JP2010506908A - グルコサミンまたはグルコサミン誘導体を含むアトピー性皮膚炎治療用組成物およびこれらを使用しアトピー性皮膚炎を治療する方法 - Google Patents

Abstract

グルコサミンおよびその誘導体の新規な用途を開示する。アトピー性皮膚炎の治療のためのグルコサミンならびにその誘導体を含む医薬組成物、および、組成物を使用したアトピー性皮膚炎の治療方法を開示する。医薬組成物および治療方法は、従来の抗炎症薬に伴う副作用のないアトピー性皮膚炎の安全な治療を実現する。
【選択図】図５

Description

本発明はアトピー性皮膚炎の治療に効果的な組成物に関する。より詳しくは、グルコサミンまたはグルコサミン誘導体を含むアトピー性皮膚炎治療用組成物および該組成物を使ってアトピー性皮膚炎を治療する方法に関する。

アトピー性皮膚炎（ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）は、原因不明の皮膚の異常症候群であり、通常、強いそう痒および皮膚の乾燥、皮膚紅斑と炎症を特徴とする（Ｌａｎｃｅｔ．１９９８；３５１：１７１５〜１７２１）。アトピー性皮膚炎は慢性疾患であり、長期間にわたり日常生活に支障を来し、しばしば乳幼児に発症する。アトピー性皮膚炎は１０〜１５％の乳幼児において発症する。約６０％のアトピー性皮膚炎患者が１年目に疾患の徴候を示し、約８５％が、５歳以下で皮膚病を発症する（Ｌａｎｃｅｔ．１９９８；３５１：１７１５〜１７２１）。子供のアトピー性皮膚炎の症例のうち約４０％において、子供が成長するにつれ疾患が次第に治まる。しかし、大気汚染または環境汚染を引き起こす急激な産業化により、アトピー性皮膚炎の罹患率が増加し、成人の約１〜３％が発症し、産業化以前と比較し、２〜３倍高い（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ａｌｌｅｒｇｙ．Ｃｌｉｎ．Ｎｏｒｔｈ Ａｍ．２００２；２２：１〜２４；Ｌａｎｃｅｔ．２００３；３６１；１５１〜１６０）。これらの理由により、多くの研究者がアトピー性皮膚炎の臨床症状を減少させる努力に励んでいる。

アトピー性皮膚炎の症状は個人により差は見られるが、代表的な症状は深刻なそう痒であり、それに続き皮膚の乾燥があり、患者に不快感をもたらす。乾燥は皮膚表面の保護機能に損傷を与え、外部の刺激物質に対し敏感になり、それに対し皮膚が反応し炎症を起す（Ｌａｎｃｅｔ．１９９８；３５１；１７１５〜１７２１，Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ．２００２；１６；１４３−１４５）。

アトピー性皮膚炎の原因と治療に対しては今日まで様々な研究がなされてきたが、疾患自体の複雑性および矛盾する研究データにより、正確な病因の理論および有効な治療法は確立されていない。現在、利用できるアトピー性皮膚炎の治療剤はステロイド（Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１９９９；１４０：１１１４〜１１２１）、タクロリムス（Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００２；１０９：５３９〜５４６，Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００１；４４：Ｓ５８〜ｓ６４）、ピメクロリムス（Ｐｉｍｅｃｒｏｌｉｍｕｓ，Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００１；１４４：７８８〜７９４，Ｊ．Ａｍ Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００２；４６：４９５〜５０４）などの局所抗炎症剤、抗ヒスタミン剤（Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７；７９：１９７〜２１１）およびサイクロスポリンのような免疫抑制剤（Ｌａｎｃｅｔ．１９９１；３３８：１３７〜１４０）がある。また補助的な療法として低刺激性保湿剤または紫外線Ａを利用した光化学療法（Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１９９８；３８：５８９−５９３，Ｌａｎｃｅｔ．２００１；３５７：２０１２〜２０１６）も臨床で行われている。しかし、このような治療法または治療剤は、根本的な治療というよりはむしろ症状を許容水準までに抑える手助けをするのみなので、アトピー性皮膚炎患者らの要求を完全に満たしていない。

