JP2003528850A - 血管形成および腫瘍成長の阻害 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 腫瘍成長を抑制し、血管形成を阻害する、一般式（ＩＩ）の化合物を提供する。これらの化合物は、芳香族の中心結合コアに結合したグリシルリジン誘導体を含む。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 発明の分野 本発明は、血管形成と腫瘍成長を阻害する組成物に関する。より詳細には、本
発明は、インテグリンα_ｖβ_３に結合し、インテグリンα_ｖβ_３とマトリックス
メタロプロテイナーゼ２（ＭＭＰ２）の相互作用を遮断する組成物に関する。ま
た本発明は、インテグリンα_ｖβ_３とＭＭＰ２の結合の選択的阻害剤を利用して
、血管形成および腫瘍成長を阻害する方法に関する。

【０００２】 発明の背景 血管細胞が組織に侵入するには、細胞外マトリックス構造を再構築するプロテ
イナーゼ、ならびにその仮のマトリックスを認識する細胞接着分子を含む非常に
多くの因子の協調した相互作用が必要である。最近の報告は、７２ｋＤａマトリ
ックスメタロプロテイナーゼ２（ＭＭＰ２）が血管の発達および血管形成の主役
であると示唆している。たとえば、Ｋｉｔｏｈ等（Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．、第
１０９巻、９５３〜８ページ（１９９６年））は、ＭＭＰ２およびその活性化因
子である膜型１−マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＴ１−ＭＭＰ）が、間
葉細胞によってもっぱら胚発生中に協調して発現することを報告し、このような
組織でのマトリックスの再構築に関する特定の拘束を示唆している。さらに、血
管形成およびそれに付随する腫瘍成長は、ＭＭＰ２ノックアウトマウスで低減す
る（Ｉｔｏｈ等のＣａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、第５８巻１０４８〜５１ページ（１
９９８年）を参照のこと）。興味深いことに、Ｓａｆｔｏｒ等（Ｐｒｏｃ．Ｎａ
ｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、第８９巻、１５５７〜６１ページ（１
９９２年））は、それ自体が血管形成のメディエータとして知られているインテ
グリンα_ｖβ_３の結合が、ＭＭＰ２の産生を誘発することを示し、血管形成に伴
って血管が再構築される際の、これら２種の分子の協調した相互作用を示唆して
いる（Ｂａｆｅｔｔｉ等のＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７３巻、１４３〜９
ページ（１９９８年）も参照のこと）。実際に、ＭＭＰ２とインテグリンα_ｖβ_３ の直接の相互作用が、Ｂｒｏｏｋｓ等（Ｃｅｌｌ、第８５巻、６８３〜９３ペ
ージ（１９９６年））によって実証されている。その後Ｂｒｏｏｋｓ等は、血管
が浸潤され、成熟する間、ＭＭＰ２の負の調節がα_ｖβ_３の発現に依存すること
を示した（Ｃｅｌｌ、第９２巻、３９１〜４００ページ（１９９８年））。

【０００３】 ＭＭＰ２を含めた、天然ならびに合成のＭＭＰ阻害剤による血管形成の阻害お
よびそれに伴う腫瘍成長の抑制が文献に記載されているものの、このような戦略
を臨床向けに変換することは、主としてこのような広スペクトル阻害剤の有害な
副作用のために、その成功には限界がある。一般に、ＭＭＰ機能は、成体生物体
の多くのプロセスに必要であるので、酵素機能の活性部位阻害は、創傷の治癒な
ど、組織の再構築を含む様々な生物学的プロセスに、おそらく大きな影響を及ぼ
す。実際、様々なタイプの癌の臨床試験で、広スペクトルＭＭＰ阻害剤での治療
によって、炎症性腱炎、多発性関節炎、骨筋肉痛症候群（ｍｕｓｃｏｓｋｅｌｅ
ｔａｌ ｐａｉｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ）を含む、用量を制限し、しばしば治療
中止後も続く重篤な副作用が引き起こされることが文献に記載されている。しか
し、成体生物体ではインテグリンα_ｖβ_３の分布が限られていることを考えると
、ＭＭＰ２とα_ｖβ_３の相互作用を新血管新生または細胞浸潤の領域に対してタ
ーゲッティングすることにより、このような治療に関連した毒性作用がそれに応
じて制限されると予測されるはずである。実際に、ＭＭＰ２とインテグリンα_ｖ β_３の結合を媒介する、ＭＭＰ２の組換え型非触媒カルボキシ末端ヘモペキシン
ドメイン（ＰＥＸ）が、ｉｎ ｖｉｖｏで抗血管形成活性および抗腫瘍活性を示
している。このような大きなタンパク質断片の潜在的な有用性は、欠点を伴うも
のの（たとえば、大規模生産の問題、ＦＤＡの品質安全管理の問題、および抗原
性）、この問題の実際的な解決法の必要性を示唆している。

【０００４】 したがって、体の他の部位ではＭＭＰ阻害が最小で、腫瘍成長部位で選択的に
ＭＭＰ活性を阻害する化学的化合物が求められている。

【０００５】 発明の概要 本発明は、血管形成および腫瘍成長の阻害剤として有用な新規の化合物を提供
する。また本発明は、ＭＭＰ２とインテグリンα_ｖβ_３の相互作用を阻害する方
法、およびインテグリンα_ｖβ_３を含む細胞で血管形成を阻害する方法も提供す
る。さらに、本発明は、ＭＭＰ２−α_ｖβ_３相互作用阻害剤を投与することによ
って腫瘍成長を抑制する方法も提供する。

【０００６】 本発明の化合物は、次式（Ｉ）で表され、結合基に化学結合したグリシルリジ
ン誘導体を含む。

【０００７】

【化１１】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］このような化合物は、α_ｖβ_３に結合し、ＭＭ
Ｐ２とα_ｖβ_３の相互作用を阻害する。

【０００８】 好ましい構造式（Ｉ）の化合物は、構造式（ＩＩ）で表される。

【０００９】

【化１２】 ［Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、フェニル、ま
たはベンジルであり；Ｘ^２およびＸ^３は、それぞれ独立に、ハロ、ニトロ、Ｃ_１ 〜Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキ
ルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ならびに、ｔは、０または１の値の
整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、ｔは０であり、Ａが共有結合であると
き、ｔは１である。］Ａが共有結合であり、かつｔが１であるとき、グリシルリ
ジン誘導体部分は、ベンゼン結合基にオルト、メタ、またはパラの位置で結合し
ていてよい。

【００１０】 式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物がα_ｖβ_３を含む細胞に投与されると、α_ｖ β_３とＭＭＰ２の結合が阻害され、したがって、血管形成の本質的な機構が妨げ
られる。血管形成を妨害すると、腫瘍の血管新生を妨げ、それにより腫瘍を栄養
の欠乏に陥らせることによって腫瘍成長も抑制することができる。したがって、
本発明の血管形成および腫瘍成長阻害化合物は、腫瘍または血管形成性障害のあ
る患者の治療に有用な治療薬剤である。この化合物はα_ｖβ_３に結合するので、
これを炎症性の事象の抑制に使用することもできる。

【００１１】 本発明の化合物は、適切な薬剤として許容される媒質に含ませて製剤して、望
ましくない血管形成が関与している腫瘍および他の障害の治療に有用な薬剤組成
物とすることができる。

【００１２】 本発明の方法の態様では、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物を含む薬剤組成物
を、化合物を薬剤として許容されるマトリックスに含ませて製剤することによっ
て調製する。この活性化合物の薬剤組成物を腫瘍のある患者に投与して、腫瘍成
長を低減または阻止する。この活性化合物は、注射する、または時間をかけて徐
々に注入することによって非経口的に、あるいは特定の剤形に適した他の何らか
の方法によって投与することができる。

【００１３】 図面の簡単な説明 添付図面中、 図１は、ＭＭＰ２のインテグリンα_ｖβ_３との相互作用およびその血管形成で
の役割、ならびに本発明の化合物などの拮抗薬によるＭＭＰ２とα_ｖβ_３の相互
作用の阻害を示す略図である。 図２Ａは、固体相結合アッセイで、式（Ｉ）の阻害剤化合物がＭＭＰ２とイン
テグリンα_ｖβ_３の相互作用に及ぼす影響を示すグラフである。 図２Ｂは、式（Ｉ）の化合物と、インテグリンα_ｖβ_３およびα_５β_１との結
合を示すグラフである。 図２Ｃは、本発明の化合物の作用を、α_ｖβ_３への結合について対照化合物と
比較するグラフである。 図２Ｄは、アミノ酸残基ＲＧＤが本発明の化合物のα_ｖβ_３への結合に及ぼす
影響と、ＲＧＤがｂＶＮのα_ｖβ_３への結合に及ぼす影響を比較するグラフであ
る。 図３Ａは、β_３陽性細胞およびβ_３陰性細胞でのプロテイナーゼ活性を示すグ
ラフである。 図３Ｂは、β_３陽性細胞およびβ_３陰性細胞でのＭＭＰ２結合を示す図である
。 図４Ａは、ニワトリＣＡＭ組織での血管形成阻害の顕微鏡写真である。 図４Ｂは、ニワトリＣＡＭ組織での血管形成阻害を示すグラフである。 図４Ｃは、処理細胞および未処理細胞でのＭＭＰ２濃度を示す図である。 図５Ａは、ニワトリＣＡＭ組織の腫瘍成長および脈管構造の顕微鏡写真である
。 図５Ｂは、ニワトリＣＡＭ組織での血管密度の顕微鏡写真である。 図５Ｃは、ニワトリＣＡＭ組織での腫瘍重量を示すグラフである。 図５Ｄは、ニワトリＣＡＭ組織での血管新生を示すグラフである。 図５Ｄは、ニワトリＣＡＭ組織での腫瘍細胞密度の顕微鏡写真である。

【００１４】 発明の詳細な説明 ＭＭＰ２のインテグリンα_ｖβ_３への結合は、血管形成プロセスの重要な機構
である。この結合相互作用の特異的阻害は、腫瘍など、成長組織での血管新生の
低減をもたらし、したがって腫瘍の成長を妨げる。ＭＭＰ２とインテグリンα_ｖ β_３の相互作用を図１に示す。血管形成および腫瘍成長の新しいクラスの阻害剤
は、ＭＭＰ２がインテグリンα_ｖβ_３に結合するのを特異的に妨げ、そのため新
規の重要な治療手段となる、以下で述べる小さな分子の拮抗薬である。

【００１５】 本発明のある種の化合物は、１個または複数の不斉中心を有し、光学的に活性
な形で存在していてよい。追加の不斉中心は、アルキル基など、置換基中に存在
していてよい。純粋なＳ異性体、純粋なＲ異性体、異性体のラセミ混合物、およ
びこれらの混合物も本発明の範囲に含まれるものとする。本発明のある種の化合
物のキラルな形も企図されており、本発明の範囲に特に含まれる。

【００１６】 用語「アルコキシ」は、指示するサイズの以下で定義するアルキル基にエーテ
ル結合によって結合した酸素原子を意味する。アルコキシ基の例は、メトキシ、
エトキシ、ｔ−ブトキシなどである。用語「アルキル」は、直鎖または分枝鎖の
、指示するサイズの炭素基を意味する。アルキル基の代表例は、メチル、エチル
、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔ
−ブチル、２−エチルヘキシル、ｎ−オクチル、２，４−ジメチルペンチルなど
である。用語「ヒドロキシアルキル」は、ヒドロキシル基に結合した、指示する
サイズの上記で定義したアルキル基を意味する。例には、ヒドロキシメチル、２
−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシ−１−プロピル、２−ヒドロキシ−１−プ
ロピル、４−ヒドロキシブチルなどが含まれる。

【００１７】 用語「ペルフルオロアルキル」は、水素の各箇所にフルオロ置換基を含む、以
下で定義する指示するサイズのアルキル基、たとえば、トリフルオロメチルおよ
びペンタフルオロエチルを指す。

【００１８】 用語「ハロ」または「ハロゲン」は、ブロモ、クロロ、フルオロ、およびヨー
ドを指す。

【００１９】 本発明の化合物は、次式（Ｉ）で表され、結合基に化学結合したグリシルリジ
ン誘導体を含む。

【００２０】

【化１３】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］ Ｇ^１およびＧ^２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１ であり、Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍおよびｎが１であることが好ましい。
Ｘ^１は、Ｃ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであることが好ましく、トリフルオロ
メチルであることが最も好ましい。構造式（Ｉ）の範囲に入る好ましい化合物は
、次の構造式（ＩＩ）で表され、ベンゼン結合基に、オルト、メタ、またはパラ
のいずれかの配向で結合したグリシルリジン誘導体を含む。

