JP2004283604A - 癌の治療のための方法および組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】 固形腫瘍の処置のための方法および組成物の提供。
【解決手段】 形質転換組織、感染組織、または疾患組織に対する免疫応答を誘導するための方法であって、血液中に存在する１２０，０００ダルトン以下の分子量を有する成分のみを、該形質転換組織、該感染組織、または該疾患組織の量が減少するまで除去する工程を包含する、方法であって、ここで、１つの実施形態において、上記組織が固形腫瘍であり、また、１つの実施形態において、上記成分が、１血液容量から除去され、上記成分が複数の処置において除去される、方法。
【選択図】 なし

Description

本発明は、一般に、免疫応答を増強する分野にあり、そして特に、抗脈管形成性化合物、サイトカイン、プロコアギュラント状態（ｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔ
ｓｔａｔｅ）を誘導する化合物、化学療法剤および／または照射を組み合わせる、免疫メディエイタのインヒビターの除去に関する。

本出願は、１９９８年５月２２日に出願された米国特許出願番号０９／０８３，３０７号に対する優先権を主張する。

従来の癌治療は、複製する細胞を、望ましくは薬剤が患者の正常細胞を殺傷するよりも速く殺傷する薬物および／または照射の使用に基づく。手術は、腫瘍塊を減少させるために使用されるが、一旦癌が転移すると効果はほとんどない。照射は、局在化された領域においてのみ有効である。

処置は、維持的治療がない場合、それ自体で患者を殺傷し得る。例えば、いくつかの型の癌について、骨髄体外移植組織は、他の致死量の化学療法を用いる処置に続いて、患者を維持するために使用されている。しかし、有効性は、固形腫瘍の処置について証明されていない。異なる化学療法剤の「カクテル」、ならびに回復推進剤（例えば、血小板および白血球のレベルを回復させるための顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、エリトロポイエチン、トロンボポエチン（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ）、顆粒球コロニー刺激因子（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）（「Ｇ−ＣＳＦ］）、マクロファージコロニー刺激因子（「Ｍ−ＣＳＦ］）および幹細胞因子（「ＳＣＦ」））を用いる非常に高用量の化学療法の組合せが、攻撃的な癌を処置するために使用されている。支持的治療または拘束的治療を用いてさえも、副作用は激しい。

他の処置は、死亡率および罹患率を改善しようと試みられてきた。患者の免疫系を刺激するワクチンが企図されてきたが、卓越した成功はない。種々のサイトカイン（例えば、腫瘍壊死因子、インターフェロンγ、およびインターロイキン−２（「ＩＬ−２」））が、単独でまたは組み合わせて、癌を殺傷するために使用されているが、治癒は得られていない。より最近では、サリドマイドのような抗脈管形成性化合物が、同情的な使用の場合において試みられ、そして腫瘍の寛解を生じることが示された。動物の研究において、プロテインＣのインヒビターのようなプロコアギュラント状態を誘導する化合物が、腫瘍の寛解を生じさせるために使用されてきた。新たな研究によって、腫瘍細胞から可溶性形態で放出される腫瘍壊死因子レセプター（「ＴＮＦ−Ｒ」）のようなサイトカインレセプターのインヒビターは、正常細胞に対して高濃度で、腫瘍細胞上での免疫系の攻撃を回復させ得ることが示された（ＪａｂｌｏｎｓｋａおよびＰｅｉｔｒｕｓｋａ、Ａｒｃｈ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｈｅｒ．Ｅｘｐ．（Ｗａｒｓｚ）１９９７、４５（５〜６）、４４９〜４５３；Ｃｈｅｎら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．１９９７、５６（５）、５４１〜５５０）。

Ｌｅｎｔｚの米国特許第４，７０８，７１３号は、癌を処置するための代替的な方法を記載し、この方法は、分子量に基づいて化合物を除去するためのウルトラフェレーシス（ｕｌｔｒａｐｈｅｒｅｓｉｓ）を含む。これは、患者自身の白血球によって腫瘍上での免疫攻撃を促進させる。

全てのこれらの努力にも関わらず、多くの患者が癌によって死亡する；他の者は恐ろしく不具にされる。任意の１つの治療は、全ての型の癌を治癒するために効果的ではないようである。

