JP2010215574A - Melanogenesis inhibitor, and skin care preparation or cosmetic product - Google Patents

Melanogenesis inhibitor, and skin care preparation or cosmetic product Download PDF

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JP2010215574A JP2009065328A JP2009065328A JP2010215574A JP 2010215574 A JP2010215574 A JP 2010215574A JP 2009065328 A JP2009065328 A JP 2009065328A JP 2009065328 A JP2009065328 A JP 2009065328A JP 2010215574 A JP2010215574 A JP 2010215574A
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Ken Itakura
研 板倉
Akiyoshi Takayama
明美 高山
Tomonori Hata
友紀 畑
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a melanogenesis inhibitor having excellent safety and stability and high melanogenesis inhibiting action, and a skin care preparation or a cosmetic product, especially a skin care preparation or cosmetic product for skin whitening use containing the inhibitor. <P>SOLUTION: The melanogenesis inhibitor contains a solvent extract of a mycelium or fruit body of Pleurotus eryngii belonging to genus Pleurotus, family Pleurotaceae. The skin care preparation or the cosmetic product, especially the skin care preparation or the cosmetic product for skin whitening use containing the inhibitor has excellent stability and safety, exhibits melanogenesis inhibiting action and gives high skin whitening effect. <P>COPYRIGHT: (C)2010,JPO&INPIT

Description

本発明は、新規なメラニン生成抑制剤、及びそれを配合した皮膚外用剤又は化粧料に関する。 The present invention relates to a novel melanin production inhibitor, and a skin external preparation or cosmetic containing the same.

皮膚外用剤又は化粧料の有効成分として、種々の植物由来の成分が利用されている。例えば、特定のキノコの子実体、培養菌糸体の培養液又は抽出液には、美白作用があることが知られており、美白目的の化粧料や皮膚外用剤に配合することも提案されている(特許文献1〜6)。また、報告されているキノコの種類も広く、特許文献5にはキシメジ科、タコウキン科、マンネンタケ科、ベニタケ科、ヒラタケ科、ハラタケ科、ヒトヨタケ科、タバコウロコタケ科、ホコリタケ科、ニンギョウタケモドキ科、フウセンタケ科などが記載されている。また、特許文献3にはエリンギ抽出物と他の植物抽出物を組み合わせてメラニン生成抑制剤とすることが請求項には記載されてはいるが、明細書にはエリンギ抽出物自体にメラニン生成抑制作用があることやエリンギ抽出物と他の植物抽出物とを組み合わせることにより更にメラニン生成抑制作用が高まるとの具体的な記載は見当たらず、また、エリンギ抽出物に美白効果があるとの記載についても見当たらない。この様に、上記特許文献には、キノコ類抽出物について、その美白作用等の効能が記載されているものの、エリンギについて、メラニン生成抑制作用、美白作用等の効能を具体的に示す記載は見当たらない。   Various plant-derived components have been used as active ingredients for external preparations for skin or cosmetics. For example, it is known that a specific mushroom fruit body, a culture solution or an extract of cultured mycelium has a whitening effect, and it is also proposed to be blended into a cosmetic or skin external preparation for whitening purposes. (Patent Documents 1 to 6). In addition, the types of mushrooms that have been reported are wide, and Patent Document 5 includes xymediaceae, octopus kinaceae, mannenaceae, cypressaceae, oyster mushrooms, agaricaceae, cypress mushrooms, tobacco mushrooms, dust mushrooms, nymph mushrooms, Fusentaceae is listed. In addition, Patent Document 3 describes that the melanin production inhibitor is formed by combining an eringi extract and other plant extracts, but the specification describes the melanin production inhibition in the eringi extract itself. There is no specific description that the melanin production inhibitory action is further increased by combining eringi extract with other plant extracts, and the description that eringi extract has a whitening effect I can't find any. Thus, although the above-mentioned patent document describes the effect of whitening action and the like for mushroom extracts, there is no description specifically showing the effect of melanin production inhibiting action and whitening action for eringi. Absent.

特開平05−186324号公報JP 05-186324 A 特開2002−322044号公報JP 2002-322044 A 特開2003−104835号公報JP 2003-104835 A 特開2004−285058号公報JP 2004-285058 A 特開2005−239644号公報JP 2005-239644 A 特開2006−083064号公報JP 2006-083064 A

課題を解決しようとする課題The challenge to solve the problem

従来より、乳液、クリーム、化粧水、パック、洗浄料等の化粧料や、分散液、軟膏、外用液剤(ローション)剤等の皮膚外用剤には、これらに所定の薬効を付与することを目的として薬効成分が加えられている。例えば、日焼け等により生じる皮膚の黒化、色素沈着により生ずるシミ、ソバカス等を予防または改善するために、アスコルビン酸類、胎盤エキス、グルタチオン、ハイドロキノン類等の美白剤が加えられている。しかしながら、これらの美白剤では、美白効果が十分でなかったり、あるいは、製剤中で変質するなどして所期の薬効が得られない場合が多く、その改善が望まれていた。   Conventionally, cosmetics such as emulsions, creams, lotions, packs, cleaning agents, etc. and skin external preparations such as dispersions, ointments, external liquids (lotions), etc., are intended to give them a predetermined medicinal effect. As a medicinal ingredient has been added. For example, whitening agents such as ascorbic acids, placenta extract, glutathione, hydroquinones and the like are added to prevent or improve skin blackening caused by sunburn or the like, stains caused by pigmentation, buckwheat etc. However, with these whitening agents, the whitening effect is not sufficient, or the desired medicinal effect is often not obtained due to deterioration in the preparation, and the improvement has been desired.