アトピー性皮膚炎の治療には局所用ステロイドが最も一般的である。しかし、長期間使用した場合、ステロイドはクッシング症候群（Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．１９９３；２５：２６９〜２７６）を引き起こす。また、長期間のステロイド投与後に突然中断することで、急性副腎機能不全を招き、これが全身衰弱感、発熱、筋肉痛、関節痛および摂食障害などを引き起こし、免疫機能障害をもたらし、バクテリアおよびウィルス感染のリスクが増加する。特にステロイドの長期間にわたる皮膚への外用は、皮膚の保護能力を低下させ、使用を中止すると、深刻な接触性皮膚炎を発症する。したがって、このような副作用がないアトピー性皮膚炎治療剤が求められる。

グルコサミンは分子式Ｃ_６Ｈ_１３ＮＯ_６を有する天然アミノ糖であり、炭素原子を６個有するのでガラクトサミンと共にヘキソサミンに分類される。グルコサミンは無色の針状結晶粉末で、１１０℃で分解し、水に対し容易に溶け、強塩基性である。グルコサミンは、多糖類の成分として天然に存在し、多糖類はキチン、バクテリアの細胞壁および動物の軟骨や皮膚組織を構成するムコ多糖類において広く分布する。また、グルコサミンは骨関節炎や関節の損傷の回復に必要な物質を提供する。特に、軟骨中に見られるグリルコサミノグリカンと呼ばれるムコ多糖類の形成において主要な役割を担っている。また、グルコサミンは、消化器系および循環器系の基礎粘膜、関節の滑液、靭帯および腱を含む身体組織の大部分の構造において重要な成分である。

グルコサミンは主に蛋白質生合成を促進し、軟骨マトリックスの形成を刺激し、関節内の潤滑剤であるヒアルロン酸の産生を刺激する。このような作用により、グルコサミンは、初期の骨関節炎、関節リウマチ、腎臓結石および事故などによる関節の損傷の治療に広く使われており、偏頭痛予防（Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ａ．Ｌ．など、Ｍｅｄ．Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ，５５（３）：１９５〜１９８（２０００））および小児慢性腸疾患の治療（Ｓａｌｖａｔｏｒｅ，Ｓ．など、Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．，１４：１５６７〜１５７９（２０００））に役立つという報告がなされている。しかし、アトピー性皮膚炎にグルコサミンが有効であることを開示する報告はなされていない。

トランスグルタミナーゼは、グルタミン残基−リシン残基間のε−（γ−グルタミル）リシン結合の形成により異なるタンパク質の架橋結合を触媒する酵素である（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ．１９８５；１１３：３５８〜３７５）。この酵素は皮膚損傷防止および損傷した組織の治癒において重要な因子と考えられる（ＦＡＳＥＢ Ｊ．１９９９；１３：１７８７〜１７９５）。しかしながら、異常に活性化したトランスグルタミナーゼは脳疾患、アテローム性動脈硬化、炎症性疾患、自己免疫疾患および線維症などの様々な疾患の発症の一因となる（Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．２００２；４０：８５〜１０３）。

皮膚真皮においてトランスグルタミナーゼ−１および３は豊富に発現されるので、炎症性皮膚疾患におけるトランスグルタミナーゼの研究のほとんどは、トランスグルタミナーゼ−１および３に焦点を置いている（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９９；２７４：３０７１５〜３０７２１）。トランスグルタミナーゼ−２はマクファージの活性と関連があり（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．２００３；１００：７８１２−７８１７）、マクロファージを刺激し、ＩＮＦ−γおよびＴＮＦ−αなどの炎症性サイトカインを放出させる。トランスグルタミナーゼ−２の機能は、線維芽細胞および表皮細胞のような非免疫細胞に適用され、これら細胞において炎症性サイトカインの分泌を誘発する（Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ＆Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｒｅｓ．２００２；２２：６７７〜６８２）。グルタミナーゼ−２の臨床病理学的特徴は、グルテンに反応して小腸を損傷してしまう自己免疫疾患であるセリアック病患者の小腸表皮組織において見られる。マクロファージの過剰な堆積が小腸の表皮組織において見られ、トランスグルタミナーゼ−２の活性がマクロファージにおいて有意に増強される（Ｐｒｏｇ．Ｅｘｐ．Ｔｕｍｏｒ．Ｒｅｓ．２００５；３８：１５８〜７３）。またセリアック病に関連する疱疹状皮膚炎において、セリアック病のように、マクロファージの過剰な堆積が、トランスグルタミナーゼ−２の活性の増強される皮膚の真皮乳頭層において見られる（Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１９９９；１１３：１３３〜１３６）。

