JP2009532037A - グリセロールの嫌気醗酵 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、先願の2006年3月31日に出願された米国仮特許出願第60/788,512号、および2006年11月28日に出願された米国仮特許出願第60/867,581号に対する優先権を主張する。これらは双方とも、本明細書中にその全体が参考として援用される。
本発明は政府基金により部分的に財政支援されており、合衆国政府は本発明に特定の権利を有する。
適用せず。
本発明はグリセロール基質上で発酵的に(即ち電子受容体の非存在下)生育させるための細菌に対する適切な培養条件の開発に関する。本発明はグリセロールをより高い価値の生成物、例えばエタノール、水素、ホルメート、スクシネート、及び1,2−プロパンジオールに変換することができる方法及び菌株の開発のために特に使用される。
Jin,R.Z.ら、J.Mol.Evol.19:429−436(1983) Tang,J.C.ら、J.Bacteriol.152:1169−1174(1982) Tang,J.C.ら、J.Bacteriol.152:1001−1007(1982)
本発明者等はE.coliが実際は特定の条件下で電子受容体非存在下にグリセロールを発酵できることを発見した。本発明者等の所見はE.coliおよび他の腸内細菌におけるグリセロール発酵の新しいパラダイムを提示するものであり、そして低価値の粗グリセロールを高価値の薬品及び燃料に変換する微生物プラットホームの開発を可能にすることになる。
極めて「デリケート」なこととなる。H2は数種の反応(例えばフマレート還元酵素)においては電子供与体として作用し、これにより酸化還元バランスを相殺する。H2濃度が低下すればこれは起こらず、そしてグリセロール発酵は最適に進行する。ヘッドスペースを増大させることにより、H2は希釈され、そしてグリセロール発酵は向上している。ヘッドスペースを不活性ガス又はCO2でフラッシュすることにより過剰なH2が除去され、グリセロール発酵が更に増進される。培地を通してガスでスパージ又はバブリングすることにより、大部分のH2は除去され、最良のグリセロール発酵条件がもたらされている。
本明細書全体を通じて、遺伝子破壊突然変異体は以下の命名法、即ち:遺伝子1の単一の破壊についてはΔ遺伝子1、又は二重破壊についてはΔ遺伝子1Δ遺伝子2を用いて言及する。
E.coliにおけるグリセロールの代謝は呼吸条件により限定されていると考えられるが、本発明者等は電子受容体の非存在下においてこの生物がグリセロールを代謝できることを発見している。図1は2g/Lトリプトンを補充した培地中の野生型菌株MG1655に関する典型的な発酵プロファイルを示す(追加的詳細は暫定出願60/788,512ならびに60/867,581及びGonzalez等、2007に記載されている)。約1〜2g/Lのグリセロールは定常期培養の培地中において未発酵状態で残存していた。エタノール、1,2−プロパンジオール(1,2−PDO)及びコハク酸、及びギ酸は異なるNMR手法を用いた場合に発酵生成物として検出された。
腸内細菌によるグリセロールの嫌気的発酵は、活性な1,3−PDO経路を有する種の特権であると考えられてきた。しかしながら本発明者等は、E.coliは機能する1,2−PDO経路及びglyDH−II−DHAK経路が存在している限り、1,3−PDO非依存性の態様においてグリセロールを発酵的に代謝できることを明らかにしている。
2NG:生育観察せず;ND:検出せず;SD:標準偏差。
3μM:指数生育期に計算した最大特異的生育速度(h−1)。
4Yx/s:消費されたグリセロール当たりの菌体塊の増大として計算した生育収率(mg細胞/gグリセロール)。
51,2−PDOの合成は記載した通りNMRで識別した。
グリセロール発酵の向上のための本発明者等の所見の意義を明らかにするために、本発明者等は野生型菌株MG1655における発見された主幹経路(GldA−DHAK)を過剰発現させ、そして細胞生育及びグリセロール発酵の両方において2倍超の増大を観察した。GldA−DHAK経路の増幅はプラスミドpZSdhaKLM_gldAでMG1655を形質転換することにより達成した。生産性を更に向上させるためにはGldA−DHAK経路と共に解糖系酵素(例えばトリオース−ホスフェートイソメラーゼ)の一致した過剰発現が必要であると考えられる。更に又、培地、培養系及び作動様式を更に最適化することを包含する幾つかのプロセス系の改良が実施中である。
本発明者等は又炭素源としてのグリセロール及び上記した培地を用いた生成物形成の例示的呈示を行った。例えば、本発明者等は図4に示すエタノールの生産を示している。本発明者等の結果は、僅かな遺伝子的及び環境的な改変により、E.coliがエタノールとH2−CO2(pH6.3)又はエタノールとギ酸(pH7.5及びFHL系の破壊)の何れかへのグリセロールの変換のための良好な生体触媒となることを示している。糖類の発酵を介したエタノールの生産は、対照的に、H2やギ酸の同時生成の可能性を全く与えず、従って低効率のプロセスとなっている。エタノールとH2及びエタノールとギ酸の収率を更に向上させることは、スクシネート及びアセテート経路を排除することによりもたらされることになる(frdA及びpta突然変異:Gonzalez等、2007及び暫定出願60/867,581)。生産性及び工業用培地の使用における向上は実施例4において上記した通りである。
