JP2008530058A

JP2008530058A - ノシセプチン／オーファニンｆｑ受容体に対する高い活性の全体的及び部分的なアゴニスト及びアンタゴニスト

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Publication number: JP2008530058A
Application number: JP2007554583A
Authority: JP
Inventors: グエッリニ・レモ; サルヴァドリ・セヴェロ; カロ・ジロラモ; レゴリ・ドメニコ
Original assignee: メナリニインターナショナルオペレーションズルクセンブルグソシエテアノニマ
Priority date: 2005-02-15
Filing date: 2006-02-15
Publication date: 2008-08-07
Anticipated expiration: 2026-02-15
Also published as: PT1851241E; NO341856B1; WO2006087340A2; CA2598121C; BRPI0606998A2; HRP20150731T1; HUE025000T2; UA91844C2; KR101294895B1; US20100273710A1; RS54095B1; CN104689293A; CN101128482A; EP1851241B1; NO20074702L; ES2541308T3; BRPI0606998B1; CY1116456T1; SI1851241T1; US8227414B2

Abstract

ノシセプチン／オーファニンＦＱのペプチドアナログ、これらからなる組成物、ノシセプチン受容体の活性化又は阻害に関連する疾病及び機能障害の処置への使用について、開示する。

Description

本発明は、ノシセプチン／オーファニンＦＱ（Ｎ／ＯＦＱ）ペプチド受容体（ＮＯＰ受容体）の活性を調節し得る、Ｎ／ＯＦＱペプチドのアナログ、このペプチドアナログを有する医薬組成物、並びにこの受容体に関連する機能障害、病態及び病的状態を処置するための使用に関する。

１９９４年、ＯＲＬ１と称される、オピオイド受容体と構造的に類似する新規の受容体がクローニングされた；近年のＩＵＰＨＡＲの提言によると、この受容体に対する最も適当な名称は、ＮＯＰである。１９９５年末に同定されたその内因性のリガンド（Ｎ／ＯＦＱ）は、いくつかのオピオイドペプチド（例えば、ジノルフィンＡ）と類似のヘプタデカペプチドであるが、μ（ＭＯＰ）、δ（ＤＯＰ）又はκ（ＫＯＰ）型の従来のオピオイド受容体には結合しないものである。ＮＯＰ受容体で媒介される細胞性効果は、従来のオピオイド受容体で惹起されるものと類似である。構造的な観点、及びシグナル伝達の観点から、Ｎ／ＯＦＱ−ＮＯＰのペプチド／受容体システムは、薬理的に異なるものであるにもかかわらず、オピオイドファミリーに属する。１９９６年から１９９８年にかけて行われた複数の研究で示されたように、Ｎ／ＯＦＱは、中枢神経系（疼痛、不安症、学習、記憶、薬物乱用、食欲）及び末梢レベル（血圧、心拍、並びに腎臓、胃腸、尿生殖器及び呼吸機能）の両方で複数の機能を調節し得る（詳細は、非特許文献１参照）。
国際公開第９９／０７２１２号パンフレット国際公開第９７／０７２０８号パンフレット国際公開第９９／０３４９１号パンフレット国際公開第９９／０３８８０号パンフレット欧州特許第１４２２２４０号明細書Ｍａｓｓｉら著、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、２０００年、２１巻Ｃａｌｏら著、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９６年、３１１巻、ｐ．Ｒ３−５Ｒｉｚｚｉら著、ＮａｕｎｙｎＳｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓＡｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００１年、３６３巻、ｐ．１６１−１６５Ｃａｌｏら著、Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９９７年、７５巻、ｐ．７１３−８Ｖａｒａｎｉら著、ＮａｕｎｙｎＳｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓＡｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９９９年、３６０巻、ｐ．２７０−７Ｇｕｅｒｒｉｎｉら著、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９９８年、１２３巻、ｐ．１６３−５Ｏｋａｗａら著、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９９９年、１２７巻、ｐ．１２３−３０Ｃａｌｏら著、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、２０００年、２１巻、ｐ．９３５−４７Ｃａｌｏら著、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２０００年、１２９巻、ｐ．１１８３−９３Ｇｕｅｒｒｉｎｉら著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２０００年、１５巻、ｐ．２８０５−１３Ｃａｌｏら著、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２０００年、１２９巻、ｐ．１２６１−８３Ｇｕｅｒｒｉｎｉら著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００１年、４４巻、ｐ．３９５６−６４Ｏｋａｄａら著、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、２０００年、２７８巻、ｐ．４９３−８Ｒｉｚｚｉら著、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、２００２年、３００巻、ｐ．５７−６３Ｚｈａｎｇら著、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２００２年、４５巻、ｐ．５２８０−５２８６Ｃａｌoら著、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、１９９８年、１２５巻、ｐ．３７５−３７８Ｒｉｚｚｉら著、ＮａｕｎｙｎＳｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓＡｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００１年、３６３巻、ｐ．１６１−１６５ "ＩＵＰＨＡＲｏｎＲｅｃｅｐｔｏｒＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅａｎｄＤｒｕｇＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍ．"、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、２００３年、５５巻、４号、ｐ．５９７Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒら著、"ＴｈｅＰｅｐｔｉｄｅｓ"、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、１９６５年、１巻Ｂｏｄａｎｓｚｋｙら著、"ＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ"、ＩｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒ、１９６６年Ｂａｒａｎｙ及びＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ著、"Ｔｈｅｐｅｐｔｉｄｅｓ；Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇｙ"、ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ、１９８０年、２版Ｅ．Ａｔｈｅｒｏｎ及びＲ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ著、"ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ"、ＩＲＬＰｒｅｓｓａｔＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ、１９８９年Ｊ．Ｊｏｎｅｓ著、"ＴｈｅＣｈｅｍｉｃａｌＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＰｅｐｔｉｄｅｓ"、ＣｌａｒｅｄｏｎＰｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、１９９４年 "Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，１８° Ｅｄｉｔｉｏｎ"ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ、１９９０年Ｂａｌｂｏｎｉら著、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．ＰｅｒｋｉｎＴｒａｎｓＩ、１９９８年、ｐ．１６４５−１６５１ＮａｕｎｙｎＳｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓＡｒｃｈＰｈａｒｍａｃｏｌ、１９９９年、３５９巻、ｐ．１６０−７ＮａｕｎｙｎＳｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓＡｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００３年、３６７巻、ｐ．１８３−１８７Ｃａｌoら著、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００２年、１３６巻、ｐ．３０３−３１１Ｎｉｓｈｉ，Ｍ．ら著、"Ｕｎｒｅｓｔｒａｉｎｅｄｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅａｎｄｄｉｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｈｅａｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙｉｎｍｉｃｅｌａｃｋｉｎｇｔｈｅｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ／ｏｒｐｈａｎｉｎＦＱｒｅｃｅｐｔｏｒ"、ＥｍｂｏＪ、１９９７年、１６巻、８号、ｐ．１８５８−６４ＬｉｆｅＳｃｉ．、１９８３年、３３巻、Ｓｕｐｐｌ．１号、ｐ．４４７−５０Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２００４年、１８巻、ｐ．５６ "ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｎｇｒｅｓｓｏｆｔｈｅＩｔａｌｉａｎＳｏｃｉｅｔｙｏｆＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄｊｏｉｎｔＩｔａｌｉａｎ−ＳｗｅｄｉｓｈＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅＭｅｅｔｉｎｇｓ"、Ｉｓｃｈｉａ（Ｎａｐｏｌｉ）、２００５年１０月、１−４Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１９７６年、７２巻、ｐ．２４８−２５４

本発明者らは、１９９６年より、特定のＮＯＰの同定に続き、Ｎ／ＯＦＱ−ＮＯＰシステムに関する研究を行っており、例えば、ｉ）Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が、天然のＮ／ＯＦＱリガンドと同様の活性を有する最小限の機能的フラグメントであること（非特許文献２）、ｉｉ）Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２が、Ｎ／ＯＦＱと比較して、より強力且つ持続的な効果を、特にｉｎｖｉｖｏにおいて発揮すること（非特許文献３）、ｉｉｉ）［Ｔｙｒ^１］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が混合されたアゴニストとして、ＮＯＰ、及び従来のオピオイド受容体に対して作用すること（非特許文献４及び５）、ｉｖ）［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が、非特許文献８に報告の［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が真正の部分的なＮＯＰ受容体のアゴニストであるという知見に基づいて、選択的なＮＯＰ受容体のリガンドとして、調製／アッセイに依存して、純粋なアンタゴニスト、部分的なアゴニスト、又は完全なアゴニストとして挙動すること（非特許文献６及び７）、ｖ）［Ｎｐｈｅ^１］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が、最初の純粋なＮＯＰ受容体に対する競合型のアンタゴニストであること（非特許文献９及び１０）がある。

