JP2006105699A - ペプチドの定量方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 検体に含まれる第1〜第n(nは2以上の整数である。)のペプチドを定量する方法であって、(a)第1のペプチドの濃度を求める工程、(b)検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルに基づいて、第1〜第nのペプチドのピーク面積を算出する工程、及び(c)次式(1):A=B/C×D(1)[式中、Aは検体に含まれる第k(kは2〜nの整数である。)のペプチドの濃度を表し、Bは検体に含まれる第kのペプチドのピーク面積を表し、Cは検体に含まれる第1のペプチドのピーク面積を表し、Dは検体に含まれる第1のペプチドの濃度を表す。]に基づいて、第2〜第nのペプチドの濃度を求める工程を含む方法である。
【選択図】 なし
Description
本発明は、検体に含まれる第1〜第n(nは2以上の整数である。)のペプチドを定量する方法である。
(a)第1のペプチドの濃度を求める工程
(b)検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルに基づいて、第1〜第nのペプチドのピーク面積を算出する工程
(c)次式(1):A=B/C×D[式中、Aは検体に含まれる第k(kは2〜nの整数である。)のペプチドの濃度を表し、Bは検体に含まれる第kのペプチドのピーク面積を表し、Cは検体に含まれる第1のペプチドのピーク面積を表し、Dは検体に含まれる第1のペプチドの濃度を表す。]に基づいて、第2〜第nのペプチドの濃度を求める工程
工程(c)は、工程(a)及び工程(b)の後に行う必要があるが、工程(a)又は工程(b)を行う順序は特に限定されるものではない。
工程(a)は、第1のペプチドの濃度を定量する工程である。
第1のペプチドは、第2〜第nのペプチドの濃度を求めるにあたって基準となるペプチドであるため、工程(c)を行う段階では第1のペプチドの濃度が判明していることを要する。
まず、内部標準物質を添加した検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルに基づいて、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比を算出する。次に、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比と第1のペプチドの濃度との相関関係に基づいて、第1のペプチドの濃度を求める。このように、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比と第1のペプチドの濃度との相関関係に基づいて第1のペプチドの濃度を求めると、第1のペプチドの濃度の定量精度を向上させることができる。
各種濃度に調整したそれぞれの第1のペプチド溶液と所定の濃度に調整した内部標準物質溶液とを等量ずつ混合して検量線用試料溶液を調製し、当該検量線用試料溶液を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られるマススペクトルに基づいて、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積を算出する。得られたピーク面積から、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比を算出する。得られたピーク面積比及び第1のペプチドの濃度から、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比と第1のペプチドの濃度との関係を示す検量線を作成する。
工程(b)は、検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルに基づいて、第1〜第nのペプチドのピーク面積を算出する工程である。工程(b)で用いられる液体クロマトグラフィー/質量分析法は、LC/MS/MS分析法でもよいし、LC/MS分析法でもよいが、LC/MS分析法を用いるのが好ましい。LC/MS分析法を用いる方が、検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理するときの操作が簡便である。
「保持時間」は、液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理したときの保持時間を意味する。
工程(c)は、次式(1)に基づいて、第2〜第nのペプチドの濃度を求める工程である。
A=B/C×D・・・(1)
ただし、式(1)中、Aは検体に含まれる第k(kは2〜nの整数である。)のペプチドの濃度を表し、Bは検体に含まれる第kのペプチドのピーク面積を表し、Cは検体に含まれる第1のペプチドのピーク面積を表し、Dは検体に含まれる第1のペプチドの濃度を表す。
第1〜第nのペプチド濃度の単位としては、例えば、ng/mL、μg/mL等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