本発明者らは、皮膚外用剤又は化粧料に使用することができる成分について鋭意検討を行った結果、エリンギ抽出物が高いメラニン生成抑制作用を有していることを見出した。更に、エリンギ抽出物は皮膚外用剤又は化粧料に容易且つ安定に配合することができ、そのメラニン生成抑制作用による美白効果の高い皮膚外用剤又は化粧料が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。   As a result of intensive studies on the components that can be used in the external preparation for skin or cosmetics, the present inventors have found that the eringi extract has a high melanin production inhibitory action. Furthermore, it has been found that eringi extract can be easily and stably blended into a skin external preparation or cosmetic, and a skin external preparation or cosmetic with a high whitening effect due to its melanin production inhibitory action can be obtained, and the present invention has been completed. It came to do.

本発明のエリンギ抽出物は、安全性に優れるとともに、高いメラニン生成抑制作用を有するものである。また、エリンギ抽出物は皮膚外用剤又は化粧料に容易且つ安定に配合することができ、皮膚に適用するとメラニン生成抑制作用が発揮された高い美白効果を有する皮膚外用剤又は化粧料が得られる。   The eringi extract of the present invention is excellent in safety and has a high melanin production inhibitory action. In addition, the eringi extract can be easily and stably blended into a skin external preparation or cosmetic, and when applied to the skin, a skin external preparation or cosmetic having a high whitening effect in which a melanin production inhibitory action is exhibited.

すなわち本発明は、エリンギ抽出物を有効成分とするメラニン生成抑制剤に関するものである。また、エリンギ抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤又は化粧料、特に、くすみ、シミ、ソバカスまたは老人性色素斑及び肝斑などの色素沈着の予防及び改善に優れた美白用皮膚外用剤又は化粧料に関するものである。   That is, this invention relates to the melanin production inhibitor which uses an eringi extract as an active ingredient. Also, a skin external preparation or cosmetic containing an eringi extract as an active ingredient, in particular, a skin whitening external preparation excellent in prevention and improvement of pigmentation such as dullness, stains, buckwheat or senile pigment spots and liver spots. It relates to cosmetics.

以下、本発明について詳細に説明する。なお、本明細書において、「〜」はその前後の数値を含む範囲を意味するものとする。
本発明に用いられるエリンギ(学名: Pleurotus eryngii )は、ヒラタケ科ヒラタケ属のキノコの一種であり、その子実体は食用とされる。原産地はイタリア、フランスなど地中海性気候地域を中心として、ロシア南部、中央アジアなどのステップ気候地域までとされ、日本国内において本種の自生はなく、全てが栽培産品である。本発明に用いられるエリンギ抽出物は、エリンギの菌糸もしくは子実体から、溶媒を用いて抽出する。その調製法は特に限定されないが、例えば圧搾抽出法や種々の適当な溶媒を用いて低温もしくは室温〜加温下で抽出される。また、上記菌糸もしくは子実体を、所望により、乾燥、細切、圧搾、又は発酵などの適宜の処理を施した後、抽出処理等を施してもよい。
Hereinafter, the present invention will be described in detail. In the present specification, “to” means a range including numerical values before and after.
The eryngii (scientific name: Pleurotus eryngii) used in the present invention is a kind of mushroom belonging to the genus Oleander, and its fruiting body is edible. The place of origin is centered on Mediterranean climatic regions such as Italy and France, as well as step climatic regions such as southern Russia and Central Asia. There is no native species of this species in Japan, and all are cultivated products. The eringi extract used in the present invention is extracted from the mycelium or fruiting body of eringi using a solvent. Although the preparation method is not particularly limited, for example, the extraction is performed at a low temperature or from room temperature to warming using a press extraction method or various appropriate solvents. In addition, the mycelium or fruit body may be subjected to an appropriate treatment such as drying, chopping, pressing, or fermentation, followed by an extraction treatment or the like, if desired.

抽出溶媒としては、例えば水、低級1価アルコール(メチルアルコール、エチルアルコール、1−プロパノール、2−プロパノール、1−ブタノール、2−ブタノール等)、液状多価アルコール(グリセリン、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール等)、低級アルキルエステル(酢酸エチル等)、炭化水素(ベンゼン、ヘキサン、ペンタン等)、ケトン類(アセトン、メチルエチルケトン等)、エーテル類(ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジプロピルエーテル等)、アセトニトリル等が挙げられ、これらの1種または2種以上を用いることができる。好ましい抽出方法の例としては、水もしくは含水濃度0〜100vol%のエチルアルコールを用い、室温で、または加温して1〜5日間抽出を行ったのち、濾過を行う方法が挙げられる。   Examples of the extraction solvent include water, lower monohydric alcohols (methyl alcohol, ethyl alcohol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, etc.), liquid polyhydric alcohols (glycerin, propylene glycol, 1, 3 -Butylene glycol, etc.), lower alkyl esters (ethyl acetate, etc.), hydrocarbons (benzene, hexane, pentane, etc.), ketones (acetone, methyl ethyl ketone, etc.), ethers (diethyl ether, tetrahydrofuran, dipropyl ether, etc.), acetonitrile Etc., and one or more of these can be used. As an example of a preferable extraction method, there may be mentioned a method in which water or ethyl alcohol having a water content of 0 to 100 vol% is used, and extraction is performed at room temperature or after heating for 1 to 5 days, followed by filtration.

更に、抽出物は、分子量分画、溶媒分画、各種の樹脂処理(イオン交換樹脂、吸着剤等)等によって精製されたもの、凍結乾燥されたもの等いずれのものでも用いることができる。   Further, the extract may be any of molecular weight fraction, solvent fraction, purified by various resin treatments (ion exchange resin, adsorbent, etc.), freeze-dried, etc.

