JP2011140494A

JP2011140494A - 新規なビンカアルカロイド誘導体及びその調製方法

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Publication number: JP2011140494A
Application number: JP2011027226A
Authority: JP
Inventors: Patrice Rool; パトリス・ルール
Original assignee: Roowin SA
Current assignee: Roowin SA
Priority date: 1998-06-02
Filing date: 2011-02-10
Publication date: 2011-07-21
Also published as: FR2779146B1; WO1999062912A1; ES2233048T3; DE69921996D1; FR2779146A1; JP5154720B2; US6365735B1; EP1084126A1; AU3936699A; CA2335947C; EP1084126B1; CA2335947A1; DE69921996T2; JP2002517399A; PT1084126E

Abstract

【課題】新規なビンカアルカロイド並びにその酸との付加塩及びその第四級アンモニウム塩の調製方法の提供。
【解決手段】一般式（II）

に相当する生成物を、他方の縮合環化合物と反応させて、中間体を得、さらにそれを還元又はシアン化することにより最終生成物を得る方法。
【選択図】なし

Description

本発明は、一般式（I）：

[式中、
・Ｒ’_１は、水素原子またはアルコキシ、アシル、ホルミルまたはハロゲノアシル基を表し、
・Ｒ’_２は、水素原子またはアルキル基を表し、
・Ｒ’_３及びＲ”_３が同一または相違し、個別に水素原子またはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシ基を表すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ”_３が共にカルボニル基を成すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ’_５がエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ’_４は、水素原子またはアルキルオキシカルボニル、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基、好ましくはアルキルオキシカルボニル基を表し、
・Ｒ’_５及びＲ”_５は、同一又は相違し、個別に水素原子またはヒドロキシ、アルカノイルオキシル、エチルまたは２-ヒドロキシエチル基を表し、
・Ｒ’_６は、水素原子またはエチル、２-ヒドロキシエチルまたはアセチル基を表し、
・Ｒ’_７は、水素原子またはシアニド基を表し、
・Ｒ_１は、水素原子またはアルキル、ホルミルまたはアシル基、好ましくは水素またはアルキル基を表し、
・Ｒ_２は、水素原子またはアルコキシ基を表し、
・Ｒ_３は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_４及びＲ_３が共にエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ_４は水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_３及びＲ_４が共にエポキシブリッジを成し、
・Ｒ_６は、アルキルオキシカルボニル、ヒドラジド、アセタミド、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基を表し、
・Ｒ_５及びＲ_７は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表す]
のビンカアルカロイド並びにその酸との付加塩及びその第四級アンモニウム塩の調製方法に関する。

式（Ｉ）の誘導体の幾つかは、ビンブラスチン、ビンクリスチン及びビンオレルビン（vinorelbine）等の抗腫瘍薬の調製における中間体であることが知られている。

Ｒ＝ＣＨ_３、ビンブラスチンｎ＝２、無水ビンブラスチン
Ｒ＝ＣＨＯ、ビンクリスチンｎ＝１、ビンオレルビン

マダガスカルニチニチソウ（Madagascar periwinkle）、Carantheus roseusから抽出される、これらの複合天然分子の著しい抗腫瘍特性は公知であり、これらは既に、抗癌治療に使用されている。ビンブラスチン及びビンクリスチンは、細胞分離の際の有糸分裂紡錘体の生成を阻害し、よって細胞分化を回避する“紡錘体毒（spindle poison）”である。

ビンクリスチン及びビンブラスチンは、白血病、リンパ肉腫及び固形腫瘍の治療における有効成分である。ビンブラスチンはまた、ホジキン病の治療に使用される。
ビンオレルビンは、現在最も広範囲に及んでいる形態の肺の癌、すなわち非小細胞の肺癌の治療に使用される。これはまた、胸の転移性癌の治療に使用される。

