JP2006226986A - カドミウム測定方法およびその前処理装置 - Google Patents
カドミウム測定方法およびその前処理装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006226986A JP2006226986A JP2005235227A JP2005235227A JP2006226986A JP 2006226986 A JP2006226986 A JP 2006226986A JP 2005235227 A JP2005235227 A JP 2005235227A JP 2005235227 A JP2005235227 A JP 2005235227A JP 2006226986 A JP2006226986 A JP 2006226986A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cadmium
- solution
- hydrochloric acid
- sample
- measurement
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
【解決手段】 測定対象物に0.002M〜2Mの塩酸溶液を加えてカドミウムを抽出し、得られた溶液をpH1.5〜2.5に調整し、該溶液をトリ−n−オクチルメチルアンモニウムクロライドが表面に固定化された担体に接触させた後、該担体を0.01Mより大きく0.5M以下の濃度の硝酸と接触させて得られた溶液を中和して測定用試料を得る前処理工程と、抗原抗体反応を利用してカドミウムを測定するイムノアッセイに前記測定用試料を供してカドミウム含有量を分析する測定工程を含むものである。
【選択図】図15
Description
本発明にかかるカドミウム測定方法は、測定対象物からカドミウム以外のマンガン、亜鉛、マグネシウム、銅などの金属を減少あるいは除去してカドミウムを抽出する前処理工程と、抗原抗体反応を利用してカドミウムを測定するイムノアッセイに前記測定用試料を供してカドミウム含有量を分析する測定工程から成る。
このイムノアッセイ法に使用される抗カドミウムモノクローナル抗体としては、錯体を形成したカドミウムを特異的に認識するモノクローナル抗体、例えばSo25A1、So21D5、So26G8が挙げられる。なお、モノクローナル抗体So26G8を産生するハイブリドーマは、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに平成15年2月27日付けで受託番号FERM P−19240として寄託されている。また、モノクローナル抗体Nx22C3も挙げられる。モノクローナル抗体Nx22C3を産生するハイブリドーマは、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに平成16年2月26日付けで受託番号FERM P−19703として寄託されている。これらは、主にカドミウムと反応してカルシウム、マグネシウム、銅、鉄、ニッケル、鉛、亜鉛などのその他の金属とはほとんどまたは全く交差反応しないという特性を示す。尚、イムノアッセイ法において使用するカドミウムに対し特異性をもつ抗体としては、上述のモノクローナル抗体に特に限られず、その他の抗体の使用も可能である。
モノクローナル抗体を用いた免疫学的測定法の一例としてフロー式蛍光センサーを用いた蛍光イムノアッセイについて説明する。図1にその測定原理を図示する。
装置の中には、抗原が固定化された例えばビーズ状の不溶性担体が設置されている。固定化するための不溶性担体としては、例えばポリメチルメタクリル酸、ガラス等からなる固定化用ビーズ、アルギン酸カルシウム粒子等の微細粒子などを用いることができるが、特にこれらに限定されるものではなく、種々の形状、材質のものを使用することができる。このうち、ビーズないし微粒子形状、特に平均粒径50〜100μm程度のビーズないし微粒子形状のものであることが好まれる。
抗体を用いた免疫学的測定法の一例としてイムノクロマトグラフィーについて説明する。この方法は、試料を試験紙上に滴下するだけでカドミウムの有無を数分から数十分の間に判定できるため簡便性に優れ、かつ特別な機械装置を必要としないため非常に安価である。イムノクロマトグラフィーは、キレート剤−タンパク質複合体を利用することにより所望の金属イオンを効果的に検出するものである。尚、免疫クロマトグラフィー装置には、モノクローナル抗体あるいはキレート剤−タンパク質複合体のいずれか一方が固定され、他方が流動可能に供給されれば良い。図2にその実施形態の一例を示す。プラスチックバッキングシート1の上に、メンブレン2と吸収パッド3を一部で重なるように配置し、メンブレン2の先端の試料滴下位置4に試料を滴下すると試料が吸収パッド3に向かってメンブレン2上を流動し、抗金属EDTAモノクローナル抗体あるいはEDTA−タンパク質複合体が固定化された領域5を通過する際に、標識された金属EDTA錯体が抗体に捕捉されあるいは標識された抗金属EDTAモノクローナル抗体がEDTA−タンパク質複合体のEDTAと錯体を形成してその錯体に抗金属EDTAが捕捉されて、固定化領域Bが目視可能となることで検出対象物の有無を簡易に検出可能としている。なお、EDTAなどのキレート剤を直接標識することは困難であるため、キレート剤にタンパク質を付加する前あるいは後に、タンパク質に色素粒子を付加することで間接的にキレート剤を標識するのが好ましい。あるいは、モノクローナル抗体自体を標識することもできる。これらタンパク質の標識は通常行われている手法によって行うことができる。
