KR20240043704A - Mek 억제제로서의 3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2h,7h)-디온 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

여기서, R¹, R², R³ 및 R⁴는 본원에 정의된 바와 같다. 본 발명은 추가로 이러한 화합물 및 염을 포함하는 제약 조성물, 및 암을 포함한 비정상적 세포 성장의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 포함한 비정상적 세포 성장을 치료하기 위한 이러한 화합물, 염 및 조성물의 방법 및 용도에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 고체 형태에 관한 것이다.

Description

MEK 억제제로서의 3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온{3,4-DIHYDRO-2,7-NAPHTHYRIDINE-1,6(2H,7H)-DIONES AS MEK INHIBITORS}

본 발명은 MEK 억제제로서 작용하여 환자에서 비정상적 세포 성장, 예컨대 암의 치료에 유용한 신규 3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 화합물을 함유하는 제약 조성물, 및 비정상적 세포 성장, 예컨대 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 상기 화합물 및 조성물을 비정상적 세포 성장, 예컨대 암의 치료에 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 고체 형태, 상기 고체 형태를 함유하는 제약 조성물, 및 비정상적 세포 성장, 예컨대 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 비정상적 세포 성장, 예컨대 암의 치료에서 상기 고체 형태 및 그의 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

MEK 키나제 (미토겐 활성화 단백질 키나제 (MAPKK))는 Ras-RAF-MEK-ERK 세포 생존 경로의 중요한 구성요소이다. Ras 경로는 성장 인자, 시토카인 및 호르몬이 그의 동족 수용체에 결합함으로써 활성화된다. 그러나, 암 세포에서 이 경로는 구성적으로 활성화되고, 증가된 암 세포 생존, 세포 증식, 혈관신생 및 전이로 이어진다. 상기 경로의 구성적 활성화를 나타내는 종양은 결장, 췌장, 유방, 뇌, 난소, 폐 및 피부의 종양을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. Ras의 활성화 (상류 신호전달로 인해 또는 Ras 종양유전자에서의 활성화 점 돌연변이의 결과로서)는 Raf 키나제의 인산화 및 활성화로 이어지고, 이는 다시 MEK1 및 MEK2 (MAPKK1 및 MAPKK2로도 공지됨)를 인산화 및 활성화시킨다. MEK1 및 MEK2는 ERK1/2 키나제 (MAP 키나제로도 지칭됨)를 인산화 및 활성화시킴으로써 ERK1 및 ERK2를 활성화시키는 이중-특이성 키나제이며, 이는 추가로 세포 생존 및 아폽토시스에 수반되는 단백질, 예컨대 Mcl-1, Bim 및 Bad를 인산화시키고 그의 기능을 조절한다. 따라서, 이러한 인산화 매개 캐스케이드의 활성화는 종양발생 표현형의 개시 및 유지에 필요한 증진된 세포 증식, 세포 생존 및 감소된 세포 사멸로 이어진다. 이 경로의 억제, 특히 MEK 활성의 억제는 과다증식성 질환을 치료하는 데 유익한 것으로 공지되어 있다. MEK 억제제는 BRAF V600-돌연변이체 흑색종, NRAS-돌연변이체 흑색종, 저등급 장액성 난소암, 총상 신경섬유종, 갑상선암, 및 저등급 신경교종을 포함한 여러 설정에서 다양한 정도의 활성을 나타냈으며, KRAS-돌연변이체 췌장암 또는 폐암에서 보다 제한된 반응을 갖는다.

뇌로 빈번하게 전이되는 암, 예를 들어 흑색종 및 비소세포 폐암은 MAPK 경로 활성화 변경, 예컨대 BRAF V600E 및 KRAS G12 돌연변이를 보유하는 것으로 공지되어 있다 (문헌 [Cancer Genome Atlas N., Cell 2015;161:1681-96]). 활성화 돌연변이는 정규 경로에서 상이한 수준으로 발생할 수 있지만, 이들은 모두 증식 및 생존을 증가시키기 위해 미토겐/세포외 신호-조절 키나제 (MEK)를 통한 신호전달을 필요로 한다 (문헌 [Schubbert S, Shannon K, Bollag G., Nat Rev Cancer. 2007;7:295-308]). 악성종양에서 MAPK 경로의 공통 활성화 및 MEK의 중심 및 하류 위치는 또한 MEK 억제제를 두개내 종양 치료에 대한 잠재적인 관심의 대상으로 만든다.

혈액-뇌 계면은 혈액-뇌 장벽 (BBB)을 형성하는 뇌 미세혈관 내피 및 혈액-CSF 장벽 (BCSFB)을 형성하는 맥락총의 상피를 포함한다. 혈액 뇌 장벽 (BBB)은 혈액으로부터 CNS를 분할하는 고도로 선택적인 물리적 수송 및 대사 장벽이다. BBB는 특정 약물이 뇌 조직에 진입하는 것을 방지할 수 있고, 따라서 CNS로의 많은 말초-투여 작용제의 전달에서 제한 인자이다. 중추 신경계 종양에서 많은 분자적으로 표적화된 작용제의 효능은, 뇌를 보호하는 물리적 장벽으로서 작용하는 치밀 접합부에 의해 연결된 내피 세포의 단층으로 구성된 혈액-뇌 장벽 (BBB)을 가로지르는 침투에 의해 제한된다. 또한, 이들 내피 세포는 P-당단백질 (P-gp) 및 유방암 내성 단백질 (BCRP)을 포함한 다중 유출 수송체를 발현하며, 이는 뇌로부터 많은 항암제를 배제하는 것으로 공지되어 있다 (문헌 [Ohtsuki and Terasaki, 2007, Pharm Res 24:1745-1758; Agarwal et al., 2011, Pharm Res 24:1745-1758]). 혈액-뇌 장벽과 유사하게, 혈액-CSF 장벽은 대부분의 혈액-매개 물질의 뇌 내로의 통과를 방지하는 한편, 특정 물질의 뇌 내로의 통과를 선택적으로 허용하고 뇌 대사물 및 대사 산물의 혈액으로의 이동을 용이하게 하는 기능을 한다.

따라서, BBB 및/또는 BCSFB를 침투하고 CNS 내의 종양을 표적화할 수 있는 요법을 비롯한, MEK에 의해 매개되는 종양의 치료를 위한 요법이 여전히 필요하다.

부분적으로, 화학식 I 및 화학식 II의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다. 이러한 화합물은 MEK의 활성을 억제하여 생물학적 기능에 영향을 미칠 수 있고, MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하는 데 유용할 수 있다. 또한, 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 고체 형태가 본원에 제공된다. MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하는 데 단독으로 또는 추가의 항암 요법과 조합하여 유용할 수 있는, 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물 및 의약이 또한 제공된다. 또한, 본원에 기재된 임의의 화학식 및 그의 제약상 허용되는 염에 따른 화합물, 제약상 허용되는 염 및 제약 조성물을 제조하는 방법, 및 상기를 사용하는 방법이 본원에 제공된다. 본 발명의 내용은 하기 상세한 설명에서 추가로 기재되는 개념 중에서 선택된 것을 간략화된 형태로 소개하기 위해 제공된다. 본 발명의 내용은 청구된 대상의 핵심 특징 또는 본질적인 특징을 식별하도록 의도되지 않으며, 청구된 대상의 범주를 결정하는 데 도움을 주는 것으로서 별개로 사용되도록 의도되지도 않는다.

본 발명의 한 실시양태에 따르면, 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다:

여기서:

R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;

R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;

R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;

R⁴는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환된 페닐이다.

또한, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다:

여기서:

R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;

R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;

R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;

R^a 및 R^b는 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택된다.

한 실시양태에서, 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 고체 형태가 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물이 본원에 제공된다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 2종 이상의 제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제를 포함한다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 치료 방법 및 용도가 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 비정상적 세포 성장을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물은 단일 작용제로서 투여될 수 있거나, 또는 1종 이상의 항암 요법과 조합하여 투여될 수 있다.

한 실시양태에서, 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 소정량의 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을, 상기 비정상적 세포 성장을 치료하는 데 함께 효과적인 양의 추가의 항암제와 조합하여 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, 의약으로서 사용하기 위한 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료에 사용하기 위한 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, 대상체에서 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료를 위한 의약의 제조를 위한, 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도가 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물이 본원에 제공된다.

본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물의 각각의 실시양태는 그것이 조합되는 실시양태(들)와 모순되지 않는 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물의 하나 이상의 다른 실시양태와 조합할 수 있다.

상기 일반적 설명 및 하기 상세한 설명은 둘 다 단지 예시적이고 설명적이며, 청구된 바와 같이 본 발명을 제한하지 않는 것으로 이해되어야 한다.

도 1은 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1의 분말 X선 회절 패턴을 도시한다.
도 2는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2의 분말 X선 회절 패턴을 도시한다.
도 3은 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 분말 X선 회절 패턴을 도시한다.
도 4는 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4의 분말 X선 회절 패턴을 도시한다.
도 5는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 수착 등온선을 도시한다.

한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다:

여기서:

R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;

R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;

R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;

R⁴는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환된 페닐이다.

본원에 사용된 단수 형태는 치환기를 지칭하는 경우에 달리 나타내지 않는 한 복수 지시대상을 포함한다. 예를 들어, 치환기는 1개 이상의 치환기를 포함한다.

본원에 사용된 복잡한 화학 명칭의 경우, 치환기는 전형적으로 이것이 부착된 기 앞에 명명된다. 예를 들어, 메톡시에틸은 메톡시 치환기를 갖는 에틸 백본을 포함한다.

용어 "할로겐"은 -F (때때로 본원에서 "플루오로" 또는 "플루오로들"로 지칭됨), -Cl, -Br 및 -I를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "C1-C6 알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자의 포화 선형 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 알킬 기의 예는 메틸, 에틸, 1-프로필, 이소프로필, 1-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 2-메틸-2-프로필, 펜틸, 네오펜틸 및 헥실을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 용어 "히드록시C1-C6 알킬-"은 수소 원자 중 1개가 히드록시 기로 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 C1-C6 알킬 라디칼을 지칭한다.

용어 "히드록시"는 -OH 기를 지칭한다.

용어 "C3-C6 시클로알킬"은 3-6개의 고리 탄소 원자를 갖는 완전 포화 카르보시클릭 고리를 의미한다. 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "플루오로C1-C6 알킬"은 1, 2 또는 3개의 수소 원자가 각각 1, 2 또는 3개의 플루오로 원자로 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 C1-C6 알킬 라디칼을 지칭한다. 예는 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 2-플루오로에틸, 2,2-디플루오로에틸 및 2,2,2-트리플루오로에틸을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 용어 "C1-C6 알콕시"는 산소 원자에 단일 결합된 본원에 정의된 바와 같은 C1-C6 알킬 라디칼을 지칭하며, 여기서 라디칼은 산소 원자 상에 있다 (즉, C1-C6-O-). 알콕시 기의 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 이소프로폭시를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 용어 "플루오로C1-C6 알콕시"는 1, 2 또는 3개의 수소 원자가 각각 1, 2 또는 3개의 플루오로 원자로 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 C1-C6 알콕시를 지칭한다. 예는 트리플루오로메톡시를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

용어 "(C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-"는 수소 원자 중 1개가 본원에 정의된 바와 같은 C3-C6 시클로알킬 기로 대체된 것인 본원에 정의된 바와 같은 C1-C6 알콕시-를 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "C1-C6 알킬티오"는 C1-C6 알킬 부분이 본원에 정의된 바와 같은 것인 (C1-C6 알킬)S- 라디칼을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "플루오로C1-C6 알킬티오"는 1, 2 또는 3개의 수소 원자가 각각 1, 2 또는 3개의 플루오로 원자로 대체된 것인 본원에 정의된 바와 같은 C1-C6 알킬티오 기를 지칭한다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R¹은 H이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R¹은 Br이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R¹은 C1-C6 알킬이다. 화학식 I의 한 실시양태에서, R¹은 메틸이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R¹은 페닐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R²는 H이다.

한 실시양태에서, R²는 할로겐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R²는 F이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R²는 Cl이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R²는 Br이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R²는 I이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R²는 CH₃-이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 H이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 히드록시C1-C6 알킬-이다. 비제한적 예는 2-히드록시에틸을 포함한다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 히드록시C1-C6 알콕시-이다. 비제한적 예는 각각 하기 구조를 갖는 2-히드록시에톡시 및 2-히드록시프로폭시를 포함한다:

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 C1-C6 알콕시이다. 비제한적 예는 메톡시, 에톡시, 1-메틸에톡시 및 2,2-디메틸에톡시를 포함한다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 플루오로C1-C6 알콕시이다. 비제한적 예는 2,2-디플루오로에톡시를 포함한다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 C3-C6 시클로알킬이다. 비제한적 예는 시클로프로필이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R³은 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이다. 비제한적 예는 시클로프로필메톡시이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, 에틸, 프로필, 이소프로필, 메틸티오, 디플루오로메틸티오, 트리플루오로메틸, 메톡시, 디플루오로메톡시, 시클로프로필, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환된 페닐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, 에틸, 프로필, 이소프로필, 메틸티오, 디플루오로메틸티오, 트리플루오로메틸, 메톡시, 디플루오로메톡시, 시클로프로필 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택되는 1개의 치환기로 치환된 페닐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, 에틸, 프로필, 이소프로필, 메틸티오, 디플루오로메틸티오, 트리플루오로메틸, 메톡시, 디플루오로메톡시, 시클로프로필, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택되는 1개의 치환기로 치환된 페닐이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 하기 구조로부터 선택된다:

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는

이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는

이다.

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 하기 구조로부터 선택된다:

화학식 I의 한 실시양태에서, R⁴는 하기 구조로부터 선택된다:

한 실시양태에서, R⁴는 하기 구조를 갖는다:

여기서, R^a 및 R^b는 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택된다. 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이다. 한 실시양태에서, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 또는 플루오로C1-C6 알콕시이다. 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 또는 플루오로C1-C6 알콕시이다.

한 실시양태에서, 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다:

여기서:

R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;

R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;

R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;

R^a 및 R^b는 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택된다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 Br이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 C1-C6 알킬이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 메틸이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 페닐이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 할로겐이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 F이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 Cl이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 Br이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 I이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 CH₃-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R²는 H 또는 CH₃-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 H이고, R²는 H 또는 CH₃-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 히드록시C1-C6 알킬-이다. 비제한적 예는 2-히드록시에틸을 포함한다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 히드록시C1-C6 알콕시-이다. 비제한적 예는 각각 하기 구조를 갖는 2-히드록시에톡시 및 2-히드록시프로폭시를 포함한다:

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 C1-C6 알콕시이다. 비제한적 예는 메톡시, 에톡시, 1-메틸에톡시 및 2,2-디메틸에톡시를 포함한다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 플루오로C1-C6 알콕시이다. 비제한적 예는 2,2-디플루오로에톡시를 포함한다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 C3-C6 시클로알킬이다. 비제한적 예는 시클로프로필이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이다. 비제한적 예는 시클로프로필메톡시이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R³은 H 또는 히드록시C1-C6 알콕시-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 플루오로 또는 클로로이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 플루오로이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^b는 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, 에틸, 프로필, 이소프로필, 메틸티오, 디플루오로메틸티오, 트리플루오로메틸, 메톡시, 디플루오로메톡시, 시클로프로필, 또는 CH₃C(=O)-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 또는 플루오로C1-C6 알콕시이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^b는 브로모, 아이오도, 에틸, 메틸티오 또는 디플루오로메톡시이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^b는 메틸티오이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 플루오로이고, R^b는 메틸티오이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 C1-C6 알킬-C(=O)-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 또는 플루오로C1-C6 알콕시이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알킬이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알킬이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알킬티오이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알킬티오이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 플루오로C1-C6 알킬티오이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 플루오로C1-C6 알킬티오이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 플루오로이고, R^b는 메틸티오이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 플루오로C1-C6 알킬이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 플루오로C1-C6 알킬이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알콕시이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알콕시이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 플루오로C1-C6 알콕시이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 플루오로C1-C6 알콕시이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C3-C6 시클로알킬이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C3-C6 시클로알킬이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알킬-C(=O)-이다. 화학식 II의 한 실시양태에서, R^a는 할로겐이고, R^b는 C1-C6 알킬-C(=O)-이고, R¹은 H이고, R²는 H이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 H이고, R²는 H 또는 CH₃-이고, R³은 H 또는 히드록시C1-C6 알콕시-이고, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 C1-C6 알킬-C(=O)-이다.

화학식 II의 한 실시양태에서, R¹은 H이고, R²는 H 또는 CH₃-이고, R³은 H 또는 히드록시C1-C6 알콕시-이고, R^a는 할로겐이고, R^b는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 또는 플루오로C1-C6 알콕시이다.

화학식 II의 임의의 상기 기재된 실시양태의 한 실시양태에서, 기

는 하기 구조로부터 선택된다:

본원에 사용된 용어 "화합물"은 도시된 구조의 모든 입체이성질체, 기하 이성질체, 호변이성질체 및 동위원소를 포함하는 것으로 의도된다. 한 특정한 호변이성질체 형태로서 명칭 또는 구조에 의해 확인된 본원의 화합물은 달리 명시되지 않는 한 다른 호변이성질체 형태를 포함하는 것으로 의도된다.

본원에 제공된 화학식의 화합물은 비대칭 탄소 원자를 가질 수 있다. 본 발명의 화합물의 탄소 결합은 실선 (

), 쐐기형 실선 (

), 또는 쐐기형 점선 (

)을 사용하여 본원에 도시될 수 있다. 비대칭 탄소 원자에 대한 결합을 도시하기 위한 실선의 사용은 그 탄소 원자에서의 모든 가능한 입체이성질체 (예를 들어, 특정 거울상이성질체, 라세미 혼합물 등)가 포함됨을 나타내는 것으로 의도된다. 비대칭 탄소 원자에 대한 결합을 도시하기 위한 쐐기형 실선 또는 쐐기형 점선의 사용은 단지 제시된 입체이성질체만이 포함되는 것을 나타내는 것으로 의도된다. 본 발명의 화합물은 1개 초과의 비대칭 탄소 원자를 함유할 수 있는 것이 가능하다. 이들 화합물에서, 비대칭 탄소 원자에 대한 결합을 도시하기 위한 실선의 사용은 입체중심에 부착된 모든 가능한 입체이성질체가 포함됨을 나타내는 것으로 의도된다. 예를 들어, 달리 언급되지 않는 한, 본 발명의 화합물은 거울상이성질체 및 부분입체이성질체로서 또는 라세미체 및 그의 혼합물로서 존재할 수 있는 것으로 의도된다. 본 발명의 화합물에서 1개 이상의 비대칭 탄소 원자에 대한 결합을 도시하기 위한 실선의 사용 및 동일한 화합물에서 다른 비대칭 탄소 원자에 대한 결합을 도시하기 위한 쐐기형 실선 또는 쐐기형 점선의 사용은 부분입체이성질체의 혼합물이 존재함을 나타내는 것으로 의도된다.

키랄 중심을 갖는 본 발명의 화합물은 입체이성질체, 예컨대 라세미체, 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체로서 존재할 수 있다.

본원의 화학식의 화합물의 입체이성질체는 1종 초과의 유형의 이성질현상을 나타내는 화합물을 포함하여 본 발명의 화합물의 시스 및 트랜스 이성질체, 광학 이성질체, 예컨대 (R) 및 (S) 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 기하 이성질체, 회전 이성질체, 회전장애이성질체, 형태 이성질체 및 호변이성질체; 및 그의 혼합물 (예컨대, 라세미체 및 부분입체이성질체 쌍)을 포함할 수 있다.

또한, 반대이온이 광학 활성인 산 부가염 또는 염기 부가염, 예를 들어 d-락테이트 또는 I-리신, 또는 라세미, 예를 들어 dl-타르트레이트 또는 dl-아르기닌이 포함된다.

임의의 라세미체가 결정화되는 경우, 2종의 상이한 유형의 결정이 가능하다. 제1 유형은 둘 다의 거울상이성질체를 등몰량으로 함유하는 결정의 하나의 균질한 형태가 생성된 상기 언급된 라세미 화합물 (진성 라세미체)이다. 제2 유형은 각각 단일 거울상이성질체를 포함하는 두 형태의 결정이 등몰량으로 생성된 라세미 혼합물 또는 집성체이다.

개별 거울상이성질체의 제조/단리를 위한 통상적인 기술은 적합한 광학적으로 순수한 전구체로부터의 키랄 합성, 또는 예를 들어 키랄 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC) 또는 초유체 임계 크로마토그래피 (SFC)를 사용하는 라세미체 (또는 염 또는 유도체의 라세미체)의 분해를 포함한다.

대안적으로, 라세미체 (또는 라세미 전구체)는 적합한 광학 활성 화합물, 예를 들어 알콜, 또는 화합물이 산성 또는 염기성 모이어티를 함유하는 경우에 산 또는 염기, 예컨대 타르타르산 또는 1-페닐에틸아민과 반응할 수 있다. 생성된 부분입체이성질체 혼합물을 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화에 의해 분리할 수 있고, 부분입체이성질체 중 하나 또는 둘 다는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지된 수단에 의해 상응하는 순수한 거울상이성질체(들)로 전환될 수 있다.

본 발명의 키랄 화합물 (및 그의 키랄 전구체)은 0 내지 50% 이소프로판올, 전형적으로 2 내지 20%, 및 0 내지 5%의 알킬아민, 전형적으로 0.1% 디에틸아민을 함유하는 탄화수소, 전형적으로 헵탄 또는 헥산으로 이루어진 이동상을 사용하는 비대칭 수지 상에서의 크로마토그래피, 전형적으로 HPLC를 사용하여 거울상이성질체적으로 풍부한 형태로 수득될 수 있다. 용리액을 농축시켜 풍부한 혼합물을 제공한다.

입체이성질체 집성체는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술에 의해 분리될 수 있고; 예를 들어, 문헌 ["Stereochemistry of Organic Compounds" by E L Eliel (Wiley, New York, 1994)]을 참조하며, 그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본원에 기재된 화합물의 거울상이성질체 순도는 거울상이성질체 과잉률 (ee)로 기재될 수 있으며, 이는 샘플이 하나의 거울상이성질체를 다른 것보다 더 많은 양으로 함유하는 정도를 나타낸다. 라세미 혼합물은 0%의 ee를 갖는 반면에, 단일의 완전히 순수한 거울상이성질체는 100%의 ee를 갖는다. 유사하게, 부분입체이성질체 순도는 부분입체이성질체 과잉률 (de)로 기재될 수 있다.

본 발명의 화합물은 호변이성질현상 및 구조 이성질현상을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 화합물은 엔올 및 이민 형태, 및 케토 및 엔아민 형태를 포함하는 여러 호변이성질체 형태 및 기하 이성질체 및 그의 혼합물로 존재할 수 있다. 모든 이러한 호변이성질체 형태는 본 발명의 화합물의 범주 내에 포함된다. 호변이성질체는 용액 중 호변이성질체 세트의 혼합물로서 존재한다. 고체 형태에서, 통상적으로 1종의 호변이성질체가 우세하다. 1종의 호변이성질체가 기재될 수 있지만, 본 발명은 제공된 화학식의 화합물의 모든 호변이성질체를 포함한다. 화학식 I의 화합물의 호변이성질체는, 예를 들어 R³이 수소인 경우에, 즉 하기와 같이 발생할 수 있다:

또한, 본 발명의 화합물 중 일부는 회전장애이성질체 (예를 들어, 치환된 비아릴)를 형성할 수 있다. 회전장애이성질체는, 단일 결합의 양쪽 말단에서의 치환기가 비대칭인 경우에 분자의 다른 부분과의 입체 상호작용의 결과로서 분자 내의 단일 결합에 대한 회전이 방해되거나 또는 크게 느려지는 형태 입체이성질체이다. 회전장애이성질체의 상호전환은 미리 결정된 조건 하에 분리 및 단리를 가능하게 하기에 충분히 느리다. 열적 라세미화에 대한 에너지 장벽은 키랄 축을 형성하는 하나 이상의 결합의 자유 회전에 대한 입체 장애에 의해 결정될 수 있다.

본 발명은 또한 1개 이상의 원자가 자연에서 통상적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된 사실을 제외하고는 제공된 화학식 중 하나에 언급된 것과 동일한 제약상 허용되는 동위원소 표지된 화합물을 포함한다.

본 발명의 동위원소 표지된 화합물은 일반적으로 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술에 의해 또는 본원에 기재된 것과 유사한 방법에 의해, 달리 사용되는 비표지된 시약 대신에 적절한 동위원소 표지된 시약을 사용하여 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오린 및 염소의 동위원소, 예컨대, 비제한적으로, ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸0, ¹⁷0, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F 및 ³⁶Cl을 포함한다. 본 발명의 특정 동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 방사성 동위원소, 예컨대 ²H, ³H 또는 ¹⁴C가 혼입된 화합물은 약물 또는 기질 조직 분포 검정 중 하나 또는 둘 다에 유용하다. 삼중수소, 즉 ³H, 및 탄소 14, 즉 ¹⁴C 동위원소는 그의 제조 용이성 및 검출감도로 인해 특히 바람직하다. 추가로, 보다 무거운 동위원소, 예컨대 중수소, 즉 ²H로의 치환은 더 큰 대사 안정성으로부터 생성된 특정의 치료 이점, 예를 들어 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건을 제공할 수 있고, 따라서 일부 상황에서 바람직할 수 있다. 양전자 방출 동위원소, 예컨대 ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O 및 ¹³N으로의 치환은 기질 수용체 점유율을 조사하기 위한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 연구에 유용할 수 있다. 본 발명의 동위원소 표지된 화합물은 일반적으로 비-동위원소 표지된 시약을 동위원소 표지된 시약으로 대체하여 하기 반응식 및/또는 실시예 및 제조예에 개시된 절차를 수행함으로써 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 제약상 허용되는 용매화물은 결정화의 용매가 동위원소 치환될 수 있는 것들, 예를 들어 D₂O, d⁶-아세톤, d⁶-DMSO를 포함한다.

달리 나타내지 않는 한, 본 발명의 화합물에 대한 본원의 모든 언급은 그의 염, 용매화물, 수화물 및 복합체, 및 그의 염의 용매화물, 수화물 및 복합체, 예컨대 그의 다형체, 입체이성질체 및 동위원소 표지된 형태에 대한 언급을 포함한다.

본 발명의 화합물은 본원에 제공된 화학식 중 하나의 화합물의 제약상 허용되는 염, 예컨대 예를 들어 산 부가염 및 염기 부가염의 형태로 존재할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은 모 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 그러한 염을 지칭한다. 본원에 사용된 어구 "제약상 허용되는 염(들)"은, 달리 나타내지 않는 한, 본원에 개시된 화학식의 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 포함한다.

예를 들어, 사실상 염기성인 본 발명의 화합물은 다양한 무기 및 유기 산과 매우 다양한 염을 형성할 수 있다. 이러한 염은 동물에게 투여하기 위해 제약상 허용되어야 하지만, 실제로 본 발명의 화합물을 반응 혼합물로부터 제약상 허용되지 않는 염으로서 초기에 단리한 다음, 알칼리성 시약으로의 처리에 의해 후자를 다시 유리 염기 화합물로 단순히 전환시키고, 후속적으로 후자의 유리 염기를 제약상 허용되는 산 부가염으로 전환시키는 것이 종종 바람직하다. 본 발명의 염기 화합물의 산 부가염은 염기 화합물을 수성 용매 매질 중에서 또는 적합한 유기 용매, 예컨대 메탄올 또는 에탄올 중에서 실질적으로 등가량의 선택된 무기 또는 유기 산으로 처리함으로써 제조할 수 있다. 용매의 증발 시, 목적하는 고체 염이 수득된다. 목적 산 염은 또한 적절한 무기 또는 유기 산을 용액에 첨가함으로써 유기 용매 중 유리 염기의 용액으로부터 침전될 수 있다.

이러한 염기성 화합물의 제약상 허용되는 산 부가염을 제조하는 데 사용될 수 있는 산은 비독성 산 부가염, 즉 약리학상 허용되는 음이온을 함유하는 염, 예컨대 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로아이오다이드, 니트레이트, 술페이트, 비술페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 이소니코티네이트, 아세테이트, 락테이트, 살리실레이트, 시트레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 판토테네이트, 비타르트레이트, 아스코르베이트, 숙시네이트, 말레에이트, 겐티시네이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 사카레이트, 포르메이트, 벤조에이트, 글루타메이트, 메탄술포네이트, 에탄술포네이트, 벤젠술포네이트, p-톨루엔술포네이트 및 파모에이트 염을 형성하는 것들이다.

염의 예는 아세테이트, 아크릴레이트, 벤젠술포네이트, 벤조에이트 (예컨대, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 히드록시벤조에이트 및 메톡시벤조에이트), 비카르보네이트, 비술페이트, 비술파이트, 비타르트레이트, 보레이트, 브로마이드, 부틴-1,4-디오에이트, 에데트산칼슘, 캄실레이트, 카르보네이트, 클로라이드, 카프로에이트, 카프릴레이트, 클라불라네이트, 시트레이트, 데카노에이트, 디히드로클로라이드, 디히드로겐포스페이트, 에데테이트, 에디실레이트, 에스톨레이트, 에실레이트, 에틸숙시네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루타메이트, 글리콜레이트, 글리콜릴아르사닐레이트, 헵타노에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 헥실레조르시네이트, 히드라바민, 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, g 히드록시 부티레이트, 아이오다이드, 이소부티레이트, 이소티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우레이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메타포스페이트, 메탄 술포네이트, 메틸술페이트, 모노히드로겐포스페이트, 뮤케이트, 나프실레이트, 나프탈렌-1-술포네이트, 나프탈렌-2-술포네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 파모에이트 (엠보네이트), 팔미테이트, 판토테네이트, 페닐아세테이트, 페닐부티레이트, 페닐프로피오네이트, 프탈레이트, 포스페이트/디포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 프로판술포네이트, 프로피오네이트, 프로피올레이트, 피로포스페이트, 피로술페이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 서브아세테이트, 수베레이트, 숙시네이트, 술페이트, 술포네이트, 술파이트, 탄네이트, 타르트레이트, 테오클레이트, 토실레이트 및 발레레이트 염을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

적합한 염의 예시적인 예는 아미노산, 예컨대 글리신 및 아르기닌, 암모니아, 1급, 2급 및 3급 아민 및 시클릭 아민, 예컨대 피페리딘, 모르폴린 및 피페라진으로부터 유도된 유기 염, 및 나트륨, 칼슘, 칼륨, 마그네슘, 망가니즈, 철, 구리, 아연, 알루미늄 및 리튬으로부터 유도된 무기 염을 포함한다.

염기성 모이어티, 예컨대 아미노 기를 포함하는 본 발명의 화합물은 상기 언급된 산 이외에 다양한 아미노산과 제약상 허용되는 염을 형성할 수 있다.

대안적으로, 사실상 산성인 유용한 화합물은 다양한 약리학상 허용되는 양이온과 염기 염을 형성할 수 있다. 이러한 염의 예는 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염, 특히 나트륨 및 칼륨 염을 포함한다. 이들 염은 모두 통상의 기술에 의해 제조된다. 본 발명의 제약상 허용되는 염기 염을 제조하기 위한 시약으로서 사용되는 화학적 염기는 본원의 산성 화합물과 비독성 염기 염을 형성하는 것들이다. 이들 염은 임의의 적합한 방법, 예를 들어 유리 산을 무기 또는 유기 염기, 예컨대 아민 (1급, 2급 또는 3급), 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 등으로 처리함으로써 제조될 수 있다. 이들 염은 또한 상응하는 산성 화합물을 목적하는 약리학상 허용되는 양이온을 함유하는 수용액으로 처리한 다음, 생성된 용액을 바람직하게는 감압 하에 증발 건조시킴으로써 제조될 수 있다. 대안적으로, 이들은 또한 산성 화합물의 저급 알칸올성 용액 및 목적하는 알칼리 금속 알콕시드를 함께 혼합한 다음, 생성된 용액을 이전과 동일한 방식으로 증발 건조시킴으로써 제조될 수 있다. 어느 경우든, 반응의 완전성 및 목적하는 최종 생성물의 최대 수율을 보장하기 위해 화학량론적 양의 시약이 바람직하게 사용된다.

사실상 산성인 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염기 염을 제조하기 위한 시약으로서 사용될 수 있는 화학적 염기는 이러한 화합물과 비독성 염기 염을 형성하는 것들이다. 이러한 비독성 염기 염은 이러한 약리학상 허용되는 양이온, 예컨대 알칼리 금속 양이온 (예를 들어, 칼륨 및 나트륨) 및 알칼리 토금속 양이온 (예를 들어, 칼슘 및 마그네슘), 암모늄 또는 수용성 아민 부가염, 예컨대 N-메틸글루카민 (메글루민), 및 저급 알칸올암모늄 및 제약상 허용되는 유기 아민의 다른 염기 염으로부터 유도된 것들을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

산 및 염기의 헤미염, 예를 들어 헤미술페이트 및 헤미칼슘 염이 또한 형성될 수 있다.

적합한 염에 대한 검토를 위해, 문헌 [Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley VCH, 2002)]을 참조한다. 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염의 제조 방법, 및 염 및 유리 염기 형태의 상호전환 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있다.

본 발명의 염은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염은 화합물 및 목적하는 산 또는 염기의 용액을 적절하게 함께 혼합함으로써 용이하게 제조될 수 있다. 염은 용액으로부터 침전되어 여과에 의해 수집될 수 있거나 또는 용매의 증발에 의해 회수될 수 있다. 염에서의 이온화도는 완전히 이온화된 것에서부터 거의 비이온화된 것까지 다양할 수 있다.

관련 기술분야의 통상의 기술자는 염기성 관능기를 갖는 유리 염기 형태의 본 발명의 화합물이 화학량론적 과량의 적절한 산으로 처리함으로써 산 부가염으로 전환될 수 있음을 이해할 것이다. 본 발명의 화합물의 산 부가염은 전형적으로 수성 용매의 존재 하에 약 0℃ 내지 100℃의 온도에서 화학량론적 과량의 적합한 염기, 예컨대 탄산칼륨 또는 수산화나트륨으로 처리함으로써 상응하는 유리 염기로 재전환될 수 있다. 유리 염기 형태는 통상적인 수단, 예컨대 유기 용매로의 추출에 의해 단리될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물의 산 부가염은 염의 차등 용해도, 산의 휘발성 또는 산도를 이용함으로써, 또는 적절하게 로딩된 이온 교환 수지로 처리함으로써 상호교환될 수 있다. 예를 들어, 상호교환은 출발 염의 산 성분보다 낮은 pK의 약간의 화학량론적 과량의 산과 본 발명의 화합물의 염의 반응에 의해 영향을 받을 수 있다. 이러한 전환은 전형적으로 약 0℃ 내지 절차를 위한 매질로서 사용되는 용매의 비점의 온도에서 수행된다. 전형적으로 유리 염기 형태의 중개를 통해 염기 부가염과 유사한 교환이 가능하다.

본 발명의 화합물은 비용매화 및 용매화 형태 둘 다로 존재할 수 있다. 용매 또는 물이 단단히 결합될 때, 복합체는 습도와 무관하게 잘 정의된 화학량론을 가질 것이다. 그러나, 채널 용매화물 및 흡습성 화합물에서와 같이 용매 또는 물이 약하게 결합된 경우, 물/용매 함량은 습도 및 건조 조건에 좌우될 것이다. 이러한 경우, 비-화학량론이 규준일 것이다. 용어 '용매화물'은 본 발명의 화합물 및 1종 이상의 제약상 허용되는 용매 분자, 예를 들어 에탄올을 포함하는 분자 복합체를 기재하기 위해 본원에 사용된다. 용어 '수화물'은 용매가 물인 경우에 사용된다. 본 발명에 따른 제약상 허용되는 용매화물은 결정화의 용매가 동위원소 치환될 수 있는 수화물 및 용매화물, 예를 들어 D₂O, d6-아세톤, d6-DMSO를 포함한다.

본 발명은 또한 본원에 제공된 화학식의 화합물의 전구약물에 관한 것이다. 따라서, 그 자체로 약리학적 활성을 거의 또는 전혀 갖지 않을 수 있는 본 발명의 화합물의 특정 유도체는, 환자에게 투여되는 경우, 예를 들어 가수분해성 절단에 의해 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다. 이러한 유도체는'전구약물'로 지칭된다. 전구약물의 사용에 대한 추가의 정보는 문헌 ['Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi and W Stella); 'Bioreversible Carriers in Drug Design', Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association); Guarino, V.R; Stella, V.J.: Biotech Pharm. Aspects 2007 5 (Pt2) 133-187; and J. Rautio et al. Nature Reviews Drug Discovery, 17, 559-587 (2018)]에서 찾을 수 있으며, 그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

본 발명에 따른 전구약물은, 예를 들어 문헌 ["Design of Prodrugs" by H Bundgaard (Elsevier, 1985)] (그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같이, 예를 들어 본 발명의 화합물에 존재하는 적절한 관능기를 '프로모이어티'로서 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 특정 모이어티로 대체함으로써 제조될 수 있다.

본 발명에 따른 전구약물의 일부 비제한적 예는 하기를 포함한다:

(i) 화합물이 카르복실산 관능기 (-COOH)를 함유하는 경우, 그의 에스테르, 예를 들어 수소의 (C1-C6)알킬로의 대체;

(ii) 화합물이 알콜 관능기 (-OH)를 함유하는 경우, 그의 에테르, 예를 들어 수소의 (C1-C6)알카노일옥시메틸 또는 포스페이트 에테르 기로의 대체; 및

(iii) 화합물이 1급 또는 2급 아미노 관능기 (NH₂ 또는 NHR, 여기서 R은 H가 아님)를 함유하는 경우, 그의 아미드, 예를 들어 하나 또는 둘 다의 수소의 적합하게는 대사적으로 불안정한 기, 예컨대 아미드, 카르바메이트, 우레아, 포스포네이트, 술포네이트 등으로의 대체.

상기 예에 따른 대체 기의 추가의 예 및 다른 전구약물 유형의 예는 상기 언급된 참고문헌에서 찾아볼 수 있다.

마지막으로, 본 발명의 특정 화합물은 그 자체로 본 발명의 다른 화합물의 전구약물로서 작용할 수 있다.

또한, 본원에 기재된 화학식의 화합물의 대사물, 즉, 약물의 투여 시, 종종 산화 또는 탈알킬화에 의해 생체내 형성된 화합물이 본 발명의 범주 내에 포함된다. 본 발명에 따른 대사물의 일부 예는 하기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다:

(i) 본 발명의 화합물이 알킬 기를 함유하는 경우, 그의 히드록시알킬 유도체 (-CH -> -COH):

(ii) 본 발명의 화합물이 알콕시 기를 함유하는 경우, 그의 히드록시 유도체 (-OR -> -OH);

(iii) 본 발명의 화합물이 3급 아미노 기를 함유하는 경우, 그의 2급 아미노 유도체 (-NRR^' -> -NHR 또는 -NHR^');

(iv) 본 발명의 화합물이 2급 아미노 기를 함유하는 경우, 그의 1급 유도체 (-NHR -> -NH₂);

(v) 본 발명의 화합물이 페닐 모이어티를 함유하는 경우, 그의 페놀 유도체 (-Ph -> -PhOH);

(vi) 본 발명의 화합물이 아미드 기를 함유하는 경우, 그의 카르복실산 유도체 (-CONH₂ -> COOH); 및

(vii) 화합물이 히드록시 또는 카르복실산 기를 함유하는 경우, 화합물은 예를 들어 글루쿠론산과의 접합에 의해 대사되어 글루쿠로니드를 형성할 수 있음. 접합 대사의 다른 경로가 존재함. 이들 경로는 빈번하게 2상 대사로 공지되어 있고, 예를 들어 황산화 또는 아세틸화를 포함함. 다른 관능기, 예컨대 NH 기가 또한 접합에 적용될 수 있음.

한 실시양태에서, 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 고체 형태가 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 고체 형태는 결정질 형태이다. 한 실시양태에서, 고체 형태는 무정형 형태이다.

본원에 사용된 용어 "결정질"은 규칙적으로 반복되는 분자 배열 또는 외부 면 평면을 갖는 것을 의미한다. 단일 화합물은 다양한 결정질 형태를 생성할 수 있으며, 여기서 각각의 형태는 상이하고 별개의 고체 상태 물리적 특성, 예컨대 상이한 용해도 프로파일, 용해 속도, 융점 온도, 유동성 및/또는 상이한 X선 회절 피크를 갖는다. 물리적 특성의 차이는 제약 파라미터, 예컨대 저장 안정성, 압축성 및 밀도 (제제화 및 제품 제조에서 중요할 수 있음), 및 용해 속도 (생체이용률에서 중요한 인자일 수 있음)에 영향을 미칠 수 있다.

용어 '무정형'은 물질이 분자 수준에서 장범위 규칙이 결여되고, 온도에 따라 고체 또는 액체의 물리적 특성을 나타낼 수 있는 상태를 지칭한다. 전형적으로, 이러한 물질은 특유의 X선 회절 패턴을 제공하지 않고, 고체의 특성을 나타내지만, 보다 형식적으로는 액체로서 기재된다. 가열시, 상태의 변화, 전형적으로 2차(second order) ('유리 전이')를 특징으로 하는 고체에서 액체 특성으로의 변화가 발생한다.

고체-상태 화학에서 관련 기술분야의 통상의 기술자가 고체 형태를 분석하는 데 사용할 수 있는 다수의 분석 방법이 존재한다. 분말 X선 회절은 또한 혼합물 중 결정질 고체 형태 (또는 형태들)의 양을 정량화하는 데 적합할 수 있다. 분말 X선 회절에서, X선은 결정질 분말 상으로 향하고, 회절된 X선의 강도는 X선 공급원과 샘플에 의해 회절된 빔 사이의 각도의 함수로서 측정된다. 이들 회절된 X선의 강도는 피크로서 그래프 상에 플롯팅될 수 있으며, x-축은 X선 공급원과 회절된 X선 사이의 각도 (이는 "2-세타" 각도로서 공지됨)이고, y-축은 회절된 X선의 강도이다. 이 그래프는 분말 X선 회절 패턴 또는 분말 패턴으로 불린다. 상이한 결정질 고체 형태는 상이한 분말 패턴을 나타내며, 이는 x-축 상의 피크의 위치가 결정의 고체-상태 구조의 특성이기 때문이다.