ビンブラスチン及びビンクリスチンの調製に現在使用されている方法には、植物からのこれらの分子の抽出が含まれる。該植物を粉砕し、乾燥して初めて、これらの物質が抽出可能となる。得られた抽出物が非常に複雑で、少なくとも２００の異なるアルカロイドを含むとすれば、抽出工程は長くコスト高である。収量も非常に低量であり、１トンの乾燥植物材料に対してビンブラスチン０．５から１０g、１トンの乾燥植物材料に対してビンクリスチン０．５から１gが得られる。

特許ＦＩ８８２７５５特許ＦＲ２２９６４１８ＵＳ５０３７９７７

VUKOVIC et al., "Tetrahedron"（1998, volume 44, pages 325-331） GUNIC et al., "Journal of Chemical Society Chemical Communications"(1993), volume 19, pages 1496-1497 Tabaskovic et al., "Journal of Organic Chemistry"(1997), volume 62, pages 947-953

然るに、多くの研究において、よりよい収量が得られ、重要な抗腫瘍特性を有するが、本来有する毒性は低レベルである誘導体を利用した、より効率の良い操作を利用することによって、これらの分子の合成の達成が試みられてきた。

HUATAN-MAKI Oy社によって出願された特許ＦＩ８８２７５５は、酸素又は不活性ガスの雰囲気下、酸性水溶液中で、カタランチン及びビンドリンにＵＶ光線を照射することによる、ビンブラスチン及びビンクリスチンの生成に関する。これらの反応において得られる収量は、この上なく低量である。

さらにまた、ビンブラスチン、ビンクリスチン、及びビンオレルビンの合成における中間体である、無水ビンブラスチンを利用する別の方法が公知である。

然るに、無水ビンブラスチンは、ビンブラスチンタイプの全てのアルカロイドを入手可能とする鍵となる化学中間体である。この中間体は、カタランチンとビンドリンとのカップリングによって合成される。
カタランチンビンドリン

後者の二つのアルカロイドはまた、マダガスカルニチニチソウから抽出されるが、ビンクリスチン及びビンブラスチンとは対照的に、これらは、得られる抽出物の主要な構成要素である。実際、１トンの乾燥植物材料に対してカタランチン４００g、１トンの乾燥植物材料に対してビンドリン８００gが得られる。

したがって、カタランチンとビンドリンとのカップリングによる無水ビンブラスチンの調製は、この中間体生成物の合成には、好ましい経路である。
カタランチンとビンドリンとから無水ビンブラスチンを調製する、幾つかの方法がある。

ANVAR社によって出願された特許ＦＲ２２９６４１８には、その途中にカタランチンのＮ-オキシドが無水トリフルオロ酢酸の存在下でビンドリンにカップリングされる方法が記載されている。
この方法を、環境温度にて実行した場合、無水ビンブラスチンの不活性１６’-Ｒエピマーのみが得られる。天然に産する１６’-Ｓエピマーは、この反応を少なくともさらに５０℃低温で、不活性ガス雰囲気中で実行した場合に、主な生成物として得られる。それにも関わらず、低温でさえも、無水ビンブラスチンの１６’-Ｒエピマー１０％が、依然生成される。

この方法には、幾つかの欠点がある。操作条件が、無水溶媒、低温及び不活性ガス雰囲気の採用によって、この上なく制限されている。得られる生成物は、無水ビンブラスチンの１６’-Ｒエピマーが１０％存在するため、精製操作に処さねばならない。単離される無水ビンブラスチンの収量は低量であり、３５％のオーダーである。

“Tetrahedron”誌（1998年、volume 44, 325-331頁）において、VUKOVICらによって提案された第二の方法には、第二鉄イオンによって開始されるカタランチンとビンドリンとの間のカップリング反応が記載されている。カタランチンはまた、この反応中に酸化される。無水ビンブラスチンの収率は、該反応が不活性ガス雰囲気下で行われた場合には６９％のオーダーである。しかしながら、この方法には多数の副生成物を産するという、重大な欠点がある。これらは、生成する二量体アルカロイドのさらなる酸化によって、操作条件の選択によらず生じてくる不純物である。このため、生成段階は困難であり、注意を要する。

