JP2004510688A

JP2004510688A - サイトカイン放出調節剤としてのガロタンニン及びエラギタンニン

Info

Publication number: JP2004510688A
Application number: JP2001538925A
Authority: JP
Inventors: フェルドマン，ケネス　エス．
Original assignee: Penn State Research Foundation
Current assignee: Penn State Research Foundation
Priority date: 1999-11-19
Filing date: 2000-11-17
Publication date: 2004-04-08
Also published as: AU1774201A; EP1232169A1; WO2001036436A1; CA2392059A1; CN1222533C; HK1049012A1; US20080070850A1; CN1425021A

Abstract

ガロタンニン及びエラギタンニンを使用してサイトカインの分泌を増大させるか又は阻害する手段及び方法が記載されている。好ましいサイトカイン放出阻害化合物は、これら化合物の炭水化物コアを誤って配列させるリンカー分子を有する二量体ガロタンニンである。好ましいサイトカイン放出促進ガロタンニン及びエラギタンニンはジアリールエーテルリンカー単位を含んでいる。構造的により複雑なエラギタンニンと比較して、本発明の化合物は構造的により単純であり、合成がより容易であり、そしてより強力である。

Description

【０００１】
助成金参照条項
本発明は米国立保健研究所（ＮＩＨ）の助成金、助成金番号ＧＭ３５７２７によって資金が一部提供された。米国政府は本発明に一定の権利を有している。
発明の分野
本発明は、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）及びインターロイキン−１β（ＩＬ−β）を含むサイトカインの産生及び分泌調節剤としてのガロタンニン及びエラギタンニン、これらの合成、並びにサイトカイン放出の増大又は減少によって影響を受ける疾病及び状態におけるこれらの使用方法に関する。
発明の背景
ガロタンニン及びエラギタンニンは植物ポリフェノールの加水分解性タンニンクラスのメンバーである。タンニンは、１９５０年代に初めて単離されそして特徴づけられた植物界の至る所で見られる二次代謝産物である。今日までのところ、５００を超えるエラギタンニンと２００を超えるガロタンニンが同定されている。
【０００２】
ガロタンニンは最も単純な加水分解性タンニンである。この種の化合物は没食子酸でアシル化されている炭水化物コア、通常はグルコースからなっている。ガロタンニン間の異形体はアノマー炭素における立体化学や炭水化物コアに関するガロイル化度の差異から生じる。
【０００３】
より複雑なエラギタンニンはガロタンニンと同一の構築ブロックで構成されている。エラギタンニンに特徴的な定義は、多分２個のガロイル基間における分子内の酸化的Ｃ−Ｃカップリングによって形成される少なくとも１個のヘキサヒドロジフェノイル部分（ＨＨＤＰ）が存在することである。このＨＨＤＰ単位は炭水化物コアの１，６−、１，３−、３，６−及び２，４−位の架橋として同定されているが、２位と３位間又は４位と６位間に最もしばしば見られる。
【０００４】
エラギタンニンはモノマーか又はオリゴマーのどちらかであることができる。単純なエラギタンニン間の異形体は、アノマー炭素の立体化学並びにＨＨＤＰ単位の数、位置及び立体化学における差異を含んでいる。より高順位のタンニンは二量体、三量体又は四量体であることができる。オリゴマーエラギタンニンの炭水化物コアは、恐らく２個のアノマーガロイル単位間の分子間のＣ−Ｏ酸化的カップリングによって形成されると思われるデヒドロジガロイル官能性か又はガロイル基とＨＨＤＰ単位間の同様な結合のどちらかで結合されている。
【０００５】
リポ多糖（ＬＰＳ）又は細菌性内毒素は全てのグラム陰性菌の細胞壁の構成成分である。ＬＰＳの構造は共有結合している４つの部分：オリゴ糖で構成されているＯ−特異的鎖、オクツロソン酸（ｏｃｔｕｌｏｓｏｎｉｃａｃｉｄ）とヘプトピラノースからできている外部コア及び内部コア、並びに脂質膜アンカー、即ち末端リピドＡからなっている。ＬＰＳに対する宿主免疫細胞の応答はサイトカイン、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）及びＴＮＦ−αの分泌に関係している。これらサイトカイン、特にＴＮＦ−αの過剰産生は敗血症や敗血性ショックを生じさせる可能性がある。
【０００６】
敗血症は、グラム陰性菌感染によるＬＰＳへの暴露の結果として低レベル（＜１ｎｇ／ｍＬ）のＴＮＦ−αが産生されることによって引き起こされる。敗血症の特徴的な症状は低体温、発熱及び白血球数増加である。より高レベルのＴＮＦ−α（＞１００ｎｇ／ｍＬ）が産生されると潜在的に致死的な状態、敗血性ショックを生じさせる可能性がある。敗血性ショックは合衆国だけで１年当たり２０，０００人を超える死亡を引き起こしており、そして集中治療室における死亡の主要原因である。この状態は循環器虚脱を引き起こし、多臓器不全や心血管脱出を生じさせる。
【０００７】
ＬＰＳのリピドＡ部分はこの分子の内毒素活性に介在する。このプロセスは細菌溶解で開始され、細菌の細胞壁からＬＰＳが遊離されそしてリピドＡが露出される。ＬＰＳは血清中の濃度が低いとＬＰＳ結合タンパク質（ＬＢＰ）によって結合される。この二量体コンプレックスは末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の膜結合レセプターＣＤ１４と結合する。ＣＤ１４は、サイトカイン放出を生じさせるシグナル形質導入を開始するために、Ｔｌｒ４として同定されている第２のレセプターと結合し（又はそうでない場合、該レセプターを活性化し）なければならない。高濃度のＬＰＳでは、第２の膜結合レセプター、Ｌ−セレクチンと直接結合することができ、そしてこれもサイトカインを放出させる。
【０００８】
ＬＰＳがどのようにしてＬＢＰと相互作用するのか、又はＬＰＳ／ＬＢＰコンプレックスがどのようにしてＣＤ１４と結合するのかは分かっていない。合成及び天然の大腸菌リピドＡは他の全ての合成及び天然リピドＡ試料と比較して最も高い内毒素毒性を示すことが知られている。内毒素活性を与える大腸菌リピドＡの構造的特徴を同定する試みは否定的な結果をもたらした。大腸菌リピドＡの構造の異形体は全て内毒素毒性の低下又は欠如を生じさせる。
【０００９】
現在、敗血性ショックに対する広範囲に有効な治療法は存在していない。ＬＰＳで誘導される細菌性敗血症を阻害する現在の手法には、１）多分リピドＡ／レセプターの相互作用を遮断するＬＰＳアンタゴニスト；又は２）敗血性ショック応答の種々の構成成分（ＬＰＳ、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−αレセプター、ＬＰＳレセプター等）の配列を決定するように設計されているモノクローナル抗体を使用することが含まれる。前者の戦略は一般的に、非常に強力であるが規模拡大生産が不確実になるほど構造的に非常に複雑なリピドＡ類似体／誘導体か又はより入手し易いがはるかにより強力でない小分子作用剤のどちらかに依拠している。後者の手法は費用を懸念して妨げられ、そして結局インビボ有効性試験で期待はずれに終わった。
【００１０】
ＴＮＦ−αや他のサイトカインの過剰産生も幾つかの衰弱性疾患、例えば、らい病、リウマチ様関節炎及び悪液質の原因になっていると信じられており、そしてこの後者は、後期段階エイズ（ＡＩＤＳ）に関連して悪評を獲得している。従って、サイトカイン分泌を阻害することは多数の治療法の目標となってきている。
【００１１】
ＴＮＦ−αレベルを上昇させることは、腫瘍寛解を目標とした多数の治療レジメの重要なポイントであった。最も好ましいケースでは、比較的高濃度のＴＮＦ−αを腫瘍部位に直接投与するとメラノーマや肉腫を有する患者で著しい応答がもたらされた。バーバラ（Ｂａｒｂａｒａ）等、１９９６年。しかしながら、ＴＮＦ−αの全身適用は、その重篤な炎症性効果（ＩＬ−１βに類似している）及び血清からの急速なクリアランス（ｔ_１／２ ≒６．５〜１０．５分）の結果として、無効な治療法である。サンチェス−カンツ（Ｓａｎｃｈｅｓ−Ｃａｎｔｕ）等、１９９１年。
【００１２】
加水分解性タンニンのエラギタンニンサブファミリーは５００を超える構造的に特徴づけられたメンバーに及んでいる。中国及び日本由来のポリフェノールに富む民間薬でこれらの植物の二次代謝産物が果たす役割における関心の高まりから、強力な抗ウイルス及び抗癌治療剤としての有望性を有している幾つかのエラギタンニンが同定された。例えば、バーリンク（Ｂｅｒｌｉｎｃｋ）等（１９９５年）参照。
【００１３】
コリアリインＡ及び構造的に関係のある種アグリモニインやゲミンＡを含む多数のオリゴマーエラギタンニンは、ＩＬ−１βの産生増大によって肉腫−１８０腫瘍に感染したマウスで腫瘍退行を誘導することが見出されている。ミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）等、ケム．ファーム．ブル．（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．）、１９８７年及びアンチキャンサー・レス．（ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＲｅｓ．）、１９９３年。モノマーエラギタンニン、テリマグランジンＩ、テリマグランジンＩＩ、β−Ｄ−ＰＧＧ及びペダンクラギンは非常に有効性の低い抗腫瘍剤であることが見出されている。
【００１４】
本発明者は今や、驚いたことに、或る種のガロタンニン及びエラギタンニンがＴＮＦ−αや他のサイトカインの産生のアップレギュレーション及びダウンレギュレーションのどちらかで役割を果たしていることを発見した。これら化合物の幾つかはＴＮＦ−αの分泌を低下させるのに有用であり、そしてそれによってＴＮＦ−αの過剰産生に関連した疾病、例えば敗血性ショック、らい病及び悪液質の治療法開発においてこれら化合物が適切になることが見出された。他のガロタンニンは腫瘍寛解に使用するためにＴＮＦ−αレベルを増加させるのに有効であることが見出された。
【００１５】
従って、本発明の主要な目的は、ガロタンニン及びエラギタンニンを使用してサイトカイン、例えばＴＮＦ−α及びＩＬ−１βの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００１６】
本発明の更なる目的は、ガロタンニン及びエラギタンニンを使用して、ＴＮＦ−α及び他のサイトカインのレベルを高めて腫瘍寛解を誘導するための組成物及び方法を提供することである。
【００１７】
本発明の更なる目的は、ガロタンニンを使用して、ＩＬ−１β及びＴＮＦ−αを含むサイトカインの急性過剰産生に関連した疾病、例えば敗血症及び敗血性ショックを治療するための組成物及び方法を提供することである。
【００１８】
本発明の未だ更なる目的は、ガロタンニンを使用して、ＩＬ−１β及びＴＮＦ−αを含むサイトカインのより低いレベルの慢性過剰産生に関連した疾病、例えばらい病、リウマチ様関節炎及び悪液質を治療するための組成物及び方法を提供することである。
【００１９】
本発明の更なる目的は、低い毒性を有するガロタンニン及びエラギタンニンを使用してＴＮＦ−αの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００２０】
本発明の更なる目的は、インビボで有効なガロタンニン及びエラギタンニンを使用してＴＮＦ−αの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００２１】
本発明のなお更なる目的は、合成するのが単純で且つ製造するのが経済的なガロタンニン及びエラギタンニンを使用してＴＮＦ−α及び他のサイトカインの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００２２】
本発明のなお更なる目的は、ＬＰＳアンタゴニストであるガロタンニンを使用してＴＮＦ−α及び他のサイトカインの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００２３】
本発明の更なる目的は、ＬＰＳアゴニストであるガロタンニン及びエラギタンニンを使用してＴＮＦ−α及び他のサイトカインの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００２４】
本発明の未だ更なる目的は、サイトカインＩＬ−１βの分泌を殆ど又は全く誘導しないガロタンニンを使用してＴＮＦ−α及び他のサイトカインの産生を調節するための組成物及び方法を提供することである。
【００２５】
上記目的並びに他の目的の各々を達成する方法及び手段は以下の本発明の詳細な説明から明白になるであろう。
発明の要約
本発明は、ガロタンニン及びエラギタンニン、これらのプロドラッグ並びに類似体を使用してサイトカインの産生を調節するための方法及び組成物を記載する。詳細には、本発明の化合物は低い毒性を有しており、そしてこれらの構造に依存して、サイトカインアンタゴニスト又はアゴニストのどちらかとして機能するのに有効であることが見出されている。
【００２６】
本発明のサイトカインアンタゴニストは、モノマーガロタンニン、β−ペンタガロイルグルコース、及び好ましい二量体ガロタンニンからなっており、その際上記化合物の２個の炭水化物コアを結合するリンカー分子はこれらコアの誤った配列を生じさせる。この点に関して、ジアリールエーテル分子は炭水化物コアを整列させ、そして上記化合物をサイトカインアゴニストとして機能させるので、上記リンカー分子はジアリールエーテルであってはならない。これらのアンタゴニストは敗血症／敗血性ショック並びにサイトカインの過剰産生に関連した他の慢性及び急性状態、例えば、らい病、リウマチ様関節炎及び悪液質の治療に有効である。
【００２７】
本発明のアゴニストは、上記化合物の炭水化物コアを結合するエーテル結合を有する二量体ガロタンニン及びエラギタンニンである。これらの化合物はＴＮＦ−αの放出を促進し、そしてこれは順次ＩＬ−１β及び他のサイトカインの産生を誘導し、これら化合物を多数の抗癌戦略で有効にする。本発明は更に、コリアリインＡの合成、並びにコリアリインＡのモノマー前駆体、テリマグランジンＩＩのバイオ模擬的合成のための新規なスキームを含んでいる。
好ましい実施態様の詳細な説明
本発明は、ＴＮＦ−αや他のサイトカインの分泌を調節するためにガロタンニン及びエラギタンニンを開発することに関係している。本発明は、タンニンがＬＰＳと、少なくともＴｉｒ４レセプターを利用するという程度まで同一の生物学的経路で作用するように思われるという発見に根拠を置いている。これらの構造に依存して、本発明のモノマー及び二量体ガロタンニンはＴＮＦ−α及び他のサイトカインの産生及び放出を増大させるか又は阻害するかのどちらかで有効である。本発明のＴＮＦ−αアンタゴニストは、サイトカインの分泌を減少させることによって、そして本発明の好ましい化合物に関しては、ＩＬ−１βの分泌を殆ど又は全く生じさせないことによって、敗血性ショック並びにＴＮＦ−α及び他のサイトカインの過剰産生に関連した他の疾病及び状態の治療で有効である。ＴＮＦ−αアゴニストはＴＮＦ−α及び他のサイトカインの分泌を増大させるのに有効であり、そしてそれ故腫瘍に対して活性を有している。
【００２８】
ここ数年の間、加水分解性タンニンのエラギタンニンサブファミリーのメンバーは、有機合成における多数の現代的な挑戦並びに抗癌及び抗敗血性ショック化学療法の両方における多数の感動的な機会を提供してきた。これらの加水分解性タンニンは配座的に自由でタンパク質が弱く結合しているガロタンニン（Ｋｄ≒ｍＭ）並びにエラギタンニンの両方を含んでいる。本発明以前には、後者のクラスのメンバーしか選択的な生物学的活性に必要な必須の程度のレセプター結合（ＩＣ_５０≒μＭ〜ｎＭ）を提供できないと信じられていた。
【００２９】
本発明者は今や驚いたことに、単純なモノマー及び二量体ガロタンニン並びにエラギタンニンが、ＴＮＦ−α及び他のサイトカインの選択的な放出又は放出阻害を提供するためにＬＰＳレセプターとの必須の結合度を提供できることを発見した。エラギタンニンと比較してガロタンニン化合物は比較的合成し易く、そしてエラギタンニンと同様に低い細胞毒性度を示す。更に、本発明のガロタンニン及びエラギタンニンはＴＮＦ−αレセプターに対して、これまでに知られているタンニン化合物より一層特異的でさえあることが証明されており、そして抗癌及び抗敗血性ショック戦略における有効性を示している。
【００３０】
上記したように、植物ポリフェノールのエラギタンニンファミリーは５００を超える構造的に多様なメンバーのクラスに及んでいる。中国及び日本由来のタンニンに富む民間薬でこれらの植物の二次代謝産物における関心の高まりから、抗癌及び抗ウイルスアッセイで高レベルの活性を示す幾つかのエラギタンニンが同定された。これらのエラギタンニンは典型的には本来的に低い細胞毒性を示し、そしてそれ故、新しい治療法の開発において調査されてきた。
【００３１】
幾つかのエラギタンニンのインビボ抗腫瘍能力の試験によって、二量体エラギタンニンは、モノマー（ガロ）エラギタンニンと比較して一層強力な腫瘍殺害剤であることが示されている。ミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）、ケム．ファーム．ブル．（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．）、１９８７年。肉腫−１８０腫瘍接種の前又は後にマウスにタンニンを腹腔内投与すると同じ程度の腫瘍退行を示す。ミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）、ジャパン・ジェイ．ファーマコル．（Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．）、１９８７年。これらの観察は、内在的に誘導可能な因子がエラギタンニンの抗腫瘍活性で役割を果たしている可能性があることを示唆していた。
【００３２】
或る範囲のタンニンの抗腫瘍活性に関する分子基準でのミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）のインビボ試験によって、これらがマウス腹腔滲出細胞及びヒト末梢血単核細胞（ｈ−ＰＢＭＣ）の両方によるインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）分泌を刺激できることが明らかにされた。ミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）、ケム．ファー．ブル．（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒ．Ｂｕｌｌ．）、１９８７年。ＩＬ−１βは腫瘍殺害天然キラー細胞の活性をアップレギュレーションすることができ、そしてこのことはサイトカインがエラギタンニンのインビボ抗腫瘍活性に介在するというホクリク（Ｈｏｋｕｒｉｋｕ）グループの示唆を増進している。ミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）、アンチキャンサー・レス．（ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＲｅｓ．）、１９９３年。
【００３３】
本発明者は、予期されなかったことに、ＴＮＦ−αが免疫介在性腫瘍寛解に関与するサイトカインであると思われることを見出した。それ故、今やタンニンがＴＮＦ−α分泌を刺激することが示されたので、ＩＬ−１βレベルに関するミヤモト（Ｍｉｙａｍｏｔｏ）の測定は実際には、発生期ＴＮＦ−αに起因する少なくとも或る二次的な産生を反映していた可能性がある。
【００３４】
本発明のＴＮＦ−αアゴニストは、ジアリールエーテル結合単位を有する二量体ガロタンニン及びエラギタンニンである。本発明の好ましい化合物は天然生起の二量体エラギタンニンコリアリインＡ及びアグリモニイン並びにコリアリインＡのガロタンニン類似体である。コリアリインＡ及びアグリモニインの構造は以下に記載する：
【００３５】
【化１２】

