JP2003527346A - 合成オリゴマンノシド並びにその調製および使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、化学合成により調製されるオリゴマンノシドに関するものである。当該オリゴマンノシドは、酵母，真菌，ウイルス，細菌のような感染性若しくは病原性生物またはその変異体の外膜のオリゴマンノシドに相同である。また本発明は、前記の合成オリゴマンノシドの調製、および、感染を診断または予防するためのそれらの使用に関するものである。

Description

【発明の詳細な説明】

（技術分野） 本発明は、合成オリゴマンノシド、それらの調製及び抗体の検出と感染の予防
におけるそれらの使用に関する。

【０００１】 （発明の開示） すべての真菌と同様に、日和見真菌Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ（カン
ジダアルビカンス）においては、代謝のかなりの部分が、その機構が細胞の環境
への適応を微細に調節する細胞壁多糖類の合成に当てられる。多くのグループが
、カンジダ症の病態生理学におけるＣ．ａｌｂｉｃａｎｓのマンナンの非常な重
要性を確認している。同様に、宿主の体液及び細胞成分とマンナンの様々な相互
作用は、酵母によって合成される一連のオリゴマンノシドに依存する特異性に基
づくことが示された。感染の予後を方向づける相互作用の性質を決定するのは、
マンノース残基の結合のアノマー性（ａｎｏｍｅｒｉｅ）とオリゴマンノシド鎖
の長さである。これらのオリゴマンノシドの生物学的特性と構造、そして言うま
でもなくこれらの感染の診断又は予防方法の開発に関する研究作業は、多大のオ
リゴマンノシドを使用することを必要とする。ところで、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ
菌株からの天然オリゴマンノシドの生成は複雑であり、費用がかかる。糖類の性
質は、培地、温度、酸素付加、培養時間、等々に密接に依存するので、当然なが
ら極めて標準化された条件下で菌株を使用し、保存し、発酵槽で培養することが
重要である。Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの発酵槽での培養には、微生物学の分野にお
ける豊富な経験知識と非常な慎重さが求められる。それに続いて、マンナンのロ
ットを培養から回収し、それらの抗原性について、特に化学的に特徴づけねばな
らない。そのためには、マンナンの解重合と遊離した糖類のＮＭＲ（核磁気共鳴
）による分析が必要である。

【０００２】 これらの天然オリゴマンノシドは、当然ながら、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによる
感染の免疫学的診断試験の調製のために使用される。ところで、マンナン抗原に
よるプレートの感作は、種々の生産ロットに関して、そして適用する量（ｑｕａ
ｎｉｔｉｔｅｅ ｄｅｐｏｓｅｅ）を調節することができないプロトコールに従
って実施される。また多数の試験が、カンジダ症（Ｓｅｎｄｉｄ，Ｂ．ら、１９
９９、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３７（５）：１５１０−７）及びク
ローン病（Ｓｅｎｄｉｄ，Ｂ．ら、１９９６、Ｃｌｉｎ．Ｄｉａｇ．Ｌａｂ．Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ．３（２）：２１９：２６）の診断のために酵母の天然マンナンを
使用する。これらの試験は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ及びＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａ
ｅのマンナン中に存在する一連のオリゴマンノシドの混合物に対する抗体を検出
するものである。

【０００３】 上述したような難点を克服するため、発明者は、天然マンナンに好都合に取っ
て代わることができる、酵母の細胞エンベロープのオリゴマンノシドの類似体、
以下合成オリゴマンノシドと称する、を大量且つ再現可能に化学合成によって生
成するに至った。実際に、これらの合成オリゴマンノシドに関して実施した研究
試験は、それらが、特に抗原性、及び哺乳類の細胞及び分子への接着性、及び細
胞刺激に関して、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの天然糖類の生物学的特性を模倣するこ
とを示した。そこで発明者は、合成オリゴマンノシドが、診断上及び予後におけ
る意味が異なる各々の構造の特異的抗体の検出を目標として、共有結合によるマ
イクロタイトレーションプレートの感作のために成功裏に使用できるこを明らか
にした（Ｊｏｕａｕｌｔ，Ｔ．，１９９７、Ｃｌｉｎ．Ｄｉａｇ．Ｌａｂ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．４（３）：３２８−３３）。

【０００４】 さらに発明者は、これらの合成オリゴマンノシドが、カンジダ症の予防と治療
のためにそれらを使用することを可能にする、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによるコロ
ニー形成の著明な阻害特性を備えることを明らかにした。

【０００５】 本発明は、それ故、感染性又は病原性生物の壁のオリゴマンノシドに相同な、
化学合成によって生成されるオリゴマンノシドを対象とする。より特定すると、
上記生物は、その細胞エンベロープがオリゴマンノシドを含む酵母、真菌、ウイ
ルス、細菌である。細胞エンベロープとは、細胞の膜、壁、莢膜も意味する。本
発明は、中でも特に酵母、明細にはＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ（カンジ
ダアルビカンス）又はＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（ビ
ール酵母菌）に関する。

【０００６】 相同とは、本発明の合成オリゴマンノシドが、酵母、特にＣａｎｄｉｄａ ａ
ｌｂｉｃａｎｓ又はＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの天然
オリゴマンノシドと同じα又はβ結合の連鎖に従ったマンノースの同じモチーフ
（１‐２）、（１‐３）、（１‐６）を備えるが、先行技術で述べられている天
然オリゴマンノシドに不可避に結びつく他の細胞成分、特にたんぱく質、糖類、
脂質を含まないことを意味する。

【０００７】 本発明のオリゴマンノシドの誘導体とは、１個又はそれ以上の官能基が、例え
ば保護基によって置換されているオリゴマンノシド、又はマイクロタイトレーシ
ョンプレートのような保持体への固定のために、コネクターとも称される結合基
に複合されている合成オリゴマンノシドを意味する。

【０００８】 本発明は、より特定すると、次の一般式： ［Ｍａｎα（１‐３）］ｐ［Ｍａｎα（１‐２）］ｑ［Ｍａｎβ（１‐２）］
ｒ（α又はβ）‐Ｍａｎ‐ＯＲ ［式中、 ‐Ｒは、水素原子、Ｃ₁‐Ｃ₂₀、好ましくはＣ₁₅‐Ｃ₂₀アルキル、場合によっ
て、例えば発色団又は蛍光基で標識されたコネクター基、又は後述するように、
オリゴマンノシドを免疫原性にすることができる物質を表わし、 ‐ｐ、ｑ及びｒは０から１９まで、好ましくは０から１１までの整数であって
、ｐ＋ｑ＋ｒの合計が１から１９まで、好ましくは１から１１までであり、 ‐ポリマー［Ｍａｎα（１‐３）］ｐ［Ｍａｎα（１‐２）］ｑ［Ｍａｎβ（
１‐２）］ｒの３つの部分は逆位にする又は反復することができる］ に対応する合成オリゴマンノシドに関する。

【０００９】 上記の合成オリゴマンノシドの中で、本発明は特にテトラマンノシド、明細
には次の合成テトラマンノシドに関する： ・次の式（Ｉ）：

【００１０】

【化７】

【００１１】 ［式中、Ｒは、水素原子、Ｃ₁‐Ｃ₂₀、好ましくはＣ₁₅‐Ｃ₂₀アルキル、又は場
合によって標識されたコネクター基、又はオリゴマンノシドを免疫原性にするこ
とができる物質、又はヒドロキシル基の１個又はそれ以上が置換されているその
誘導体を表わす］ に対応する、下記ではＭβ‐１‐２‐テトラマンノシドとも称される、Ｃ．ａｌ
ｂｉｃａｎｓの、 Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐
Ｍａｎ。

【００１２】 ・次の式（ＩＩ）：

【００１３】

【化８】

【００１４】 ［式中、Ｒは式（Ｉ）と同じ意味を表わす］ に対応する、下記ではＭα‐１‐２‐テトラマンノシドとも称される、Ｃ．ａｌ
ｂｉｃａｎｓの、 Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐
Ｍａｎ。

【００１５】 ・次の式（ＩＩＩ）：

【００１６】

【化９】

【００１７】 ［式中、Ｒは式（Ｉ）と同じ意味を表わす］ に対応する、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの、 Ｄ‐Ｍａｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐
Ｍａｎα（１‐２）。

【００１８】 コネクターを表わすＲ基の存在は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによる感染又は腸の
慢性炎症性疾患、特に後述するようなクローン病の診断のために、被験者におい
てある種のオリゴマンノシドに特異的な抗体の存在を検出するための試験の調製
にとって有用である。

【００１９】 コネクターは、好ましくは共有結合によって、若しくは例えば疎水型の他の何
らかの結合によって、マイクロタイトレーションプレートのような保持体に合成
オリゴマンノシドを結合することができるあらゆる化学基でありうる。共有結合
は、強固で免疫学的分析試験に適合した表面を使用するという利点を提供し、合
成オリゴマンノシドのより良好な方向づけを可能にすると共に、より高密度のエ
ピトープを使用することができ、また抗原性部位が非常にアクセスしやすいため
抗体の認識という問題が回避される。

【００２０】 合成オリゴマンノシドと反応するためにそれ自体が活性化された表面上で結合
のために活性化することができるカルボン酸官能基を備えるコネクターが好まし
い。コネクターの例として、式中、Ｒが式：−ＣＨ₂−（ＣＨ₂）₇−ＣＯ₂Ｈの基
を表わす、Ｒ．Ｕ．Ｌｅｍｉｅｕｘ（Ｌｅｍｉｅｕｘ，Ｒ．Ｕ．ら、１９７５、
Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９７，４０７６−４０８３）のコネクターが挙げ
られる。

【００２１】 保持体の表面で第一アミン基とアミド結合を形成することができる活性エステ
ルを得るため、Ｒ．Ｕ．Ｌｅｍｉｅｕｘのコネクターのような、カルボン酸基を
担うコネクターをカルボジイミドによって活性化することができる。スルホ‐Ｎ
‐ヒドロキシスクシニミド（スルホ‐ＮＨＳ：Ｎ‐ヒドロキシスクシニミド）の
存在下で合成オリゴマンノシドの‐ＣＯＯＨ基を活性化するため水溶性カルボジ
イミド（ＥＤＣ：１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイ
ミド）を使用する。スルホ‐ＮＨＳは活性化された産物の加水分解を有効に阻止
して、‐ＮＨ₂基によって既に感作されたプレートの表面への合成オリゴマンノ
シドの固定を可能にする。

【００２２】 本発明の合成オリゴマンノシドは、好ましくはジブロック（ｄｉｂｌｏｃ）に
よる戦略に従って保護されたジマンノシドの縮合により、保護された単糖類又は
二糖類を縮合することによって調製できる。

【００２３】 本発明に従ったオリゴマンノシドの調製のためのジブロック戦略の１つの好ま
しい実施態様は： ａ）‐２個のブロックのうちの少なくとも１個が、出発官能基によって活性化
される他のジブロックとの縮合に必要なものを除いて、各々の単糖類の遊離ヒド
ロキシル官能基が同じか又は異なる１個又はそれ以上の保護基によって置換され
ている中間ブロックであり、 ‐２個のブロックのうちの少なくとも１個が、他のジブロックとの縮合に必要
なもの及び場合によって保持体へのオリゴマンノシドの固定のための結合基で置
換されているものを除いて、各々の単糖類の遊離ヒドロキシル官能基が同じか又
は異なる１個又はそれ以上の保護基によって置換されている末端ブロックである
ジブロックを調製し、 ｂ）上記ジブロックを縮合し、次いでそのようにして調製したオリゴマンノシ
ドを脱保護する ことから成る。

【００２４】 上記の工程を実施するためのジマンノシドＭａｎα（１‐２）Ｍａｎの例は、
次の式（ＩＶ）：

【００２５】

【化１０】

【００２６】 ［式中、 ‐Ｒは永久保護基である。永久保護基とは、オリゴマンノシドの合成開始時に
導入され、合成終了時に除去される保護基を意味する。そのような永久保護基の
例として、ベンジル基が挙げられる、 ‐Ｒ１は一時保護基である。一時保護基とは、縮合を生じさせるために取り除
かれる保護基を意味する。そのような一時保護基の例として、アセテート基が挙
げられる、 ‐Ｒ２は： 中間ブロックの場合には出発基であり、この場合ブロックはα又はβとしてポ
リマーの残りの部分に結合していてもよい：そのような出発基の例として、−Ｏ
−Ｃ（ＮＨ）−ＣＣＬ₃又はＰｈＳが挙げられる、 末端ブロックの場合には、α又はβとして、アルキル基、ベンジル基、又はコ
ネクター基から選択される基である、 に対応する。

【００２７】 上記の工程を実施するためのジマンノシドＭａｎβ（１‐２）Ｍａｎの例は、
次の式（Ｖ）：

【００２８】

【化１１】

【００２９】 ［式中、 ‐Ｒ１は一時保護基である；そのような一時保護基の例として、テルブチルジ
メチルシリル基が挙げられる、 ‐Ｒ２は： 中間ブロックの場合には出発基であり、この場合ブロックはα又はβとしてポ
リマーの残りの部分に結合していてもよい；そのような出発基の例として、ＳＰ
ｈ又はＳＯＰｈが挙げられる、 末端ブロックの場合には、アルキル基、ベンジル基、又はα又はβとしてコネ
クター基から選択される基である、 に対応する。

【００３０】 上記の工程を実施するためのジマンノシドＭａｎα（１‐３）Ｍａｎの例は、
次の式（ＶＩ）：

【００３１】

【化１２】

【００３２】 ［式中、 ‐Ｒは永久保護基である；そのような永久保護基の例として、ベンジル基が挙
げられる、 ‐Ｒ１は一時保護基である；そのような一時保護基の例として、アセテート基
が挙げられる、 ‐Ｒ２は： 中間ブロックの場合には出発基であり、この場合ブロックはαとしてポリマー
の残りの部分に結合していてもよい；そのような出発基の例として、チオフェニ
ル（ＳＰｈ）基が挙げられる、 末端ブロックの場合には、α又はβとして、アルキル基、ベンジル基、又はコ
ネクター基から選択される基である、 に対応する。

【００３３】 上記のジマンノシドは、本発明のテトラマンノシドの調製のために使用できる
。

【００３４】 式（Ｉ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）
Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎは、式（Ｖ）の２個のブロックＭａｎβ（１
‐２）から調製することができ、そのうちの１個は、Ｒ２が出発基、例えばＲ２
＝−ＳＯＰｈであって、β結合を形成する中間ジブロックであり、他の１個は、
Ｒ２が例えばＳＰｈである末端ジブロックである。

【００３５】 式（ＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２
）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎは、式（ＩＶ）のブロックＭａｎα（１‐
２）Ｍａｎから調製することができ、そのうちの１個は、Ｒ２が出発基である、
例えばＲ２が−Ｃ（ＮＨ）−ＣＣｌ₃を表わす中間ジブロックであり、他の１個
は、Ｒ２が‐ＳＰｈである末端ジブロックである。

【００３６】 式（ＩＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐
２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）は、式（ＶＩ）の１個のジ
ブロックＭａｎα（１‐３）Ｍａｎと式（ＩＶ）の１個のジブロックＭａｎα（
１‐２）Ｍａｎから調製することができ、中間ジブロックは、Ｒ２が出発基であ
る、例えばＲ２が−ＳＰｈである式（ＶＩ）のＭａｎα（１‐３）Ｍａｎであり
、末端ジブロックは、Ｒ２が式（ＩＩＩ）で定義されるＲ基を表わすＭａｎα（
１‐２）Ｍａｎである。

【００３７】 上述したように、本発明の合成オリゴマンノシドは、感染性又は病原性生物、
特にその細胞エンベロープがオリゴマンノシドを含む酵母、真菌、ウイルス、細
菌による感染の存在を患者のサンプルに関してインビトロで検出するために有用
である。そのような方法は、好都合にはあらかじめ保持体上に固定した、上記で
定義した少なくとも１個の合成オリゴマンノシドを、感染性又は病原性生物に対
する抗体を含む可能性がある生物学的サンプルと接触させ、その後何らかの適切
な手段によって抗原‐抗体複合体を検出することから成る。本発明は、特にＣ．
ａｌｂｉｃａｎｓ及びＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅによる感染の診断、又はクロー
ン病の症例において抗Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ抗体の存在を明らかにすること
に関する。

【００３８】 そこで発明者は、式（Ｉ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍ
ａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎ及び式（ＩＩ）のテトラマ
ンノシドＤ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２
）Ｄ‐Ｍａｎが、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによる感染の特異的検出、従ってカンジ
ダ症の診断を可能にすることを明らかにした。

【００３９】 同様に、発明者は、（ＩＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎα（１‐３）Ｄ
‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）が抗Ｓ．
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ抗体の特異的検出を可能にし、クローン病の診断のための
ＡＳＣＡ試験において好都合に利用できることを明らかにした。

【００４０】 発明者はさらに、意外にも式（ＩＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎα（１
‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）
が、ウイルス性肝炎、自己免疫疾患又は炎症性疾患の診断又は予測のためにＡＳ
ＣＡ試験の枠内で使用できることを示した。

【００４１】 それ故本発明は、上述した合成オリゴマンノシドの少なくとも１個を生物学的
サンプルと接触させることを特徴とする、感染性及び／又は炎症性疾患の診断又
は予測のための抗オリゴマンノシド抗体の検出方法を対象とする。

【００４２】 より特定すると、本発明は、上述した合成オリゴマンノシドの少なくとも１個
を生物学的サンプルと接触させることを特徴とする、クローン病又はウイルス性
肝炎の診断のための抗Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ抗体の検出方法に関する。

【００４３】 好都合には、合成オリゴマンノシドは、式（ＩＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐
Ｍａｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎ
α（１‐２）である。

【００４４】 本発明はさらに、感染性又は病原性生物、特にその細胞エンベロープがオリゴ
マンノシド診断するためのキットに関する。そのようなキットは、好都合にはＥ
ＬＩＳＡプレートのような保持体上に固定された、上記で定義した少なくとも１
個の合成オリゴマンノシド、抗原‐抗体複合体の形成を検出するための手段、及
び場合によって対照試薬を備える。

【００４５】 本発明の枠内で実施した研究試験から、上記で定義した合成オリゴマンノシド
が、その膜がオリゴマンノシドを含む感染性又は病原性因子によるコロニー形成
を抑制するために使用できることが発見された。実際に、カンジダ属の酵母は、
宿主の細胞、すなわち膣又は消化管の細胞に接着するために自らの壁の表面の糖
類を利用する。それ故発明者は、特に酵母の糖類が、感染、特にＣ．ａｌｂｉｃ
ａｎｓによって、さらには同じ糖類、例えばＳａｌｍｏｎｅｌｌａ（サルモネラ
属）、Ｅ．ｃｏｌｉ（大腸菌）のＬＰＳを発現する他の微生物によって決定され
る感染から防護することを明らかにするに至った。

【００４６】 より特定すると、発明者は、膣カンジダ症のモデルにおいて、式（Ｉ）のテト
ラマンノシドＤ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１
‐２）Ｄ‐Ｍａｎが、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによるコロニー形成を極めて有意に
低下させることを示した。同様に、式（Ｉ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎβ（
１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎは、Ｃ．ａ
ｌｂｉｃａｎｓによる消化管コロニー形成の実験モデルにおいて強力な防護作用
を示した。

【００４７】 その結果として、本発明は、上述した合成オリゴマンノシド、又は例えば破傷
風トキソイドのような、糖類を免疫原性にすることができる物質に結合した合成
オリゴマンノシドから形成されるコンジュゲート、ならびに前記コンジュゲート
に対して特異的なモノクローナル又はポリクローナル抗体の治療適用に関する。
これらの抗体は、研究ツールとしてのみならず、診断ツールの開発のためにも有
用である。

【００４８】 それ故本発明はまた、組成物において製薬上許容される賦形剤と組み合わせた
、複合した又は複合していない、上記で定義した少なくとも１個の合成オリゴマ
ンノシドを有効成分として備える製薬組成物に関する。これらの製薬組成物は、
認められる感染の種類に応じて、コロニー形成の抑制又は局所又は全身性免疫に
よる防護をもたらすように、局所的又は全身的に適用することができる。

【００４９】 本発明は、より明細には、Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ
‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎ殻形成されるコンジュゲートを考慮する。

【００５０】 また意外にも、発明者は、特にＣ．ａｌｂｉｃａｎｓによる腸コロニー形成の
症例及び膣カンジダ症の症例において、非複合オリゴマンノシドの阻害特性を明
らかにした。