これらのリガンドの作用は、ｉｎｖｉｔｒｏ及びｉｎｖｉｖｏのアッセイにおいて、複数、特徴付けられてきた（非特許文献１１参照）。最近、Ｐｈｅ^４残基を（ｐＦ）Ｐｈｅ又は（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅに置き換えて、強力で選択的なＮＯＰのアゴニストが得られている（非特許文献１２）。他の興味ある化合物である［Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱが、ＨＥＫ２９３細胞に発現されたヒトのリコンビナントＮＯＰ受容体に選択的に、高度に強力なアゴニストであることが同定された（非特許文献１３）。このリガンドの作用について、Ｎ／ＯＦＱに感受的な単離した組織を用いたｉｎｖｉｔｒｏの系、及びマウスを用いたｉｎｖｉｖｏの系で、さらに特徴付けられている（非特許文献１４）。さらに、Ｚｈａｎｇらは、Ｎ／ＯＦＱのアナログについて、言及しており、これは、７位及び／又は１１位のアラニン残基を、２−アミノ−２−メチルプロピオン酸（Ａｉｂ）残基に置換したことを特徴とするものであって、リガンドの親和性及び活性が増加した（非特許文献１５）。Ｎ／ＯＦＱのアナログについては、特許文献１乃至５に述べられている。このリガンドの利用性については、痛覚過敏、神経内分泌機能、ストレス、運動活性及び不安症に関連する疾病の処置／予防について、報告されている。

なお、以下、Ｎ／ＯＦＱの参照配列は、下記のとおりである。

Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＯＨ

本発明の主題は、下記の一般式（１）に示すＮ／ＯＦＱのペプチドアナログである。

Ｘａａ^１−？−Ｇｌｙ^２−Ｇｌｙ^３−Ｘｂｂ^４−Ｔｈｒ^５−Ｇｌｙ^６−Ｘｃｃ^７−Ａｒｇ^８−Ｌｙｓ^９−Ｓｅｒ^１０−Ｘｄｄ^１１−Ａｒｇ^１２−Ｌｙｓ^１３−Ｘｅｅ^１４−Ｘｆｆ^１５−Ｒ（１）

ここで、Ｘａａ^１は、フェニル基又はＮ−ベンジル−グリシン（ＮＰｈｅ）であり、
？は、第１のアミノ酸残基と第２のアミノ酸残基との結合を示し、ＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ及びＣＨ_２−Ｏから選択され、
Ｘｂｂ^４は、フェニル基又は（ｐＸ）フェニル基であり、ここで、Ｘは、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、ＮＯ_２、ＣＮを示し、ｐは、フェニル基のフェニル環におけるパラ位を示し、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１は、Ａｌａ；２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）；２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）；２−アミノ−２−エチル−ブチル酸（Ｄｅｇ）；２−アミノ−２−プロピル−ペンタン酸（Ｄｐｇ）；（Ｃ_ａＣＨ_３）Ｌｅｕ；（Ｃ_ａＣＨ_３）Ｖａｌ；１−アミノ−シクロプロパン−カルボン酸（Ａｃ_３ｃ）；１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５ｃ）及び１−アミノ−シクロヘキサン−カルボン酸（Ａｃ_６ｃ）から選択され、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｏｍｏＡｒｇ、ジアミノブチル酸、ジアミノプロピオン酸及びＴｒｐから選択され、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２若しくはＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＯＨのジペプチド、又は末端がアミド（−ＮＨ_２）若しくはカルボン酸（−ＯＨ）、若しくは末端がアミノ（−ＮＨ_２）若しくは水酸基（−ＯＨ）であるＡｓｎを示す。

さらに、本発明は、上記の式（１）の化合物の医薬的に許容可能な塩を含み、特に、有機酸及び無機酸の塩であって、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、酢酸塩、コハク酸塩、アスコルビン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、安息香酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩及びステアリン酸塩が挙げられる。

本発明において用いる用語は、例えば、非特許文献１８のように、当業者公知の意味を有するものであって、下記に述べる通りである。

有効性−同じ比率で受容体を占拠している場合であっても、異なるアゴニストに対して異なる反応を生じる程度を表現する概念。

効力−特定の効果を発揮するのに必要な濃度又は量の観点から定義された、化合物の活性の表現。効力は、アゴニストについては、ｐＥＣ_５０として測定され、アンタゴニストについては、ｐＡ_２として測定される。

本発明による式（１）に含まれる化合物は、本技術分野公知のペプチドリガンドと比較して、１００倍以上の証明された薬理活性を有する。従って、式（１）に従った配列の相乗効果を推測することが可能であって：１位、４位、７位、１１位、１４位及び１５位について、並びに第１の２つのアミノ酸残基間の結合について、推測することが可能である。最も高い活性を有する式（１）の化合物、特に好適な化合物は、［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２であって、親和性、効力、プロテアーゼに対する耐性、ｉｎｖｉｔｒｏでの作用の動態、及び上述の全てのもの、及びｉｎｖｉｖｏにおける作用の持続性について、示されている。

好適な化合物としては、式（１）の化合物において、
？がＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ、又はＣＨ_２−Ｏであり、
Ｘａａ^１がフェニル基又はＮＰｈｅであり、
Ｘｂｂ^４がフェニル基又は（ｐＸ）フェニル基であって、ｐＸは、上記の通りであり、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１は、上記の通りであり、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｏｍｏＡｒｇ又はＴｒｐであり、
Ｒは、−ＮＨ_２、−ＯＨ、Ａｓｎ−ＮＨ_２、Ａｓｎ−ＯＨ、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２、又はＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＯＨである。

さらに好適なものは、式（１）の化合物において、
？がＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ又はＣＨ_２−Ｏであり、
Ｘａａ^１がフェニル基又はＮＰｈｅであり、
Ｘｂｂ^４がフェニル基、（ｐＦ）フェニル基、又は（ｐＮＯ_２）フェニル基であり、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１がＡｌａ、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）、２−アミノ−２−エチル−ブチル酸（Ｄｅｇ）、２−アミノ−２−プロピル−ペンタン酸（Ｄｐｇ）、（Ｃ_ａＣＨ_３）Ｌｅｕ；（Ｃ_ａＣＨ_３）Ｖａｌ、１−アミノ−シクロプロパン−カルボン酸（Ａｃ_３ｃ）、１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５ｃ）又は１−アミノ−シクロヘキサン−カルボン酸（Ａｃ_６ｃ）であり、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５がＡｒｇ又はＬｙｓであり、
ＲがＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２又は−ＮＨである。

さらに好ましくは、式（１）を有するペプチドアナログであって、下記の表に記載の可変の残基を有するものである。

これらのなかでも、より好ましいものは、
？がＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ又はＣＨ_２−Ｏであり、
Ｘａａ^１がフェニル基又はＮＰｈｅであり、
Ｘｂｂ^４がフェニル基、（ｐＦ）フェニル基又は（ｐＮＯ_２）フェニル基であり、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１がＡｌａ、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）であり、
Ｘｅｅ^１４がＡｒｇであり、
Ｘｆｆ^１５がＬｙｓであり、
ＲがＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２又は−ＮＨ_２であって、
下記の式で示されるものである。

ａ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｄ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｅ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｆ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｇ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｈ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｉ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｌ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｍ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｎ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｏ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｐ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ａａ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｂｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｃｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｄｄ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｅｅ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｆｆ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｇｇ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｈｈ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｉｉ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｌｌ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｍｍ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｎｎ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｏｏ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｐｐ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ａａａ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｂｂｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｃｃｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｄｄｄ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｅｅｅ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｆｆｆ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｇｇｇ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｈｈｈ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｉｉｉ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｌｌｌ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｍｍｍ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｎｎｎ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｏｏｏ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｐｐｐ）Ｈ−Ｐｈｅ−？（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２