【００３６】
【化１３】

【００３７】
本発明の最も好ましい化合物は次の構造を有している：
【００３８】
【化１４】

【００３９】
理解され得るように、天然生起二量体エラギタンニンコリアリインＡのこの類似体は、これがコリアリインＡのＯ（４）／Ｏ（６）結合ＨＨＤＰ単位を欠いていることを除いて、親化合物と同一である。
【００４０】
本発明のアゴニストの合成はまた、コリアリインＡ用の新しい合成プランのモデルとしても役立つ。加えて、コリアリインＡのモノマー前駆体、テリマグランジンＩＩのバイオ模擬的合成も本明細書に記載されている。
【００４１】
本発明のＴＮＦ−αアゴニストの合成に向けた戦略は２つの重要な問題：１）デヒドロジガロイルエーテル結合単位の形成、及び；２）立体化学的に制御されたβ−アノマーガロイル結合の確立に取り組まなければならない。アノマーエステル立体化学に加えて、テリマグランジンＩＩの合成には、１）ＨＨＤＰ部分の（Ｓ）−アトロプ異性体の立体選択的形成、及び２）分子内に存在する他の官能基と共存可能な態様でのアノマー中心の選択的な操作が必要である。Ｐｂ（ＯＡｃ）_４−介在性酸化的ガロイルカップリングは立体化学的に確保された（Ｓ）−ＨＨＤＰ単位を製造するための骨の折れる戦略であることが証明されている。ＴＮＦ−αアゴニスト及びテリマグランジンＩＩの両者におけるβ−アノマーガロイル結合は、適当な塩基の存在下で、適切に保護された中間体のアノマーヒドロキシ基とガロイルクロリドとのカップリングによって確保することができる。
【００４２】
本発明者は、２個の活性化したβ−Ｄ−ＰＧＧ単位を二量体化することによるバイオ模擬的アプローチを推し進めた。この経路は以下に示す：
【００４３】
【化１５】

【００４４】
このスキームでは、アルコール１１のアシル化はトリエチルアミンの存在下でガロイルクロリド１６を使用して達成され、そしてこれによってアノマー位で厳密にβ−立体化学を特徴とするペンタエステル１７が得られた。化合物１７の脱シリル化によってカテコール１８が得られ、そしてこれはオルトクロラニルでオルトキノン１９に酸化した。オルトキノン１９は反応混合物からきれいに沈殿するので、この敏感な化合物を更に精製する必要が無くなる。オルトキノン１９のＢ（ＯＡｃ）_３−介在性ディールス−アルダー二量体化、続いての３工程の還元／配列転位によってパーベンジル化ガロタンニン二量体１２が、オルトキノン１９から出発して４４％の収率で得られた。最終工程で、１２中のベンジルエステルを水素化分解して二量体ガロタンニンが５０％の収率で得られた。
【００４５】
テリマグランジンＩＩ２の合成は既知のアセタール２０で開始する。この合成スキームは以下を参照されたい：
【００４６】
【化１６】

【００４７】
この炭水化物コアの２及び３位のガロイル化によってジエステル２１が７８％の収率で得られる。２１中のＯ（４），Ｏ（６）ベンジリデンアセタールの脱保護によって中間体ジオールが８４％の収率で得られ、そしてこれは直ちに過剰の２２によってＯ（４）及びＯ（６）位の両方でエステル化されてテトラガロイル化合物２３が得られる。ビスシリルエーテル２３の脱シリル化によって酸化的環化前駆体が得られる。このビスフェノール中のＯ（４）及びＯ（６）位におけるガロイル基の分子内ＰＢ（ＯＡｃ）_４−介在性酸化的カップリングによって４，６−（Ｓ）−ＨＨＤＰを有する化合物２４ａ〜ｃが３つのレジオ異性体の混合物として６７％の収率で得られる。２４ａ〜ｃ中のジフェニルメチレンケタールの水素化分解は予知できない反応であり、そしてそれ故２工程の脱保護／保護戦略を採用した。２４ａ〜ｃのジフェニルメチレンケタールを８０％のＨＯＡｃで開裂し、そして得られたヘキサフェノール化合物を直接ベンジル化して、２５が今や１つの異性体として、２工程で５０％の収率で得られる。
【００４８】
全てのフェノール位にベンジルエステルが存在することは、これらエステルが後の中間体に好ましいクロマトグラフィー及び分光学的特性を与え、一方最終工程で純粋なポリフェノール生成物を産生する手段を保持しているので、テリマグランジンＩＩ合成の最終工程で有利であることが証明される。２５のＯ（１）−ニトロベンジルエーテルの選択的な光化学開裂によって、遊離アノマーヒドロキシル基を特徴とするパーベンジル化テリマグランジンＩ誘導体２６が６６％の収率で得られる。トリエチルアミンの存在下でのこのアルコールによる３，４，５−トリベンジルベンゾイルクロリドのエステル化によって２７が専らβ−エステル化生成物として４１％の収率で得られる。最終工程で、２７中のベンジルエーテルの水素化分解によって粗製のテリマグランジンＩＩが得られ、そしてこれはろ過及びヘキサンとジエチルエーテルによる磨砕を繰り返して精製することによって、２が灰色の固形物として３０％の収率で得られる。化学的に合成したテリマグランジンＩＩ２のスペクトルデータは全て、天然に生起する化合物について発表されているデータと相関している。（Ｓ）−ＨＨＤＰアトロプ異性体の存在はＣＤ測定によって確認される。
【００４９】
要約すると、ガロタンニンオルトキノン中間体からデヒドロジガロイルエーテル含有二量体ガロタンニンの最初の全合成が達成された。この合成は、このクラスの化合物の入手におけるオルトキノンのＢ（ＯＡｃ）_３−介在性ディールス−アルダー二量体化の価値を示している。更に、テリマグランジンＩＩ、即ちコリアリインＡの生物合成前駆体の合成が示されている。
【００５０】
本発明のサイトカインアンタゴニストにはモノマーガロタンニンβ−ＰＧＧ及びガロタンニン化合物の２個の炭水化物コアを結合している非ジアリールリンカー単位を有している好ましい二量体ガロタンニンが含まれる。
【００５１】
本発明者は、モノマーガロタンニンβ−ＰＧＧがｈ−ＰＢＭＣからのＬＰＳ誘導性ＴＮＦ−α分泌の阻害において有効であることを発見した。β−ＰＧＧの構造を以下に記載する：
【００５２】
【化１７】

【００５３】
予備的なインビボ結果は、β−ＰＧＧがＴＮＦ−αや他のサイトカインの放出を阻害するのに有効であることを示している。本発明者は、β−ＰＧＧが他の血液タンパク質、例えばラット血清アルブミンと相互作用し得る小さなモノマーガロタンニンであるので、阻害を発揮するためには大量のβ−ＰＧＧが必要であることを見出した。加えて、たとえβ−ＰＧＧで処置したラットがより低いレベルのＴＮＦ−α分泌を示したとしても、低血圧の形態での敗血性ショック応答は依然として観察された。この生理学的効果は、敗血性ショックをもたらすことも示されているサイトカインＩＬ−１βの分泌によるものであると考えられる。β−ＰＧＧはｈ−ＰＢＭＣによる高レベルのＩＬ−１β分泌を生じさせる。それ故本発明者は、その生物学的相互作用において一層選択的でありそしてＩＬ−１βを殆ど又は全く放出しないＴＮＦ−αのインヒビターを見つけるために、他の二量体ガロタンニンを試験した。
【００５４】
〔発明の効果〕
本発明の好ましいサイトカインアンタゴニストは、２個の炭水化物コアを結合しているリンカー単位を有する二量体ガロタンニンである。本発明のアゴニストのジアリールエーテル結合とは異なって、このサイトカインアンタゴニストのリンカー単位は炭水化物コアを誤って配列させ、そしてこれらの化合物にアンタゴニスト活性を与える。それ故、本発明のアンタゴニストのリンカー単位はジアリールエーテルであることはできない。
【００５５】
好ましいアンタゴニストは次の一般的な構造を有している：
【００５６】
【化１８】

【００５７】
上記式中、Ｌは：
【００５８】
【化１９】

【００５９】
からなる群から選択される。これらの好ましい化合物はサイトカインの分泌をβ−ＰＧＧより低下させ、そしてＰＢＭＣにおけるＬＰＳ誘導性のＴＮＦ−αレベルを阻害することができる。
【００６０】
本発明の最も好ましいアンタゴニストは：
【００６１】
【化２０】

【００６２】
からなる群から選択されるリンカー分子を有している。
【００６３】
これらのアンタゴニストは、ＩＬ−１βを殆ど又は全く分泌させないので、最も好ましい。上記したように、サイトカインＩＬ−１βはＬＰＳで刺激される敗血性ショック応答でも放出される。ＩＬ−１βを殆ど又は全く分泌させない化合物は、これら自体が敗血性ショック応答をより少なく誘発するように思われるので、潜在的な敗血性ショック治療法に最適の化合物であろう。
【００６４】
二量体ガロタンニンサイトカインアンタゴニストの合成は、以下の反応スキームに示されているように、適当なビス酸クロリドとアルコール２２との直接的なカップリングに係わっている：
【００６５】
【化２１】

【００６６】
このカップリングに続いてベンジルエーテルを水素化することによって最終生成物１７ｃ〜２１ｃが得られる。１７ｂ、１８ｂ及び２１ｂを与えるカップリングはβ，β’アノマーに関して高いジアステレオ選択性で進行する。１９ｂの合成には他の類似体より高い温度が必要である。この類似体は、^１ＨＮＭＲで測定するとき４：１の比率のβ，β’対α，α’アノマー立体化学で得られる。α，α’アノマーのＨ（１）プロトンはβ，β’アノマーのＨ（１）プロトン（６．０２ｐｐｍ、Ｊ＝９．８Ｈｚ）よりダウンフィールド（６．８８ｐｐｍ）に見られ、そしてより小さなカップリング定数（Ｊ＝３．２Ｈｚ）を有している。２０ｂの合成ではβ，β’、α，α’及びα，β’アノマーの混合物が得られる。しかしながら、上記アルコール２２に２０ａを徐々に加えると主としてβ，β’異性体が得られる。αアノマーのＨ（１）プロトンは６．６９ｐｐｍに見られ、そしてカップリング定数は４．１５Ｈｚである。
【００６７】
酸クロリド１９ａ及び２０ａは商業的に入手可能ではないが、容易に製造される。例えば、１９ａは、以下に示されているようにして、オキサリルクロリド及び触媒ＤＭＦを使用してビス酸２３を酸クロリドに変換して製造することができる：
【００６８】
【化２２】

【００６９】
化合物２１ａは３工程で製造された。ジアリールエーテルエステル２４はウルマンカップリングによって製造された。２４を加水分解してビス酸２５を得、そしてこれは、以下に示されているようにして、オキサリルクロリド及び触媒ＤＭＦによって酸クロリド２１ａに変換された：
【００７０】
【化２３】

