JP2008133301A - 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 - Google Patents
免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008133301A JP2008133301A JP2008038799A JP2008038799A JP2008133301A JP 2008133301 A JP2008133301 A JP 2008133301A JP 2008038799 A JP2008038799 A JP 2008038799A JP 2008038799 A JP2008038799 A JP 2008038799A JP 2008133301 A JP2008133301 A JP 2008133301A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hcv
- amino acid
- sequence
- sequences
- polypeptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title abstract description 174
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title abstract description 124
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title abstract description 109
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 91
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 title abstract description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 64
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 45
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 28
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 abstract description 2
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 abstract description 2
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 102
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 94
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 63
- 238000000034 method Methods 0.000 description 51
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 47
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 37
- 101710158312 DNA-binding protein HU-beta Proteins 0.000 description 31
- 101710128560 Initiator protein NS1 Proteins 0.000 description 31
- 101710144127 Non-structural protein 1 Proteins 0.000 description 31
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 27
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 27
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 27
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 25
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 24
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 23
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 20
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 19
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 18
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 18
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 18
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 18
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 17
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 16
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 14
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 14
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 14
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 12
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 12
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 10
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 10
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 8
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 8
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 8
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 7
- -1 serum Substances 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 6
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 6
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 6
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 6
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 6
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 6
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 5
- 206010019786 Hepatitis non-A non-B Diseases 0.000 description 5
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 5
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 5
- 241000710778 Pestivirus Species 0.000 description 5
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 5
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 5
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 5
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 5
- JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N mifamurtide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OCCNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1NC(C)=O JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N 0.000 description 5
- 229960005225 mifamurtide Drugs 0.000 description 5
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101710118188 DNA-binding protein HU-alpha Proteins 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 4
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 4
- 101710144128 Non-structural protein 2 Proteins 0.000 description 4
- 101710199667 Nuclear export protein Proteins 0.000 description 4
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 4
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 4
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 4
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012317 liver biopsy Methods 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 4
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 101150082674 E2 gene Proteins 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 3
- 101150033828 NS1 gene Proteins 0.000 description 3
- 101710144121 Non-structural protein 5 Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 3
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N almurtide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CO[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N 0.000 description 3
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 3
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- QMXCRMQIVATQMR-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-pyridin-2-ylsulfanylpropanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSC1=CC=CC=N1 QMXCRMQIVATQMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 241000701822 Bovine papillomavirus Species 0.000 description 2
- 241000710780 Bovine viral diarrhea virus 1 Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 2
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 2
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 2
