JP2009232808A - 麹菌、及びそれを用いた清酒の醸造方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】
既存の麹菌と比較して増殖能に問題がなく、ペプチダーゼ総合活性が低く、且つ蒸米の溶解及び糖化にも問題が無い麹菌Aspergillus oryzae AOK12株(FERM AP−21544)及び/又はAspergillus oryzae AOK18株(FERM AP−21545)を用いて清酒麹を造り、それを用いて清酒の醸造を行うことにより、アルギニン含有量を低減したアミノ酸組成も良好で官能評価も優れた清酒を製造する。
【選択図】なし
Description
生成されたアミノ酸の一つのアルギニンの呈味性を官能試験によって調べたところ、清酒中の存在量で官能的に識別でき、苦味を呈して喉ごしや後味に大きく関係する(非特許文献1)。さらに、普通酒ではアルギニン含有率はアラニンに次いで2番目に多く存在するものの、高級酒である吟醸酒や純米吟醸酒ではアルギニンの含有率が少なく、清酒中のアルギニン含有量の低減は品質向上に有効である(非特許文献2)。
本発明は斯かる問題点に鑑みてなされたものであり、上記課題を解決できる麹菌、及びそれを用いた清酒の醸造方法を開発することを目的とする。
本発明の請求項1に記載の麹菌では、Aspergillus oryzae AOK12株(FERM AP−21544)又はAspergillus oryzae AOK18株(FERM AP−21545)である麹菌が提供されることを特徴とする。
本発明の請求項2に記載の清酒の醸造方法では、請求項1に記載の麹菌を蒸米に付着させて製麹を行い清酒麹を造る麹造り工程と、清酒麹、及び酒母若しくは酵母を用いる醪仕込み工程とを有することを特徴とする。
本発明の麹菌は、製麹を行って各酵素活性の値により選別される。具体的には、国税庁所定分析法(参照URL:http://www.nta.go.jp/shiraberu/zeiho−kaishaku/tsutatsu/kobetsu/sonota/070622/pdf/211.pdf)を用いて測定したグルコアミラーゼ活性が100〜210Units/g−koji、且つ特願2008−028316号に記載された米グルテリンを基質とする総合タンパク質分解酵素活性測定方法を用いて測定した総合ペプチダーゼ活性が7.2Units/g−koji以下の麹菌である。
なお、グルコアミラーゼ活性は、麹1gが可溶性デンプンから40℃で60分間に1mgのブドウ糖を生成する活性を1Unit/g−kojiとして定義される(g−kojiは、「g麹」の意味である)。また、総合タンパク質分解酵素活性は、麹1gが60分間に1mgのアルギニンを生成する活性を1Unit/g−kojiとして定義される。
実施の形態1で選別された麹菌Aspergillus oryzae AOK12株(受領番号:FERM AP−21544)及びAspergillus oryzae AOK18株(受領番号:FERM AP−21545)は、平成20年3月17日付で独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに寄託されている。
麹菌AOK12株及びAOK18株の培養は、ツァペック(Czapek)寒天培地[3gのNaNO3、1gのK2HPO4、0.5gのMgSO4・7H2O、0.5gのKCl、0.01gのFeSO4、30gのショ糖、15gの寒天に蒸留水1000mlを加えて作成する。]、ポテトデキストロース寒天培地(PDA)[バレイショ浸出液(皮をむき1cm角に切った200gのバレイショを1000mlの蒸留水で約20分煮沸し、その後ガーゼでバレイショを除去)、20gのブドウ糖、15gの寒天を加えて作成する。]を用いて25℃で行う。麹菌AOK12株及びAOK18株のコロニーは7日で4〜5cmに達する。
麹菌AOK12株及びAOK18株の分生子頭は放射状であり、色は淡緑黄色、後に明褐色になる。分生子柄は無色で長さは500〜700μmである。頂のうは亜球形で直径約50〜70μmである。フィアライドは直接頂のう上かメトレ上に生じ、12〜15μm×3〜5μmである。メトレは9〜11μm×4〜5μmである。分生子は成熟すると球形〜亜球形になり、直径4.5〜8μmで緑色、表面は滑面〜微細な粗面である。