(1)E.coliのネイティブのPEP依存性DHAK(dhaKLM)をC.freundiiのATP依存性DHAK(dhaKLサブユニット)と置き換えること、および、ネイティブのグリセロールデヒドロゲナーゼ(gldA)と並行したその過剰発現。
(2)DHAPから1,2−PDOへの変換に全て関与している酵素メチルグリオキサルシンターゼ、グリセロールデヒドロゲナーゼ及びメチルグリオキサル還元酵素の過剰発現(Gonzalez等、2007及び暫定出願60/867,581)。
(3)トランスヒドロゲナーゼの過剰発現を介したNADHからNADPHへの変換を向上させること、又はグリセロールデヒドロゲナーゼ、グリセロール−3−Pデヒドロゲナーゼ、グリセルアルデヒドデヒドロゲナーゼ、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ等を包含する中心的代謝経路における酵素のコファクター特異性を操作することにより、DHAPから1,2−PDOの変換を駆動するためのNADPHの利用性を増大させること等。或いは、自身のネイティブの形態においてはコファクターとしてNADPを使用するこれらの酵素の変異を他の生物からクローニングしてE.coli中で発現させることができる。
(4)1工程におけるHAへのグリセロールの変換のためのグリセロールデヒドラターゼ(GD、天然にはグリセロールを3−ヒドロキシプロピオンアルデヒドに変換することによりこれを脱水する)の操作。次に本発明者等が既に培地に初期より存在するHAを化学量論的に1,2−PDOに変換した実験において明らかにした通り、HAをE.coliにおいてGldA又は他の酵素により1,2−PDOに変換する(暫定出願60/867,581)。この経路は中間体としてのメチルグリオキサル(極めて毒性の生成物)を回避することになり、そしてATPが消費されないために1,2−PDOへのグリセロールの最もエネルギー効率的な経路となり、収率を顕著に増大させる。操作されたGDは他のGDとは異なり活性のために補酵素B12を必要としないC.butyricum GD(dhaBI)を突然変異誘発することにより得られる。本発明者等は又、グリセロールをHAに変換できるネイティブの微生物GDを得るために検索を実施中である。発見されればこの活性はE.coliにクローニングされ、発現されることになる。
(5)化学的(グリセロールからHA)及び生物学的(HAから1,2−PDO)な方策を組み合わせる。グリセロールからHAへの脱水は固体触媒、中程度の温度(〜200℃)及び大気圧を使用するプロセスを用いて効率的に達成されている(Crabtree等、2006)。生成物はHAと水のみである。本発明者等はグリセロールを含有する培地中のE.coliによるHAから1,2−PDOへの効率的変換を明らかにしている(Gonzalez等、2007及び暫定出願60/867,581)。消費されるグリセロールの量は最小限であり、HAから1,2−PDOへの化学量論的変換は極めて短時間の発酵により達成される。
全ての参考文献は読者の都合のために掲示している。各々は参照により全体が本明細書に組み込まれる。
Claims (28)
- グリセロールが生成物に変換されるような嫌気的条件下で培地中細菌細胞を培養することを含む、グリセロールを嫌気的に発酵させることにより生成物を製造するための方法であって、
ここで該細菌細胞は機能的1,3−プロパンジオール経路を欠いているが、機能的1,2−プロパンジオール経路、機能的II型グリセロールデヒドロゲナーゼ−ジヒドロキシアセトンキナーゼ経路、及び機能的F0F1−ATPase経路を有しており、
ここで該培地は炭素源としての少なくとも10g/Lグリセロール、10mM未満のカリウム、50mM未満のホスフェート、10%以上のCO2、及び5.0と7.5との間のpHを含む、方法。 - 前記培地にヒドロキシアセトン(HA)を補充するがトリプトンは補充しない請求項1に記載の方法。
- 前記培地に30mM HAを補充する請求項1に記載の方法。
- 前記培地のpHが6.5以下の場合に細菌細胞が機能的FHL経路も有する請求項1に記載の方法。
- 前記pHが約7.5の場合にCO2が少なくとも20%である請求項1に記載の方法。
- 前記培地が2mM以下のカリウム及び10mM以下のホスフェートを有する請求項1に記載の方法。
- 前記培地が1mM以下のカリウム及び5mM以下のホスフェートを有する請求項1に記載の方法。
- 前記生成物がエタノール、コハク酸、ギ酸、水素、1,2−PDO、プロパノールアミド、プロピオン酸、及びブタノールよりなる群から選択される請求項1に記載の方法。
- 前記培地が1mM以下のカリウム及び2mM以下のホスフェートを有する請求項8に記載の方法。