本発明によるペプチドアナログは、非特許文献１９乃至２３などの文献公知の異なる方法で合成され得る。これらの技術は、固相でのペプチド合成、又は液相でのペプチド合成、有機化学的な合成方法、又はこれらの組み合わせを含む。合成スキームの選択は、与えられるペプチドの組成に明らかに依存する。好ましくは、固相技術、従来の液相方法の適当な組み合わせに基づいて、低い製造コストに関連し、特に工業スケールでのコストに関連して、合成方法を使用する。詳しくは、この方法は、以下の工程を有する：

ｉ）適当に活性化されたＮを保護されたアミノ酸の、アミノ酸又はＣを保護されたペプチド鎖への連続カップリングを介したペプチド鎖フラグメントの溶液における合成であって、中間体を単離しつつ、次に、このフラグメントのＮ末及びＣ末の選択的な保護、及び所望のペプチドが得られるまで上記のカップリングを繰り返す工程。必要であれば、側鎖は、脱保護される。

ｉｉ）不溶性のポリマー支持体上での、Ｃ末からＮ末へのペプチド鎖の固相合成工程。このペプチドは、無水フルオロ酸（ｆｌｕｏｒｉｄｒｉｃａｃｉｄ）又はトリフルオロ酢酸を用いて、樹脂から除去されると同時に側鎖が脱保護される。

この合成の終期において、ペプチドは、適当な溶媒で処理することによって、及びＨＰＬＣなどのクロマトグラフィー技術によって、精製され且つ単離されてもよい。

本発明によるペプチドアナログは、ＮＯＰ受容体上で、ｉ）［Ｐｈｅ^１？（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する場合、完全なアゴニストとして、ｉｉ）［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］又は［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する場合、部分的なアンタゴニストとして、及び［Ｎｐｈｅ^１？（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する場合、純粋なアンタゴニストとして、それぞれ機能する。

また、本発明は、上述のペプチドアナログと、医薬的に許容可能なビヒクル及び賦形剤とを含有する医薬組成物に関する。本発明の組成物は、経口又は非経口で投与されてもよく、或いは呼吸器、直腸、脊髄、髄腔、膀胱又は局所の経路で注入可能な調製物、カプセル、錠剤、顆粒、溶液、懸濁液、シロップ、坐剤、鼻腔用スプレー、クリーム、軟膏、ゲル、放出制御調製物、又はその他の形態として、投与されてもよい。医薬組成物の本体及びこの医薬組成物の調製方法は、当業者に公知であって、例えば、非特許文献２４に記載のものであってもよい。本発明による医薬組成物は、有効量のペプチド（又はその誘導体）を含有し、一般的に、０．００１〜１００ｍｇの範囲であり、好ましくは、０．０１〜１０ｍｇの範囲である。１日量は、病態／不全のタイプ、年齢、性別、患者の体重、一般的な健康状態、及び症例に基づいて必要とするその他の変数に依存して、種々変更する。

本発明のペプチドが示す活性プロファイルを生物学的試験において考慮して、上記のペプチドを含有する医薬組成物は、機能不全又は神経系若しくは感覚神経の機能不全を含む病態の処置に使用されてもよい。不安症、拒食症、高血圧、頻脈、水保持障害、低ナトリウム血症、うっ血性心疾患、胃腸、呼吸器及び尿生殖路における平滑筋運動神経不全（特に過敏膀胱の後の尿失禁）、炎症状態、又は末梢若しくは脊髄麻酔の処置、特に慢性疼痛の処置、さらに咳の制御には、強力で持続的なＮＯＰ受容体の活性化を得ることが望ましい。さらに、記憶、気分、自発運動（例えば、パーキンソン病）、摂食障害（例えば、過食症）などの処置、又は特に、肥満患者を処置するのに、アンタゴニストを使用することも可能である。大きい分子量を有するこれらの化合物、及び生理的なｐＨにおいて正に荷電し得る残基を有するものは、脳血液関門を通過することが可能でないかもしれない。この化合物は、末梢に主として分布する場合であって、局所に投与した後に中枢での効果を発揮し得る。例えば、アゴニストの化合物は、髄腔又は脊髄への投与の後に中枢神経系において無痛覚の状態を惹起し得る。

（実験部）
１．ペプチドの合成
１．１合成の一般的スキーム
４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチルフェノキシアセトアミド−ノルロイシン樹脂（リンクアミド（Ｒｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ）ＭＢＨＡ樹脂）を用いて、固相合成によって、本発明のペプチドを調製した。カルボキシル基を活性化する試薬として［Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムエキサフルオロフォスフェート］（ＨＡＴＵ）を用いて、Ｆｍｏｃアミノ酸（フルオレミルメトキシカルボニル）を濃縮した。ＤＭＦ（ジメチルフォルムアミド）中に２０％のピペリジンを有する溶液を用いて、Ｆｍｏｃ基を除去し、生のペプチドを得るため、保護ペプチドに結合された樹脂を、Ｋ試薬で処理した。最終の合成ステップ中に樹脂に結合した保護ペプチド（２−１７）、（２−１６）又は（２−１５）上のＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＨＯの縮合によって、ｉｎｓｉｔｕにおいて中間体である「イミノ」誘導体をＮａＢＨ_３ＣＮで還元して、或いは、最終の合成ステップ中に樹脂に結合した保護ペプチド（３−１７）、（３−１６）又は（３−１５）上のフラグメントであるＢｏｃ−［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２］−ＯＨ（非特許文献２５に報告の方法に従って得たもの）を、縮合剤としてＨＡＴＵを用いて、縮合することにより、改変したペプチド結合を上記の第１の２つのアミノ酸残基間に有する［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］又は［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２］なる化合物を得た。

Ａｌｌｔｅｃｈ社製のＣ−１８カラム（１５０×４．６ｍｍ、５μｍ）を用いて、分析用ＨＰＬＣであるＢｅｃｋｍａｎｎＳｙｓｔｅｍ社製のＧｏｌｄ１６８によって、生及び最終的な製品の分析を行った。溶媒Ａ：３５ｍＭＮａＨ_２ＰＯ_４（ｐＨ２．１）、及び溶媒Ｂ：５９ｍＭＮａＨ_２ＰＯ_４（ｐＨ２．１）−アセトニトリル（６０：４０ｖ／ｖ）からなる二相のシステムを用い、分析する化合物の物理化学的特性に従ってグラジエントをプログラムしたシステムで、１ｍＬ／分の流速、２２０ｎｍの波長により、化合物を分析した。Ｗａｔｅｒ社製の円柱のパックカラムであるＤｅｌｔａ−ＬＣ４０ｍｍ（３０×４０ｃｍ、Ｃ１８、３００Ａ、１５μｍ）を用いたＷａｔｅｒ社製の調製用ＨＰＬＣであるＤｅｌｔａＰｒｅｐ４０００ｓｙｓｔｅｍにより、上記の分析用ＨＰＬＣで用いたのと同じ移動相で溶出し、生の反応産物の分析プロファイルを参照したグラジエントプログラムにより、生のペプチドを精製した。ｍｉｃｒｏｍａｓｓＺＭＤ２０００装置を用いたエレクトロスプレー質量分析によって、最終的な化合物の分子量を得た。

複数のペプチドの中間体に関し、Ｂｒｕｃｋｅｒ社製の２００ＭＨｚの装置を用いて、分光^１ＨＮＭＲ分析を行った。

１．２方法
上記の方法に従って、上述のペプチドアナログｂ）、ｃ）及びｄ）を調製した。

ＤＭＦ中にピペリジン（２０％）を有するもので、リンクアミドＭＢＨＡ樹脂（０．６５ミリモル／ｇ、０．２ｇ）を処理し、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨで縮合し、ＨＡＴＵでカルボキシル基を活性化した。Ｆｍｏｃアミノ酸を連続的に伸張する下記のペプチド鎖にカップリングした：Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ。ＨＡＴＵ（４当量）及びジイソプロピルエチルアミン（４当量）を有するＤＭＦを用いて、全てのＦｍｏｃアミノ酸（４当量）を伸張するペプチド鎖にカップリングした；このカップリング反応を１時間行った。合成収量を最適化するため、且つ化合物の精製を容易にするため、Ａｉｂ残基には、１時間のアセチル化時間を有する二重のカップリングが必要である。各ステップにおいて、Ｆｍｏｃ基を除去するのに、ピペリジン（２０％）を有するＤＭＦを用いた。最終的なＮ^ａ−Ｆｍｏｃ基を脱保護した後、ペプチドの樹脂をメタノールで洗浄し、吸引下で乾燥して、リンクアミドＭＢＨＡで保護された［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ（１−１７）の樹脂を得た。この保護ペプチド樹脂を、Ｋ試薬（ＴＦＡ：Ｈ_２０：フェノール：エタンジチオール：チオアニソール＝８２．５：５：５：２．５：５（ｖ／ｖ）、１０ｍＬ／０．２ｇ樹脂）を用いて、１時間、室温で処理した。枯渇した樹脂を濾過した後、吸引下で溶媒を濃縮し、残渣をエタノール中で粉砕した。調製用の逆相ＨＰＬＣによって、生のペプチドを精製し、凍結乾燥の後に白色の粉末を得た。