ＵＳ５０３７９７７には、より優れた方法が提案されており、これにより無水ビンブラスチンの収率は８９％にまで上昇する。しかしながら、この改良法は、非常に少量の試薬についてのみ記載されており、工業スケールにまでこれを拡張することは困難と思われる。いずれにせよ、鉄二イオンに基づくこれらの方法は、これらのイオンが寄生反応（parasitic reaction）を招くという事実により、いかなる場合も多数の副生成物を生じる。

“Journal of Chemical Society Chemical Communications”(1993), volume 19, pages 1496-1497においてGUNICらにより提案され、また、“Journal of Organic Chemistry”(1997), volume 62, pages 947-953においてTabaskovicらにより提案された第三の方法には、カタランチンの陽極酸化の結果としての、カタランチンとビンドリンとのカップリング反応が記載されている。しかしながら、この方法もまた、一方では不活性雰囲気を要するという欠点、他方では、電極の劣化、再現性制御の困難性及び電解液のコストを含む電気化学的方法それ自体の性質に関連する欠点を有する。さらに、前述の全ての方法のように、該無水ビンブラスチンは、無水ビンブラスチンの１６’-Ｒエピマー約１０％によって汚染されている。

ここに開示した全ての方法が、例外なくカタランチン分子の分割を含み、これが後者の酸化または活性化によって誘発されていることは特記すべきである。これらの方法は、制限条件下で行われ、十分に純粋な生成物の満足な収量を与えない。

本発明による方法によれば、より非制限的な操作条件を使用して、一般式（I）のビンカアルカロイド、特に無水ビンブラスチンの製造が、この上ない収量及び高い純度で可能である。本発明による方法によれば、天然に産する活性な形態での無水ビンブラスチンの製造が、僅かな無水ビンブラスチンの１６’-エピマーもなしに可能である。

然るに、本発明は、一般式（I）：

[式中、
・Ｒ’_１は、水素原子またはアルコキシ、アシル、ホルミルまたはハロゲノアシル基を表し、
・Ｒ’_２は、水素原子またはアルキル基を表し、
・Ｒ’_３及びＲ”_３が同一または相違し、個別に水素原子またはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシ基を表すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ”_３が共にカルボニル基を成すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ’_５がエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ’_４は、水素原子またはアルキルオキシカルボニル、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基、好ましくはアルキルオキシカルボニル基を表し、
・Ｒ’_５及びＲ”_５は、同一又は相違し、個別に水素原子またはヒドロキシル、アルカノイルオキシル、エチルまたは２-ヒドロキシエチル基を表し、
・Ｒ’_６は、水素原子またはエチル、２-ヒドロキシエチルまたはアセチル基を表し、
・Ｒ’_７は、水素原子またはシアニド基を表し、
・Ｒ_１は、水素原子またはアルキル、ホルミルまたはアシル基、好ましくは水素またはアルキル基を表し、
・Ｒ_２は、水素原子またはアルコキシ基を表し、
・Ｒ_３は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_４及びＲ_３が共にエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ_４は水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_３及びＲ_４が共にエポキシブリッジを成し、
・Ｒ_６は、アルキルオキシカルボニル、ヒドラジド、アセタミド、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基を表し、
・Ｒ_５及びＲ_７は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表す]
に相当する生成物（Ａ）並びにその酸との付加塩及びその第四級アンモニウム塩の調製方法に関し、一般式（II）：

[式中、Ｒ’_１、Ｒ’_２、Ｒ’_３、Ｒ”_３、Ｒ’_４、Ｒ’_５、Ｒ”_５及びＲ’_６は上記の通りである]
に相当する生成物（ｃ）を、一般式（III）：

[式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６及びＲ_７は上記の通りである]
に相当する生成物（ｖ）と反応させることを特徴とし、
この方法は、生成物（ｖ）が酸化されて一般式（IV）：

