JP2007291083A - 口腔用組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】フソバクテリウム菌のう蝕原因菌や歯周病関連細菌に対する強力な共凝集抑制作用を有するとともに、フソバクテリウム属細菌を特異的に殺菌することにより歯垢の形成を防止し、むし歯や歯周病を予防する口腔用組成物を安価に提供する。
【解決手段】式（Ａ）

（式中、Ｒは置換されてもよい炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基を示し、Ｇはガラクトース残基を示し、Ｅは水素原子又はメチル基を示し、ｍは０〜２００の整数を示し、ｎは１〜３０の整数を示す
。）で表される化合物、及びノニオン性殺菌剤を含有する口腔用組成物。
【選択図】なし

Description

本発明は、むし歯予防効果及び歯周病予防効果に優れる口腔用組成物に関する。

う蝕は、病原性細菌の歯面への付着、定着により発症へと向かう口腔内感染症としての一面を有する。口腔細菌の歯面への定着は、先ず、唾液の薄膜（ペリクル）によって覆われたエナメル質表面に、ストレプトコッカス オラリス、ストレプトコッカス サンガイス、ストレプトコッカス ゴードニィ、アクチノマイセス ナエスランディ等の初期定着細菌の吸着から始まる。そして、これら初期定着細菌は増殖に伴って互いに共凝集（ｃｏ−ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ）を起こし、歯垢（プラーク）の形成を開始する。次いで、プラークの成熟化に伴い、微生物菌叢が通性嫌気性菌から偏性嫌気性菌へと遷移し、フソバクテリウム ヌクレアタムに代表される偏性嫌気性菌が初期定着細菌に共凝集する。そして、当該フソバクテリウム ヌクレアタムにアクチノバシルス アクチノマイセテムコミタンス、ポルフィロモナス ジンジバリス、プレヴォテラ インターメディア等の歯周病関連細菌がさらに共凝集し、定着すると考えられている。さらに、Ｔａｋｅｍｏｔｏらは、う蝕関連細菌であるストレプトコッカス ミュータンス、ストレプトコッカス ソブリナス等もフソバクテリウム ヌクレアタムと共凝集することから、同様の定着機序を有することを示唆した（非特許文献１）。

斯かる共凝集は、細菌同士のレクチン・レセプター型相互作用、非特異的静電気的相互作用や粘着性多糖合成による付着作用、非特異性疎水的相互作用等によって引き起こされるものである。プラークを形成する口腔細菌は、腸内細菌や皮膚常在細菌と異なり口腔特有の菌叢からなることから、病原性細菌の歯面への定着においては、レクチン・レセプター型相互作用が特に重要な役割を果たしていると考えられている。このレクチン・レセプター型相互作用とは、通常細菌表層結合タンパク質であるアドヘシンと他の細菌表層上のレセプター構造との立体特異的な相互作用であり、その多くは炭化水素特異的結合を呈する。

歯垢を形成する細菌の最も一般的なレクチンはラクトース感受性アドヘシンであり、ラクトース中のβ−ガラクトシドを特異的に認識する。ラクトース感受性アドヘシンは広汎な口腔細菌に存在し、アクチノマイセス属、ストレプトコッカス属、ポルフィロモナス属、プレヴォテラ属、フソバクテリウム属、ヘモフィリス属、カプノサイトファーガ属、ヴェイロネラ属、ナイセリア属、セレノモナス属などの共凝集に関与している（非特許文献２）。

とりわけ、フソバクテリウム属細菌は共凝集に係わるラクトース感受性アドヘシンを多数発現し、ペリクルに吸着した初期定着菌とストレプトコッカス ソブリナスなどのう蝕原因菌や、ポルフィロモナス ジンジバリスやプレヴォテラ インターメディアなどの推定歯周病関連細菌とを“橋架け”する細菌として重要視されている（非特許文献２）。

そして口腔内感染症の予防手段としては、病原性細菌の歯面への定着を阻害することが有力であると考えられており、例えばガラクトースやラクトースを用いて歯垢の歯牙付着抑制効果を図ること（特許文献１）、抗菌性を有する炭素数１０〜１６の脂肪酸の少なくとも１種とフルクトース又はガラクトースとがエステル結合した脂肪酸糖エステルを用いること（特許文献２）等が報告されている。

さらに、フソバクテリウム ヌクレアタム菌を口腔から排除する方法として、３−メチル−５−フェニル−１−ペンタノールなど当該菌に対する特異的抗菌性物質の利用（特許文献３）や、抗フソバクテリウム ヌクレアタム夾膜卵黄抗体の利用（特許文献４）が提案されている。
特公昭５８−１１９２４号公報 特開２０００−１５９６７５号公報 特開平９−１１０６６２号公報 特開平１０−１５２４２５号公報 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｖｏｌ．３０、ｐ２５２−２５７ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，Ｖｏｌ．５７，ｐ３１９４−３２０３