- 前記pHが約6.3であり、そして前記培地が不活性ガスでスパージされており、そして前記生成物がエタノール及び水素である請求項9に記載の方法。
- ネイティブのグリセロールデヒドロゲナーゼ−ジヒドロキシアセトンキナーゼ経路が過剰発現され、pta及びfrdAが不活性化され、前記グリセロールが粗製のグリセロールであり、そして前記培地が更にコーンスチープリカーを含むがトリプトンを含まない請求項10に記載の方法。
- 前記細菌細胞が機能的FHL酵素を欠いており、前記pHが約7であり、そして前記培地が不活性ガスでスパージされ、そして前記生成物がエタノール及びホルメートである請求項9に記載の方法。
- ネイティブのグリセロールデヒドロゲナーゼ−ジヒドロキシアセトンキナーゼ経路が過剰発現され、pta及びfrdAが不活性化され、前記グリセロールが粗製のグリセロールであり、そして前記培地が更にコーンスチープリカーを含むがトリプトンを含まない請求項12に記載の方法。
- 前記細菌細胞がネイティブのジヒドロキシアセトンキナーゼを欠いており、そしてC.freundii由来のジヒドロキシアセトンキナーゼを発現し、そして前記生成物がスクシネートである請求項9に記載の方法。
- 前記培地が10〜20%CO2を含み、そして前記pHが6〜7.5である請求項14に記載の方法。
- ネイティブのグリセロールデヒドロゲナーゼ及びC.freundiiジヒドロキシアセトンキナーゼが過剰発現され、ネイティブのホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼが不活性化され、E.coli又はA.succinogenes由来のホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼが過剰発現され、pta及びadhEが不活性化され、前記グリセロールが粗製のグリセロールであり、そして前記培地が更にコーンスチープリカーを含む請求項15に記載の方法。
- ネイティブのグリセロールデヒドロゲナーゼ及びジヒドロキシアセトンキナーゼが過剰発現され、そして前記生成物が1,2−PDOである請求項9に記載の方法。
- 前記ネイティブのジヒドロキシアセトンキナーゼがC.freundiiジヒドロキシアセトンキナーゼにより置き換えられ、そして酵素メチルグリオキサルシンターゼ、グリセロールデヒドロゲナーゼ、及びメチルグリオキサル還元酵素が全て過剰発現される請求項17に記載の方法。
- グリセロールをヒドロキシアセトンに変換することができる操作された、又は天然に存在するグリセロールデヒドラターゼが過剰発現される請求項17に記載の方法。
- グリセロールが1,2−PDOに変換される嫌気的条件下培地中で細菌細胞を培養すること、及び、該細胞又は該培地から1,2−PDOを単離することを含む、1,2−PDOの製造方法であって、ここで該細菌細胞は機能的1,3−プロパンジオール経路を欠いているが、機能的1,2−プロパンジオール経路、機能的II型グリセロールデヒドロゲナーゼ−ジヒドロキシアセトンキナーゼ経路、及び機能的F0F1−ATPase経路を有しており、ここで該培地は炭素源としての少なくとも10g/Lグリセロール、10mM未満のカリウム、50mM未満のホスフェート、0%〜10%のCO2、及び5と7.5との間のpHを含む、方法。
- ネイティブのPEP依存性DHAKが不活性化され、ATP依存性DHAK及びグリセロールデヒドロゲナーゼ(gldA)遺伝子が過剰発現される請求項20に記載の方法。
- メチルグリオキサルシンターゼ、グリセロールデヒドロゲナーゼ、及びメチルグリオキサル還元酵素及びこれ等の組み合わせよりなる群から選択される酵素が過剰発現される請求項21に記載の方法。
- グリセロールキナーゼ、NAD+/NADP+依存性グリセロールデヒドロゲナーゼ、NAD+/NADP+依存性グリセロール−3−Pデヒドロゲナーゼ、NAD+/NADP+依存性グリセルアルデヒドデヒドロゲナーゼ、NAD+/NADP+依存性ピルビン酸デヒドロゲナーゼ、NADHからNADPHへのトランスヒドロゲナーゼ、プロパンジオール酸化還元酵素及びこれらの組み合わせよりなる群から選択される酵素が過剰発現される請求項20に記載の方法。
- グリセロールからHAへの変換のための操作された、又はネイティブのグリセロールデヒドラターゼ(GD)が個別に、又はグリセロールデヒドロゲナーゼの過剰発現と組み合わせられて発現される請求項20に記載の方法。
- 前記培地がHAを含む請求項20に記載の方法。
- アルデヒド/アルコールデヒドロゲナーゼ(adhE)、ホスホアセチルトランスフェラーゼ(pta)、フマレート還元酵素(frd)の遺伝子及びこれらの組み合わせがノックアウトされている請求項22に記載の方法。
- 操作された菌株を高性能生体触媒の選択による連続又は逐次的なバッチシステムの何れかにおいて代謝進化に付す請求項21〜24および26に記載の方法。