【００５１】 本発明の他の利点及び特徴は、本発明のオリゴマンノシドの調製、及び感染の
診断、予防及び治療のためのそれらの使用に関する下記の実施例において明らか
になるであろう。下記の実施例においては、次のような添付の図面を参照する。

【００５２】 （発明を実施するための最良の形態） （実施例１）式（Ｉ）のＤ−Ｍａｎβ（１−２）Ｄ−Ｍａｎβ（１−２）Ｄ−
Ｍａｎβ（１−２）Ｄ−Ｍａｎ Ｉ−反応図について 添付資料の図１は、式（１）のＤ−Ｍａｎ β(１−２)Ｄ−Ｍａｎ β(１−２)
Ｄ−Ｍａｎ β(１−２) Ｄ−Ｍａｎの調製の反応図を表す。

【００５３】 −式１化合物（Stutz, A.ら、１９８５年、Carbohydr.Res. 第１３７号，第２
８２−２９０頁）は、ＨＢＦ₄Ｅｔ₂Ｏの存在下に、ＤＭＦ中におけるフェニル
１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド（Maity, S.K.ら、１９９４年、Tetrahedr
on， 第５０号，第６９６５−６９７４頁）に対するＰｈＣＨ(ＯＭｅ)₂の反応に
より調製される。選択的ベンジル化により化合物２が産生される。この化合物２
は、シリル化および酸化されて化合物４になる。

【００５４】 反応（ａ）は次の条件で行われる。すなわち、ＢｎＢｒ、Ｂｕ₂ＳｎＯ、ＮＢ
ｕ₄Ｂｒ、トルエン、１１０℃。

【００５５】 反応（ｂ）は次の条件で行われる。すなわち、ＴＢＤＭＳＯＴｆ、Ｅｔ₃Ｎ、
ＣＨ₂Ｃｌ₂。

【００５６】 反応（ｃ）は次の条件で行われる。すなわち、ＭＣＰＢＡ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、−４
０℃。

【００５７】 チオフェニルを含むジサッカリドおよびテトラサッカリドは、まず化合物２お
よび４を縮合して調製される。２と４との縮合によりジサッカリド５となり、こ
れはスルホキシドにより活性化されて化合物７に、または位置２’の保護が除去
されて、受容体６となる。化合物６および７を縮合すると重要なテトラサッカリ
ド８ができる。

【００５８】 反応（ｄ）は次の条件で行われる。すなわち、Ｔｆ₂Ｏ、２,６−ジテルブチル
−ピリジンまたは２,６−ジテルブチル−４−メチルピリジン（ＤＢＭＰ）、Ｃ
Ｈ₂Ｃｌ₂、−７８℃。

【００５９】 反応（ｅ）は次の条件で行われる。すなわち、ｂ）ＮＢｕ₄Ｆ・３Ｈ₂Ｏ、ＴＨ
Ｆ。

【００６０】 反応（ｆ）は次の条件で行われる。すなわち、ＭＣＰＢＡ、−４０℃、ＣＨ₂
Ｃｌ₂。

【００６１】 反応（ｇ）は次の条件で行われる。すなわち、Ｔｆ₂Ｏ、ＤＢＭＰ、ＣＨ₂Ｃｌ ₂ 、−０℃。

【００６２】 ８−メトキシカルボニルオクタノルはコネクターとして選択されている。これ
はＬｅｍｉｅｕｘ（Ｌｅｍｉｅｕｘ，Ｒ．Ｕ．ら、１９７５，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅ
ｍ．Ｓｏｃ．，９７，４０７６−４０８３）に従って、アゼライン酸から、また
はより良くはオレイン酸メチルのオゾン分解および、ＮａＢＨ₄により形成され
たアルデヒドのｉｎ ｓｉｔｕで還元により調製されてもよい（Ｇｅｒｌａｃｈ
、Ｈ．ら、１９７８，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，６１，１２２６−１２３
１）。

【００６３】 この化合物８は次に、ＮＢＳの存在下の水との反応である、ＮＢｕ₄ＮＦによ
るシリルの除去によって９に変換され、式（Ｉ）（式中、Ｒはベンジルおよびベ
ンジリデンの脱保護によるＨである）に変換される。

【００６４】 化合物８の８−メトキシカルボニルオクタノルとのクリコシル化により化合物
１０となり、脱保護の後、式（Ｉ）（式中、Ｒは−（ＣＨ₂）₆−ＣＯ₂Ｍｅであ
る）テトラマンノシドになる。

【００６５】 反応（ｈ）は次の条件で行われる。すなわち、ＮＢｕ₄Ｆ．３Ｈ₂Ｏ、ＴＨＦ、
次いでＮＢＳ、Ｈ₂Ｏ、アセトン。

【００６６】 反応（ｉ）は次の条件で行われる。すなわち、ＮＢＳ、ＴｆＯＨ、８−メトキ
シカルボニルオクチノル、４オングストロームモレキュラーシーブ、ＣＨ₂Ｃｌ₂ 。

【００６７】 反応（ｊ）は次の条件で行われる。すなわち、Ｈ₂、Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ、Ａ
ｃＯＥｔ。

【００６８】 反応（ｋ）は次の条件で行われる。すなわち、１−ＮＢｕ₄ＮＦ．３Ｈ₂Ｏ、Ｔ
ＨＦ、２−Ｈ₂、Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ、ＡｃＯＥｔ、３−ＮａＯＨ、ＴＨＦ、Ｈ₂ Ｏ。

【００６９】 ＩＩ−実験実施要領 １）概論 溶解点をＢｕｃｈｉ５１０毛細管装置で測定し、修正は行わなかった。 旋光能を、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ２４１偏光計により室温で測定した。化学
イオン化法（アンモニア）における質量スペクトルはＮｅｒｍａｇＲ１０−１０
により得られた。実験分析は、ピエールおよびマリー・キュリー大学（パリ６区
）のマイクロ分析機関により行われた。プロトンのスペクトルＲＭＮが、重水化
されたクロロホルム内の溶液状態において、２５０または４００ＭＨｚのＢｒｕ
ｋｅｒ装置で記録された。化学移動がＴＭＳに対してｐｐｍで示され、使用され
た略語は次の通りである。ｓ（一電子結合）、ｓｅ（拡大一電子結合）、ｄ（二
電子結合）、ｄｅ（拡大二電子結合）、ｔ（三電子結合）、ｑ（四電子結合）、
ｍ（多電子結合）、ｂｙ（ベンジリデン）。薄層クロマトグラフィーがシリカプ
レートＭｅｒｃｋ６０ Ｆ２５４上で行われ、濃縮された硫酸アルコール溶液（
２０％ｖ／ｖ）の気化および加熱により顕現された。カラムクロマトグラフィー
（ｆｌａｓｈ）はシリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ、Ｍｅｒｃｋ）に対
して行われた。

【００７０】 １）フェニル３−ｏ−ベンジル−４，６−ｏ−ベンジリデン−１−チオ−α−
Ｄ−マンノピラノシド（２） この化合物は次の文献、Ｚ Ｓｚｕｒｍａｉ．Ｂａｌａｔｏｎｉ，Ａ．Ｌｉｐ
ｔａｋ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２５４（１９９４）３０１−３０９およ
びＴ Ｏｓｈｉｔａｒｉ、Ｓ Ｋｏｂａｙａｓｉ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌ
ｅｔｔ（１９９５）１０８９−９２に記載されている。下記の記述は、大量な場
合に使用可能な合成に関する（二つの異なる溶媒に関する二つの異なる方法）。

【００７１】

【化１３】

【００７２】 −方法１（溶媒はトルエンである） 無水トルエン２９５ｍＬ中における１の溶液（公知の化合物、すなわち有利に
はＲ．Ａｌｂｅｒｔ、Ｋ Ｄａｘ、Ｒ．Ｐｌｅｓｃｈｋｏ、Ａ Ｓｔｕｔｚ，Ｃ
ａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１３７（１９８５）２８２−２９０）により調製さ
れたＨ Ｆｒａｎｚｙｋ，Ｍ Ｍｅｄａｌ，Ｈ Ｐａｕｌｓｅｎ，Ｋ Ｂｏｃｋ
Ｊ．Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ Ｉ，（１９９５）２８８
３−９８）（１０ｇ、２８ｍｍｏｌ）に、酸化ジブチルスズ７．５９ｇを加える
。混合物を、Ｄｅａｎ Ｓｔａｒｋ装置でトルエンの還流に一晩かける。ヨウ化
テトラブチルアンモニウム（６．５９ｇ）、次いで臭化ベンジル４．３ｍＬ）を
加える。還流下に撹拌を３時間行い、室温に戻した後（シクロヘキサン／酢酸エ
チル＝３／１のコントロール）、真空下に混合物を濃縮する。得られた残滓をカ
ラムクロマトグラフィーにより精製して（溶離、シクロヘキサン／酢酸エチル＝
４／１）、生成物２（１１ｇ、８９％）を得る。

【００７３】 −方法２（溶媒はアセトニトリル） 丸底フラスコに化合物１（９．０５ｇ、２５．１１ｍｍｏｌ）および無水アセ
トニトリル４５０ｍＬを導入する。アルゴン下にＣＨ₃ＣＮの還流にかけて加熱
する（化合物１は加熱されたアセトニトリル中に溶解する）。溶液が透明になっ
たら、粉末状の４Åモレキュラーシーブ２３．５３ｇ、Ｂｕ₂ＳｎＯ７．５１ｇ
を添加し、６時間還流にかける。そのまま放置して室温に戻す。ＮＢｕ₄Ｎ＋Ｂ
ｒ^-８．１０ｇ（１等量）、臭化ベンジル６．３ｍＬ（２．３等量）を加え、４
５℃で一晩撹拌する。セライトで被覆された焼結漏斗により濾過して、固体をジ
クロロメタンで濯いで、真空下に濃縮する。得られた残滓をカラムクロマトグラ
フィー（溶離、シクロヘキサン／酢酸エチル＝３／１）により精製して、生成物
２（１０．２ｇ、９０％）を得る。

【００７４】 ¹H-RMN : (250MHz,CDCl₃) : δ : ？5.55(s,1H,By); 5.52 (s,1H,H-1); 4.82(
d,1H, J gem=11.79Hz, CHPh); 4.67(d,1H,J gem=11.75Hz, CHPh); 4.27(ddd,1H,
H-5); 4.21(d,1H, J 2-3=3.54Hz,H-2); 4.14(dd,1H,J 6a-6b=9.73Hz and J 6a-5
=4.80Hz,H-6a); 4.11(t,1H,H-4); 3.89(dd,1H,J 3-4=9.50Hz and J 3-2=3.37Hz,
H-3); 3.78(t,1H, J 6b-5=10.18Hz and J 6b-5=10.18Hz,H-6b); 2.79(s,1H,O-H)
。

【００７５】 ２）フェニル２−０−tert−ブチルジメチルシリル−３−ベンジル−４，６−
ベンジリデン−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド（３）

【００７６】

【化１４】

【００７７】 アルゴンの雰囲気下に、丸底フラスコ内に化合物２（５．５１ｇ、１２．２３
ｍｍｏｌ）および無水ジクロロメタン５５ｍＬを導入する。撹拌下にトリエチル
アミン５．３ｍＬ（３．１等量）、三フタル酸第三（テル）ブチルジメチルシリ
ル４．６５ｍＬ（１．６５等量）を添加する。室温で一晩撹拌する。ＣＣＭ（溶
離、シクロヘキサン／酢酸エチル＝３／１）により反応の進捗状態を調整する）
。ＮａＨＣＯ₃水性溶液により中和する。有機相をカラムクロマトグラフィーに
より濃縮して、残滓を得、これをカラムクロマトグラフィー（溶離、シクロヘキ
サン／酢酸エチル＝３／１）により精製して、生成物３（６．２ｇ、９０％）を
産出する。参考、（シクロヘキサン／ＡｃＯＥｔ＝９６／４）：０．４３。［α
］_D＝＋１２２（ｃ１．２、ＣＨＣｌ₃） ¹H-RMN (250MHz,CDCl₃) : δ : 5.55(s,1H,By); 5.24(d,1H,J1-2=1.4Hz,H-1);
4.69(dd,2H,CHPh); 4.26-4.08(massif,4H); 3.83-3.65(massif,2H); 0.81(s,9H
,Si-tBu); 0.00(s,3H,Si-Me); -0.4(s,3H,Si-Me). Analyse pour C₃₂H₄₀O₅SSi(564.821) : 計算値 C:68.04 H:7.14 実測値 C:68.
15 H:7.27。

【００７８】 ３）フェニル（２−０−tert−ブチルジメチルシリル−３−Ｏ−ベンジル−４
．６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−マンノピラノシド）スルホキシド（４）

【００７９】

【化１５】

【００８０】 アルゴンの雰囲気下に、丸底フラスコ内に、化合物３（６．２ｇ、１０．９７
ｍｍｏｌ）および無水アセトニトリル１２５ｍＬを導入する。−７８℃に冷却し
た丸底フラスコ内に、３−クロロ過ベンゾイル酸（１２．０６ｍｍｏｌ）をジク
ロロメタン２６ｍＬ中の溶液として添加する。−７８℃を５分間維持して、次い
でゆっくりと−３０℃に戻す。過剰の過酸を除去するために、（ＣＨ₃）₂Ｓを添
加する。ＮａＨＣＯ₃の飽和溶液で中和して、ＮａＣｌの飽和溶液で洗浄し、ジ
クロロメタンにより水性相を抽出する。有機相を乾燥し（ＮｇＳＯ₄）、濾過し
て、濃縮する。残滓を得て、カラムクロマトグラフィー（溶離、シクロヘキサン
／酢酸エチル＝５／１）により精製して、化合物４（５．０４ｇ、７９％大半が
ジアステレオイソメール）を精製する。クロマトグラフィー時に、ごく僅かな別
のジアステレオイソメール（＜５％）を回収する。

【００８１】 大半イソメールの特徴：［α］_D＝−６７（ｃ１．０、ＣＨＣｌ₃） 1H-RMN : (400MHz,CDCl3) : 7,70-7,20(m,15H,arom); 5.69(s,1H,By); 4.93 a
nd 4;82(2d,2H,CHPh); 4.73(dd,1H,J1,2=1,2,J2,3 2.3Hz,H-2); 4.39(d,1H,H-1)
; 4.30(dd,1H,J3,4=9,9;J4,5 9,9Hz;H-4); 4.28(dd,1H,H-3); 4.26(dd, 1H, J6a
,6b 10.3; J6b,5=5,8Hz, H-6b); 4.14( ddd, 1H, J5,6a=120,1Hz, H-5); 3.79(d
d, 1H, H-6a); 0.88 (s, 9H, tBu); 0.072 and -0.046 ( 2s, 6H, MeSi); 質量スペクトル：ｍ／ｚ５９８（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺。

【００８２】 Ｃ₃₂Ｈ₄₀Ｏ₆ＳＳｉ（５６４．８２１）に対する分析：計算値Ｃ：６６．１７
Ｈ：６．９４実測値Ｃ：６６，３０ Ｈ：７．０６。

【００８３】 ４）フェニル ２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ ２−Ｏ−ｔｅｒｔ
ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，
６−Ｏ−ベンジリデン−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド（５）．

【００８４】

【化１６】

【００８５】 ４を７．１ｇ（１２．２２ｍｍｏｌ、１等量）および２．６−ジｔｅｒｔ−ブ
チルピリジンを９．０６ｍＬ（４０．３ｍｍｏｌ、３．３等量）を、無水ジクロ
ロメタン２００ｍＬ中に溶解し、アルゴンの雰囲気下に置く。溶液を−７８℃に
冷却した後、トリフルオロメタンスルホン酸を２．２７ｍＬ（１３．４４ｍｍｏ
ｌ、１．１等量）を添加する。−７８℃で５分間撹拌した後、無水ジクロロメタ
ン１００ｍＬ中であらかじめ希釈した２を１１ｇ（２４．４ｍｍｏｌ、２等量）
、一滴ずつ添加する。温度を−７８℃で１時間維持し、ゆっくりと０℃に上昇す
るまで放置する。次に反応媒質を炭酸水素ナトリウム溶液で中和する。さらに有
機相をＮａＣｌ水性により洗浄して、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空下に濾
過、気化を行う。未処理物のシルカゲル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘ
キサン／酢酸エチル＝９６／４）により、白い泡状の５（７．９７ｇ、７２％）
を得ることができる。ｐｆ：８１−８３℃（ヘキサン）；［α］_D ＋１２．５
（ｃ １．０２，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.58-7.34(m, 25H, arom.), 5.66 and 5.65
(2s, 2H, by), 5.56(d, 1H, J 1-2=1Hz, H-1A), 4.85(2d, 2H, J gem=12Hz, CH
Ph), 4.8(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.75(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.53(d
d, 1H, J 2-1=1Hz and J 2-3=3.3Hz, H-2A), 4.52(se, 1H, H-1B), 4.45-4.4(m,
1H, H-5A), 4.37(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.5Hz, H-4A), 4.31(dd, 1H, J 6b-6a=1
0Hz and J 6b-5=4.3Hz, H-6Ab), 4.26(dd, 1H, J 6b-6a=10.3Hz and J 6b-5=4.8
Hz, H-6Bb), 4.21(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.5Hz, H-4B), 4.19(de, 1H, J 2-3=2.7
Hz, H-2B), 4(dd, 1H, J 3-2=2.7Hz and J 3-4=9.5Hz, H-3A), 3.91(t, 1H, J 6
a-6b=J 6a-5=10Hz, H-6Aa), 3.84(t, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.2Hz, H-6Ba), 3.5
9(dd, 1H, J 3-2=2.7Hz and J 3-4=9.5Hz, H-3B), 3.35(dt, 1H, J 5-4=J 5-6a=
10.2Hz and J 5-6=4.8Hz, H-5B), 1.0(s, 9H, SiC(CH3)3), 0,30 and 0,23(2s,
6H, Si(CH3)2). 13C R.M.N. (100 MHz) : 138.55, 138.3, 137.5, 137.4, 133.6(5 C arom.), 1
31.8-126.06(25 CH arom), 101.6(CH by), 101.4(CH by), 99.8(1JCH=157Hz, C-
1B), 86.7(1JCH=166Hz, C-1A), 78.7(C-4B), 78.2(C-4A), 77.5(C-3B), 76.4(C-
2A), 74(C-3A), 72.2(CH2Ph), 71.7(C-2B), 70.7(CH2Ph), 68.5(C-6B), 68.47(C
-6A), 67.7(C-5B), 65.2(C-5A), 26(C(CH3)3), 18.5(C(CH3)3), -4(SiCH3), -4.
5(SiCH3)． 質量スペクトル：ｍ／ｚ ９２２（Ｍ＋ＮＨ４）⁺。

【００８６】 Ｃ₅₂Ｈ₆₀Ｏ₁₀ＳＳｉ （９０５．１９９）についての分析：計算値 Ｃ：６８
．９９ Ｈ：６．６８ 実測値 Ｃ：６８．８２ Ｈ：６．６９。

【００８７】 ５） フェニル ２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−
β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−
１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド（６）。