[式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７及びＲ’_１、Ｒ’_２、Ｒ’_３、Ｒ”_３、Ｒ’_４、Ｒ’_５、Ｒ”_５及びＲ’_６は上記の通りである]
の中間体（ｉ）が得られるように反応条件が選択され、さらに式（IV）の生成物（ｉ）を還元又はシアン化することにより生成物（Ａ）が得られることを特徴とする。

生成物（ｖ）は、あらゆる既知の方法で酸化可能である。例としては、下記の、光化学的、有機金属及び電気化学経路を挙げることができる。生成物（ｖ）は、好ましくは、光及び任意に有機または無機の増感剤の存在下、光化学経路を用いて酸化される。

無機増感剤は、遷移金属または半導体、好ましくはルテニウム錯体または酸化チタンであるとよい。
有機増感剤は、好ましくはキサンテート、ピリリウム、ピリジニウム、フラビン、芳香族化合物、ケトン及びキノン、並びにこれらの塩から選択される、特にフルオレセイン、トリフェニルピリリウム、４-（４-メトキシフェニル）-２，６-ジフェニルピリリウム、２，６-ビス-（４-メトキシフェニル）-２，６-ジフェニルピリリウム、及び２，４，６-トリス-（４-メトキシフェニル）-ピリリウムから選択される着色剤である。

酸化工程は、酸性媒体中、好ましくはｐＨ０から７まで、特に０．５から３までにて行われる。
生成物（ｉ）の還元段階は、いかなる既知の方法で行われても良い。水素化ホウ素アルカリが好ましく、特に水素化ホウ素ナトリウムが使用される。

生成物（ｉ）のシアン化工程は、いかなる既知の方法で行われても良い。この工程は、好ましくは有機媒体中において、シアニドイオンの供給源であってアルカリ性ではないもの、または弱アルカリ性のものの存在下で、特にトリメチルシリルシアニドの存在下で行われる。

事実、出願人は、生成物（ｖ）（従来技術のように生成物（ｃ）ではない）を酸化するように反応条件を選択することにより、中間体（ｉ）中のＣ_１６炭素原子に関する立体特異的反応を引き起こし、よって不活性な１６’-Ｒエピマーによる汚染を回避できることを発見した。さらにまた、この立体特異性は、温度及び反応媒体には依存しておらず、このため調製方法を簡略化する。

（ｖ）が光化学経路によって酸化される場合は、使用する光はＵＶ／可視スペクトル内の、好ましくは２５４nmより高い、特に４００nmより高いものである。

本発明はまた、カタランチンをビンドリンと反応させることによる無水ビンブラスチンの調製方法にも関し、この方法は、ビンドリンが酸化されて式（V）：

の中間体（ｉ’）が得られるように反応条件を選択することを特徴とし、さらに式（V）の中間体（ｉ’）を還元して無水ビンブラスチンを得ることを特徴とする。

本発明はまた、式（VI）：

[式中、
・Ｒ’_１は、水素原子またはアルコキシ、アシル、ホルミルまたはハロゲノアシル基を表し、
・Ｒ’_２は、水素原子またはアルキル基を表し、
・Ｒ’_３及びＲ”_３が同一または相違し、個別に水素原子またはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシ基を表すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ”_３が共にカルボニル基を成すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ’_５が共に二重結合を成し、
・Ｒ’_４は、水素原子またはアルキルオキシカルボニル、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基、好ましくはアルキルオキシカルボニル基を表し、
・Ｒ’_５及びＲ”_５は、同一又は相違し、個別に水素原子またはヒドロキシル、アルカノイルオキシル、エチルまたは２-ヒドロキシエチル基を表し、
・Ｒ’_６は、水素原子またはエチル、２-ヒドロキシエチルまたはアセチル基を表し、
・Ｒ_１は、水素原子またはアルキル、ホルミルまたはアシル基、好ましくは水素またはアルキル基を表し、
・Ｒ_２は、水素原子またはアルコキシ基を表し、
・Ｒ_３は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_４及びＲ_３が共にエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ_４は水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_３及びＲ_４が共にエポキシブリッジを成し、
・Ｒ_６は、アルキルオキシカルボニル、ヒドラジド、アセタミド、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基を表し、
・Ｒ_５及びＲ_７は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表す]
の新規化合物（Ｂ）にも関する。

