JP2010065025A - 角層剥離酵素保護用組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明による角層剥離酵素保護用組成物は、二価の金属イオンと、加水分解シルクタンパク質とを必須成分として含んでなることを特徴とする。
【選択図】なし
Description
本発明による角層剥離酵素保護用組成物は、前記したように、二価の金属イオンと、加水分解シルクタンパク質とを必須成分として含んでなることを特徴とする。
本発明において使用される二価の金属イオンは、生体への安全性が高いものである限り特に限定されるものでなく、例えば、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウムなどの周期表第2族元素の金属イオンを挙げることができる。これらは二種以上組み合わせて用いてもよい。皮膚に適用した際に皮膚刺激が少なく、本発明の効果が優れているという点から、該二価の金属イオンとしては、カルシウムイオン(Ca2+)が好ましい。
本発明において使用される加水分解シルクタンパク質は、家蚕(Bombyx mori)や野蚕が生産するシルクタンパク質を加水分解して得られるものである。シルクタンパク質は、フィブロイン、セリシンを主成分とするタンパク質の混合物であり、本発明においては、フィブロイン、セリシンを単独もしくは混合状態で加水分解したものを用いることができる。
加水分解シルクタンパク質として、加水分解セリシン、加水分解フィブロインをそれぞれ含む水溶液を製造した。
まず家蚕由来の切り繭50gを水洗した後、1Lの水に浸漬し、溶液のpHが9.5になるように水酸化ナトリウムを添加した。続いて、アルカリ条件下で繭を2時間煮沸し、セリシンの抽出と加水分解を行った。得られた抽出液を塩酸を用いて中和した。続いて抽出液を平均孔径0.2μmのフィルターを用いてろ過し、不溶物を除去した。さらに、抽出液を脱塩カラム(PD−10:GEヘルスケアバイオサイエンス株式会社製)を用いて脱塩し、濃度約50,000mg/kgの加水分解セリシン水溶液を得た。
なお水溶液中の加水分解セリシンの重量平均分子量は約30,000であった。
まず家蚕由来の切り繭50gを水洗した後、1Lの水に浸漬し、溶液のpHが9.5になるように水酸化ナトリウムを添加した。続いて、アルカリ条件下で繭を2時間煮沸して、セリシンを除去し、フィブロイン繊維を得た。得られたフィブロイン繊維を水で洗浄した後、9M臭化リチウム水溶液500mLに溶解し、フィブロイン水溶液を調製した。さらにこのフィブロイン水溶液を透析して、溶液中の臭化リチウムを除いた後、最終濃度が0.2Nとなるように塩酸を加え、80℃で1時間加温して加水分解を行った。加水分解後、水酸化ナトリウムを用いて溶液を中和した。続いて、得られた溶液を平均孔径0.2μmのフィルターを用いてろ過し、不溶物を除去した。さらに脱塩カラム(PD−10:GEヘルスケアバイオサイエンス株式会社製)を用いて脱塩し、濃度約50,000mg/kgの加水分解フィブロイン水溶液を得た。
なお水溶液中の加水分解フィブロインの重量平均分子量は約1,500であった。
前述の加水分解シルクタンパク質の水溶液を用いて、表1および表2に示す各組成物を調製し、各試験に適用した。この内、比較例8および9の組成物は、アスコルビン酸と加水分解シルクタンパク質とを含有する公知の皮膚外用剤(特開2007−277119号公報(特許文献4))に関するものであり、アスコルビン酸としては、L−アスコルビン酸ナトリウムとして使用した。
なお、各組成物において、水溶性の金属塩の形態で塩化カルシウム、パントテン酸カルシウムおよび塩化マグネシウムを加え、金属イオンとしては、これらに由来するもの用いた。またpH条件を一定にするため、本実施例では100mM Tris−HCl緩衝液(pH7.0)を用いて、各組成物を調製した。
前記の実施例1〜9および比較例1〜11の各組成物に、最終濃度が100μg/mlとなるようにトリプシン(シグマ社製)を添加し、酵素溶液を調製した。
得られた酵素溶液10μlをそれぞれ、96wellマイクロプレートに分注し、40℃の恒温器内に2時間静置して乾燥処理を行った。続いて、100mM Tris−HCl緩衝液(pH7.0)190μlをここに添加し、酵素を再溶解させた。比較対照として、100mM Tris−HCl緩衝液に上記濃度のトリプシンを添加し、乾燥処理を行わないサンプルを同時に調製した。
まず、100mM Tris−HCl緩衝液(pH7.0)に、最終濃度が100μg/mlとなるようにトリプシン(シグマ社製)を添加し、これを酵素溶液とした。
次にこの酵素溶液10μlを96wellマイクロプレートに分注し、40℃の恒温器内に2時間静置して乾燥処理を行った。続いて、前記実施例3および6、ならびに比較例1、3、4、5、6、10および11の各組成物をそれぞれ190μlずつ添加し、酵素を再溶解させた。比較対照として、前記酵素溶液10μlに、100mM Tris−HCl緩衝液(pH7.0)180μlを添加し、乾燥処理を行わないサンプルを同時に調製した。
表3に示す実施例10の組成物を調製した。表中、クエン酸の適量とは、組成物をpH6.5にするのに必要な量のことであり、フェノキシエタノールは防腐剤として使用した。