【００８８】

【化１７】

【００８９】 生成物５を３．８ｇ（４．２ｍｍｏｌ、１等量）およびフッ化テトラブチルア
ンモニウム三水和物を６．６ｇ（２１ｍｍｏｌ、５等量）を、テトラヒドロフラ
ン６０ｍＬ中に溶解する。室温に１時間放置した後、媒質をジクロロメタンによ
り希釈し、有機相を水で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧
下に濾過、気化する。シリカゲル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン
／酢酸エチル＝３／１）により、白い粉末状の６（３．０ｇ、９０％）を得る。
ｐｆ：７９−８１℃（ヘキサン）；［α］_D ＋３０（ｃ ０．３３，クロロホ
ルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.54-7.30(m, 25H, arom.), 5.59 and 5.51
(2s, 2H, by), 5.54(d, 1H, J 1-2=1Hz, H-1A), 4.89 (d, 1H, J gem=12.2Hz, C
HPh), 4.86 (d, 1H, J gem=11.8Hz, CHPh), 4.82 (d, 1H, J gem=11.8Hz, CHPh)
, 4.8 (d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.77 (d, 1H, J 1-2=0.8Hz, H-1B), 4.66
(dd, 1H, J 2-1=1Hz and J 2-3=3.3Hz, H-2A), 4.33 (dt, 1H,J 5-4=9.7Hz and
J 5-6a=J 5-6b=4.9Hz, H-5A), 4.32 (t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.3Hz, H-4B), 4.26
(dd, 1H, J 6b-6a=10.5Hz and J 6b-5=4.9Hz, H-6Bb), 4.3 (dd, 1H, J 6b-6a=
10Hz and J 6b-5=5Hz, H-6Ab), 4.24 (t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.7Hz, H-4A), 4.19
(de, 1H, J 2-3=3.9Hz, H-2B), 4.04 (dd, 1H, J 3-2=3.3Hz and J 3-4=9.7Hz,
H-3A), 3.8 (m, 2H, H-6Aa and H-6Ba), 3.72 (dd, 1H, J 3-2=3.9Hz and J 3-
4=9.2Hz, H-3B), 3.43 (dt, 1H, J 5-4=J 5-6a=9.5Hz and J 5-6b=4.9Hz, H-5B)
, 3.2 (br, 1H, OH). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 138, 137.8, 137.3, 137.29, 131.7 (5 C arom.),
129.2-1 27.7 (25 CH arom), 101.4 (CH by), 101.2 (CH by), 97.4 (1JCH=163Hz, C-1B)
, 86.4 (1JCH=167Hz, C-1A), 78.5 (C-4A), 78.4 (C-4B), 76.1 (C-3B), 74.4 (
C-3A), 74.35 (C-2A), 72.4 (CH2Ph), 72.3 (CH2Ph), 69.4 (C-2B), 68.5 (C-6B
), 68.25 (C-6A), 66.8 (C-5B), 65.2 (C-5A). 質量スペクトル:m/z 808(M+NH4)⁺。

【００９０】 Ｃ₄₆Ｈ₄₆Ｏ₁₀Ｓ （７９０．９３）についての分析：計算値 Ｃ：６９．８５
Ｈ：５．８６ 実測値 Ｃ：６９．７６ Ｈ：６．０１。

【００９１】 ６）フェニル［２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２
−Ｏ−ｔｅｒｔブチルジメチルシリル−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−
ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン α−Ｄ−マンノピラノシル］スルホキシ
ド（７）。

【００９２】

【化１８】

【００９３】 ５を３．０ｇ（３．３１ｍｍｏｌ、１等量）を無水ジクロロメタン４０ｍＬ中
に溶解する。反応媒質を−７８℃に冷却した後、ジクロロメタン１５ｍＬ中にあ
らかじめ溶解した３−クロロペロキシ安息香酸０．９７ｇ（５．５．ｍｍｏｌ、
１．７等量）をカニューレにより添加する。−７８℃で１５分間撹拌した後、温
度が３０℃に上がるまで放置して、ジメチル硫化物を数滴添加する。有機相を炭
酸水素ナトリウム溶液、水性Ｎａｃｌ溶液で洗浄し、真空下に濾過、気化を行う
。未処理物のシルカゲル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エ
チル＝３／１）により、白い泡状の第１ジアステレオマーを２．８ｇ（９１％）
、およびやはり白い泡状の第２ジアステレオマーを７１ｍｇ（２％）得る。

【００９４】 大半ジアステレオマーの特徴、ｐｆ：８９−９１℃（ヘキサン）；［α］_D−
９９（ｃ １，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.65-7.4(m, 25H, arom.), 5.63 and 5.62(
2s, 2H, by), 4.89(1d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.85(d, 1H, J gem=12.4Hz, C
HPh), 4.81(dd, 1H, J 2-1=1.1Hz and J 2-3=3.4Hz, H-2A), 4.78(d, 1H, J gem
=12.4Hz, CHPh), 4.76(1d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.42(d, 1H, J 1-2=1.1Hz,
H-1A), 4.37(t, 1H, J 4-3=J 4-5=10.1Hz, H-4A), 4.33(dd, 1H, J 3-2=3.4Hz
and J 3-4=10.1Hz, H-3A), 4.28(dd, 1H, J 6b-6a=10.2Hz and J 6b-5=4.8Hz, H
-6Ab), 4.26(se, 1H, H-1B), 4.18-4.10(m, 3H, H-5A, H-6Bb and H-4B), 4.08(
de, 1H, J 2-3=2.8Hz, H-2B), 3.75(t, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.1Hz, H-6Aa), 3
.74(dd, 1H, J 6b-6a=J 6b-5=10.2Hz, H-6Ba), 3.52(dd, 1H, J 3-2=2.8Hz and
J 3-4=9.7Hz, H-3B), 3.18(dt, 1H, J 5-4=J 5-6a=9.8Hz and J 5-6=4.8Hz, H-5
B), 1(s, 9H, SiC(CH3)3), 0.22 and 0.17(2s, 6H, Si(CH3)2). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 141.3, 138.4, 138.3, 137.5, 137(5 C arom), 13
1.8-124.3(25 CH arom), 101.7(CH by), 101.4(CH by), 99.8(1JCH=156Hz, C-1B
), 97.5(1JCH=163Hz, C-1A), 78.7(C-4B), 77.5(C-3B), 77.1(C-4A), 74.2(C-3A
), 72.4(CH2Ph), 71.7(C-2B), 71.4(C-2A), 70.9(CH2Ph), 70.1(C-5A), 68.4(C-
6B), 68.1(C-6A), 67.5(C-5B), 26(C(CH3)3), 18.5(C(CH3)3), -4(SiCH3), -4.5
(SiCH3). Ｃ₄₆Ｈ₄₆Ｏ₁₀Ｓ（９２１．１９８）についての分析：計算値Ｃ ：６７．８
Ｈ：６．５６ 実測値 Ｃ：６７．６８ Ｈ：６．９０。

【００９５】 ７）フェニル ２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−
Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−ｔｅｒｔブチルジメチルシリル−β−Ｄ−マンノピ
ラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−マンノピ
ラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−マンノピ
ラノシル）−３−Ｏ−ベンジル４，６−Ｏ−ベンジリデン−１−チオ−α−Ｄ−
マンノピラノシド（８）。

【００９６】

【化１９】

【００９７】 実験実施要領は、ジサッカリド５の合成要領に同じである。６（１．１４０ｇ
、２等量）および７（０．６６４ｇ、１等量）から、シルカゲル上クロマトグラ
フィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝８５／１５）後に、白い泡状の化
合物８（５８０ｍｇ、５５％）を得る。ｐｆ：１１１−１１４℃（ヘキサン）；
［α］_D −５３．５（ｃ ０．６，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.5-7.15(m, 45H, arom.), 5.615*2, 5.61
and 5.6(4s, 4H, by), 5.53(d, 1H, J 1-2=1.1Hz, H-1A), 5.35(se, 1H, H-1B),
5.03(se, 1H, H-1C), 4.82(d, 1H, J gem=12.8Hz, CHPh), 4.76(s, 2H, CH2Ph)
, 4.73(d, 1H, J gem=12.8Hz, CHPh), 4.72(se, 1H, H-1D), 4.72(d, 1H, J gem
=11.6Hz, CHPh), 4.67(d, 1H, J gem=17.7Hz, CHPh), 4.57(d, 1H, J gem=11.6H
z, CHPh), 4.58-4.57(m, 1H, H-2A), 4.57(de, 1H, J 2-3=3.2Hz, H-2B), 4.57(
2de, 2H, J 2-3=3.2Hz, H-2C and H-2D), 4.42-4.37(m, 1H, H-5A), 4.39-4.35(
m, 2H, H-6Db and H-6Bb), 4.38(d, 1H, J gem=11.7Hz, CHPh), 4.29(dd, 1H, J
6b-6a=10.2 and J 6b-5=4.8Hz, H-6Ab), 4.24(dd, 1H, J 4-3=10 and J 4-5=9.
6Hz, H-4B), 4.16(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.7Hz, H-4C), 4.13(dd, 1H, J 6b-6a=1
0.2 and J 6b-5=4.7Hz, H-6Cb), 4.05(t, 1H, J 4-3=J 4-5=10Hz, H-4A), 4.02(
t, 1H, J 4-3=J 4-5=10Hz, H-4D), 4.05-4.02(m, 1H, H-3A), 4(t, 1H, J 6a-6b
=J 6a-5=10.3Hz, H-6Ba), 3.89(t, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.2Hz, H-6Da), 3.8(t
, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.2Hz, H-6Aa), 3.79(t, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.2Hz,
H-6Ca), 3.69(dd, 1H, J 3-2=3.2Hz and J 3-4=9.9Hz, H-3D), 3.58(dd, 1H, J
3-2=2.7Hz and J 3-4=9.7Hz, H-3C), 3.55(dd, 1H, J 3-2=3.2Hz and J 3-4=10H
z, H-3B), 3.49(ddd, 1H, J 5-4=9.6Hz and J 5-6b=10.3Hz and J 5-6a=4.8Hz,
H-5B), 3.42(ddd, 1H, J 5-4=9.8Hz and J 5-6b=4.8Hz and J 5-6a=10.2Hz, H-5
D), 3.31(ddd, 1H, J 5-4=9.7Hz and J 5-6b=4.75Hz and J 5-6a=10.1Hz, H-5D)
, 0.95(s, 9H, SiC(CH3)3), 0.25 and 0.14(2s, 6H, Si(CH3)2). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 138.6, 138.4, 138.1, 138, 137.7, 137.4, 136.
95, 136.93, 133.2(9 C arom), 131.65-126(45 CH arom), 103.1(1JCH=159Hz, C
-1C), 102.05(CH by), 102.02(CH by), 101.6(CH by), 101.2(CH by), 101.19(1
JCH=158.5Hz, C-1B), 99(1JCH=167Hz, C-1A), 85.4(1JCH=159.2Hz, C-1D), 79.7
(C-3C), 79.05(C-4C), 78.9(C-4A), 78.5(C-4D), 77.6(C-4B), 76.9(C-3B), 75.
8(C-3D), 75.3(C-2B), 75.2(C-2A), 74.4(C-3A), 73.1(C-2C or C-2D), 72.8(CH
2Ph), 71.9(CH2Ph), 71.2(C-2C or C-2D), 70.9(CH2Ph), 70.1(CH2Ph), 68.8(C-
6A), 68.7(C-6D and C-6B), 68.5(C-6C), 68.1(C-5B), 67.8(C-5C), 67.7(C-5D)
, 65.1(C-5A), 26.1(C(CH3)3), 18.5(C(CH3)3), -3.7(SiCH3), -4.7(SiCH3)． 質量スペクトル：ｍ／ｚ １６０２（Ｍ＋ＮＨ４）⁺。 Ｃ₉₂Ｈ₁₀₀Ｏ₂₀ＳＳｉ （１５８５．９５６）についての分析：計算値 Ｃ：６
９．６７ Ｈ：６．３５ 実測値 Ｃ：６９．５７ Ｈ：６．４１。

【００９８】 ８）８−メトキシカルボニルオクチル ２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−
Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−ｔｅｒｔブチルジメチルシ
リル−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリ
デン−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリ
デン−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリ
デン−Ｄ−マンノピラノシド（１０）。

【００９９】

【化２０】

【０１００】 ８を５６２ｍｇ（３５４μｍｏｌ、１等量）およびメトキシダルボニルオクタ
ン（Ｈ．Ｇｅｒｌａｃｈ，Ｐ．Ｋuｎｚｌｅｒ，Ｋ．Ｏｅｒｔｌｅ，Ｈｅｌｖ
Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，６１（１９７８），１２２６−１２３１．に従って調製）
を１６６ｍｇ（８８５μｍｏｌ、２．５等量）および粉末状の４Åモレキュラー
シーブを７００ｍｇを、無水ジクロロメタン１０ｍＬ中に懸濁する。全体をアル
ゴンの雰囲気下に置き、３０分間撹拌する。溶液を−２０℃まで冷却し、Ｎ−ブ
ロモサクシンイミド１２６ｍｇ（７０９μｍｏｌ、２等量）およびトリフルオロ
メタンスルホン酸６．３μＬ（７．０８μｍｏｌ、０．２等量）をそこへ加える
。−２０℃で１時間放置した後、炭酸水素ナトリウム溶液を添加する。全体をセ
ライト床上で濾過する。有機相をチオ硫酸ナトリウム溶液および水性ＮａＣｌ溶
液で洗浄する。次にこれを硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空下に濾過、気化す
る。未処理物をシルカゲル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸
エチル＝３．５／１）にかけ、白い泡状の分離不可能な化合物１０（α／β＝１
／６）を４１２ｇ（７０％）得る。

【０１０１】 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) du produit β-O-connecteur : δ7.48-7.16(m,
40H, arom.), 5.64, 5.62 and 5.6, 5.34(4s, 4H, by), 5.34(s, 1H, H-1A), 5.
16(s, 1H, H-1B), 4.86(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.84(s, 1H, H-1C), 4.8
2(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.79(d, 1H, J gem=12.4Hz, CHPh), 4.74(d, 1H,
J 2-3=3.2Hz, H-2C), 4.73(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.68(d, 1H, J gem=12
.3Hz, CHPh), 4.67(d, 1H, J gem=11.8Hz, CHPh), 4.65(d, 1H, J 2-3=3.4Hz, H
-2A), 4.63(d, 1H, J gem=12.4Hz, CHPh), 4.56(d, 1H, J gem=11.8Hz, CHPh),
4.51(d, 1H, J 2-3=3.2Hz, H-2B), 4.47(s, 1H, H-1D), 4.41(dd, 1H, J 6b-6a=
10.4Hz and J 6b-5=4.8Hz, H-6Cb), 4.36(dd, 1H, J 6b-6a=10.3Hz and J 6b-5=
4.8Hz, H-6Ab), 4.32(dd, 1H, J 6b-6a=10.3Hz and J 6b-5=4.5Hz, H-6Db), 4.2
8(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.6Hz, H-4A), 4.23(dd, 1H, J 6b-6a=10.4Hz and J 6b-
5=4.6Hz, H-6Bb), 4.21(d, 1H, J 2-3=3.15Hz, H-2D), 4.17(t, 1H, J 4-3=J 4-
5=9.3Hz, H-4B), 4.01(t, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.3Hz, H-6Aa), 3.99(t, 1H, J
4-3=J 4-5=9.5Hz, H-4C), 3.91(t, 1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.4Hz, H-6Ca), 3.95
-3.88(m, 1H, -O-CH-CH2-), 3.88(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.8Hz, H-4D), 3.85(t,
1H, J 6a-6b=J 6a-5=10.4Hz, H-6Ba), 3.69(s, 3H, -C:O-OCH3), 3.64(dd, 1H,
J 3-2=3.2Hz and J 3-4=9.5Hz, H-3C), 3.6(dd, 1H, J 3-2=3.4Hz and J 3-4=9.
6Hz, H-3A), 3.59(dd, 1H, J 3-2=3.15Hz and J 3-4=9.8Hz, H-3D), 3.60-3.57(
m, 1H, H-6Da), 3.54(dd, 1H, J 3-2=3.2Hz and J 3-4=9.3Hz, H-3B), 3.5-3.27
(m, 5H, H-5A, H-5B, H-5C, H-5D and -O-CH-CH2-), 2.31(t, 2H, J 3-2=7.5Hz,
-CH2C:O-OCH3),1.64-1.58, 1.34-1.31(m, 12H, -CH2-), 0.94(s, 9H, SiC(CH3)
3), 0.25 and 0.14(2s, 6H, Si(CH3)2). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 138.5, 138.4, 138.39, 138.2, 137.7, 137.5, 1
37.1, 137.08(8 C arom), 129-126(40 CH arom), 103.9(159.7C-1C), 102.7(1JC
H=160Hz, C-1D), 101.8(CH by), 101.6(CH by), 101.58(1JCH=155Hz, C-1A), 10
1.5(CH by), 101.35(1JCH=158.5Hz, C-1B), 101.2(CH by), 79.9(C-3B), 78.97(
C-4B), 78.46(C-4D), 78.4(C-4C), 77.9(C-4A), 77.6(C-2D), 76.29(C-3D), 76.
27(C-3C), 76.23(C-3A), 75.22(C-2A), 72.83(C-2C), 72.8(CH2Ph), 71.9(CH2Ph
), 71.16(C-2B), 70.62(CH2Ph), 70.14(-O-CH2-), 69.8(CH2Ph), 68.87, 68.82*
2, 68.5(C-6A, C-6B, C-6C and C-6D), 67.88(C-5B), 67.83(C-5C), 67.7(C-5A)
, 67.4(C-5D), 34(-CH2-C:O-O-CH3), 29.5, 29.2, 29.1, 29, 25.5, 24.8(-CH2-
), 25.9(C(CH3)3), 18.5(C(CH3)3), -3.7(SiCH3), -4.7(SiCH3). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １６６３．７（Ｍ＋Ｈ）⁺． Ｃ₉₆Ｈ₁₁₄Ｏ₂₃Ｓｉ（１６６４．０３）についての分析：計算値 Ｃ：６９．
２９ Ｈ：６．９０５ 実測値 Ｃ：６９．１３ Ｈ：７．０６ ９）８−カルボキシルオクチル２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（β−Ｄ−マン
ノピラノシル）−β−Ｄ−マンノピラノシル）−β−Ｄ−マンノピラノシル）−
Ｄ−マンノピラノシド（Ｉ、Ｒ＝コネクター）。

【０１０２】

【化２１】

【０１０３】 工程１：脱シリル化 化合物１０を３０５ｍｇ（１８３μｍｏｌ、１等量）およびフッ化テトラブチ
ルアンモニウム三水和物を、テトラヒドロフラン１０ｍＬ中に溶解する。６０℃
で１２時間加熱した後、反応媒質をジクロロメタンにより希釈し、水で洗浄する
。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下で濾過して、気化する。シルカ
ゲル上の未処理物のクロマトグラフィーにより、白い泡状の脱シリル化された生
成物２３０ｍｇを得る。

【０１０４】 工程２：鹸化 先の生成物１４０ｍｇ（８５μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン５ｍＬ中に溶解
する。これに水酸化ナトリウム４．５ｍＬ（０．１Ｎ）を添加する。全体を６０
℃で一晩加熱する。溶液を塩酸溶液（１Ｍ）で酸性化し、ジクロロメタンで３回
抽出を行う。有機相をＭｇＳＯ₄上で乾燥し、真空下で濾過、気化を行う。シル
カゲル上での未処理物のクロマトグラフィーで、白い泡状の生成物１１５ｍｇ（
８２％）を得る。

【０１０５】 工程３：水素化分解 先の生成物６６ｍｇ（４２μｍｏｌ）をメタノール２ｍＬ中に溶解し、触媒量
としてＰｄ／Ｃ（１０％）の存在下に、２水素の雰囲気下（１．４バール）に、
（Ｉ、Ｒ＝コネクター）（２９．３ｍｇ、８３％）になるよう撹拌し、凍結乾燥
後、撹拌して非晶質の粉末になるようにする。

【０１０６】 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du produit β-O-connecteur : δ 4.99(se, 1H, H
-1A), 4.89(se, 1H, H-1B), 4.84(se, 1H, H-1C), 4.68(se, 1H, H-1D), 4.36(d
, 1H, J 2-3=3Hz, H-2A), 4.28(d, 1H, J 2-3=3.2Hz, H-2C), 4.18(d, 1H, J 2-
3=3.19Hz, H-2D), 4.11(d, 1H, J 2-3=3.2Hz, H-2B), 3.9-3.84(m, 5H, H-6Ab,
H-6Bb, H-6Cb, H-6Db and -O-CH-CH2), 3.73-3.65(m, 4H, H-6Aa, H-6Ba, H-6Ca
, H-6Da), 3.63(dd, 1H, J 3-2=3.19Hz and J 3-4=9.7Hz, H-3D), 3.62-3.57(m,
2H, -O-CH-CH2 and H-3C), 3.59(dd, 1H, J 3-2=3Hz and J 3-4=10.3Hz, H-3A)
, 3.57(dd, 1H, J 3-2=3.2Hz and J 3-4=9.7Hz, H-3B), 3.55(t, 1H, J 4-3=J 4
-5=10.3Hz, H-4A), 3.51(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.7Hz, H-4B), 3.46(t, 1H, J 4-
3=J 4-5=9.7Hz, H-4C), 3.44(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.7Hz, H-4D), 3.36-3.3(m,
4H, H-5A, H-5B, H-5C and H-5D), 2.25(t, 2H, J CH2-CH2=7.4Hz, -CH2-COOH),
1.6-1.52 and 1.3-1.28(m, 12H, -CH2-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 181.7(COOH), 101.58, 101.46, 101.26, 100.32(
C-1A, C-1B, C-1C, C-1D), 79.5, 79.3, 78.7, 76.6, 76.5*3, 73.2, 72.6, 72.
3*2, 70.7, 67.8, 67.4, 67.2, 67.1, 61.5, 61.06, 61.02, 60.9(20 CH cycle)
, 70.4(-O-CH2-), 34(-CH2-CO2H), 29, 28.7, 28.65, 28.6, 25.7, 25.5(6 -CH2
-)。

