とβカロテンとの反応性ついて調査した。測定には、H−7170S形自動分析装置を使用した。試薬組成を表5、測定条件を表6、測定結果を表7に示す。
Claims (22)
- 試料中の色素成分を定量する分析方法であって、定量対象とする色素成分の測定波長と重複または近接する波長に吸収を持つ、定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質を含有する試薬を添加する工程を含む、前記分析方法。
- さらに、定量対象とする色素成分を退色させる物質を含有する試薬を添加する工程を含む、請求項1に記載の分析方法。
- 試料が生体試料である、請求項1または2に記載の分析方法。
- 定量対象とする色素成分がβカロテンである、請求項1〜3のいずれか一項に記載の分析方法。
- 定量対象とする色素成分以外の色素成分が、ビリルビンである、請求項4に記載の分析方法。
- 生体試料が、血清および/または血漿である請求項3〜5のいずれか一項に記載の分析方法。
- 生体試料が、ウシ由来である、請求項3〜6のいずれか一項に記載の分析方法。
- 請求項1〜7のいずれか一項に記載の分析方法に用いる試薬であって、定量対象とする色素成分の測定波長と重複または近接する波長に吸収を持つ、定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質を含有する、前記試薬。
- 定量対象とする色素成分がβカロテンである、請求項8に記載の試薬。
- 定量対象とする色素成分以外の色素成分が、ビリルビンである、請求項9に記載の試薬。
- 定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質が、過酸化水素、次亜塩素酸ナトリウム、過ホウ酸ナトリウム、過硫酸アンモニウムおよび過硫酸カリウムからなる群から選択される1種又は2種以上である、請求項8〜10のいずれか一項に記載の試薬。
- 定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質が、過酸化水素である、請求項11に記載の試薬。
- 請求項2〜7のいずれか一項に記載の分析方法に用いる試薬であって、定量対象とする色素成分を退色させる物質を含有する、前記試薬。
- 定量対象とする色素成分がβカロテンである、請求項13に記載の試薬。
- 定量対象とする色素成分を退色させる物質が、亜硝酸ナトリウム、過ヨウ素酸ナトリウムおよびN−ブロモスクシンイミドからなる群から選択される1種又は2種以上である、請求項13または14に記載の試薬。
- 定量対象とする色素成分を退色させる物質が亜硝酸ナトリウムである、請求項15に記載の試薬。
- 試料中の色素成分を定量する分析方法に用いるための試薬セットであって、試料中の定量対象とする色素成分の測定波長と重複または近接する波長に吸収を持つ、定量対象とする色素成分以外の色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質を含有する試薬、および定量対象とする色素成分を退色させる物質を含有する試薬を含む、前記試薬セット。
- 試料が生体試料である、請求項17に記載の試薬セット。
- 定量対象とする色素成分がβカロテンである、請求項17または18に記載の試薬セット。
- 定量対象とする色素成分以外の色素成分が、ビリルビンである、請求項17〜19のいずれか一項に記載の試薬セット。
- 定量対象とする色素成分を退色させるが、定量対象とする色素成分は退色させない物質が過酸化水素であり、定量対象とする色素成分を退色させる物質が亜硝酸ナトリウムである、請求項17〜20のいずれか一項に記載の試薬セット。
- 自動分析装置を用いる、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010263839A JP5660867B2 (ja) | 2010-11-26 | 2010-11-26 | 色素成分の測定方法及び測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010263839A JP5660867B2 (ja) | 2010-11-26 | 2010-11-26 | 色素成分の測定方法及び測定用試薬 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012112884A true JP2012112884A (ja) | 2012-06-14 |
JP5660867B2 JP5660867B2 (ja) | 2015-01-28 |
Family
ID=46497241
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010263839A Active JP5660867B2 (ja) | 2010-11-26 | 2010-11-26 | 色素成分の測定方法及び測定用試薬 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5660867B2 (ja) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5389796A (en) * | 1977-01-14 | 1978-08-07 | Eastman Kodak Co | Colorimetric method and detecting element for bilirubin in aqueous solution |
WO1996017251A1 (fr) * | 1994-12-02 | 1996-06-06 | Nitto Boseki Co., Ltd. | Procede de determination quantitative de bilirubine |
JPH1146794A (ja) * | 1997-08-04 | 1999-02-23 | Nitto Boseki Co Ltd | 直接型ビリルビンの測定方法及び測定用キット |
JP2010230447A (ja) * | 2009-03-26 | 2010-10-14 | Hiroshima Prefecture | 家畜の血中ビタミンa及びベータカロテン濃度測定方法並びに家畜の血中ビタミンa及びベータカロテン濃度測定装置 |
-
2010
- 2010-11-26 JP JP2010263839A patent/JP5660867B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5389796A (en) * | 1977-01-14 | 1978-08-07 | Eastman Kodak Co | Colorimetric method and detecting element for bilirubin in aqueous solution |
