JP2003531888A

JP2003531888A - 酵母からアスタキサンチン色素を抽出するためのプロセスおよびその抽出された色素

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Publication number: JP2003531888A
Application number: JP2001580866A
Authority: JP
Inventors: チヨウンハン，; ソウンジャエリー，; ミュンキョジュン，; ソウクケウンチョイ，; ジュンセオプロウ，
Original assignee: ハイタイフーズプロダクツカンパニーリミテッド
Priority date: 2000-05-04
Filing date: 2001-05-02
Publication date: 2003-10-28
Also published as: KR100388110B1; KR20000053886A; EP1278725A1; AU5680701A; WO2001083437A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタキサンチン色素を抽出するためのプロセスに関し、このプロセスは、以下の工程：ｉ）酵母を培養する工程；ｉｉ）マイクロ波を用いてこの培養懸濁液を処理して細胞壁およびミクロボディを破壊する工程；およびｉｉｉ）この培養懸濁液を乾燥させるかまたは、エタノール、メタノール、アセトンおよびそれらの混合物からなる群より選択される溶媒を用いてアスタキサンチン色素を抽出する工程、を包含する。さらに、本発発明はまた、上記の方法によって抽出されたアスタキサンチンにも関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（技術分野）本発明は、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタキサン
チン色素を抽出するためのプロセスに関し、このプロセスは、ｉ）上記酵母細胞
を培養する工程、ｉｉ）酵母培養懸濁液をマイクロ波で処理して、細胞壁および
ミクロボディーを破壊する工程、ｉｉｉ）この懸濁液を乾燥するか、またはエタ
ノール、メタノール、アセトンおよびそれらの混合物からなる群より選択される
溶媒を用いて、アスタキサンチン色素を抽出する工程を包含する。さらに、本発
明はまた、上記の方法によって抽出されたアスタキサンチンに関する。

【０００２】より特に、本発明は、酵母培養懸濁液からアスタキサンチン色素を抽出するた
めのプロセスに関し、このプロセスはさらに、ｉ）この培養懸濁液が、９００〜
９３０ＭＨｚまたは２４００〜２５００ＭＨｚの周波数で、５０〜１０００ワッ
トのマイクロ波の照射のために、テフロン（登録商標）チューブを通過するかま
たはテフロン（登録商標）抽出容器上に置かれる、マイクロ波処理工程；ｉｉ）
得られた色素を、ロータリーバキュームエバポレーターを使用して減圧で濃縮す
る、色素分離工程を包含する。さらに、このマイクロ波処理はまた、他の微生物
の不稔、ならびに酵母の細胞壁およびミクロボディーの破壊を提供する。

【０００３】（背景技術）アスタキサンチン（３，３’−ジヒドロキシ−β，β’−カロテン−４，４’
−ジオン）は、一般的に、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞（Ｐ
ｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１５，１００９（１９７６））、Ｈａｅｍａｔｏ
ｃｏｃｃｕｓ種のラン藻類（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０，２５６１（
１９８１））およびＢｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ（Ｊ．ｇｅｎｅｒａｌａｎ
ｄａｐｐｌｉｅｄｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１５，１２７（１９６９））
から得られる。さらに、アスタキサンチンは、主に海水動物および淡水動物に分
布される（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１５．１００３−１００７（１９７
６））。

【０００４】特に、アスタキサンチンは、Ｃｒｕｓｔａｃｅａ（例えば、エビまたはザリガ
ニ）；鳥の先端（ｔｉｐ）または卵黄；マスおよびサケにおいて緋色（ｓｃａｌ
ｅｔｃｏｌｏｒ）として見出されている（ＣｒｉｔｉｃａｌＲｅｖｉｅｗｓ
ｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１１（４），２９７−３２６（１９９１
））。アスタキサンチンは、色および香味の増強、免疫の活性化、酸素フリーラ
ジカルの除去による抗癌活性（Ｐｕｒｅ＆Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，５１．６４９
−６６０（１９７９），Ｊ．Ｋｏｒｅａｎ．Ｓｏｃ．ＦｏｏｄＳｃｉ．Ｎｕｔ
ｒ．２７（１）．１６３−１６７（１９９８））、および抗加齢代謝（Ｉｎｔｅ
ｒｎａｔ．Ｊ．Ｖｉｔ．Ｎｕｔｒ．Ｒｅｓ．６５．７９−８６（１９９５））に
寄与する。さらに、アスタキサンチンは、ビタミンＡ前駆物質として使用され得
る。