【０１０７】 質量スペクトル（ＦＡＢ）ｍ／ｚ計算値 Ｃ₃₃Ｈ₅₈Ｏ₂₃Ｎａ：８４５．３２，
実測値８４５．２４。

【０１０８】 １０）２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−Ｄ−マンノピラノース（９）。

【０１０９】

【化２２】

【０１１０】 工程１：脱シリル化 実験実施要領については、化合物１（Ｒ＝コネクター）の工程１を参照のこと
。

【０１１１】 フッ化テトラブチルアンモニウムにより８（２３５ｍｇ）を処理し、シルカゲ
ル上のクロマトグラフィー後、およびメタノール中の再結晶化後に、白い泡状の
２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン
−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン
−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン
−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン
−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド（２０２ｍｇ、９２％）が得られる。

【０１１２】 ｐｆ：１３３〜１３６℃（メタノール）、［α］_D−４２（ｃ０．５クロロホ
ルム） 1H-R.M.N.(400MHz,CDCl3) : δ 7.57-7.32(？m,45H,arom.), 5.73, 5.71, 5.6
7 and 5.66(4s,4H,by), 5.64(s,1H,H-1A), 5.36(s,1H,H-1B), 4.92(s,1H,H-1D),
4.86(d,1H, J gem=12.1Hz,CHPh), 4.83(d,1H, J gem=11.8Hz,CHPh), 4.79(s,1H
,H-1C), 4.78(s,2H,CH2Ph), 4.77(2d,2H,2CHPh), 4.71(d,1H,J2-3=3.2Hz,H-2A),
4.69(d,1H,J gem=11.8Hz,CHPh), 4.64(d,1H,J gem=11.8Hz,CHPh), 4.61(d,1H,J
2-3=3Hz,H-2B), 4.53(d,1H,J2-3=3.4Hz,H-2C), 4.51-4.46(m,1H,H-5A), 4.47(dd
,1H,J6b-6a=10.3Hz and J6b-5=4.8Hz,H-6Bb), 4.41-4.36(m,4H,H-6Ab,H-6Cb,H-6
Db,H-2D), 4.36(t,1H,J4-3=J4-5=9.7Hz,H-4D), 4.32(t,1H,J4-3=J4-5=9.8Hz,H-4
B), 4.21(t,1H,J4-3=J4-5=9.7Hz,H-4C), 4.13-4.11(m,2H,H-4A and H-3A), 4.08
(t,1H,J6a-6b=J6a-5=10Hz,H-6Ba), 3.98(dd,1H,J6a-6b=10.4 and J6a-5=9.7Hz,H
-6Ca), 3.95(dd,1H,J6a-6b=10.1J6a-5=9.7Hz,H-6Da), 3.91(t,1H,J6a-6b=J6a-5=
10.2Hz,H-6Aa), 3.75(dd,1H,J3-2=3.4Hz and J3-4=9.7Hz,H-3C), 3.65(dd,1H,J3
-2=3Hz and J3-4=9.8Hz,H-3B), 3.56(ddd,1H, J5-4=9.8Hz and J5-6b=4.8Hz and
J5-6a=9.8Hz,H-5B), 3.53(dd,1H,J3-2=3.1Hz and J3-4=9.6Hz,H-3D), 3.44(ddd
,1H, J5-4=9.7Hz and J 5-6b=9.7Hz and J 5-6a=4.7Hz, H-5C), 3.35(ddd, 1H,
J 5-4=9.7Hz and J 5-6b=9.7Hz and J 5-6a=4.9Hz, H-5D), 3.28(se, 1H, OH). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 138.2*2, 137.9, 137.8, 137.5, 137.2, 137.04,
136.8, 133.05(9 C arom.), 131.5-125.9(45 CH arom), 102.1(CH by), 101.5(
CH by), 101.48(C-1D), 101.26(CH by), 101.15(CH by), 101(C-1B), 98.2(C-1C
), 85.14(C-1A), 78.98(C-4A), 78.4(C-4D), 78(C-4B), 77.98(C-4C), 77.7(C-3
B), 76.9(C-3D), 75.3(C-3C), 74.6(C-3A), 74.4(C-2A), 74.3(C-2C), 74.1(C-2
B), 72.4(CH2Ph), 71.8*2(CH2Ph), 71(CH2Ph), 68.9(C-2D), 68.6(C-6D), 68.5(
C-6A), 68.4(C-6B), 68.25(C-6C), 67.8(C-5B and C-5C), 66.8(C-5D), 64.9(C-
5A). 質量スペクトル：ｍ／ｚ１４８８（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺。 Ｃ₈₆Ｈ₈₆Ｏ₂₀Ｓ．１ＣＨ₃ＯＨ（１５０３．６７）に対する分析：計算値Ｃ：６
９．４９Ｈ：６．０３ 実測値Ｃ：６９．２８ Ｈ：５．９２。

【０１１３】 工程２：チオフェニルの加水分解 先の化合物１７５ｍｇ（１１９μｍｏｌ、１等量）を溶媒アセトン／水＝４．
５ｍＬ／０．５ｍＬの混合液中に溶解する。全体を０℃に冷却する。これにＮ−
ブロモサクシンイミド１０６ｍｇ（０．５９５ｍｍｏｌ、５等量）を添加する。
炭酸水素ナトリウム溶液を０℃で３０分撹拌した後、丸底フラスコに注ぐ。アセ
トンを真空下に気化する。残滓をジクロロメタンにより再び溶解し、チオ硫酸ナ
トリウムおよびＮａＣｌの水性溶液で洗浄する。次に有機相を硫酸マグネシウム
上で乾燥し、濾過し、気化する。未処理物をシルカゲル上でクロマトグラフィー
（溶離、シクロヘキサン／酢酸エチル＝１．８／１、次いで１．５／１）にかけ
、白い泡状の構造α／β（２．６／１）混合物の化合物９を１３８ｍｇ（Ｒｄｔ
＝８４％）を得る。

【０１１４】 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) du produit α-OH: δ 5.52(s, 1H, H-1B), 5.22
(de, 1H, J 1-OH=3Hz, H-1A), 4.78(s, 1H, H-1D), 4.63(s, 1H, H-1C). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 101.7(C-1D), 101.1(C-1B), 99.2(C-1C), 92.09
(C-1A)グリコーンとしてチオフェノールを有するＣ−１Ａの８５．１４ｐｐｍの
特徴的最大値分布。

【０１１５】 質量スペクトル：ｍ／ｚ１３９６．８（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺ Ｃ₈₀Ｈ₈₂Ｏ₂₁（１３７９．５２９）に対する分析：計算値Ｃ：６９．６５ Ｈ
：５．９９ 実測値Ｃ：６９．４６ Ｈ：６．１１。

【０１１６】 １１）２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（β−Ｄ−マンノピラノシル）−β−Ｄ
−マンノピラノシル）−β−Ｄ−マンノピラノシル）−Ｄ−マンノピラース（Ｉ
、Ｒ＝Ｈ）。

【０１１７】

【化２３】

【０１１８】 実験実施要領については、化合物Ｉの工程３を参照のこと（Ｒ＝コネクター）
１１１．４ｍｇ（８０．７μｍｏｌ）の化合物９は、凍結乾燥後、非晶質粉末
の化合物Ｉ（Ｒ＝Ｈ）４６ｍｇ（８５％）になる。

【０１１９】 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du produit α-OH : δ 5.24(d, 1H, J 1-2=1.64Hz
, H-1A), 4.91(s, 1H, H-1C), 4.89(s, 1H, H-1D), 4.81(se, 1H, H-1B), 4.39(
d, 1H, J 2-3=3.2Hz, H-2C), 4.22(d, 1H, J 2-3=3.27Hz, H-2B), 4.11(d, 1H,
J 2-3=3.1Hz, H-2D), 4.08(dd, 1H, J 2-1=1.64Hz and J 2-3=3.02Hz, H-2A). 13C R.M.N.(100 MHz) : δ 101.53, 101.29, 99.46, 92.4(C-1A, C-1B, C-1C,
C-1D), 79.7, 79, 78.7, 76.6, 76.5, 76.4, 73.2, 72.67, 72.5, 72.2, 70.7,
69.4, 67.7, 67.4, 67.26, 67.1, 61.5, 61.1, 60.84, 60.7(20 CH cycle). 質量スペクトル（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：計算値Ｃ₂₄Ｈ₄₂Ｏ₂₁Ｎａ：実測値６８９．
２１：６８９．３２。

【０１２０】 （実施例２）式（ＩＩ）のＤ−Ｍａｎα（１−２）Ｄ−Ｍａｎα（１−２）Ｄ
−Ｍａｎα（１−２）Ｄ−Ｍａｎの調製 Ｉ−反応図について 添付資料の図２は、式（ＩＩ）のＤ−Ｍａｎα（１−２）Ｄ−Ｍａｎα（１−
２）Ｄ−Ｍａｎα（１−２）Ｄ−Ｍａｎの反応の仕組みを表す。実施例１のよう
に、ブロックによる戦略が使われた。チオフェニル基はアノマー炭素を中間で保
護する。化合物１１は、行われる反応により、化合物１２または１３に導かれ、
いずれも縮合されてジサッカリド１４になる。

【０１２１】 反応（ａ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＣＨ₃ＣＯＯＨ、Ｈ₂Ｏ（８０
／２０）、次にＣＣｌ₃ＣＮ、ＤＢＵ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、０℃。

【０１２２】 反応（ｂ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＰｈＳＨ、ＨｇＢｒ₂、ＣＨ₃ ＣＮ、８０℃、次いでＣＨＢＯＮａ、ＣＨ₃ＯＨ。

【０１２３】 反応（ｃ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＴＭＳＯＴｆ、４Åモレキュ
ラーシーブ、ＣＨ₂Ｃｌ₂。

【０１２４】 ジサッカリド１４はジサッカリド１５および１６に変換され、いずれも縮合さ
れてキーとなるテトラサッカリド１７が得られる。

【０１２５】 反応（ｄ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＮＢＳ、水、アセトン、次い
でＣＣｌ₃ＣＮ、ＤＢＵ、ＣＨ₂Ｃｌ₂。

【０１２６】 反応（ｅ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＭｅＯＮａ、ＭｅＯＨ。

【０１２７】 反応（ｆ’）は次の条件で行われる。１）ＢＦ₃・Ｅｔ₂Ｏ、４Åモレキュラー
シーブ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、２）ＭｅＯＮａ／ＭｅＯＨ。

【０１２８】 キーとなるテトラサッカリド１７は、化合物１８または１９のいずれか一つに
機能化されてもされなくてもよく、脱保護の後、式（ＩＩ）（式中、ＲはＨまた
は−（ＣＨ₂）８−ＣＯ２Ｍｅである）のテトラマンノシドが得られる。

【０１２９】 反応（ｇ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＮＢＳ、ＴｆＯＨ、８−メト
キシカルボニルオクタノール、４Åモレキュラーシーブ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、−１５℃
。

【０１３０】 反応（ｈ’）は次の条件で行われる。すなわち、ＮＢＳ、水、アセトン。

【０１３１】 反応（ｉ’）は次の条件で行われる。すなわち、１−ＮａＯＨ、ＴＨＦ、水、
２−Ｈ₂、Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ。

【０１３２】 反応（ｊ’）は次の条件で行われる。すなわち、Ｈ₂、Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ。

【０１３３】 ＩＩ−実験実施要領 化合物１２（Ｆ Ｙａｍａｚａｋｉ，Ｓ Ｓａｔｏ，Ｔ Ｎｕｋｕｄａ，Ｙ．
Ｉｔｏ，Ｔ Ｏｇａｗａ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２０１（１９９０）３
１−５０）および１３（Ｙ−Ｍ．Ｚｈａｎｇ、Ｊ．−Ｍ．Ｍａｌｌｅｔ、Ｐ．Ｓ
ｉｎａｙ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２３６，（１９９２），７３−８８）
は、文献に従って、オルトエステル１１（Ｎ．Ｅ．Ｆｒａｎｋｓ Ｒ Ｍｏｎｔ
ｏｇｏｍｅｒｙ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．６（１９６８）２８６−８９）
から調製される。

【０１３４】 １）フェニル２−Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル
−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−１−チオ−
α−Ｄ−マンノピラノシド（１４）。

【０１３５】

【化２４】

【０１３６】 無水ジクロロメタン１００ｍＬ中の１２（Ｆ Ｙａｍａｚａｋｉ，Ｓ Ｓａｔ
ｏ，Ｔ Ｎｕｋｕｄａ，Ｙ．Ｉｔｏ，Ｔ．Ｏｇａｗａ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒ
ｅｓ．２０１（１９９０）３１−５０）（９．７ｇ，１５．２４ｍｍｏｌ，１．
２等量）と１３（Ｙ−Ｍ．Ｚｈａｎｇ，Ｊ．−Ｍ．Ｍａｌｌｅｔ，Ｐ．Ｓｉｎａ
ｙ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２３６，（１９９２），７３−８８）（６．
８８ｇ，１２．７ｍｍｏｌ，１等量）と４Åモレキュラーシーブ１７ｇとの混合
物をアルゴンの雰囲気下に撹拌する。３０分撹拌を行った後、反応媒質を−１０
℃まで冷却する。トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．４４ｍ
Ｌ、１．９ｍｍｏｌ、０．１５等量）を３０分後に加え、溶液を炭酸水素ナトリ
ウムの水溶液で中和する。次に有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾
燥して、濾過および濃縮する。シルカゲル上での未処理物のクロマトグラフィー
により無色のシロップ形態の１４（９．３ｇ、７２％）を得る。［α］_D ＋９
３（ｃ ０．５５，クロロホルム） 1H-R.M.N.(400MHz,CDCl3) : δ 7.48-7.25(m, 35H, arom.), 5.69(d,1H, J1-2
=1.62Hz, H-1A), 5.58(dd, 1H, J2-1=1.7Hz and J2-3=3.3Hz, H-2B), 5.13(d,1H
, J1-2=1.7Hz,H-1B), 4.94(d,1H, J gem=10.8Hz,CHPh), 4.87(d,1H, J gem=10.8
Hz,CHPh), 4.79(d,1H, J gem=11.8Hz,CHPh), 4.75(d,1H, J gem=11.8Hz,CHPh),
4.71(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.69(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.64(d,
1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.6(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.52(d, 1H, J g
em=12Hz, CHPh), 4.47(d, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.45(d, 1H, J gem=10.9H
z, CHPh), 4.43(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.33(ddd, 1H, J 5-4=9.3Hz, J
5-6a=1.7Hz and J 5-6b=5.2Hz, H-5A), 4.28(dd, 1H, J 2-1=1.62Hz and J 2-3=
2.8Hz, H-2A), 4.03(dd, 1H, J 3-2=3.3Hz and J 3-4=9.4Hz, H-3B), 4.03-3.97
(m, 1H,H-5B), 3.99(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.3Hz, H-4A), 3.94(dd, 1H, J 3-2=2
.8Hz and J 3-4=9.3Hz, H-3A), 3.88(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.4Hz, H-4B), 3.88(
dd, 1H, J 6b-6a=11.1Hz and J 6b-5=5.2Hz, H-6Ab), 3.77(dd, 1H, J 6b-6a=11
.1Hz and J 6b-5=1.7Hz, H-6Aa), 3.74(dd, 1H, J 6b-6a=10.6Hz and J 6b-5=4.
5Hz, H-6Bb), 3.77(dd, 1H, J 6b-6a=10.6Hz and J 6b-5=1.7Hz, H-6Ba), 2.19(
s, 3H, -C:O-OCH3). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 170.2(-C:O-OCH3), 138.4, 138.3, 138.27, 138,
137.98, 137.9, 131.6(7 C arom), 129-127.3(35 CH arom), 99.7(1JCH=169.2H
z, C-1B), 87.1(1JCH=168.8Hz, C-1A), 79.89(C-3A), 78(C-3B), 76.6(C-2A), 7
5.2(CH2Ph), 75(CH2Ph), 74.7(C-4A), 74.3(C-4B), 73.1(2 CH2Ph), 72.8(C-5A)
, 72.2(CH2Ph), 71.9(CH2Ph), 71.9(C-5B), 69.1(C-6A), 68.7(C-2B), 68.5(C-6
B), 21.1(-C:O-OCH3). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １０３４．４（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺． Ｃ₆₂Ｈ₆₄Ｏ_1lＳ（１０１７．２５６）についての分析 ： 計算値 Ｃ：７３
．２０ Ｈ：６．３５ 実測値 Ｃ：７２．９８ Ｈ：６．６５。

【０１３７】 ２）Ｏ−［２−Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−
α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マン
ノピラノシルおよびβ−Ｄ−マンノピラノシル］トリクロロアセトイミデート（
１５）．

【０１３８】

【化２５】

【０１３９】 １４（３ｇ、２．９５ｍｍｏｌ、１等量）をアセトン／水：９５／５混合物１
５０ｍＬ中に溶解する。この溶液に、Ｎ−ブロモサクシンイミド２．６ｇ（１１
．８ｍｍｏｌ、４等量）。１５分間の撹拌後、炭酸水素ナトリウムを添加し、ア
セトンを真空下に気化する。残滓をジクロロメタンにより再び溶解し、塩水によ
り洗浄する。未処理物のシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより、
無色の油性形態下の、還元位置におけるフリーＯＨ生成物２．３７ｇ（Ｒｄｔ＝
８７％）を得る。このようにして得られたこの油を無水クロロメタン１０ｍＬ中
に溶解する。トリクロロアセトニトリル３．０８ｍＬ（１２等量）を加えて、溶
液を０℃まで冷却し、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エ
ンを１１５μＬ（０．３等量）を媒質に加える。２０分後、溶液を直接シルカゲ
ル（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝３／１）上に注入し、このようにして
無色の油性形態である、大部分の化合物１５α（α／β＝９２／８）を２．２ｇ
（２工程に対してＲｄｔ＝８１％）得る。

【０１４０】 1H-R.M.N.(400MHz,CDCl3) du produit α-O-Imidate : δ 8.55(s, 1H, C=NH)
, 7.39-7.25(m, 30H, arom.), 6.36(d, 1H, J 1-2=1.95Hz, H-1A), 5.67(dd, 1H
, J 2-1=1.6Hz and J 2-3=3.4Hz, H-2B), 5.2(d, 1H, J 1-2=1.6Hz, H-1B), 4.9
5(d, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.89(d, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.81(d, 1
H, J gem=11.9Hz, CHPh), 4.75(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.73(d, 1H, J gem
=11.9Hz, CHPh), 4.71(d, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.7(d, 1H, J gem=12.6Hz
, CHPh), 4.65(d, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.55(d, 1H, J gem=12.6Hz, CHPh
), 4.52(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.51(d, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.45(
d, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.13(dd, 1H, J 2-1=1.95Hz and J 2-3=3.3Hz, H
-2A), 4.09(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.7Hz, H-4A), 4.08-3.97(m, 5H, H-5A, H-5B,
H-3A, H-3B and H-4B), 3.89(dd, 1H, J 6b-6a=11.5Hz and J 6b-5=3.6Hz, H-6
Ab), 3.86(dd, 1H, J 6b-6a=11.6Hz and J 6b-5=4.1Hz, H-6Bb), 3.78(dd, 1H,
J 6b-6a=11.5Hz and J 6b-5=1.1Hz, H-6Aa), 3.75(dd, 1H, J 6b-6a=11.6Hz and
J 6b-5=1Hz, H-6Ba), 2.2(s, 3H, -C:O-OCH3). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 170.25(-C:O-OCH3), 159.98(-C=NH), 138.4, 138
.3, 138.15, 138.07, 137.9, 137.88(6 C arom.), 128.4-127.4(30 CH arom), 9
9.5(C-1B), 96.7(C-1A), 78.5(C-3A), 78.1(C-3B), 75.4(CH2Ph), 75.1(CH2Ph),
74.7(C-5B), 74.1(C-4B), 73.8(C-4A), 73.3(CH2Ph), 73.2(CH2Ph), 73(C-2A),
72.4(CH2Ph), 71.97(CH2Ph), 71.9(C-5A), 68.62(C-2B), 68.58(C-6B), 68.51(
C-6A), 21.15(-C:O-OCH3)。