【００２１】

【化１４】 ［Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、フェニル、ま
たはベンジルであり；Ｘ^２およびＸ^３は、それぞれ独立に、ハロ、ニトロ、Ｃ_１ 〜Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキ
ルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ならびに、ｔは、０または１の値の
整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、ｔは０であり、Ａが共有結合であると
き、ｔは１である。］Ａが共有結合であり、かつｔが１であるとき、グリシルリ
ジン誘導体部分は、ベンゼン結合基にオルト、メタ、またはパラの位置で結合し
ていてよい。

【００２２】 置換基Ｘ^２およびＸ^３は、ベンジル基のフェニル環にベンジルのＣＨ_２に対し
て４位で結合している（すなわち、パラ置換基である）ことが好ましい。Ｘ^２お
よびＸ^３基がＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであることが好ましく、パラ−ト
リフルオロメチルであることが最も好ましい。好ましいＲ^２およびＲ^３基は、水
素およびメチルである。置換基Ｘ^２およびＸ^３は、同じでも異なっていてもよく
、置換基Ｒ^２およびＲ^３も、同じでも異なっていてもよい。

【００２３】 Ａが共有結合であり、かつｔが１である式（ＩＩ）で表される化合物のファミ
リーのうち特に活性なメンバーは、以下の化合物１で表される化合物である。

【００２４】

【化１５】 式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、適度な段階数の合成ステップで、容易に
入手できる材料から合成することができる。たとえば、スキーム１は、化合物１
の合成を示しており、Ａが共有結合であり、Ｒ^２およびＲ^３が同じであり、かつ
Ｘ^２およびＸ^３が同じである式（ＩＩ）の化合物を生成する一般の方法の例であ
る。スキーム１はさらに、Ｘ^２およびＸ^３の両方がパラ−トリフルオロメチルで
あり、Ｒ^２およびＲ^３の両方がメチルまたは水素のいずれかである式（ＩＩ）の
化合物の合成を例示する。

【００２５】

【化１６】 スキーム１では、ｐ−トリフルオロメチルベンジルアルコールを、ジスクシン
イミジルカルボナートと反応させて、活性エステル中間体を生成し、次にΕＮ−
ε−ＢＯＣ−リジンメチルエステルと反応させて、化合物２を９９％の収率で得
た。ＢＯＣ保護基の加水分解およびその後のＢＯＣ−グリシンとの結合によって
、化合物３を９６％の収率で得た。化合物３のＢＯＣ保護基を酸で加水分解する
ことにより、化合物４を９９％の収率で得た。２当量の化合物４を二塩化イソフ
タロイルと結合させて、Ｒ^２およびＲ^３がメチルであり、Ｘ^２およびＸ^３がｐ−
トリフルオロメチルであり、Ａが共有結合である式（ＩＩ）に相当する化合物５
を、６８％の収率で得た。化合物５を水酸化リチウムで加水分解して、９３％の
収率で化合物１を生成した。

【００２６】 他のＲおよびＸ置換基を有する化合物１の類似体である式（Ｉ）および（ＩＩ
）の化合物の合成は、スキーム１の変更形態によって実現することができ、その
変更形態は、合成化学分野の技術者に容易に明らかであろう。ｐ−トリフルオロ
メチル以外の置換基（たとえば、ベンジルのＣＨ_２に対してオルト、メタ、また
はパラのいずれかの位置の、ハロ、ニトロ、または他のＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロ
アルキル基）を有するベンジルアルコールを使用する、あるいはメチル以外のエ
ステル基を有する保護したリジンエステルを使用にすることよって、他の式（Ｉ
Ｉ）の化合物が得られる。

【００２７】 １，３−フェニル以外のＺ基を有する式（Ｉ）の化合物の合成は、たとえば、
スキーム１の二塩化イソフタロイルの代わりにビスクロロカルボニルアセチレン
、二塩化フマリル、二塩化フタロイルなど、他の二塩基酸の二塩化物を用いるこ
とによって実施する。あるいは、対応する酸の代わりに酸塩化物を利用し、さら
にその酸を当技術分野で知られている標準のペプチド結合技術によって適切なア
ミンに結合させてもよい。当分野の技術者には、スキーム１および２に例示した
合成方法で実施できる他の化学材料の代用は容易に明らかであり、式（Ｉ）およ
び（ＩＩ）で表される化合物群の他のメンバーを合成することができる。式（Ｉ
）および（ＩＩ）の化合物の合成に適合可能な、関連化合物の合成および有用な
化学的戦略は、Ｂｏｇｅｒ等のＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．第１２３巻、１２
８０〜１２８８ページ（２００１年）に記載されている。

【００２８】 Ａが共有結合であり、ｔが１であり、Ｒ^２がＲ^３と異なる、Ｘ^２がＸ^３と異な
る、またはＲ^２／Ｒ^３とＸ^２／Ｘ^３の両方が異なる式（ＩＩ）の化合物も、スキ
ーム１で提示した方法の変更形態によって合成することができ、これは、当分野
の技術者に容易に明らかであろう。たとえば、１当量の化合物４を、二塩化イソ
フタロイル、またはいずれの適切なイソフタルハロゲン化物もしくは活性エステ
ルと反応させることができ、続いて第２の活性酸基を、異なるＸ基もしくは異な
るＲ基のいずれか、またはその両方を有する化合物４の類似体と反応させること
ができる。同様に、異なるＸ基もしくは異なるＲ基のいずれか、またはその両方
を有する化合物４の２種の類似体を、二塩化イソフタロイル、または同等の活性
イソフタラートと連続的に反応させて、異なるＸ基とＲ基を有する化合物１の追
加の類似体を得ることができる。

【００２９】 Ａが水素であり、ｔが０である式（ＩＩ）の化合物の合成を、以下のスキーム
２で、化合物６および７の合成によって例示する。

【００３０】

【化１７】 スキーム２では、スキーム１の化合物４を、塩化ベンゾイルと反応させると、
化合物６（Ｒ^２＝メチル、Ｘ^２＝ｐ−トリフルオロメチル）が９０％の収率で得
られる。６のエステル基を水酸化リチウムで加水分解することにより、化合物７
（Ｒ^２＝Ｈ、Ｘ^２＝ｐ−トリフルオロメチル）を８８％の収率で得た。

【００３１】 異なるＲ基（たとえば、他のＣ_１〜Ｃ_４アルキル基）を有するかつ／またはベ
ンジル基上に異なるＸ置換基を有する化合物４の類似体をベンゾイル化すると、
Ａ＝Ｈかつｔ＝０である式（ＩＩ）の他の化合物になる。

【００３２】 スキーム２は、化合物８、すなわち式（ＩＩ）のグリシン単位に結合したベン
ゾイル基がジグリコールアミドで置換されている化合物６および７の不活性類似
体の合成も例示する。化合物９は、化合物４をジグリコール酸と結合させること
によって７７％の収率で得られる。

【００３３】 以下のスキーム３は、化合物１２、すなわち式（ＩＩ）のｐ−トリフルオロメ
チルベンジルオキシカルボニル基がベンゾイルアミドで置換されている、化合物
１の不活性類似体の合成を例示する。

【００３４】

【化１８】

【００３５】 本発明の方法の態様では、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物の薬剤調製物を、
化合物を薬剤として許容される担体マトリック中に含ませて製剤することにより
調製することができる。式（Ｉ）および（ＩＩ）の活性化合物を含む薬剤組成物
を、腫瘍のある宿主に投与して、腫瘍成長を低減または阻止する。活性化合物は
、注射によって、または時間をかけて徐々に注入することによって非経口的に投
与することができる。治療する組織を腹腔内または皮下投与によって治療するこ
とが非常に多いが、この活性化合物は、眼内、静脈内、筋肉内、滑液内、腔内、
または経皮投与することもでき、そのうえ蠕動による手段によって送達すること
ができる。

【００３６】 本明細書では、本発明の化合物または組成物の「投与」という用語は、従来の
非毒性の薬剤として許容される担体、補助剤、および賦形剤を望みに応じて含む
単位剤形製剤の形で、経口または非経口的に；吸入スプレーによって；鼻腔、直
腸、または口腔内経路で；あるいは局所的に投薬する場合の全身への使用を指す
。本明細書では、用語「非経口」には、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸骨内、皮下
、および関節内への注射および注入技術が含まれる。

【００３７】 「薬剤として許容される」とは、医学の良識から逸脱しない範囲で、過度の毒
性、刺激、アレルギー反応などなしに、ヒトおよび下等動物の組織と接触して使
用するのに適し、さらに腫瘍および血管形成関連障害の治療でのその目的とする
使用に有効な、妥当な利益／リスク比を有するその塩、アミド、およびエステル
を意味する。

【００３８】 薬剤として許容される塩は、当技術分野でよく知られている。たとえば、Ｓ．
Ｍ Ｂｅｒｇｅ等は、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、
第６６巻、１〜１９ページ（１９７７年）において、薬剤として許容される塩を
詳細に記述している。代表的な酸の付加塩には、塩化水素酸塩、臭化水素酸塩、
硫酸塩、重硫酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、パルミチン
酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸
塩、トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、
フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、アスコルビン酸塩、グルコヘプト酸塩、ラ
クトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩などが含まれる。代表的なアルカリ金属または
アルカリ土類金属の塩には、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム
塩などが含まれる。

【００３９】 本明細書では、用語「薬剤として許容される担体」は、非毒性の、不活性な固
体、半固体、または液体の、何らかのタイプの充填剤、希釈剤、カプセル化材料
、または製剤助剤を意味する。薬剤として許容される担体として使用できる材料
のいくつかの例は、ラクトース、グルコース、およびスクロースなどの糖類；ト
ウモロコシデンプンやジャガイモデンプンなどのデンプン類；カルボキシメチル
セルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロースなど、セルロ
ースおよびその誘導体；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；カカオ脂
や座剤用ロウ類などの添加剤；落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリ
ーブ油、トウモロコシ油、および大豆油などの油類；プロピレングリコールなど
、グリコール類；グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレ
ングリコールなど、ポリオール類；オレイン酸エチルやラウリン酸エチルなど、
エステル類；寒天；水酸化マグネシウムや水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；ア
ルギン酸；パイロジェンフリー水；等張食塩水；リンガー溶液；エチルアルコー
ル、リン酸塩緩衝液、ならびに薬剤製剤中に使用する適合可能な他の非毒性物質
である。

【００４０】 製剤する者の判断次第で、ラウリル硫酸ナトリウムやステアリン酸マグネシウ
ムなどの湿潤剤、乳化剤、および滑沢剤に加え、着色剤、放出剤、コーティング
剤、甘味剤、着香剤、香料剤、保存剤、および抗酸化剤が組成物中に存在してい
てもよい。薬剤として許容される抗酸化剤の例には、アスコルビン酸、塩酸シス
チン、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど
、水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソール（
ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル
、α−トコフェロールなど、油溶性抗酸化剤；およびクエン酸、エチレンジアミ
ン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など、金属キレート剤が
含まれる。

【００４１】 本発明の薬剤または化合物の「治療有効量」とは、どんな医学的治療にも適合
可能な妥当な利益／リスク比で、腫瘍および血管形成関連障害を治療するのに十
分な化合物の量を意味する。しかし、本発明の化合物および組成物の合計１日使
用量は、主治医によって医学の良識から逸脱しない範囲で決定されることが理解
されよう。ある患者のための特定の治療上有効な用量レベルは、治療する障害お
よびその障害の重症度；使用する特定の化合物の活性；使用する特定の組成物；
患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別、および食事；使用する特定の化合物
の投与時間、投与経路、および排泄率；治療期間；使用する特定の化合物と併せ
て、または同時に使用する薬物；ならびに医学の技術分野でよく知られている要
因を含む様々な要因に応じて決まる。

【００４２】 本発明はまた、治療有効量の本発明の化合物（または組成物）を従来の薬剤用
担体との組合せで含む、単位投与形態の薬剤組成物も提供する。注射可能な調製
物、たとえば、注射可能な水性または油性の無菌懸濁液を、知られている技術に
従って、適切な分散剤もしくは湿潤剤、および懸濁化剤を使用して製剤すること
ができる。注射可能な無菌調製物は、非経口用として許容される非毒性希釈剤ま
たは溶媒に含ませて、たとえば、１，３−ブタンジオール溶液として、注射可能
な無菌溶液、懸濁液、または乳濁液にしてもよい。許容される賦形剤および溶媒
の中で使用できるものは、水、リンガー溶液、ＵＳＰ塩化ナトリウム溶液、およ
び等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の固定油も、溶媒または懸濁
媒質として従来から使用されている。この目的では、合成のモノグリセリドまた
はジグリセリドを含めて、どんな無刺激性固定油を使用してもよい。