これらは、２１’位にて炭素に結合したシアニド基が存在する、ビンカアルカロイドの新規な誘導体である。これらの生成物は、容易に官能化され、よって細胞毒性レベルにおいて潜在的に重要な新規分子の製造を可能にするという利点を有する。

これらの生成物（Ｂ）は、求核化合物または求電子化合物のいずれによっても官能化可能である。

さらに、本発明は、式 VII：

２１’α-シアノ無水ビンブラスチン
の新規化合物にも関する。

これは、無水ビンブラスチンの誘導体、すなわち、２１’α-シアノ無水ビンブラスチンである。実際、出願人は、２１’α-シアノ無水ビンブラスチンの製造方法を開発しているが、これは容易に官能化可能であって、細胞毒性レベルにおいて潜在的に重要な新規誘導体の製造を可能にするものである。

２１’α-シアノ無水ビンブラスチンは、求核化合物または求電子化合物のいずれによっても官能化可能である。したがって、得られる可能性のある誘導体の範囲は非常に広範である。

この新規化合物（Ｄ）はまた、かなり安定であるので単離して純粋な結晶形態で得ることができるため、非常に重要である。誘導体の前駆体の結晶を得ることの利点は、この前駆体の官能化反応が、反応可能な残基が微量でも存在しない、清浄な反応媒体内で実行可能なことである。

２１’α-シアノ無水ビンブラスチンは、無水ビンブラスチンまたはこれらの誘導体において、Ｃ_１５’、Ｃ_２０’及びＣ_２１’位にて一置換または多置換された誘導体の製造を可能にする。

本発明はまた、カタランチンをビンドリンと反応させることによる２１’α-シアノ無水ビンブラスチンの調製方法に関し、この方法は、ビンドリンが酸化されて式（V）の中間体（ｉ’）が得られるように反応条件が選択され、中間体（ｉ’）をシアン化して生成物（Ｄ）を得ることを特徴とする。

シアン化は、好ましくは有機媒体中において、シアニドイオンの供給源であってアルカリ性ではないもの、または弱アルカリ性のものの存在下で、特にトリメチルシリルシアニドの存在下で行われる。
本発明は、下記の非限定的実施例の助けを借りてよりよく理解されるであろう。

（実施例１）
０．４７３mmolのカタランチン塩酸塩（１７６mg）、０．４７３mmolのビンドリン（２１６mg）及び０．４７３mmolのトリフェニルピリリウムハイドロゲンスルファート（１９２mg）を、２５mlの０．１Ｎ塩酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。６時間３０分間照射した後、媒体をジクロロメタンで抽出した。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応媒体を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。残渣を０．５Ｎ塩酸に溶解させ、ジエチルエーテルで洗浄した。アンモニアを添加して水相をアルカリ性とし、ジクロロメタンで抽出した。
残渣（３３７mg、０．４２６mmol、９０％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。無水ビンブラスチンの白色結晶２９０mg（０．３６６mmol；収率７７％）が回収された。

（実施例２）
０．５３７mmolのカタランチン塩酸塩（２００mg）、０．５３７mmolのビンドリン（２４５mg）、０．０５４mmolのジメチルビオロゲン（１４mg）及び０．０２６mmolのトリフェニルピリリウムハイドロゲンスルファート（１１mg）を、５０mlの０．１Ｎ硫酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。２時間３０分間照射した後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、１０mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。残渣を０．５Ｎ塩酸に溶解させ、ジエチルエーテルで洗浄した。アンモニアを添加して水相をアルカリ性とし、ジクロロメタンで抽出した。
残渣（４０３mg、０．５０９mmol、９５％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。無水ビンブラスチンの白色結晶３４０mg（０．４３０mmol；収率８０％）が回収された。