さらに、アトピー性皮膚炎および乾せん患者から採取した皮膚サンプルの研究により、真皮−表皮の境界部（ｄｅｒｍｏｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｊｕｎｃｔｉｏｎ）においてマクロファージが著しく活性化されていることが判明した（Ａｍ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｐａｔｈｏｌ．１９９５；１７：１３９〜１４４）。

本発明者らは最近、トランスグルタミナーゼ阻害剤である種々の合成ペプチドを花粉により誘発させた結膜炎のモルモットに投与したところ、ステロイド剤に匹敵する抗炎症効果があることを発見した（Ｓｏｈｎ，Ｊ．，Ｋｉｍ，Ｔ．−Ｉ．，Ｙｏｏｎ，Ｙ．−Ｈ．，ａｎｄ Ｋｉｍ，Ｓ．Ｙ．Ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ：Ａ Ｎｅｗ Ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｉｎ Ａｌｌｅｒｇｉｃ Ｃｏｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖｉｔｉｓ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１１，１２１−８，２００３；Ｓｏｏ−Ｙｏｕｌ Ｋｉｍ．Ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ ２ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｆｒｏｎｔ Ｂｉｏｓｃｉ．１１，３０２６〜３０３５，２００６）。また、本発明者らは、韓国特許出願第１０−２００６−５６９４２号に記載されているとおり、トランスグルタミナーゼ阻害剤として有用な物質を特定するために、すでに安全性が認められ、市販されている天然物質をスクリーニングした。スクリーニングの結果、グルコサミンまたはその誘導体にトランスグルタミナーゼを阻害する活性があることを見出した。

本願の発明者らは、集中的かつ徹底的な研究を行い、アトピー性皮膚炎と乾せん患者の皮膚の炎症性病変において、トランスグルタミナーゼの高い活性を示すという推測について詳しく調べた。研究の結果、グルコサミンまたはその誘導体が、トランスグルタミナーゼ活性を抑制することにより、アトピー性皮膚炎患者の皮膚における炎症拡散を抑制することができることが明らかになり、本発明に到った。

したがって、本発明の目的は、グルコサミン、その誘導体またはこれらの塩を含む、アトピー性皮膚炎治療用の医薬組成物を提供することである。

本発明の他の目的は、グルコサミン、その誘導体またはこれらの塩を使って、アトピー性皮膚炎を治療する方法を提供することである。

本発明の更なる目的は、動物においてトランスグルタミナーゼ活性の阻害能力を有する候補物質をスクリーニングする方法を提供することである。

１２−Ｏ―テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート（ＴＰＡ）誘発耳浮腫モデルのマウスにおいて、グルコサミンを局所的に塗布したときの耳の重量変化を表すグラフである（ノーマル：無処置、ＴＰＡのみ：ＴＰＡのみを局所塗布、Ｇ：グルコサミンを局所塗布、ＨＣ：ヒドロコルチゾンを局所塗布）。 グルコサミンを局所塗布したＴＰＡ誘発耳浮腫モデルのマウスからの耳生検材料に対するミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）アッセイの結果を表すグラフである。 グルコサミンを経口投与したＴＰＡ誘発耳浮腫モデルのマウスからの耳生検材料の重量を表すグラフである（ノーマル：無処置、陽性：陽性コントロール、賦形剤：賦形剤のみ投与、Ｇ：グルコサミン投与（数字はグルコサミンの濃度を意味する）、デキサメタゾン：デキサメタゾン投与）。 グルコサミンを経口投与したＴＰＡ誘発耳浮腫モデルのマウスからの耳生検材料に対するＭＰＯアッセイの結果を表すグラフである。 グルコサミンのアトピーに対する効果を決定するための臨床試験の結果を表すグラフであり（青色：グルコサミン投与前、黄色：グルコサミン投与後１週間、オレンジ色：グルコサミン投与後２週間）、外用投与のデータは誤差範囲１０％以内で表示した。 グルコサミンのアトピーに対する効果を決定するための臨床試験の結果を表すグラフであり（青色：グルコサミン投与前、黄色：グルコサミン投与後１週間、オレンジ色：グルコサミン投与後２週間）、外用投与のデータは誤差範囲１０％以内で表示した。

一つの様態において、本発明はグルコサミン、その誘導体またはこれらの塩を含むアトピー性皮膚炎治療用の医薬組成物に関する。

グルコサミンはカニやエビなどの甲殻類の殻の主成分であるキトサンの分解産物である。キチンやキトサンはカニまたは海老の殻の主成分である。キチンは２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコース（Ｎ−アセチルグルコサミン）で構成されている。キトサンは、キチンが脱アセチル化した多糖であるポリ（β−（１，４）−グルコサミン）である。グルコサミンは下記式１の構造を有する。

本発明での用語である「グルコサミン誘導体」は、グルコサミンのヒドロキシル基の水素がアシルまたはアルキル基に置換され、下記式２の構造を有するものを指す。

式中、Ｒは炭素数が２〜１８であるアシル基または炭素数が１〜５である直鎖または分岐アルキルとである。望ましくは、Ｒはアセチル、プロピオニル、ブチリル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ヘプタノイル、オクタノイル、ノナノイル、デカノイル、ウンデカノイル、ラウリル、トリデカノイル、ミリスチル、ペンタデカノイル、パルミトイル、マルガリルまたはステアリル基などのアシル基、または、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、イソプロピル、イソブチルまたはｓｅｃ−ブチル基などのアルキル基でもよい。

上述のように、アミン基を変化させずに、グルコサミンの１、３、４、６位のアルコール基に疎水基を導入することが、グルコサミンの生理的活性に関与していると見られている。したがって、得られたグルコサミン誘導体は、環境において易分解性で毒性は無く、重金属に対し高い吸着能力を有し、抗菌活性を有する一方で、本来の生理的活性をそのまま維持している。

グルコサミンのいかなる供給源からでも、本発明に適するグルコサミンを得ることができる。グルコサミンは、天然物質から分離および精製することができ、市販もされている。または、グルコサミンは、薬学的に許容可能なグルコサミンの合成に適した方法を使用して合成することができる。また、グルコサミンは、グルコサミンを含む、キチン、ヒアルロン酸、ヘパリンならびにケラト硫酸の加水分解産物からのグルコサミンまたはそれらの誘導体および他の誘導体からグルコサミンを分離および精製することによって得ることができる。

また、本発明に使用されるグルコサミンまたはその誘導体は、その使用用途に応じて、薬学的許容可能な塩の形態で、本発明の医薬組成物に含めることができる。このような塩の形態の例には、グルコサミンまたはグルコサミン誘導体の硫酸塩、塩酸塩、酢酸塩、クエン酸塩およびリンゴ酸塩が含まれるが、これらに制限されない。グルコサミンまたはグルコサミン誘導体の硫酸塩が望ましい。

また、グルコサミンまたはグルコサミン誘導体の薬学的許容可能な塩の安定性を維持するため、および、塩の形態におけるアミノ基の酸化を防止するため、医薬組成物は、公知の抗酸化剤をさらに含んでもよく、薬学的に許容可能な金属塩、好ましくはナトリウムまたはカリウム塩と結合させてもよい。

アトピー性湿疹とも呼ばれるアトピー性皮膚炎は、慢性再発性湿疹性疾患である。アトピー性皮膚炎を引き起こす根本的な原因およびメカニズムは正確には分かっていない。この疾患は、主として独特の遺伝的要因によって引き起こされるように見えるが、その原因は単純ではなく、複数の要因が関係している。アトピー性皮膚炎は、幼少期、青年期、成人期における、小児湿疹から典型的な皮膚炎の蘚苔化まで範囲の臨床的および組織学的進行を呈する皮膚疾患群である。本発明の医薬組成物は、以下の実施例において説明するように、本発明の組成物の有効成分であるグルコサミンがトランスグルタミナーゼを阻害することで皮膚における炎症反応を防ぐことによりアトピー性皮膚炎に有効である。