관련 기술분야의 통상의 기술자는 분말 패턴에서 피크의 2-세타 x-축 값의 전형적인 정밀도가 대략 플러스 또는 마이너스 0.2도 2-세타 (± 0.2도 2세타)라는 것을 알 것이다. 따라서, 예를 들어 "약 18.0도 2-세타"에서 나타나는 회절 피크는 피크가 18.0도 ± 0.2도 2-세타에서 나타나는 것을 의미하며, 즉 이는 대부분의 조건 하에 대부분의 X선 회절계 상에서 측정 시 17.8도 2-세타 내지 18.2도 2-세타일 수 있다. 추가로, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 상대 피크 강도가 장치간 가변성 뿐만 아니라 결정화도, 바람직한 배향, 제조된 샘플 표면, 및 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 기타 인자로 인한 가변성을 나타낼 것이며, 단지 정성적 척도로서만 취해져야 함을 알 것이다. 따라서, 분말 X선 회절 피크 위치와 관련하여 본원에 사용된 용어 "본질적으로 동일한"은 피크 위치 및 강도에서의 전형적인 가변성이 대략 ± 0.2도 2 세타임을 의미한다.

분말 X선 회절은 결정질 고체 형태를 특징화 및/또는 확인하는 데 사용할 수 있는 여러 분석 기술 중 단지 하나이다. 분광학적 기술, 예컨대 라만 (현미경적 라만 포함), 적외선 및 고체 상태 NMR 분광분석법을 사용하여 결정질 고체 형태를 특징화하고/거나 확인할 수 있다. 이들 기술은 또한 혼합물 중 하나 이상의 결정질 고체 형태의 양을 정량화하는 데 사용될 수 있고, 피크 값은 또한 피크 값 앞에 수식어 "약"을 사용하여 보고될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "무수"는 결정 격자 내에 임의의 용매 또는 물 분자가 없는 결정질 형태를 지칭한다.

용어 "수화물"은 화합물 및 화학량론적 또는 비-화학량론적 양의 물을 포함하는 용매화물을 지칭한다. 용어 "1수화물"은 화합물 분자당 1개의 물 분자 (즉, 물 대 화합물의 1:1 화학량론)를 포함하는 수화물을 지칭한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1을 제공한다.

한 실시양태에서, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1은 분말 X선 회절 (PXRD) (2-세타)로 특징지어진다.

표 X는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1에 대한 PXRD 피크 목록을 도 2-세타 (± 0.2 도 2-세타)로 제공한다.

표 X

한 실시양태에서, 본 발명은 5.0, 8.7, 9.3, 10.8, 14.5, 15.3, 18.8 및 20.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서의 피크를 특징으로 하는 것을 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 도 1에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 제공한다.

한 실시양태에서, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2는 분말 X선 회절 (PXRD) (2-세타)로 특징지어진다. 한 실시양태에서, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2의 PXRD 분석은, 예를 들어 실시예 77에 기재된 바와 같이 25℃ 및 10% 미만의 상대 습도에서 수행된다.

표 Y는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2에 대한 PXRD 피크 목록을 도 2-세타 (± 0.2 도 2-세타)로 제공한다.

표 Y

한 실시양태에서, 본 발명은 7.1, 9.4, 12.4, 12.8, 14.3, 15.6, 16.4, 17.4, 18.5, 18.9, 19.5, 19.9, 21.1, 21.4, 23.2, 23.7, 24.8, 25.6, 27.6, 30.3, 33.2, 33.5 및 37.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서의 피크를 특징으로 하는 것을 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 도 2에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 제공한다.

한 실시양태에서, 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3은 분말 X선 회절 (PXRD) (2-세타)로 특징지어진다. 한 실시양태에서, 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 PXRD 분석은 25℃ 및 30% 초과의 상대 습도에서 수행된다.

표 Z는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3에 대한 PXRD 피크 목록을 도 2-세타 (± 0.2 도 2-세타)로 제공한다.

표 Z

한 실시양태에서, 본 발명은 13.7, 18.0 및 18.3도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서의 피크를 특징으로 하는 것을 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 6.9, 9.1, 13.7, 18.0 및 18.3도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서의 피크를 특징으로 하는 것을 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 6.9, 9.1, 11.8, 12.0, 13.7, 14.0, 15.2, 15.8, 18.0, 18.3, 19.0, 19.3, 20.2, 20.9, 21.6, 22.6, 23.6, 24.0, 24.9, 25.2, 25.8, 27.5, 28.1, 28.4, 29.8, 30.9, 31.7, 32.3 및 36.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서의 피크를 특징으로 하는 것을 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 도 3에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 제공한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4를 제공한다.

한 실시양태에서, 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4는 분말 X선 회절 (PXRD) (2-세타)로 특징지어진다.

한 실시양태에서, 본 발명은 도 4에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4를 제공한다.

본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 단독으로 또는 다른 치료제 또는 완화제와 조합하여 투여하는 것을 포함하는 치료 방법 및 용도를 추가로 제공한다.

화학식 I 및 화학식 II의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은 MEK 키나제 억제제로 치료될 수 있는 질환 및 장애, 예컨대 MEK-연관 질환 및 장애를 치료하는 데, 예를 들어 비정상적 세포 성장, 예컨대 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료에 유용하다. MEK 억제제로서 작용하는 화학식 I 및 화학식 II의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염의 능력은 실시예 A에 기재된 검정에 의해 입증될 수 있다. IC₅₀ 값이 표 A에 나타나 있다.

따라서, 한 실시양태에서, 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 종양을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 종양은 MEK-연관 종양이다.

본원에 사용된 용어 "MEK 키나제 억제제" 및 "MEK 억제제"는 상호교환가능하게 사용되고, 미토겐-활성화 단백질 키나제 효소 MEK1 및/또는 MEK2를 억제하는 화합물을 지칭한다.

용어 "MEK-연관" 및 "MEK-매개"는 상호교환가능하게 사용되고, MEK 억제제로 치료될 수 있는 MEK 키나제의 구성적 활성화를 갖는 질환 또는 장애를 지칭한다. 예는 MEK-연관 비정상적 세포 성장, 예컨대 MEK-연관 종양, 예를 들어 MEK-연관 암을 포함한다. 한 실시양태에서, 용어 "MEK-연관"은 MEK 키나제의 발현 또는 활성의 조절이상, 또는 BRAF 유전자 또는 BRAF 키나제의 조절이상을 갖는 질환 또는 장애를 지칭한다.

어구 "MEK 키나제의 발현 또는 활성의 조절이상"은, 세포에서 MEK 단백질의 키나제 도메인 (예를 들어, MEK 단백질의 구성적 활성 키나제 도메인)의 활성의 병원성 증가를 유발하는, 세포에서 MEK 유전자의 과다발현으로부터 유발되는 MEK 단백질의 과다발현 또는 자가분비 활성을 유발하는 유전자 증폭을 지칭한다.

어구 "BRAF 유전자 또는 BRAF 키나제의 조절이상"은 유전자 돌연변이 (예를 들어, 융합 단백질의 발현을 유발하는는 BRAF 유전자 전위, 야생형 BRAF 단백질과 비교하여 적어도 1개의 아미노산의 결실을 포함하는 BRAF 단백질의 발현을 유발하는 BRAF 유전자에서의 결실, 또는 야생형 BRAF 단백질과 비교하여 1개 이상의 점 돌연변이를 갖는 BRAF 단백질의 발현을 유발하는 BRAF 유전자에서의 돌연변이)를 지칭한다. 또 다른 예로서, BRAF 유전자, BRAF 단백질, 또는 이들 중 임의의 것의 발현 또는 활성 또는 수준의 조절이상은 돌연변이를 포함하지 않는 BRAF 유전자에 의해 코딩되는 단백질과 비교하여 증가된 활성을 갖거나 구성적으로 활성인 BRAF 단백질을 코딩하는 BRAF 유전자에서의 돌연변이일 수 있다. 예를 들어, BRAF 유전자, BRAF 단백질, 또는 이들 중 임의의 것의 발현 또는 활성 또는 수준의 조절이상은 기능적 키나제 도메인을 포함하는 BRAF의 제1 부분 및 파트너 단백질 (즉, BRAF가 아닌 것)의 제2 부분을 함유하는 융합 단백질의 발현을 유발하는 유전자 또는 염색체 전위의 결과일 수 있다.

한 실시양태에서, MEK-연관 질환 또는 장애는 활성화 BRAF 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 질환 또는 장애는 활성화 BRAF 돌연변이를 갖는 MEK-연관 암이다. BRAF 돌연변이의 비제한적 예는 BRAF V600 돌연변이, 예를 들어 V600E, V600D, V600K, V600R 및 V600S를 포함한다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E 돌연변이이다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600K 돌연변이이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 질환 또는 장애는 KIAA11549-BRAF, MKRN1-BRAF, TRIM24-BRAF, AGAP3-BRAF, ZC3HAV1-BRAF, AKAP9-BRAF, CCDC6-BRAF, AGK-BRAF, EPS15-BRAF, NUP214-BRAF, ARMC10-BRAF, BTF3L4-BRAF, GHR-BRAF, ZC3HAV1-BRAF, ZNF767-BRAF, CCDC91-BRAF, DYNC112-BRAF, ZKSCAN1-BRAF, GTF2I-BRAF, MZT1-BRAF, RAD18-BRAF, CUX1-BRAF, SLC12A7-BRAF, MYRIP-BRAF, SND1-BRAF, NUB1-BRAF, KLHL7-BRAF, TANK-BRAF, RBMS3-BRAF, STRN3-BRAF, STK35-BRAF, ETFA-BRAF, SVOPL-BRAF, JHDM1D-BRAF, 또는 BCAP29-BRAF를 포함하나 이에 제한되지는 않는, 구성적 키나제 활성화 및 형질전환을 유도하는 1개 이상의 BRAF 융합체를 갖는 MEK-연관 종양이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 질환 또는 장애는 BRAF-융합 단백질을 갖는 MEK-연관 종양이며, 여기서 종양은 유방 암종 (예를 들어, 유방 침습성 관 암종), 결장직장 암종 (예를 들어, 결장 선암종), 식도 암종 (예를 들어, 식도 선암종), 신경교종 (예를 들어, 뇌 결합조직형성 영아 신경절교종, 뇌 모양세포성 성상세포종, 뇌 다형성 황색성상세포종, 척수 저등급 신경교종 (NOS), 역형성 핍지교종, 역형성 신경절교종), 두경부 암종 (예를 들어, 두경부 신경내분비 암종), 폐 암종 (예를 들어, 폐 선암종, 폐 비소세포 폐암 (NOS)), 흑색종 (예를 들어, 피부 흑색종 스피츠양, 점막 흑색종 비-스피츠양, 피부 흑색종 스피츠양, 원인불명 원발성 흑색종, 피부 흑색종 비-스피츠양), 췌장 암종 (예를 들어, 선암종, 췌장 세엽 세포 암종), 전립선 암종 (예를 들어, 전립선 세엽 선암종), 육종 (악성 고형 섬유성 종양), 갑상선 암종 (갑상선 유두상 암종), 원인불명 원발성 암종 (예를 들어, 원인불명 원발성 선암종), 흉막 중피종, 직장 선암종, 자궁 자궁내막 암종 (예를 들어, 자궁 자궁내막 선암종 (NOS)) 또는 난소 장액성 암종이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 암은 표 1에 기재된 BRAF-융합 단백질을 갖는 암으로부터 선택된다 (문헌 [J.S. Ross, et al., Int. J. Cancer: 138, 881-890 (2016)]).

표 1. 예시적인 BRAF 융합 파트너 및 암

한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 야생형 종양이다.

용어 "야생형"은 참조 핵산 또는 단백질과 관련된 질환 또는 장애를 갖지 않는 대상체에서 전형적으로 발견되는 핵산 (예를 들어, BRAF 유전자 또는 BRAF mRNA)을 기재한다.

용어 "야생형 BRAF"는 활성화 BRAF-돌연변이를 갖지 않는 대상체에서 발견되는 BRAF 핵산 (예를 들어, BRAF 유전자 또는 BRAF mRNA) 또는 BRAF 단백질을 기재한다.

본원에 사용된 "비정상적 세포 성장"은, 달리 나타내지 않는 한, 정상 조절 메카니즘과 독립적인 세포 성장 (예를 들어, 접촉 억제의 상실), 예를 들어 종양을 지칭한다. 비정상적 세포 성장은 양성 (비암성) 또는 악성 (암성)일 수 있다.

용어 "암" 또는 "암성"은 비정상적 세포 성장에 의해 유발된 임의의 악성 및/또는 침습성 성장 또는 종양을 지칭한다. 암은 신체 내 특정 부위에서 기원하는 원발성 암, 암이 시작된 장소로부터 신체의 다른 부분으로 확산된 전이성 암, 완화 후 원래의 원발성 암으로부터의 재발, 및 이전 암 병력을 갖는 환자에서의 새로운 원발성 암인 제2 원발성 암 (이전 암은 제2 원발성 암과 상이한 유형임)을 포함한다. 암은 그를 형성하는 세포의 유형에 대해 명명된 고형 종양, 혈액, 골수 또는 림프계의 암을 포함한다. 고형 종양은 통상적으로 낭 또는 액상 영역을 함유하지 않는 조직의 비정상적 성장물 또는 덩어리이다. 고형 종양의 예는 육종, 암종 및 림프종이다. 백혈병 (혈액암)은 일반적으로 고형 종양을 형성하지 않는다 (국립 암 연구소, 암 용어 사전).

본원에 사용된 용어 "치료하다" 또는 "치료"는 치료적 또는 완화적 조치를 지칭한다. 유익한 또는 목적하는 임상 결과는 검출가능하든 또는 검출불가능하든, 질환 또는 장애 또는 상태와 연관된 증상의 전체적 또는 부분적 완화, 질환 정도의 감소, 질환 상태 안정화 (즉, 악화되지 않음), 질환 진행의 지연 또는 둔화, 질환 상태 (예를 들어, 질환의 1종 이상의 증상)의 호전 또는 완화, 및 관해 (부분적이든 또는 전체적이든)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본원에 사용된 용어 암을 "치료하다" 또는 "치료하는"은 암을 갖거나 또는 암으로 진단된 대상체에게 본 발명의 화합물을 투여하여, 적어도 1종의 양성 치료 효과, 예컨대 예를 들어 암 세포의 감소된 수, 감소된 종양 크기, 말초 기관 내로의 암 세포 침윤의 감소된 속도, 또는 종양 전이 또는 종양 성장의 감소된 속도를 달성하거나, 이러한 용어가 적용되는 장애 또는 상태, 또는 이러한 장애 또는 상태의 1종 이상의 증상의 진행을 역전, 완화 또는 억제하는 것을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "치료"는, 달리 나타내지 않는 한, 바로 위에 정의된 "치료하는"과 같은 치료하는 행위를 지칭한다. 용어 "치료하는"은 또한 대상체의 보조 및 신보조 치료를 포함한다.

본 발명의 목적상, 유익한 또는 목적하는 임상 결과는 다음 중 하나 이상을 포함하나 이에 제한되지는 않는다: 신생물성 또는 암성 세포의 증식의 감소 (또는 파괴); 전이 또는 신생물성 세포의 억제; 종양의 크기의 축소 또는 감소; 대상체에 대한 완화 기간의 증가 (예를 들어, 치료를 받지 않거나 또는 상이한 치료를 받는 유사한 암을 갖는 대상체에서의 하나 이상의 측정기준(들)과 비교하여, 또는 치료 전 동일한 대상체에서의 하나 이상의 측정기준(들)과 비교하여); 암으로부터 발생한 증상의 감소; 암을 앓고 있는 대상체의 삶의 질의 증가; 암을 치료하는 데 요구되는 다른 의약의 용량의 감소; 암의 진행의 지연; 암의 치유; 암의 하나 이상의 내성 메카니즘의 극복; 및/또는 암 환자의 생존 연장. 암에서의 양성 치료 효과는 여러 방식으로 측정될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [W. A. Weber, Assessing tumor response to therapy, J. Nucl. Med. 50 Suppl. 1 :1 S-10S (2009)]). 예를 들어, 종양 성장 억제 (T/C)와 관련하여, 국립 암 연구소 (NCI) 표준에 따르면, 42% 이하의 T/C가 항종양 활성의 최소 수준이다. T/C<10%는 높은 항종양 활성 수준으로 간주되며, T/C (%) = 치료군의 중앙 종양 부피/대조군의 중앙 종양 부피 x 100이다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물의 투여에 의해 달성되는 치료는 부분 반응 (PR), 완전 반응 (CR), 전체 반응 (OR), 무진행 생존 (PFS), 무질환 생존 (DFS) 및 전체 생존 (OS) 중 임의의 것을 참조하여 정의된다. "종양 진행까지의 시간"으로도 지칭되는 PFS는 치료 동안 및 치료 후에 암이 성장하지 않는 시간의 길이를 나타내고, 환자가 CR 또는 PR을 경험한 시간의 양, 뿐만 아니라 환자가 안정 질환 (SD)을 경험한 시간의 양을 포함한다. DFS는 치료 동안 및 치료 후에 환자가 질환이 없는 상태를 유지하는 시간의 길이를 지칭한다. OS는 나이브 또는 비치료 대상체 또는 환자와 비교하여 기대 수명의 연장을 지칭한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물로의 치료에 대한 반응은 고형 종양의 반응 평가 기준 (RECIST) 1.1 반응 기준을 사용하여 평가되는 PR, CR, OR, PFS, DFS 또는 OS 중 임의의 것이다.

암 환자를 치료하는 데 효과적인 본 발명의 화합물에 대한 치료 요법은 환자의 질환 상태, 연령 및 체중, 및 대상체에서 항암 반응을 도출하는 요법의 능력과 같은 인자에 따라 달라질 수 있다. 본 발명의 임의의 측면의 한 실시양태가 모든 대상체에서 양성 치료 효과를 달성하는 데 효과적이지 않을 수 있지만, 관련 기술분야에 공지된 임의의 통계적 시험, 예컨대 스튜던트 t-검정, 카이2-검정, 만 및 휘트니에 따른 U-검정, 크루스칼-왈리스 검정 (H-검정), 존키어-터프스트라 검정 및 윌콘슨 검정에 의해 결정 시 통계적으로 유의한 수의 대상체에서 효과적이어야 한다.

용어 "치료 요법", "투여 프로토콜" 및 "투여 요법"은 단독의 또는 또 다른 치료제와 조합된 본 발명의 화합물의 투여 용량 및 시기를 지칭하기 위해 상호교환가능하게 사용된다.

"호전시키는"은 조합물을 투여하지 않는 것과 비교하여, 본원에 기재된 조합물로 치료 시 1종 이상의 증상의 경감 또는 개선을 의미한다. "호전시키는"은 또한 증상의 지속기간의 단축 또는 감소를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "대상체"는 포유동물, 예컨대 인간을 포함한 임의의 동물을 지칭한다. 한 실시양태에서, 대상체는 치료 및/또는 예방될 질환 또는 장애의 적어도 1종의 증상을 경험하고/거나 나타냈다. 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 종양을 갖는 것으로 확인 또는 진단되었다 (예를 들어, 규제 기관-승인된, 예를 들어 FDA-승인된 검정 또는 키트를 사용하여 결정된 바와 같음). 한 실시양태에서, 대상체는 BRAF 돌연변이에 대해 양성인 MEK-연관 종양을 갖는다 (예를 들어, 규제 기관-승인된 검정 또는 키트를 사용하여 결정된 바와 같음). 대상체는 그의 종양이 MEK 돌연변이를 갖는 대상체일 수 있다 (예를 들어, 여기서 종양은 규제 기관-승인된, 예를 들어 FDA-승인된 키트 또는 검정을 사용하여 그와 같이 확인됨). 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 종양을 갖는 것으로 의심된다. 한 실시양태에서, 대상체는 대상체가 BRAF 돌연변이를 갖는 MEK-연관 종양을 갖는다는 것을 나타내는 임상 기록을 갖는다 (임의로 임상 기록은 대상체가 본원에 제공된 임의의 조성물로 치료되어야 한다는 것을 나타냄). 한 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 한 실시양태에서, 인간 대상체는 소아 대상체이다.

본원에 사용된 용어 "소아 대상체"는 진단 또는 치료 시에 21세 미만의 대상체를 지칭한다. 용어 "소아"는 신생아 (출생부터 생애 첫달까지); 영유아 (1개월부터 2세까지); 아동 (2세부터 12세까지); 및 청소년 (12세부터 21세까지 (22세 생일까지이나 이를 포함하지는 않음))을 비롯한 다양한 하위집단으로 추가로 나뉠 수 있다. Berhman RE, Kliegman R, Arvin AM, Nelson WE, Nelson Textbook of Pediatrics, 15th Ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1996; Rudolph AM, et al. Rudolph's Pediatrics, 21st Ed. New York: McGraw-Hill, 2002; and Avery MD, First LR. Pediatric Medicine, 2nd Ed. Baltimore: Williams & Wilkins; 1994. 한 실시양태에서, 소아 대상체는 출생부터 생애 첫 28일까지, 29일부터 2세 미만까지, 2세부터 12세 미만까지, 또는 12세부터 21세까지 (22세 생일까지이나, 이를 포함하지는 않음)이다. 한 실시양태에서, 소아 대상체는 출생부터 생애 첫 28일까지, 29일부터 1세 미만까지, 1개월부터 4개월 미만까지, 3개월부터 7개월 미만까지, 6개월부터 1세 미만까지, 1세부터 2세 미만까지, 2세부터 3세 미만까지, 2세부터 7세 미만까지, 3세부터 5세 미만까지, 5세부터 10세 미만까지, 6세부터 13세 미만까지, 10세부터 15세 미만까지, 또는 15세부터 22세 미만까지이다.

한 실시양태에서, 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 종양을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 종양은 MEK-연관 종양이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E 및/또는 V600K 및/또는 V600D 및/또는 V600R 및/또는 V600S이다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E이다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600K이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 융합체, 예를 들어 본원에 개시된 BRAF 융합체를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 야생형 종양이다.

본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, 종양은 고형 종양이다. 본원에 개시된 임의의 방법의 한 실시양태에서, 고형 종양은 MEK-연관 종양이다. 한 실시양태에서, 종양은 두개내 종양이다. 한 실시양태에서, 종양은 두개외 종양이다. 본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, 종양 (예를 들어, MEK-연관 종양)은 악성 종양 (즉, 암), 예를 들어 MEK-연관 암이다. 본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 흑색종, 결장암, 결장직장암, 폐암 (예를 들어, 소세포 폐 암종 또는 비소세포 폐 암종), 갑상선암 (예를 들어, 유두상 갑상선암, 수질성 갑상선암, 분화 갑상선암, 재발성 갑상선암 또는 불응성 분화 갑상선암), 유방암, 난소암, CNS의 암, 골암, 항문암, 항문관암 또는 항문직장암, 눈의 암, 담관암, 관 상피내 암종, 간암, 담낭암 또는 흉막암, 경구암(oral cancer), 구강암(oral cavity cancer), 구순암, 구인두암, 코암, 비강암 또는 중이암, 외음부암, 식도암, 자궁경부암, 위장 카르시노이드 종양, 하인두암, 신장암, 후두암, 간암, 폐암, 흑색종, 비인두암, 말초 신경계암 (예를 들어, 신경모세포종), 난소암, 췌장암, 복막암, 망 및 장간막암, 인두암, 전립선암, 신암 (예를 들어, 신세포 암종 (RCC)), 소장암, 연부조직암, 위암, 고환암, 자궁암, 요관암 또는 방광암이다.

본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 두개외 암 (즉, 두개외 종양)이다. 한 실시양태에서, 두개외 암은 흑색종, 결장직장암, 갑상선암, 비소세포 폐암, 난소암 및 신경모세포종으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 흑색종이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 결장직장암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 갑상선암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 난소암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 신경모세포종이다.

본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 CNS 암이다.

본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, MEK-연관 암은 두개내 암 (뇌암)이다.

본원에 기재된 임의의 사용 방법의 한 실시양태에서, 암은 전이성 암이다.

용어 "전이"는 암 세포가 처음 형성된 장소 (원발성 부위)로부터 대상체 내의 하나 이상의 다른 부위 (하나 이상의 속발성 부위)로의 암 세포의 확산을 지칭하는 관련 기술분야에 공지된 용어이다. 전이에서, 암 세포는 원래의 (원발성) 종양으로부터 떨어져 나와, 혈액 또는 림프계를 통해 이동하여, 신체의 다른 기관 또는 조직에서 새로운 종양 (전이성 종양)을 형성한다. 새로운 전이성 종양은 원발성 종양과 동일하거나 유사한 암 세포를 포함한다. 속발성 부위에서, 종양 세포는 증식하여 이 원위 부위에서 속발성 종양의 성장 또는 콜로니화를 시작할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "전이성 암" ("속발성 암"으로도 공지됨)은 하나의 조직 유형에서 기원하지만, 이어서 (원발성) 암의 기원 밖의 하나 이상의 조직으로 확산되는 암의 유형을 지칭한다. 전이성 뇌암은 뇌에서의 암, 즉 뇌 이외의 조직에서 기원하고 뇌로 전이된 암을 지칭한다.

한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 놀라운 뇌 및/또는 CNS 침투도를 나타낸다. 이러한 화합물은 BBB를 가로지를 수 있고, 뇌 및/또는 다른 CNS 구조에서 MEK 키나제를 억제할 수 있다. 따라서, 한 실시양태에서, 본원에 제공된 화합물은 CNS 종양, 예컨대 CNS 암을 치료하는 데 유용하다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 악성 CNS 종양 (즉, MEK-연관 CNS 암)이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 BRAF 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 BRAF V600 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E 및/또는 V600K 및/또는 V600D 및/또는 V600R 및/또는 V600S이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 BRAF V600E 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 BRAF V600K 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 융합체를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 야생형 종양이다.

본원에서 상호교환가능하게 사용된 용어 "CNS 암" 또는 "CNS의 암"은 뇌의 암 (두개내 종양으로도 공지됨), 척수의 암, 및 뇌 및 척수를 둘러싼 수막의 암을 비롯한 CNS의 암 (즉, 악성 종양)을 지칭한다. 뇌암은 전이성 뇌암 (즉, 전이성 두개내 암) 및 악성 원발성 뇌 종양을 포함한다.

한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 MEK-연관 전이성 뇌암이다. MEK-연관 전이성 뇌암은 본원에 기재된 임의의 암의 결과일 수 있으며, 여기서 대상체는 적어도 1개의 뇌 전이가 발생하였다. 한 실시양태에서, 전이성 뇌암은 흑색종, 결장직장암, 갑상선암, 비소세포 폐암, 난소암 또는 신경모세포종이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 전이성 뇌암은 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암 또는 전이성 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 전이성 뇌암은 전이성 흑색종이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 전이성 뇌암은 전이성 결장직장암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 전이성 뇌암은 전이성 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 전이성 뇌암은 전이성 난소암이다. 한 실시양태에서, 전이성 뇌암은 전이성 갑상선암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 전이성 뇌암은 신장암이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 전이성 암 (즉, 전이성 뇌암)이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 전이성 흑색종이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 전이성 결장직장암이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 전이성 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 전이성 난소암이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 전이성 갑상선암이다. 한 실시양태에서, 암은 적어도 1개의 뇌 전이를 동반한 MEK-연관 신경모세포종이다. 임의의 상기 MEK-연관 전이성 뇌암의 한 실시양태에서, 암은 BRAF 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, 암은 BRAF V600 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E 및/또는 V600K 및/또는 V600D 및/또는 V600R 및/또는 V600S이다. 한 실시양태에서, 암은 BRAF V600E 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, 암은 BRAF V600K 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 융합체를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 BRAF 야생형 종양이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 암은 연수막 전이 (연수막 질환 (LMD))이다. LMD는 뇌 또는 척추의 내층 및/또는 뇌척수액 (CSF) 또는 연수막 암종증에서 성장하는 CNS 전이의 하위세트를 나타낸다. 포유동물에서, 수막은 경막, 거미막 및 연질막이다. CSF는 거미막과 연질막 사이의 지주막하 공간에 위치한다. 거미막 및 연질막은 함께 때때로 연수막으로 불린다. LMD가 연수막 및/또는 척수 주위의 CSF에서 발생하는 경우, 이는 "두개외 LMD"로 지칭될 수 있다. LMD가 뇌의 연수막 및/또는 CSF에서 발생하는 경우, 이는 "두개내 LMD"로 지칭될 수 있다. LMD 암 세포는 CSF에 현탁될 수 있기 때문에, 이들은 CNS 전반에 걸쳐 신속하게 확산될 수 있다. 그 결과, LMD는 불량한 예후를 가지며, 생존은 전형적으로 개월 단위로 측정된다. 한 실시양태에서, 전이성 암은 LMD이다. 한 실시양태에서, 전이성 암은 MEK-연관 LMD이다. 한 실시양태에서, 전이성 암은 MEK-연관 두개내 LMD이다. 한 실시양태에서, 전이성 암은 MEK-연관 두개외 LMD이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 흑색종 전이로부터 유래된 LMD이다 (즉, LMD는 전이성 흑색종임). 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 결장직장암 전이로부터 유래된 LMD이다 (즉, LMD는 전이성 결장직장암임). 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 비소세포 폐암 전이로부터 유래된 LMD이다 (즉, LMD는 전이성 비소세포 폐암임). 임의의 상기 MEK-연관 LMD의 한 실시양태에서, LMD는 BRAF 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 BRAF V600 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, BRAF 돌연변이는 V600E 및/또는 V600K 및/또는 V600D 및/또는 V600R 및/또는 V600S이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 BRAF V600E 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 BRAF 융합체를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 LMD는 BRAF 야생형 종양이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 전이 위험이 높은 암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 종양은 BRAF V600E, V600D, V600K, V600R 및/또는 V600S 돌연변이를 갖는 암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF 융합체, 예를 들어 본원에 개시된 임의의 BRAF 융합체를 갖는다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF 야생형 종양이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 흑색종, 결장직장암, 갑상선암, 비소세포 폐암, 난소암 또는 신경모세포종이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 흑색종, 결장직장암, 갑상선암, 비소세포 폐암, 난소암 또는 신경모세포종이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 흑색종이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF V600E 돌연변이 또는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는 흑색종이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 결장직장암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF V600E 돌연변이 또는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는 결장직장암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 갑상선암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF V600E 돌연변이 또는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는 갑상선암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF V600E 돌연변이 또는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 난소암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF V600E 돌연변이 또는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는 난소암이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 신경모세포종이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 BRAF V600E 돌연변이 또는 BRAF V600K 돌연변이를 갖는 신경모세포종이다. 한 실시양태에서, 전이 위험이 높은 암은 KIAA11549-BRAF 융합체를 갖는다.

한 실시양태에서, CNS 종양은 원발성 뇌 종양이다. 원발성 뇌 종양은 뇌 또는 척추에서 시작하는 종양이고, 집합적으로 신경교종으로 공지되어 있다. 용어 "신경교종"은 CNS에 존재하는 신경교 세포에서 기원하는 종양을 기재하는 데 사용된다. 뇌 종양의 WHO 분류에 따르면, 신경교종은 세포 활성 및 공격성에 의해 등급 I (양성 CNS 종양) 및 등급 II 내지 IV (악성 CNS 종양)를 포함한 척도로 등급화된다:

등급 I 신경교종 (모양세포성 성상세포종): 전형적으로 소아에서 소뇌 또는 뇌간, 및 때때로 뇌 반구에서 발생하고, 느리게 성장한다. 등급 I은 성인에서도 발생할 수 있다. 이들은 양성이긴 하지만 (WHO 등급 I), 이 질환을 치유하기가 어렵기 때문에 이들의 성장은 높은 이환율을 갖는 거동으로 악성이 된다 (문헌 [Rostami, Acta Neurochir (Wien). 2017; 159(11): 2217-2221]).

등급 II 신경교종 (저등급 신경교종): 성상세포종, 핍지교종, 및 혼합형 핍지교성상세포종을 포함한다. 등급 II 신경교종은 전형적으로 젊은 성인 (예를 들어, 20세 내지 50세)에서 발생하고, 대뇌 반구에서 가장 자주 발견된다. 이들 종양의 침윤성 성질로 인해, 재발이 발생할 수 있다. 일부 등급 II 신경교종은 재발하여 보다 공격적인 종양 (등급 III 또는 IV)으로 진화한다.

등급 III 신경교종 (악성 신경교종): 역형성 성상세포종, 역형성 핍지교종, 및 역형성 혼합 핍지교성상세포종을 포함한다. 등급 III 종양은 공격성 고등급 암이고, 촉수-유사 돌기로 인근 뇌 조직을 침습하여, 완전한 외과적 제거를 보다 어렵게 만든다.

등급 IV 신경교종: 다형성 교모세포종 (GBM) 및 신경교육종을 포함한다; (GBM)은 악성 신경교종이다. GBM은 가장 공격적이고 가장 흔한 원발성 뇌 종양이다. 다형성 교모세포종은 통상적으로 신속하게 확산되고, 촉수-유사 돌기로 뇌의 다른 부분을 침습하여, 완전한 외과적 제거를 보다 어렵게 만든다. 신경교육종은 악성 암이고, 신경교종성 및 육종성 성분으로 이루어진 교모세포종으로서 정의된다.

한 실시양태에서, 원발성 뇌 종양은 신경교종이다. 한 실시양태에서, 신경교종은 저등급 신경교종이다. 한 실시양태에서, 신경교종은 소아 저등급 신경교종이다.

한 실시양태에서, 원발성 뇌 종양은 양성 원발성 뇌 종양이다. 양성 원발성 뇌 종양은 중증 통증, 영구적 뇌 손상 및 사망을 유발할 수 있고, 일부 경우에는 악성이 될 수 있다. 양성 원발성 뇌 종양의 비제한적 예는 등급 I 신경교종, 유두상 두개인두종, 수막종 (횡문근양 수막종 포함), 비정형 기형/횡문근양 종양, 및 배아이형성 신경상피종양 (DNT), 모양세포성 성상세포종, 핍지교종, 혼합 핍지교성상세포종, 역형성 성상세포종, 역형성 핍지교종, 역형성 혼합 핍지교성상세포종, 미만성 성상세포종, 상의세포종, 다형성 황색성상세포종 (PXA), 신경절교종, 신경교육종, 또는 역형성 신경절교종을 포함한다.

한 실시양태에서, 암은 말초 신경계 암이다. 한 실시양태에서, 말초 신경계 암은 신경모세포종이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것 (예를 들어, 경구 투여)을 포함하는, MEK-연관 CNS 종양을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 BRAF V600 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 BRAF V600E 및/또는 V600K 및/또는 V600D 및/또는 V600R 돌연변이 및/또는 V600S를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 BRAF V600E 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 BRAF V600K 돌연변이를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 BRAF 융합체, 예를 들어 본원에 개시된 임의의 BRAF 융합체, 예를 들어 KIAA11549-BRAF 융합체를 갖는다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 BRAF 야생형 종양이다. 한 실시양태에서, 대상체는, 예를 들어 하기 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 항암제, 수술 및 방사선요법으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 항암 요법으로 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을, 예를 들어 하기 기재된 바와 같은 1종 이상의 항암제, 수술 및/또는 방사선요법으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 항암 요법과 조합하여 치료된다. 한 실시양태에서, 대상체는, 예를 들어 하기 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 후에 항암제, 수술 및 방사선요법으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 항암 요법으로 치료된다. 한 실시양태에서, MEK-연관 종양은 CNS 종양이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 악성 CNS 종양 (즉, CNS 암)이다. 한 실시양태에서, 악성 CNS 종양은 전이성 CNS 암이다. 한 실시양태에서, 전이성 CNS 암은 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암, 전이성 비소세포 폐암, 전이성 갑상선암 및 전이성 난소암으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, 전이성 CNS 암은 전이성 흑색종이다. 한 실시양태에서, 전이성 CNS 암은 결장직장암이다. 한 실시양태에서, 전이성 CNS 암은 전이성 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, 전이성 CNS 암은 전이성 갑상선암이다. 한 실시양태에서, 전이성 CNS 암은 전이성 난소암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 LMD이다. 한 실시양태에서, LMD는 두개내이다. 한 실시양태에서, LMD는 두개외이다. 한 실시양태에서, LMD는 전이성 흑색종이다. 한 실시양태에서, LMD는 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암 및 전이성 비소세포 폐암으로부터 선택된다. 한 실시양태에서, LMD는 전이성 결장직장암이다. 한 실시양태에서, LMD는 전이성 비소세포 폐암이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 암은 원발성 뇌 종양이다. 한 실시양태에서, 원발성 뇌 종양은 등급 2 신경교종이다. 한 실시양태에서, 원발성 뇌 종양은 등급 3 신경교종이다. 한 실시양태에서, 원발성 뇌 종양은 등급 4 신경교종이다. 한 실시양태에서, MEK-연관 CNS 종양은 양성 종양이다. 한 실시양태에서, 양성 CNS 종양은 유두상 두개인두종, 수막종 (횡문근양 수막종 포함), 비정형 기형/횡문근양 종양, 또는 배아이형성 신경상피종양 (DNT)이다. 한 실시양태에서, 화합물은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다. 한 실시양태에서, 화합물은 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다. 한 실시양태에서, 화합물은 실시예 1-69의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로부터 선택된다.

화합물이 CNS 암을 치료하는 데 적합할 수 있는지를 결정하는 능력은, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같이, 화합물이 유출 수송체의 기질인지를 확인하고/거나 세포 투과성을 측정하고/거나 유리 혈액-대-유리 혈장 비를 측정함으로써 결정될 수 있다.

한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 높은 세포 투과성을 나타낸다. 본 발명의 화합물의 투과성을 결정하는 방법은 실시예 B에 기재된 검정에 따라 결정될 수 있고, 투과 계수는 표 B1에 제공된다.

본 발명의 화합물은 낮은 유출을 나타낸다. 본 발명의 화합물이 유출 수송체 P-당단백질 (P-gp 또는 다중-약물 내성 1 (MDR1) 단백질) 및 유방암 내성 단백질 (BCRP)에 대한 기질인지 여부를 평가하는 시험관내 방법은 실시예 B에 기재되어 있고, 본 발명의 화합물의 유출 비는 표 B3에 제공된다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 중간-대-높은 뇌 (비결합)/혈장 (비결합) 비 (즉, 중간-대-높은 유리 뇌/혈장 비)를 나타낸다. 대상체 (예를 들어, 인간)의 BBB를 침투하는 본 발명의 화합물의 능력은 적합한 동물 모델 (예를 들어, 설치류, 예컨대 마우스)에서 결정될 수 있다. 예를 들어, 마우스에서 BBB를 침투하는 특정 화합물의 능력은, 예를 들어 실시예 C에 기재된 바와 같이 마우스에서 미결합 뇌-대-미결합 혈장 농도 (유리 B/P) 비를 평가함으로써 결정되었고, 유리 뇌-대-유리 혈장 비는 표 C2에 제공된다. 화합물의 유리 뇌-대-유리 혈장 비의 계산은 동물 모델에서 용량-관련 노출에 기초하여 말초 및 뇌에서 효능을 달성하는 데 요구되는 효과적인 농도의 예측을 가능하게 한다. 이들 분포 데이터는, 연관된 약동학적 데이터와 함께, 인간 환자에서 효능을 달성하는 데 요구되는 용량을 모델링하고 예측하는 데 이용될 수 있다.

따라서, 한 실시양태에서, 본 발명의 방법은 적합한 동물 모델에서 입증된 바와 같이 화학식 II의 화합물 또는 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하고, 여기서 화학식 II의 화합물의 적어도 일부가 BBB를 침투하는 것인, MEK-연관 CNS 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 MEK-연관 CNS 암을 치료하는 방법을 포함한다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.3이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.35이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.4이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.45이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.5이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.55이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.6이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.65이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.7이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.75이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.8이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.85이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.9이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 0.95이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.0이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.0이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.1이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.2이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.3이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.4이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.5이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.6이다. 한 실시양태에서, 총 약물의 뇌/혈장 비는 대상체에게의 투여 (예를 들어, 경구 또는 정맥내 투여) 후 적어도 약 1.7이다. BBB를 침투하는 화합물의 백분율은 뇌 대 혈장에서의 주어진 시간 기간 동안의 농도-시간 곡선하 면적 (AUC_0-t)을 기준으로 계산된다는 것에 유의해야 한다. 따라서, 백분율은 농도의 비를 나타낸다. 즉, 화합물에 대한 (AUC_0-24h)가 뇌에서 20 ng/mL이고 혈장에서 80 ng/mL이면, BBB를 침투하는 화합물의 백분율은 20%이다 (뇌에서 20 ng/mL를 (20 ng/mL+80 ng/mL)의 총 농도로 나눈 것) (즉, 0.20의 뇌-대-혈장 비). 한 실시양태에서, 백분율은 t=0 (투여 시간)에서 최종 정량가능한 농도점까지의 기간 동안 농도-시간 곡선하 면적, 즉 (AUC_0-최종)을 기준으로 계산된다.

뇌로 빈번하게 전이되는 암은 MAPK 경로 활성화 변경, 예컨대 본원에 개시된 BRAF 돌연변이를 포함한 BRAF 돌연변이, 또는 본원에 개시된 BRAF 융합체를 포함한 BRAF 융합체를 보유하는 것으로 공지되어 있다. 활성화 돌연변이는 정규 경로에서 상이한 수준으로 발생할 수 있지만, 이들은 모두 증식 및 생존을 증가시키기 위해 미토겐/세포외 신호-조절 키나제 (MEK)를 통한 신호전달을 필요로 한다 (문헌 [Schubbert S, Shannon K, Bollag G. Nat Rev Cancer. 2007;7:295-308]). BRAF 유전자에서의 돌연변이는 악성 흑색종, 유두상 갑상선 암종, 결장직장 암종, 비소세포 폐 암종 (NSCLC), 및 난소 암종 및 그의 전이성 종양, 및 원발성 뇌 종양에서 확인되었다 (문헌 [Davies H., et al., Nature 417(6892):949-954, 2002]). 예를 들어, BRAF 돌연변이, 예컨대 BRAF V600 돌연변이는 흑색종 뇌 전이 (문헌 [Flaherty KT, et al., Nat Rev Cancer (2012) 12(5):349-61]), 결장직장암의 뇌 전이 및 비소세포 폐암의 뇌 전이 (문헌 [Berghoff, AS, Preusser M., Curr Opin Neurol (2014) 27(6):689-696]), 유두상 갑상선암 (문헌 [Kim, WW et al., J Otolaryngol Head Neck Surg. 2018; 47:4, 1-6]), 및 난소암 (문헌 [Grisham RN., et al., Cancer, 2013;119:548-554])을 포함한 수많은 전이성 CNS 종양에서 관찰되었다.