特許文献１に記載のガラクトースやラクトースは口内で口腔細菌によりう蝕の原因となる酸を生成する点で好ましくなく、特許文献２に記載の脂肪酸糖エステルも、口腔用組成物の配合成分や口腔内において加水分解を受けると、フルクトースやガラクトースを生成するため、同様の問題があった。特許文献３に記載のフソバクテリウム ヌクレアタム菌に特異的な抗菌剤として挙げられているものは香料成分であり、独特の風味により口腔用組成物の嗜好性が低下し、特許文献４に記載の卵黄抗体は分子量の大きなＩｇＹ抗体のため、バイオフィルム内部のフソバクテリウム菌に作用し難いという問題があった。
従って、本発明は、フソバクテリウム菌のう蝕原因菌や歯周病関連細菌に対する強力な共凝集抑制作用を有するとともに、フソバクテリウム属細菌を特異的に殺菌し、歯垢の形成を防止する口腔用組成物を提供することにある。

そこで本発明者は、種々の成分について、フソバクテリウム属細菌と、う蝕原因菌もしくは歯周病原菌との共凝集の抑制効果について検討したところ、式（Ａ）又は（Ｃ）で表される化合物が強力な共凝集抑制作用を有することを見出した。さらに検討したところ、当該式（Ａ）又は（Ｃ）で表される化合物がノニオン性殺菌剤のフソバクテリウム属細菌に対する殺菌効果を顕著に増強させるという全く予想外の効果を有し、これらの両者を配合すればフソバクテリウム属細菌を強力に殺菌でき、う蝕予防及び歯周病予防に有用な口腔用組成物が得られることを見出した。

本発明は、式（Ａ）

（式中、Ｒは置換されてもよい炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を示し、Ｇはガラクトース残基を示し、Ｅは水素原子又はメチル基を示し、ｍは０〜２００の整数を示し、ｎは１〜３０の整数を示す。）で表される化合物、並びにノニオン性殺菌剤を含有する口腔用組成物を提供するものである。

また、本発明は、式（Ｃ）

（式中、Ｒは置換されてもよい平均炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を示し、Ｇはガラクトース残基を示し、Ｅは水素原子又はメチル基を示し、ｘは０〜２００の数を示し、ｙは１〜３０の数を示す。）で表される化合物、ノニオン性殺菌剤を含有する口腔用組成物を提供するものである。

本発明の組成物を用いれば、歯垢中に存在するフソバクテリウム属細菌等のう蝕原因菌や歯周病関連細菌に対する共凝集を抑制させるとともに、これら病原性菌が定着する足場となるフソバクテリウム属細菌自身を殺菌するため、むし歯や歯周病等の予防が可能となる。
式（Ａ）又は（Ｃ）で表される化合物とノニオン性殺菌剤を組み合せた場合のフソバクテリウム属細菌に対する殺菌効果の増強作用は、式（Ａ）又は（Ｃ）で表される化合物の有する共凝集抑制作用とノニオン性殺菌剤の殺菌作用だけでは説明できない。なぜなら、共凝集抑制作用を有するガラクトースやラクトースと、ノニオン性殺菌剤とを組み合せた場合には、フソバクテリウム属細菌に対する殺菌効果の増強は生じないからである。従って、上記式（Ａ）又は（Ｃ）で表される化合物とノニオン性殺菌剤を組み合せた場合の特有の効果と考えられる。

