JP2010516693A - Ｋｉｔ阻害剤に対して獲得した抵抗性を有する癌の処置 - Google Patents

Abstract

本発明は、ＫＩＴ阻害剤に対し抵抗性を獲得した癌をＤＡＳＴの有効量を投与することによって処置する組成物および方法を提供する。

Description

癌は、二つの遺伝性性質、すなわち（１）制御されない細胞分裂と、そして（２）隣接組織中への直接の発育（浸潤）によるか、または離れた部位へ細胞の移動（転移）により他の組織を浸潤するこれらの細胞の能力によって特徴付けられる病気のクラスである。高増殖性質は最初に腫瘍または新生物を発生させる。腫瘍は、その細胞がまわりの組織を例えばルーズに破壊し、血液またはリンパ系へ侵入することにより、または体内の他の部位において二次腫瘍を形成することによって浸潤する能力を獲得する時の癌と考えられる。規制されない発育は、他の機能の中でも細胞分裂、細胞サイクルをコントロールする生存遺伝子に対して突然変異を招来する傷ついたＤＮＡによって引起こされる。遺伝または獲得されることができる一以上のこれらの突然変異はコントロールされない細胞分裂および癌へ導くことができる。

癌はそれらが発生する組織および細胞タイプに従って分類することができる。上皮から発達する癌は癌腫と呼ばれ、結合および筋組織からのそれらは肉腫と呼ばれる。追加の癌は造血細胞から発生する癌（例えば白血病）および神経系の癌を含む。

一般に、癌は異常細胞の集団が継続的な突然変異および選択のサイクルを通じて一層異常な細胞に進化する過程の間に発生するように見える。突然変異する時癌を生ずる１００以上の異なる遺伝子が同定されている。これらのいわゆる癌臨界遺伝子は、多数のそして並列的経路を含んでいる高度に複雑なプロセスである、細胞分裂の調節において役割を果す。これらは成長因子、サイトカイン、ホルモン等を含む。

癌は悪性病の部位および性格と、転移があるかないかによって多くの異なる症状を引起こし得る。決定的診断は通常生検によって得た組織の顕微鏡検査を必要とする。一旦診断されると、癌は通常外科手術、化学療法および／または放射線によって処置される。

もし処置しなければ、大部分の癌は最終的に死を引起こす。癌は先進国において主要な死因の一つである。Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅにより、約９８０万人のアメリカ人が癌の履歴を持って２００１年１月に生存していたと推計されている。２００５年だけで約１，３７２，９１０例の癌の新しい例が診断されるものと見込まれた。２００５年には、殆ど６０万人のアメリカ人が癌で死亡した。これは死亡した人４人に約１人の割合である。癌の多数の形が避けることができる環境要因に関連している。煙草の喫煙は他のどの環境要因よりも多数の癌へ導く。

キナーゼ阻害剤が成功的に癌の処置に使用されている（例えば、Ｄｒｅｖｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ，２００３，４，１１３−１２１）。しかしながら一部の患者は薬物活性に対する抵抗性を獲得する。一態様において本発明は、癌を有する対象に対しＤＡＳＴの有効量を投与することを含み、ここで前記癌はＫＩＴチロシンキナーゼ阻害剤に対して抵抗性を獲得している、それを必要とする対象の癌を処置する方法を提供する。チロシンキナーゼ阻害剤はそのキナーゼ活性をブロックまたは減少する薬物（すなわち化合物）である。一般に“チロシンキナーゼ活性”とは、ＡＴＰ（または他のホスフェートドナー）からチロシン残基へホスフェートの移動を触媒することにより、それ自身、またはトランスホスフォリレートレセプターサブユニット（または他の基質）を自動ホスフォリー化するチロシンキナーゼの能力をいう。

以前成功的に癌の処置に使用されてきたキナーゼ阻害剤に対し癌が抵抗性を獲得した多数の良く証明された症例が存在する。術語“獲得した抵抗性”とは、癌が薬物の効果に対し、ある期間それへ暴露された後抵抗性になる、および／または実質的に低応答性になることを指示する。例えば、胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、腸管の間葉腫瘍および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）は、ＢＣＲ−ＡＢＬ，ＡＢＬ，ＫＩＴおよびＰＤＧＦＲのキナーゼ活性を阻害するチロシンキナーゼ阻害剤である、ｉｍａｔｉｎｉｂ（ＳＴＩ５７１またはＧｌｅｅｖａｃ）で処置される。患者は当初この処置から利益を受けることができるが、多数の患者は後にこの剤に対する抵抗性を発現することが示された。一部のケースにおいては、この獲得した抵抗性は癌に関係した遺伝子の二次的突然変異から招来することが示された。例えば、多数のＧＩＳＴ患者はＫＩＴまたはＰＤＧＦＲＡ遺伝子のどちらかにおいて活性化突然変異を持っている。ｉｍａｔｉｎｉｂに対する獲得した抵抗性を有するＧＩＳＴ患者の研究は、ＫＩＴキナーゼドメインにおける二次的突然変異を示した。例えば、Ａｎｔｏｎｅｓｃｕ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１１（１１）：４１８２−４１９０，２００５およびＨｅｉｎｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２４（２９），４７６４−４７７２，２００６を見よ。ＢＣＲ−ＡＢＬにおける第２部位突然変異はＣＭＬにおけるｉｍａｔｉｎｉｂ抵抗性の支配的メカニズムである。例えばｉｍａｔｉｎｉｂ抵抗性に関連した突然変異を記載する、Ｇｏｒｒｅ ｅｔ ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９３：８７６−８８０，２００１を見よ。獲得した抵抗性は、ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ（ｉｒｅｓｓａ）またはｅｒｉｏｔｉｎｉｂ（Ｔａｒｃｅｖａ）のようなＥＧＦＲキナーゼ阻害剤で処置された患者を含む、他の癌薬物でも観察されている。例えばＫｏｂａｙａｓｈｉ ｅｔ ａｌ，Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．ｍｅｄ．３２５：７９２，２００５を見よ。Ｐａｏ ｅｔ ａｌ．（Ｐｌｏｓ Ｍｅｄ．２，ｅ７３，２００５）は進行性肺腫瘍を有する患者はＥＧＦＲにおける一次薬物感染受容性突然変異に加え、薬物抵抗性へ導いたキナーゼドメインにおける二次的突然変異を含んでいたことを観察した。

それに対する薬物抵抗性が獲得できるＫＩＴ阻害剤の例は、限定でなく、例えばｉｍａｔｉｎｉｂメシレートおよびその誘導体および塩、ＰＰ１（４−アミノ−５−（４−メチルフェニル）−７−（ｔ−ブチル）ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン），ＭＬＮ５１８（ＣＴ５３５１８），ＰＤ１８０９７０，ＳＵ１１２４８１，ＳＵ５４１４，ＳＵ６５９７，ＳＵ６６６３，ＳＵ６５６１を含む。Ｋｒｙｓｔｔａｌ ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２００１，６１：３６６０−３６６８をも見よ。

抵抗性突然変異はキナーゼ触媒ドメインにおいてもしばしば起こり、その阻害剤を妨害または阻害剤との相互作用を弱める、ＫＩＴに対する抵抗性二次突然変異が報告されている。これら二次的突然変異は、ＡＴＰ結合ポケットをガードし、そして阻害剤と相互作用する部位を含むことができるアミノ酸残基である、ゲートキーパー残基においてしばしば発生する。例えば、Ｎｏｂｌｅ ｅｔ ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０３：１８００−１８０５，２００４を見よ。

どのようなメカニズムにも拘束されるものではないが、抵抗性または獲得した抵抗性に関連するＫＩＴ遺伝子中の突然変異の例は、限定でなく、例えばエクソン１３，１４および／または１７における突然変異；残基６５４，６７０，７１６，８１６，８２０，８２２および８２３；残基約６５０−６５４；残基約６７０−６７４；残基約８１６−８２４において；Ｖ６５４Ａ（エクソン１３）、Ｔ６７０１（エクソン１４）、Ｔ６７０Ｅ，Ｄ７１６Ｎ，Ｓ７０９Ｆ（エクソン１４），Ｄ８１６Ｇ，Ｄ８１６Ｅ（エクソン１７），Ｃ８０９Ｇ，Ｄ８１６Ｈ，Ｄ８１６Ｖ，Ｄ８２０Ａ，Ｄ８２０Ｅ，Ｄ８２０Ｙ，Ｄ８２０Ｇ，Ｎ８２２Ｋ，Ｙ８２３Ｄ（エクソン１７）のようなＡループ（活性化）における突然変異；および／またはそのような位置または隣接位置における欠失および他のアミノ酸置換を含む。一般に、ＫＩＴ阻害剤に対する抵抗性または獲得した抵抗性に関連した一次および／または二次ＫＩＴ遺伝子突然変異を有するいかなる癌も本発明に従った化合物で処置することができる。