［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ペプチドｃ）の合成は、上述の通り合成した、中間体である［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ−（２−１７）−樹脂から出発して、行った。この中間体（０．２ｇ、０．６５ミリモル／ｇ、０．１３ミリモル）を、１％の酢酸を有するメタノール（２ｍＬ）中で、再懸濁し、且つ膨潤させた。２０分後、メタノールに溶解した、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＨＯ（０．０６５ｇ、０．２６ミリモル）及びＮａＢＨ_３ＣＮ（０．０３３ｇ、０．５２ミリモル）を含有する溶液（０．８ｍＬ）を添加し、この反応混合物を、１．５時間、攪拌した。得た樹脂を、メタノールで洗浄し、上述のＫ試薬で処理した。［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ペプチドｄ）の合成は、上述の通り合成した中間体である［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ（３−１７）−樹脂から出発して、行った。最終ステップにおいて、この中間体（０．２ｇ、０．６５ミリモル／ｇ、０．１３ミリモル）をアセチル化し、上記の通常のアセチル化ステップで言及したのと同様の条件下で、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ［？（ＣＨ_２−Ｏ）］Ｇｌｙ−ＯＨ（４当量、０．１６ｇ、０．５２ミリモル）のカルボキシル基をＨＡＴＵで活性化した。その後、樹脂をメタノールで洗浄し、上記の試薬Ｋで処理した。

２．薬理試験
２．１材料及び方法
上記の化合物について、ヒトのリコンビナントＮＯＰ受容体（ＣＨＯ_ｈＮＯＰ）（受容体結合実験及びＧＴＰ？Ｓの結合刺激実験）を発現するハムスターの卵母細胞膜、及び電気刺激を行った後のマウスの輸精管を用いたｉｎｖｉｔｒｏの試験を行った。バイオアッセイ実験（マウス輸精管）において化合物の効果を検討するのに用いた条件は、Ｂｉｇｏｎｉらが非特許文献２６で言及するものであり、ＣＨＯ_ｈＮＯＰ細胞における効果を検討するのに用いた条件は、ＭｃＤｏｎａｌｄらが非特許文献２７に言及するものである。実験の各シリーズにおいて、新規の化合物の活性は、天然のＮ／ＯＦＱペプチドの活性と比較した。

２．２結果
受容体結合実験において、試験した全ての化合物は、ヒトのＮＯＰ受容体から、トリチウム化したＮ／ＯＦＱを完全に置き換え得ることが証明された。化合物は、種々の化学改変に依存して、非常に異なる受容体親和性（ｐＫｉ）を示した。一般的に、［Ｐｈｅ^１？（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造の化合物は、［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造の化合物よりも高い親和性を示し、且つ［Ｎｐｈｅ^１？（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造の化合物よりも極めて高い親和性を示した。さらに、［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］の改変を組み合わせた化合物は、一つの改変を加えたものよりも大きな親和性を示した。

ＧＴＰ？Ｓの結合刺激に関連する機能試験、及びマウスの輸精管の電気的刺激で誘導した痙攣の阻害に関連する試験において、［Ｐｈｅ^１？（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する化合物は、Ｎ／ＯＦＱの効果と似ており、特に同様の誘導した最大効果と似ており、従って、完全なアゴニストとして機能する一方、［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する化合物は、Ｎ／ＯＦＱよりも低い最大効果であるので、部分的アゴニストとして機能した。最後に、［Ｎｐｈｅ^１？（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する化合物は、それ自体、種々の効果を発揮しなかったが、Ｎ／ＯＦＱに対する競合型のアンタゴニストとして機能した。

簡略化するため、表１に、［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１２）、［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１３）及び［Ｎｐｈｅ^１、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１１）並びに参照ペプチドであるＮ／ＯＦＱで得た結果を示す。

表１
［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１２）、［Ｐｈｅ^１？（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１３）及び［Ｎｐｈｅ^１、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１１）、並びに参照ペプチドであるＮ／ＯＦＱの生物活性

これらの結果は、４〜６回の実験の平均値（メジアン）である。ＮＤは、化合物がアゴニスト効果を示さなかったため、検出不可であることを示す。

表１に強調するように、化合物ＵＦＰ−１１３は、部分的なＮＯＰ受容体アゴニストとして挙動し、ＧＴＰγＳのアッセイにおいても、マウスの輸精管の電気刺激で誘導した収縮の阻害アッセイにおいても、Ｎ／ＯＦＱよりも低い最大効果を示した。ＵＦＰ−１１１は、ＮＯＰ受容体に対して、純粋で強力で選択的なアンタゴニストであることが証明された。Ｓｃｈｉｌｄらによる分析（ＧＴＰγＳの実験及びマウスの輸精管の系）で示すように、この化合物は、それぞれ、８．６８及び７．４６の強力な値を以て、ＮＯＰ受容体の競合型のアンタゴニストとして挙動する（表１参照）。

２．３化合物ＵＦＰ−１１２の選択性
ＵＦＰ−１１２の効果は、下記の事実で示すように、ＮＯＰ受容体の活性化によって、媒介されている。つまり、この事実とは、マウスの輸精管におけるこのペプチドの作用は、ナロキソン（従来のオピオイド受容体の非選択的なアンタゴニストであるが、ＮＯＰ受容体に対してのものではない）の存在下で改変されなかったが、ＮＯＰ受容体に対する選択的なアンタゴニストであるＵＦＰ−１０１（［Ｎｐｈｅ^１、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２、非特許文献２８）によって効果的に中和されたということである。ＵＦＰ−１１２に拮抗して用いたＵＦＰ−１０１は、内因性のアゴニストであるＮ／ＯＦＱと拮抗して用いられた場合に得られた結果（ｐＡ_２＝６．９１）と同様に、強力な値（ｐＡ_２＝６．８１）を示した。このことは、３つの分子（Ｎ／ＯＦＱ、ＵＦＰ−１１２及びＵＦＰ−１０１）が同じ受容体、つまりＮＯＰ受容体と相互作用することを示す。さらに、このことは、ＮＯＰ受容体遺伝子のノックアウトマウス（ＮＰＯ^−／−）に由来する組織を用いた結果（非特許文献２９参照）でも示されている（表２参照）。

表２
野性型（ＮＯＰ^＋／＋）及びＮＯＰ受容体のノックアウトマウス（ＮＯＰ^−／−）の輸精管における、アゴニストであるＮ／ＯＦＱ及びＵＦＰ−１１２、並びにアゴニストであるＤＯＰ、Ｄ−Ｐｅｎ^２、Ｄ−Ｐｅｎ^５エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）の効果

電気刺激により誘導される収縮に対する、ＵＦＰ−１１２による阻害効果（Ｎ／ＯＦＱで観察されるのと同様）は、ＮＯＰ^−／−で消失した。このことから、ＵＦＰ１１２の生物学的作用は、ＮＯＰ受容体との相互作用によるもののみであることが確認された。

選択的なＤＯＰのアゴニストである、［Ｄ−Ｐｅｎ^２、Ｄ−Ｐｅｎ^５］−エンケファリン（ＤＰＤＰＥ）なる化合物を正のコントロールとして用いた。このコントロールが示すのは、阻害的な刺激に通常反応するＮＯＰ受容体のノックアウトマウスに由来する組織は、ＮＯＰ受容体を用いないことである。

２．４本発明による化合物の選択性に関する薬理試験
各化合物について、ＭｃＤｏｎａｌｄらによる、上記の項目２．１で説明した、ヒトのリコンビナントＮＯＰ受容体を発現したハムスターの卵母細胞（ＣＨＯ）の細胞膜（ＣＨＯ_ｈＮＯＰ）における、ｉｎｖｉｔｒｏの試験を行った（非特許文献２７）。