従って、本発明の目的は、固形腫瘍の処置のための方法および組成物を提供することである。

本発明のさらなる目的は、非選択的、非常な毒性、全身的な化学療法を含まない方法および組成物を提供することである。

項目１ 形質転換組織、感染組織、または疾患組織に対する免疫応答を誘導するための方法であって、血液中に存在する１２０，０００ダルトン以下の分子量を有する成分のみを、該形質転換組織、該感染組織、または該疾患組織の量が減少するまで除去する工程を包含する、方法。
項目２ 前記組織が固形腫瘍である、項目１に記載の方法。
項目３ 前記成分が、１血液容量から除去される、項目１に記載の方法。
項目４ 前記成分が複数の処置において除去される、項目１に記載の方法。
項目５ 前記組織を、抗脈管形成化合物、プロコアギュラント化合物、サイトカイン、化学療法剤、および照射からなる群より選択される因子で処置する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
項目６ 前記因子がサイトカインであり、そして該サイトカインが、ＧＭ−ＣＳＦ、エリトロポイエチン、トロンボポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦおよびＳＣＦからなる群より選択される、項目５に記載の方法。
項目７ 可溶性サイトカインレセプター分子を選択的に除去する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
項目８ 前記可溶性サイトカインレセプター分子が、可溶性組織壊死因子レセプター−１（「ｓＴＮＦＲ−１」）、可溶性組織壊死因子レセプター−２（「ｓＴＮＦＲ−２」）、可溶性インターロイキン−２レセプター（「ｓＩＬ−２Ｒ」）、可溶性インターロイキン−１レセプター（「ｓＩＬ−１Ｒ」）、可溶性インターロイキン−６レセプター（「ｓＩＬ−６Ｒ」）、および可溶性インターフェロンγレセプター（「ｓＩＦＮ−γＲ］）からなる群より選択される、項目７に記載の方法。
項目９ 前記サイトカインレセプター分子が、該サイトカインレセプター分子と免疫反応性のサイトカインまたは抗体もしくは抗体フラグメントに結合することによって除去される、項目８に記載の方法。
項目１０ 前記サイトカインまたは抗体もしくは抗体フラグメントが、患者の血液または血漿が該患者に戻される前に循環する濾過器またはカラムに固定化される、項目９に記載の方法。
項目１１ 前記患者を、前記形質転換組織、前記感染組織、または前記疾患組織に対するワクチンを用いてワクチン接種する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
項目１２ 形質転換組織、感染組織、または疾患組織に対する免疫応答を誘導するためのシステムであって、以下：
血液中に存在する１２０，０００ダルトン以下の分子量を有する成分のみを除去するためのデバイスであって、患者の血液を該デバイスに再循環させるためのポンプおよびチュービングに接続するための入口手段および出口手段を有する、デバイス、
を備える、システム。
項目１３ 前記デバイスが、約０．０２ミクロンと０．０５ミクロンとの間の孔サイズを有する毛細管膜濾過器である、項目１２に記載のシステム。
項目１４ 前記デバイスが、約０．０４ミクロンと０．０８ミクロンとの間の孔サイズを有する平行板濾過器である、項目１２に記載のシステム。
項目１５ 前記デバイスが、前記血液由来の物質の交互除去を提供するための異なる孔サイズまたは幾何学を有する濾過器を備える、項目１２に記載のシステム。
項目１６ 前記デバイスが、特定のサイトカインまたは前記血液由来の細胞性インヒビターを選択的に除去する吸着カラムである、項目１２に記載のシステム。
項目１７ 前記サイトカインまたは細胞性インヒビターが、可溶性組織壊死因子レセプター−１（「ｓＴＮＦＲ−１」）、可溶性組織壊死因子レセプター−２（「ｓＴＮＦＲ−２」）、可溶性インターロイキン−２レセプター（「ｓＩＬ−２Ｒ」）、可溶性インターロイキン−１レセプター（「ｓＩＬ−１Ｒ」）、可溶性インターロイキン−６レセプター（「ｓＩＬ−６Ｒ」）、および可溶性インターフェロンγレセプター（「ｓＩＦＮ−γＲ］）からなる群より選択される、項目１６に記載のシステム。
項目１８ 前記サイトカインレセプター分子と免疫反応性のサイトカインまたは抗体もしくは抗体フラグメントを含む、項目１７に記載のシステム。
項目１９ 前記サイトカインまたは抗体もしくは抗体フラグメントが、患者の血液または血漿が該患者に戻される前に循環する濾過器またはカラムに固定化される、項目１８に記載のシステム。
項目２０ 前記血液が血漿である、項目１２に記載のシステム。
項目２１ 前記システムが、前記組織に照射を投与するための手段を備える、項目１２に記載のシステム。
項目２２ 形質転換組織、感染組織、または疾患組織に対する免疫応答を誘導して患者を処置するためのキットであって、以下：
血液に存在する１２０，０００ダルトン以下の分子量を有する成分のみを除去するためのデバイス、および
該患者の処置のための投薬処方物中の、抗脈管形成化合物、プロコアギュラント化合物、サイトカイン、化学療法剤、および照射からなる群より選択される因子、
を備える、キット。
項目２３ 前記因子が抗脈管形成化合物である、項目２２に記載のキット。
項目２４ 前記因子がプロコアギュラント化合物である、項目２２に記載のキット。
項目２５ 前記因子がサイトカインである、項目２２に記載のキット。
項目２６ 前記サイトカインが、ＧＭ−ＣＳＦ、エリトロポイエチン、トロンボポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦおよびＳＣＦからなる群より選択される、項目２５に記載のキット。
項目２７ 前記因子が化学療法剤である、項目２２に記載のキット。
項目２８ 前記因子が、アルキル化剤、ドキソルビシン、カルボプラチン、シスプラチン、およびタキソールからなる群より選択される、項目２７に記載のキット。
項目２９ 使用の前に前記血液由来の成分を除去するためのデバイスを処理するための抗凝固剤をさらに含む、項目２２に記載のキット。
（発明の要旨）
癌を処置するための方法は、患者の免疫系を刺激して固形腫瘍を攻撃するために、ウルトラフェレーシス（１２０，０００ダルトン未満の分子量の化合物を除去するために精製され、続いて置換液体が投与される）を使用する。好ましい実施態様において、患者は、少なくとも１血液容量を濾過するために十分な、分子量１２０，０００ダルトンのカットオフを有する毛細管限外濾過器または平行板濾過器（ｐａｒａｌｌｅｌ ｐｌａｔｅ ｆｉｌｔｅｒ）を使用してウルトラフェレーシスされる。好ましい置換液体は、ウルトラフェレーシスされた正常な血漿である。あるいは、患者は、可溶性組織壊死因子レセプター−１（「ｓＴＮＦＲ−１」）、可溶性組織壊死因子レセプター−２（「ｓＴＮＦＲ−２」）、可溶性インターロイキン−２レセプター（「ｓＩＬ−２Ｒ」）、可溶性インターロイキン−１レセプター（「ｓＩＬ−１Ｒ」）、可溶性インターロイキン−６レセプター（「ｓＩＬ−６Ｒ」）、または可溶性インターフェロンγレセプター（「ｓＩＦＮ−γＲ」）に対する可溶性レセプター／インヒビターを選択的に除去するためにフェレーシスされる。これらは、サイトカイン、そのエピトープ、またはレセプターに対する抗体への結合によって除去され得る。これらは、患者の血液または血漿からタンパク質を除去するための結合反応のために、濾過器に、カラムに、または他の標準的技術を使用して固定化され得る。患者は、好ましくは、３週間の間毎日処置され、診断試験が、腫瘍の収縮が存在することを検証するために実施され、次いで、処置レジメが繰り返される。