【００７１】
本発明のサイトカインアゴニスト及びアンタゴニストは一般的に、癌、敗血性ショック並びにサイトカインの分泌を増加させるか又は阻害することが望ましい他の疾病及び状態の治療で使用することができる。本発明のガロタンニン及びエラギタンニンは製薬的に許容可能な担体と一緒に投与される。製薬的に許容可能な任意の担体は一般的に、この担体がガロタンニン及びエラギタンニンの安定性又は生体内利用効率を顕著には妨げない場合、上記目的に使用することができる。
【００７２】
本発明のガロタンニン及びエラギタンニンは、ヒトや他の動物対象を含む温血動物に対して任意の効果的に製薬的に許容可能な形態、例えば局所、洗浄、経口、坐剤、非経口又は注入可能な投与形態で、局所、口腔内、舌下若しくは鼻スプレーとして又はこれら作用剤を送達するのに有効な任意の他の方法で投与することができる。投与経路は好ましくは、サイトカインレセプターに対するこれら作用剤の送達及び／又は局在性を最適化するように設計されるであろう。
【００７３】
上記活性化合物、即ちガロタンニンに加えて、本発明の製薬組成物は、活性化合物から製薬的に使用できる製剤への加工を促進する適当な賦形剤や補助剤を含有することができる。経口投与形態には錠剤、カプセル、顆粒及び糖衣錠が含まれる。直腸に投与することができる製剤には坐剤が含まれる。他の投与形態には非経口的又は経口的に投与するのに適する溶液及び口腔内又は舌下的に投与することができる組成物が含まれる。
【００７４】
本発明の製薬製剤は、当該技術分野でそれ自体周知の態様で製造される。例えば、これらの製薬製剤は慣用の混合、顆粒形成、糖衣錠製造、溶解、凍結乾燥プロセスによって製造することができる。使用されるプロセスは最終的には使用される活性成分の物理的特性に依存するであろう。
【００７５】
適当な賦形剤は、特に糖類、例えばラクトース若しくはスクロース、マンニトール若しくはソルビトール、セルロース調製物及び／又はリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウム若しくはリン酸水素カルシウムのような充填剤、並びに、例えばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドンを使用したデンプン、ペーストのような結合剤である。所望の場合、上記したデンプン並びにカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天若しくはアルギン酸又はこれらの塩、例えばアルギン酸ナトリウムのような崩壊剤を加えることができる。補助剤は、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸又はこれらの塩、例えばステアリン酸マグネシウム若しくはステアリン酸カルシウム及び／又はポリエチレングリコールのような流れ調節剤及び滑沢剤である。糖衣錠のコアに、所望の場合胃液に対して抵抗性であることができる適当なコーティングを提供することができる。
【００７６】
この目的には、濃縮された糖溶液を使用することができ、そしてこれは任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール及び／又は二酸化チタン、ラッカー溶液並びに適当な有機溶媒若しくは溶媒混合物を含有していることができる。胃液に抵抗性のコーティングを得るために、アセチルセルロースフタレート又はヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートのような適当なセルロース調製物の溶液を、同定するためにか又は種々の組合せの化合物投与量を特徴づけるためには染料及び顔料を糖衣錠コーティングの錠剤に加えることができる。
【００７７】
経口的に使用できる他の製薬製剤にはゼラチンでできているプッシュフィットカプセル、並びにゼラチンとグリセリン又はソルビトールのような可塑剤でできているシールされた軟カプセルが含まれる。プッシュフィットカプセルは上記活性化合物を顆粒の形態で含有していることができ、そしてこのような顆粒はラクトースのような充填剤、デンプンのような結合剤、及び／又はタルク若しくはステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、並びに任意に、安定化剤と混合することができる。軟カプセルでは、上記活性化合物は好ましくは適当な液体、例えば脂肪油、液体パラフィン又は液体ポリエチレングリコールに溶解するか又は懸濁することができる。加えて、安定化剤を加えることができる。直腸で使用できる考えられる製薬製剤には、例えば、上記活性化合物と坐剤基剤との組合せ物からなっている坐剤が含まれる。適当な坐剤基剤は、例えば、天然又は合成トリグリセリド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコール又は高級アルカノールである。加えて、上記活性化合物と基剤との組合せ物からなるゼラチン直腸カプセルを使用することもできる。考えられる基剤材料には、例えば、液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール又はパラフィン炭化水素が含まれる。
【００７８】
非経口投与に適する処方物には水溶性又は水分散性形態中の活性化合物の水溶液が含まれる。加えて、上記活性化合物の懸濁液を適当な油状注入懸濁液として投与することができる。適当な親油性溶媒又は媒体には脂肪油、例えばゴマ油又は合成脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチル又はトリグリセリドが含まれる。水性注入懸濁液は懸濁液の粘度を高める物質を含有することができ、そしてこれら物質には、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／又はデキストランが含まれる。このような組成物はまた、保存剤、湿潤化剤、乳化剤及び分散化剤のようなアジュバントを含んでいることもできる。これらはまた、例えば、細菌保持フィルターでろ過するか、又は該組成物中に滅菌剤を組み入れて滅菌することもできる。これらはまた、投与前に滅菌水、生理食塩液又は他の注射可能な媒体に溶解するか又は懸濁することができる無菌固形組成物の形態で製造することもできる。
【００７９】
慣用の担体と共に投与することに加えて、活性成分は、当該技術分野の熟練者に知られている多様な特別の医薬品送達技術、例えば携帯用注入ポンプによって投与することができる。
【００８０】
投与用の更なる処方物はレミントンズ・ファーマシューチカル・サイエンシズ（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ）、第１８版、ウイリィ・パブリッシング（ＷｉｌｅｙＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）（１９９０年）（この開示はその全体を参考として本明細書に組み入れる）中に記載されている当該技術分野で知られている方法及び量に従って製造することができる。
【００８１】
本発明の組成物は製薬的に許容可能な担体と一緒に、マラリア感染を予防しそして／又は活動的な感染を治療するのに十分な量で投与される。本発明のガロタンニンは極めて低い毒性と、たとえ高投与量であっても程度の低い副作用を有している。ガロタンニンの投与範囲は、多数の因子、例えば活動的な感染又は悪性腫瘍の予防又は治療に使用されるのかどうか、投与経路、所望の投与スケジュール等に依存して変動するであろう。ガロタンニン化合物は好ましくは製薬的な担体中に入れられ、そしてその際その製薬組成物中の該化合物の最終濃度は約１〜１０重量％である。一般的に、このタイプの製薬組成物の投与量範囲はまさに１日当たり約１０から約１０００ｍｌまでの範囲である。或いは、ガロタンニンの投与量は一般的に約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり、約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日が好ましい。上記の投与量は単回投与量として投与することができ、又は投与するために多数回投与量に分割することができる。ガロタンニンは毎日１回〜数回投与することができる。
【００８２】
ガロタンニン及びエラギタンニンに加えて担体成分と共存できる他の医薬品も上記製薬処方物中に組み入れることができる。当該技術分野の通常の技倆を有する者はこのような医薬品を容易に確認することができ、そしてこのような医薬品には、例えば、抗生物質、他の抗ウイルス剤、抗炎症剤等が含まれる。
【００８３】
本発明は、上記したガロタンニン及びエラギタンニン化合物自体だけではなく、該化合物に代謝されるこれらのプロドラッグ並びにこれらの類似体及び生物学的に活性の塩形態、並びに同じ製薬的結果をもたらす光学異性体の使用も意図していることが理解される。
【００８４】
以下の実施例は本発明を説明するために提供するものであって、限定するために提供するものではない。それ故、これらは、種々の処方修正並びに送達方法の修正がなされ、そしてこれらも依然として本発明の精神内であるという理解で提供されている。
【００８５】
実施例１
二量体ガロタンニン及びエラギタンニンの合成
核磁気共鳴スペクトル（^１ＨＮＭＲ、^１３ＣＮＭＲ）は２００、３００又は３６０ＭＨｚ（^１Ｈ）分光光度計のどれかで記録した。低解像の高速原子衝撃マススペクトル（ＦＡＢＭＳ）は、２−ニトロフェニルオクチルエーテル（ＮＰＯＥ）マトリックス又はニトロベンジルアルコール（ＮＢＡ）マトリックス中で得た。高解像の高速原子衝撃マススペクトルはオースティンのテキサス大学（ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｘａｓ）で実施された。円偏光二色性（ＣＤ）測定では２００ｎｍ〜３５０ｎｍの範囲の波長を使用した。スキャニングは、１ｍｍのセル中２５℃で、０．５ｎｍの間隔で１０．０秒の平均時間であった。使用した溶液（単数又は複数）の濃度は１ｍｇ／ｍＬであった。液体（フラッシュ）カラムクロマトグラフィーは、３２〜６３μｍのシリカゲル及び指示された溶媒を使用して実施した。燃焼分析はインディアナ州インディアナポリスのミッドウエスト・マイクロラブ（ＭｉｄｗｅｓｔＭｉｃｒｏｌａｂ）又はテネシー州ノックスビルのガルブライス・ラボラトリーズ（ＧａｌｂｒａｉｔｈＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）によって行われた。エーテル（Ｅｔ_２Ｏ）及びテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）は、窒素下でナトリウム／ベンゾフェノンから蒸留して精製した。ベンゼン、塩化メチレン（ＣＨ_２Ｃｌ_２）、メタノール及びトルエンは窒素下でＣａＨ_２から蒸留した。水分感受性反応は、Ａｒの不活性雰囲気下で予め乾燥したガラス器具中で実施した。^１Ｈ及び^１３ＣＮＭＲスペクトルのコピーは、燃焼分析の対象ではなかった化合物についての純度を確立するためにサポート情報中で提供されている。
【００８６】
修正ステグリッヒ（Ｓｔｅｇｌｉｃｈ）エステル化反応：一般的な方法Ａ。
適当なポリオール（１．０当量）、酸（１ヒドロキシル当たり１当量）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ）（０．５当量）、ＤＭＡＰ・ＨＣｌ（０．５当量）及び１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１ヒドロキシル当たり１．２５当量）の乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（酸中０．１Ｍ）中の溶液をＡｒでパージし、そしてＡｒ下で１５〜２０時間加熱還流した。この溶液を室温（ｒｔ）に冷却し、等容量のＥｔ_２Ｏで希釈し、セライトでろ過し、そしてこのろ液を１Ｍの氷冷Ｈ_３ＰＯ_４中に注いだ。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして真空下で濃縮した。この粗製生成物を、指示された溶媒を使用してフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製した。
【００８７】
修正ステグリッヒ（Ｓｔｅｇｌｉｃｈ）エステル化反応：一般的な方法Ｂ。
適当なポリオール（１．０当量）、酸（１ヒドロキシル当たり１当量）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ）（０．５当量）、ＤＭＡＰ・ＨＣｌ（０．５当量）及び１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１ヒドロキシル当たり１．５当量）の乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（酸中０．１Ｍ）中の溶液をＡｒでパージし、そしてＡｒ下で１５〜２０時間加熱還流した。この溶液を室温に冷却し、セライトでろ過した。このろ液を等容量のＥｔＯＡｃで希釈し、そして１Ｍの氷冷Ｈ_３ＰＯ_４中に注いだ。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして真空下で濃縮した。この粗製生成物を、指示された溶出液を使用してフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、所望のエステルを得た。
【００８８】
シリルエーテル脱保護反応：一般的な方法Ｃ。
適当なｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）保護グルコース誘導体（１．０当量）の乾燥ＴＨＦ（ＴＢＤＭＳ−保護グルコース誘導体中０．０１Ｍ〜０．０５Ｍ）中の溶液にテトラｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）のＴＨＦ中溶液（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液）（ＴＢＤＭＳ基当たり１．５当量）を加えた。この反応物を室温で撹拌し、そしてＴＬＣで追跡した（１０〜４５分）。指示された時間の終了時に、反応溶液を１Ｍの氷冷Ｈ_３ＰＯ_４で注意深く処理し、そして生成物をＥｔ_２Ｏで抽出した。Ｅｔ_２Ｏ層を分離し、水、そしてその後食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして真空下で濃縮した。指示された溶媒を使用して粗製残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにかけて純粋な生成物を得た。
【００８９】
２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−α−Ｄ−グルコピラノース。
１，２，３，４，６−ペンタキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（７．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ２００ｍＬと乾燥ＭｅＯＨ１００ｍＬの混合物に溶解し、そして０℃に冷却した。この溶液中にアンモニアガスを１０分間吹き込んだ。この反応物を０℃で３０分間撹拌し、そしてその後室温に温め、そして更に２．５時間撹拌した。溶媒を除去し、続いてフラッシュカラムクロマトグラフィーでヘキサン中１０％、２５％、そしてその後５０％のＥｔＯＡｃを使用して溶出して、４．１６ｇ（７３％）の２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノースを白色の固形泡状物（α、βアノマーの混合物）として得た。この生成物の一部（３０ｍｇ）を分離用ＴＬＣでベンゼン中１０％のＥｔＯＨを使用して更に精製した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）３４８３、１７２５ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）δ ７．４２〜６．６４（ｍ，６８Ｈ）、６．２３（ｔ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．７９（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．７０（ｔ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５〜４．６５（ｍ，２７Ｈ）、４．２９（ｄｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１２．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．４０（ｂｓ，１Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ １６６．７、１６５．７、１６５．４、１６５．１、１５２．５４、１５２．５０、１５２．４、１４３．１、１４２．９、１４２．８、１４２．７、１４２．６、１３７．４、１３７．３５、１３７．３、１３６．６、１３６．４５、１３６．４、１３６．３３、１３６．３、１２８．５、１２８．４、１２８．３３、１２８．２、１２８．１、１２８．０７、１２８．０５、１２８．０、１２７．９４、１２７．９、１２７．８６、１２７．８、１２７．７８、１２７．５６、１２７．５１、１２７．４、１２７．３、１２４．６、１２４．１、１２３．９、１０９．４、１０９．３、１０９．１、９０．４、７５．１、７５．０、７２．８、７１．２、７１．１、７０．９、７０．０、６７．６、６３．１；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１８６９（ＭＨ^＋、０．５）。元素分析（Ｃ_１１８Ｈ_１００Ｏ_２２として）計算値：Ｃ、７５．８０；Ｈ、５．３５；実測値：Ｃ、７６．１３；Ｈ、５．４５。
【００９０】
３−ベンジロキシ−１，２−ジオキソシクロヘキサ−３，５−ジエン−５−安息香酸メチル。
−３０℃に冷却したオルトクロラニル（１．９７ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ５ｍＬ中溶液に３−ベンジロキシ−４，５−ジヒドロキシ安息香酸メチル（２．０ｇ、７．３ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ１１５ｍＬ中溶液を添加漏斗から６時間かけて滴下して加えた。この反応物を−３０℃で更に０．５時間撹拌し、そしてその後−２０℃で２０時間貯蔵した。沈殿した赤色固形物をろ過して集め、冷Ｅｔ_２Ｏで洗浄し、そして真空ポンプで乾燥して１．１１ｇ（５５％）のオルトキノンを得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７２７、１６７１ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）δ ７．４１〜７．２６（ｍ，５Ｈ）、６．７４（ｓ，１Ｈ）、６．７３（ｓ，１Ｈ）、６．５６（ｓ，２Ｈ）、３．９２（ｓ，３Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨｚ）δ １７９．９、１７４．２、１６４．７、１５２．１、１４１．３、１３４．３、１２８．８、１２８．７、１２７．７、１２４．４、１０７．７、７１．１、５３．４；ＭＳ（−ＦＡＢ）２７２（Ｍ−、１２）。元素分析（Ｃ_１５Ｈ_１２Ｏ_５として）計算値：Ｃ、６６．１８；Ｈ、４．４１；実測値：Ｃ、６５．７５；Ｈ、４．４５。
【００９１】
ジアリールエーテル。
上記オルトキノン（２００ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＣＤＣｌ_３に溶解し、Ｂ（ＯＡｃ）_３（１３６ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を加え、そしてこの混成混合物を−２〜６５℃（油浴温度）で１５時間加熱し、そしてこの時点で^１ＨＮＭＲ分析によってオルトキノンは存在していないことが示された。この反応混合物を冷却し、そしてろ過した。Ｂ（ＯＡｃ）_３ペレットを冷ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄し、そしてろ液及び洗浄液を留去して褐色油状物を得、そしてこの油状物を直ちに５ｍＬのＨＯＡｃ中のＮａＯＡｃ（６０ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）と共に２時間撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃと水間に分配し、そして有機層を食塩水で洗浄しそして乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。有機層を真空下で濃縮して黄色油状物を得、そしてこれをフラッシュカラムクロマトグラフィー（−７８℃、アルゴン下）で精製して１５０ｍｇのデヒドロジガロイルキノンのレジオ異性体混合物を黄色固形物として得た。このキノン混合物を直ちに８ｍＬのＴＨＦ／２ｍＬの水中のＮａ_２Ｓ_２Ｏ_４（１８０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）と共に０℃で１０分間撹拌した。この間に、暗黄色の反応混合物は淡黄色溶液にまで脱色した。この反応混合物をＥｔＯＡｃと水間に分配し、そして有機層を食塩水で洗浄しそして乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。溶媒を真空下で除去して１５０ｍｇの白色固形物（デヒドロジガロイルエーテルのレジオ異性体混合物）を得た。この粗製の白色固形物（１５０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を、ＢｎＣｌ（１２６μＬ、１．１０ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（１９０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）及びＫＩ（２７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を使用して３０ｍＬの還流アセトン中で２４時間ベンジル化した。この反応混合物を冷却し、セライトでろ過し、そしてろ液を真空下で濃縮して油状物を得、そしてこれをフラッシュカラムクロマトグラフィーで１：１のＥｔ_２Ｏ：ヘキサンを使用して精製した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７１８ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）δ ７．４５〜７．１３（ｍ，２７Ｈ）、６．９０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．１４（ｓ，４Ｈ）、５．１２（ｓ，４Ｈ）、４．９７（ｓ，２Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ １６６．４、１６５．２、１５２．６、１４９．９、１４６．８、１４６．５、１４２．５、１４１．７、１３７．９、１３６．８、１３６．７、１３６．６、１３６．３、１２８．６１、１２８．６、１２８．５、１２８．３４、１２８．３、１２９．２、１２８．１、１２７．９６、１２７．９、１２７．７、１２７．５、１２５．０、１１９．８、１１０．８、１０９．１４、１０９．１２、７５．６、７５．３、７５．１、７１．４、７１．２、５２．３、５２．１；ＭＳ（−ＦＡＢ）８１６．５（Ｍ^＋、１００）、ＨＲＦＡＢＭＳ。Ｃ_５１Ｈ_４４Ｏ_１０として計算値：８１６．２９３４；実測値：８１６．２９３３。
【００９２】
３，４，５，３’，４’−ペンタベンジロキシデヒドロジ没食子酸。
ＭｅＯＨ：水の３：１混合物１６ｍＬ中のジアリールエーテル（０．３０ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及び水酸化リチウム水和物（０．１５ｇ、３．７ｍｍｏｌ）を還流させ、そしてそこでＴＬＣでモニタリングしながら３．５時間保持した。この反応混合物を冷却し、そして溶媒を真空下で除去した。残渣を、ヘキサン中５０％のＥｔＯＡｃ、そしてその後ＥｔＯＡｃ中１％のＨＯＡｃを溶出液として使用してフラッシュカラムクロマトグラフィーにかけて、０．１８ｇ（６２％）のジ酸を白色固形物として得た。ＩＲ（ＫＢｒペレット）２６２９、１６８８ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（アセトン−ｄ_６、３００ＭＨｚ）δ ７．５７〜７．１７（ｍ，２７Ｈ）、６．９６（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．２６（ｓ，２Ｈ）、５．２２（ｓ，２Ｈ）、５．２０（ｓ，２Ｈ）、５．１５（ｓ，２Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（アセトン−ｄ_６、５０ＭＨｚ）δ １６７．２、１６５．９、１５３．８、１５０．９、１５０．５、１４９．０、１４７．５、１４７．２、１４３．１、１４２．５、１３９．１、１３８．０、１３７．９、１３７．７、１３７．６、１２９．４、１２９．３、１２９．２、１２９．１、１２８．９７、１２８．９２、１２８．９、１２８．８、１２８．７、１２８．５、１２８．３、１２８．２、１２６．３、１２１．３、１１１．７、１０９．８、７６．１、７５．９、７５．６、７１．９、７１．７、５２．２、５２．０；ＭＳ（＋ＦＡＢ）７８８．５（Ｍ^＋、１００）、ＨＲＦＡＢＭＳ。Ｃ_４９Ｈ_４０Ｏ_１０として計算値：７８８．２６２１；実測値：７８８．２６１４。
【００９３】
１−Ｏ−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−α−Ｄ−グルコピラノシルトリクロロアセトイミデート。
２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノース（１．０ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の乾燥ベンゼン１０ｍＬ中溶液を脱脂水素化ナトリウム（０．０１４ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）に加え、続いてトリクロロアセトニトリル（５３６μＬ、５．２０ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られた溶液を室温で１８時間撹拌した。この反応物を水で希釈し、そして生成物をＥｔＯＡｃ２５ｍＬ中に抽出した。有機層を分離し、そして食塩水で洗浄しそして乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。この溶液を真空下で濃縮しそしてフラッシュカラムクロマトグラフィーでヘキサン中１０％、そしてその後２０％のＥｔＯＡｃを溶出液として使用し精製して、０．９０ｇ（８４％）の１−Ｏ−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−α−Ｄ−グルコピラノシルトリクロロアセトイミデートを白色固形物として得た。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）３３４２、１７２８、１６７８ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）δ ８．６５（ｓ，１Ｈ）、７．４１〜７．１５（ｍ，６８Ｈ）、６．８８（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．２１（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．７３（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．５４（ｄｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１０．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．１３〜４．８８（ｍ，２４Ｈ）、４．８２〜４．６５（ｍ，２Ｈ）、４．３２（ｄｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１２．２Ｈｚ，１Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ １６５．５４、１６５．５０、１６５．１、１６５．０、１６０．５、１５２．６０、１５２．５７、１５２．５１、１５２．５０、１４３．３、１４３．１、１４２．８、１３７．４、１３７．３、１３６．６、１３６．５、１３６．４、１３６．３、１２８．５２、１２８．５０、１２８．４３、１２８．４０、１２８．３４、１２８．３０、１２８．２４、１２８．２０、１２８．１３、１２８．１１、１２８．１０、１２８．０、１２７．９６、１２７．９、１２７．８２、１２７．８、１２７．６、１２７．５２、１２７．５０、１２４．６、１２３．９、１２３．５、１０９．６、１０９．４、１０９．２、１０９．１、９３．２、９０．８、７５．１、７１．３、７１．２１、７１．２０、７１．１１、７１．１、７０．８、６９．２、６２．８；ＭＳ（＋ＦＡＢ）２０１２（ＭＨ^＋、７８）。元素分析（Ｃ_１２０Ｈ_１００Ｃｌ_３ＮＯ_２２として）計算値：Ｃ、７１．６１；Ｈ、４．９７；Ｃｌ、５．２２；Ｎ、０．７０；実測値：Ｃ、７１．６１；Ｈ、５．０７；Ｃｌ、５．４２；Ｎ、０．７２。
【００９４】
１−Ｏ−３，４，５−トリアセトキシベンゾイル−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。
１−Ｏ−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−α−Ｄ−グルコピラノシルトリクロロアセトイミデート（１７０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）及び３，４，５−トリアセトキシ安息香酸（２５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の乾燥トルエン０．８ｍＬ中溶液を還流させ、そしてそこで１８時間保持した。この反応物を冷却し、そして溶媒を真空下で除去し、そして残渣を、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーでヘキサン中２０％、４０％、そしてその後６０％のＥｔＯＡｃを溶出液として使用し精製して６０ｍｇ（３３％）の１−Ｏ−３，４，５−トリアセトキシベンゾイル−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを白色固形物として得た。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７３８、１７３１ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）δ ７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．４６〜７．１６（ｍ，６９Ｈ）、６．２７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．０５（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．８１（ｔ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．６９（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．１５〜４．８８（ｍ，２４Ｈ）、４．７５（ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．４２〜４．３２（ｍ，２Ｈ）、２．２７（ｓ，３Ｈ）、２．２５（ｓ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ １６７．６、１６６．４、１６５．８、１６５．２、１６５．１、１６２．９、１５２．８、１５２．７３、１５２．７、１４３．８、１４３．３、１４２．７、１３９．７、１３７．７、１３７．６、１３７．５、１３６．９、１３６．７、１３６．６、１３６．５、１２８．７、１２８．６、１２８．５３、１２８．５０、１２８．４、１２８．３、１２８．２１、１２８．２０、１２８．１、１２８．０、１２７．８、１２７．７９、１２７．７５、１２６．８、１２４．７、１２３．８、１２３．７、１２３．１、１０９．６、１０９．５、１０９．３、１０９．２、９３．３、７５．３３、７５．３、７３．５３、７３．５、７１．４、７１．３、７１．２、６９．９、６３．４、２０．８、２０．３；ＭＳ（＋ＦＡＢ）２１４７（ＭＨ^＋、２５）。元素分析（Ｃ_１３１Ｈ_１１０Ｏ_２９として）計算値：Ｃ、７３．２５；Ｈ、５．１３；実測値：Ｃ、７２．８４；Ｈ、５．３４。
【００９５】
３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジロキシ安息香酸。
３−ベンジロキシ−４，５−ジヒドロキシ安息香酸（３．００ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（４．３４ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ１３ｍＬ（反応物質を溶解するために必要な最小限度の量）中溶液をＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（６．０ｍＬ、３５ｍｍｏｌ）で処理した。この濁った褐色溶液を室温で１８時間撹拌し、そしてこの時点でＴＬＣによって出発物質が完全に存在していないこと及び３，４−ジ−ｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジロキシ安息香酸が３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジロキシ）ベンゾエートと一緒に存在していることが示された。この反応混合物を２０ｍＬの１ＭＨ_３ＰＯ_４で処理し、そして２００ｍＬのＥｔ_２Ｏで抽出した。有機層を分離し、そして水（１０×５０ｍＬ）、そしてその後食塩水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、そして真空下で濃縮した。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィーでヘキサン中１０％、そしてその後２５％のＥｔＯＡｃを使用して溶出し精製して、１．５３ｇの標題化合物を白色固形物として、３．６１ｇの黄色油状物としての３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジロキシ）ベンゾエートと一緒に得た。このシリルエステル生成物をＨＯＡｃ：ＴＨＦ：水の１：６：２溶液６０ｍＬ中室温で２．５時間撹拌し、そしてこの時点でＴＬＣによって標題化合物しか存在しないことが示された。この反応溶液を重炭酸ナトリウム飽和水溶液で処理し、そしてＥｔＯＡｃ中に抽出した。有機層を分離し、そして水、そしてその後食塩水で洗浄し、そして乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。溶媒を真空下で除去し、続いて残渣をヘキサンで磨砕して、更に２．５２ｇの３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジロキシ安息香酸（２工程で４．０５ｇ、７１％）を得た。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）３５０４、１６８４ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、３００ＭＨｚ）δ ７．４２〜７．３３（ｍ，７Ｈ）、５．０５（ｓ，２Ｈ）、０．９９（ｓ，９Ｈ）、０．９０（ｓ，９Ｈ）、０．２４（ｓ，６Ｈ）、０．０７（ｓ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨｚ）δ １７１．９、１５１．２、１４７．７、１３６．２、１２８．６、１２８．４、１２８．２、１１６．３、１０７．８、７０．９、２６．１、２５．８、１９．０、１８．６、−３．８、−４．１；ＭＳ（＋ＦＡＢ）４８８（ＭＨ^＋、５２）。元素分析（Ｃ_２６Ｈ_４０Ｏ_５Ｓｉ_２として）計算値：Ｃ、６３．９３；Ｈ、８．１９；実測値：Ｃ、６４．１７；Ｈ、８．００。
【００９６】
３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルイソロキシ−５−ベンジルオキシベンゾイルクロライド。３０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２中の３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジルオキシ安息香酸（１．５０ｇ、３．０７ｍｍｏｌ）の溶液を、オキサリルクロライド（２９５μＬ、３．３８ｍｍｏｌ）、次いで触媒量のＤＭＦで処理した。反応を、ＴＬＣによるモニターを伴って室温で攪拌した。２時間後、開始材料の消費が示され、そして減圧下での溶媒の除去、および高減圧下での乾燥は、１．５５ｇ（１００％）の産物を提供した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７４２ｃｍ^−１；１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．４４〜７．３４（ｍ、７Ｈ）、５．０５（ｓ、２Ｈ）、０．９９（ｓ、９Ｈ）、０．９０（ｓ、９Ｈ）、０．２６（ｓ、６Ｈ）、０．０７（ｓ、６Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６７．３、１５１．３、１４７．９、１４３．９、１３５．７、１２８．８、１２８．５、１２８．４、１２４．６、１１８．２、１０８．９、７１．２、２６．０、２５．７、１８．７、１８．６、−４．０、−４．１；ＭＳ（＋ＦＡＢ）（ＭＨ＋２４）。ＨＲＦＡＭＢＳ　Ｃ_２６Ｈ_３９Ｏ_４Ｓｉ_２Ｃｌについての算定：５０７．２１５４；検出５０７．２１２６。
【００９７】
１−Ｏ−（３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジルオキシベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。
【００９８】
トリエチルアミン（１１６μＬ、１．６２ｍｍｏｌ）を、１２ｍＬの乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（アルコール中の０．０５Ｍ）中の２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノース（１．００ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）および３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルイソロキシ−５−ベンジルオキシベンゾイルクロライド（０．３３ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）に添加し、そして溶液を室温で１８時間攪拌した。反応を、１０ｍＬの１Ｍ　ＨＣｌで処置し、そして２５ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、そして水、次いで鹹水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、そして減圧下で濃縮した。溶出液としてヘキサン中の１０％、次いで２５％のＥｔＯＡｃを使用する粗混合物のフラッシュカラムクロマトグラフィーは、白色固体の気泡として０．９６ｇ（７６％）の１−Ｏ−（３，４−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジルオキシベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを与えた。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７３２ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．４８〜７．１８（ｍ、７５Ｈ）、６．２８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．０８（ｔ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．８８（ｄｄ、Ｊ＝９．９Ｈｚ、８．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．７８（ｔ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．１７〜４．７９（ｍ、２７Ｈ）、４．４３〜４．３８（ｍ、２Ｈ）、０．９８（ｓ、９Ｈ）、０．８７（ｓ、９Ｈ）、０．２５（ｓ、３Ｈ）、０．２０（ｓ、３Ｈ）、０．０３（ｓ、３Ｈ）、０．０２（ｓ、３Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６５．６、１６５．５、１６４．９、１６４．７、１６４．４、１５２．５、１５２．４、１５２．３、１５１．１、１４７．７、１４３．１、１４３．０、１４２．９、１４２．５、１４２．２、１３７．４、１３７．３、１３７．２、１３６．３、１３５．９、１２８．７、１２８．５、１２８．４、１２８．３５、１２９．３２、１２８．２４、１２８．２１、１２８．１、１２８．０６、１２８．０３、１２７．９６、１２７．９０、１２７．８１、１２７．７、１２７．５、１２７．４、１２４．５、１２３．８、１２３．７、１２３．６６、１２３．６、１２０．０、１１６．１、１０９．３、１０９．１、１０７．８、９２．７、７５．１、７５．０、７３．５、７３．１、７１．１、７１．０、７０．９、７０．８、６９．８、６３．２、２６．０、２５．７、１８．５、１８．４、−３．４、−３．５；分析　Ｃ_１４４Ｈ_１３８Ｏ_２６Ｓｉについての算定：Ｃ、７３．９０；Ｈ、５．９０：検出；Ｃ、７３．９１；Ｈ、５．９４。
【００９９】
１−Ｏ−（２−ベンジルオキシ−４，５−ジヒドロキシベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。一般的な手順Ｃを使用することによって、１−Ｏ−（３，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−５−ベンジルオキシベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１．１０ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ中の０．０２Ｍ溶液）を、４５分間脱ケイ素化して、溶出液としてヘキサン中の１０％、２５％、次いで５０％のＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーの後に、０．８０ｇ（８０％）の１−Ｏ−（３−ベンジルオキシ４，５−ジヒドロキシベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを提供した。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）３５３４、１７３２ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．４５〜７．１６（Ｍ、７５Ｈ）、６．２４（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．０４（ｔ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．９６（ｂｓ、１Ｈ）、５．８３（ｄｄ、Ｊ＝９．７、８．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．７３（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ）、５．５０（ｂｓ、１Ｈ）、５．１４〜４．７６（ｍ、２７Ｈ）、４．４３〜４．３４（ｍ、２Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６５．６、１６５．５、１６５．０、１６４．９、１６４．３、１５２．５９、１５２．５７、１５２．４７、１４５．７、１４３．７、１４３．３、１４３．２、１４３．１、１４２．６、１３８．１、１３７．５、１３７．３、１３６．４、１３６．３、１３５．６、１２８．７、１２８．６、１２８．５、１２８．４５、１２８．４０、１２８．３、１２８．２、１２８．１、１２８．０９、１２８．０６、１２７．９、１２７．８、１２７．５、１２４．６、１２８．８、１２３．７、１２３．６、１１９．９、１１１．９、１０９．４、１０９．３、１０９．２、１０６．７、９２．９、７５．１、７５．０８、７３．４、７３．３７、７３．３、７１．４、７１．３４、７１．３、７１．２２、７１．２、７１．１、６９．９、６３．２；Ｃ_１３２Ｈ_１１０Ｏ_２６について算定された分析：Ｃ，７５．０７；Ｈ５．２１；検出Ｃ、７４．８８；Ｈ、５．２２。
【０１００】
１−Ｏ−（３−ベンジルオキシ１，２−ジオキソシクロヘキサ−３，５−ジエン−５−ベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。−３０℃に冷却した４ｍＬの乾燥Ｅｔ_２Ｏ中のオルトクロラミル（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）（オルトクロラミル中の０．１Ｍ）に、１２ｍＬの乾燥Ｅｔ_２Ｏ（ジフェノール中の０．０３Ｍ）中の１−Ｏ−（２−ベンジルオキシ−４，５−ジヒドロキシベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（０．８０ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液を、１．５時間にわたって、付加漏斗を介して滴下して添加した。添加が完了した後、得られる濃赤色の溶液をさらに３時間−３０℃にて攪拌し、次いで冷凍庫において−２０℃で１８時間保存した、沈殿された赤色固体を濾過によって回収し、冷却Ｅｔ_２Ｏで洗浄し、そして減圧ポンプにおいて乾燥して、０．５３ｇ（６６％）の産物を赤色の非結晶性の固体として得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７３０、１６７２ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．４５〜７．１７（Ｍ、７３Ｈ）、６．７９（ｄ、Ｊ＝１．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．４７（ｓ、１Ｈ）、６．１３（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．０３（ｔ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．７４（ｔ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、２Ｈ）、５．１５〜４．８５（ｍ、２６Ｈ）、４．７９（ｄ、Ｊ＝９．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．４１〜４．３２（ｍ、２Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨＺ）δ１７９．６、１７３．８、１６５．６、１６５．５、１６４．９、１６４．８、１６２．８、１５２．６、１５２．５、１５２．４、１４３．３、１４３．２、１４０．１、１３７．４、１３７．３、１３６．６、１３６．３、１３６．２、１３４．２、１２８．８、１２８．６、１２８．５、１２８．４９、１２８．４２、１２８．３、１２８．２、１２８．１４、１２８．１０、１２７．９９、１２７．９２、１２７．８８、１２７．８５、１２７．８３、１２７．７６、１２７．５、１２５．６、１２４．４、１２３．４、１２３．３、１０９．４、１０９．３、１０９．２、１０６．８、９３．８、７５．１、７３．５、７２．９、７１．２、７１．１８、７１．１２、７１．０、６９．３、６２．８；ＭＳ（＋ＦＡＢ）２１０９（ＭＨ＋、２１）。分析Ｃ_１８２Ｈ_１０８Ｏ_２６についての算定：Ｃ，７５．１４；Ｈ５．１２；検出：Ｃ、７４．７５；Ｈ、５．２９。
【０１０１】
ベンジル化２量体１２。オルトキノリン（１００ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）を、１．５ｍＬの（ＣＤＣｌ_３）Ｂ（ＯＡｃ）_３（１０ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）中に溶解し、そして添加し、そして異種混合物を６２〜６５℃（油浴温度）で２４時間加熱し、２４時間の時点での１Ｈ　ＮＭＲ分析は、オルトキノリンの不在を示した。反応混合物を冷却し、そして濾過した。残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄しそして濾液および洗浄液をエバポレートして赤味がかった茶色の固体を得、これを即座にＨＯＡｃ（２ｍＬ）：ＴＨＦ（０．５ｍＬ）中のＮａＯＡｃ（４ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）で２時間処理した。この反応混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を鹹水で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、そして減圧下で濃縮して、黄色の残渣を得た。溶出液としてヘキサン中の１０％、次いで５０％のＥｔＯＡｃを使用する−７８℃でのフラッシュカラムクロマトグラフィーは、７８ｍｇの固体を提供し、これを即座に１０ｍＬの８：２　ＴＨＦ：水中のＮａ_２ＳＯ_４（２ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）で１０分間、０℃で処理した。暗黄色の反応混合物は、この時間にわたって淡黄色の溶液に脱色された。反応混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配し、そして有機相を鹹水で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、そして減圧下で濃縮して、白色の固体を得、これを高減圧下で乾燥した。粗白色固体（７８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を、５ｍＬの還流アセトン中の塩化ベンジル（９μｌ、０．０７ｍｍｏｌ）、ならびにＫ_２ＣＯ_２（１３ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＫＩ（９２ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）で２４時間ベンジル化した。反応混合物を冷却し、Ｃｅｌｉｔｅを介して濾過し、そして濾液で減圧下で油に濃縮し、これを溶出液としてヘキサン中の１０％、次いで２０％のＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、４６ｍｇ（４工程を介して、４４％）の過ベンジル化２量体ガロタンニンを供給した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７３１ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．６４〜７．０５（ｍ、１６３Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、６．２３（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．０８（ｍ、２Ｈ）、５．９４（ｔ、Ｊ＝９．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．８４（ｔ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．７４（ｔ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．７０〜５．６２（ｍ、２Ｈ）、５．１５〜４．７０（ｍ、５９Ｈ）、４．５８〜４．３１（ｍ、５Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨＺ）δ１６９．０、１６５．６２、１６５．６、１６５．０、１６４．９、１６４．７、１６４．２、１５２．６、１５２．５４、１５２．５、１４３．３、１４３．２１、１４３．２、１４３．１、１４２．７、１３７．５、１３７．４、１３６．７、１３６．５、１３６．４、１３６．３、１２８．５１、１２８．５、１２８．４２、１２８．４、１２８．３、１２８．２、１２８．１、１２８．０、１２７．９、１２７．８、１２７．６１、１２７．６、１２７．５、１２４．６、１２３．７、１２３．６、１２３．３、１９．５、１０９．４１、１０９．４、１０９．２、９３．０、９２．２、７５．１、７３．５、７３．３、７３．２、７１．４、７１．３、７１．２、７１．１、７１．０、６９．８、６９．７、６３．１、；ＭＳ（＋ＦＡＢ）４４９３（ＭＨ＋、３５）。分析Ｃ_２８５Ｈ_２３６Ｏ_５２についての算定：Ｃ，７６．２０；Ｈ５．２６；検出：Ｃ、７６．０７；Ｈ、５．５２。
【０１０２】
フェノール２量体。２５ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の２量体の溶液（３２ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）およびＣ上の１０％ｐｄ（６ｍｇ、２０重量％）を、１気圧でのＨ_２のバルーン下で２０時間、室温にて攪拌し、アルゴンで数回パージした。Ｃｅｌｉｔｅを介して２回濾過し、そして減圧下で濃縮した。得られる茶灰色の残渣をＥｔ_２Ｏ、ヘキサン、次いでベンゼンですり砕いて６ｍｇ（５０％）の脱ベンジル化された２量体ガロタンニンを淡灰色の固体として得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（アセトン−ｄ_６ _、３００ＭＨｚ）δ７．４２〜６．９３（ｍ、１８Ｈ）、６．７８（ｓ、１Ｈ）、６．３２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．１８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．０９〜５．８７（ｍ、２Ｈ）、５．６９〜５．３９（ｍ、４Ｈ）、４．５６〜４．２５（ｍ、６Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（アセトン−ｄ_６、９０ＭＨＺ）δ１６９．４、１６６．４、１６５．９、１６５．８、１６５．６、１６５．５、１６４．９、１４６．０、１４５．８、１３９．３、１３９．１、１２９．３、１２９．２、１２８．５、１２１．５、１２０．７、１２０．６、１２０．０、１１０．４、１１０．３、１１０．１、９３．４、９２．９、７４．０、７３．３、７１．８、６９．３、６９．２、６６．９、６２．８、；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１８７９（ＭＨ＋、２２）、１９０１（Ｍ＋Ｎａ＋、３６）。ＨＲＦＡＢＭＳ　Ｃ_８２Ｈ_６２Ｏ_５２についての算定：１８７８．２２０７；検出：１８７８．２１９０：Ｃ_８２Ｈ_６２Ｏ_５２Ｎａについての算定：１９０１．２１０５；検出：１９０１．２０８５。
【０１０３】
２−ニトロベンジル　４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。一般的な手順Ａの使用によって、２−ニトロベンジル　４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド（５．２０ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）、および３，４，５−トリベンジルオキシ安息香酸（１１．４ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）を結合して、続いて溶出液としてヘキサン中の１０％、次いで２０％のＥｔＯＡｃを使用するラッシュカラムクロマトグラフィーを行って、１２．６ｇ（７８％）の２−ニトロベンジル　４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを白色固体の気泡として得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７２８ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ８．０６〜８．０３（ｍ、１Ｈ）、７．６７〜７．６４（ｍ、１Ｈ）、７．４４〜７．１７（ｍ、４１Ｈ）、５．７８（ｔ、Ｊ＝９．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．６０〜５．５５（ｍ、２Ｈ）、５．３３（ｄ、Ｊ＝１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１２〜４．９９（ｍ、１３Ｈ）、４．９４（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．４９（ｄｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．９９〜３．８７（ｍ、２Ｈ）、３．７７（ｄｄ、Ｊ＝９．４Ｈｚ、４．７Ｈｚ、２Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６５．２、１６４．９、１５２．５、１５２．４、１４６．６、１４２．８、１４２．７、１３７．３、１３６．６、１３６．５、１３６．４、１３３．８、１３３．７、１２９．１、１２８．４、１２８．３、１２８．２、１２８．１、１２８．０６、１２８．０、１２７．９、１２７．８、１２７．５、１２７．４、１２６．１、１２４．３、１２４．０、１０９．３、１０９．２、１０１，５、１０１．３、７８．７、７５．１、７２．１、７２．２、７１．２、６８．５、６８．１、６６．８、；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１２４８（ＭＨ＋、２２）、分析Ｃ_７６Ｈ_６５ＮＯ_１６についての算定：Ｃ、７３．１３；Ｈ、５．２１；Ｎ、１．１２；検出：Ｃ、７３．１１；Ｈ、５．１７；Ｎ、０．９２。
【０１０４】
２−ニトロベンジル　２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。１７ｍＬの乾燥ＣＨ_３ＯＨおよび１７ｍＬの乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２中の２−ニトロベンジル　４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１．４ｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびヨウ素（０．２８ｇ、１．１ｍｍｏｌ）の溶液を還流にて、Ａｒ下で４８時間加熱した。溶液を室温に冷却した。Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３の飽和水溶液で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、水、次いで鹹水で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、そして減圧下で濃縮した。ベンゼン中の３０％、次いで５０％のＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーは、１．１０ｇ（８４％）の２−ニトロベンジル　２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを白色固体の気泡として提供した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７２６ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ８．０４〜８．０１（ｍ、１Ｈ）、７．６４〜７．６０（ｍ、１Ｈ）、７．４３〜７．１７（ｍ、３６Ｈ）、５．５３（ｄｄ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、８．０Ｈｚ、１Ｈ）、５．３３〜５．２７（ｍ、２Ｈ）、５．１３〜４．８３（ｍ、１３Ｈ）、４．９６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．９１〜４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．０４〜３．９３（ｍ、３Ｈ）、３．６４〜３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．５６（ｂｓ、１Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６７．５、１６５．１、１５２．６、１４６．８、１３７．３、１３６．４、１３３．８、１３３．７、１２８．５２、１２８．５、１２８．４４、１２８．４、１２８．１４、１２８．１、１２７．９９、１２７．９１、１２７．６、１２７．５３、１２７．５、１２４．７、１２４．０、１２３．５、１０９．３、１０９．２、１００．７、７８．１、７５．１、７１．６、７１．２、７１．１、７１．０、６９．９、６８．１、６２．１；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１１５９（Ｍ＋、１８）、分析Ｃ_６９Ｈ_６１ＮＯ_１６についての算定：Ｃ、７１．４４；Ｈ、５．２６；Ｎ、１．２１：検出；Ｃ、７１．３０；Ｈ、５．４５；Ｎ、１．１８。
【０１０５】
２−ニトロベンジル　４．６−ビス（３−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−４，５−ジフェニルメチレンジオキシベンゾイル）−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。一般的な手順Ｂを使用して、２−ニトロベンジル　２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２．１０ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）を、３−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−４，５−ジフェニルメチレンジオキシ安息香酸（１．６２ｇ、３．６２ｍｍｏｌ）と結合し、続いて溶出液としてヘキサン中の１０％、次いで２０％のＥｔｏＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーを行って、２．９９ｇ（８０％）の２−ニトロベンジル　４．６−ビス（３−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−４，５−ジフェニルメチレンジオキシベンゾイル）−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを白色固体の気泡として得た。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７２９ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、７５ＭＨｚ）δ８．０５（ｄ、Ｊ＝１．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９８（ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０〜７．１５（ｍ、６０Ｈ）、５．８４（ｔ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．６７〜５．５６（ｍ、２Ｈ）、５．３１（ｄ、Ｊ＝１５．２Ｈｚ、２Ｈ）、５．１３〜４．８９（ｍ、１４Ｈ）、４．６４（ｄ、Ｊ＝１０．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．３８〜４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．１５〜４．１２（ｍ、１Ｈ）、０．９９（ｓ、９Ｈ）、０．９６（ｓ、９Ｈ）、０．１９（ｓ、６Ｈ）、０．１８（ｓ、６Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６５．６、１６５．３、１６４．９、１６４．４、１５２．５、１４８．６、１４６．８、１４２．８、１４２．０、１４１．７、１３９．９、１３９．６、１３８．６、１３７．４、１３６．５、１３３．７、１２９．２、１２８．９、１２８．４、１２８．３、１２８．１、１２８．０、１２７．６、１２７．５、１２６．２、１２４．６、１２４．２、１２４．０、１２３．５、１２２．５、１１９．１、１１８．１、１１８．２、１０９．３、１０９．１、１０４．１、１００．１、７５．１、７５．０、７３３．３、７２．８、７２．３、７１．２、７１．１、６８．９、６８．３、６２．５、２６．５、２６．０５、２６．０４、１８．３、１８．２、−４．０：ＭＳ（＋ＦＡＢ）２０２０（ＭＨ＋、２３）、分析Ｃ_１２１Ｈ_１１３ＮＯ_２４Ｓｉ_２ついての算定：Ｃ、７１．９２；Ｈ、５．５９；Ｎ、０．６９；検出：Ｃ、７１．１６；Ｈ、５．８０；Ｎ、０．５８。
【０１０６】
２−ニトロベンジル　４．６−ビス（３，４−ジフェニルメチレンジオキシ−５−ヒドロキシベンゾイル）−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。一般的な手順Ｃの使用によって、２−ニトロベンジル　４．６−ビス（３−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−４，５−ジフェニルメチレンジオキシ−ベンゾイル）−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２．６４ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ中の０．０５Ｍ溶液）を３５分間脱ケイ素化し、続いて１０％、次いで溶出液としてヘキサン中の４０％のＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーを行って、１．８０ｇ（７７％）の２−ニトロベンジル　４．６−ビス（３，４−ジフェニルメチレンジオキシ−５−ヒドロキシベンゾイル）−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを得た。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）３５５４、１７２９ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ８．０５〜８．０２（ｍ、１Ｈ）、７．６８（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６８〜７．０８（ｍ、６０Ｈ）、６．２６（ｂｓ、１Ｈ）、５．８３（ｔ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．６３〜５．５２（ｍ、２Ｈ）、５．４２（ｄ、Ｊ＝１５．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４〜４．８７（ｍ、１４Ｈ）、４．６２（ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、４Ｈ）、４．３１〜４．２５（ｍ、１Ｈ）、４．１１〜４．０６（ｍ、１Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、７５ＭＨＺ）δ１６５．６、１６５．４、１６４．９、１６４．５、１５２．５、１４８．５、１４８．３、１４６．３、１４２．８、１３９．６、１３９．２、１３８．、１３８．７、１３８．６、１３７．４、１３７．３、１３５．５、１３４．４、１３４．２、１２９．４、１２９．３、１２８．５、１２８．４、１２８．３５、１２８．３１、１２８．３、１２８．２、１２８．１、１２７．９９、１２７．９０、１２７．８、１２７．６、１２７．５、１２６．３、１２６．２、１２４．８、１２４．１、１２３．７、１２３．６、１２２．７、１１８．９、１１８．７、１１４．４、１１３．６、１０９．３、１０９．２、１０３．６、１００．７、７５．１、７３．２、７２．７、７２．３、７１．２、７１．１、６９．５、６７．７、６３．２；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１７９２（ＭＨ＋、４０）、分析Ｃ_１０９Ｈ_８５ＮＯ_２４ついての算定：Ｃ、７３．０３；Ｈ、４．７５；Ｎ、０．７８；検出：Ｃ、７３．２３；Ｈ、４．８８；Ｎ、０．５５。
【０１０７】
２−ニトロベンジル　４．６−（３，４−ジフェニルメチレンジオキシ−５−ヒドロキシ−３’、４’−ジフェニルメチレンジオキシ−５’ヒドロキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドの部分異性体（ｒｅｇｉｏｉｓｏｍｅｒｉｃ）混合物。５ｍＬの乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２中のＰｂ（ＯＡｃ）_４（０．４９ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）の溶液を、１８０ｍＬの乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（ビスフェノール中の０．００５Ｍ）中の２−ニトロベンジル　４．６−ビス（３，４−ジフェニルメチレンジオキシ−５−ヒドロキシベンゾイル）−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１．８０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびピリジン（３２６μＬ、４．０ｍｍｏｌ）の冷却された（−３０℃）脱酸素された溶液に、３０分間にわたって滴下して添加した。濃いオレンジ色の溶液を−３０℃にてさらに１時間攪拌し、ＮａＨＣＯ_３の１００ｍＬの飽和化水溶液で処理し、そして２５０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を７５ｍＬの１Ｍ　Ｈ_３ＰＯ_４、次いで鹹水で洗浄し、そして乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。減圧下での濃縮、続く得られる黄色の残渣の、ヘキサン中の１０％、２０％、次いで３５％のＥｔＯＡｃを使用したシリカゲルクロマトグラフィーによる精製は、３つの部分異性体の１．２１ｇ（６７％）の混合物を、黄色固体として供給した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７４７、１７３１ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ８．０５〜８．０２（ｍ、１Ｈ）、７．９８〜７．００（ｍ、５７Ｈ）、６．７９〜６．７１（Ｍ、２Ｈ）、５．６６〜５．５６（ｍ、２Ｈ）、５．４８〜５．２９（ｍ、２Ｈ）、５．１８〜４．１９（ｍ、１５Ｈ）、４．１４〜３．９０（ｍ、２Ｈ）；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１７９０（ＭＨ＋、８０）、分析Ｃ_１０９Ｈ_８３ＮＯ_２４ついての算定：Ｃ、７３．１１；Ｈ、４．６４；Ｎ、０．７８；検出：Ｃ、７２．８９；Ｈ、４．８８；Ｎ、０．６７。
【０１０８】
２−ニトロベンジル　４，６−ビス（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。　２−ニトロベンジル　４，６−ビス（３，４−ジフェニルメチレンジオキシ−５−ヒドロキシ−３’、４’−ジフェニルメチレンジオキシ−５’ヒドロキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１．３０ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を７５ｍＬの８０％ＨＯＡｃにおける還流にもたらし、そしてそこで１６時間保持した。溶媒を除去して油を得、これをヘキサンですり砕き、１．１０ｇの粗２−ニトロベンジル　４，６−ビス（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサヒドロキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを黄色固体として得た。粗ヘキサヒドロキシ化合物（１．１０ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）および水素化ナトリウム（０．２２ｇ、９．０３ｍｍｏｌ）（油中の６０％懸濁液）を、１０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中で０℃にて１０分間攪拌した。臭化ベンジル（０．８１ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）、次いでテトラ−ｎ−ブチルヨウ化アンモニウム（ＴＢＡＩ）（０．２５ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）の添加後、得られる濁った茶色の懸濁液を９０分間にわたって室温に加温させ、そしてさらに１８時間、室温で攪拌した。反応物を水で希釈し、そしてＥｔ_２Ｏで抽出した。有機層を分離し、水、次いで鹹水で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、そして黄色の油に濃縮した。溶出液としてヘキサン中の１０％、２０％、次いで３０％のＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによるこの残渣の精製は、０．７５ｇ（５０％）の２−ニトロベンジル　４，６−ビス（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを白色固体の気泡として生じた。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）１７２８ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ８．０８〜８．０５（ｍ、１Ｈ）、７．７０〜７．６７（ｍ、１Ｈ）、７．４９〜６．８５（ｍ、６８Ｈ）、５．７３〜５．６１（ｍ、２Ｈ）、５．４７〜５．３４（ｍ、２Ｈ）、５．２３〜４．７３（ｍ、２７Ｈ）、４．２２〜４．１７（ｍ、１Ｈ）、４．１１（ｄ、Ｊ＝１３．２、１Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ１６７．４、１６６．７、１６５．９、１６４．９、１５２．７、１５２．６、１５２．５、１５２．３、１５２．２、１４６．８、１４４．７、１４４．５、１４３．１、１３７．７、１３７．６、１３７．５、１３７．４、１６．５、１３６．４、１３３．９、１３３．７、１２８．７、１２８．、１２８．５、１２８．４６、１２８．３９、１２８．３６、１２８．３３、１２８．２６、１２８．２２、１２８．１、１２８．０２、１２８．０１、１２７．９、１２７．８７、１２７．８４、１２７．７、１２７．６、１２７．５６、１２７．５０、１２７．４、１２７．３、１２７．２、１２６．７、１２４．６、１２４．１、１２３．９、１２３．６、１２３．４、１０９．５、１０８．０、１０７．９、１０１．３、７５．４、７５．１、７５．０、７４．９、７３．４、７２．４、７１．９、７１．３、７１．２、７１．１、７０．３、６８．１、６７．９、６３．１；ＭＳ（＋ＦＡＢ）２０２０（ＭＨ＋、５６）、分析Ｃ_１２５Ｈ_１０３ＮＯ_２４ついての算定：Ｃ、７４．９６；Ｈ、５．１５；Ｎ、０．６９；検出：Ｃ、７４．７３；Ｈ、５．１７；Ｎ、０．６４。
【０１０９】
４，６−ビス（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジル−オキシ）ベンゾイル）−α−Ｄ−グルコピラノース。２−ニトロベンジル　４，６−（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１００ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を、６ｍＬのＴＨＦ、６ｍＬのＥｔＯＨ、および１ｍＬの蒸留水の混合液中に溶解し、そしてＲａｙｏｎｅｔ光化学装置において吊り下げられたＰｙｒｅｘ管中で、３５０ｎｍにて７．５時間、照射した。減圧下での溶媒の除去は油を生じ、これは溶出液としてヘキサン中の１０％、次いで２０％のＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーの際に、６２ｍｇ（６６％）の４，６−ビス（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル２，３−ビス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノースを白色固体として提供した（α、βアノマーの混合物）。この産物のサンプル（２５ｍｇ）をさらに、溶出液としてベンゼン中の５％ＥｔＯＡｃを使用する分離用の薄層クロマトグラフィーによって精製して１５ｍｇの産物を提供した。ＩＲ（ＣＨ_２Ｃｌ_２）３５１２、１７２５ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．４７〜６．８３（ｍ、６６Ｈ）、６．０５（ｔ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．７２（ｄ、Ｊ＝３．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．４０〜４．６９（ｍ、２８Ｈ）、３．９４（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．３７（ｂｓ、１Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ１６７．７、１６７．０、１６５．９、１６５．３、１５２．６４、１５２．６、１５２．５４、１５２．５２、１５２．３、１５２．２、１４４．７、１４４．３、１４２．９、１４２．８、１３７．７、１３７．６、１３７．５、１３７．４、１３７．３、１３６．５、１３６．４２、１３６．４、１３６．３１、１３６．３、１２８．８、１２８．５、１２８．４、１２８．４、１２８．３２、１２８．３、１２８．２、１２８．１、１２８．０、１２７．９７、１２７．９１、１２７．８８、１２７．８３、１２７．７、１２７．６、１２７．５６、１２７．５３、１２７．３、１２７．６、１２７．５６、１２７．５３、１２７．３、１２４．１、１２３．９、１２３．７、１２３．４、１０９．３、１０８．０、１０７．８、９０．７、７５．５、７５．４、７５．１、７５．０、７４．８、７３．１、７１．２、７１．１、７１．０、７０．９、７０．４、６７．０、６３．５；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１８６７（ＭＨ＋、１６）；ＨＲＭＳ　Ｃ_１１８Ｈ_９８ＮＯ_２２ついての算定：１８６６．６５４９；検出：１８６６．６５２８。
【０１１０】
４，６−（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−１，２，３−トリス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド。５ｍＬのベンゼン中の４，６−（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノース（１００ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を、２ｍＬのベンゼン中の３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイルクロライド（３０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２２μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）の溶液を含有するフラスコに添加した。反応混合物を室温で１８時間攪拌した。次いで溶液を５ｍＬの氷冷１Ｍ　ＨＣｌで処理し、そして１５ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を、水、次いで鹹水で洗浄し、そして乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。減圧下での溶媒の除去は、白色固体を供給し、これを溶出液としてヘキサン中の１０％　ＥｔＯＡｃ、ついでヘキサン中の２５％　ＥｔＯＡｃを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、５０ｍｇ（４１％）の４，６−（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−１，２，３−トリス（３，４，５−トリベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを白色固体として提供した。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７３５ｃｍ^−１；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３ _、３００ＭＨｚ）δ７．５０〜６．８４（ｍ、８３Ｈ）、６．１０（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．８２（ｍ、２Ｈ）、５．５１（ｔ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．４２（ｄｄ、Ｊ＝６．４、１３．３Ｈｚ）、５．２１〜４．７２（ｍ、３０Ｈ）、４．３８（ｄｄ、Ｊ＝６．０、９．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．１０（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、１Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、９０ＭＨｚ）δ１６７．４、１６６．８、１６５．７、１６４．８、１６４．２、１５２．７、１５２．６１、１５２．６、１５２．５、１５２．３、１５２．２、１４４．８、１４４．４、１４３．３、１４３．２、１４３．１、１３７．６４、１３７．６、１３７．５、１３７．３４、１３７．３１、１３７．３、１３６．４４、１３６．４、１３６．３、１２８．６、１２８．４２、１２８．４、１２８．３８、１２８．３、１２８．２２、１２８．２、１２８．０３、１２８．０、１２７．９７、１２７．９１、１２７．９、１２７．７、１２７．６、１２７．５、１２７．３、１２３．８、１２３．６、１２３．４、１２３．２、１０９．５、１０９．４、１０９．３、１０７．９１、１０７．９、９３．１、７５．５、７５．４、７５．１、７５．０、７４．８、７３．１、７２．７、７１．６、７１．２、７０．１、６３．０；ＭＳ（＋ＦＡＢ）２２８８（Ｍ＋、２０）、分析Ｃ_１４６Ｈ_１２０Ｏ_２６ついての算定：Ｃ、７６．５７；Ｈ、５．２４；検出：Ｃ、７６．３８；Ｈ、５．４０。
【０１１１】
テリマグランディン　ＩＩ。１．５ｍＬのＴＨＦ中の４，６−（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジルオキシ）ジフェノイル−１，２，３−トリス（３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（２６ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）および１０％　Ｐｄ／Ｃ（５ｍｇ、開始材料の２０重量％）の溶液を水素で６回パージし、そして水素のバルーン下、室温にて１８時間攪拌した。次いで反応混合物をアルゴンで２回パージし、そしてＣｅｌｉｔｅを介して２回濾過した。濾液を濃茶色の固体に濃縮し、これをヘキサンおよびジエチルエーテルで数回すり砕き、そして乾燥して３ｍｇ（３０％）のテリマグランディン　ＩＩを灰色固体として供給した。^１Ｈ　ＮＭＲ（アセトン−ｄ_６ _、２００ＭＨｚ）δ７．１１（ｓ、２Ｈ）、６．９９（ｓ、２Ｈ）、６．９６（ｓ、２Ｈ）、６．６５（ｓ、１Ｈ）、６．４５（ｓ、１Ｈ）、６．２０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．８４（ｔ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．５９（ｔ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．３７（ｄｄ、Ｊ＝６．４、１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２１（ｔ、Ｊ＝１０Ｈｚ、１Ｈ）、４．５４（ｄｄ、Ｊ＝５．９、９．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．８８（ｄ、Ｊ＝１４Ｈｚ、１Ｈ）；^１３Ｃ　ＮＭＲ（アセトン−ｄ_６、９０ＭＨｚ）δ１６８．０、１６７．６、１６６．２、１６５．４、１６５．０、１４６．１、１４５．９、１４５．８、１４５．３、１４４．５、１３９．８、１３９．３、１３９．１、１３６．６、１２６．６、１２６．０、１２０．５、１１９．９、１１５．５、１１０．４、１１０．２、１１０．１、１０８．３、１０７．９、９３．７、７３．２、７３．１、７１．７、７０．７、６３．１；ＭＳ（＋ＦＡＢ）９３８（Ｍ^＋、５６）、９３７（Ｍ−１、９５）；ＣＤ（ＭｅＯＨ）２３５ｎｍ、＋３１．７、２６１ｎｍ、−７．５、２８１．５ｎｍ、＋７．７；ＨＲＭＳ　Ｃ_４１Ｈ_２９Ｏ_２６ついての算定：９３７．０９４７；検出：９３７．０９４３。
【０１１２】
実施例２
ガロタンニン及びエラグタンニン二量体暴露に続くｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α及びＩＬ−βの産生
Ａｇｒｉｍｏｎｉｉｎとｃｏｒｉａｒｉｉｎの標準品はＹｏｓｈｉｄａ教授（岡山大学、日本）から供給を受けた。二量体ガロタンニン（ＣｏｒｉａｒｉｉｎＡ類似体）を記述されたように合成した。ＬＰＳ（大腸菌０５５−Ｂ５、フェノール抽出、分子量範囲５０〜１００ＫＤ）、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｈｙｓｔｏｐａｑｕｅ（ρ＝１．０７７ｇ／ｍＬ）、不稔性ハイブリドーマ試験ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、ゲンタマイシン１０ｍｇ／ｍＬ、Ｌ−グルタミン、２００ｍＭデキストラン−５１２リュウコノストク（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属平均分子量５８００００及びトリパンブルー染色剤はＳｉｇｍａから購入した。フェノールレッド仲介ハンクス緩衝食塩水１Ｘ（ＨＢＳＳ）及び仲介ＲＰＭＩ１６４０１ＸはＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃから、ヒトＩＬ−β及びＴＮＦ−α酵素結合イムノソルベント検定（ＥＬＩＳＡ）キットはＲ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ（ミネアポリス、ミネソタ州）から入手した。新鮮なヘパリン添加血液は健常人被験者（年齢２０〜３４）から入手した。
【０１１３】
用量−反応データ：一般的操作
Ｈ−ＰＢＭＣを報告された操作（１０，１８）によって単離した。細胞の計数及び生存率をトリパンブルー排除によって決定した（標準的な生存率は９５％を超えていた）。所要量のＲＰＭＩで希釈することによって０．５ｍＬウェル内の細胞濃度を１ｘ１０^６細胞／ウェルに調節した。
【０１１４】
ＨＢＳＳ中のタンニン（またはＬＰＳ）原液適当量をそれぞれのウェルに加えて図に報告した濃度値にした。それぞれの濃度値を３回とブランク試験を行って、バクテリア汚染により実験値が錯綜しないようにした。培養プレートを５％ＣＯ_２、３７℃加湿インキュベーター中で指定時間インキュベートした。時間間隔の終わりに各ウェルから４５０μＬの培養上清を採取し、４００ｇ、２５℃で１０分間の中断で遠心分離し、サイトカインＥＬＩＳＡ分析まで保存した。標準検量線を用い製造者の指示書に従ってＥＬＩＳＡ検定を行い、観察された吸光度の読みからサイトカイン濃度を計算した。サイトカインの報告値は３回の試行値の平均±標準誤差である。
【０１１５】
結果
本研究において、二量体抗腫瘍エラグタンニンｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ及びａｇｒｉｍｏｎｉｉｎ、一量体ガロタンニンβ−Ｄ−ペンタガロイルグルコース（β−Ｄ−ＰＧＧ）及び本発明の二量体ガロタンニンの全てを検討した。二量体ガロタンニンはｃｏｒｉａｒｉｉｎＡの類似体であり、Ｏ（４）及びＯ（６）でのガロイル環がヘキサヒドロキシジフェノイル（ＨＨＤＰ）結合に加わっていないことを別にして、親エラグタンニンと同じである。ｈ−ＰＢＭＣを検討する化合物で指定時間インキュベートし、培養上清中に存在したＩＬ−１βとＴＮＦ−αの両方の量を別々に市販のＥＬＳＡキットを用いて決定した。それぞれの場合において、正の制御としてＬＰＳを用い、その一方で未処理の細胞を負の制御として保有した。
【０１１６】
自然産物での初期試験をＭｉｙａｍｏｔｏが記述した条件下で行った。２８μＭのａｇｒｉｍｏｎｉｉｎ処理後に、ｈ−ＰＢＭＣはブランク上で約１ｎｇ／ｍＬのＩＬ−１β、以前の報告に対比される結果（２０μＭａｇｒｉｍｏｎｉｉｎで約１．２ｎｇ／ｍＬ）を分泌した（図１）。これらの同じ実験条件を用いて北陸大学の従来研究との比較を行い、ｃｏｒｉａｒｉｉｎＡもまた顕著なＩＬ−１β誘発能、おそらくモルベースでａｇｒｉｍｏｎｉｉｎの２の誘発能を示した（図１）。Ｌ９２９マウスの繊維芽細胞のｃｏｒｉａｒｉｉｎＡとＡｇｒｉｍｏｎｉｉｎの両方での定量溶菌アッセイ（１９，２０）を用いるさらなる探索実験で、これらの二量体エラグタンニンもかなりの量のＴＮＦ−αの放出を促進することが明らかになった。ｈ−ＰＢＭＣ上清中でのＴＮＦ−αレベルのこの間接的な測定はこのサイトカインをタンニン仲介抗腫瘍活性に関係付ける最初の証拠を提供するものであり、以下に説明するようにａｇｒｉｍｏｎｉｉｎ及び関連種のＴＮＦ−α放出能に関するさらなる定量的評価を促すことになった。
【０１１７】
ｈ−ＰＢＭＣからのａｇｒｉｍｏｎｉｉｎ仲介ＩＬ−１β分泌の時間推移はＭｉｙａｍｏｔｏによって描写された。このサイトカインの顕著な放出は４時間処理後に明らかであり、約２４時間で最大分泌を示した。対照的に、本研究に用いたｈ−ＰＢＭＣからのβ−Ｄ−ＰＧＧまたは二量体ガロタンニン処理に際しての両ＩＬ−１β及びＴＮＦ−αの放出は大きく異なるプロフィール（図２及び３）に従った。全ての場合において、サイトカイン放出の最大値は約２４時間（Ｍｉｙａｍｏｔｏの系に類似）で観察されたが、どちらかのサイトカインの極微量だけが初めの４時間の読みに検出された。しかしながら、これらのデータは両二量体ガロタンニン及び大きな大きさのβ−Ｄ−ＰＧＧがｈ−ＰＢＭＣからのＩＬ−１β産生の促進に効果的であることを明白に示すものである。対比的に、二量体構造は低級同属体よりもこれらの特定濃度値でのＴＮＦ−αの放出誘出に更に堪能であると思われる。これらの有望な観察がポリフェノール系構造物に関する用量−反応プロフィールのさらに詳細な開発を鼓舞した。自然産物ａｇｒｉｍｏｎｉｉｎの供給に制限のあることがそのＴＮＦ−α反応の検討の妨げとなったことは残念であった。
【０１１８】
異なる被験者からのｈ−ＰＢＭＣを別々の実験に用いて２４時間暴露での単量体種及びその二量体相対物に関する両ＩＬ−１β及びＴＮＦ−αの用量−反応曲線を得た（図４〜７）。ＣｏｒｉａｒｉｉｎＡ及びＬＰＳデータを比較のためにこれらグラフの中に含めた。図４及び５はβ−Ｄ−ペンタガロイルグルコースがどちらかの被験者におけるＩＬ−１β分泌誘発能においてｃｏｒｉａｒｉｉｎＡに類似であることを示す。加えて、これらのグラフは類似特性がβ−Ｄ−ＰＧＧのＯ−１−ガロイル結合二量体及びガロタンニン−エラグタンニンハイブリッドにも付随することを明らかにする。一緒にすると、これらの結果はこれらポリフェノール系がＩＬ−１β放出開始の厳格な分子認識基準に符合するはずであるという条件に関する支持を提供するものでない。Ｍｉｙａｍｏｔｏのマウス研究は実際にタンニン類間の抗腫瘍活性に関し十分に画定された構造要件（すなわち、ライフスパンの増加：ｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ（２３８％）、β−Ｄ−ＰＧＧ（８２％）、リグレッサー：ｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ（３／６）、β−Ｄ−ＰＧＧ（０／６））を認めるために、動物全体の抗腫瘍反応におけるＩＬ−１βの役割が疑問とて喚起されている。
【０１１９】
しかしながら、ＴＮＦ−α放出データ（図６及び７）は異なる説を教示する。β−Ｄ−ＰＧＧのいずれかの被験者における対比濃度でのＴＮＦ−α放出促進は二量体またはｃｏｒｉａｒｉｉｎＡよりも遥かに少ない。さらに、類似体の用量−反応プロフィールは、少なくとも低濃度域において、ｃｏｒｉａｒｉｉｎＡのプロフィールに類似である。これらのデータはｈ−ＰＢＭＣ内ＴＮＦ−α誘発経路における幾らかの認識要素による構造に基づく区別が単量体及び二量体タンニン種の間に存在することを示唆する。このＴＮＦ−α誘出能の差はマウス／肉腫−１８０系の抗腫瘍特性における全体的傾向に平行している。その上、非類似種間におけるＩＬ−１β分泌プロフィールのもっともらしい類似性はＩＬ−１β産生を上方制御するための一次生成ＴＮＦ−αの人工物そのものであるのかもしれない。
【０１２０】
結論として、単量体化合物β−ＰＧＧに対比される二量体タンニンｃｏｒｉａｒｉｎＡ及びｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ類自体のｈ−ＰＢＭＣからの高レベルＴＮＦ−α誘発能が実証された。この観察は従来のインビボ研究に合致するものであり、従来研究では二量体タンニンは単量体タンニンと比較された場合に良好な抗腫瘍活性を示していた。これらの実験結果はタンニンインキュベートｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α産生の程度がタンニンの抗腫瘍効力と相関するかもしれないことを示唆する。二量体ガロタンニンの活性は関連エラグタンニンｃｏｒｉａｒｉｉｎＡの活性と区別することができず、タンニン系化学療法剤開発における先導として、この構造的がより簡単で合成的アクセスが可能な種の利用可能性を提起している。
【０１２１】
実施例３
タンニンが機能する生理経路
タンニンがＬＰＳ受容体系を介して免疫機能を変調するか否かを探る実験を行った。タンニンはＬＢＰ／ＣＤ１４及びＴｌｒ４と特異的に相互作用してサイトカイン分泌を誘発するのであろうか？この疑問を試験するために１００ｎｇ／ｍＬ以下のレベルでＬＰＳ非反応Ｃ３Ｈ／ＨｅＪマウス系を用いた。これらマウスはシグナル伝達を阻害するとされているＴｌｒ４タンパクコード領域にプロリン−ヒスチジンの点変異を持つ。
【０１２２】
Ｃ３Ｈ／ＨｅＪマウスがＬＰＳ非反応であるかを調べるために、Ｃ３Ｈ／ＨｅＪマウス及びＬＰＳ反応マウス（Ｃ３Ｈ／ＨｅＯｕＪ）の対照群の両方からの腹腔浸出細胞（ＰＥＣ）を低用量ＬＰＳで処理し、ＴＮＦ−α分泌を標準ＥＬＩＳＡで評価した。これらの結果はＨｅＪマウスが真にＬＰＳ非反応（ＴＮＦ−α分泌が観察されない）であり、一方でＯｕＪマウスは代表的なＬＰＳ用量−反応曲線（図８）を示すことが示された。次にｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ同属体を試験した。この化合物はＬＰＳに類似な用量−反応曲線でｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α誘発を示していた。ＨｅＪマウスもｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ類自体に非反応であり、一方ＯｕＪマウスはそのＬＰＳ反応に対比される僅かな反応を示すことが判明した（図９）。これらの予備的結果は、タンニンはＬＰＳが利用するのと同じＴｌｒ４仲介経路を介して機能することを示唆する。
【０１２３】
実施例４
β−ＰＧＧでのインビボ研究
発明者はガロタンニンβ−ＰＧＧがｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−αの分泌誘発を阻害できることを見出した。β−ＰＧＧのインビボでの機能性はＨｅｒｓｈｅｙＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌのＤｒ．ＣｈａｒｌｅｓＬａｎと共同で研究された。この実験では、２グループのラットが用いられた。第１のグループに２５ｍｇのβ‐ＰＧＧと１ｍｇ／ｋｇのＬＰＳとを腹腔内投与した。第２のグループには、１ｍｇ／ｋｇのＬＰＳのみを与えた。β−ＰＧＧを投与されたラットの殆どはＬＰＳだけのラットに比べて抑制されたレベルでのＴＮＦ−α分泌を示した（図１０）。これらの予備的インビボ結果は有望なものであったが、阻害剤としてβ−ＰＧＧを使用することに伴う種々の問題を明らかにした。阻害を誘出するためには、大量のβ−ＰＧＧを必要とする。これはβ−ＰＧＧが血清アルブミンなどのほかの血液タンパクと相互作用することができる小さな単量体ガロタンニンであるためである。加えて、β−ＰＧＧ処理ラットでも低レベルでのＴＮＦ−α分泌を示し、低血圧の形の敗血症性ショックがまだ観察された。この生理的影響は敗血症性ショックを仲介することが示されていたサイトカインＩＬ−１βの分泌に起因するものであろう。β−ＰＧＧはｈ−ＰＢＭＣからの高レベルでのＩＬ−１β分泌を引き起こす。
【０１２４】
実施例５
二量体ガロタンニン類自体の合成
次なる目標は単量体ガロタンニンβ−ＰＧＧよりもその生理的相互作用に於いてより選択的な大きなタンニンを合成することであった。したがって、一連の二量体ガロタンニン類似体を合成して、二つの炭化水素コアに結合するリンカーユニットの変化が生理活性に及ぼす影響を決定した。種々の理由（例えば、より硬直性）からリンカーを選択したが、全てが活性ｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ類自体と対比される炭化水素コア間の距離を変化させると思われる。リンカー１７，１８及び１９との類似体（前掲記述のような）はｃｏｒｉａｒｉｉｎＡ類自体に存在するジアリルエーテル連結よりも更に硬直なリンカーである。類似体は更なる可とう性を可能にし、２１はアリル環付近にフェノキシル化が必要であるかを探るものである。
【０１２５】
これら化合物の合成には、適切な二酸塩化物とアルコールとの直接的カップリングが含まれ、ベンジルエーテルの水素化がそれに続き最終生成物である１７ｃ〜２１ｃが得られる。１７ｂ、１８ｂ及び２１ｂを与えるカップリングはβ，β’アノマーに関する高いジアステレオ選択性を伴って進行する。１９ｂの合成には、他の類似体よりも高い温度が必要である。この類似体は、^１ＨＮＭＲで決定されるように、β，β’対α，α’アノマーの立体化学比４：１で得られる。α，α’アノマーのＨ（１）プロトンはβ，β’アノマーのＨ（１）プロトン（６．０２ｐｐｍ、Ｊ＝９．８Ｈｚ）よりも更に下方域（６．８８ｐｐｍ）に現れ、かつ小さなカップリング係数を有していた（Ｊ＝３．２Ｈｚ）。２０ｂの合成では常にβ，β’、α，α’及びα，β’アノマーの混合物が生成した。しかしながら、アルコール２２に２０ａを徐々に添加することで、β，β’異性体が主として得られた。αアノマーのＨ（１）プロトンは６．６９ｐｐｍで出現し，カップリング係数は４．１５Ｈｚであった。
【０１２６】
酸塩化物１９ａ及び２０ａは市販されていないが、容易に合成された。例えば、１９ａは塩化オキサリルと触媒性ＤＭＦを用いて二酸２３を酸塩化物へ変換することによって合成された（スキーム８）。化合物２１ａは３段階で合成された。ジアリルエーテルエステルはウルマンカップリングによって合成された。加水分解で二酸が生成し、塩化オキサリルと触媒性ＤＭＦによって二酸が酸塩化物に変換された。
【０１２７】
実施例６
二量体ガロタンニン類自体の生理活性
類似体１７ｃ〜２１ｃがｈ−ＰＢＭＣからサイトカインを放出することを四つの研究で調べた。全ての評価に適切な対照群、ブランク（負）及びＬＰＳ（正）を付随させた。
【０１２８】
最初の研究では、それぞれの化合物１７ｃ〜２１ｃの存在下におけるｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α分泌の誘発を測定した。ｈ−ＰＢＭＣをそれぞれの化合物で２４時間インキュベートした。細胞培養上清中のＴＮＦ−αレベルを酵素結合イムノソルベント検定（ＥＬＩＳＡ）で評価した。各アッセイのデータ点は３回測定の平均値を表す。種２１ｃを含むジアリルエーテルだけがｈ−ＰＢＭＣから有意な量のＴＮＦ−α分泌を誘発し、ＬＰＳアンタゴニストとしての可能性に望ましくない特性を示した（図１１参照）。
【０１２９】
第二の研究では、化合物１７ｃ〜２０ｃのｈ−ＰＢＭＣにおけるＬＰＳ誘発ＴＮＦ−α産生の阻害能を四個の評価で調査した。第一の実験はｈ−ＰＢＭＣを一定濃度のＬＰＳ（５μｇ／ｍＬ）で４５分インキュベートした速度論的実験であった。このインキュベーション期間に続いて、化合物１７ｃ〜２０ｃの一定濃度（１０μｇ／ｍＬ）を添加した。細胞を種々の時間間隔で採集した。この速度論的評価はこれらの化合物がＬＰＳ誘発ＴＮＦ−α分泌を阻害できることを示した。ＬＰＳだけで分泌されたＴＮＦ−αの量をそれぞれの時間点でＬＰＳと基質によって分泌されたＴＮＦ−αの量と比較することによって、最適時間を決定した。全体的な阻害は８時間で最大であることが判明した（図１２）。
【０１３０】
第二の評価で阻害に必要な基質の最小量を決定した。ＬＰＳ（１０μｇ／ｍＬ）をｈ−ＰＢＭＣで４５分インキュベートし、引き続き１７ｃ〜２０ｃを異なる濃度で添加した。細胞培養上清を８時間後に採集した。異なる被験者からの細胞を用いること、或いはアッセイ日に固有の変異性が阻害剤の総合的効果の比較を困難なものにした。したがって、所与の化合物につき最大阻害が起こる濃度をより容易に確認するために、最大分泌値（ＬＰＳ単独に基づく）の割合を計算することによってＴＮＦ−αの分泌を正規化した（図１３）。阻害は用量に依存することが判明した。阻害の最適濃度は基質間で変動したが、一般的な用量反応傾向は同じであった。全体として、最大阻害は１８ｃ及び２０ｃで４５％、１９ｃに付き２５％であった。
【０１３１】
第三のアッセイは１７ｃ、１８ｃ及び２０ｃのＬＰＳ誘発ＴＮＦ−α分泌の阻害能を更に少量のＬＰＳ用量（５μｇ／ｍＬ）を用いて調査した（図１４）。ここでも、阻害は用量依存であった。最大阻害は１７ｃ及び２０ｃで４５％、１８ｃで３５％であった。これらの結果は図１３に見られるものに類似であり、いずれのＬＰＳ用量既にも受容体を飽和していることを示唆する。
【０１３２】
第四のアッセイでは、基質１７ｃ〜２０ｃの濃度を変化させ、同時にＬＰＳを加えてＴＮＦ−α分泌の阻害に与える添加順序の影響を調査した。しかしながら、最大阻害は化合物がＬＰＳ添加の４５分後に加えられた時と同じであった（それぞれの化合物につき約４０％）。
【０１３３】
第三の研究では、ｈ−ＰＢＭＣからのそれらのＩＬ−１βの分泌誘発能を化合物１７ｃ〜２０ｃにつき調査した（図１６）。サイトカインＩＬ−１βもＬＰＳで刺激された敗血症性ショック反応に於いて放出されることを序論から想起してほしい。ＩＬ−１βの分泌を極めて少量引き起こすか、或いは全く起こさない化合物は、それ自体が敗血症性ショック反応を誘発することは少ないと思われるので、敗血症性ショック治療薬として可能性のある最適な化合物であろう。更なる研究に選択された化合物は、それらが最低量のＩＬ−１β産生を誘発することから、１９ｃと２０ｃであった。
【０１３４】
最後に、第四の研究では、類似体１９ｃ及び２０ｃを再度そのＬＰＳ誘発ＴＮＦ−α分泌阻害に付き試験した（図１７）。この評価では、更に小さなＬＰＳ用量を用いて、もっと小さいＬＰＳ用量が存在するときに、阻害がより大きいかどうかを決定した。ＬＰＳ添加の４５分後に基質を加え、８時間後に細胞を採集した。少量のＬＰＳが使用されたときに基質が良好な阻害剤であるようには見えない、多分この用量でのＬＰＳによる受容体飽和を反映しているのであろう。
【０１３５】
結論
予備実験はエラグタンニンが、少なくともＴｌｒ４受容体を用いる限りにおいて、ＬＰＳと同じ生理経路を介して機能するであろうことを示唆するが、更なる調査が必要である。ガロタンニンβ−ＰＧＧはラットでＬＰＳ誘発ＴＮＦ−αの分泌を阻害することが示された。しかしながら、何らかの阻害を観察するにはこの化合物の大用量が必要であり、敗血症性ショックが全ての場合に観察された。高レベルのＩＬ−１β誘発はこの観察に起因するものであろう。二量体タンニン類自体１７ｃ〜２１ｃが可能性のあるＬＰＳアンタゴニストとして合成された。化合物１７ｃ〜２０ｃはｈ−ＰＢＭＣ中で僅かなＴＮＦ−α分泌を引き起こすか、或いは全く分泌を引き起こさず、ｈ−ＰＢＭＣにおけるＴＮＦ−αのＬＰＳ誘発レベルを阻害することが可能であった。化合物１９ｃ〜２０ｃは最も有望なアンタゴニストであり、サイトカインＩＬ−１β分泌の湧出は極めて少量であった。これらの化合物が敗血症／敗血症性ショック治療薬開発の候補であるかどうかを決定するためには、これらの化合物のインビボでの調査が更に必要であろう。
【０１３６】
合成化学
核磁気共鳴スペクトル（^１ＨＮＭＲ，^１３ＣＮＭＲ）を３００または３６０ＭＨｚ（^１Ｈ）分光計のいずれかで記録した。低分解能高速原子衝撃質量分析（ＨＡＢＭＳ）をニトロベンジルアルコール（ＮＢＡ）マトリックス中で得た。高解像高速原子衝撃質量分析をテキサス大学（オースティン）で行った。ＭｉｄｗｅｓｔＭｉｃｒｏｌａｂ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ（ＩＮ）で元素分析を行った。シリカゲル３２〜６３μｍ及び指定溶媒を用いてフラッシュカラムクロマトグラフを行った。エーテル及びテトラヒドロフランをアルゴン下でナトリウム／ベンゾフェノンから蒸留で純化した。ベンゼン、メチレンクロライド及びメタノールをアルゴン下ＣａＨ_２から蒸留した。トリエチルアミンをＣａＨ２から蒸留し、４オングストロームモレキュラーシーブ上に保存した。湿りに敏感な反応はアルゴン雰囲気下で予め乾燥したガラス用器の中で実施した。
【０１３７】
メチル３−ベンゾイルオキシ−４，５−ジヒドロキシ安息香酸エステル
メチル−３，４，５−トリヒドロキシ安息香酸エステル（１０．０ｇ、５４．３ｍｍｏｌ）とアンバーライト（０．２ｇ）とのベンゼン４０ｍＬ中溶液にトリエチルオルソ蟻酸エステル（３２ｍＬ、２７０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をアルゴン下で１８時間還流加熱した。反応混合物を熱いうちに濾過し、濾液を真空濃縮した。得られた油にアセトン２０ｍＬ、臭化ベンジル（３８．７ｍＬ、３２６ｍｍｏｌ）及び炭酸カリ（オーブン乾燥、２２．４ｇ、１６３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をアルゴン下で２０時間還流加熱した。この混合物を冷却し、トリエチルアミン（３．３ｍＬ、２７２ｍｍｏｌ）で処理して、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を１０％Ｈ_２ＳＯ_４、Ｈ_２Ｏ及び食塩水で順次洗浄しＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を真空中で除去した。残留油にＭｅＯＨの２０ｍＬ、ＴｓＯＨＨ_２Ｏ（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液をアルゴン下の室温で２０時間撹拌した。有機層をＮａＨＣＯ_３、Ｈ_２Ｏ及び食塩水で順次洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過、濃縮の後に、流出液としてヘキサン、続いてヘキサン中２５％ＥｔＯＨを用いるフラッシュクロマトグラフで生成物を純化して、１０ｇ（７１％）のメチル３−ベンジルオキシ−４，５−ジヒドロキシ安息香酸エステルが得られた。
【０１３８】
メチル３，４，５−トリベンジルオキシ安息香酸エステル
臭化ベンジル（１０．６ｍＬ、８９．７ｍｍｏｌ）をメチル３，４，５−トリヒドロキシ安息香酸エステル（５．０ｇ、２７ｍｍｏｌ）と炭酸カリ（オーブン乾燥、１２．４ｇ、８９．７ｍｍｏｌ）との２５０ｍＬのアセトン中溶液に加えた。溶液をアルゴン下で２４時間還流加熱した。反応混合物を冷却し、トリエチルアミン（７．６ｍＬ、５４ｍｍｏｌ）で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を１０％Ｈ_２ＳＯ_４、Ｈ_２Ｏ及び食塩水で順次洗浄しＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過、濃縮の後に、１１．８ｇ（９６％）のメチル３，４，５−トリベンゾイルオキシ安息香酸エステルが色の悪い白色固形物として得られた。
【０１３９】
５−ベンゾイルオキシ−３，４−ジ−ｔ−ブチルジメチルシロキシベンゾイル塩化物
５−ベンゾイルオキシ−３，４−ジ−ｔ−ブチルメチルシロキシ安息香酸（１ｇ、２ｍｍｏｌ）のベンゼン４６ｍＬ中溶液にＮａＨ（８０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）のベンゼン２ｍＬ中の溶液を加えた。得られた溶液を塩化オキサリル（０．９ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）と一緒にアルゴン下で２０時間撹拌した。溶媒を除去して０９３ｇ（９１％）の５−ベンゾイルオキシ−３，４−ジ−ｔ−ブチルメチルシロキシルベンゾイル塩化物が黄色固形物として得られた。
【０１４０】
１−Ｏ−（３−ベンジルオキシ−１，２−ジオキソシクロヘキサ−３，５−ジエン−５−ベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドオルソ−クロラニル（４７ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の乾燥エーテル１ｍＬ中溶液（０．１７Ｍｏ−クロラニル）を−４０℃に冷却した。この溶液に１−Ｏ−（２−ベンジルオキシ−４，５−ジヒドロキシベンゾイル）２，２，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（３３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の乾燥エーテル中溶液（ジフェノール中０．００７Ｍ）を１５分間にわたって滴下させて加えた。得られた赤色溶液をアルゴン下−４０℃で２時間撹拌してから−２０℃のフリーザーに移し、２０時間放置した。赤色沈殿を濾過し、冷エーテルで洗浄、真空乾燥して、２６０ｍｇ（７９％）の１−Ｏ−（３−ベンジルオキシ−１，２−ジオキソシクロヘキサ−３，５−ジエン−５−ベンゾイル）−２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシドを得た。
【０１４１】
一般操作Ａ：２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコース（α，βアノマー混合物）のビスアシル化
２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコース（３００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の１．５ｍＬ乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２中溶液にトリエチルアミン（６７μＬ、０．４３ｍｍｏｌ）を加え、引き続き適切な二酸塩化物（０．１ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液をアルゴン下で１８時間撹拌した。反応混合物を１ＮのＨＣｌで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＨ_２Ｏと食塩水で逐次洗浄してからＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び真空中で溶媒を除去した後に、３：５：１２のＥｔＯＡｃ：ベンゼン：ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフで生成物を純化した。
【０１４２】
一般操作Ｂ：水素化
適当なベンジル化二量体のＴＨＦ中０．００８Ｍ溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（０．６当量）を加えた。反応混合物をＨ_２で４回パージし、Ｈ_２雰囲気下の室温で１８時間撹拌した。反応混合物をアセトンで洗浄したセライトを通して濾過した。濃縮後に得られた灰色固形物をヘキサンとエーテルで摩砕、真空下３５℃で乾燥した。
【０１４３】
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’４，４’，６，６’−テトラキシス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルテレフタル酸エステル
一般操作Ａを用いて塩化テレフタロイルを２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコースにカップリングさせ、フラッシュクロマトグラフで純化して１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’４，４’，６，６’−テトラキシス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルテレフタル酸エステルの６１％を得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７３４（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１、ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）δ８．０２（ｓ，４Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．４３＝７．１５（ｍ，１３６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．２５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚδ８．０２（ｓ，４Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．４３〜７．１６（ｍ，１３６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．２５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（２），（Ｈ２）’）、δ５．７（Ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ５．１１〜４．９１（ｍ，４８Ｈ，ＡｒＯＣＨ_２）、δ４．７７（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．４７〜４．４２（ｍ，２Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’）、δ４．３５〜４．２９（ｍ，２Ｈ，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，７５ＭＨｚ）１６５．６４，１６５．５１，１６４．９９，１６４．８２，１６３．６７，１５２．５７，１５２．５２，１５２．４３，１４３．１７，１４３．１０，１４２．５６，１３７．４３，１３７．３１，１３７．２３，１３６．５９，１３６．３３，１３６．２４，１３２．９２，１３０．２８，１２８．５１，１２８．４６，１２８．４１，１２８．２４，１２８．１９，１２８．１０，１２８．０１，１２７．８２，１２７．５２，１２４．４０，１２３．５６，１２３．４７，１０９．２８，１０９．０９，１０９．０３，９３．１７，７５．０６，７３．３７，７３．２５，７１．１４，７１．１１，７０．９８，６９．７５，６３．１９；ＭＳ（＋ＦＡＢ）３８６７（ＭＨ^＋１６）；分析Ｃ_２４４Ｈ２０２Ｏ_４６としての計算値：Ｃ，７５．７４，Ｈ，５．２３；実測Ｃ，７５．５９，Ｈ，５．２９
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルテレフタル酸エステル
一般操作Ｂを用いて、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルテレフタル酸エステルを水素化して１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルテレフタル酸エステルが定量的収量で得られた。ＩＲ（ＫＢｒ）３４２２（ＯＨ）１７０２（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；１ＨＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，３００ＭＨｚ）δ８．５〜７．４（ｍ，２４Ｈ，ＯＨ）、δ８．０５（ｓ，４Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．１３〜６．９４（ｍ，１６ＨＡｒＨ）、δ６．３７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ６．０２（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，２ＨＨ（３），Ｈ（３）’）、δ５．６８〜５．５８（ｍ，４Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ４．６１〜４．５４（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．４１〜４．３５（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，４．５Ｈｚ，２Ｈ，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，７５ＭＨｚ）δ１６５．４５，１６４．９４，１６４．８８，１６４．６６，１６３．３０，１４５．１３，１４５．０６，１４４．９９，１３８．５４，１３８．３１，１３８．１５，１３５．９３．１３３．２５，１３０．０１，１２８．３６，１２０．４８，１１９．６９，１１９．６１，１１９．４３，１０９．３９，１０９．２３，９８．１８，７３．１９，７２．０２，７０．９２，６８．２８，６１．８２；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１７０６（Ｍ＋６）（ＭＨ＋７）；ＨＲＦＡＢＭＳＣ_７６Ｈ_５８Ｏ_４６としての計算値：１７０６．２１９９２６、実測：１７０６．２２３２２６
１，１’−Ｏ−２，２’３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ−グルコピラノシルイソフタール酸エステル
一般操作Ａを用いることで、塩化イソフタロイルを２、３、４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコースにカップリングさせフラッシュクロマトグラフで純化して、４８％の１，１’−Ｏ−２，２’３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ−グルコピラノシルイソフタール酸エステルを得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ３）１７３０（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．７６（ｓ，１Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ（Ｃ＝Ｏ））、δ８．１９（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ，２Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．４２〜７．１５（ｍ，１３７Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．２６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ６．０１（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ２Ｈ，Ｈ（３），Ｈ（３）’）、δ５．７９（ｄｄ，Ｊ＝９．８，８．３Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’）、δ５．７４（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．４１〜４．３０（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，７５ＭＨｚ）δ１６５．６６，１６５．５３，１６４．９５，１６４．８６，１６３．６０，１５２．５８，１５２．５５，１５２．４３，１４３．１８，１４３．０６，１４２．５７，１３７．４８，１３７．３４，１３７．２９，１３６．６４，１３６．４０，１３６．３６，１３６．２９，１２９．３４，１２８．９３，１２８．８５，１２８．７４，１２８．５１，１２８．４３，１２８．２８，１２８．１３，１２８．０４，１２７．８２，１２７．７２，１２７．５５，１２４．４４，１２３．６６，１２３．６０，１０９．３０，１０９．０８，９３．１２，７５．１６，７５．０９，７３．３３，７３．１９，７１．２２，７１．１５，７０．９９，６９．７０，６８．１３；ＭＳ（＋ＦＡＢ）３８６７（ＭＨ^＋７）；分析Ｃ_２４４Ｈ_２０２Ｏ_４６としての計算値：Ｃ，７５．７４，Ｈ，５．２３；実測Ｃ，７５．６１，Ｈ，５．２３
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ−グルコピラノシルイソフタール酸エステル
一般操作Ｂを用いることで、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ−グルコピラノシルイソフタール酸エステルを水素化し、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ−グルコピラノシルイソフタール酸エステルが定量的収量で得られた。ＩＲ（ＫＢｒ）（ＯＨ）１７０２（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（（ＣＨ３）２ＣＯ），３００ＭＨｚ）δ８．５８（ｓ，１Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ（Ｃ＝Ｏ））、δ８．４５〜７．８５（ｍ，２４Ｈ，ＯＨ）、δ８．１７（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．５Ｈｚ，２Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．６１（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ，ＡｒＨ）、δ７．１２〜６．９４（ｍ，１６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．４０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ６．００（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９０４Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（３），Ｈ（３）’）、δ５．６８￣５．５９（ｍ，４Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ４．６１〜４．４９（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．１２〜４．３６（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，４．５Ｈｚ，２Ｈ，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，７５ＭＨｚ）δ１６６．０４，１６５．５１，１６５．３８，１６５．２３，１６３．８１，１４５．６６，１４５．６０，１４４．５３，１３９．０５，１３８．８５，１３８．７１，１３６．８７，１３５．３１，１３５．１９，１３０．３３，１３０．１３，１２１．０５，１２０．２８，１２０．８６，１２０．２８，１２０．２１，１２０．０６，１０９．９６，１０９．８９，１０９．７９，９３．６８，７３．７９，７２．８０，７１．５０，６９．８０，６２．４２；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１７０６（Ｍ＋１４）；ＨＲＦＡＢＭＳＣ_３６Ｈ_５８Ｏ_４６としての計算値：１７０６．２１９９２６、実測：１７０６．２２２１２４
ビフェニル−４，４’−ジカルボニル二塩化物
ビフェニル−４，４’−ジカルボン酸（２００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の１５ｍＬＣＨ_２ＣＨ_２中溶液を塩化オキサリル（０．８ｍＬ、９ｍｍｏｌ）及び１滴のＤＭＦと一緒にアルコン下で１８時間撹拌した。溶媒を真空除去して、２１１ｍｇ（９３％）のビフェニル−４，４’−ジカルボニル二塩化物が黄色固形物として得られた。スペクトルデータは参照したスペクトルデータと符合した。ＩＲ（ＣＨ_２ＣＨ_２）１７８１（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（（ＣＤＣｌ_３），３６０Ｍｚ）、δ８．２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，４Ｈ（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．７（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，４Ｈ，ＡｒＨ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，９０ＭＨｚ）δ１６７．９，１４５．８，１３３．２，１３２．１，１２７．９
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキシ（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルビフェニル−４，４’−ジエステル
２，３，４，６−テトラキシ（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコース（４４０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の３ｍＬ乾燥ＴＨＦ溶液中にトリエチルアミン（６７μＬ、０．４８ｍｍｏｌ），続いてビフェニル４，４’−ジカルボニルジクロライド（３３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を５０℃に加熱し、アルゴン下で４０時間撹拌した（注：混合物を還流加熱（６５℃）すると、β，β’：α，α’異性体が４：１で得られた）。反応混合物１Ｎ塩酸で処理しＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＨ_２Ｏ及び食塩水で逐次洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を真空除去し、生成物を３：５：１２のＥｔＯＡｃ：ベンゼン：ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフで純化して、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキシ（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルビフェニル−４，４’−ジエステル（１７％）を得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７３２（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）δ８．０８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，４Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．５７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，４Ｈ，ＡｒＨ）、δ７．４７〜７．１８（ｍ，１３６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．３５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ６．０７（ａｐｐ．ｔ，２Ｈ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，Ｈ（３），Ｈ（３）’）、δ５．８７（ｄｄ，Ｊ＝９．５，８．３Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’）、δ５．７６（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ５．１５〜４．８０（ｍ，５０Ｈ，ＡｒＣＨ２Ｏ，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）、δ４．４９〜４．３３（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），（Ｈ５）’，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ１６８．５９，１６５．６０，１６５．５４，１６５．０３，１６４．２４，１５２．５６，１１４４．５５，１４３．００，１４．４９，１３７．４２，１３７．３０，１３７．２４，１３６．６３１２，８．７９，１２８．７１，１２８．６６，１２８．５９，１２８．４６，１２８．３９，１２８．２６，１２８．１９，１２８．１０，１２７．９９，１２７．８２，１２７．５８，１２７．５１，１２３．６１，１２３．５２，１０９．２８，１０９．０９，１０９．００，７５．１１，７５．０６，７１．１８，７１．０８，７０．９８，６９．２７，６３．１２；分析Ｃ_２５０Ｈ_２０５Ｏ_４６としての計算値：Ｃ，７６．１０，Ｈ，５．２３；実測Ｃ，７５．８５，Ｈ，５．３１　　１，１−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルビフェニル−４，４’−ジエステル
一般操作Ｂを用いることで、１，１−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルビフェニル−４，４’−ジエステルを水素化して、１，１−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルビフェニル−４，４’−ジエステル（８６％）を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３４４８（ＯＨ）１７０２（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，３００ＭＨｚ）δ８．２８〜８．０８（ｍ，２４Ｈ，ＯＨ）、δ８．０５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，４Ｈ，（Ｃ＝Ｏ）ＡｒＨ）、δ７．７９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，４Ｈ，ＡｒＨ）、δ７．１４〜６．９５（ｍ，１６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．４０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ６．０６（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．８Ｈ，Ｈ（３），Ｈ（３）’）、δ５．７１〜５．６１（ｍ，４Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’，Ｈ（４），Ｈ（４）’）δ４．６１〜４．５２（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．４１〜４．３９（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，４．９Ｈｚ，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，９０Ｈｚ）δ１６７．２８，１６６．７７，１６６．６６，１６６．５０，１６５．６８，１４６．９２，１４６．８１，１４６．５４，１４０．２９，１４０．１０，１３９．９３，１３８．８８，１３２．３１，１３２．２５，１３０．２０，１２９．４２，１２２．３７，１２１．５６，１２１．４９，１２１．３８，１１１．２２，１１１．１１，１１１．０５，９４．６９，７４．９６，７４．０３，７２．７８，７１．１８，６３．６６；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１７８２（Ｍ＋）；ＨＲＦＡＢＭＳＣ_８２Ｈ_６２Ｏ_４６としての計算値１７８２．２５１２２６、実測地１７８２．２５０７００
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルピメリン酸エステル
一般操作Ａを用いることで、塩化ピメロイルを２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−Ｄ−グルコースにカップリングさせ、フラッシュクロマトグラフで純化して、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルピメリン酸エステル（α，α、β，β及びα，β混合物）の４５％を得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７３０（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）δ７．４３〜７．１８（ｍ，１３６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．０９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ５．９８（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（３），Ｈ（３）’）、δ５．８１〜５．６（ｍ，２Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’）、δ５．４１〜５．３６（ｍ，２Ｈ，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ５．１３〜４．７２（ｍ，５０Ｈ，ＡｒＯＣＨ_２，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．５４〜４．２７（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，９０ＭＨｚ）δ１７１．５３，１６５．８２，１６５．６３，１６４．６９，１５２．６８，１５２．５７，１５２．５２，１５２．４４，１４３．２５，１４３．１２，１４３．０８，１４２．９９，１４２．６６，１４２．５７，１３７．４８，１３７．３４，１３６．６５，１３６．４８，１３６．４１，１３６．３６，１３６．２１，１２８．５２，１２５．４６，１２８．３９，１２８．３１，１２８．２６，１２８．２１，１２８．１３，１２８．１１，１２８．０２，１２７．８８，１２７．５６，１２４．４８，１２３．８１，１２３．６８，１２３．６４，１２３．５７，１０９．４０，１０９．２３，１０９．０９，９２．０５，７５．１２，７５．０８，７３．５４，７２．９８，７１．２８，７１．１６，７１．０９，７０．９９，６９．９０，６３．０５，３３．６６，２８．１２，２３．９３；ＭＳ（＋ＦＡＢ）３８６１（ＭＨ＋５０）
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルピメリン酸エステル
一般操作Ｂを用いることで、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルピメリン酸エステルを水素化して１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルピメリン酸エステルを定量的収率で得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３４２２（ＯＨ）１７１８（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；１ＨＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，３００ＭＨｚ）δ８．１７〜７．４５（ｍ，２４Ｈ，ＯＨ）、δ７．２１〜６．８２（ｍ，１６Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（１），Ｈ（１）’）、δ５．７９（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（３），Ｈ（３）’）、δ５．４８（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’）、δ５．９６（ｄｄ，Ｊ＝９．８，１．５Ｈｚ，２Ｈ，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ４．４０〜４．３４（ｍ，４Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）７，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’）、δ４．２５（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，４．５Ｈｚ，２Ｈ，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）：^１３ＣＮＭＲ（ＣＤ_３）_２ＣＯ，７５ＭＨｚ）δ１７１．３３，１６５．８３，６５．２３，１６４．９７，１４５．４７，１４５．４３，１４５．３９，１４５．２６，１３８．８６，１３８．８０，１３８．５８，１３８．４９，１２８．５４，１２０．７９，１１９．９８，１１９．８９，１１９．８０，１０９．６７，１０９．６３，１０９．５４，１０９．４９，９２．１６，７３．３０，７２．６２，７１．１５，６８．５７，６２．１５，３３．６１，２８．２５，２４．３８；ＭＳ（＋ＦＡＢ）１７０１（ＭＨ＋）；ＨＲＦＡＢＭＳＣ_３５Ｈ_６４Ｏ_４６としての計算値１７００．２２６８７６、実測値１７００．２５７７４０
２，３’−オキシ−ジ−安息香酸
２４（０．１２ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＭｅＯＨと１ｍＬのＨ_２Ｏ中でＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏと一緒にした。反応混合物をアルゴン下で５時間還流加熱した。溶液を室温に冷却し１Ｎの塩酸で酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び溶媒を真空除去した後に、白色の粉末０．１ｇ（９３％）が得られた。^１ＨＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，３００ＭＨｚ）δ９．５（ｂｒｓ，２Ｈ，ＣＯ_２Ｈ）、δ８．００（ｄｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（３））、δ７．７５（ａｐｐ．ｄのｔ，Ｊ＝７．８，１．２，１Ｈ，Ｈ（４）’）、δ７．６４（ｄｄｄ，Ｊ＝８．２，７．５，１．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（５））、δ７．５３〜７．４６（ｍ，２Ｈ，Ｈ（２）’，Ｈ（５）’）、δ７．３５（ａｐｐ．ｔのｄ，Ｊ＝７．６，１．１Ｈｚ、１Ｈ，Ｈ（４））、δ７．２１（ｄｄｄ，Ｊ＝８．２，２．６，１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（６）’）、δ７．１４（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（６））；１３ＣＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，７５ＭＨｚ）δ１６６．６，１６６．０，１５８．８，１５５．６，１３４．４，１３２．６，１３２．５，１３０．３，１２５．０，１２４．７，１２４．２，１２２．５，１２２．３，１１８．４
２，３’−オキシ‐ジ−ベンゾイルクロライド
塩化オキサリル（０．０５８μＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を２５（０．０５７ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の２ｍＬ乾燥ＣＨ_２ＣＨ_２及びＤＭＦ１滴の懸濁液中にゆっくり滴下させた。懸濁液は徐々に透明な黄色液になった。反応混合物をアルゴン下で３時間撹拌した。溶媒を真空除去し、生成物０．０６３ｇ（９７％）が黄色油として得られた。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７５８（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１：^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）δ８．１９（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（３））、δ７．９３〜７．９０（ｍ，１Ｈ，Ｈ（４）’）、δ７．６６（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（２）’）、δ７．６６〜７．６０（ｍ，１Ｈ，Ｈ（４））、δ７．５２（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝８．１，Ｈ（５’））、δ７．３６〜７．３１（ｍ，２Ｈ，（Ｈ５），Ｈ（６）’）、δ７．００（ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（６））；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ１６７．６，１６３．９，１５６．９，１５５．４，１３６．１，１３５．０，１３４．３，１３０．５，１２６．８，１２５．８，１２５．４，１２４．５，１２０．５，１２０．４
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシル−（２，３’−オキシ−ジ−安息香酸エステル）
一般操作Ａを用いることで、２１ａを２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−グルコースにカップリングさせ、フラッシュクロマトグラフで純化して、３５％の１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシル−（２，３’−オキシ−ジ−安息香酸エステル）を得た。ＩＲ（ＣＤＣｌ_３）１７３１（Ｃ＝Ｏ）ｃｍ^−１；^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３００ＭＨｚ）δ７．９７（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ，１Ｈ，ＡｒＨ（３））、δ７．７６〜７．７３（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ（４）’）、δ７．６６〜７．６５（ｍ，１Ｈ，Ａｒ（Ｈ２））、δ７．４１〜７．１５（ｍ，１３８Ｈ，ＡｒＨ，ＡｒＨ（４），ＡｒＨ（５）’）、δ７．１３〜７．００（ｍ，２Ｈ，ＡｒＨ（５），ＡｒＨ（６）’）、δ６．７２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（１））、δ６．２６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（１）’）、δ６．０４（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（３））、δ５．９７（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（３）’）、δ５．８２〜５．６８（ｍ，４Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ５．１０〜４．９（ｍ，４８Ｈ，ＡｒＯＣＨ_２）、δ４．９３〜４．７２（ｍ，２Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’）、δ４．３７〜４．２８（ｍ，４Ｈ，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’，Ｈｂ（６），Ｈｂ（６）’）：^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ^３，９０ＭＨｚ）δ１６５．５，１６５．４，１６５．０，１６４．９，１６４．８，１６４．８，１６４．０，１６２．８，１６２．８，１６２．４，１５７．３，１５６．７，１５２．５，１５２．５，１５２．４，１５２．４，１４８．１，１４３．１，１４３．０，１４３．０，１４３．０，１４２．５，１４２．５，１３７．５，１３７．５，１３７．４，１３７．３，１３７．３，１３６．７，０３６．６，１３６．４，１３６．４，１３６．３，１３６．３，１３４．９，１３２．６，１３０．２，１３０．２，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．０，１２７．９，１２７．８，１２７．５，１２４．８，１２４．５，１２４．５，１２３．７，１２３．７，１２３．６，１２０．６，１２０．３，１１９．５，１０９．８，１０９．１，１０９．１，９２．９，９２．５，７５．１，７５．１，７３．６，７３．４，７３．１，７１．２，７１．１，７１．１，７１．０，６９．８，６９．７，６７．５，６３．２，６２．９
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシル−（２，３’−オキシ−ジ−安息香酸エステル）
一般操作Ｂを用いることで、１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリベンジルオキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシル−（２，３’−オキシ−ジ−安息香酸エステル）を水素化して定量的収量の１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシル−（２，３’−オキシ−ジ−安息香酸エステル）を得た。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３６０ＭＨｚ）δ８．１８（ｍ，２４Ｈ，ＡｒＯＨ）、δ７．９１（ｍ，１Ｈ，ＡｒＨ（３））、δ７．７１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ，ＡｒＨ（４）’）、δ７．６０〜７．５３（ｍ，２Ｈ）、δ７．４〜６．９４（ｍ，２０Ｈ，ＡｒＨ）、δ６．３９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｈ（１））、δ６．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（１）’）、δ６．０４（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（３），Ｈ（４）’）、δ５．９７（ａｐｐ．ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ（３）’）、δ５．７１〜５．５６（ｍ，４Ｈ，Ｈ（２），Ｈ（２）’，Ｈ（４），Ｈ（４）’）、δ４．６１〜４．４０（ｍ，６Ｈ，Ｈ（５），Ｈ（５）’，Ｈａ（６），Ｈａ（６）’，Ｈｂ（６），Ｈ（６）’）；^１３ＣＮＭＲ（（ＣＤ_３）_２ＣＯ，９０Ｍｈｚ）δ１６６．０，１６５．４，１６５．２，１６５．１，１６５．１，１６４．１，１６４．１，１６２．６，１５７．９，１５６．６，１４５．６，１４５．５，１４５．４，１３８．９，１３８．７，１３８．６，１３５．５，１３２．３，１３０．８，１３０．７，１２４．９，１２４．６，１２４．２，１２１．８，１２１．３，１２１．３，１２０．９，１１９．６，１０９．８，１０９．８，１０９．７，９３．４，９３．０，７３．６，７３．５，７２．８，７２．６，７１．３，７１．２，６８．８，６８．７，６２．３，６２．２，６２．２；ＭＳ（＋ＭＡＬＤＩ）１８２２（ＭＮａ＋）
材料
化合物は実験室で合成した。ＬＰＳ（大腸菌０５５：Ｂ５、フェノール抽出）、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｈｉｓｔｏｐａａｑｕｅ（ρ＝１．０７７ｇ／ｍＬ）、不稔性ハイブリドーマ試験ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、ゲンタマイシン１０ｍｇ／ｍＬ、Ｌ−グルタミン、デキストラン−５１２リュウコノストク（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）属平均分子量５８００００及びトリパンブルー染色剤（０．４％）はＳｉｇｍａから購入した。フェノールレッド仲介ハンクス緩衝食塩水１Ｘ（ＨＢＳＳ）及び仲介ＲＰＭＩ１６４０１ＸはＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手した。ヒト、ラット及びマウスＩＬ−β及びＴＮＦ−α酵素結合イムノソルベント検定（ＥＬＩＳＡ）キットはＲ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ（ミネアポリス、ミネソタ州）から入手した。新鮮なヘパリン添加血液は健常人被験者（年齢２０〜３４）から入手した。Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ及びＣ３Ｈ／ＨｅＯｕＪマウスはＪａｃｋｓｏｎＬａｂｓ．（ＢａｙＣｉｔｙ，ＭＥ）から入手した。
【０１４４】
【表１】

