JP2009527762A - 神経変性疾患もしくは病態の検出または診断方法 - Google Patents
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Abstract
Description
Mclntyre, JA. Wagenknecht, DR, & Faulk, WP. “Autoantibodies unmasked by redox reactions.”J. Autoimmun 2005; 24: 311-17.
Mclntyre, JA. Wagenknecht, DR, & Faulk, WP. “Redox-reactive autoantibodies: Detection and physiological relevance.”Autoimm. Rev. 2006; 5: 76-83. および米国特許出願公開第2005/0101016号明細書。
表:今日までに、健常な血漿もしくはIgGの酸化還元転位後に特定されたマスク自己抗体
酸化還元反応自己抗体の最新リスト*
抗リン脂質抗体、aPS、aCL、aPE、aPC、ループス性抗凝固因子(LA)
抗グルタミン酸デカルボキシラーゼ(GAD)
抗チロシンホスファターゼ(IA−2)
抗核抗体(ANA)
抗細胞小器官:核小体、ラミン(lamin)、ゴルジ体など
抗顆粒球:好中球、単球
抗Bリンパ球
抗ミエロペルオキシダーゼ
抗腫瘍細胞系:Raji、Jurkat、U87MG、K562
抗栄養膜および栄養基底膜(TBM)
抗因子VIII
抗PF4/ヘパリン複合体
抗β2糖タンパク質I
抗RBC(広範にわたる反応性)
*他の特異性も、更なる試験に基づき予測される。
使用した表中の簡略記号
aCL、抗カルジオリピン
aPC、抗ホスファチジルコリン
aPE、抗ホスファチジルエタノールアミン
aPS、抗ホスファチジルセリン
APPT、活性化部分トロンボプラスチン時間
dRVVT、希釈ラッセルクサリヘビ蛇毒時間
ELISA、酵素免疫測定法
健常な被検体由来のヒト脳脊髄液にマスク自己抗体が含まれているか否かを判定するために、健常な個体から脊椎穿刺によって脊髄液を採取し、BSAおよびABPの希釈緩衝液中の試料で、ヘミンによって酸化処理する前後に、aPS、aCL、aPEおよびaPCの各レベルについてELISAによって検査を行った。図1のAおよびBに示されているように、試料は、酸化処理前には抗リン脂質抗体がまったく存在しないかもしくは最小のレベルを示し(A)、酸化処理後のレベルはかなり増加し(B)、aPEおよびaPCでは、BSA緩衝液中でもっとも高いレベルを示し、aPSおよびaCLは、ABP緩衝液内でもっとも高いレベルをそれぞれ示している。
健常な被検体の脳脊髄液試料中の酸化還元反応に感応する自己抗体の存在およびアルツハイマー病患者の脊髄液中におけるそれらの欠失は、これらの自己抗体が機能性および/または病原性であることを示唆していないにもかかわらず、顕著であった。機能的活性に関する試験を行うため、酸化還元反応性自己抗体を含む脳脊髄液試料を、マウスモデルシナプトソームアッセイで試験した。脳脊髄液試料を、シナプトソームで10分間インキュベートし、次いで、細胞を溶解しウエスタンブロット法によりリン酸化活性に関してプロービングを行った。図2は、ヘミン緩衝液コントロール、ヘミン処理脳脊髄液および1/10希釈の同じヘミン処理脳脊髄液の酸化還元反応性自己抗体ERK1/2リン酸化活性を表している。
アルツハイマー病の被検体からのヒト脳脊髄液に高いレベルの脱マスクまたは活性リン脂質自己抗体が含まれているか否かを判定するため、病理解剖の確認に基づいてアルツハイマー病と診断された6名の患者から死後脊髄液を採取した。BSAおよびABPの希釈緩衝液中の脳脊髄液の試料について、aPLのレベルに関して検査した。図3のAおよびBに示されているように、アルツハイマー病患者由来の試料(B)は、ヘミンによる酸化処理後、死後コントロールのレベル(A)と比較して、aPLのレベルが減少しているかまたはaPLが完全に欠失していることを示している。このことは、酸化還元自己抗体が脱マスク化され、神経細胞標的に結合していることを示しており、このプロセスでは、痴呆に至る可能性のある正常なシナプシスの機序が脳細胞で改変されることが実証されている。
試料中にニトロチロシン残基のレベルの上昇が存在しているか否かを判定するために、アルツハイマー病の徴候のある患者の脳脊髄液から採取したIgGで、抗ニトロチロシン検査を実施することができる。この検査は、上述の方法によって実施することができる。被検体の脳脊髄液中もしくは脳脊髄液から単離したIgGにおけるニトロチロシンレベルの上昇は、被検体における神経変性疾患もしくは病態と相関すると考えられている。
Claims (30)
- 被検体における神経変性疾患もしくは病態を検出または診断する方法であって、
被検体由来の脳脊髄液の試料を得る工程、および
試料を、IgGアイソトープの少なくとも1種類の抗リン脂質自己抗体の存在に関して検査する工程
を含み、少なくとも1種類の抗リン脂質自己抗体のレベルの上昇が、該被検体における神経変性疾患もしくは病態と相関関係がある方法。 - 前記抗リン脂質自己抗体が、抗カルジオリピン、抗ホスファチジルコリン、抗ホスファチジルエタノールアミンもしくは抗ホスファチジルセリンである請求項1記載の方法。
- 前記自己抗体が抗カルジオピリンである請求項1記載の方法。
