JP2008128982A - 蛍光検出装置、蛍光検出方法および蛍光検出プログラム - Google Patents
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Abstract
【解決手段】蛍光検出装置1は、顕微鏡10、励起光源20、検出部30および処理部40等を備える。処理部40に含まれる第1測定データ取得手段41は、複数の検出波長帯域それぞれにおいて蛍光を検出部30により略同一の検出時間に亘って検出させて第1測定データを取得する。検出時間設定手段42は、各検出波長帯域についての第1測定データを互いに比較して、入力光強度が最も低い特定検出波長帯域における検出時間を他の検出波長帯域における検出時間より長く設定する。第2測定データ取得手段43は、設定された各検出波長帯域の検出時間に亘って蛍光を検出部30により検出させて第2測定データを取得する。解析手段44は、第2測定データに基づいて、測定対象物9に含有される各種類の蛍光色素の含有濃度を解析する。
【選択図】図1
Description
Claims (12)
- 複数種類の蛍光色素が含有された測定対象物で発生する蛍光を検出する蛍光検出装置であって、
複数の検出波長帯域それぞれにおいて入力光強度を検出して当該検出結果を示すデータを出力するともに、前記複数の検出波長帯域それぞれにおける当該検出時間が可変である検出部と、
前記検出部における光検出動作を制御するとともに、前記検出部から出力されるデータを取得して該データを処理する処理部と、
を備え、
前記処理部が、
前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて、前記測定対象物で発生する蛍光を前記検出部により略同一の検出時間に亘って検出させ、当該検出結果を示す第1測定データを取得する第1測定データ取得手段と、
前記第1測定データ取得手段により取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第1測定データを互いに比較して、その比較結果に基づいて、前記複数の検出波長帯域のうち入力光強度が最も低い検出波長帯域(以下「特定検出波長帯域」という。)を選択して、前記複数の検出波長帯域のうち前記特定検出波長帯域における検出時間を他の検出波長帯域における検出時間より長く設定する検出時間設定手段と、
前記検出時間設定手段により設定された前記複数の検出波長帯域それぞれの検出時間に亘って、前記測定対象物で発生する蛍光を前記検出部により検出させ、当該検出結果を示す第2測定データを取得する第2測定データ取得手段と、
前記第2測定データ取得手段により取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第2測定データに基づいて、前記測定対象物に含有される前記複数種類の蛍光色素それぞれの含有濃度を解析する解析手段と、
を含む、
ことを特徴とする蛍光検出装置。 - 前記検出時間設定手段が、前記第1測定データ取得手段により取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第1測定データの比に対して逆比例関係となるように、前記複数の検出波長帯域それぞれにおける検出時間の比を設定する、ことを特徴とする請求項1記載の蛍光検出装置。
- 前記解析手段が、前記複数種類の蛍光色素のうちの個々の種類の蛍光色素を単独で含む基準試料それぞれで発生した蛍光を前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて前記検出部により検出して得られた基準データと、前記第2測定データ取得手段により取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第2測定データとに基づいて、前記測定対象物に含有される前記複数種類の蛍光色素それぞれの含有濃度を解析する、ことを特徴とする請求項1記載の蛍光検出装置。
- 前記検出部が、前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて入力光強度に対する出力データのゲインが可変であり、
前記処理部が、第2測定データ取得手段により前記測定対象物で発生する蛍光を前記検出部により検出させる際に、前記検出時間設定手段による比較結果に基づいて前記複数の検出波長帯域のうち何れかの検出波長帯域において前記検出部のゲインを調整する、
ことを特徴とする請求項1記載の蛍光検出装置。 - 前記検出部が、前記複数の検出波長帯域のうちの個々の検出波長帯域に対応する検出素子を含む、ことを特徴とする請求項1記載の蛍光検出装置。
- 複数種類の蛍光色素が含有された測定対象物で発生する蛍光を検出する蛍光検出方法であって、
