JP2006078231A - クロマトカラムの作製方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ポリマー系クロマト充填剤のスラリーをカラム容器7に注入して該充填剤の充填層を形成した後、該自然沈降充填層をその高さに対して5〜20%圧縮してクロマトカラムを作製する。又、前記自然沈降充填層の圧縮を、流体圧駆動のピストン(可動栓)13をカラム容器7内に挿入することによって行うとともに、圧縮後は流体圧の供給を遮断して前記ピストン13を固定する。
【選択図】図1
Description
V=V0 ×0.9 … (1)
となる。
ここで、図1に示すカラム容器7の高さ(カラム押えフランジ9を含む)Hとピストン13の高さh’は既知であるため、10%圧縮後の充填層の高さが(2)式で求められるhの値になるよう、図1に示す高さΔh(ピストン13の下面とカラム押えフランジ9の下面との間の高さ)を実測し、その値Δhが
Δh=H−(h+h’) … (3)
に達した時点でストップ弁25,26を閉じて油圧ジャッキ6へのオイルの供給を遮断し、ピストン13の上昇を停止するとともに、該ピストン13をその停止位置に固定する。
液張り工程では、図3に示すように、スラリータンク2−14内に充填用溶媒を張るが、このとき、油圧ジャッキ2−17及びスラリーポンプ2−11は非作動状態にあり、可動栓2−19はカラム容器2内の上限位置にある。
この充填工程では、図4に示すように、前記液張り工程において充填用溶媒が張られたスラリータンク2−14内に規定量の充填剤を投入し、両者を撹拌機2−28によって混合して充填剤をスラリー化し、所定濃度の充填剤スラリーを調製する。
液抜き工程においては、前記充填工程での充填剤スラリーの充填によってカラム容器2−2内に充填層が形成されると、図5に示すように、そのままの状態を放置し、充填層の上部に溜った溶媒をカラム容器2−2下部の排液管2−6からバルブ2−7を通って外部へと排出する。
前記液抜き工程においてカラム容器2−2内の充填層の上部に溜った溶媒が抜き取られると、充填パイプ2−8のカラム容器2−2への固定を解除してこれを横方向にスライドさせてカラム容器2−2から抜き取る(図6参照)。このとき、バルブ7は閉じておく。そして、工程に先立って、充填層の高さを測定しておく。
前記工程において充填パイプ2−8が抜き取られると、可動栓2−19のカラム容器2−2内での摺動を阻害するものが無くなるため、油圧ジャッキ2−17を駆動して可動栓2−19を図7に示すようにカラム容器2−2内で下動せしめ、充填層を5〜20%圧縮加圧する。即ち、図2に示す油圧ユニット2−23の油圧ポンプを駆動してオイルを一方の油圧配管2−24から油圧ジャッキ2−17の本体上部に供給してロッド2−18を押し下げると、このロッド2−18に連結された可動栓2−19が下動してカラム容器2−2内の充填層を加圧する。加圧によって充填層が圧密され、充填層内の余分な溶媒は、送液管2−29の途中に設けられた三方弁2−30から排出される。尚、ロッド2−18の押し下げによって油圧ジャッキ2−17の本体下部から排出されるオイルは、油圧配管2−25を通って油圧ユニット2−23へと戻される。
1−1)標準理論段数測定試験条件
1)カラム :アキシャルコンプレッション型カラム
2)充填剤 :Toyopearl SuperQ−650C
3)移動相 :水(純粋)
4)流速 :LV=2,4,6m/h
5)温度 :室温
6)検出 :UV254nm、0.2mmセル、レンジ0.10
7)試料 :アセトン100%
8)繰り返し回数:3回
9)理論段数 :半値幅法により1m当たりの理論段数を下記計算式にて算出
理論段数={5.54(Tr/W1/2 )2 }/L
ここに、Tr:保持時間=クロマトグラムの試料負荷からピークトップまでの長さ
W1/2 :半値幅
L:カラムの長さ
1−2)実施手順:1)所定量の充填剤の自然沈降体積を測定
2)スラリー量を自然沈降体積の1.4〜1.6倍にする
3)自然沈降体積をカラム断面積で除してカラム充填長さL0 を算出
4)スラリーをカラムに充填
5)ピストンで充填層をL0 に対して10〜20%に圧縮した後ピストンを固定
6)カラム作製終了
7)充填用溶媒を移動相溶媒(純粋)に置換
8)理論段数測定実施
2.試験結果:
上記試験条件にて試験して得られた結果を表1に示す。
2 カラム本体
3 油圧ユニット
6 油圧ジャッキ
7 カラム容器
10 トップフランジ
12 カラム出口配管
13 ピストン(可動栓)
14 カラム出口配管
20 油圧ポンプ
23,24 油圧配管
25,26 ストップ弁
2−1 クロマトカラム充填装置
2−2 カラム容器
2−3 上部フランジ
2−5 下部フランジ
2−6 排液管
2−8 充填パイプ
2−9 バッフル
2−10 スラリー配管
2−11 スラリーポンプ
2−13 スラリー配管
2−14 スラリータンク
2−17 油圧ジャッキ
2−19 可動栓
2−21 送液路
2−23 油圧ユニット
2−28 撹拌機
2−29 送液管
2−30 三方弁
Claims (2)
- ポリマー系クロマト充填剤のスラリーをカラム容器に注入して該充填剤の充填層を形成した後、該自然沈降充填層をその高さに対して5〜20%圧縮してクロマトカラムを作製することを特徴とするクロマトカラムの作製方法。
- 前記充填層の圧縮を、流体圧駆動の可動栓をカラム容器内に挿入することによって行うとともに、圧縮後は流体圧の供給を遮断して前記可動栓を固定することを特徴とする請求項1記載のクロマトカラムの作製方法。
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