BRAF 돌연변이, 예를 들어 본원에 개시된 BRAF 돌연변이, 및 BRAF 융합체, 예를 들어 본원에 개시된 BRAF 융합체는 또한 소아 및 성인 연구에서 악성 원발성 뇌 종양, 예컨대 등급 IV 신경교종, 예를 들어 교모세포종 및 신경교육종, 역형성 성상세포종 (고등급 종양) 및 WHO 등급 III 역형성 신경절교종에서 관찰되었다 (문헌 [Berghoff, AS, Preusser M., Curr Opin Neurol (2014) 27(6):689-696); Schindler et al. (Acta Neuropathol 121(3):397-405, 2011); Behling et al. (Diagn Pathol 11(1):55, 2016); K.C. Schreck, et al., Cancers, 2019, 11, 1262)]).

BRAF 돌연변이, 예를 들어 본원에 개시된 BRAF 돌연변이, 및 BRAF 융합체, 예를 들어 본원에 개시된 BRAF 융합체는 또한 소아 및 성인 연구에서 양성 원발성 뇌 종양, 예를 들어 WHO 등급 II 성상세포종, WHO 등급 II 다형성 황색성상세포종 (PXA), 역형성을 동반한 다형성 황색성상세포종, 모양세포성 성상세포종 (PA), 유두상 두개인두종, 신경절교종, 성상모세포종, 모양세포성 성상세포종, 비정형 기형/횡문근양 종양, 횡문근양 수막종에서 관찰되었다 (문헌 [Berghoff, AS, Preusser M., Curr Opin Neurol (2014) 27(6):689-696; Schindler et al. (Acta Neuropathol 121(3):397-405, 2011); Behling et al. (Diagn Pathol 11(1):55, 2016); (Behling et al., Diagn Pathol 11(1):55, 2016; Brastianos et al., Nat Genet 46(2):161-165, 2014; Dougherty et al., Neuro Oncol 12(7):621- 630, 2010; Lehman et al., Neuro Oncol 19(1):31-42, 2017; Mordechai et al., Pediatr Hematol Oncol 32(3):207-211, 2015; Myung et al., Transl Oncol 5(6):430-436, 2012; Schindler et al., Acta Neuropathol 121(3):397-405, 2011)]).

BRAF 돌연변이는 또한 재발성 신경모세포종에서 검출되었다 (문헌 [Eleveld, TF, et al., Nat Genet 47(8):864-871, 2015]). 신경모세포종은 말초 신경계의 소아 종양이다. 대다수의 신경모세포종 대상체는 초기에 화학요법에 반응하는 종양을 갖지만, 대다수의 대상체는 요법-저항성 재발을 경험할 것이다.

따라서, MEK-연관 종양, 예를 들어 본원에 개시된 임의의 예시적인 MEK-연관 종양을 갖는 것으로 진단되거나 확인된 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 대상체는, 예를 들어 대상체 또는 대상체로부터의 생검 샘플에서 BRAF 돌연변이 또는 융합체를 확인하기 위한 규제 기관-승인된, 예를 들어 FDA-승인된 시험 또는 검정의 사용을 통해, 또는 본원에 기재된 검정의 임의의 비제한적 예를 수행함으로써 BRAF 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 종양을 갖는 것으로 확인되거나 진단된 것인, MEK-연관 종양, 예를 들어 본원에 개시된 임의의 예시적인 MEK-연관 종양을 갖는 것으로 진단되거나 확인된 대상체를 치료하는 방법이 또한 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 시험 또는 검정은 키트로서 제공된다. 한 실시양태에서, 검정은 차세대 서열분석, 파이로시퀀싱, 면역조직화학, 형광 현미경검사, 분해 FISH 분석, 서던 블롯팅, 웨스턴 블롯팅, FACS 분석, 노던 블롯팅, 또는 PCR-기반 증폭 (예를 들어, RT-PCR 및 정량적 실시간 RT-PCR)을 이용한다. 한 실시양태에서, 검정은 규제 기관-승인된 검정, 예를 들어 FDA-승인된 키트이다.

한 실시양태에서, 생검은 종양 생검 (예를 들어, 전통적인 수술 동안 수득된 종양 샘플 또는 정위 바늘 생검, 예를 들어 CT 또는 MRI 스캐닝에 의해 안내된 정위 필요 생검)이다. 조직 생검 방법은 총 종양 부담 및/또는 BRAF 돌연변이 및/또는 BRAF 융합체를 검출하는 데 사용될 수 있다.

한 실시양태에서, BRAF 돌연변이 또는 융합체는 액체 생검 (유체 생검 또는 유체 상 생검으로 다양하게 지칭됨)을 사용하여 확인될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Karachialiou et al., "Real-time liquid biopsies become a reality in cancer treatment", Ann. Transl. Med., 3(3):36, 2016]을 참조한다. 액체 생검 방법은 총 종양 부담 및/또는 BRAF 돌연변이를 검출하는 데 사용될 수 있다. 액체 생검은 대상체로부터 비교적 용이하게 (예를 들어, 단순 채혈을 통해) 수득된 생물학적 샘플에 대해 수행될 수 있고, 일반적으로 종양 부담 및/또는 BRAF 돌연변이를 검출하는 데 사용되는 전통적인 방법보다 덜 침습적이다. 한 실시양태에서, 액체 생검은 전통적인 방법보다 더 이른 단계에서 BRAF 돌연변이의 존재를 검출하는 데 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 액체 생검에 사용될 생물학적 샘플은 CSF, 혈액, 혈장, 소변, 타액, 객담, 기관지-폐포 세척액, 담즙, 림프액, 낭액, 대변, 복수 및 그의 조합을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 액체 생검을 사용하여 순환 종양 세포 (CTC)를 검출할 수 있다. 한 실시양태에서, 액체 생검을 사용하여 무세포 DNA를 검출할 수 있다. 한 실시양태에서, 액체 생검을 사용하여 검출된 무세포 DNA는 종양 세포로부터 유래된 순환 종양 DNA (ctDNA)이다. ctDNA의 분석 (예를 들어, 민감한 검출 기술, 예컨대 비제한적으로 차세대 서열분석 (NGS), 전통적인 PCR, 디지털 PCR, 또는 마이크로어레이 분석을 사용함)은 BRAF 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 확인하는 데 사용될 수 있다.

한 실시양태에서, 액체 생검을 사용하여 확인된 BRAF 돌연변이 또는 BRAF 융합체는 또한 대상체에 (예를 들어, 종양에) 존재하는 암 세포에 존재한다. 한 실시양태에서, 임의의 유형의 BRAF 돌연변이 또는 융합체는 액체 생검을 사용하여 검출될 수 있다. 한 실시양태에서, 액체 생검을 통해 확인된 유전자 돌연변이는 대상체를 특정한 치료를 위한 후보로서 확인하는 데 사용될 수 있다.

"종양 부담" ("종양 부하"로도 지칭됨)은 신체 전반에 걸쳐 분포된 종양 물질의 총량을 지칭한다. 종양 부담은 림프절 및 골수를 포함한, 신체 전반에 걸친 암 세포의 총 수 또는 종양(들)의 총 크기를 지칭한다. 종양 부담은 관련 기술분야에 공지된 다양한 방법에 의해, 예컨대, 예를 들어 대상체로부터 제거 시, 예를 들어 캘리퍼를 사용하여, 또는 신체 내에 있는 동안 영상화 기술, 예를 들어 자기 공명 영상화 (MRI) 스캔, 컴퓨터 단층촬영 (CT), 다중-검출기 CT (MDCT), 양전자 방출 단층촬영 (PET), X선, 초음파 또는 골 스캔을 사용하여 종양(들)의 치수를 측정함으로써 결정될 수 있다.

용어 "종양 크기"는 종양의 길이 및 폭으로서 측정될 수 있는 종양의 총 크기를 지칭한다. 종양 크기는 관련 기술분야에 공지된 다양한 방법에 의해, 예컨대, 예를 들어 대상체로부터의 제거 시, 예를 들어 캘리퍼를 사용하여, 또는 신체 내에 있는 동안 영상화 기술, 예를 들어 MRI 스캔, 골 스캔, 초음파 또는 CT를 사용하여 종양(들)의 치수를 측정함으로써 결정될 수 있다.

액체 생검은 대상체에게 치료를 투여한 후에 질환의 진행 또는 치료의 효능을 비제한적으로 포함한 하나 이상의 임상적으로 관련된 파라미터를 결정하기 위해 진단 과정, 모니터링 과정 및/또는 치료 과정 동안 다수회 수행될 수 있다. 예를 들어, 진단 과정, 모니터링 과정 및/또는 치료 과정 동안 제1 액체 생검은 제1 시점에 수행될 수 있고, 제2 액체 생검은 제2 시점에 수행될 수 있다. 한 실시양태에서, 제1 시점은 질환을 갖는 대상체를 진단하기 전의 시점 (예를 들어, 대상체가 건강할 때)일 수 있고, 제2 시점은 대상체가 질환을 발병한 후의 시점일 수 있다 (예를 들어, 제2 시점은 질환을 갖는 대상체를 진단하는 데 사용될 수 있음). 한 실시양태에서, 제1 시점은 질환을 갖는 대상체를 진단하기 전의 시점 (예를 들어, 대상체가 건강할 때)일 수 있고, 그 후 대상체가 모니터링되고, 제2 시점은 대상체를 모니터링한 후의 시점일 수 있다. 한 실시양태에서, 제1 시점은 질환을 갖는 대상체를 진단한 후의 시점일 수 있고, 그 후 치료가 대상체에게 투여되고, 제2 시점은 치료가 투여된 후의 시점일 수 있고; 이러한 경우, 제2 시점은 치료의 효능을 평가하는 데 사용될 수 있다 (예를 들어, 제1 시점에 검출된 유전자 돌연변이(들)가 풍부하게 감소되거나 검출불가능한 경우).

화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 비정상적 세포 성장을 갖는 대상체, 예컨대 MEK-연관 종양, 예를 들어 MEK-연관 암을 치료하기 위해 단독으로 또는 1종 이상의 상이한 치료 형태와 조합하여 사용될 수 있다.

한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암 요법, 예를 들어 수술, 방사선요법 및 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 항암제로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 요법과 조합하여 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, MEK-연관 암을 갖는 대상체를 1종 이상의, 예를 들어, 예컨대 수술, 방사선요법 및 항암제 (예를 들어, 항암제가 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 것인 하기 본원에 기재된 임의의 항암제) 중 1종 이상으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 추가의 요법과 조합하여 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 치료하는 것은, 단독요법으로서 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 사용한 동일한 대상체 또는 유사한 대상체의 치료와 비교하여 증가된 치료 효능을 가질 수 있다. 조합 요법이 사용되고, 1종 이상, 예를 들어 1, 2 또는 3종의 항암 요법이 1종 이상의 항암제, 예컨대 본원에 개시된 임의의 항암제로부터 독립적으로 선택되는 경우, 항암제(들)는 임의의 순서로 및 다양한 투여 스케줄을 사용하여 본 발명의 화합물과 동시에, 또는 다양한 개재 시간 제한으로 및 임의의 순서로 개별적으로 투여될 수 있다. 한 실시양태에서, 항암제(들)는 본 발명의 화합물의 투여 전에 대상체에게 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 항암제(들)는 본 발명의 화합물의 투여 후에 대상체에게 투여된다. 또 다른 실시양태에서, 항암제(들)는 본 발명의 화합물의 투여와 동시에 대상체에게 투여된다. 한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 수술, 방사선요법, 또는 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 항암제인 1종의 추가의 항암 요법과 조합하여 사용된다.

따라서, 한 실시양태에서, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)을 갖는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의 추가의 항암 요법과 조합하여 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체를 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 항암 요법은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 1종 이상의 항암제이다. 한 실시양태에서, 항암 요법은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 1종의 항암제이다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 수술이다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 방사선요법이다.

또한, 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 항암 요법과 조합하여 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 수술, 방사선요법, 및/또는 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 1종 이상의 항암제로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 요법으로부터 독립적으로 선택된다.

또한, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용하기 위한 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 항암 요법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 수술, 방사선요법, 및/또는 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 1종 이상의 항암제로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 요법으로부터 독립적으로 선택된다.

또한, 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암 요법과 조합하여 MEK-연관 종양을 치료하는 데 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 제공된다.

또한, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과의 공-투여에 의해 MEK-연관 종양을 치료하는 데 사용하기 위한 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암 요법이 본원에 제공된다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 한 실시양태에서, 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 1종 이상의 항암 요법을 투여받는다. 한 실시양태에서, 1종 이상의 항암 요법은 수술, 방사선요법, 및 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 항암제로부터 선택된다. 예를 들어, 한 실시양태에서, 그를 필요로 하는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 종양의 적어도 부분적 절제를 받을 수 있다. 한 실시양태에서, 종양의 적어도 부분적 절제에 의한 치료는 종양의 크기 (예를 들어, 종양 부담)를 감소시키며, 이는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 1회 이상의 용량의 투여 전에 발생한다. 한 실시양태에서, 치료를 필요로 하는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 방사선요법을 받을 수 있다. 한 실시양태에서, 치료를 필요로 하는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 1종 이상의 항암제로 치료를 받을 수 있다. 한 실시양태에서, 대상체는 이전 요법 또는 요법들에 대해 불응성 또는 불내성인 암을 갖는다.

따라서, 한 실시양태에서, (i) MEK-연관 종양을 갖는 대상체에게 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 항암 요법을 투여하고, (ii) (i) 후에, 단독요법으로서 (a) 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 (b) 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암 요법과 조합하여 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체를 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 수술, 방사선요법, 및/또는 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 1종 이상의 항암제 중 1종 이상으로부터 독립적으로 선택된다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 1종 이상의 항암제이다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 하나의 항암제이다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 수술이다. 한 실시양태에서, 추가의 항암 요법은 방사선요법이다.

본원에 기재된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 추가의 항암제의 비제한적 예는 MEK 억제제, BRAF 억제제, EGFR 억제제, HER2 및/또는 HER3의 억제제, SHP2 억제제, Axl 억제제, PI3K 억제제, SOS1 억제제, 신호 전달 경로 억제제, 체크포인트 억제제, 아폽토시스 경로의 조정제, 세포독성 화학요법제, 혈관신생-표적화 요법, 및 면역요법을 포함한 면역-표적화 작용제를 비롯한, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 추가의 키나제 억제제를 포함한다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암제는 표적화 치료제이다. 본원에 사용된 "표적화 치료제"는 단순히 모든 신속하게 분열하는 세포를 (예를 들어, 전통적인 세포독성 화학요법으로) 방해하기 보다는 발암 및 종양 성장에 필요한 특이적 표적화된 분자를 방해함으로써 암 세포의 성장을 차단하는 분자를 포함하고 이를 지칭하며, 수용체 티로신 키나제-표적화 치료제, 신호 전달 경로 억제제 (예를 들어, Ras-Raf-MEK-ERK 경로 억제제, PI3K-Akt-mTOR-S6K 경로 억제제 ("PI3K 억제제")), 및 아폽토시스 경로의 조정제를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암제는 BRAF 억제제이다. 다른 BRAF 억제제의 비제한적 예는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394), 및 그의 제약상 허용되는 염, 예를 들어 하기로부터 선택되는 화합물을 포함한 국제 출원 번호 PCT/IB2020/055992 (PCT 공개 번호 WO 2020/261156 A1로서 2020년 12월 30일에 공개됨)에 개시된 화합물:

N-(3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-2,4-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4,5-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-메틸-3-(메틸-d3)-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}프로판-1-술폰아미드;

N-(3-클로로-4-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시)-5-플루오로피리딘-2-일)프로판-1-술폰아미드; 및

N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 예를 들어 N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-2-아자비시클로[2.1.1]헥산-2-술폰아미드, (R)-N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드, 및 N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한 PCT 공개 번호 WO 2021/250521 (2021년 12월 16일에 공개됨)에 개시된 화합물을 포함한다.

한 실시양태에서, BRAF 억제제는 엔코라페닙 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염으로부터 선택된다.

한 실시양태에서, BRAF 억제제는 엔코라페닙 또는 그의 제약상 허용되는 염이다. 한 실시양태에서, BRAF 억제제는 N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염이다. 한 실시양태에서, BRAF 억제제는 N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

BRAF 억제제의 추가의 예는 관련 기술분야에 공지되어 있다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암제는 EGFR 억제제이다. EGFR 억제제의 비제한적 예는 세툭시맙 (에르비툭스(Erbitux)®), 파니투무맙 (벡티빅스(Vectibix)®), 오시메르티닙 (메렐렉티닙, 타그리소(Tagrisso)®), 에를로티닙 (타르세바(Tarceva)®), 게피티닙 (이레사(Iressa)®), 네시투무맙 (포르트라자(Portrazza)™), 네라티닙 (네를린크스(Nerlynx)®), 라파티닙 (타이커브(Tykerb)®), 반데타닙 (카프렐사(Caprelsa)®), 브리가티닙 (알룬브리그(Alunbrig)®) 및 PCT 공개 번호 WO 2019/071351 및 WO 2017/117680에 개시된 EGFR의 억제제를 포함한다. EGFR 억제제의 추가의 예는 관련 기술분야에 공지되어 있다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암제는 SHP2 억제제이다. SHP2 억제제의 비제한적 예는 6-(4-아미노-4-메틸피페리딘-1-일)-3-(2,3-디클로로페닐)피라진-2-아민 (SHP099), [3-[(3S,4S)-4-아미노-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일]-6-(2,3-디클로로페닐)-5-메틸피라진-2-일]메탄올 (RMC-4550) RMC-4630, TNO155, 및 WO 2020/081848, WO 2020/201991, WO 2015/107493, WO 2015/107494, WO 2015/107495 및 WO 2019/075265에 개시된 화합물을 포함한다. 한 실시양태에서, SHP2 억제제는 WO 2020/201991에 개시된 화합물이다. 한 실시양태에서, SHP2 억제제는 (S)-1'-(6-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)-1,2,4-트리아진-3-일)-1,3-디히드로스피로[인덴-2,4'-피페리딘]-1-아민 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암제는 PI3K 억제제이다. 비제한적 예는 부파를리십 (BKM120), 알펠리십 (BYL719), 사모톨리십 (LY3023414), 8-[(1R)-1-[(3,5-디플루오로페닐)아미노]에틸]-N,N-디메틸-2-(모르폴린-4-일)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드 (AZD8186), 테날리십 (RP6530), 복스탈리십 히드로클로라이드 (SAR-245409), 게다톨리십 (PF-05212384), 파눌리십 (P-7170), 타셀리십 (GDC-0032), 트랜스-2-아미노-8-[4-(2-히드록시에톡시)시클로헥실]-6-(6-메톡시피리딘-3-일)-4-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-7 (8H)-온 (PF-04691502), 두벨리십 (ABBV-954), N2-[4-옥소-4-[4-(4-옥소-8-페닐-4H-1-벤조피란-2-일)모르폴린-4-윰-4-일메톡시]부티릴]-L-아르기닐-글리실-L-아스파르틸-L-세린 아세테이트 (SF-1126), 픽틸리십 (GDC-0941), 2-메틸-1-[2-메틸-3-(트리플루오로메틸)벤질]-6-(모르폴린-4-일)-1H-벤즈이미다졸-4-카르복실산 (GSK2636771), 이델라리십 (GS-1101), 움브랄리십 토실레이트 (TGR-1202), 픽틸리십 (GDC-0941), 코판리십 히드로클로라이드 (BAY 84-1236), 닥톨리십 (BEZ-235), 1-(4-[5-[5-아미노-6-(5-tert-부틸-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피라진-2-일]-1-에틸-1H-1,2,4-트리아졸-3-일]피페리딘-1-일)-3-히드록시프로판-1-온 (AZD-8835), 5-[6,6-디메틸-4-(모르폴린-4-일)-8,9-디히드로-6H-[1,4]옥사지노[4,3-e]퓨린-2-일]피리미딘-2-아민 (GDC-0084), 에베롤리무스, 라파마이신, 페리포신, 시롤리무스 및 템시롤리무스를 포함한다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암제는 면역요법이다. 용어 "면역요법"은 면역계를 조정하는 작용제를 지칭한다. 한 실시양태에서, 면역요법은 면역계의 조절제의 발현 및/또는 활성을 증가시킬 수 있다. 한 실시양태에서, 면역요법은 면역계의 조절제의 발현 및/또는 활성을 감소시킬 수 있다. 한 실시양태에서, 면역요법은 면역 세포를 동원하고/거나 그의 활성을 증진시킬 수 있다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 면역요법은 항체 요법 (예를 들어, 모노클로날 항체, 접합된 항체)이다. 한 실시양태에서, 항체 요법은 베바시주맙 (엠바스티(Mvasti)™, 아바스틴(Avastin)®), 트라스투주맙 (헤르셉틴(Herceptin)®), 리툭시맙 (맙테라(MabThera)™, 리툭산(Rituxan)®), 에드레콜로맙 (파노렉스(Panorex)), 다라투무맙 (다르잘렉스(Darzalex)®), 올라라투맙 (라트루보(Lartruvo)™), 오파투무맙 (아르제라(Arzerra)®), 알렘투주맙 (캄파트(Campath)®), 세툭시맙 (에르비툭스(Erbitux)®), 오레고보맙, 펨브롤리주맙 (키트루다(Keytruda)®), 디누틱시맙 (유니툭신(Unituxin)®), 오비누투주맙 (가지바(Gazyva)®), 트레멜리무맙 (CP-675,206), 라무시루맙 (시람자(Cyramza)®), 우블리툭시맙 (TG-1101), 파니투무맙 (벡티빅스(Vectibix)®), 엘로투주맙 (엠플리시티(Empliciti)™), 네시투무맙 (포르트라즈자™), 시름투주맙 (UC-961), 이브리투모맙 (제발린(Zevalin)®), 이사툭시맙 (SAR650984), 니모투주맙, 프레솔리무맙 (GC1008), 리릴루맙 (INN), 모가물리주맙 (포텔리게오(Poteligeo)®), 피클라투주맙 (AV-299), 데노수맙 (엑스제바(Xgeva)®), 가니투맙, 우렐루맙, 피딜리주맙, 아마툭시맙, 블리나투모맙 (AMG103; 블린사이토(Blincyto)®) 또는 미도스타우린 (리답트(Rydapt))이다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 면역요법은 면역 체크포인트 억제제이다. 한 실시양태에서, 면역요법은 1종 이상, 예를 들어 1 또는 2종의 면역 체크포인트 억제제를 포함한다. 한 실시양태에서, 면역 체크포인트 억제제는 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 또는 PD-L1 억제제이다. 한 실시양태에서, CTLA-4 억제제는 이필리무맙 (예르보이(Yervoy)®) 또는 트레멜리무맙 (CP-675,206)이다. 한 실시양태에서, PD-1 억제제는 펨브롤리주맙 (키트루다®), 니볼루맙 (옵디보(Opdivo)®) 및 사산리맙 (RN888)이다. 한 실시양태에서, PD-L1 억제제는 아테졸리주맙 (테센트릭(Tecentriq)®) 또는 두르발루맙 (임핀지(Imfinzi)™)이다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암 요법은 방사선요법이다. 방사선요법의 비제한적 예는 외부 방사선 빔 요법 (예를 들어, 킬로전압 X선 또는 메가전압 X선을 사용하는 외부 빔 요법) 또는 내부 방사선요법을 포함한다. 내부 방사선요법 (근접요법으로도 불림)은, 예를 들어 저선량 내부 방사선요법 또는 고선량 내부 방사선요법의 사용을 포함할 수 있다. 저선량 내부 방사선요법은, 예를 들어 작은 방사성 펠릿을 대상체의 암 조직 내로 또는 그에 근접하여 삽입하는 것을 포함한다. 고선량 내부 방사선요법은, 예를 들어 대상체 내의 암 조직 내로 또는 그에 근접하여 얇은 튜브 (예를 들어, 카테터) 또는 이식물을 삽입하는 것, 및 방사선 기계를 사용하여 얇은 튜브 또는 이식물에 고선량의 방사선을 전달하는 것을 포함한다. 암을 갖는 대상체에 대해 방사선요법을 수행하는 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 종양이 CNS 종양인 실시양태에서, 방사선요법은 전뇌 방사선요법 (WBRT) 또는 정위 방사선수술 (SRS), 예컨대 사이버나이프(Cyberknife)®, 엑스나이프(XKnife)®, 감마 나이프(Gamma knife)® 또는 이그잭트랙(ExacTrac)®을 포함할 수 있다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 조합 요법 방법에 따라 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 조합하여 사용될 수 있는 항암 요법은 수술이다. 수술의 비제한적 예는, 예를 들어 개방 수술 또는 최소 침습 수술을 포함한다. 수술은, 예를 들어 종양의 적어도 부분적 절제, 전체 종양의 제거, 종양의 용적축소, 또는 대상체에서 통증 또는 압력을 유발하는 종양의 제거를 포함할 수 있다. 암을 갖는 대상체에 대해 개방 수술 및 최소 침습 수술을 수행하는 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 BRAF 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 BRAF 억제제)를 임의의 순서로 함께 또는 개별적으로 투여하는 것을 포함하는, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 실시예 1-69로부터 선택되는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 EGFR 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 EGFR 억제제)를 임의의 순서로 함께 또는 개별적으로 투여하는 것을 포함하는, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 실시예 1-69 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 SHP2 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 SHP2 억제제)를 임의의 순서로 함께 또는 개별적으로 투여하는 것을 포함하는, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 실시예 1-69 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제)를 임의의 순서로 함께 또는 개별적으로 투여하는 것을 포함하는, MEK-연관 종양 (예를 들어, 본원에 기재된 임의의 MEK-연관 종양)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 실시예 1-69 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

또한, (a) 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 (b) 적어도 1종의 추가의 항암제 (예를 들어, 본원에 기재되거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 예시적인 추가의 항암제)를 포함하며, 여기서 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암제는 종양의 치료를 위한 동시 또는 개별 사용을 위해 개별적으로 제제화되고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 추가의 항암제(들)의 양은 함께 종양의 치료에 효과적인 것인, MEK-연관 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 MEK-연관 종양을 치료하기 위한 제약 조합물; (ii) 종양 치료를 위한 의약의 제조를 위한 이러한 조합물의 용도; 및 (iii) 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서 이러한 조합물을 포함하는 상업용 패키지 또는 제품; 및 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 종양을 치료하는 방법이 본원에 제공된다.

본원에 사용된 용어 "제약 조합물"은 활성 성분의 비-고정 조합물을 지칭한다. 용어 "비-고정 조합물"은, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암제가 그를 필요로 하는 대상체에게 동시에 또는 가변적 개재 시간 제한 하에 및 임의의 순서로 개별적으로 투여될 수 있도록 개별 조성물 또는 투여량으로서 제제화되는 것을 의미하며, 여기서 이러한 투여는 대상체의 체내에서 2종 이상의 화합물의 유효 수준을 제공한다. 이들은 또한 칵테일 요법, 예를 들어 3종 이상의 활성 성분의 투여에 적용된다. 유사하게, 용어 "조합물"은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의 항암제의 조합물과 함께 사용하는 경우에 비-고정 조합물을 지칭한다.

따라서, MEK-연관 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 (a) 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 (b) 종양의 치료를 위한 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 1종 이상의, 예를 들어 1종 이상의 추가의 항암제를 포함하는, 상기 종양을 치료하기 위한 제약 조합물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 추가의 항암제(들)의 양은 함께 종양을 치료하는 데 효과적인 것인, MEK-연관 종양을 치료하는 방법이 또한 본원에 제공된다.

한 실시양태에서, MEK-연관 종양 (예를 들어, 양성, 악성 또는 전이성 종양)의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 대상체는 상기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 항암 요법으로 치료를 받지 않았고, 여기서 항암 요법은 1종 이상의, 예를 들어 수술, 방사선요법 및 동일하거나 상이한 작용 메카니즘에 의해 작용하는 항암제로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 항암 요법으로부터 선택되는 것인, MEK-연관 종양 (예를 들어, 양성, 악성 또는 전이성 종양)을 치료하는 방법이 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 환자는 상기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 항암제로 치료받은 적이 없다. 한 실시양태에서, 환자는 상기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 수술로 치료받은 적이 없다. 한 실시양태에서, 환자는 상기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 투여 전에 방사선요법으로 치료받은 적이 없다.

한 실시양태에서, 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, MEK-연관 종양 (예를 들어, 양성, 악성 또는 전이성 종양)을 갖는 대상체를 치료하는 방법이 본원에 제공되며, 여기서 대상체는 선행 요법 또는 표준 요법 (예를 들어, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 1종 이상의 항암제로 치료 및/또는 방사선요법 및/또는 수술)으로 치료되었고, 여기서 MEK-연관 종양은 상기 선행 요법에 불응성 또는 불내성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드, (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙 및 베무라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제 및 MEK 억제제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드, 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040), 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으로부터 선택되는 MEK 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙 및 베무라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 비니메티닙, 트라메티닙 및 코비메티닙으로부터 선택되는 MEK 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙 및 비니메티닙으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 다브라페닙 및 트라메티닙으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 베무라페닙 및 코비메티닙으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 이필리무맙, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 PI3K 억제제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 부파를리십 (BKM120), 알펠리십 (BYL719), 사모톨리십 (LY3023414), 8-[(1R)-1-[(3,5-디플루오로페닐)아미노]에틸]-N,N-디메틸-2-(모르폴린-4-일)-4-옥소-4H-크로멘-6-카르복스아미드 (AZD8186), 테날리십 (RP6530), 복스탈리십 히드로클로라이드 (SAR-245409), 게다톨리십 (PF-05212384), 파눌리십 (P-7170), 타셀리십 (GDC-0032), 트랜스-2-아미노-8-[4-(2-히드록시에톡시)시클로헥실]-6-(6-메톡시피리딘-3-일)-4-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-7 (8H)-온 (PF-04691502), 두벨리십 (ABBV-954), N2-[4-옥소-4-[4-(4-옥소-8-페닐-4H-1-벤조피란-2-일)모르폴린-4-윰-4-일메톡시]부티릴]-L-아르기닐-글리실-L-아스파르틸-L-세린 아세테이트 (SF-1126), 픽틸리십 (GDC-0941), 2-메틸-1-[2-메틸-3-(트리플루오로메틸)벤질]-6-(모르폴린-4-일)-1H-벤즈이미다졸-4-카르복실산 (GSK2636771), 이델라리십 (GS-1101), 움브랄리십 토실레이트 (TGR-1202), 픽틸리십 (GDC-0941), 코판리십 히드로클로라이드 (BAY 84-1236), 닥톨리십 (BEZ-235), 1-(4-[5-[5-아미노-6-(5-tert-부틸-1,3,4-옥사디아졸-2-일)피라진-2-일]-1-에틸-1H-1,2,4-트리아졸-3-일]피페리딘-1-일)-3-히드록시프로판-1-온 (AZD-8835), 5-[6,6-디메틸-4-(모르폴린-4-일)-8,9-디히드로-6H-[1,4]옥사지노[4,3-e]퓨린-2-일]피리미딘-2-아민 (GDC-0084), 에베롤리무스, 라파마이신, 페리포신, 시롤리무스 및 템시롤리무스로부터 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 PI3K 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 부파를리십 또는 알펠리십 단독으로 또는 조합으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제, 및 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 이필리무맙, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제, MEK 억제제, 및 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040), 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 1종 이상의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제, 및/또는 PD-L1 억제제)로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙 및 베무라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제, 비니메티닙, 트라메티닙 및 코비메티닙으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 이필리무맙, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성흑색종 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 흑색종)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 알킬화제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 테모졸로미드, 포테무스틴, 로무스틴 및 카르무스틴으로부터 선택되는 알킬화제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 테모졸로미드로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 결장직장암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 결장직장암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 MEK 억제제, 및 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040), 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으부터 선택되는 MEK 억제제, 및 1종 이상의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제, 및/또는 PD-L1 억제제)로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 비니메티닙, 트라메티닙 및 코비메티닙으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 이필리무맙, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 비니메티닙인 MEK 억제제, 및 니볼루맙, 이필리무맙 또는 펨브롤리주맙인 체크포인트 억제제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 결장직장암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 결장직장암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 이필리무맙, 니볼루맙, 펨브롤리주맙 및 사산리맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 결장직장암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 돌연변이체 전이성 결장직장암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의 세포독성 화학요법제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 옥살리플라틴, 이리노테칸, 폴폭시리 (옥살리플라틴, 이리노테칸 및 플루오로우라실), 폴피리 (폴린산, 플루오로우라실 및 이리노테칸) 또는 카페옥스 (카페시타빈 및 옥살리플라틴)로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 결장직장암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 결장직장암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 EGFR 억제제, BRAF 억제제, 및 1종 이상의 세포독성 화학요법제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 전이성 결장직장암을 갖는 대상체는 세툭시맙, 파니투무맙, 오시메르티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 네시투무맙, 네라티닙, 라파티닙, 반데타닙 및 브리가티닙으로부터 선택되는 EGFR 억제제, 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 1종 이상의 세포독성 화학요법제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 세툭시맙 및 파니투무맙으로부터 선택되는 EGFR 억제제, 베무라페닙인 BRAF 억제제, 및 이리노테칸인 세포독성 화학요법제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 결장직장암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 결장직장암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 EGFR 억제제 및 1종 이상의 세포독성 화학요법제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 세툭시맙, 파니투무맙, 오시메르티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 네시투무맙, 네라티닙, 라파티닙, 반데타닙 및 브리가티닙우로부터 선택되는 EGFR 억제제, 및 1종 이상의 화학요법제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 세툭시맙 및 파니투무맙으로부터 선택되는 EGFR 억제제, 및 이리노테칸 또는 폴피리 (폴린산, 플루오로우라실 및 이리노테칸)인 세포독성 화학요법제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 비소세포 폐암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 비소세포 폐암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 EGFR 억제제로 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 세툭시맙, 파니투무맙, 오시메르티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 네시투무맙, 네라티닙, 라파티닙, 반데타닙 및 브리가티닙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 EGFR 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 에를로티닙으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 게피티닙으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 에를로티닙 및 게피티닙으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 비소세포 폐암 (예를 들어, BRAF 돌연변이를 갖는 전이성 비소세포 폐암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040), 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 세툭시맙, 파니투무맙, 오시메르티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 네시투무맙, 네라티닙, 라파티닙, 반데타닙 및 브리가티닙으로부터 선택되는 EGFR 억제제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 베무라페닙, 다브라페닙 및 엔코라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 세툭시맙 및 파니투무맙으로부터 선택되는 EGFR 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 전이성 갑상선암 (예를 들어, BRAF V600 돌연변이 또는 BRAF 융합체를 갖는 전이성 갑상선암)을 갖는 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040), 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 세툭시맙, 파니투무맙, 오시메르티닙, 에를로티닙, 게피티닙, 네시투무맙, 네라티닙, 라파티닙, 반데타닙 및 브리가티닙으로부터 선택되는 EGFR 억제제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 베무라페닙, 다브라페닙 및 엔코라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료 동안 뇌 전이가 발생하였다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 LMD를 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제, 및 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 이필리무맙, 니볼루맙, 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 LMD를 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제, MEK 억제제, 및 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040), 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제, 및/또는 PD-L1 억제제)로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙 및 베무라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제, 비니메티닙, 트라메티닙 및 코비메티닙으로부터 선택되는 MEK 억제제, 및 이필리무맙, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 LMD를 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제 (예를 들어, 본원에 개시된 임의의 체크포인트 억제제, 예를 들어 CTLA-4 억제제, PD-1 억제제 및/또는 PD-L1 억제제)로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 이필리무맙, 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의, 예를 들어 1 또는 2종의 체크포인트 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 수술로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 방사선요법 (예를 들어, 전뇌 방사선요법 또는 정위 방사선수술)으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 1종 이상의 세포독성 화학요법제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 시스플라틴, 페메트렉세드, 비노렐빈 및 파클리탁셀로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 세포독성 화학요법제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 오르니틴 데카르복실라제 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 에플로르니틴 (라세미체로서, 또는 D 또는 L 거울상이성질체로서)인 오르니틴 데카르복실라제 억제제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 알킬화제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 테모졸로미드, 로무스틴 및 카르무스틴으로부터 선택되는 알킬화제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 알킬화제 및 오르니틴 데카르복실라제 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 테모졸로미드, 로무스틴 및 카르무스틴으로부터 선택되는 알킬화제, 및 에플로르니틴인 오르니틴 데카르복실라제 억제제 (라세미체로서, 또는 D 또는 L 거울상이성질체)로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 방사선요법 (예를 들어, 전뇌 방사선요법 또는 정위 방사선수술) 및 알킬화제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 방사선요법 (예를 들어, 전뇌 방사선요법 또는 정위 방사선수술), 및 테모졸로미드, 로무스틴 및 카르무스틴으로부터 선택되는 알킬화제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 항체 요법으로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 베바시주맙인 항체 요법으로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 수술 및 방사선요법으로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 수술, 방사선요법 및 알킬화제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 수술, 방사선요법 (예를 들어, 전뇌 방사선요법 또는 정위 방사선수술), 및 테모졸로미드, 로무스틴 및 카르무스틴으로부터 선택되는 알킬화제로 이전에 치료받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 베무라페닙, 다브라페닙, 엔코라페닙 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 신경교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물 또는 다형체, 또는 화학식 II 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물 또는 다형체로의 치료 전에 BRAF 억제제 및 MEK 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 베무라페닙, 다브라페닙, 엔코라페닙 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 비니메티닙, 트라메티닙, 코비메티닙, 셀루메티닙, 피마세르팁, 레파메티닙, N-[2(R),3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)벤즈아미드 (PD-325901), 2-(2-클로로-4-아이오도페닐아미노)-N-(시클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아미드 (CI-1040) 및 3-[2(R),3-디히드록시프로필]-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온 (TAK-733)으로부터 선택되는 MEK 억제제로 이전에 치료를 받았다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙 및 베무라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제, 및 비니메티닙, 트라메티닙 및 코비메티닙으로부터 선택되는 MEK 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다. 한 실시양태에서, 신경교종은 등급 2, 등급 3 또는 등급 4 신경교종이다.

MEK-연관 종양을 갖는 대상체를 치료하기 위한 본원에 개시된 방법의 한 실시양태에서, 대상체는 MEK-연관 뇌간 신경절교종을 갖고, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로의 치료 전에 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙, 베무라페닙, N-[3-(5-클로로-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일카르보닐)-2,4-디플루오로페닐]프로판-1-술폰아미드 (PLX4720), 및 (3R)-N-(3-[[5-(2-시클로프로필피리미딘-5-일)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 (PLX8394)로부터 선택되는 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 엔코라페닙, 다브라페닙 및 베무라페닙으로부터 선택되는 BRAF 억제제로 이전에 치료되었다. 한 실시양태에서, 대상체는 상기 선행 치료에 불응성이 되었다.

종양발생의 유전적 기초는 상이한 암 유형들 간에 다를 수 있지만, 전이에 요구되는 세포 및 분자 메카니즘은 모든 고형 종양 유형에 대해 유사한 것으로 보인다. 전이성 캐스케이드 동안, 암 세포는 성장 억제 반응을 상실하고, 부착성의 변경을 겪고, 세포외 매트릭스 성분을 분해할 수 있는 효소를 생산한다. 이는 원래 종양으로부터 종양 세포의 분리, 새로 형성된 혈관계를 통한 순환 내로의 침윤, 종양 세포가 콜로니를 형성할 수 있는 유리한 원위 부위에서의 종양 세포의 이동 및 혈관외유출을 유발한다. 다수의 유전자가 전이의 프로모터 또는 억제자인 것으로 확인되었다.

따라서, MEK-연관 종양의 전이의 치료, 억제, 예방, 예방 보조 또는 감소를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 MEK-연관 종양의 전이를 치료, 억제, 예방, 예방 보조 또는 감소시키는 방법이 또한 본원에 제공된다. 한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염은 수술 (예를 들어, 종양의 적어도 부분적 절제), 방사선요법 및 항암제로부터 독립적으로 선택되는 1종 이상의 항암 요법과 조합하여 사용된다.

본원에 사용된 용어 "전이를 치료하는"은 하나 이상의 전이의 크기, 진행 및/또는 추가의 확산을 감소시키는 것을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "전이를 억제하는"은 하나 이상의 전이의 발생 (또는 재발)을 감소시키는 것, 하나 이상의 전이의 발생 (또는 재발)을 방지하는 것, 또는 하나 이상의 전이의 확산을 감소시키는 것을 의미한다.

한 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 방법에 따라 치료된 대상체는 RECIST (고형 종양의 반응 평가 기준, 예를 들어 RECIST 버전 1.0, RECIST 버전 1.1 및 변형된 RECIST 1.1 (mRECIST 1.1)), RANO-BM (신경종양학 뇌 전이에서의 반응 평가), 마크도날드, RANO-LMD 및 NANO (신경종양학에서의 신경학적 평가)를 포함한 관련 기술분야에 공지된 하나 이상의 표준 반응 평가 기준에 따라 평가될 수 있다. 임의의 상기 기준의 한 실시양태에서, 종양은 영상화 연구 (예를 들어, MRI, CT, MDCT 또는 PET)에 의해 평가된다. 한 실시양태에서, 치료 반응은 RECIST 버전 1.1에 따라 평가되며, 여기서: 완전 반응 (CR)은 모든 종양 병변의 완전 소멸로서 정의되고; 부분 반응 (PR)은 종양 측정의 합계의 적어도 30%만큼의 감소로서 정의되고; 진행성 질환 (PD)은 종양 측정의 합계의 적어도 20% 증가로서 정의되며 (여기서 새로운 병변의 발생 또는 비-표적 병변의 실질적 진행 또한 PD로서 정의됨), 여기서 기준선으로부터 적어도 5 mm의 증가가 PD로서 평가되고; 안정 질환 (SD)은 치료 중인 동안 최소 합계 직경을 참조로 하여, PR에 대한 자격을 얻기에 충분한 수축도 PD에 대한 자격을 얻기에 충분한 증가도 아닌 것으로 정의된다. 한 실시양태에서, 평가는 두개내 반응 (가돌리늄 증진 MRI를 사용하여 변형된 RECIST에 따라 평가됨), 두개외 반응, 전반적 반응률, 질환 제어율 (DCR), 반응 지속기간 (DOR), 무진행 생존 (PFS), 및 전체 생존 (OS)을 포함한다.

본원에 사용된 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 "유효 투여량" 또는 "유효량"은 질환, 그의 합병증 및 질환의 발생 동안 나타나는 중간 병리학적 표현형의 생화학적, 조직학적 및/또는 행동 증상을 포함한 임의의 1종 이상의 유익하거나 목적하는 증상에 영향을 미치기에 충분한 양이다. 치료 용도를 위해, "치료 유효량"은 치료될 장애의 증상 중 1종 이상을 어느 정도 경감시킬, 투여되는 화합물의 양을 지칭한다. 암의 치료와 관련하여, 치료 유효량은 환자에서 (1) 종양의 크기를 감소시키고/거나, (2) 종양 전이를 억제하고/거나 (즉, 어느 정도 늦추고/거나, 바람직하게는 정지시킴), (3) 종양 성장 또는 종양 침습성을 어느 정도 억제하고/거나 (즉, 어느 정도 늦추고/거나, 바람직하게는 정지시킴), (4) 암과 연관된 1종 이상의 징후 또는 증상을 어느 정도 완화시키고/거나 (또는 바람직하게는 제거함), (5) 질환을 치료하는 데 요구되는 다른 의약의 용량을 감소시키고/거나, (6) 또 다른 의약의 효과를 증진시키고/거나, (7) 질환의 진행을 지연시키는 효과를 갖는 양을 지칭한다.

유효 투여량은 1회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 본 발명의 목적을 위해, 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 유효 투여량은 직접적으로 또는 간접적으로 예방적 또는 치유적 치료를 달성하기에 충분한 양이다. 임상 상황에서 이해되는 바와 같이, 약물, 화합물 또는 제약 조성물의 유효 투여량은 또 다른 약물, 화합물 또는 제약 조성물과 함께 달성될 수 있거나 그렇지 않을 수 있다.

"제약 조성물"은 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물 중 1종 이상, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 용매화물, 수화물 또는 전구약물, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제의 혼합물을 지칭한다. 한 실시양태에서, 제약 조성물은 2종 이상의 제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제를 포함한다.

한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 한 실시양태에서, 제약 조성물은 2종 이상의 제약상 허용되는 담체 및/또는 부형제를 포함한다.

따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는, 비정상적 세포 성장의 치료를 필요로 하는 대상체에서 비정상적 세포 성장의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물을 제공한다.

본원에 사용된 "제약상 허용되는 담체"는 유기체에 상당한 자극을 일으키지 않고 투여된 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 제거하지 않는 담체 또는 희석제를 지칭한다.

제약상 허용되는 담체는 임의의 통상적인 제약 담체 또는 부형제를 포함할 수 있다. 담체 및/또는 부형제의 선택은 특정한 투여 방식, 용해도 및 안정성에 대한 담체 또는 부형제의 효과, 및 투여 형태의 성질과 같은 인자에 크게 좌우될 것이다.

적합한 제약 담체는 불활성 희석제 또는 충전제, 물 및 다양한 유기 용매 (예컨대, 수화물 및 용매화물)를 포함한다. 제약 조성물은, 원하는 경우, 추가의 성분, 예컨대 향미제, 결합제, 부형제 등을 함유할 수 있다.

용어 '부형제'는 본 발명의 화합물(들) 이외의 임의의 성분을 기재하기 위해 본원에서 사용된다. 부형제의 선택은 투여 방식, 용해도 및 안정성에 대한 부형제의 효과, 및 투여 형태의 성질과 같은 인자에 크게 좌우될 것이다.

본원에 사용된 "부형제"는 생리학상 상용성인 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항박테리아제 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제, 담체, 희석제 등을 포함한다. 부형제의 예는 물, 염수, 포스페이트 완충 염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등, 뿐만 아니라 그의 조합 중 하나 이상을 포함하고, 조성물 중에 등장화제, 예를 들어 당, 염화나트륨, 또는 폴리알콜, 예컨대 만니톨, 또는 소르비톨을 포함할 수 있다. 부형제의 예는 또한 다양한 유기 용매 (예컨대, 수화물 및 용매화물)를 포함한다. 제약 조성물은 원하는 경우에 추가의 부형제, 예컨대 향미제, 결합제/결합제, 윤활제, 붕해제, 감미제 또는 향미제, 색소 또는 염료 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 경구 투여의 경우, 다양한 부형제, 예컨대 시트르산을 함유하는 정제가 다양한 붕해제, 예컨대 전분, 알긴산 및 특정 복합 실리케이트, 및 결합제, 예컨대 수크로스, 젤라틴 및 아카시아와 함께 사용될 수 있다. 부형제의 예는 제한 없이 탄산칼슘, 인산칼슘, 다양한 당 및 전분 유형, 셀룰로스 유도체, 젤라틴, 식물성 오일 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 따라서, 경구 투여를 위해, 다양한 부형제, 예컨대 시트르산을 함유하는 정제는 다양한 붕해제, 예컨대 전분, 알긴산 및 특정 복합 실리케이트, 및 결합제, 예컨대 수크로스, 젤라틴 및 아카시아와 함께 사용될 수 있다. 부형제의 예는 제한 없이 탄산칼슘, 인산칼슘, 다양한 당 및 전분 유형, 셀룰로스 유도체, 젤라틴, 식물성 오일 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 추가로, 윤활제, 예컨대 스테아르산마그네슘, 소듐 라우릴 술페이트 및 활석은 종종 정제화 목적에 유용하다. 유사한 유형의 고체 조성물이 또한 연질 및 경질 충전된 젤라틴 캡슐에 사용될 수 있다. 따라서, 물질의 비제한적 예는 락토스 또는 유당 및 중합체량 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 수성 현탁액 또는 엘릭시르가 경구 투여에 바람직한 경우, 그 안의 활성 화합물을 다양한 감미제 또는 향미제, 색소 또는 염료, 및 원하는 경우에 유화제 또는 현탁화제, 및 희석제, 예컨대 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 글리세린 또는 그의 조합과 함께 배합할 수 있다.

부형제의 예는 또한 화합물의 보관 수명 또는 유효성을 증진시키는 제약상 허용되는 물질, 예컨대 습윤제 또는 소량의 보조 물질, 예컨대 습윤제 또는 유화제, 보존제 또는 완충제를 포함한다.

제약 조성물은, 예를 들어 정제, 캡슐, 환제, 분말, 지속 방출 제제, 용액 현탁액, 멸균 용액, 현탁액 또는 에멀젼으로서의 비경구 주사용 액체 용액 (예를 들어, 주사가능한 및 주입가능한 용액), 연고 또는 크림으로서의 국소 투여용, 분말, 리포솜 및 좌제 (예를 들어, 좌제로서의 직장 투여용)로서의 경구 투여에 적합한 형태일 수 있다. 예시적인 비경구 투여 형태는 멸균 수용액, 예를 들어 수성 프로필렌 글리콜 또는 덱스트로스 용액 중 활성 화합물의 용액 또는 현탁액을 포함한다. 이러한 투여 형태는 원하는 경우에 적합하게 완충될 수 있다. 형태는 의도된 투여 방식 및 치료 용도에 좌우된다.

제약 조성물은 정확한 투여량의 단일 투여에 적합한 단위 투여 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물은 경구로 투여될 수 있다. 경구 투여는 화합물이 위장관으로 들어가도록 삼키는 것을 포함할 수 있거나, 또는 화합물이 구강으로부터 혈류로 직접 들어가는 협측 또는 설하 투여가 이용될 수 있다. 경구 투여에 적합한 제제는 고체 제제, 예컨대 정제, 미립자, 액체 또는 분말을 함유하는 캡슐, 로젠지 (액체 충전 포함), 츄잉제, 다중 및 나노 미립자, 겔, 고용체, 리포솜, 필름 (점막 접착제 포함), 오뷸, 스프레이 및 액체 제제를 포함한다. 이러한 캡슐 또는 정제는 제어 방출 제제를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 환제의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있거나 또는 장용 코팅으로 제조될 수 있다.

액체 제제는 현탁액, 용액, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 이러한 제제는 연질 또는 경질 캡슐에서 충전제로서 사용될 수 있고, 전형적으로 담체 또는 아주반트, 예를 들어, 예컨대 습윤제, 유화제, 현탁화제, 향미제 (예를 들어, 감미제) 또는 퍼퓸제, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 메틸셀룰로스 또는 적합한 오일 중 1종 이상, 및 1종 이상의 유화제 및/또는 현탁화제를 포함한다. 액체 제제는 또한, 예를 들어 고체의 재구성에 의해 사쉐로부터 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 신속 용해, 신속 붕해 투여 형태, 예컨대 문헌 [Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981 986 by Liang and Chen (2001)] (그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것들에 사용될 수 있다.

정제 투여 형태의 경우, 용량에 따라, 약물은 투여 형태의 1 중량% 내지 80 중량%, 보다 전형적으로 투여 형태의 5 중량% 내지 60 중량%를 구성할 수 있다. 약물 이외에, 정제는 일반적으로 붕해제를 함유한다. 붕해제의 예는 소듐 스타치 글리콜레이트, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스, 칼슘 카르복시메틸 셀룰로스, 크로스카르멜로스 소듐, 크로스포비돈, 폴리비닐피롤리돈, 메틸 셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 저급 알킬 치환된 히드록시프로필 셀룰로스, 전분, 예비젤라틴화 전분 및 알긴산나트륨을 포함한다. 일반적으로, 붕해제는 투여 형태의 1 중량% 내지 25 중량%, 바람직하게는 5 중량% 내지 20 중량%를 차지할 것이다. 결합제는 일반적으로 정제 제제에 응집 품질을 부여하는 데 사용된다. 적합한 결합제는 미세결정질 셀룰로스, 젤라틴, 당, 폴리에틸렌 글리콜, 천연 및 합성 검, 폴리비닐피롤리돈, 예비젤라틴화 전분, 히드록시프로필 셀룰로스 및 히드록시프로필 메틸셀룰로스를 포함한다. 정제는 또한 희석제, 예컨대 락토스 (1수화물, 분무 건조된 1수화물, 무수 등), 만니톨, 크실리톨, 덱스트로스, 수크로스, 소르비톨, 미세결정질 셀룰로스, 전분 및 이염기성 인산칼슘 2수화물을 함유할 수 있다. 정제는 또한 임의로 표면 활성제, 예컨대 소듐 라우릴 술페이트 및 폴리소르베이트 80, 및 활택제, 예컨대 이산화규소 및 활석을 포함할 수 있다. 존재하는 경우, 표면 활성제는 전형적으로 정제의 0.2 중량% 내지 5 중량%의 양이고, 활택제는 전형적으로 정제의 0.2 중량% 내지 1 중량%이다. 정제는 또한 일반적으로 윤활제, 예컨대 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘, 스테아르산아연, 소듐 스테아릴 푸마레이트, 및 스테아르산마그네슘과 소듐 라우릴 술페이트의 혼합물을 함유한다. 윤활제는 일반적으로 정제의 0.25 중량% 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.5 중량% 내지 3 중량%의 양으로 존재한다. 다른 통상적인 성분은 항산화제, 착색제, 향미제, 보존제 및 맛 차폐제를 포함한다. 정제 블렌드는 직접 또는 롤러에 의해 압축되어 정제를 형성할 수 있다. 정제 블렌드 또는 블렌드의 부분은 대안적으로 정제화 전에 습식, 건식 또는 용융 과립화, 용융 응결 또는 압출될 수 있다. 최종 제제는 하나 이상의 층을 포함할 수 있고, 코팅 또는 비코팅되거나; 또는 캡슐화될 수 있다. 경구 투여용 고체 제제는 즉시 및/또는 변형 방출되도록 제제화될 수 있다. 변형 방출 제제는 지연, 지속 펄스, 제어, 표적화 및 프로그램화 방출을 포함한다.

경구 투여를 위해, 조성물은 환자에 대한 투여량의 대증적 조정을 위해 0.01, 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 25.0, 50.0, 75.0, 또는 100 밀리그램의 활성 성분을 함유하는 정제 또는 캡슐의 형태로 제공될 수 있다. 의약은 전형적으로 약 0.01 mg 내지 약 100 mg의 활성 성분을 함유한다. 또 다른 실시양태에서, 의약은 약 0.01 내지 0.25 mg의 활성 성분을 함유한다. 또 다른 실시양태에서, 의약은 약 0.25, 0.5, 1.0, 5.0, 15 또는 25 mg의 활성 성분을 함유한다.

본 발명의 화합물은 또한 혈류 내로, 근육 내로, 또는 내부 기관 내로 직접 투여될 수 있다. 비경구 투여에 적합한 수단은 정맥내, 동맥내, 복강내, 척수강내, 뇌실내, 요도내, 흉골내, 두개내, 근육내 및 피하를 포함한다. 비경구 투여에 적합한 장치는 바늘 (미세 바늘 포함) 시린지, 무바늘 시린지 및 주입 기술을 포함한다. 주사가능한 제제 (즉, 멸균 주사가능한 수성 또는 유성 현탁액)는 적합한 분산제, 습윤제 또는 현탁화제 중 1종 이상을 사용하여 공지된 기술에 따라 제제화될 수 있다. 비경구 제제는 전형적으로 부형제, 예컨대 염, 탄수화물 및 완충제 (바람직하게는 3 내지 9의 pH)를 함유할 수 있는 수용액이지만, 일부 적용을 위해, 이들은 보다 적합하게는 멸균 비-수용액으로서 또는 적합한 비히클, 예컨대 멸균 발열원 무함유 물과 함께 사용될 건조 형태로서 제제화될 수 있다. 예를 들어 동결건조에 의한 멸균 조건 하에서의 비경구 제제의 제조는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지된 표준 제약 기술을 사용하여 용이하게 달성될 수 있다. 비경구 용액의 제조에 사용되는 본 발명의 화합물의 용해도는 적절한 제제화 기술, 예컨대 용해도 증진제의 혼입의 사용에 의해 증가될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제는 즉시 및/또는 변형 방출되도록 제제화될 수 있다. 변형 방출 제제는 지연, 지속, 펄스, 제어, 표적화 및 프로그램화 방출을 포함한다. 따라서, 본 발명의 화합물은 활성 화합물의 변형 방출을 제공하는 이식 데포로서 투여하기 위한 고체, 반고체 또는 요변성 액체로서 제제화될 수 있다. 이러한 제제의 예는 약물 코팅된 스텐트 및 PGLA 마이크로구체를 포함한다.

본 발명의 화합물은 또한 피부 또는 점막에 국소로, 즉 피부로 또는 경피로, 예컨대 경피 패치 또는 이온영동 장치, 안내 투여, 또는 비강내 또는 흡입 투여를 통해 투여될 수 있다. 국소 제제는 피부 또는 다른 이환 부위를 통한 활성 성분의 흡수 또는 침투를 증진시키는 화합물을 포함할 수 있다. 본 발명의 화합물이 경피 장치에 의해 투여되는 경우, 투여는 저장소 및 다공성 막 유형 또는 고체 매트릭스 종류의 패치를 사용하여 달성될 것이다. 이러한 목적을 위한 전형적인 제제는 겔, 히드로겔, 로션, 용액, 크림, 연고, 산포제, 드레싱, 발포체, 필름, 피부 패치, 웨이퍼, 이식물, 스폰지, 섬유, 붕대 및 마이크로에멀젼을 포함한다. 리포솜이 또한 사용될 수 있다. 전형적인 담체는 알콜, 물, 미네랄 오일, 액체 페트롤라툼, 백색 페트롤라툼, 글리세린, 폴리에틸렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜을 포함한다. 침투 증진제가 혼입될 수 있다. 국소 투여의 다른 수단은 전기천공, 이온영동, 음파영동, 초음파영동 및 미세 바늘 또는 무바늘 (예를 들어, 파우더젝트(Powderject)™, 바이오젝트(Bioject)™ 등) 주사에 의한 전달을 포함한다.

눈으로의 국소 투여에 적합한 제제는, 예를 들어 본 발명의 화합물이 적합한 부형제 중에 용해 또는 현탁되어 있는 점안제를 포함한다. 안구 또는 귀 투여에 적합한 전형적인 제제는 등장성의 pH-조정된 멸균 염수 중의 마이크로화 현탁액 또는 용액의 점적제 형태일 수 있다. 안구 및 귀 투여에 적합한 다른 제제는 연고, 생분해성 (즉, 흡수성 겔 스폰지, 콜라겐) 및 비-생분해성 (즉, 실리콘) 이식물, 웨이퍼, 렌즈 및 미립자 또는 소포성 시스템, 예컨대 니오솜 또는 리포솜을 포함한다. 중합체, 예컨대 가교된 폴리아크릴산, 폴리비닐 알콜, 히알루론산, 셀룰로스 중합체, 예를 들어 히드록시프로필메틸셀룰로스, 히드록시에틸셀룰로스 또는 메틸셀룰로스, 또는 헤테로폴리사카라이드 중합체, 예를 들어 겔란 검은 보존제, 예컨대 벤즈알코늄 클로라이드와 함께 혼입될 수 있다. 이러한 제제는 또한 이온영동에 의해 전달될 수 있다.

국소 투여를 위한 제제는 즉시 및/또는 변형 방출되도록 제제화될 수 있다. 변형 방출 제제는 지연, 지속, 펄스, 제어, 표적화 및 프로그램화 방출을 포함한다.

본 발명의 화합물은 또한 비강내로 또는 흡입에 의해, 전형적으로 건조 분말 흡입기로부터 건조 분말의 형태로 (단독으로, 혼합물로서, 예를 들어 락토스와의 건조 블렌드로, 또는 예를 들어 인지질, 예컨대 포스파티딜콜린과 혼합된 혼합 성분 입자로서), 또는 적합한 추진제, 예컨대 1,1,1,2 테트라플루오로에탄 또는 1,1,1,2,3,3,3 헵타플루오로프로판을 사용하거나 사용하지 않는 가압 용기, 펌프, 스프레이, 아토마이저 (바람직하게는 미세 연무를 생성하기 위해 전기유체역학을 사용하는 아토마이저) 또는 네뷸라이저로부터 에어로졸 스프레이로서 투여될 수 있다. 비강내 사용의 경우, 분말은 생체접착제, 예를 들어 키토산 또는 시클로덱스트린을 포함할 수 있다. 가압 용기, 펌프, 스프레이, 아토마이저 또는 네뷸라이저는, 예를 들어 에탄올, 수성 에탄올, 또는 활성제의 분산, 가용화 또는 연장 방출을 위한 적합한 대안적 작용제, 용매로서의 추진제(들), 및 임의적인 계면활성제, 예컨대 소르비탄 트리올레에이트, 올레산 또는 올리고락트산을 포함하는 본 발명의 화합물(들)의 용액 또는 현탁액을 함유한다. 건조 분말 또는 현탁액 제제로 사용하기 전에, 약물 제품은 흡입에 의한 전달에 적합한 크기 (전형적으로 5 마이크로미터 미만)로 마이크로화될 수 있다. 이는 임의의 적절한 파분쇄 방법, 예컨대 나선형 제트 밀링, 유동층 제트 밀링, 나노입자를 형성하기 위한 초임계 유체 가공, 고압 균질화, 또는 분무 건조에 의해 달성될 수 있다.

흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한 캡슐 (예를 들어, 젤라틴 또는 HPMC로부터 제조됨), 블리스터 및 카트리지는 본 발명의 화합물, 적합한 분말 베이스, 예컨대 락토스 또는 전분 및 성능 개질제, 예컨대 류신, 만니톨 또는 스테아르산마그네슘의 분말 믹스를 함유하도록 제제화될 수 있다. 락토스는 무수 또는 1수화물의 형태일 수 있으며, 바람직하게는 후자이다. 다른 적합한 부형제는 덱스트란, 글루코스, 말토스, 소르비톨, 크실리톨, 프룩토스, 수크로스 및 트레할로스를 포함한다.

적합한 향미제, 예컨대 멘톨 및 레보멘톨, 또는 감미제, 예컨대 사카린 또는 사카린 소듐이 흡입/비강내 투여를 위해 의도된 본 발명의 제제에 첨가될 수 있다.

본 발명의 화합물은, 예를 들어 좌제, 페사리 또는 관장제의 형태로 직장으로 또는 질로 투여될 수 있다. 코코아 버터는 전통적인 좌제 베이스이지만, 적절한 경우에 다양한 대체물이 사용될 수 있다.

직장/질 투여를 위한 제제는 즉시 및/또는 변형 방출되도록 제제화될 수 있다. 변형 방출 제제는 지연, 지속, 펄스, 제어, 표적화 및 프로그램화 방출을 포함한다.

본 발명의 화합물은 또한 전형적으로 등장성의 pH 조정된 멸균 염수 중의 마이크로화 현탁액 또는 용액의 점적제 형태로 눈 또는 귀에 직접 투여될 수 있다. 안구 및 귀 투여에 적합한 다른 제제는 연고, 생분해성 (예를 들어, 흡수성 겔 스폰지, 콜라겐) 및 비-생분해성 (예를 들어, 실리콘) 이식물, 웨이퍼, 렌즈 및 미립자 또는 소포성 시스템, 예컨대 니오솜 또는 리포솜을 포함한다. 중합체, 예컨대 가교된 폴리아크릴산, 폴리비닐알콜, 히알루론산, 셀룰로스 중합체, 예를 들어 히드록시프로필메틸셀룰로스, 히드록시에틸셀룰로스 또는 메틸 셀룰로스, 또는 헤테로폴리사카라이드 중합체, 예를 들어 겔란 검은 보존제, 예컨대 벤즈알코늄 클로라이드와 함께 혼입될 수 있다. 이러한 제제는 또한 이온영동에 의해 전달될 수 있다.

안구/귀 투여를 위한 제제는 즉시 및/또는 변형 방출되도록 제제화될 수 있다. 변형 방출 제제는 지연, 지속, 펄스, 제어, 표적화 또는 프로그램화 방출을 포함한다.

제약 분야에 공지된 다른 부형제 및 투여 방식이 또한 사용될 수 있다. 본 발명의 제약 조성물은 임의의 널리 공지된 제약 기술, 예컨대 효과적인 제제화 및 투여 절차에 의해 제조될 수 있다. 효과적인 제제화 및 투여 절차에 관한 상기 고려사항은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 표준 참고서에 기재되어 있다. 약물의 제제화는, 예를 들어 문헌 [Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, 1975; Liberman et al., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; and Kibbe et al., Eds., Handbook of Pharmaceutical Excipients (3rd Ed.), American Pharmaceutical Association, Washington, 1999]에 논의되어 있다.

허용되는 부형제는 사용되는 투여량 및 농도에서 대상체에게 비독성이고, 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 1) 완충제, 예컨대 포스페이트, 시트레이트 또는 다른 유기 산; 2) 염, 예컨대 염화나트륨; 3) 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 메티오닌; 4) 보존제, 예컨대 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드, 헥사메토늄 클로라이드, 벤즈알코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드, 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 5) 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤, 카테콜, 레조르시놀, 시클로헥산올, 3-펜탄올 또는 m-크레졸; 6) 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 7) 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 이뮤노글로불린; 8) 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 9) 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 10) 모노사카라이드, 디사카라이드 또는 다른 탄수화물, 예컨대 글루코스, 만노스 또는 덱스트린; 11) 킬레이트화제, 예컨대 EDTA; 12) 당, 예컨대 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 13) 염-형성 반대-이온, 예컨대 나트륨, 금속 착물 (예를 들어, Zn-단백질 복합체), 또는 14) 비-이온성 계면활성제, 예컨대 폴리소르베이트 (예를 들어, 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80), 폴록사머 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG).

본 발명의 화합물을 함유하는 리포솜은 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Chang, H.I.; Yeh, M.K.; Clinical development of liposome-based drugs: formulation, characterization, and therapeutic efficacy; Int J Nanomedicine 2012; 7; 49-60] 참조). 특히 유용한 리포솜은 포스파티딜콜린, 콜레스테롤 및 PEG-유도체화 포스파티딜에탄올아민 (PEG-PE)을 포함하는 지질 조성물을 사용한 역상 증발 방법에 의해 생성될 수 있다. 리포솜은 규정된 세공 크기의 필터를 통해 압출되어 목적하는 직경을 갖는 리포솜을 생성한다.

본 발명의 화합물은 또한, 예를 들어 코아세르베이션 기술 또는 계면 중합에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예를 들어 각각 히드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐 내에, 콜로이드성 약물 전달 시스템 (예를 들어, 리포솜, 알부민 마이크로구체, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐) 내에 또는 마크로에멀젼 내에 포획될 수 있다. 이러한 기술은 문헌 [Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., Mack Publishing (2000)]에 개시되어 있다.

지속-방출 제제가 사용될 수 있다. 지속-방출 제제의 적합한 예는 본 발명의 화합물을 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함하며, 이 매트릭스는 성형품, 예를 들어 필름 또는 마이크로캡슐의 형태이다. 지속-방출 매트릭스의 예는 폴리에스테르, 히드로겔 (예를 들어, 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐알콜)), 폴리락티드, L-글루탐산 및 7 에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비-분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예컨대 데포 현탁액용 류프롤리드 아세테이트에 사용되는 것들 (락트산-글리콜산 공중합체 및 류프롤리드 아세테이트로 구성된 주사가능한 마이크로구체), 수크로스 아세테이트 이소부티레이트 및 폴리-D-(-)-3-히드록시부티르산을 포함한다.

정맥내 투여에 사용될 제제는 멸균되어야 한다. 이는, 예를 들어 멸균 여과 막을 통한 여과에 의해 용이하게 달성된다. 본 발명의 화합물은 일반적으로 멸균 접근 포트를 갖는 용기, 예를 들어 피하 주사 바늘로 뚫을 수 있는 마개를 갖는 정맥내 용액 백 또는 바이알에 넣는다.

적합한 에멀젼은 상업적으로 입수가능한 지방 에멀젼, 예컨대 대두 오일을 포함하는 지질 에멀젼, 정맥내 투여를 위한 지방 에멀젼 (예를 들어, 수중 홍화 오일, 대두 오일, 난 포스파티드 및 글리세린을 포함함), 대두 오일 및 중쇄 트리글리세리드를 함유하는 에멀젼, 및 목화씨 오일의 지질 에멀젼을 사용하여 제조될 수 있다. 활성 성분은 예비-혼합된 에멀젼 조성물 중에 용해될 수 있거나, 또는 다르게는 오일 (예를 들어, 대두 오일, 홍화 오일, 목화씨 오일, 참깨 오일, 옥수수 오일 또는 아몬드 오일) 및 인지질 (예를 들어, 난 인지질, 대두 인지질 또는 대두 레시틴) 및 물과 혼합하여 형성된 에멀젼 중에 용해될 수 있다. 에멀젼의 장성을 조정하기 위해 다른 성분, 예를 들어 글리세롤 또는 글루코스가 첨가될 수 있다는 것이 인지될 것이다. 적합한 에멀젼은 전형적으로 20% 이하, 예를 들어 5 내지 20%의 오일을 함유할 것이다. 지방 에멀젼은 0.1 내지 1.0 μm, 특히 0.1 내지 0.5 μm의 지방 액적을 포함할 수 있고, 5.5 내지 8.0 범위의 pH를 가질 수 있다.

예를 들어, 에멀젼 조성물은 본 발명의 화합물을 대두 오일 또는 그의 구성성분 (대두 오일, 난 인지질, 글리세롤 및 물)을 포함하는 지질 에멀젼과 혼합함으로써 제조된 것일 수 있다.

약물 제품 중간체 (DPI)는 벌크 약물 제품이 되기 전에 추가의 가공 단계를 겪어야 하는 부분적으로 가공된 물질이다. 본 발명의 화합물은 결정질 형태보다 더 높은 자유 에너지 형태의 활성 성분을 함유하는 약물 제품 중간체 DPI로 제제화될 수 있다. DPI를 사용하는 한 이유는 저용해도, 느린 용해, 상피 세포에 인접한 점액층을 통한 개선된 물질 수송, 및 일부 경우에 생물학적 장벽, 예컨대 대사 및 수송체로 인한 제한으로 인해 경구 흡수 특징을 개선시키는 것이다. 다른 이유는 개선된 고체 상태 안정성 및 하류 제조성을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 약물 생성물 중간체는 무정형 상태로 단리되고 안정화된 본 발명의 화합물 (예를 들어, 무정형 고체 분산물 (ASD))을 함유한다. 벌크 약물 제품으로의 통합에 적합한 물질을 생성하는 ASD를 제조하기 위한 관련 기술분야에 공지된 많은 기술, 예를 들어 분무 건조된 분산액 (SDD), 용융 압출물 (종종 HME로 지칭됨), 공침전물, 무정형 약물 나노입자 및 나노-흡착물이 존재한다. 한 실시양태에서, 무정형 고체 분산물은 본 발명의 화합물 및 중합체 부형제를 포함한다. 다른 부형제 뿐만 아니라 상기 부형제 및 본 발명의 화합물의 농도는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, 표준 교과서에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌 ["Amorphous Solid Dispersions Theory 및 Practice" by Navnit Shah et al.]을 참조한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 의약, 특히 비정상적 세포 성장의 치료를 위한 의약으로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 대상체에서의 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료를 위한 의약의 제조를 위한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 비정상적 세포 성장, 예를 들어 종양, 예를 들어 MEK-연관 종양의 치료에 사용하기 위한 본원에 기재된 임의의 화학식에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

본 발명의 화합물의 투여는 화합물의 작용 부위로의 전달을 가능하게 하는 임의의 방법에 의해 영향을 받을 수 있다. 이들 방법은 경구 경로, 십이지장내 경로, 비경구 주사 (정맥내, 피하, 근육내, 혈관내 또는 주입 포함), 국소 및 직장 투여를 포함한다.

투여 요법은 최적의 목적하는 반응을 제공하도록 조정될 수 있다. 예를 들어, 단일 볼루스가 투여될 수 있거나, 여러 분할 용량이 시간에 걸쳐 투여될 수 있거나, 또는 용량이 치료 상황의 위급성에 의해 지시되는 바와 같이 비례적으로 감소 또는 증가될 수 있다. 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 비경구 조성물을 투여 단위 형태로 제제화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 투여 단위 형태는 치료될 포유동물 대상체에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적 이산 단위를 지칭하며; 각각의 단위는 요구되는 제약 담체와 함께 목적하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 미리 결정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 본 발명의 투여 단위 형태에 대한 상세사항은 (a) 투여되는 화합물의 고유의 특징 및 달성하고자 하는 특정한 치료적 또는 예방적 효과, 및 (b) 개체에서의 감수성 치료를 위해 이러한 활성 화합물을 배합하는 분야에서의 고유한 제한에 따라 좌우되고, 이에 직접적으로 의존한다.

따라서, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본원에 제공된 개시내용에 기초하여, 용량 및 투여 요법이 치료 기술분야에 널리 공지된 방법에 따라 조정된다는 것을 알 것이다. 즉, 최대 허용 용량은 용이하게 확립될 수 있고, 검출가능한 치료 이익을 환자에게 제공하는 유효량이 또한 결정될 수 있으며, 검출가능한 치료 이익을 환자에게 제공하기 위해 각각의 작용제를 투여하기 위한 일시적 요건도 결정될 수 있다. 따라서, 특정 용량 및 투여 요법이 본원에 예시되지만, 이들 예는 본 발명을 실시하는 데 있어서 환자에게 제공될 수 있는 용량 및 투여 요법을 결코 제한하지 않는다.

투여량 값은 완화될 상태의 유형 및 중증도에 따라 달라질 수 있고, 단일 또는 다중 용량을 포함할 수 있다는 것을 주목해야 한다. 임의의 특정한 대상체에 대해, 구체적 투여 요법은 개별 필요성, 및 조성물을 투여하거나 그의 투여를 감독하는 사람의 전문적인 판단에 따라 시간 경과에 따라 조정되어야 하고, 본원에 제시된 투여량 범위는 단지 예시적이며 청구된 조성물의 범주 또는 실시를 제한하는 것으로 의도되지 않는다는 것이 추가로 이해되어야 한다. 예를 들어, 용량은 임상 효과, 예컨대 독성 효과 및/또는 실험실 값을 포함할 수 있는 약동학적 또는 약역학적 파라미터에 기초하여 조정될 수 있다. 따라서, 본 발명은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정된 바와 같은 환자내 용량 증량을 포괄한다. 화학요법제의 투여에 적절한 투여량 및 요법을 결정하는 것은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있고, 본원에 개시된 교시가 제공되눈 경우 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 포괄되는 것으로 이해될 것이다. 한 실시양태에서, 유효 투여량은 전형적으로 단일 또는 분할 용량으로 1일에 kg 체중당 약 0.001 내지 약 100 mg, 빈번하게는 약 0.01 내지 약 35 mg/kg/일의 범위이다. 70 kg 인간의 경우, 이는 약 0.07 mg/일 내지 약 7000 mg/일, 보다 통상적으로 약 10 mg/일 내지 약 1000 mg/일의 양일 것이다. 때때로, 투여량은 약 10, 20, 30, 40, 50, 60, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575, 600, 625, 650, 675, 700, 750, 800, 900 또는 1000 mg/일이다. 때때로, 투여량은 약 10 mg/일 내지 약 1000 mg/일, 약 10 mg/일 내지 약 750 mg/일, 약 10 mg/일 내지 약 600 mg/일, 약 10 mg/일 내지 약 300 mg/일, 약 10 mg/일 내지 약 150 mg/일, 약 20 mg/일 내지 약 750 mg/일, 약 20 mg/일 내지 약 600 mg/일, 약 20 mg/일 내지 약 300 mg/일, 약 20 mg/일 내지 약 150 mg/일, 약 50 mg/일 내지 약 750 mg/일, 약 50 mg/일 내지 약 600 mg/일, 약 50 mg/일 내지 약 300 mg/일, 약 50 mg/일 내지 약 150 mg/일, 약 75 mg/일 내지 약 750 mg/일, 약 75 mg/일 내지 약 600 mg/일, 약 75 mg/일 내지 약 300 mg/일, 또는 약 75 mg/일 내지 약 150 mg/일이다. 일부 경우에, 상기 범위의 하한치 미만의 투여량 수준이 보다 적절할 수 있는 반면에, 다른 경우에는 훨씬 더 많은 용량이 임의의 유해한 부작용을 유발하지 않으면서 사용될 수 있으며, 이러한 더 많은 용량은 전형적으로 하루에 걸쳐 투여하기 위해 수회의 더 적은 용량으로 분할된다. 한 실시양태에서, 대상체는 약 50 mg/일 투여된다.

예를 들어 특정한 질환 또는 상태를 치료하기 위한 목적으로 활성 화합물의 조합물을 투여하는 것이 바람직할 수 있는 한, 2종 이상의 제약 조성물 (이들 중 적어도 1종은 본 발명에 따른 화합물을 함유함)이 편리하게는 조성물의 공-투여에 적합한 키트의 형태로 조합될 수 있는 것은 본 발명의 범주 내에 있다. 따라서, 본 발명의 키트는 2종 이상의 개별 제약 조성물 (이들 중 적어도 1종은 본 발명의 화합물을 함유함), 및 상기 조성물을 개별적으로 보유하기 위한 수단, 예컨대 용기, 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함한다. 이러한 키트의 예는 정제, 캡슐 등의 포장에 사용되는 익숙한 블리스터 팩이다.

본 발명의 키트는 상이한 투여 형태, 예컨대 경구 및 비경구 투여 형태를 투여하거나, 개별 조성물을 상이한 투여 간격으로 투여하거나, 개별 조성물을 서로에 대해 적정하는 데 특히 적합하다. 순응도를 돕기 위해, 키트는 전형적으로 투여 지침서를 포함하고, 기억 보조물이 제공될 수 있다. 일부 실시양태에서, 키트는 화합물 또는 그의 제약 조성물 및 진단제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 키트는 화합물 또는 그의 제약 조성물 및 1종 이상의 치료제, 예컨대 BRAF 억제제, 예를 들어 N-(3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-2,4-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드; N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드; N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4,5-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드; N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드; N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드; N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-메틸-3-(메틸-d3)-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드; N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}프로판-1-술폰아미드; N-(3-클로로-4-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시)-5-플루오로피리딘-2-일)프로판-1-술폰아미드; N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}-3-플루오로프로판-1-술폰아미드; N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-2-아자비시클로[2.1.1]헥산-2-술폰아미드, (R)-N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드 및 N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드로부터 선택되는 BRAF 억제제; 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.

하기 반응식 및 기재된 설명은 본 발명의 화합물의 제조에 관한 일반적 세부사항을 제공한다.

본 발명의 화합물은 유사한 구조의 화합물의 제조에 대해 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 특히, 본 발명의 화합물은 하기 반응식을 참조하여 기재된 절차에 의해, 또는 실시예에 기재된 구체적 방법에 의해, 또는 이들 중 어느 하나와 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.

관련 기술분야의 통상의 기술자는 하기 반응식에 제시된 실험 조건이 제시된 변환을 실시하기 위한 적합한 조건의 예시이고, 화학식 I의 화합물, 및 화학식 I 내에 속하는 화합물, 예를 들어 화학식 II의 화합물 등의 제조에 사용되는 정확한 조건을 변화시키는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 알 것이다.

또한, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 바람직하지 않은 부반응을 방지하기 위해 1개 이상의 감수성 기를 보호하는 것이 본 발명의 화합물의 합성의 임의의 단계에서 필요하거나 바람직할 수 있음을 알 것이다. 특히, 아미노 또는 알콜 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있다. 본 발명의 화합물의 제조에 사용되는 보호기 (PG)는 통상적인 방식으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 본원에 참조로 포함된 문헌 ['Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora W Greene and Peter G M Wuts, third edition, (John Wiley and Sons, 1999)], 특히 챕터 7 ("Protection for the Amino Group") 및 2 ("Protection for the Hydroxyl Group, Including 1 ,2- and 1 ,3-Diols")에 기재된 것들을 참조하며, 이는 또한 이러한 기의 제거 방법을 기재하고 있다.

반응식 1

반응식 1은 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 C3-C6 시클로알킬이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물인 화합물 8을 제조하는 일반적 방법을 기재한다. 상업적으로 입수가능한 2,6-디클로로-4-메틸니코틴산 (화합물 1)을 (트리메틸실릴)디아조메탄으로 처리하여 에스테르 유사체 2로 전환시킬 수 있다. 화합물 2를 N,N-디메틸포름아미드 디메틸아세탈로 처리하여 디메틸아미노비닐 중간체 화합물 3으로 전환시킬 수 있다. 화합물 3을 적합한 용매, 예컨대 에테르 중에서 적합한 산, 예컨대 염산으로 처리하여 알데히드 중간체 화합물 4로 전환시킬 수 있다. 화합물 4를 환원제 (예를 들어, 소듐 시아노보로히드라이드)의 존재 하에 적합한 용매, 예컨대 메탄올 중에서 화학식 R³NH₂ (여기서, R³은 C3-C6 시클로알킬임)를 갖는 시약으로 처리하여 화합물 4의 고리화를 달성함으로써 화합물 5를 제공할 수 있다. 화합물 5를 적합한 용매, 예컨대 아세토니트릴 중에서 트리메틸실릴 아이오다이드로 처리하여 화합물 6으로 전환시킬 수 있다. 화합물 6을 적합한 염기, 예컨대 알칼리성 카르보네이트, 예컨대 탄산칼륨의 존재 하에 적합한 용매, 예컨대 THF의 존재 하에 메틸 아이오다이드로 처리하여 메틸화함으로써 화합물 7을 제공할 수 있다. 화합물 7을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 8을 제공할 수 있다.

반응식 2

반응식 2는 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 17을 제조하는 일반적 방법을 기재한다. 상업적으로 입수가능한 4-브로모-2,6-디클로로피리딘을 시약, 예컨대 리튬 디이소프로필아미드로 리튬화시키고, 이산화탄소로 트랩핑하여 카르복실산 10을 수득할 수 있다. 화합물 10을 수성 염기, 예컨대 4 M 수산화나트륨 중에서 환류시켜 화합물 11로 전환시킬 수 있다. 화합물 11을 적합한 염기, 예컨대 알칼리성 카르보네이트, 예컨대 탄산칼륨의 존재 하에, 적합한 용매, 예컨대 DMF의 존재 하에 메틸 아이오다이드로 처리하여 메틸화함으로써 화합물 12를 제공할 수 있다. 화합물 12를 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 촉매, 예컨대 메탄술포네이토(2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-프로폭시-1,1'-비페닐)(2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) 및 알칼리성 염기 (예를 들어, 알칼리성 카르보네이트, 예를 들어 수성 탄산칼륨)를 사용하여 (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (화합물 (i))과의 스즈키 반응을 통해 비닐 에테르 중간체 13으로 전환시킬 수 있다. 화합물 13을 트리에틸아민 및 HCl을 사용하고 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 가열하면서 화학식 R^3a-NH₂HCl (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약으로 처리하여 옥심 형성을 수행함으로써 화합물 14를 제공할 수 있다. 화합물 14를 적합한 용매, 예컨대 이소프로판올 중에서 적절한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로히드라이드를 사용하여 알콕시아민 중간체 15로 환원시킬 수 있다. 화합물 15를 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행하고, 병행하여 고리화한 다음, 화합물 16이 P¹ 보호기를 함유하는 경우에 (관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 알콜 탈보호 조건, 예컨대 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 사용하여) 임의적으로 탈보호시켜, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-인 화합물 17을 제공할 수 있다.

반응식 3

반응식 3은 R¹이 H이고, R²가 CH₃-이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 20을 제조하는 일반적 방법을 기재한다. R^3a가 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, P¹이 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 반응식 2에 기재된 바와 같이 제조된 화합물 15를 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서 R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 고리화함으로써 화합물 16을 제공할 수 있다. 화합물 16을 적합한 용매, 예컨대 1:1 MeOH:THF 중에서 n-아이오도숙신이미드 및 p-톨루엔술폰산을 사용하여 아이오딘화하여 화합물 18을 제공할 수 있다. 화합물 18을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 촉매, 예를 들어 팔라듐 촉매, 예컨대 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐 (0)을 사용하여 메틸아연(II) 클로라이드와 네기시 커플링시킨 다음, 화합물 19가 보호기를 함유하는 경우에 (관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 알콜 탈보호 조건, 예컨대 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 사용하여) 임의적으로 탈보호시켜, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시인 화합물 20을 제공할 수 있다.

반응식 4

반응식 4는 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 H이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 24를 제조하는 일반적 방법을 기재한다. 반응식 2에 기재된 바와 같이 제조된 화합물 13을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 21을 제공할 수 있다. 화합물 21을 적합한 용매, 예컨대 디클로로메탄 중에서 산, 예컨대 트리플루오로아세트산을 사용하여 산성 조건 하에 알데히드 중간체 22로 가수분해할 수 있다. 화합물 22를 적합한 용매, 예컨대 디클로로에탄 중에서 환원제, 예컨대 소듐 트리아세톡시보로히드라이드를 사용하여 화학식 P^2-NH₂ (여기서, P²는 아민 보호기, 예컨대 벤질, p-메톡시벤질 또는 2,4-디메톡시벤질임)를 갖는 시약으로 처리하여 고리화함으로써 화합물 23을 제공할 수 있다. 화합물 23의 탈보호를 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 탈보호 조건을 사용하여, 예컨대 트리플루오로아세트산 또는 염산과 함께 가열하여 달성함으로써 화합물 24를 제공할 수 있다.

반응식 5

반응식 5는 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시C1-C6 알킬이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 27을 제조하는 일반적 방법을 기재한다. 반응식 2에 기재된 바와 같이 제조된 화합물 13을 적합한 산, 예컨대 트리플루오로아세트산을 사용하여 알데히드 중간체 25로 가수분해할 수 있다. 화합물 25를 60℃에서 적합한 용매, 예컨대 디클로로에탄 중에서 적합한 환원제, 예컨대 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 및 아세트산을 사용하여 화학식 P¹O-(C1-C6 알킬)-ONH₂HCl (여기서, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약과 반응시켜 고리화되고 탈보호된 화합물 26을 수득할 수 있다. 화합물 26을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 27을 제공할 수 있다.

반응식 6

반응식 6은 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물인 화합물 17을 제조하는 대안적인 일반적 방법을 기재한다. 화합물 13에 대해 기재된 것과 유사한 방법에 따라 제조된 화합물 28을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 29를 제공할 수 있다. 화합물 29를 트리에틸아민 및 HCl을 사용하고 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 가열하면서 화학식 R^3aNH₂ HCl (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약으로 처리하여 옥심 형성을 수행함으로써 화합물 30을 제공할 수 있다. 화합물 30을 적합한 용매, 예컨대 이소프로판올 중에서 적절한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로히드라이드 및 아세트산을 사용하여 고리화시킨 다음, 화합물 30이 P¹ 보호기를 함유하는 경우에 (관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 알콜 탈보호 조건, 예컨대 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 사용하여) 임의적으로 탈보호시켜, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시인 화합물 17을 제공할 수 있다.

반응식 7

반응식 7은 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 17을 제조하는 대안적인 일반적 방법을 기재한다. 화합물 28을 트리에틸아민 및 HCl을 사용하고 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 가열하면서 화학식 TBSO-(C1-C6 알킬)-ONH₂ HCl의 시약으로 처리하여 옥시민 형성을 수행함으로써 화합물 32를 제공할 수 있다. 화합물 32를 적합한 용매, 예컨대 DMF 중에서 tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 및 적합한 염기, 예컨대 이미다졸을 사용하여 적절한 알콜 보호기 P¹, 예컨대 tert-부틸디메틸실릴로 보호하여 화합물 14를 제공할 수 있다. 화합물 14를 적합한 용매, 예컨대 이소프로판올 중에서 적절한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로히드라이드를 사용하여 알콕시아민 중간체 15로 환원시킬 수 있다. 화합물 15를 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 16을 제공할 수 있다. 화합물 16을 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 알콜 탈보호 조건, 예컨대 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 사용하여 탈보호시켜 화합물 17을 제공할 수 있다.

반응식 8

반응식 8은 R¹이 H이고, R²가 CH₃-이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 20을 제조하는 대안적인 일반적 방법을 기재한다. 화합물 28을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 29를 제공할 수 있다. 화합물 29를 적합한 산, 예컨대 트리플루오로아세트산을 사용하여 알데히드 중간체 22로 가수분해할 수 있다. 화합물 22를 60℃에서 용매, 예컨대 디클로로에탄 중에서 적합한 환원제, 예컨대 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 및 아세트산을 사용하여 화학식 R^3aNH₂ HCl (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약과 반응시켜 고리화된 화합물 16을 수득할 수 있다. 화합물 16을 적합한 용매, 예컨대 1:1 MeOH:THF 중에서 n-아이오도숙신이미드 및 p-톨루엔술폰산을 사용하여 아이오딘화하여 화합물 18을 제공할 수 있다. 화합물 18을 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 촉매, 예컨대 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐 (0)을 사용하여 메틸아연(II) 클로라이드와 네기시 커플링시킨 다음, 화합물 18이 P¹ 보호기를 함유하는 경우에 (관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 알콜 탈보호 조건, 예컨대 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 사용하여) 임의적으로 탈보호시켜, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시인 화합물 20을 제공할 수 있다.

반응식 9

반응식 9는 R¹이 H이고, R²가 할로겐이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 35의 합성을 위한 일반적 방법을 기재한다. 화합물 12를 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 33을 제공할 수 있다. 화합물 33을 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 촉매, 예를 들어 팔라듐 촉매, 예컨대 메탄술포네이토(2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-프로폭시-1,1'-비페닐)(2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) 및 알칼리성 염기, 예를 들어 알칼리성 카르보네이트 염기, 예컨대 수성 탄산칼륨을 사용하여 (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란과의 스즈키 반응을 통해 비닐 에테르 중간체 21로 전환시킬 수 있다. 화합물 21을 트리에틸아민 및 HCl을 사용하고 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 가열하면서 화학식 R^3aNH₂ HCl (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약으로 처리하여 옥심 형성을 수행함으로써 화합물 30을 제공할 수 있다. 화합물 30을 적합한 용매, 예컨대 이소프로판올 중에서 적절한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로히드라이드 및 아세트산으로 처리하여 고리화된 화합물 31을 생성할 수 있다. 화합물 31을 1:1 THF/MeOH 중 N-아이오도숙신이미드 및 p-톨루엔술폰산, 또는 적합한 용매, 예컨대 DMF 중 N-브로모숙신이미드, 또는 적합한 용매, 예컨대 DMF 중 N-클로로숙신이미드, 또는 적합한 용매, 예컨대 아세토니트릴 중 셀렉트플루오르(Selectfluor)로의 처리와 같은 조건을 사용하여 할로겐화시킨 다음, 화합물 31이 P¹ 보호기 (예컨대, 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드)를 갖는 경우에 임의적으로 탈보호시켜, R²가 각각 아이오도, 브로모, 클로로 또는 플루오로이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시인 화합물 35를 제공할 수 있다.

반응식 10

반응식 10은 R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물인 화합물 17을 제조하는 대안적인 일반적 방법을 기재한다. 화합물 12를 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 적합한 염기, 예컨대 포타슘 tert-부톡시드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 36을 제공할 수 있다. 화합물 36을 용매, 예컨대 2-메틸테트라히드로푸란 중에서 촉매, 예를 들어 팔라듐 촉매, 예컨대 메탄술포네이토(2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-프로폭시-1,1'-비페닐)(2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) 및 적합한 염기, 예컨대 알칼리성 염기, 예를 들어 알칼리성 카르보네이트 염기, 예를 들어 수성 탄산칼륨을 사용하여 (Z)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란과의 스즈키 반응을 통해 비닐 에테르 중간체 29로 전환시킬 수 있다. 화합물 29를 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 트리에틸아민 및 염산을 사용하여 화학식 R^3aNH₂ HCl (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약과 반응시키고, 이어서 적합한 환원제, 예컨대 피리딘 보란 및 염산으로 처리하고, 60℃에서 가열한 다음, 화합물 29가 P¹ 보호기 (예컨대, 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드)를 갖는 경우에 임의적으로 탈보호시켜, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시인 화합물 17을 제공할 수 있다.

반응식 11

반응식 11은 R¹이 페닐이고, R²가 수소이고, R³이 수소이고, R⁴가 화학식 I에 대해 기재된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물인 화합물 43을 제조하는 방법을 기재한다. 상업적으로 입수가능한 2,6-디클로로-4-아이오도피리딘을 시약, 예컨대 리튬 디이소프로필아미드로 리튬화시키고, 이산화탄소로 트랩핑하여 화합물 37을 수득할 수 있다. 화합물 37을 수성 염기, 예컨대 4 M 수산화나트륨 중에서 환류시켜 화합물 38로 전환시킬 수 있다. 화합물 38을 적합한 염기, 예컨대 알칼리성 카르보네이트, 예컨대 탄산칼륨의 존재 하에 적합한 용매, 예컨대 DMF의 존재 하에 메틸 아이오다이드로 처리하여 메틸화함으로써 화합물 39를 제공할 수 있다. 화합물 39를 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 적합한 촉매, 예를 들어 팔라듐 촉매 (예를 들어, Pd(dppf)Cl₂) 및 염기, 예컨대 알칼리성 카르보네이트 (예를 들어, 수성 탄산칼륨)를 사용하여 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1-페닐비닐)-1,3,2-디옥사보롤란과의 스즈키 반응을 통해 비닐 에테르 중간체 40으로 전환시킬 수 있다. 화합물 40을 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행함으로써 화합물 41을 제공할 수 있다. 화합물 41을 적합한 용매, 예컨대 톨루엔 중에서 가열함으로써 루이스 산, 예컨대 트리메틸알루미늄의 존재 하에 (2,4-디메톡시페닐)메탄아민으로 고리화하여 화합물 42를 수득할 수 있다. 화합물 42를 적합한 산, 예컨대 TFA와 함께 가열함으로써 탈보호하여 화합물 43을 수득할 수 있다.

반응식 12

반응식 12는 R¹이 메틸이고, R²가 수소이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물인 화합물 51을 제조하는 방법을 기재한다. 화합물 44를 저온에서 NH₃, Fe(NO₃)₃.9H₂O 및 NaNH₂로 처리한 다음, 메틸 아이오다이드로 처리하여 화합물 45를 제공할 수 있다. 화합물 45를 촉매, 예컨대 NiCl₂(dppe)를 함유한 적합한 용매, 예컨대 톨루엔 중에서 벤조[d][1,3,2]디옥사보롤과 함께 가열하여 화합물 46을 제공할 수 있다. 화합물 46을 스즈키 반응 조건을 사용하여, 예를 들어 촉매, 예를 들어 팔라듐 촉매, 예컨대 Pd(dppf)Cl₂, 및 염기, 예컨대 K₃PO₄, K₂CO₃, KOtBu, Cs₂CO₃, NaOH, 또는 트리에틸아민의 존재 하에 적합한 용매, 예를 들어 1 용매 혼합물, 예컨대 톨루엔/THF 중에서 화합물 39와 반응시켜 화합물 47로 전환시킬 수 있다. 화합물 47을 트리에틸아민 및 HCl을 사용하고 적합한 용매, 예컨대 1,4-디옥산 중에서 가열하면서 화학식 R^3aNH₂ HCl (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, P¹은 알콜 보호기, 예컨대 tert-부틸, 벤질 또는 tert-부틸디메틸실릴임)의 시약으로 처리하여 옥심 형성을 수행함으로써 화합물 48을 제공할 수 있다. 화합물 48을 적합한 용매, 예컨대 이소프로판올 중에서 적절한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로히드라이드 및 아세트산으로 처리하여 고리화된 생성물 49를 생성할 수 있다. 화합물 49를 적합한 용매, 예컨대 THF 중에서 강염기, 예컨대 리튬 헥사메틸디실라지드의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약으로 처리하여 방향족 친핵성 치환을 수행한 다음, 화합물 49가 P¹ 보호기를 함유하는 경우에 (관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 표준 알콜 탈보호 조건, 예컨대 인산, 트리플루오로아세트산 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 사용하여) 임의적으로 탈보호시켜, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시인 화합물 51을 제공할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "아민 보호기"는 반응이 화합물의 다른 관능기 상에서 수행되는 동안 아미노 기를 차단 또는 보호하기 위해 통상적으로 사용되는 기의 유도체를 지칭한다. 본원에 기재된 임의의 방법에 사용하기에 적합한 보호기의 예는 카르바메이트, 아미드, 알킬 및 아릴 기, 이민, 뿐만 아니라 목적하는 아민 기를 재생성하기 위해 제거될 수 있는 많은 N-헤테로원자 유도체를 포함한다. 아민 보호기의 비제한적 예는 t-부틸옥시카르보닐 ("Boc"), 2-트리메틸실릴에톡시메틸 (SEM) 및 p-메톡시벤질 (PMB)이다. 이들 기 및 다른 보호기의 추가의 예는 문헌 [T. W. Greene, et al., Greene's Protective Groups in Organic Synthesis. New York: Wiley Interscience, 2006]에서 발견된다.

본원에 사용된 용어 "알콜 보호기"는 반응이 화합물 상의 다른 관능기 상에서 수행되는 동안 히드록시 기를 차단하는 데 통상적으로 사용되는 기의 유도체를 지칭한다. 본원에 기재된 임의의 방법에 사용하기에 적합한 보호기의 예는 벤질, 트리틸, 실릴 에테르 등을 포함한다.

상기 반응식에 예시된 바와 같은 중간체 화합물 7, 15, 18, 22, 26, 29, 30 및 31은 또한 화학식 I의 화합물의 제조에 유용한 신규 중간체이고, 본 발명의 추가 실시양태를 제공한다.

한 실시양태에서,

(a) R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 C3-C6 시클로알킬이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 7의 화합물을 강염기의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약과 반응시키거나; 또는

(b) R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 15의 화합물 (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, P¹은 알콜 보호기임)을 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약의 존재 하에 강염기의 존재 하에 고리화한 다음, 임의로 존재하는 경우에 알콜 보호기를 제거하거나; 또는

(c) R¹이 H이고, R²가 CH₃-이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 것인 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 18의 화합물 (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, P¹은 알콜 보호기이고, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)을 팔라듐 촉매의 존재 하에 메틸아연(II) 클로라이드와 반응시킨 다음, 존재하는 경우에 알콜 보호기를 제거하거나; 또는

(d) R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 H이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 22의 화합물 (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)을 화학식 P^2-NH₂ (여기서, P²는 아민 보호기임)를 갖는 시약의 존재 하에 고리화한 다음, 아민 보호기를 제거하거나; 또는

(e) R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시C1-C6 알킬이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 26의 화합물을 강염기의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약의 존재 하에 반응시키거나; 또는

(f) R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시C1-C6 알킬이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 30을 갖는 화합물 (여기서, P¹은 알콜 보호기이고, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)을 환원제의 존재 하에 고리화한 다음, 알콜 보호기를 제거하거나; 또는

(g) R¹이 H이고, R²가 할로겐이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 31의 화합물 (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같고, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, P¹은 알콜 보호기임)을 할로겐화시킨 다음, 존재하는 경우에 알콜 보호기를 제거하거나; 또는

(h) R¹이 H이고, R²가 H이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 29의 화합물 (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)을 트리에틸아민 및 염산의 존재 하에 화학식 P¹O-(C1-C6 알킬)-ONH₂HCl (여기서, P¹은 알콜 보호기임)의 시약과 반응시킨 다음, 알콜 보호기를 제거하거나; 또는

(i) R¹이 페닐이고, R²가 수소이고, R³이 수소이고, R⁴가 화학식 I에 대해 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 41을 갖는 화합물 (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)을 루이스 산의 존재 하에 승온에서 (2,4-디메톡시페닐)메탄아민을 사용하여 고리화하여 하기 화합물 42를 갖는 화합물을 제공한 다음, 화합물 42를 산으로 처리하거나; 또는

(j) R¹이 메틸이고, R²가 수소이고, R³이 히드록시-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시이고, R⁴가 화학식 I에 대해 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 49를 갖는 화합물 (여기서, R^3a는 P¹O-C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고, P¹은 알콜 보호기임)을 강염기의 존재 하에 화학식 R⁴NH₂ (여기서, R⁴는 화학식 I에 대해 정의된 바와 같음)를 갖는 시약과 반응시킨 다음, 존재하는 경우에 P¹ 보호기를 제거하고;

임의로 화학식 I의 화합물을 제약상 허용되는 염으로 전환시키는 것

을 포함하는, 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법이 본원에 제공된다.

합성 중간체 3, 4, 5, 6, 7, 13, 14, 15, 16, 18, 21, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 30, 32, 33, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 47, 48 및 49는 또한 신규한 것으로 여겨지며, 본 발명의 추가 실시양태이다.

본 발명은 본 발명의 실시양태의 하기 상세한 설명 및 본원에 포함된 실시예를 참조하여 추가로 이해될 수 있다. 본 발명은 물론 달라질 수 있는 특정 합성 제조 방법으로 제한되지 않는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본원에 사용된 용어는 단지 구체적 실시양태를 기재하기 위한 목적이며, 제한하려는 의도가 아님을 이해해야 한다.

E1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

여기서:

R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;

R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;

R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;

R⁴는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환된 페닐이다.

E2. 실시양태 E1에 있어서, R¹이 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E3. 실시양태 E1 또는 E2에 있어서, R²가 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E4. 실시양태 E1 또는 E2에 있어서, R²가 CH₃-인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E5. 실시양태 E1 내지 E4 중 어느 하나에 있어서, R³이 히드록시C1-C6 알킬-인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E6. 실시양태 E1 내지 E5 중 어느 하나에 있어서, R⁴가 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E7. 실시양태 E1 내지 E6 중 어느 하나에 있어서, R⁴가 할로겐 및 C1-C6 알킬티오로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E8. 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

여기서,

R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;

R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;

R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;

R^a 및 R^b는 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택된다.

E9. 실시양태 E8에 있어서, R¹이 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E10. 실시양태 E8 또는 E9에 있어서, R²가 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E11. 실시양태 E8 또는 E9에 있어서, R²가 CH₃-인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E12. 실시양태 E8 내지 E11 중 어느 하나에 있어서, R³이 히드록시C1-C6 알킬-인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E13. 실시양태 E8 내지 E11 중 어느 하나에 있어서, R³이 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E14. 실시양태 E8 내지 E13 중 어느 하나에 있어서, R^a가 할로겐인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E15. 실시양태 E8 내지 E14 중 어느 하나에 있어서, R^b가 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오 또는 플루오로C1-C6 알콕시인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E16. 실시양태 E15에 있어서, R^b가 C1-C6 알킬티오인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E17. 실시양태 E1에 있어서, 하기로부터 선택되는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(시클로프로필메톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-에톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-클로로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2,3-디플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-3-클로로-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-아세틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

2-에톡시-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-메톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

2-(tert-부톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

(S)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

(R)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

(S)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

(R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

(R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-클로로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

5-클로로-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-플루오로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

5-브로모-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

4-브로모-8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

2-(2,2-디플루오로에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온.

E18. 하기 구조를 갖는 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

E19. 하기 구조를 갖는 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온인 화합물:

E20. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온을 포함하는 결정.

E21. 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1.

E22. 실시양태 E21에 있어서, 5.0, 8.7, 9.3, 10.8, 14.5, 15.3, 18.8 및 20.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 특징적인 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1.

E23. 실시양태 E21에 있어서, 도 1에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1.

E24. 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2.

E25. 실시양태 E24에 있어서, 7.1, 9.4, 12.4, 12.8, 14.3, 15.6, 16.4, 17.4, 18.5, 18.9, 19.5, 19.9, 21.1, 21.4, 23.2, 23.7, 24.8, 25.6, 27.6, 30.3, 33.2, 33.5 및 37.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 특징적인 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2.

E26. 실시양태 E24에 있어서, 도 2에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2.

E27. 실시양태 E25 또는 E26에 있어서, PXRD 패턴이 25℃ 및 10% 미만의 상대 습도에서 수행된 PXRD 분석에 의해 수득된 것인 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2.

E28. 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3.

E29. 실시양태 E28에 있어서, 13.7, 18.0 및 18.3도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 PXRD 피크를 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3.

E30. 실시양태 E28에 있어서, 6.9, 9.1, 13.7, 18.0 및 18.3도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 PXRD 피크를 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3.

E31. 실시양태 E28에 있어서, 2-세타의 관점에서 6.9, 9.1, 11.8, 12.0, 13.7, 14.0, 15.2, 15.8, 18.0, 18.3, 19.0, 19.3, 20.2, 20.9, 21.6, 22.6, 23.6, 24.0, 24.9, 25.2, 25.8, 27.5, 28.1, 28.4, 29.8, 30.9, 31.7, 32.3 및 36.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 PXRD 피크를 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3.

E32. 실시양태 E28에 있어서, 도 3에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3.

E33. 실시양태 E29 내지 E32 중 어느 하나에 있어서, PXRD 패턴이 25℃ 및 35% 초과의 상대 습도에서 수행된 PXRD 분석에 의해 수득된 것인 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3.

E34. 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4.

E35. 실시양태 E34에 있어서, 도 4에 도시된 것과 본질적으로 동일한 2-세타 값에서 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4.

E36. 실시양태 E1 내지 E35 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.

E37. MEK-연관 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 실시양태 E1 내지 E35 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, MEK-연관 종양을 치료하는 방법.

E38. 실시양태 E37에 있어서, 종양이 V600E, V600K, V600D, V600R 및 V600S로부터 선택되는 BRAF V600 돌연변이를 갖는 것인 방법.

E39. 실시양태 E37 또는 E38에 있어서, 종양이 BRAF V600E 돌연변이를 갖는 것인 방법.

E40. 실시양태 E37 내지 E39 중 어느 하나에 있어서, 종양이 두개외 종양인 방법.

E41. 실시양태 E40에 있어서, 두개외 종양이 흑색종, 결장직장암, 갑상선암, 비소세포 폐암, 난소암 및 신경모세포종으로부터 선택되는 것인 방법.

E42. 실시양태 E37 내지 E39 중 어느 하나에 있어서, 종양이 CNS 종양인 방법.

E43. 실시양태 E42에 있어서, CNS 종양이 두개내 종양인 방법.

E44. 실시양태 E43에 있어서, 두개내 종양이 뇌암인 방법.

E45. 실시양태 E44에 있어서, 뇌암이 전이성 뇌암인 방법.

E46. 실시양태 E45에 있어서, 전이성 뇌암이 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암, 전이성 비소세포 폐암, 전이성 갑상선암 및 전이성 난소암으로부터 선택되는 것인 방법.

E47. 실시양태 E42에 있어서, CNS 종양이 두개내 LMD 또는 두개외 LMD인 방법.

E48. 실시양태 E47에 있어서, LMD가 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암 및 전이성 비소세포 폐암으로부터 선택되는 것인 방법.

E49. 실시양태 E43에 있어서, 두개내 종양이 원발성 종양인 방법.

E50. 실시양태 E49에 있어서, 원발성 뇌 종양이 악성 종양인 방법.

E51. 실시양태 E50에 있어서, 원발성 뇌 종양이 등급 2 신경교종, 등급 3 신경교종 또는 등급 4 신경교종인 방법.

E52. 실시양태 E49에 있어서, 원발성 뇌 종양이 양성 종양인 방법.

E53. 실시양태 E37에 있어서, 종양이 BRAF 융합체를 갖는 것인 방법.

E54. 실시양태 E53에 있어서, 종양이 KIAA11549-BRAF, MKRN1-BRAF, TRIM24-BRAF, AGAP3-BRAF, ZC3HAV1-BRAF, AKAP9-BRAF, CCDC6-BRAF, AGK-BRAF, EPS15-BRAF, NUP214-BRAF, ARMC10-BRAF, BTF3L4-BRAF, GHR-BRAF, ZC3HAV1-BRAF, ZNF767-BRAF, CCDC91-BRAF, DYNC112-BRAF, ZKSCAN1-BRAF, GTF2I-BRAF, MZT1-BRAF, RAD18-BRAF, CUX1-BRAF, SLC12A7-BRAF, MYRIP-BRAF, SND1-BRAF, NUB1-BRAF, KLHL7-BRAF, TANK-BRAF, RBMS3-BRAF, STRN3-BRAF, STK35-BRAF, ETFA-BRAF, SVOPL-BRAF 및 JHDM1D-BRAF로부터 선택되는 BRAF 융합체를 갖는 것인 방법.

E55. 실시양태 E54에 있어서, 종양이 유방 암종 (예를 들어, 유방 침습성 관 암종), 결장직장 암종 (예를 들어, 결장 선암종), 식도 암종 (예를 들어, 식도 선암종), 신경교종 (예를 들어, 뇌 결합조직형성 영아 신경절교종, 뇌 모양세포성 성상세포종, 뇌 다형성 황색성상세포종, 척수 저등급 신경교종 (NOS), 역형성 핍지교종, 역형성 신경절교종), 두경부 암종 (예를 들어, 두경부 신경내분비 암종), 폐 암종 (예를 들어, 폐 선암종, 폐 비소세포 폐암 (NOS)), 흑색종 (예를 들어, 피부 흑색종 스피츠양, 점막 흑색종 비-스피츠양, 피부 흑색종 스피츠양, 원인불명 원발성 흑색종, 피부 흑색종 비-스피츠양), 췌장 암종 (예를 들어, 선암종, 췌장 세엽 세포 암종), 전립선 암종 (예를 들어, 전립선 세엽 선암종), 육종 (악성 고형 섬유성 종양), 갑상선 암종 (갑상선 유두상 암종), 원인불명 원발성 암종 (예를 들어, 원인불명 원발성 선암종), 흉막 중피종, 직장 선암종, 자궁 자궁내막 암종 (예를 들어, 자궁 자궁내막 선암종 (NOS)), 또는 난소 장액성 암종인 방법.

E56. 실시양태 E37에 있어서, 종양이 BRAF 야생형 종양인 방법.

E57. 실시양태 E37 내지 E56 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 추가의 항암 요법을 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.

E58. 실시양태 E57에 있어서, 1종 이상의 추가의 항암 요법이 수술, 방사선요법 및 항암제로부터 독립적으로 선택되는 것인 방법.

E59. 실시양태 E58에 있어서, 추가의 항암 요법이 1종 이상의 항암제로부터 선택되는 것인 방법.

E60. 실시양태 E59에 있어서, 항암제가 MEK 억제제, BRAF 억제제, EGFR 억제제, HER2 및/또는 HER3의 억제제, SHP2 억제제, Axl 억제제, PI3K 억제제, SOS1 억제제, 신호 전달 경로 억제제, 체크포인트 억제제, 아폽토시스 경로의 조정제, 세포독성 화학요법제, 혈관신생-표적화 요법, 및 면역요법을 포함한 면역-표적화제로부터 선택되는 것인 방법.

E61. 실시양태 E60에 있어서, 항암제가 BRAF 억제제인 방법.

E62. 실시양태 E61에 있어서, BRAF 억제제가 엔코라페닙 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.

E63. 실시양태 E61에 있어서, BRAF 억제제가 하기로부터 선택되는 것인 방법:

N-(3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-2,4-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4,5-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-메틸-3-(메틸-d3)-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}프로판-1-술폰아미드;

N-(3-클로로-4-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시)-5-플루오로피리딘-2-일)프로판-1-술폰아미드; 및

N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;

또는 그의 제약상 허용되는 염.

E64. 실시양태 E63에 있어서, BRAF 억제제가 N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.

E65. 실시양태 E61에 있어서, BRAF 억제제가 하기로부터 선택되는 것인 방법:

N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-2-아자비시클로[2.1.1]헥산-2-술폰아미드,

(R)-N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드, 및

N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드,

또는 그의 제약상 허용되는 염.

E66. 실시양태 E65에 있어서, BRAF 억제제가 N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.

E67. 실시양태 E60에 있어서, 항암제가 SHP2 억제제인 방법.

E68. 실시양태 E67에 있어서, SHP2 억제제가 (S)-1'-(6-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)-1,2,4-트리아진-3-일)-1,3-디히드로스피로[인덴-2,4'-피페리딘]-1-아민 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.

E69. 실시양태 E37 내지 E68 중 어느 하나에 있어서, 화합물이 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온이고, 대상체에게 50 mg의 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온을 1일 1회 투여하는 것인 방법.

E70. 실시양태 E1 내지 E35 중 어느 하나에 있어서, 의약으로서 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E71. 실시양태 E1 내지 E35 중 어느 하나에 있어서, MEK-연관 종양의 치료에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

E72. 대상체에서 MEK-연관 종양의 치료를 위한 의약의 제조를 위한 실시양태 E1 내지 E35 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.

본 발명을 보다 잘 이해할 수 있도록 하기 위해, 하기 실시예를 기재한다. 이들 실시예는 단지 예시를 위한 것이며, 어떠한 방식으로도 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.

하기 기재된 화합물 및 중간체는 켐드로우(ChemDraw), 버전 20.1.1.125 (퍼킨 엘머 인포매틱스(Perkin Elmer Informatics))에 제공된 명명 규정을 사용하여 명명하였다. 켐드로우, 버전 20.1.1.125에 제공된 명명 규정은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있고, 켐드로우, 버전 20.1.1.125에 제공된 명명 규정은 일반적으로 유기 화학 명명법 및 CAS 인덱스 규칙에 대한 IUPAC (국제 순수 응용 화학 연합) 권장사항에 부합하는 것으로 여겨진다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 반응물은 추가 정제 없이 상업적으로 수득하거나 또는 문헌에 공지된 방법을 사용하여 제조하였다.

실시예

생물학적 실시예

실시예 A

세포 포스포-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) 검정

세포를 화합물과 함께 1시간 동안 인큐베이션하고, 고정된 세포 상에서 인-셀 웨스턴에 의해 pERK 신호를 정량화하고, GAPDH 신호에 대해 정규화하는 것을 포함하는 하기 세포 검정에 의해 ERK1/2 (Thr202/Tyr204) 인산화의 억제를 결정하였다. A375 세포를 ATCC로부터 수득하고, 10% 태아 소 혈청, 페니실린/스트렙토마이신, 글루타맥스(Glutamax)^ⓒ, 비필수 아미노산, 및 피루브산나트륨으로 보충된 DMEM에서 성장시켰다. 세포를 96-웰 플레이트에 30,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 37℃/5% CO₂에서 밤새 부착되도록 하였다. 세포를 10-포인트, 1:3 일련의 희석물 (범위: 20 μM - 0.05 nM; 최대 농도는 20 μM - 1 μM로 다양함)로서 제조된 화합물로 0.5%의 최종 DMSO 농도로 처리하였다. 대조군 웰은 0.5% DMSO 단독 (억제 없음 대조군) 또는 1 μM의 강력한 대조군 화합물 (완전 억제 대조군)을 함유하였다. 1시간 인큐베이션 후에, 세포를 실온에서 20분 동안 dPBS (둘베코 포스페이트-완충 염수) 중 3.7% 포름알데히드 중에 고정시켰다. 이어서, 세포를 dPBS로 세척하고, 실온에서 10분 동안 100% MeOH 중에서 투과화하였다. 투과화 후에, 세포를 dPBS 중에서 세척하고, LI-COR 차단 완충제 (LI-COR 바이오사이언시스, Cat # 927-40000) 중에서 1시간 이상 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 플레이트를 MAP 키나제 신호 전달 경로에서 MEK의 하류에 있는 MEK-의존성 ERK1/2 인산화 부위에 특이적인 항체인 트레오닌 202 및 티로신 204 (셀 시그널링 테크놀로지스; Cat # 9101), 뿐만 아니라 GAPDH (밀리포어; Cat # MAB374)와 함께 인큐베이션하였다. pErk1/2 (Thr202/Tyr204) 항체를 0.05% 트윈-20을 함유하는 LI-COR 차단 완충제 중에 1:250으로 희석하고; GAPDH를 1:2,500으로 희석하였다. 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. PBS/0.05% 트윈-20으로 세척한 후, 세포를 형광-표지된 2차 항체 (항-토끼-알렉사 플루오르680, 인비트로젠 Cat # A21109; 항-마우스-IRDye800CW, LI-COR 바이오사이언시스 Cat # 926-32210, 둘 다 1:1000 희석)와 함께 1시간 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 세포를 상기와 같이 세척하고, 오디세이 CLx 적외선 영상화 시스템 (LI-COR 바이오사이언시스)을 사용하여 680 및 800 nm 파장 둘 다에서 형광에 대해 분석하였다. 인산화된 Erk1/2 (Thr202/Tyr204) 신호를 각각의 웰에 대해서 GAPDH 신호에 대해 정규화하였다. IC₅₀ 값은 바이오어세이 소프트웨어에서 4-파라미터 피트를 사용하여 정규화된 값으로부터 계산되었고, 표 A에 제공된다.

표 A

실시예 B

MDR1 LLC-PK1 및 BCRP MDCKII 투과성 검정

LLC-PK1 및 MDR1 형질감염된 LLC-PK1 세포 둘 다를, 계대배양 시간을 7일까지 연장하기 위해 계대배양 배지에 단지 2% 태아 소 혈청을 함유시킨다는 것을 제외하고는 제조업체의 권장사항에 따라 배양하고 플레이팅하였다.

BCRP 형질감염된 MDCKII 개 P-gp 녹아웃 세포주를 제조업체의 권장사항에 따라 배양하고 플레이팅하였다.

양성 및 음성 대조군 둘 다를 사용하여 검정에서 P-gp 또는 BCRP 유출의 기능성을 평가하였다. 검정 대조군용 원액 및 시험 물품을 각각 10 및 1 μM의 최종 시험 농도를 위해 DMSO 중에서 제조하였다. 검정에서의 최종 유기부 농도는 1%였다. 모든 투여 용액은 LLC-PK1 또는 MDCKII 세포 단층 완전성을 모니터링하기 위해 10 μM 루시퍼 옐로우를 함유하였다.

정단측에서 기저측 결정 (A에서 B)을 위해, 수송 완충제 중 시험 물품 75 μL를 개별 트랜스웰의 정단측에 첨가하고, 화합물 또는 루시퍼 옐로우가 없는 기저측 배지 250 μL를 각각의 웰에 첨가하였다. 기저측에서 정단측 결정 (B에서 A)을 위해, 수송 완충제 중 시험 물품 250 μL를 각각의 웰에 첨가하고, 화합물 또는 루시퍼 옐로우가 없는 수송 완충제 75 μL를 각각의 트랜스웰에 첨가하였다. 모든 시험을 삼중으로 수행하였고, 각각의 화합물을 정단측에서 기저측으로의 수송 및 기저측에서 정단측으로의 수송 둘 다에 대해 시험하였다. 플레이트를 랩-라인 인스트루먼츠 타이터 오비탈 진탕기 (VWR, 펜실베니아주 웨스트 체스터) 상에서 50 rpm 및 37℃에서 5% CO₂와 함께 2시간 동안 인큐베이션하였다. 모든 배양 플레이트를 인큐베이터로부터 제거하고, 각각의 웰의 정단측 및 기저측 부분으로부터 배지 50 μL를 제거하고, 2:1 아세토니트릴 (아세토니트릴):H₂O, v/v 중 1 μM 라베탈롤 150 μL에 첨가하였다.

플레이트를 몰레큘라 디바이시스 (캘리포니아주 서니베일) 제미니 형광계를 사용하여 판독하여 425/535 nm의 여기/방출 파장에서의 루시퍼 옐로우 농도를 평가하였다. 이들 값은 MDR1-형질감염된 LLC-PK1 또는 BCRP-형질감염된 MDCKII 세포 단층에 걸쳐 정단측에서 기저측 유동에 대해 2% 미만 및 기저측에서 정단측 유동에 대해 5% 미만인 것으로 확인된 경우에 허용되었다. 플레이트를 밀봉하고, 각각의 웰의 내용물을 LC-MS/MS에 의해 분석하였다. 화합물 농도는 투여 용액과 비교하여 내부 표준물 (라베탈롤)에 대한 화합물의 피크 면적의 비로부터 결정하였다.

LC-MS 분석

LC-MS/MS 시스템은 HTS-PAL 오토샘플러 (립 테크놀로지스, 노스캐롤라이나주 카르보로), HP1200 HPLC (애질런트, 캘리포니아주 팔로 알토), 및 MDS 사이엑스 4000 Q 트랩 시스템 (어플라이드 바이오시스템즈, 캘리포니아주 포스터 시티)으로 구성되었다. 분석물 및 내부 표준물의 크로마토그래피 분리를 이동상 A (1% 이소프로필 알콜 및 0.1% 포름산을 함유하는 물) 및 B (아세토니트릴 중 0.1% 포름산)를 사용하는 구배 조건과 함께 C18 칼럼 (키네틱스(Kinetics)®, 50 x 300 mm, 2.6 μm 입자 크기, 페노메넥스, 캘리포니아주 토런스)을 사용하여 실온에서 달성하였다. 단일 주입에 대한 총 실행 시간 (재평형 포함)은 1.2분이었다. 이온 분무 양성 모드를 사용하여 분석물의 질량 분광측정 검출을 달성하였다. 분석물 반응을 각각의 화합물에 고유한 전이의 다중 반응 모니터링 (MRM)에 의해 측정하였다 (각각의 시험 물품에 대해 양성자화된 전구체 이온 및 선택된 생성물 이온 및 내부 표준인 라베탈롤에 대해 m/z 329 내지 m/z 162).

투과 계수 (P_app)는 하기 방정식으로부터 계산된다:

P_app = [((C_d*V*(1x10⁶))/(t*0.12cm²*C)]

여기서, C_d, V, t 및 C₀은 각각 검출된 농도 (μM), 투여 측 상의 부피 (mL), 인큐베이션 시간 (s) 및 초기 투여 농도 (μM)이다. P_app에 대한 계산을 각각의 반복물에 대해 수행한 다음, 평균을 냈다. 화학식 I의 화합물에 대한 투과 계수가 표 B1에 제공된다. 이 검정에서, 투과도가 8 x 10^-6 cm/sec를 초과하는 경우 화합물은 높은 투과도를 갖는 것으로 규정되고, 투과도가 2 x 10^-6 cm/sec 내지 8 x 10^-6 cm/sec인 경우 화합물은 중간 투과도를 갖는 것으로 규정되고, 투과도가 2 x 10^-6 cm/sec 미만인 경우 화합물은 낮은 투과도를 갖는 것으로 규정된다.

유출 비는 평균 정단측에서 기저측 (A-B) P_app 데이터 및 기저측에서 정단측 (B-A) Papp 데이터로부터 계산된다:

유출 비 = P_app(B-A)/P_app(A-B)

표 B1

N/A: 이용가능하지 않음

유출 비는 평균 정단측에서 기저측 (A-B) P_app 데이터 및 기저측에서 정단측 (B-A) Papp 데이터로부터 계산된다:

유출 비 = P_app(B-A)/P_app(A-B)

표 B2는 본 검정에서 시험될 때 화학식 I의 화합물에 대한 유출 비를 제공한다.

표 B2

N/A: 이용가능하지 않음

실시예 C

PK (유리 뇌-대-유리 혈장 비) (마우스)

마우스에서 대표적인 화합물의 BBB를 침투하는 능력을 수컷 CD-1 마우스에서 미결합 뇌-대-미결합 혈장 (또한 유리 뇌-대-유리 혈장으로 지칭됨) 농도 비를 평가함으로써 결정하였다.

10 mg/kg의 경구 위관영양 투여 후 2, 4, 8, 12 및 24시간의 전형적인 샘플링 시간으로 경구 마우스 PK 투여로부터 뇌 화합물 수준을 생성하였다. 뇌 샘플을 분석 전에 -20 ± 5℃에서 저장하였다. 마우스 뇌 균질물 중 시험 화합물의 농도를 아세토니트릴을 사용한 단백질 침전 후에 액체 크로마토그래피 탠덤 질량 분광측정법 (LC-MS/MS)에 의해 결정하였다. 0.5 내지 10,000 ng/mL 범위의 12-포인트 보정 곡선을 이중으로 제조하였다. 디메틸 술폭시드 (DMSO) 중 시험 화합물 400 μg/mL의 용액을 100% DMSO 중에 연속 희석 (3배)한 다음, 각각의 표준 용액 2.5 μL를 나이브 수컷 CD-1 마우스 뇌 균질물 100 μL에 첨가하였다. 표준 곡선에서의 추출을 모방하기 위해, DMSO 2.5 μL를 모든 시험 샘플에 첨가하였다. 보정 및 시험 뇌 균질물 샘플 둘 다를 10 μL의 IS (1 μg/mL의 구조적 유사체)로 스파이킹하였다. 각 뇌 샘플에 0.75 mL의 4:1 물:MeOH를 첨가한 후, MP 패스트 프렙-24(MP Fast Prep-24)®를 사용하여 6 m/s로 비드 비터 튜브로 1분 동안 균질화함으로써 뇌 균질물을 생성하였다. 300 μL의 아세토니트릴을 첨가하여 100 μL의 뇌 균질물 샘플로부터 단백질을 침전시켰다. 샘플을 5분 동안 볼텍스-혼합하고, 알레그라 X-12R 원심분리기 (베크만 쿨터, 캘리포니아주 풀러톤; SX4750A 로터)에서 15분 동안 4℃에서 약 1,500 x g로 회전시켰다. 각각의 상청액의 100 μL 분취물을 550 μL 퍼스널 피펫터 (아프리코트 디자인스, 캘리포니아주 몬로비아)를 통해 96-웰 플레이트로 옮기고, HPLC 등급 물로 1:1 희석하였다. 생성된 플레이트를 LC-MS/MS 분석을 위해 알루미늄으로 밀봉하였다.

뇌에서 측정된 화합물의 농도를 혈장에서 측정된 화합물의 농도로 나누어 뇌-대-혈장 비를 계산하였다. 뇌-대-혈장 비는 항상 단일 동물 및 시점으로부터 생성되었다. 유리 뇌-대-유리 혈장 비는 다음 방정식을 사용하여 뇌-대-혈장 비에 시험관내 뇌 균질물 유리 분율을 시험관내 혈장 유리 분율로 나눈 것을 곱하여 계산하였다: (B/P)*(B_fu/P_fu).

표 C는 본원에 개시된 실시예 6, 7, 8, 14, 22, 36 및 46의 대표적인 화합물의 유리 뇌-대-유리 혈장 비를 제공한다.

표 C

합성 실시예

중간체 1

메틸 (E)-2,6-디클로로-4-(2-(디메틸아미노)비닐)니코티네이트

단계 1. 메틸 2,6-디클로로-4-메틸니코티네이트의 제조. 0℃에서 1:1 MeOH:디옥산 (10 mL) 중 2,6-디클로로-4-메틸니코틴산 (1.0 g, 4.9 mmol)의 용액에 (트리메틸실릴)디아조메탄 (3.3 mL, 헥산 중 2 M, 6.6 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 빙조로부터 제거하고, 10분 동안 교반한 다음, 절반 부피로 농축시키고, 물 (20 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 조심스럽게 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 2,6-디클로로-4-메틸니코티네이트 (0.81 g, 76%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.2 (s, 1H), 4.0 (s, 3H), 2.3 (s, 3H) ppm.

단계 2. 메틸 (E)-2,6-디클로로-4-(2-(디메틸아미노)비닐)니코티네이트의 제조. DMF (5 mL) 중 메틸 2,6-디클로로-4-메틸니코티네이트 (810 mg, 3.68 mmol)의 용액에 N,N-디메틸포름아미드 디메틸아세탈 (978 mL, 7.36 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 냉각된 혼합물을 물 (40 mL)로 처리하고, 10분 동안 교반한 다음, 고체를 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 메틸 (E)-2,6-디클로로-4-(2-(디메틸아미노)비닐)니코티네이트 (764 mg, 75%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.3 (s, 1H), 7.1 (d, 1H), 4.8 (d, 1H), 3.1 (s, 3H), 2.9 (s, 6H) ppm.

중간체 2

메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트

단계 1. 4-브로모-2,6-디클로로니코틴산의 제조. THF (1000 mL) 중 4-브로모-2,6-디클로로피리딘 (100 g, 440.7 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시켰다. LDA (THF 중 2 M, 242.4 mL, 484.8 mmol)를 -78℃에서 적가하고, -78℃에서 1시간 동안 교반을 계속하였다. 고체 CO₂ (155.1 g, 3.53 mol)를 반응물에 조금씩 첨가하고, -78℃에서 2시간 동안 교반을 계속하였다. 반응물을 1 M Na₂CO₃ (1600 mL), 및 이어서 물 (500 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 10분 동안 교반하였다. 수성 층을 EtOAc (300 mL)로 추출하였다. 수성 층의 pH 값을 2 N HCl을 사용하여 조정하여 pH 2를 갖는 용액을 수득하였다. 이어서, 수성 층을 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 4-브로모-2,6-디클로로니코틴산 (540 g, 75%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 15.51 - 12.87 (m, 1H), 8.13 (s, 1H) ppm.

단계 2. 4-브로모-2-클로로-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산의 제조. NaOH의 용액 (4 M, 1.62 L, 6.46 mol)을 110℃로 가열하고, 4-브로모-2,6-디클로로니코틴산 (70 g, 258.4 mmol)을 1 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 8시간 동안 교반한 다음, 0℃로 냉각시켰다. 반응물을 HCl (6 M)을 사용하여 pH 1로 조정하고, 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 4-브로모-2-클로로-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산 (100%로 추정됨)을 수득하였다.

단계 3. 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DMF (800 mL) 중 4-브로모-2-클로로-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산 (100 g, 396 mmol)의 혼합물에 메틸 아이오다이드 (168.6 g, 1.19 mol, 73.98 mL) 및 K₂CO₃ (164.2 g, 1.19 mol)을 1 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 포화 NH₄Cl (1800 mL)에 붓고, 수성 상을 EtOAc (2 x 500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (400 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 합한 잔류물 (5 배치)을 칼럼 크로마토그래피에 의해 2-100% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (5 배치로부터임, 141.83 g, 24.7%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.86 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.69 - 3.66 (m, 3H); MS (apci, m/z) = 280.0, 282.0 (M+H).

중간체 3

메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트

메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (20.0 g, 71.3 mmol, 메탄술포네이토 (2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-프로폭시-1,1'-비페닐)(2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) (5.96 g, 7.13 mmol) 및 (Z)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (14.8 g, 74.9 mmol)을 1,4-디옥산 (700 mL) 중에 현탁시키고, K₂CO₃ (53.5 mL, 107 mmol) (2 N 수성)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 6시간 동안 교반한 다음, 주위 온도에서 12시간 동안 아르곤 분위기 하에 교반하였다. 반응물을 물 (1500 mL)과 EtOAc (500 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 400 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (500 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40-60% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (13.3 g, 68%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.23 (s, 1H), 6.45 (d, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.40 (q, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.67 (s, 3H), 1.35 (t, 3H); MS (apci, m/z) = 272.0 (M+H).

중간체 4

메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트

단계 1. 메틸 (E/Z)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (0.95 g, 3.50 mmol) 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (593 mg, 3.50 mmol)를 1,4-디옥산 (10 mL) 중에서 합하였다. Et₃N (487 mL, 3.50 mmol) 및 HCl (1.75 mL, 6.99 mmol) (4 N/디옥산)을 첨가하였다. 현탁액을 60℃로 1시간 동안 가열한 다음, 냉각시키고, 여과하였다. 여과물을 농축시켜 메틸 (E/Z)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (100%로 추정됨)를 이성질체의 1:1 혼합물로서 수득하였다. MS (apci, m/z) = 359.1 (M+H).

단계 2. 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. IPA (20 mL) 중 메틸 (E/Z)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (1.25 g, 3.48 mmol)의 용액에 소듐 시아노보로히드라이드 (1.09 g, 17.4 mmol), 및 이어서 아세트산 (1.0 mL, 17.4 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반한 다음, 포화 NaHCO₃ (50 mL)과 EtOAc (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (30 mL)로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/DCM으로 용리시키면서 정제하여 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (0.66 g, 53%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.43 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.78 (t, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.50 (t, 2H), 3.10 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.20 (s, 9H) ppm; MS (apci, m/z) = 361.1, 363.1 (M+H).

중간체 5

2-클로로-4-에틸아닐린

단계 1. N-(4-에틸페닐)아세트아미드의 제조. 4-에틸아닐린 (513 μL, 4.13 mmol)을 DCM (10.3 mL) 중에 용해시켰다. 트리에틸아민 (690 μL, 4.95 mmol)을 첨가하고, 0℃로 냉각시킨 후, 아세트산 무수물 (467 μL, 4.95 mmol)을 적가하였다. 30분 후, 반응물을 포화 NaHCO₃ (50 mL)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 DCM (2 x 25 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 헥산으로 연화처리하고, 고체를 여과에 의해 수집하여 N-(4-에틸페닐)아세트아미드 (600 mg, 89%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.40 - 7.38 (d, 2H), 7.16 - 7.14 (d, 2H), 7.07 (br s, 1H), 2.64 - 2.58 (q, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.23 - 1.20 (t, 3H) ppm.

단계 2. N-(2-클로로-4-에틸페닐)아세트아미드의 제조. N-(4-에틸페닐)아세트아미드 (50 mg, 0.31 mmol)를 DMF (613 μL) 중에 용해시켰다. N-클로로숙신이미드 (65 mg, 0.49 mmol)를 첨가한 후, 용액을 70℃로 6시간 동안 가열한 다음, 16시간에 걸쳐 주위 온도로 냉각되도록 하였다. 반응 혼합물을 2 N HCl (4 mL)에 붓고, 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 (3 x 10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-25% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 N-(2-클로로-4-에틸페닐)아세트아미드 (36 mg, 59%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.23 - 8.21 (d, 1H), 7.51 (br s, 1H), 7.20 - 7.19 (d, 1H), 7.11 - 7.08 (dd, 1H), 2.63 - 2.57 (q, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.23 - 1.20 (t, 3H) ppm.

단계 3. 2-클로로-4-에틸아닐린의 제조. N-(2-클로로-4-에틸페닐)아세트아미드 (36 mg, 0.18 mmol)를 EtOH (0.5 mL) 중에 용해시키고, 12 N HCl (0.5 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 6 N NaOH의 첨가에 의해 pH 10이 되도록 한 다음, MTBE (3 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 2-클로로-4-에틸아닐린 (26 mg, 92%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.09 - 7.08 (d, 1H), 6.91 - 6.88 (dd, 1H), 6.71 - 6.69 (d, 1H), 2.55 - 2.49 (q, 2H), 1.20 - 1.16 (t, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 156.1 (M+H).

중간체 6

4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로아닐린

LiBF₄ (196 mg, 2.10 mmol) 및 LiH (17.5 mg, 2.10 mmol)를 DMF (8.8 mL, 1.75 mmol)에서 합하였다. 4-아미노-3-플루오로벤젠티올 (250 mg, 1.75 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 5분 동안 교반하였다. (트리플루오로메틸)트리메틸실란 (0.644 mL, 4.37 mmol)을 신속하게 첨가한 다음, 용액을 동일한 온도에서 10분 동안 교반하였다. TBAF (6 mL, 1 N/THF, 6.00 mmol)를 신속하게 첨가한 다음, 용액을 동일한 온도에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 물 (3 x 50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로아닐린 (56 mg, 17%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.25 - 7.22 (dd, 1H), 7.19 - 7.16 (ddd, 1H), 6.86 - 6.58 (t, 1H), 6.77 - 6.73 (dd, 1H), 3.95 (br s, 1H) ppm.

중간체 7

2-클로로-4-(메틸티오)아닐린

2-클로로-4-아이오도아닐린 (250 mg, 0.986 mmol), NiBr₂ (22 mg, 0.099 mmol), Zn 분말 (129 mg, 1.97 mmol) 및 2,2'-비피리딘 (15 mg, 0.099 mmol)을 Ar 분위기 하에 THF (1.6 mL) 중에 용해시켰다. 1,2-디메틸디술판 (44 μL, 0.493 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밀봉하고, 65℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 진한 NH₄OH (50 mL), 및 이어서 10% 시트르산 용액 (50 mL)으로 세척하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 2-클로로-4-(메틸티오)아닐린 (116 mg, 68%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.27 - 7.26 (m, 1H), 7.09 - 7.06 (dd, 1H), 6.71 - 6.69 (d, 1H), 4.02 (br s, 2H), 2.41 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 174.0 (M+H).

중간체 8

메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트

메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (1.0 g, 3.565 mmol), 메탄술포네이토 (2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-프로폭시-1,1'-비페닐)(2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) (0.2982 g, 0.3565 mmol), 및 (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (0.7414 g, 3.743 mmol)을 1,4-디옥산 (35.65 mL) 중에 현탁시키고, 탄산칼륨 (2.674 mL, 2 N 수성, 5.35 mmol)을 첨가하였다. 아르곤으로 탈기한 후, 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하였다. 냉각된 반응물을 물 (150 mL)과 EtOAc (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 40 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (150 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (379 mg, 39%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.27 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.43 (s, 1H), 5.53 (d, 1H), 3.95 - 3.83 (m, 5H), 3.67 (s, 3H), 1.34 (t, 2H) ppm. MS (apci, m/z) = 272.1 (M+H).

실시예 1

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 메틸 2,6-디클로로-4-(2-옥소에틸)니코티네이트의 제조. Et₂O (30 mL) 및 1 N HCl (30 mL) 중 메틸 (E)-2,6-디클로로-4-(2-(디메틸아미노)비닐)니코티네이트 (0.797 g, 2.90 mmol)의 현탁액을 주위 온도에서 1시간 동안 격렬히 교반하였다. 생성된 용액을 염수 (20 mL)로 처리하고, Et₂O (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 조심스럽게 농축시켜 메틸 2,6-디클로로-4-(2-옥소에틸)니코티네이트 (100%로 추정됨)를 수득하고, 이를 즉시 사용하였다.

단계 2. 8-클로로-2-시클로프로필-6-메톡시-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1(2H)-온의 제조. 0℃에서 1:1 IPA:MeOH (20 mL) 중 메틸 2,6-디클로로-4-(2-옥소에틸)니코티네이트 (0.719 g, 2.90 mmol)의 용액에 시클로프로필아민 (201 mL, 2.90 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 10분 동안 교반한 다음, 소듐 시아노보로히드라이드 (546 mg, 8.70 mmol) 및 아세트산 (498 mL, 8.70 mmol)을 첨가하였다. 주위 온도에서 16시간 동안 교반한 후, 혼합물을 포화 NaHCO₃ (50 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 (10 mL) 중에 용해시키고, 1 N NaOH (3.33 mL, 3.33 mmol)로 처리하고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 절반 부피로 농축시킨 다음, 물 (20 mL)과 DCM (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 DCM (2 x 10 mL)으로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-10% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 8-클로로-2-시클로프로필-6-메톡시-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1(2H)-온 (310 mg, 42%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.5 (s, 1H), 4.0 (s, 3H), 3.5 (t, 2H), 2.9 (m, 3H), 0.9 (m, 2H), 0.7 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 253.1, 255.1 (M+H).

단계 3. 8-클로로-2-시클로프로필-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (2 mL) 중 8-클로로-2-시클로프로필-6-메톡시-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1(2H)-온 (99 mg, 0.39 mmol)의 용액에 트리메틸실릴 아이오다이드 (2.94 mL, 1.96 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 48시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15-20% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 8-클로로-2-시클로프로필-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (100%로 추정됨)을 수득하고, 이를 즉시 사용하였다. MS (apci, m/z) = 239.0 (M+H).

단계 4. 8-클로로-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. THF (2 mL) 중 8-클로로-2-시클로프로필-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (93 mg, 0.39 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (110 mg, 0.78 mmol), 및 이어서 메틸 아이오다이드 (29 mL, 0.47 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반한 다음, 추가의 메틸 아이오다이드 (50 mL, 0.84 mmol)로 처리하고, 추가로 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, (4:1) DCM/MeOH (10 mL)로 세척하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 8-클로로-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (31 mg, 31%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.29 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.45 (t, 2H), 2.87-2.81 (m, 1H), 2.77 (t, 2H), 0.94-0.89 (m, 2H), 0.72-0.68 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 253.1 (M+H).

단계 5. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. N₂ 하에 -78℃에서 THF (1 mL) 중 4-브로모-2-플루오로아닐린 (24 mg, 0.12 mmol)의 용액에 LiHMDS (1.84 mL, 1.0 M/THF, 0.184 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 45분 동안 교반한 다음, THF (2 mL) 중 8-클로로-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (31 mg, 0.13 mmol)의 현탁액을 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반한 다음, 포화 NH₄Cl (10 mL)로 켄칭하고, 주위 온도에서 10분 동안 교반한 다음, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (24.9 mg, 50%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.6 (s, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.19 (ddd, 1H), 6.71 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 3.50 (t, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.77 (t, 2H), 2.74-2.70 (m, 1H), 0.93-0.87 (m, 2H), 0.72-0.67 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 406.0, 408.0 (M+H).

실시예 2

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(시클로프로필메톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 1에 따라, 단계 2에서 시클로프로필아민 대신에 O-(시클로프로필메틸)히드록실아민 히드로클로라이드로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(시클로프로필메톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (20 mg, 57%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.32 (s, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.21 (m, 1H), 6.72 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 3.85 (d, 2H), 3.77 (t, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.98 (t, 2H), 1.22-1.14 (m, 1H), 0.64-0.59 (m, 2H), 0.36-0.31 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 436.0, 438.0 (M+H).

실시예 3

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-에톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 1에 따라, 단계 2에서 시클로프로필아민 대신에 O-에틸히드록실아민 히드로클로라이드로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-에톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (22 mg, 55%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.34 (s, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.21 (m, 1H), 6.72 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.08 (q, 2H), 3.73 (t, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.99 (t, 2H), 1.32 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 410.0, 412.0 (M+H).

실시예 4

2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 1에 따라, 단계 5에서 4-브로모-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린로 대체하여 제조하여 2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (50.4 mg, 66%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.62 (s, 1H), 7.01 (dd, 1H), 6.95 (dd, 1H), 6.79 (t, 1H), 5.95 (s, 1H), 3.49 (t, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.80-2.68 (m, 3H), 2.47 (s, 3H), 0.93-0.87 (m, 2H), 0.72-0.67 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 374.1 (M+H).

실시예 5

2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 1에 따라, 단계 5에서 4-브로모-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-아이오도아닐린로 대체하여 제조하여 2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (46.7 mg, 52%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.60 (s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.37 (dt, 1H), 6.55 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 3.50 (t, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.81-2.69 (m, 3H), 0.93-0.87 (m, 2H), 0.72-0.67 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 454.0 (M+H).

실시예 6

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온을 방법 A 또는 방법 B에 의해 제조하였다.

방법 A.

단계 1. 4-브로모-2,6-디클로로니코틴산의 제조. THF (1000 mL) 중 4-브로모-2,6-디클로로피리딘 (100 g, 440.7 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시켰다. LDA (242.4 mL, 2 M/THF, 484.8 mmol)를 -78℃에서 적가하고, -78℃에서 1시간 동안 교반을 계속하였다. 고체 CO₂ (155.1 g, 3.53 mol)를 반응물에 조금씩 첨가하고, -78℃에서 2시간 동안 교반을 계속하였다. 반응물을 1 M Na₂CO₃ (1600 mL), 및 이어서 물 (500 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 10분 동안 교반하였다. 수성 층을 EtOAc (300 mL)로 추출하였다. 수성 층의 pH 값을 2 N HCl을 사용하여 조정하여 pH 2를 갖는 용액을 수득하였다. 이어서, 수성 층을 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 4-브로모-2,6-디클로로니코틴산 (540 g, 75%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 15.51 - 12.87 (m, 1H), 8.13 (s, 1H) ppm.

단계 2. 4-브로모-2-클로로-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산의 제조. NaOH의 용액 (1.62 L, 4 M, 6.46 mol)을 110℃로 가열하고, 단계 1에서 수득한 4-브로모-2,6-디클로로니코틴산 (70 g, 258.4 mmol)을 1 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 8시간 동안 교반한 다음, 0℃로 냉각시켰다. 반응물을 HCl (6 M)을 사용하여 pH 1로 조정하고, 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 4-브로모-2-클로로-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산 (100%로 추정됨)을 수득하였다.

단계 3. 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DMF (800 mL) 중 4-브로모-2-클로로-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산 (100 g, 396 mmol)의 혼합물에 메틸 아이오다이드 (168.6 g, 1.19 mol, 73.98 mL) 및 K₂CO₃ (164.2 g, 1.19 mol)을 1 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 포화 NH₄Cl (1800 mL)에 붓고, 수성 상을 EtOAc (2 x 500 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (400 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 합한 잔류물 (5 배치)을 칼럼 크로마토그래피에 의해 2-100% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (5 배치로부터임, 141.83 g, 24.7%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.86 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.69 - 3.66 (m, 3H); MS (apci, m/z) = 280.0, 282.0 (M+H).

단계 4. 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 단계 3에서 수득된 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (20.0 g, 71.3 mmol), 메탄술포네이토 (2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-프로폭시-1,1'-비페닐)(2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) (5.96 g, 7.13 mmol) 및 (Z)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (14.8 g, 74.9 mmol)을 1,4-디옥산 (700 mL) 중에 현탁시키고, K₂CO₃ (53.5 mL, 2 N 수성, 107 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 6시간 동안 교반한 다음, 주위 온도에서 12시간 동안 아르곤 분위기 하에 교반하였다. 반응물을 물 (1500 mL)과 EtOAc (500 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 400 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (500 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40-60% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (13.3 g, 68%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.23 (s, 1H), 6.45 (d, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.40 (q, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.67 (s, 3H), 1.35 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 272.0 (M+H).

단계 5. 메틸 (E/Z)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 단계 4에서 수득한 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (0.95 g, 3.50 mmol) 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (593 mg, 3.50 mmol)를 1,4-디옥산 (10 mL) 중에서 합하였다. Et₃N (487 mL, 3.50 mmol) 및 HCl (1.75 mL, 4 N/디옥산, 6.99 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 60℃로 1시간 동안 가열한 다음, 냉각시키고, 여과하였다. 여과물을 농축시켜 메틸 (E/Z)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (100%로 추정됨)를 이성질체의 1:1 혼합물로서 수득하였다. MS (apci, m/z) = 359.1 (M+H).

단계 6. 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 단계 5에서 수득한 IPA (20 mL) 중 메틸 (E/Z)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (1.25 g, 3.48 mmol)의 용액에 소듐 시아노보로히드라이드 (1.09 g, 17.4 mmol), 및 이어서 아세트산 (1.0 mL, 17.4 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반한 다음, 포화 NaHCO₃ (50 mL)과 EtOAc (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (30 mL)로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/DCM으로 용리시키면서 정제하여 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (0.66 g, 53%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.43 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.78 (t, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.50 (t, 2H), 3.10 (t, 2H), 2.71 (t, 2H), 1.20 (s, 9H) ppm; MS (apci, m/z) = 361.1, 363.1 (M+H).

단계 7. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 (114 mg, 0.73 mmol)을 THF (5.0 mL, 0.69 mmol) 중에 용해시키고 N₂ 분위기 하에 -78℃로 냉각시켰다. LiHMDS (1.39 mL, 1.0 m/THF, 1.39 mmol)를 적가한 다음, 혼합물을 45분 동안 교반하였다. 이어서, THF (5.0 mL) 중 단계 6에서 수득한 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (250 mg, 0.69 mmol)의 용액을 적가하였다. 10분 동안 교반한 후, 추가의 LiHMDS (1.0 mL, 1.0 mmol)를 첨가하고, -78℃에서 1시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (20 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% (20% MeOH/DCM)/DCM)로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (111 mg, 36%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.35 (s, 1H), 7.02 - 6.99 (dd, 1H), 6.97 - 6.94 (m, 1H), 6.82 - 6.77 (t, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.16 - 4.14 (m, 2H), 3.80 - 3.77 (t, 2H), 3.62 - 3.60 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.99 - 2.95 (t, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.21 (s, 9H) ppm; MS (apci, m/z) = 450.2 (M+H).

단계 8. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (2.0 mL) 중 단계 7에서 수득한 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (111 mg, 0.247 mmol)의 용액에 H₃PO₄ (2.0 mL, 38.5 mmol)를 첨가하였다. 용액을 60℃로 15분 동안 가열한 다음, 냉각시키고, 포화 NaHCO₃ (20 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-20% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제한 다음, 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA, 30분에 걸침)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 생성물을 DCM/NaHCO₃을 사용하여 유리 염기로 전환시켜 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (62 mg, 64%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.17 (s, 1H), 7.03-6.97 (m, 2H), 6.85 (t, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.03 (t, 2H), 3.74-3.70 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 2.98 (t, 2H), 2.48 (s, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 394.1 (M+H). PXRD 분석을 실시예 77에 기재된 바와 같이 수행하였다. 도 4에 도시된 PXRD 패턴은 수득된 물질이 무정형임을 확증하였다. 이에 기초하여, 물질을 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4로서 지정하였다.

방법 B.

단계 1. 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 0℃에서 THF (50 mL) 중 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (본원에 기재된 임의의 방법에 따라 제조됨; 50.0 g, 87.2%, 155 mmol) 및 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 (24.4 g, 55 mmol)의 용액에 포타슘 tert-부톡시드 (34.9 g, 311 mL, 1.0 몰, 311 mmol)를 40분에 걸쳐 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 50분 동안 유지한 다음, 포화 NH₄Cl (600 mL) 및 EtOAc (500 mL)로 희석하였다. 물을 첨가하여 고체를 용해시키고, 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 300 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 물 (500 mL) 및 염수 (500 mL)로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (57 mL) 중에 현탁시키고, 잠시 초음파처리한 다음, 60℃로 10분 동안 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 천천히 냉각되도록 한 다음, 30분 동안 0℃로 냉각시켰다. 고체를 여과하고, 수집하여 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (40.14 g, 64.4%)를 수득하였다. ¹H NMR CDCl₃ δ 9.03 (s, 1H), 7.04 (dd, 1H), 6.96 (m, 1H), 6.71-6.65 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 2.47 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 401.0, 403.0 (M+H).

단계 2. 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. (Z)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (80.25 g, 82.3 mL, 405.17 mmol)을 2-메틸테트라히드로푸란 (860 mL) 중 단계 1의 절차에 따라 수득된 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (130.06 g, 324.14 mmol), K₂CO₃ (67.2 g, 243.10 mL, 2 M, 486.21 mmol) 및 메탄술포네이토(2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-'프로폭시-1,1'-비페닐)'2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) (6.78 g, 8.10 mmol)의 교반 용액에 아르곤 하에 주위 온도에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤으로 30분 동안 폭기하였다. 반응물을 60℃로 가열하고, 13시간 동안 교반한 다음, 주위 온도에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (1800 mL) 및 EtOAc (1100 mL)로 희석한 다음, GF/F 종이를 통해 여과하였다. 여과물 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 650 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (1500 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 MTBE (30 mL)로 처리하고, 농축시키고, 진공 하에 건조시켰다. 잔류물을 MTBE (330 mL) 중에 현탁시키고, 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 주위 온도로 천천히 냉각되도록 한 다음, 0℃에서 40분 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 차가운 MTBE (110 mL), 및 이어서 차가운 MTBE:헵탄 (1:1 혼합물, 150 mL)으로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (98.54 g, 77.46%)를 수득하였다. 1H NMR CDCl₃ δ 8.65 (s, 1H), 7.04 (dd, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.92 (m, 1H), 6.56 (t, 1H), 6.37 (d, 1H), 5.36 (d, 1H), 4.01 (q, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.31 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 1.35 (t, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 393.1 (M+H).

단계 3. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 트리에틸아민 (2.84 g, 3.91 mL, 28.0 mmol)을 1,4-디옥산 (255 mL) 중 단계 2의 절차에 따라 수득된 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (10.0 g, 25.5 mmol) 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (4.95 g, 96%, 28.0 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 반응물을 냉수조에 넣고, Ar로 퍼징하고, HCl (2.04 g, 14.0 mL, 4 M/디옥산, 56.1 mmol)을 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 가열한 다음, 냉수조를 사용하여 주위 온도로 냉각시켰다. 피리딘 보란 (4.74 g, 5.42 mL, 51.0 mmol)을 천천히 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 10분 동안 교반하였다. HCl (1.11 g, 7.64 mL, 4 M/디옥산, 30.6 mmol)을 5분에 걸쳐 첨가하고, 교반을 20분 동안 계속하였다. 반응물을 60℃에서 21시간 동안 가열한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 냉각된 혼합물을 포화 NaHCO₃ (140 mL)의 느린 첨가에 의해 약 pH 7로 중화시킨 다음, EtOAc (400 mL) 및 H₂O (300 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (600 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 최소량의 DCM 중에 용해시키고, 5 인치 실리카 플러그를 통해 3% MeOH:DCM (1 L)으로 용리시키면서 여과하였다. 여과물을 농축시켜 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (100%로 추정됨)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS (apci, m/z) = 450.2 (M+H).

단계 4. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 주위 온도에서 아세토니트릴 (63.09 mL, 31.54 mmol) 중 단계 3의 절차에 따라 수득된 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (14.18 g, 31.54 mmol)의 용액에 인산 (36.36 g, 21.60 mL, 85%, 315.4 mmol)을 20분에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 60℃로 4시간 동안 가열한 다음, 주위 온도로 천천히 냉각시켰다. 반응물을 빙조 중 인산칼륨 (66.95 g, 157.7 mL, 2 M, 315.4 mmol)의 차가운 용액에 격렬히 교반하면서 천천히 부었다. 10분 동안 교반한 후, EtOAc (300 mL)를 첨가하고, 층을 분리하였다. 유기 층을 염수 (300 mL)로 세척한 다음, 수성 층을 EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% (20% MeOH/DCM)/MTBE로 용리시키면서 정제하여 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9.48 g, 76.4%)을 수득하였다. PXRD 분석은 수득된 물질이 무정형임을 확증하였다. ¹H NMR CDCl₃ δ 11.19 (s, 1H), 7.06 - 6.93 (m, 2H), 6.91 - 6.76 (m, 1H), 5.95 (t, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.21 - 3.87 (m, 2H), 3.84 - 3.54 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 2.98 (td, 2H), 2.48 (s, 3H). MS (apci, m/z) = 394.1 (M+H).

실시예 7

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-브로모-2-플루오로아닐린로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (15 mg, 63%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.14 (s, 1H), 7.33 (dd, 1H), 7.24 (m, 1H), 6.78 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.38 (t, 1H), 4.05 - 4.01 (m, 2H), 3.75-3.70 (m, 4H), 3.17 (s, 3H), 3.00 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 426.0, 428.0 (M+H).

실시예 8

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-아이오도-2-플루오로아닐린로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (12 mg, 74%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.11 (s, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.42 (m, 1H), 6.63 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.42 - 4.33 (m, 1H), 4.05 - 4.00 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 4H), 3.18 (s, 3H), 2.99 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 474.0 (M+H).

실시예 9

8-((2-클로로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-클로로-4-아이오도아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-클로로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (6.4 mg, 50%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.09 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 6.46 (d, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.03 (t, 2H), 3.78-3.70 (m, 4H), 3.14 (s, 3 H), 3.00 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 490.0 (M+H).

실시예 10

8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-브로모-2-클로로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (7.9 mg, 52%)을 수득하였다. ¹H NMR 11.10 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.31 (dd, 1H), 6.61 (d, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.03 (t, 2H), 3.77-3.68 (m, 4H), 3.14 (s, 3H), 3.00 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 442.0, 444.0 (M+H).

실시예 11

8-((4-브로모-2,3-디플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-브로모-2,3-디플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2,3-디플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (12.2 mg, 75%)을 수득하였다. ¹H NMR 11.17 (s, 1H), 7.30-7.22 (m, 1H), 6.65 (dt, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.32 (bs, 1H), 4.04 (t, 2H), 3.78-3.69 (m, 4H), 3.21 (s, 3H), 3.01 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 444.0 (M+H).

실시예 12

8-((4-브로모-3-클로로-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-브로모-3-클로로-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-3-클로로-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10.6 mg, 68%)을 수득하였다. ¹H NMR 11.17 (s, 1H), 7.37 (d, 1H), 6.68 (t, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.06-4.00 (m, 2H), 3.77-3.69 (m, 4H), 3.20 (s, 3H), 3.01 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 460.0, 462.0 (M+H).

실시예 13

8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (11 mg, 22%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 472.2 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (6 mg, 62%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.18 (s, 1H), 7.44 - 7.41 (dd, 1H), 7.38 - 7.36 (d, 1H), 6.92 - 6.88 (t, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.05 - 4.03 (m, 2H), 3.76 - 3.72 (m, 4H), 3.23 (s, 3H), 3.03 - 3.00 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 416.1 (M+H).

실시예 14

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-에틸-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (19 mg, 42%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 432.2 (M+H).

단계 2. 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 61%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.17 (s, 1H), 7.00 - 6.91 (m, 2H), 6.87 - 6.83 (t, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.03 - 4.01 (m, 2H), 3.74 - 3.70 (m, 4H), 3.15 (s, 3H), 3.00 - 2.97 (t, 2H), 2.66 - 2.61 (q, 2H), 1.25 - 1.21 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 376.2 (M+H).

실시예 15

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-시클로프로필-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (32 mg, 52%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 444.2 (M+H).

단계 2. 8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (19 mg, 68%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.18 (s, 1H), 6.83 - 6.78 (m, 3H), 5.92 (s, 1H), 4.49 (br s, 1H), 4.03 - 4.01 (m, 2H), 3.74 - 3.69 (m, 4H), 3.13 (s, 3H), 3.0 - 2.96 (t, 2H), 1.90 - 1.84 (m, 1H), 1.03 - 0.98 (m, 2H), 0.69 - 0.65 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 388.1 (M+H).

실시예 16

8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-메톡시아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (8 mg, 17%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 434.2 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3 mg, 43%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.18 (s, 1H), 6.94 - 6.90 (t, 1H), 6.07 - 6.64 (m, 2H), 5.91 (s, 1H), 4.04 - 4.01 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.75 - 3.69 (m, 4H), 3.12 (s, 3H), 3.00 - 2.96 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 378.1 (M+H).

실시예 17

8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (17 mg, 31%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 504.1 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 66%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.16 (s, 1H), 7.49 - 7.46 (dd, 1H), 7.40 - 7.38 (d, 1H), 6.86 - 6.82 (t, 1H), 6.06 (s, 1H), 4.31 (br s, 1H), 4.05 - 4.02 (t, 2H), 3.76 - 3.72 (m, 4H), 3.23 (s, 3H), 3.03 - 3.00 (t, 2H); MS (apci, m/z) = 448.1 (M+H).

실시예 18

8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-이소프로필아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (17 mg, 34%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 446.2 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 67%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.16 (s, 1H), 7.00 - 6.93 (m, 2H), 6.97 - 6.83 (t, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.51 - 4.48 (t, 1H), 4.03 - 4.01 (t, 2H), 3.75 - 3.69 (m, 4H), 3.14 (s, 3H), 3.00 - 2.96 (t, 2H), 2.92 - 2.85 (m, 1H), 1.24 - 1.22 (d, 6H) ppm; MS (apci, m/z) = 390.2 (M+H).

실시예 19

8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-클로로-4-시클로프로필아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (21 mg, 41%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 460.2 (M+H).

단계 2. 8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (12 mg, 65%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.13 (s, 1H), 7.14 (d, 1H), 6.91 - 6.88 (dd, 1H), 6.69 - 6.67 (d, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.47 - 4.44 (t, 1H), 4.04 - 4.01 (t, 2H), 3.75 - 3.69 (m, 4H), 3.09 (s, 3H), 3.01 - 2.98 (t, 2H), 1.89 - 1.82 (m, 1H), 1.02 - 0.97 (m, 2H), 0.69 - 0.65 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 404.1 (M+H).

실시예 20

8-((4-아세틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에티닐-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-플루오로-4-((트리메틸실릴)에티닐)아닐린 (30.2 mg, 0.145 mmol)을 THF (1.0 mL, 0.139 mmol) 중에 용해시키고 N₂ 분위기 하에 -78℃로 냉각하였다. LiHMDS (0.277 mL, 1 N/THF, 0.277 mmol)를 적가하고, 혼합물을 동일한 온도에서 45분 동안 교반하였다. 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (50 mg, 0.139 mmol)를 THF (1.0 mL, 0.139 mmol) 중에 용해시키고, 반응 혼합물에 적가하였다. 10분 동안 교반한 후, LiHMDS (0.160 mL, 1 N/THF, 0.160 mmol)를 첨가하고, 반응물을 동일한 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (25 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (3 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 물질을 THF (1.0 mL, 0.139 mmol) 중에 용해시키고, 주위 온도에서 TBAF (0.1 mL, 1 N/THF, 0.100 mmol)로 30분 동안 처리하였다. 혼합물을 EtOAc (25 mL)와 포화 NH₄Cl (25 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 제거하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 25 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에티닐-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (19 mg, 32%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 428.2 (M+H).

단계 2. 8-((4-아세틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에티닐-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((4-아세틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (11 mg, 64%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.19 (s, 1H), 7.76 - 7.73 (dd, 1H), 7.71 - 7.69 (dd, 1H), 6.87 - 6.83 (t, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.31 (br s, 1H), 4.05 - 4.03 (m, 2H), 3.76 - 3.73 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 3.03 - 3.00 (t, 2H), 2.58 (s, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 390.1 (M+H).

실시예 21

8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-클로로-4-(메틸티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (15 mg, 29%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 466.1 (M+H).

단계 2. 8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9 mg, 68%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.15 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.09 - 7.06 (dd, 1H), 6.71 - 6.69 (d, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.42 (br s, 1H), 4.04 - 4.02 (t, 2H), 3.75 - 3.71 (m, 4H), 3.12 (s, 3H), 3.01 - 2.98 (t, 2H), 2.48 (s, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 410.1 (M+H).

실시예 22

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (17 mg, 33%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 470.2 (M+H).

단계 2. 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 67%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.18 (s, 1H), 7.00 - 6.91 (m, 3H), 6.68 - 6.31 (t, 1H), 5.98 (s, 1H), 4.43 - 4.40 (t, 1H), 4.04 - 4.02 (t, 2H), 3.75 - 3.71 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 3.01 - 2.98 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 414.1 (M+H).

실시예 23

8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-클로로-4-에틸아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9 mg, 14%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 448.2 (M+H).

단계 2. 8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (6 mg, 80%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.13 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.02 - 7.00 (dd, 1H), 6.72 - 6.70 (d, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.46 (br s, 1H), 4.04 - 4.01 (m, 2H), 3.75 - 3.70 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 3.01 - 2.97 (t, 2H), 2.65 - 2.59 (q, 2H), 1.24 - 1.21 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 392.1 (M+H).

실시예 24

8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (22 mg, 41%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 488.2 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (13 mg, 67%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.17 (s, 1H), 7.08 - 7.06 (d, 1H), 7.02 - 6.99 (d, 1H), 6.94 - 6.90 (t, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.40 - 4.36 (t, 1H), 4.05 - 4.02 (t, 2H), 3.75 - 3.72 (t, 4H), 3.18 (s, 3H), 3.02 - 2.99 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 432.1 (M+H).

실시예 25

8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 7에 따라, 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (19 mg, 35%)을 수득하였다. δ 11.31 (s, 1H), 7.40 - 7.37 (dd, 1H), 7.30 - 7.28 (m, 1H), 6.94 - 6.66 (t, 1H), 6.80 - 6.76 (t, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.17 - 4.14 (m, 2H), 3.82 - 3.79 (t, 2H), 3.62 - 3.59 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 3.01 - 2.97 (t, 2H), 1.21 (s, 9H) ppm. MS (apci, m/z) = 486.2 (M+H).

단계 2. 8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온. 실시예 6, 방법 A의 단계 8에 따라, 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온으로 대체하여 제조하여 8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (11 mg, 57%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.16 (s, 1H), 7.42 - 7.39 (dd, 1H), 7.33 - 7.32 (d, 1H), 6.96 - 6.68 (t, 1H), 6.87 - 6.82 (t, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.37 - 4.33 (t, 1H), 4.05 - 4.02 (t, 2H), 3.75 - 3.72 (t, 4H), 3.22 (s, 3H), 3.03 - 2.99 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 430.1 (M+H).

실시예 26

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A의 단계 1-7에 따라, 단계 5에서 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 대신에 O-이소프로필히드록실아민 히드로클로라이드 및 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-브로모-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10.3 mg, 14%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.37 (s, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.21 (dq, 1H), 6.73 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.33 (m, 1H), 3.68 (t, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.99 (t, 2H), 1.30 (d, 6H) ppm; MS (apci, m/z) = 424.1, 426.1 (M+H).

실시예 27

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A의 단계 1-7에 따라, 단계 5에서 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 대신에 O-이소프로필히드록실아민 히드로클로라이드, 및 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-아이오도아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (15.2 mg, 23%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.36 (s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.38 (dt, 1H), 6.58 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.33 (m, 1H), 3.68 (t, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.99 (t, 2H), 1.30 (d, 6H) ppm; MS (apci, m/z) = 472.1 (M+H).

실시예 28

2-에톡시-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A의 단계 1-7에 따라, 단계 5에서 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 대신에 O-에틸히드록실아민 히드로클로라이드, 및 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-아이오도아닐린으로 대체하여 제조하여 2-에톡시-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (24.3 mg, 25%)을 수득하였다. ¹H NMR 11.33 (s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 6.57 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.07 (q, 2H), 3.72 (t, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.99 (t, 2H), 1.31 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 458.0 (M+H).

실시예 29

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-메톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 6, 방법 A의 단계 1-7에 따라, 단계 5에서 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 대신에 O-메틸히드록실아민 히드로클로라이드, 및 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-아이오도아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-메톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (16.7 mg, 33%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.32 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.58 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.73 (t, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.00 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 444.0 (M+H).

실시예 30

2-(tert-부톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1-7. 메틸 4-(2-(tert-부톡시아미노)에틸)-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 1-7에 따라, 단계 5에서 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 대신에 O-(tert-부틸)히드록실아민 히드로클로라이드 및 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 2-플루오로-4-아이오도아닐린으로 대체하여 제조하여 메틸 4-(2-(tert-부톡시아미노)에틸)-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (40.3 mg, 62%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 518.1 (M+H).

단계 8. 2-(tert-부톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. THF (1 mL) 중 메틸 4-(2-(tert-부톡시아미노)에틸)-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (40.3 mg, 0.078 mmol)의 용액을 Et₃N (10.9 μL, 0.078 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 50℃로 1시간 동안 가열하였다. 추가의 Et₃N (10.9 μL, 0.078 mmol)을 반응물에 첨가하고, 50℃에서 추가 1시간 동안 교반되도록 하였다. 추가의 분취량의 Et₃N (10.9 μL, 0.078 mmol)을 첨가하고, 반응물을 50℃에서 5일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (40 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 합하고, 포화 비카르보네이트로 세척하고, EtOAc (3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 비카르보네이트 (20 mL) 및 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 2-(tert-부톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (16.5 mg, 43%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.49 (s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.39 (td, 1H), 6.59 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 3.70 - 3.60 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.10 - 2.87 (m, 2H), 1.34 (s, 9H) ppm; MS (apci, m/z) = 486.1 (M+H).

실시예 31

(S)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 메틸 (S,E)-2-클로로-4-(2-((2-히드록시프로폭시)이미노)에틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (200 mg, 0.736 mmol) 및 (S)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민 (151 mg, 0.736)을 1,4-디옥산 (5 mL) 중에 용해시켰다. TEA (103 μL, 0.736 mmol) 및 HCl (368 μL, 4 N/디옥산, 1.47 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 60℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (S,E)-2-클로로-4-(2-((2-히드록시프로폭시)이미노)에틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (66.6 mg, 29%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 317.1 (M+H).

단계 2. 메틸 (S,E)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(6,8,8,9,9-펜타메틸-4,7-디옥사-3-아자-8-실라데크-2-엔-1-일)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (S,E)-2-클로로-4-(2-((2-히드록시프로폭시)이미노)에틸)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (66.6 mg, 0.210 mmol) 및 이미다졸 (0.043 g, 0.631 mmol)을 DMF (2 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. TBS-Cl (63.4 mg, 0.421 mmol)을 후속적으로 첨가하고, 반응물을 2시간에 걸쳐 실온으로 가온되도록 하였다. 반응물을 물 (40 mL) 및 EtOAc (20 mL)로 희석하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 물 (5 x 20 mL) 및 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (S,E)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(6,8,8,9,9-펜타메틸-4,7-디옥사-3-아자-8-실라데크-2-엔-1-일)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (63.4 mg, 70%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 431.2 (M+H).

단계 3. 메틸 (S)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(6,8,8,9,9-펜타메틸-4,7-디옥사-3-아자-8-실라데실)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (S,E)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(6,8,8,9,9-펜타메틸-4,7-디옥사-3-아자-8-실라데크-2-엔-1-일)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (63.4 mg, 0.147 mmol)를 2-프로판올 (1 mL) 중에 용해시켰다. 소듐 시아노보로히드라이드 (46.2 mg, 0.735 mmol) 및 아세트산 (42.1 μL, 0.735 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 비카르보네이트 (30 mL)와 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (S)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(6,8,8,9,9-펜타메틸-4,7-디옥사-3-아자-8-실라데실)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (30.6 mg, 48%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 433.2 (M+H).

단계 4. (S)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로폭시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. N₂ 하에 -78℃에서 무수 THF (1 mL) 중 2-플루오로-4-아이오도아닐린 (16.9 mg, 0.071 mmol)의 용액에 LiHMDS (0.141 ml, 1 M/THF, 0.141 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 45분 동안 교반한 다음, THF (0.5 mL) 중 메틸 (S)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(6,8,8,9,9-펜타메틸-4,7-디옥사-3-아자-8-실라데실)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (30.6 mg, 0.071 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (30 mL)로 켄칭하고, 주위 온도에서 10분 동안 교반한 다음, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 (S)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로폭시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (15.2 mg, 36%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 602.2 (M+H).

단계 5. (S)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. (S)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로폭시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (15.2 mg, 0.025 mmol)을 MeOH (0.5 mL) 중에 용해시켰다. 반응 혼합물을 HCl (12.6 μL, 4 N/디옥산, 0.051 mmol)로 처리하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 합하고, 포화 비카르보네이트로 세척하고, EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 비카르보네이트 (15 mL) 및 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (S)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (6.8 mg, 55%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.16 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.42 (dt, 1H), 6.62 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.05-3.91 (m, 2H), 3.78-3.60 (m, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.10-2.90 (m, 2H), 1.15 (d, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 488.0 (M+H).

실시예 32

(R)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 31에 따라, 단계 1에서 (S)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민 대신에 (R)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민으로 대체하여 제조하여 (R)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (8.6 mg, 49%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.16 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.42 (dt, 1H), 6.62 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.05-3.91 (m, 2H), 3.78-3.60 (m, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.09-2.90 (m, 2H), 1.15 (d, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 488.0 (M+H).

실시예 33

(S)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 31에 따라, 단계 4에서 2-플루오로-4-아이오도아닐린 대신에 4-브로모-2-플루오로아닐린으로 대체하여 (S)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9.2 mg, 55%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.16 (s, 1H), 7.32 (dd, 1H), 7.26-7.22 (m, 1H), 6.78 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.05-3.92 (m, 2H), 3.78-3.60 (m, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.10-2.90 (m, 2H), 1.15 (d, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 440.1, 442.1 (M+H).

실시예 34

(R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 31에 따라, 단계 1에서 (S)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민 대신에 (R)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민, 및 단계 4에서 2-플루오로-4-아이오도아닐린 대신에 4-브로모-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9.2 mg, 55%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.17 (s, 1H), 7.32 (dd, 1H), 7.24 (dt, 1H), 6.78 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.06-3.91 (m, 2H), 3.78-3.60 (m, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.10-2.90 (m, 2H), 1.15 (d, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 440.0 (M+H).

실시예 35

(R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1-4: (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 31, 단계 1-4에 따라, 단계 1에서 (S)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민 대신에 (R)-O-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)히드록실아민으로 대체하여 제조하여 (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (63.5 mg, 62%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 554.1 (M+H).

단계 5. (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (42.3 mg, 0.076 mmol)을 THF (1 mL) 및 MeOH (1 mL) 중에 용해시켰다. p-톨루엔술폰산 1수화물 (21.8 mg, 0.114 mmol)을 첨가하였다. 5분 후, N-아이오도숙신이미드 (17.2 mg, 0.076 mmol)를 첨가하고, 30분 동안 교반되도록 두었다. 반응 혼합물을 EtOAc (15 mL)와 포화 비카르보네이트 (30 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (23.8 mg, 54%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 566.0 (M+H).

단계 6. (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 0℃에서 THF (400 μL) 중 (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (21.7 mg, 0.038 mmol)의 용액에 Pd(Pt-Bu₃)₂ (1.96 mg, 0.004 mmol), 및 이어서 메틸아연(II) 클로라이드 (19.4 μL, 0.039 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 빙조로부터 제거하고, 5분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (20 mL)과 EtOAc (15 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 합하고, 포화 비카르보네이트로 세척하고, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 비카르보네이트 (25 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (7.5 mg, 43%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.97 (s, 1H), 7.30 (dd, 1H), 7.19 (dt, 1H), 6.68 (t, 1H), 4.05-3.91 (m, 2H), 3.71 (m, 2H), 3.64 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.13-3.04 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.14 (d, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 454.1 (M+H).

실시예 36

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. N₂ 하에 -78℃에서 무수 THF (5 mL) 중 4-브로모-2-플루오로아닐린 (88 mg, 0.47 mmol)의 용액에 LiHMDS (694 mL, 1.0 M/THF, 0.694 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 45분 동안 교반한 다음, THF (2 mL) 중 메틸 4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)아미노)에틸)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (167 mg, 0.46 mmol)의 용액을 첨가하였다. 교반을 -78℃에서 10분 동안 계속한 다음, LiHMDS (300 mL, 1.0 M/THF, 0.300 mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 추가 10분 동안 교반한 후, LiHMDS (100 mL, 1.0 M/THF, 0.100 mmol)를 첨가하고, 교반을 10분 동안 계속하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (10 mL)로 켄칭하고, 주위 온도에서 10분 동안 교반한 다음, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (78 mg, 35%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 482.1 (M+H).

단계 2. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. THF (2 mL) 및 MeOH (2 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (78 mg, 0.16 mmol)의 용액에 p-톨루엔술폰산 1수화물 (46 mg, 0.24 mmol)을 첨가하였다. 5분 후, N-아이오도숙신이미드 (36 mg, 0.16 mmol)를 첨가하였다. 주위 온도에서 30분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 EtOAc (10 mL)와 포화 NaHCO₃ (10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-30% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (62 mg, 63%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.54 (s, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.22 (m, 1H), 6.73 (t, 1H), 4.17 - 4.13 (m, 2H), 3.80 (t, 2H), 3.63 - 3.59 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.17 (t, 2H), 1.22 (s, 9H) ppm; MS (apci, m/z) = 608.0 (M+H).

단계 3. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 0℃에서 무수 THF (2 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (62 mg, 0.10 mmol)의 용액에 Pd(Pt-Bu₃)₂ (5 mg, 0.01 mmol), 및 이어서 메틸아연(II) 클로라이드 (61 mL, 2 M/THF, 0.12 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 빙조로부터 제거하고, 5분 동안 교반한 다음, 포화 NH₄Cl (10 mL)과 EtOAc (10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-60% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (39 mg, 77%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.11 (s, 1H), 7.28 (dd, 1H), 7.16 (dt, 1H), 6.61 (t, 1H), 4.17 - 4.13 (m, 2H), 3.78 (t, 2H), 3.64 - 3.59 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.02 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.22 (s, 9H) ppm; MS (apci, m/z) = 496.1 (M+H).

단계 4. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (0.5 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (39 mg, 0.079 mmol)의 용액에 인산 (0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 1시간 동안 가온한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 혼합물을 포화 NaHCO₃ (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)와 함께 10분 동안 교반하고, 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 0-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 포화 NaHCO₃/EtOAc로 후처리하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (18 mg, 52%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.96 (s, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.20 (dt, 1H), 6.68 (t, 1H), 4.05 - 4.01 (m, 2H), 3.75 - 3.69 (m, 4H), 3.23 (s, 3H), 3.03 (t, 2H), 2.08 (s, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 440.0 (M+H).

실시예 37

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-클로로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 6, 방법 A의 단계 1-7에 따라, 단계 7에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-브로모-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (28 mg, 35%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 482.1 (M+H).

단계 2. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-클로로-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. DMF (0.5 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (28 mg, 0.058 mmol)의 용액에 NCS (8 mg, 0.058 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반한 다음, 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 냉각된 혼합물을 포화 NaHCO₃ (10 mL)과 EtOAc (10 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 물 (5 x 10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-클로로-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (14 mg, 47%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 516.0 (M+H).

단계 3. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-클로로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (0.5 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-클로로-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (14 mg, 0.027 mmol)의 용액에 인산 (0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 30분 동안 가온한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 혼합물을 포화 NaHCO₃ (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)와 함께 10분 동안 교반하고, 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-클로로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (11 mg, 88%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.22 (s, 1H), 7.33 (dd, 1H), 7.26 (dt, 1H), 6.78 (t, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.22 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 460.0 (M+H).

실시예 38

5-클로로-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 37에 따라, 단계 1에서 4-브로모-2-플루오로아닐린 대신에 4-아이오도-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 5-클로로-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 93%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.21 (s, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.43 (dt, 1H), 6.63 (t, 1H), 4.25 - 4.17 (m, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 2H), 3.79 - 3.70 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.22 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 508.0 (M+H).

실시예 39

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-플루오로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-플루오로-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (9.0 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (77 mg, 0.16 mmol) 및 1-(클로로메틸)-4-플루오로-1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄-1,4-디움 테트라플루오로보레이트 (57 mg, 0.16 mmol)의 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (25 mL), 및 이어서 염수 (25 mL)로 세척하였다. 유기 상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고 포화 NaHCO₃ (15 mL)으로 희석한 다음에 EtOAc (2 x 25 mL)로 추출하였다. 유기 상을 합하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-플루오로-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 13%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 500.1 (M+H).

단계 2. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-플루오로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (1.0 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5-플루오로-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (13 mg, 0.026 mmol) 및 진한 H₃PO₄ (0.20 mL, 3.0 mmol)의 용액을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시킨 다음, K₃PO₄ (물 중 1 M, 3.0 mL, 3.0 mmol)로 희석하였다. 수성 상을 EtOAc (2 x 15 mL)로 추출하고, 유기 상을 합하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 HPLC (10-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 포화 NaHCO₃ (15 mL)으로 희석하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 추출하고, 유기 상을 합하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-플루오로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (5.0 mg, 43%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.79 (s, 1H), 7.34-7.30 (m, 1H), 7.25-7.21 (m, 1H), 6.72 (t, 1H), 4.23 (t, 1H), 4.06-4.02 (m, 2H), 3.80-3.70 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.17-3.12 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 444.0 (M+H).

실시예 40

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (실시예 36, 단계 1-3에 따라 제조됨; 65 mg, 0.13 mmol), 아이오딘화구리 (I) (6.2 mg, 0.033 mmol), 아이오딘화나트륨 (39 mg, 0.26 mmol), 및 (1S,2S)-N1,N2-디메틸시클로헥산-1,2-디아민 (9.3 mg, 0.065 mmol)을 1,4-디옥산 (1 mL) 중에서 합하고, 아르곤으로 폭기하였다. 혼합물을 110℃에서 18시간 동안 가열한 다음, 주위 온도에서 48시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc (20 mL)와 수산화암모늄 (10 mL/물 10 mL) 사이에 분배하였다. 유기 상들을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (49 mg, 69%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 544.1 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (1 mL) 중 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (49 mg, 0.09 mmol)의 용액에 인산 (0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 1시간 동안 가온한 다음, 주위 온도로 냉각시켰다. 혼합물을 포화 NaHCO₃ (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)와 함께 10분 동안 교반하고, 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 EtOAc/포화 NaHCO₃으로 후처리하여 8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (23 mg, 52%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.95 (s, 1H), 7.47 (dd, 1H), 7.37 (dt, 1H), 6.52 (t, 1H), 4.05 - 4.02 (m, 2H), 3.75 - 3.65 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 3.03 (t, 2H), 3.02 (s, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 488.0 (M+H).

실시예 41

8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. N₂ 하에 -78℃에서 무수 THF (5 mL) 중 2-플루오로아닐린 (100 mg, 0.90 mmol)의 용액에 LiHMDS (1.34 mL, 1.0 M/THF, 1.34 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 45분 동안 교반한 다음, THF (5 mL) 중 메틸 4-브로모-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (250 mg, 0.89 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 50분 동안 교반하였다. 추가의 LiHMDS (0.5 mL, 1.0 M/THF, 0.5 mmol)를 첨가하고, 교반을 추가 10분 동안 계속하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (20 mL)로 켄칭하고, 주위 온도에서 10분 동안 교반한 다음, EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (291 mg, 92%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 355.0 (M+H).

단계 2. 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (188 mg, 0.529 mmol), 메탄술포네이토 (2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디-i-'프로폭시-1,1'-비페닐)'2-아미노-1,1'-비페닐-2-일)팔라듐(II) (44.3 g, 0.053 mmol), 및 (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (123 μL, 0.582 mmol)을 1,4-디옥산 (5 mL) 중에 현탁시키고, 탄산칼륨 (0.397 mL, 2 N 수성, 0.794 mmol)을 첨가하였다. 아르곤으로 탈기한 후, 혼합물을 주위 온도에서 23시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (40 mL)과 EtOAc (30 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (40 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (91.5 mg, 50%)로 정제하였다. MS (apci, m/z) = 347.1 (M+H).

단계 3. 메틸 (E)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (91.5 mg, 0.264 mmol) 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (44.8 mg, 0.264 mmol)를 1,4-디옥산 (2 mL) 중에 용해시켰다. TEA (36.8 μL, 0.264 mmol) 및 HCl (66 μL, 4 N/디옥산, 0.264 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 60℃로 가열하였다. 2시간 후, 추가의 HCl (66 μL, 4 N/디옥산, 0.264 mmol)을 첨가하고, 교반을 60℃에서 추가 2시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (67.6 mg, 59%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 434.2 (M+H).

단계 4. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 (E)-4-(2-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)에틸)-2-((2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (67.6 mg, 0.156 mmol)를 MeOH (1.0 mL) 및 2-프로판올 (1.0 mL) 중에 용해시켰다. 소듐 시아노보로히드라이드 (49 mg, 0.780 mmol) 및 아세트산 (44.6 μL, 0.780 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 40℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응물을 포화 비카르보네이트 (20 mL)와 EtOAc (10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (37.8 mg, 60%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 404.2 (M+H).

단계 5. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (19 mg, 0.047 mmol)을 THF (0.5 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중에 용해시켰다. p-톨루엔술폰산 1수화물 (13 mg, 0.071 mmol)을 첨가하였다. 5분 후, N-아이오도숙신이미드 (11 mg, 0.047 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (20 mL)와 포화 비카르보네이트 (40 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-30% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9.9 mg, 40%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 530.1 (M+H).

단계 6. 8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9.9 mg, 0.019 mmol)을 아세토니트릴 (0.5 mL) 중에 용해시키고, 인산 (0.5 mL)을 첨가하였다. 용액을 60℃로 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 비카르보네이트 (15 mL)와 EtOAc (10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 8 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (15 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 합하고, 포화 비카르보네이트로 세척하고, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 비카르보네이트 (20 mL) 및 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (4.5 mg, 51%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.41 (s, 1H), 7.21-7.08 (m, 3H), 6.94 (t, 1H), 4.04 (t, 2H), 3.76-3.69 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.19 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 474.0 (M+H).

실시예 42

5-브로모-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 41에 따라, 단계 1에서 2-플루오로아닐린 대신에 4-브로모-2-플루오로 아닐린 및 단계 5에서 N-브로모숙신이미드로 대체하여 제조하여 5-브로모-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (6.5 mg, 29%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.28 (s, 1H), 7.33 (dd, 1H), 7.25 (m, 1H), 6.80 (t, 1H), 4.05 (t, 2H), 3.78-3.70 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.22 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 504.0 (M+H).

실시예 43

4-브로모-8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 주위 온도에서 무수 THF (5 mL) 중 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (75 mg, 0.14 mmol)의 용액에 메틸아연(II) 클로라이드 (140 mL, 2 M, 0.14 mmol)를 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-80% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (38 mg, 64%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 418.2 (M+H).

단계 2. 4-브로모-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 무수 DMF (1 mL) 중 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (38 mg, 0.09 mmol)의 용액에 NBS (17 mg, 0.09 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에서 2시간 동안 교반한 다음, 포화 NaHCO₃ (10 mL)과 EtOAc (10 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 물 (5 x 10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척한 다음, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-60% EtOAc/헥산으로 용리시키면서 정제하여 4-브로모-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (30 mg, 66%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 496.2 (M+H).

단계 3. 4-브로모-8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 아세토니트릴 (0.5 mL) 중 4-브로모-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (30 mg, 0.060 mmol)의 용액에 인산 (0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 1시간 동안 가온한 다음 냉각시키고, 포화 NaHCO₃ (10 mL) 및 EtOAc (10 mL)와 함께 10분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-15% (20% MeOH/DCM)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 4-브로모-8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (10 mg, 38%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.08 (s, 1H), 7.15 - 7.05 (m, 2H), 6.86 (t, 1H), 5.36 (t, 1H), 4.17-4.04 (m, 3H), 3.99-3.92 (m, 1H), 3.88 (dd, 1H), 3.68 (dt, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.26 (t, 1H) ppm; MS (apci, m/z) = 440.1 (M+H).

실시예 44

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. N₂ 하에 -78℃에서 무수 THF (2 mL) 중 4-에틸-2-플루오로아닐린 (155 mg, 1.12 mmol)의 용액에 LiHMDS (2.21 mL, 1 M/THF, 2.21 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 40분 동안 교반한 다음, THF (1 mL) 중 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (300 mg, 1.10 mmol)의 용액을 시린지를 통해 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 45분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (35 mL)로 켄칭하고, 주위 온도에서 5분 동안 교반한 다음, EtOAc (3 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (298 mg, 72%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 375.2 (M+H).

단계 2. 메틸 2-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (298 mg, 0.797 mmol)를 DCM (800 μL) 중에 용해시키고, TFA (921 μL, 11.9 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM (20 mL)과 포화 중탄산나트륨 (35 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 DCM (2 x 15 mL)으로 세척하였다. 합한 유기 층을 포화 중탄산나트륨 (30 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 2-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (276 mg, 100%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 347.1 (M+H).

단계 3. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 2-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (276 mg, 0.797 mmol), O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (117 mg, 0.876 mmol), 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (203 mg, 0.956 mmol), 및 아세트산 (45.6 μL, 0.797 mmol)을 DCE (8 mL) 중에 용해시켰다. 반응물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 55℃로 20분 동안 가열하였다. 추가의 소듐 트리아세톡시히드로보레이트 (400 mg) 및 아세트산 (90 μL)을 반응물에 첨가하고, 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 소듐 시아노보로히드라이드 (250 mg, 3.98 mmol) 및 아세트산 (250 μL)을 반응물에 첨가하고, 주위 온도에서 3시간 동안 교반되도록 하였다. 용액을 DCM (40 mL)과 포화 중탄산나트륨 (70 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 DCM (2 x 20 mL)으로 세척하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (137 mg, 40%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 432.2 (M+H).

단계 4. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (137 mg, 0.317 mmol)을 THF (1 mL)/MeOH (1 mL) 중에 용해시켰다. p-톨루엔술폰산 1수화물 (90.4 mg, 0.475 mmol)을 첨가하였다. 5분 후, N-아이오도숙신이미드 (71.3 mg, 0.317 mmol)를 첨가하고, 30분 동안 교반되도록 두었다. 반응 혼합물을 EtOAc (20 mL)와 포화 중탄산나트륨 (30 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (143 mg, 81%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 558.1 (M+H).

단계 5. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 0℃에서 THF (2.5 mL, 0.256 mmol) 중 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (143 mg, 0.256 mmol)의 용액에 Pd(Pt-Bu₃)₂ (13.1 mg, 0.026 mmol), 및 이어서 메틸아연(II) 클로라이드 (130 μL, 0.259 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 빙조로부터 제거하고, 45분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (50 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (40 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (53.7 mg, 47%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 446.2 (M+H).

단계 6. 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (53.7 mg, 0.121 mmol)을 아세토니트릴 (0.75 mL) 중에 용해시키고, 인산 (0.75 mL)을 첨가하였다. 반응물을 60℃로 60분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (40 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 포화 중탄산나트륨 (30 mL) 및 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (40.6 mg, 87%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.01 (s, 1H), 6.95 (dd, 1H), 6.89 (dd, 1H), 6.77 (t, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.02 (t, 2H), 3.75-3.67 (m, 4H), 3.20 (s, 3H), 3.02 (t, 2H), 2.62 (q, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.22 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 390.2 (M+H).

실시예 45

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 44에 따라, 단계 1에서 4-에틸-2-플루오로아닐린 대신에 4-시클로프로필-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (30.7 mg, 75%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.00 (s, 1H), 6.81-6.71 (m, 3H), 4.52 (t, 1H), 4.02 (m, 2H), 3.75-3.66 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 3.02 (t, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.86 (m, 1H), 1.02-0.95 (m, 2H), 0.69-0.63 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 402.2 (M+H).

실시예 46

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트

단계 1. 메틸 (E)-2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 4-브로모-2-플루오로아닐린 (492 mg, 2.59 mmol) 및 메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (670 mg, 2.47 mmol)를 THF (12.3 mL, 0.2 M) 중에 용해시키고, 질소 분위기 하에 -78℃로 냉각시켰다. LiHMDS (4.9 mL, 1.0 M/THF, 4.9 mmol)를 적가한 다음, 혼합물을 -78℃에서 주위 온도로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl (15 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (810 mg, 77%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 425.0 (M+H).

단계 2. 메틸 2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DCM (5.0 mL) 중 메틸 (E)-2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (810 mg, 1.90 mmol)의 용액에 TFA (5.0 mL)를 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반되도록 한 다음, 농축시켰다. 이어서, 조 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다 (751 mg, 99%). MS (apci, m/z) = 397.0, 399.0 (M+H).

단계 3. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (751 mg, 1.89 mmol), (4-메톡시페닐)메탄아민 (272 mg, 1.99 mmol), 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (441 mg, 2.08 mmol), 및 아세트산 (11.4 mg, 0.189 mmol)을 DCE (19 mL) 중에 용해시키고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 반응물을 60℃로 가온하고, 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, DCM (10 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (15 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (630 mg, 69%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 486.0 (M+H).

단계 4. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트의 제조. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (630 mg, 1.30 mmol)을 TFA (8.0 mL) 중에 용해시키고, 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응물을 주위 온도로 냉각되도록 하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 동결건조시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트 (226 mg, 48%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.28 (s, 1H), 7.32-7.29 (m, 1H), 7.23-7.20 (m, 1H), 6.74 (t, 1H), 6.05 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 3.51-3.47 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.84 (t, 2H) ppm. MS (apci, m/z) = 366.0, 368.0 (M+H).

실시예 47

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (실시예 46에 따라 제조됨; 41 mg, 0.11 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 (29 mg, 0.17 mmol)을 1:1 THF/MeOH 용액 1 mL 중에 용해시켰다. 5분 후, NIS (25 mg, 0.11 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 주위 온도에서 30분 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 조 반응 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 포화 수성 NaHCO₃ (15 mL) 사이에 분배하고, EtOAc (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다 (55 mg, 100%). MS (apci, m/z) = 493.9 (M+H).

단계 2. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (55 mg, 0.112 mmol) 및 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐 (0) (5.71 mg, 0.0112 mmol)을 THF (1.1 mL) 중에 용해시키고, 메틸아연(II) 클로라이드 (55.9 μL, 2 M/THF, 0.112 mmol)를 적가하였다. 반응물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaHCO₃ (2 mL)으로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피에 의해 5-95% 아세토니트릴/H₂O로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (24 mg, 56%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.08 (s, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 7.18-7.15 (m, 1H), 6.63 (t, 1H), 5.72 (s, 1H), 3.50-3.46 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.88 (t, 2H), 2.11 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 380.0 (M+H).

실시예 48

8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (실시예 46에 따라 제조됨; 20 mg, 0.053 mmol), 아이오딘화구리 (I) (2.5 mg, 0.013 mmol), 아이오딘화나트륨 (16 mg, 0.11 mmol), 및 (1S,2S)-N1,N2-디메틸시클로헥산-1,2-디아민 (3.7 mg, 0.026 mmol)을 1,4-디옥산 (0.5 mL) 중에서 합하였다. 반응물을 120℃로 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, 포화 수성 NH₄Cl (2 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 생성물을 DCM/NaHCO₃을 사용하여 유리 염기로 전환시켜 8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (5.0 mg, 22%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.07 (s, 1H), 7.46-7.43 (m, 1H), 7.36-7.33 (m, 1H), 6.48 (t, 1H), 5.82 (s, 1H), 3.50-3.46 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 2.88 (t, 2H), 2.11 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 428.10 (M+H).

실시예 49

8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트

단계 1. 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 4-아이오도-2-플루오로아닐린 (266 mg, 1.12 mmol) 및 메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (290 mg, 0.920 mmol)를 THF (9.2 mL) 중에 용해시키고, N₂ 분위기 하에 -78℃로 냉각시켰다. LiHMDS (2.1 mL, 1.0 M/THF, 2.1 mmol)를 적가한 다음, 혼합물을 -78℃에서 주위 온도로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl (10 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (389 mg, 77%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 473.1 (M+H).

단계 2. 메틸 2-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DCM (4.0 mL) 중 메틸 (E)-2-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (389 mg, 0.824 mmol)의 용액에 TFA (4.0 mL)를 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반되도록 한 다음, 농축시켰다. 이어서, 조 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 2-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에서 직접 사용하였다 (351 mg, 96%). MS (apci, m/z) = 445.0 (M+H).

단계 3. 8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 2-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (351 mg, 0.790 mmol), (4-메톡시페닐)메탄아민 (114 mg, 0.830 mmol), 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (184 mg, 0.869 mmol), 및 아세트산 (4.8 mg, 0.079 mmol)을 DCE (10 mL) 중에 용해시키고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이 때, 반응물을 60℃로 가온하고, 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, DCM (5 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (321 mg, 76%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 534.1 (M+H).

단계 4. 8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트의 제조. 8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (321 mg, 0.602 mmol)을 TFA (6.0 mL) 중에 용해시키고, 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각되도록 하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 동결건조시켜 8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트 (102 mg, 41%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.27 (s, 1H), 7.48-7.45 (m, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 6.58 (t, 1H), 6.05 (s, 1H), 5.84 (s, 1H), 3.51-3.47 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.84 (t, 2H) ppm. MS (apci, m/z) = 414.0 (M+H).

실시예 50

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트

단계 1. 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (400 mg, 1.47 mmol) 및 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 (243 mg, 1.55 mmol)을 THF (9.8 mL) 중에 용해시키고 N₂ 분위기 하에 -78℃로 냉각시켰다. LiHMDS (2.9 mL, 1.0 M/THF, 2.9 mmol)를 적가한 다음, 혼합물을 -78℃에서 주위 온도로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl (10 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (495 mg, 86%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 393.1 (M+H).

단계 2. 메틸 2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DCM (4.0 mL) 중 메틸 (E)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (495 mg, 1.26 mmol)의 용액에 TFA (4.0 mL)를 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 밤새 교반되도록 한 다음, 농축시켰다. 이어서, 조 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다 (391 mg, 85%). MS (apci, m/z) = 365.1 (M+H).

단계 3. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (391 mg, 1.07 mmol), (4-메톡시페닐)메탄아민 (155 mg, 1.13 mmol), 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (250 mg, 1.18 mmol), 및 아세트산 (6.4 mg, 0.079 mmol)을 DCE (11 mL) 중에 용해시키고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이 때, 반응물을 60℃로 가온하고, 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, DCM (5 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (401 mg, 82%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 454.1 (M+H).

단계 4. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트의 제조. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (401 mg, 0.884 mmol)을 TFA (8.0 mL) 중에 용해시키고, 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각되도록 하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결건조시켜 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트 (131 mg, 44%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.10 (s, 1H), 7.04-6.96 (m, 2H), 6.84 (t, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 3.53-3.49 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.85 (t, 2H), 2.48 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 334.1 (M+H).

실시예 51

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 50에 따라, 단계 1에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-에틸-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (14.9 mg, 47%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.25 (s, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.90 (m, 1H), 6.81 (t, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 3.48 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.82 (t, 2H), 2.62 (q, 2H), 1.22 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 316.1 (M+H).

실시예 52

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 50에 따라, 단계 1에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-시클로프로필-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (5.8 mg, 17%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.24 (s, 1H), 6.83-6.75 (m, 3H), 5.99 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 3.48 (dt, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.82 (t, 2H), 1.86 (m, 1H), 1.02-0.95 (m, 2H), 0.69-0.62 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 328.1 (M+H).

실시예 53

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 50에 따라, 단계 1에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (30.6 mg, 47%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.29 (s, 1H), 6.97 (m, 1H), 6.91-6.84 (m, 2H), 6.49 (t, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.79 (s, 1H), 3.49 (dt, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.84 (t, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 354.1 (M+H).

실시예 54

8-((2-플루오로-4-프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1-4: 8-((4-알릴-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 50에 따라, 단계 1에서 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린 대신에 4-알릴-2-플루오로아닐린을 사용하여 8-((4-알릴-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3.8 mg, 10%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.27 (s, 1H), 7.09 (dd, 1H), 7.01 (dd, 1H), 6.80 (t, 1H), 6.35-6.28 (m, 1H), 6.25-6.15 (m, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 3.49 (dt, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.83 (t, 2H), 1.88 (dd, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 328.1 (M+H).

단계 5. 8-((2-플루오로-4-프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. MeOH (0.5 mL) 중 8-((4-알릴-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3.8 mg, 0.012 mmol) 및 Pd/C (5% 데구사 유형, 1 mg, 0.009 mmol)의 교반 혼합물을 탈기하고, H2 분위기 하에 24시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM으로 희석하고, 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (20분에 걸쳐 5-95% 아세토니트릴/물/0.1% TFA)에 의해 정제하고, 깨끗한 분획을 합하고, 포화 비카르보네이트로 세척하고, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 비카르보네이트 (30 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-((2-플루오로-4-프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (2.5 mg, 65%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.22 (s, 1H), 6.93 (dd, 1H), 6.88 (m, 1H), 6.81 (t, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.81 (s, 1H), 3.48 (dt, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.83 (t, 2H), 2.55 (t, 2H), 1.62 (m, 2H), 0.92 (t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 330.1 (M+H).

실시예 55

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (41.2 mg, 0.124 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 (31.9 mg, 0.185 mmol)을 1:1 THF/MeOH 용액 1 mL 중에 용해시켰다. 5분 후, NIS (27.8 mg, 0.124 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 주위 온도에서 30분 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 조 반응 혼합물을 EtOAc (10 mL) 및 포화 수성 NaHCO₃ (15 mL) 사이에 분배하고, EtOAc (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 10-80% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (37 mg, 65%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 460.0 (M+H).

단계 2. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (37.0 mg, 0.0806 mmol) 및 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐 (0) (4.12 mg, 0.00806 mmol)을 THF (0.8 mL) 중에 용해시키고, 메틸아연(II) 클로라이드 (80.6 μL, 2 M/THF, 0.161 mmol)를 적가하였다. 반응물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl (2 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 생성물을 DCM/NaHCO₃을 사용하여 유리 염기로 전환시켜 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (15.5 mg, 55%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.10 (s, 1H), 7.04-7.01 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 1H), 6.71 (t, 1H), 5.96 (s, 1H), 3.49-3.46 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.87 (t, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.11 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 348.1 (M+H).

실시예 56

8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 55에 따라, 단계 1에서 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (실시예 51에 따라 제조됨)으로 대체하여 제조하여 8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (6.7 mg, 62%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.06 (s, 1H), 6.94 (dd, 1H), 6.86 (dd, 1H), 6.72 (t, 1H), 5.87 (s, 1H), 3.47 (dt, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.87 (t, 2H), 2.61 (q, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.21(t, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 330.2 (M+H).

실시예 57

8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 55에 따라, 단계 1에서 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (실시예 52에 따라 제조됨)으로 대체하여 제조하여 8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (2.3 mg, 47%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.05 (s, 1H), 6.80-6.75 (m, 2H), 6.69 (t, 1H), 5.80 (s, 1H), 3.47 (dt, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.87 (t, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.85 (m, 1H), 1.00-0.94 (m, 2H), 0.67-0.61 (m, 2H) ppm; MS (apci, m/z) = 342.2 (M+H).

실시예 58

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 55에 따라, 단계 1에서 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 대신에 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (실시예 53에 따라 제조됨)으로 대체하여 제조하여 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (9.5 mg, 41%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.09 (s, 1H), 6.96 (dd, 1H), 6.87-6.82 (m, 1H), 6.76 (t, 1H), 6.47 (t, 1H), 6.01 (s, 1H), 3.48 (dt, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.88 (t, 2H), 2.11 (s, 3H) ppm; MS (apci, m/z) = 368.1 (M+H).

실시예 59

8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 메틸 (E)-2-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (140 mg, 0.515 mmol) 및 4-브로모-2-클로로아닐린 (108 mg, 0.520 mmol)을 THF (5.2 mL) 중에 용해시키고 N₂ 분위기 하에 -78℃로 냉각시켰다. LiHMDS (1.0 mL, 1.0 M/THF, 1.0 mmol)를 적가한 다음, 혼합물을 -78℃에서 주위 온도로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl (5 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-2-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (145 mg, 64%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 441.0, 443.0 (M+H).

단계 2. 메틸 2-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DCM (2.0 mL) 중 메틸 (E)-2-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (145 mg, 0.328 mmol)의 용액에 TFA (2.0 mL)를 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 밤새 교반되도록 한 다음, 농축시켰다. 이어서, 조 혼합물을 DCM (5 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (5 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 2-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다 (136 mg, 100%). MS (apci, m/z) = 415.2 (M+H).

단계 3. 8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 2-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (136 mg, 0.329 mmol), (4-메톡시페닐)메탄아민 (47.4 mg, 0.345 mmol), 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (76.6 mg, 0.362 mmol), 및 아세트산 (2.0 mg, 0.033 mmol)을 DCE (3.3 mL) 중에 용해시키고, 주위 온도에서 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이 때, 반응물을 60℃로 가온하고, 1시간 동안 교반되도록 하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, DCM (5 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (104 mg, 63%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 502.1, 504.1 (M+H).

단계 4. 8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(4-메톡시벤질)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (79.1 mg, 0.207 mmol)을 TFA (3.0 mL) 중에 용해시키고, 60℃로 16시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각되도록 하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 생성물을 DCM/NaHCO₃을 사용하여 유리 염기로 전환시켜 8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (28 mg, 35%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.27 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.31-7.28 (m, 1H), 6.60-6.57 (m, 1H), 6.07 (t, 1H), 5.63 (s, 1H), 3.52-3.48 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.85 (t, 2H) ppm. MS (apci, m/z) = 382.0, 384.0 (M+H).

실시예 60

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트

단계 1. 메틸 2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DCM (5.0 mL) 중 메틸 (E)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (331 mg, 1.22 mmol)의 용액에 TFA (5.0 mL)를 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반되도록 한 다음, 농축시켰다. 이어서, 조 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (10 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 메틸 2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다 (236 mg, 80%). MS (apci, m/z) = 244.1 (M+H).

단계 2. 8-클로로-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 메틸 2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(2-옥소에틸)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (122 mg, 0.501 mmol), 2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에탄-1-아민 (105 mg, 0.601 mmol), 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (127 mg, 0.601 mmol), 및 아세트산 (6.0 mg, 0.10 mmol)을 DCE (5 mL) 중에 용해시키고, 주위 온도에서 2시간 동안 교반되도록 하였다. 반응물을 60℃로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, DCM (10 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO₃ (15 mL)으로 세척하였다. 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 목적 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 생성물을 DCM/NaHCO₃을 사용하여 유리 염기로 전환시켜 8-클로로-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (20 mg, 16%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 257.0 (M+H).

단계 3. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트의 제조. 4-브로모-2-플루오로아닐린 (17.7 mg, 0.093 mmol) 및 8-클로로-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (20 mg, 0.077 mmol)을 THF (0.7 mL) 중에 용해시키고 N₂ 분위기 하에 -78℃로 냉각시켰다. LiHMDS (233 μL, 1.0 M/THF, 0.233 mmol)를 적가한 다음, 혼합물을 -78℃에서 주위 온도로 1시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl (5 mL)로 켄칭한 다음, EtOAc (3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 역상 HPLC (5-95% 아세토니트릴/H₂O/0.1% TFA)에 의해 정제하였다. 깨끗한 분획을 동결건조시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 트리플루오로아세테이트 (10.1 mg, 32%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.36 (s, 1H), 7.32-7.29 (m, 1H), 7.22-7.19 (m, 1H), 6.70 (t, 1H), 6.06 (s, 1H), 3.85 (t, 2H), 3.67 (t, 2H), 3.61 (t, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.86 (t, 2H) ppm. MS (apci, m/z) = 410.1, 412.1 (M+H).

실시예 61

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 44에 따라, 단계 1에서 4-에틸-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (2.1 mg, 21%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.01 (s, 1H), 7.02 (dd, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.77 (m, 1), 4.48 (t, 1H), 4.03 (t, 2H), 3.76-3.67 (m, 4H), 3.21 (s, 3H), 3.02 (t, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.08 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 408.1 (M+H).

실시예 62

8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1-5. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 실시예 41, 단계 1-5에 따라, 단계 1에서 2-플루오로아닐린 대신에 4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로아닐린으로 대체하여 제조하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (156 mg, 94%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 596.1 (M+H).

단계 6. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 0℃에서 THF (2.5 mL) 중 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (156 mg, 0.262 mmol)의 용액에 Pd(Pt-Bu₃)₂ (13.4 mg, 0.026 mmol), 및 이어서 메틸아연(II) 클로라이드 (132 μL, 0.265 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 빙조로부터 제거하고, 10분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NH₄Cl (40 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (89.9 mg, 71%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 484.2 (M+H).

단계 7. 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (89.9 mg, 0.186 mmol)을 ACN (750 μL) 중에 용해시키고, 인산 (750 μL)을 첨가하였다. 반응물을 60℃로 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (50 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (2 x 15 mL)로 세척하였다. 합한 유기 층을 포화 중탄산나트륨 (25 mL), 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (65.9 mg, 83%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.00 (s, 1H), 6.97 (dd, 1H), 6.90-6.79 (m, 2H), 6.48 (t, 1H), 4.44 (t, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.76-3.68 (m, 4H), 3.22 (s, 3H), 3.03 (t, 2H), 2.09 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 428.1 (M+H).

실시예 63

2-(2,2-디플루오로에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 실시예 44, 단계 1에 따라, 4-에틸-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (0.373 g, 69%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 393.1 (M+H).

단계 2. 메틸 (E)-4-(2-((2,2-디플루오로에톡시)이미노)에틸)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 실시예 6, 단계 5에 따라, 메틸 (Z)-2-클로로-4-(2-에톡시비닐)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 대신에 메틸 (Z)-4-(2-에톡시비닐)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트, 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 대신에 O-(2,2-디플루오로에틸)히드록실아민 히드로클로라이드로 대체하여 제조하여 메틸 (E)-4-(2-((2,2-디플루오로에톡시)이미노)에틸)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (100%로 추정됨)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 444.1 (M+H).

단계 3. 2-(2,2-디플루오로에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. MeOH (0.8 mL) 중 메틸 (E)-4-(2-((2,2-디플루오로에톡시)이미노)에틸)-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (36 mg, 0.081 mmol)의 용액에 소듐 시아노보로히드라이드 (26 mg, 0.406 mmol) 및 아세트산 (23 μL, 0.406 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 45℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 주위 온도에서 72시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO₃ (25 mL) 및 EtOAc (25 mL)로 희석하였다. 유기 상들을 분리하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 5-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 2-(2,2-디플루오로에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (11.8 mg, 35.2%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 11.26 (s, 1H), 7.08 - 6.94 (m, 2H), 6.91 - 6.76 (m, 1H), 6.51 - 5.64 (m, 2H), 4.22 (td, 2H), 3.73 (t, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.04 - 2.97 (m, 2H), 2.48 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 414.1 (M+H).

실시예 64

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 2,6-디클로로-4-아이오도니코틴산의 제조. THF (30 mL) 중 2,6-디클로로-4-아이오도피리딘 (4.0 g, 14.6 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시켰다. LDA (10.95 mL, 2 M, 21.9 mmol)를 용액에 -78℃에서 적가하고, -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 과량의 CO₂ 기체를 -78℃에서 20분 동안 반응 용액 내로 버블링하였다. 이어서, 반응 혼합물을 드라이 아이스 (10 g)에 붓고, 물 (30 mL)로 켄칭하였다. 반응물을 2 N HCl을 사용하여 pH 3-4로 조정하고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 2,6-디클로로-4-아이오도니코틴산 (3.0 g, 64.6%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 317.9, 319.8 (M+H).

단계 2. 2-클로로-4-아이오도-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산의 제조. NaOH의 용액 (100 mL, 4 M, 236 mmol)을 110℃로 가열한 다음, 2,6-디클로로-4-아이오도니코틴산 (3.0 g, 9.44 mmol)을 1 부분으로 첨가하고, 8시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 HCl (6 M)을 사용하여 pH 1로 조정하고, 30분 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 진공 하에 건조시켜 2-클로로-4-아이오도-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산 (3.0 g, 추정치 100%)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS (apci, m/z) = 299.9, 301.9 (M+H).

단계 3. 메틸 2-클로로-4-아이오도-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. DMF (30 mL) 중 2-클로로-4-아이오도-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실산 (3.0 g, 10.02 mmol)의 혼합물에 25℃에서 MeI (4.27 g, 30.06 mmol) 및 K₂CO₃ (4.15 g, 30.06 mmol)을 1 부분으로 첨가하였다. 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 포화 NH₄Cl (10 mL)에 붓고, 수성 상을 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 2-100% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 2-클로로-4-아이오도-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (850 mg, 25.9%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.16 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.65 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 327.9 (M+H).

단계 4. 메틸 2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(1-페닐비닐)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 1,4-디옥산 (10 mL) 및 물 (1 mL) 중 메틸 2-클로로-4-아이오도-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (0.2 g, 0.611 mmol)의 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1-페닐비닐)-1,3,2-디옥사보롤란 (0.148 g, 0.641 mmol), Pd(dppf)Cl₂ (50 mg, 0.061 mmol), Na₂CO₃ (0.194 g, 1.83 mmol) 및 H₂O (1 mL)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 3회 탈기하고, 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1-페닐비닐)-1,3,2-디옥사보롤란 (37 mg, 0.153 mmol) 및 Pd(dppf)Cl₂ (50 mg, 0.061 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3회 탈기하고, 80℃에서 추가로 1.5시간 동안 교반하였다. 냉각된 혼합물을 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-20% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(1-페닐비닐)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (95 mg, 51%)를 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.33-7.32 (m, 3H), 7.32-7.25 (m, 2H), 6.58 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 5.42 (s, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.36 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 303.7 (M+H).

단계 5. 메틸 2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(1-페닐비닐)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. THF (5 mL) 중 4-브로모-2-플루오로아닐린 (56 mg, 0.29 mmol)의 용액에 -78℃에서 LiHMDS (0.74 mL, 1.0 M, 0.74 mmol)를 첨가하고, -78℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 이어서, THF (0.5 mL) 중 메틸 2-클로로-1-메틸-6-옥소-4-(1-페닐비닐)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (90 mg, 0.296 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl 용액 (5 mL)으로 켄칭하고 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (5 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-20% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(1-페닐비닐)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (120 mg, 89%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 459.2 (M+H).

단계 6. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2,4-디메톡시벤질)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. 톨루엔 (10 mL) 중 메틸 2-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-4-(1-페닐비닐)-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (120 mg, 0.29 mmol)의 용액에 N₂ 하에 25℃에서 DMB-NH₂ (43.8 mg, 0.26 mmol) 및 AlMe₃ (0.4 mL, 2.0 M, 0.79 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 48시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl 용액 (5 mL)으로 켄칭하고, 여과하였다. 여과물을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하고, 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2,4-디메톡시벤질)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (80.0 mg, 52%)을 수득하였다. MS (apci, m/z) = 594.2 (M+H).

단계 7. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온. TFA (5 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2,4-디메톡시벤질)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (80 mg, 0.14 mmol)의 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 냉각된 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 MeOH (5 mL) 중에 용해시켰다. NaHCO₃ 고체 (~1 g)를 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반한 다음, DCM (20 mL)으로 처리하고, 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 정제용 HPLC (정제용 HPLC 조건: 칼럼: 보스톤 프라임 C18 150*25 mm*5 um; 이동상: 물 (0.225% 암모니아 히드록시드 v/v)-ACN; B%: 40%-70%, 유량(ml/분): 25)에 의해 정제하였다. 분획을 동결건조시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (5.49 mg, 9%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.49 (d, 1H), 7.40-7.32 (m, 6H), 6.93 (t, 1H), 5.76 (s, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.66 (d, 2H), 3.24 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 442.2, 444.1 (M+H).

실시예 65

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 64에 따라, 단계 5에서 4-브로모-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (21 mg, 29%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, d₆-DMSO) δ 11.71 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.40 -7.25 (m, 6H), 7.08 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.13 (t, 1H), 3.54 (bs, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.05 (s, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 410.1 (M+H).

실시예 66

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 64에 따라, 단계 4에서 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1-페닐비닐)-1,3,2-디옥사보롤란 대신에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(프로프-1-엔-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란으로 대체하여 제조하여 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3 mg, 13%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.48 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 6.88 (t, 1H), 6.15 (s, 1H), 3.51 (dd, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.20-3.15 (m, 1H), 2.99-2.86 (m, 1H), 1.33 (d, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 380.0, 382.2 (M+H).

실시예 67

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 64에 따라, 단계 4에서 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1-페닐비닐)-1,3,2-디옥사보롤란 대신에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(프로프-1-엔-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란, 및 단계 5에서 4-브로모-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3.8 mg, 22%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.16 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.92 (t, 1H), 6.09 (s, 1H), 3.51 (dd, 1H), 3.19 (s, 3H), 3.17-3.15 (m, 1H), 2.99-2.94 (m, 1H), 2.51 (s, 3H),1.33 (d, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 348.1 (M+H).

실시예 68

8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

단계 1. 1-에톡시프로프-1-인의 제조. 무수 NH₃ (300 mL)을 반응 플라스크에서 -70℃에서 응축시키고, 분쇄된 Fe(NO₃)₃·9H₂O (252 mg, 0.625 mmol)를 천천히 교반하면서 첨가하였다. 고체 NaNH₂ (34.14 g, 0.875 mol)를 -60 내지 -40℃에서 10분에 걸쳐 첨가한 다음, 2-클로로-1,1-디에톡시에탄 (38.15 g, 0.25 mol)을 이 온도에서 30분의 기간에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 -30℃에서 1시간 동안 환류한 후, MeI (177.42 g, 1.25 mol)를 30분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 이 온도에서 90분 동안 격렬히 교반한 다음, 냉각된 포화 NH₄Cl 용액 (40 mL), 및 이어서 Et₂O (100 mL) 및 추가의 포화 NH₄Cl (50 mL)을 적가하여 조심스럽게 켄칭하였다. 냉각 조를 제거하고, 반응 혼합물을 15℃로 가온되도록 하였다. 물 (50 mL)을 첨가하고, 유기 층을 분리하고, 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 합한 수용액을 Et₂O (50 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하여 1-에톡시프로프-1-인의 ~1.3 M 에테르성 용액 (100 mL, 52%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 3.99 (q, 2H), 1.73 (s, 3H), 1.32 (t, 3H) ppm.

단계 2. (Z)-2-(1-에톡시프로프-1-엔-2-일)벤조[d][1,3,2]디옥사보롤란의 제조. 톨루엔 (50 mL) 중 벤조[d][1,3,2]디옥사보롤 (1.43 g, 11.89 mmol)의 용액에 N₂ 하에 1-에톡시프로프-1-인 (7.7 mL, 1.3 M/Et₂O, 11.89 mmol) 및 NiCl₂(dppe) (314 mg, 0.59 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3회 탈기하고, 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여 (Z)-2-(1-에톡시프로프-1-엔-2-일)벤조[d][1,3,2]디옥사보롤란 (1.5 g, 62%)의 톨루엔 용액을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.

단계 3. 메틸 (E)-2-클로로-4-(1-에톡시프로프-1-엔-2-일)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 톨루엔 (50 mL) 및 THF (30 mL) 중 (Z)-2-(1-에톡시프로프-1-엔-2-일)벤조[d][1,3,2]디옥사보롤 (1.5 g, 7.33 mmol)의 용액에 메틸 2-클로로-4-아이오도-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (1.2 g, 3.66 mmol), Pd(dppf)Cl₂ (299 mg, 0.37 mmol), K₃PO₄ (2.33 g, 10.99 mmol) 및 H₂O (3 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 3회 탈기하고, 75℃에서 3시간 동안 교반하였다. 냉각된 혼합물을 여과하였다. 여과물을 EtOAc (50 mL)로 희석한 다음, 물 (3 x 10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 메틸 (E)-2-클로로-4-(1-에톡시프로프-1-엔-2-일)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (650 mg, 62%)를 수득하였다. MS (apci, m/z) = 286.0 (M+H).

단계 4. 메틸 (E/Z)-4-(1-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)프로판-2-일)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조. 디옥산 (10 mL) 중 메틸 (E)-2-클로로-4-(1-에톡시프로프-1-엔-2-일)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (600 mg, 2.1 mmol) 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (356 mg, 2.1 mmol)의 용액에 TEA (212 mg, 2.1 mmol) 및 HCl (1 mL, 4 M/디옥산, 4.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 1,4-디옥산 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 여과하고, 농축시켜 메틸 (E/Z)-4-(1-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)프로판-2-일)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (780 mg, 99.6%)를 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS (apci, m/z) = 317.1 (M+H - t-Bu).

단계 5. 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-클로로-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. IPA (10 mL) 중 메틸 (E/Z)-4-(1-((2-(tert-부톡시)에톡시)이미노)프로판-2-일)-2-클로로-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (780 mg, 2.09 mmol)의 용액에 NaCNBH₃ (657 mg, 10.46 mmol) 및 AcOH (628 mg, 10.46 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 48시간 동안 교반하였다. EtOAc (100 mL)를 첨가하고 혼합물을 포화 NaHCO₃ (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 0-40% EtOAc/석유 에테르로 용리시키면서 정제하여 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-클로로-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (200 mg, 28%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.31 (s, 1H), 4.10-4.06 (m, 2H), 3.84 (dd, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.59-3.53 (m, 3H), 3.06-3.05 (m, 1H), 1.31 (d, 3H), 1.15 (s, 9H) ppm. MS (apci, m/z) = 343.1 (M+H).

단계 6. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. THF (8 mL) 중 4-브로모-2-플루오로아닐린 (55 mg, 0.29 mmol)의 용액에 N₂ 하에 -78℃에서 LiHMDS (0.73 mL, 1 M, 0.73 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반한 다음, THF (2 mL) 중 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-클로로-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (100 mg, 0.29 mmol)의 용액을 적가하고, -78℃에서 30분 동안 교반을 계속하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl (5 mL)로 처리하고, EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (144.8 mg, 100%)을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS (apci, m/z) = 496.2 (M+H).

단계 7. 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 제조. TFA (5 mL) 중 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (144.8 mg, 0.292 mmol)의 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, MeOH (10 mL) 중에 용해시키고, NaHCO₃ 고체 (73 mg, 0.876 mmol)로 처리하였다. 30분 동안 교반한 후, DCM (50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 여과하고, 농축시키고, 정제용 HPLC (정제용 HPLC 조건: 칼럼: 워터스 엑스브리지 150*25 mm 10 um; 이동상: 물 (0.05% 암모니아 히드록시드 v/v)-ACN; B%:24%-64%, 유량(ml/분): 25)에 의해 정제하였다. 깨끗한 분획을 동결건조시켜 8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (34.8 mg, 27%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.38 (d, 1H), 7.26 (d, 1H), 6.82 (t, 1H), 6.02 (s, 1H), 3.98 (t, 2H), 3.82 (dd, 1H), 3.66 (t, 2H), 3.64-3.50 (m, 1H), 3.12 (s, 3H), 3.09-3.08 (m, 1H), 1.29 (d, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 440.1 (M+H).

실시예 69

8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온

실시예 68에 따라, 단계 6에서 4-브로모-2-플루오로아닐린 대신에 2-플루오로-4-(메틸티오)아닐린으로 대체하여 제조하여 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (27.5 mg, 23%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.16 (d, 1H), 7.10 (d, 1H), 6.99 (t, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.05 (t, 2H), 3.91 (dd, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.60 (dd, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.19-3.15 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 1.40 (d, 3H) ppm. MS (apci, m/z) = 408.2 (M+H).

실시예 70

무수 결정질 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1의 제조

인산 (37.4 g, 25.8 mL, 14.8 몰, 50 당량, 382 mmol)을 아세토니트릴 (ACN) 중 본원에 개시된 임의의 방법에 따라 제조될 수 있는 2-(2-(tert-부톡시)에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3.43 g, 1 당량, 7.63 mmol)의 교반 용액에 공기 하에 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 가온하고, 15분 동안 교반한 후, LCMS는 완전한 반응을 나타냈다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, K₃PO₄ (382 mL, 1 M, 382 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 담황색 발포체를 수득하였다. 조 잔류물을 80 g 실리카 카트리지 상에서 먼저 디클로로메탄 (DCM) 중 0%에서 15% 메탄올의 구배, 이어서 DCM 중 20% 메탄올로 증가시키면서 용리시키면서 정제하여 생성물을 담황색 발포체 (2.17 g)로서 수득하였다. 이를 DCM (50 mL) 중에 용해시키고, 노리트 CA1 활성탄 (600 mg)으로 처리하고, 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 GF 페이퍼를 통해 여과하고, 잔류물을 농축시켜 담황색 발포체를 수득하였다. 이 절차를 다르코 G-60 활성탄을 사용하여 반복하여 생성물을 연분홍색 발포체로서 수득하였다. 이 물질을 2-프로판올 (20 mL)로 처리하고, DCM (5 mL)을 첨가하여 완전히 가용화시켰다. 혼합물을 농축시키고, 그 동안 고체가 형성되기 시작하였지만, 완전히 농축되면 물질은 오일이 되었다. 잔류물을 2-프로판올 (10 mL)로 처리하고, 40℃로 가온하였으며, 이 때 농후한 침전물이 나타났다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 차가운 2-프로판올 (5 mL)로 희석하여 교반을 용이하게 하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 차가운 2-프로판올 15 mL를 세정 및 세척에 사용하여, 진공 하에 건조시킨 후 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1 (1.61 g, 4.09 mmol, 53.6%)을 회백색 고체로서 수득하였다. 도 1은 이 방법에 따라 제조된 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1의 분말 X선 회절 패턴을 도시하며, 여기서 PXRD 분석은 실시예 77에 기재된 기기 방법을 사용하여 수행되었다.

실시예 71

결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2의 시드 결정의 제조

단계 1: 메틸 4-브로모-2-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (본원에 기재된 임의의 방법에 따라 제조됨) (1.0 당량, 7.5 kg), XPhos (0.075 당량) 및 MeThF (10 부피)를 반응기에 첨가하고, 반응물을 탈기하였다. Pd(II) 아세테이트 (0.015 당량)를 반응기에 충전하고, 반응물을 탈기하였다. (Z)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (0.8 당량) 및 폭기된 45 wt% KOH 용액 (4 당량)을 반응기에 충전하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 가열한 후, 추가의 (Z)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (0.3 당량)을 첨가하고, 가열을 추가 1시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (2 부피), 및 이어서 1 M 아세트산 (2 당량)으로 세척한 다음, 실리아메트S(SiliaMetS)® 티올 (실리사이클 인크., 캐나다 퀘벡 시티) (0.3 g/g)과 함께 50℃에서 18시간 동안 교반한 후, 여과하였다. 필터 케이크를 MeTHF (5 부피)로 세척하였다. 유기 층을 3 부피로 농축시키고, 작은 부분을 제거하고, 냉각시켜 시드 결정을 생성하였다. 시드 결정을 반응기에 다시 채우고, 50℃에서 1시간 동안 교반되도록 한 후, 30℃로 천천히 냉각시켰다. 이어서, MeTHF/헵탄 1:4 (5 부피)를 반응기에 천천히 충전하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 10℃로 천천히 냉각시키고, 18시간 동안 교반되도록 한 후, 여과하였다. 필터 케이크를 MeTHF/헵탄 1:1 (5 부피)로 세척하였다. 이어서, 고체를 진공 오븐에서 건조시켜 메틸 4-[(Z)-2-에톡시에테닐]-2-[2-플루오로-4-(메틸술파닐)아닐리노]-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트를 수득하였다.

단계 2: 메틸 4-[(Z)-2-에톡시에테닐]-2-[2-플루오로-4-(메틸술파닐)아닐리노]-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (5.0 g, 12.5 mmol)를 2-메틸테트라히드로푸란 (20 부피) 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (1.3 당량, 16.3 mmol)와 합하고, 대략 75℃로 가열하였다. 생성된 혼합물을 20℃로 냉각시켰다. 보란-피리딘 착물 (2.0 당량, 25.0 mmol), 및 또한 시클로펜틸 메틸 에테르 (CPME) 중 HCl (3 M, 1.3 당량, 16.3 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20℃에서 45분 동안 교반한 다음, 60℃로 가열하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 20℃로 냉각시키고, HCl (1 M, 30 mL)로 켄칭하였다. 이 시간 동안, 약간의 버블링 및 발열이 관찰되었다. 가스 배출이 완료된 것으로 나타난 후 (~5분), 유기 층을 분리하고, 물 (8 부피)로 세척하고, 감압 증류를 통해 대략 6 부피로 농축시켰다. 이 때, 인산 (14.6 M, 15 당량, 187 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 65℃에서 교반하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 2-메틸테트라히드로푸란 (7 부피)으로 희석하였다. 수산화칼륨의 용액 (11.5 M, 20 당량)을 천천히 첨가하였다. 대략 10분 동안 교반한 후, 층을 분리되도록 하였다. 유기 상을 물 (10 부피)로 세척한 후, 감압 증류 하에 대략 5 부피로 농축시켜 2-메틸테트라히드로푸란 중 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 용액을 수득하였다. 시클로펜틸 메틸 에테르 (2 부피)를 대략 40℃로 가온한 후, 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이 시간 동안 고체가 침전되었다. 용매를 감압 증류를 통해 CPME (대략 8 부피)로 교환하고, 생성된 현탁액을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 고체를 수집하고, 진공 하에 45℃에서 건조시켜 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 수득하였다. 결정질 형태를 실시예 77에 기재된 기기 방법을 사용하여 PXRD 분석에 의해 확인하였다.

실시예 72

결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2의 제조

실시예 71, 단계 1에 기재된 바와 같이 제조된 메틸 4-[(Z)-2-에톡시에테닐]-2-[2-플루오로-4-(메틸술파닐)아닐리노]-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (2.0 g, 5.0 mmol)를 2-메틸테트라히드로푸란 (20 부피)과 합하고, 대략 75℃로 가열하였다. O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (1.3 당량, 6.50 mmol)를 혼합물에 첨가하고, 생성된 혼합물을 20℃로 냉각시켰다. 보란-피리딘 착물 (2.0 당량, 10.0 mmol), 및 또한 시클로펜틸 메틸 에테르 (CPME) 중 HCl (3 M, 1.3 당량, 6.5 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60℃에서 교반하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 20℃로 냉각시키고, HCl (1 M, 12 mL)로 켄칭하였다. 이 시간 동안, 약간의 버블링 및 발열이 관찰되었다. 반응이 완료된 것으로 나타난 후 (~5분), 유기 층을 분리하고, 물 (8 부피)로 세척하고, 감압 증류를 통해 대략 6 부피로 농축시켰다. 이 때, 인산 (14.6 M, 15 당량, 75.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 65℃에서 교반하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 2-메틸테트라히드로푸란 (7 부피)으로 희석하였다. 수산화칼륨의 용액 (11.5 M, 20 당량)을 천천히 첨가하였다. 대략 10분 동안 교반한 후, 층을 분리되도록 하였다. 유기 상을 물 (10 mL)로 세척한 후, 감압 증류로 대략 5 부피로 농축시켰다. 이어서, 혼합물을 50℃로 가열하고, 시클로펜틸 메틸 에테르 (2 부피)를 첨가하였다. 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2 (실시예 71에 기재된 바와 같이 제조됨)의 시드를 이 때 첨가하고, 생성된 현탁액을 30℃로 냉각시켰다. 용매를 감압 증류를 통해 시클로펜틸 메틸 에테르 (대략 9 부피)로 교환하고, 생성된 현탁액을 40℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 밤새 교반하였다. 생성된 고체를 수집하고, 시클로펜틸 메틸 에테르 (4 부피)로 세척하고, 진공 하에 45℃에서 건조시켜 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 수득하였다. 도 2는 이 방법에 따라 제조된 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2의 분말 X선 회절 패턴을 도시하며, 여기서 PXRD 분석은 실시예 77에 기재된 기기 방법을 사용하여 수행되었다.

실시예 73

결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 시드 결정의 제조

반응기에 실시예 71, 단계 1에 기재된 바와 같이 제조된 2-메틸테트라히드로푸란 (20 부피)의 메틸 4-[(Z)-2-에톡시에테닐]-2-[2-플루오로-4-(메틸술파닐)아닐리노]-1-메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복실레이트 (5.0 kg; 한계 시약 - 모든 후속물이 이 양을 기준으로 충전됨), 및 O-(2-(tert-부톡시)에틸)히드록실아민 히드로클로라이드 (2.89 kg)를 충전하였다. 후속 혼합물을 70℃로 가열하였다. 반응이 완료된 후, 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 보란-피리딘 (8 M, 3.3 L) 및 CPME 중 HCl (3 M, 5.95 L)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 교반하였다. 환원이 완료된 후, 고리화가 완료될 때까지 혼합물을 65℃로 가열하였다. 반응물을 25℃로 냉각시키고, 1 M HCl (6 부피)로 켄칭하고, 물 (8 부피)로 세척하였다. 유기 층을 대략 7 부피로 농축시켰다. 인산 (13.1 L)을 충전하고, 탈보호가 완료될 때까지 생성된 혼합물을 60℃로 가열하였다. 반응물을 물 (7 부피) 중에 용해된 수성 45 중량% 수산화칼륨 (22.8 L)으로 켄칭한 다음, 물 (10 부피)로 세척하였다. 이어서, 유기부를 스펙 프리 필터를 통해 여과하였다. 45℃의 반응 온도에서, 유기 층을 대략 5 부피로 농축시키고, 물 함량을 KF로 측정하고, 5% 물로 조정하였다. 반응 혼합물의 대략 5%를 제거하고, 20℃로 냉각시켜 슬러리를 수득하고, 이를 반응기에 다시 충전하여 벌크를 시딩하였다. 45℃에서 3시간 동안 교반한 후, 용매를 5%-10% 잔류 2-MeTHF 및 적어도 0.5%의 KF를 갖는 CPME (8 부피)로 교환하였다. 이어서, 반응물을 3시간에 걸쳐 15℃로 냉각시키고, 8시간 동안 과립화하였다. 고체를 수집하고, CPME (4 부피)로 세척하였다. 고체를 진공 하에 건조시켜 잔류 용매를 제거하였다. 건조 공정은 고체 형태를 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2로 탈수시켰다. 이어서, 생성된 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 오븐 (진공 없음) 내 25-40℃에서 물의 트레이로 재수화시켰다. 최종 고체를 재수화시켜 KF 및 PXRD 분석에 기초하여 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 수득하였으며, 여기서 PXRD 분석은 실시예 77에 기재된 기기 방법을 사용하여 수행되었다.

실시예 74

시딩된 결정화에 의한 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 제조

반응기에 2-MeTHF (6 부피, 19 L) 및 물 (0.27 부피, 0.87 L)을 충전하였다. 실시예 6, 방법 A 또는 B에 따라 제조된 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (3.22 kg)을 첨가하고, 혼합물을 65℃로 가열하였다. 이 시간 동안, 고체를 용해시키고, 용액을 수득하였다. 혼합물을 45℃로 냉각시키고, 실시예 73에서 제조된 바와 같은 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 시드를 첨가하였다. 혼합물을 대략 2시간 동안 교반한 후, 헵탄 (4 부피)을 3시간에 걸쳐 천천히 충전하였다. 혼합물을 4시간에 걸쳐 15℃로 냉각시키고, 적어도 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 고체를 수집하고, 50:50 헵탄/2-MeTHF (4 부피, 13 L)로 세척하였다. 고체를 진공 하에 건조시켜 잔류 용매를 제거하였다. 건조 공정은 고체 형태를 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2로 탈수시켰다. 이어서, 생성된 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2를 오븐 (진공 없음) 내 25-40℃에서 물의 트레이로 재수화시켰다. 오븐에서 8-24시간 동안 정치시킨 후, 고체를 재수화시켜 KF 및 PXRD 분석에 기초하여 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 수득하였다.

실시예 75

결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 대안적 제조

실시예 6, 방법 A 또는 B에 따라 제조된 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 (404.88 mg)을 자기 교반하면서 2-프로판올 (1.50 mL, 3.7 부피)과 합하였다. 혼합물을 60℃로 가열하였다. 이 시간 동안, 혼합물은 균질해지고, 암적색이 되었고, 모든 고체가 용해되었다. 물 (2.5 mL, 6.2 부피)을 첨가하고, 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 2시간 동안 교반하였다. 이 시간 동안, 고체가 침전되었고, 혼합물은 매우 농후해졌다. 이 때 더 큰 교반 막대를 첨가하였다. PXRD로의 분석을 위해 분취물을 취하고, 혼합물을 실온에서 교반되도록 하였다. 밤새 교반한 후, 고체를 수집하고, 9:1 2-프로판올:물 (2 x 1.00 mL)로 세척하였다. 예열된 오븐에서 50℃에서 물의 팬으로 3시간 동안 건조시킨 후, 벤치 상에서 캡핑하지 않고 밤새 정치시켰다. 371 mg, 91% 회수율. 단리된 물질은 PXRD 분석에 의해 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3인 것으로 결정되었다. 도 3은 이 방법에 따라 제조된 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 분말 X선 회절 패턴을 도시하며, 여기서 PXRD 분석은 실시예 77에 기재된 기기 방법을 사용하여 수행되었다.

실시예 76

결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 수분 수착 분석

자동화 증기 수착 분석기 (TA 인스트루먼츠 Q5000 SA) 상에서 물 수착 및 탈착 연구를 수행하였다. 100 mg 표준 중량을 사용하여 미량천칭을 보정하였다. 상대 습도 센서를 포화 염 용액을 사용하여 5.0, 11.3, 32.8, 52.8, 75.3, 및 84.3% RH (25℃)에서 보정하였다. 대략 10-20 mg의 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3을 석영 샘플 홀더에 넣고 25℃에서 ≤ 3% 상대 습도 (RH)에서 건조시켰다. 이어서, RH를 0%에서 40% RH로 5%의 증분으로 점진적으로 증가시킨 후, 0%의 최종 RH로 5% RH 증분으로 감소시켰다. 120분의 최대 평형 시간을 모든 단계에 사용하였다. 각각의% RH 단계에서의 중량 증가는 0% RH에서의 초기 건조 단계 후의 중량을 기준으로 한다. 평형을 평가하는 데 샘플의 중량 변화를 이용하지 않았고, 대신에 모든 단계를 120분으로 프로그램화하였다. 데이터 수집이 완료된 후, 데이터 분석을 상업적으로 입수가능한 TA 유니버셜 어낼러시스 소프트웨어 및 마이크로소프트 엑셀을 사용하여 수행하였다.

도 5는 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 수착 등온선을 도시한다. 도 5에 도시된 바와 같이, 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3은 PXRD 분석에 의해 확인된 바와 같이 15% RH 및 25℃에서 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2로 탈수된다. PXRD 분석에 의해 확인된 바와 같이, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2는 25℃에서 25% RH에서 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3으로 재수화된다. 이 분석에 기초하여, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2는 25℃에서 10% RH 미만에서 안정하고, 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3은 25℃에서 30% RH 초과에서 안정하다.

실시예 77

PXRD에 의한 고체 형태 분석을 위한 일반적 절차

기기 방법

무수 결정질 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1, 무수 결정질 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2, 및 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온 형태 4의 분말 X선 회절 분석을 Cu 방사선원이 장착된 리가쿠 미니플렉스 6G 회절계를 사용하여 수행하였다. 규소 저 배경 샘플 홀더 (2 mm x 0.5 mm 웰)를 사용하여 샘플을 제조하였다. 회절된 방사선을 D/teX 울트라2 검출기에 의해 검출하였다. X선 튜브 전압 및 암페어수를 각각 40 kV 및 15 mA로 설정하였다. 미니플렉스 측각기에서 0.02°의 스텝 및 2.00°/분의 스텝 속도를 사용하여 3.0 내지 45.0° 2-세타의 Cu 파장에서 데이터를 수집하였다. 입사 슬릿 박스를 1.25°로 설정하고, 길이 제한 슬릿을 10 mm로 설정하였다. 샘플을 수집 동안 10 RPM으로 회전시켰다. 데이터를 리가쿠 소프트웨어 스마트랩 스튜디오 II를 사용하여 *txt 파일로 보내고, EVA 회절 플러스 소프트웨어로 분석하였다. 실시예 76에 의해 나타난 바와 같이, 무수 형태 2는 25℃에서 25% RH에서 1수화물 형태 3으로 재수화된다. 따라서, PXRD에 의한 무수 형태 2의 분석을 대략 25℃ 및 10% 미만의 상대 습도에서 수행하였다.

결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3의 분말 X선 회절 분석을 Cu 방사선원이 장착된 브루커 AXS D8 엔데버 회절계를 사용하여 수행하였다. 발산 슬릿을 10 mm 연속 조명으로 설정하였다. 4.11도로 설정된 검출기 PSD 개구를 갖는 PSD-링스 아이 검출기에 의해 회절된 방사선을 검출하였다. X선 튜브 전압 및 암페어수를 각각 40 kV 및 40 mA로 설정하였다. 3.0 내지 40.0도 2-세타의 세타-세타 측각기에서의 Cu 파장 (CuKα = 1.5418 λ)에서 데이터를 수집하였다. 0.02°의 스텝 크기 및 0.3초의 스텝 시간을 사용하였다. 산란방지 스크린을 1.5 mm의 고정된 거리로 설정하였다. 데이터 수집 동안 샘플을 회전시켰다. 규소 저 배경 샘플 홀더에 넣어 샘플을 제조하고, 수집 동안 회전시켰다. 데이터를 브루커 디프랙 플러스(Bruker DIFFRAC Plus) 소프트웨어를 사용하여 수집하고, 분석을 EVA 회절 플러스 소프트웨어에 의해 수행하였다. PXRD 데이터 파일은 피크 탐색 전에 프로세싱하지 않았다. EVA 소프트웨어에서 피크 검색 알고리즘을 사용하여, 1의 임계값을 갖는 것으로 선택된 피크를 사용하여 예비 피크 배정을 수행하였다. 유효성을 보장하기 위해, 수동으로 조정하고; 자동화 할당의 출력을 시각적으로 체크하고, 피크 위치를 피크 최대치로 조정하였다. ≥ 3%의 상대 강도를 갖는 피크를 일반적으로 선택하였다. 전형적으로, 해상되지 않거나 노이즈와 일치하는 피크는 선택하지 않았다. USP에서 언급된 PXRD로부터의 피크 위치와 연관된 전형적인 오차는 최대 +/- 0.2° 2-세타 (USP-941)이다. 실시예 76에 의해 나타난 바와 같이, 1수화물 형태 3은 15% RH 및 25℃에서 무수 형태 2로 탈수된다. 따라서, PXRD를 사용한 1수화물 형태 3의 PXRD 분석을 대략 25℃ 및 30% 초과의 상대 습도에서 수행하였다.

PXRD 피크 선별 파라미터

EVA 소프트웨어에서 피크 검색 알고리즘을 사용하여, 1의 임계값을 갖는 것으로 선택된 피크를 사용하여 예비 피크 배정을 수행하였다. 유효성을 보장하기 위해, 수동으로 조정하고; 자동화 할당의 출력을 시각적으로 체크하고, 피크 위치를 피크 최대치로 조정하였다. ≥ 3%의 상대 강도를 갖는 피크를 일반적으로 선택하였다. 전형적으로, 해상되지 않거나 노이즈와 일치하는 피크는 선택하지 않았다. USP에서 언급된 PXRD로부터의 피크 위치와 연관된 전형적인 오차는 최대 +/- 0.2° 2-세타 (USP-941)이다.

본 발명의 범주 또는 취지를 벗어나지 않으면서 본 발명에서 다양한 변형 및 변경이 이루어질 수 있다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 본 발명의 다른 실시양태는 본원에 개시된 본 발명의 명세서 및 실시를 고려하여 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 명세서 및 실시예는 단지 예시적인 것으로 간주되며, 본 발명의 진정한 범주 및 취지는 하기 청구범위에 의해 제시되는 것으로 의도된다.

특허, 특허 출원, 논문, 교과서 등을 비롯한 본원에 인용된 모든 참고문헌, 및 여기서 인용된 참고문헌은 그들이 이미 존재하지 않는 정도로 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 정의된 용어, 용어 용법, 기재된 기술 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는, 포함된 문헌 및 유사한 자료 중 하나 이상이 본 출원과 상이하거나 모순되는 경우, 본 출원이 우선한다.

2021년 3월 31일에 출원된 미국 특허 가출원 번호 63/168,456 및 2022년 2월 11일에 출원된 미국 특허 가출원 번호 63/309,346의 내용은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.

Claims (50)

1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물:
   
   여기서:
   R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;
   R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;
   R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;
   R⁴는 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환된 페닐이다.
2. 제1항에 있어서, R¹이 H인 제약 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R²가 H인 제약 조성물.
4. 제1항 또는 제2항에 있어서, R²가 CH₃-인 제약 조성물.
5. 제1항 또는 제2항에 있어서, R³이 히드록시C1-C6 알킬-인 제약 조성물.
6. 제1항 또는 제2항에 있어서, R⁴가 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐인 제약 조성물.
7. 제1항 또는 제2항에 있어서, R⁴가 할로겐 및 C1-C6 알킬티오로부터 독립적으로 선택되는 1 또는 2개의 치환기로 치환된 페닐인 제약 조성물.
8. 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물:
   
   여기서,
   R¹은 H, Br, C1-C6 알킬 또는 페닐이고;
   R²는 H, 할로겐 또는 CH₃-이고;
   R³은 H, 히드록시C1-C6 알킬-, 히드록시C1-C6 알콕시-, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 또는 (C3-C6 시클로알킬)C1-C6 알콕시-이고;
   R^a 및 R^b는 독립적으로 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬티오, 플루오로C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 플루오로C1-C6 알콕시, C3-C6 시클로알킬, 및 C1-C6 알킬-C(=O)-로부터 선택된다.
9. 제8항에 있어서, R^a가 할로겐인 제약 조성물.
10. 제8항 또는 제9항에 있어서, R^b가 할로겐, C1-C6 알킬, C1-C6 알킬티오 또는 플루오로C1-C6 알콕시인 제약 조성물.
11. 제1항에 있어서, 화합물이 하기로부터 선택되는 것인 제약 조성물:
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-시클로프로필-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(시클로프로필메톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-에톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    2-시클로프로필-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-클로로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2,3-디플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-3-클로로-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-메톡시페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-((트리플루오로메틸)티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-이소프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-클로로-4-시클로프로필페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-아세틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-클로로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-클로로-4-에틸페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-((디플루오로메틸)티오)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-이소프로폭시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    2-에톡시-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-메톡시-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    2-(tert-부톡시)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    (S)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    (R)-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    (S)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    (R)-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시프로폭시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-클로로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    5-클로로-8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5-플루오로-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5-아이오도-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    5-브로모-8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    4-브로모-8-((2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-아이오도-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-프로필페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-에틸-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-시클로프로필-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-클로로페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에틸)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-5,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    2-(2,2-디플루오로에톡시)-8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-7-메틸-4-페닐-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((4-브로모-2-플루오로페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-4,7-디메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온;
    또는 그의 제약상 허용되는 염.
12. 하기 구조를 갖는 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
    
13. 하기 구조를 갖는 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온인 화합물, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
    
14. 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온을 포함하는 결정, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
15. 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
16. 제15항에 있어서, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 1이 5.0, 8.7, 9.3, 10.8, 14.5, 15.3, 18.8 및 20.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 PXRD 피크를 갖는 것을 특징으로 하는 것인 제약 조성물.
17. 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
18. 제17항에 있어서, 결정질 무수 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 2가 7.1, 9.4, 12.4, 12.8, 14.3, 15.6, 16.4, 17.4, 18.5, 18.9, 19.5, 19.9, 21.1, 21.4, 23.2, 23.7, 24.8, 25.6, 27.6, 30.3, 33.2, 33.5 및 37.5도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 특징적인 피크를 포함하는 PXRD 패턴을 갖는 것인 제약 조성물.
19. 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
20. 제19항에 있어서, 결정질 1수화물 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 3이 13.7, 18.0 및 18.3도 2-세타 (± 0.2도 2-세타)에서 PXRD 피크를 갖는 것을 특징으로 하는 것인 제약 조성물.
21. 무정형 8-((2-플루오로-4-(메틸티오)페닐)아미노)-2-(2-히드록시에톡시)-7-메틸-3,4-디히드로-2,7-나프티리딘-1,6(2H,7H)-디온, 형태 4, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
22. 제1항, 제2항, 제8항, 제9항 및 제11항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, MEK-연관 종양의 치료를 필요로 하는 대상체에서 MEK-연관 종양을 치료하기 위한 제약 조성물.
23. 제22항에 있어서, 종양이 V600E, V600K, V600D, V600R 및 V600S로부터 선택되는 BRAF V600 돌연변이를 갖는 것인 제약 조성물.
24. 제22항에 있어서, 종양이 BRAF V600E 돌연변이를 갖는 것인 제약 조성물.
25. 제22항에 있어서, 종양이 CNS 종양인 제약 조성물.
26. 제25항에 있어서, CNS 종양이 두개내 종양인 제약 조성물.
27. 제26항에 있어서, 두개내 종양이 뇌암인 제약 조성물.
28. 제27항에 있어서, 뇌암이 전이성 뇌암인 제약 조성물.
29. 제28항에 있어서, 전이성 뇌암이 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암, 전이성 비소세포 폐암, 전이성 갑상선암 및 전이성 난소암으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
30. 제25항에 있어서, CNS 종양이 두개내 LMD 또는 두개외 LMD인 제약 조성물.
31. 제30항에 있어서, LMD가 전이성 흑색종, 전이성 결장직장암 및 전이성 비소세포 폐암으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
32. 제26항에 있어서, 두개내 종양이 원발성 종양인 제약 조성물.
33. 제32항에 있어서, 원발성 뇌 종양이 악성 종양인 제약 조성물.
34. 제33항에 있어서, 원발성 뇌 종양이 등급 2 신경교종, 등급 3 신경교종 또는 등급 4 신경교종인 제약 조성물.
35. 제32항에 있어서, 원발성 뇌 종양이 양성 종양인 제약 조성물.
36. 제22항에 있어서, 종양이 BRAF 융합체를 갖는 것인 제약 조성물.
37. 제36항에 있어서, 종양이 KIAA11549-BRAF, MKRN1-BRAF, TRIM24-BRAF, AGAP3-BRAF, ZC3HAV1-BRAF, AKAP9-BRAF, CCDC6-BRAF, AGK-BRAF, EPS15-BRAF, NUP214-BRAF, ARMC10-BRAF, BTF3L4-BRAF, GHR-BRAF, ZC3HAV1-BRAF, ZNF767-BRAF, CCDC91-BRAF, DYNC112-BRAF, ZKSCAN1-BRAF, GTF2I-BRAF, MZT1-BRAF, RAD18-BRAF, CUX1-BRAF, SLC12A7-BRAF, MYRIP-BRAF, SND1-BRAF, NUB1-BRAF, KLHL7-BRAF, TANK-BRAF, RBMS3-BRAF, STRN3-BRAF, STK35-BRAF, ETFA-BRAF, SVOPL-BRAF 및 JHDM1D-BRAF로부터 선택되는 BRAF 융합체를 갖는 것인 제약 조성물.
38. 제37항에 있어서, 종양이 유방 암종, 결장직장 암종, 식도 암종, 신경교종, 두경부 암종, 폐 암종, 흑색종, 췌장 암종, 전립선 암종, 육종, 갑상선 암종, 원인불명 원발성 암종, 흉막 중피종, 직장 선암종, 자궁 자궁내막 암종 또는 난소 장액성 암종인 제약 조성물.
39. 제22항에 있어서, 종양이 BRAF 야생형 종양인 제약 조성물.
40. 제22항에 있어서, 1종 이상의 추가의 항암 요법을 추가로 포함하는 제약 조성물.
41. 제40항에 있어서, 추가의 항암 요법이 1종 이상의 항암제로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
42. 제41항에 있어서, 항암제가 BRAF 억제제인 제약 조성물.
43. 제42항에 있어서, BRAF 억제제가 엔코라페닙 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제약 조성물.
44. 제42항에 있어서, BRAF 억제제가 하기로부터 선택되는 것인 제약 조성물:
    N-(3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-2,4-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;
    N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;
    N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4,5-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;
    N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드;
    N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;
    N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-메틸-3-(메틸-d3)-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;
    N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}프로판-1-술폰아미드;
    N-(3-클로로-4-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시)-5-플루오로피리딘-2-일)프로판-1-술폰아미드; 및
    N-{2-클로로-3-[(3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)옥시]-4-플루오로페닐}-3-플루오로프로판-1-술폰아미드;
    또는 그의 제약상 허용되는 염.
45. 제44항에 있어서, BRAF 억제제가 N-(2-클로로-3-((3,5-디메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로프로판-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제약 조성물.
46. 제42항에 있어서, BRAF 억제제가 하기로부터 선택되는 것인 제약 조성물:
    N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-2-아자비시클로[2.1.1]헥산-2-술폰아미드,
    (R)-N-(2-클로로-4-플루오로-3-((5-플루오로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)페닐)-3-플루오로피롤리딘-1-술폰아미드, 및
    N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드,
    또는 그의 제약상 허용되는 염.
47. 제46항에 있어서, BRAF 억제제가 N-(2-클로로-3-((5-클로로-3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일)아미노)-4-플루오로페닐)-3-플루오로아제티딘-1-술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제약 조성물.
48. 제41항에 있어서, 항암제가 SHP2 억제제인 제약 조성물.
49. 제48항에 있어서, SHP2 억제제가 (S)-1'-(6-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)-1,2,4-트리아진-3-일)-1,3-디히드로스피로[인덴-2,4'-피페리딘]-1-아민 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제약 조성물.
50. 제22항에 있어서, 대상체가 인간인 제약 조성물.