【０００５】一方、アスタキサンチン色素は、他のカロテノイド色素またはトコフェロール
と比較して、優れた抗酸化活性を有することが報告されている（Ｆｉｓｈｅｒｉ
ｅｓＳｃｉ．，６２．１３４−１４０（１９９６））。アスタキサンチン色素
は、医療用途ならびに食用色素の重要性を有すると考えられている（Ｃｒｉｔ．
Ｒｅｖ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１１．２９７−３２６（１９９１））。

【０００６】しかし、Ｃｒｕｓｔａｃｅａ（例えば、エビまたはザリガニ）からのアスタキ
サンチンの抽出は、ほとんど試みられてこなかった。なぜなら、少量のアスタキ
サンチンしか含まれていないからである。さらに、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏ
ｚｙｍａからのアスタキサンチンの抽出は、ほとんど適用されてこなかった。な
ぜなら、このような微生物の細胞壁は堅すぎて、この微生物からアスタキサンチ
ンを抽出できないからである。

【０００７】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞由来のアスタキサンチンを得
るために、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの細胞壁を破壊するための有効
な方法の開発が余儀なく必要とされる。時折、コストの上昇を避けるために、細
胞壁が破壊されていない乾燥アスタキサンチン粉末が使用されている（Ｊ．Ａｐ
ｐｌｉｅｄｐｈｙｃｏｌｏｇｙ４，２６７−２７９（１９９２））。しかし
、このような処理を伴わずに製造されたアスタキサンチン粉末は、動物の飼料ま
たは食品添加物として使用される場合、非常に低いバイオアベイラビリティを示
す。

【０００８】従って、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの細胞壁を破壊するための多く
の方法が開発されている。

【０００９】１）ｉ）酸を使用して、細胞壁を破壊および加水分解する工程、ならびにｉｉ
）アスタキサンチンを中和（ｎｅｕｔｒｏｌｙｚｅ）および抽出する工程を包含
する化学的方法が、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．Ｒｅｖ．，３９．１９７−２３１（１
９７５）；米国特許第５，２１０，１８６号および欧州特許第０５５３８１
４Ａ１に開示されている。

【００１０】２）ｉ）フレンチプレス（Ｆｒｅｎｃｈｐｒｅｓｓｕｒｅ）、Ｂｒａｕｎホ
モジナイザーまたはＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｇｅｒを使用して、細胞壁を破壊す
る工程、ならびにｉｉ）溶媒でアスタキサンチンを抽出する工程を包含する物理
的方法が、ＥｎｚｙｍｅＭｉｃｒｏｂ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．，８．１９４−２０
３（１９８６）；Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ７０．１８１−１
９１（１９９１）に開示されている。

【００１１】３）消化酵素（例えば、セルラーゼ、ヘミセルラーゼおよびペクチナーゼ）を
使用して、細胞壁を破壊する工程を包含する生化学的方法が、Ａｐｐｌ．ａｎｄ
Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３５（６）．１１５５−１１５９（１
９７８）に開示されている。

【００１２】しかし、任意の上記の方法は、プロセスの間のアスタキサンチン色素の破壊お
よびアスタキサンチンの低収率に起因して、アスタキサンチンについての市販の
抽出方法を提供できない。さらに、溶媒（例えば、エタノールまたはアセトン）
を使用したアスタキサンチンの直接抽出方法はまた、その高コストおよび低収率
に起因して、商業化できない。