本発明に用いられる式（Ａ）で表される化合物は、炭素数６〜１６のアルキル基に直接又は１つ以上のオキシエチレン基若しくはオキシプロピレン基を介して、１つ以上のガラクトース残基がα−配置もしくはβ−配置でエーテル結合した化合物である。当該アルキル基としては、直鎖又は分岐鎖のいずれでもよく、具体的にはｎ−ヘキシル基；ｎ−ヘプチル基、１，４−ジメチルペンチル基、３−メチルヘキシル基、４−メチルヘキシル基、５−メチルヘキシル基等の各種ヘプチル基；ｎ−オクチル基、１，１，２−トリメチルペンチル基、１，１，４−トリメチルペンチル基、２，２−ジメチルヘキシル基、１−メチルヘプチル基、５−メチルヘプチル基、２−エチルヘキシル基等の各種オクチル基；ｎ−ノニル基、１−メチルオクチル基、６−メチルオクチル基、８−メチルオクチル基等の各種ノニル基；ｎ−デシル基、３，７−ジメチルオクチル基、１−メチルノニル基、８−メチルノニル基等の各種デシル基；ｎ−ウンデシル基、１−メチルデシル基、２−メチルデシル基、９−メチルデシル基等の各種ウンデシル基；ｎ−ドデシル基、２−ブチルオクチル基、１−メチルウンデシル基、１０−メチルウンデシル基等の各種ドデシル基；ｎ−トリデシル基、１−メチルドデシル基、１１−メチルドデシル基等の各種トリデシル基；ｎ−テトラデシル基、１−メチルトリデシル基、１２−メチルトリデシル基等の各種テトラデシル基；ｎ−ペンタデシル基、１−メチルテトラデシル基、１３−メチルテトラデシル基等の各種ペンタデシル基；ｎ−ヘキサデシル基、２−ヘキシルデシル基、１−メチルペンタデシル基、１４−メチルペンタデシル基等の各種ヘキサデシル基等が挙げられる。これらアルキル基のうち、香味、口腔内での滞留性、起泡性の面から、炭素数８〜１４が好ましく、特に炭素数１０〜１４の直鎖又は分岐鎖、もしくはそれらの混合物が好ましく、直鎖ではドデシル基（ラウリル基）単独のアルキル基組成、もしくはデシル基、ドデシル基、テトラデシル基からなる混合アルキル基組成が特に好ましく、分岐鎖では２−エチルヘキシル基単独のアルキル基組成、もしくは分岐デシル異性体からなる混合アルキル基組成、直鎖及び分岐鎖の混合物としてはウンデシル基及び２−メチルデシル基の混合物が特に好ましい。また、アルキル基の１個以上の水素原子は、置換基で置換されてもよく、当該置換基としては、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子（例、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素など）、ニトロ基、炭素数１〜６のハロアルキル基、炭素数１〜６のハロアルコキシ基が挙げられる。
また、本発明で用いられる式（Ａ）で表される化合物のガラクトースは、ピラノース型、フラノース型又はそれらの混合物のいずれも含まれる。ｍは、０〜２００の整数を示すが、共凝集抑制作用の面から０〜１２が好ましく、０〜３がより好ましい。ガラクトースの縮合度を示すｎは、１〜３０の整数であるが、起泡性の面から１〜６が好ましく、１〜３がより好ましい。

また、本発明に用いられる化合物は、式（Ａ）においてＥが水素原子である、式（Ｂ）

（式中、Ｒは置換されてもよい炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を示し、Ｇはガラクトース残基を示し、ｍは０〜２００の整数を示し、ｎは１〜３０の整数を示す。）で表される化合物が好ましい。

また、本発明で用いられる化合物は、２種類以上の化合物を含む混合物であってもよい。かかる混合物である式（Ｃ）において、Ｒの置換されてもよいアルキル基は平均炭素数６〜１６のアルキル基であるが、香味、口腔内での滞留性、起泡性の面から好ましくは平均炭素数１０〜１４である。平均重合度ｘは０〜２００の数であるが、０〜１２の数が好ましく、０〜３の数がより好ましい。ガラクトースの平均縮合度ｙは１〜３０の数であるが、共凝集抑制作用の面から１〜６の数が好ましく、１〜３の数がより好ましい。尚、ガラクトースの平均縮合度ｙは、ゲル浸透クロマトグラフィーなどの分析法から得られる各縮合度の成分の組成をもとに算出することができる。例えば、ガラクトースの縮合度1〜ｚのアルキルガラクトシド混合物の場合、縮合度ｚのガラクトシドのモル比がa_z（a₁＋a₂＋a₃＋・・・＋a_z＝1）であるとすると、ガラクトースの平均縮合度はｙ＝a₁×1＋a₂×2＋・・・＋a_z×z＝Σ(a_z×z)で表される。
また、オキシエチレン基又はオキシプロピレン基の平均重合度ｘやＲで表されるアルキル基の平均炭素数も同様にして算出することができる。

式（Ａ）〜（Ｃ）で表される化合物は、堀らの方法（薬学雑誌，Ｖｏｌ．７９，Ｎｏ．１，ｐ８０−８３）や後述する参考例１〜６に記載のガラクトースとアルコールとの合成により製造することができる。

式（Ａ）〜（Ｃ）で表される化合物は、常在菌であるフソバクテリウム属細菌とう蝕原因菌との共凝集を強力に抑制する。ここで、フソバクテリウム属細菌としては、フソバクテリウム ヌクレアタム、フソバクテリウム ルージー等が挙げられる。また、う蝕原因菌としては、ストレプトコッカス ミュータンス、ストレプトコッカス ソブリナス等が挙げられる。歯周病関連細菌としては、アクチノバチルス アクチノミセテムコミタンスやポルフィロモナス ジンジバリス、プレヴォテラ インターメディアなどが挙げられる。