【０１４１】 これら安定性に乏しい化合物に対する基本分析はない。

【０１４２】 ３）フェニル２−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピ
ラノシル）３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノ
シド（１６）。

【０１４３】

【化２６】

【０１４４】 １４（６ｇ、５．９ｍｍｏｌ）を、トルエン／メタノール：１／１混合物４０
ｍＬ中に溶解する。これにナトリウム（触媒）を添加する。１５分後、溶液を樹
脂ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲ１２０（Ｈ＋）により中和し、濾過および濃縮する。
未処理物のシルカゲル上（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝３／１）クロマ
トグラフィーにより、無色シロップ形態の１６（５．４５ｇ、９５％）を得る。
［α］_D ＋９３．６（ｃ ０．５１，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.5-7.2(m, 35H, arom.), 5.76(d, 1H, J 1
-2=1.6Hz, H-1A), 5.22(d, 1H, J 1-2=1.6Hz, H-1B), 4.95(d, 1H, J gem=10.7H
z, CHPh), 4.85(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.77(s, 2H, CH2Ph), 4.75(d, 1
H, J gem=12Hz, CHPh), 4.66(d, 1H, J gem=10.7Hz, CHPh), 4.65(d, 1H, J gem
=11.3Hz, CHPh), 4.6(d, 1H, J gem=11.3Hz, CHPh), 4.57(d, 1H, J gem=12.4Hz
, CHPh), 4.55(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.52(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh),
4.45(d, 1H, J gem=12.4Hz, CHPh), 4.37-4.33(m, 1H, H-5A), 4.34(dd, 1H, J
2-1=1.6Hz and J 2-3=2.7Hz, H-2A), 4.21-4.18(m, 1H, H-2B), 4.01(t, 1H, J
4-3=J 4-5=9.3Hz, H-4A), 4.03-3.98(m, 1H,H-5B), 3.96(dd, 1H, J 3-2=2.7Hz
and J 3-4=9.3Hz, H-3A), 3.95(dd, 1H, J 6b-6a=11.2Hz and J 6b-5=4.6Hz, H
-6Ab), 3.93(dd, 1H, J 3-2=3.1Hz and J 3-4=9.4Hz, H-3B), 3.87(t, 1H, J 4-
3=J 4-5=9.4Hz, H-4B), 3.8(dd, 1H, J 6b-6a=11.2Hz and J 6b-5=1.6Hz, H-6Aa
), 3.71(dd, 1H, J 6b-6a=10.6Hz and J 6b-5=4.9Hz, H-6Bb), 3.64(dd, 1H, J
6b-6a=10.6Hz and J 6b-5=1.9Hz, H-6Ba), 2.53(d, 1H, J OH-2=1.6Hz, OH). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 138.5, 138.3, 138.2, 138, 137.9, 137.86, 131
.5(7 C arom), 128.9-127.3(35 CH arom), 101.2(C-1B), 87.2(C-1A), 79.99(C-
3A), 79.9(C-3B), 76.5(C-2A), 75.1(CH2Ph), 75(CH2Ph), 74.8(C-4A), 74.2(C-
4B), 73.13(CH2Ph), 73.1(CH2Ph), 72.8(C-5A), 72.3(CH2Ph), 72.1(CH2Ph), 71
.6(C-5B), 69.1(C-6A), 68.5(C-6B), 68.47(C-2B). 質量スペクトル： ｍ／ｚ ９９２．６（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺． Ｃ₆₀Ｈ₆₂Ｏ₁₀Ｓ （９７５．２１８）についての分析 ： 計算値 Ｃ：７
３．８９ Ｈ：６．４０８ 実測値 Ｃ：７４．１５ Ｈ：６．９０。

【０１４５】 ４）フェニル２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジ
ル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−
マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノ
シル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシ
ド（１７）。

【０１４６】

【化２７】

【０１４７】 無水ジクロロメタン６ｍＬ中、１６（２００ｍｇ、１８７μｍｏｌ、１等量）
と１５（３６４ｍｇ、３７４μｍｏｌ、２等量）と４Åモレキュラーシーブ６０
０ｍｇとの化合物をアルゴンの雰囲気下に３０分間撹拌し、−１０℃に冷却する
。次いで三フッ化ホウ素エーテラート７１μＬ（３等量）添加する。−１０℃で
４０分間おいた後、全体を炭酸水素ナトリウムで中和する。セライト床上での濾
過の後、有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥して、濾過後、真空
下で濃縮する。残滓をクロマトグラフィーにかけ（溶離：シクロヘキサン／酢酸
エチル＝６／１）、無色の油を２１１ｍｇ（Ｒｄｔ＝６０％）を得る。１Ｈ−Ｒ
．Ｍ．Ｎによる分析により、二つの生成物、一方は新規に創られた結合レベルに
おける立体化学α、もう一方はβの存在が示される。これらは残念ながらシリカ
ゲル上クロマトグラフィーによっては分離することができない。さらに混合物を
トルエン／メタノール混合物中に溶解し、そこへナトリウム（触媒）を添加する
。１５分後、溶液を樹脂ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲ１２０（Ｈ＋）により中和し、
真空下に濾過、気化を行う。残滓をクロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン
／酢酸エチル＝５／１）にかけ、生成物１７（１５３ｍｇ、７１％）を得る。 １７の特徴：［α］_D ＋４８．７ （ｃ ０．３６，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.51-7.23(m, 60H, arom.), 5.83(d, 1H, J
1-2=1.4Hz, H-1A), 5.35(d, 1H, J 1-2=1.4Hz, H-1B or H-1C), 5.3(d, 1H, J
1-2=1.6Hz, H-1B or H-1C), 5.21(d, 1H, J 1-2=1.5Hz, H-1D), 4.91(d, 1H, J
gem=10.7Hz, CHPh), 4.9(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.89(d, 1H, J gem=10.
6Hz, CHPh), 4.84(d, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.71(2d, 2H, J gem=12.2Hz,
2 CHPh), 4.69(d, 1H, J gem=11.3Hz, CHPh), 4.67(d, 1H, J gem=11.3Hz, CHPh
), 4.65(s, 2H, CH2Ph), 4.64(d, 1H, J gem=11.3Hz, CHPh), 4.61(d, 1H, J ge
m=10.9Hz, CHPh), 4.59(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.56(3d, 3H, 3 CHPh),
4.54(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.53(d, 1H, J gem=11.3Hz, CHPh), 4.51(d
, 1H, J gem=10.8Hz, CHPh), 4.49(d, 1H, J gem=11.9Hz, CHPh), 4.47(d, 1H,
J gem=12.2Hz, CHPh), 4.46(d, 1H, J gem=12.8Hz, CHPh), 4.36(d, 1H, J gem=
11.9Hz, CHPh), 4.36-4.34(m, 2H, H-2A and H-5A, B, C or D), 4.24(d, 1H, J
gem=12.3Hz, CHPh), 4.21(m, 1H, H-2D), 4.19(dd, 1H, J 2-1=1.6Hz and J 2-
3=2.4Hz, H-2B or H-2C), 4.17(dd, 1H, J 2-1=1.4Hz and J 2-3=2.4Hz, H-2B o
r H-2C), 4.04-3.95(m, 6H, H-3D, H-3B or H-3C, H-4A, B, C or D, 3*H-5A, B
, C u D), 3.97-3.88(m, 4H, H-3A, H-3B or H-3C and 2*H-4A, B, C or D), 3.
83-3.56(m, 5H, H-4A, B, C or D, H-6A, H-6B, H-6C and H-6D), 2.47(d, 1H,
J OH-2=2.25Hz, OH). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 138.47*2, 138.44, 138.4*2, 138.32*2, 138.29,
138.2, 138.05, 138, 137.9, 134.2(13 C arom), 128.8-127.2(60 CH arom), 1
01.4(C-1B or C-1C, 1JCH=171.7Hz or 1JCH=170.9Hz), 101(C-1B or C-1C and C
-1D, 1JCH=171.7Hz or 1JCH=170.9Hz), 87.1(C-1A, 1JCH=169.1Hz), 80, 79.6,
79.4, 79(4*C-3), 77.3(C-2A), 75.5(C-2B or C-2C), 75.1(CH2Ph), 75.07(C-2B
or C-2C), 74.94(CH2Ph), 74.85*2, 74.77, 72(4*C-4), 73.26(CH2Ph), 73.18(
CH2Ph), 73.1(CH2Ph), 72.8(CH2Ph), 72.6, 72.26, 72.22, 71.5(4*C-5), 72.3(
CH2Ph), 72(CH2Ph), 71.8(CH2Ph), 69.4, 69.2, 68.9, 68.7(4*C-6), 68.4(C-2D
). 質量スペクトル ： ｍ／ｚ １８６１．９ （Ｍ＋Ｎａ）⁺． Ｃｎ₁₁₄Ｈｎ₁₁₈Ｏ₂₀Ｓ（１８４０．２５８）についての分析 計算値 Ｃ：
７４．４ Ｈ：６．４６３ 実測値 Ｃ：７４．３ Ｈ：６．５４ ５）８−メトキシカルボニルオクチル ２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３，
４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ
−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジ
ル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−
マンノピラノシド（１８ａ）および８−メトキシカルボニルオクチル２−Ｏ−（
２−Ｏ−（２−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−ａＤ−マンノピラノシ
ル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４
，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−
Ｏ−ベンジルβ−Ｄ−マンノピラノシド（１８ｂ）。

【０１４８】

【化２８】

【０１４９】 実験実施要領については、化合物１０を参照のこと。

【０１５０】 ２６８ｍｇ（１４６μｍｏｌ）の化合物１７から、シリカゲル上クロマトグラ
フィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝４／１）後に、二つのジアステレ
オマー１８ａα−Ｏ−コネクタ（１０１ｍｇ、３６％）および１８ｂβ−Ｏ−コ
ネクタ（１００ｍｇ、３６％）を、α／β＝１／１の割合で得る。 １８ａα−Ｏ−コネクタの特徴：［α］_D ＋３５ （ｃ ０．２，クロロホル
ム）、 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.36-7.23(m, 55H, arom.), 5.3(d, 1H, J
1-2=1.2Hz, H-1B or H-1C), 5.27(d, 1H, J 1-2=1.6Hz, H-1B or H-1C), 5.18(d
, 1H, J 1-2=1.4Hz, H-1D), 4.99(d, 1H, J 1-2=1.4Hz, H-1A), 4.89(2d, 2H, J
gem=10.9Hz, 2 CHPh), 4.86(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.82(d, 1H, J gem
=10.5Hz, CHPh), 4.72(2d, 2H, 2 CHPh), 4.67(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4
.63-4.58(m, 8H, 8 CHPh), 4.56(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.55(d, 1H, J
gem=10.9Hz, CHPh), 4.54(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.49(d, 1H, J gem=10
.5Hz, CHPh), 4.48(d, 1H, J gem=11.5Hz, CHPh), 4.47(d, 1H, J gem=11.2Hz,
CHPh), 4.4(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.35(d, 1H, J gem=11.5Hz, CHPh),
4.21(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.2-4.19(m, 1H, H-2D), 4.185(dd, 1H, J
2-1=1.6Hz and J 2-3=2.5Hz, H-2B or H-2C), 4.15(dd, 1H, J 2-1=1.2Hz and J
2-3=2.1Hz, H-2B or H-2C), 4.03(dd, 1H, J 2-1=1.4Hz and J 2-3=2.5Hz, H-2
A), 4.01-3.89(m, 9H, 4*H-3, 3*H-5A, B, C or D, 2*H-4A, B, C or D), 3.84-
3.72(m, 5H, 2*H-4A, B, C or D, 1*H-5A, B, C or D, 2*H-6A, B, C or D), 3.
71(s, 3H, -C:O-OCH3), 3.67-3.51(m, 2H, 2*H-6A, B, C or D), 3.60(dt, 1H,
J CH-CH2=6.8Hz and J gem=9.5Hz, -O-CH-CH2-), 3.28(dt, 1H, J CH-CH2=6.6Hz
and J gem=9.5Hz, -O-CH-CH2-), 2.44(br, 1H, OH), 2.34(t, 2H, J 3-2=7.6Hz
, -CH2C:O-OCH3), 1.69-1.62(m, 2H, -CH2-), 1.55-1.48(m, 2H, -CH2-), 1.37-
1.27(m, 8H, -(CH2)4-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 174.2(-C:O-OCH3), 138.6, 138.55, 138.5*4, 13
8.44, 138.36*2, 138.3, 138.1, 138(12 C arom.), 128.4-127.26(55 CH arom),
101.1(C-1B or C-1C, 1JCH=171.7Hz or 1JCH=172.9Hz), 100.9(C-1B or C-1C a
nd C-1D, 1JCH=171.7Hz or 1JCH=172.9Hz), 98.7(C-1A, 1JCH=168.5Hz), 80, 79
.4*2, 79.1(4*C-3), 75.8(C-2A), 75.6(C-2B or C-2C), 75.13(C-2B or C-2C),
75.1(2*CH2Ph), 74.96(CH2Ph), 73.9*2, 74.8, 74.3(4*C-4), 73.3(CH2Ph), 73.
2(CH2Ph), 73.18(2*CH2Ph), 72.33(2*CH2Ph), 72.3, 72, 71.76, 71.73(4*C-5),
72(CH2Ph), 71.76(CH2Ph), 71.73(CH2Ph), 69.6, 69.5, 63.35, 68.8(4*C-6),
68.5(C-2D), 67.65(-O-CH2-), 69.8(CH2Ph), 51.4(-C:O-OCH3), 34(-CH2-C:O-O-
CH3), 29.4, 29.2, 29.1, 29, 26, 24.9(-CH2-) 質量スペクトル：ｍ／ｚ １９３４．８（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺． Ｃ₁₁₈Ｈ_l32Ｏ₂₃（１９１８．３５）についての分析 ： 計算値 Ｃ：７３．
８８ Ｈ：６．９３ 実測値 Ｃ：７３．７６ Ｈ：７．１２。

【０１５１】 １８ｂβ−Ｏ−コネクタの特徴：［α］_D ＋２ （ｃ ０．２，クロロホル
ム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.38-7.25(m, 55H, arom.), 5.39(d, 1H, J
1-2=1.5Hz, H-1B or H-1C), 5.34(d, 1H, J 1-2=1.5Hz, H-1B or H-1C), 5.23(
d, 1H, J 1-2=1.45Hz, H-1D), 4.9(d, H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.89(d, 1H, J
gem=10.9Hz, CHPh), 4.87(d, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.82(d, H, J gem=12
.3Hz, CHPh), 4.81(d, 1H, J gem=10.1Hz, CHPh), 4.79(d, 1H, J gem=11.5Hz,
CHPh), 4.69(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.68-4.55(m, 11H, 11 CHPh), 4.54
(d, 1H, J gem=11.7Hz, CHPh), 4.52(d, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.51(d, 1H
, J gem=11.5Hz, CHPh), 4.48(d, 1H, J gem=10.1Hz, CHPh), 4.41-4.38(m, 1H,
H-5B or H-5C), 4.38(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.3(s, 1H, H-1A), 4.27(
d, 1H, J gem=12.4Hz, CHPh), 4.25-4.24(m, 2H, H-2B and H-2C), 4.2-4.19(m,
1H, H-2D), 4.13(d, 1H, J 2-3=2.3Hz, H-2A), 4.09(dd, 1H, J 3-2=2.8Hz and
J 3-4=9.6Hz, H-3B or H-3C), 4.05(dd, 1H, J 3-2=2.8Hz and J 3-4=9.1Hz, H
-3B or H-3C), 4.047-3.88(m, 7H, H-3D, 3*H-4B, B or D, 3*H-5B, C or D), 3
.92-3.89(m, 1H, -O-CH-CH2-), 3.8-3.5(m, 8H, H-4A, 4*H-6A, B, C and D, -C
:O-OCH3), 3.48(dd, 1H, J 3-2=2.5Hz and J 3-4=9.4Hz, H-3A), 3.44-3.39(m,
2H, H-5A and -O-CH-CH2-), 2.44(br, 1H, OH), 2.34(t, 2H, J 3-2=7.6Hz, -CH
2C:O-OCH3), 1.67-1.57(m, 4H, -(CH2)2-), 1.39-1.28(m, 8H, -(CH2)4-)． 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 174.2(-C:O-OCH3), 138.9, 138.77, 138.66, 138
.65, 138.56*2, 138.37, 138.35, 138.12*2, 138.07, 137.9(12 C arom), 128.4
-127.2(55 CH arom), 100.8(C-1D), 100.5(C-1B or C-1C), 99.9(C-1A), 99.5(C
-1B or C-1C), 82.3(C-3A), 80(C-3D), 79.7(C-3B or C-3C), 79.5(C-3B or C-3
C), 75.6(C-5A), 75.3(C-2B or C-2C), 75.02(CH2Ph), 75*2(CH2Ph), 74.93(C-4
A), 74.9(C-2B or C-2C), 74.88, 74.84, 74.2(C-4B, C-4C, C-4D), 73.35(CH2P
h), 73.23(CH2Ph), 73.21(CH2Ph), 73.17(CH2Ph), 73.12(CH2Ph), 72.5(C-2A),
72.34(CH2Ph), 72.2, 71.6, 71.5(C-5B, C-5C, C-5D), 72.1(CH2Ph), 72(CH2Ph)
, 71.8(CH2Ph), 69.7, 69.4, 63.37, 69.2(4*C-6), 68.48(-O-CH2-), 68.46(C-2
D), 51.4(-C:O-OCH3), 34(-CH2-C:O-O-CH3), 29.6, 29.2, 29.16, 29.1, 26, 24
.9(-CH2-) 質量スペクトル：ｍ／ｚ １９３４．９５（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺． Ｃ₁₁₈Ｈ_l32Ｏ₂₃（１９１８．３５）についての分析 ： 計算値 Ｃ：７３．
８８ Ｈ：６．９３ 実測値 Ｃ：７３．８４ Ｈ：７．１ ６）８−カルボキシルオクチル ２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（α−Ｄ−マ
ンノピラノシル）−α−Ｄ−マンノピラノシル）−α−Ｄ−マンノピラノシル）
−α−Ｄ−マンノピラノシドおよびβ−Ｄ−マンノピラノシド（ＩＩ，Ｒ＝コネ
クター）。

【０１５２】 二つの異性体１８ａおよび１８ｂから、二つの化合物（ＩＩＲ＝コネクター）
を調製した。

【０１５３】

【化２９】

【０１５４】 −化合物 α−アグリコン 工程１：鹸化 実験実施要領については、Ｉ（Ｒ＝コネクター）の工程２を参照のこと。

【０１５５】 １８ａ（９０ｍｇ、４７μｍｏｌ）により、シリカゲル上クロマトグラフィー
（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝２／１）後に−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ
−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−＿−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，
６−トリ−Ｏ−ベンジル−＿−Ｄ−マンノピラノシル）３，４，６−トリ−Ｏ−
ベンジル−＿−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−−
Ｄ−マンノピラノシド：［＿］Ｄ＋１７（ｃ １，クロロホルム） 1H-R.M.N.(400MHz,CDC13) : 7.36-7.23(m,55H,arom.), 5.3(d,1H, J 1-2=1.2H
z, H-1B またはH-1C), 5.27(d,1H, J 12=1.6Hz, H-1BまたはH-1C), 5.18(d,1H,
J 1-2=1.4Hz,H-1D), 4.99(d,1H, J 1-2=1.4Hz,H-1A),メチルエステルのメチルの
特徴的最大値の欠如。

【０１５６】 質量スペクトル： ｍ／ｚ １９２０．８６ （Ｍ＋ＮＨ₄＋）⁺。 Ｃ₁₁₇Ｈ₁₃₀Ｏ₂₃ （１９０４．３２）についての分析 ： 計算値 Ｃ：７３．
７９ Ｈ：６．８８ 実測値 Ｃ：７３．３６ Ｈ：７．１２ 工程２：水素化分解 実験実施要領については、Ｉ（Ｒ＝コネクタ）の工程３を参照のこと。