【００１３】上記の問題を解決するために、本発明者らは、色素の有効な抽出のために細胞
壁を破壊するマイクロ波処理方法を開発し、そしてまたマイクロ波照射のための
容器およびチューブを設計した。従って、本発明者らは、アスタキサンチン色素
を得るための効率的かつ費用効果のよい方法を完成した。

【００１４】（発明の開示）本発明の目的は、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するためのプロセスを提供することであり、このプロセス
は、ｉ）酵母細胞を培養する工程、ｉｉ）水で培養酵母細胞を懸濁する工程、ｉ
ｉｉ）マイクロ波で培養懸濁液を処理して、細胞壁およびミクロボディーを破壊
する工程、ならびにｉｖ）アスタキサンチン色素を含有する得られた物質を乾燥
する工程を包含する。

【００１５】本発明の別の目的は、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からア
スタキサンチン色素を抽出するためのプロセスを提供することであり、このプロ
セスは、ｉ）酵母細胞を培養する工程、ｉｉ）水で培養酵母細胞を懸濁する工程
、ｉｉｉ）マイクロ波で培養懸濁液を処理して、細胞壁およびミクロボディーを
破壊する工程、ならびにｉｖ）エタノール、メタノール、アセトンおよびそれら
の混合物からなる群より選択される溶媒を用いて、アスタキサンチン色素を抽出
する工程を包含する。

【００１６】このマイクロ波処理は、９００〜９３０ＭＨｚまたは２４００〜２５００ＭＨ
ｚの周波数で５０〜１０００ワットのマイクロ波照射のために、培養懸濁液がテ
フロン（登録商標）チューブを通過する連続的プロセス、および培養懸濁液がテ
フロン（登録商標）抽出容器上に置かれる固定化プロセスから選択される。

【００１７】本発明はまた、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタキ
サンチン色素を抽出するためのプロセスを提供し、このプロセスは、得られた色
素を、ロータリーバキュームエバポレーターを使用して減圧で濃縮する色素分離
工程をさらに包含する。

【００１８】アスタキサンチン色素の収率は、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母
細胞に含まれる総カロテノイドから１０〜９５ｗｔ％であり、そしてアスタキサ
ンチン色素の純度は、得られた物質の５０〜９５ｗｔ％である。

【００１９】抽出溶媒の量は、懸濁液の１容積部と比較して、５〜２０容積部であるか、ま
たはＰｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞の乾燥量の１重量部と比較
して、５〜１０（容積／重量）部である。

【００２０】本発明のさらなる目的は、アスタキサンチン色素を、化粧品、動物の飼料また
は食品添加物として使用するための方法を提供することである。

【００２１】（発明を実施するための最良の形態）マイクロ波処理の原理は、以下に説明され得る。

【００２２】マイクロ波がＰｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａに図１または図２に示され
る方法に従って照射される場合、細胞中の自由水および他の双極子は、電界の周
期変化に従って回転し、これは、マイクロ波のエネルギーを熱エネルギーへと変
換する。次いで、細胞中の細胞壁およびミクロボディ（核、ミトコンドリア、ゴ
ルジ体）は、内圧の上昇、続いて内部加熱によって破壊される。それゆえ、マイ
クロ波処理は、細胞壁の物理的破壊を伴わない、色素の抽出を可能にする。さら
に、有機溶媒による抽出は、マイクロ波処理によって容易に達成され得る。なぜ
なら、有機溶媒は、細胞中に容易に拡散し得るからである。

【００２３】それゆえ、本発明者らは、マイクロ波処理法を採用し、そしてこの方法をアス
タキサンチン色素の抽出に適用する。この方法は、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏ
ｚｙｍａの、主にα−グルカン（特に、α−１，３−グルカン）から構成される
、硬く厚い細胞壁の破壊を可能にする。

【００２４】さらに、本発明者らは、アスタキサンチンを効果的に抽出するためのマイクロ
波処理システムを設計する。１つのものは、図１に示すようにテフロン（登録商
標）チューブを用いたマイクロ波処理システムであり、そして別のものは、図２
に示されるようなテフロン（登録商標）抽出容器を用いた固定マイクロ波処理シ
ステムである。

【００２５】図１に示されるように、テフロン（登録商標）チューブは、マイクロ波オーブ
ンに挿入され、そしてテフロン（登録商標）チューブの長さおよび直径は、マイ
クロ波保持時間およびマイクロ波処理能力に従って設計される。培養懸濁物を、
変速蠕動ポンプ（Ｍｏｄｅｌ：ＡＳ−９０３６１、ＷｏｎＣｏｒｐｏｒａｔｉ
ｏｎ，Ｋｏｒｅａ）を用いてこのチューブに通す。

【００２６】図２に示されるように、テフロン（登録商標）抽出容器は、マイクロ波オーブ
ンの中心に置かれ、そしてある量の培養懸濁物が、マイクロ波オーブン中の容器
に入れられる。この固定システムでは、テフロン（登録商標）チューブおよびポ
ンプは必要とされない。

【００２７】マイクロ波の出力は、９１６ＭＨｚまたは２４５０ＭＨｚの周波数で５０〜１
，０００ワットの範囲である。マイクロ波は、テフロン（登録商標）抽出容器ま
たはテフロン（登録商標）チューブに１０〜５００秒間照射される。

【００２８】本発明は、以下の実施例によってより詳細に説明される。しかし、実施例は、
本発明を例示することを意図するが、本発明の範囲を決して制限しないことが理
解されるべきである。

【００２９】（実施例）（実施例１）連続マイクロ波処理システムまたは固定マイクロ波処理システム
による色素抽出収率試験アスタキサンチンの抽出収率を、以下の条件によるマイクロ波照射下で測定し
た；マイクロ波出力５０〜１，０００ワット、９１６ＭＨｚまたは２４５０ＭＨ
ｚの周波数、１０〜５００秒間。培養酵母細胞（濃度：１０ｇ／Ｌ）を、以下に
よってマイクロ波で処理した：ｉ）図１に示すようなテフロン（登録商標）チュ
ーブを用いた連続マイクロ波処理システム、およびｉｉ）図２に示すようなテフ
ロン（登録商標）抽出容器を用いた固定マイクロ波処理システム。１０容量部の
エタノールを１容量部の培養酵母懸濁物に添加した。３０℃にて２４時間の抽出
後、抽出物を−２０℃に３０分間を超えて置いて、脂質を除去した。得られた抽
出物を遠心分離器を用いて遠心分離した後（１０，０００×ｇ）、アスタキサン
チン抽出物を、上清を減圧下で濃縮することによって得た。色素の抽出収率を測
定するために、アセトンを添加して、ＵＶ／ＶＩＳＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏ
ｍｅｔｅｒＢｉｏｃｈｒｏｍ４０６０，Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｇｅｒｍａｎ
によって４７８ｎｍで吸光度を測定した。

【００３０】コントロール群を、以下の方法に従って調製した。１ｍｌのジメチルスルホキ
シド（ＤＭＳＯ）の予め加熱した（５５℃）ストック溶液を、培養酵母細胞に添
加した。次いで、酵母細胞を完全に破壊するために混合物を激しく攪拌した。色
素を抽出するために、１ｍｌのアセトン、１ｍｌの石油エーテルおよび１ｍｌの
塩化ナトリウム（２０％）をこの順番で添加した。冷蔵庫で保存する場合には、
この溶液を１０，０００×ｇで５分間遠心分離した。色素が溶解した石油エーテ
ル層を得た後、石油エーテルを減圧下でエバポレートした。得られた物質に１ｍ
ｌのアセトンを添加し、そして吸光度を４７８ｎｍにて測定して、色素抽出物を
確認した。

【００３１】色素抽出収率を、以下の方程式によって算出した。

【００３２】色素抽出収率（％）＝Ｂ／Ａ×１００Ａ：ＤＭＳＯを用いて細胞壁を破壊した後のコントロール群の、４７８ｎｍで
の吸光度；Ｂ：マイクロ波の照射後の実験群における有機溶媒による可溶性物質の、４７
８ｎｍでの吸光度。

【００３３】色素破壊率を、以下の方程式によって算出した。

【００３４】色素破壊率＝｛Ａ−（Ｂ＋Ｃ）｝／Ａ×１００Ａ：ＤＭＳＯを用いて細胞壁を破壊した後のコントロール群の、４７８ｎｍで
の吸光度；Ｂ：マイクロ波の照射後の実験群における有機溶媒による可溶性物質の、４７
８ｎｍでの吸光度；Ｃ：マイクロ波の照射後の実験群における有機溶媒による不溶性物質の、４７
８ｎｍでの吸光度。

【００３５】表１は、周波数、時間および出力の変動による色素抽出収率および色素破壊率
の結果を示す。全ての結果は、３回の実験の平均値である。

【００３６】

【表１】（実施例２）マイクロ波照射後の抽出溶媒および抽出時間による色素抽出収率
試験実施例１における方法に従って、周波数２４５０ＭＨｚ；出力５００ワット；
および照射時間６０秒間をマイクロ波処理のために調整した。培養懸濁物は、１
０ｇ／Ｌの細胞密度を有する。抽出溶媒の量は、１容積部の培養懸濁物と比較し
て、１０容積部である。抽出温度は３０℃であった。アスタキサンチン抽出物を
、ロータリーバキュームエバポレーターを用い、続いて暗室で攪拌することによ
って得た。アセトンを添加した後、色素抽出物の吸光度を４７８ｎｍで測定した
。最終的に、色素抽出収率を、ＵＶ／ＶＩＳＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔ
ｅｒＢｉｏｃｈｒｏｍ４０６０を用いて測定した。

【００３７】表２は、溶媒および時間の変動による色素抽出収率および色素破壊率の結果を
示す。全ての結果は、３回の実験の平均値である。

【００３８】

【表２】 ^*コントロール群は、培養懸濁物からマイクロ波処理を伴わずにエタノールに
よって抽出された吸光度を示す。

【００３９】（実施例３）マイクロ波照射の時点での細胞培養懸濁物の細胞密度による色素
抽出収率試験この実験を、細胞培養懸濁物の細胞密度を変動させたこと以外は実施例２と同
じ様式で実施した。細胞培養懸濁物の細胞密度を、１リットルあたりの酵母細胞
の乾燥重量によって評価した。最終的に、色素抽出収率および色素破壊率を、Ｕ
Ｖ／ＶＩＳＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒＢｉｏｃｈｒｏｍ４０６
０を用いて測定した。

【００４０】表３は、マイクロ波照射時点の細胞培養懸濁物の細胞密度による色素抽出収率
および色素破壊率の結果を示す。全ての結果は、３回の実験の平均値である。

【００４１】

【表３】（実施例４）マイクロ波照射後の抽出温度および抽出時間の色素抽出収率試験この実験を、抽出温度を変動させたこと以外は実施例２と同じ様式で実施した
。最終的に、色素抽出収率を、ＵＶ／ＶＩＳＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔ
ｅｒＢｉｏｃｈｒｏｍ４０６０を用いて測定した。

【００４２】表４は、抽出温度および抽出時間の変動による色素抽出収率および色素破壊率
の結果を示す。全ての結果は、３回の実験の平均値である。

【００４３】

【表４】（実施例５）マイクロ波照射の後の抽出溶媒容積による色素抽出収率試験抽出溶媒容積を変えたことを除いて、実験を、実施例２と同じ様式で実行した
。抽出時間は、２４時間であり、そして抽出温度は、３０℃であった。最後に、
色素抽出収率を、ＵＶ／ＶＩＳＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒＢｉｏ
ｃｈｒｏｍ４０６０を用いて測定した。

【００４４】表５は、抽出溶媒容積の変化による色素抽出収率および色素破壊率の結果を示
す。全ての結果は、３回の実験の平均値である。

【００４５】

【表５】（実施例６）抽出された色素中のアスタキサンチン含量を測定するための分析総カルチノイド含量を、公知の方法に従って測定した。培養した懸濁液（１ｍ
ｌ）を、遠心分離し、そして沈殿物を、滅菌された水で２回洗浄した。次いで、
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の予熱した（５５℃）ストック溶液（１ｍｌ
）を添加した。次いで、この混合物を、酵母細胞を完全に破壊するために激しく
撹拌した。