【００４３】 さらに、オレイン酸など、脂肪酸も注射可能薬物の調製に使用する。注射可能
製剤は、たとえば、細菌保持フィルターでの濾過によって、または使用直前に無
菌の水または他の注射可能な無菌媒質中に溶解または分散される無菌固体組成物
の形態に滅菌剤を組み込むことによって滅菌することができる。

【００４４】 薬物の効果を持続させるために、皮下または筋肉内の注射による薬物の吸収を
遅らせることが多くの場合望ましい。これを実現するための最もよくある手段は
、水に溶けにくい結晶性または無定形材料の懸濁液を注射することである。薬物
の吸収速度は、薬物の溶解速度に依存するが、これは、薬物の物理的状態、たと
えば、結晶サイズや結晶形に応じて決まる。薬物の吸収を遅らせるための別の手
法は、薬物を油性溶液または懸濁液として投与することである。薬物と、ポリラ
クチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマーとのマイクロカプセルマトリッ
クスを形成することによって注射可能なデポー剤を作製してもよい。薬物とポリ
マーの比およびポリマーの組成に応じて、薬物放出速度を制御することができる
。他の生分解性ポリマーの例には、ポリオルトエステルやポリ無水物が含まれる
。デポー注射薬物は、体組織に適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルジ
ョン中に薬物を閉じ込めることによって作製することもできる。

【００４５】 薬物を直腸投与するための座剤は、薬物を、常温では固体であるが直腸の温度
では液体となるために直腸で融けて薬物を放出する、カカオ脂やポリエチレング
リコールなどの適切な非刺激性の添加剤と混合することによって調製することが
できる。

【００４６】 経口投与用の固体剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、小球剤（ｐｒｉ
ｌｌ）、および顆粒剤が含まれるであろう。このような固体剤形では、活性化合
物を、スクロース、ラクロース、デンプンなど、少なくとも１種の不活性な希釈
剤と混ぜてもよい。このような剤形は、通常の慣行どおり、不活性な希釈剤以外
の追加の物質、たとえば、ステアリン酸マグネシウムや微結晶セルロースなど、
打錠滑沢剤（ｔａｂｌｅｔｉｎｇ ｌｕｂｒｉｃａｎｔ）および他の打錠助剤を
含んでいてもよい。カプセル剤、錠剤、および丸剤の場合には、この剤形が緩衝
剤を含んでいてもよい。錠剤および丸剤はさらに、腸溶コーティングおよび他の
徐放コーティングを施して調製することができる。同様のタイプの固体組成物を
、ラクトースや乳糖などの添加剤、ならびに高分子量のポリエチレングリコール
などを利用して、軟ゼラチンカプセルまたは硬ゼラチンカプセルの充填剤として
使用してもよい。

【００４７】 経口投与用の液体剤形には、水など、当技術分野で普通に使用される不活性な
希釈剤を含んだ乳剤、マイクロエマルジョン剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、お
よびエリキシル剤が含まれるであろう。このような組成物は、湿潤剤などの補助
剤；乳化剤および懸濁化剤；甘味剤；香味剤および着香剤を含んでいてもよい。
望むなら、本発明の化合物は、ポリマーマトリックス、リポソーム、およびマイ
クロスフェアなど、徐放システムまたは標的指向性送達（ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄ
ｅｌｉｖｅｒｙ）システムに組み込むことができる。この化合物は、たとえば、
細菌保持フィルターでの濾過によって、または使用直前に無菌の水または他のい
くつかの注射可能な無菌媒質中に溶解される無菌固体組成物の形態に滅菌剤を組
み込むことによって滅菌することができる。活性化合物は、上記の１種または複
数の添加剤を有するマイクロカプセルの形とすることもできる。

【００４８】 固体剤形の錠剤、糖衣丸、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤は、医薬製薬の分
野でよく知られている腸溶コーティングや他のコーティングなど、剤皮や外皮を
施して調製してよい。このような剤形は、場合によって不透明化剤を含んでいて
よく、腸管のある部分で、活性成分をそれだけで、または選択して、場合によっ
てはゆっくりと放出する組成物としてもよい。使用できる包埋式組成物の例には
、ポリマー物質およびロウが含まれる。本発明の化合物の局所投与用または経皮
投与用剤形にはさらに、軟膏剤、パスタ剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤
、粉末剤、液剤、スプレー剤、吸入剤、またはパッチ剤が含まれる。活性成分は
、必要に応じて、無菌条件下で、薬剤として許容される担体および何らかの保存
剤または緩衝剤と混合する。

【００４９】 眼科用製剤、点耳剤、眼軟膏剤、粉末剤、および液剤も、本発明の範囲に入る
と考えられる。軟膏剤、パスタ剤、クリーム剤、およびゲル剤は、本発明の活性
化合物に加え、動植物性の脂、脂、ロウ、パラフィン、デンプン、トラガカント
、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、ケイ素、ベントナイト、ケイ酸
、タルク、酸化亜鉛、またはこれらの混合物など、添加剤を含んでいてよい。

【００５０】 粉末剤およびスプレー剤は、本発明の化合物に加えて、ラクトース、タルク、
ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、粉末ポリアミド、またはこれ
らの物質の混合物など、添加剤を含んでいてよい。スプレー剤は、クロロフルオ
ロヒドロカーボンなど、通常の噴射剤をさらに含んでいてよい。

【００５１】 経皮パッチは、体への化合物の送達が制御されるという更なる利点を有する。
このような剤形は、化合物を適する媒質中に溶解または分散させることによって
作製することができる。吸収増強剤（ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｒ
ｓ）を使用して、化合物の皮膚を介しての流入を増強させることもできる。速度
制御膜を設けることによって、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲ
ルに分散させることによって速度を制御することができる。

【００５２】 活性化合物を含む組成物は、剤形に適合する方法で、治療有効量を投与する。
投与する量および投与のタイミングは、治療する宿主、宿主の器官系が活性成分
を利用する能力、および所望の治療効果の程度に応じて決まる。投与する必要の
ある活性成分の正確な量は、従事者の判断次第であり、各人で異なる。

【００５３】 全身への適用に適する投与量の範囲を、本明細書に開示するが、これは投与経
路に応じて変わる。適切な投与レジメンも変わり得るが、最初の投与の後に、予
め決定した１または複数の間隔で投与を繰り返し、その後に注射または他の投与
経路を用いることを特徴とする。

【００５４】 本発明は、本明細書に記載の治療方法を実践するのに有用な薬剤組成物も提供
する。組成物は、上述の活性化合物と共に薬剤として許容される担体を含む。

【００５５】 本発明の化合物または組成物の非経口投与用調製物には、無菌の水性または非
水性液剤、懸濁剤、および乳剤が含まれる。非水性溶媒の例は、プロピレングリ
コール、ポリエチレングリコール；オリーブ油などの植物油；およびオレイン酸
エチルなどの注射可能な有機エステル類である。水性担体には、食塩水、および
緩衝媒質を含めて、水、アルコール／水溶液；乳液、懸濁液が含まれる。非経口
用賦形剤には、塩化ナトリウム水溶液、リンゲルデキストロース、デキストロー
スと塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液、または固形油が含まれる。静脈内用賦形
剤には、（リンゲルデキルトロースをベースとしたものなど）体液および栄養素
補充液、電解質補充液などが含まれる。たとえば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート
剤、不活性ガスなど、保存剤および他の添加物が含まれていてもよい。

【００５６】 本発明の別の態様は、ＭＭＰ２とα_ｖβ_３の相互作用を阻害し、それにより腫
瘍組織での血管形成を阻害する方法を提供する。この阻害方法は、宿主に、血管
形成を阻害する量の上述の化合物を含む組成物を投与することを含む。ＭＭＰ２
とα_ｖβ_３の相互作用は、α_ｖβ_３と本発明の化合物を接触させることにより阻
害される。

【００５７】 血管形成は、既存の宿主の血管から新生血管網が形成されることであり、１〜
２ｍｍ^３超の腫瘍成長に必要である。本発明の目的では、血管形成を改善しさえ
すれば、血管形成および血管形成を媒介とする病状が抑制される。

【００５８】 宿主に活性化合物を投与するための投与量範囲は、特定の活性化合物、および
特定の腫瘍もしくはインテグリンに対するその効力に応じて決まる。当分野の技
術者なら、大変な実験をせずとも、その活性化合物の正しい投与量を決定するこ
とができる。宿主は任意の哺乳動物であってよい。投与量は、血管形成および血
管形成が媒介となる病状が改善される所望の治療効果を生じるのに十分な量とす
べきであり、通常、活性化合物の血漿濃度を約０．０１〜約１００マイクロモル
濃度（μＭ）、好ましくは約０．２〜約２０μＭ、より好ましくは約１〜約１０
μＭの範囲に維持するのに十分な量とする。しかし、投与量は、有害な副作用を
引き起こすほど多くすべきでない。体重１キログラム（ｋｇ）あたりの投与量は
、１日、数日間、または無期限で、１日あたり１回または複数回の投与で、１回
あたり１〜２０ｍｇの範囲をとり得る。

【００５９】 血管形成の阻害では、治療有効量は、治療する組織での血管形成がはっきりと
阻害されるだけの活性化合物の量、すなわち血管形成阻害量またはＭＭＰ２−α_ｖ β_３相互作用阻害量である。血管形成阻害は、本明細書に記載の免疫組織化学
によって、または当分野の技術者に知られている他の方法によってｉｎ ｓｉｔ
ｕで測定することができる。

【００６０】 本発明はさらに、本明細書に記載の治療方法を実践するのに有用な薬剤組成物
を提供する。この組成物は、上記で定義した活性化合物と共に薬剤として許容さ
れる担体を含む。

【００６１】 本発明は、腫瘍細胞のアポトーシスを誘発する方法も提供する。この方法は、
宿主に腫瘍細胞のアポトーシスを起こすのに十分な治療有効量の活性化合物を投
与することを含む。

【００６２】 本発明の目的では、治療する標的腫瘍中で腫瘍細胞アポトーシスの増加が観察
されれば、腫瘍細胞アポトーシスが誘発されていることになる。腫瘍細胞のアポ
トーシスは、本明細書に記載の方法または当技術分野で一般に知られている方法
によって測定することができる。

【００６３】 以下に非限定的な例を提示して、本発明の様々な態様を例示する。

【００６４】 材料および方法 抗体細胞および試薬。ＣＳ−１ハムスター黒色腫細胞およびヒトβ_３−インテ
グリンサブユニット（β_３ＣＳ−１細胞）でトラスフェクトしたＣＳ−１細胞は
、以前に記述されている（Ｃｅｌｌ、第８５巻、６８３〜９３ページ（１９９６
年）；Ｃｅｌｌ、第９２巻、３９１〜４００ページ（１９９８年））。西洋ワサ
ビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）と結合したモノクローナル抗体である抗ビオチン
ｍＡｂＢＮ−３４および抗アクチンｍＡｂＡＣ−４０は、Ｓｉｇｍａ（ミズーリ
州セントルイス）より入手した。抗フォン−ウィルブランド因子（ｖＷＦ）ポリ
クローナル抗体（ｐＡｂ）は、ＤＡＫＯ（デンマーク、Ｇｌｏｓｔｒｕｐ）より
入手した。環状ペプチドｃＲＧＤｆＶおよびｃＲＡＤｆＶ、およびインテグリン
−α_ｖβ_３は、Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ（ドイツ、ダルムシュタット）から好意で
提供を受けた。精製したｐｒｏＭＭＰ２およびインテグリン−α_ｖβ_３は、Ｃｈ
ｅｍｉｃｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（カリフォルニア州Ｔｅｍｅｃｕｌ
ａ）から提供された。精製した活性ＭＭＰ２は、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ（カリフ
ォルニア州ラ ホーヤ）より入手した。塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）
は、Ｓｃｉｏｓ（カリフォルニア州マウンテンヴュー）から好意で提供を受けた
。

【００６５】 ［^１４Ｃ］化合物の合成。［^１４Ｃ］標識化合物１は、未標識の材料について
先に記載した手順（スキーム１）をわずかに変更し、Ｎ−ＢＯＣ−［１−^１４Ｃ
］−グリシン（５５ｍＣｉ／ミリモル、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒａｄｉｏｌａｂｅ
ｌｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ミズーリ州セントルイス）を利用することによっ
て合成した。４段階の手順での［^１４Ｃ］−化合物１の総合的な収率は２５％で
あった。

【００６６】 実施例１．固体相インテグリン結合アッセイ 精製したインテグリンを、終夜マイクロタイターウェル（１〜５μｇ／ｍｌ、
５０μｇ／ウェル）に吸着させ、その後Ｃａｓｅｉｎｂｌｏｃｋｅｒ（Ｐｉｅｒ
ｃｅ、イリノイ州ロックフォード）でブロックした。化合物１、化合物１２、環
状ＲＧＤペプチド、環状ＲＡＤペプチド、または緩衝賦形剤のみの存在下、ある
いはこれらの不在下で、精製したビオチン標識ＭＭＰ２（ｂＭＭＰ２、３〜５ｎ
Ｍ）を入れた結合緩衝液（５０ｍＭのトリス、ｐＨ８、１５０ｍＭのＮａＣｌ、
１ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．５ｍＭのＭｎＣｌ_２）をウェルに加えた。対照ウェル
には、インテグリンを吸着させなかった。ビオチン標識ビトロネクチン（ｂＶＮ
、１μｇ／ｍｌ）を基準として使用した。結合したタンパク質をＨＲＰ−抗ビオ
チンｍＡｂで検出し、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン溶液（ＴＭ
Ｂ；ペルオキシダーゼの基質）（ＢｉｏＲａｄ、カリフォルニア州Ｈｅｒｃｕｌ
ｅｓ）を用いて、４５０ｎｍで定量した。

【００６７】 化合物１によるインテグリンとの直接の結合を評価するために、α_ｖβ_３およ
びα_５β_１（１０μｇ／ｍｌ、５０μｌ／ウェル）をＩｍｍｕｌｏｎ−４マイク
ロタイターウェル（Ｄｙｎａｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ヴァージニ
ア州Ｃｈａｎｔｉｌｌｙ）にコートし、これを十分にブロックし、［^１４Ｃ］化
合物１で滴定してから、０．１％のＴｗｅｅｎ−２０を含む結合緩衝液１５０μ
ｌを加えてインキュベートし、液体をすべて吸引した。乾燥したウェルを外し、
ＢｅｔａＭａｘ液体シンチレーション反応混液（ＩＣＮ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ
ｌｓ、カリフォルニア州コスタメーサ）に浸し、定量した。その結合曲線から、
［^１４Ｃ］化合物１がほぼ飽和する濃度（３μＭ）を、モルが２５倍過剰の（７
５μｌ）の非標識の化合物１もしくは化合物１２、または１００μＭの環状ＲＧ
Ｄペプチドもしくは環状ＲＡＤペプチドの存在下または不在下で調べた。対照は
ｂＶＮとし、上述のとおりに使用し、検出した。

【００６８】 実施例２．ＭＭＰ２の細胞結合および［^３Ｈ］ＩＶ型コラーゲン分解アッセイ ＣＳ−１細胞またはβ_３ＣＳ−１細胞を、４ｎＭの精製した活性ＭＭＰ２を単
独で、または１０μＭの化合物１あるいは化合物１２との組合せで含む、０．５
％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、０．４ｍＭのＭｎＣｌ_２、および１０μｇ
／ｍｌのアプロチニン）を補った接着緩衝液線維芽細胞基本培地（ＦＢＭ）中、
３７℃で４５分間インキュベートしてから、洗浄し、［^３Ｈ］ＩＶ型コラーゲン
でコートしたウェルに加えた。ウェルは、０．４１４ｍＣｉ／ｍｌの［^３Ｈ］Ｉ
Ｖ型コラーゲン（ＩＣＮ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、カリフォルニア州コスタ
メーサ）５０μｌで終夜コートし、回収した洗浄溶液の放射能がバックグラウン
ドに達するまでよく洗浄しておいた。一方、対照として、細胞をＭＭＰ２の不在
下で上記のとおりに処理し、あるいは、ＭＭＰ２溶液を直接、細胞を含まないウ
ェルに加えた。５０μｌの培地へ放射された放射能を液体シンチレーションカウ
ンタで測定することによって、ＩＶ型コラーゲン分解を定量した。ビオチン標識
ＭＭＰ２のＣＳ−１細胞への結合を評価するために、１０μＭの化合物１もしく
は化合物１２の存在下または不在下で、細胞を接着緩衝液に懸濁させ、１２ｎＭ
のｂＭＭＰ２と共に３７℃で４５分間インキュベートした。その後、細胞を洗浄
してから、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび抗ビオチンｍＡｂでのイムノブロッティング
のために、溶解させ、プロセシングした。

【００６９】 実施例３．ニワトリ漿尿膜（ＣＡＭ）血管形成アッセイ 血管形成を、ほぼ以前に述べられたとおりに評価した（Ｃｅｌｌ、第８５巻、
６８３〜９３ページ（１９９６年）；Ｃｅｌｌ、第９２巻、３９１〜４００ペー
ジ（１９９８年））。１０日目ニワトリ胚ＣＡＭを、塩基性線維芽細胞成長因子
（ｂＦＧＦ）３μｇ／ｍｌで刺激後、３μＭの化合物１または化合物１２ ２０
μｌで処理した。誘発させてから３日後に、盲評価でＣＡＭを定量した。各群か
らのＣＡＭをプールし、ミンチにし、５０ｍＭのトリス、１５０ｎＭのＮａＣｌ
、０．１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含むＥＤＴＡフリーのＣＯＭＰＬＥＴＥ
ブランドのプロテアーゼ阻害反応混液（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ、ドイツ、マンハ
イム）で抽出を行い、ザイモグラフィによる分析に備えた。

【００７０】 実施例４．ＳＤＳ−ＰＡＧＢ、イムノブロット、およびザイモグラフィ イムノブロット。還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、タンパク質を等
量に分離し、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、メリーランド州
Ｂｅｄｆｏｒｄ）に電気泳動ブロットした。膜をブロックし、窒素特異性第一抗
体、次いで必要に応じてＨＲＰ共役第二抗体と共にインキュベートして固定化タ
ンパク質を検出した。化学発光基質ＰＳ−３（Ｌｕｍｉｇｅｎ，Ｉｎｃ．、ミシ
ガン州Ｓｏｕｔｈｆｉｅｌｄ）でバンドを視覚化した。

【００７１】 ザイモグラフィ。上述のとおりにニワトリＣＡＭ溶解産物を調製し、還元剤ま
たは煮沸なしに、０．２％のゼラチンで包埋したポリアクリルアミドゲルで、タ
ンパク質を等量に分離した。ゲルを２％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００で洗浄し、次
いで水でよく洗浄してから、コラゲナーゼ緩衝液（５０ｍＭのトリス７．４、２
００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＣａＣｌ_２）中で、３７℃で終夜インキュベー
トした。ゲルを０．５％のクーマシーブルーで染色することによってゼラチン溶
解（ｇｅｌａｔｉｎｏｌｙｔｉｃ）活性を視覚化した。

【００７２】 実施例５．腫瘍成長アッセイ ５×１０^６のＣＳ−１細胞を移植し、７日間インキュベートすることによって
、原発腫瘍を、９日胚ＣＡＭ上に成長させた。この時点で、この腫瘍の５０ｍｇ
切片を新鮮な９日ＣＡＭに継代し、２４時間移植させるようにした後、１００μ
Ｍの試験化合物を含むハンクス液（ＨＢＳＳ）１００μｌを１回静脈内注射（Ｉ
Ｖ）した。緩衝液のみを対照として使用した。腫瘍は、合計１０日間インキュベ
ートし、回収し、余分な間質を除いた後、湿重量を決定し、組織学用にプロセシ
ングした。

【００７３】 実施例６．免疫蛍光アッセイ 急速冷凍した（ｓｎａｐ−ｆｒｏｚｅｎ）ＣＳ−１細胞切片を、４％のパラホ
ルムアルデヒドで固定し、０．１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００で浸透性にした。
切片を、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に入った５％のウシ血清アルブミン（ＢＳ
Ａ）でブロックした後、抗ｖＷＦｐＡｂで染色し、Ａｌｅｘａ５６８と結合した
抗ウサギ第二抗体で視覚化した。サンプルをＭＲＣ１Ｏ２４共焦点顕微鏡（Ｂｉ
ｏＲａｄ、カリフォルニア州Ｈｅｒｃｕｌｅｓ）で分析した。１切片あたり４視
野かつ１条件あたり４腫瘍の血管密度を、倍率２０×の対物レンズで定量した。

【００７４】 実施例７．（Ｓ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）アミノ
−２−（（４−トリフルオロメチル）ベンジルオキシカルボニル）ヘキサン酸メ
チル（２） Ｎ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボナート（５．３８ｇ、２１ミリモル）の
アセトニトリル（１５０ｍＬ）溶液を、４−（トリフルオロメチル）ベンジルア
ルコール（２．８７ｍＬ、２１ミリモル）およびＥｔ_３Ｎ（５．８ｍＬ、４２ミ
リモル）で処理し、２５℃で攪拌した。３時間後、反応混合物を、Ｎ−∈−ＢＯ
Ｃ−リジンメチルエステル（４．２ｇ、１４ミリモル）を含んだアセトニトリル
を含むフラスコに加え、さらに３時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をＣＨ_２ Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）に溶解させ、１０％のＨＣｌ水溶液（２×２００ｍＬ）お
よび飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２００ｍＬ）で洗浄した。フラッシュクロマトグ
ラフィ（ＳｉＯ_２、３：１のＣＨ_２Ｃｌ_２／ＥｔＯＡｃ）によって、６．４ｇ（
９９％）の２を淡黄色の油として得た。［α］_Ｄ ^２５−８．９（ｃ ５．６，Ｃ
Ｈ_３ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ７．５７（ｄ，Ｊ＝
８．１Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ）、５．７０（ｄ，
Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．１３（ｍ，２Ｈ）、４．７１（ｍ，１Ｈ）、４．
２８（ｍ，１Ｈ）、３．６７（ｓ，３Ｈ）、３．０３（ｍ，２Ｈ）、１．７８（
ｍ，１Ｈ）、１．６４，（ｍ，１Ｈ）１．４６〜１．３２（ｍ，４Ｈ）１．３５
（ｓ，９Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，１００ＭＨｚ）δ１７２．９、１
５６．２、１５５．８、１４０．４、１３０．１（ｑ，Ｊ＝３２．０Ｈｚ）、１
２７．８、１２５．３、１２２．９（ｑ，Ｊ＝２７０．０Ｈｚ）、７９．０５、
６５．８、５３．７、５２．３、３９．８、３１．７、２９．５、２８．４、２
２．２；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３５７、２９５２、１７９０、１７４５、１
５２４ｃｍ^−１；ＦＡＢＨＲＭＳ（ＮＢＡ−ＮａＩ）ｍ／ｚ ４６３．２０４４
（Ｍ＋Ｈ^＋，Ｃ_２１Ｈ_２９Ｆ_３Ｎ_２Ｏ_６の計算値 ４６３．２０５６）。

【００７５】 実施例８．（Ｓ）−６−［２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）
アミノ）アセトアミド］−２−［（４−トリフルオロメチル）ベンジルオキシカ
ルボニル］ヘキサン酸メチル（３） 化合物２（２．７ｇ、５．８ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）溶液を、４
Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（１０ｍＬ）で処理し、２５℃で２０分間攪拌した。減
圧下で溶媒および余分な酸を除去し、粗塩酸塩をＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解させ
、Ｎ−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）グリシン（１．０ｇ、５．８
ミリモル）、１−（３−（ジメチルアミノ）プロピル）−３−エチルカルボジイ
ミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）（１．２ｇ、６．４ミリモル）、およびｉ−Ｐｒ_２ＮＥ
ｔ（２．０ｍＬ、１１．６ミリモル）で処理し、２５℃で１２時間攪拌した。反
応混合物をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で希釈し、１０％のＨＣｌ水溶液（３×２
５０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎ
ａ_２ＳＯ_４）、蒸発を行って、２．８９ｇ（９６％）の化合物３を白色の泡状固
体として得た。［α］_Ｄ ^２５−１０．４（ｃ ２．５，ＣＨ_３ＯＨ）；^１Ｈ Ｎ
ＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ７．５９（ｍ，２Ｈ）、７．４５（ｍ，２
Ｈ）、６．１９（ｍ，１Ｈ）、５．５１（ｍ，１Ｈ）、５．１３（ｍ，２Ｈ）、
４．３２（ｍ，２Ｈ）、３．７４（ｓ，３Ｈ）、３．７３（ｍ，２Ｈ）、３．２
６（ｍ，２Ｈ）、１．８１〜１．３９（ｍ，６Ｈ）１．４４（ｓ，９Ｈ）；^１３ Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ１７４．５、１７２、１５８．２、
１５８．１、１４２．７、１３０．８（ｑ，Ｊ＝３１．８Ｈｚ）、１２８．８、
１２６．３、１２５．５（ｑ，Ｊ＝２６９．７Ｈｚ）、８０．５、６６．５、５
５．３、５２．７、４４．６、３９．８、３２．１、２９．８、２４．０；ＩＲ
（被膜）ν_ｍａｘ ３３２０、２９３２、１７２１、１６９２、１３２６ｃｍ^{− １} ；ＦＡＢＨＲＭＳ（ＮＢＡ−ＣｓＩ）ｍ／ｚ ６５２．１２３４（Ｍ＋Ｃｓ^＋ ，Ｃ_２３Ｈ_３２Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_７の計算値 ６５２．１２４７）。

【００７６】 実施例９．６−［２−（アミノ）アセトアミド］−２−［（４−トリフルオロ
メチル）−ベンジルオキシカルボニル］ヘキサノアート塩酸塩（４） 化合物３（３５０ｍｇ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）溶液を、４Ｎ ＨＣｌ−ジ
オキサン（５．０ｍＬ）で処理し、２５℃で攪拌した。０．５時間後、減圧下で
溶媒および余分な酸を除去して、３００ｍｇ（９９％）の化合物４を淡黄色の油
として得た。［α］_Ｄ ^２５−１０．４（ｃ ３．０，ＣＨ_３ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭ
Ｒ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ７．６５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）、５
．１８（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．１６（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，１
Ｈ）、４．１６（ｍ，１Ｈ）、３．７０（ｓ，３Ｈ）、３．６５（ｓ，２Ｈ）、
３．２１（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、１．８４（ｍ，１Ｈ）、１．６８（ｍ
，１Ｈ）、１．５４（ｍ，２Ｈ）、１．４２（ｍ，２Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（Ｃ
Ｄ_３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ１７４．５、１６７．１、１５８．２、１４２．８
、１３０．８（ｑ，Ｊ＝３１．８Ｈｚ）、１２８．８、１２６．３、１２５．５
（ｑ，Ｊ＝２７０．１Ｈｚ）、 ６６．５、５５．４、５２．７、４１．５、４０．２、３２．１、２９．６、２
４．１；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３１７、２９５４、１７１８、１６８４、１
５３０、１３２７ｃｍ^−１；ＭＡＬＤＩＦＴＭＳ（ＤＨＢ）ｍ／ｚ ４４２．１
５８６（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_１８Ｈ_２４Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_５の計算値 ４４２．１５６６）
。

【００７７】 実施例１０．Ｎ，Ｎ^１−ビス［（５−（Ｓ）−（メトキシカルボニル）−５［
（（４−トリフルオロメチル）−ベンジルオキシカルボニル）アミノ］ペンチル
）カルボキサミドメチル］ベンゼン−１，３ジカルボキサミド（５） 化合物４（２．０５ｇ、４．０ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３．０ｍＬ）溶液
を、４Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（１０．０ｍＬ）で処理し、２５℃で２０分間攪
拌した。減圧下で溶媒および余分な酸を除去し、粗塩酸塩をＤＭＦ（４０ｍＬ）
中に懸濁させ、二塩化イソフタロイル（４００ｍｇ、２．０ミリモル）およびｉ
−Ｐｒ_２ＮＥｔ（１．４ｍＬ、８．０ミリモル）で処理し、２５℃で１時間攪拌
した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で希釈し、１０％のＨＣｌ水溶液
（３×２００ｍＬ）および５％のＮａ_２ＣＯ_３水溶液（２００ｍＬ）で洗浄し、
乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発を行った。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２ 、１：４．５：４．５のＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＥｔＯＡｃ）によって、１
．３０ｇ（６８％）の化合物５を黄色の粉末として得た。［α］_Ｄ ^２５−６．４
（ｃ ２．１，ＣＨ_３ＯＨ）：^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ８
．２９（ｍ，２Ｈ）、８．１１（ｍ，２Ｈ）、７．８７（ｍ，４Ｈ）、７．５３
（ｍ，２Ｈ）、７．３９（ｍ，２Ｈ）、６．８８（ｍ，２Ｈ）、５．９４（ｍ，
２Ｈ）、５．０８（ｍ，４Ｈ）、４．３０（ｍ，２Ｈ）、４．０１（ｍ，４Ｈ）
、３．７０（ｓ，６Ｈ）、３．２３（ｍ，４Ｈ）、１．７７（ｍ，２Ｈ）、１．
６７（ｍ，２Ｈ）、１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３７（ｍ，４Ｈ）；^１３Ｃ Ｎ
ＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ１７４．６、１７１．５、１６９．３、１
５８．３、１４２．７、１３５．３、１３１．６、３０．８（ｑ，Ｊ＝３２．２
）、１２９．８、１２８．８、１２７．６、１２６．３、１２５．５（ｑ，Ｊ＝
２６９．２）、６６．５、５５．４、５２．７、４４．１、４０．０、３２．１
、２９．８、２４．１；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３０５、２９５１、１７１６
、１６５１、１５３８ｃｍ^−１；ＦＡＢＨＲＭＳ（ＮＢＡ−ＣｓＩ）ｍ／ｚ １
１０１．２３９８（Ｍ＋Ｃｓ^＋，Ｃ_４４Ｈ_５０Ｆ_６Ｎ_６Ｏ_１２の計算値 １１０
１．２４４５）。

【００７８】 実施例１１．Ｎ，Ｎ^１−ビス−［（５−（Ｓ）−カルボキシ−５−［（（４−
トリフルオロメチル）ベンジルオキシカルボニル）アミノ］−ペンチル）カルボ
キシアミドメチル］ベンゼン−１，３−ジカルボキサミド（１） 化合物５（０．９５ｇ、０．９８ミリモル）のＴＨＦ−ＭｅＯＨ（８．０ｍＬ
，３：１）溶液を、Ｈ_２Ｏ（２．０ｍＬ）中ＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１６５ｍｇ，３
．９ミリモル）で処理し、０℃で攪拌した。２時間後、１０％のＨＣｌ水溶液（
２０ｍｌ）を加えることによって反応をクェンチし、混合物をＥｔＯＡｃ（３×
５０ｍＬ）での抽出にかけた。有機相を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ
）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発を行って、０．８６ｇ（９３％）の
化合物１を白色の粉末として得た。［α］_Ｄ ^２５−０．６（ｃ ３．２，ＣＨ_３ ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ８．４０（ｍ，１Ｈ、８
．０３（ｄｄ，Ｊ＝１．８，７．８Ｈｚ，２Ｈ，７．６２（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ
，４Ｈ）、７．５３（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．５１（ｄ，Ｊ＝８．１
Ｈｚ，４Ｈ，５．１６（ｄ．，Ｊ．＝１３．３Ｈｚ，２Ｈ）、５．１３（ｄ，Ｊ
＝１３．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．１２（ｍ，２Ｈ）、４．００（ｓ，４Ｈ）、３．
２２（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ）、１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．７０（ｍ，２
Ｈ）、１．５５（ｍ，４Ｈ，１．３７（ｍ，４Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ_３Ｏ
Ｄ，１００ＭＨｚ）δ１７５．９、１７１．６、１６９．４、１５８．４、１３
５．４、１３１．６、３０．５（ｑ，Ｊ＝３１．８）、１２９．８、１２８．８
、１２７．７、１２６．３、１２５．６（ｑ．Ｊ＝２６８．７）；６６．５、５
３．３、４４．２、４０．１、３２．２、２９．８、２４．２；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３３４、２９３３、１７１８、１６４６、１６３１、１５２８ｃｍ^{− １} ；ＭＡＬＤＩＦＴＭＳ（ＤＨＢ）ｍ／ｚ ９６３．２９５３（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_４２ Ｈ_４６Ｆ_６Ｎ_６Ｏ_１２の計算値 ９６３．２９７６）。

【００７９】 実施例１２．［^１４Ｃ］化合物（１） ［１−^１４Ｃ］グリシン（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃ
ｈｅｍｉｃａｌｓ、１．０ｍＣｉ、５５ｍＣｉ／ミリモル、０．０１８ミリモル
）の０．１Ｎ ＨＣｌ溶液を、４ｍＬ容バイアルに移し、Ｎ_２ストリーム中で溶
媒を除去した。得られた残渣を、ＮａＨＣＯ_３（４．６ｍｇ、０．０５４ミリモ
ル）のＨ_２Ｏ（０．２５ｍＬ）溶液、および重炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１０
．５ｍＬ、０．０４５ミリモル）のＴＨＦ（０．２５ｍ）溶液で処理し、２５℃
で攪拌した。１２時間後、溶液が均質になったので、それをＨ_２Ｏ（１．０ｍＬ
）で処理し、ジエチルエーテル（２×１．０ｍＬ）で洗浄した。次いでこの水溶
液を、１０％のＨＣｌ水溶液（０．５ｍＬ）を加えることによって酸性化し、酢
酸エチル（４×１．０ｍＬ）での抽出にかけた。抽出物を合わせ、乾燥し（Ｎａ_２ ＳＯ_４）、Ｎ_２ストリーム中で蒸発を行って、２．９ｍｇ（９２％）の［１−^１４ Ｃ］−Ｎ−ＢＯＣ−グリシンを白色のフィルムとして得た。

【００８０】 化合物２（５０ｍｇ、０．１１ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１ｍＬ）溶液を、
４Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（１ｍＬ）で処理し、２５℃で１時間攪拌した。反応
混合物を酢酸エチル（２５ｍＬ）で希釈し、１０％のＮａ_２ＣＯ_３水溶液（２５
ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４ ）、蒸発を行って、未保護のリジンを無色のフィルムとして得た。ＤＭＦ（０．
２ｍＬ）に入れたこの遊離アミン（４．５ｍｇ、０．０１３ミリモル）の一部を
、［１−^１４Ｃ］−Ｎ−ＢＯＣ−グリシン（１．５ｍｇ、０．００８５ミリモル
）を含む４ｍＬ容バイアルに加え、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（２ｍＬ）およびＥＤＣＩ
（５．０ｍｇ、０．０２６ミリモル）の塩化メチレン（０．１ｍＬ）溶液で処理
し、２５℃で３時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２．０ｍＬ）で希釈し
、１０％の塩酸（３×ｌ．０ｍＬ）、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液（１．０ｍＬ）、
および飽和ＮａＣｌ水溶液（１．０ｍＬ）で洗浄し、蒸発を行った。分取薄層ク
ロマトグラフィ（ＰＴＬＣ）（ＳｉＯ_２、ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３ １：１）に
よって、１．８ｍｇ（４１％）の［^１４Ｃ］化合物３を白色のフィルムとして得
た。

【００８１】 ４ｍＬ容バイアルに含まれた［^１４Ｃ］化合物３（１．８ｍｇ、３．５ミリモ
ル）を４Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（０．２５ｍＬ）で処理し、反応物を２５℃で
０．５時間攪拌した。Ｎ_２ストリーム中で溶媒および余分な酸を蒸発させ、得ら
れた粗塩酸塩を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（０．１ｍＬ）中二塩化イソフタロイル（３５５
ｍｇ、０．００１８ミリモル）およびＣＨ_２Ｃｌ_２（０．０５ｍＬ）中ｉ−Ｐｒ_２ ＮＥｔ（２．４ｍＬ、０．０１４ミリモル）で処理した。２５℃で３時間おい
た後、反応混合物を、直接ＰＴＬＣ（ＳｉＯ_２、ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２／Ｅｔ
ＯＡｃ １：９：９）によって精製して、１．２ｍｇ（７１％）の［^１４Ｃ］化
合物５を得た。

【００８２】 ［^１４Ｃ］−化合物５（１．２ｍｇ）のＴＨＦ−ＭｅＯＨ（０．２ｍＬ、１：
１）溶液を、０℃のＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（０．４ｍｇ）のＨ_２Ｏ（０．０５ｍＬ）
溶液で処理し、１時間攪拌した。反応混合物をメタノール（１．０ｍＬ）で希釈
し、Ｄｏｗｅｘ ５０ＷＸ−８酸カチオン交換樹脂（２００ｍｇ）で処理し、１
分間攪拌した。次いで混合物を脱脂綿で濾過し、濾液を蒸発にかけて、相対活量
がおよそ１１０ｍＣｉ／ミリモルである、１．１ｍｇ（９４％）の［^１４Ｃ］−
化合物１を得た。この化合物およびそのすべての合成中間体は、薄層クロマトグ
ラフィ（ＴＬＣ）で対応する非標識の材料と比較すると同一であった。