ＮＯＰ受容体に対するこれらの受容体の選択性に関する検討は、ＣＨＯ_ｈＮＯＰについての同様の方法を用いて、μ（ＭＯＰ）、δ（ＤＯＰ）及びκ（ＫＯＰ）型のヒトのリコンビナントのオピオイド受容体でトランスフェクトしたＣＨＯ細胞の細胞膜における受容体結合実験により、行われた。ＭｃＤｏｎａｌｄによる方法に従った拮抗実験により、選択性の試験を行った（非特許文献２７）。Ｎ／ＯＦＱに対するｐＫｉを測定するため、放射性リガンドとして、トリチウム化したＮ／ＯＦＱを用い、［^３Ｈ］−ジプレオンルフィンを、従来のオピオイド受容体に対するものとして用いた。新規の化合物の活性は、天然のペプチドであるＮ／ＯＦＱと比較した。

トランスフェクトしたＣＨＯ細胞の細胞膜上で行った受容体結合実験において、ＵＦＰ−１１１、ＵＦＰ−１１２及びＵＦＰ−１１３は、ＭＯＰ、ＤＯＰ及びＤＯＰ受容体よりも、ＮＯＰ受容体に対して、高い選択性（＞１００倍）を示した（表３参照）。

表３
ＣＨＯ細胞にトランスフェクトしたＮＯＰ、ＭＯＰ、ＤＯＰ及びＫＯＰ受容体に対するＵＦＰ−１１２、ＵＦＰ−１１３及びＵＦＰ−１１１の親和性（ｐＫｉ）（非特許文献２７）

これらのデータは、４回の実験の平均である。
印１は、用いたトリチウム化したリガンドが［^３Ｈ］Ｎ／ＯＦＱであることを示し、
印２において、ＤＡＭＧＯは、［Ｄ−Ａｌａ（２）、Ｎ−ＭｅＰｈｅ（４）、Ｇｌｙ−ｏｌ（５）］エンケファリンであり、
印３は、用いたトリチウム化したリガンドが［^３Ｈ］ジプレノルフィンであることを示す。

３．完全なアゴニストである化合物ＵＦＰ−１１２の効能に関するｉｎｖｉｖｏ試験
完全なアゴニストである化合物ＵＦＰ−１１２について、下記に示す異なるアッセイにおいて、マウスを用いたｉｎｖｉｖｏの試験を行った。

１）Ｃａｌoらによる（非特許文献１６）、及びＲｉｚｚｉらによる（非特許文献３１）実験プロトコールに従った尾の除去アッセイ
２）Ｒｉｚｚｉらが述べる給餌動物における摂食の測定（非特許文献３２）
３）Ｒｉｚｚｉらが述べる一時的な移動運動活性の測定アッセイ（非特許文献３）

各アッセイにおいて、同様の効果の量として、ＵＦＰ−１１２及びＮ／ＯＦＱの活性を測定した。ＵＦＰ−１１２が約１００倍の高い効能を示したので、ＵＦＰ−１１２のペプチドは、０．００１〜０．１ナノモルの用量を用い、Ｎ／ＯＦＱは、０．１〜１０ナノモルの用量を用いた。

マウスにおける麻酔性の尾の除去試験において、同様の効果の用量におけるＵＦＰ−１１２は、長期間の活性を示したにもかかわらず（＞１２０分）、天然のリガンドであるＮ／ＯＦＱの効果と類似した。

０．００１〜０．１ナノモルの用量範囲におけるＵＦＰ−１１２は、脳室内投与（ｉ．ｃ．ｖ．）で注入した場合、前障害性（ｐｒｏｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ）の効果を誘導したが、髄腔内投与した場合、痛覚抑制効果を示した（図１参照）。この効果は、ＮＯＰ^−／−マウスでは見られなかったので、ＮＯＰ受容体の活性化を介したものである。

同じ効果の用量におけるＮ／ＯＦＱ及びＵＦＰ−１１２について、給餌マウスにおける摂食試験を行った。両化合物は、摂食の有意な増加を誘導し、これらのアッセイにおいて、ＵＦＰ−１１２は、Ｎ／ＯＦＱよりも１００倍の活性であることが証明された。この試験において、Ｎ／ＯＦＱ及びＵＦＰ−１１２の過食効果は、ＮＯＰ^＋／＋マウスでは見られたがＮＯＰ^−／−マウスで見られなかったことから、ＮＯＰ受容体の活性化による排他的なものである。

ｉｎｖｉｖｏにおけるＵＦＰ−１１２の持続時間を検討するため、Ｎ／ＯＦＱ（１０ナノモル）及びＵＦＰ−１１２（０．１ナノモル）を同じ効果の用量で、ｉ．ｃ．ｖ．で投与した際の、持続時間（午後５時半〜午前７時半まで）についての一時的な移動運動活性を検討した。両ペプチドは、この移動運動活性を阻害したが、Ｎ／ＯＦＱは、ｉ．ｃ．ｖ注入後６０分で効果が消失したが、ＵＦＰ−１１２で誘導した効果は、約６時間後に終了した（図２参照）。

４．脳のホモジネート及び血漿における、Ｎ／ＯＦＱ並びに新規の誘導体であるＵＦＰ−１１１、ＵＦＰ−１１２及びＵＦＰ−１１３の代謝安定性
血漿及び脳の組織のサンプルは、オスのスイスマウス（Ｍｏｒｉｎｉ社製、ＲｅｇｇｉｏＥｍｉｌｉａ、イタリア、２５〜３０ｇ）から得た。エーテル麻酔で動物を屠殺し、左心室から挿入したニードルを介して生理的なヘパリン溶液を注入して、還流した。その後、血液を除去し、室温で２分間、１４，０００×ｇで遠心分離した。ペレットから分離した後、血漿を採取し、−８０℃で保存した。血液を除去した後、脳を除去する前、２分間、生理的溶液で動物をさらに還流した。脳の組織を、５容量のＴｒｉｓ／塩酸（５０ｍＭ、ｐＨ７．４、０℃）を用いて、Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ（ＪａｎｋｅＫｕｎｋｅｌ社製、Ｓｔａｕｆｅｎ、ＦＲＧ）で、各１５秒間を３回繰り返して、ホモジナイズした。遠心分離（３，０００×ｇ、１５分間、４℃）で得た上清をデカントし、その後、−８０℃で保存した。

調製物のタンパク質の含量を、非特許文献３３によるＢｒａｄｆｏｒｄ法によって、同定したところ、脳のホモジネートでは、８μｇ／μＬであり、血漿では、１７μｇ／μＬであった。

各ペプチドの１００μＬの溶液（３ｍｇ／５００μＬＴｒｉｓ）を、Ｔｒｉｓ／塩酸５０ｍＭのｐＨ７．４の緩衝液を含有する溶液１ｍＬ中で、脳のホモジネート又は血漿（４５０μＬ）とインキュベートした（終濃度が６μｇ／ｍＬ）。このインキュベートは、２４０分まで３７℃で行った。異なるインキュベーション時間において、用量の一部（１００μＬ）を除去し、４．５％のＴＦＡ溶液（２００μＬ）を添加して、分解を阻害した。遠心分離（３０００ｒｐｍ、１５分）を行った後、上清の一部（１００μＬ）を、ＲＰ−ＨＰＬＣに注入した。このＨＰＬＣ分析は、種々の可変波長のＵＶ検出器を装着したＢｅｃｋｍａｎｓｙｓｔｅｍＧｏｌｄクロマトグラフィーを用い、Ｋｒｏｍａｓｉｌ社製の１００−５Ｃ１８カラム（４．６×２５０ｍｍ）において、行った。

溶出の条件としては、共に０．１％のＴＦＡを含有する水（溶媒Ａ）及びアセトニトリル（溶媒Ｂ）を、０．７ｍＬ／分の流速で、グラジエント分析を行った。以下のプロトコールは、分析物の物理化学的特徴に基づいて選択したグラジエント分析に用いた。２０分間、５％〜４０％の溶媒Ｂについてのリニアグラジエントを行い、５分間、４０％〜６０％の溶媒Ｂのリニアグラジエントを行い、５分間、６０％〜５％の溶媒Ｂのリニアグラジエントを行った。溶出物は、２２０ｎｍでモニターした。半減期（Ｔ１／２）は、各分析についての少なくとも５点を用い、インキュベーション時間の関数として、各誘導物のピーク領域を図示して、最小二乗法を用いた線形回帰によって、得た。