処置は、好ましくは、代替治療（例えば、抗脈管形成性化合物、１つ以上のサイトカイン（例えばＴＮＦ、γインターフェロン、他のインターフェロン、もしくはＩＬ−２）、またはプロコアギュラント化合物を用いる処置）と組合わせられる。処置は、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ）を効率的に作用させることによって、腫瘍に対して炎症を増大させる。これは、腫瘍に対するサイトカイン活性を増強する任意の処置（例えば、アルキル化剤、ドキソルビシン（ｄｏｘｙｒｕｂｉｃｉｎ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎｕｍ）、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎｕｍ）、およびタキソール、ならびに「ブロックされない」サイトカインを用いる効果において相乗的であり得る他の薬物を使用する処置）と組み合わせられる場合に、改善された効果についての根拠を提供する。あるいは、ウルトラフェレーシス処置は、局所性の化学療法、全身性の化学療法、および／または照射と組合わせられ得る。

本発明によって、固形腫瘍の処置のための方法および組成物を提供された。
本発明によって、非選択的、非常な毒性、全身的な化学療法を含まない方法および組成物が提供された。

（発明の詳細な説明）
本明細書中に開示される方法およびデバイスは、癌、免疫媒介性障害、慢性寄生、いくつかのウイルス疾患、およびＩＬ−２、ＩＬ−６、γインターフェロン、または他の炎症前（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）シグナルに対するＴＮＦレセプターまたはインヒビターのレベルの増加によって特徴づけられる他の障害、ならびに白血球の活性化を有する患者の処置のために有用である。実施例は、癌患者の処置における有効性を実証する。

（Ｉ．ウルトラフェレーシス）
（Ａ．ウルトラフェレーシスシステム）
（１．濾過器）
濾過器は、生体適合性であり、そして血小板の過剰な活性化または凝固を生じることなく血液と接触されることに適切でなければならない。デバイスは、代表的に、平行板濾過器または毛細管膜濾過器のいずれかである。これらは、現在、腎臓透析のための使用におけるデバイスから適応され得る。毛細管膜濾過器は、代表的に、子供に対する使用のために約０．２５〜１ｍ²の表面積を有し、成人に対する使用のために約１〜３ｍ²の表面積を有する。平行板濾過器は、代表的に濾過されるべき血液１ｍｌあたり０．１〜２ｃｍ²の範囲の表面積を有する。