【００４６】色素を抽出するために、１ｍｌのアセトン、１ｍｌの石油エーテルおよび１ｍ
ｌの塩化ナトリウム（２０％）を、この順序で添加した。冷蔵庫中に貯蔵する際
に、この溶液を、１０，０００×ｇにて５分間遠心分離した。この上清の吸光度
を、４７４ｎｍにて測定した。

【００４７】実施例５における色素抽出溶液の１ｍｌを用いて、溶媒を減圧下でエバポレー
トした。１ｍｌの石油エーテルを添加し、そして吸光度を４７４ｎｍにて測定し
た。色素の抽出収率を、ジメチルスルホキシド（１００％）によって、抽出した
色素の量を比較することによって測定した。

【００４８】総カルチノイド含量を、１％の吸光係数（２，１００）および細胞の乾燥含量
を含む以下の式を用いることによって測定した（Ａｐｐｌ．ａｎｄＥｎｖｉｒ
ｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５５．１１６−１２４（１９８９））。エタノー
ル抽出物から、アスタキサンチン含量の含量を、真空下および減圧下にて抽出溶
媒をエバポレートした後に測定した。次いで、得られたアスタキサンチン色素を
、ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ４８６，ＵＳＡ）分析する前にクロロホルム中に溶
解した。ＨＰＬＣデータを、図４中に示した。詳細な分析条件は、以下の通りで
あった：ｉ）移動相＝ｎ−ヘキサン／アセトン（８：２）；ｉｉ）固定相＝シリ
カ（４．０×２５０ｍｍ）；ｉｉｉ）溶媒＝クロロホルム；ｉｖ）流速＝１ｍｌ
／分；ｖ）波長＝４７６ｎｍ；ｖｉ）標準＝クロロホルム中に溶解させたアスタ
キサンチン（Ｓｉｇｍａ、９８％以上）。次いで、アスタキサンチンの含量を、
アスタキサンチンの標準濃度の測定によって調製した標準定量曲線に従って測定
した。

【００４９】総カルチノイド含量（ｍｇ／酵母細胞乾燥重量１ｇ）＝（Ａ×Ｍ×１００）／
（２１×Ｄ）Ａ：４７４ｎｍでの色素の吸光度；Ｍ：抽出について使用した溶媒の量（ｍｌ）；Ｄ：Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａ細胞の乾燥重量；２１：細胞の重量からの１％の吸光係数＝２，１００。

【００５０】エタノール溶媒を用いるマイクロ波照射の後の総カルチノイドの含量およびア
スタキサンチンの含量を測定した。表６中に示される結果は、３回の実験の平均
値であった。

【００５１】

【表６】＊アスタキサンチン含量を、マイクロ波照射後の抽出物から測定した。

【００５２】（参照実施例）Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａ乾燥産物の作製Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａ乾燥産物を作成する実施例は、以下の通
りである。

【００５３】実施例２の様式と同様の様式で、培養されたＰｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙ
ｍａ懸濁液にマイクロ波を照射した後、細胞を、連続フロー遠心分離（７，００
０×ｇ）の後に得た。得られた細胞を、浄水を用いて２回洗浄しそして水の含量
を１０％未満にした。噴霧乾燥機、真空ドラム乾燥機またはトレー乾燥機を用い
て、Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａ乾燥産物を製造した。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、本発明に従う懸濁液にテフロン（登録商標）チューブを使用した連続
的マイクロ波処理システムの概略図を示す。

【図２】図２は、本発明に従う懸濁液にテフロン（登録商標）抽出容器を使用した固定
化マイクロ波処理システムの概略図を示す。

【図３】図３は、本発明に従った５日間のＰｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの培養
後の、マイクロ波処理を伴わないＰｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａ（Ａ）；
マイクロ波処理を伴うＰｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａ（Ｂ）の光学顕微鏡
（×１，０００）写真を示す。