式（Ａ）〜（Ｃ）で表される化合物の本発明口腔用組成物全体中の含有量は０．０５〜２０質量％が好ましく、より好ましくは０．１〜１０質量％、さらに好ましくは０．２〜５質量％である。

本発明で使用されるノニオン性殺菌剤としては、フェノール系殺菌剤、トロポロン系殺菌剤、ハロゲン化カルバニリド系殺菌剤が挙げられる。前記フェノール系殺菌剤としては、フェノール、クレゾール、トリクロサン（5-chloro-2-[2,4-dichlorophenoxyl]phenol）、イソプロピルメチルフェノール（3-Methyl-4-isopropylphenol）、チモール(2-Isopropyl-5-Methylphenol)が挙げられる。前記トロポロン系殺菌剤としては、β−ツヤブリシン（ヒノキチオール）、β−ドラブリン、γ−ツヤブリシン、α−ツヤブリシン、４−アセチルトロポロンが挙げられる。前記ハロゲン化カルバニリド系殺菌剤としては、トリクロロカルバニリド（3,4,4'-Trichlorocarbanilide）が挙げられる。これらノニオン性殺菌剤の本発明口腔用組成物全体中の含有量は０．００１〜０．５質量％が好ましく、より好ましくは０．００５〜０．２質量％、さらに好ましくは０．０１〜０．１質量％である。

また、本発明者の検討によれば、炭素数４〜１２の糖アルコールは、フソバクテリウム属細菌とう蝕原因菌との結合を遅延させる作用を有し、かつ口腔内で酸を生成しない。すなわち、これらの糖アルコールを併用することにより、本発明の共凝集抑制剤としての効果を向上させることができる。従って、本発明の口腔用組成物は、共凝集抑制効果の面から炭素数４〜１２の糖アルコールを含有することが好ましい。炭素数４〜１２の糖アルコールとしては、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、パラチニット、ラクチトール等を挙げることができる。炭素数４〜１２の糖アルコールの本発明口腔用組成物全体中の含有量は４〜６０質量％が好ましく、さらに好ましくは１０〜５０質量％である。

式（Ａ）〜（Ｃ）で表される化合物と炭素数４〜１２の糖アルコールとの併用は香味の面からも有用である。炭素数４〜１２の糖アルコールは、化合物（Ａ）〜（Ｃ）１質量部に対して１〜５００質量部含有することが好ましく、特に練歯磨剤では５〜４００質量部、洗口剤では１０〜２００質量部含有することが好ましい。

本発明の口腔用組成物には、前記成分のほか、その形態に応じて種々の成分を配合することができる。配合可能な成分として、例えば湿潤剤、粘結剤、歯質強化剤、殺菌剤、ｐＨ調整剤、酵素類、抗炎症剤、血行促進剤、甘味剤、防腐剤、着色剤、色素類、香料等を適宜使用することができる。また、本発明の効果を損なわない限り、式（Ａ）〜（Ｃ）で表される化合物以外の界面活性剤を配合することもできる。

本発明の口腔用組成物は、式（Ａ）〜（Ｃ）で表される化合物及び前記ノニオン性殺菌剤、さらに必要により前記糖アルコールを配合し、常法により製造することができ、粉歯磨、液状歯磨、練歯磨、潤製歯磨、口腔パスタ等のペースト状洗浄剤、洗口液、マウスウォッシュ等の液状洗浄剤、うがい用錠剤、歯肉マッサージクリーム、チューインガム、トローチ、キャンディ等の食品等の形態とすることができる。

参考例１ α，β−ラウリルガラクトシドの製造
Ｄ−ガラクトースとラウリルアルコールを触媒量のパラトルエンスルホン酸１水和物存在下、加熱、減圧条件で脱水しながら反応させた。得られた混合物をシリカゲルカラムにより精製し、ガラクトース縮合度１〜３のラウリルガラクトシドを得た。ゲル浸透クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、¹Ｈ−ＮＭＲによる分析の結果、得られたラウリルガラクトシドのガラクトースの平均縮合度は１．４８であり、成分中のラウリルモノガラクトシドの組成はピラノシド／フラノシド＝８３／１７、そのうちピラノシドのα／β比は７５／２５であった。これをα，β−ラウリルガラクトシドとして後述の参考例及び実施例に用いた。

