JP2008263983A - 病原体の一次感染の検出 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】IgM抗体の検出と鑑別測定の為には、検出対象の抗体が結合しうる複数のエピトープコピーより成る有効エピトープ密度を有する多量体型試験用抗原の多重抗原を使用する。
【選択図】なし
Description
(i)少なくとも1つの多量体化ドメイン、および
(ii)病原体由来の複数コピーのエピトープセグメント、
を含む融合ポリペプチドに関する。
(i)ヘルペスウイルス、例えば、ヒト単純ヘルペスウイルス1型および2型(HHV1およびHHV2)、水痘帯状疱疹ウイルス(HHV3)、エプスタイン・バーウイルス(HHV4/EBV)、またはヒトサイトメガロウイルス(HHV5)、さらにはヒトヘルペスウイルス6型、7型、および8型;
(ii)風疹ウイルス;
(iii)肝炎ウイルス、例えば、A型肝炎ウイルス(HAV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、およびC型肝炎ウイルス(HCV);
(iv)パラミクソウイルス、例えば、麻疹ウイルスおよび流行性耳下腺炎ウイルス;
(v)トキソプラズマ属生物;ならびに
(vi)ボレリア属生物;
からなる群より選択される。
(i)上記に記載されるような宿主細胞を提供するステップ、
(ii)融合ポリペプチドが発現される条件下で該宿主細胞を培養するステップ、および
(iii)該融合ポリペプチドを単離するステップ、
を含む。
(a)上記に記載されるような少なくとも1種の融合ポリペプチドとさらなる試験用成分とを含む試験試薬と共に該サンプルをインキュベートするステップ、ならびに
(b)サンプル成分と試験試薬との反応を評価することにより該サンプル中の該抗体の存在および/または濃度を測定するステップ、
を含む。
(a)サンプルを、
(i)IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1種のレセプターR1、
(ii)鑑別検出対象のIgM抗体に特異的に結合する少なくとも1種のレセプターR2(ただし、R2は、レポーター基を担持する)、
(iii)場合により、干渉IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1種のレセプターR3、および
(iv)場合により、IgG抗体に特異的に結合するレセプターR4、
を含む試験試薬と共にインキュベートするステップ、
(b)以下の複合体:
(i)R1と鑑別検出対象のIgM抗体とR2とを含む複合体(該複合体は、レポーター基を担持する)、
(ii)場合により、R3と干渉IgM抗体とを含む複合体(それによりR2への干渉IgM抗体の干渉結合を抑制する)、
(iii)場合により、R4と干渉IgG抗体とを含む複合体(それによりR2への干渉IgG抗体の干渉結合を抑制する)、
を形成させるステップ、ならびに
(c)R2により鑑別検出対象のIgM抗体に結合されたレポーター基を該サンプル中のIgM抗体の指標として測定するステップ、
を含む。
(i)IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1種のレセプターR1と、
(ii)鑑別検出対象のIgM抗体に特異的に結合する少なくとも1種のレセプターR2(ただし、R2は、レポーター基を担持する)と、
(iii)場合により、干渉IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1種のレセプターR3と、
(iv)場合により、IgG抗体に特異的に結合するレセプターR4と、
を含む。
1. 材料および方法
1.1. 材料および試薬
塩化グアニジン(Guanidinum-Cl)(GdmCl)は、NIGU (Waldkraiburg, Germany)から購入した。Complete(登録商標)EDTAフリープロテアーゼ阻害剤錠剤、イミダゾール、およびEDTAは、Roche Diagnostics GmbH (Mannheim, Germany)製であり、他のすべての化学物質は、Merck (Darmstadt, Germany)製の分析グレード品であった。限外濾過メンブレン(YM10、YM30)は、Amicon (Danvers, MA, USA)から購入し、マイクロダイアライズメンブレン(VS/0.025μm)および限外濾過ユニット(biomax ultrafree濾過装置)は、Millipore (Bedford, MA, USA)製であった。粗製溶解物を濾過するためのセルロースニトレートメンブレンおよびセルロースアセテートメンブレン(1.2μm/0.45μm/0.2μm)は、Sartorius (Goettingen, Germany)製であった。