濾過膜は、代表的に生体適合性であるか、または代表的に毛細管膜濾過器において０．０２〜０．０５ミクロン、および平行板濾過器において０．０４〜０．０８ミクロンの孔サイズを有する不活性熱可塑性プラスチック（例えば、ポリカーボネート、ポリテトラフルオロエタン（Ｔｅｆｌｏｎ（登録商標））、ポリプロピレン、エチレンポリビニルアルコールまたはポリスルホン）である。約１２０，０００ダルトンの所望のカットオフを生じる実際の孔サイズは、流体の流れのジオメトリー（ｆｌｕｉｄ ｆｌｏｗ ｇｅｏｍｅｔｒｙ）、ずり応力、流速、および表面積に基づいて決定される。０．０３ミクロンの孔サイズを有する毛細管膜濾過器について有効なカットオフは１２０，０００ダルトンであり、１０〜３０％のふるい係数を有する。これにより、患者の血液から些細な量のＩｇＧのみが除去される。濾過膜は、厚さが約２５ミクロン未満であるべきであり、好ましくは厚さが約１０ミクロン未満であるべきである。透析膜は、血液凝固を生じないべきであり、そうでなければ血液と反応しないべきである。

好ましい膜は、孔が表面に対して垂直に向く電子ビームによって作製される膜である。なぜなら、孔のサイズおよび密度は、この様式で正確に制御され得るからである。孔は、有効な孔サイズが実際の孔のサイズであるように、断面において本質的に円形である。円形でない断面を有する孔を有する限外濾過媒体の有効な孔サイズは、当該濾過媒体を通過させる分子もしくは他の成分と等価なサイズの分子または他の成分を通過させる円形の孔の直径であるべきである。

適切なデバイスは、Ａｓａｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｊａｐａｎ、およびＫｕｒａｒａｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ、１−１２−３９、Ｕｍｅｄａ ｉｒｅ−ｋｕ、Ｏｓａｋａ ５３０、Ｊａｐａｎから入手され得る。

段階的な濾過器は、異なる孔サイズおよび／もしくはジオメトリーまたは表面積を有し、これはまた、血液からの物質の「時差的な（ｓｔａｇｇｅｒｄ）」除去を提供するために使用され得る。あるいは、この時点で好ましくないが、血液成分の適切な分離を提供するために示差的な遠心分離を使用し得る。特定の吸収カラムはまた、特定のサイトカインおよび細胞性インヒビターを濾過された血漿から選択的に除去するために使用され得る。その結果、限外濾過物（処理された血漿）は、患者に戻され得る。

（２．プロセス制御および流体取り扱い）
この患者は代表的に、標準的な静脈内チュービングを用いて血液処理デバイスに接続され（血小板フェレーシスに用いられるのと同様に接続され）、その結果、血液は、一方の側でこの患者から取り出され得、他方の側で戻され得る。このチュービングは、流速を制御するポンプに接続され、その結果、好ましい実施態様では、１血液容量（総体重の約７％に基づく）は、約２．５時間の時間をかけて処理される。次いで、濾液は、第２の部位で濾過デバイスからこの患者へと戻される。標準的なマイクロプロセッサー制御を用い、例えば、流速モニターおよびポンプ速度と組み合わせて、取り出される血液産物の容量をモニタリングすることにより血流を調節し得る。

このシステム全体は、第１に、生理食塩水を用いて洗い流され、次いで抗凝固薬剤または抗凝血剤（ａｎｔｉｃｌｏｔｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）（例えば、ヘパリンナトリウム）を用いて処理されて、このシステム内には血液凝固が生じ得る場所が存在しないことが確実にされるべきである。さらに、少量の抗凝固薬剤が、限外濾過器に指向される血流中に連続的に導入されて、濾過プロセスの間に凝固が生じないことを確実にすべきである。患者に注入される血液および流体と接触する、このシステムの表面の全ては、処理を始める前に滅菌されなければならない。

図１は、ウルトラフェレーシス（ｕｌｔｒａｐｈｅｒｅｓｉｓ）のためのシステムを例示する。血液は、静脈カテーテル１０によって患者から取り出される。カテーテルの遠位リード１１は、患者の心臓１３に導かれる上大静脈１２中に配置される。この血液は、導管１４を通ってドリップチャンバ１５へと流れ、次いでポンプ１６中に流れる。ポンプ１６は、導管１８を通しての分離ユニット１７（好ましくは、示されるような限外濾過器）へのこの血液の圧力を制御する。圧力ゲージ１９は、導管１４に提供されて、動脈圧力を連続的にモニタリングする。シリンジポンプ２０は、抗凝固薬物（例えば、ヘパリンナトリウム）を導管１８へと供給して、限外濾過器１７内での血液の凝固を防ぐ。限外濾過器１７では、この血流は、圧力がかけられた状態で、限外濾過器媒体またはメンブレン２１を通過する。低分子量成分を含む血液画分は、メンブレン２１を通過し、そして導管２２を通って透過物として排出される。高分子量成分を含む残存物（ｒｅｔｅｎｔａｔｅ）または処理された血液（これは、血球および血小板全体を含む）は、導管２３へと排出され、導管２３は、最終的にこの患者に戻る。容量ポンプ２７は、制御された量の透過物を、閉じ込めまたは測定のための容器２８へと通過させる。容量ポンプ３０（これは、好ましくはポンプ２７と同じタイプおよび容量である）は、置換流体を容器３１から導管３２へと汲み出し、導管３２は、この流体を導管２３へと導き、ここで、この流体は残存物または処理された血液と混合する。処理された血液および他の成分は、この患者へと静脈カテーテル３４を通して戻され、静脈カテーテル３４の遠位端または排出端は、腕頭静脈中に配置されている。容量ポンプ２７および容量ポンプ３０は、好ましくは、同じ合計量の流体を汲み出すかまたは同じ速度で汲み出すかのいずれかであるように設定されて、その結果、患者の血流から透過物として取り出される同じ容量の流体が置換流体として戻されるようにする。導管２３中の血流は、濾過器３６に通されて、この血流から凝塊または他の破片が除去される。ドリップチャンバ３７は、有意な量の空気が患者の血流に入らないことを確実にする。圧力ゲージ３８は、静脈の血圧を連続的にモニタリングするために提供される。