本発明のグルコサミンまたはグルコサミン誘導体を含む医薬組成物は、単独で使用でき、または、認可された医薬組成物と併用できる。

グルコサミンまたはグルコサミンの誘導体を含む医薬組成物は、カプセルに賦形剤なしで充■し、微粉化した固体担体、液体担体またはその両方と均一、かつ、密に接触させることができる。必要であれば、その後、製品は望ましい剤形に成形される。適合した担体、賦形剤の例として、デンプン、水、食塩水、エタノール、グリセロール、リンゲル溶液およびデキストロース溶液が挙げられる。医薬組成物は、文献（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ，１９ｔｈ Ｅｄ．，１９９５，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ）にしたがって、この技術分野において公知の適した剤形に製剤することができる。

本発明のグルコサミンまたはグルコサミン誘導体を含む医薬組成物は、グルコサミンまたはグルコサミン誘導体を有効成分として含むいかなる剤形にも適用可能であり、経口用または非経口用剤形にも製剤することができる。望ましい非経口用剤形は軟こう剤、乳液、ローションおよびクリームなどの局所製剤である。経口用製剤もまた好ましい。本発明の医薬組成物は、経口投与用剤形として、例えば、錠剤、トローチ剤、ローゼンジ（ｌｏｇｅｎｚｅ）、水溶性または油性懸濁液、分散性粉剤または粒剤、乳液、ハードまたはソフトカプセル、シロップまたはエリキシル剤に製剤することができる。錠剤およびカプセルは、ラクトース、サッカロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アミロペクチン、セルロースまたはゼラチンなどの結合剤、第二リン酸カルシウムなどの賦形剤、コーンスターチまたはさつまいもデンプンなどの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアロイルフマル酸ナトリウムまたはポリエチレングリコールワックスなどの潤滑剤と伴に製剤することができる。本発明の組成物をカプセルとして製剤する場合、前述の物質に、脂肪油などの液体担体をさらに含めることができる。

本発明の薬剤学的組成物を含む非経口投与用剤形としては、例えば、皮下注射、静脈注射または筋肉内注射などの注射用形態、座剤注入方式または呼吸器を通じて吸入が可能なようにするエアゾール剤などのスプレー用に製剤化することができる。注射用剤形に製剤化するためにはグルコサミンまたはグルコサミン誘導体を安定剤または緩衝剤とともに水で混合して溶液または懸濁液に製造して、これをアンプルまたはバイアルの単位投与用に製剤する。座剤で注入するためには、ココアバターまたは他のグリセリドなどの通常の座剤ベースを含む座剤または浣腸剤のような直腸投与用組成物に製剤化することができる。エアゾール剤などのスプレー用に剤形化する場合、水分散された濃縮物または湿潤粉末が分散するように推進剤などが添加剤とともに配合されることができる。上記医薬組成物が軟膏剤である場合は、油脂性基剤、水溶性基剤、乳剤性基剤などの軟膏基剤、酸化防止剤、防腐剤、保湿剤および溶解補助剤などを含みうる。本発明のグルコサミンまたはグルコサミン誘導体を含む医薬組成物の非経口投与は好ましい純度下で薬学的に許容可能な担体、すなわち使われる濃度と投与量で受容体に非毒性で、他の製剤成分と和合できる担体と混合して単位投与量の剤形に調剤することが望ましい。特に製剤は酸化剤および人体に有害だと知られているその他の化合物を含まないことが望ましい。

別の態様において、本発明は、グルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩を使い、アトピー性皮膚炎を治療する方法に関する。

詳細な様態として、治療方法はグルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩を含む医薬組成物を使い、アトピー性皮膚炎を治療することを含む。

本発明のグルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩は、１種以上の薬学的に許容可能な賦形剤とともに医薬組成物として投与されうる。該医薬組成物が人間患者に投与される場合、１日の投与量は正しい医学的判断範囲内で担当医師によって決定しうることは当業者に自明である。特定の患者に対する具体的な治療に有効な量は、望ましい反応の種類と程度、用途により他の製剤の使用などの具体的組成、患者の年齢、体重、一般健康状態、性別ならびに食習慣、投与時間、投与経路ならびに組成物の排せつ率、投与期間、具体的組成物と併用または同時に使用される薬物などの様々な因子および医療野で公知の類似因子により変化する。当該技術分野において公知の適した製剤はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９ｔｈ Ｅｄ．，１９９５，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡに記載されている。したがって、本発明の目的に適したグルコサミンまたはグルコサミンの誘導体の有効量は、前述した事項を考慮して決定することが好ましい。

また、本発明の治療方法において、グルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩は、通常、経口または非経口などの多様な経路で投与される。非経口投与が好ましく、この場合、化合物はアトピー性皮膚炎が発生した皮膚の部位に局所塗布される。

望ましい様態において、本発明の治療方法には、グルコサミン、グルコサミン誘導体、これらの塩、またはこれらを含む医薬組成物と、１つ以上の抗炎症剤などのアトピー性皮膚炎用の公知の薬物を併用することも含む。

アトピー性皮膚炎用の薬物の薬学的有効量は、当業界において公知であり、症状の程度、および、グルコサミンの併用投与などの諸般条件を考慮し、担当医師によって決定される。アトピー性皮膚炎の公知の薬物とグルコサミンまたはグルコサミン誘導体の併用投与は、グルコサミンまたはグルコサミン誘導体の作用によって、とりわけ、ステロイド抗炎症剤などの公知のアトピー性皮膚炎治療薬による副作用を緩和し、付加的または相乗的治療効果をもたらす。公知のアトピー性皮膚炎治療薬はグルコサミンまたはその誘導体との混合物として、または、同時にあるいは別の時間に、別々に投与することができる。

更なる態様において、本発明は、トランスグルタミナーゼ活性の阻害能力を有する候補物質のスクリーニング方法を提供する。

詳細な態様において、本発明のスクリーニング方法は、皮膚に炎症反応を誘発させた動物モデルにトランスグルタミナーゼ活性を阻害する候補物質を投与することを含む。好ましくは、候補物質は、炎症を誘発させた動物モデルに局所塗布または経口投与される。

以下に説明する実施例により、本発明の更なる理解が得られるが、本発明の範囲は実施例に限定されるものとしてみなされるべきではない。

参照例１：ＴＰＡ誘発耳浮腫モデルのマウスの作製
以下のように１２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート（ＴＰＡ）を使用し、マウスにおいて耳浮腫を誘発させた。ＴＰＡは、アセトンを２．５Ｄ／２０Ｄで調製する。ＩＣＲマウスは試験１週間前に準備し、輸送ストレスを最小化するために、食料および水へのアクセスを自由にする。ＴＰＡ溶液の２０ＤをオスＩＣＰマウス（７週齢）の右耳に塗布した。２４時間後、マウスを頚椎脱臼により安楽死させ、６ｍｍ生検パンチで右耳を穿孔する。穿孔した耳サンプルは、微量天秤で重さを測定し、細かく裂き、ミエロペルオキシダーゼアッセイ（Ｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ａｓｓａｙ：ＭＰＯ）に供した。

実施例１：ＴＰＡ誘発耳浮腫モデルのマウスに局所塗布したグルコサミンの抗炎症活性の評価
３０匹のオスＩＣＲマウス（７週齢、体重２５〜３２ｇ）を、各グループ５匹から成る６グループに分けた。実験動物は１週間係留して、輸送ストレスを最小化するために、１週間、食料および水へのアクセスを自由にした。グルコサミンおよび対照薬は滅菌蒸留水で希釈した後、アセトンで１：９の割合に希釈した。

グループ１には、ＴＰＡおよび対照薬での処置は施さなかった。グループ２はＴＰＡのみ右耳の皮膚に塗布した。グループ３にはＴＰＡを局所塗布した後、滅菌蒸留水：アセトン（１：９）に希釈した０．５％のグルコサミンを２０Ｄ、ＴＰＡを塗布してから１５分後および６時間後に塗布した。グループ３と同じ方法で、グループ４には１％のグルコサミンを、グループ５には２％のグルコサミンを塗布した。陽性対照群としてグループ６には０．５％のヒドロコルチゾンを塗布した。ＴＰＡを塗布してから２４時間後にマウスを頚椎脱臼により安楽死させ、６ｍｍ生検パンチで耳を穿孔した。穿孔した耳サンプルは重さを測定し、ＭＰＯ活性を分析した。