Skp、FkpA、およびSlyDの配列をSwissProt(UniProt)データベースから検索した(SkP:SwissProt登録番号P11457;FkpA:SwissProt登録番号P45523;SlyD:SwissProt登録番号P0A9K9)。大腸菌Skp、FkpA、およびSlyDに対する遺伝子を大腸菌株BL21(DE3)からPCRにより増幅し、制限切断し、そしてpET24a発現ベクター(Novagen, Madison, Wisconsin, USA)中にライゲーションした。ジスルフィド架橋を介する共有結合性アダクトの生成を回避するために、SlyDの高システインC末端部(166〜196)を除去し、末端切断型SlyD AA1〜165(配列番号1)を融合パートナーとして使用した。標的分子のサイトゾル内発現を確実に行うために、ペリプラズム性シャペロンFkpAおよびSkpのシグナル配列を省略した。したがって、FkpA AA26〜270(配列番号2)およびSkp AA21〜161(配列番号3)を融合ポリペプチド中のモジュールとして使用した。Scholz et al. (J. Mol. Biol. 345 (2005), 1229-1241)に記載されるように融合タンパク質用の発現カセットをデザインした。QuikChange(Stratagene, La Jolla, USA)および標準的PCR法を用いて、点突然変異、欠失・挿入変異体、または制限部位を生成させた。組換えタンパク質変異体はすべて、Ni−NTA支援精製および再折畳みを容易にするためにC末端ヘキサヒスチジンタグを含有していた。
実質的に同一のプロトコルを用いることにより、すべてのポリペプチド融合変異体を精製した。特定のpET24a発現プラスミドを保有する大腸菌BL21(DE3)細胞をLB培地+カナマイシン(30μg/ml)中37℃で1.5のOD600になるまで増殖させ、1mMのイソプロピル−β−D−チオガラクトシドを添加することによりサイトゾル内過剰発現を誘導した。誘導の3時間後、遠心分離(5000gで20分間)により細胞を回収し、−20℃で凍結保存した。細胞溶解のために、冷却された50mMリン酸ナトリウム pH8.0、7.0M GdmCl、5mMイミダゾール中に凍結ペレットを再懸濁させ、懸濁液を氷上で2時間攪拌して細胞溶解を完了させた。遠心分離および濾過(セルロースニトレートメンブレン、0.45μm/0.2μm)の後、5.0mM TCEP(トリス(2−カルボキシエチル)ホスフィン)を含む溶解バッファーで平衡化されたNi−NTAカラム上に溶解物をアプライした。後続の洗浄ステップをそれぞれの標的タンパク質に合わせて適合化し、50mMリン酸ナトリウム pH8.0、7.0M GdmCl、5.0mM TCEP中10〜25mMイミダゾール(SlyDおよびFkpA融合タンパク質)から30mMイミダゾール(Skp融合タンパク質)までの範囲内で行った。少なくとも10〜15体積の洗浄バッファーをアプライした。次に、50mMリン酸ナトリウム pH7.8、100mM NaCl、10mMイミダゾール、5.0mM TCEPでGdmCl溶液を置換し、マトリックス結合タンパク質のコンフォメーション的再折畳みを誘発した。共精製プロテアーゼの再活性化を回避するために、プロテアーゼ阻害剤カクテル(Complete(登録商標)EDTAフリー、Roche)を再折畳みバッファーに含めた。全量15〜20カラム体積の再折畳みバッファーを終夜反応に適用した。次に、3〜5カラム体積の50mMリン酸ナトリウム pH7.8、100mM NaCl、40mMイミダゾールで洗浄することにより、TCEPおよびComplete(登録商標)EDTAフリー阻害剤カクテルの両方を除去した。次に、同一のバッファー中の250mMイミダゾールにより天然タンパク質を溶出させた。Schagger and von Jagow (Anal. Biochem. 166 (1987), 368-379)に記載されるトリシン−SDS−PAGEによりタンパク質含有画分を純度に関して評価し、プールした。最後に、タンパク質をサイズ排除クロマトグラフィー(Superdex HiLoad, Amersham Pharmacia)に付し、タンパク質含有画分をプールし、Amiconセル(YM10)で濃縮した。
Skp−ppUL32−X1(配列番号4)およびSkp−ppUL32−X4(配列番号5)
これらの融合ポリペプチドは、Skp融合モジュールと、1コピー(X1)または4コピー(X4)のヒトサイトメガロウイルス(HMCV)エピトープppUL32とを含む。このエピトープは、HCMV大型構造ホスホタンパク質pp150(Uniprot ID P08318)のアミノ酸587〜640に対応する。
これらの融合ポリペプチドは、Skp融合モジュールと、1コピー(X1)または4コピー(X4)のHMCV pp150エピトープ(これはHCMV pp150のアミノ酸999〜1048に対応する)を含む。
これらの融合ポリペプチドは、Skp融合モジュールと、1コピー(X1)または4コピー(X4)のHMCV p52エピトープ(これはHCMVポリメラーゼアクセサリータンパク質p52(Uniprot ID P16790)のアミノ酸254〜293に対応する)とを含む。
Uvikon XL複光束分光光度計を用いてタンパク質の濃度測定を行った。Pace et al. (Protein Sci. 4 (1995), 2411-2423)に記載の手順を用いることにより、モル吸光係数(ε280)を測定した。
