JP2009519704A5

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Publication number: JP2009519704A5
Application number: JP2008540261A
Authority: JP
Filing date: 2006-11-13
Publication date: 2010-01-07
Anticipated expiration: 2026-11-13

Description

ペプチド、ポリエーテルなどの一般的なリンカーも、タグとして作用することができ、これは、約５アミノ酸と２００アミノ酸の間のポリ−Ｇｌｙ配列（配列番号３３）などのポリペプチド配列を含む。こうしたフレキシブルリンカーは、当業者に知られている。例えば、ポリ（エチレングリコール）リンカーは、ＳｈｅａｒｗａｔｅｒＰｏｌｙｍｅｒｓ，Ｉｎｃ．，Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，Ａｌａｂａｍａから入手できる。こうしたリンカーは、場合によっては、アミド結合、スルフヒドリル結合またはヘテロ官能性結合を有する。

類似の研究を、薬物乱用者であることが知られているＭＤＤ対象の脳を使用し、これらの対象の遺伝子発現を、薬物乱用者ではないＭＤＤ対象における遺伝子発現と、、ならびに対照被検者と比較することによって実施した。表１Ｃは、薬物乱用者ではないＭＤＤ患者に対して、薬物を乱用していたＭＤＤ患者で異常調節されることが示された遺伝子のリストである。表１Ｃはまた、対照被検者に対して、薬物を乱用していたＭＤＤ患者で異常調節された遺伝子を示す。ＤＤＸ５０において、ＤＥＡＤ＝配列番号３６。

Ｂ．ＮＣＡＭ（ＦＧＬペプチド）のマイクロインジェクション
この一連の実験は、ＮＣＡＭ投与の後の強制水泳試験における動物の気分に対する有意な影響を示す（アミノ酸配列＝ＥＶＹＶＶＡＥＮＱＱＧＫＳＫＡ（配列番号３４）；図３を参照のこと）。ここでは、ＮＣＡＭ注射された動物（ｎ＝１３）は、対照（ｎ＝１３）よりも少ない不動（ｔ［２４］＝２．１３、ｐ＜０．０５）を示した。また、これは、より抑うつ様でない挙動の指標である。これはまた、ＦＧＦ２データと同じ傾向であり、ＦＧＦ２およびＮＣＡＭがＦＧＦ受容体と相互作用するという事実と整合性がある。同様に、ＮＣＡＭ注射された動物は、クローズドアームで過ごす時間が多く（有意に長い時間ではないが）、オープンアームで過ごす時間が短く、不安様挙動の増大と整合性があった。ＮＣＡＭ注射された動物はまた、センターの４分の１で過ごす時間が有意に短かった（ｔ［１８］＝２．４０、ｐ＜０．０５）。

Ｃ．ＦＧＦＲのペプチドインヒビターのマイクロインジェクション
この一連の実験は、強制水泳試験および高架式十字迷路試験を使用する、ＦＧＦ系ペプチドインヒビター（アミノ酸配列＝ＨＦＫＤＰＫＲＬＹ（配列番号３５））を用いる注射の後の、動物の気分に対する有意な影響を示す。結果を図４に示す。ＦＳＴでは、インヒビターを注射された動物（ｎ＝７）は、対照（ｎ＝７）よりも、有意に少ないクライミング（ｔ［１２］＝２．０６、ｐ＜０．０５）、有意に少ない水泳（ｔ［１２］＝１．９２、ｐ＜０．０５）、および有意に多い不動（ｔ［１２］＝３．５８、ｐ＜０．００５）を示した。これらの結果は、ＦＧＦ系の抑制が、抑うつ様挙動の増大をもたらす可能性があることを示す。これらの結果は、以前のデータセットの結果を確認し、進歩させるものであり、大うつ病を伴う個人の死後組織の研究と整合性があった。インヒビターを注射された動物はまた、ＥＰＭのセンターの４分の１で過ごす時間が有意に長かった（Ｔ［７，７］＝３５．０、ｐ＝０．０３）。同じ動物は、オープンアームで過ごす時間が短く、不安様挙動の増大の指標となるクローズドアームで過ごす時間は等しかったが、過ごす時間の長さに有意な差はなかった）。しかし、これらの知見は、上述のマイクロインジェクション研究から引き出される結論と整合性がある。

気分障害におけるＦＧＦＲ２バリアントの違いを示す。ＦＧＦＲ２可溶性受容体スプライスバリアントは、対照におけるよりもＭＤＤにおいて、全受容体の、より小さな割合に相当する可能性がある。それぞれ移動性試験（上図）および高架式十字迷路（ＥＰＭ）試験（下図）によって測定されたものとしての、マウス抑うつおよび不安に対するＦＧＦ２の急性の注射の効果を示す。「オープン」、「センター」、および「クローズド」はそれぞれ、ＥＰＭのオープン、センター、およびクローズド部分で過ごした時間を指す。それぞれクライミングおよび強制水泳試験（上図）および高架式十字迷路（ＥＰＭ）試験（下図）によって測定されたものとしての、マウス抑うつおよび不安に対するＮＣＡＭペプチドの注射の効果を示す。「オープン」、「センター」、および「クローズド」はそれぞれ、ＥＰＭのオープン、センター、およびクローズド部分で過ごした時間を指す。それぞれクライミングおよび強制水泳試験（上図）および高架式十字迷路（ＥＰＭ）試験（下図）によって測定されたものとしての、マウス抑うつおよび不安に対するペプチドインヒビターの注射の効果を示す。「オープン」「センター」、および「クローズド」はそれぞれ、ＥＰＭのオープン、センター、およびクローズド部分で過ごした時間を指す。その発現が、双極性障害（ＢＰＤ）患者由来の前部帯状皮質（ＡｎＣｇ）において有意に異常調節される、ｃＡＭＰシグナル伝達経路における遺伝子を列挙する表を示す。その発現が、大うつ病障害（ＭＤＤ）患者の前部帯状皮質（ＡｎＣｇ）において有意に異常調節される、ｃＡＭＰシグナル伝達経路における遺伝子を列挙する表を示す。その発現が、双極性障害（ＢＰＤ）患者の前部帯状皮質（ＡｎＣｇ）において有意に異常調節される、ホスファチジルイノシトール・シグナル伝達経路における遺伝子を列挙する表を示す。その発現が、大うつ病障害（ＭＤＤ）患者の前部帯状皮質（ＡｎＣｇ）において有意に異常調節される、ホスファチジルイノシトール・シグナル伝達経路における遺伝子を列挙する表を示す。げっ歯類が、この試験システムの明るい区画で過ごす時間によって測定されるものとしての、げっ歯類における不安に対する長期にわたるＦＧＦ−２投与（５ｎｇ／ｇ、３週）の効果を示す、違いを伴う２つの図を示す。ＬＲ、本来備っている不安が高い動物；ＨＲ、本来備っている不安が低い動物；ＨＲＦＧＦ−２、ＦＧＦ−２が投与された、不安の低い動物；ＬＲＦＧＦ−２、ＦＧＦ−２が投与された、不安の高い動物。「オープンアーム」試験を使用する、ＦＧＦ−２遺伝子発現と不安挙動との間の反比例の関係を示す。ＣＡ−２、海馬領域ＣＡ−２。図１１上：増幅され、実施例に記載されたエキソンを有する、アラインメントされたＦＧＦＲ２およびＦＧＦＲ３の基本構造の模式図を示す。両方の受容体（Ｒ２およびＲ３）の第３のＩｇ様ドメインのＣ末端におけるＩＩＩｂ／ＩＩＩｃスプライスバリアントに、重点が置かれる。ＦＧＦＲ２およびＦＧＦＲ３のエキソン配列は、決して同一ではない（図１１下を参照のこと）が、エキソン命名は、Ｒ２およびＲ３両タンパク質構造上の相当する領域に対する各エキソン数にマッチするように合わせられた。ＦＧＦ受容体の先端を切り取られたアイソフォームおよび切断されたアイソフォームは、模式図から除外される。図１１下：リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ定量分析のために設計されたフォワードおよびリバースＦＧＦＲ２およびＦＧＦＲ３プライマーの配列（配列番号１〜３２）を示す。プライマーは、ＦＧＦＲ２およびＦＧＦＲ３の両方のＩＩＩｂ／ＩＩＩｃスプライスバリアントの差次的な検出についての効率を得るように最適化および設計された。ＦＧＦＲ２（上のパネル）とＦＧＦＲ３（下のパネル）の両方における、エキソンＩＩＩｃ：ＩＩＩｂスプライスバリアント発現比の、長期にわたるストレスによって誘発される低下を示す２つの図を示す。Ｖ（賦形剤）；ＮＳ（ストレスなし）；長期にわたるストレス（Ｓ）；ＦＧＦ−２（Ｆ）。

Claims

対象が不安または不安を伴う病気と診断された後、前記対象に十分な量のＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物を投与するステップを含む、対象における不安の症状を治療する方法において使用するための、ＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
前記対象がヒトである、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
前記十分な量が、少なくとも１週間の長さの期間にわたって、少なくとも毎週２回投与される量である、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
前記病気が、大うつ病または大うつ病性障害である、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
ＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物が薬学的に許容される担体を用いて投与される、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
ＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物が経口的に、経鼻的に、局所的に、静脈内に、腹膜内に、あるいはクモ膜下腔内に投与される、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
ＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物が長期にわたって投与される、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
ＦＧＦ２ペプチドが組換え型ペプチドである、請求項１に記載の使用のためのＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物。
対象が不安または不安を伴う病気と診断された後前記対象における不安の症状を治療するための薬剤を製造するための、ＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物の使用。
前記対象がヒトである、請求項９に記載の使用。
薬剤が、少なくとも１週間の長さの期間にわたって、少なくとも毎週２回投与される量での投与のためのものである、請求項９に記載の使用。
前記病気が、大うつ病または大うつ病性障害である、請求項９に記載の使用。
ＦＧＦ２ペプチドまたはＦＧＦ２の作用を模倣する化合物が、薬学的に許容される担体を用いて投与されるためのものである、請求項９に記載の使用。
薬剤が、経口的に、経鼻的に、局所的に、静脈内に、腹膜内に、あるいはクモ膜下腔内に投与されるためのものである、請求項９に記載の使用。
薬剤が長期にわたって投与されるためのものである、請求項９に記載の使用。
ＦＧＦ２ペプチドが組換え型ペプチドである、請求項９に記載の使用。