JP2005528421A

JP2005528421A - セファイボルの新規な使用

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Publication number: JP2005528421A
Application number: JP2004506841A
Authority: JP
Inventors: マティーアス・シール; ラースロウ・フェルテシ; ヨーアヒム・ヴィンク; ブリギッテ・シュレーゲル; アルベルト・ヘールトル; ウード・グレーフェ
Original assignee: アベンティス・ファーマ・ドイチユラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング
Priority date: 2002-05-23
Filing date: 2003-05-02
Publication date: 2005-09-22
Also published as: MXPA04011130A; DK1509241T3; ES2271575T3; BR0311238A; DE10222792A1; DE50304667D1; CA2487246A1; ATE336259T1; AU2003229766A1; EP1679081A2; EP1509241A1; PT1509241E; EP1679081A3; EP1509241B1; WO2003099317A1

Abstract

本発明は神経学的なおよび／または免疫抑制効果を有する薬物を製造するために一般式
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−ｘ−ｗ−Ｌｅｕ−ｙ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−ｚ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｒ
（式中、ＲはＰｈｅ−ｏｌまたはＰｈｅ−ａｌを表し、そしてｗ、ｘ、ｙおよびｚは以下の意味
ａ）ｗはＧｌｙまたはＡｌａを表し；ｘはＡｉｂを表し；そしてｙおよびｚはＩｖａを表し；ｂ）ｗはＧｌｙを表し；ｘ、ｙおよびｚはＩｖａを表し；ｃ）ｗはＧｌｙを表し；ｘおよびｚはＡｉｂを表しそしてｙはＩｖａを表し；ｄ）ｗはＧｌｙを表し；ｘ、ｙおよびｚはＡｉｂを表し；またはｅ）ｗはＧｌｙを表し；ｘおよびｙはＡｉｂを表し；そしてｚはＩｖａを表す）
の化合物：
または一般式
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−ｘ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ
（式中、ｘはＨｙｐまたはＰｒｏを表す）
の化合物、およびこれらの生理学的に許容できる塩を使用することに関する。

Description

本発明は神経学的および免疫抑制効果を有する医薬を製造するためにセファイボルを使用することに関する。

そのいくつかが構造的に異常であるアミノ酸を２０まで含むペプチドは、バクテリアおよび真菌による非リボソーム性ペプチド合成酵素を用いる二次的新陳代謝により生成される。これまで知られたペプチド構造を有する二次的代謝物の多くは、抗生物質、酵素阻害剤、強心薬、免疫調節物質、殺虫剤、抗線虫薬などのような興味深い生物学的効果を有する（Graef, U. Biochemie der Antibiotika [Biochemistry of the antibiotics], Spektrum Heidelberg, 1992参照）。

ペプチド活性化合物の構造群のうち、ペプタイボルと称される化合物は、それがアルファ−アミノ酪酸を大きな割合で含む異常に多数の（２０までの）アミノ酸を含むことで際立つ（Brueckner, H., Koenig, W. A., Greiner, M., Jung, G. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 18（1979), 476-477）。さらにまた、ペプタイボルはＮ末端でしばしばアセチル化されかつＣ末端にアルコール基（例えばフェニルアラニトール）またはアルデヒド基を含む残基を有する。

ペプタイボルの作用機構は、生物学的な膜内での細孔の形成であると一般に考えられている（M. K. Das et al. Biochemistry, 25, 7110-7117, 1986）。結果として、イオンは制御されない仕方で細胞内に侵入しそして重要な生化学的過程に干渉する可能性があり、このことで多くのペプタイボルの抗生物質としての効果を説明することができよう。抗生物質効果に加えて、様々なペプタイボルが異なる他の生物学的効果を有することが認められている。アンプロスポリン（ampullosporin）はフォマ・デストラクティバ（Phoma destructiva）中での色素の生成を誘発しまたマウスで神経弛緩効果を生む（WO 99/12598; DE 199148644; M. Ritzau et al. J. Antibiotics 50, 722-728, 1997, Kronen et al., J. Antibiotics, 54, 175-178, 2001）。ベルゴファンギン（bergofungin）成分 (A. Berg et al., J. Antibiotics, 52, 666-669, 1999) はマイクロモル以下の濃度でプロリルエンドペプチダーゼ（prolylendpeptidase）を阻害するが、フォマ・デストラクティバに対する効果はない。クロンスタチン（clonstachin）（T. Chikanishi et al., J. Antibiotics, 50, 105-110, 1997）は血小板の凝集を阻害する。最近、抗ウィルス性のペプタイビリン（peptaivirin）ＡおよびＢが記載されている（B.-S. Yun et al., Tetrahedron Letters, 41, 1429-1431, 2000）。様々なペプタイボルの生物学的活性に対する統一した説明およびその予測は、これらの化合物の構造の差異のために与えることができない。