本発明のエリンギ抽出物の皮膚外用剤又は化粧料における含有量は、乾燥分として好ましくは0.00001〜1質量%(以下単に「%」で示す)であり、より好ましくは0.01〜0.5%である。この範囲内であれば、エリンギ抽出物を安定に配合することができ、かつ高い美白効果を発揮することができる。また、抽出液を使用する場合は、溶質である乾燥分の含有量が上記範囲内であれば、その抽出液濃度は何ら限定されるものではない。   The content of the eringi extract of the present invention in the external preparation for skin or cosmetic is preferably 0.00001 to 1% by mass (hereinafter simply referred to as “%”), more preferably 0.01 to 0 as a dry matter. .5%. Within this range, the eringi extract can be blended stably and a high whitening effect can be exhibited. Moreover, when using an extract, if the content of the dry part which is a solute is in the said range, the extract concentration will not be limited at all.

本発明の皮膚外用剤又は化粧料には上記の必須成分のほかに、化粧料や医薬部外品、外用医薬品等に通常使用される各種の成分、即ち、水、アルコール、油剤、界面活性剤、増粘剤、粉体、キレート剤、pH調整剤、各種薬効剤、動植物・微生物由来の抽出物、香料等を、本発明の効果を損なわない範囲で適宜加えることができる。また、特に他の美白剤、紫外線防御剤、抗菌剤、抗炎症剤、細胞賦活剤、活性酸素除去剤、保湿剤等の薬効成分を併用して、本発明の効果を更に高める、もしくは他の効果をさらに付加することもできる。   In addition to the above essential components, the skin external preparation or cosmetic of the present invention, in addition to the above-mentioned essential components, various components usually used in cosmetics, quasi-drugs, external medicines, etc., that is, water, alcohol, oils, surfactants , Thickeners, powders, chelating agents, pH adjusters, various medicinal agents, extracts derived from animals, plants and microorganisms, fragrances, and the like can be appropriately added within a range not impairing the effects of the present invention. In particular, other whitening agents, UV protection agents, antibacterial agents, anti-inflammatory agents, cell activators, active oxygen scavengers, moisturizers and other medicinal ingredients are used in combination to further enhance the effect of the present invention, or other Further effects can be added.

使用可能な美白剤の例には、アスコルビン酸又はその誘導体、アルブチン、リノール酸、ビタミンE及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体、トラネキサム酸、胎盤抽出物、カミツレ抽出物、カンゾウ抽出物、エイジツ抽出物、オウゴン抽出物、海藻抽出物、クジン抽出物、ケイケットウ抽出物、ゴカヒ抽出物、コメヌカ抽出物、小麦胚芽抽出物、サイシン抽出物、サンザシ抽出物、サンペンズ抽出物、シラユリ抽出物、シャクヤク抽出物、センプクカ抽出物、大豆抽出物、茶抽出物、糖蜜抽出物、ビャクレン抽出物、ブドウ抽出物、ホップ抽出物、マイカイカ抽出物、モッカ抽出物、ユキノシタ抽出物等が含まれる。   Examples of whitening agents that can be used include ascorbic acid or derivatives thereof, arbutin, linoleic acid, vitamin E and derivatives thereof, glycyrrhizic acid and derivatives thereof, tranexamic acid, placenta extract, chamomile extract, licorice extract, age extract , Ogon extract, seaweed extract, cucumber extract, caquette extract, gokahi extract, rice bran extract, wheat germ extract, saicin extract, hawthorn extract, sun penz extract, shirayuri extract, peony extract , Sempukuka extract, soybean extract, tea extract, molasses extract, juniper extract, grape extract, hop extract, micaika extract, mokka extract, yukinoshita extract and the like.

紫外線防御剤としては、例えば、パラメトキシケイ皮酸−2−エチルヘキシル、2−ヒドロキシ−4−メトキシベンゾフェノン、2−ヒドロキシ−4−メトキシベンゾフェノン−5−硫酸ナトリウム、4−t−ブチル−4‘−メトキシジベンゾイルメタン、2−フェニル−ベンズイミダゾール−5−硫酸、酸化チタン、酸化亜鉛等が挙げられる。   Examples of the UV protection agent include paramethoxycinnamate-2-ethylhexyl, 2-hydroxy-4-methoxybenzophenone, 2-hydroxy-4-methoxybenzophenone-5 sodium sulfate, 4-t-butyl-4′- Examples thereof include methoxydibenzoylmethane, 2-phenyl-benzimidazole-5-sulfuric acid, titanium oxide, and zinc oxide.

抗菌剤としては、例えば、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール等が挙げられる。   Examples of the antibacterial agent include benzoic acid, sodium benzoate, p-hydroxybenzoate ester, benzalkonium chloride, phenoxyethanol, isopropylmethylphenol, and the like.

抗炎症剤は日焼け後の皮膚のほてりや紅斑等の炎症を抑制する作用を有しており、例えば、イオウ及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体、グリチルレチン酸及びその誘導体、アルテア抽出物、アシタバ抽出物、アルニカ抽出物、インチンコウ抽出物、イラクサ抽出物、オウバク抽出物、オトギリソウ抽出物、カミツレ抽出物、キンギンカ抽出物、クレソン抽出物、コンフリー抽出物、サルビア抽出物、シコン抽出物、シソ抽出物、シラカバ抽出物、ゲンチアナ抽出物等が挙げられる。   Anti-inflammatory agents have the effect of suppressing inflammation such as hot flashes and erythema on the skin after sunburn. For example, sulfur and its derivatives, glycyrrhizic acid and its derivatives, glycyrrhetinic acid and its derivatives, Altea extract, Ashitaba extract , Arnica extract, Ginseng extract, nettle extract, Duckweed extract, Hypericum extract, Chamomile extract, Snapdragon extract, Watercress extract, Comfrey extract, Salvia extract, Bamboo extract, Perilla extract , Birch extract, gentian extract and the like.

細胞賦活剤は肌荒れの改善等の目的で用いられ、例えば、カフェイン、鶏冠抽出物、貝殻抽出物、貝肉抽出物、ローヤルゼリー、シルクプロテイン及びその分解物又はそれらの誘導体、ラクトフェリン又はその分解物、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸等のムコ多糖類またはそれらの塩、コラーゲン、酵母抽出物、乳酸菌抽出物、ビフィズス菌抽出物、醗酵代謝抽出物、イチョウ抽出物、オオムギ抽出物、センブリ抽出物、タイソウ抽出物、ニンジン抽出物、ローズマリー抽出物、グリコール酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、コハク酸等が挙げられる。   Cell activators are used for the purpose of improving rough skin, for example, caffeine, chicken crown extract, shell extract, shell meat extract, royal jelly, silk protein and its degradation products or derivatives thereof, lactoferrin or its degradation products. , Mucopolysaccharides such as chondroitin sulfate and hyaluronic acid or their salts, collagen, yeast extract, lactic acid bacteria extract, bifidobacteria extract, fermentative metabolic extract, ginkgo biloba extract, barley extract, assembly extract, lysium extract Products, carrot extract, rosemary extract, glycolic acid, citric acid, lactic acid, malic acid, tartaric acid, succinic acid and the like.

活性酸素除去剤は、過酸化脂質生成抑制等の作用を有しており、例えば、スーパーオキサイドディスムターゼ、アスタキサンチン、マンニトール、クエルセチン、カテキン及びその誘導体、ルチン及びその誘導体、ボタンピ抽出物、ヤシャジツ抽出物、メリッサ抽出物、羅漢果抽出物、レチノール及びその誘導体、カロチノイド等のビタミンA類、チアミンおよびその誘導体、リボフラビンおよびその誘導体、ピリドキシンおよびその誘導体、ニコチン酸およびその誘導体等のビタミンB類、トコフェロール及びその誘導体等のビタミンE類、ジブチルヒドロキシトルエン及びブチルヒドロキシアニソール等が挙げられる。   The active oxygen scavenger has an action such as suppression of lipid peroxide production, for example, superoxide dismutase, astaxanthin, mannitol, quercetin, catechin and derivatives thereof, rutin and derivatives thereof, button pi extract, yashajitsu extract, Melissa extract, Rahan fruit extract, retinol and its derivatives, vitamin A such as carotenoid, thiamine and its derivative, riboflavin and its derivative, pyridoxine and its derivative, vitamin B such as nicotinic acid and its derivative, tocopherol and its derivative And vitamin E such as dibutylhydroxytoluene and butylhydroxyanisole.

保湿剤としては、例えば、エラスチン、ケラチン等のタンパク質またはそれらの誘導体、加水分解物並びにそれらの塩、グリシン、セリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、テアニン等のアミノ酸及びそれらの誘導体、ソルビトール、エリスリトール、トレハロース、イノシトール、グルコース、蔗糖およびその誘導体、デキストリン及びその誘導体、ハチミツ等の糖類、D−パンテノール及びその誘導体、尿素、リン脂質、セラミド、オウレン抽出物、ショウブ抽出物、ジオウ抽出物、センキュウ抽出物、ゼニアオイ抽出物、タチジャコウソウ抽出物、ドクダミ抽出物、ハマメリス抽出物、ボダイジュ抽出物、マロニエ抽出物、マルメロ抽出物等が挙げられる。   Examples of humectants include proteins such as elastin and keratin or derivatives thereof, hydrolysates and salts thereof, amino acids such as glycine, serine, aspartic acid, glutamic acid, arginine and theanine and derivatives thereof, sorbitol, erythritol, Trehalose, inositol, glucose, sucrose and derivatives thereof, dextrin and derivatives thereof, saccharides such as honey, D-pantenol and derivatives thereof, urea, phospholipid, ceramide, lauren extract, ginger extract, diautum extract, senkyu extract Product, mallow extract, gypsophila extract, dokudami extract, hamamelis extract, bodaige extract, maronier extract, quince extract and the like.

本発明の皮膚外用剤又は化粧料は、美肌等を目的とする化粧料、特に美白用化粧料として調製するのに適する。化粧料の形態については特に限定されず、例えば、乳液、クリーム、化粧水、パック、美容液、洗浄料などのスキンケア化粧料の他、ファンデーション、頬紅、白粉等のメーキャップ化粧料等の化粧料や医薬部外品であってもよい。また、分散液、軟膏、液剤、エアゾール、貼付剤、パップ剤、リニメント剤等の剤型であっても良く、乳化剤型ではW/O型及びO/W型の他、O/W/O型やW/O/W型等複合型のいずれであっても良い。   The skin external preparation or cosmetic of the present invention is suitable for preparation as a cosmetic intended for beautifying skin, particularly as a whitening cosmetic. The form of the cosmetic is not particularly limited. For example, in addition to skin care cosmetics such as a milky lotion, cream, lotion, pack, cosmetic liquid, and detergent, cosmetics such as makeup cosmetics such as a foundation, blusher, and white powder It may be a quasi-drug. Further, it may be in the form of dispersion, ointment, liquid, aerosol, patch, poultice, liniment, etc. In the emulsifier type, in addition to the W / O type and O / W type, the O / W / O type Or a composite type such as W / O / W type.