図２は、別の実施態様を例示する。ここでは、患者から取り出された血液は、最初に導管３０を通して第１の限外濾過器３１へと通されて、約１，０００，０００ダルトン未満の分子量を有する成分を有する血液画分が選択的に分離される。この限外濾過からの、高分子量成分を含む残存物は、導管３２を通してこの患者へと戻される。第１の限外濾過器３０からの透過物は、導管３３を通して第２の限外濾過器３４を通過させられ、ここで３０，０００未満の分子量を有する血液画分は、第１の限外濾過器３０からの透過物の流れから取り出される。第２の限外濾過器３４からの透過物（これは、非常に低分子量の成分、例えば、塩および栄養素を含む）は、導管３８を通してこの患者へと戻され得る。第２の限外濾過器からの残存物（これは、ブロッキング因子、ＩｇＧ免疫グロブリンおよび他の成分を含む）は、導管３６および導管１３を通して排出される。

血液は、免疫抑制効果を有する血液成分のこの濾過器の通過を生じるに充分な圧力で、しかし、このメンブレンを通る血球を過度に剪断または傷付けない速度で、限外濾過器ユニットを通して汲み出されるべきである。一般に、１時間当りで処理される血液の量に対するこのメンブレンの面積比が、約０．１ｃｍ／ｍＬ〜約２ｃｍ／ｍＬ内であるべきであることが見出されている。このメンブレンにわたる圧力差は、約２ｍＭ Ｈｇ〜約２０ｍＭ Ｈｇの範囲であるべきである。

（３．置換流体）
患者は、濾過後の置換流体を受けなければならない。好ましい置換流体は、この患者を処置するために用いられたのと同じ濾過器を用いて濾過された、ウルトラフェレーシス正常血漿（例えば、赤十字から入手される期限切れの血漿）である。あるいは、この患者には、正常アルブミン、または生理食塩水で希釈された新鮮な凍結血漿が、投与され得る。

（ＩＩ．アジュバント治療での処置）
標準的なウルトラフェレーシスは、ポジティブな指標が観察されるまでは、ある期間にわたって行われる。これは、代表的には、腫瘍サイズのいくらかの減少が存在したことを示すかまたは腫瘍炎症を示唆する、診断試験に基づく。この患者は、好ましくは、３週間にわたって毎日処置され、腫瘍および／または炎症の縮小が存在したことを確認する診断試験が行われ、次いでこの処置レジメが繰り返される。

壊死物質の外科的（または減圧）除去は、高い腫瘍負荷に関連する毒性を回避するために、処置の前または処置の間に必要とされ得る。

この手順は、全ての他の処置法が失敗した患者うちの約５０％において種々の固形腫瘍に有意な応答（腫瘍サイズの５０％より大きい減少）を引き起こすことが実証されている。ウルトラフェレーシスによって誘発された腫瘍特異的炎症応答は、転移性黒色腫の臨床試験において患者のうちの約７５％において実証されている。この炎症は、赤み、腫脹、ぬくみ（ｗａｒｍｔｈ）および圧痛によって特徴付けられ、そしてこの炎症は腫瘍のみに制限される。非癌性組織に関連した損傷は存在していない。この腫瘍特異的炎症応答は、これまでに研究された患者のうちの５０％において腫瘍サイズの５０％以上の減少をもたらした。臨床試験はまた、ヒトの乳癌および前立腺癌において腫瘍転移の４４％の大きな減少を実証した。

腫瘍特異的炎症は、転移性の結腸癌、卵巣癌、肺癌、頭部および頚部の癌、子宮頸部癌および子宮内膜癌を有する患者において観察されている。いくつかの場合では、この炎症に続いて、各腫瘍型における有意な腫瘍後退が起こる。このような多様な腫瘍型における応答の重要性は、ウルトラフェレーシスが、腫瘍に対する患者の応答を腫瘍の好首尾の免疫学的制御に有利に改変することを強力に示唆する。ウルトラフェレーシスに特に感受性である腫瘍の型としては、上皮腫瘍、肉腫、黒色腫、および神経膠芽細胞腫が挙げられる。

完全な後退を引き起こすことは明らかに有利である。このプロセスが、腫瘍によって生成された免疫インヒビター、特にサイトカインおよび他の免疫メディエーターのインヒビターを除去するという推定された機構に基づいて、ウルトラフェレーシスを用いて達成される結果を増強する、アジュバントまたは組合せ治療を用いて患者を処置することが可能である。ＴＮＦ−αレセプターおよびＴＮＦ−βレセプターは、特に重要な免疫インヒビターであると考えられる。それゆえ、ＴＮＦ活性を増強する化合物が特に好ましい。これらとしては、抗脈管形成化合物（例えば、サリドマイド）、プロコアギュラント化合物、サイトカインおよび他の免疫刺激物質（ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｎｔ）が挙げられる。標準的な化学治療剤および／または照射もまた、ウルトラフェレーシスと共に用いられ得る。

（Ａ．抗脈管形成化合物）
任意の抗脈管形成化合物が用いられ得る。例示的な抗脈管形成化合物としては、以下が挙げられる：Ｏ−置換フマジロール（ｆｕｍａｇｉｌｌｏｌ）およびその誘導体（例えば、ＴＮＰ−４７０）（Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏらに対する米国特許第５，１３５，９１９号、同第５，６９８，５８６号、および同第５，２９０，８０７号に記載される）；アンジオスタチン（ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ）およびエンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙに対する米国特許第５，２９０，８０７号、同第５，６３９，７２５号、および同第５，７３３，８７６号に記載される）；サリドマイド（Ｄ’Ａｍａｔｏに対する米国特許第５，６２９，３２７号および同第５，７１２，２９１号に記載されるとおり）；ならびに他の化合物（例えば、抗侵入因子（ａｎｔｉ−ｉｎｖａｓｉｖｅ ｆａｃｔｏｒ）、レチノイン酸、およびパクリタキセル（Ｈｕｎｔｅｒらに対する米国特許第５，７１６，９８１号に記載される）およびメタロプロテイナーゼインヒビター（Ｍｕｒｐｈｙらに対する米国特許第５，７１３，４９１号に記載される））。サリドマイドは、一日１回、２００ｍｇが経口投与される。

（Ｂ．プロコアギュラント化合物）
プロテインＣは、セリンプロテアーゼに対するビタミンＫ依存性血漿タンパク質チモーゲンである。活性化されると、プロテインＣは強力な抗凝固因子となる。活性化されたプロテインＣは、プロコアギュラント補因子である第ＶＩＩＩａ因子および第Ｖａ因子の特異的タンパク質分解を通して作用する。この活性は、別のビタミンＫ依存性タンパク質であるプロテインＳ、カルシウムおよびリン脂質（おそらく細胞性）表面の存在を必要とする。Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ ａｎｄ
Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ：Ｂａｓｉｃ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ 第２版、Ｃｏｌｍａｎ，Ｒ．Ｗ．ら編、２６３頁（Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ１９８７）に記載されるように、プロテインＣは、大きい方の重鎖がより小さい方の軽鎖に一つのジスルフィド連結を通じて結合した、二本鎖形態で循環する。プロテインＣは、活性化プロテインＣ（ＡＰＣ）へと活性化される。トロンビンは、プロテインＣを、その重鎖中のＡｒｇ¹²−Ｌｅｕ¹³結合の特異的切断によって活性化し得る。インビボで、生理学的濃度のカルシウムの存在下で、この活性化速度は、トロンビンが内皮細胞補因子であるトロンボモジュリンに結合された場合に劇的に増強される。Ｍａｔｓｃｈｉｎｅｒら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｓ
ｉｎ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｋ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１３５−１４０頁、Ｊｏｈｎ
Ｗ．Ｓｕｔｔｉｅ編（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．１９８８）は、凝固におけるビタミンＫ依存性タンパク質の役割をさらに概説した。

天然の抗凝結物質経路の遮断は、特にプロテインＣ経路の遮断は、Ｅｓｍｏｎらに対する米国特許第５，１４７，６３８号に記載されるように、微小血管血栓症について腫瘍の毛細血管を標的化するために腫瘍の天然のプロコアギュラント特性を用いて、腫瘍の出血性壊死をもたらす。このような化合物の例としては、抗プロテインＣおよび抗プロテインＳが挙げられる。