データを、平均±標準誤差として、表３に示す。なお、このデータは、少なくとも３回の実験によって得たものである。

表３
マウスの血漿及び脳の組織におけるＮ／ＯＦＱ及び各誘導体のＴ_１／２（分）

Ｎ／ＯＦＱの半減期は、血漿において、約１時間であって、脳のホモジネートで得られた約３分と、非常に異なるものであった。本発明による検討した全てのペプチドでは、天然のペプチドと比較して、有意に長い半減期を示した。特に、ＵＦＰ−１１１及びＵＦＰ−１１３の血漿の半減期（Ｔ_１／２）は、Ｎ／ＯＦＱの約２倍であり、ＵＦＰ−１１２のＴ_１／２は、Ｎ／ＯＦＱのほぼ３倍の長さであった。

Ｎ／ＯＦＱと比較して、各誘導体で示した長い半減期は、血漿よりも脳のホモジネートでより顕著であった。事実、全ての誘導体のＴ_１／２は、脳の組織においてＮ／ＯＦＱが示す値（３分）よりも、３倍以上長いものであった。

これらのデータが示すように、化学的改変物であるＵＦＰ−１１１、ＵＦＰ−１１２及びＵＦＰ−１１３の配列は、Ｎ／ＯＦＱと比較して、アゴニストとして又はアンタゴニストとして、効力が増加した：斯かる改変は、ＮＯＰ受容体上での効力を調節し、血漿又は脳の組織の両方に存在するペプチダーゼによる分解に対する重要な低減の疑いを決定するものである。この重要な特徴は、ｉｎｖｉｖｏにおけるこれらの分子の作用とともに、上記の項目３で行った一連の実験（ｉｎｖｉｖｏの検討）におけるＵＦＰ−１１２についての持続性に特に重大である。

５．マウスの輸精管におけるＵＦＰ−１１２の阻害効果の動態
電気的に刺激したマウスの輸精管において、ＵＦＰ−１１２の作用の動態、及び洗浄後のこの効果の可逆性は、Ｎ／ＯＦＱのものよりも、非常に遅いものであった（図３参照）。このことは、電気的刺激により誘導した輸精管の収縮に対する阻害効果で示された。代謝安定性のデータとともに、このことは、内因性のであるＮ／ＯＦＱと比較したＵＦＰ−１１２のｉｎｖｉｖｏにおける作用を説明するものである。

６．電気刺激した後のマウスの輸精管における式（１）に示す複数の化合物の生物活性
表４は、アゴニストのモデルであるＮ／ＯＦＱ−ＮＨ_２の７位及び１１位を化学的に改変した式（１）に示す一連の化合物の存在下における、電気刺激後のマウスの輸精管において得た結果をまとめたものである。

これらのデータが示すように、異なるアミノ酸の置換によって、完全なアゴニストとして全て作用するこれらの化合物の効力を変化させるものではないが、いくつかの場合（例えば、［Ａｃ_５ｃ^１１］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２及び［Ｄ／Ｌ−Ｉｖａ^１１］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２）、上記の参照配列に比較して、効力が増加する。これらの個々の改変の結果として得た効力における上記の増加（参照配列と比較して２倍）は、１００倍以上効力が増加するという化合物ＵＦＰ−１１２において異なる位置における組み合わせの改変の結果（表１）として得た効力の増加よりも低い。

表４
電気的に刺激したマウスの輸精管において測定した、７位及び１１位の種々の化学的改変で得た一般式（１）の一連の化合物の効力

尾の除去アッセイ（ｔａｉｌｗｉｔｈｄｒａｗａｌａｓｓａｙ）に関する、Ｎ／ＯＦＱ（１０ナノモル／マウス）及びＵＦＰ−１１２（０．１ナノモル／マウス）の脳室内及び髄腔内投与の効果を示す（非特許文献１６参照）。コントロールの動物には、生理食塩水（２μＬ／マウス）のｉ．ｃ．ｖ．投与を一回行った。各点は、少なくとも４回の実験で得た値の平均±Ｓ．Ｅ．を示す。Ｎ／ＯＦＱ（１０ナノモル／マウス）及びＵＦＰ−１１２（０．１ナノモル／マウス）の脳室内投与の、マウスにおける一時的な運動活性に対する経時的な効果を示す（非特許文献１７参照）。コントロールの動物には、生理食塩水（２μＬ／マウス）のｉ．ｃ．ｖ．投与を一回行った。各点は、少なくとも４回の実験で得た値の平均±Ｓ．Ｅ．を示す。電気刺激を行った後のマウスの輸精管における、同様の効果を有する濃度のＮ／ＯＦＱ及びＵＦＰ−１１２の効果の作用及び可逆的な動態を示す。電気刺激により誘導した輸精管の収縮は、ＵＦＰ−１１２又はＮ／ＯＦＱの存在によって、阻害された。

本発明者らは、１９９６年より、特定のＮＯＰの同定に続き、Ｎ／ＯＦＱ−ＮＯＰシステムに関する研究を行っており、例えば、ｉ）Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が、天然のＮ／ＯＦＱリガンドと同様の活性を有する最小限の機能的フラグメントであること（非特許文献２）、ｉｉ）Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２が、Ｎ／ＯＦＱと比較して、より強力且つ持続的な効果を、特にｉｎｖｉｖｏにおいて発揮すること（非特許文献３）、ｉｉｉ）［Ｔｙｒ^１］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が混合されたアゴニストとして、ＮＯＰ、及び従来のオピオイド受容体に対して作用すること（非特許文献４及び５）、ｉｖ）［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が、非特許文献８に報告の［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が真正の部分的なＮＯＰ受容体のアゴニストであるという知見に基づいて、選択的なＮＯＰ受容体のリガンドとして、調製／アッセイに依存して、純粋なアンタゴニスト、部分的なアゴニスト、又は完全なアゴニストとして挙動すること（非特許文献６及び７）、ｖ）［Ｎｐｈｅ^１］Ｎ／ＯＦＱ（１−１３）−ＮＨ_２が、最初の純粋なＮＯＰ受容体に対する競合型のアンタゴニストであること（非特許文献９及び１０）がある。

Ｘａａ^１−Ψ−Ｇｌｙ^２−Ｇｌｙ^３−Ｘｂｂ^４−Ｔｈｒ^５−Ｇｌｙ^６−Ｘｃｃ^７−Ａｒｇ^８−Ｌｙｓ^９−Ｓｅｒ^１０−Ｘｄｄ^１１−Ａｒｇ^１２−Ｌｙｓ^１３−Ｘｅｅ^１４−Ｘｆｆ^１５−Ｒ（１）

ここで、Ｘａａ^１は、フェニル基又はＮ−ベンジル−グリシン（ＮＰｈｅ）であり、
Ψは、第１のアミノ酸残基と第２のアミノ酸残基との結合を示し、ＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ及びＣＨ_２−Ｏから選択され、
Ｘｂｂ^４は、フェニル基又は（ｐＸ）フェニル基であり、ここで、Ｘは、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、ＮＯ_２、ＣＮを示し、ｐは、フェニル基のフェニル環におけるパラ位を示し、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１は、Ａｌａ；２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）；２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）；２−アミノ−２−エチル−ブチル酸（Ｄｅｇ）；２−アミノ−２−プロピル−ペンタン酸（Ｄｐｇ）；（Ｃ_αＣＨ_３）Ｌｅｕ；（Ｃ_αＣＨ_３）Ｖａｌ；１−アミノ−シクロプロパン−カルボン酸（Ａｃ_３ｃ）；１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５ｃ）及び１−アミノ−シクロヘキサン−カルボン酸（Ａｃ_６ｃ）から選択され、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｏｍｏＡｒｇ、ジアミノブチル酸、ジアミノプロピオン酸及びＴｒｐから選択され、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２若しくはＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＯＨのジペプチド、又は末端がアミド（−ＮＨ_２）若しくはカルボン酸（−ＯＨ）、若しくは末端がアミノ（−ＮＨ_２）若しくは水酸基（−ＯＨ）であるＡｓｎを示す。

好適な化合物としては、式（１）の化合物において、
ΨがＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ、又はＣＨ_２−Ｏであり、
Ｘａａ^１がフェニル基又はＮＰｈｅであり、
Ｘｂｂ^４がフェニル基又は（ｐＸ）フェニル基であって、ｐＸは、上記の通りであり、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１は、上記の通りであり、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｏｍｏＡｒｇ又はＴｒｐであり、
Ｒは、−ＮＨ_２、−ＯＨ、Ａｓｎ−ＮＨ_２、Ａｓｎ−ＯＨ、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２、又はＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＯＨである。