〔製造例1〕エリンギ抽出物の製造
エリンギの子実体10gに、加温した精製水100mLを加え、室温にて3日間抽出を行ったのち濾過し、溶媒を除去してエリンギ抽出物(乾燥分として)0.5gを得た。
[Production Example 1] Manufacture of eringi extract To 10 g of eringi fruiting body, 100 mL of heated purified water was added, extracted at room temperature for 3 days, filtered, and the solvent was removed to remove eringi extract (dried fraction). As 0.5 g).

〔試験例1〕細胞培養によるメラニン生成抑制及び細胞生存率試験
マウス由来のB16メラノーマ培養細胞を使用した。2枚の6穴シャーレに培地を適量とり、B16メラノーマ細胞を播種し、37℃、二酸化炭素濃度5%中にて静置した。翌日、製造例1で得たエリンギ抽出物を最終濃度が0(対照)、10、30,100,300,1000μg/mLとなるように検体調製液を添加し混和した。培養5日目に培地を交換し、再度検体調製液を添加した。翌日、培地を除き、1枚のシャーレについて、細胞をリン酸緩衝液にて洗浄した後回収し、B16メラノーマ培養細胞の白色化度を以下の基準にて評価した。
なお、エリンギ抽出物の比較対照として、メラニン生成抑制効果が知られているL−アスコルビン酸2−グルコシドを用い、同様な試験を行った。
[Test Example 1] Inhibition of melanin production by cell culture and cell viability test B16 melanoma cultured cells derived from mice were used. An appropriate amount of medium was taken in two 6-well petri dishes, seeded with B16 melanoma cells, and allowed to stand at 37 ° C. in a carbon dioxide concentration of 5%. On the next day, the sample preparation solution was added and mixed with the eringi extract obtained in Production Example 1 so that the final concentration was 0 (control), 10, 30, 100, 300, 1000 μg / mL. On day 5 of the culture, the medium was changed, and the sample preparation solution was added again. On the next day, the medium was removed and the cells were collected after washing with a phosphate buffer for one petri dish, and the whiteness of the cultured B16 melanoma cells was evaluated according to the following criteria.
In addition, the same test was done using L-ascorbic acid 2-glucoside known for the melanin production inhibitory effect as a comparison control of the eringi extract.

(判定基準)
+++:対照(無添加)に対してきわめて白色である。
++ :対照(無添加)に対してあきらかに白色である。
+ :対照(無添加)に対して白色である。
± :対照(無添加)に対してやや白色である。
− :対照(無添加)と同じ黒色である。
(Criteria)
+++: Very white compared to the control (no addition).
++: Clearly white with respect to the control (no addition).
+: White with respect to the control (no addition).
±: Slightly white with respect to the control (no addition).
-: The same black color as that of the control (no addition).


残りの1枚のシャーレについて、細胞をホルマリン固定後、1%クリスタルバイオレット溶液に添加し染色した。各検体濃度に対する生存細胞率をモノセレーター(オリンパス社製)で測定した。以上の結果を表1に示す。

For the remaining one petri dish, cells were fixed in formalin, added to a 1% crystal violet solution and stained. The viable cell ratio with respect to each sample concentration was measured with a monocerator (manufactured by Olympus). The results are shown in Table 1.

(結果)
(result)

表1の結果から明らかなごとく、エリンギ抽出物はL−アスコルビン酸2−グルコシドに比べ低濃度でもメラニン生成抑制効果を有し、L−アスコルビン酸2−グルコシドと同濃度ではより高いメラニン生成抑制効果を有することが認められた。また、B16メラノーマ培養細胞に対し毒性が低いことも認められた。従って、エリンギ抽出物を配合した本発明の皮膚外用剤又は化粧料は、これを肌に適用しても安全であり、且つ、優れたメラニン生成抑制作用を発揮し、日焼けによる肌の黒色化、シミ、ソバカスなどを効果的に抑制する美肌効果が期待できる。   As is clear from the results in Table 1, the eringi extract has a melanin production inhibitory effect even at a low concentration compared to L-ascorbic acid 2-glucoside, and a higher melanin production inhibitory effect at the same concentration as L-ascorbic acid 2-glucoside. It was found to have It was also observed that the toxicity to B16 melanoma cultured cells was low. Therefore, the external preparation for skin or cosmetics of the present invention blended with eringi extract is safe even when applied to the skin, and exhibits an excellent melanin production inhibitory effect, and the skin becomes darkened by sunburn, A skin-beautifying effect that effectively suppresses spots, freckles, etc. can be expected.

以下に、皮膚外用剤又は化粧料の処方例を挙げて説明するが、本発明がこれらに限定されるものではない。   Hereinafter, examples of the preparation for external preparation for skin or cosmetics will be described. However, the present invention is not limited thereto.

[例1:化粧水の調製]
下記の組成の化粧水を、以下の方法で調製した。
A.成分(1)〜(8)を混合溶解する。
B.成分(9)〜(14)を混合溶解する。
C.BにAを加え混合し、化粧水を得る。
(成分) (%)
(1)メドウホーム油 0.1
(2)ホホバ油 0.05
(3)香料 適量
(4)防腐剤 適量
(5)モノオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)
ソルビタン 0.5
(6)イソステアリン酸ポリオキシエチレン(50E.O.)
硬化ヒマシ油
1.0
(7)エチルアルコール 8.0
(8)酢酸トコフェロール*1 0.05
(9)グリチルリチン酸ジカリウム*2 0.1
(10)グリセリン 5.0
(11)1,3−ブチレングリコール 5.0
(12)ポリエチレングリコール1500 0.1
(13)エリンギ抽出物*3 0.01
(14)精製水 残量
*1:理研ビタミン株式会社製
*2:一丸ファルコス社製
*3:製造例1にて得たもの
[Example 1: Preparation of lotion]
A lotion having the following composition was prepared by the following method.
A. Components (1) to (8) are mixed and dissolved.
B. Components (9) to (14) are mixed and dissolved.
C. A is added to B and mixed to obtain a skin lotion.
(Ingredient) (%)
(1) Meadow home oil 0.1
(2) Jojoba oil 0.05
(3) Perfume appropriate amount (4) preservative appropriate amount (5) polyoxyethylene monooleate (20E.O.)
Sorbitan 0.5
(6) Polyoxyethylene isostearate (50 EO)
Hydrogenated castor oil
1.0
(7) Ethyl alcohol 8.0
(8) Tocopherol acetate * 1 0.05
(9) Dipotassium glycyrrhizinate * 2 0.1
(10) Glycerin 5.0
(11) 1,3-butylene glycol 5.0
(12) Polyethylene glycol 1500 0.1
(13) Elingi extract * 3 0.01
(14) Purified water remaining * 1: Riken Vitamin Co., Ltd. * 2: Ichimaru Falcos * 3: Obtained in Production Example 1