脱脂ゴマ160kgに抽出溶媒として0.05Nの水酸化ナトリウム3000Lを加え、55℃の温度条件下で45分間攪拌してゴマタンパク質を溶解抽出した。得られた抽出液に2Nの塩酸を加え、抽出液のpHを4.5に調整し、等電点沈殿によりタンパク質を得た。得られたタンパク質を水1500Lに懸濁させ、懸濁液に0.05Nの水酸化ナトリウム水溶液を加え、懸濁液のpHを7.0に調整した後、サモアーゼ(商品名,大和化成社製)300gを添加し、65℃の温度条件下で2時間反応させた。その後、酵素反応液に2Nの塩酸を加えて酵素反応液のpHを5.0に調整し、加熱により酵素を失活させ、濾過・濃縮・粉末化し、粉末状脱脂ゴマペプチド50kgを得た。
(1)LVY標準溶液の調製
脱脂ゴマに含まれていることが知られているトリペプチド(Leu-Val-Tyr(LVY),ペプチド研究所社製)10mgを精密に量り取り、10質量%トリフルオロ酢酸水溶液を加え完全に溶解させ、10mLに定容した。この溶液を10質量%トリフルオロ酢酸水溶液にて段階的に希釈し、各種濃度(15×103ng/mL,3.0×103ng/mL,0.60×103ng/mL)のLVY標準溶液を調製した。
ジペプチド(Val-Tyr(VY),シグマ−アルドリッチ社製)10mgを精密に量り取り、10質量%トリフルオロ酢酸水溶液を加え完全に溶解させ、10mLに定容し、内部標準溶液原液とした。この内部標準溶液原液1mLに10質量%トリフルオロ酢酸水溶液を加えて10mLに定容し、内部標準溶液を調製した。
各種濃度のLVY標準溶液と内部標準溶液とを等量ずつ混合した検量線用溶液を調製し、下記の条件により、検量線用溶液をLC/MS/MS分析法で処理し、VY及びLVYのSRMピーク面積を測定した。
カラム:ODS-80Ts(内径;4.6mm,長さ;100mm,東ソー社製)
カラム温度:30℃
流速:400μL/min
検量線用溶液注入量:20μL
移動相:0.1%トリフルオロ酢酸を含む
水/アセトニトリルのグラジエント(90:10→55:45)
UV検出波長:215nm
MS検出条件:エレクトロスプレーイオン(ESI)法
positive(測定範囲;m/z 150〜800)
MS/MS検出条件:(VY)ESI positive前駆イオンm/z 281,SRM m/z 182
(LVY)ESI positive前駆イオンm/z 394,SRM m/z 213
LVY濃度(ng/mL)=(SRMピーク面積比−0.2003)/0.033・・・(2)
SRMピーク面積比(%)=LVYのSRMピーク面積/VYのSRMピーク面積×100
脱脂ゴマに含有される複数種類のペプチド(Leu-Val-Tyr(LVY),Ile-Val-Tyr(IVY),Val-Ile-Tyr(VIY),Leu-Ser-Ala(LSA),Leu-Gln-Pro(LQP),Leu-Lys-Tyr(LKY),Met-Leu-Pro-Ala-Tyr(MLPAY))及び実施例2で用いた内部標準物質(Val-Tyr(VY))を1mgずつ精密に量り取り、10質量%トリフルオロ酢酸水溶液を加えて完全に溶解させ、それぞれ10mLに定容し各種ペプチド溶液を調製した。
また、下記の条件により、上記各種ペプチド溶液を一種類ずつLC/MS分析法で処理し、各種ペプチドの保持時間を測定した。
カラム:ODS-80Ts(内径;4.6mm,長さ;100mm,東ソー社製)
カラム温度:30℃
流速:400μL/min
試料溶液注入量:20μL
移動相:0.1%トリフルオロ酢酸を含む
水/アセトニトリルのグラジエント(90:10→55:45)
UV検出波長:215nm
MS検出条件:エレクトロスプレーイオン化(ESI)法
positive(測定範囲 m/z 150〜800)
ESI positive SIM(VY) m/z 281
ESI positive SIM(LVY) m/z 394
ESI positive SIM(IVY) m/z 394
ESI positive SIM(VIY) m/z 394
ESI positive SIM(LSA) m/z 290
ESI positive SIM(LQP) m/z 357
ESI positive SIM(LKY) m/z 423
ESI positive SIM(MLPAY) m/z 594
A’=B’/C’×D’・・・(3)
ただし、式(3)中、A’は検体に含まれる第k’(k’は2〜nの整数である。)のペプチドの濃度(ng/mL)を表し、B’は検体に含まれる第k’のペプチドのSIMピーク面積を表し、C’は検体に含まれる第1のペプチドのSIMピーク面積を表し、D’は検体に含まれる第1のペプチドの濃度(ng/mL)を表す。
実施例1で得られた粉末状脱脂ゴマペプチド50mgを精密に量り取り、10質量%トリフルオロ酢酸水溶液を加え、超音波処理等により可溶性のものを完全に溶解させ、10mLに定容したゴマペプチド溶液を得た。
カラム:ODS-80Ts(径;4.6mm,長さ;100mm,東ソー社製)
カラム温度:30℃
流速:400μL/min
試料溶液注入量:20μL
移動相:0.1%トリフルオロ酢酸を含む
水/アセトニトリルのグラジエント(90:10→55:45)
UV検出波長:215nm
MS検出条件:エレクトロスプレーイオン化(ESI)法
positive(測定範囲 m/z 150〜800)
ESI positive SIM(LVY) m/z 394
ESI positive SIM(IVY) m/z 281
ESI positive SIM(VIY) m/z 394