【０１５７】 前駆体４８ｍｇ（２５ｍｏｌ）から、化合物−Ｏ−コネクタＩＩ（Ｒ＝コネク
タ）を２０ｍｇ（Ｒｄｔ＝９５％）が得られる。

【０１５８】 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du compose -O-connecteur: 5.25(d, 1H, J 1-2=1.
6Hz, H-1B or H-1C), 5.24(d, 1H, J 1-2=1.5Hz, H-1B or H-1C), 5.04(d, 1H,
J 1-2=1.3Hz, H-1D), 4.99(d, 1H, J 1-2=2Hz, H-1A), 3.69-3.63(m, 1H, -O-CH
-CH2-), 3.48(dt, 1H, J CH-CH2=6.2Hz and J gem=9.9Hz, -O-CH-CH2-), 2.22(t
, 2H, J 3-2=7.5Hz, -CH2COOH), 1.58-1.48(m, 4H, -(CH2)2-), 1.3-1.24(m, 8H
, -(CH2)4-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 102.5, 100.96, 100.91, 98.29(4 C-1). 質量スペクトル（ＦＡＢ）：計算値 Ｃ₃₃Ｈ₅₈Ｏ₂₃Ｎａ ： 実測値ｍ／ｚ
８４５．３２ ：８４５．３７ −加工物 β−アグリコン 工程１：鹸化 実験実施要領については、Ｉ（Ｒ＝コネクタ）の工程２を参照のこと。 １８ｂ（８９ｍｇ、４６．４μｍｏｌ）から、８−カルボキシルオクチル ２−
Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノ
ピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）
３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−
トリ−Ｏ−ベンジルｓｓ−Ｄ−マンノピラノシド： ［α］_D＋１９（ｃ １，
クロロホルム）を６４ｍｇ（７２％）得る。

【０１５９】 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.38-7.25(m, 55H, arom.), 5.39(d, 1H, J
1-2=1.5Hz, H-1B or H-1C), 5.34(d, 1H, J 1-2=1.5Hz, H-1B or H-1C), 5.23(
d, 1H, J 1-2=1.45Hz, H-1D), 4.3(s, 1H, H-1A), メチルエステルのメチルの特
徴的最大値の欠如。 質量スペクトル： ｍ／ｚ １９２０．９ （Ｍ＋ＮＨ₄＋）⁺． Ｃ₁₁₇Ｈ₁₃₀Ｏ₂₃ （１９０４．３２）についての分析 ： 計算値 Ｃ：７３．
７９ Ｈ：６．８８ 実測値 Ｃ：７３．３７ Ｈ：７．２８ 工程２：水素化分解 実験実施要領については、Ｉ（Ｒ＝コネクタ）の工程３を参照のこと。

【０１６０】 １８ｍｇ（９２％）のＩＩ（Ｒ＝コネクタ）β−Ｏ−コネクタが、４５ｍｇ（
２３．６μｍｏｌ）から得られる： 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du compose β-O-connecteur: δ 5.33(d, 1H, J 1
-2=1.3Hz, H-1B or H-1C), 5.24(d, 1H, J 1-2=1.8Hz, H-1B or H-1C), 4.98(d,
1H, J 1-2=1.9Hz, H-1D), 4.63(s, 1H, H-1A), 3.84-3.79(m, 1H, -O-CH-CH2-)
, 3.53(dt, 1H, J CH-CH2=5.8Hz and J gem=9.9Hz, -O-CH-CH2-), 2.22(t, 2H,
J 3-2=7.5Hz, -CH2COOH), 1.59-1.49(m, 4H, -(CH2)2-), 1.3-1.24(m, 8H, -(CH
2)4-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 102.5, 100.95, 100.91, 99.99(4 C-1). 質量スペクトル（ＦＡＢ）：計算値 Ｃ₃₃Ｈ₅₈Ｏ₂₃Ｎａ：実測値ｍ／ｚ ８４
５．３２ ： ８４５．４ ７）２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−
Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピ
ラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−
３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−マンノピラノース（１９）。

【０１６１】

【化３０】

【０１６２】 実験実施要領については、Ｉ（Ｒ＝Ｈ）の工程２を参照。

【０１６３】 １０５ｍｇ（５７μｍｏｌ）の化合物１７から、溶離：シクロヘキサン／酢酸
エチル＝３／１次いで２／１によるシルカゲル上クロマトグラフィー後に、化合
物１９（α／β＝８７／１３）を８４ｍｇ（８５％）得る。

【０１６４】 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) du compose : δ 7.4-7.27(m, 60H, arom.), 5.3
8-5.37(m, 1H, H-1A), 5.34(d, 1H, J 1-2=1.5Hz, H-1B or H-1C), 5.32(d, 1H,
J 1-2=1.7Hz, H-1B or H-1C), 5.23(d, 1H, J 1-2=1.6Hz, H-1D), 2.83(br, 1H
, OH), 2.51 (br, 1H, OH). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 100.94(C-1D), 100.9(C-1B or C-1C), 100.85(C-
1B or C-1C), 93.3(C-1A). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １７６９．５４（Ｍ＋Ｎａ）⁺。

【０１６５】 Ｃ_1l7Ｈ_l30Ｏ₂₃（１７４８．１）についての分析：計算値 Ｃ：７４．２ Ｈ
：６．５７ 実測値 Ｃ：７４．１５ Ｈ：６．７ ８）２−Ｏ−（２−Ｏ−（２−Ｏ−（α−Ｄ−マンノピラノシル）−α−Ｄ−
マンノピラノシル）−α−Ｄ−マンノピラノシル）−Ｄ−マンノピラノース Ｉ
Ｉ （Ｒ＝Ｈ）．

【０１６６】

【化３１】

【０１６７】 実験実施要領については、化合物Ｉ（Ｒ＝コネクタ）の工程３を参照のこと。
先の化合物３０ｍｇ（１８μｍｏｌ）から、凍結乾燥後に、化合物ＩＩ（Ｒ＝Ｈ
）を１８ｍｇ（Ｒｄｔ＝９５％）を得る。

【０１６８】 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du compose α-OH: δ ？5.23(s, 1H, H-1A), 5.15
(se, 2H, H-1B and H-1C), 4.91(d, 1H, J1-2=1.6Hz, H-1D). 質量スペクトル：計算値 Ｃ₂₄Ｈ₄₂Ｏ₂₁Ｎａ：実測値ｍ／ｚ ６８９．２１
６８９．４１。

【０１６９】 （実施例３）式（ＩＩＩ）のＤ−Ｍａｎ α（１−３） Ｄ−Ｍａｎ α（１
−２） Ｄ−Ｍａｎ α（１−２） Ｄ−Ｍａｎ α（１−２）の調製 Ｉ−反応図について 添付資料の図３は、式（ＩＩＩ）の Ｄ−Ｍａｎ α（１−３） Ｄ−Ｍａｎ
α（１−２） Ｄ−Ｍａｎ α（１−２） Ｄ−Ｍａｎ α（１−２）の調製
の反応図である。この化合物は出発基ＳＰｈおよびブロック（１−２）（このう
ちの一つは下記の反応（ａ”’）〜（ｄ”’）に準拠したコネクタを伴う）によ
るブロックα（１−３）の縮合により調製される。

【０１７０】 反応（ａ”’）は次の条件で行われる。すなわち、ＴｆＯＴＭＳ、４Åモレキ
ュラーシーブ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、−２０℃。

【０１７１】 反応（ｂ”’）は次の条件で行われる。すなわち、ＭｅＯＮａ、ＭｅＯＨ。

【０１７２】 反応（ｃ”’）は次の条件で行われる。すなわち、ＮＩＳ、ＴｆＯＨ、４Åモ
レキュラーシーブ、ＣＨ₂Ｃｌ₂、−２０℃。

【０１７３】 反応（ｄ”’）は次の条件で行われる。すなわち、１−ＮａＯＨ、ＴＨＦ、水
、２−Ｈ₂、Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ、ＡｃＯＥｔ。

【０１７４】 ＩＩ−実験実施要領 化合物２２（Ｙ−Ｍ． Ｚｈａｎｇ， Ｊ．−Ｍ．Ｍａｌｌおよび，Ｐ．Ｓｉ
ｎａｙ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２３６，（１９９２），７３−８８．）
および２１（Ｐ．Ｊ．Ｇａｒｅｇｇ，Ｈ．Ｈｕｌｔｂｅｒｇ，ＴＮｏｒｂｅｒｇ
，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．９６（１９８１）５９−６４）を文献の実施要
領に従って調製する。

【０１７５】 １）８−メトキシカルボニルオクチル２−Ｏ−（２−Ｏ−ベンゾイル−３，４
，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−
Ｏ−ベンジル−α−Ｄマンノピラノシド（２３）。

【０１７６】

【化３２】

【０１７７】 フェニル ２−Ｏ−ベンゾイル−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−１−チオ
−α−Ｄ−マンノピラノシド（２２）（Ｙ−Ｍ．Ｚｈａｎｇ，Ｊ．−Ｍ．Ｍａｌ
ｌおよび，Ｐ．Ｓｉｎａｙ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２３６，（１９９２
），７３−８８．）を４３０ｍｇ（６６５μｍｏｌ、１等量）と８−メトキシカ
ルボニル３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−１−α−Ｄ−マンノピラノシド（２
１）（Ｐ．Ｊ．Ｇａｒｅｇｇ，Ｈ．Ｈｕｌｔｂｅｒｇ，Ｔ Ｎｏｒｂｅｒｇ，Ｃ
ａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．９６（１９８１）５９−６４）を４１２ｍｇ（１等
量）と、モレキュラーシーブ１ｇとを無水ジクロロメタン９ｍＬ中に、アルゴン
の雰囲気下に懸濁する。室温で３０分間撹拌を行った後、溶液を−２０℃に冷却
する。そこへＮ−イオドサクシンイミド３０６ｍｇ（２．２等量）およびトリフ
ルオロメタンスルホン酸１１．７μＬ（０．２等量）を連続的に加える。３０分
後、−２０℃で、反応媒質を炭酸水素ナトリウム溶液により中和する。全体をセ
ライト床上で濾過し、有機相をチオ硫酸ナトリウム溶液およびＮａＣｌ水性溶液
により洗浄する。次にこれを硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下に濾過、濃縮
を行う。未処理物のクロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝
４／１）により、無色の油である生成物２３を６１５ｍｇ（８０％）得る。［α
］_D ＋５．２ （ｃ ０．５６，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 8.15-7.25(m, 35H, arom.), 5.85(dd, 1H,
J 2-1=1.8Hz and J 2-3=3.3Hz, H-2B), 5.27(d, 1H, J 1-2=1.8Hz, H-1B), 4.96
(d, 1H, J 1-2=1.66Hz, H-1A), 4.93(d, 1H, J gem=10.7Hz, CHPh), 4.92(d, 1H
, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.83(d, 1H, J gem=11.1Hz, CHPh), 4.78(d, 1H, J ge
m=12Hz, CHPh), 4.76(s, 2H, CH2Ph), 4.74(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.62
(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.62(d, 1H, J gem=10.7Hz, CHPh), 4.58(d, 1H
, J gem=12Hz, CHPh), 4.57(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.51(d, 1H, J gem=
11.1Hz, CHPh), 4.19(dd, 1H, J 3-2=3.3Hz and J 3-4=9Hz, H-3B), 4.12-4.09(
m, 2H, H-5B and H-4B), 4.07(dd, 1H, J 2-1=1.66Hz and J 2-3=2.9Hz, H-2A),
4(dd, 1H, J 3-2=2.9Hz and J 3-4=9.2Hz, H-3A), 3.94(dd, 1H, J 6b-6a=10.5
Hz and J 6b-5=3Hz, H-6Bb), 3.92(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.2Hz, H-4A), 3.85-3.
77(m, 4H, H-6A, H-6Ba and H-5A), 3.71(s, 3H, -C:O-OCH3), 3.67(dt, 1H, J
gem=9.5Hz and J CH-CH2=6.7Hz, -O-CH-CH2-), 3.35(dt, 1H, J gem=9.5Hz and
J CH-CH2=6.7Hz, -O-CH-CH2-), 2.36(t, 2H, J CH2-CH2=7.5Hz, -CH2-CO2CH3),
1.69-1.65, 1.57-1.54 and 1.35-1.33(m, 12H, -CH2-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 174.2(-C:O-OCH3), 165.4(-O-C:O), 138.5, 138.
4, 138.32, 138.3, 138.26, 137.98, 129.9(7 C arom), 133-127.35(35 CH arom
), 99.5(C-1B), 98.6(C-1A), 79.73(C-3A), 78.07(C-3B), 75.2(C-2A), 75.1(CH
2Ph), 75(CH2Ph), 74.6(C-4B), 74.3(C-4A), 73.3(CH2Ph), 73.2(CH2Ph), 72.1(
CH2Ph), 71.9(C-5B), 71.7(C-5A), 71.6(CH2Ph), 69.2(C-6A), 69.15(C-6B), 68
.98(C-2B), 67.64(-O-CH2-), 51.4(-C:O-OCH3), 34(-CH2-COOCH3), 29.36, 29.1
7, 29.11, 29, 26, 24.9(-CH2-). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １１７４．５（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺。 Ｃ₇₁Ｈ₈₀Ｏ₁₄（１１５７．４０）についての分析：計算値 Ｃ：７３．６８ Ｈ
：６．９６ 実測値 Ｃ：７３．６１ Ｈ：７．１１ ２）８−メトキシカルボニルオクチル ２−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベ
ンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−
Ｄ−マンノピラノシド（２４）。

【０１７８】

【化３３】

【０１７９】 化合物２３を５４０ｍｇ（４６７μｍｏｌ）、メタノール溶媒／ジクロロメタ
ン＝１／１の混合液５ｍＬ中に溶解する。ここでナトリウム（触媒）を添加する
。室温に１時間おいた後、溶液を樹脂ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲ１２（Ｈ＋）によ
り中和する。全体を真空下で濾過、濃縮する。未処理物のクロマトグラフィー（
溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝２．７５／１）により、無色の油である生
成物２４を４４２ｍｇ（Ｒｄｔ＝９０％）を得る。 ［α］_D ＋３４（ｃ ０
．７１，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.4-7.3(m, 30H, arom.), 5.21(d, 1H, J 1
-2=1.45Hz, H-1B), 4.95(d, 1H, J 1-2=1.75Hz, H-1A), 4.89(d, 1H, J gem=10.
6Hz, CHPh), 4.87(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.75(d, 1H, J gem=12.2Hz, C
HPh), 4.75(d, 1H, J gem=11.6Hz, CHPh), 4.71(d, 1H, J gem=11.6Hz, CHPh),
4.69(d, 1H, J gem=12.1Hz, CHPh), 4.64(d, 1H, J gem=11.4Hz, CHPh), 4.59(d
, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.59(d, 1H, J gem=12.2Hz, CHPh), 4.58(d, 1H,
J gem=11.4Hz, CHPh), 4.56(d, 1H, J gem=12.1Hz, CHPh), 4.54(d, 1H, J gem=
10.9Hz, CHPh), 4.2-4.17(m, 1H, H-2B), 4.08(dd, 1H, J 2-1=1.75Hz and J 2-
3=2.9Hz, H-2A), 4.03-3.99(m, 1H, H-5B), 3.99(dd, 1H, J 3-2=2.9Hz and J 3
-4=9.3Hz, H-3A), 3.93(dd, 1H, J 3-2=3.2Hz and J 3-4=9.1Hz, H-3B), 3.89(t
, 1H, J 4-3=J 4-5=9.3Hz, H-4A), 3.86(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.1Hz, H-4B), 3.
86(dd, 1H, J 6b-6a=11.1Hz and J 6b-5=4.95Hz, H-6Ab), 3.82-3.75(m, 4H, H-
6Aa, H-6B and H-5A), 3.71(s, 3H, -C:O-OCH3), 3.65(dt, 1H, J gem=9.5Hz an
d J CH-CH2=6.8Hz, -O-CH-CH2-), 3.3(dt, 1H, J gem=9.5Hz and J CH-CH2=6.8H
z, -O-CH-CH2-), 2.51(d, 1H, J OH-2=1.9Hz, OH), 2.34(t, 2H, J CH2-CH2=7.6
Hz, -CH2-CO2CH3), 1.7-1.63, 1.56-1.49 and 1.37-1.27(m, 12H, -CH2-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 174.3(-C:O-OCH3), 138.5, 138.35, 138.3, 138.
25, 138.1, 137.9(6 C arom), 128.4-127.3(30 CH arom), 101(C-1B), 98.7(C-1
A), 79.92(C-3B), 79.79(C-3A), 75.1(CH2Ph), 74.95(CH2Ph), 74.93(C-2A), 74
.76(C-4A), 74.3(C-4B), 73.3(CH2Ph), 73.2(CH2Ph), 72.8(CH2Ph), 72(CH2Ph),
71.7(C-5B), 71.7(C-5A), 69.2(C-6A), 69(C-6B), 68.45(C-2B), 67.63(-O-CH2
-), 51.4(-C:O-OCH3), 34(-CH2-COOCH3), 29.4, 29.2, 29.1, 29, 26, 24.9(-CH
2-). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １０７０．５ （Ｍ＋ＮＨ₄）⁺。 Ｃ₆₄Ｈ₇₆Ｏ₁₃（１０５３．３０）に対する分析：計算値 Ｃ：７２．９８ Ｈ：
７．２７ 実測値 Ｃ：７２．８９ Ｈ：７．４３。

【０１８０】 ３）フェニル ２−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−１−チオ−α
−Ｄ−マンノピラノシド（２５）。

【０１８１】

【化３４】

【０１８２】 フェニル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド
１を２ｇ（５．５ｍｍｏｌ、１等量）および１０−ＤＬ−カンファースルホン酸
を２９２ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ、０．２等量）を、トリエチルオルト酢酸塩１０
ｍＬ中に溶解する。室温で３０分放置した後、あらかじめ０℃に冷却した溶液に
、酢酸８０％を１４．４ｍＬを添加する。１時間放置して室温に温度を上げた後
、全体を濃縮して、シリカゲル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン／
酢酸エチル＝２／１）にかける。溶媒を気化させた後、白い粉末状の化合物２５
を１．６７ｇ（７５％）得る。ｐｆ：１５７−１５８℃；［α］_D ＋１６９（
ｃ １．０５，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.56-7.3(m, 10H, arom.), 5.66(s, 1H, by
), 5.52(s, 1H, H-1), 5.51(dd, 1H, J 2-1=1.3Hz and J 2-3=3.3Hz, H-2), 4.4
1(ddd, 1H, J 5-4=9.7Hz, J 5-6a=10.3Hz and J 5-6b=4.9Hz, H-5), 4.29(dd, 1
H, J 6b-6a=10.3Hz and J 6b-5=4.9Hz, H-6b), 4.28-4.25(m, 1H, H-3), 4.04(t
, 1H, J 4-3=J 4-5=9.7Hz, H-4), 3.89(t, 1H, J 6b-6a=J 6b-5=10.3Hz, H-6a),
2.65(d, 1H, J OH-3=3.5Hz, OH), 2.21(s, 3H, O-C:O-CH3). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 170.3(-O-C:O-CH3), 136.9, 133(2 C arom.), 13
2-126.2(10 CH arom.), 102.2(by), 86.8(C-1), 79(C-4), 73.5(C-2), 68.3(C-6
), 67.7(C-3), 64.5(C-5A), 20.9(-O-C:O-CH3). 質量スペクトル：ｍ／ｚ ４０３．２（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【０１８３】 Ｃ₂₁Ｈ₂₂Ｏ₆Ｓ（４０２．４６）についての分析：計算値 Ｃ：６２．６７
Ｈ：５．５０９ 実測値 Ｃ：６２．６６ Ｈ：５．５４。

【０１８４】 ４）フェニル ３−Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジ
ル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−２−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデ
ン−１−チオ−α−Ｄ−マンノピラノシド（２６）。

【０１８５】

【化３５】

【０１８６】 Ｏ−（２−Ｏ−アセチル−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノ
ピラノース）トリクロロアセトイミダート（１２）を７３１ｍｇ（１．１５ｍｍ
ｏｌ、１．１等量）と化合物２５を４２０ｍｇ（１．０４４ｍｍｏｌ、１等量）
とモレキュラーシーブを１．３ｇとを、無水ジクロロメタン１２ｍＬ中に懸濁し
、アルゴンの雰囲気下に維持する。室温で３０分間撹拌した後、溶液を−２０℃
まで冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル２２μＬ（０．１
等量）を注入する。１時間撹拌した後、全体を炭酸水素ナトリウム溶液で中和し
て、セライト上で濾過し、分離された有機相をＮａＣｌ水性溶液で洗浄して、硫
酸マグネシウム上で乾燥した後、真空下で濾過、濃縮する。未処理物をシリカゲ
ル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝４／１）にかけ
、このようにして白い泡状の化合物２６を６２６ｍｇ（Ｒｄｔ＝６８％）得る。
ｐｆ：５８−５９℃；［α］_D ＋１１９（ｃ ０．５５，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.47-7.25(m, 25H, arom.), 5.69(s, 1H, b
y), 5.55(dd, 1H, J 2-1=1.8Hz and J 2-3=2.7Hz, H-2D), 5.52(dd, 1H, J 2-1=
1.3Hz and J 2-3=3.4Hz, H-2C), 5.49(d, 1H, J 1-2=1.3Hz, H-1C), 5.34(d, 1H
, J 1-2=1.8Hz, H-1D), 4.89(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.77(d, 1H, J gem
=12.2Hz, CHPh), 4.74(d, 1H, J gem=11.4Hz, CHPh), 4.56(d, 1H, J gem=12.2H
z, CHPh), 4.56(d, 1H, J gem=11.4Hz, CHPh), 4.54(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHP
h), 4.42(ddd, 1H, J 5-4=9.8Hz, J 5-6b=4.9Hz and J 5-6a=10.3Hz, H-5C), 4.
4(dd, 1H, J 3-2=3.4Hz and J 3-4=9.8Hz, H-3C), 4.3(dd, 1H, J 6b-6a=10.3Hz
and J 6b-5=4.9Hz, H-6Cb), 4.2(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.8Hz, H-4C), 3.97-3.8
7(m, 4H, H-5D, H-4D, H-3D and H-6Ca), 3.86(dd, 1H, J 6b-6a=12Hz and J 6b
-5=3.9Hz, H-6Db), 3.78(dd, 1H, J 6a-6b=12Hz and J 6a-5=3.3Hz, H-6Da), 2.
21 and 2.16(2s, 6H, 2 O-C:O-CH3). 13C R.M.N.(100 MHz) : δ 170.1 and 169.7(2 -O-C:O-CH3), 138.4, 138.2,
137.9, 136.9, 133(C arom.), 132-125.9(25 CH arom.), 101.3(by), 98.8(C-1D
), 86.8(C-1C), 78.9(C-4C), 75.6, 74.1 and 72.1(C-3D, C-4D and C-5D), 74.
9(CH2Ph), 73.4(CH2Ph), 73.1(C-2C), 71.7(CH2Ph), 70.8(C-3C), 68.6(C-6D),
68.4(C-2D), 68.2(C-6C), 64.6(C-5C), 21 and 20.8(2 -O-C:O-CH3). 質量スペクトル：ｍ／ｚ ８９４．３（Ｍ＋ＮＨ４）⁺ Ｃ₅₀Ｈ₅₂Ｏ₁₂Ｓ （８７７．０２）についての分析：計算値 Ｃ：６８．４７
Ｈ：５．９７６ 実測値 Ｃ：６８．３６ Ｈ：６．１５。

【０１８７】 ５）８−メトキシカルボニルオクチル２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−Ｏ−（２−Ｏ
−アセチル−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−
２−Ｏ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−マンノピラノシル）−
３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−
トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシド（２７）．

【０１８８】

【化３６】

【０１８９】 化合物２６を１５８ｍｇ（１８０μｍｏｌ、１等量）と化合物２４を１８６ｍ
ｇ（１等量）とモレキュラーシーブ５００ｍｇとを無水ジクロロメタン５ｍＬ中
に溶解し、アルゴンの雰囲気下に維持する。３０分間撹拌した後、溶液を−２０
℃まで冷却して、Ｎ−ヨードこはく酸イミド８１ｍｇ（２等量）およびトリフル
オロメタンスルホン酸４μＬ（０．３等量）を媒質に加える。３０分間撹拌した
後、全体を炭酸水素ナトリウムで中和し、セライト床上で濾過する。次に有機相
をチオ硫酸ナトリウム溶液、ＮａＣｌ水性溶液により洗浄し、硫酸マグネシウム
上で乾燥して、減圧下に濾過、濃縮する。未処理物をシリカゲル上クロマトグラ
フィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にかけ、このようにして
、無色油である生成物２７を２３６ｍｇ（Ｒｄｔ＝７２％）を単離する。［α］ _D ＋２９（ｃ ０．８５，クロロホルム） 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.38-7.25(m, 50H, arom.), 5.66(s, 1H, b
y), 5.56(dd, 1H, J 2-1=1.5Hz and J 2-3=3Hz, H-2D), 5.44(dd, 1H, J 2-1=1.
3Hz and J 2-3=3.5Hz, H-2C), 5.32(se, 1H, H-1D), 5.2(se, 1H, H-1B), 5.04(
se, 1H, H-1C), 4.94(se, 1H, H-1A), 4.88(d, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.88
(d, 1H, J gem=10.7Hz, CHPh), 4.87(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.75(d, 1H
, J gem=12.4Hz, CHPh), 4.75(d, 1H, J gem=11.2Hz, CHPh), 4.72(s, 2H, CH2P
h), 4.67(d, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.67(d, 1H, J gem=12Hz, CHPh), 4.61
(d, 1H, J gem=12.4Hz, CHPh), 4.6(d, 1H, J gem=10.6Hz, CHPh), 4.6(d, 1H,
J gem=12Hz, CHPh), 4.58(s, 2H, CH2Ph), 4.57(d, 1H, J gem=11.2Hz, CHPh),
4.53(d, 1H, J gem=10.9Hz, CHPh), 4.52(d, 1H, J gem=10.7Hz, CHPh), 4.33(d
, 1H, J gem=12.3Hz, CHPh), 4.43(dd, 1H, J 3-2=3.5Hz and J 3-4=9.3Hz, H-3
C), 4.21(dd, 1H, J 6b-6a=10.4Hz and J 6b-5=4.5Hz, H-6Cb), 4.14-4.12(m, 1
H, H-2B), 4.09(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.3Hz, H-4C), 4.07-4.04(m, 1H, H-5C),
4.03(t, 1H, J 4-3=J 4-5=9.9Hz, H-4D), 4.01-4(m, 1H, H-2A), 3.98-3.96(m,
1H, H-3B), 3.93(dd, 1H, J 3-2=3Hz and J 3-4=9.9Hz, H-3D), 3.88-3.85(m, 1
H, H-5D), 3.71(s, 3H, -C:O-OCH3), 3.62-3.59(m, 1H, H-6Da), 3.6-3.56(m, 1
H, -O-CH-CH2-), 3.25(dt, 1H, J gem=9.4Hz and J CH-CH2=6.6Hz, -O-CH-CH2-)
, 2.34(t, 2H, J CH2-CH2=7.5Hz, -CH2-CO2CH3), 2.14 and 2.13(2s, 6H, 2 O-C
:O-CH3), 1.7-1.62, 1.54-1.47 and 1.35-1.25(m, 12H, -CH2-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 174.3(-C:O-OCH3), 170.1 and 169.5(2 -O-C:O-C
H3), 138.6, 138.55, 138.3*2, 138.29*2, 138.23, 138.2, 137.98, 137(10 C a
rom.), 128.7-125.9(50 CH arom.), 101.2(by), 100.6(C-1B, 1JCH=171.3Hz), 9
9.8 (C-1C, 1JCH=172.2Hz), 98.8(C-1D, 1JCH=174Hz), 98.6(C-1A, 1JCH=170.5H
z), 79.3(C-3B), 78.9(C-4C), 77.7(C-3D), 75.56(C-2A), 75.4(C-2B), 75.13(C
H2Ph), 75.06(CH2Ph), 74.87(CH2Ph), 73.9(C-4D), 73.24(CH2Ph), 73.22(CH2Ph
), 73.2(CH2Ph), 72.17(CH2Ph), 72.09(CH2Ph), 72(C-5D), 71.7(CH2Ph), 71.4(
C-2C), 70.8(C-3C), 68.05(C-2D), 68.4(C-6C), 67.63(-O-CH2-), 51.4(-C:O-OC
H3), 34(-CH2-COOCH3), 29.4, 29.2, 29.1, 29, 26, 24.9(-CH2-), 21 and 20.8
(2 -O-C:O-CH3). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １８３６．５（Ｍ＋ＮＨ４）⁺． Ｃ₁₀₈Ｈ_l22Ｏ₂₅（１８２０．０２６）についての分析：計算値 Ｃ：７１．２
７ Ｈ：６．７５ 実測値 Ｃ：７１．０８ Ｈ：６．９４。

【０１９０】 ６）８−カルボキシルオクチル ２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−Ｏ−（α−Ｄ−マ
ンノピラノシル）−α−Ｄ−マンノピラノシル）−α−Ｄ−マンノピラノシル）
−α−Ｄ−マンノピラノシドＩＩＩ。

【０１９１】

【化３７】

【０１９２】 工程１：鹸化 ２００ｍｇ（１１０μｍｏｌ、１等量）の前駆体２７を、テトラヒドロフラン
／水酸化ナトリウム溶液（０．１Ｎ）混合液（１／１）１０ｍＬ中に溶解する。
一晩還流を行った後、全体を酸性化して、ジクロロメタンにより３回抽出を行う
。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空下で濾過、濃縮を行う。未処理生
成物をシルカゲル上クロマトグラフィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝
１．５／１）にかけ、このようにして無色の油性形態の化合物を１５５ｍｇ（Ｒ
ｄｔ＝８２％）を単離する。 ８−カルボキシルオクチル ２−Ｏ−（２−Ｏ−（３−Ｏ−（３，４，６−トリ
−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシル）−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α
−Ｄ−マンノピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノ
ピラノシル）−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−マンノピラノシド［
α］_D ＋３３．３ （ｃ ０．５２，クロロホルム）。

【０１９３】 1H-R.M.N. (400MHz, CDCl3) : δ 7.5-7.25(m, 50H, arom.), 5.6(s, 1H, by)
, 5.21(d, 1H, J 1-2=1.3Hz, H-1B), 5.16(d, 1H, J 1-2=1.45Hz, H-1D), 5.12(
d, 1H, J 1-2=1.1Hz, H-1C), 4.97(d, 1H, J 1-2=1.2Hz, H-1A), 4.42-4.41(m,
1H, H-2C), 4.18-4.17(m, 1H, H-2B), 4.08(m, 1H, H-2D), 4(dd, 1H, J 2-1=1.
2Hz and J 2-3=3.1Hz, H-2A), 3.6(dt, 1H, J gem=9.5Hz and J CH-CH2=6.5Hz,
-O-CH-CH2-), 3.27(dt, 1H, J gem=9.5Hz and J CH-CH2=6.5Hz, -O-CH-CH2-), 2
.35(t, 2H, J CH2-CH2=7.5Hz, -CH2-CO2H), 1.7-1.6, 1.54-1.47 and 1.35-1.25
(m, 12H, -CH2-)．エステルのメチルに相当する三つの最大値の欠如。

【０１９４】 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 178.5(-CO2H), 102.3(C-1C), 101.7(by), 100.9(
C-1B), 99.8(C-1D), 98.5(C-1A), 75.7(C-2A), 74.8(C-2B), 69.65(C-2C), 68.5
(C-2D), 67.6(-O-CH2-), 33.8(-CH2-COOH), 29.3, 29, 28.9, 28.7, 25.9, 24.
5(-CH2-), 21 and 20.8(2 -O-C:O-CH3). 質量スペクトル：ｍ／ｚ １７３８．９（Ｍ＋ＮＨ４）⁺。

【０１９５】 Ｃ₁₀₃Ｈ_ll6Ｏ₂₃ （１７２２．０５９）についての分析：計算値 Ｃ：７１．
８４ Ｈ：６．７８９ 実測値 Ｃ：７１．７３ Ｈ：６．９１ 工程２ 実験実施要領については、化合物Ｉ（Ｒ＝コネクター）の工程３を参照のこと
。 先の化合物１００ｍｇ（５８μｍｏｌ）から、凍結乾燥後に白い粉末状の化合物
ＩＩＩを４０ｍｇ（Ｒｄｔ＝８３％）を得る。

【０１９６】 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) : δ 5.25(d, 1H, J 1-2=1.2Hz, H-1B), 5.1(d, 1H
, J 1-2=1.3Hz, H-1D), 5.05(d, 1H, J 1-2=0.8Hz, H-1A), 4.99(d, 1H, J 1-2=
1.4Hz, H-1C), 4.19(dd, 1H, J 2-1=1.42Hz and J 2-3=3Hz, H-2C), 4.07(dd, 1
H, J 2-1=1.2Hz and J 2-3=3.1Hz, H-2B), 4.03(dd, 1H, J 2-1=1.3Hz and J 2-
3=3.3Hz, H-2D), 3.9-3.88(m, 1H, H-2A), 3.92(dd, 1H, J 3-2=3.1Hz and J 3-
4=9.6Hz, H-3B), 3.91(dd, 1H, J 3-2=3Hz and J 3-4=9.4Hz, H-3C), 3.72-3.65
(m, 1H, -O-CH-CH2-), 3.49(dt, 1H, J gem=10Hz and J 1a-CH2=6.2Hz-O-CH-CH2
-), 2.32(t, 2H, J CH2-CH2=7.4Hz, -CH2-CO2H), 1.6-1.5 and 1.33-1.26(m, 12
H, -CH2-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 178.3(-CO2H), 102.5(C-1D), 102.49(C-1C), 100
.99(C-1B), 98.3(C-1A), 79.3(C-2A), 78.9(C-2B), 78.2(C-3C), 73.66, 73.6*2
, 73(4*C-5), 70.63(C-3D), 70.61(C-3A), 70.34(C-2D), 70.28(C-3B), 69.9(C-
2C), 68.3(-O-CH2-), 67.4, 67.24, 67.2, 66.5(4*C-4), 61.4*2, 61.3, 61.2(4
*C-6), 34.6(-CH2-COOH), 28.7, 28.56, 28.55, 28.48, 25.6, 24.6(-CH2-). 質量スペクトル （マイナス ＦＡＢ）：計算値 Ｃ₃₃Ｈ₅₇Ｏ₂₃：ｍ／ｚ ８
２１．３２ 実測値 ８２１．３２ （実施例４）ジマンノシドＶＩＩＩの合成 添付資料の表４は下記の実施要領の反応図を表している。

【０１９７】 １）２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−マン
ノピラノシル）３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−Ｄ−マンノピラ
ノシド（２８）．

【０１９８】

【化３８】

【０１９９】 実験実施要領については、化合物９の工程２を参照のこと。

【０２００】 ６（２００ｍｇ、２５２μｍｏｌ、１等量）から、シルカゲル上クロマトグラ
フィー（溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝１．５／１）後に白い泡状の化合
物２８（α／β）を１６０ｍｇ（Ｒｄｔ＝９０％）得る。

【０２０１】 化合物α−ＯＨおよびβ−ＯＨの1H-R.M.N.(250MHz,CDCl₃) : δ 7.46-7.16(m
,20H,arom.), 5.49*3および5.43(2s,4H,4*by), 5.21(se,1H,H-1), 4.89-4.59(m,
11H,3*H-1および4*CH2Ph), 4.35-3.55(m,20H,4*H-2,4*H-3,4*H-4および4*H-6),
3.4-3.21(m,4H,4*H-5). 質量スペクトル：ｍ／ｚ ７１６（Ｍ＋ＮＨ４）⁺。

【０２０２】 Ｃ₄₀Ｈ₄₂Ｏ₁₁ （６９８．７７）についての分析：計算値 Ｃ：６８．７５
Ｈ：６．０５８ 実測値 Ｃ：６８．５０ Ｈ：６．２６。

【０２０３】 １）２−Ｏ−（β−Ｄ−マンノピラノシル）−Ｄ−マンノピラノース（ＩＶ，
Ｒ＝Ｈ）。

【０２０４】

【化３９】

【０２０５】 実験実施要領については、化合物（Ｉ、Ｒ＝コネクター）の工程３を参照のこ
と。

【０２０６】 ２８（１３０ｍｇ、３５μｍｏｌ）から、凍結乾燥後に白い非晶質粉末を５６
．７ｍｇ（Ｒｄｔ＝８５％）を得る。

【０２０７】 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du compose α-OH : δ 5.27(d, 1H, J 1-2=1.7Hz,
H-1A), 4.76(s, 1H, H-1B), 4.11(dd, 1H, J 2-1=1.7Hz and J 2-3=3.3Hz, H-2
A), 4.03(d, 1H, J 2-3=3.1Hz, H-2B), 3.84(dd, 1H, J 3-2=3.3Hz and J 3-4=9
.7Hz, H-3A), 3.63(dd, 1H, J 3-2=3.1Hz and J 3-4=9.5Hz, H-3B). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 99.01(C-1B), 92.25(C-1A), 78.30(C-2A), 71.13
(C-2B). 1H-R.M.N. (400MHz, D2O) du compose β-OH : δ 4.97(s, 1H, H-1A), 4.81(
s, 1H, H-1A), 4.17(d, 1H, J 2-3=3Hz, H-2A), 4.16(d, 1H, J 2-3=3.3Hz, H-2
B), 3.65-3.61(m, 2H, H-3A and H-3B). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 101.18(C-1B), 93.99(C-1A), 79.68(C-2A), 70.6
3(C-2B). 質量スペクトルＨＲＭＳ：計算値（Ｍ−ＯＨ＋ＮＨ₃）：実測値 ３４２．１
４００：計算値 ３４２．１３９１（Ｍ＋ＮＨ₄）⁺：実測値 ３６０．１５０６
：３６０．１５１７。

【０２０８】 ２）８−メトキシカルボニルオクチル ２−Ｏ−（３−Ｏ−ベンジル−４，６
−Ｏ−ベンジリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）−３−Ｏ−ベンジル−４，６
−Ｏ−ベンジリデン−Ｄ−マンノピラノシド（２９）。

【０２０９】

【化４０】

【０２１０】 実験実施要領については、化合物１０を参照のこと。

【０２１１】 ６（２５０ｍｇ、３１６μｍｏｌ）から、シルカゲル上クロマトグラフィー（
溶離：シクロヘキサン／酢酸エチル＝１．５／１）後に、無色のオイルである化
合物２９（α／β＝１／１、分離不可）を得る。

【０２１２】 1H-R.M.N. (250MHz, CDCl3) : δ 7.45-7.18(m, 20H, arom.), 5.51*2, 5.49
and 5.43(2s, 4H, 4*by), 4.86(s, 1H, H-1), 4.80-4.67(m, 10H, 2*H-1 and 4*
CH2Ph), 4.41(s, 1H, H-1), 4.31-3.53(m, 28H, 4*H-2, 4*H-3, 4*H-4, 4*H-6,
2*-C:O-O-CH3 and 2*-O-CH2-), 3.42-3.21(m, 6H, 4*H-5 and 2*-O-CH2-), 2.26
-2.18(m, 4H, 2*-CH2-CO2CH3), 1.54-1.18(m, 24H, -O-CH2-(CH2)6-CH2-C:O-) 質量スペクトル：ｍ／ｚ ８８６（Ｍ＋ＮＨ４）⁺． Ｃ₅₀Ｈ₆₀Ｏ₁₃ （８６９．０２８）に対する分析：計算値 Ｃ：６９．１０
Ｈ：６．９５９ 実測値 Ｃ：６８．５５ Ｈ：７．４１。

【０２１３】 ３）８−カルボキシルオクチル２−Ｏ−（β−Ｄ−マンノピラノシル）−Ｄ−
マンノピラノシド（ＶＩＩ，Ｒ＝コネクター）。

【０２１４】

【化４１】

【０２１５】 −工程１：実験実施要領については、化合物（Ｉ、Ｒ＝コネクター）の工程２
を参照のこと。

【０２１６】 ６０ｍｇ（６９μｍｏｌ）の前駆体２９から、溶離：シクロヘキサン／酢酸エ
チル＝１／１のシリカゲル上クロマトグラフィー後に、白い粉末を４２ｍｇ（Ｒ
ｄｔ＝７２％）得る。

【０２１７】 1H-R.M.N. (250MHz, CDCl3) : δ 7.45-7.18(m, 20H, arom.), 5.51*2, 5.49
and 5.43(2s, 4H, 4*by).メチルエステルのメチルの特徴的最大値の欠如。

【０２１８】 質量スペクトル ＨＲＭＳ：計算値 ｍ／ｚ ：実測値 ８５５．３９５６：
８５５．３９５８ Ｃ₄₀Ｈ₄₂Ｏ₁₁ （８５５．０００８）についての分析：計算値 Ｃ：６８．８
３ Ｈ：６．８３７ 実測値 Ｃ：６８．６４ Ｈ：７．１０ 工程２：実験実施要領については、化合物（Ｉ、Ｒ＝コネクター）の工程３を
参照のこと。