参考例２ β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシドの製造
ペンタアセチル−Ｄ−ガラクトースとトリオキシエチレンモノラウリルエーテルを三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体存在下、ジクロロメタン中、室温で反応させた。溶媒を減圧下で留去した後、シリカゲルカラムで精製することによりβ−トリオキシエチレンラウリル−２，３，４，６−テトラアセチルガラクトシドを得た。これをナトリウムメトキシドにより脱アセチル化して、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシドを得た。¹Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）０．８８（ｔ，３Ｈ），１．２−１．３５（ｍ，１８Ｈ），１．５７（ｍ，２Ｈ），３．３５−３．８（ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，１３Ｈ），３．８４（ｔ，２Ｈ），３．９７−４．０７（ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，３Ｈ），４．１７（ｄ，１Ｈ），４．２９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．４１（ｄ，１Ｈ）。これをβ−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド（ガラクトース縮合度は１）として後述の参考例及び実施例に用いた。

参考例３ α−及びβ−オクチルガラクトシドの製造
参考例１と同様にオクチルアルコールを原料として製造したα，β−オクチルガラクトシドをカラムにより精製し、α−オクチルガラクトシド及びβ−オクチルガラクトシドを得た。α体：０．７８（ｔ，３Ｈ），１．１−１．３（ｍ，１０Ｈ），１．４７（ｍ，２Ｈ），３．４５−３．７０（ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，７Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）、β体：０．８６（ｔ，３Ｈ），１．２−１．３５（ｍ，１０Ｈ），１．５１（ｍ，２Ｈ），３．２５−３．７５（ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，７Ｈ），４．０９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）。これらをそれぞれα−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド（いずれもガラクトース縮合度は１）として後述の参考例及び実施例に用いた。

参考例４ α，β−２−エチルヘキシルガラクトシドの製造
Ｄ−ガラクトースと２−エチルヘキサノールを触媒量のパラトルエンスルホン酸１水和物存在下、加熱、減圧条件で脱水しながら反応させた。反応後、水酸化ナトリウム水溶液を加えて触媒を中和し、得られた混合物からろ過により未反応のＤ−ガラクトースを除去した。ろ液から未反応のアルコールを減圧下で留去することで２−エチルヘキシルガラクトシドを得た。ゲル浸透クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、¹ＨＮＭＲによる分析の結果、得られた２−エチルヘキシルガラクトシドのガラクトースの平均縮合度は１．１６であり、組成物中のモノガラクトシドの組成はピラノシド／フラノシド＝４０／６０、そのうちピラノシドのα／β比は７０／３０であった。これを２−エチルヘキシルガラクトシドとして後述の参考例及び実施例に用いた。

参考例５ α，β−デシルガラクトシドの製造
参考例４の２−エチルヘキサノールをデカノール異性体混合物（デカノール、協和発酵ケミカル（株））に変更した以外は参考例４に従い、デシルガラクトシドを得た。得られたデシルガラクトシドのガラクトースの平均縮合度は１．１５であり、組成物中のモノガラクトシドの組成はピラノシド／フラノシド＝４６／５４、そのうちピラノシドのα／β比は６７／３３であった。これをα，β−デシルガラクトシドとして後述の参考例及び実施例に用いた。

参考例６ α，β−ウンデシルガラクトシドの製造
参考例４の２−エチルヘキサノールをウンデカノール異性体混合物（ダイヤドール１１、三菱化学（株））に変更した以外は参考例４に従い、ウンデシルガラクトシドを得た。得られたウンデシルガラクトシドのガラクトースの平均縮合度は１．１６であり、組成物中のモノガラクトシドの組成はピラノシド／フラノシド＝５２／４８、そのうちピラノシドのα／β比は７１／２９であった。これをα，β−ウンデシルガラクトシドとして後述の参考例及び実施例に用いた。

参考例７（共凝集抑制効果）
（１）使用菌株
フソバクテリウム属細菌としてフソバクテリウム ヌクレアタム ポリモルヒュムＡＴＣＣ１０９５３株（以下Ｆｎｐ菌）、フソバクテリウム ヌクレアタム フジフォームＪＣＭ１１０２４（以下Ｆｎｆ菌）、フソバクテリウム ペリオドンティカムＡＴＣＣ３３６９３株（以下Ｆｐ菌）、フソバクテリウム ヴァリウムＡＴＣＣ８５０１株（以下Ｆｖ菌）、フソバクテリウム モルティフェルムＡＴＣＣ２５５５７株（以下Ｆｍ菌）を用いた。共凝集反応の対細菌としては、う蝕原因菌としてストレプトコッカス ソブリナス Ｂ１３株（以下Ｓｓ菌）を、歯周病関連細菌としてアクチノバチラス・アクチノミセテムコミタンスＪＣＭ２４３４株（以下Ａａ菌）を用いた。