ESI positive SIM(LSA) m/z 394
ESI positive SIM(LQP) m/z 394
ESI positive SIM(LKY) m/z 394
ESI positive SIM(MLPAY) m/z 394
MS/MS検出条件:(VY)ESI positive 前駆イオン m/z 281,SRM m/z 182
(LVY)ESI positive 前駆イオン m/z 394,SRM m/z 213
上記試験結果について、表2に示す。
Claims (5)
- 検体に含まれる第1〜第n(nは2以上の整数である。)のペプチドを定量する方法であって、
(a)第1のペプチドの濃度を求める工程、
(b)検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルに基づいて、第1〜第nのペプチドのピーク面積を算出する工程、及び
(c)次式(1):A=B/C×D[式中、Aは検体に含まれる第k(kは2〜nの整数である。)のペプチドの濃度を表し、Bは検体に含まれる第kのペプチドのピーク面積を表し、Cは検体に含まれる第1のペプチドのピーク面積を表し、Dは検体に含まれる第1のペプチドの濃度を表す。]に基づいて、第2〜第nのペプチドの濃度を求める工程
を含む前記方法。 - 前記工程(a)において、内部標準物質を添加した検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルに基づいて、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比を算出し、第1のペプチド及び内部標準物質のピーク面積比と第1のペプチドの濃度との相関関係に基づいて、第1のペプチドの濃度を求める請求項1に記載の方法。
- 前記内部標準物質が、ペプチドである請求項2に記載の方法。
- 前記工程(b)において、第1〜第nのペプチドの保持時間に基づいて、検体を液体クロマトグラフィー/質量分析法で処理することによって得られたマススペクトルのピークと第1〜第nのペプチドとの対応関係を決定し、第1〜第nのペプチドのピーク面積を算出する請求項1〜3のいずれかに記載の方法。
- 前記第1〜第nのペプチドのアミノ酸残基数が、2〜50個である請求項1〜4のいずれかに記載の方法。
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Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007116927A1 (ja) | 2006-04-06 | 2007-10-18 | Showa Denko K.K. | 部材同士の接合方法 |
WO2008081849A1 (ja) * | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | ペプチドおよびタンパク質定量法 |
JP2009092597A (ja) * | 2007-10-11 | 2009-04-30 | Univ Kinki | α−グルコシダーゼ阻害活性を有する化合物の定量方法、及びサラキア属植物又はその抽出液のα−グルコシダーゼ阻害活性評価法 |
JPWO2009123297A1 (ja) * | 2008-04-03 | 2011-07-28 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | 質量分析装置を用いた定量分析方法 |
JP2013515272A (ja) * | 2009-12-22 | 2013-05-02 | エクスプレッション、パソロジー、インコーポレイテッド | 上皮成長因子受容体(egfregfr)タンパク質srm/mrmアッセイ |
JP2013515271A (ja) * | 2009-12-22 | 2013-05-02 | エクスプレッション、パソロジー、インコーポレイテッド | インスリン受容体基質1(irs1)タンパク質srm/mrmアッセイ |
CN103760269A (zh) * | 2014-01-23 | 2014-04-30 | 姜艳彬 | 一种兽药残留的检测方法 |
CN103969362A (zh) * | 2014-03-14 | 2014-08-06 | 中国环境科学研究院 | 一种定量检测鸡粪中氟喹诺酮类的方法 |
CN104111291A (zh) * | 2014-06-19 | 2014-10-22 | 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 | 一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法 |
CN104133017A (zh) * | 2014-07-31 | 2014-11-05 | 国家烟草质量监督检验中心 | 水基胶中辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚含量的测定方法 |
CN104730163A (zh) * | 2015-03-19 | 2015-06-24 | 湖北犇星农化有限责任公司 | 基于3,5,6-三氯吡啶-2-酮的检测控制3,5,6-三氯吡啶-2-醇钠生产的方法 |