[例2:ローション剤の調製]
下記の組成のローション剤を、以下の方法で調製した。
A.成分(1)〜(5)を混合溶解する。
B.成分(6)〜(13)を混合溶解する。
C.AにBを加え混合し、化粧水を得た。
(成分) (%)
(1)クエン酸 0.05
(2)クエン酸ナトリウム 0.2
(3)ピロリドンカルボン酸ナトリウム(50%)水溶液 0.5
(4)グリセリン 3.0
(5)1,3−ブチレングリコール 8.0
(6)精製水 残量
(7)エチルアルコール 10.0
(8)カテキン*1 0.0001
(9)アスコルビン酸グルコシド*2 0.3
(10)エリンギ抽出物*3 0.1
(11)香料 適量
(12)防腐剤 適量
(13)モノオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)
ソルビタン 0.5
*1:三井農林株式会社社製
*2:株式会社林原生物化学研究所社製
*3:製造例1にて得たもの
[Example 2: Preparation of lotion preparation]
A lotion having the following composition was prepared by the following method.
A. Components (1) to (5) are mixed and dissolved.
B. Components (6) to (13) are mixed and dissolved.
C. B was added to A and mixed to obtain a skin lotion.
(Ingredient) (%)
(1) Citric acid 0.05
(2) Sodium citrate 0.2
(3) Sodium pyrrolidonecarboxylate (50%) aqueous solution 0.5
(4) Glycerin 3.0
(5) 1,3-butylene glycol 8.0
(6) Purified water remaining amount (7) Ethyl alcohol 10.0
(8) Catechin * 1 0.0001
(9) Ascorbic acid glucoside * 2 0.3
(10) Elingi extract * 3 0.1
(11) Perfume Appropriate amount (12) Preservative Appropriate amount (13) Polyoxyethylene monooleate (20E.O.)
Sorbitan 0.5
* 1: Made by Mitsui Norin Co., Ltd. * 2: Made by Hayashibara Biochemical Research Co., Ltd. * 3: Obtained in Production Example 1

[例3:乳液の調製]
下記の組成の乳液を、以下の方法で調製した。
A.成分(10)を加熱混合し、70℃に保つ。
B.成分(1)〜(9)および(11)を加熱混合し、70℃に保つ。
C.BにAを加えて混合し、均一に乳化する。
D.Cを冷却後(12)〜(16)を加え、均一に混合して乳液を得た。
(成分) (%)
(1)ポリオキシエチレン(10E.O.)ソルビタン
モノステアレート 1.0
(2)ポリオキシエチレン(60E.O.)ソルビット
テトラオレエート 0.5
(3)モノステアリン酸グリセリル 1.0
(4)ステアリン酸 0.5
(5)ベヘニルアルコール 0.5
(6)スクワラン 8.0
(7)エチルアルコール 5.0
(8)パルミチン酸レチノール*1 0.1
(9)グリチルリチン酸ステアリル*2 0.1
(10)精製水 残量
(11)防腐剤 適量
(12)カルボキシビニルポリマー 0.2
(13)水酸化ナトリウム 0.1
(14)ヒアルロン酸ナトリウム*3 0.1
(15)エリンギ抽出物*4 0.05
(16)香料 適量
*1:理研ビタミン株式会社製
*2:日光ケミカルズ社製
*3:日光ケミカルズ社製
*4:製造例1にて得たもの
[Example 3: Preparation of emulsion]
An emulsion having the following composition was prepared by the following method.
A. Ingredient (10) is heat mixed and maintained at 70 ° C.
B. Ingredients (1) to (9) and (11) are heated and mixed and maintained at 70 ° C.
C. A is added to B, mixed and uniformly emulsified.
D. After cooling C, (12) to (16) were added and mixed uniformly to obtain an emulsion.
(Ingredient) (%)
(1) Polyoxyethylene (10E.O.) sorbitan monostearate 1.0
(2) Polyoxyethylene (60E.O.) sorbit tetraoleate 0.5
(3) Glyceryl monostearate 1.0
(4) Stearic acid 0.5
(5) Behenyl alcohol 0.5
(6) Squalane 8.0
(7) Ethyl alcohol 5.0
(8) Retinol palmitate * 1 0.1
(9) Stearyl glycyrrhizinate * 2 0.1
(10) Purified water Remaining amount (11) Preservative Appropriate amount (12) Carboxyvinyl polymer 0.2
(13) Sodium hydroxide 0.1
(14) Sodium hyaluronate * 3 0.1
(15) Elingi extract * 4 0.05
(16) Fragrance Appropriate amount * 1: Riken Vitamin Co., Ltd. * 2: Nikko Chemicals * 3: Nikko Chemicals * 4: Obtained in Production Example 1