N−ヒドロキシ−スクシンイミド活性化ルテニウム標識を用いて約10mg/mlのタンパク質濃度で融合タンパク質のリシンのε−アミノ基を修飾した。それぞれの融合タンパク質に応じて、標識:タンパク質モル比を2:1から7:1まで変化させた。反応バッファーは、150mMリン酸カリウム(pH8.0)、50mM塩化カリウム、1mM EDTAであった。反応を室温で10分間行い、10mMの最終濃度になるように緩衝化L−リシンを添加することにより停止させた。標識の加水分解的不活性化を回避するために、それぞれのストック溶液を無水DMSO(seccosolvグレード, Merck, Germany)中に調製した。反応バッファー中20%までのDMSO濃度で、試験したすべての融合タンパク質の耐容性は良好であった。カップリング反応の後、粗製タンパク質コンジュゲートをゲル濾過カラム(Superdex 200 HiLoad)に通すことにより、未反応遊離標識および有機溶媒を除去した。
HMCV由来の抗原p52およびpp150に対するIgM抗体を検出するために、シャペロン融合モジュールを使用した。この抗体は、CMV感染時に多量にヒト血清中に生起される。μキャプチャー方式を用いて自動化Elecsys(登録商標)2010アナライザーにより免疫反応性を検証した(すなわち、特異的な抗IgM IgGを介して全IgM集団を捕捉し固相に固定する)。
2.1 高い発現収率
Skp、FkpA、SlyD、およびそれらの融合変異体をBL21(DE3)大腸菌株中で多量に過剰発現させた。合成速度が速いため、標的タンパク質は、大腸菌のサイトゾル内に封入体として部分的に蓄積した。マトリックス結合再折畳みは、Skp、FkpA、SlyD、およびそれらの融合変異体を非常に高い収率で再生(regeneration)するのに適した方法であることが判明した。本質的には、再生プロトコルは、SlyD融合タンパク質用に開発された方法(Scholz et al. (2005), 上掲; Scholz et al., Biochemistry 45 (2006), 20-33)に従った。結合精製・再折畳みプロトコルの後、1gの大腸菌湿潤細胞から20mg超の標的タンパク質が取得可能であった。一例として、SDS−PAGEにより実証されるSkp−p52−X4の精製を図1に示す。
CMVに対するIgM抗体を測定するための試験を開発した。この試験は、急性感染期/初期一次感染期と後期感染期または再発性感染との鑑別を可能にする。検出試薬は、三量体化ドメインSkpと4つのCMVエピトープ(UL32または150のいずれか)とをそれぞれ含む3ユニットの融合ポリペプチドをルテニウム(ビピリジン)3(BPRu)で標識化してそれぞれ含む複合体を含んでなる。したがって、検出試薬の多量体型分子は、12個のエピトープコピーを含む。試験は、干渉抑制試薬、すなわち、単量体型IgG干渉抑制試薬SlyD−X(ここで、XはUL32または150エピトープである)、二量体型または四量体型のIgM干渉抑制試薬(FkpA−X)2および(FkpA−X2)2(ここで、FkpAは二量体化ドメインであり、XはエピトープUL32またはpp150である)、ならびに三量体型または六量体型のIgM干渉抑制試薬(Skp−X)3および(Skp−X2)3(ここで、Skpは三量体化ドメインであり、XはUL32またはpp150エピトープである)の不在下または存在下で行われる。
1.1 成分
バッファーB1
変形例1:
50mM MESバッファー pH6.5、150mM NaCl;1mM EDTA、0.1%メチルイソチアゾロンおよびオキシピリドン(oxypyrione)、ポリドカノール(prolidocanol)、ならびに0.2%ウシ血清アルブミン(BSA)
1mg/Lビオチン化モノクローナルMab抗ヒトIgM
変形例2:
同変形例1+2mg/L SlyD−pp(UL32)×1および2mg/ml SlyD−pp(150)×1
変形例3:
同変形例1+2mg/L FkpA−pp(UL32)×1および2mg/ml FkpA−pp(150)×1
変形例4:
同変形例1+2mg/L Skp−pp(UL32)×1および2mg/ml Skp−pp(150)×1。
50mM MESバッファー pH6.5、150mM NaCl;1mM EDTA、0.1%メチルイソチアゾロンおよびオキシピリドン、ポリドカノール、ならびに0.2%ウシ血清アルブミン(BSA)
B2中の免疫学的成分: ルテニル化CMV抗原
40ng/ml Skp−(pp150)×4−BPRuおよび40ng/ml Skp−(UL32)×4−BPRu。
10μl希釈血清サンプル(Elecsys Diluent Universalで1:20希釈)+75μlバッファーB1。9分間のインキュベーション時間の後、75μlバッファーB2および40μlストレプトアビジンコーティングビーズを添加する。9分後、混合物を測定セルに移し、ECLシグナルを測定する。
非感染者由来、急性感染患者由来、および過去の感染患者由来の血清を記載のμキャプチャー方式に基づく免疫学的アッセイに付した。結果を表1にまとめる。第1の列(変形例1)は、いかなる干渉抑制試薬もクエンチングモジュールも不在の状態で得られたシグナルを示している。CMV陰性ヒト血清を用いた場合のカウント数は、約700程度であり、陰性血清と陽性血清とが明確に識別される。第2の列(変形例2)は、単量体型クエンチングモジュールSlyD−Xの存在下で得られたシグナルを示している。残留シグナル強度(%単位)により実証されるように、SlyD−Xのクエンチング効果は、急性血清および過去の感染血清のいずれを用いた場合にも無視しうる。これは、期待したとおりである。なぜなら、単量体としてのSlyD−Xは、多価IgM分子と効率的に相互作用できないはずであるからである。