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710159910 Movement protein Proteins 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 108700015872 N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101710144111 Non-structural protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 101710144117 Non-structural protein 4 Proteins 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 2
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 2
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M rubidium chloride Chemical compound [Cl-].[Rb+] FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940074404 sodium succinate Drugs 0.000 description 2
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical compound O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N (4R)-4-[[(2S,3R)-2-[acetyl-[(3R,4R,5S,6R)-3-amino-4-[(1R)-1-carboxyethoxy]-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound C(C)(=O)N([C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](CCC(=O)O)C(N)=O)C1[C@H](N)[C@@H](O[C@@H](C(=O)O)C)[C@H](O)[C@H](O1)CO YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQILVUYCDHSGEU-UHFFFAOYSA-N 4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound C1CC(C(=O)O)CCC1CN1C(=O)C=CC1=O LQILVUYCDHSGEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOJKKJKETHYEAC-UHFFFAOYSA-N 6-Maleimidocaproic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O WOJKKJKETHYEAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102100034044 All-trans-retinol dehydrogenase [NAD(+)] ADH1B Human genes 0.000 description 1
- 101710193111 All-trans-retinol dehydrogenase [NAD(+)] ADH4 Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100163849 Arabidopsis thaliana ARS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010002913 Asialoglycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 238000000035 BCA protein assay Methods 0.000 description 1
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100033620 Calponin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 241000222128 Candida maltosa Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 108010039939 Cell Wall Skeleton Proteins 0.000 description 1
- 102100037633 Centrin-3 Human genes 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241001227713 Chiron Species 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 241000744472 Cinna Species 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000725619 Dengue virus Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101150029662 E1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000984570 Enterobacteria phage T4 Baseplate wedge protein gp53 Proteins 0.000 description 1
- 101800001467 Envelope glycoprotein E2 Proteins 0.000 description 1
- 101000997743 Escherichia phage Mu Serine recombinase gin Proteins 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 108700004715 Flavivirus NS1 Proteins 0.000 description 1
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101150038242 GAL10 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100024637 Galectin-10 Human genes 0.000 description 1
- 102100039556 Galectin-4 Human genes 0.000 description 1
- 206010060891 General symptom Diseases 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000030595 Glucokinase Human genes 0.000 description 1
- 108010021582 Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010070600 Glucose-6-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- 102100031132 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 1
- 101710170453 Glycoprotein 55 Proteins 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102100031547 HLA class II histocompatibility antigen, DO alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 108700008783 Hepatitis C virus E1 Proteins 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000945318 Homo sapiens Calponin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000880522 Homo sapiens Centrin-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000608765 Homo sapiens Galectin-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000866278 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DO alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 1
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699673 Mesocricetus auratus Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 108700020354 N-acetylmuramyl-threonyl-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 238000009004 PCR Kit Methods 0.000 description 1
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 1
- 108010087702 Penicillinase Proteins 0.000 description 1
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000001105 Phosphofructokinases Human genes 0.000 description 1
- 108010069341 Phosphofructokinases Proteins 0.000 description 1
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 241000282405 Pongo abelii Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 101710185720 Putative ethidium bromide resistance protein Proteins 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- WINXNKPZLFISPD-UHFFFAOYSA-M Saccharin sodium Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(=O)[N-]S(=O)(=O)C2=C1 WINXNKPZLFISPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000003534 Saccharomyces carlsbergensis Nutrition 0.000 description 1
- 241001123227 Saccharomyces pastorianus Species 0.000 description 1
- 101100097319 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) ala1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 206010042566 Superinfection Diseases 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 1
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108700010756 Viral Polyproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- 241000710772 Yellow fever virus Species 0.000 description 1
- CUTSCJHLMGPBEJ-UHFFFAOYSA-N [N].CN(C)C=O Chemical compound [N].CN(C)C=O CUTSCJHLMGPBEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 229940024142 alpha 1-antitrypsin Drugs 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000010310 bacterial transformation Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- KDPAWGWELVVRCH-UHFFFAOYSA-N bromoacetic acid Chemical compound OC(=O)CBr KDPAWGWELVVRCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- PPBOKXIGFIBOGK-BDTUAEFFSA-N bvdv Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CN=CN1 PPBOKXIGFIBOGK-BDTUAEFFSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 210000004520 cell wall skeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 231100000749 chronicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000012864 cross contamination Methods 0.000 description 1
- NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCC1 NZNMSOFKMUBTKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N diethyl pyrocarbonate Chemical compound CCOC(=O)OC(=O)OCC FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000003631 expected effect Effects 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 229960004887 ferric hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N glycerol 1-phosphate Chemical compound OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N guanidinium thiocyanate Chemical compound SC#N.NC(N)=N ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000055277 human IL2 Human genes 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical group 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000012966 insertion method Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 239000000138 intercalating agent Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N iodoacetic acid Chemical compound OC(=O)CI JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEECXTSVVFWGSE-UHFFFAOYSA-M iron(3+);oxygen(2-);hydroxide Chemical compound [OH-].[O-2].[Fe+3] IEECXTSVVFWGSE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 108700007621 mifamurtide Proteins 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000004942 nuclear accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 208000014451 palmoplantar keratoderma and congenital alopecia 2 Diseases 0.000 description 1
- 229950009506 penicillinase Drugs 0.000 description 1
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009465 prokaryotic expression Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- VMXUWOKSQNHOCA-UKTHLTGXSA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)\C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-UKTHLTGXSA-N 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229940102127 rubidium chloride Drugs 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940080237 sodium caseinate Drugs 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000008299 viral mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940051021 yellow-fever virus Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24211—Hepacivirus, e.g. hepatitis C virus, hepatitis G virus
- C12N2770/24222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/82—Hepatitis associated antigens and antibodies
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/82—Proteins from microorganisms
- Y10S530/826—Viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
【解決手段】少なくとも2つのC型肝炎ウイルス(HCV)アミノ酸配列を含む免疫反応性ポリペプチド組成物であって、各アミノ酸配列が、HCVエンベロープポリペプチドの可変ドメイン中に存在する少なくとも1つのエピトープを含有し、ここで、該可変ドメインのアミノ酸配列が互いに異質性であり、別個のHCV単離体由来であり、そして各アミノ酸配列は全長のエンベロープタンパク質より長くない、組成物。
【選択図】なし
Description
とを示す。その証拠となる数種の系は、HCVがフラビウイルスおよびペスチウイルスを包含するフラビウイルス(Flaviviridae)科のウイルスと同様の遺伝子構成を有することを示唆する。そのペスチウイルスおよびフラビウイルスの系統と同様に、HCVは、個々のウイルスのタンパク質(構造および非構造の両者)がプロセッシングによって生じる、大きなポリタンパク質前駆体をコードすると考えられる。
「HCV−1」:Chooら(1990)Brit.Med.Bull.46:423−441;Chooら(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:2451−2455;Hanら(1991)Proc.Natl.Acad.Sci
.USA 88:1711−1715;European Patent Publication No.318,216。
ine、Kanazawa Medical University、Japan。
Rr−(SVn)X−R’r'
ここで、
RおよびR’は、約1−2000個のアミノ酸からなるアミノ酸配列であり、そしてそれらは同一であるかまたは異なり;
rおよびr’は、0または1であり、そしてそれらは同一であるかまたは異なり;Vは、
HCV可変ドメインの配列を含有するアミノ酸配列であって、ここで、該可変ドメインは、少なくとも1個のエピトープを含有し;
Sは、1以上の整数であり、選択された可変ドメインを表し;そして
nは、1以上の整数であり、異なるnの値を有する少なくとも1種の他の単離体に関して、所定のSVで選択された異質性HCV単離体を表し、そしてnは各xに対して独立して選択され;
xは、1以上の整数であり;そして
ただし、アミノ酸配列は、(i)1V1および1V2、(ii)1V1および2V2、および(iii)1Vlおよび2Vlからなる群から選択される組合せを表す組成物中に存在する。
(a)上記免疫反応性組成物を提供すること;
(b)適切な賦形剤を提供すること;および
(c)哺乳動物へ投与することにより免疫原性の応答を提供する割合で、(a)の免疫反応性組成物と(b)の賦形剤とを混合すること。
(a)HCVに対する抗体を含有すると推測される生物学的試料を提供すること;
(b)上記免疫反応性組成物を提供すること;
(c)抗原−抗体複合体が形成されるような条件下で、(a)の生物学的試料と(b)の免疫反応性組成物とを反応させること;および
(d)必要に応じて、(a)の免疫反応性組成物と(b)の生物学的試料の抗体との間で形成される抗原−抗体複合体の形成を検出すること。
CELLS AND ENZYMES(IRL Press,1986);B.Perbal,A PRACTICAL GUIDE TO MOLECULAR CLONING(1984);METHODS IN ENZYMOLOGYのシリーズ(Academic Press,Inc.);GENE TRANSFER VECTORS FOR MAMMALIAN CELLS(J.H.MillerおよびM.P.Calos編,1987,Cold Spring Harbor Laboratory);Methods in Enzymology Vol.154およびVo1.155(それぞれ、WuおよびGrossman、およびWu編)、MayerおよびWalker編(1987);IMMUNOCHEMICAL METHODS IN CELL AND MOLECULAR BIOLOGY(Academic Press,London)、Scopes(1987);PROTEIN PURIFICATION: PRINCIPLES AND PRACTICE,Second Edition(Springer−Verlag,N.Y.)、およびHANDBOOK OF EXPERIMENTAL IMMUNOLOGY,I〜IV巻(D.M.WeirおよびC.C.Blackwell編,1986);IMMUNOASSAY:A PRACTICAL GUIDE(D.W.Chan編,1987)。本明細書中で述べられる前述および後述の全ての特許、特許出願および刊行物は、本明細書中に参考として援用されている。
よびII群のウイルス単離体配列の間で高度に保存されているヌクレオキャプシドタンパク質である。(表3では、記号N/Aは、比較により得られなかった配列を示す。)従って、本発明のためには、I群の単離体は、本明細書中でI群として分類される単離体に対して、アミノ酸レベルで約90%またはそれ以上の相同性であるそれらのウイルスタンパク質、特に、E1およびE2/NS1タンパク質を有する単離体として定義され得る。II群は類似の方法で定義される。それ以上の群については、同様に、始原型単離体に対してウイルスタンパク質の相同性によって定義され得る。下位群はまた、所定のタンパク質、例えば、E1、E2/NS1またはNS2タンパク質における相同性により、または単により高い相同性レベルにより定義され得る。
キル化剤を含むもの、修飾された結合(例えば、アルファアノマー核酸など)を有するもの、ならびに未修飾形態のポリヌクレオチドが含まれる。
物」である。
官と腸管と尿生殖器管の外側部分、涙、唾液、乳、血液細胞、腫瘍、器官、バイオプシー、およびさらに、インビトロでの細胞培養構成物(これには細胞培養培地で細胞を増殖させて得られる馴化培地、例えば、Mab産生ミエローマ細胞、組換え細胞、および細胞成分を包含するが、それに限定されない)の試料を包含するが、それに限定されない。
Ly−Z−L’y' (I)
Zは、選択されたHCV単離体由来のタンパク質の領域由来のアミノ酸配列を表す。ここで、この領域は、少なくとも1個の可変ドメインを含み、そしてこの可変ドメインは、少なくとも1個のエピトープを含む。LおよびL’は、非HCVアミノ酸配列であるかまたは可変ドメインを含まないHCVアミノ酸配列であり、ここで、LおよびL’は、同一または異なり得る。yおよびy’は、0または1であり、これらは同一または異なり得る。従って、式1は、HCV VDの配列を含むアミノ酸配列を表し、ここで、VDは、エピトープを含む。
Zの可変ドメインは、存在するエピトープの配列を組み合わせたサイズと少なくとも同程度のサイズである。従って、このドメインに、ただ1つのエピトープが存在するならば、このドメインは、典型的には最小約5個のアミノ酸で作られる。エピトープが部分的に重複するとき、この可変ドメインにおける組み合わされたエピトープの最小アミノ酸配列は、その個々のエピトープの配列の合計より小さい。
アミノ酸である。
Ly−Z1−L’y ' (II)
Ly−Z2−L’y ' (III)
L、L’、yおよびy’は上記のように定義され、そしてそれらは独立して式IIおよびIIIの各々に対してもまた定義される。ZlおよびZ2は、各々、上記でZについて定義されたようなHCVアミノ酸配列であり、同一の可変ドメイン(すなわち、物理的な場所)を含むが、Z1およびZ2の共通の可変ドメインにおいて少なくとも1種の異質性エピトープをそれらの間に有する異なるHCV単離体から誘導される。例示的な実施例として、式IIに従ったアミノ酸配列は、Zlとして、単離体HCV−1のアミノ酸384−41