CN105044247A (zh) * | 2015-09-07 | 2015-11-11 | 天津生机集团股份有限公司 | 一种兽药中氯霉素药物残留的检测方法 |
CN105510457A (zh) * | 2015-12-01 | 2016-04-20 | 河南中标检测服务有限公司 | 一种检测牛奶中抗生素残留的方法 |
CN106568866A (zh) * | 2016-11-10 | 2017-04-19 | 山东省海洋资源与环境研究院 | 海参中脱一氧乙酰甲喹、脱二氧乙酰甲喹及mqca的测定方法 |
KR20200013725A (ko) * | 2017-06-02 | 2020-02-07 | 젠자임 코포레이션 | 질량 분광분석법을 이용한 소량 폴리펩티드의 절대 정량화 방법 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01214754A (ja) * | 1988-02-23 | 1989-08-29 | Shimadzu Corp | 組成比定量装置 |
JPH05196606A (ja) * | 1991-09-03 | 1993-08-06 | Kao Corp | 界面活性剤の微量定量分析方法 |
JP2002523058A (ja) * | 1998-08-25 | 2002-07-30 | ユニバーシティ オブ ワシントン | 複合した混合物中のタンパク質またはタンパク質機能の迅速定量分析 |
WO2002077016A2 (en) * | 2001-03-22 | 2002-10-03 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw | Methods and apparatus for gel-free qualitative and quantitative proteome analysis, and uses therefore |
WO2002090929A2 (en) * | 2001-05-08 | 2002-11-14 | Perseptive Biosystems, Inc. | Process for analyzing protein samples |
WO2003089937A2 (en) * | 2002-04-15 | 2003-10-30 | Thermo Finnigan, Llc | Quantitation of biological molecules |
-
2004
- 2004-10-01 JP JP2004290781A patent/JP4563764B2/ja active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01214754A (ja) * | 1988-02-23 | 1989-08-29 | Shimadzu Corp | 組成比定量装置 |
JPH05196606A (ja) * | 1991-09-03 | 1993-08-06 | Kao Corp | 界面活性剤の微量定量分析方法 |
JP2002523058A (ja) * | 1998-08-25 | 2002-07-30 | ユニバーシティ オブ ワシントン | 複合した混合物中のタンパク質またはタンパク質機能の迅速定量分析 |
JP2003107066A (ja) * | 1998-08-25 | 2003-04-09 | Univ Of Washington | 複合した混合物中のタンパク質またはタンパク質機能の迅速定量分析 |
WO2002077016A2 (en) * | 2001-03-22 | 2002-10-03 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw | Methods and apparatus for gel-free qualitative and quantitative proteome analysis, and uses therefore |
WO2002090929A2 (en) * | 2001-05-08 | 2002-11-14 | Perseptive Biosystems, Inc. | Process for analyzing protein samples |
WO2003089937A2 (en) * | 2002-04-15 | 2003-10-30 | Thermo Finnigan, Llc | Quantitation of biological molecules |
Cited By (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007116927A1 (ja) | 2006-04-06 | 2007-10-18 | Showa Denko K.K. | 部材同士の接合方法 |
CN101600959B (zh) * | 2006-12-28 | 2013-10-30 | 雪印惠乳业株式会社 | 肽和蛋白的定量方法 |
WO2008081849A1 (ja) * | 2006-12-28 | 2008-07-10 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | ペプチドおよびタンパク質定量法 |