実施の形態1及び2で選別された麹菌を用いた清酒の醸造方法について説明する。
麹菌を用いた清酒の醸造は常法に従って行うが、本発明の技術分野において醸造時の温度、時間、原料、配合割合、及び各処理等について通常の変更をすることができる。具体的には、以下に示す工程を経て製造される。
精米工程:原料米から糠及び胚芽を取り除き胚乳を削り、任意の精米歩合まで磨いて精米を行い白米を得る。
放冷・枯らし工程:精米工程における白米の摩擦熱を冷却し、蒸発した水分を元に戻すために2〜4週間程度放置する。
洗米工程:精米工程において表面に付着した糠や米屑を除去する。5℃前後の冷水で行う。
浸漬工程:洗米工程で洗米された白米は、一定時間水につけて吸水させる。
蒸きょう工程:麹菌の酵素が米のデンプンを分解しやすくさせるために、白米を蒸して蒸米を得る。
麹造り工程:蒸きょう工程で得られた蒸米に実施の形態1で選別された麹菌、麹菌AOK12株、及び/又は麹菌AOK18株を付着させて、製麹を約30〜40℃で40〜50時間程度行い清酒麹を造る。
酒母造り工程:酵母菌を増殖させるために、清酒麹は、酵母菌、蒸米、水、乳酸と共に5日〜30日程度培養を行う。なお、乳酸は乳酸菌を用いて生成してもよい。
醪仕込み工程:酒母若しくは酵母、清酒麹、蒸米、及び水をタンクに入れて醪を仕込む。仕込みは、添仕込み、仲仕込み、及び留仕込みの3段仕込みの工程を経て行い、添仕込みの後、踊りを約1日置く。このようにして、麹菌による糖化及び酵母によるアルコール発酵を行う並行複発酵を約5〜15℃で15〜30日前後行う。
上槽工程:醪仕込み工程において仕込みが終了した醪を上槽し、生酒と酒粕に分ける。
なお、出来上がった生酒は、不溶性のタンパク質、デンプン等による沈殿酒の濁りを取り除くために滓下げを行ってもよい。さらに、滓下げを行った生酒の中に残存する細かい滓や雑味を取り除くために濾過してもよい。また、出来上がった生酒は、ろ過や遠心分離で精製してもよい。出荷前には、加熱殺菌処理を施す火入れを行ってもよい。また、酒の旨み、まろみ、味の深み等を引き出すために暫く貯蔵して熟成させてもよい。
本実施の形態の方法を用いて清酒を醸造することによって、アルギニン含有率が100ppm以下の清酒が製造される。
米タンパク質の分解には麹菌が有する種々のタンパク質分解酵素(ペプチダーゼ)活性が関わっており、醸造の現場でのアミノ酸生成量を反映するためにはタンパク質分解酵素の総合活性を求める必要があった。そこで、これらの総合ペプチダーゼ活性について、申請者らが開発した米グルテリンを基質とする活性測定方法(特願2008−028316号参照)を用いて検討した。
測定に用いる酵素抽出液は、麹米5品種を用いて3回製麹して造った15麹を用いて調整した。そして、5品種の蒸米の消化試験を行った。消化試験は、実際の醸造場の醪仕込み工程の条件を考慮して温度15℃で14日間行った。
その結果、蒸米消化液中の全アミノ酸量と米グルテリンを基質とした総合ペプチダーゼ活性とは危険率5%で相関が認められ、アルギニンと総合ペプチダーゼ活性とは相関係数r=0.711**と高い正の相関関係が認められた。これより、米グルテリンを基質とした総合ペプチダーゼ活性の少ない麹菌を選択することによって、清酒のアルギニン含有量を低減させる可能性があると判断した。
麹菌25菌株を用いて岡崎らのシャーレ法に準じて製麹した。まず、蒸米を95℃で15時間熱風乾燥してα米とした。次に、種麹菌の散布を10gのα米に分生胞子を2×105胞子/mlで懸濁した蒸留水を5ml加えて行い、白米1gあたり1×105胞子/mlとした。次に、6.5%の水酸化ナトリウム溶液を用いて相対湿度を95%に調整した容器内で直径9cmのシャーレを用いて製麹を行い、温度を35℃に一定にして、24時間後(一部30時間後)に1回手入れを行い43時間後に出麹した。
表1に試験した25菌株について麹のグルコアミラーゼ活性の高い順で並べた結果を示す。水分(%)、菌体量(mg/g)と共に、国税庁所定分析法を用いて測定したα−アミラーゼ活性(AAase)、グルコアミラーゼ活性(GAase)、酸性プロテアーゼ活性(APase)、酸性カルボキシペプチダーゼ活性(ACPase)、及び特願2008−028316号の方法を用いて測定した総合ペプチダーゼ活性(TPase)が示される。