- 前記被検体が、神経変性疾患もしくは病態の身体的徴候または認知的徴候を呈しているとして選択される請求項1記載の方法。
- 前記被検体が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ピック病もしくは多重硬化症の身体的徴候または認知的徴候を呈しているとして選択される請求項1記載の方法。
- 前記被検体が、アルツハイマー病の身体的徴候または認知的徴候を呈しているとして選択される請求項1記載の方法。
- 前記被検体が、少なくとも1種類の神経変性疾患もしくは病態の家族歴をもつ請求項1記載の方法。
- 前記被検体が、アルツハイマー病の家族歴をもつ請求項1記載の方法。
- 前記被検体が、少なくとも1種類の神経変性疾患もしくは病態の家族歴をもち、かつ該神経変性疾患もしくは病態の家族のメンバーが発症した平均年齢であるか平均年齢を超えている請求項1記載の方法。
- 少なくとも1種類の抗リン脂質自己抗体のレベルの上昇が、基準値と相対的に決定される請求項1記載の方法。
- 少なくとも1種類の抗リン脂質自己抗体のレベルの上昇が、基準値と相対的に決定され、かつ該基準値が、コントロール個体群における少なくとも1種類の自己抗体のレベルの平均値または中間値である請求項1記載の方法。
- 一定期間にわたって、被検体における神経変性疾患もしくは病態の発症または進行をモニタリングする方法であって、
一定期間の始めに請求項1記載の方法を実施し、およびついで、その後の時点で該方法を少なくとも一回繰り返して実施することを含む方法。 - 被検体における神経変性疾患もしくは病態を診断する方法であって、
被検体由来の脳脊髄液の試料を得る工程、
ニトロシル化抗体を検出するため該試料を検査する工程、
を含み、ニトロシル化抗体のレベルの上昇が、該被検体における神経変性疾患もしくは病態と相関関係にある方法。 - 前記ニトロシル化抗体を検出するための試料の検査工程が、ニトロシル化チロシン残基またはトリプトファンアミノ酸残基を有する抗体を検出する請求項13記載の方法。
- 前記ニトロシル化抗体を検出するための試料の検査工程が、ニトロチロシン残基を有する抗体を検出する請求項13記載の方法。
- 被検体における神経変性疾患もしくは病態を検出または診断する方法であって、
被検体由来の脳脊髄液の試料の第1の部分を、少なくとも1種類の抗リン脂質自己抗体の存在に関して検査する工程、
該試料の第2の部分を、ニトロシル化抗体の存在に関して検査する工程
を含み、該試料の該第1の部分における少なくとも1種類の抗リン脂質自己抗体のレベルの上昇、または該第2の部分におけるニトロシル化抗体のレベルの上昇、またはその両方が、前記被検体における神経変性疾患もしくは病態と相関関係にある方法。 - 被検体における神経変性疾患もしくは病態を検出または診断する方法であって、
選択された特異性を有する少なくとも1種類の自己抗体のレベルを決定するため、該被検体由来の脳脊髄液の第1の試料を検査する工程、
脳脊髄液の第2の試料を酸化剤で処理する工程、および
該選択された特異性を有する自己抗体のレベルを決定するため、酸化された第2の試料を検査し、そして酸化された第2の試料における少なくとも1種類の自己抗体のレベルと、第1の試料における少なくとも1種類の自己抗体のレベルとを比較する工程
を含み、第1の試料における少なくとも1種類の自己抗体のレベルと比較して、酸化された第2の試料における少なくとも1種類の自己抗体の増加の欠如が、該被検体における神経変性疾患もしくは病態と相関関係にある方法。 - 前記選択された特異性を有する少なくとも1種類の自己抗体が、抗リン脂質自己抗体である請求項17記載の方法。
- 前記選択された特性を有する少なくとも1種類の自己抗体が、抗カルジオリピン、抗ホスファチジルコリン、抗ホスファチジルエタノールアミンまたは抗ホスファチジルセリンである請求項17記載の方法。
- 前記酸化剤が起電力である請求項17記載の方法。
- 前記自己抗体が抗カルジオリピンである請求項17記載の方法。
- 前記被検体が、神経変性疾患もしくは病態の身体的徴候または認知的徴候を呈しているとして選択される請求項17記載の方法。
- 前記被検体が、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ピック病もしくは多重硬化症の身体的徴候または認知的徴候を呈しているとして選択される請求項17記載の方法。
- 前記被検体が、アルツハイマー病の身体的徴候または認知的徴候を呈しているとして選択される請求項17記載の方法。
- 前記被検体が、少なくとも1種類の神経変性疾患もしくは病態の家族歴をもつ請求項17記載の方法。
- 前記被検体が、アルツハイマー病の家族歴をもつ請求項17記載の方法。
- 前記被検体が、少なくとも1種類の神経変性疾患もしくは病態の家族歴をもち、かつ該神経変性疾患もしくは病態をもつ家族のメンバーが発症した平均年齢であるか平均年齢を超えている請求項17記載の方法。
- 一定期間にわたって、被検体における神経変性疾患もしくは病態の発症または進行をモニタリングする方法であって、
一定期間の始めに請求項17記載の方法を実施し、およびついで、その後の時点で該方法を少なくとも一回繰り返して実施することを含む方法。 - 前記抗リン脂質自己抗体が、IgGアイソタイプである請求項18記載の方法。
- 前記抗リン脂質自己抗体が、IgGアイソタイプである請求項16記載の方法。
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