4位(またはさらに特定すると396−407位または396−408位のアミノ酸)にわたる超可変ドメインのフラグメントを有し、一方、Z2は、単離体HCV−J1.1由
来の類似のフラグメントである。これらの2種の単離体は、このドメインにおいて異質性であり、これらのエピトープのアミノ酸配列は、有意に変化する。
SVn (IV)
Vは、HCV可変ドメインの配列を含むアミノ酸配列を表し、ここで、この可変ドメインは、少なくとも1種のエピトープ;すなわち、式1を含む。Sおよびnは、1またはそれ以上の整数である。Sは特定の可変ドメインを表し、そしてnは特定の単離体を表す。例えば、S=1はアミノ酸384−411位における可変ドメインを表し得;S=2はアミノ酸215−255位における可変ドメインを表し得;そしてn=1、2、3および4は、それぞれ、単離体HCV−1、HCV−J1.1、HC−J1およびHC−J4を表し
得る。従って、上記の2つの群の配列は以下のように表され得る:
群1:1V1、1V2、1V3および1V4
群2:2V1、2V2、2V3および2V4 本発明に記載の組成物には、式IVの少なくとも2種の別個の配列がある。すなわち、この組成物は、式IVに従う2種の異なる配列を含有し、ここでSおよびまたはnの値は異なる。例えば、少なくとも1V1お
よび1V2が存在し、または少なくとも1Vlおよび
2V2が存在し、または少なくとも1Vlおよび2V1が存在する。
プチド分子のいずれかにおける組成物中に存在する。1V1および1V2の最小の組み合わせを用いて、これらの2種の配列は、同一のポリペプチド分子(例えば、1Vl−1V2)または分離した分子中に存在し得る。本発明の組成物のこの特徴は、以下のようなポリペプチドの組成物として記載され得る:
Rr−(SVn)x−R’r ' (V)
ここで、S、Vおよびnは、上記で定義のとおりであり;RおよびR’は、約1−2000個のアミノ酸のアミノ酸配列であり、そして同一または異なり;rおよびr’は、0または1であり、そして同一または異なり;xは、1以上の整数であり;nは、各xに対して独立して選択され;ただし、これらのアミノ酸配列は、(i)1V1および1V2、(ii)1v1および2V2、および(iii)1V1および2V1からなる群より選択される組み合わせを表す組成物中に存在する。式IVの別個の配列が異なるポリペプチド内にある実施態様においては、xは1であり得るが、所望であるなら1をさらに越え得る;例えば、ポリペプチド1V1−1V2と1Vl−2V2との混合物。xが1であるとき、rおよびr’は好ましくは共に0であり、LyおよびL’y'の重複を避ける。これは、Vが式Iによる好ましい実施態様によって記載され得るからである。xが1より大きいとき、Rとその隣接するLとを組み合わせた長さ、およびR’とその隣接するL’とを組み合わせた長さは、好ましくは、LおよびL’に関して上記の典型的な最大長より長くはない。
で同定されるエピトープの遺伝子座は、種々の単離体の異質性およびスクローニングされた対応の異質性配列の免疫学的な性質について試験され得る。
号に記載の抗原である。この出願のタイトルは、Robert O.Ralston,Frank Marcus,Kent B.Thudium,Barbara GervaseおよびJohn Hallにより、「C型肝炎ウイルスアシアロ糖タンパク質」(アトーニィドケット番号0154.002)であって、本願と共に同日で出願しており、本明細書中に参考として援用されている。
SSAY:A PRACTICAL GUIDE、上記を参照のこと。あるいは、本発明のポリペプチド組成物を作り出す実質的に同一の各ポリペプチドを別個の遺伝子座で同一の支持体上に固定し得、それにより抗体が産生される単離体または群についての情報が提供される。このことは、種々の単離体が、肝炎、癌、または種々の臨床予後を必要とする他の疾患を引き起こすならば、診断に特に重要である。好ましい形式は、Chiron RIBATMストリップイムノアッセイ形式であり、これは、同一人の所有する米国特許出願第07/138,894号および米国特許出願第07/456,637号に記載されており、その開示内容は本明細書中に参考として援用されている。
,149号;米国特許第4,629,783号を参照のこと。これらの開示内容は、本明細
書中に参考として援用されている。
Res.8:4057)、およびλ由来PLプロモーター系およびN遺伝子リボゾーム
結合部位(Shimatakeら、(1981)Nature 292:128)であり得る。さらに、天然に存在しない合成プロモーターもまた、細菌プロモーターとして機能する。例えば、1つのプロモーターの転写活性化配列は、他のプロモーターのオペロン配列に結合して、合成ハイブリッドプロモーターを形成し得る(例えば、tacプロモーター(これは、trpおよびlacプロモーターの配列由来である)(De Boerら、(1983)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 80:21)。上記の系は、特にE.coliに適合し得る;所望であれば、他の原核宿主(例えば、バチリス属(Bacillus)またはシュードモナス属(Pseudomonas)の株が、対応する制御配列で用いられ得る。
リメラーゼに結合する能力を有する、酵母以外の起源の天然に存在するプロモーターを包含する。
−因子遺伝子(米国特許第4,588,684号))に由来し得る。あるいは、非酵母起源のリーダー(例えば、インターフェロンリーダー)もまた、酵母における分泌を提供する(欧州公開公報第60057号)。分泌リーダーの好ましいクラスは、酵母α−因子遺伝子のフラグメントを使用し、このフラグメントは、「プレ」シグナル配列と「プロ」領域との両方を含んでいる。用いられ得るα−因子フラグメントのタイプは、完全長プレ−プロα−因子リーダー、および不完全α−因子リーダー(米国特許第4,546,083号および第4,870,008号;欧州公開公報第324274号)を包含する。分泌を提供するα−因子リーダーフラグメントを用いる別のリーダーは、第2の酵母α−因子由来のプロ−領域ではなく、第1の酵母のプレ配列で作られたハイブリッドα−因子リーダーを包含する(例えば、PCT WO89/02463を参照のこと)。
中への組込みを確実にする配列を含み得る。
、ヒトインターロイキン2シグナル(IL2)は、細胞が認識されると外部へ輸送するシグナルとなり、完全に除去される。
149号に記載のロタウイルス/「結合ペプチド」システムが用いられる。上記の列挙は、それがすべてであるわけではなく、列挙された化合物の改変物もまた、明らかに使用され得る。
列を含むハイブリッドは、欧州公開公報第175,261号に開示されている。これらの
構築物は、SV40−ジヒドロ葉酸還元酵素ベクターを用いて、CHO細胞のような哺乳動物細胞中でも発現され得る(Michelleら(1984))。
ある。他の投与形態に適したさらなる処方物には、坐剤があり、場合によっては経口処方物を含む。坐剤には、従来のバインダーおよび担体は、例えば、ポリアルキレングリコールまたはトリグリセリドを含み得る;このような坐剤は、活性成分を含む混合物から0.
5%〜10%、好適には1%〜2%の範囲で形成され得る。経口処方物には、通常用いられる賦形剤が含まれており、この賦形剤には、例えば、薬学的なグレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどがある。これらの組成物は溶液、懸濁液、錠剤、丸剤、カプセル、徐放性処方物または粉末の形態をとり、そして10%〜95%の、好適には25%〜70%の活性成分を含む。
れる残りの試薬および材料(例えば、適当な緩衝液、塩類溶液など)および適当なアッセイの説明書のセットと共に、適当な容器中にパッケージすることで構成される。
無症候性のHCV保菌者であるHCT18およびHCVJ1、および慢性的に感染しているHCV被験体のThは、Weinerら(1991)Virol.180:842−848中に、以前に記載されている。被験体Qは、肝臓バイオプシーに基づいて、慢性活性肝炎であると診断され、6ヶ月間、アルファ−2bインターフェロン治療を施された(毎週3回、3百万単位)。製造者により示されるように10μg/mlのMS2保菌者RNA(Boehringer Mannheim,165−948)を含むRNAzolTMB試薬(Cinna/Biotecx Laboratories)を用いてChomcynskiおよびSacchi(1987)Anal.Biochem.162:156−159の方法に従い、RNAを血漿0.2mlから抽出した。RNAを、蒸留水で処
理したジエチルピロカーボネート200μl中に再懸濁し、そして、最終濃度0.2Mの
酢酸ナトリウムおよび2.5倍容量の100%エタノール(−20℃)中で再沈澱させた
。
すべての反応を、Weinerら(1990)Lancet 335:1−5に従い実施した。M13配列決定は、Messingら(1983)Methods in Enzymology 101:20−37に従い実施した。少なくとも4つのクローン化挿入フラグメントの共通配列が、2つのクローン由来のHCV J1.2 E2/NS1配列を除いて与えられた。
HCVの3つの株の超可変領域に対する重複オクタペプチド(8ペプチド)を、切断可能なリンカー上で合成し、誘導し、ポリエチレンのピンを、本質的にMaejiら(19
90)J.Immunol.Methods 134:23−33による記載のように、各ペプチドのN−末端にカップリングした。最後に、40mMのビオチン、40mMの1−ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)、40mMのべンゾトリアゾール−1−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP,NOVABIOCHEM)および60mMのN−メチルモルホリン(NMM)を含む150μlのジメチルホルムアミド溶液を用いて一晩20℃で反応させ、ビオチンをN−末端にカップリングした。
ポリスチレンプレート(Nunc immuno plate maxisorb F96)を、一晩4℃で、0.1ml/ウェルの5μg/m1ストレプトアビジン(Sig
ma カタログ番号S4762)溶液と共に、pH9.6の0.1M炭酸緩衝液中でインキュベートすることにより、ストレプトアビジンでコートした。ストレプトアビジン溶液除去の後、ウェルを、PBS中のTween20の0.1%溶液で4回洗浄した。PBS中
で、0.2mlの2%BSAと共に1時間20℃で、各ウェルをインキュベートすること
により、非特異的結合を遮断した。ウェルを、再びPBS/Tween20で4回洗浄した。プレートを風乾し、要求されるまで、4℃で貯蔵した。各ウェル中のストレプトアビジンを、0.1%のアジ化ナトリウムを含むPBS中に0.1%のBSAを伴う切断ペプチド溶液の1:100希釈液100μlと、20℃で1時間のインキュベートすることにより、切断されたペプチドにカップリングした。インキュベーションの後、プレートをPBS/Tween 20で4回洗浄した。各ウェルを、血清の適切な希釈液(0.1%のア
ジ化ナトリウムを含むPBS中の2%BSAで希釈)100μlと共に、20℃で1時間または4℃で一晩インキュベートした後、PBS/Tween 20で4回洗浄した。結合した抗体を、コンジュゲート0.1ml中で、20℃で1時間反応させることにより検
出した。これは、CASS(0.1MのPBS中に希釈した0.1%ヒツジ血清、0.1%
Tween 20、0.1%ナトリウムカゼイネート、pH7.2)中の西洋ワサビペルオキシダーゼ標識ヤギ抗ウサギIgG(H+L)(Kirke gaard and Perry Labs,Gaithersburg,MD)0.25ml/l(飽和レベル)
から構成されていた。ウェルを、PBS/Tween 20で2回洗浄し、引続きPBSだけで2回洗浄した。酵素の存在は、100mlの0.1Mリン酸/0.08Mクエン酸緩衝液、pH4.0中に50mgのアンモニウム2,2’−アジノ−ビス[3−エチルベンゾチアゾリン−6−スルホネート(ABTS,Boehringer Mannheim カタログ番号122661)および0.03mlの35%(w/w)過酸化水素溶液を含
む0.1mlの新たに調製された溶液と、20℃で45分間反応させることにより検出し
た。発色を、Titertek Multiscan MCプレートリーダー中で、492nmの対照波長に対して405nmのデュアル波長モードで測定した。
HCV E2/NS1タンパク質およびHIV−1 gp120超可変領域V3(aa303−338)に対する抗原性プロフィールを、Kabat[免疫学的に重要なタンパク質の配列、米国厚生省(U.S.Department of Health and
Human Services)、公共保健サービス(Public Health Service)、国立衛生研究所(1983)]により最初に提案されたようにして、配列変異の程度に基づいて、コンピュータープログラムから誘導した。この抗原性プロフィールを用いて、各々の可能な対をなすアミノ酸に対して抗体結合が保持される個々の確率の平均を乗じて免疫グロブリンの超可変ループを同定した。与えられたアミノ酸の変化