（２）共凝集測定法
Ｓｓ菌及びＡａ菌は、ブレインハートインフュージョン液体培地に植菌後３７℃の嫌気条件下にて２４時間培養した。フソバクテリウム属細菌は、ＧＡＭブイヨン液体培地に植菌後３７℃の嫌気条件下で４８時間培養した。培養終了後、遠心分離にて集菌し、ｐＨ８．０の共凝集用緩衝液（１ｍＭ トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、０．１ｍＭ 塩化カルシウム、０．１ｍＭ 塩化マグネシウム、０．１５Ｍ 塩化ナトリウム）で２回洗浄した。洗浄後、フソバクテリウム属細菌は６００ｎｍの波長における濁度（ＯＤ：ＵＶ−１６００、UV-Visible spectrophotometer（（株）島津製作所））が１．０になるよう、Ｓｓ菌及びＡａ菌は０．５になるよう共凝集用緩衝液で調整し菌懸濁液を得た。式（Ａ）で表される化合物など試験物質は１．６％（wt/vol％）になるように共凝集用緩衝液で予め調整した。比較物質として、ラクトース、ガラクトース、スクロース、グルコース、マルトース（以上、和光純薬工業(株)）、β−ラウリルマルトシド（同仁製薬(株)）、Ｃ１０：Ｃ１４アルキルグルコシド(コグニスジャパン)を用いた共凝集試験は、丸底９６穴マイクロプレート（ＴＰＰ）を用い、いずれかのフソバクテリウム属細菌懸濁液１００μＬ、Ｓｓ菌もしくはＡａ菌懸濁液５０μＬ及び１．６％（wt/vol％）試験物質溶液５０μＬを順次混和した。室温にて一昼夜静置後、試験物質を添加していない対照群において凝集塊の生じたものを共凝集能あり（※）とし、凝集塊の生じなかったものは共凝集能なし（×）とした。共凝集抑制活性の有無は、対照群において共凝集活性の認められた組み合わせに試験物質を添加後、凝集塊の沈殿が認められなかったものについて共凝集抑制活性有り（＋）、認められたものを共凝集抑制活性無し（−）とした。

（３）結果
表１に示すように、供試したフソバクテリウム属細菌の中で、Ｆｎｐ菌、Ｆｎｆ菌及びＦｐ菌にＳｓ菌やＡａ菌との共凝集能が認められ、病原菌の定着に大きな影響があるフソバクテリウム属細菌と考えられた。Ｆｖ菌やＦｍ菌はこれらの菌に対する共凝集能が認められず、ガラクトース感受性アドヘシンを発現していないと考えられた。
Ｆｎｐ菌、Ｆｎｆ菌、Ｆｐ菌の共凝集能の認められたフソバクテリウム３菌株について、共凝集抑制試験を行った結果を表２〜４に示した。スクロース、グルコース、マルトース、Ｃ１０：１４アルキルグルコシド、β−ラウリルマルトシドでは共凝集による明確な凝集塊が認められたが、α，β−ラウリルガラクトシド、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド、α−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド、α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド、α，β−デシルガラクトシド、α，β−ウンデシルガラクトシドはラクトースやガラクトース同様に共凝集抑制活性を有することが明らかとなった。

実施例１（フソバクテリウムに対する殺菌力増強作用）
（１）使用菌株
参考例４と同様の菌株を用いた。

（２）培養及び殺菌力試験
培地としては、フソバクテリウム属細菌はＧＡＭブイヨン（日水製薬（株））で、Ｓｓ菌及びＡａ菌は、ブレインハートインフュージョンブロス（ベクトンディッキンソン社）を用いた。アネロコロンビアウサギ血液寒天培地にて２４〜３６時間培養した菌を、上記液体培地にて３７℃、１０％ＣＯ₂，１０％Ｈ₂，８０％Ｎ₂の条件下で６００ｎｍの波長における濁度が０．５〜１程度になるよう対数増殖期後期まで培養した後、５，０００ｒｐｍ、５分遠心分離を行い集菌した。その後、予備嫌気した生理食塩水（大塚製薬（株））で洗浄後、コロニー形成ユニットが１×１０⁶〜１×１０⁸ＣＦＵ/ｍＬの範囲になるように希釈した。

供試物質を０．４％（wt/vol％）、ノニオン性殺菌剤を所定濃度になるように溶解した液体培地を、供試物質０．４％（wt/vol％）を含む液体培地で２倍ずつ順次希釈し、あらかじめ丸底９６穴プレートに０．２ｍＬずつ分注した。その後、菌懸濁液を０．０２ｍＬ添加した。上記条件下で４８時間培養し、菌の生育が認められなかったウェルの中で最もノニオン性殺菌剤濃度が低い終濃度（ｐｐｍ）を最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）とした。