モノクローナル抗体を試験紙の一部分に試料の流れを横切るように帯状に固定化する。次いで、試験試料中にキレート剤−タンパク質−色素粒子(キレート剤−標識タンパク質)複合体を添加して、カドミウムイオンと結合させたのち試験紙に滴下させる。目的の金属イオンが存在する場合には、金属−キレート剤錯体が形成され、金属錯体と標識タンパク質複合体が試験紙上に帯状に固定化したモノクローナル抗体によって補足され、その結果として色素粒子が帯状に密集して試料中の金属イオンが可視化する。試料中に金属イオンが存在しない場合は、キレート剤−タンパク質−色素粒子複合体は試験紙上に固定化されたモノクローナル抗体に補足されないため、色素粒子により可視化されない。
キレート剤−タンパク質複合体を利用して金属イオンを検出するイムノクロマトグラフィーとして次の方法がある。まず、試験法1における抗体の代わりにキレート剤−タンパク質を試験紙上に帯状に固定化する(図3(B)参照)。色素粒子はモノクローナル抗体に付加する。この標識抗体と試験試料を混合してからともに試験紙に滴下させると(図3(A)、(B)参照)、金属イオンが試験紙上のキレート剤−タンパク質複合体に捕捉され金属−キレート剤錯体を形成し、結果として標識されたモノクローナル抗体が金属−キレート剤錯体を介して試験紙上に補足され、帯状に密集した色素粒子により試料中の金属イオンが可視化される(図3(C)、(D)参照)。
塩酸処理による対象物からのカドミウムの回収率を調査するため、対象物を玄米として、以下の手順により回収率を調査した。予めカドミウム濃度の分かっているカドミウム含量の異なる8種の玄米それぞれ2gに対して、濃度0.02Mの塩酸溶液を米粒がすべて浸かる程度加え、一晩放置した。この玄米をガラス棒にて粉砕後、10%容量(全量20ml)になるように0.02M塩酸溶液を加え4時間振とうした。これら8種の玄米から得られた塩酸溶液中のカドミウム濃度を、ICP発光分光分析装置によって分析した。結果を図4に示す。この結果から、塩酸溶液中のカドミウム濃度(塩酸処理後測定濃度)が予め分かっているカドミウム濃度(添付濃度)とほぼ等しいことが確認された。また、公定法に準じた塩酸−硝酸法によって得られた抽出物のカドミウム濃度についてもICP発光分光分析装置によって分析し、回収率=(本法抽出物のカドミウム濃度/公定法抽出物のカドミウム濃度)として決定した結果、平均で玄米に含まれるカドミウムの95%を溶液中に回収することができた。以上の結果から、塩酸処理により対象物からカドミウムを十分に回収可能であることが確認された。
カドミウムを選択的に分離するためのカラムを以下の手順により作製した。担体として10gのオクタデシルシロキサン系シリカゲル樹脂(ワコーゲルC−100、和光純薬工業)を採用し、塩酸(50ml、6M)で洗浄後、さらに蒸留水で洗浄し乾燥させた。次に、カプリコート(トリ−n−オクチルメチルアンモニウムクロライド:同仁化学)を3重量%含むように有機溶媒(ヘキサン)を調製した。この3重量%カプリコート含有ヘキサン50mlと上記のオクタデシルシロキサン系シリカゲル樹脂10gを遮光性の三角フラスコに入れて、1時間振とうした。十分にカプリコートを樹脂に吸着させた後、ヘキサンで三角フラスコを洗いこみながら樹脂を濾過装置に移し、濾過によって樹脂とヘキサンを分離し、樹脂を80℃に設定したオーブンの中で乾燥させ、カプリコートを樹脂表面に固定した。カプリコートを固定化した樹脂0.3gをクロマトグラフィー用の遮光性のガラス管(直径20mm x 高さ300mm)に充填し、カドミウム分離カラムとした。
カドミウム含有量の異なる数種類の玄米について、従来の方法であるICP発光分析法による機器分析とイムノアッセイ(蛍光光度計によるキネクサ法とイムノクロマトグラフィー法)によって分析した結果を比較した。
カドミウム分離カラムによって分離されたカドミウムのイムノアッセイについて検討した。実施例2で硝酸によって溶出された玄米由来のカドミウム溶液(玄米抽出液)75μlを1μMのEDTAを含むTris−塩酸緩衝液(pH8.0、50mM)925μlによって希釈、中和した。
7.容器
8.試料液流入口
9.試料液流出口
12.充填剤
Claims (5)
- 測定対象物に0.002M〜2Mの塩酸溶液を加えてカドミウムを抽出し、得られた溶液をpH1.5〜2.5に調整し、該溶液にジベンジルジチオカルバン酸/トリ−n−オクチルメチルアンモニウムクロライド溶液を加え振とうあるいは攪拌後静置し、分離して得られた有機相に0.5〜2Mの塩酸溶液を有機相の1/5〜等量添加して振とうあるいは攪拌し、分離して得られた水相を中和して測定用試料を得る前処理工程と、抗原抗体反応を利用してカドミウムを測定するイムノアッセイに前記測定用試料を供してカドミウム含有量を分析する測定工程を含むものであるカドミウム測定方法。
- 測定対象物に0.002M〜2Mの塩酸溶液を加えてカドミウムを抽出し、得られた溶液をpH1.5〜2.5に調整し、該溶液をトリ−n−オクチルメチルアンモニウムクロライドが表面に固定化された担体に接触させた後、該担体を0.01より大きく0.5M以下の濃度の硝酸と接触させて得られた溶液を中和して測定用試料を得る前処理工程と、抗原抗体反応を利用してカドミウムを測定するイムノアッセイに前記測定用試料を供してカドミウム含有量を分析する測定工程を含むものであるカドミウム測定方法。
- 前記塩酸溶液の前記担体への接触はカラム法により行うことを特徴とする請求項2に記載のカドミウム測定方法。
- 測定対象物が穀物である請求項1〜3いずれか1つに記載のカドミウム測定方法。
- 試料液流入口と試料液流出口を有する容器と、試料液流入口と試料液流出口の間に収容される充填剤とを備え、前記充填剤は表面にトリ−n−オクチルメチルアンモニウムクロライドが固定化された担体であることを特徴とするカドミウム分離カラム装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005235227A JP4758708B2 (ja) | 2005-01-24 | 2005-08-15 | カドミウム測定方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005015443 | 2005-01-24 | ||