配列番号1:SlyDのアミノ酸配列(AA 1〜165)
配列番号2:FkpAのアミノ酸配列(AA 26〜270)
配列番号3:Skpのアミノ酸配列(AA 21〜161)
配列番号4:Skp−ppUL32−X1のアミノ酸配列(ppUL32=HCMV pp150、AA 587〜640)
配列番号5:Skp−ppUL32−X4のアミノ酸配列
配列番号6:Skp−pp150−X1のアミノ酸配列(pp150=HCMV pp150、AA 999〜1048)
配列番号7:Skp−pp150−X4のアミノ酸配列
配列番号8:Skp−pp150−X1のアミノ酸配列(p52=HCMV p52、AA 254〜293)
配列番号9:Skp−p52のアミノ酸配列、AA 254〜293。
Claims (50)
- 以下のもの:
(i)少なくとも1つの多量体化ドメイン、および
(ii)病原体由来の複数コピーのエピトープセグメント
を含む、融合ポリペプチド。 - 前記多量体化ドメインが、二量体化ドメイン、三量体化ドメインまたは四量体化ドメインである、請求項1に記載のポリペプチド。
- 前記多量体化ドメインが、原核生物または真核生物シャペロン、好ましくはATP非依存性シャペロンである、請求項1または2に記載のポリペプチド。
- 前記多量体化ドメインが、大腸菌由来のFkpA、SkpおよびSecB、または他の原核生物由来のそのオルソログからなる群より選択される、請求項1〜3のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- エピトープ含有フラグメントを、少なくとも2コピー、好ましくは2〜10コピー、より好ましくは2、3、4、5または6コピー含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- エピトープセグメントの長さが、5〜120アミノ酸、好ましくは15〜50アミノ酸である、請求項1〜5のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記エピトープセグメント同士が、スペーサー配列により分離されている、請求項1〜6のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記スペーサー配列が、1〜10アミノ酸の長さを有し、かつ好ましくはグリシンおよび/またはセリン残基を含む、請求項7に記載のポリペプチド。
- 前記エピトープセグメントが、前記病原体の感染の初期または急性期に生起される抗体により特異的に認識されるエピトープ、特に該病原体の一次感染の初期または急性期に生起される抗体により特異的に認識されるエピトープを含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記エピトープセグメントが、前記病原体の感染の後期または過去の感染において生起される抗体により特異的に認識されるエピトープを含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記エピトープセグメントが、前記病原体の持続感染または再発感染において生起される抗体により特異的に認識されるエピトープを含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記エピトープ含有フラグメントが、ウイルス、細菌または寄生生物病原体に由来するものである、請求項1〜11のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- 前記病原生物が、以下のもの:
(i)ヘルペスウイルス、例えばヒト単純ヘルペスウイルス1型および2型(HHV1およびHHV2)、水痘帯状疱疹ウイルス(HHV3)、エプスタイン・バーウイルス(HHV4/EBV)またはヒトサイトメガロウイルス(HHV5)、ならびにヒトヘルペススイルス6型、7型および8型;
(ii)風疹ウイルス;
(iii)肝炎ウイルス、例えばA型肝炎ウイルス(HAV)、B型肝炎ウイルス(HBV)、C型肝炎ウイルス(HCV);
(iv)パラミクソウイルス、例えば麻疹ウイルスおよび流行性耳下腺炎ウイルス;
(v)トキソプラズマ属生物;および
(vi)ボレリア属生物
からなる群より選択される、請求項1〜12のいずれか1項に記載のポリペプチド。 - 前記病原体が、妊娠中のリスクに関連する病原体、特にヒトサイトメガロウイルス、トキソプラズマ(Toxoplasma gondii)および風疹ウイルスより選択される、請求項13に記載のポリペプチド。
- 少なくとも1つのレポーター基および/またはカップリング基を担持している、請求項1〜14のいずれか1項に記載のポリペプチド。
- ビオチンカップリング基を担持している、請求項15に記載のポリペプチド。
- 電気化学発光レポーター基、特にルテニウムレポーター基、またはハプテンレポーター基、特にジゴキシゲニンレポーター基を担持している、請求項15に記載のポリペプチド。
- 多量体として存在する、請求項1〜17のいずれか1項に記載の融合ポリペプチド。
- 請求項1〜17のいずれか1項に記載のポリペプチドをコードする核酸分子。
- 同一のエピトープセグメントをコードする前記核酸分子の一部分同士が、遺伝コードの縮重の範囲内で異なるヌクレオチド配列を有する、請求項19に記載の核酸。
- 発現制御配列と機能的に連結された、請求項19または20に記載の少なくとも1つの核酸を含む、発現ベクター。
- 請求項19もしくは20に記載の核酸分子、または請求項21に記載の発現ベクターを用いてトランスフェクトまたは形質転換されている、宿主細胞。
- 請求項1〜17のいずれか1項に記載の融合ポリペプチドの調製方法であって、以下のステップ:
(i)請求項22に記載の宿主細胞を用意するステップ;
(ii)該融合ポリペプチドが発現される条件下で該宿主細胞を培養するステップ;および
(iii)該融合ポリペプチドを回収するステップ
を含む、上記方法。 - 請求項18に記載の多量体型融合ポリペプチドの調製方法であって、複数の単量体型融合ポリペプチドを適切な条件下で組み立てて、多量体を形成させるステップを含む、上記方法。
- サンプル中の抗体の検出方法での検出試薬としての、請求項1〜18のいずれか1項に記載の融合ポリペプチドの使用。
- 前記抗体がIgM抗体である、請求項25に記載の使用。
- IgM抗体の鑑別測定(differential determination)のための、請求項26に記載の使用。
- 前記抗体が、病原体の感染の、特に一次感染の初期または急性期に生起されるIgM抗体である、請求項26または27に記載の使用。
- サンプル中の抗体の検出方法での干渉抑制試薬としての、請求項1〜18のいずれか1項に記載の融合ポリペプチドの使用。
- 前記抗体がIgG抗体である、請求項29に記載の使用。
- サンプル中の抗体を検出するための試験試薬キットであって、請求項1〜18のいずれか1項に記載の少なくとも1つの融合ポリペプチドおよびさらなる試験用構成要素を含む、上記キット。
- 前記融合ポリペプチドが検出試薬である、請求項31に記載の試験試薬。
- 前記融合ポリペプチドが干渉抑制試薬である、請求項31に記載の試験試薬。
- サンプル中の、病原体に対する抗体の検出方法であって、以下のステップ:
(i)該サンプルを、請求項1〜18のいずれか1項に記載の少なくとも1つの融合ポリペプチドおよびさらなる試験用構成成分を含む試験試薬とともにインキュベートするステップ;および
(ii)サンプル成分と該試験試薬との反応を評価することにより、該サンプル中の該抗体の存在および/または濃度を明らかにするステップ
を含む、上記方法。 - 前記試験試薬が検出試薬および少なくとも1つの干渉抑制試薬を含み;ステップ(b)が所望のサンプル成分と検出試薬との反応を測定するステップを含み、ここで、所望でないサンプル成分は、該少なくとも1つの干渉抑制試薬により捕捉される、請求項34に記載の方法。
- 検出対象の抗体が、一次感染の初期または急性期に生起されるIgM抗体であり、前記試験試薬が、レポーター基および/もしくはカップリング基を担持する請求項1〜18のいずれか1項に記載の少なくとも1つの融合ポリペプチドを含む、請求項34または35に記載の方法。
- 前記試験試薬が、IgG抗体を捕捉するための干渉抑制試薬および/または感染の後期および/もしくは再発感染において生起されるIgM抗体を捕捉するための干渉抑制試薬をさらに含む、請求項36に記載の方法。
- 前記試験試薬が、レポーター基を担持する第1の融合ポリペプチドおよび固相への固定化のためのカップリング基を担持する第2の融合ポリペプチドを含み、第1および第2の融合ポリペプチドとの複合体を形成させ、固相上で該複合体を検出することにより抗体を測定する、請求項34〜37のいずれか1項に記載の方法。
- 前記試験試薬が、固相への固定化のためのカップリング基を担持する融合ポリペプチドおよびレポーター基を担持する測定対象の抗体を認識するレセプターを含み、固相上で融合ポリペプチドとレセプターとの複合体を形成させることにより抗体を測定する、請求項34〜37のいずれか1項に記載の方法。
- 前記試験試薬が、レポーター基を担持する融合ポリペプチドおよび固相への固定化のためのカップリング基を担持する測定対象の抗体を認識するレセプターを含み、固相上で融合ポリペプチドとレセプターとの複合体を形成させることにより抗体を測定する、請求項34〜37のいずれか1項に記載の方法。
- サンプル中の、病原体に対するIgM抗体を鑑別検出するための方法であって、該サンプルは、干渉IgM抗体および/または干渉IgG抗体より選択される干渉抗体を含んでもよく、以下のステップ:
(a)サンプルを、以下のもの:
(i)IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1つのレセプターR1、
(ii)鑑別的に検出される対象のIgM抗体に特異的に結合し、レポーター基を担持する、少なくとも1つのレセプターR2、
(iii)場合により、干渉IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1つのレセプターR3、および
(iv)場合により、IgG抗体に特異的に結合するレセプターR4
を含む試験試薬とともにインキュベートするステップ、
(b)以下の複合体:
(i)R1、鑑別的に検出される対象のIgM抗体およびR2を含む複合体であって、レポーター基を担持する複合体、
(ii)場合により、R3および干渉IgM抗体を含む複合体であって、これによりR2に対する該干渉IgM抗体の干渉的結合を抑制するもの、