【００８３】 実施例１３．（Ｓ）−６−［２−（ベンゾイルアミノ）アセトアミド］−２−
［（４−トリフルオロメチル）−ベンジルオキシカルボニル］ヘキサン酸メチル
（６） 化合物３（４４ｍｇ、０．０８５ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１．０ｍＬ）溶
液を、４Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（１．０ｍＬ）で処理し、２５℃で１時間攪拌
した。Ｎ_２ストリーム中で溶媒および余分な酸を除去し、粗塩酸塩をＣＨ_２Ｃｌ_２ （０．８ｍＬ）中に懸濁させ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（３０μＬ、０１７ミリモル
）および塩化ベンゾイル（１１μＬ、０．０９４ミリモル）で処理し、２５℃で
攪拌した。２時間後、反応混合物を直接フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２ 、１：９：９ ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＥｔＯＡｃ）によって精製して、４０
ｍｇ（９０％）の化合物６を白色の粉末として得た。［α］_Ｄ ^２５−２．７（ｃ
０．７０，ＣＨＣｌ_３）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ７．
８６（ｍ，２Ｈ）、７．６４（ｍ，２Ｈ）、７．５３（ｍ，３Ｈ）、７．４５（
ｍ，２Ｈ）、５．１６（ｍ，２Ｈ）、５．１６（ｄｄ，Ｊ＝７．３，３．８Ｈｚ
，１Ｈ）、３．６９（ｓ，３Ｈ）、３．２１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）、１
．８１（ｍ，１Ｈ）、１．６９（ｍ，１Ｈ）、１．５３（ｍ ２Ｈ）、１．４２
（ｍ，２Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，１００ＭＨｚ）δ１７２．８、１
６９．５、１６８．４、１５６．３、１４２．３、１３２．９、１３１．４、１
２９．４（ｑ，Ｊ＝３２．２Ｈｚ）、１２８．０、１２７．１、１２６．７、１
２６．３（ｑ，Ｊ−２６９．０Ｈｚ）、１２４．８、６５．１、５３．６、５１
．６、４２．６、３８．４、３０．６、２８．１、２２．２；ＩＲ（被膜）ν_{ｍ ａｘ} ３３０３、２９２３、１７１３、１６５１、１５３３ｃｍ^−１；ＦＡＢＨ
ＲＭＳ（ＮＢＡ−ＣｓＩ）ｍ／ｚ ６５６．０９６１（Ｍ＋Ｃｓ，Ｃ_２５Ｈ_２５ Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_６の計算値 ６５６．０９８５）。

【００８４】 実施例１４．（Ｓ）−６−［２−（ベンゾイルアミノ）アセトアミド］−２−
（４−トリフルオロメチル）−ベンジルオキシカルボニル］ヘキサン酸（７） 化合物６（１７ｍｇ、０．０３２ミリモル）のＴＨＦ−ＭｅＯＨ（０．４ｍｌ
、３：１）溶液を、Ｈ_２Ｏ（０．１ｍＬ）に溶解したＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（２．０
ｍｇ、０．４９ミリモル）で処理し、０℃で２時間攪拌した。反応混合物を、濃
ＨＣｌ水溶液（５μＬ）を加ることによってクェンチし、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ
）で希釈し、水（２×１５ｍＬ）で洗浄した。乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、蒸発を
行って、１４．５ｍｇ（８８％）の化合物７を白色の粉末として得た。［α］_Ｄ ^２５ ＋２．２（ｃ ０．６，ＣＨ_３ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００
ＭＨｚ）δ７．８６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝８．２
Ｈｚ，２Ｈ）、７．５４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．５３（ｍ，１Ｈ）
、７．４３（ｍ，２Ｈ）、５．１７（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ）、５．１４
（ｄ，Ｊ−１３．２Ｈｚ，１Ｈ０，４．１４（ｍ，１Ｈ）、４．０４（ｓ，２Ｈ
）、３．２５（ｍ，２Ｈ）、１．８８（ｍ，１Ｈ）、１．７１（ｍ，１Ｈ）、１
．５２（ｍ，２Ｈ）、１．４４（ｍ，２Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，１
２５ＭＨｚ）δ１７５．９、１７１．７、１７０．５、１５８．４、１４２．９
、１３５．１、１３２．９、１３０．９（ｑ，Ｊ＝３２．４Ｈｚ）、１２９．５
、１２８．９、１２８．５、１２６．３、１２５．７（ｑ，Ｊ−２６９．０Ｈｚ
）、６６．５、５５．４、４４．１、４０．１、３２．３、２９．９、２４．２
；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３１８、２９３５、１７１３、１６４４、１５３８
、１３２６ｃｍ^−１；ＭＡＬＤＩＦＴＭＳ ｍ／ｚ ５３２．１６７２（Ｍ＋Ｎ
ａ^＋，Ｃ_２４Ｈ_２６Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_６の計算値 ５３２．１６７１）。

【００８５】 実施例１５．（Ｓ）−６−［２−［（２−（（カルボキシメチル）メトキシ）
アセトアミド］アセトアミド］−２−［（４−トリフルオロメチル）ベンジルオ
キシカルボニル］ヘキサン酸メチル（８） 化合物３（５７ｍｇ、０．１１ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１ｍｌ）溶液を、
４Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（２ｍＬ）で処理し、２５℃で１時間攪拌した。Ｎ_２ ストリーム中で溶媒および余分な酸を除去し、残渣をＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解さ
せ、ジグリコール酸（１６ｍｇ、０．１２ミリモル）、ＥＤＣＩ（２３ｍｇ、０
．１２ミリモル）、およびｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（４２μＬ、０．２４ミリモル）で
処理し、２５℃で攪拌した。４時間後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を
含む分液漏斗に注ぎ、１０％のＨＣｌ水溶液（３×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣ
ｌ水溶液（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発を行って、４５
ｍｇ（７７％）の一酸化合物８を白色の固体として得た。［α］_Ｄ ^２５−７．５
（ｃ １．８，ＣＨ_３ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ７
．６５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．５４（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ）
、５．１８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．１５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１
Ｈ）、４．４２（ｓ，２Ｈ）、４．１６（ｍ，１Ｈ）、４．１１（ｓ，２Ｈ）、
３．８７（ｓ，２Ｈ）、３．７０（ｓ，３Ｈ）、３．２０（ｔ，Ｊ＝４．５Ｈｚ
，２Ｈ）、１．８１（ｍ，１Ｈ）、１．６８（ｍ，１Ｈ）、１．５３（ｍ，２Ｈ
）、１．３９（ｍ，２Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ１
７４．５、１７３．７、１７２．５、１７１．２、１５８．２、１４２．６、１
３０．９（ｑ，Ｊ＝３３．２Ｈｚ）、１２８．２、１２６．２、１２５．４（ｑ
，Ｊ＝２７０．１Ｈｚ）、７１．３、６９．０、６６．５、５５．３、５２．７
、４２．９、３９．９、３２．０、２９．７、２３．９；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３１５、２９３１、１７２５、１６６１、１５３８、１３２６ｃｍ^−１ Ｍ
ＡＬＤＩＦＴＭＳ ｍ／ｚ ５５８．１６８６（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_２２Ｈ_２３Ｆ_３ Ｎ_３Ｏ_９の計算値 ５５８．１６７３）。

【００８６】 実施例１６：（Ｓ）−２−（ベンゾイルアミノ）−６−（（（ｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシ）カルボニル）アミノ）ヘキサン酸メチル（９） Ｎ−∈−ＢＯＣ−リジンメチルエステル塩酸塩（５．０５ｇ、１７ミリモル）
のＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）溶液を、塩化ベンゾイル（２．０ｍＬ、１７ミリ
モル）およびｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（５．９ｍｌ、３４ミリモル）で処理し、２５℃
で攪拌した。１時間後、反応混合物を１０％のＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）で洗
浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発を行ってＣＨ_２Ｃｌ_２−ヘキサンから白色
の粉末を結晶化して、４．８ｇ（７８％）の化合物９を、融点１０８〜１０９℃
の白色結晶性固体として得た。［α］_Ｄ ^２５−１３．２（ｃ ５．８）、ＣＨ_３ ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ８．７２（ｄ，Ｊ＝
７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９（ｍ，２Ｈ）、７．５５（ｍ，１Ｈ）、７．４８
（ｍ，２Ｈ）、６．８８（ｔ，Ｊ−５．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．４２（ｍ，１Ｈ）
、３．６４（ｓ，３Ｈ）、２．９３（ｍ，２Ｈ）、１．８１（ｍ，２Ｈ）、１．
４１（ｍ，４Ｈ）、１．３７（ｓ，９Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，
１００ＭＨｚ）δ１７２．９、１６６．７、１５５．６、１３３．８、１３１．
５、１２８．３、１２７．６、７７．４、５２．８、５１．９、４０．８、３０
．２、２９．２、２８．３、２３．２；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３３５、２９
３３、１７４０、１６９０、１６４７、１５３４ｃｍ^−１；ＭＡＬＤＩＦＴＭＳ
（ＤＨＢ）ｍ／ｚ ３８７．１８９５（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_１９Ｈ_２５Ｎ_２Ｏ_５の計
算値 ３８７．１８９０）。

【００８７】 実施例１７．（Ｓ）−２−（ベンゾイルアミノ）−６−［２−（（（ｔｅｒｔ
−ブチルオキシ）カルボニル）アミノ］−アセトアミド）ヘキサン酸メチル（１
０） 化合物９（４．４ｇ、１２．１ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ（５．０ｍＬ）溶液を
、４Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（１０．０ｍＬ）で処理し、２５℃で３時間攪拌し
た。減圧下で溶媒および余分な酸を除去し、残渣をＤＭＦ（１５０ｍＬ）に溶解
させ、Ｎ−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）グリシン（２．２ｇ、１
２．１ミリモル）、ＰｙＢｒＯＰ（７．０ｇ、１５ミリモル）、およびＰｒ_２Ｎ
Ｅｔ（８．４ｍＬ、４８．４ミリモル）で処理し、２５℃で攪拌した。１２時間
後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈し、１０％のＨＣｌ水溶液（
３×２５０ｍＬ）、５％のＮａ_２ＣＯ_３水溶液（２５０ｍＬ）、および飽和Ｎａ
Ｃｌ水溶液（２５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発を行った。
フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、ＥｔＯＡｃ）によって、４．６（９０
％）の化合物１０を無色の油として得た。［α］_Ｄ ^２５−１０．３（ｃ ０．３
０，ＣＨ_３ＯＨ）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ７．８４（ｍ
，２Ｈ）、７．５１（ｍ，１Ｈ）、７．４４（ｍ，２Ｈ）、６．９１（ｄ，Ｊ−
７．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．３５（ｂｒｔ，Ｊ−５．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．２２（
ｍ，１Ｈ）、４．７６（ｍ，１Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、３．７０（ｂｒｔ
，Ｊ−６．３Ｈｚ，４Ｈ）、３．２６（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｍ，１Ｈ）、１
．８４（ｍ，１Ｈ）、１．５７〜１．３０（ｍ，４Ｈ）、１．４１（ｓ，９Ｈ）
；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，１００ＭＨｚ）δ１７３．０、１６９．７、１
６７．３、１５６．５、１３３．７、１３１．８、１２８．６、１２７．２、８
１．８、５２．５、５２．３、４４．３、３８．７、３２．０、２８．９、２８
．３、２２．４；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３１８、２９５４、１７１８、１６
４７、１５３５、１４９１ｃｍ^−１；ＭＡＬＤＩＦＴＭＳ ｍ／ｚ ４４４．２
１０８（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_２１Ｈ_３１Ｎ_３Ｏ_６の計算値 ４４４．２１１０）。

【００８８】 実施例１８．Ｎ，Ｎ’−ビス［Ｎ−（−５−（Ｓ）−（（ベンゾイル）アミノ
）−５−（メトキシカルボニル）ペンチル）−カルボキサミドメチル］ベンゼン
−１，３−ジカルボキサミド（１１） 化合物１０（４．４ｇ、１０．４ミリモル）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）溶液を
、４．０Ｎ ＨＣｌ−ジオキサン（２０ｍＬ）で処理し、２５℃で１時間攪拌し
た。減圧下で溶媒および余分な酸を除去し、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）に
溶解させ、Ｅｔ_２Ｎ（５．８ｍＬ、４２ミリモル）および二塩化イソフタロイル
（１．０６ｇ、５．２ミリモル）で処理し、２５℃で攪拌した。１６時間後、反
応混合物を１０％のＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、蒸発を行って、黄色の
油とした。フラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２、５：５：２ ＥｔＯＡｃ／
ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ）によって、２．５ｇ（６２％）の化合物１１を白色の
泡状固体として得た。［α］_Ｄ ^２５−８．０（ｃ ４．８，ＣＨ_３ＯＨ）；^１Ｈ
ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ８．３７（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｍ
，２Ｈ）７．８４（ｍ，４Ｈ）、７．５２（ｍ，３Ｈ）、７．４４（ｍ，４Ｈ）
、４．５８（ｍ，２Ｈ）、３．９９（２個 ｓ，４Ｈ）；３．７２（ｓ，６Ｈ）
、３．２２（ｍ，４Ｈ）、１．９９〜１．８３（ｍ，４Ｈ）、１．５９〜１．４
０（ｍ，８Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ１７４．２、
１７１．５、１７０．２、１６９．０、１３５．０、１３４．８、１３２．８、
１３１．５、１２９．４、１２８．４、１２７．６、５４．３、５２．７、４４
．２、４０．１、３１．７、２９．８、２４．３；ＩＲ（被膜）ν_ｍａｘ ３３
０４、２９５０、１７３８、１６５０、１６４４、１５３８ｃｍ^−１；ＭＡＬＤ
ＩＦＴＭＳ ｍ／ｚ ７９５．３３３２（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_４０Ｈ_４５Ｎ_６Ｏ_１０ の計算値 ７９５．３３３０）。