パネラーは、実施例10の組成物の適量(約2ml)を、毎日朝と夜の2回、8週間継続して顔全体に塗布した。塗布開始前と塗布後8週間の皮膚の表面状態をレプリカに採り、レプリカ法の常法に従ってキメの状態を評価した。
一般に、キメ体積率が大きいほど皮丘が高く、規則的に整ったキメの状態であるといえる。また、キメ個数が多いほど、細かく整ったキメであるといえる。
結果から明らかなように、塗布後はキメ体積率の増加、キメ個数の増加がみられた。このことから、本発明の組成物は、乾燥肌における角層のターンオーバーを正常化し、キメを整える効果が優れており、乾燥性の肌荒れを予防改善するための皮膚外用剤として有用性が高いことが確認された。
本発明による角層剥離酵素保護用組成物の他の処方例を下記に示す。
処方例1: ローション
(1)1,3−ブチレングリコール 8(重量%)
(2)濃グリセリン 6
(3)エタノール 3
(4)L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2
(5)加水分解セリシン 0.2
(6)アロエエキス 0.2
(7)クロレラエキス 0.2
(8)カッコンエキス 0.01
(9)酵母エキス 0.2
(10)塩化カルシウム 0.001
(11)水酸化ナトリウム 適量
(12)クエン酸ナトリウム 適量
(13)クエン酸 適量
(14)パラオキシ安息香酸エステル 0.1
(15)精製水 残量
pH:6.7
製法:精製水に全ての成分を順次添加して、混合、均一化する。
(1)濃グリセリン 10(重量%)
(2)エタノール 8
(3)トリ2−エチルヘキサン酸グリセリル 6
(4)1,3−ブチレングリコール 5
(5)ジステアリン酸ポリグリセリル 2
(6)バチルアルコール 2
(7)L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2
(8)加水分解セリシン 0.2
(9)水素添加大豆リン脂質 0.5
(10)アロエエキス 0.2
(11)クロレラエキス 0.2
(12)カッコンエキス 0.01
(13)酵母エキス 0.2
(14)カンゾウ抽出末 0.1
(15)d−δ−トコフェロール 0.1
(16)塩化カルシウム 0.005
(17)ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム 適量
(18)カルボキシビニルポリマー 適量
(19)ヒドロキシエチルセルロース 適量
(20)クエン酸ナトリウム 適量
(21)水酸化ナトリウム 適量
(22)パラオキシ安息香酸エステル 0.1
(23)精製水 残量
pH:7.0
製法:油性成分、及び水性成分をそれぞれ混合均一化して80℃に加熱する。水性成分に油性成分を添加して乳化し、撹拌しながら冷却する。
(1)濃グリセリン 15(重量%)
(2)1,3−ブチレングリコール 10
(3)スクワラン 10
(4)硬化油 5
(5)バチルアルコール 5
(6)エタノール 5
(7)ベヘニルアルコール 2
(8)パルミチン酸セチル 2
(9)親油型モノステアリン酸グリセリン 2
(10)イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル 1
(11)メチルポリシロキサン 1
(12)L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2
(13)加水分解セリシン 1
(14)アロエエキス 0.2
(15)クロレラエキス 0.2
(16)塩化カルシウム 0.01
(17)カッコンエキス 0.01
(18)クワエキス 0.1
(19)マロニエエキス 0.1
(20)ワレモコウエキス 0.1
(21)酵母エキス 0.2
(22)ツボクサエキス 0.1
(23)テルミナリアエキス 0.01
(24)カンゾウ抽出末 0.1
(25)バチルアルコール 0.1
(26)ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム 適量
(27)ヒドロキシエチルセルロース 適量
(28)クエン酸ナトリウム 適量
(29)水酸化ナトリウム 適量
(30)パラオキシ安息香酸エステル 0.1
(31)精製水 残量
pH:6.5
製法:油性成分、及び水性成分をそれぞれ混合均一化して80℃に加熱する。水性成分に油性成分を添加して乳化し、撹拌しながら冷却する。
(1)1,3−ブチレングリコール 8(重量%)
(2)濃グリセリン 6
(3)エタノール 3
(4)L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2
(5)加水分解セリシン 0.2
(6)アロエエキス 0.2
(7)クロレラエキス 0.2
(8)カッコンエキス 0.01
(9)酵母エキス 0.2
(10)パントテン酸カルシウム 0.005
(11)水酸化ナトリウム 適量
(12)クエン酸ナトリウム 適量
(13)クエン酸 適量
(14)パラオキシ安息香酸エステル 0.1
(15)精製水 残量
pH:6.7
製法:精製水に全ての成分を順次添加して、混合、均一化する。
(1)濃グリセリン 10(重量%)
(2)エタノール 8
(3)トリ2−エチルヘキサン酸グリセリル 6
(4)1,3−ブチレングリコール 5
(5)ジステアリン酸ポリグリセリル 2