（実施例３）
０．５３７mmolのカタランチン塩酸塩（２００mg）、０．５７３mmolのビンドリン（２４５mg）及び０．０５４mmolの２，６-ビス-（４-メトキシフェニル）-４-フェニルピリリウムハイドロゲンスルファート（２５mg）を、５０mlの０．１Ｎ硫酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。２時間の照射後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、１０mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。残渣を０．５Ｎ塩酸に溶解させ、ジエチルエーテルで洗浄した。アンモニアを添加して水相をアルカリ性とし、ジクロロメタンで抽出した。
残渣（４０８mg、０．５１６mmol、９６％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。無水ビンブラスチンの白色結晶３４０mg（０．４３０mmol；収率８０％）が回収された。

（実施例４）
０．８０６mmolのカタランチン塩酸塩（３００mg）、０．８０６mmolのビンドリン（３６７mg）及び０．０４０mmolのフルオレセイン（５％）を、５０mlの０．１Ｎ硫酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。３時間の照射後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。
残渣（６１３mg、０．７７４mmol、９６％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。無水ビンブラスチンの白色結晶５２３mg（０．６６１mmol；収率８２％）が回収された。

（実施例５）
０．２６８mmolのカタランチン塩酸塩（１００mg）、０．２６８mmolのビンドリン（１２２mg）及びリボフラビン-５’-ホスファート二水物（ＦＭＮ）のナトリウム塩０．０２９mmol（５％）を、５０mlの０．１Ｎ塩酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。４時間の照射後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。
残渣（１７１mg、０．２１６mmol、８０％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させたところ、無水ビンブラスチンの白色結晶１４０mg（０．１７６mmol；収率６６％）が回収された。

（実施例６）
０．５７７mmolのカタランチン塩酸塩（２１５mg）、０．５７７mmolのビンドリン（２６３mg）及びＮ，Ｎ’-ジメチル-２，７-ジアザピレニウム（ＤＡＰ）の二塩化物０．０２９mmol（５％）を、６０mlの０．１Ｎ塩酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。３時間３０分間照射した後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。
シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって、残渣（３７９mg、０．４７９mmol、８３％）を精製し、無水エタノールから再結晶させ、無水ビンブラスチンの白色結晶２７４mg（０．３４６mmol；収率６０％）が回収された。

（実施例７）
０．３５７mmolのカタランチン塩酸塩（１２０mg）、０．３５７mmolのビンドリン（１５２mg）及び２gのＴｉＯ_２を、２５mlの０．１Ｎ塩酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞３４５nmの光を照射した。２時間照射の後、媒体をジクロロメタンで抽出した。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。
シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって、無水ビンブラスチン８５mg（０．１０７mmol；収率３０％）が得られた。

（実施例８）
０．４４８mmolのカタランチン塩酸塩（１６６mg）、０．４４８mmolのビンドリン（２０４mg）及び触媒量（５％）のローダミン６Ｇを、６０mlの０．１Ｎ硫酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。３時間３０分間照射した後、媒体をジクロロメタンで抽出した。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。
フラッシュクロマトグラフィーによって、無水ビンブラスチン１２４mg（０．１５７mmol；収率３５％）が得られた。

（実施例９）
０．５３７mmolのカタランチン塩酸塩（２００mg）、０．５３７mmolのビンドリン（２４５mg）及び０．０５４mmolのジメチルビオロゲン（１４mg）を、５０mlの０．１Ｎ塩酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞３６０nmの光を照射した。２時間照射の後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。
残渣（３９１mg、０．４９４mmol、９２％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。無水ビンブラスチンの白色結晶３４５mg（０．４３５mmol；収率８１％）が回収された。

（実施例１０）
０．５３７mmolのカタランチン塩酸塩（２００mg）及び０．５７３mmolのビンドリン（２４５mg）を、５０mlの０．１Ｎ塩酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞３６０nmの光を照射した。２時間の照射後、反応を終了させた。