１６もしくは１７のアミノ酸またはアミノ酸誘導体（そのいくつかはコード化できない）から直線状に構成されるセファイボルは、ペプタイボル抗生物質の他の１群をなす。セファイボルの構造、製造および生物学的活性は例えばWO 00／68256またはM. Schiell et al., J. Antibiotics, 54(2001) 220-233に記載されている。セファイボルは吸虫類、線虫、クモ類（arachnida）およびいくつかの昆虫のような、ヒトおよび／または動物に対して病原性をもつ内部寄生虫および／または外部寄生虫に対する抑圧効果を有する。これに加えてセファイボルは抗バクテリア活性を示す。

様々な試験モデルで、セファイボルは追加の効果を示し、この効果のため、免疫抑制剤
または神経学的、特に神経弛緩的な効果を有する薬剤として治療の用途にとって好適であることが驚くべきことに今回見いだされた。

従って、本発明は神経学的なおよび／または免疫抑制効果を有する医薬を製造するために、式Ｉ
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−ｘ−ｗ−Ｌｅｕ−ｙ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−ｚ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｒ（Ｉ）
（式中、ＲはＰｈｅ−ｏｌまたはＰｈｅ−ａｌであり、そしてｗ、ｘ、ｙおよびｚは以下の意味
ａ）ｗはＧｌｙまたはＡｌａであり；ｘはＡｉｂであり；そしてｙおよびｚはＩｖａであり；
ｂ）ｗはＧｌｙであり；ｘ、ｙおよびｚはＩｖａであり；
ｃ）ｗはＧｌｙであり；ｘおよびｚはＡｉｂでありそしてｙはＩｖａであり；
ｄ）ｗはＧｌｙであり；ｘ、ｙおよびｚはＡｉｂであり；または
ｅ）ｗはＧｌｙであり；ｘおよびｙはＡｉｂでありそしてｚはＩｖａである
をもつ）
の化合物、または式II
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−ｘ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（II）
（式中、ｘはＨｙｐまたはＰｒｏである）
の化合物、およびこれらの生理学的に許容できる塩の使用に関する。

式ＩまたはIIの化合物はまたペプチド活性化合物またはセファイボルと称される。

本発明はさらにセファイボルＡ、Ａ１、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＰおよびＱの使用に関する。

セファイボルＡは、ＲがＰｈｅ−ｏｌであり、ｗがＧｌｙであり、ｘがＡｉｂであり、そしてｙおよびｚがＩｖａである式Ｉの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ（配列番号１）

を示す。

セファイボルＡ１は、ＲがＰｈｅ−ｏｌであり、ｗがＡｌａであり、ｘがＡｉｂであり、そしてｙおよびｚがＩｖａである式Ｉの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ（配列番号８）

を示す。

セファイボルＢは、ＲがＰｈｅ−ｏｌであり、ｗがＧｌｙであり、そしてｘ、ｙおよびｚがＩｖａである式Ｉの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｉｖａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ（配列番号２）

を示す。

セファイボルＣは、ＲがＰｈｅ−ｏｌであり、ｗがＧｌｙであり、ｘおよびｚがＡｉｂでありそしてｙがＩｖａである式Ｉの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ（配列番号３）

を示す。

セファイボルＤは、ＲがＰｈｅ−ｏｌであり、ｗがＧｌｙであり、そしてｘ、ｙおよびｚがＡｉｂである式Ｉの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ（配列番号４）

を示す。

セファイボルＥは、ＲがＰｈｅ−ｏｌであり、ｗがＧｌｙであり、ｘおよびｙがＡｉｂでありそしてｚがＩｖａである式Ｉの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ（配列番号５）

を示す。

セファイボルＰは、ｘがＨｙｐである式IIの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（配列番号６）

を示す。

セファイボルＱは、ｘがＰｒｏである式IIの化合物
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（配列番号７）

を示す。

ＡｃＰｈｅはＮ−アセチルフェニルアラニンを、Ａｉｂはα−アミノイソ酪酸を、Ａｌａはアラニンを、Ｉｖａはイソバリンを、Ｈｙｐはヒドロキシプロリンを、Ｐｈｅ−ｏｌはフェニルアラニノールを、Ｐｈｅ−ａｌはフェニルアラニナールを、Ｐｈｅはフェニルアラニンを、Ｇｌｙはグリシンを、Ｌｅｕはロイシンを、Ｇｌｎはグルタミンを、ＰｒｏはプロリンをＩｌｅはイソロイシンを、ＴｈｒはトレオニンをそしてＳｅｒはセリンを示す。

上述した化合物は既知でありまた例えばWO 00/68256またはSchiell et al., J. Antibiotics, 54(2001), 220-233に記載のように製造することができる。上記のセファイボルは、それが発酵媒体中で蓄積するまで好適な条件下で発酵されるものとし、例えば微生物アクレモニウム・ツバキイ（Acremonium tubakii） FH 1685 DSM 12774によって製造することができ、次いで単離しそして精製することができる（WO 00/68256; Schiell et al., J. Antibiotics, 54(2001), 220-233）。単離した微生物は1999年３月31日付で、ブダペスト条約の規則に従って、次の番号：Acremonium tubakii FH 1685 DSM 12774でDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen [German Collection of microorganisms and cell cultures] GmbH, Mascheroder Weg 1B, D 38124 Brunswick, Germanyに寄託した。

本発明は式ＩおよびIIを、それらのラセミ化合物、ラセミ混合物および純粋な鏡像異性体ならびにまたそれらのジアステレオマーならびにこれらの混合物の形で使用することにも関する。上述した化合物がジアステレオマーまたは鏡像異性体の形を可能にしまた選定した合成においてその混合物として得られるなら、純粋な立体異性体への分離は、場合によってはキラルな支持物質上でのクロマトグラフィーによって、または、上述したラセミ化合物が塩の生成を可能にするなら、光学活性のある塩基または酸を補助剤として使用することにより生成されるジアステレオマー塩の分別結晶化によって達成することができる。

本発明は式ＩまたはIIの化合物の明らかな化学的同等物の使用もまた包含する。このような同等物の例はエステル、エーテル、付加塩、錯体または部分加水分解生成物である。

式ＩまたはII化合物の生理学的に許容できる塩は、Remington Pharmaceutical Science（17版、1418ページ(1985年)）中に記載のように、その有機塩および無機塩であると理解される。物理的および化学的安定性と溶解性との理由で、酸性基に対しては、特にナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩そしてアンモニウム塩が好ましく；塩基性基に対しては特に塩酸、硫酸もしくはリン酸の塩または酢酸、クエン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸およびｐ−トルエンスルホン酸のようなカルボン酸もしくはスルホン酸の塩が好ましい。

本発明は１つまたはそれ以上のセファイボルを含む医薬製剤にも関する。好ましくは、補助物質または担持物質と混合されたセファイボルを使用するのが好ましい。担持物質としては薬学的に許容される任意の担持物質および／または補助物質が使用可能である。例挙されうる頻繁に使用される担持物質または補助物質の例は、炭酸マグネシウム、二酸化チタン、乳糖、マンニトールおよび他の糖、滑石、乳タンパク質、ゼラチン、デンプン、ビタミン、セルロースおよびその誘導体、動物性または植物性の油、ポリエチレングリコールならびに溶媒例えば滅菌水、アルコール、グリセロールおよび多価アルコールである。

一般に、医薬品は経口的、局所的または非経口的に投与されるが、直腸経由の使用もまた原則的に可能である。好適な固体または液体の製剤調製物の形は、顆粒、粉末、錠剤、
糖衣錠、（マイクロ）カプセル、坐薬、シロップ、乳濁液、懸濁物、エアゾル、ドロップまたはアンプル状の注射可能な溶液、および活性化合物の遅延性の放出を行う製剤であり、これの製造においては担持物質および添加剤および／または補助剤、例えば分解剤、バインダー、コーティング剤、膨潤剤、リガンド、潤滑剤、香味料、甘味料または溶解剤が慣用的に使用される。

場合によっては、経口投与のための投薬単位は、例えば粒子状の活性化合物を好適なポリマー、ロウなどでコーティングするかこれらに包埋することにより、比較的長い期間にわたって放出を遅延しまたは延長するためにマイクロカプセルとすることができる。

医薬製剤は投薬単位で製造されそして投与されるのが好ましく、各々の単位は活性成分として本発明のセファイボルの１つまたはそれ以上の化合物の定めた投薬量を含有する。この投薬量は錠剤、カプセルおよび坐薬のような固体の投薬単位である場合、１日あたり約２０００mgまでであるが、好ましくは約１〜１０００mgであってよく、またアンプルの形の注射のための溶液の場合、１日あたり約１０００mgまでであるが、好ましくは約１０〜３００mgであってよい。

投薬される１日あたりの投薬量は哺乳動物の体重、年齢、性別および容態に依存する。しかしながら、より多いまたはより少ない投薬量がおそらく適当であるかもしれない。１日あたりの投薬量は、単一の投薬単位の形での１回だけの投与によって、さもなければ２回もしくはそれ以上のより少ない投薬単位出、または規定された間隔での小分けにされた投薬量の多数回の投与によって投与することができる。

本発明は医薬品を製造するための方法にも関し、この方法ではセファイボルが、慣用の担体物質とともにそして、場合によっては、添加剤および／または補助物質とともに、投与のために好適な当該のまたはある１つの形にされる。

神経系、特に中枢神経系の撹乱は、様々な種類の疾病の原因である。これには、幻覚、妄想、精神運動性興奮のような精神病理学的症状を伴い、または他の症状を伴う疾病が含まれる。ここに挙げることができる例は、統合失調症、癲癇およびパーキンソン病であるが、身体の機能の制御に影響するか、またはしばしば精神病性の性質を有する多数の他の疾病が知られている。これらの疾病は通常進行性である。これらは、例えば神経弛緩剤、抗抑鬱剤およびトランキライザーを含む向精神薬によって医学的に処置される。これらの機能は精神病理学的症状を取り除きまたは軽減することである。トランキライザーは精神に対する沈静作用を主として有しまた不安を低減する化合物である。抗鬱剤は病的な落ち込みが支配する気分を改善しそして抑鬱的な妄想を取り除くことができる物質である。神経弛緩剤は精神運動性興奮、感情的興奮および不眠症を抑え、ならびに、知的能力が維持されなければならないこととの関連において、欲動、自発的運動および表情運動を減少させるために好適である。

マウスで実施されるインビボ実験で、上述したセファイボルは低体温症または自発的運動性の低下のような神経弛緩効果を示す。観察されるこれらの薬理学的効果を基礎におき、式ＩおよびIIの化合物そして特にセファイボルＡ、Ａ１、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＰおよびＱは、中枢神経系または末梢神経系に作用し、また神経学的疾病を治療するために、例えば神経弛緩剤、抗抑鬱剤またはトランキライザー、特に神経弛緩剤のような向精神薬剤が使用される疾病または疾病状態を治療するために好適である薬剤として使用できると考えられている。