[例4:美容液の調製]
下記の組成の美容液を、以下の方法で調製した。
A. 成分(1)〜(9)を混合溶解する。
B. 成分(10)〜(19)を混合溶解する。
C. BにAを加え混合し、美容液を得る。
(成分) (%)
(1)トリ2−エチルヘキサン酸グリセリル 0.1
(2)マカデミアンナッツ油
0.05
(3)オリーブ油
0.05
(4)小麦胚芽油
0.01
(5)香料 適量
(6)防腐剤 適量
(7)モノオレイン酸ポリオキシエチレン(20E.O.)
ソルビタン
0.4
(8)イソステアリン酸ポリキシエチレン(50E.O.)
硬化ヒマシ油
1.6
(9)エチルアルコール 8.0
(10)グリセリン
6.0
(11)1,3−ブチレングリコール
8.0
(12)ジプロピレングリコール
4.0
(13)セリン*1
0.1
(14)ソルビトール
0.5
(15)乳酸ナトリウム 1.0
(16)エリンギ抽出物*2
0.2
(17)ヒドロキシエチルセルロース
0.08
(18)アルギン酸ナトリウム
0.05
(19)精製水 残量
*1:味の素株式会社製
*2:製造例1にて得たもの
[Example 4: Preparation of serum]
A serum having the following composition was prepared by the following method.
A. The components (1) to (9) are mixed and dissolved.
B. Components (10) to (19) are mixed and dissolved.
C. A is added to B and mixed to obtain a serum.
(Ingredient) (%)
(1) Glyceryl tri-2-ethylhexanoate 0.1
(2) Macadamian nut oil
0.05
(3) Olive oil
0.05
(4) Wheat germ oil
0.01
(5) Perfume appropriate amount (6) Preservative appropriate amount (7) Polyoxyethylene monooleate (20E.O.)
Sorbitan
0.4
(8) Polyoxyethylene isostearate (50 EO)
Hydrogenated castor oil
1.6
(9) Ethyl alcohol 8.0
(10) Glycerin
6.0
(11) 1,3-butylene glycol
8.0
(12) Dipropylene glycol
4.0
(13) Serine * 1
0.1
(14) Sorbitol
0.5
(15) Sodium lactate 1.0
(16) Elingi extract * 2
0.2
(17) Hydroxyethyl cellulose
0.08
(18) Sodium alginate
0.05
(19) Purified water remaining amount * 1: manufactured by Ajinomoto Co., Inc. * 2: obtained in Production Example 1

[例5:ファンデーションの調製]
下記の組成のファンデーションを、以下の方法で調製した。
A. 成分(8)〜(14)を混合する。
B. 成分(15)〜(21)を混合する。
C. Aに成分(1)〜(7)を加え混合分散する。
D.CにBを加えて乳化する。
E. Dに成分(22)を加え混合する。
(成分) (%)
(1)セリサイト
8.0
(2)酸化チタン 10.0
(3)ベンガラ
1.0
(4)黄色酸化鉄
2.2
(5)雲母チタン
2.0
(6)黒酸化鉄
0.1
(7)有機変性ベントナイト(*1)
0.5
(8)長鎖アルキル含有ポリオキシアルキレン変性
オルガノポリシロキサン(*2)
2.0
(9)ポリオキシアルキレン変性オルガノ
ポリシロキサン(*3)
2.0
(10)デカメチルシクロペンタシロキサン
12.0
(11)オクタメチルシクロペンタシロキサン
10.0
(12)トリメチルシロキシケイ酸の
シリコーン溶液(*4)
3.0
(13)パラメトキシケイ皮酸−2−エチルヘキシル
1.0
(14)トリ2−エチルヘキサン酸グリセリル
5.0
(15)1,3−ブチレングリコール
5.0
(16)ジグリセリン
2.0
(17)グリセリン
2.0
(18)エリンギ抽出物*5
0.1
(19)キサンタンガム
0.2
(20)塩化ナトリウム
0.2
(21)精製水 残量
(22)香料 適量
*1:ベントン38(NLエンダストリー社製)
*2:アビルEM−90(ゴールドシュミット社製)
*3:シリコンKF−6017(信越化学工業社製)
*4:シリコンKF−7312J(信越化学工業社製)
*5:製造例1にて得たもの
[Example 5: Preparation of foundation]
A foundation having the following composition was prepared by the following method.
A. The components (8) to (14) are mixed.
B. Components (15) to (21) are mixed.
C. Add components (1) to (7) to A and mix and disperse.
D. B is added to C and emulsified.
E. Add component (22) to D and mix.
(Ingredient) (%)
(1) Sericite
8.0
(2) Titanium oxide 10.0
(3) Bengala
1.0
(4) Yellow iron oxide
2.2
(5) Mica titanium
2.0
(6) Black iron oxide
0.1
(7) Organically modified bentonite (* 1)
0.5
(8) Long chain alkyl-containing polyoxyalkylene-modified organopolysiloxane (* 2)
2.0
(9) Polyoxyalkylene-modified organo polysiloxane (* 3)
2.0
(10) Decamethylcyclopentasiloxane
12.0
(11) Octamethylcyclopentasiloxane
10.0
(12) Silicone solution of trimethylsiloxysilicate (* 4)
3.0
(13) 2-methoxyhexyl paramethoxycinnamate
1.0
(14) Glyceryl tri-2-ethylhexanoate
5.0
(15) 1,3-butylene glycol
5.0
(16) Diglycerin
2.0
(17) Glycerin
2.0
(18) Elingi extract * 5
0.1
(19) Xanthan gum
0.2
(20) Sodium chloride
0.2
(21) Purified water Remaining amount (22) Fragrance proper amount * 1: Benton 38 (manufactured by NL Endustry)
* 2: Avil EM-90 (Gold Schmidt)
* 3: Silicon KF-6017 (manufactured by Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)
* 4: Silicon KF-7312J (manufactured by Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)
* 5: Obtained in Production Example 1