まず、麹菌株の選別のために、グルコアミラーゼ活性に着目した。これは、清酒の並行複発酵ではグルコアミラーゼ活性が高い方が好ましいものの、グルコアミラーゼ活性が高すぎる麹は黒粕の発生原因であるチロシナーゼ活性も高いため除外する必要があり、今回試験した麹菌においても、グルコアミラーゼ活性が210Units/g−koji以上の麹菌はチロシナーゼ活性も高かった。また、グルコアミラーゼ活性が100Units/g−koji以下の麹菌は糖化力が低かった。そこで、グルコアミラーゼ活性が100〜210Units/g−kojiの範囲にある麹菌(表1太字参照)を15菌株選択した。
さらに麹菌株を選別するために、実施例1で示した総合ペプチダーゼ活性の低い麹菌を選択することによって清酒のアルギニン含有量を低減させる可能性に着目した。そして、総合ペプチダーゼ活性が7.2Units/g−koji以下であるAOK116株、AOK27株、AOK12株、AOK183株、AOK150株、AOK18株、市販種麹菌No.5株が選択された。
その中でAOK27株は、チロシナーゼ活性が高く酒粕の褐変が予測されるため選択から除外した。なお、麹のチロシナーゼ活性が低く麹褐変度が低い菌株は、AOK12株、AOK18株、AOK116株、AOK150株であった。市販種麹菌No.5株はチロシナーゼ活性の低い菌株と高い菌株の複合菌であった。
また、AOK150株は純白の麹菌であり、特殊な菌株であるため選択から除外した。
最終的に、総合ペプチダーゼ活性が7.2Units/g−koji以下の麹菌AOK116株、AOK12株、AOK183株、AOK18株、市販種麹菌No.5株(表2太字参照)の5菌株が選択された。
実施例2で選択した5菌株(AOK12株、AOK18株、AOK116株、AOK183株、市販種麹菌No.5株)を用いて、精米歩合55%の酒こまちを麹米とし、各1kgの製麹を行った。
さらに、AOK116株及びAOK183株は、α−アミラーゼ活性(AAase)、グルコアミラーゼ活性(GAase)、酸性プロテアーゼ活性(APase)、酸性カルボキシペプチダーゼ活性(ACPase)、及び総合ペプチダーゼ活性(TPase)全てにおいて酵素活性も低かった。
総米5kgの仕込みであるため、通常の酒母仕込みの代わりに麹エキスで培養した酵母を使う酵母仕込みで実施した。原料米に秋田酒こまち(精米歩合50%)を使用し、総米5kg(麹歩合20%)、くみ水歩合150%、醸造乳酸使用量3ml、及び秋田流花酵母AK−1を使用して、表4に示す仕込み配合で3段仕込みを行った。添仕込みは15℃で2日間の踊りを取り、仲仕込み及び留仕込みは12℃で行った。そして、20〜30日前後の適当な醪日数経過後、5000rpmで20分の遠心分離を行い製成酒を得た。
なお、非特許文献2によると、清酒のアルギニン含有率の平均は、吟醸酒が60.9ppm、純米酒が142.3ppm、本醸造酒が124.6ppm、普通酒が151.4ppmであり、呈味性の優れた高級酒はアルギニン含有率が約100ppm以下であるといえる。これより、AOK12株又はAOK18株を用いて醸造した清酒もその条件に該当し、呈味性が優れている可能性がある。
また、AOK12株、AOK18株において、清酒の甘味や酸味といった呈味に関わるアラニンやグルタミン酸等のアミノ酸組成は、市販種麹菌No.5株と同様であった。
また、苦味アミノ酸であるアルギニンは、量が多いと喉越しや後味を悪くして清酒の評価を低下させるが、アルギニンの含有量が低いAOK12株、AOK18株を用いて醸造した清酒は、いずれも喉越しや後味に関連する悪い評価を得なかった。
また、精米歩合は醸造原価に大きく関わる要因であるが、本発明の麹菌、AOK12株及び/又はAOK18株を用いることによって、蒸米の溶解・糖化に問題が無く、呈味に関わるアミノ酸組成も良好であり官能評価も優れている高品質の清酒を安価に醸造可能になる。
Claims (2)
- Aspergillus oryzae AOK12株(FERM AP−21544)又はAspergillus oryzae AOK18株(FERM AP−21545)である麹菌。
- 請求項1に記載の麹菌を蒸米に付着させて製麹を行い清酒麹を造る麹造り工程と、
前記清酒麹、及び酒母若しくは酵母を用いる醪仕込み工程と
を有することを特徴とする清酒の醸造方法。
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