(6)バチルアルコール 2
(7)L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2
(8)加水分解セリシン 0.2
(9)水素添加大豆リン脂質 0.5
(10)アロエエキス 0.2
(11)クロレラエキス 0.2
(12)カッコンエキス 0.01
(13)酵母エキス 0.2
(14)カンゾウ抽出末 0.1
(15)d−δ−トコフェロール 0.1
(16)パントテン酸カルシウム 0.01
(17)ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム 適量
(18)カルボキシビニルポリマー 適量
(19)ヒドロキシエチルセルロース 適量
(20)クエン酸ナトリウム 適量
(21)水酸化ナトリウム 適量
(22)パラオキシ安息香酸エステル 0.1
(23)精製水 残量
pH:7.0
製法:油性成分、及び水性成分をそれぞれ混合均一化して80℃に加熱する。水性成分に油性成分を添加して乳化し、撹拌しながら冷却する。
(1)濃グリセリン 15(重量%)
(2)1,3−ブチレングリコール 10
(3)スクワラン 10
(4)硬化油 5
(5)バチルアルコール 5
(6)エタノール 5
(7)ベヘニルアルコール 2
(8)パルミチン酸セチル 2
(9)親油型モノステアリン酸グリセリン 2
(10)イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル 1
(11)メチルポリシロキサン 1
(12)L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2
(13)加水分解セリシン 1
(14)アロエエキス 0.2
(15)クロレラエキス 0.2
(16)パントテン酸カルシウム 0.01
(17)カッコンエキス 0.01
(18)クワエキス 0.1
(19)マロニエエキス 0.1
(20)ワレモコウエキス 0.1
(21)酵母エキス 0.2
(22)ツボクサエキス 0.1
(23)テルミナリアエキス 0.01
(24)カンゾウ抽出末 0.1
(25)バチルアルコール 0.1
(26)ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム 適量
(27)ヒドロキシエチルセルロース 適量
(28)クエン酸ナトリウム 適量
(29)水酸化ナトリウム 適量
(30)パラオキシ安息香酸エステル 0.1
(31)精製水 残量
pH:6.5
製法:油性成分、及び水性成分をそれぞれ混合均一化して80℃に加熱する。水性成分に油性成分を添加して乳化し、撹拌しながら冷却する。
Claims (8)
- 二価の金属イオンと、加水分解シルクタンパク質とを必須成分として含んでなることを特徴とする、角層剥離酵素保護用組成物。
- 前記加水分解シルクタンパク質が加水分解セリシンである、請求項1に記載の組成物。
- 加水分解セリシンの重量平均分子量が、1,000〜100,000である、請求項2に記載の組成物。
- 二価の金属イオンがカルシウムイオンである、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。
- 二価の金属イオンが、水溶性の金属塩の形態で加えられたパントテン酸カルシウムに由来する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記金属イオンの含有量が、組成物全量に対して、0.01〜10,000mg/kgであり、かつ、加水分解シルクタンパク質の含有量が、組成物全量に対して、200〜200,000mg/kgである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
- 皮膚のターンオーバーの調節に関与するプロテアーゼの、皮膚における乾燥による活性低下を防止するか、または、前記プロテアーゼの低下した活性を回復させるために用いられる、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物。
- 乾燥性の肌荒れを予防改善するための皮膚外用組成物である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
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JP2008208443 | 2008-08-13 | ||
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JP2009185627A JP5933907B2 (ja) | 2008-08-13 | 2009-08-10 | 角層剥離酵素保護用組成物 |
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Title |
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JPN6014036402; 新化粧品ハンドブック , 20061030, p.426-428 * |
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