α，β−ラウリルガラクトシド、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド、α−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド、α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド、α，β−デシルガラクトシド、α，β−ウンデシルガラクトシドの７成分には、共凝集能を有するＦｎｐ菌、Ｆｎｆ菌及びＦｐ菌に対して選択的なトリクロサンの殺菌力増強効果を認めた。Ｆｖ菌やＦｍ菌のような共凝集能を持たないフソバクテリウム属細菌や、Ａａ菌のような属の異なる細菌に対して殺菌力増強効果は認められなかった。スクロース、グルコース、マルトース、Ｃ１０：１４アルキルグルコシド、β−ラウリルマルトシドのような共凝集抑制能の認められない化合物には殺菌力増強効果は認められなかった。ガラクトースやラクトースのように炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を構造中に含まない化合物は、共凝集抑制能があるにも係わらず殺菌力増強効果は認められなかった。

α，β−ラウリルガラクトシド、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド、α−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド、α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド、α，β−デシルガラクトシド、α，β−ウンデシルガラクトシドの７成分には、共凝集能を有するＦｎｐ菌、Ｆｎｆ菌及びＦｐ菌に対して選択的なイソプロピルメチルフェノールの殺菌力増強効果を認めた。しかし、Ｆｖ菌やＦｍ菌のような共凝集能を持たないフソバクテリウム属細菌や、Ａａ菌のような属の異なる細菌に対して殺菌力増強効果は認められなかった。スクロース、グルコース、マルトース、Ｃ１０：１４アルキルグルコシド、β−ラウリルマルトシドのような共凝集抑制能の認められない化合物には殺菌力増強効果は認められなかった。ガラクトースやラクトースのように炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を構造中に含まない化合物は、共凝集抑制能があるにも係わらず殺菌力増強効果は認められなかった。
なお、今回のＭＩＣの測定において設定した殺菌剤濃度が２倍希釈系列のため、ＭＩＣ値の差が２倍以内の結果については、実験誤差の範囲内と考えられる。

α，β−ラウリルガラクトシド、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド、α−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド、α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド、α，β−デシルガラクトシド、α，β−ウンデシルガラクトシドの７成分には、共凝集能を有するＦｎｐ菌、Ｆｎｆ菌及びＦｐ菌に対して選択的なヒノキチオールの殺菌力増強効果を認めた。しかし、Ｆｖ菌やＦｍ菌のような共凝集能を持たないフソバクテリウム属細菌や、Ａａ菌のような属の異なる細菌に対して殺菌力増強効果は認められなかった。スクロース、グルコース、マルトース、Ｃ１０：１４アルキルグルコシド、β−ラウリルマルトシドのような共凝集抑制能の認められない化合物には殺菌力増強効果は認められなかった。ガラクトースやラクトースのように炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を構造中に含まない化合物は、共凝集抑制能があるにも係わらず殺菌力増強効果は認められなかった。

（３）結果
α，β−ラウリルガラクトシド、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド、α−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド、α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド、α，β−デシルガラクトシド、α，β−ウンデシルガラクトシドの各菌に対するＭＩＣは４０００ｐｐｍ（０．４％（wt/vol％））であり殺菌能は極めて低かった。トリクロサンの各菌に対するＭＩＣは０．５〜８ｐｐｍ、ヒノキチオールは８〜３２ｐｐｍ、イソプロピルメチルフェノール（３−メチル−４−イソプロピルフェノールを使用）は２５６〜５１２ｐｐｍであった。今回のＭＩＣの測定において設定した殺菌剤濃度は２倍希釈系列のため、ＭＩＣ値の差が２倍以内の結果については、実験誤差の範囲内と考えられる。これに、０．１％（wt/vol％）のα，β−ラウリルガラクトシド、β−トリオキシエチレンラウリルガラクトシド、α−オクチルガラクトシド、β−オクチルガラクトシド、α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド、α，β−デシルガラクトシド、あるいは、α，β−ウンデシルガラクトシドを加えた時のＦｎｐ菌、Ｆｎｆ菌、Ｆｐ菌に対するＭＩＣは１／４〜１／１６となり、これらのガラクトース誘導体はノニオン性殺菌剤の殺菌効果を顕著に高めた。しかし、共凝集能を持たない、すなわちガラクトース感受性アドヘシンのないＦｖ菌やＦｍ菌、フソバクテリウム属以外の細菌であるＳｓ菌、Ａａ菌に対してＭＩＣは変わらず、殺菌効果を高めなかった。すなわち、本発明におけるガラクトース誘導体とノニオン性殺菌剤の組み合わせは、共凝集能を有するフソバクテリウム属細菌を選択的に殺菌できることが示された。
一方、スクロース、グルコース、マルトース、Ｃ１０：１４アルキルグルコシド、β−ラウリルマルトシドのような共凝集抑制能の認められない化合物には殺菌力増強効果は認められなかった。さらにガラクトース及びラクトース等共凝集抑制能があるにも係わらず炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を構造中に含まない化合物とノニオン性殺菌剤との組み合せでも、フソバクテリウム属細菌に対する殺菌効果の増強作用は認められなかった。