（Ｃ．サイトカイン） プロ炎症性サイトカインの生物学的活性および臨床効果は、癌および後天性免疫寛容性の他の状態を有する患者におけるウルトラフェレーシス（ｕｌｔｒａｐｈｅｒｅｓｉｓ）によって増大される。詳細には、ＴＮＦαおよびＴＮＦβはともに、１平方メートル体表面積（Ｍ２ＢＳＡ）当たり約１００μｇ〜約５００μｇの用量で、攻撃性腫瘍において免疫反応を増強し得る。単球およびリンパ球活性化は、ＩＮＦ−α、ＩＮＦ−βおよびγによって増大される。ＩＬ−１およびＩＬ−２のレセプターアンタゴニストは、ウルトラフェレーシスによって除去され、そしてそれにより、これらのサイトカインのインビボ活性をアップレギュレートする。８０ｋＤａ糖タンパク質（これは、進行した悪性疾患、慢性感染性疾患および妊娠における芽細胞様（ｂｌａｓｔｏｉｄ）形質転換の阻害を担う）は、近年、見出されており、このプロセスにより除去される、これらの疾患における遅延型過敏性反応の損失の原因であるようである。これは、有意である。なぜなら、このタイプの抑制を除去することにおいて、全てのタイプのワクチンがより良好に働くからである。ＩＦＮ−αおよびβの投薬量レジメは、１週間に３回の３Ｍ単位の皮下投与から、毎日２０Ｍ単位／Ｍ２ＢＳＡまでである。インターフェロンγは、１００〜１０００μｇ／日の投薬量で投与される。

（Ｄ．抗サイトカインレセプター分子）
ＴＮＦレセプター１およびＴＮＦレセプター２の分子が腫瘍細胞によって脱離される（ｓｈｅｄ）こと、およびこれらの分子が腫瘍細胞上で宿主による免疫媒介攻撃を阻害するようであることが十分に確立されている。ウルトラフェレーシスは、これらの可溶性レセプターの大部分を除去すると考えられる。可溶性組織壊死因子レセプター−１（「ｓＴＮＦＲ−１」）、可溶性組織壊死因子レセプター−２（「ｓＴＮＦＲ−２」）、可溶性インターロイキン−２レセプター（「ｓＩＬ−２Ｒ」）、可溶性インターロイキン−１レセプター（「ｓＩＬ−１Ｒ」）、可溶性インターロイキン−６レセプター（「ｓＩＬ−６Ｒ」）、または可溶性インターフェロンγレセプター（ｓＩＦＮ−γＲ」）に対するこれらの可溶性レセプター／インヒビターのさらなるおよび／または選択的な除去は、ウルトラフェレーシスを補充するためにまたはその代わりに使用され得る。選択的除去の利点は、同じ有益な効果が、障害の処置で得られるが、この処置は、選択的な除去が存在するとき、外因性血漿もアルブミンも患者に投与される必要がないので、よりずっと安価でかつ安全であることである。これらは、サイトカイン、それらのエピトープ、またはそのレセプターに対する抗体に結合することにより除去され得る。これらは、フィルタ中に、カラム中に、または患者の血液または血漿からタンパク質を除去するための結合反応についての他の標準的な技術を用いて固定化され得る。本明細書中で使用されるように、抗体とは、レセプター分子に対して免疫反応性の抗体または抗体フラグメント（単鎖、組換え体、またはヒト化）をいう。好ましい実施態様では、これらの抗体は、標準的な抗体カップリング技術を使用して、ウルトラフェレーシス膜フィルターで固定化される。最も好ましい実施態様では、抗体は、脱離されたレセプター分子のカルボキシ末端と反応性であり、それにより、レセプターによるシグナル伝達が細胞表面上になお存在するという懸念を回避する。

（Ｅ．化学療法剤）
好ましい化学療法剤は、ＴＮＦと相乗的である薬剤であり、例えば、アルキル化剤、ドキソルビシン（ｄｏｘｙｒｕｂｉｃｉｎ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎｕｍ）、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎｕｍ）、およびタモキシフェン（ｔｏｍｏｘｉｆｅｎ）が挙げられる。タモキシフェンは、エストロゲンレセプターの遮断においてだけでなく、上皮由来増殖因子（「ＥＤＧＦ」）、線維芽細胞由来増殖因子（「ＦＤＧＦ」）、腫瘍由来増殖因子（「ＴＤＧＦ」）、ＴＤＧＦ−βおよび血小板由来増殖因子（「ＰＤＧＦ」）のような特定の増殖因子レセプターの遮断においても役割を演じ、従って、ウルトラフェレーシスによって刺激された癌に対する炎症に対して補足的であり得る。

（Ｆ．放射線照射）
放射線療法は、正常組織を破壊し、腫瘍を炎症攻撃によって部分的に死滅させる。ウルトラフェレーシスは、残留する腫瘍細胞を殺傷し、そして正常組織に有害な作用を与えない、より低い線量の放射線照射の使用を可能にする。好ましい方法において、ウルトラフェレーシスが初期療法として使用され、通常の照射量のおよそ半分での放射線照射が続く。ＴＮＦは、遊離酸素ラジカル、ヒドロキシルラジカル、およびハロゲン化物イオンを生成することにより腫瘍細胞を殺傷すること、および放射線療法は、組織においてカルボニウムイオンを生成することが、十分に確立されている。従って、これら２つの組み合わせは、いずれか単独よりも、癌細胞の殺傷において有効である。

