JP2010256278A - 微生物検査装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】微生物検査チップを構成する微生物検出部に励起光を照射した場合に、検出用流路に流れる微生物から発生される蛍光を検出して電気信号に変換する第1の検出器と、同じく検出用流路に流れる微生物から発生される散乱光を検出して電気信号に変換する第2の検出器とを微生物検査装置に搭載する。そして、第1の検出器によって検出された蛍光の光量に基づいて微生物検査チップを搭載するステージを移動制御することにより、励起光の光軸方向に対する検出用流路の位置決めを行う。
【選択図】図1
Description
図1に、本発明の実施の形態に係る微生物検査装置1の構成図を示す。微生物検査装置1は、検体や試薬を内部に保持し、微生物計測に必要な工程を行うための機構を内部に備えた微生物検査チップ10と、微生物計測に必要な工程を行うために、微生物検査チップ10と連結したチップ連結管1441〜1444を介して、微生物検査チップ10内の検体や試薬の搬送を制御するための圧力供給装置14と、微生物検査チップ10を保持し、微生物検査チップ10の位置を調整するX−Y可動ステージ125と、微生物検査チップ10内の微生物に励起光を照射し、微生物からの散乱光及び蛍光を電気信号に変換する検出装置11で構成されている。微生物検査装置1に連結したコンピュータ18は、圧力供給装置14に対する制御信号及びX−Y可動ステージ125に対する制御信号の出力と、検出装置11から入力される電気信号に対する信号処理を実行する。なお、電気信号の処理により得られた計測結果は、コンピュータ18に接続された出力装置19に表示される。
図2A及び図2Bを用い、微生物検査チップ10のうち微生物検査部17の構造を説明する。図2Aは、微生物検査チップ10の本体15と微生物検出部17の接合部の断面図を示す。図2Bは、微生物検出部17の分解斜視図を示す。
図3に、微生物検査チップ10の位置合わせ手順例を示す。検査装置11は、図3に示す手順例に従い、微生物検出流路173と励起光113との位置合わせを実行する。
図8に、微生物検査チップ10の微生物検出部17の別の実施の形態を示す。図8の場合、微生物検出部17の一部に標識176が組み込まれている。標識176は、散乱光又は反射光又は蛍光の光量を増すための構造であり、微生物検出用流路173の近傍に流路方向と平行になるように配置される。X−Y可動ステージ125(図1)により、微生物検査チップ10を励起光113の光軸に対し垂直方向(X方向)に動かすと、励起光113の中心に標識176が重なるとき(Xm)、散乱光又は反射光又は蛍光の光量が最大になる。標識176と微生物検出用流路173とのX方向の関係の位置関係は設計段階で明らかになっている。従って、散乱光又は反射光又は蛍光の光量が最大となった位置から予め決まった量を移動させることにより微生物検出部のX方向の位置合わせを行う。従って、励起光113に垂直な方向について、微生物検出用流路173と励起光113の位置合わせを行うことが可能になる。
以下、本発明の実施の形態に係る微生物検査装置1を用いて、食品由来の検体中の生菌数を計測する場合の実施例を説明する。図9に、微生物検査チップ10を用いた生菌数計測の工程をフローチャートで示す。また、図10に、微生物検査チップ10の平面図を示す。
以下では図11を参照し、微生物検査装置1を構成する検出装置11の構成例を説明する。検出装置11は、前述したように、食品由来の検体中の生菌数を計測するのに好適である。すなわち、検出装置11を用いれば、生菌数と死菌数を判別することができる。検出装置の光学系は、蛍光色素の励起スペクトルと蛍光スペクトルによって異なる場合もある。ここでは、死菌染色液としてPI(励起波長ピーク532nm、蛍光波長ピーク615nm)を使用し、全菌染色液としてLDS751(励起波長ピーク541nm、蛍光波長ピーク710nm)を使用する場合について説明する。
Claims (8)
- 微生物を含む検体液を保持する検体容器と、前記検体液と反応する試薬液を保持すると共に前記検体液と前記試薬液とを反応させる反応容器と、前記微生物を検出するための微生物検出部とを有する微生物検査チップと、
前記微生物検査チップと連結され、前記検体液、前記試薬液とを前記微生物検査チップ内にて搬送する圧力供給装置と、
前記微生物検査チップを保持すると共に、前記微生物検査チップを移動させるステージと、
前記微生物検出部に励起光を照射する光源と、前記微生物検出部の検出用流路を流れる微生物からの蛍光を検出して電気信号に変換する第1の検出器と、前記微生物検出部を流れる微生物からの散乱光を検出して電気信号に変換する第2の検出器とを有し、微生物検査チップの位置に応じて変化する前記微生物検出部からの蛍光の検出光量に基づいて前記ステージを可動制御し、前記励起光の光軸方向に対する前記検出用流路の位置を制御する検査装置と
を有する微生物検査装置。 - 前記微生物検出部は、
カバー部材と流路部材を有し、
前記流路部材が有する溝は、前記カバー部材と前記流路部材を張り合わせた際に、前記検出用流路を形成する
ことを特徴とする請求項1に記載の微生物検査装置。 - 前記検査装置は、前記ステージを通じ、前記検出用流路を励起光の光軸に対して垂直方向に位置合わせする処理と、前記検出用流路を励起光の光軸に対して平行方向に位置合わせする処理とを実行する
ことを特徴とする請求項2に記載の微生物検査装置。 - 前記検査装置は、検出される蛍光量が最大となる前記検出用流路の位置を求めることにより、前記検出用流路を前記励起光の焦点に一致させる
ことを特徴とする請求項3に記載の微生物検査装置。 - 前記検査装置は、検出される散乱光の光量が最大となる前記検出用流路の位置を求めることにより、前記検出用流路を前記励起光の光軸に一致させる
ことを特徴とする請求項3に記載の微生物検査装置。 - 前記微生物検査チップは、励起光の照射により、散乱光又は反射光又は蛍光の光量を増加させる標識を前記検出用流路の近傍に配置し、この標識からの散乱光又は反射光又は蛍光に基づき前記検出用流路を励起光の光軸に対して垂直方向に位置合わせする処理を行う
ことを特徴とする請求項3に記載の微生物検査装置。 - 蛍光フローサイトメトリー法を用いた微生物検査装置において、
微生物検出部は微生物検査チップに設けられ、前記微生物検査チップは移動ステージに保持されており、前記微生物検査チップは、励起光の照射により、蛍光の光量を増加させる構造であって、前記検出用流路との励起光の光軸方向の位置関係が予め決められた標識を前記検出用流路の近傍に配置し、この標識からの蛍光に基づき前記検出用流路を励起光の光軸方向に対して位置合わせする処理を行う
ことを特徴とする微生物検査装置。 - 蛍光フローサイトメトリー法を用いた微生物検査装置における微生物検出部と励起光の位置合わせを行う方法において、
前記微生物検出部は微生物検査チップに設けられ、前記微生物検査チップは移動ステージに保持されており、
前記励起光を前記微生物検出部に照射し、前記微生物検出部から検出される蛍光の光量が最大となる方向に、前記移動ステージを前記励起光の光軸方向に移動制御し、前記励起光の光軸方向に対する前記微生物検出部の位置合わせを行うようにしたことを特徴とする微生物検査装置における微生物検出部と励起光の位置合わせ方法。
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