水相を、０℃にて、３mlのモル炭酸ナトリウムに溶解させた水素化ホウ素ナトリウム（２等量）の過剰量を滴々と添加して使用することによって還元した。反応混合物を、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。残渣を０．５Ｎ塩酸に溶解させ、ジエチルエーテルで洗浄した。アンモニアを添加して水相をアルカリ性とし、ジクロロメタンで抽出した。
残渣（３８３mg、０．４８３mmol、９０％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。無水ビンブラスチンの白色結晶３３２mg（０．４１９mmol；収率７８％）が回収された。

（実施例１１：２１’α-シアノ無水ビンブラスチンの調製）
０．５３７mmolのカタランチン塩酸塩（２００mg）、０．５７３mmolのビンドリン（２４５mg）及び０．０５４mmolのジメチルビオロゲン（１４mg）及び０．０２８mmolのトリフェニルピリリウムハイドロゲンスルファート（１１mg）を、５０mlの０．１Ｎ硫酸に加えた。全混合物に、パイレックス（登録商標）照射フラスコ中、酸素雰囲気下で、波長λ＞４００nmの光を照射した。２時間３０分間の照射後、反応を終了させた。

水相を、テトラフルオロホウ酸リチウムで飽和させ、ジクロロメタンで抽出した。１００μl（１．３４mmol、２等量）のトリメチルシリルシアニド、ＴＭＳＣＮを含有する１５mlのジクロロメタン溶液を、反応媒体に添加した。有機相を０．１Mの炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥させ、減圧下、２０℃にて蒸発させた。残渣を０．５Ｎ塩酸に溶解させ、ジエチルエーテルで洗浄した。アンモニアを添加して水相をアルカリ性とし、ジクロロメタンで抽出した。
残渣（４０３mg、０．５０９mmol、９５％）中、唯一の生成物を、無水エタノールから再結晶させた。２１’α-シアノ無水ビンブラスチンの白色結晶３４０mg（０．４３０mmol；収率８０％）が回収された。

Claims

一般式（I）：

[式中、
・Ｒ’_１は、水素原子またはアルコキシ、アシル、ホルミルまたはハロゲノアシル基を表し、
・Ｒ’_２は、水素原子またはアルキル基を表し、
・Ｒ’_３及びＲ”_３が同一または相違し、個別に水素原子またはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシ基を表すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ”_３が共にカルボニル基を成すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ’_５がエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ’_４は、水素原子またはアルキルオキシカルボニル、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基、好ましくはアルキルオキシカルボニル基を表し、
・Ｒ’_５及びＲ”_５は、同一又は相違し、個別に水素原子またはヒドロキシル、アルカノイルオキシル、エチルまたは２-ヒドロキシエチル基を表し、
・Ｒ’_６は、水素原子またはエチル、２-ヒドロキシエチルまたはアセチル基を表し、
・Ｒ’_７は、水素原子またはシアニド基を表し、
・Ｒ_１は、水素原子またはアルキル、ホルミルまたはアシル基、好ましくは水素またはアルキル基を表し、
・Ｒ_２は、水素原子またはアルコキシ基を表し、
・Ｒ_３は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_４及びＲ_３が共にエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ_４は水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_３及びＲ_４が共にエポキシブリッジを成し、
・Ｒ_６は、アルキルオキシカルボニル、ヒドラジド、アセタミド、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基を表し、
・Ｒ_５及びＲ_７は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表す]
に相当する生成物（Ａ）並びにその酸との付加塩及びその第四級アンモニウム塩の調製方法であって、一般式（II）：

[式中、Ｒ’_１、Ｒ’_２、Ｒ’_３、Ｒ”_３、Ｒ’_４、Ｒ’_５、Ｒ”_５及びＲ’_６は上記の通りである]
に相当する生成物（ｃ）を、一般式（III）：

[式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６及びＲ_７は上記の通りである]
に相当する生成物（ｖ）と反応させることを特徴とし、
生成物（ｖ）が酸化されて一般式（IV）：