WO1996017251A1 (fr) * | 1994-12-02 | 1996-06-06 | Nitto Boseki Co., Ltd. | Procede de determination quantitative de bilirubine |
JPH1146794A (ja) * | 1997-08-04 | 1999-02-23 | Nitto Boseki Co Ltd | 直接型ビリルビンの測定方法及び測定用キット |
JP2010230447A (ja) * | 2009-03-26 | 2010-10-14 | Hiroshima Prefecture | 家畜の血中ビタミンa及びベータカロテン濃度測定方法並びに家畜の血中ビタミンa及びベータカロテン濃度測定装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5660867B2 (ja) | 2015-01-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Raabo et al. | On the enzymatic determination of blood glucose | |
Rice-Evans et al. | [241 Total antioxidant status in plasma and body fluids | |
JP5871800B2 (ja) | 糖化ヘモグロビンの測定方法 | |
DE60314990T2 (de) | Verfahren zur quantifizierung von glykosyliertem protein unter verwendung einer redoxreaktion sowie eines quantifizierungskits | |
JP2640847B2 (ja) | 過酸の分析方法および分析用試薬 | |
WO2012020745A1 (ja) | 糖化ヘモグロビンの測定方法 | |
DE3124594A1 (de) | Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid | |
CN105352920A (zh) | 一种利用1,4-二羟基-9,10-蒽醌缩氨基硫脲化合物作为荧光探针检测铜离子的方法 | |
SU971120A3 (ru) | Способ определени аскорбиновой или дегидроаскорбиновой кислоты | |
Basu et al. | Tri-iodide and vanadium chloride based chemiluminescent methods for quantification of nitrogen oxides | |
JP5660867B2 (ja) | 色素成分の測定方法及び測定用試薬 | |
Back et al. | A simplified hydroethidine method for fast and accurate detection of superoxide production in isolated mitochondria | |
US5312759A (en) | Method for measurement of fructosamines using 1,2-quinones | |
JP6144208B2 (ja) | アスコルビン酸の影響抑制方法 | |
Ciuti et al. | A novel assay for measuring total antioxidant capacity in whole blood and other biological samples | |
JP5938713B2 (ja) | ヘモグロビンの高感度測定法と試薬 | |
Guthrie | A method for the determination of peroxidase activity | |
DE2759962C2 (de) | Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Harnstoff | |
Włodek et al. | Alteration in plasma levels of nonprotein sulfhydryl compounds and S-nitrosothiols in chronic renal failure patients | |
JP6585244B1 (ja) | γ−アミノ酪酸の測定方法、及びそのためのキット | |
JP6533076B2 (ja) | 還元力の分析方法および還元力の分析試薬 | |
Shimamura et al. | Electron spin resonance analysis of superoxide anion radical scavenging activity with spin trapping agent, diphenyl-PMPO | |
DE60226066T2 (de) | Natriumazid verwendendes messverfahren | |
RU2700708C1 (ru) | Способ раздельного определения органических и неорганических гидропероксидов при помощи хемилюминесценции с использованием каталазы | |
JP3733704B2 (ja) | 直接型ビリルビンの測定方法及び測定用キット |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130805 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20140129 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140304 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140428 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140603 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140728 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20141111 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20141202 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5660867 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |