JP2005179244A - パントテン酸誘導体を有効成分とするラミニン5産生促進剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 パントテン酸誘導体を有効成分とするラミニン5の産生促進剤。主として化粧品または皮膚科学的の分野で有用である。
【選択図】 なし
Description
Rousselle ら J. Cell Biol.114,567,1991 Fine ら J.Am.Acad.Dermatol.,24,119,(1991) Aberdam ら,Nat. Genet. 6,299,(1994) Schmidhauser ら,Proc. Natn. Acad.U.S.A., 87,9118,(1990) Tsunenaga ら,Matrix Biology 17, 603−613(1998) Ryan ら, J. Biol. Chem. 269, 22779−22787 (1994) J. Cell. Biol. 133, 417−430 (1998)
本発明における有効成分とする一般式(A)で示されるパントテン酸誘導体は、上述したとおり、特開2001−348369号公報に記載の既知化合物であるので、そこに記載された方法により得られるものを利用するのが都合よい。
ラミニン5の産生能の測定試験:
(1) 表皮角化細胞の培養
表皮角化細胞はヒト包皮より単離し、カルシウム濃度の低い表皮角化細胞増殖培地(KGM)にて培養した。この培地には牛脳下垂体抽出液とEGFを添加した。細胞は第4代までKGMで培養後、トリプシ−EDTA処理によって接着細胞を浮遊させ、ろ過によって細胞のアグリゲートを除き、均一な細胞懸濁液を得た。遠心分離によって細胞を集め、DMEM−F12(2:1)−0.1%BSAに8×104/mlとなるように再懸濁させた。この細胞懸濁液を0.5ml、2倍濃度の有効成分(被検薬物)を含む同培地0.5mlに加えた。培養は24穴プレートを用いて、37℃にて24時間行った。培養終了時に、培養上清をエッペンドルフチューブに移し、10000rpm5分間遠心分離し、上清を新たなチューブに移し、ラミニン5の測定の日まで−20℃に保存した。細胞内と培養プラスチック上に結合したラミニン5を可溶化するため、各種の界面活性剤を含むトリス塩酸緩衝液(pH7.4)を各穴に添加し、一晩−20℃に保存した。翌日、超音波処理を行い、再度凍結した。翌日、再度溶解後、10000rpmで5分間遠心分離し、上清をチューブに移し、ラミニン5の測定の日まで−20℃に保存した。
培養上清、細胞層に存在するラミニン5はサンドイッチELISA法にて測定した。96穴ELISAプレートの固層にラミニン5のラミニンα3鎖に対するモノクローナル抗体、BM165、を結合させた。ラミニン5をサンドイッチして測定するため、もう一種の抗体としてラミニンβ3鎖に対するモノクローナル抗体である6F12を予めビオチン化(b−6F12)して用いた。本法では、機能を発揮しうるヘテロトリマー体(α3β3γ2)のみを測定し、ヘテロダイマー(β3γ2)を検出しない。b−6F12を含む3%ゼラチン・リン酸緩衝溶液を予め入れておいた各穴に試料を添加する。試料の穴内での最終希釈率は培養液が1/4、細胞層が1/10とした。抗原抗体反応は37℃2時間行い、洗浄した後、アビヂンHRP(ホースラディシュパーオキシダーゼ)溶液を添加し、更に、30分から1時間反応させた。洗浄後、HRPの基質であるABTS溶液を加え、405nmの吸光度をELISAプレートリーダーを用いて測定した。検量線は0〜40ng/mlの範囲で作成した。
結果を下記表1に示す。
実施例1 クリーム
(処方) (%)
ポリオキシエチレン(20モル付加)セチルアルコールエーテル 1.0
メチルフェニルポリシロキサン(20cs) 2.0
流動パラフィン 3.0
2−ヒドロキシ−4−メトキシベンゾフェノン 5.0
N−パントテノイル−2−(2−アミノエトキシ)エタノール 1.0
レチノール 0.1
プロピレングリコール 5.0
グリセリン 2.0
エチルアルコール 15.0
カルボキシビニルポリマー(商品名:カーボポール941,B.F.