[例6:軟膏の調製]
下記の組成の軟膏を、以下の方法で調製した。
A. 成分(3)、(4)、(6)、(7)及び(8)の一部を加熱混合し、70℃に保つ。
B. 成分(1)、(2)を加熱混合し、70℃に保つ。
C. AをBに徐々に加え混合する。
D.CにBを加えて乳化する。
E. Cを冷却しながら、成分(8)の残部で溶解した成分(5)を加え混合して軟膏を得た。
(成分) (%)
(1)ステアリン酸 18.0
(2)セタノール 4.0
(3)トリエタノールアミン 2.0
(4)グリセリン 5.0
(5)エリンギ抽出物*1 0.2
(6)乳酸 1.0
(7)防腐剤 適量
(8)精製水 残量
*1:製造例1にて得たもの
[Example 6: Preparation of ointment]
An ointment having the following composition was prepared by the following method.
A. A part of the components (3), (4), (6), (7) and (8) is heated and mixed and kept at 70 ° C.
B. Ingredients (1) and (2) are heated and mixed and maintained at 70 ° C.
C. Gradually add A to B and mix.
D. B is added to C and emulsified.
While cooling E.C, component (5) dissolved in the remainder of component (8) was added and mixed to obtain an ointment.
(Ingredient) (%)
(1) Stearic acid 18.0
(2) Cetanol 4.0
(3) Triethanolamine 2.0
(4) Glycerin 5.0
(5) Elingi extract * 1 0.2
(6) Lactic acid 1.0
(7) Preservative appropriate amount (8) Purified water remaining amount * 1: obtained in Production Example 1

上記、例1〜6の皮膚外用剤又は化粧料は、安定性や安全性にも優れ、皮膚に適用することにより、メラニン生成抑制作用が発揮され、シミ、ソバカスを防ぎ、肌を白くする作用があるものであった。   The above skin external preparations or cosmetics of Examples 1 to 6 are also excellent in stability and safety, and when applied to the skin, the melanin production inhibitory effect is exerted, preventing spots and freckles and whitening the skin. There was something.

Claims (3)

エリンギ(学名:Pleurotus eryngii)抽出物を有効成分とするメラニン生成抑制剤。 Melanin production inhibitor containing eringi (scientific name: Pleurotus eryngii) extract as an active ingredient. 請求項1記載のメラニン生成抑制剤を有効成分として配合することを特徴とする皮膚外用剤又は化粧料。 A skin external preparation or cosmetic comprising the melanin production inhibitor according to claim 1 as an active ingredient. 請求項1記載のメラニン生成抑制剤を有効成分として配合することを特徴とする美白用皮膚外用剤又は化粧料。 A whitening skin external preparation or cosmetic comprising the melanin production inhibitor according to claim 1 as an active ingredient.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101325214B1 (en) 2011-05-24 2013-11-04 농업회사법인주식회사 뜰아채 Noble elastease inhibitor isolated from Pleurotus eryngii var. ferulae and composition of the prevention or treatment for anti aging containing the same as an active ingredient

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5527883B2 (en) * 1971-10-12 1980-07-24
JPH10158144A (en) * 1996-12-03 1998-06-16 Pola Chem Ind Inc Skin cosmetic
JP2003267887A (en) * 2002-03-15 2003-09-25 Shiseido Co Ltd Skin care preparation inhibiting chemokine expression
JP2005239644A (en) * 2004-02-26 2005-09-08 Geol Kagaku Kk Composition derived from mushroom
JP2006083064A (en) * 2003-09-10 2006-03-30 Fumiharu Eguchi Antioxidant, beautifying and whitening agent, and skin preparation for external use comprising the same
JP2007300916A (en) * 2006-04-10 2007-11-22 Manabu Nukina Method for producing ergothioneine
JP2009126863A (en) * 2007-11-27 2009-06-11 Koei Kogyo Kk Composition highly containing ergothioneine extracted from mushroom

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5527883B2 (en) * 1971-10-12 1980-07-24
JPH10158144A (en) * 1996-12-03 1998-06-16 Pola Chem Ind Inc Skin cosmetic
JP2003267887A (en) * 2002-03-15 2003-09-25 Shiseido Co Ltd Skin care preparation inhibiting chemokine expression
JP2006083064A (en) * 2003-09-10 2006-03-30 Fumiharu Eguchi Antioxidant, beautifying and whitening agent, and skin preparation for external use comprising the same
JP2005239644A (en) * 2004-02-26 2005-09-08 Geol Kagaku Kk Composition derived from mushroom
JP2007300916A (en) * 2006-04-10 2007-11-22 Manabu Nukina Method for producing ergothioneine
JP2009126863A (en) * 2007-11-27 2009-06-11 Koei Kogyo Kk Composition highly containing ergothioneine extracted from mushroom

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JPN6013031846; Hyun-In Oh, et al.: 'Monitoring the Functional Properties of Pleurotus eryngii Extracts Using Response Surface Methodolog' Food Science and Biotechnology Vol. 16, No. 2, 2007, 299-305 *
JPN6013031848; 新 化粧品ハンドブック , 200610, 528-529, 日光ケミカルズ株式会社他 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101325214B1 (en) 2011-05-24 2013-11-04 농업회사법인주식회사 뜰아채 Noble elastease inhibitor isolated from Pleurotus eryngii var. ferulae and composition of the prevention or treatment for anti aging containing the same as an active ingredient

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