【図４】図４は、ｉ）Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの培養、ｉｉ）マイクロ波
処理、およびｉｉｉ）本発明に従ったエタノール抽出後に得られた抽出物のＨＰ
ＬＣデータを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｐ 23/00 Ｃ１２Ｒ 1:645 Ｃ１２Ｒ 1:645） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ジュン，ミュンキョ大韓民国 431−065 キョウンギ−ド，アーヤン−シティ，ドンガン−ク，ブリム−ドン，ゴンジャクアパートメント， 507−1207 (72)発明者チョイ，ソウクケウン大韓民国 132−208 ソウル，チュンナン−ク，ミュンモク８−ドン，ジンロアパートメント 503 (72)発明者ロウ，ジュンセオプ大韓民国 138−783 ソウル，ソンパ− ク，ポーンナップ−２−ドン，ウォーサンアパートメント，３−802 Ｆターム(参考） 4B018 MA01 MB05 MC01 4B064 AH01 CA06 CE08 CE16 DA10 DA20 4C083 AA031 AD621 CC01 4H006 AA02 AD16 BA91 BB14 BB16 UC12 UC22

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するためのプロセスであって、該プロセスは、以下の工程
：ｉ）酵母細胞を培養する工程；ｉｉ）水を用いて該培養された酵母細胞を懸濁する工程；ｉｉｉ）マイクロ波を用いて該培養懸濁液を処理して細胞壁およびミクロボディ
を破壊する工程；およびｉｖ）アスタキサンチン色素を含有する得られた物質を乾燥させる工程、を包含する、プロセス。
【請求項２】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するためのプロセスであって、該プロセスは、以下の工程
：ｉ）酵母細胞を培養する工程；ｉｉ）水を用いて該培養された酵母細胞を懸濁する工程；ｉｉｉ）マイクロ波を用いて該培養懸濁液を処理して細胞壁およびミクロボディ
を破壊する工程；およびｉｖ）エタノール、メタノール、アセトンおよびそれらの混合物からなる群より
選択される溶媒を用いてアスタキサンチン色素を抽出する工程、を包含する、プロセス。
【請求項３】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するための、請求項１または請求項２に記載のプロセスで
あって、ここで、前記マイクロ波処理は、前記培養懸濁液がテフロン（登録商標
）チューブを通される連続プロセス、ならびに該培養懸濁液が９００〜９３０Ｍ
Ｈｚまたは２４００〜２５００ＭＨｚの周波数でのマイクロ波５０〜１０００ワ
ットの照射のためテフロン（登録商標）抽出容器上に置かれる固定プロセスから
選択される、プロセス。
【請求項４】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するための、請求項２に記載のプロセスであって、ここで
、前記得られた色素がロータリーバキュームエバポレーターを用いて減圧下にて
濃縮される色素分離工程をさらに包含する、プロセス。
【請求項５】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するための、請求項１または請求項２に記載のプロセスで
あって、ここで、前記アスタキサンチン色素の収率は、ラン藻類に含まれる総カ
ロチノイドの１０〜９５重量％であり、そして該アスタキサンチン色素の純度は
、得られた物質の５０〜９５重量％である、プロセス。
【請求項６】Ｐｈａｆｆｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞からアスタ
キサンチン色素を抽出するための、請求項１または請求項２に記載のプロセスで
あって、ここで、前記抽出溶媒の量は、懸濁液の１容積部に比較して５〜２０容
積部、またはラン藻類の乾燥含量の１重量部に比較して５〜１０（容積／重量）
部である、プロセス。
【請求項７】請求項１または請求項２に記載の方法に従って、Ｐｈａｆｆ
ｉａｒｈｏｄｏｚｙｍａの酵母細胞から抽出された、アスタキサンチン色素。
【請求項８】化粧品、動物の餌または食品添加物としてアスタキサンチン
色素を使用するための、方法。