これには例えば、幻覚、妄想、精神運動性興奮、不安性激昂、統合失調症、急性躁病相、パラノイア状態またはパラノイア−幻覚状態のような急性精神異常症候群、ならびに不安および緊張の状態に関連してこれらを使用すること、そしてまた麻酔前投薬、神経弛緩性鎮痛状態または神経弛緩性麻酔状態に関してこれらを使用すること、または嘔吐に関してこれらを使用することが含まれる。

加えて、上述したセファイボルはフォマデストラクティバ中で、有効な免疫抑制剤である既知のシクロスポリンＡと類似の仕方で色素の生成を誘発する。従って、式ＩおよびIIの化合物、特にセファイボルＡ、Ａ１、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＰおよびＱは、免疫抑制剤が使用される疾病および容態に関して、特に移植医療において、または自己免疫疾患との関連で使用されるのにもまた好適である。これの使用には例えば、ネフローゼ症候群を含む糸球体腎炎、慢性炎症性腸疾患、重症筋無力症、自己免疫性肝炎、血小板減少性紫斑病、または皮膚筋炎、紅斑性狼瘡、リウマチ様関節炎および硬皮症のような炎症性リウマチ疾患での使用が含まれる。

疾病または疾病状態の治療は、疾病を防止しまたはそれの発現を遅延するためのその予防的処置も含むと理解すべきである。

セファイボルの活性は以下のように試験した。

マウスモデルにおけるセファイボルの神経弛緩効果
ａ）自発的運動性に対する影響
実験室のマウスでの運動力に対するセファイボＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの影響を様々な期間（５分〜２４時間）にわたって観察した。それぞれの場合１ｋｇあたりセファイボルＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥを１０mg腹膜内投与後、選定した実験条件下でそして異なる観察期間の後、対照用マウスと比べて運動力（よじ登り）が損なわれるのが認められた。観察した効果はセファイボルＢおよびＣの投与の後、特に顕著であった。
観察された運動力の抑制はセファイボルが神経弛緩特性を有することを示した。驚愕反応（騒音）は保持され、これによって、セファイボルが実験手順において催眠効果を有する可能性が排除された。

ｂ）低体温症
対照用動物と比較して、そして選定した実験条件下で、実験室マウスにそれぞれの場合１kgあたりセファイボルＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥを１０mg腹膜内投与すると、体温の顕著な低下を生じた（セファイボルＢおよびＣの場合に特に際立った）。このことは、比較的長い時間にわたって観察することができ、また試験されたセファイボルが神経弛緩特性を有することを同様に示した。

フォマ・デストラクティバのモデルでの免疫抑制効果
フォマ・デストラクティバ真菌での色素生成の誘発は、試験物質で可能性のある免疫抑制効果を特に同定するための試験モデルである。フォマ・デストラクティバ試験の実施はK. Dornberger et al. in J. Antibiotics, 48, 977-989, 1995に記載されている。

生物フォマ・デストラクティバは、植物に対する病原性があることが知られ、また植物菌糸体が接種されている寒天板上で薄く着色したコロニーの形で増殖する真菌である。色素の生成を伴い、従って細胞の分化の検出を可能にする細胞分化過程は、特別な誘動物質の影響下で開始する。メラニン様物質であるこの色素は、その色彩によって認識することができ、また測光法によりまたは帯域の大きさを測定することにより定量化することができる。既知の免疫抑制性のシクロスポリンＡは形態的変化および試験用の生物中での色素生成をもたらす。
本発明のセファイボルは、シクロスポリンＡによって示されるのと類似するフォマ・デストラクティバ中での色素生成を惹起することが現在見いだされている。

実験手順
真菌フォマ・デストラクティバを培養基ＡまたはＢが入った傾斜寒天チューブ上で２０〜２５℃で培養し、次いで４〜６℃で保存しそして２年周期で再度接種した。
培養基Ａ：モルトエキス、４０ｇ／Ｌ
イーストエキス、４ｇ／Ｌ
寒天、１５ｇ／Ｌ
培養基Ｂ：ジャカイモ−ブドウ糖寒天（Ｅ．Ｍｅｒｃｋ）、３９ｇ／Ｌ