実施例に示すように、突然変異はＣ−ＫＩＴタンパク質に対するＩｍａｔｉｎｉｂ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）のようなキナーゼ阻害剤の親和性を減少させ、それにより薬物の治療有効性を減少させる。表１は、Ｉｍａｔｉｎｉｂ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）の結合親和性が減少した特定例を示す。影響された組織（例えば癌）がＫＩＴ阻害剤に対して抵抗性または低応答性になるどのような障害もＤＡＳＴまたはその誘導体で処置することができる。

ＫＩＴ（Ｃ−ＫＩＴ，肥満細胞成長因子受容性、または幹細胞成長因子受容体としても知られる）は、Ｈａｒｄｙ−Ｚｕｃｋｅｒｍａｎ ４ネコ肉腫ウイルスのプロウイルスのヒトホモロジーである。ＫＩＴは、多数の組織において発現され、そして正常造血、メラニン産生および配偶子発生に必要な膜横断チロシンキナーゼ受容体をコードする。この遺伝子自体は４ｑ１１−ｑ１２にマップされ、２１のエクソンを含み、そして交番にスプライスされる。例えば、Ｖａｎｄｅｎｂａｒｋ ｅｔ ａｌ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，７：１２６６，１９９２を見よ。

ＫＩＴにおいて過多発現および／またはゲイン−オブ−ファンクション突然変異はリガンド非依存性チロシンキナーゼ活性、ＫＩＴの自動ホスフォリル化、コントロールされない細胞増殖、および下流信号経路の刺激を招来し得る。例えば、ＫＩＴは悪性および良性胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）の両方において過多発現された。例えば、Ｋｏｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｇｕｔ，２００４，５３：２３５−２４５を見よ。ＫＩＴはまた骨髄白血病、肥満細胞腫瘍、ＳＣＬＣ，胚芽細胞腫瘍、乳癌および神経芽ストローマにおいても発現される。

ＫＩＴ遺伝子の活性化突然変異は、ヒト消化管の最も普通な間葉新生物であるＧＩＳＴの多数のタイプに関連している。例えば、Ｈｉｒｏｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７９−５７７−５８０，１９９８は、間葉腫瘍４９例のうち、その９４％が活性化ＫＩＴを発現したことを示した。ＧＩＳＴは良性および悪性タイプを含み、そして消化管のすべてのレベル（例えば胃、小腸、大腸、直腸等）で発現する腫瘍のスペクトルを含んでいる。

最初はＫＩＴ阻害剤に感受性であるが、しかしそれに対する抵抗性を獲得した癌が本発明に従って処置されることができる。ＫＩＴ遺伝子のエクソン１１に（アミノ酸位置５５０−５８２から：例えば表２を見よ）、そしてもっと好ましくはコドン５５０−５６０内に突然変異を有する癌が特に適応している。特定例は、限定でなく、１）アミノ酸残基５５７−５５８欠失；２）アミノ酸残基５５１−５５５欠失；３）アミノ酸残基５５０−５５８欠失；４）アミノ酸残基５５９−５６０欠失；５）アミノ酸残基５５７−５６１欠失；６）アミノ酸残基５５４−５５８欠失；７）アミノ酸残基５５２−５５７欠失；８）Ｖ５５９Ｄ，Ｖ５５９ＡまたはＶ５５９Ｃを含む残基５５９における突然変異；９）Ｖ５５９Ｄ，Ｖ５６０ＥまたはＶ５６０Ｇを含む残基５９０における突然変異；１０）Ｗ５５７Ｓ単独、またはアミノ酸残基５５２−５５６欠失との組合せ；１１）Ｗ５５７Ｒを含むアミノ酸残基５５７における突然変異；１２）Ｌ５７６Ｐを含むアミノ酸残基５７６における突然変異；１３）ＩｎｓＱＬ５７６−５７７を含む。これら突然変異は単独か、または特定的に言及した突然変異のどれかを含む他の突然変異との組合せであることができる。Ｌａｓｏｔａ ｅｔ ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈ．，１５４：５３−６０，１９９９を見よ。

他のＫＩＴ突然変異に関連した薬物抵抗性癌、特にＫＩＴ阻害剤に感受性の癌も同様に処置することができる。これらは、例えば、全身性マストサイト−シス、例えばＦ５２２Ｃ突然変異（ＡＲＩｎ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，２００４，１９３：３２２２−３２２５）、およびＫ５０９１（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ，２００５，Ｌｅｎｋ．Ｒｅｓ．Ｓｅｐｔ．２１）を持つもの；例えばＮ８２２ＫおよびＹ８２３Ｄのようなアミノ酸残基８２２および８２３にｉｍａｔｉｎｉｂメシレート感受性突然変異を持つ睾丸セミノーマ（例えばＫｅｍｍｅｒ ｅｔ ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．，２００４，１６４：３０５−３１４，２００４）を含む。

ＫＩＴ突然変異を有する癌（例えばＧＩＳＴ）に関連した遺伝子突然変異の解析はルーチンに決定することができる。例えば、ヒトＫＩＴ遺伝子の発表された配列を用いて特定の領域を増幅するためにＰＣＲを利用することができる。例えばＡｎｄｒｅ ｅｔ ａｌ，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，１９９７，３９：２１６−２２６を見よ。エクソン１１の増幅については、例えばＬａｓｏｔａ ｅｔ ａｌ，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈ．，１５４：５３−６０，１９９９を見よ。

ジアリール尿素は、セリン−スレオニンキナーゼ阻害剤の一クラスであり、この分野で知られたチロシンキナーゼ阻害剤でもある。以下の刊行物は、癌のような高増殖病の処置のための薬剤組成物の活性成分としてそれらの有用性を例証する。

〔文献リスト１〕

オメガカルボキシアリールジフェニル尿素はＷＯ００／４２０１２（２０００年７月２０日発行）およびＷＯ００／４１６９８（２０００年７月２０日発行）に記載されており、ここでは４−｛４−〔３−（４−クロロー３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシ酸メチルアミドと呼ぶジフェニル尿素、ＤＡＳＴはＷＯ０５／００９９６１（２００５年２月３日発行）に開示され、そしてｒａｆ，ＶＥＧＦＲ−２，ｐ３８およびＰＤＧＦＲキナーゼの強力な阻害剤として記載されている。これらの酵素は癌を含む高増殖病の処置のために関心ある分子標的である。ＤＡＳＴの固体分散体はＷＯ０６／０２６５００（２００６年３月９日発行）に記載されている。