さらに好適なものは、式（１）の化合物において、
ΨがＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ又はＣＨ_２−Ｏであり、
Ｘａａ^１がフェニル基又はＮＰｈｅであり、
Ｘｂｂ^４がフェニル基、（ｐＦ）フェニル基、又は（ｐＮＯ_２）フェニル基であり、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１がＡｌａ、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）、２−アミノ−２−エチル−ブチル酸（Ｄｅｇ）、２−アミノ−２−プロピル−ペンタン酸（Ｄｐｇ）、（Ｃ_αＣＨ_３）Ｌｅｕ；（Ｃ_αＣＨ_３）Ｖａｌ、１−アミノ−シクロプロパン−カルボン酸（Ａｃ_３ｃ）、１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５ｃ）又は１−アミノ−シクロヘキサン−カルボン酸（Ａｃ_６ｃ）であり、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５がＡｒｇ又はＬｙｓであり、
ＲがＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２又は−ＮＨである。

これらのなかでも、より好ましいものは、
ΨがＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ又はＣＨ_２−Ｏであり、
Ｘａａ^１がフェニル基又はＮＰｈｅであり、
Ｘｂｂ^４がフェニル基、（ｐＦ）フェニル基又は（ｐＮＯ_２）フェニル基であり、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１がＡｌａ、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）であり、
Ｘｅｅ^１４がＡｒｇであり、
Ｘｆｆ^１５がＬｙｓであり、
ＲがＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２又は−ＮＨ_２であって、
下記の式で示されるものである。

ａ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｄ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｅ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｆ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｇ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｈ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｉ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｌ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｍ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｎ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｏ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｐ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ａａ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｂｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｃｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｄｄ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｅｅ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｆｆ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｇｇ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｈｈ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｉｉ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｌｌ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｍｍ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｎｎ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｏｏ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｐｐ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ａａａ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｂｂｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｃｃｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｄｄｄ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｅｅｅ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｆｆｆ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｇｇｇ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２
ｈｈｈ）Ｈ−Ｎｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｉｉｉ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｌｌｌ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｍｍｍ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｎｎｎ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｏｏｏ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２
ｐｐｐ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−（ｐＮＯ_２）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｖａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−ＮＨ_２

本発明によるペプチドアナログは、ＮＯＰ受容体上で、ｉ）［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する場合、完全なアゴニストとして、ｉｉ）［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］又は［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する場合、部分的なアンタゴニストとして、及び［Ｎｐｈｅ^１ Ψ（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する場合、純粋なアンタゴニストとして、それぞれ機能する。

（実験部）
１．ペプチドの合成
１．１合成の一般的スキーム
４−（２’，４’−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチルフェノキシアセトアミド−ノルロイシン樹脂（リンクアミド（Ｒｉｎｋ−Ａｍｉｄｅ）ＭＢＨＡ樹脂）を用いて、固相合成によって、本発明のペプチドを調製した。カルボキシル基を活性化する試薬として［Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムエキサフルオロフォスフェート］（ＨＡＴＵ）を用いて、Ｆｍｏｃアミノ酸（フルオレミルメトキシカルボニル）を濃縮した。ＤＭＦ（ジメチルフォルムアミド）中に２０％のピペリジンを有する溶液を用いて、Ｆｍｏｃ基を除去し、生のペプチドを得るため、保護ペプチドに結合された樹脂を、Ｋ試薬で処理した。最終の合成ステップ中に樹脂に結合した保護ペプチド（２−１７）、（２−１６）又は（２−１５）上のＢｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＨＯの縮合によって、ｉｎｓｉｔｕにおいて中間体である「イミノ」誘導体をＮａＢＨ_３ＣＮで還元して、或いは、最終の合成ステップ中に樹脂に結合した保護ペプチド（３−１７）、（３−１６）又は（３−１５）上のフラグメントであるＢｏｃ−［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２］−ＯＨ（非特許文献２５に報告の方法に従って得たもの）を、縮合剤としてＨＡＴＵを用いて、縮合することにより、改変したペプチド結合を上記の第１の２つのアミノ酸残基間に有する［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］又は［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２］なる化合物を得た。

ＤＭＦ中にピペリジン（２０％）を有するもので、リンクアミドＭＢＨＡ樹脂（０．６５ミリモル／ｇ、０．２ｇ）を処理し、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨで縮合し、ＨＡＴＵでカルボキシル基を活性化した。Ｆｍｏｃアミノ酸を連続的に伸張する下記のペプチド鎖にカップリングした：Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（ｐＦ）Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ。ＨＡＴＵ（４当量）及びジイソプロピルエチルアミン（４当量）を有するＤＭＦを用いて、全てのＦｍｏｃアミノ酸（４当量）を伸張するペプチド鎖にカップリングした；このカップリング反応を１時間行った。合成収量を最適化するため、且つ化合物の精製を容易にするため、Ａｉｂ残基には、１時間のアセチル化時間を有する二重のカップリングが必要である。各ステップにおいて、Ｆｍｏｃ基を除去するのに、ピペリジン（２０％）を有するＤＭＦを用いた。最終的なＮ^α−Ｆｍｏｃ基を脱保護した後、ペプチドの樹脂をメタノールで洗浄し、吸引下で乾燥して、リンクアミドＭＢＨＡで保護された［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ（１−１７）の樹脂を得た。この保護ペプチド樹脂を、Ｋ試薬（ＴＦＡ：Ｈ_２０：フェノール：エタンジチオール：チオアニソール＝８２．５：５：５：２．５：５（ｖ／ｖ）、１０ｍＬ／０．２ｇ樹脂）を用いて、１時間、室温で処理した。枯渇した樹脂を濾過した後、吸引下で溶媒を濃縮し、残渣をエタノール中で粉砕した。調製用の逆相ＨＰＬＣによって、生のペプチドを精製し、凍結乾燥の後に白色の粉末を得た。

［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ペプチドｃ）の合成は、上述の通り合成した、中間体である［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ−（２−１７）−樹脂から出発して、行った。この中間体（０．２ｇ、０．６５ミリモル／ｇ、０．１３ミリモル）を、１％の酢酸を有するメタノール（２ｍＬ）中で、再懸濁し、且つ膨潤させた。２０分後、メタノールに溶解した、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＣＨＯ（０．０６５ｇ、０．２６ミリモル）及びＮａＢＨ_３ＣＮ（０．０３３ｇ、０．５２ミリモル）を含有する溶液（０．８ｍＬ）を添加し、この反応混合物を、１．５時間、攪拌した。得た樹脂を、メタノールで洗浄し、上述のＫ試薬で処理した。［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ペプチドｄ）の合成は、上述の通り合成した中間体である［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］−Ｎ／ＯＦＱ（３−１７）−樹脂から出発して、行った。最終ステップにおいて、この中間体（０．２ｇ、０．６５ミリモル／ｇ、０．１３ミリモル）をアセチル化し、上記の通常のアセチル化ステップで言及したのと同様の条件下で、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ［Ψ（ＣＨ_２−Ｏ）］Ｇｌｙ−ＯＨ（４当量、０．１６ｇ、０．５２ミリモル）のカルボキシル基をＨＡＴＵで活性化した。その後、樹脂をメタノールで洗浄し、上記の試薬Ｋで処理した。

２．薬理試験
２．１材料及び方法
上記の化合物について、ヒトのリコンビナントＮＯＰ受容体（ＣＨＯ_ｈＮＯＰ）（受容体結合実験及びＧＴＰγＳの結合刺激実験）を発現するハムスターの卵母細胞膜、及び電気刺激を行った後のマウスの輸精管を用いたｉｎｖｉｔｒｏの試験を行った。バイオアッセイ実験（マウス輸精管）において化合物の効果を検討するのに用いた条件は、Ｂｉｇｏｎｉらが非特許文献２６で言及するものであり、ＣＨＯ_ｈＮＯＰ細胞における効果を検討するのに用いた条件は、ＭｃＤｏｎａｌｄらが非特許文献２７に言及するものである。実験の各シリーズにおいて、新規の化合物の活性は、天然のＮ／ＯＦＱペプチドの活性と比較した。

２．２結果
受容体結合実験において、試験した全ての化合物は、ヒトのＮＯＰ受容体から、トリチウム化したＮ／ＯＦＱを完全に置き換え得ることが証明された。化合物は、種々の化学改変に依存して、非常に異なる受容体親和性（ｐＫｉ）を示した。一般的に、［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造の化合物は、［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造の化合物よりも高い親和性を示し、且つ［Ｎｐｈｅ^１ Ψ（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造の化合物よりも極めて高い親和性を示した。さらに、［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］の改変を組み合わせた化合物は、一つの改変を加えたものよりも大きな親和性を示した。