[式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７及びＲ’_１、Ｒ’_２、Ｒ’_３、Ｒ”_３、Ｒ’_４、Ｒ’_５、Ｒ”_５及びＲ’_６は上記の通りである]
の中間体（ｉ）が得られるように反応条件を選択し、さらに式（IV）の生成物（ｉ）を還元又はシアン化することにより生成物（Ａ）を得る方法。
生成物（ｖ）が、光化学経路で酸化されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
生成物（ｖ）が、有機金属経路で酸化されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
生成物（ｖ）が、電気化学経路で酸化されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
光化学経路による酸化が、光及び任意に有機または無機の増感剤の存在下で行われることを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
無機増感剤が、遷移金属または半導体、好ましくはルテニウム錯体または酸化チタンであることを特徴とする請求項５に記載の方法。
有機増感剤が、好ましくはキサンテート、ピリリウム、ピリジニウム、フラビン、芳香族化合物、ケトン及びキノン、並びにこれらの塩から選択される、特にフルオレセイン、トリフェニルピリリウム、４-（４-メトキシフェニル）-２，６-ジフェニルピリリウム、２，６-ビス-（４-メトキシフェニル）-２，６-ジフェニルピリリウム、及び２，４，６-トリス-（４-メトキシフェニル）-ピリリウムから選択される、着色剤であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
光が、ＵＶ／可視スペクトル内の、好ましくは２５４nmより大きい、特に４００nmより大きい波長を有することを特徴とする請求項５に記載の方法。
還元工程を、水素化ホウ素アルカリ、好ましくは水素化ホウ素ナトリウムの補助の下に実施することを特徴とする請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
生成物（Ａ）が無水ビンブラスチンであり、
（ｃ）がカタランチンであり、
（ｖ）がビンドリンであり、
生成物（ｉ）が式（V）：

に相当することを特徴とする請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
一般式（VI）：

[式中、
・Ｒ’_１は、水素原子またはアルコキシ、アシル、ホルミルまたはハロゲノアシル基を表し、
・Ｒ’_２は、水素原子またはアルキル基を表し、
・Ｒ’_３及びＲ”_３が同一または相違し、個別に水素原子またはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシ基を表すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ”_３が共にカルボニル基を成すか、あるいは、Ｒ’_３及びＲ’_５が共に二重結合を成し、
・Ｒ’_４は、水素原子またはアルキルオキシカルボニル、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基、好ましくはアルキルオキシカルボニル基を表し、
・Ｒ’_５及びＲ”_５は、同一又は相違し、個別に水素原子またはヒドロキシル、アルカノイルオキシル、エチルまたは２-ヒドロキシエチル基を表し、
・Ｒ’_６は、水素原子またはエチル、２-ヒドロキシエチルまたはアセチル基を表し、
・Ｒ_１は、水素原子またはアルキル、ホルミルまたはアシル基、好ましくは水素またはアルキル基を表し、
・Ｒ_２は、水素原子またはアルコキシ基を表し、
・Ｒ_３は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_４及びＲ_３が共にエポキシブリッジ又は二重結合を成し、
・Ｒ_４は水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表すか、あるいは、Ｒ_３及びＲ_４が共にエポキシブリッジを成し、
・Ｒ_６は、アルキルオキシカルボニル、ヒドラジド、アセタミド、ヒドロキシメチルまたはアルカノイルオキシメチル基を表し、
・Ｒ_５及びＲ_７は、水素原子もしくはヒドロキシルまたはアルカノイルオキシル基を表す]
の新規化合物（Ｂ）。
式（VII）：

２１’α-シアノ無水ビンブラスチン
の新規化合物。
カタランチンをビンドリンと反応させることによる、請求項１２に記載の新規化合物（Ｄ）の調製方法であって、ビンドリンが酸化されて式（V）の中間体（ｉ’）が得られるように反応条件が選択され、中間体（ｉ’）をシアン化して生成物（Ｄ）を得ることを特徴とする方法。
シアン化工程が、好ましくは有機媒体中において、シアニドイオンの供給源であってアルカリ性ではないもの、または弱アルカリ性のものの存在下で、特にトリメチルシリルシアニドの存在下で行われることを特徴とする請求項１から８及び１３のいずれか一項に記載の方法。