【０１４５】
【表２】

【０１４６】
【表３】

【０１４７】
【表４】

【０１４８】
【表５】

【０１４９】
【表６】

【０１５０】
【表７】

【０１５１】
【表８】

【０１５２】
本発明のガロタンニン及びエラグタンニン組成物は上述した化学式の範囲内のガロタンニン類及びエラグタンニン類、光学異性体またはそれらの化合物のプロドラッグ類または類似体類、或いはＤまたはＬ態いずれかのラセミ混合物を含むものと理解すべきである。また、本明細書で述べた組成及び範囲に関する僅かな用量及び配合の修正は為されるものであり、本発明の精神および範囲のものである。
【０１５３】
特定の組成物、有効性に関する理論などを参照して本発明を説明したが、本発明はかかる例示的な実施例やメカニズムによって限定されるものでなく、添付のクレームに規定されるように本発明の精神及び範囲から逸脱することなく修正がなされることは当業者にとって明らかであろう。かかる明白な修正及び変形は添付クレームに規定されるように本発明の範囲に含まれるものである。クレームは特に反する文意がない限り、クレームされた要素及び此処で意図する目的を満たすために有効な一連のステップを全て網羅するものである。
【０１５４】
本明細書に引用した文献及び次に挙げる文献は特に参照してその全体を本明細書の一部とする。
【０１５５】
【表９】

【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、種々の濃度のコリアリインＡ、アグリモニイン及びＬＰＳへの４時間暴露によるヒト末梢血単核細胞（ｈ−ＰＢＭＣ）からのＩＬ−１β放出を示している。
【図２】
図２は、一定濃度のβ−Ｄ−ＰＧＧ、二量体ガロタンニン及びＬＰＳによって刺激されたｈ−ＰＢＭＣからのＩＬ−１β放出の時間経過を示している。
【図３】
図３は、一定濃度のβ−Ｄ−ＰＧＧ、二量体ガロタンニン及びＬＰＳによって刺激されたｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α放出の時間経過を示している。
【図４】
図４は、種々の濃度のβ−Ｄ−ＰＧＧ（２４時間）、二量体ガロタンニン（２４時間）、コリアリインＡ（４時間）及びＬＰＳ（４時間）への暴露による被験者１のｈ−ＰＢＭＣからのＩＬ−１β放出を示している。
【図５】
図５は、種々の濃度のβ−Ｄ−ＰＧＧ（２４時間）、二量体ガロタンニン（２４時間）、コリアリインＡ（４時間）及びＬＰＳ（４時間）への暴露による被験者２のｈ−ＰＢＭＣからのＩＬ−１β放出を示している。
【図６】
図６は、種々の濃度のβ−Ｄ−ＰＧＧ（２４時間）、二量体ガロタンニン（２４時間）、コリアリインＡ（４時間）及びＬＰＳ（４時間）への暴露による被験者１のｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α放出を示している。
【図７】
図７は、種々の濃度のβ−Ｄ−ＰＧＧ（２４時間）、二量体ガロタンニン（２４時間）、コリアリインＡ（４時間）及びＬＰＳ（４時間）への暴露による被験者２のｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α放出を示している。
【図８】
図８は、ＬＰＳ（２４時間インキュベーション）で刺激したマウスＰＥＣからのＴＮＦ−α分泌を示している。
【図９】
図９はコリアリインＡ類似体（２４時間インキュベーション）で刺激したマウスＰＥＣからのＴＮＦ−α分泌を示している。
【図１０】
図１０はＬＰＳ＋ＬＰＳのβ−ＰＧＧだけでのラット処理によるＴＮＦ−α分泌を示している。
【図１１】
図１１は１７ｃ〜２１ｃで刺激したｈ−ＰＢＭＣからのＴＮＦ−α分泌を示している。１８ｃ及び２１ｃは第１被験者であり；１７ｃ、１９ｃ及び２０ｃは第２被験者である。
【図１２】
図１２はＬＰＳ（５μｇ／ｍＬ）及び１７ｃ−２０ｃ（１０μｇ／ｍＬ）で刺激したｈ−ＰＢＭＣ（第３被験者）からの長時間に亘るＴＮＦ−α分泌を示している
【図１３】
図１３は、１８ｃ〜２０ｃによってｈ−ＰＢＭＣ（第４被験者）から得られるＬＰＳ（１０μｇ／ｍＬ）誘導性ＴＮＦ−α分泌の阻害を、最大応答に対するパーセントとして表して示している。基質は、ｈ−ＰＢＭＣにＬＰＳを添加して４５分後に加えた。
【図１４】
図１４は、１７ｃ、１８ｃ及び２０ｃによってｈ−ＰＢＭＣ（第３被験者）から得られるＬＰＳ（５μｇ／ｍＬ）誘導性ＴＮＦ−α分泌の阻害を、最大応答に対するパーセントとして表して示している。基質は、ｈ−ＰＢＭＣにＬＰＳを添加して４５分後に加えた。
【図１５】
図１５は、１７ｃ〜２０ｃによってｈ−ＰＢＭＣ（第５被験者）から得られるＬＰＳ（５μｇ／ｍＬ）誘導性ＴＮＦ−α分泌の阻害を、最大応答に対するパーセントとして表して示している。基質は、ｈ−ＰＢＭＣにＬＰＳを添加して４５分後に加えた。
【図１６】
図１６は、１７ｃ〜２０ｃで刺激したｈ−ＰＢＭＣ（第２被験者）からのＩＬ−１β分泌を示している。
【図１７】
図１７は、１９ｃ及び２０ｃによってｈ−ＰＢＭＣ（第４被験者）から得られるＬＰＳ（１μｇ／ｍＬ）誘導性ＴＮＦ−α分泌の阻害を、最大応答に対するパーセントとして表して示している。基質は、ｈ−ＰＢＭＣにＬＰＳを添加して４５分後に加えた（８時間インキュベーション）。

Claims

ガロタンニン（ｇａｌｌｏｔａｎｎｉｎ）又はエラギタンニン（ｅｌｌａｇｉｔａｎｎｉｎ）、及び医薬として許容される担体を含む、サイトカインの放出を調節するための医薬組成物。
β−Ｄ−ペンタガロイルグルコース及び二量体ガロタンニンからなる群から選ばれるガロタンニンを含み、それにより、上記二量体ガロタンニンの炭水化物コアを結合しているリンカー単位が上記ガロタンニンの炭水化物コアを誤って配列させる結合である、サイトカインの放出を阻害する請求項１に記載の医薬組成物。
上記リンカー単位がジアリールエーテルではない、請求項２に記載の医薬組成物。
上記リンカー単位がデヒドロジガロイルエーテルではない、請求項２に記載の医薬組成物。
上記リンカー単位が以下の：

からなる群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
上記リンカー単位が以下の：

である請求項２に記載の製薬組成物。
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルテレフタレート。
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ−グルコピラノシルイソフタレート。
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルビフェニル−４，４’−ジエステル。
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシルピメレート。
１，１’−Ｏ−２，２’，３，３’，４，４’，６，６’−テトラキス（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）−β，β’−Ｄ，Ｄ’−グルコピラノシル−（２，３’−オキシ−ジ−ベンゾエート）。
β−Ｄ−ペンタガロイルグルコース及び二量体ガロタンニンからなる群から選択される化合物、並びに医薬として許容される担体を含み、それにより、上記二量体ガロタンニンの炭水化物コアを結合しているリンカー単位が上記ガロタンニンの炭水化物コアを誤って配列させる結合である敗血症又は敗血性ショックを予防又は治療するための医薬組成物。
サイトカイン放出を阻害するのに有効な量のガロタンニンを投与することを含むサイトカインの放出を阻害する方法。
前記ガロタンニンが医薬として許容される担体中で、β−Ｄ−ペンタガロイルグルコース及び二量体ガロタンニンからなる群から選択され、それにより上記二量体ガロタンニンの炭水化物コアを結合しているリンカー単位が上記ガロタンニンの炭水化物コアを誤って配列させる結合である、請求項１３に記載の方法。
前記リンカー単位がジアリールエーテルではない、請求項１４に記載の方法。
上記リンカー単位が以下の：

からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
上記リンカー単位が以下の：

である、請求項１６に記載の方法。
上記ガロタンニンが約０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の投与量で投与される、請求項１４に記載の方法。
上記ガロタンニンが単回投与量で投与される、請求項１４に記載の方法。
上記ガロタンニンが分割投与量で投与される、請求項１４に記載の方法。
次式：

（式中、Ｌは：

からなる群から選択されるリンカー分子である）
を有しているビス酸クロリドを次式：

を有するアルコールとカップリングさせ、続いてベンジルエーテルを水素化して次式：

を有する化合物を形成させることを含む、サイトカインの分泌を阻害するためのガロタンニンを製造する方法。
二量体ガロタンニン及び二量体エラギタンニン、これらのプロドラッグ並びにこれらの光学異性体からなる群から選択される、サイトカイン放出を促進するのに有効な量の化合物、並びに医薬として許容される担体を含むサイトカインの放出を促進するための医薬組成物であって、その際上記化合物の炭水化物コアはジアリールエーテルで結合されている前記医薬組成物。
上記化合物の炭水化物コアがデヒドロジガロイルエーテルで結合されている、請求項２２に記載の医薬組成物。
上記化合物が次の構造：

を有している二量体ガロタンニンである、請求項２２に記載の組成物。
上記化合物が、コリアリイン（ｃｏｒｉａｒｉｉｎ）Ａ及びアグリモニイン（ａｇｒｉｍｏｎｉｉｎ）からなる群から選択される二量体エラギタンニンである、請求項２２に記載の組成物。
次の構造：

を有する二量体ガロタンニン。
医薬として許容される担体中の、二量体ガロタンニン及び二量体エラギタンニンからなる群から選択される化合物の、サイトカイン放出を促進するのに有効な量を投与することを含むサイトカインの放出を促進する方法。
上記化合物の炭水化物コアがジアリールエーテルで結合されている、請求項２７に記載の方法。
上記化合物が次の構造：

を有している二量体ガロタンニンである、請求項２７に記載の方法。
上記化合物がコリアリインＡ及びアグリモニインからなる群から選択される二量体エラギタンニンである、請求項２７に記載の方法。
２，３，４，６−テトラキス（３，４，５−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−α−Ｄ−グルコピラノースをガロイルクロリドでアシル化してペンタエステルを形成させ；このペンタエステルを脱シリル化してカテコールを形成させ；このカテコールを酸化してオルトキノンを形成させ；このオルトキノンを二量体化してパーベンジル化ガロタンニン二量体を形成させ；そしてこのパーベンジル化ガロタンニン二量体のベンジルエーテルを水素化分解して二量体ガロタンニン又は二量体エラギタンニンを形成させることを含む、サイトカインの放出を促進するための二量体ガロタンニン又は二量体エラギタンニンを合成する方法。
上記アシル化工程がトリエチルアミンの存在下で生起する、請求項３１に記載の方法。
上記カテコールがオルトクロラニルで酸化される、請求項３１に記載の方法。
２−ニトロベンジル４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−グルコピラノシドをその炭水化物コアの２及び３位でガロイル化してジエステルを形成させ；このジエステルのＯ（４），Ｏ（６）ベンジリデンアセタールを脱保護化して中間体ジオールを形成させ；この中間体ジオールを過剰の３−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−４，５−ジフェニルメチレンジオキシ安息香酸でエステル化してテトラガロイル化合物を形成させ；このテトラガロイル化合物を脱シリル化してビスフェノールを形成させ；このビスフェノール中のＯ（４）及びＯ（６）位のガロイル基を酸化的にカップリングして４，６−（Ｓ）−ＨＨＤＰを有する化合物を形成させ；この４，６−（Ｓ）−ＨＨＤＰを有する化合物のジフェニルメチレンケタールを開裂してヘキサフェノール化合物を形成させ；このヘキサフェノール化合物をベンジル化して２−ニトロベンジル４，６−（３，４，５，３’，４’，５’−ヘキサベンジロキシ）ジフェノイル−２，３−ビス（２，３，４−トリス（ベンジロキシ）ベンゾイル）−β−Ｄ−グルコピラノシド化合物を形成させ；この化合物からＯ（１）−ニトロベンジルエーテルを開裂してパーベンジル化テリマグランジンＩ誘導体を形成させ；このパーベンジル化テリマグランジンＩ誘導体を使用して３，４，５−トリベンジロキシベンゾイルクロリドをエステル化してβ−エステル化生成物を形成させ；そしてこのβ−エステル化生成物のベンジルエーテルを水素化分解してテリマグランジンＩＩを形成させることを含む、テリマグランジンＩＩの合成方法。
上記の酸化的カップリング工程がＰｂ（ＯＡｃ）_４によって介在される、請求項３４に記載の方法。
上記ジフェニルメチレンケタールがＨＯＡｃで開裂される、請求項３４に記載の方法。
上記の３，４，５−トリベンジロキシベンゾイルクロリドがトリエチルアミンの存在下でエステル化される、請求項３４に記載の方法。