JP2008164511A (ja) * | 2006-12-28 | 2008-07-17 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ペプチドおよびタンパク質定量法 |
US8221967B2 (en) | 2006-12-28 | 2012-07-17 | Megmilk Snow Brand Co., Ltd. | Method for quantification of peptide and protein |
JP2009092597A (ja) * | 2007-10-11 | 2009-04-30 | Univ Kinki | α−グルコシダーゼ阻害活性を有する化合物の定量方法、及びサラキア属植物又はその抽出液のα−グルコシダーゼ阻害活性評価法 |
JPWO2009123297A1 (ja) * | 2008-04-03 | 2011-07-28 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | 質量分析装置を用いた定量分析方法 |
JP5337144B2 (ja) * | 2008-04-03 | 2013-11-06 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | 質量分析装置を用いた定量分析方法 |
JP2013515271A (ja) * | 2009-12-22 | 2013-05-02 | エクスプレッション、パソロジー、インコーポレイテッド | インスリン受容体基質1(irs1)タンパク質srm/mrmアッセイ |
JP2013515272A (ja) * | 2009-12-22 | 2013-05-02 | エクスプレッション、パソロジー、インコーポレイテッド | 上皮成長因子受容体(egfregfr)タンパク質srm/mrmアッセイ |
US9417246B2 (en) | 2009-12-22 | 2016-08-16 | Expression Pathology, Inc. | Insulin receptor substrate 1 (IRS1) protein SRM/MRM assay |
US10054592B2 (en) | 2009-12-22 | 2018-08-21 | Expression Pathology, Inc. | Insulin receptor substrate 1 (IRS1) protein SRM/MRM assay |
CN103760269A (zh) * | 2014-01-23 | 2014-04-30 | 姜艳彬 | 一种兽药残留的检测方法 |
CN103969362A (zh) * | 2014-03-14 | 2014-08-06 | 中国环境科学研究院 | 一种定量检测鸡粪中氟喹诺酮类的方法 |
CN104111291A (zh) * | 2014-06-19 | 2014-10-22 | 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 | 一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法 |
CN104133017A (zh) * | 2014-07-31 | 2014-11-05 | 国家烟草质量监督检验中心 | 水基胶中辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚含量的测定方法 |
CN104730163A (zh) * | 2015-03-19 | 2015-06-24 | 湖北犇星农化有限责任公司 | 基于3,5,6-三氯吡啶-2-酮的检测控制3,5,6-三氯吡啶-2-醇钠生产的方法 |
CN105044247A (zh) * | 2015-09-07 | 2015-11-11 | 天津生机集团股份有限公司 | 一种兽药中氯霉素药物残留的检测方法 |
CN105510457A (zh) * | 2015-12-01 | 2016-04-20 | 河南中标检测服务有限公司 | 一种检测牛奶中抗生素残留的方法 |
CN106568866A (zh) * | 2016-11-10 | 2017-04-19 | 山东省海洋资源与环境研究院 | 海参中脱一氧乙酰甲喹、脱二氧乙酰甲喹及mqca的测定方法 |
KR20200013725A (ko) * | 2017-06-02 | 2020-02-07 | 젠자임 코포레이션 | 질량 분광분석법을 이용한 소량 폴리펩티드의 절대 정량화 방법 |
JP2020522692A (ja) * | 2017-06-02 | 2020-07-30 | ジェンザイム・コーポレーション | 質量分析を使用する低存在量のポリペプチドの絶対定量のための方法 |
KR20220163526A (ko) * | 2017-06-02 | 2022-12-09 | 젠자임 코포레이션 | 질량 분광분석법을 이용한 소량 폴리펩티드의 절대 정량화 방법 |
JP7193479B2 (ja) | 2017-06-02 | 2022-12-20 | ジェンザイム・コーポレーション | 質量分析を使用する低存在量のポリペプチドの絶対定量のための方法 |
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