に関連する抗体結合の保持の確率は、103個の特徴化された線形エピトープに対するすべての可能なアミノ酸置換基の抗体結合における効果を評価することにより、実験的に決定される値であった。Geysenら(1988)J.Mol.Rec.1:32−41。このようにして、このアルゴリズムは、変異指数に加重価を与え、抗体の結合に大きな影響があると考えられるアミノ酸の変化により重みを与えた。すなわち、保存的なアミノ酸の変化に対して補正を行った。15のHCV配列[HCV−1,Q3.2,HCT23,EC10,HC−J1,HCVE1,TH,HCT27,Q1.2,HCT18,HC−J4,HCV J1.2/HCV J1.1,HCV J,HCV BK]をHCVに対する抗原性プロフィールの測定に用いた。HIV−1 V3プロフィールを、ユニークHIV−1配列のより多数のデータベースからランダムに選択した15配列の242の個プロフィールを平均することで得た。LaRosaら(1990)Science 249:932−935およびCorrection in Science(1991)811頁。これらの単離体のいくつかのaa384と420との間のアミノ酸配列を図4〜6に示す。
アミノ末端領域(384−420)がαヘリックス、βシート、βターン2次構造を含む確率は、3つの上記2次構造特徴のそれぞれに対する確率を、各残基に割り当てるアルゴリズムを用いて決定し得る。アルゴリズムに用いられる係数は、構造データベースの残基のすべての対合様式の組合せに対して得られた。LevittおよびGreer(1977)J.Mol.Biol.114:181−293。これらの係数から得られた予想パラメーターは、与えられた残基が3つの定義された2次構造特徴の1つに見出される確率を得るためにアルゴリズムをデータベースに適応し直して、観察結果と合致させた。
(HCV E2/NS1 HVおよびHIV−1 gp120ドメインの2次構造およびアミノ酸配列変異の比較)
15のHCVおよびHIV−1単離体由来のアミノ酸配列を、HCV E2 HVドメインまたはHIV−1 gp120 V3ドメイン中でアミノ酸配列の異質性が観察された位置の数について比較した(それぞれ、図7、AおよびB)。アミノ酸の異質性は、E2 HV領域では30のアミノ酸位置のうち25の位置、そして、HIV−1 gp120 V3ドメインでは35のアミノ酸位置のうち23の位置で生じていた。図7AおよびBのx軸上のダッシュは、可変アミノ酸残基が生じるアミノ酸位置を表し、そして、非変異アミノ酸は1文字のアミノ酸コードで示している。図7中に示された抗原性プロフィールにより、HIV−1 GP120タンパク質のV3ループ(図7B)と同様に、HCV
E2中の1ブロックのアミノ酸残基(図7A中のアミノ酸384−414)において、その変異は抗体結合における予想通りの逆の効果を有することが認められたことが示される。図7中のデータにより、HCV E2ドメインは、ウイルス中和エピトープをコードすることで知られるHIV−1 gp120 V3ドメインと、観察されたアミノ酸変異の程度および期待重みの両方において類似することが示され、E2 HVドメインは、gp120 V3ドメインと同様の機能を有し得ることが示唆される。
HVアミノ酸配列についての定義された2次構造特徴に関連する確率を予測した。図7から、E2アミノ末端残基384と、非常に期待され顕著に保存されたβターン(残基415−418)との間の領域は、αヘリックス、βシート、βターンの確率が50%以下であることから示されるように、比較的構造化されていないことが示される。E2 HVドメイン中の期待構造の欠如は、単離体間でみられる広範囲の配列変異に対する許容性と
一致し、タンパク質の3次元的折り畳みに寄与する顕著に構造化された領域と対照的である。V3は、HIV−1 gp120の主要中和ドメインであり、β鎖−II型βターン−β鎖−αヘリックス特徴を含むことが報告されており、アミノ酸の変異において、HCV E2HVドメインよりも強い構造的制限を有し得る。HCV E2 HVドメインは、このV3よりも構造化されていないようにさえ見える。まとめると、この事実は、E2
HVドメインが、線形中和エピトープと考えられる部位を含むタンパク質ドメインに特徴的な特性を有するように思われることを示唆する。
(HCV E2/NS1 HVドメインのエピトープマッピング)
HCT18(A,D)、Th(B,E)およびHCV J1(C,F)のE2/NS1
HVドメイン(アミノ酸384〜416位)に対応し、そしてそれを越えて伸長する重複ビオチン化8量体ペプチドを、ストレプトアビジンでコートしたプレートに結合し、HCT 18(A−C)またはTh(D−F)のいずれかに由来の血漿と反応させた。HCV単離体HCT 18(図9)、Th(図10)、およびHCVJ1(図11)についての結果を図9〜11に示す。HCT 18血漿を1:200に希釈し、Th血漿を1:500に希釈した。HVE−1、−2、−3、−4、および−5は単離体に特異的なエピトープを示す。
18(399IVRFFAP405、図9)およびHCV J1中のエピトープをもまた同定した。IVの薬剤の使用者であるThは、HCVの複数の株に対して感染可能状態に置かれ得た。
18HVドメインに対する重複8量体を含むピンで遮断した。これらのデータにより、以下のことが示される:1)E2/NS1 HVドメインが免疫原性であること、2)この領域をマップする複数のエピトープがあること、そして、3)HVドメイン中のエピトープのサブセット(図9〜11中のHVE−1、−2、−3、−4または−5)が単離体特異的であること。
(可変E2/NS1 HVドメインが、肝炎の発赤と関連し得ることの決定)
慢性HCV感染にしばしば見出される肝炎の間欠性発赤に関連するHCV変異体を発見する可能性を調べるために、慢性肝炎の被験体Qから、約2年間隔の肝炎の2つの別個のエピソード(それぞれ、Q1およびQ3)の際に得たE2/NS1遺伝子を部分的に配列決定した。肝炎の第2のエピソードは、インターフェロン治療を終了して1年半後に起こった。
じていた(図12)。図12は、Q1およびQ3単離体のE2/NS1ポリペプチドの2つの領域、つまりアミノ酸384−414および547−647の推定アミノ酸配列を示す。Q1配列上のアミノ酸(E)が、4つのQ1クローンのうちの1つに見出された。ボックスで囲まれたアミノ酸は、Ql
HVEまたはQ3 HVEの12量体ペプチドの位置を表す。Q1とQ3との間に見出されるアミノ酸配列の相違は、太字で示した。
漿のQ3ペプチドヘの結合は、統計上有意ではなかった。このデータは、被験体Qは、HCV Ql HVドメインに対する抗体を発生し、この抗体は、2年後のQ3時点でもまだ検出し得たが、検出し得る体液性応答は、肝炎の第2のエピソードの間に優性であるQ3 E2 HV変異体に対して全く発生されなかったことを示している。
(HCV感染固体における異なるE2/NS1 HVドメインを伴う共存E2/NS1遺伝子の検出)
図13は、日本人のボランティアの供血者HCV J1の1つの漿試料からクローンニングしたHCV J1の2つの単離体(J1.1およびJ1.2)から推定されたアミノ酸配列を示す。Kuboら(1989)Nucl.Acids Res.17:10367−10372。HCV J1.1とHCV J1.2との間の全部で23のアミノ酸の変化のうち、太字で示した9つの相違が、30のアミノ酸のE2/NS1HVドメインに集中している。E2/NS1 HVドメイン中の9つのアミノ酸の置換のうち5つは、非保存的アミノ酸変化を表す。HCV J1は、本発明者らの実験室でクローニングされた唯一のII群HCVゲノムであるため、これらの相違がHCV J1血漿の交叉汚染によるものではないと考えられる。2つの別個のPCR反応から作製した7つのクローン化配
列から、2つのE2/NSlHV変異体配列だけが同定されたので、HCVJ1.2配列は、HCVJ1の血液中の少数配列(minority sequence)を表す。
(ワクチンの製剤と調製)
(ジフテリアトキソイド担体タンパク質のMCSへのカップリング)
(必要な材料)
エチレンジアミン四酢酸(EDTA Na2・2H2O)(MW 372)
6−マレイミドヘキサン酸N−ヒドロキシスクシンイミドエステル(MCS)(Sigma)−純度95%
リン酸二水素一ナトリウム(NaH2P04)
窒素
ジメチルホルムアミド(DMF)
Milli Q水
5mM EDTA含有0.1Mリン酸緩衝液(pH6.66)
0.1Mリン酸緩衝液(pH8.0)
0.1Mリン酸緩衝液(pH7.0)
コハク酸ナトリウム[(CH2COONa)2・6H2O]
システイン
塩酸(2%溶液)
0.1Mコハク酸ナトリウム/0.1 EDTA、pH5.6
精製されたジフテリアトキソイド(Commonwealth Serum Laboratories,Victoria,Australia)を、以下に記載の方法によりMCSにカップリングした:Leeら(1980)Mol.Immuno1.17:749;Partisら(1983)Prot.Chem.2:263;Peetersら(1989)J.Immunol.Methods 120:133;Jonesら(1989)J.Immunol.Methods 123:211。100mlのジフテリアトキソイドをG25セファデックスカラム(17cm×4cm)に通し、チオメルサールを除去した。トキソイドを、0.1Mリン酸緩衝液(pH7.0)で溶出し、溶出液のタンパク質容量をBCAタンパク質測定法(Pierce)を用いてアッセイした。得られた溶液を、Amicon限外濾過ユニットを用いて、最終濃度10mg/mlに濃縮した。
室温で1時間時々撹拝しながらインキュベートした。MCSトキソイドからカップリングされていないMCSを分離するため、溶液を、0.1Mリン酸緩衝液(pH6.66)で平衡化されたセファデックスPD10カラムに通過させ、タンパク質画分を採集した。
る吹き込まれた緩衝液中に溶解した。表5中に示した溶液の分量を、2連で、25mlスクリューキャップボトルに移した。別々のピペットを用いて、各分量中へ窒素を通気した。次いで各ボトルを密封し、暗所において室温で40分間時々かきまぜながらインキュベートした。
(必要な材料)
リン酸緩衝液、pH8.0
15.6gのNaH2PO4または12.0gのNaH2PO4無水物を、約700mlのMilli Q水に溶解する。50%NaOHを用いてpHを8.0に調節する。Mill
i Q水を最終体積が1000mlになるように加え、次いで必要に応じてpHを調整する。
エルマン試薬
10.0mgの5,5’−ジチオビス−2−ニトロ安息香酸(DTNB)を、2.5ml
のリン酸緩衝液(pH8.0)中に溶解する。
およびブランク溶液の0.1ml分量のそれぞれに加えた。次いで、5mlのリン酸緩衝
液(pH8.0)を、各分量に加えてよく混合し、15分間そのままおいた。各分量の吸
光度を1cm路長のセル中で412nmで測定した。
mlであった。そのため、存在する総μモル数は、A(0.01)(5.2)/0.136
であった。試料溶液は、全体積が1.3mlであり、その内0.3mlが活性化担体タンパク質から構成された。試料溶液中に存在するマレイミド基の量は、A(0.01)(5.2)(1.3)/(0.136)(0.1)(0.3)=A(16.57)μモル/m1である
と計算された。MCS活性化担体タンパク質は、−20℃で貯蔵した。
HCVペプチドをMCS活性化担体タンパク質にカップリングする前に、ペプチドを還元し、ペプチド上に存在するチオール基が完全に還元された−SH形であることを確実にした。
ジチオトレイトール(DTT)
炭酸水素アンモニウム(NH4HCO3)
メタノール
SEP−PAKs(C18カートリッジ、水)、各8mgのペプチドに1カートリッジ
0.1M炭酸水素アンモニウム緩衝液
1L Milli Q水中に7.9gのNH4HC03を溶解
緩衝液A、Mi11i Q水中、0.1%V/Vトリフルオロ酢酸(TFA)
緩衝液B、Milli Q水中、60%V/Vアセトニトリル、0.1%V/VTFA
HCVポリタンパク質のアミノ酸384−411および225−260にそれぞれ対応する2つの各HCVペプチド15mgを、10倍過剰量のDTTを含む2.5m1の0.1M炭酸水素アンモニウムに加えた。生成した溶液をペプチドが溶解するまで撹拝し、次いで室温で1時間そのままおいた。2対のSEP−PAKsを連結し、約20mlのメタノール、次いで20mlの緩衝液Aを各対のSEP−PAKsに通すことにより活性化した。各ペプチド/DTT試料を、ゆっくりと1対のSEP−PAKsに通した。DTTを20mlの緩衝液Aで溶出した。還元されたペプチドを、7mlの緩衝液Bで事前に重さを量ったボトル中に溶出し、次いで一晩凍結乾燥した。次いでこのボトルの重さを量り、回収されたポリペプチドの量を測定した。次いで、還元されたペプチドを、MCS活性化担体タンパク質に即座にカップリングした。
5mMのEDTAを伴う約100m1の0.1Mリン酸緩衝液(pH6.66)を、真空下で脱気し、次いで10分間窒素を吹き込んだ。MCS活性化担体タンパク質の10mg/ml溶液2伽1に、過剰の発泡を防ぐために窒素を注意深く吹き込んだ。各5mgの還元ペプチドを、約0.2mlの脱気され吹き込まれたリン酸/EDTA緩衝液(pH6.66)中に溶解し、次いでMCS活性化担体タンパク質溶液と混合した。得られた混合物を、スクリューキャップボトル中に移し、次いで窒素を充満させ密封した。この溶液を、Branson 2000R音波処理バス中に2分間おいてさらに脱気した。このボトルを
、アルミホイルで被い、振とうテーブル上で緩やかに撹拝しながら室温で一晩インキュベートした。
カラムに通すことにより除去した。タンパク質画分を採集した。担体タンパク質に結合したペプチドの量を、アミノ酸分析により測定した。
ミノ酸レベルの量を掛けてある。
注射組成物は、上記のように調製されたMCS活性化ジフテリアトキソイド担体タンパク質に結合したHCVペプチド、および本明細書中に参考として援用された1990年12月13日に公開されたPCT国際公開番号第W0904837号に記載のサブミクロンの水中油乳化型アジュバントを構成成分とした。さらに、HCV結合ペプチドおよびアジュバントに加え、免疫賦活剤である親油性ムラミルペプチド(MTP−PE、CIBA−GEIGY、Basel、Switzerland)を含む注射組成物を調製した。ワクチン組成物は、一般的に50%のタンパク質および5%の免疫賦活剤から構成された。
注射ワクチン組成物10mlの調製:
2.5mlのスクアレン(Sigma Chemical Co.,St.Louis,
Mo.)
0.25ml Tween 80(Sigma Chemical Co.)
0.25ml SPAN 85(Sigma Chemical Co.)
1000μg MTP−PE
1000μg MCS−活性化ジフテリアトキソイド担体タンパク質に結合したHCVペプチド
(MTP−PEを含まないワクチン組成物の処方箋)
注射ワクチン組成物10mlの調製:
2.5mlのスクアレン(Sigma Chemical Co.,St.Louis,
Mo.)
0.25ml Teen 80(Sigma Chemical Co.)
0.25ml SPAN 85(Sigma Chemical Co.)
1000μg MCS−活性化ジフテリアトキソイド担体タンパク質に結合したHCVペプチド
(実施例6)
(ワクチン調製物の毒性についての試験方法)
実施例5の方法により調製したワクチンを、毒性について小動物で試験した。1kg当り50μgのワクチンを、モルモット、マウスおよびウサギに腹腔内注射して投与した。
アカゲザルおよび霊長類にも、腹腔内注射によりワクチンを投与した。アカゲザルおよび霊長類の試験個体群の半数には、5μg/kgで投与したが、一方他の半数には、50μg/kgで投与した。各研究で用いた対照動物には、ウイルスペプチドを含まないワクチン調製物の成分からなる同等量の組成物を注射した。
(ワクチンにおける投与動物における中和抗体の産生の証明)
実施例5の方法により調製したワクチンを、ワクチン投与した被験体におけるウイルス中和抗体の産生を誘起するワクチンの効果を測定するために、チンパンジーで試験した。チンパンジーに、実施例5の方法により調製したワクチンを5μg/kgの投与量で、6ヵ月の期間にわたり0、1、3、および6カ月の間隔をおいて投与した。対照のチンパンジーには、ウイルスペプチドを含まないワクチンの成分からなる同等量の組成物を注射した。最後のワクチン投与を行ってから2週間後、試験および対照の各チンパンジーに、10 CIU50(チンパンジー感染単位)の投与量のCDC/910血漿接種材料で刺激した。ウイルス刺激の1週間後から始めて、各チンパンジーを、ウイルス血症について毎週ベースでモニターした。
SAによりスクリーニングした。チンパンジーの血清中におけるこれらのペプチドに対する抗体の存在は、HCV感染を示した。
cPCRアッセイにおいて、試料中の推定ウイルスRNAを、逆転写酵素でcDNAに逆転写し、次いで、得られたcDNAのセグメントを、Saikiら(1986)により記載のPCR技術の改変法を用いて増幅する。cPCR法に用いるプライマーは、HCV
RNAから誘導する。これは本明細書で提供されるHCV cDNAのファミリーにより同定され得る。HCV−RNAに対応する増幅生成物を、本明細書で提供されるHCV
cDNAのファミリーから誘導されるプローブを使用して検出する。
ソチオシアネート法を使用して、RNAを肝臓から抽出した。
トリス−HC1(pH8.0)、1mM EDTA)で5〜10倍に希釈し、そして、プ
ロティナーゼK/SDS溶液(0.5%SDS、1mg/mlプロテイナーゼK、20マ
イクログラム/mlポリA担体)中で60〜90分間37℃でインキュベートした。試料を、フェノール(pH6.5)で1回抽出し、得られた有機相を0.1%SDS含有TENBで再び1回抽出し、そして、両抽出の水相をプールして、同体積のフェノール/CHCl3/イソアミルアルコール[1:1(99:1)]で2回抽出した。得られた水相を、
同体積のCHCl3/イソアミルアルコール(99:1)で2回抽出し、そして、0.2M酢酸ナトリウム(pH6.5)、および2.5倍容量の100%エタノールを用いてエタノール沈澱した;沈澱は、−20℃で一晩行った。
ーゼAおよびPerkin Elmer Cetus PCRキット(N801−0043またはN801−0055)のPCR反応物を用いて、製造者の指示に従ってインキュベートした。PCR反応は、Perkin Elmer Cetus DNA熱サイクラーで、30サイクルまたは60サイクルいずれかで実施した。各サイクルは、94℃1分での変性段階、37℃2分でのアニーリング段階、および72℃3分での伸長段階で構成された。しかしながら、最終サイクル(30または60)における伸長段階は、3分ではなく7分であった。増幅後、試料を同体積のフェノール:クロロホルム(1:1)で抽出
し、次いで同体積のクロロホルムで抽出し、次いで試料を0.2Mの酢酸ナトリウム含有
エタノールで沈澱させた。
NaCl、0.015Mのクエン酸ナトリウム)中で中和し、0.3MのNaCl、15mMのリン酸ナトリウム緩衝液、pH6.8、15mMのEDTA、1.0%のSDS、0.
5%の脱脂乳(Carnation Co.)、および0.5mg/mlの超音波処理さ
れ変性されたサケ精子DNA中でプレハイブリダイズした。HCVcDNAフラグメントについて分析すべきブロットを、米国出願番号07/456,637に記載のクローン3
5のHCV cDNA挿入配列のニックトランスレーションにより生成された32標識化プローブに、ハイブリダイズした。ハイブリダイゼーションの後、ブロットを1×SSC(1×SSCは、0.15M NaCl、0.01Mのクエン酸ナトリウム)中で65℃で洗浄し、乾燥し、そしてオートラジオグラフを記録した。生成物の期待サイズは、586ヌクレオチド長である;プローブとハイブリダイズされて、このサイズの範囲でゲル中を移動した生成物は、ウイルスRNAについて陽性であると評価された。
lacement pipetters)でピペッティング;および3)2つの非連続的cDNAクローンからのcDNAおよびPCRプライマーに対するオリゴヌクレオチド配列の選択。
Claims (1)
- 明細書に記載の発明。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US75957591A | 1991-09-13 | 1991-09-13 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005020454A Division JP4353905B2 (ja) | 1991-09-13 | 2005-01-27 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008133301A true JP2008133301A (ja) | 2008-06-12 |
Family
ID=25056174
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP5506119A Withdrawn JPH06511149A (ja) | 1991-09-13 | 1992-09-11 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2001211447A Withdrawn JP2002167336A (ja) | 1991-09-13 | 2001-07-11 | 免疫反応生c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2003326811A Withdrawn JP2004073207A (ja) | 1991-09-13 | 2003-09-18 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2005020454A Expired - Lifetime JP4353905B2 (ja) | 1991-09-13 | 2005-01-27 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2008038799A Withdrawn JP2008133301A (ja) | 1991-09-13 | 2008-02-20 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
Family Applications Before (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP5506119A Withdrawn JPH06511149A (ja) | 1991-09-13 | 1992-09-11 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2001211447A Withdrawn JP2002167336A (ja) | 1991-09-13 | 2001-07-11 | 免疫反応生c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2003326811A Withdrawn JP2004073207A (ja) | 1991-09-13 | 2003-09-18 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
JP2005020454A Expired - Lifetime JP4353905B2 (ja) | 1991-09-13 | 2005-01-27 | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US5756312A (ja) |
EP (1) | EP0608261B1 (ja) |
JP (5) | JPH06511149A (ja) |
AT (1) | ATE228564T1 (ja) |
AU (1) | AU679429B2 (ja) |
BG (1) | BG62973B1 (ja) |
CA (1) | CA2116764C (ja) |
DE (1) | DE69232859T2 (ja) |
DK (1) | DK0608261T3 (ja) |
ES (1) | ES2182822T3 (ja) |
FI (1) | FI112438B (ja) |
HU (1) | HU227510B1 (ja) |
PL (2) | PL171489B1 (ja) |
RO (1) | RO116199B1 (ja) |
RU (2) | RU2212899C2 (ja) |
WO (1) | WO1993006126A1 (ja) |
Families Citing this family (79)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6596476B1 (en) * | 1989-12-22 | 2003-07-22 | Abbott Laboratories | Hepatitis C assay |
JPH06511149A (ja) * | 1991-09-13 | 1994-12-15 | カイロン コーポレイション | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
US6297048B1 (en) * | 1992-02-04 | 2001-10-02 | Chiron Corporation | Hepatitis therapeutics |
US6667387B1 (en) | 1996-09-30 | 2003-12-23 | N.V. Innogenetics S.A. | HCV core peptides |
US6709828B1 (en) | 1992-03-06 | 2004-03-23 | N.V. Innogenetics S.A. | Process for the determination of peptides corresponding to immunologically important epitopes and their use in a process for determination of antibodies or biotinylated peptides corresponding to immunologically important epitopes, a process for preparing them and compositions containing them |
EP0671926B1 (en) * | 1992-08-11 | 2002-11-13 | President And Fellows Of Harvard College | Immunomodulatory peptides |
US7255997B1 (en) | 1993-04-27 | 2007-08-14 | N.V. Innogenetics S.A. | Sequences of hepatitis C virus genotypes and their use as therapeutic and diagnostic agents |
ATE373093T1 (de) | 1993-04-27 | 2007-09-15 | Innogenetics Nv | Sequenzen der genotype des hepatitis-c-virus sowie ihre verwendung als arzneimitteln und diagnostika |
ATE249838T1 (de) | 1993-05-12 | 2003-10-15 | Chiron Corp | Konserviertes motiv der hepatitis c virus e2/ns1 region |
US5514539A (en) * | 1993-06-29 | 1996-05-07 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Nucleotide and deduced amino acid sequences of the envelope 1 gene of 51 isolates of hepatitis C virus and the use of reagents derived from these sequences in diagnostic methods and vaccines |
EP0979867A3 (en) * | 1993-11-04 | 2007-06-13 | Innogenetics N.V. | Immunodominant human T-cell epitopes of hepatitis C virus |
NZ291153A (en) | 1994-07-25 | 1999-01-28 | Boehringer Mannheim Gmbh | Determination of a specific antibody using multiple antigens containing several epitope regions which react with the antibody |
DK0721505T4 (da) * | 1994-07-29 | 2006-08-14 | Innogenetics Nv | Rensede hepatitis C-virus-kappeproteiner til diagnostisk og terapeutisk anvendelse |
US7129337B1 (en) | 1994-10-21 | 2006-10-31 | Innogenetics N.V. | Sequences of hepatitis C virus genotypes and their use as prophylactic, therapeutic and diagnostic agents |