JP2005015443 | 2005-01-24 | ||
JP2005235227A JP4758708B2 (ja) | 2005-01-24 | 2005-08-15 | カドミウム測定方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006226986A true JP2006226986A (ja) | 2006-08-31 |
JP4758708B2 JP4758708B2 (ja) | 2011-08-31 |
Family
ID=36988470
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005235227A Active JP4758708B2 (ja) | 2005-01-24 | 2005-08-15 | カドミウム測定方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4758708B2 (ja) |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008058207A (ja) * | 2006-09-01 | 2008-03-13 | Sumika Chemical Analysis Service Ltd | カートリッジ及び該カートリッジを具備するカドミウム分析用前処理装置 |
JP2010133949A (ja) * | 2008-11-06 | 2010-06-17 | Sumika Chemical Analysis Service Ltd | カドミウム測定用試料の前処理方法、カドミウムの分離方法、及び、カドミウム分離カラム装置、並びにそれらの利用 |
JP2011145288A (ja) * | 2009-12-15 | 2011-07-28 | Sumika Chemical Analysis Service Ltd | 重金属測定用試料の夾雑物除去方法、夾雑物除去剤、および重金属の測定方法 |
CN102539742A (zh) * | 2011-12-13 | 2012-07-04 | 暨南大学 | 一种检测碳水化合物类农产品中重金属的方法与应用 |
CN104034718A (zh) * | 2014-05-19 | 2014-09-10 | 宁波大学 | Icp-aes测定土壤中镉含量的方法 |
WO2014189123A1 (ja) * | 2013-05-24 | 2014-11-27 | 関西電力株式会社 | 農作物試料中の有害元素量を測定するための試料の前処理方法 |
CN104181024A (zh) * | 2014-09-10 | 2014-12-03 | 江苏天瑞仪器股份有限公司 | 一种用于谷物类农作物中镉元素快速测定的萃取液 |
CN112881376A (zh) * | 2021-01-15 | 2021-06-01 | 山东省海洋资源与环境研究院(山东省海洋环境监测中心、山东省水产品质量检验中心) | 一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0388704A (ja) * | 1989-05-26 | 1991-04-15 | Chem Fab Budenheim Rudolf A Oetker | 湿式法により得られたリン酸からのカドミウムイオンの除去方法 |
JPH08512128A (ja) * | 1993-06-22 | 1996-12-17 | バイオネブラスカ,インコーポレイテッド | 金属陽イオン検出用mcaアッセイ/キット |
JPH10510008A (ja) * | 1994-11-30 | 1998-09-29 | アライドシグナル・インコーポレーテッド | 金属を回収するための溶媒含浸架橋マトリックスの使用 |
CN1212292A (zh) * | 1997-09-03 | 1999-03-31 | 北京有色金属研究总院 | 一种用负载纤维柱分离富集溶液中微量金属元素的方法 |
JP2004323508A (ja) * | 2003-03-20 | 2004-11-18 | Central Res Inst Of Electric Power Ind | 抗重金属モノクローナル抗体およびその使用方法 |
JP2004536708A (ja) * | 2001-08-03 | 2004-12-09 | カナダス テクノロジーズ, エルエルシー | 水性の処理液から金属イオンを除去するための組成物とその使用方法 |
JP2005031041A (ja) * | 2003-07-11 | 2005-02-03 | Sekisui Chem Co Ltd | マイクロリアクター及び分析方法 |
-
2005
- 2005-08-15 JP JP2005235227A patent/JP4758708B2/ja active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0388704A (ja) * | 1989-05-26 | 1991-04-15 | Chem Fab Budenheim Rudolf A Oetker | 湿式法により得られたリン酸からのカドミウムイオンの除去方法 |
JPH08512128A (ja) * | 1993-06-22 | 1996-12-17 | バイオネブラスカ,インコーポレイテッド | 金属陽イオン検出用mcaアッセイ/キット |
JPH10510008A (ja) * | 1994-11-30 | 1998-09-29 | アライドシグナル・インコーポレーテッド | 金属を回収するための溶媒含浸架橋マトリックスの使用 |