ＧＴＰγＳの結合刺激に関連する機能試験、及びマウスの輸精管の電気的刺激で誘導した痙攣の阻害に関連する試験において、［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する化合物は、Ｎ／ＯＦＱの効果と似ており、特に同様の誘導した最大効果と似ており、従って、完全なアゴニストとして機能する一方、［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する化合物は、Ｎ／ＯＦＱよりも低い最大効果であるので、部分的アゴニストとして機能した。最後に、［Ｎｐｈｅ^１ Ψ（ＣＯ−ＮＨ）Ｇｌｙ^２］なる構造を有する化合物は、それ自体、種々の効果を発揮しなかったが、Ｎ／ＯＦＱに対する競合型のアンタゴニストとして機能した。

簡略化するため、表１に、［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１２）、［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１３）及び［Ｎｐｈｅ^１、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１１）並びに参照ペプチドであるＮ／ＯＦＱで得た結果を示す。

表１
［（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１２）、［Ｐｈｅ^１ Ψ（ＣＨ_２−ＮＨ）Ｇｌｙ^２、（ｐＦ）Ｐｈｅ^４、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１３）及び［Ｎｐｈｅ^１、Ａｉｂ^７、Ａｒｇ^１４、Ｌｙｓ^１５］Ｎ／ＯＦＱ−ＮＨ_２（ＵＦＰ−１１１）、並びに参照ペプチドであるＮ／ＯＦＱの生物活性

Claims

下記一般式（１）
Ｘａａ^１−？−Ｇｌｙ^２−Ｇｌｙ^３−Ｘｂｂ^４−Ｔｈｒ^５−Ｇｌｙ^６−Ｘｃｃ^７−Ａｒｇ^８−Ｌｙｓ^９−Ｓｅｒ^１０−Ｘｄｄ^１１−Ａｒｇ^１２−Ｌｙｓ^１３−Ｘｅｅ^１４−Ｘｆｆ^１５−Ｒ（１）
を有するペプチド又はその医薬的に許容可能な塩であって、
Ｘａａ^１は、フェニル基又はＮ−ベンジル−グリシン（ＮＰｈｅ）からなる群から選択され、
？は、第１の二つのアミノ酸残基間の結合を示し、ＣＯ−ＮＨ、ＣＨ_２−ＮＨ及びＣＨ_２−Ｏからなる群から選択され、
Ｘｂｂ^４は、フェニル基又は（ｐＸ）フェニル基であり、ここで、Ｘは、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、ＮＯ_２及びＣＮからなる群から選択され、ｐは、フェニル基のフェニル環におけるパラ位を示し、
Ｘｃｃ^７及びＸｄｄ^１１は、Ａｌａ；２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）；２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）；２−アミノ−２−エチル−ブチル酸（Ｄｅｇ）；２−アミノ−２−プロピル−ペンタン酸（Ｄｐｇ）；（Ｃ_ａＣＨ_３）Ｌｅｕ；（Ｃ_ａＣＨ_３）Ｖａｌ；１−アミノ−シクロプロパン−カルボン酸（Ａｃ_３ｃ）；１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５ｃ）及び１−アミノ−シクロヘキサン−カルボン酸（Ａｃ_６ｃ）からなる群から選択され、
Ｘｅｅ^１４及びＸｆｆ^１５は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、ｏｍｏＡｒｇ、ジアミノブチル酸、ジアミノプロピオン酸及びＴｒｐからなる群から選択され、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２若しくはＡｓｎ−Ｇｌｎ−ＯＨのジペプチド、又は末端がアミド（−ＮＨ_２）若しくはカルボン酸（−ＯＨ）、若しくは末端がアミノ（−ＮＨ_２）若しくは水酸基（−ＯＨ）であるＡｓｎを示すことを特徴とするペプチド又はその医薬的に許容可能な塩。
Ｘｃｃ^７は、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）、２−アミノ−２−エチル−ブチル酸（Ｄｅｇ）、２−アミノ−２−プロピル−ペンタン酸（Ｄｐｇ）、（ＣａＣＨ_３）Ｌｅｕ、（ＣａＣＨ_３）Ｖａｌ、１−アミノ−シクロプロパン−カルボン酸（Ａｃ_３Ｃ）、１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５Ｃ）及び１−アミノ−シクロヘキサン−カルボン酸（Ａｃ_６Ｃ）からなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載のペプチド又はその医薬的に許容可能な塩。
下記の群

から選択されることを特徴とする請求項２に記載のペプチド又は医薬的に許容可能な塩。
Ｘａａ^１は、フェニル基であり、
Ｘｂｂ^４は、（ｐＸ）フェニル基であって、ここで、Ｘは、Ｈ、Ｆ及びＮＯ_２からなる群から選択され、ｐは、フェニル基のフェニル環におけるパラ位を示し、
Ｘｃｃ^７は、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５Ｃ）及び２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）からなる群から選択され、
Ｘｄｄ^１１は、Ａｌａ、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）、１−アミノ−シクロペンタン−カルボン酸（Ａｃ_５Ｃ）及び２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）からなる群から選択され、
Ｘｅｅ^１４は、Ａｒｇであり、
Ｘｆｆ^１５は、Ｌｙｓであり、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２若しくはＡｓｎ−ＮＨ_２のジペプチド、又はアミノ基（−ＮＨ_２）を示すことを特徴とする請求項２に記載のペプチド又は医薬的に可能な塩。
？は、ＣＯ−ＮＨであり、
Ｘは、Ｆであり、
Ｘｃｃ^７は、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）であり、
Ｘｄｄ^１１は、Ａｌａであり、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２であることを特徴とする請求項４に記載のペプチド又は医薬的に可能な塩。
？は、ＣＨ_２−ＮＨであり、
Ｘは、Ｆであり、
Ｘｃｃ^７は、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）であり、
Ｘｄｄ^１１は、Ａｌａであり、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２であることを特徴とする請求項４に記載のペプチド又は医薬的に可能な塩。
Ｘａａ^１は、Ｎ−ベンジル−グリシン（ＮＰｈｅ）であり、
？は、ＣＯ−ＮＨであり、
Ｘｂｂ^４は、フェニル基であり、
Ｘｃｃ^７は、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）又は２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）からなる群から選択され、
Ｘｄｄ^１１は、Ａｌａ、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）又は２−アミノ−２−メチル−ブチル酸（Ｉｖａ）からなる群から選択され、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２又はアミノ基（−ＮＨ_２）であることを特徴とする請求項３に記載のペプチド又は医薬的に可能な塩。
Ｘｃｃ^７は、２−アミノ−２−メチル−プロピオン酸（Ａｉｂ）であり、
Ｘｄｄ^１１は、Ａｌａであり、
Ｒは、Ａｓｎ−Ｇｌｎ−ＮＨ_２であることを特徴とする請求項７に記載のペプチド又は医薬的に可能な塩。
請求項１乃至８のいずれか一項に記載のペプチドを有することを特徴とする組成物。
請求項１乃至８のいずれか一項に記載のペプチドを活性本体として有し、医薬的に許容可能なヒビクル及び／又は賦形剤と組み合わせたことを特徴とする医薬組成物。
経口、局所、呼吸器、直腸、髄腔、膀胱又は非経口の投与形態で投与されることを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物。
投与は、髄腔及び非経口を介することを特徴とする請求項１１に記載の医薬組成物。
神経系及び感覚神経の不全の処置又は予防に使用される医薬の調製のための、請求項１乃至８のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
高血圧、頻脈、水保持障害、低ナトリウム血症、心疾患、胃腸、呼吸器及び尿生殖路における平滑筋運動神経不全、炎症状態、末梢又は脊髄麻酔、慢性疼痛、並びに咳の減弱に対する、処置及び予防用の医薬の調製のための、請求項４乃至６のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
前記処置は、膀胱の尿失禁を含む尿生殖系の疾病、尿膀胱の活動過剰用、呼吸器不全用、又は疼痛の管理用であることを特徴とする請求項１４に記載の請求項４乃至６のいずれか一項に記載のペプチドの使用。
精神安定剤、又は不安症を処置若しくは予防する医薬の調製のための、請求項１３に記載のペプチドの使用。
記憶、気分の不全、自発運動及び摂食障害の処置、又は肥満患者の処置用の医薬の調製のための、請求項７又は８に記載のペプチドの使用。