それにもかかわらず本発明は、責任ある分子メカニズムに関係なく、ＫＩＴ阻害剤に対して抵抗性を獲得した、上で述べたような癌を処置するためのＤＡＳＴの使用に関する。

本発明は、それを必要とする対象へＤＡＳＴの有効量を投与することを含む、癌の処置方法を提供する。

ｉｍａｔｉｎｉｂで処置することができる癌の例は、限定でなく、加速期慢性骨髄性白血病；急性赤血球白血病；急性リンパ芽球および急性単球白血病；緩解期急性リンパ芽球白血病；急性リンパ球白血病；急性単芽球白血病；急性骨髄性白血病；急性骨髄白血病；前立腺腺癌；頭頸部のアデノイドのう胞性癌；進行した胃腸間質腫瘍；原因不明骨髄腫；骨幹端炎；退生稀突起膠腫；星状細胞腫；Ｂ細胞成人急性リンパ芽球白血病；芽期慢性骨髄性白血病骨転移；脳腫瘍；乳癌；中枢神経系癌；小児急性リンパ芽球白血病；緩解期小児急性リンパ芽球白血病；小児中枢神経系胚芽細胞腫瘍；小児慢性骨髄性白血病；小児軟組織肉腫；脊索腫；慢性好酸性白血病（ＣＥＬ）；慢性特発性骨髄線維症；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄単球白血病；慢性期慢性骨髄性白血病；結腸癌；結直腸癌；皮膚線維肉腫；隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）；類腱腫；好酸球増加症；流行性カポジ肉腫；本質的血小板血症；Ｅｗｉｎｇファミリ腫瘍；延長段階小細胞肺癌；ファロピアンチューブ癌；家族性高好酸球増加症；線維肉腫；胃腺癌；胃腸新生物；胃腸間質腫瘍；膠芽腫；グリオーム；神経膠肉腫；グレードＩ髄膜腫；グレードＩＩ髄膜腫；グレードＩＩＩ髄膜腫；造血リンパ癌；高グレード小児脳星状細胞腫；過多好酸性血病症候群；特発性肺線維症；Ｌ１成人急性リンパ芽球白血病、Ｌ２成人急性リンパ芽球白血病；急性リンパ球白血病Ｌ２；慢性骨髄白血病；慢性期骨髄白血病；肝障害および新生物；肺病；慢性骨髄白血病のリンパ様胚芽期；男性乳癌；悪性線維組織球腫；肥満細胞腫；髄膜血管細胞腫；髄膜腫；転移癌；転移性固形腫瘍；骨髄線維症；慢性期骨髄白血病；骨髄化生；好酸性血症を有する骨髄増殖障害；神経芽腫；非Ｔ非Ｂ小児急性リンパ芽球白血病；稀突起膠腫；骨肉腫；卵巣胚芽細胞腫瘍；卵巣低悪性可能性腫瘍；卵巣新生物；膵臓癌；骨盤新生物；腹腔癌；腹腔新生物；フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ球白血病；骨髄芽発症にあるフィラデルフィア陽性慢性骨髄白血病；多血症ベラ；肺線維症；再発成人脳腫瘍；再発性成人軟組織肉腫；再発性乳癌；再発性結腸癌；再発性食道癌；再発性胃癌；再発性多形態膠芽腫（ＧＢＭ）；再発性カポジ肉腫；再発性黒色腫；再発性メルケル細胞癌；再発性卵巣上皮癌；再発性膵臓癌；再発性前立腺癌；再発性直腸癌；再発性唾液腺癌；再発性小細胞肺癌；Ｅｗｉｎｇファミリの再発性腫瘍；再発性子宮肉腫；再発性慢性骨髄性白血病；リュウマチ性関節炎；唾液腺アデノイドのう胞性癌；肉腫；小細胞肺癌；ステージＩＩ黒色腫；ステージＩＩメルケル細胞癌；ステージＩＩＩ成人軟組織肉腫；ステージＩＩＩ食道癌；ステージＩＩＩメルケル細胞カルシノーマ；ステージＩＩＩ卵巣上皮癌；ステージＩＩＩ膵臓癌；ステージＩＩＩ唾液腺癌；ステージＩＩＩＢ乳癌；ステージＩＩＩＣ乳癌；ステージＩＶ成人軟組織肉腫；ステージＩＶ乳癌；ステージＩＶ結腸癌；ステージＩＶ食道癌；ステージＩＶ胃癌；ステージＩＶ黒色腫；ステージＩＶ卵巣上皮癌；ステージＩＶ前立腺癌；ステージＩＶ直腸癌；ステージＩＶ唾液腺癌；ステージＩＶＡ膵臓癌；ステージＩＶＢ膵臓癌；全身性肥満細胞症；Ｔ細胞小児急性リンパ芽球白血球；睾丸癌；甲状腺癌；切除不能または転移性悪性胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；特定されない成人固形腫瘍；未処置小児脳幹膠腫；子宮癌肉腫；および子宮肉腫を含む。

語句“有効量”は、癌のいかなる症状または局面をも処置するのに有効なＤＡＳＴの量を指示する。有効量はルーチンに決定することができる。投与量および投与方法のさらなるガイダンスは後に提供される。

術語“処置”は慣用的に使用される。例えば、ここで述べたすべての癌を含む癌に関連した一以上の症状を撲滅、緩解、減少、緩和、改善等を行う目的のための対象の管理またはケアである。ＤＡＳＴの有効量の投与は、限定でなく、腫瘍後退を惹起し；細胞死滅を惹起し；アポトーシスを惹起し；壊死を惹起し；細胞増殖の阻害；腫瘍成長の阻害；腫瘍転移の阻害；腫瘍移動の阻害；腫瘍浸潤の阻害；病気進行の減少；病気の安定化；血管新生の減少または阻害；患者生存の延長；患者クオーリティ・オブ・ライフの増強；癌に関連した副症状の減少；および上述した局面のいずれかの頻度、重篤度、強度および／または期間の減少を含む、癌病の一以上の局面を処置することができる。

癌のタイプおよび原因に関係なく、そしてそれに関係する遺伝子損傷に関係なく、どんな癌も本発明に従って処置することができる。処置することができることができる癌の例は、限定でなく、ＧＩＳＴ、急性骨髄性白血病、肥満細胞腫瘍、ＳＣＬＣ、胚芽細胞腫瘍、乳癌、神経芽腫、鼻腔リンパ腫等である。

処置することができる癌は、例えば一次癌；第２の転移部位において一次癌から発生した癌；外科手術（例えば完全除去、外科的切除等）によって処置された癌；化学療法、放射線、高周波切除、および／または薬物療法に付属する他のものによって処置された癌を含む。例えばマウス、ラット、イヌ、ネコ、非ヒト霊長類、サルおよびヒトを含むどのような対象も本発明に従って処置することができる。

ＫＩＴ阻害剤に対して獲得した抵抗性を有する癌を処置するＤＡＳＴの能力はルーチンに決定することができる。例えば、ＩＬ−３依存性ネズミ造血細胞ラインＢａ／Ｆ３は、構成的に活性なＫＩＴ（例えばアミノ酸残基５５７−５５８の欠失を有する）で形質転換される時、ＩＬ−３に依存せずに培養することができる。例えば、Ｔｓｕｊｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，１９９９，９３：１３１９−１３２９を見よ。ｉｍａｔｉｎｉｂのようなＫＩＴ阻害剤の存在下では、構成的に活性なＫＩＴポリペプチドを発現する細胞はＫＩＴ阻害の結果細胞死滅を受ける。ＫＩＴ阻害剤に対する抵抗性を付与する第２の突然変異の存在は細胞を救助する。二重突然変異（活性化；ＫＩＴ抵抗性）を発現する細胞がＤＡＳＴの存在下で培養される。死滅する細胞はＤＡＳＴに感受性であり、ＫＩＴ阻害剤に対して獲得した抵抗性を有する患者の処置においてその有用性を指示する。

本発明に従って処置することができる癌の特定例は、残基５５７−５５８の欠失を有し、そしてＶ６５４Ａ，Ｔ６７０１，Ｄ８２０Ｙ，Ｎ８２２ＫおよびＹ８２３Ｄのうちの少なくとも一つの突然変異を有する癌を含む。

本発明はまた、突然変異が活性化および／またはＫＩＴ阻害剤抵抗性変異である、ＫＩＴ遺伝子中の突然変異の存在を決定し、一以上のあらかじめ決定した突然変異を有する対象にＤＡＳＴを投与することを含む、癌を有する対象をＤＡＳＴで処置するかどうかを決定する方法を提供する。活性化およびＫＩＴ阻害剤抵抗性突然変異は上に記載した。ＫＩＴ阻害剤に対し抵抗性を有する対象は、活性化および／または抵抗性突然変異（上に列挙したような）の存在についてスクリーニングすることができ、この突然変異を有する対象はＤＡＳＴで処置することができる。

ここで使用される術語“ＤＡＳＴ”は、すべての多形、水和物、溶媒和物、薬学的に許容し得る塩またはそれらの組合せを含む、後記式Ｉの化合物、４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドを指称する。４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの代謝物、および慣用技術により調製された４−｛４−〔３−(４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル)ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドのプロドラッグも含まれる。

好適な薬学的に許容し得る塩は当業者に良く知られており、そして塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸、およびマンデル酸のような、無機および有機酸の塩を含む。加えて、薬学的に許容し得る塩は、アルカリカチオン（例えばＬｉ^＋，Ｎａ^＋またはＫ^＋）、アルカリ土類カチオン（例えばＭｇ^＋２，Ｃａ^＋２またはＢａ^＋２）、アンモニウムカチオンを含んでいる無機塩基の塩、それに脂肪族および芳香族置換アンモニウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルアミン、リジン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、１，４−ジアザビシクロ〔２．２．２〕オクタン（ＤＡＢＣＯ），１，５−ジアザビシクロ〔４．３．０〕ノン−５−エン（ＤＢＮ）、および１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデ−７−セン（ＤＢＶ）のプロトン化またはペルアルキル化から生ずるもののような４級アンモニウムカチオンを含んでいる塩のような有機塩基の酸塩を含む。

本発明の目的のための溶媒和物は、溶媒分子が固相の錯体を形成した化合物の形であり、そして限定でなく、例えばエタノールまたはメタノールを含む。水和物は溶媒分子が水である溶媒和物の特定の形である。

ＤＡＳＴの代謝物は、式Ｉに示した尿素窒素の一以上がヒドロキシルに基で置換された酸化誘導体を含む。ＤＡＳＴの代謝物はまた、式Ｉに示したメチルアミド基がヒドロキシル化され、その時代謝分解によって脱メチル化されたアナログを含む。ＤＡＳＴの代謝物は、式Ｉに示したピリジン窒素がＮ−オキシド形にあり（例えばヒドロキシ置換基）、この分野で１−オキソピリジンおよび１−ヒドロキシピリジンと呼ばれる構造へ導く酸化された誘導体をさらに含む。

ＤＡＳＴは生体内投与後親の活性剤として薬理学的な不活性な誘導体化（官能）基を供給するように分裂する不安定な官能基で修飾することができる。普通プロドラグと呼ばれるこれらの誘導体は、例えば活性剤や物理化学的性質を変えるため、活性剤を特定の組織へ標的化するため、望ましくない副作用を減らすため、および／または活性剤の薬物動態学的および薬力学的性質を変えるために（例えば溶解度、吸収性、生安定性および放出時間）（ここに参照として取り入れる“Ｐｈａｒｍａｃｅｎｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ”（Ｓｉｘｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ），ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ａｎｓｅｌ ｅｔ ａｌ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ発行、２７−２９頁参照）使用することができる。