CN1212292A (zh) * | 1997-09-03 | 1999-03-31 | 北京有色金属研究总院 | 一种用负载纤维柱分离富集溶液中微量金属元素的方法 |
JP2004536708A (ja) * | 2001-08-03 | 2004-12-09 | カナダス テクノロジーズ, エルエルシー | 水性の処理液から金属イオンを除去するための組成物とその使用方法 |
JP2004323508A (ja) * | 2003-03-20 | 2004-11-18 | Central Res Inst Of Electric Power Ind | 抗重金属モノクローナル抗体およびその使用方法 |
JP2005031041A (ja) * | 2003-07-11 | 2005-02-03 | Sekisui Chem Co Ltd | マイクロリアクター及び分析方法 |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008058207A (ja) * | 2006-09-01 | 2008-03-13 | Sumika Chemical Analysis Service Ltd | カートリッジ及び該カートリッジを具備するカドミウム分析用前処理装置 |
JP2010133949A (ja) * | 2008-11-06 | 2010-06-17 | Sumika Chemical Analysis Service Ltd | カドミウム測定用試料の前処理方法、カドミウムの分離方法、及び、カドミウム分離カラム装置、並びにそれらの利用 |
JP2011145288A (ja) * | 2009-12-15 | 2011-07-28 | Sumika Chemical Analysis Service Ltd | 重金属測定用試料の夾雑物除去方法、夾雑物除去剤、および重金属の測定方法 |
CN102539742A (zh) * | 2011-12-13 | 2012-07-04 | 暨南大学 | 一种检测碳水化合物类农产品中重金属的方法与应用 |
WO2014189123A1 (ja) * | 2013-05-24 | 2014-11-27 | 関西電力株式会社 | 農作物試料中の有害元素量を測定するための試料の前処理方法 |
JP5666070B1 (ja) * | 2013-05-24 | 2015-02-12 | 関西電力株式会社 | 農作物試料中の有害元素量を測定するための試料の前処理方法 |
CN104034718A (zh) * | 2014-05-19 | 2014-09-10 | 宁波大学 | Icp-aes测定土壤中镉含量的方法 |
CN104181024A (zh) * | 2014-09-10 | 2014-12-03 | 江苏天瑞仪器股份有限公司 | 一种用于谷物类农作物中镉元素快速测定的萃取液 |
CN112881376A (zh) * | 2021-01-15 | 2021-06-01 | 山东省海洋资源与环境研究院(山东省海洋环境监测中心、山东省水产品质量检验中心) | 一种水产品重金属镉残留量快速检测的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP4758708B2 (ja) | 2011-08-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4758708B2 (ja) | カドミウム測定方法 | |
Berthiller et al. | Developments in mycotoxin analysis: an update for 2016-2017 | |
Soylak et al. | Diaion SP-850 resin as a new solid phase extractor for preconcentration-separation of trace metal ions in environmental samples | |
Sungur et al. | Investigation of heavy metal mobility and availability by the BCR sequential extraction procedure: relationship between soil properties and heavy metals availability | |
Baig et al. | Arsenic fractionation in sediments of different origins using BCR sequential and single extraction methods | |
Krska et al. | Analysis of Fusarium toxins in feed | |
Li et al. | Development of an immunochromatographic assay for rapid and quantitative detection of clenbuterol in swine urine | |
Björklund et al. | Fast extraction, clean-up and detection methods for the rapid analysis and screening of seven indicator PCBs in food matrices | |
Özdemir et al. | Magnetic solid phase extractions of Co (II) and Hg (II) by using magnetized C. micaceus from water and food samples | |
Fähnrich et al. | Immunochemical detection of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) | |