実施例２
本発明の練歯磨の処方は、以下の通りである。
ソルビトール ３５ 質量％
無水ケイ酸 ２０ 質量％
濃グリセリン ５ 質量％
α，β−ラウリルガラクトシド ５ 質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム １ 質量％
歯磨き用香料 １ 質量％
フッ化ナトリウム ０．２質量％
サッカリンナトリウム ０．２質量％
トリクロサン ０．０３質量％
精製水 残部
計 １００ 質量％

実施例３
本発明の練歯磨の処方は、以下の通りである。
ソルビトール ２８ 質量％
無水ケイ酸 ２０ 質量％
濃グリセリン ８ 質量％
エリスリトール ５ 質量％
ラウリル硫酸ナトリウム １．２質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム １ 質量％
歯磨き用香料 １ 質量％
α，β−ラウリルガラクトシド ０．５質量％
フッ化ナトリウム ０．２質量％
サッカリンナトリウム ０．２質量％
イソプロピルメチルフェノール ０．１質量％
精製水 残部
計 １００ 質量％

実施例４
本発明の練歯磨の処方は、以下の通りである。
ソルビトール ２５ 質量％
無水ケイ酸 ２０ 質量％
プロピレングリコール ６ 質量％
ラクチトール ５ 質量％
ラウリル硫酸ナトリウム １．２重量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム １ 質量％
歯磨き用香料 １ 質量％
α，β−２−エチルヘキシルガラクトシド ０．５質量％
フッ化ナトリウム ０．２質量％
サッカリンナトリウム ０．２質量％
ヒノキチオール ０．１質量％
精製水 残部
計 １００ 質量％

実施例５
本発明の練歯磨の処方は、以下の通りである。
ソルビトール ２８ 質量％
ポリオキシエチレン(200)ポリオキシプロピレン(40)共重合体 １６ 質量％
無水ケイ酸 １２ 質量％
パラチニット １０ 質量％
濃グリセリン ８ 質量％
ラウリル硫酸ナトリウム １．２質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５質量％
歯磨き用香料 １ 質量％
α，β−ウンデシルガラクトシド ０．８質量％
モノフルオロリン酸ナトリウム ０．７質量％
サッカリンナトリウム ０．２質量％
トリクロサン ０．０３質量％
精製水 残部
計 １００ 質量％

実施例６
本発明の練歯磨の処方は、以下の通りである。
ソルビトール ２８ 質量％
無水ケイ酸 １５ 質量％
ポリエチレングリコール４００ ８ 質量％
キシリトール ５ 質量％
ラウリル硫酸ナトリウム １．２質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム １ 質量％
歯磨き用香料 １ 質量％
α，β−デシルガラクトシド ０．１質量％
フッ化ナトリウム ０．２質量％
サッカリンナトリウム ０．２質量％
イソプロピルメチルフェノール ０．１質量％
精製水 残部
計 １００ 質量％

実施例７
本発明のマウスウォッシュの処方は、以下の通りである。
エタノール １５ 質量％
キシリトール ７ 質量％
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ２ 質量％
サッカリンナトリウム ０．５質量％
β−オクチルガラクトシド ０．２質量％
洗口剤用香料 ０．２質量％
安息香酸ナトリウム ０．１質量％
トリクロサン ０．０２質量％
精製水 残部
計 １００ 質量％

Claims (4)

1. 式（Ａ）
   

   

   （式中、Ｒは置換されてもよい炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を示し、Ｇはガラクトース残基を示し、Ｅは水素原子又はメチル基を示し、ｍは０〜２００の整数を示し、ｎは１〜３０の整数を示す。）で表される化合物、及びノニオン性殺菌剤を含有する口腔用組成物。
2. 式（Ｃ）
   

   

   （式中、Ｒは置換されてもよい平均炭素数６〜１６の直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を示し、Ｇはガラクトース残基を示し、Ｅは水素原子又はメチル基を示し、ｘは０〜２００の数を示し、ｙは１〜３０の数を示す。）で表される化合物、及びノニオン性殺菌剤を含有する口腔用組成物。
3. 前記ノニオン性殺菌剤がフェノール系殺菌剤、トロポロン系殺菌剤又はハロゲン化カルバニリド系殺菌剤である請求項１又は２記載の口腔用組成物。
4. さらに炭素数４〜１２の糖アルコールを含有する請求項１〜３のいずれかに記載の口腔用組成物。