好適なのは、Ｎ−脱アルキル化、Ｏ−脱アルキル化、脂肪族ヒドロキシル化、芳香族ヒドロキシル化、Ｎ−オキシド化、Ｓ−オキシド化、脱アミノ化、加水分解反応、グルクロナイド化、サルフェート化およびアセチル化を含む。例えばＧｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｍａｃｏｌｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（９ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ），ｅｄｉｔｏｒ Ｍｏｌｉｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ発行、１１−１３頁（１９９６）を見よ。

ＤＡＳＴの好適なプロドラグは、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはフェニルエステルを含むアルキルエステルのような、良く耐えられる薬学的に許容し得るエステルを含む。フェニル−Ｃ_１−Ｃ_５アルキルエステルのような追加エステルも使用し得るが、メチルエステルが好ましい。

プロドラグの合成方法は、ここに参照として取り入れるこの標題のレビューに記載される。

〔文献リスト２〕

式Ｉは以下のとおりである。

ＤＡＳＴ、その塩およびその薬剤組成物製造の実施例を以下に示す。

中間体の製造：４−アミノ−３−フルオロフェノール

アルゴンでパージした乾燥フラスコへ、１０％Ｐｄ／Ｃ（８０ｍｇ）を加え、次に３−フルオロ−４−ニトロフェノール（１．２ｇ，７．６４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（４０ｍＬ）中の溶液として加えた。混合物をＨ_２雰囲気下４時間かぎまぜた。混合物をセライトのパッドを通して濾過し、溶媒を減圧下蒸発し、所望の生成物を黄褐色固体として得た（９４０ｍｇ，７．３９ｍｍｏｌ：９７％収率）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）４．３８（ｓ，２Ｈ），６．２９−６．３５（ｍ，１Ｈ），６．４１（ｄｄ，Ｊ＝２．５，１２．７，１Ｈ），６．５２−６．６２（ｍ，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ）

出発物質１の製造：４−（４−アミノ−３−フルオロフェノキシ）ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミド

０℃へ冷却したＮ，Ｎ−ジメチルアセタミド（６ｍＬ）中の中間体４−アミノ−３−フルオロフェノール（５００ｍｇ，３．９ｍｍｏｌ）の溶液をカリウムｔ−ブロトキサイド（４４１ｍｇ，３．９ｍｍｏｌ）で処理し、褐色溶液を０℃で２５分かきまぜた。この混合物へ、ジメチルアセタミド（４ｍＬ）中の溶液として４−クロロ−Ｎ−メチル−２−ピリジンカルボキサマイド（５１６ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間加熱し、室温へ冷却し、Ｈ_２Ｏ（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４×４０ｍＬ）で抽出した。合併した有機層を水（２×３０ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、蒸発した赤褐色オイルを得た。^１Ｈ−ＮＭＲは残留ジメチルアセタミドの存在を示したので、このオイルをジエチルエーテル（５０ｍＬ）に取り、食塩水（５×３０ｍＬ）でさらに洗った。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、そして濃縮して所望の生成物、出発物質１を赤褐色固体９５０ｍｇとして得た。これを精製することなく次工程において使用した。

実施例１：ＤＡＳＴの製造：４−{４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ}ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミド

トルエン（３ｍＬ）中の４−（４−アミノ−３−フルオロフェノキシ）ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミド（出発物質１,１７７ｍｇ，０．６８ｍｍｏｌ）の溶液へ、４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニルイソシアネート（１５０ｍｇ，０．６８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で７２時間かきまぜた。反応液を減圧下濃縮し、残渣をジエチルエーテルとこねた。生成した固体を濾過して集め、４時間減圧乾燥し、標題化合物（１５５ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ，４７％収率）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）２．７８（ｄ，Ｊ＝４．９，３Ｈ），７．０３−７．０８（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ＝２．６，５．６，１Ｈ），７．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．７，１１．６．１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝２．５，１Ｈ），７．６０（ｓ，２Ｈ），８．０７−８．１８（ｍ，２Ｈ），８．５０（ｄ，Ｊ＝５．７，１Ｈ），８．７２（ｓ，１Ｈ），８．７４−８．８０（ｍ，１Ｈ），９．５０（ｓ，１Ｈ），；ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＥＳ）４８３．０６ｍ／ｚ＝（Ｍ＋１）

実施例２：塩の製造：４−{４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ}ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミド塩酸塩
遊離塩基の形の実施例１の化合物（２．０ｇ）を無水テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解し、そして４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（過剰）を加えた。溶液を次に減圧濃縮し、灰白色固体２．３２ｇを得た。この粗製塩を熱エタノール（１２５ｍＬ）に溶解し、活性炭を加え、混合物を１５分間還流へ加熱した。熱懸濁液をセライト５２１のパッドを通して濾過し、室温へ冷却した。フラスコをフリーザー中に一夜置いた。結晶性固体を吸引濾過して集め、エタノール次にヘキサンで洗い、空気乾燥した。母液を濃縮し、フリーザー中で一夜結晶化を許容した。固体の２番目のクロップを集め、最初のクロップと合併した。無色の塩を６０℃でオーブン中２日間減圧乾燥した。得られた塩酸塩の収量は１．７２ｇ（７９％）であった。融点２１５℃
元素分析：
計算値 実測値
Ｃ ４８．５７ ４８．６８
Ｈ ３．１１ ２．７６
Ｎ １０．７９ １０．６０
Ｃｌ １３．６５ １３．６３
Ｆ １４．６３ １４．８８

実施例３：塩の製造：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トルフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドメシレート
遊離塩基としての実施例１の化合物（２．２５ｇ）をエタノール（１００ｍＬ）に溶解し、メタンスルホン酸のストック溶液（過剰）を加えた。溶液を次に減圧濃縮し、黄色オイルを得た。エタノールを加え、くり返し濃縮し、灰白色固体２．４１ｇを得た。粗製塩を熱エタノール（〜１２５ｍＬ）に溶解し、結晶化のためゆっくり冷却した。室温に達した後、フラスコを一夜フリーザー中に置いた。無色結晶性物質を吸引濾過により集め、フイルターケーキをエタノール、次いでヘキサンで洗い、風乾し、物質２．０５ｇを得た。このものは６０℃で一夜真空オーブン中で乾燥した。融点２３１℃
元素分析：
計算値 実測値
Ｃ ４５．６４ ４５．３４
Ｈ ３．３１ ３．０８
Ｎ ９．６８ ９．４４
Ｃｌ ６．１２ ６．０８
Ｆ １３．１３ １３．４２
Ｓ ５．５４ ５．５９

実施例４：塩の製造：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアシドフェニルスルホン酸塩
遊離塩基として実施例１の化合物（２．２５ｇ）をエタノール（５０ｍＬ）に懸濁し、エタノール（５０ｍＬ）中のベンゼンスルホン酸（０．７３７ｇ）を加えた。混合物を激しくかきまぜながら加熱した。すべての原料が溶解し、赤色溶液を与えた。この溶液を室温へ冷却し、フラスコをこすった。結晶形成は遅く、いくらかの種晶を溶液へ加え、フラスコをフリーザー中に一夜置いた。灰色がかった黄褐色の固体がフラスコ中に生成した。これを砕き、吸引濾過により集めた。固体をエタノール、次にヘキサンで洗い、風乾した。秤量した生成物２．０５ｇ，６９％収率。融点２１３℃
元素分析：
計算値 実測値
Ｃ ５０．５９ ５０．２４
Ｈ ３．３０ ３．５０
Ｎ ８．７４ ８．５４
Ｆ １１．８６ １１．７９
Ｃｌ ５．５３ ５．６３
Ｓ ５．００ ５．１６

実施例５：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドとポリビニルピロリドンの１＋４固体分散体
キャップしてないバイアル中で、塩基として実施例１の化合物１部と、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ−２５／Ｋｏｌｌｉｄｏｎ ２５）とを混合し、すべての粉末が溶液になるまでアセトンとエタノール１：１混合物の十分な量に溶解した。キャップしてないバイアルを４０℃にセットした真空オーブン中に入れ、少なくとも２４−４８時間乾燥した。

実施例６：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドとポリビニルピロリドンの１＋３固体分散体
遊離塩基として実施例１の化合物１部と、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ−２５／Ｋｏｌｌｉｄｏｎ ２５）３部を８０：２０アセトン／エタノール混液（ｗ／ｗ）３０部に溶解した。ロータリ真空エバポレーターを用い、溶媒を７０℃で除去した。乾燥残渣をエバポレーターフラスコから除去し、篩分（６３０μｍ）した。