Tan et al. | Atmospheric mercury deposition in Guizhou, China | |
Wang et al. | Development of fluorescence sensor and test paper based on molecularly imprinted carbon quantum dots for spiked detection of domoic acid in shellfish and lake water | |
Zhou et al. | A versatile and highly sensitive probe for Hg (II), Pb (II) and Cd (II) detection individually and totally in water samples | |
CN103954764B (zh) | 快速定量检测玉米赤霉烯酮的方法 | |
Safari et al. | Persistent sample circulation microextraction combined with graphite furnace atomic absorption spectroscopy for trace determination of heavy metals in fish species marketed in Kermanshah, Iran, and human health risk assessment | |
Yager et al. | Arsenic relative bioavailability from diet and airborne exposures: Implications for risk assessment | |
Yang et al. | A new purification method for Ni and Cu stable isotopes in seawater provides evidence for widespread Ni isotope fractionation by phytoplankton in the North Pacific | |
Kong et al. | Magnetic microspheres-based cytometric bead array assay for highly sensitive detection of ochratoxin A | |
Zhang et al. | Capillary electrophoresis-based immunoassay with electrochemical detection as rapid method for determination of saxitoxin and decarbamoylsaxitoxin in shellfish samples | |
Magnaghi et al. | Development of a dye-based device to assess the poultry meat spoilage. Part II: Array on act | |
Chen et al. | Rapid and easy determination of morphine in chafing dish condiments with colloidal gold labeling based lateral flow strips | |
Su et al. | Development of quantitative magnetic beads-based flow cytometry fluorescence immunoassay for aflatoxin B1 | |
Ling et al. | Development of sensitive and portable immunosensors based on signal amplification probes for monitoring the mercury (II) ions | |
JP3996137B2 (ja) | 抗重金属モノクローナル抗体およびその使用方法 | |
KR101149418B1 (ko) | 세균양 측정 방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080307 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20100129 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101116 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110112 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110208 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110406 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110517 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110603 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4758708 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140610 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |