JP2006117713A - 抗血栓性高分子組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
E.Nylas,R.C.Reinbach, J.B.Caulfield,N.H.Buckley, W.G.Austen; J.Biomed.Mater.Res.Symp.,3,129(1972)、 L.P.Joyce,M.C.Devries,W.S.Hastings,D.B.Olsen,R.K.Jarvik,W.J.Kolff; Trans.ASAIO, 29,81(1983)
C. Nojiri, T. Okano, D. Grainger, K. D. Park, S. Nakahama, K. Suzuki, S. W. Kim, Trans. ASAIO, 33, 596 (1987)
K. Ishihara, R. Aragaki, T. Ueda, A. Watanabe, N. Nakabayashi, J. Biomed. Mater. Res., 24, 1069 (1990)
好ましいブロック共重合体〔A〕としては、二元又は三元ブロック共重合体が挙げられ、中でも、2−[2−(2−メトキシエトキシ)エトキシ]エチルメタクリレートの重合体ブロックと、ポリスチレンブロックを含むブロック共重合体が特に好ましい。
好ましい、スチレン系重合体〔B〕としては、例えば、ポリスチレン単独重合体、ポリアルファスチレン単独共重合体等が挙げられる。
本発明によれば、汎用のポリスチレン系重合体〔B〕に、少量のブロック共重合体〔A〕を配合することによって、抗血栓性に優れ、人工臓器、カテーテル等をはじめとする医療用材料としてきわめて有用な高分子組成物を得ることができる。
本発明の抗血栓性高分子組成物によってこれらの医療用材料を作製する際には、医療用材料を該高分子組成物自体によって構成する以外に、医療用材料を他の材料からなる基材表面に本発明の高分子組成物からなる被膜を設けた材料により構成することもできる。
(実施例1)
定法により合成した、PSとPME3MA[上記一般式(1)において、n=3, p=1のメタクリレート誘導体]よりなるブロック共重合体(PS-PME3MA)、及びPSを種々のブレンド比率(PS-PME3MAの配合量=0、3、8、9、17、50、100%)でトルエンに溶解し、大きさ10×10 mm2、厚さ1.0 mmのシリコン基板表面にスピンコーティングした。これを真空中、100℃で1時間加熱処理し、表面に高分子組成物によるコーティング層を有する基板を得た。
得られた各基板を、4.6 × 102 μg/mLのヒト由来アルブミン、または40 μg/mLのヒト由来フィブリノーゲンを含むリン酸緩衝液 5mLに37℃で2時間浸漬した後、リン酸緩衝液で二回洗浄、乾燥させた。基板表面の炭素に対する窒素の元素比(N/C)をX線光電子分光法で調べることにより、各基板表面に対するアルブミン、またはフィブリノーゲンの吸着量を相対的に評価した。なお、炭素はPS-PME3MA及びPSの主要構成元素であり、窒素はタンパク質の構成元素である。結果を図1に示す(N=6、エラーバーは標準偏差)。
いずれのタンパク質も、PS表面(PS-PME3MA 0%)に対する吸着量が最も多いことが分かる。タンパク吸着量は、コーティング層中のPS-PME3MA比率の増加(PS-PME3MA比率 8〜17 %)に伴い急激に減少し、50 %以上ではほぼ0になった。以上の結果から、PS-PME3MAを含む高分子表面は、タンパク質の吸着を抑制することが分かった。
PS-PME3MA及びPSを、種々のブレンド比率(PS-PME3MAの配合量=0、4、17、24、100%)でトルエンに溶解し、直径18 mm、厚さ0.12〜0.17 mmのガラス円板表面にスピンコーティングした。これを真空中100℃で1時間加熱処理し、表面に高分子組成物によるコーティング層を有する円板を得た。
5%ウマ血清を含むMEM細胞培養液に、マウス線維芽組織由来L929細胞を1.2 × 105 個/mLの濃度となるように懸濁させた。作製した試料を、12ウェルの細胞培養用マイクロプレートにセットし、各ウェルに前記細胞懸濁液 2 mLを注いだ。37℃、5 % CO2雰囲気に保ったインキュベーター中で20時間培養を行った後、各ウェルより培養液を吸引し、試料をリン酸緩衝液で二回洗浄した。次いで、試料表面に接着した細胞を、0.25 %トリプシン、0.02 %EDTA混合溶液を用いて剥がし、これを0.3 %のトリパンブルーで染色した。染色された細胞の数をタタイ式細胞計数盤で計数した。結果を図2に示す(N=6、エラーバーは標準偏差)。
PS表面(PS-PME3MA 0%)に、最も多数のL929細胞が接着していることが分かる。接着細胞数は、コーティング層中のPS-PME3MA比率の増加(PS-PME3MA比率 0〜4 %)に伴い急激に減少し、4 %以上ではほぼ0になった。以上の結果から、PS-PME3MAを含む高分子表面は、タンパク質だけでなく細胞の吸着も抑制することが分かった。
作製した試料をコーン-プレート型のレオメーターにセットし、CFSE[5-又は6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)-3',6'-0,0'-diacetylfluorescein;株式会社同仁化学研究所製]で蛍光染色されたヒト由来血小板を1.0 × 108 個/mLの濃度で含むヒト多血小板血漿を、コーンと試料の間に注入した。注入後直ちにコーンを50 s−1の剪断速度で回転させ、15分後の試料表面の接着血小板数を、レオメーター付属の光学顕微鏡により計数した。結果を図3に示す(N33、エラーバーは標準偏差)。PS表面(PS-PME3MA 0%)に、最も多数の血小板が接着していることが分かる。接着血小板数は、コーティング層中のPS-PME3MA比率の増加(PS-PME3MA比率 0〜4 %)に伴い急激に減少し、4 %以上ではほぼ0になった。
以上の結果から、PS-PME3MAを含む高分子表面は、タンパク質、細胞だけでなく、血小板の吸着も抑制することが分かった。
Claims (5)
- 前記ブロック共重合体〔A〕が二元又は三元ブロック共重合体であることを特徴とする請求項1に記載の抗血栓性高分子組成物。
- 前記ブロック共重合体〔A〕が2−[2−(2−メトキシエトキシ)エトキシ]エチルメタクリレートの重合体ブロックと、ポリスチレンブロックを含むブロック共重合体であることを特徴とする請求項1又は2に記載の抗血栓性高分子組成物。
- 前記ブロック共重合体〔A〕の含有量が1〜50重量%であることを特徴とする請求項1〜3のいずれかに記載の抗血栓性高分子組成物。
- 請求項1〜4のいずれかに記載された抗血栓性高分子組成物により構成された医療用材料。
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