図１および図２に示されるように、グルコサミンは濃度に関係なく急性炎症を阻害することが分かった。

実施例２：ＴＰＡ誘発耳浮腫モデルのマウスに経口投与したグルコサミンの抗炎症活性の評価
３５匹のオスＩＣＲマウス（７週齢、体重２５〜３２ｇ）を、各グループ５匹から成る７グループに分けた。実験動物は、輸送ストレスを最小化するため、１週間、食料および水へのアクセスを自由にした。グルコサミンおよび対照薬は滅菌生理食塩水で希釈した。

グループ１には、ＴＰＡおよび対照薬での処置は施さなかった。グループ２はＴＰＡのみ右耳の皮膚に塗布した。グループ３にはＴＰＡを局所塗布し、その後、ＴＰＡを塗布してから１５分後および６時間後に、滅菌生理食塩水で希釈したグルコサミンを０．５ｍＬ、ゾンデを使って経口投与した。グループ３と同じ方法で、グループ４には０．５ｍＬのグルコサミン（５ｍｇ／ｋｇ）を、グループ５には０．５ｍＬのグルコサミン（１０ｍｇ／ｋｇ）を、グループ６には０．５ｍＬのグルコサミン（２０ｍｇ／ｋｇ）を、グループ７には０．５ｍＬのデキサメタゾン（１０ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した。ＴＰＡの塗布２４時間後にマウスを頚椎脱臼により安楽死させ、耳を６ｍｍ生検パンチで穿孔した。穿孔した耳サンプルの重さを測定し、ＭＰＯ活性を分析した。

図３および図４に示されるように、経口投与した場合、グルコサミンは濃度に関係なく急性炎症を阻害することが分かった。

実施例３：グルコサミンのアトピーに対する治療効果の臨床試験
グルコサミンが実際にアトピーに対する治療効果があるかどうかを確認するため、アトピー患者２０人を対象に臨床試験を実施した。韓国のＤｏｎｇｇｕｋ大学病院皮膚科にて臨床試験が実施された（担当医師：Ａ Ｙ Ｌｅｅ、臨床試験はＤｏｎｇｇｕｋ大学病院のＩＲＢによって承認された）。アトピー患者２０人に錠剤およびクリームで投与した。簡単に述べると、グルコサミンを２週間の間、５００ｍｇ／日で経口投与した。クリーム（５％グルコサミン）は、４週間の間、皮膚の望ましい部位に１日２回塗布した。その結果を図５に示した。図５に示されたとおり、経口投与および外用の両方でアトピーに対し有意に治療効果を示した。この結果は、グルコサミンが経口および非経口投与の両方でアトピーに対する治療効果があることを示唆している。

前述した通り、本発明のグルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩は、アトピー性皮膚炎に優秀な治療効果を有する。該化合物は、従来のステロイド製剤に伴う副作用を回避し、安全であり、抗炎症剤として可能性がある。

Claims (7)

1. グルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩を含むアトピー性皮膚炎治療用の医薬組成物。
2. 前記グルコサミン誘導体が式２
   （式中、
   Ｒは炭素数が２〜１８のアシル基、または、炭素数が１〜５の直鎖もしくは分岐アルキル基である。）
   で表される、請求項１に記載の医薬組成物。
3. グルコサミン、グルコサミン誘導体またはこれらの塩を投与することを含むアトピー性皮膚炎の治療方法。
4. 前記グルコサミン誘導体が式２
   
   （式中、
   Ｒは炭素数が２〜１８のアシル基、または、炭素数が１〜５の直鎖もしくは分岐アルキル基である。）
   で表される、請求項３に記載の方法。
5. 前記グルコサミンまたはグルコサミン誘導体の塩が硫酸塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
6. 前記グルコサミンまたはグルコサミン誘導体の塩が硫酸塩である、請求項３に記載の方法。
7. トランスグルタミナーゼ抑制剤のスクリーニング方法であって、
   皮膚に炎症反応を誘発させた動物モデルに、トランスグルタミナーゼ活性の阻害候補物質を投与することを含む、
   スクリーニング方法。