US6110465A (en) * | 1995-06-07 | 2000-08-29 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Nucleotide and deduced amino acid sequences of hypervariable region 1 of the envelope 2 gene of isolates of hepatitis C virus and the use of reagents derived from these hypervariable sequences in diagnostic methods and vaccines |
US6127116A (en) | 1995-08-29 | 2000-10-03 | Washington University | Functional DNA clone for hepatitis C virus (HCV) and uses thereof |
US7235394B1 (en) | 1995-08-29 | 2007-06-26 | Washington University | Functional DNA clone for hepatitis C virus (HCV) and uses thereof |
US7045363B2 (en) * | 1996-05-01 | 2006-05-16 | Fujirebio Inc. | Nucleic acid-bound polypeptide method of producing nucleic acid-bound polypeptide and immunoassay using the polypeptide |
US6001613A (en) * | 1996-05-24 | 1999-12-14 | Board Of Regents Of University Of Nebraska | Plasmid bearing a cDNA copy of the genome of bovine viral diarrhea virus, chimeric derivatives thereof, and method of producing an infectious bovine viral diarrhea virus using said plasmid |
CA2269097C (en) | 1996-11-08 | 2007-01-09 | The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Synthesis and purification of hepatitis c virus-like particles |
EP0870830A3 (en) * | 1997-02-10 | 2004-02-25 | Advanced Life Science Institute, Inc. | Chimera hepatitis C virus antigen |
US7338759B1 (en) | 1997-03-04 | 2008-03-04 | Washington University | HCV variants |
US7049428B1 (en) * | 1998-03-04 | 2006-05-23 | Washington University | HCV variants |
CA2305847A1 (en) * | 1997-11-06 | 1999-05-20 | Innogenetics N.V. | Multi-mer peptides derived from hepatitis c virus envelope proteins for diagnostic use and vaccination purposes |
US6451306B1 (en) | 1998-04-15 | 2002-09-17 | The Regents Of The University Of California | Methods for therapy of neurodegenerative disease of the brain |
US7157435B2 (en) | 1998-04-15 | 2007-01-02 | The Regents Of The University Of California | Methods for modulation of the effects of aging on the primate brain |
US6683058B1 (en) | 1998-04-15 | 2004-01-27 | Regents Of The University Of California | Methods for therapy of neurodegenerative disease of the brain |
US6815431B2 (en) | 1998-04-15 | 2004-11-09 | Regents Of The University Of California | Methods for therapy of neurodegenerative disease of the brain |
US7052830B1 (en) | 1998-06-09 | 2006-05-30 | Branch Andrea D | Hepatitis C virus peptides and uses thereof |
US7108855B2 (en) * | 1998-06-24 | 2006-09-19 | Innogenetics N.V. | Purified hepatitis C virus envelope proteins for diagnostic and therapeutic use |
US6548634B1 (en) * | 1998-09-30 | 2003-04-15 | Chiron Corporation | Synthetic peptides having FGF receptor affinity |
US20030180284A1 (en) * | 1998-11-05 | 2003-09-25 | Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Prevention and treatment of HCV infection employing antibodies directed against conformational and linear epitopes |
US7091324B2 (en) | 1998-11-05 | 2006-08-15 | Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Prevention and treatment of HCV infection employing antibodies directed against conformational epitopes |
JP4776075B2 (ja) * | 1998-12-31 | 2011-09-21 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 改変hivenvポリペプチド |
US6602705B1 (en) * | 1998-12-31 | 2003-08-05 | Chiron Corporation | Expression of HIV polypeptides and production of virus-like particles |
AU2487300A (en) * | 1998-12-31 | 2000-07-31 | Chiron Corporation | Polynucleotides encoding antigenic hiv type c polypeptides, polypeptides and uses thereof |
US7935805B1 (en) * | 1998-12-31 | 2011-05-03 | Novartis Vaccines & Diagnostics, Inc | Polynucleotides encoding antigenic HIV Type C polypeptides, polypeptides and uses thereof |
EP1535628B1 (en) * | 1999-11-24 | 2013-07-31 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Hbv/hcv virus-like particle |
US6740323B1 (en) | 1999-11-24 | 2004-05-25 | Chiron Corporation | HBV/HCV virus-like particle |
JP2004525070A (ja) * | 2000-07-19 | 2004-08-19 | ザ・レジェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・カリフォルニア | 脳の神経変性疾患の治療法 |
US7022830B2 (en) * | 2000-08-17 | 2006-04-04 | Tripep Ab | Hepatitis C virus codon optimized non-structural NS3/4A fusion gene |
US6680059B2 (en) * | 2000-08-29 | 2004-01-20 | Tripep Ab | Vaccines containing ribavirin and methods of use thereof |
US6858590B2 (en) | 2000-08-17 | 2005-02-22 | Tripep Ab | Vaccines containing ribavirin and methods of use thereof |
ATE375804T1 (de) | 2000-08-17 | 2007-11-15 | Tripep Ab | Ribavirin-enthaltende vakzine |
WO2002022155A1 (en) | 2000-09-13 | 2002-03-21 | Hawaii Biotechnology Group, Inc. | Immunogenic composition of hepatitis c and methods of use thereof |
US7211659B2 (en) * | 2001-07-05 | 2007-05-01 | Chiron Corporation | Polynucleotides encoding antigenic HIV type C polypeptides, polypeptides and uses thereof |
EP2292772A1 (en) | 2001-07-05 | 2011-03-09 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | HIV vaccination with a DNA encoding a HIV polypeptide and a HIV polypeptide |
US20030170614A1 (en) * | 2001-08-31 | 2003-09-11 | Megede Jan Zur | Polynucleotides encoding antigenic HIV type B polypeptides, polypeptides and uses thereof |
AU2002316578A1 (en) * | 2001-08-31 | 2003-03-18 | Chiron Corporation | Polynucleotides encoding antigenic hiv type b polypeptides, polypeptides and uses thereof |
AR045702A1 (es) * | 2001-10-03 | 2005-11-09 | Chiron Corp | Composiciones de adyuvantes. |
WO2005007808A2 (en) | 2003-05-15 | 2005-01-27 | Chiron Corporation | Hiv polynucleotides and polypeptides derived from botswana mj4 |
US20050202036A1 (en) * | 2003-07-22 | 2005-09-15 | Branch Andrea D. | Alternate reading frame polypeptides drived from hepatitis C and methods of their use |
US20050130131A1 (en) * | 2003-08-14 | 2005-06-16 | California Institute Of Molecular Medicine | Method for isolation and replication of infectious human hepatitis-C virus |
US8124747B2 (en) | 2003-08-29 | 2012-02-28 | Innogenetics | HCV clade and prototype sequences thereof |
CA2585672A1 (en) | 2004-11-01 | 2006-05-11 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Combination approaches for generating immune responses |
CA2618429A1 (en) * | 2005-05-25 | 2007-03-22 | Tripep Ab | A hepatitis c virus non-structural ns3/4a fusion gene |
WO2007084568A2 (en) | 2006-01-17 | 2007-07-26 | Health Research, Inc. | Heteroduplex tracking assay |
EP2185195A2 (en) * | 2007-08-16 | 2010-05-19 | Tripep Ab | Immunogen platform |
EP2201023A2 (en) * | 2007-09-14 | 2010-06-30 | GENimmune N.V. | Affinity tag |
DK3078743T3 (da) | 2007-09-28 | 2020-08-10 | Portola Pharm Inc | Antidoter til faktor xa-inhibitorer og fremgangsmåder til anvendelse af disse |
WO2009130588A2 (en) * | 2008-04-22 | 2009-10-29 | Tripep Ab | Immunogen platform |