接種培養基
真菌フォマデストラクティバを直径１００mmのペトリ皿内の培養基Ｂ上で２０〜２５℃で１１日間培養し、そしてその後、無菌の０.９％ＮａＣｌ溶液１０mlで洗い流した。洗
浄液は６℃で保存すると５日間使用できた。

パンチ孔のある板状寒天での拡散試験
この寒天拡散試験方法はthe European Pharmacopoeia [Deutscher Apothekerverlag
Stuttgart, pages 113-118, 1997に記載の標準化された寒天拡散アッセイの改良版であった：４０mLの試験寒天培養基を液化しそして一定温度５０℃にし；８〜１０mLの接種培養物を無菌状態で添加し、次いで混合物を直径１５０mmの試験プレート内に注入した。プレートが冷却した後、パンチ器具を使用して直径９mmの１２個のパンチ孔をプレート上の配列した［J. V. Benett et al. Appl. Micr. 14, 170-177, 1966］。試験すべき溶液５０μLを試験用の孔に装入した。１つの試験孔には対照物質としてシクロスポリン（メタノール５０μL中にシクロスポリンＡ１μg）を入れた。このようにして準備したプレートを２０〜２５℃で４〜５日培養した。
上記した試験条件下で、セファイボルは、シクロスポリンＡによって誘発される黄色の発色に類似する色素生成をもたらした。この効果はセファイボルＡ、ＢおよびＣの場合に特に顕著であった。

Claims

神経学的なおよび／または免疫抑制効果を有する医薬を製造するための、式Ｉ
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−ｘ−ｗ−Ｌｅｕ−ｙ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−ｚ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｒ（Ｉ）
（式中、ＲはＰｈｅ−ｏｌまたはＰｈｅ−ａｌであり、そしてｗ、ｘ、ｙおよびｚは以下の意味
ａ）ｗはＧｌｙまたはＡｌａであり；ｘはＡｉｂであり；そしてｙおよびｚはＩｖａであり；
ｂ）ｗはＧｌｙであり；ｘ、ｙおよびｚはＩｖａであり；
ｃ）ｗはＧｌｙであり；ｘおよびｚはＡｉｂでありそしてｙはＩｖａであり；
ｄ）ｗはＧｌｙであり；ｘ、ｙおよびｚはＡｉｂであり；または
ｅ）ｗはＧｌｙであり；ｘおよびｙはＡｉｂでありそしてｚはＩｖａである
をもつ）
の化合物または式II
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−ｘ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（II）
（式中、ｘはＨｙｐまたはＰｒｏである）
の化合物、およびこれらの生理学的に許容できる塩の使用。
ＲがＰｈｅ−ｏｌである請求項１に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に許容できる塩の使用。
請求項１または２に記載の式ＩもしくはIIの化合物であって、式
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ；
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ；
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｉｖａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ；
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｖａ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ；
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ；
ＡｃＰｈｅ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ｉｖａ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｏｌ；
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒまたは
ＡｃＰｈｅ−Ｉｖａ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｉｂ−Ｌｅｕ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｉｂ−Ｈｙｐ−Ａｉｂ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ
を有する化合物、およびこれらの生理学的に許容できる塩の使用。
神経弛緩効果を有する医薬を製造するための請求項１〜３のいずれかに記載の式ＩまたはIIの化合物の使用。
免疫抑制効果を有する医薬を製造するための請求項１〜３のいずれかに記載の式ＩまたはIIの化合物の使用。
幻覚、妄想、精神運動性興奮、不安性激昂、統合失調症、急性躁病相、急性精神異常症候群、ならびに不安および緊張の状態を治療する医薬を製造するための請求項１〜３のい
ずれかに記載の式ＩまたはIIの化合物の使用。
ネフローゼ症候群を含む慢性糸球体腎炎、慢性炎症性腸疾患、重症筋無力症、自己免疫性肝炎、血小板減少紫斑病もしくは炎症性リウマチ疾患の治療、または移植医療で使用する医薬を製造するための請求項１〜３のいずれかに記載の式ＩまたはIIの化合物の使用。