Goodrich Chemical company)
0.3
ヒドロキシプロピルセルロース 0.1
2−アミノメチルプロパノール 0.1
防腐剤 適量
香料 適量
イオン交換水 残余
実施例2 乳液
(処方) (%)
ステアリン酸 2.5
ワセリン 5.0
流動パラフィン 10.0
ポリオキシエチレン(10モル)モノオレイン酸エステル 2.0
ポリエチレングリコール1500 3.0
トリエタノールアミン 1.0
カルボキシビニルポリマー(同上) 0.005
N−パントテノイル−2−アミノエタノール 0.5
サイコ抽出物 0.1
亜硫酸水素ナトリウム 0.01
エチルパラベン 0.3
香料 適量
イオン交換水 残余
実施例3 化粧水
(処方) (%)
エタノール 5.0
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 2.0
オレイルアルコール 0.1
2−エチルヘキシル−P−ジメチルアミノベンゾエート 0.18
1,3−ブチレングリコール 9.5
グリセリン 2.0
ピロリドンカルボン酸ナトリウム 0.5
ニコチン酸アミド 0.3
N−パントテノイル−D−グルコサミン 0.1
アルブチン 1.0
β−シクロデキストリン 1.0
エリスリトール 0.05
香料 適量
イオン交換水 残余
実施例4 美容液
(処方) (%)
エチルアルコール(95%) 10.0
ポリオキシエチレン(20モル)オクチルドデカノール 1.0
N−パントテノイル−2−(2−アミノエトキシ)エタノール 0.05
シカクマメエキス 1.5
メチルパラベン 0.15
水酸化カリウム 0.1
グリセリン 5.0
ジプロピレングリコール 10.0
亜硫酸水素ナトリウム 0.03
カルボキシビニルポリマー(同上) 0.2
イオン交換水 残余
実施例5 固形ファンデーション
(処方) (%)
タルク 43.1
カオリン 15.0
セリサイト 10.0
亜鉛華 7.0
二酸化チタン 3.8
黄色酸化鉄 2.9
赤色酸化鉄 1.0
黒色酸化鉄 0.2
スクワラン 8.0
イソステアリン酸 4.0
モノオレイン酸POEソルビタン 3.0
オクタン酸イソセチル 2.0
N−パントテノイル−2−アミノエタノール 0.01
防腐剤 適量
香料 適量
実施例6 乳化型ファンデーション(クリームタイプ)
(処方) (%)
二酸化チタン 10.3
セリサイト 5.4
カオリン 3.0
黄色酸化鉄 0.8
ベンガラ 0.3
黒色酸化鉄 0.2
デカメチルシクロペンタシロキサン 11.5
流動パラフィン 4.5
ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン 4.0
イオン交換水 50.0
1,3−ブチレングリコール 4.5
N−パントテノイル−D−グルコサミン 1.5
ソルビタンセスキオレイン酸エステル 3.0
防腐剤 適量
香料 適量
Claims (5)
- 専ら基底膜の構造変化に随伴する皮膚の障害を予防または治療するためのものである請求項1記載のラミニン5産生促進剤。
- 専ら創傷を治癒するためのものである請求項1記載のラミニン5産生促進剤。
- 専ら表皮の分化を調節するためのものである請求項1記載のラミニン5産生促進剤。
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JP2003421382A JP2005179244A (ja) | 2003-12-18 | 2003-12-18 | パントテン酸誘導体を有効成分とするラミニン5産生促進剤 |
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JP2003421382A Pending JP2005179244A (ja) | 2003-12-18 | 2003-12-18 | パントテン酸誘導体を有効成分とするラミニン5産生促進剤 |
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