US20100104555A1 (en) * | 2008-10-24 | 2010-04-29 | The Scripps Research Institute | HCV neutralizing epitopes |
EP3604510A1 (en) | 2009-03-30 | 2020-02-05 | Portola Pharmaceuticals, Inc. | Antidotes for factor xa inhibitors and methods of using the same |
WO2010148117A1 (en) | 2009-06-17 | 2010-12-23 | Scantibodies Laboratory, Inc. | Therapeutic and diagnostic affinity purified specific polyclonal antibodies |
PT2453910T (pt) | 2009-07-15 | 2016-12-07 | Portola Pharm Inc | Formulação de dose unitária de antídoto contra inibidores de fator xa para uso na prevenção de sangramento |
JP6120839B2 (ja) | 2011-07-06 | 2017-04-26 | ノバルティス アーゲー | カチオン性水中油型エマルジョン |
MX350198B (es) | 2011-07-06 | 2017-08-30 | Novartis Ag | Emulsiones aceite en agua que contienen acidos nucleicos. |
US8609355B2 (en) | 2011-07-26 | 2013-12-17 | Indicator Systems International, Inc. | Assays for the detection of microbes |
FR2984328B1 (fr) | 2011-12-20 | 2016-12-30 | Bio-Rad Innovations | Procede de detection d'une infection par le virus de l'hepatite c |
EP2825191B1 (en) | 2012-03-16 | 2019-08-28 | University Health Network | Soluble toso protein and its use in treating autoimmune disorders |
RU2520710C1 (ru) * | 2012-12-10 | 2014-06-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Челябинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России) | Способ прогнозирования персистенции онкогенных типов вируса папилломы человека в цервикальном эпителии |
CA2941693A1 (en) | 2014-03-07 | 2015-09-11 | University Health Network | Methods and compositions for detection of targets involved in cancer metastasis |
RU2675108C2 (ru) * | 2015-06-15 | 2018-12-17 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича" (ИБМХ) | Композиция на основе синтетических пептидов и липидов для вакцины против гепатита с |
US10287338B2 (en) | 2015-07-10 | 2019-05-14 | Miran NERSISSIAN | Factor VIII protein compositions and methods of treating of hemophilia A |
WO2017066719A2 (en) | 2015-10-14 | 2017-04-20 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Hu specific interfering agents |
JP7514621B2 (ja) | 2017-01-04 | 2024-07-11 | リサーチ インスティチュート アット ネイションワイド チルドレンズ ホスピタル | Dnabiiワクチンおよび強化された活性を有する抗体 |
CA3049114A1 (en) | 2017-01-04 | 2018-07-12 | Lauren O. Bakaletz | Antibody fragments for the treatment of biofilm-related disorders |
AU2018236271B2 (en) | 2017-03-15 | 2023-12-21 | Research Institute At Nationwide Children's Hospital | Composition and methods for disruption of bacterial biofilms without accompanying inflammation |
KR20220032066A (ko) | 2019-07-08 | 2022-03-15 | 더 리서치 인스티튜트 앳 네이션와이드 칠드런스 하스피탈 | 생물막을 파괴하기 위한 항체 조성물 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3400079A1 (de) * | 1984-01-03 | 1985-07-11 | Röhm GmbH, 6100 Darmstadt | Wasserspreitendes kunststoffmaterial, verfahren zu seiner herstellung u. verwendung als verglasungs- und bedachungsmaterial |
NZ219516A (en) * | 1987-02-10 | 1991-02-26 | Wellcome Found | Fusion proteins of hbcag (hepatitis b virus core antigen) |
CN1049686C (zh) * | 1987-11-18 | 2000-02-23 | 希龙股份有限公司 | 非a和非b肝炎病毒的诊断及疫苗 |
US5350671A (en) * | 1987-11-18 | 1994-09-27 | Chiron Corporation | HCV immunoassays employing C domain antigens |
KR0185373B1 (ko) * | 1989-03-17 | 1999-05-01 | 로버트 피. 블랙버언 | Hcv 폴리단백질에서 유래되는 hcv 아미노산 서열 부분을 포함하는 폴리펩티드 및 그 사용 |
DK0398748T3 (da) * | 1989-05-18 | 2002-03-18 | Chiron Corp | NANBV-diagnostika: polynukleotider anvendelige til screening for hepatitis C virus |
US5372928A (en) * | 1989-09-15 | 1994-12-13 | Chiron Corporation | Hepatitis C virus isolates |
WO1991004262A1 (en) * | 1989-09-15 | 1991-04-04 | National Institute Of Health Of Japan | New hcv isolates |
EP0484787B1 (de) * | 1990-11-03 | 2001-10-10 | Dade Behring Marburg GmbH | HCV-spezifische Peptide, Mittel dazu und ihre Verwendung |
JPH06511149A (ja) * | 1991-09-13 | 1994-12-15 | カイロン コーポレイション | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 |
-
1992
- 1992-09-11 JP JP5506119A patent/JPH06511149A/ja not_active Withdrawn
- 1992-09-11 PL PL92302729A patent/PL171489B1/pl unknown
- 1992-09-11 RU RU98117084/14A patent/RU2212899C2/ru active
- 1992-09-11 DK DK92919917T patent/DK0608261T3/da active
- 1992-09-11 WO PCT/US1992/007683 patent/WO1993006126A1/en active IP Right Grant
- 1992-09-11 PL PL92313797A patent/PL171972B1/pl unknown
- 1992-09-11 RU RU94024561A patent/RU2136311C1/ru active
- 1992-09-11 RO RO94-00391A patent/RO116199B1/ro unknown
- 1992-09-11 HU HU9400741A patent/HU227510B1/hu unknown
- 1992-09-11 AT AT92919917T patent/ATE228564T1/de active
- 1992-09-11 DE DE69232859T patent/DE69232859T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-11 ES ES92919917T patent/ES2182822T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-11 EP EP92919917A patent/EP0608261B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-11 CA CA002116764A patent/CA2116764C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-09-11 AU AU26436/92A patent/AU679429B2/en not_active Expired
-
1994
- 1994-03-11 BG BG98653A patent/BG62973B1/bg unknown
- 1994-03-14 FI FI941199A patent/FI112438B/fi not_active IP Right Cessation
- 1994-04-19 US US08/231,368 patent/US5756312A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-05-12 US US08/440,103 patent/US5670152A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-12 US US08/440,542 patent/US5670153A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-12 US US08/440,210 patent/US5766845A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-06 US US08/471,498 patent/US5728520A/en not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-03-24 US US09/046,604 patent/US6303292B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2001
- 2001-07-11 JP JP2001211447A patent/JP2002167336A/ja not_active Withdrawn
-
2003
- 2003-09-18 JP JP2003326811A patent/JP2004073207A/ja not_active Withdrawn
-
2005
- 2005-01-27 JP JP2005020454A patent/JP4353905B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2008
- 2008-02-20 JP JP2008038799A patent/JP2008133301A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4353905B2 (ja) | 免疫反応性c型肝炎ウイルスのポリペプチド組成物 | |
JP4456596B2 (ja) | C型肝炎ウイルス(hcv)ポリペプチド | |
US5871903A (en) | HCV isolates | |
EP0388232B1 (en) | NANBV diagnostics and vaccines | |
EP0419182A1 (en) | New HCV isolates | |
US7371386B2 (en) | Conserved motif of hepatitis C virus E2/NS1 region | |
JP2006104207A (ja) | Nanbvの診断用薬 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081215 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090310 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090313 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090512 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090515 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090612 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20090703 |
|
A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20091102 |