（ＩＩＩ．実施例）
（実施例１：ウルトラフェレーシスを用いる転移性平滑筋肉腫（ｌｅｉｏｍｙｏｓｃａｒｃｏｍａ）を有する患者の処置）
Ｊ．Ｋ．さんは、転移性平滑筋肉腫を有する４３歳の女性である。これは、６つの肺転移を伴い、その全てが、腫瘍を除去するための両肺の手術の１ヶ月以内に発症した。これらの腫瘍はまた、メトトレキサート、アドリアマイシン、イフォスファミド（ｉｆｏｓｐｈｏｍｉｄｅ）、およびダクチノマイシンではうまくいかなかった。

彼女は、副作用を伴うことなく、２４のウルトラフェレーシス手順を受けた。一月後、ＣＡＴ走査は、わずか４つの腫瘍を示したのみであり、そしてこれらは、大きさが５０％減少した。

（実施例２：ウルトラフェレーシスおよびサリドマイドを用いる胸部癌を有する患者の処置）
Ｊ．Ｒ．さんは、転移性胸部癌を有する４４歳の女性である。これは、放射線療法および化学療法剤（サイトキサン（ｃｙｔｏｘａｎ）、アドリアマイシン、５−ＦＵ、タキソール（ｔａｘｏｌ）、シスプラチン、ナベルビン（ｎａｖａｌｂｉｎｅ）、タモキシフェン（ｔａｍｏｘｏｆｉｎ）、およびアリメデックス（ａｒｉｍｅｄｅｘ））での処置に失敗した。ウルトラフェレーシスの時点での腫瘍は、肺、骨、ならびに左側の前部および側部の胸部全体の皮膚において示された。

彼女を、３週間にわたって、１５のウルトラフェレーシス手順で処置した。彼女は、その皮膚の腫瘍における顕著な炎症、骨中の腫瘍からの痛みの増大、および肺中の腫瘍の腫脹を経験した。次いで、彼女は、夜に薬物サリドマイド２００ｍｇを受けた。皮膚における発赤および腫脹は、２日以内で改善され、そして彼女の呼吸は、１週間以内に正常に戻った。処置の完了後２週間で、彼女の皮膚中の全ての腫瘍は臨床的に解消し、骨の痛みは解消し、そして肺中の腫瘍は反復ＣＡＴ走査上で解消した。１週間後、彼女は、スクールカウンセラーとして仕事に復帰した。彼女は、処置の２ヵ月後疾患を有さないとの試験を受け、同じ用量でのサリドマイドで維持されていた。

（実施例３：ウルトラフェレーシスおよびサリドマイドを用いる転移性黒色腫を有する患者の処置）
Ｐ．Ｇ．さんは、転移性黒色腫を有する５４歳のエンジニアである。彼は、肺および縦隔中のリンパ節への転移を伴っている。

彼は、２４のウルトラフェレーシス手順を受け、これは、腫瘍の２５％減少を生じた。彼を、続けて、さらなる１２の手順で処置し、これは、腫瘍炎症の形跡に関わらず、微量な腫瘍減少を生じた。この腫瘍は、１ヶ月以内で再成長した。彼を、再度、ウルトラフェレーシスで再処置し、これは、再度、炎症およびいくらかの微量な後退を生じたが、しかし、次いで、腫瘍炎症時にサリドマイドで処置した。２ヵ月後、反復ＣＡＴ走査は、肺および縦隔において、腫瘍の完全な消失を示した。彼は、きっちりと追跡されており、疾患の形跡を示さず、そして処置の完了の６ヵ月後には医学的病訴は有していない。

（実施例４：ウルトラフェレーシスおよびサリドマイドを用いる転移性腺癌を有する患者の処置）
Ｒ．Ｓ．博士は、左側上方の肺において転移性腺癌を有する５９歳の男性である。彼は、肝臓、脳、および骨への転移を伴っている。彼の腫瘍は、タキソール、シスプラチン、およびエトポシドに応答しなかった。彼の脳腫瘍は、放射線療法に応答した。

彼は、１５のウルトラフェレーシス手順を受けた。各手順は、脊柱、骨盤、右側の臀部、および左側の肩の腫瘍において痛みの増大を引き起こした。限外フェレーシス処置後の追跡走査は、骨盤、脊柱、臀部および肋骨において腫瘍の解消を示した。肺および肝臓における原発性腫瘍において５０％の減少があった。次いで、サリドマイドを、各夜、２００ｍｇで始めた。１ヵ月後、走査は、肺および肝臓における腫瘍のさらなる減少を示した。この患者の痛みは全て解消し、そして彼は、この時点で、無症候性である。

図１は、ウルトラフェレーシスのためのシステムの概略図である。 図２は、ウルトラフェレーシスのためのシステムの概略図である。

Claims (1)

1. 形質転換組織、感染組織、または疾患組織に対する免疫応答を誘導するための方法。

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