実施例７：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドとポリビニルピロリンドンの１＋７固体分散体
塩基として実施例１の化合物１部と、ＰＶＰ７部を８０：２０アセトン／エタノール混合物（ｗ／ｗ）３０部に溶解した。ロータリ真空エバポレーターを用いて溶媒を７０℃で除去した。乾燥した残渣をエバポレーターフラスコから取り出し、篩分（６３０μｍ）した。

実施例８：溶融押出しにより製造した４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドとヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）の固体分散体
遊離塩基として実施例１の化合物２部をマルチトール１部およびＨＰＣ−Ｍ７部と混合した。混合物を実験室二軸スクリュー押出機を用いて１６０−２００℃の温度において押出した。押出した材料をカットし、その後実験室衝撃ミルを用いて粉砕した。得られた粉末はそのまま、または小袋、カプセルまたは錠剤に製剤することができる。

実施例９：ＰＶＰおよびクロスカルメロースナトリウムとの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体
塩基として式Ｉの化合物０．４ｋｇと、ＰＶＰ２５ １．２ｋｇのアセトン６．４ｋｇとエタノール１．６ｋｇの混合物の溶液を調製した。流動床真空グラニュレーターを用いてこの溶液をクロスカルメロースナトリウム１．６ｋｇの粉末ベッドに６０−７０℃の温度にいてスプレーした。乾燥後生成物を篩分（１ｍｍ）した。この顆粒はそのまま、または例えば小袋カプセルまたは錠剤に製剤することができる。

実施例１０：ＰＶＰとデンプングリコール酸ナトリウムでの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トルフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体
この物質は、溶液がデンプングリコール酸ナトリウムタイプＡ（Ｅｘｐｏｌａｔａｂ）１．６ｋｇの粉末床にスプレーされることを除き、実施例９に記載したのと同様に調製された。

実施例１１：ＰＶＰとクロスカルメロースナトリウムでの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体
アセトン６．４ｋｇとエタノール１．６ｋｇの混液中の塩基として式Ｉの化合物０．４ｋｇとＰＶＰ２５ １．６ｋｇの溶液を調製した。流動床真空グラニュレータを用いて、この溶液をクロスカルメロースナトリウム２ｋｇの粉末床に６０−７０℃の温度においてスプレーした。乾燥後生成物を篩分（１ｍｍ）した。この顆粒はそのまま使用することができ、または例えば小袋、カプセルまたは錠剤に製剤することができる。

実施例１２：ＰＶＰと、クロスカルメロースナトリウムと、微結晶セルロースでの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体
この物質は、溶液をクロスカルメロースナトリウム１ｋｇと微結晶セルロース１ｋｇよりなる粉末床にスプレーしたことを除き、実施例１１に記載したのと同様に調製された。

実施例１３：ＨＰＣ−ＳＬとクロスカルメロースナトリウムとの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体
アセトン２０ｋｇ中の塩基として式Ｉの化合物０．４ｋｇとＨＰＣ−ＳＬ １．６ｋｇの溶液を調製した。流動床真空グラニュレーターを用いて、この溶液を４０−６０℃の温度においてクロスカルメロース２ｋｇの粉末床にスプレーした。乾燥後生成物を篩分（１ｍｍ）した。この顆粒はそのまま使用することができ、または例えば小袋、カプセルまたは錠剤に製剤することができる。

実施例１４：ＨＰＣ−Ｌとクロスカルメロースナトリウムでの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体
アセトン２８ｋｇ中の塩基として式Ｉの化合物０．４ｋｇとＨＰＣ−Ｌ １．６ｋｇの溶液を調製した。流動床真空グラニュレーターを用いて、この溶液を４０−６０℃の温度においてクロスカルメロースナトリウネ２ｋｇの粉末床にスプレーした。乾燥後生成分を篩分（１ｍｍ）した。この顆粒はそのまま使用でき、または例えば小袋、カプセルまたは錠剤に製剤することができる。

実施例１５：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体を含有する錠剤
実施例１１の顆粒をローラーコンパクト化し、３および１ｍｍにスクリーンした。その後コンパクト化した顆粒をクロスカルメロースナトリウム０．５４ｋｇと、コロイダル無水シリカ２４ｇと、そしてステアリン酸マグネシウム３６ｇとブレンドした。この圧縮用ブレンドを式Ｉの化合物２０，５０および１００ｍｇを含む錠剤に回転打錠機で圧縮した。錠剤は光保護のためフィルムコーティングすることができる。

実施例１６：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体を含有する錠剤
実施例１２の顆粒をローラーコンパクト化し、３および１ｍｍにスクリーンした。その後コンパクト化した顆粒をクロスカルメロースナトリウム０．５４ｋｇと、コロイダル無水シリカ２４ｇと、そしてステアリン酸マグネシウム３６ｇとブレンドした。この圧縮用ブレンドを式Ｉの化合物２０，５０および１００ｍｇを含む錠剤に回転打錠機で圧縮した。錠剤は光保護のためフィルムコーティングすることができる。

実施例１７：４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの固体分散体を含有する錠剤
アセトン６．４ｋｇとエタノール１．６ｇの混液中の塩基として０．４ｋｇの式Ｉの化合物と１．２ｋｇのＰＶＰ２５溶液を調製した。流動床真空グラニュレーターを用いて、この溶液をクロスカルメロースナトリウム０．８ｋｇと微結晶セルロース０．８ｋｇよりなる粉末床に６０−７０℃の温度においてスプレーした。乾燥後生成物を篩分（１ｍｍ）した。この顆粒をローラーコンパクト化し、そして３および１ｍｍにスクリーンした。その後コンパクト化した顆粒をクロスカルメロースナトリウム１．３４ｇと、コロイダル無水シリカ２４ｇと、ステアリン酸マグネシウム３６ｇとブレンドした。この圧縮用ブレンドを回転打錠機で式Ｉの化合物２０，５０および１００ｍｇを含む錠剤に圧縮した。錠剤は光保護のためフィルムコーティングすることができる。

特定の投与量レベルおよび投与頻度は、活性剤の活性、その代謝安定性および活性期間、排泄速度、投与モードおよび時間、年令、体重、健康状態、性別、食事、対象のベースライン血液学的および生理学的パラメータ（例えば白血球、顆粒球、血小板、ヘモグロビン、クレアチニン、ビリルビン、アルブミン等）、および癌の重篤度、強さ、ステージ、癌の一次部位、癌病巣のサイズ、転移の存在または範囲、外科的状態、病気の進行（すなわち攻撃的）等を含む種々のファクターによって変動し得る。

ＤＡＳＴは、例えば経口、非経口、経腸、腹腔内、局所、経皮（例えばいかなる標準的パッチを用いて）、眼内、経鼻、エロゾル、スプレー、吸入、皮下、静脈内、筋肉内、口腔、舌下、経直腸、経膣、動脈内、硬膜下腔内または腫瘍内を含む、任意の有効ルートによる任意の形で投与することができる。ＤＡＳＴは腫瘍の部位へ手術前または手術後直接投与することができる。それは活性または不活性のいかなる成分と組合せて投与することができる。

ＤＡＳＴは本発明の薬剤組成物を用いて経口ルートによって投与することができる。投与量は一般に体重を標準にして、約０．０１ｍｇ／ｋｇないし約５０ｍｇ／ｋｇ；約１ｍｇ／ｋｇないし約４０ｍｇ／ｋｇ；約５ｍｇ／ｋｇないし約３０ｍｇ／ｋｇ；約１０ｍｇ／ｋｇないし約２５ｍｇ／ｋｇ，約１０ｍｇ／ｋｇないし約２０ｍｇ／ｋｇ；約２５ｍｇ／ｋｇないし約３０ｍｇ／ｋｇ等の範囲であろう。

本発明に従ってどのような投与間隔も使用することができる。例えば、ＤＡＳＴは１日１回、２回、３回、４回等投与することができる。例えば、約１００ｍｇ，約２００ｍｇ，約４００ｍｇ，約５００ｍｇ，約６００ｍｇ，または約８００ｍｇを１日１回、２回または３回投与することができる。

ＤＡＳＴは任意の適当な時に投与することができる。例えば、それは他の化学療法剤と同様にルーチンに投与することができる。それは外科介入の前に、放射線の前または後に、高周波切断または他のエネルギー処置の前または後に、手術後または手術前にボーラスとして投与することができる。

ＤＡＳＴはどのような他の適当な添加剤または薬学的に許容し得る担体とも組合せることができる。そのような添加剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ；Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ ａｎｄ Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄａ，２０ ｔｈｅ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００）；Ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｉｎｄｉｔｓｔｒｉａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｌａｃｈｍａｎ ｅｔ ａｌ，ｅｄｓ，３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，１９６６）；Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｎｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ ａｎｄ Ｂｏｙｌａｎ，ｅｄｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，２００２）に記載されているような慣用的に使用されているものを含む。

ＤＡＳＴおよび本発明の薬剤組成物は、限定なしにどのような適当な形にあることができる。経口使用に適当な形は、限定でなく、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、分散し得る粉剤または顆粒、エマルジョン、硬または軟カプセル、溶液、シロップおよびエリキサーを含む。経口使用を意図する組成物は薬剤組成物の製造のためのこの分野で知られたどのような方法に従っても製造することができる。

ＤＡＳＴは、他の成分、例えば薬学的に許容し得る担体または補助剤と製剤化することができる。それらは活性薬物と混合され、そして治療目的で対象へ安全に投与することができる。これらは、限定でなく、抗酸化剤、保存剤、染料、錠剤被覆組成物、可塑剤、不活性担体、賦形剤、ポリマー、被覆材料、浸透圧バリアー、溶解度を遅延または阻害するデバイスおよび剤等を含む。

経口使用を意図した薬剤組成物は、薬剤組成物製造のためのこの分野で知られたどんな適当な方法に従っても製造することができる。そのような組成物は、服用し得る製剤を提供するために、希釈剤、甘味剤、矯味剤、着色剤および保存剤からなる群から選ばれた一以上の剤を含有し得る。

錠剤の製造に適した補助剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムのような不活性希釈剤、顆粒化および崩壊剤、例えばコーンスターチまたはアルギン酸、および結合剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクでよい。

経口使用のための薬剤組成物は硬ゼラチンカプセルとして提供してもよく、その場合活性成分は不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合され、または活性成分が水または油性媒体、例えばピーナッツオイル、液体パラフィンまたはオリーブオイルと混合される軟ゼラチンカプセルとして提供してもよい。

水性懸濁液の製造のために適した補助剤と混合した活性成分を含有する水性懸濁液も使用することができる。そのような補助剤は、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、タラガントガムおよびアカシアガムである。分散剤または湿潤剤は、天然ホスファチド、例えばレシチン、またはエチレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えばポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトールから誘導された部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導された部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであることができる。水性懸濁液は一以上の保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｎ−プロピルエステル、一以上の着色剤、一以上の矯味剤、およびショ糖またはサッカリンのような甘味剤を含むこともできる。

水の添加によって水性分散液の調製のために適した分散し得る粉剤および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および一以上の保存剤との混合物に活性成分を提供する。好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤は既に上で言及したものによって例示される。追加的補助剤、例えば甘味剤、矯味剤および着色剤も存在し得る。

ＤＡＳＴおよび本発明の薬剤組成物は非水性液剤、例えば活性成分を植物油、例えばアラキス油、オリーブ油、ゴマ油またはピーナッツ油、または液体パラフィンのような鉱物油に分散することによって製剤化することができる油性懸濁液の形でもよい。油性懸濁液は増粘剤、例えば蜜ロウ、ハードパラフィンまたはセチルアルコールを含んでもよい。上で述べた甘味剤および矯味剤を服用し易い製剤を提供するために添加することができる。これら組成物はアスコルビン酸のような抗酸化剤の添加によって保存することができる。

ＤＡＳＴおよび本発明の薬剤組成物は水中油型エマルジョンの形にあることもできる。油相は植物油、例えばオリーブ油またはアラキス油、鉱油、例えば液体パラフィンまたはこれらの混合物であることができる。好適な乳化剤は天然ガム、例えばアカシアガムまたはトラガントガム、天然ホスファチド、例えば大豆レシチン、および脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導されたエステルまたは部分エステル、例えばソルビタンモノオレエート、および前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートでよい。エマルジョンは甘味剤および矯味剤を含有し得る。

シロップおよびエリキサーは甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはショ糖と共に処方することができる。そのような処方は緩和剤、保存剤および着色料を含むことができる。

ＤＡＳＴおよび本発明の薬剤組成物は、薬物の経直腸または経膣投与のための坐剤の形でも投与することができる。これらの組成物は、常温では固体であるが直腸または膣温度では液体であり、そしてそのため直腸または膣内で薬物を放出するように溶融する適当な非刺激性補助剤と薬物とを混合することによって製造することができる。そのような材料はココアバターおよびポリエチレングリコールを含む。

ＤＡＳＴおよび本発明の薬剤組成物は、当業者に知られた方法を使用して経皮投与することができる。例えば、Ｃｈｉｅｎ：“Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ”；Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｃｋｅｒ，Ｉｎｃ；１９８７；Ｌｉｐｐ ｅｔ ａｌ，ＷＯ９４／０４１５７を見よ。例えば、任意に浸透促進剤を含んでいる揮発性溶剤中の式Ｉの化合物の溶液または懸濁液はマトリックス材料および殺バクテリア剤のような当業者に知られた追加の添加剤と混合することができる。滅菌後、得られた混合物は既知の操作に従って投与形に製剤することができる。加えて、乳化剤および水との処理により、式Ｉの化合物の溶液または懸濁液はローションまたはザルベに処方することができる。

経皮送達システムに加工するための好適な溶剤は当業者に知られており、そしてエタノールまたはイソプロピルアルコールのような低級アルコール、アセトンのような低級ケトン、酢酸エチルのような低級カルボキシル酸エステル、テトラヒドロフランのような極性エーテル、ヘキサン、シクロヘキサンまたはベンゼンのような低級炭化水素、ジクロルメタン、クロロホルム、トリクロロトリフロロエタンまたはトリクロロフロロエタンのようなハロゲン化炭化水素を含む。好適な溶剤は、低級アルコール、低級ケトン、低級カルボキシル酸エステル、極性エーテル、低級炭化水素、ハロゲン化炭化水素から選ばれた一以上の材料の混合物を含む。

経皮送達システムのための好適な浸透促進剤は当業者に知られており、例えばエタノール、プロピレングリコールまたはベンジルアルコールのようなモノヒドロキシまたはポリヒドロキシアルコール、ラウリルアルコールまたはセチルアルコールのような飽和または不飽和Ｃ_８−Ｃ_１８脂肪アルコール、ステアリン酸のような飽和または不飽和Ｃ_８−Ｃ_１８脂肪酸、酢酸、カプロン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸またはパルミチン酸のメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルまたはモノグリセリンエステルのような２４炭素原子までの飽和または不飽和脂肪酸エステル、ジイソプロピルアジペート、ジイソブチルアジペート、ジイソプロピルセバケート、ジイソプロピルマレエートまたはジイソプロピルフマレートのような２４総炭素数までの飽和または不飽和ジカルボキシル酸のジエステルを含む。追加の浸透促進剤はレシチンまたはセファリンのようなホスファチジル誘導体、テルペン、アミド、ケトン、尿素およびその誘導体、およびジメチルイソソルビッドおよびジエチレングリコールモノエチルエーテルのようなエーテルを含む。好適な浸透促進処方は、モノヒドロキシまたはポリヒドロキシアルコール、飽和または不飽和Ｃ_８−Ｃ_１８脂肪アルコール、飽和または不飽和Ｃ_８−Ｃ_１８脂肪酸、２４炭素原子までの飽和または不飽和脂肪酸エステル、総炭素数２４までの飽和または不飽和ジカルボキシル酸のジエステル、ホスファチジル誘導体、テルペン、アミド、ケトン、尿素およびその誘導体、およびエーテルから選ばれた一以上の混合物を含む。

経皮送達システムのための好適な結合剤は当業者に知られており、そしてポリアクリレート、シリコーン、ポリウレタン、ブロックコポリマー、スチレン−ブタジエンコポリマー、および天然および合成ゴムを含む。セルロースエーテル、誘導体化ポリエチレンおよびシリケートもマトリックス成分として使用し得る。粘稠樹脂またはオイルのような追加の添加剤をマトリックスの粘度を増大するために添加することができる。

前駆体を含んでいる組成物も制御された放出のために処方することができ、この場合活性成分の放出は全身循環中への所望の送達速度を達成するように調節または変調される。制御された放出製剤はパルス遅延、延長、スロー、即時、急速等とすることができる。それは一以上の放出処方、例えば延長および即時放出成分を含むことができる。延長送達システムは２４時間毎に１回、１２時間毎に１回、８時間毎に１回、６時間毎に１回等の投与間隔を達成するために使用することができる。投与形／送達システムは延長放出に適した錠剤またはカプセルであることができるが、持続放出液または懸濁液も使用し得る。制御された放出製剤はＤＡＳＴの放出および／またはピーク血漿レベルを維持する製剤として製造することができる。

本発明に従って好ましい固形経口薬剤においては、ＤＡＳＴの少なくとも２５％、もっと好ましくはＤＡＳＴの少なくとも４０％が共沈として存在する。

微粉化は当業者に知られた標準的粉砕方法、好ましくは空気チャット粉砕によって達成することができる。微粉化した形は０．５ないし１０μｍ、好ましくは１ないし６μｍ、もっと好ましくは１ないし３μｍの平均粒子寸法を持つことができる。指示した粒子寸法は当業者に知られたレーザー回折によって測定した粒子サイズ分布の平均値である（測定装置ＨＥＬＯＳ，Ｓｙｍｐａｔｅｃ）。

好ましい薬剤組成物は、組成物重量の少なくとも２５％、好ましくは少なくとも４５％、もっと好ましくは少なくとも５０％、さらにもっと好ましくは少なくとも５５％の割合でＤＡＳＴを含んでいる。ある状況においては、組成物重量の少なくとも６２％、または少なくとも６９％、または少なくとも７５％との量を使用することができる。そのような製剤の製造方法は２００５年２月３日発行のＷＯ０５／００９９６１および２００６年３月９日発行のＷＯ０６／０２６５００に開示されている。

これ以上考究することなく、当業者はこれまでの記載を利用して本発明をその全範囲まで利用できるものと信じられる。以下の好ましい特定具体例は、それ故単に例証として考えるべきであり、開示の残部の限定ではない。上で引用したすべての出願、特許および発表はその全体を参照としてここに取入れる。

生物学的実施例
ｃ−ＫＩＴ発現Ｂａ／Ｆ３細胞ラインの発生
アミノ酸残基５５７−５５８を除去したエクソン１１に欠失を有する全長ヒト−ｃ−ＫＩＴをコードするｃＤＮＡを哺乳類発現ベクターｐＣｌｎｅｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）中にリゲートした。エクソン１１欠失突然変更細胞のＩｍａｔｉｎｉｂ（Ｇｌｅｏｎｖｅｃ）抵抗性変種を発生させる。すべての突然変異はＤＮＡシーケンシングによって確認した。

ｃ−ＫＩＴエクソン１１突然変異またはそのＩｍａｔｉｎｉｂ（Ｇｌｅｅｎｖｅｃ）抵抗性突然変異をコードする発現ベクターをエレクトロポレーションによってトランスフェクトした。培養培地からＩＬ−３を除去することによって選択的圧力をトランスフェクトした細胞へ適用した。ＩＬ−非依存性集団の後、細胞を１ｍｇ／ｍｌ Ｇ４１８の存在下で成育することによってさらなる選択的圧力を適用した。得られたＢａ／Ｆ３細胞の安定したプールはｃ−ＫＩＴに特異性の抗体を使用してウエスタンブロットによってｃ−ＫＩＴを発現することが観察された。安定したプールはトランスフェクトしたｃ−ＫＩＴ ｃＤＮＡの存在を確認するゲノムＤＮＡのシーケンシングによって特徴化された。

細胞増殖アッセイ
このアッセイは細胞増殖／生存性のマーカーとして細胞ＡＴＰを利用する。第１日に、Ｂａ／Ｆ３細胞を１ｍｇ／ｍＬ Ｇ４１８を含むＲＰＭＩ培地中の１０％ＦＢＳ中で１０，０００細胞／ウエルに９６ウエル皿（Ｃｏｓｔａｒ ３６０３）にプレートした。０．６から１０，０００ｎＭの範囲の最終濃度を与えるように８ポイント投与量レスポンスのための１０×において同じ培地中に累進希釈したテスト化合物を細胞へ添加した。プレートを次に３７℃で３日間５％ＣＯ_２インキュベーター中でインキュベートした。７２時間後、溶解／ルシフェラーゼ試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ，Ｐｒｏｍｅｇａ Ｇ７５７３）を各ウエルへ添加した。細胞はその後室温で５分間シェーカー上でインキュベートされ、そしてルミネセンスがビクター５（パーキンエルマー）分光光度計上で測定された。発育阻害はアッセイプレート上の処置対未処置ルミネセンス信号を比較することによって測定され、細胞増殖の化合物による阻害のＩＣ５０分析はＡｎａｌｙｚｅ５社内ソフトウエアを用いて分析された。種々のｃ−ＫＩＴ発現Ｂａ／Ｆ３細胞ラインにおけるＩｍａｔｉｎｉｂ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）およびＮｅｘａｖａｒについて得られたＩＣ５０値は表１に要約されている。ＩＣ５０値は少なくとも３実験から計算された平均値である。

Claims (29)

1. 当初ＫＩＴチロシンキナーゼ阻害剤に感受性であったが前記ＫＩＴチロシンキナーゼ阻害剤に対して抵抗性を獲得した、それを必要とする対象中の癌を処置する方法であって、
   すべての多形、水和物、薬学的に許容し得る塩、代謝物、プロドラグ、溶媒和物、またはそれらの組合せを含む、下記式Ｉの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの有効量を前記対象へ投与することを含む前記方法：
   

   
2. 癌が以下のＫＩＴ阻害剤の一つに対して抵抗性を獲得している請求項１の方法：
   ｉｍａｔｉｎｉｂメシレート，ｉｍａｔｉｎｉｂメシレートの誘導体、ｉｍａｔｉｎｉｂメシレートの塩、ＰＰ１（４−アミノ−５−（４−メチルフェニル−７−（ｔ−ブチル）ピラゾロ〔３，４−ｄ〕ピリミジン）；ＭＬＮ５１８（ＣＴ５３５１８）；ＰＤ１８０９７０；ＳＵ１１２４８１；ＳＵ５４１６；ＳＵ５４１４；ＳＵ６５９７；ＳＵ６６６３またはＳＵ６５６１
3. 前記癌は、悪性胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、良性胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、腸管の間葉腫瘍、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、肥満細胞腫瘍、ＳＣＬＣ、胚芽細胞腫瘍、乳癌、および／または神経芽腫の一つまたは二つ以上である請求項１の方法。
4. 癌がｉｍａｔｉｎｉｂメシレートに対して抵抗性を獲得している請求項１の方法。
5. 前記癌の前記獲得した抵抗性は、一次腫瘍において突然変異したＫＩＴ遺伝子の二次突然変異に関連している請求項１の方法。
6. 前記二次突然変異はキナーゼ触媒ドメインにある請求項５の方法。
7. 突然変異はエクソン１３，１４および／または１７中にある請求項５の方法。
8. 突然変異は残基６５４，６７０，７１６，８１６，８２０，８２２および８２３にある請求項５の方法。
9. 突然変異は残基６５０−６５４にある請求項５の方法。
10. 突然変異は残基６７０−６７４にある請求項５の方法。
11. 突然変異は残基８１６−８２４にある請求項５の方法。
12. 二次突然変異は、Ｖ６５４Ａ（エクソン１３）、Ｔ６７０１（エクソン１４）、Ｔ６７０Ｅ，Ｄ７１６Ｎ，Ｓ７０９Ｆ（エクソン１４）、Ｄ８１６Ｇ，Ｄ８１６Ｅ（エクソン１７）、Ｄ８２０Ｅ，Ｄ８２０Ｙ，Ｄ８２０Ｇ，Ｎ８２２Ｋ，Ｙ８２３Ｄ（エクソン１７）、またはそのような位置または隣接位置における欠失および他のアミノ酸置換の一または二以上である請求項５の方法。
13. 二次突然変異は、
    ｉ）アミノ酸残基５５７−５５８の欠失；
    ｉｉ）アミノ酸残基５５１−５５５の欠失；
    ｉｉｉ）アミノ酸残基５５０−５５８の欠失；
    ｉｖ）アミノ酸残基５５９−５６０の欠失；
    ｖ）アミノ酸残基５５７−５６１の欠失；
    ｖｉ）アミノ酸残基５５４−５５８の欠失；
    ｖｉｉ）アミノ酸残基５５２−５５７の欠失；
    ｖｉｉｉ）Ｖ５５９Ｄ，Ｖ５５９ＡまたはＶ５５９Ｇを含む、残基５５９における突然変異；
    ｉｘ）Ｖ５６０Ｄ，Ｖ５６０ＥまたはＶ５６０Ｇを含む、残基５６０における突然変異；
    ｘ）Ｗ５５７Ｓ単独、またはアミノ酸５５２−５５６の欠失との組合せ；
    ｘｉ）Ｗ５５７Ｒを含む、アミノ酸残基５５７における突然変異；および
    ｘｉｉ）Ｌ５７６Ｐを含む、アミノ酸残基５７６における突然変異；
    の一または二以上である請求項５の方法。
14. 二次突然変異は残基５５７−５５８の欠失と、そして以下の突然変異；Ｖ６５４Ａ，Ｔ６７０Ｉ，Ｄ８２０Ｙ，Ｎ８２２ＫまたはＹ８２３Ｄの少なくとも一つである請求項５の方法。
15. 一次腫瘍中に一次および／または二次ＫＩＴ遺伝子突然変異を持っている、それを必要とする対象の癌を処置する方法であって、
    すべての多形、水和物、薬学的に許容し得る塩、代謝物、エステルプロドラグ、溶媒和物、またはそれらの組合せを含む、下記式Ｉの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの有効量を前記対象へ投与することを含む前記方法：
    

    
16. 一次腫瘍中の前記一次および／または二次ＫＩＴ遺伝子突然変異は、ＫＩＴチロシンキナーゼ阻害剤に対する前記癌の抵抗性に関連している請求項１５の方法。
17. 前記二次突然変異はキナーゼ触媒ドメインにある請求項１５の方法。
18. 突然変異はエクソン１３，１４および／または１７中にある請求項１５の方法。
19. 突然変異は残基６５４，６７０，７１６，８１６，８２０，８２２および８２３にある請求項１５の方法。
20. 突然変異は残基６５０−６５４にある請求項１５の方法。
21. 突然変異は残基６７０−６７４にある請求項１５の方法。
22. 突然変異は残基８１６−８２４にある請求項１５の方法。
23. 二次突然変異は、Ｖ６５４Ａ（エクソン１３）、Ｔ６７０１（エクソン１４）、Ｔ６７０Ｅ，Ｄ７１６Ｎ，Ｓ７０９Ｆ（エクソン１４）、Ｄ８１６Ｇ，Ｄ８１６Ｅ（リクソン１７）、Ｄ８２０Ｅ，Ｄ８２０Ｙ，Ｄ８２０Ｇ，Ｎ８２２Ｋ，Ｙ８２３Ｄ（エクソン１７）、またはそのような位置または隣接位置における欠失および他のアミノ酸置換の一または二以上である請求項１５の方法。
24. 二次突然変異は、
    ｉ）アミノ酸残基５５７−５５８の欠失；
    ｉｉ）アミノ酸残基５５１−５５５の欠失；
    ｉｉｉ）アミノ酸残基５５０−５５８の欠失；
    ｉｖ）アミノ酸残基５５９−５６０の欠失；
    ｖ）アミノ酸残基５５７−５６１の欠失；
    ｖｉ）アミノ酸残基５５４−５５８の欠失；
    ｖｉｉ）アミノ酸残基５５２−５５７の欠失；
    ｖｉｉｉ）Ｖ５５９Ｄ，Ｖ５５９ＡまたはＶ５５９Ｇを含む、残基５５９における突然変異；
    ｉｘ）Ｖ５６０Ｄ，Ｖ５６０ＥまたはＶ５６０Ｇを含む、残基５６０における突然変異；
    ｘ）Ｗ５５７Ｓ単独、またはアミノ酸５５２−５５６の欠失との組合せ；
    ｘｉ）Ｗ５５７Ｒを含む、アミノ酸残基５５７における突然変異；および
    ｘｉｉ）Ｌ５７６Ｐを含む、アミノ酸残基５７６における突然変異；
    の一または二以上である請求項１５の方法。
25. 二次突然変異は残渣５５７−５５８の欠失と、そして以下の突然変異；Ｖ６５４Ａ，Ｔ６７０Ｉ，Ｄ８２０Ｙ，Ｎ８２２ＫまたはＹ８２３Ｄの少なくとも一つである請求項１５の方法。
26. Ｉｍａｔｉｎｉｂメシレート、ｉｍａｔｉｎｉｂメシレートの誘導体またはｉｍａｔｉｎｉｂメシレートの塩に対する抵抗性または獲得した抵抗性に関連した一次および／または二次突然変異を有する、それを必要とする対象の癌を処置する方法であって、すべての多形、水和物、薬学的に許容し得る塩、代謝物、エステルプロドラグ、溶媒和物またはそれらの組合せを含む、下記式Ｉの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロメチルフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの有効量を前記対象へ投与することを含む前記方法：
    

    
27. ｉｍａｔｉｎｉｂメシレート、ｉｍａｔｉｎｉｂメシレートの誘導体、またはｉｍａｔｉｎｉｂメシレートの塩でヒト対象の癌を処置する方法であって、
    すべての多形、水和物、薬学的に許容し得る塩、代謝物、エステルプロドラグ、溶媒和物またはそれらの組合せを含む、下記式Ｉの４−｛４−〔３−（４−クロロ−３−トリフルオロフェニル）ウレイド〕−３−フルオロフェノキシ｝ピリジン−２−カルボキシル酸メチルアミドの有効量を前記ヒト対象へ投与することを追加的に含む前記方法：
    

    
28. 処置される癌は、加速期慢性骨髄性白血病；急性赤血球白血病；急性リンパ芽球白血病；緩解期急性リンパ芽球白血病；急性リンパ球白血病；急性単芽球白血病；急性骨髄性白血病；急性骨髄白血病；前立腺腺癌；頭頸部のアデノイドのう胞性癌；進行した胃腸間質腫瘍；原因不明骨髄腫；骨幹端炎；退生稀突起膠腫；星状細胞腫；Ｂ細胞成人急性リンパ芽球白血病；芽期慢性骨髄性白血病骨転移；脳腫瘍；乳癌；中枢神経系癌；小児急性リンパ芽球白血病；緩解期小児急性リンパ芽球白血病；小児中枢神経系胚芽細胞腫瘍；小児慢性骨髄性白血病；小児軟組織肉腫；脊索腫；慢性好酸性白血病（ＣＥＬ）；慢性特発性骨髄線維症；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄単球白血病；慢性期慢性骨髄性白血病；結腸癌；結直腸癌；皮膚線維肉腫；隆起性皮膚線維肉腫（ＤＦＳＰ）；類腱腫；好酸球増加症；流行性カポジ肉腫；本質的血小板血症；Ｅｗｉｎｇファミリ腫瘍；延長段階小細胞肺癌；ファロピアンチューブ癌；家族性高好酸球増加症；線維肉腫；胃腺癌；胃腸新生物；胃腸間質腫瘍；膠芽腫；グリオーム；神経膠肉腫；グレードＩ髄膜腫；グレードＩＩ髄膜腫；グレードＩＩＩ髄膜腫；造血リンパ癌；高グレード小児脳星状細胞腫；過多好酸性血病症候群；特発性肺線維症；Ｌ１成人急性リンパ芽球白血病、Ｌ２成人急性リンパ芽球白血病；急性リンパ球白血病Ｌ２；慢性骨髄白血病；慢性期骨髄白血病；肝障害および新生物；肺病；慢性骨髄白血病のリンパ様胚芽期；男性乳癌；悪性線維組織球腫；肥満細胞腫；髄膜血管細胞腫；髄膜腫；転移癌；転移性固形腫瘍；骨髄線維症；慢性期骨髄白血病；骨髄化生；好酸性血症を有する骨髄増殖障害（ＭＰＤ）；神経芽腫；非Ｔ非Ｂ小児急性リンパ芽球白血病；稀突起膠腫；骨肉腫；卵巣胚芽細胞腫瘍；卵巣低悪性可能性腫瘍；卵巣新生物；膵臓癌；骨髄新生物；腹腔癌；腹腔新生物；フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ球白血病；骨髄芽発症にあるフィラデルフィア陽性慢性骨髄白血病；多血症ベラ；肺線維症；再発成人脳腫瘍；再発性成人軟組織肉腫；再発性乳癌；再発性結腸癌；再発性食道癌；再発性胃癌；再発性多形態膠芽腫（ＧＢＭ）；再発性カポジ肉腫；再発性黒色腫；再発性メルケル細胞癌；再発性卵巣上皮癌；再発性膵臓癌；再発性前立腺癌；再発性直腸癌；再発性唾液腺癌；再発性小細胞肺癌；Ｅｗｉｎｇファミリの再発性腫瘍；再発性子宮肉腫；再発性慢性骨髄性白血病；リュウマチ性関節炎；唾液腺アデノイドのう胞性癌；肉腫；小細胞肺癌；ステージＩＩ黒色腫；ステージＩＩメルケル細胞癌；ステージＩＩＩ成人軟組織肉腫；ステージＩＩＩ食道癌；ステージＩＩＩメルケル細胞癌；ステージＩＩＩ卵巣上皮癌；ステージＩＩＩ膵臓癌；ステージＩＩＩ唾液腺癌；ステージＩＩＩＢ乳癌；ステージＩＩＩＣ乳癌；ステージＩＶ成人軟組織肉腫；ステージＩＶ乳癌；ステージＩＶ結腸癌；ステージＩＶ食道癌；ステージＩＶ胃癌；ステージＩＶ黒色腫；ステージＩＶ卵巣上皮癌；ステージＩＶ前立腺癌；ステージＩＶ直腸癌；ステージＩＶ唾液腺癌；ステージＩＶＡ膵臓癌；ステージＩＶＢ膵臓癌；全身性肥満細胞症；Ｔ細胞小児急性リンパ芽球白血球；睾丸癌；甲状腺癌；切除不能または転移性悪性胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）；特定されない成人固形腫瘍；未処置小児脳幹膠腫；子宮カルシノ肉腫；および子宮肉腫である請求項１または２７の方法。
29. ｉｍａｔｉｎｉｂに対して抵抗性を獲得した対象の癌を処置する方法であって、前記対象へＤＡＳＴの有効量を投与することを含む方法。