- 前記代謝進化が酸素及び/又はニトレートの漸減量の存在下において実施される請求項27に記載の方法。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011528915A (ja) * | 2008-07-28 | 2011-12-01 | クラリアント・ファイナンス・(ビーブイアイ)・リミテッド | 生産方法 |
Families Citing this family (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BRPI0709679B1 (pt) | 2006-03-31 | 2017-03-28 | Rice Univ | método para fermentar anaerobicamente glicerol para produzir um produto; e método de produção de 1,2-pdo |
MY149506A (en) | 2006-05-22 | 2013-09-13 | Biogasol Ipr Aps | Thermoanaerobacter mathranii strain bg1 |
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US9051588B2 (en) * | 2007-03-23 | 2015-06-09 | Metabolic Explorer | Microorganisms and methods for production of 1,2-propanediol and acetol |
GB2461495A (en) * | 2008-02-13 | 2010-01-06 | Bioconversion Technologies Ltd | Ethanol production by lactate dehydrogenase-deleted thermophilic microorganisms |
US8119844B2 (en) | 2008-05-01 | 2012-02-21 | Lanzatech New Zealand Limited | Alcohol production process |
CA2731256A1 (en) * | 2008-07-24 | 2010-01-28 | Biogasol Ipr Aps | Increased ethanol production in recombinant bacteria |
WO2010051324A1 (en) | 2008-10-28 | 2010-05-06 | Rice University | Microaerobic cultures for converting glycerol to chemicals |
KR101093199B1 (ko) * | 2009-02-12 | 2011-12-12 | 한국과학기술원 | 글리세롤 대사능력 및 숙신산 생산능력이 향상된 재조합 미생물 및 이를 이용한 숙신산의 제조방법 |
KR101189187B1 (ko) * | 2009-03-12 | 2012-10-10 | 한국생명공학연구원 | 글리세롤 산화대사경로를 차단시킨 재조합 균주를 이용한 1、3―프로판디올의 제조방법 |
AU2010232533A1 (en) * | 2009-04-02 | 2011-10-13 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Engineering the pathway for succinate production |
BR112012011990A2 (pt) * | 2009-11-18 | 2015-09-29 | Myriant Corp | microrganismo que não ocorre naturalmente e método para produzir ácido succínico |
US20130130339A1 (en) | 2010-07-31 | 2013-05-23 | Myriant Corporation | Fermentation process for the production of organic acids |
GB201106686D0 (en) * | 2011-04-20 | 2011-06-01 | Univ Manchester | Production of succinic acid |
WO2013015770A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Myriant Corporation | Fermentation of glycerol to organic acids |
ES2395170B2 (es) * | 2011-07-29 | 2013-06-19 | Universidad De Cádiz | Medio de cultivo simplificado y optimizado para la producción de etanol e hidrógeno, a partir de glicerina, por escherichia coli, para pontenciar la productividad de biomasa |