(iii)場合により、R4および干渉IgG抗体を含む複合体であって、これによりR2に対する該干渉IgG抗体の干渉的結合を抑制するもの
を形成させるステップ、ならびに
(c)該サンプル中の鑑別的に検出される対象のIgM抗体の指標として、R2によって該IgM抗体に結合しているレポーター基を測定するステップ
を含む、上記方法。 - レセプターR4が単量体型レセプターである、請求項41に記載の方法。
- レセプターR2とR3とが、異なる有効エピトープ密度または濃度を有する多量体型レセプターである、請求項41または42に記載の方法。
- 検出対象のIgM抗体が、感染の、好ましくは一次感染の初期もしくは急性期に生起されるIgM抗体であり、干渉IgM抗体が、感染の後期もしくは過去の感染において生起されるIgM抗体であるか、かつ/または持続感染もしくは再発感染において生起されるIgM抗体である、請求項41〜43のいずれか1項に記載の方法。
- レセプターR2が、検出対象のIgM抗体により認識される、少なくとも6エピトープコピー、好ましくは少なくとも8エピトープコピー、より好ましくは少なくとも12エピトープコピーを含む多量体型レセプターである、請求項44に記載の方法。
- レセプターR3が、レセプターR2のエピトープ密度または濃度と比較して少なくとも2分の1倍低い有効エピトープ密度または濃度を有する多量体型レセプターである、請求項44または45に記載の方法。
- レセプターR1が、固相への固定化のためのカップリング基を担持している、請求項41〜46のいずれか1項に記載の方法。
- 存在する場合、レセプターR3およびR4を、レセプターR1および/またはR2が添加される前にサンプルとともにプレインキュベートする、請求項41〜46のいずれか1項に記載の方法。
- レセプターR2が、請求項1〜18のいずれか1項に記載の融合ポリペプチドである、請求項41〜48のいずれか1項に記載の方法。
- サンプル中の、病原体に対するIgM抗体を鑑別検出するための試験試薬であって、該サンプルは、干渉IgM抗体および/または干渉IgG抗体より選択される干渉抗体を含んでもよく、以下のもの:
(i)IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1つのレセプターR1、
(ii)鑑別的に検出される対象のIgM抗体に特異的に結合し、レポーター基を担持する、少なくとも1つのレセプターR2、
(iii)場合により、干渉IgM抗体に特異的に結合する少なくとも1つのレセプターR3、および
(iv)場合により、IgG抗体に特異的に結合するレセプターR4
を含む、上記試験試薬。
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Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012005238A1 (ja) * | 2010-07-07 | 2012-01-12 | 富士レビオ株式会社 | ヒトサイトメガロウイルス感染の検出方法 |
JP2015529211A (ja) * | 2012-09-06 | 2015-10-05 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | イムノアッセイの干渉の低減、及び安定化のためのシャペロン−シャペロン融合ポリペプチド |
JP2015530369A (ja) * | 2012-07-26 | 2015-10-15 | ザ・ヘンリー・エム・ジャクソン・ファンデイション・フォー・ジ・アドヴァンスメント・オヴ・ミリタリー・メディシン、インコーポレイテッド | 多量体融合タンパク質ワクチン及び免疫療法 |
JP2017512200A (ja) * | 2014-02-28 | 2017-05-18 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | HTLVキャプシド抗原p24の可溶性かつ免疫反応性バリアント |
JP2018512863A (ja) * | 2015-04-17 | 2018-05-24 | アイジーエム バイオサイエンシズ エー/エス | 多価ヒト免疫不全ウイルス抗原結合分子およびその使用方法 |
JP2018513680A (ja) * | 2015-03-25 | 2018-05-31 | アイジーエム バイオサイエンシズ エー/エス | 多価b型肝炎ウイルス抗原結合分子およびその使用 |
JP2019512688A (ja) * | 2016-03-07 | 2019-05-16 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | 抗p53抗体の検出 |
JP2020528416A (ja) * | 2017-07-27 | 2020-09-24 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | Hcv抗原のマルチエピトープ融合タンパク質およびその使用 |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102288768A (zh) * | 2011-09-19 | 2011-12-21 | 厦门市湖里区妇幼保健院 | 弓形虫IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 |
CN102360012A (zh) * | 2011-09-19 | 2012-02-22 | 厦门大学附属中山医院 | 弓形虫IgG抗体与总抗体联合检测试剂条及其制备方法 |
CN105759030B (zh) * | 2016-03-15 | 2018-01-02 | 中国农业大学 | 一种检测弓形虫抗体的胶体金试纸条 |
WO2018055535A2 (en) | 2016-09-21 | 2018-03-29 | The Governors Of The University Of Alberta | Hepatitis c virus immunogenic compositions and methods of use thereof |
WO2019018796A1 (en) * | 2017-07-21 | 2019-01-24 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | VACCINE EPITOPES AGAINST HERPES SIMPLEX VIRUS RECOGNIZED SPECIFICALLY BY MEMORY T LYMPHOCYTES RESIDING IN FABRICS |
US20220308055A1 (en) * | 2019-08-27 | 2022-09-29 | University Of Central Florida Research Foundation, Inc. | Method and device for pathogen or antibody detection using unmodified signaling substances with or without unlabeled detection reagents |
WO2021214248A1 (en) * | 2020-04-23 | 2021-10-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Corona nucleocapsid antigen for use in antibody-immunoassays |
CN114935656A (zh) * | 2022-07-25 | 2022-08-23 | 山东康华生物医疗科技股份有限公司 | 一种优生优育十项抗体联合检测试剂盒及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006509026A (ja) * | 2002-12-10 | 2006-03-16 | ロランティス リミテッド | 安定化させた免疫原性HBcキメラ粒子 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1148578C (zh) * | 1994-07-25 | 2004-05-05 | 罗切诊断学有限公司 | 免疫测定特异抗体的方法、所用试剂、抗原及其用途 |
DE19649390A1 (de) | 1996-11-29 | 1998-06-04 | Boehringer Mannheim Gmbh | Antigenspezifischer IgG-Nachweis |
DE19649389A1 (de) | 1996-11-29 | 1998-06-04 | Boehringer Mannheim Gmbh | Antigenspezifischer IgM-Nachweis |
US5989868A (en) | 1997-09-12 | 1999-11-23 | The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma | Fusion protein systems designed to increase soluble cytoplasmic expression of heterologous proteins in esherichia coli |
DE19919121B4 (de) * | 1999-04-27 | 2012-08-02 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Multimeres CMV-Antigen |
US6838553B1 (en) * | 1999-10-05 | 2005-01-04 | Academia Sinica | Peptide repeat immunogens |
DK1402015T3 (da) | 2001-06-22 | 2011-12-05 | Hoffmann La Roche | Opløseligt kompleks omfattende et retroviralt overfladeglycoprotein og FkpA eller SlyD |
AU2002361682A1 (en) * | 2001-12-14 | 2003-06-30 | Elizabeth Kopp | Innate immune system-directed vaccines |
EP1522585A1 (en) | 2003-10-09 | 2005-04-13 | Plant Research International B.V. | Chimeric carrier molecules for the production of mucosal vaccines |
WO2006078273A2 (en) * | 2004-04-26 | 2006-07-27 | The United States Of America As Represented By Teh Secretary Of Health And Human Services, Nih | Methods and compositions for producing recombinant proteins |
EP1780282B1 (en) * | 2005-10-26 | 2010-12-08 | Roche Diagnostics GmbH | Recombinant expression of Rubella E1 envelope protein variants as chaperone fusion-proteins, and their use in the detection of anti-Rubella antibodies |
-
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Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006509026A (ja) * | 2002-12-10 | 2006-03-16 | ロランティス リミテッド | 安定化させた免疫原性HBcキメラ粒子 |
Cited By (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012018051A (ja) * | 2010-07-07 | 2012-01-26 | Fujirebio Inc | ヒトサイトメガロウイルス感染の検出方法 |
WO2012005238A1 (ja) * | 2010-07-07 | 2012-01-12 | 富士レビオ株式会社 | ヒトサイトメガロウイルス感染の検出方法 |
JP2018138581A (ja) * | 2012-07-26 | 2018-09-06 | ザ・ヘンリー・エム・ジャクソン・ファンデイション・フォー・ジ・アドヴァンスメント・オヴ・ミリタリー・メディシン、インコーポレイテッド | 多量体融合タンパク質ワクチン及び免疫療法 |
JP2015530369A (ja) * | 2012-07-26 | 2015-10-15 | ザ・ヘンリー・エム・ジャクソン・ファンデイション・フォー・ジ・アドヴァンスメント・オヴ・ミリタリー・メディシン、インコーポレイテッド | 多量体融合タンパク質ワクチン及び免疫療法 |
US9962436B2 (en) | 2012-07-26 | 2018-05-08 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Multimeric fusion protein vaccine and immunotherapeutic |
US10821173B2 (en) | 2012-07-26 | 2020-11-03 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Multimeric fusion protein vaccine and immunotherapeutic |
JP2015529211A (ja) * | 2012-09-06 | 2015-10-05 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | イムノアッセイの干渉の低減、及び安定化のためのシャペロン−シャペロン融合ポリペプチド |
JP2017512200A (ja) * | 2014-02-28 | 2017-05-18 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | HTLVキャプシド抗原p24の可溶性かつ免疫反応性バリアント |
JP2018513680A (ja) * | 2015-03-25 | 2018-05-31 | アイジーエム バイオサイエンシズ エー/エス | 多価b型肝炎ウイルス抗原結合分子およびその使用 |
JP2018512863A (ja) * | 2015-04-17 | 2018-05-24 | アイジーエム バイオサイエンシズ エー/エス | 多価ヒト免疫不全ウイルス抗原結合分子およびその使用方法 |
US11192941B2 (en) | 2015-04-17 | 2021-12-07 | Igm Biosciences, Inc. | Multi-valent human immunodeficiency virus antigen binding molecules and uses thereof |
JP2019512688A (ja) * | 2016-03-07 | 2019-05-16 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | 抗p53抗体の検出 |
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