複数の検出波長帯域それぞれにおいて入力光強度を検出して当該検出結果を示すデータを出力するともに前記複数の検出波長帯域それぞれにおける当該検出時間が可変である検出部を用いて、前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて、前記測定対象物で発生する蛍光を略同一の検出時間に亘って検出し、当該検出結果を示す第1測定データを取得する第1測定データ取得ステップと、
前記第1測定データ取得ステップにおいて取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第1測定データを互いに比較して、その比較結果に基づいて、前記複数の検出波長帯域のうち入力光強度が最も低い検出波長帯域(以下「特定検出波長帯域」という。)を選択して、前記複数の検出波長帯域のうち前記特定検出波長帯域における検出時間を他の検出波長帯域における検出時間より長く設定する検出時間設定ステップと、
前記検出時間設定ステップにおいて設定された前記複数の検出波長帯域それぞれの検出時間に亘って、前記測定対象物で発生する蛍光を前記検出部により検出し、当該検出結果を示す第2測定データを取得する第2測定データ取得ステップと、
前記第2測定データ取得ステップにおいて取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第2測定データに基づいて、前記測定対象物に含有される前記複数種類の蛍光色素それぞれの含有濃度を解析する解析ステップと、
を備えることを特徴とする蛍光検出方法。 - 前記検出時間設定ステップにおいて、前記第1測定データ取得ステップにおいて取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第1測定データの比に対して逆比例関係となるように、前記複数の検出波長帯域それぞれにおける検出時間の比を設定する、ことを特徴とする請求項6記載の蛍光検出方法。
- 前記解析ステップにおいて、前記複数種類の蛍光色素のうちの個々の種類の蛍光色素を単独で含む基準試料それぞれで発生した蛍光を前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて前記検出部により検出して得られた基準データと、前記第2測定データ取得ステップにおいて取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第2測定データとに基づいて、前記測定対象物に含有される前記複数種類の蛍光色素それぞれの含有濃度を解析する、ことを特徴とする請求項6記載の蛍光検出方法。
- 前記検出部が、前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて入力光強度に対する出力データのゲインが可変であり、
前記第2測定データ取得ステップにおいて、前記検出時間設定ステップにおける比較結果に基づいて前記複数の検出波長帯域のうち何れかの検出波長帯域において前記検出部のゲインを調整して、前記測定対象物で発生する蛍光を前記検出部により検出する、
ことを特徴とする請求項6記載の蛍光検出方法。 - 前記検出部が、前記複数の検出波長帯域のうちの個々の検出波長帯域に対応する検出素子を含む、ことを特徴とする請求項6記載の蛍光検出方法。
- 複数種類の蛍光色素が含有された測定対象物で発生する蛍光を検出する処理をコンピュータに実行させるための蛍光検出プログラムであって、
複数の検出波長帯域それぞれにおいて入力光強度を検出して当該検出結果を示すデータを出力するともに前記複数の検出波長帯域それぞれにおける当該検出時間が可変である検出部を用いて、前記複数の検出波長帯域それぞれにおいて、前記測定対象物で発生する蛍光を略同一の検出時間に亘って検出し、当該検出結果を示す第1測定データを取得する第1測定データ取得ステップと、
前記第1測定データ取得ステップにおいて取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第1測定データを互いに比較して、その比較結果に基づいて、前記複数の検出波長帯域のうち入力光強度が最も低い検出波長帯域(以下「特定検出波長帯域」という。)を選択して、前記複数の検出波長帯域のうち前記特定検出波長帯域における検出時間を他の検出波長帯域における検出時間より長く設定する検出時間設定ステップと、
前記検出時間設定ステップにおいて設定された前記複数の検出波長帯域それぞれの検出時間に亘って、前記測定対象物で発生する蛍光を前記検出部により検出し、当該検出結果を示す第2測定データを取得する第2測定データ取得ステップと、
前記第2測定データ取得ステップにおいて取得された前記複数の検出波長帯域それぞれについての第2測定データに基づいて、前記測定対象物に含有される前記複数種類の蛍光色素それぞれの含有濃度を解析する解析ステップと、
をコンピュータに実行させるための蛍光検出プログラム。 - 請求項11記載の蛍光検出プログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
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