ITRM20110480A1 (it) | 2011-09-13 | 2013-03-14 | Enea Agenzia Naz Per Le Nuove Tecnologie L | Procedimento di fermentazione di glicerolo crudo per la preparazione di etanolo e idrogeno. |
US8735115B2 (en) * | 2012-03-30 | 2014-05-27 | Lanzatech New Zealand Limited | Method for controlling the sulphur concentration in a fermentation method |
WO2014018602A1 (en) * | 2012-07-26 | 2014-01-30 | Glycos Biotechnologies, Inc. | Strains and methods for plasmid maintenance |
CN103014075B (zh) * | 2012-09-20 | 2014-07-16 | 江南大学 | 利用一株安全菌株发酵生物柴油副产物粗甘油生产2,3-丁二醇 |
CN104004700A (zh) * | 2014-06-17 | 2014-08-27 | 江南大学 | 一种高产丙酸詹氏丙酸杆菌工程菌及其应用 |
CN114574411A (zh) | 2014-10-29 | 2022-06-03 | R·冈萨雷斯 | 从一碳化合物生物合成产物 |
US20190040417A1 (en) * | 2016-02-09 | 2019-02-07 | Kembiotix Llc | Biological fermentation using dihydroxyacetone as a source of carbon |
US10920251B2 (en) | 2016-05-05 | 2021-02-16 | William Marsh Rice University | Microbial production of fats |
WO2017193010A1 (en) * | 2016-05-06 | 2017-11-09 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Microbial platform for production of glycosylated compounds |
US10801043B2 (en) | 2016-10-14 | 2020-10-13 | Centre De Recherche Industrielle Du Quebec (Criq) | Process for hydrogen production from glycerol |
US10301652B2 (en) | 2016-10-14 | 2019-05-28 | Centre De Recherche Industrielle Du Quebec (Criq) | Process for hydrogen production from glycerol |
CN106701637B (zh) * | 2017-02-13 | 2021-03-30 | 广西科学院 | 一种生物柴油副产物粗甘油发酵产丁二酸所用的菌株及其生产方法 |
WO2019173217A1 (en) * | 2018-03-06 | 2019-09-12 | Danisco Us Inc | Compositions and methods for increasing ethanol production by yeast using gcy1 and dak1 |
CN109652434B (zh) * | 2019-02-25 | 2023-03-31 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一株以甘油为底物生产丁二酸的重组菌及其构建方法与应用 |
CN110964754B (zh) * | 2019-12-31 | 2021-09-07 | 广西科学院 | 一种降低产琥珀酸放线杆菌丁二酸发酵副产物比例的方法 |
CN111172123B (zh) * | 2020-01-07 | 2022-07-26 | 江南大学 | 一种以d-甘油醛为受体合成d-山梨糖和d-阿洛酮糖的方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6303352B1 (en) * | 1997-02-19 | 2001-10-16 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Microbial production of 1,2-propanediol from sugar |
WO2005093060A1 (ja) * | 2004-03-26 | 2005-10-06 | Nippon Shokubai Co., Ltd. | 1,3−プロパンジオール及び/又は3−ヒドロキシプロピオン酸を製造する方法 |
JP2005532826A (ja) * | 2002-07-10 | 2005-11-04 | ザ ペン ステート リサーチ ファウンデーション | 遺伝子ノックアウト戦略を決定する方法 |
JP2005304362A (ja) * | 2004-04-20 | 2005-11-04 | Nippon Shokubai Co Ltd | 1,3−プロパンジオール及び/又は3−ヒドロキシプロピオン酸を製造する方法 |
WO2006034156A2 (en) * | 2004-09-17 | 2006-03-30 | Rice University | High succinate producing bacteria |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1165623C (zh) * | 2001-12-05 | 2004-09-08 | 大连理工大学 | 两步微生物发酵生产1,3-丙二醇的方法 |
DE102005035554A1 (de) | 2005-07-29 | 2007-02-01 | Emitec Gesellschaft Für Emissionstechnologie Mbh | Verfahren zur selektiven katalytischen Reduktion von Stickoxiden im Abgas einer Verbrennungskraftmaschine und Abgassystem |
BRPI0709679B1 (pt) | 2006-03-31 | 2017-03-28 | Rice Univ | método para fermentar anaerobicamente glicerol para produzir um produto; e método de produção de 1,2-pdo |
-
2007
- 2007-03-30 BR BRPI0709679A patent/BRPI0709679B1/pt not_active IP Right Cessation
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6303352B1 (en) * | 1997-02-19 | 2001-10-16 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Microbial production of 1,2-propanediol from sugar |
JP2005532826A (ja) * | 2002-07-10 | 2005-11-04 | ザ ペン ステート リサーチ ファウンデーション | 遺伝子ノックアウト戦略を決定する方法 |
WO2005093060A1 (ja) * | 2004-03-26 | 2005-10-06 | Nippon Shokubai Co., Ltd. | 1,3−プロパンジオール及び/又は3−ヒドロキシプロピオン酸を製造する方法 |
JP2005304362A (ja) * | 2004-04-20 | 2005-11-04 | Nippon Shokubai Co Ltd | 1,3−プロパンジオール及び/又は3−ヒドロキシプロピオン酸を製造する方法 |
WO2006034156A2 (en) * | 2004-09-17 | 2006-03-30 | Rice University | High succinate producing bacteria |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6012031367; CAMERON D.C., et al.: 'Metabolic engineering of propanediol pathways.' Biotechnol. Prog. Vol.14, 1998, p.116-125 * |
JPN7012002304; ALTARAS N.E., et al.: 'Metabolic engineering of a 1,2-propanediol pathway in Escherichia coli.' Applied and Environmental Microbiology Vol.65, No.3, 1999, p.1180-1185 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011528915A (ja) * | 2008-07-28 | 2011-12-01 | クラリアント・ファイナンス・(ビーブイアイ)・リミテッド | 生産方法 |
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