【００８９】 実施例１９．Ｎ，Ｎ’−ビス−［Ｎ−（−５−（Ｓ）−（（ベンゾイル）アミ
ノ）−５−（カルボキシ）ペンチル）−カルボキサミドメチル］ベンゼン−１，
３−ジカルボキサミド（１２） 化合物１１（１．１ｇ、１．４ミリモル）のＭｅＯＨ−ＴＨＦ（２０ｍＬ、１
：１）溶液を、Ｈ_２Ｏ（１０ｍＬ）に溶解したＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（２４０ｍｇ、
５．７ミリモル）で処理し、０℃で１時間攪拌した。１時間後、反応物の溶媒を
蒸発させ、残渣をＨ_２Ｏ（２０ｍＬ）に再溶解させ、０℃まで冷却した。濃ＨＣ
ｌ水溶液（０．４７ｍＬ、ＨＣｌ ５．７ミリモル）を加え、沈殿した固体を濾
過にかけ、水（５０ｍＬ）で洗浄して、０．７８ｇ（７３％）の化合物１２を白
色の粉末として得た。［α］_Ｄ ^２５−２．６（ｃ ０．３５，ＣＨ_３ＯＨ）；^１ Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）δ８．３８（ｍ，１Ｈ）、８．０２（
ｍ，２Ｈ）、７．８４（ｍ，４Ｈ）、７．５５〜７．４８（ｍ，３Ｈ）、７．４
２（ｍ，４Ｈ）、４．５６（ｍ，２Ｈ）、４．００および３．９９（２個 ｓ，
４Ｈ）、３．２６（ｍ，４Ｈ）、１．９９〜１．８３（ｍ，４Ｈ）、１．６３〜
１．４５（ｍ，８Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，１００ＭＨｚ）δ１７５
．５、１７１．９、１７０．４、１６９．２、１３５．０、１３４．９、１３２
．８、１３１．７、１２９．８、１２９．５、１２８．５、１２７．７、５４．
４、４４．０、４０．２、３１．７、２９．６、２４．３；ＩＲ（被膜）ν_{ｍａ ｘ} ３２８０、２９２３、１７１８、１６４１、１５３６ｃｍ^−１；ＭＡＬＤＩ
ＦＴＭＳ（ＤＨＢ）ｍ／ｚ ７６７．３００５（Ｍ＋Ｎａ^＋，Ｃ_３８Ｈ_４４Ｎ_６ Ｏ_１０の計算値 ７６７．３０１７）。

【００９０】 結果および考察 化合物１は、インテグリンα_ｖβ_３とＭＭＰ２のＲＧＤ非依存性相互作用を妨
害する。ＭＭＰ２のカルボキシ末端ヘモペキシン様ドメインが、ＭＭＰ２のイン
テグリンα_ｖβ_３への結合を妨げ、そのため血管形成をブロックし得るという最
近の観察に促されて、我々は、治療上の投与でより扱いやすい、この相互作用の
有機阻害剤を探索した。ＭＭＰ２とインテグリンα_ｖβ_３の結合相互作用の特異
的阻害剤を特定するため、固定化したインテグリンおよびビオチン標識ＭＭＰ２
を用いて、固相受容体結合アッセイを行った。ｃＲＧＤｆＶは、α_ｖβ_３とその
細胞外マトリックスリガンドであるビトロネクチンとの相互作用を阻害したが、
ＭＭＰ２のインテグリンα_ｖβ_３への結合に対しペプチドが作用しなかったこと
によって証明されるとおり、精製したＭＭＰ２の結合が、この系では完全にＲＧ
Ｄ非依存性であることが判明した（ＶＮ、図２Ａ）。化合物１がＶＮでなくＭＭ
Ｐ２の結合を阻止し、ＭＭＰ２とα_ｖβ_３の相互作用に対するその特異性が実証
されたことは重要である。さらに、ＭＭＰ２とメタロプロテイナーゼ２組織阻害
因子（ＴＩＭＰ２）の結合は、化合物１に阻害されず、この化合物１の作用がＭ
ＭＰ２とインテグリンα_ｖβ_３の結合に限られるという主張が裏付けられ、ＴＩ
ＭＰ２のＭＭＰ２ＰＥＸドメインとインテグリンα_ｖβ_３の結合部位が区別され
ることが実証された。対照化合物も、対照ペプチドであるｃＲＡＤｆＶも、ＭＭ
Ｐ２のインテグリンα_ｖβ_３への結合を妨げなかったことに注目すべきである（
図２Ａ）。

【００９１】 化合物１は、ＭＭＰ２でなくインテグリンα_ｖβ_３に直接結合する。化合物１
の作用機構をさらに詳しく研究するため、固定化したα_ｖβ_３、および［^１４Ｃ
］標識化合物１もしくは対照のビオチン標識ＶＮを用いて、追加の固相受容体結
合アッセイを行った。図２Ｂからわかるとおり、化合物１は、固相受容体結合ア
ッセイにおいてインテグリンα_ｖβ_３に直接に結合した。この相互作用は、用量
依存性、飽和性、かつ特異的であり、化合物１と、無関係の対照インテグリンα
５β_１との相互作用が最小であることが実証された（図２Ｂ）。実際インテグリ
ンα５β_１への結合は、化合物が高濃度である場合にごくわずかに認められた（
データは示さず）。さらに、マイクロタイターウェルにＭＭＰ２をコートした場
合では化合物１の結合がなく（データは示さず）、ＭＭＰ２／インテグリンα_ｖ β_３結合アッセイで観察された作用が、化合物１がインテグリンα_ｖβ_３に結合
したためであることを示唆している。この相互作用が２５倍モル過剰の非標識化
合物１の存在によって阻害されたものの、関連対照化合物１２では阻害されなか
った（図２Ｃ）ことは重要である。さらにまた、同じ系において、ｃＲＧＤｆＶ
ペプチドがｂＶＮの固定化インテグリンへの結合を完全に阻止するものの、放射
能標識した化合物１とインテグリンα_ｖβ_３の相互作用を阻害できないことによ
って実証されるとおり、化合物１は、インテグリンα_ｖβ_３にＲＧＤ非依存的に
結合した（図２Ｄ）。対照ペプチドのｃＲＧＤｆＶは、結合阻害の特異性につい
ての対照として示してある。したがって、α_ｖβ_３に結合した化合物１は、ＲＧ
Ｄ阻害について、ＭＭＰ２に匹敵する特異性、選択性、および感受性欠如を示す
。

【００９２】 興味深いことに、化合物６、すなわちＡが水素であり、ｎが０であり、Ｘ^１が
ｐ−トリフルオロメチルであり、Ｒ^１がメチルである式（ＩＩ）の化合物は、固
体相結合アッセイにおいて化合物１より活性が若干劣り、一方、グリシン単位に
結合したフェニル基をもたない化合物８は不活性であった。この結果は、式（Ｉ
Ｉ）の阻害化合物にとってフェニル環が阻害活性の本質的な特徴であることを実
証し、さらに、少なくとも１個の置換グリシルリジン単位がこのクラスの阻害剤
の抗血管形成活性に必要であることも実証している。

【００９３】 ＭＭＰ２による細胞媒介ＩＶ型コラーゲン分解は、化合物１によってブロック
される。黒色腫細胞においてＭＭＰ２のインテグリンα_ｖβ_３への結合を防止す
ることは、細胞媒介ＩＶ型コラーゲン分解をα_ｖβ_３依存的に阻害することであ
ると以前に示されている。したがって、我々は、α_ｖβ_３を発現しているまたは
欠いている黒色腫細胞が、活性型ＭＭＰ２を利用して、固定化した［^３Ｈ］ＩＶ
型コラーゲンを分解することができるかを評価した。両方の細胞が、検出可能な
量のＭＭＰ２を内因的に産生しないことが重要である。どちらのタイプの細胞に
も、ある水準での基礎的なコラーゲン分解能があったが、Ｂ_３でトランスフェク
トしたＣＳ−１細胞だけにＭＭＰ２利用能があり、精製ＭＭＰ２と共に予めイン
キュベートした後に、基礎放射能をずっと多く培地に放射したことが実証された
（図３Ａ）。ＭＭＰ２での処理に応じたこの基質分解の増強は、化合物１を入れ
ることによって特異的に阻止されるが、化合物１２ではごくわずかにしか作用し
なかった（図３Ａ）。重要なことに、化合物１または化合物１２が存在するか否
かにかかわらず、精製活性ＭＭＰ２は、細胞不在下でもなお固定化した［^３Ｈ］
ＩＶ型コラーゲンを分解することができるので、化合物１が細胞媒介コラーゲン
分解に及ぼす作用は、ＭＭＰ２活性の直接的阻害によるものではない。図３Ａで
認められる、細胞媒介コラーゲン分解の低減が、細胞表面上で化合物１によって
ＭＭＰ２とインテグリンα_ｖβ_３の相互作用が阻害された結果であることを実証
するために、ＣＳ−１細胞およびそのα_ｖβ_３含有相対物を、ビオチン標識ＭＭ
Ｐ２結合アッセイで調べた。予想どおり、β_３陰性ＣＳ−１細胞は、あるレベル
のＭＭＰ２を結合させることができたが、β_３陰性ＣＳ−１細胞のそうした能力
は、どちらの化合物が存在しても低下しなかった（図３Ｂ）。対照的に、かなり
大量のＭＭＰ２と結合したβ_３Ｃｓ−１細胞、およびこのＭＭＰ２結合の増強が
、化合物１によって特異的に抑制された。事実、抗アクチンｍＡｂでの染色によ
って示されたレーンの負荷について補正した場合、化合物１は、ＭＭＰ２のβ_３ ＣＳ−１細胞への結合を、α_ｖβ_３（すなわち、ＣＳ−１細胞の親）の不在下で
、観察された水準まで実際に低減させた（図３Ｂ、レーン２）。

【００９４】 化合物１は、ＭＭＰ活性を抑制することなく、ｉｎ ｖｉｖｏで血管形成を阻
止する。組換え型ＭＭＰ２ＰＥＸドメインを外因的に適用することによってα_ｖ β_３／ＭＭＰ２相互作用を抑制すると、動物モデルで血管形成が低減されること
が以前に示されている。したがって、我々は、生後１０日のニワトリＣＡＭで、
化合物１が成長因子誘発性の血管形成に及ぼす影響を調べた。塩基性線維芽細胞
成長因子（ｂＦＧＦ）で刺激しておいたＣＡＭに化合物１を塗布すると、この刺
激によって新血管の発達がほぼ完全に阻止され（図４Ａおよび４Ｂ）たが、対照
化合物１２はこの点で有効でなかった。重要なことに、処理した胚と未処理の胚
に由来するＣＡＭ組織で等レベルの活性ＭＭＰ２（６２ｋＤａ）が検出されたの
で、血管形成による浸潤が化合物１によって阻止されることは、ＭＭＰ２活性の
抑制に関連していない（図４Ｃ）。これは、この系でＭＭＰ２活性を抑制した外
因性ＭＭＰ２ＰＥＸドメインの作用とは全く対照的である。これらのデータは、
化合物１が、ＭＭＰ２の活性に直接影響を与えることなく、ＭＭＰ２のインテグ
リンα_ｖβ_３への結合を妨げるという概念と一致している。実際、ＣＡＭ溶解産
物中で観察されたＭＭＰ２の総体的なレベルにはその上、血管形成組織における
ＭＭＰ２の発現レベルへの影響を除いて、化合物１での処理による影響がなかっ
た（図４Ｃ）。これらの結果は、化合物１の抗血管形成作用がおそらく、図３Ｂ
に示すような、細胞表面上でのＭＭＰ２のインテグリンα_ｖβ_３への結合が抑制
されるためであることを示唆している。これらのデータはまた、十分に活性化し
たＭＭＰ２は、細胞表面上でインテグリンα_ｖβ_３に結合しない限り、この系で
は血管形成に利用されないことを示唆している。

【００９５】 化合物１は、ｉｎ ｖｉｖｏで腫瘍成長を阻止する。血管形成を妨害すること
により、非常に多くの系で腫瘍成長が阻害されることが示されている。その結果
、ＭＭＰの阻害によって内皮細胞の浸潤特性をブロックすることがさらに、動物
モデルにおいて血管形成および腫瘍成長を抑制する。実際、いくらかのＭＭＰ阻
害剤に、ヒトにおける抗血管形成剤としての見込みがある。したがって、我々は
、この研究で観察されたＭＭＰ２／インテグリンα_ｖβ_３相互作用の遮断に伴う
血管形成の阻害がα_ｖβ_３陰性腫瘍の成長を抑制するのに十分であるか評価した
。α_ｖβ_３陰性腫瘍を使用することにより、化合物１が血管α_ｖβ_３に及ぼす影
響の評価が選択的になった。図５Ａに示すように、ニワトリＣＡＭ上の移植され
たα_ｖβ_３陰性ＣＳ−１黒色腫の成長は、化合物１の１回の静脈内（ＩＶ）注射
によって有意に妨げられ、腫瘍重量も同様に減少する（図５Ｂ）。このアッセイ
で使用した黒色腫細胞にはインテグリンα_ｖβ_３が欠けているので、この作用は
、化合物１の腫瘍への直接の影響のためではない可能性が高い。実際に、これら
の腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの成長は、化合物との共培養によって影響を受けな
かった（データは示さず）。化合物１で処理した腫瘍では、脈環構造の外観（図
５Ａ）だけでなく、総血管密度（図５Ｂ）が顕著に縮小したことが明らかである
。重要なことに、対照腫瘍の質量が１０日のアッセイ期間中に６倍の増加を示し
たにもかかわらず、こうして腫瘍脈管構造が縮小したことは、腫瘍塊内でのかな
りの細胞死と関連がある。

【００９６】 これまでの説明および実施例は、限定的でなく例示的なものとして記載してい
る。当分野の技術者には、本発明の趣旨および範囲から逸脱しないさらに他の変
形が考えられ、自らで容易に実現できるであろう。

【図面の簡単な説明】

【図１】 ＭＭＰ２のインテグリンα_ｖβ_３との相互作用およびその血管形成での役割、
ならびに本発明の化合物などの拮抗薬によるＭＭＰ２とα_ｖβ_３の相互作用の阻
害を示す略図である。

【図２Ａ】 固体相結合アッセイで、式（Ｉ）の阻害剤化合物がＭＭＰ２とインテグリンα_ｖ β_３の相互作用に及ぼす影響を示すグラフである。

【図２Ｂ】 式（Ｉ）の化合物と、インテグリンα_ｖβ_３およびα_５β_１との結合を示すグ
ラフである。

【図２Ｃ】 本発明の化合物の作用を、α_ｖβ_３への結合について対照化合物と比較するグ
ラフである。

【図２Ｄ】 アミノ酸残基ＲＧＤが本発明の化合物のα_ｖβ_３への結合に及ぼす影響と、Ｒ
ＧＤがｂＶＮのα_ｖβ_３への結合に及ぼす影響を比較するグラフである。

【図３Ａ】 β_３陽性細胞およびβ_３陰性細胞でのプロテイナーゼ活性を示すグラフである
。

【図３Ｂ】 β_３陽性細胞およびβ_３陰性細胞でのＭＭＰ２結合を示す図である。

【図４Ａ】 ニワトリＣＡＭ組織での血管形成阻害の顕微鏡写真である。

【図４Ｂ】 ニワトリＣＡＭ組織での血管形成阻害を示すグラフである。

【図４Ｃ】 処理細胞および未処理細胞でのＭＭＰ２濃度を示す図である。

【図５Ａ】 ニワトリＣＡＭ組織の腫瘍成長および脈管構造の顕微鏡写真である。

【図５Ｂ】 ニワトリＣＡＭ組織での腫瘍重量を示すグラフである。

【図５Ｃ】 ニワトリＣＡＭ組織での血管新生を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｃ 271/22 Ａ６１Ｋ 37/64 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＯ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ， ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ， ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，Ｐ Ｔ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ， ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA07 BA01 BA10 BA14 BA23 CA59 DC32 MA52 MA56 MA63 MA66 MA67 NA14 ZB212 ZB261 ZB262 ZC022 ZC201 ZC202 4H006 AA01 AB28 BJ50 BS10 BT12 BV22 BV72 RA08 【要約の続き】

Claims (40)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次の構造の化合物。 【化１】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
   ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
   ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
   Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
   びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
   アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
   ；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
   ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
   は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
   Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
   Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
   ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
   ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
   びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
   整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
   ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］
2. 【請求項２】 Ｇ_１およびＧ_２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（
   Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり、Ａが共有結合であり、ｖが１である請求項１に記載の
   化合物。
3. 【請求項３】 Ｘ^１がトリフルオロメチルである請求項２に記載の化合物。
4. 【請求項４】 Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍが１であり、ｎが１である
   請求項２に記載の化合物。
5. 【請求項５】次の構造の化合物。 【化２】 ［Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、フェニル、ま
   たはベンジルであり；Ｘ^２およびＸ^３は、それぞれ独立に、ハロ、ニトロ、Ｃ_１ 〜Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキ
   ルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ならびに、ｔは、０または１の値の
   整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、ｔは０であり、Ａが共有結合であると
   き、ｔは１である。］
6. 【請求項６】 Ｘ^２およびＸ^３の少なくとも一方がパラトリフルオロメチル
   であり、Ａが共有結合である請求項５に記載の化合物。
7. 【請求項７】 Ｒ^２およびＲ^３の少なくとも一方がＨであり、Ａが共有結合
   である請求項５に記載の化合物。
8. 【請求項８】 Ｒ^２およびＲ^３の少なくとも一方がメチルであり、Ａが共有
   結合である請求項５に記載の化合物。
9. 【請求項９】 Ｘ^２およびＸ^３がそれぞれパラトリフルオロメチルであり、
   Ｒ^２およびＲ^３がそれぞれメチルであり、Ａが共有結合である請求項５に記載の
   化合物。
10. 【請求項１０】 Ｒ^２がＨであり、ＡがＨである請求項５に記載の化合物。
11. 【請求項１１】 Ｒ^２がメチルであり、ＡがＨである請求項５に記載の化合
    物。
12. 【請求項１２】 Ｘ^２がパラトリフルオロメチルであり、Ｒ^１がＨであり、
    ＡがＨである請求項５に記載の化合物。
13. 【請求項１３】 次の構造の化合物。 【化３】
14. 【請求項１４】 薬剤として許容される担体中に次の構造の化合物を含む薬
    剤調製物。 【化４】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
    ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
    ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
    Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
    びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
    アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
    ；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
    ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
    は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
    ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
    ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
    びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
    整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
    ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］
15. 【請求項１５】 Ｇ_１およびＧ_２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−
    （Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり、Ａが共有結合であり、ｖが１である請求項１４に記
    載の薬剤調製物。
16. 【請求項１６】 Ｘ^１がトリフルオロメチルである請求項１５に記載の薬剤
    調製物。
17. 【請求項１７】 Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍが１であり、ｎが１であ
    る請求項１５に記載の薬剤調製物。
18. 【請求項１８】 Ｘ^２がパラトリフルオロメチルであり、Ｒ^１がＨであり、
    ＡがＨである請求項１５に記載の薬剤調製物。
19. 【請求項１９】 薬剤として許容される担体に含ませた次の構造の化合物を
    含む薬剤調製物。 【化５】
20. 【請求項２０】 腫瘍成長の抑制を必要とする宿主に、治療有効量の次式で
    表される化合物を投与することを含む、宿主の腫瘍成長を抑制する方法。 【化６】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
    ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
    ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
    Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
    びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
    アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
    ；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
    ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
    は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
    ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
    ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
    びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
    整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
    ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］
21. 【請求項２１】 Ｇ_１およびＧ_２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−
    （Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり、Ａが共有結合であり、ｖが１である請求項２０に記
    載の腫瘍成長を抑制する方法。
22. 【請求項２２】 Ｘ^１がトリフルオロメチルである請求項２１に記載の腫瘍
    成長を抑制する方法。
23. 【請求項２３】 Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍが１であり、ｎが１であ
    る請求項２１に記載の腫瘍成長を抑制する方法。
24. 【請求項２４】 投与が腹腔内、皮下、静脈内、経皮、滑液内、筋肉内、ま
    たは経口投与を含む請求項２０に記載の腫瘍成長を抑制する方法。
25. 【請求項２５】 腫瘍成長の抑制を必要とする宿主に、治療有効量の次式で
    表される化合物を投与することを含む、宿主の腫瘍成長を抑制する方法。 【化７】
26. 【請求項２６】 投与が腹腔内、皮下、静脈内、経皮、滑液内、筋肉内、ま
    たは経口投与を含む請求項２５に記載の腫瘍成長を抑制する方法。
27. 【請求項２７】 腫瘍組織に、血管形成を阻害する有効量の次式で表される
    化合物を投与することを含む、腫瘍組織の血管形成を阻害する方法。 【化８】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
    ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
    ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
    Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
    びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
    アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
    ；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
    ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
    は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
    ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
    ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
    びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
    整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
    ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］
28. 【請求項２８】 Ｇ_１およびＧ_２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−
    （Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり、Ａが共有結合であり、ｖが１である請求項２７に記
    載の方法。
29. 【請求項２９】 Ｘ^１がトリフルオロメチルである請求項２８に記載の方法
    。
30. 【請求項３０】 Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍが１であり、ｎが１であ
    る請求項２８に記載の方法。
31. 【請求項３１】 投与が腹腔内、皮下、静脈内、経皮、滑液内、筋肉内、ま
    たは経口投与を含む請求項２７に記載の腫瘍成長を抑制する方法。
32. 【請求項３２】 腫瘍細胞に、治療有効量の次式で表される化合物を投与す
    ることを含む腫瘍のアポトーシスを誘発する方法。 【化９】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
    ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
    ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
    Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
    びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
    アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
    ；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
    ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
    は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
    ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
    ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
    びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
    整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
    ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］
33. 【請求項３３】 Ｇ_１およびＧ_２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−
    （Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり、Ａが共有結合であり、ｖが１である請求項３２に記
    載の方法。
34. 【請求項３４】 Ｘ^１がトリフルオロメチルである請求項３３に記載の方法
    。
35. 【請求項３５】 Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍが１であり、ｎが１であ
    る請求項３３に記載の方法。
36. 【請求項３６】 投与が腹腔内、皮下、静脈内、経皮、滑液内、筋肉内、ま
    たは経口投与を含む請求項３２に記載の腫瘍成長を抑制する方法。
37. 【請求項３７】 インテグリンと、相互作用を阻害する量の次式で表される
    化合物とを接触させることを含む、宿主細胞中でＭＭＰ２とインテグリンα_ｖβ_３ の相互作用を阻害する方法。 【化１０】 ［式中、Ｇ^１およびＧ^２は、それぞれ独立に、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ^１、−
    ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−
    ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｖ −（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−（Ｃ_６Ｈ_４）−
    Ｘ^１、または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_２−（Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり；Ｙ^１およ
    びＹ^２は、それぞれ独立に、ＯＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４ヒドロキシ
    アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、フェニル、ベンジル、または−ＮＨ_２であり
    ；Ｒ^１はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；Ｘ^１は、ハロ、ニトロ、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキ
    ル、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ、またはＣ_１〜Ｃ_４ペルフルオロアルキルであり；Ｚ
    は、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ_６Ｈ_４−、ｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−、ｃｉｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、ｔｒａｎｓ−ＣＨ_２−ＣＨ＝Ｃ
    Ｈ−ＣＨ_２−、１，４−ナフチル、ｃｉｓ−１，３−シクロヘキシル、ｔｒａｎ
    ｓ−１，３−シクロヘキシル、ｃｉｓ−１，４−シクロヘキシル、またはｔｒａ
    ｎｓ−１，４−シクロヘキシルであり；Ａは、Ｈまたは共有結合であり；ｍおよ
    びｎは、それぞれ独立に０または１の値の整数であり；ｔは、０または１の値の
    整数であり；ｖは、１または２の値の整数であり；ただし、ＡがＨであるとき、
    ｔは０であり；Ａが共有結合であるとき、ｔは１であり；ｍが０であるとき、Ｙ^１ はＣ_１〜Ｃ_４ヒドロキシアルキルであり；ｎが０であるとき、Ｙ^２はＣ_１〜Ｃ_４ ヒドロキシアルキルである。］
38. 【請求項３８】 Ｇ_１およびＧ_２が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｖ−
    （Ｃ_６Ｈ_４）−Ｘ^１であり、Ａが共有結合であり、ｖが１である請求項３７に記
    載の方法。
39. 【請求項３９】 Ｘ^１がトリフルオロメチルである請求項３８に記載の方法
    。
40. 【請求項４０】 Ｙ^１およびＹ^２がＯＨであり、ｍが１であり、ｎが１であ
    る請求項３８に記載の方法。