【０２１９】 先の中間体３０ｍｇ（３５μｍｏｌ）から、凍結乾燥後に非晶質粉末（ＶＩＩ
、Ｒ＝コネクター）１５ｍｇ（Ｒｄｔ＝９２％）を回収する。

【０２２０】 化合物α−Ｏ−コネクターの1H-R.M.N. (400MHz, D2O) : δ 4.97(s, 1H, H-1
A), 4.75(s, 1H, H-1B), 4.12(d, 1H, J 2-3=3Hz, H-2A), 4.03(d, 1H, J 2-3=2
.9Hz, H-2B), 3.91-3.87(m, 1H, -O-CH-), 3.81(dd, 1H, J 3-2=3Hz and J 3-4=
9.8Hz, H-3A), 3.65-3.61(m, 1H, -O-CH-), 3.62-3.59(m, 1H, H-3B), 2.3(t, 2
H, J CH2-CH2=7.4Hz, -CH2-CO2H), 1.63-1.56(m, 4H, -(CH2)2-), 1.35-1.29(m,
8H, -(CH2)4-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 98.94(C-1B, 1JC-H=155Hz), 97.83(C-1A, 1JC-H=
170Hz), 77.58(C-2A), 71.1(C-2B). 化合物β−Ｏコネクターの1H-R.M.N. (400MHz, D2O) : δ 4.83(s, 1H, H-1B),
4.72(s, 1H, H-1A), 4.24(d, 1H, J 2-3=2.9Hz, H-2A), 4.11(d, 1H, J 2-3=2.9
Hz, H-2B), 3.77-3.72(m, 1H, -O-CH-), 3.66-3.61(m, 2H, H-3A and H-3B), 3.
57-3.51(m, 1H, -O-CH-), 2.3(t, 2H, J CH2-CH2=7.4Hz, -CH2-CO2H), 1.63-1.5
6(m, 4H, -(CH2)2-), 1.35-1.29(m, 8H, -(CH2)4-). 13C R.M.N. (100 MHz) : δ 101.04(C-1B, 1JC-H=161.8Hz), 100.45(C-1A, 1J
C-H=157.5Hz), 78.4(C-2A), 70.7(C-2B). 質量スペクトル ＨＲＭＳ：計算値（Ｍ−ＯＨ＋ＮＨ３）：実測値 ４９８．
２５５１ ：計算値 ４９８．２５３１ （Ｍ＋ＮＨ４）⁺ ：実測値 ５１６
．２６５６ ：５１６．２６７１。

【０２２１】 （実施例５）本発明による合成オリゴマンノシドの共有結合の手順 これには次の有利点がある。

【０２２２】 −頑丈で、免疫分析テストに適合した表面 −生体分子の選りすぐれた配向 −エピトープにおけるより高い密度 −抗体の認識問題が少ない、すなわち抗原部位を獲得しやすい カルボジイミドの使用： この方法は、カルボジイミドに対して生体分子自身のカルボキシル酸基を活性
化して、活性エステル、さらに表面の第１アミン基とのアミド結合形成に至らせ
る（Ｎｕｎｃ ＴｅｃｈＮｏｔｅ Ｖｏｌ．４ Ｎｏ ２７−２８）。カルボジ
イミド（ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイ
ミド）は、スルホ−Ｎ−ヒドロキシサクシンアミド（スルホ−ＮＨＳ：Ｎ−ヒド
ロキシサクシンアミド）の存在下に、生体分子の−ＣＯＯＨ基を活性化するため
に使用される（Ｔｉｍｋｏｖｉｃｈ，Ｒ．，１９７７，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．７９：１３９−１４３；Ｓｔａｒｏｓ，Ｊ．Ｖ．，ら，１９８６，Ａｎａｌ
．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１５６：２２０−２２２；Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ，Ｓ．Ｅ．，
１９９０，Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．４８：６４７−５０）。スルホ−ＮＨ
Ｓは活性化された生成物の加水分解を有効に阻止し、すでにＮＨ₂基により免疫
を活性化させたプレートの表面への合成糖の固定を可能にする。

【０２２３】 １）材料 すべての結合反応体を蒸留水中に溶解する。反応体の残りを脱ミネラル水の中
で再生する。

【０２２４】 −ＣｏｖａＬｉｎｋ ＮＨ₂ Ｃ８（触媒Ｐｏｌｙｌａｂｏ．Ｎｏ Ｎ７０８
９７）。

【０２２５】 −８個の炭素原子鎖につながったテトラマンノース合成糖類：２００ｍｇ。

【０２２６】 −スルホ−ＮＨＳ：スルホ−Ｎ−ヒドロキシサクシンアミド、ＰＩＥＲＣＥ
触媒 Ｎｏ ２４５１０。

【０２２７】 ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド
、ＰＩＥＲＣＥ Ｎｏ ０１−６２−００１１。

【０２２８】 −ＰＢＳ ０．１５Ｍ Ｎａ⁺、ｐＨ７．２、シグマ。

【０２２９】 −ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ ＰＢＳ，０．０５％、Ｔｗｅｅｎ２０、シグマ。

【０２３０】 −ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ／ＢＳＡ：ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ、０．５％ ＢＳＡ −脱脂牛乳。

【０２３１】 ２）実施要領： 合成テトラマンノシドを、二つの異なるプレートの上で使用する。

【０２３２】 ０．８ｍｇ／ｍｌの糖母液から、割合２の６種類の希釈を行い、蒸留水中に範
囲４０〜１．２５μｇ／ｍｌの各濃度を得た。

【０２３３】 その場で下記の溶液を調製した。

【０２３４】 ＮＨＳ ３．４８ｍｇ／ｍｌ ＥＤＣ ３．０７ｍｇ／ｍｌ 白および検査用のウエルを複数用意する（結合反応体なしの糖類、共役用比較
標本）。

【０２３５】 活性化および結合： −以下のウエル毎に１００μｌの割合の糖液を連続的に置いていく。

【０２３６】 ＮＨＳ ５０μｌ／ウエル ＥＤＣ ５０μｌ／ウエル −プレートをプラスチックフィルムで覆う。

【０２３７】 −静かに撹拌しながら、室温で一晩プレートをインキュベートする。

【０２３８】 洗浄および飽和： 水（３００μｌ／ウエル）で３回洗浄。

【０２３９】 ３００μｌ／ウエルの緩衝液ＰＢＳ中５％の脱脂牛乳溶液により飽和。

【０２４０】 室温で１時間のインキュベーション ３００μｌ／ウエルの割合のＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ２０（０．０５％）により５
回洗浄。

【０２４１】 ＥＬＩＳＡ法による検出： −このようにして結合された糖類は、ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ−ＢＳＡ溶液中に２
５０分の１の割合で希釈されたモノクローナル抗体５Ｂ２により検出することが
でき、次いで１００μＬ／ウエルを沈殿させる。

【０２４２】 −ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ溶液で５回洗浄 顕現（発色）： −ＰＢＳ−ｔｗｅｅｎ−ＢＳＡ溶液中の共役１００μＬ／ウエル（たとえば、
５ＢＳを顕現させるために、５００分の１に希釈したラットＩｇＭ抗体）を沈殿
させ、室温で１時間インキュベートする。

【０２４３】 −ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ（３００μｌ／ウエル）５回洗浄 −テトラメチルベンジリデン（ＴＭＢ）をベースにした色原体基質の添加によ
る発色： −ＴＭＢ２００μｌ（発色キット、Ｓａｎｏｆｉ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ
Ｐａｓｔｅｕｒ，Ｍａｒｎｅｓ−Ｌａ−Ｃｏｑｕｅｔｔｅ） −室温で３０分間各プレートをインキュベートする。

【０２４４】 −Ｈ₂ＳＯ₄ ２Ｎ溶液により、１００μＬ／ウエル毎の反応を停止する。

【０２４５】 読取り： −４５０ｎｍの読取りフィルター −６２０ｎｍの基準フィルター。

【０２４６】 （実施例６）天然オリゴマンノシドに対して生成された抗体に対する合成オリ
ゴマンノシドの反応性 １）Ｃａｎｄｉｄａ種の酵母菌の天然オリゴマンノシドの抗原活性をまねる合
成オリゴマンノシド ａ）ポリクローナル抗体 Ｉａｔｒｏｎ社から市販されている単植性ポリクローナル抗体は、全酵母菌に
よるウサギの免疫化により調製され、さらに異性種の酵母により吸着されている
。群として使用することで、ヒト病理学に関連する主要Ｃａｎｄｉｄａ種の凝集
により識別が可能である。これらの「因子」のそれぞれは、日本で行われた一連
の免疫化学研究により明らかにされた特定エピトープと共に反応を起こす。これ
らの研究結果はＳ．Ｓｕｚｕｋｉによる刊行物（Ｓｕｚｕｋｉ，Ｓ．ら，１９９
７，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｍｙｃｏｌ．８：５７−７０）に総括されてい
る。

【０２４７】 図５および６は、β−１，２オリゴマンノシドに特異的なファクター５（□）
、およびアノマーαおよびβ−１，２の合成マンノテトラオースに対するα−１
，２オリゴマンノシドと反応するファクター１（■）に対して行われたテストを
示したものである。

【０２４８】 図５および６は観察を行った反応の特異性を証明するものである。

【０２４９】 ｂ）モノクロール抗体 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓのβ−１，２オリゴマンノシドと反応させるために、文
献には複数のモノクロール抗体が記載されている。図７は、これらモノクロール
抗体のうちいくつかとのＤ−Ｍａｎ β（１−２）Ｄ−Ｍａｎ β（１−２）Ｄ
−Ｍａｎ β（１−２）Ｄ−Ｍａｎの反応性を報告したものである。

【０２５０】 抗体５Ｂ２（Ｃａｉｌｌｉｅｚ，Ｊ．Ｃ．ら、１９８８，Ａｎｎ．Ｉｎｓｔ．
Ｐａｓｔｅｕｒ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１３９：１７１−８８；Ｈｏｐｗｏｏｄ
，Ｖ．ら、１９８６，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．５４：２２２−２２７；Ｐｏ
ｕｌａｉｎ，Ｄ．ら、１９９１，Ｍｙｃｏｓｅｓ ３４：２２１−２２６；Ｔｒ
ｉｎｅｌ，Ｐ．Ａ．，１９９２，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６０：３８４５−
３８５１）は我々のチーム（Ｄｒ．Ｐｏｕｌａｉｎ）により生成された。この抗
体はＣ．ａｌｂｉｃａｎｓに感染した動物および患者の血清中を循環するオリゴ
マンノシドを検出する。

【０２５１】 抗体ＡＦ１はＡ．Ｃａｓｓｏｎｅにより生成された（Ｄｅ Ｂｅｒｎａｒｄｉ
ｓ，Ｆ．ら，１９９３，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３１：３１４２３
１４６；Ｄｅ Ｂｅｒｎａｒｄｉｓ，Ｆ．ら、１９９４，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍ
ｕｎ．６２：５０９−５１９；Ｇｉｒｍｅｎｉａ，Ｃ．ら，１９９７，Ｊ．Ｃｌ
ｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３５：９０３−９０６；Ｔｏｒｏｓａｎｔｕｃｃｉ
，Ａ．ら，１９９０，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１３６：２１５５−２
２６３）。この抗体は膣カンジダ症の実験モデルにおける雌ラットを保護する。

【０２５２】 抗体１０ＧおよびＢ６．１はＪ．Ｃｕｔｌｅｒにより生成された（Ｌｉ，Ｒ．
ら，１９９１，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１３７：４５５ ４６４；Ｌ
ｉ，Ｒ．ら，１９９３，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：１８２９３−８；Ｋ
ａｎｂｅ，Ｔ．ら，１９９４，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６２：１６６２−８
；Ｈａｎ，Ｙ．ら，１９９５，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６３：２７１４−９
；Ｈａｎ，Ｙ．ら，１９９７，Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１７５：１１６９−
７５；Ｈａｎ，Ｙ．ら，１９９７，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６５：４１００
−７；Ｈａｎ，Ｙ．ら，１９９８，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６６：５７７１
−６；Ｚｈａｎｇ，Ｍ．Ｘ．ら，１９９８，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６６：
６０２７−９）。これらの抗体はＣ．ａｌｂｉｃａｎｓの接着に対して反応し、
播種性カンジダ症の実験モデルにおけるハツカネズミを保護する。

【０２５３】 比較標本として、Ｓａｎｏｆｉ−Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｐａｓｔｅｕｒによ
り生成され、シーケンスα−１，２マンノースを認識する、ＣＡ１と名付けられ
たモノクロール抗体を使用した（Ｊａｃｑｕｉｎｏｔ，Ｐ．Ｍ．ら，１９９８，
ＦＥＭＳ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．１６９：１３１−８；Ｐｏｕｌａｉ
ｎ，Ｄ．ら、１９９１，Ｍｙｃｏｓｅｓ ３４：２２１−２２６；Ｔｒｉｎｅｌ
，Ｐ．Ａ．，１９９２，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６０：３８４５−３８５１
）。

【０２５４】 図７の結果は、合成糖が、予期されたように、これらモノクロール抗体と反応
し、従って病態生理学においてすべてが大きな重要性をもつ抗原をまねる。

【０２５５】 ２）Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ種の酵母の天然オリゴマンノシドの抗原性活
性をまねる合成オリゴマンノシド。

【０２５６】 クローン病に罹った患者のＡＳＣＡ応答が導かれる主要エピトープの一つが式 Ｍａｎ α−１，３ Ｍａｎ α−１，２ Ｍａｎ α−１，２ Ｍａｎのマ
ンノテトラオースであることが証明された（Ｓｅｎｄｉｄ，Ｂ．ら，１９９６，
Ｃｌｉｎ．Ｄｉａｇｎ．Ｌａｂ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３：２１９−２６；Ｙｏｕｎ
ｇ，Ｍ．ら，１９９８，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ．Ｊ．１５：８１５−２２）。

【０２５７】 ａ）動物のポリクローナル抗体 Ｉａｔｒｏｎ血清をコントロールとした免疫化学研究に基づき、この構造は因
子３４と共に反応するはずである（Ｓｕｚｕｋｉ，Ｓ．ら，１９９７，Ｃｕｒｒ
．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｍｙｃｏｌ．８：５７−７０）。図８は観察結果が予期され
たものに一致することを示している。

【０２５８】 ｂ）患者の抗体 図９は、ＡＳＣＡテストを標準化するために役立つ、患者の血清プールを使用
することで、これらの抗体が、プレートを免疫活性化させるために使用される合
成抗原用量に依存する反応に従って固定されることが証明されたことを報告した
ものである。

【０２５９】 （実施例７）雌ラットの実験に基づく膣カンジダ症モデルにおける‘コロニー
形成’の阻害（Ｆ．ｄｅ Ｂｅｒｎａｒｄｉｓら、Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ
Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １９９８，６６：３３１７−３３２５）。

【０２６０】 卵巣を切除した雌ラットを、全実験中にわたり、２日毎に安息香酸エストラジ
オールを０．５ｍｇを皮下注射することにより偽発情の状態を維持させた。

【０２６１】 これらの動物に、酵母１０⁷の溶液０．１ｍＬを接種する。感染の動態を膣分
泌物中の酵母数を測定することで追跡する。分泌物１μＬを、目盛り検定が行わ
れているプラスチック製の匙により採取し、抗生物質を加えた寒天ｓａｂｏｕｒ
ａｏｕｄ箱上に広げ、２８℃で４８時間インキュベーションを行った後、コロニ
ーを形成している各単位を計数する。

【０２６２】 図１０のグラフは、それぞれ雌ラット５匹から成る４組について観察を行った
結果を表している。１：β−１，２マンノテトラオース（１００μｇ）を接種の
１時間前に投与した。２：接種の１時間後。３：接種の１時間、２時間、４８時
間後。

【０２６３】 （実施例８）合成β−１，２オリゴマンノシドによる、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ
の腸管コロニー形成阻害。

【０２６４】 浸透性カンジダ症の拡大は、医療環境における大きな医学的、経済的問題であ
る。これらのカンジダ症は、自然の生息地がヒトの消化器官である酵母によって
主に測定される。ヒトの４０〜８０％が、この類ではもっとも病因性である二つ
の種のＣ．ａｌｂｉｃａｎｓまたはＣ．ｇｌａｂｒａｔａの保菌者であると考え
られている。系統的カンジダ症の場合、一般に保菌者である患者の株からまき散
らされる。臨床蘇生患者または臨床血液病の患者ではコロニー形成の強度が、系
統的カンジダ症の進行には依存しない危険因子として論証されている。

【０２６５】 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによる腸管コロニー形成の原因となる配位子−レセプタ
ーシステムの性質はいまだ明らかにされていない。

【０２６６】 本発明人は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの側壁表面の特殊な糖類、β−１，２オリ
ゴマンノシドがｇａｌｅｃｔｉｎｅ−３を介してマクロファージ細胞に固定され
ることを証明することができた。β−１，２オリゴマンノシドは、マンナン、マ
ンノプロテイン、糖脂質、ＰＬＭなどの複数のタイプの分子に結合する隔壁（細
胞壁）表面に大量に発現する。ｇａｌｅｃｔｉｎｅ−３は特に極性上皮細胞上に
発現するレクチンとして知られている。したがって、これらの結果は、ｇａｌｅ
ｃｔｉｎｅ−３がβ−１，２オリゴマンノシドを介して腸へのＣ．ａｌｂｉｃａ
ｎｓ固定の原因である得ると推測させる。

【０２６７】 平行して、β−１，２オリゴマンノシドがカンジダ症の病原性においておそら
く役割を担っているだろうことが間接的に論証された。実際、これらの残滓に特
異的な抗体は、α位置に連結する、はるかにより偏在的なマンノース残滓に対し
て導かれる抗体に反してプロテクターとして振る舞う。保護の元となるメカニズ
ムは明らかにされていない。今日まで、β−１，２オリゴマンノシドの表面の表
現型発現と、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ株の病原性との間の関係分析に関する研究は
行われてこなかった。しかし、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの抗グリコプロテインモノ
クロール抗体を使った以前の研究では、この抗体が、腐性位置に単離された株よ
りも病原性位置に単離された株とはるかに多く反応することが証明されている。
ところで、この抗体がβ−１，２オリゴマンノシドエピトープと特異的に反応す
ることが後になって証明された。

【０２６８】 これらを基礎に、腸内コロニー形成におけるβ−１，２オリゴマンノシドの役
割を探るために行われた実験モデルでは、まずβ−１，２オリゴマンノシドのさ
まざまな表現型発現レベルを示すために選択された各Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ株を
関与させること、次いで、腸内コロニー形成に対するβ−１，２オリゴマンノシ
ドの投与の効果を調べることが目標とされた。

【０２６９】 各株は、雌ラットおよびハツカネズミでの、二つの系統的疾患実験モデルにお
ける各Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ株から、繁殖可能病原性の差違を証明した研究を基
に選択された。酵母と、複数のモノクロール抗体抗β−１，２オリゴマンノシド
により免疫活性を与えたラテックス粒子との共凝集から、もっとも毒性のある株
が、その表面により多くのβ−１，２オリゴマンノシドを発現するということを
証明することができた。用いられた腸内コロニー形成モデルは、Ｃｏｌｅらによ
り育成された新生児ハツカネズミのモデルであった。２つの株がそこに取り入れ
られ、その一つは《毒性のない》株よりもより多く表面にβ−１，２オリゴマン
ノシドを発現する《毒性のある》株である。フンの試験に基づき、毒性株は、β
−１，２オリゴマンノシドを発現するのが少ない株よりも消化器系コロニー形成
を強度にかつ持続的に維持できることが明らかになった。そこでこの強いコロニ
ー形成を阻害する試みが企てられた。この目的において、本発明に従って化学的
合成により得られたβ−１，２オリゴマンノシドが、株を接種する前に、子ネズ
ミに投与された。この方法を用いることで、生物学的材料を長時間かけて精製す
る必要がなく、純粋な生成物を大量に確保することができる。予防として合成β
−１，２オリゴマンノシドを投与することで、比較標本として使用される合成α
−１．２テトラマンノシドにより治療されないまたはされた動物と比較して、便
内に見いだされる酵母数の大幅な減少およびそれに依存する容量の減少を可能に
した。これらの結果は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓにより、その自然宿主の細胞およ
び内因性レクチンに特異的に存在するβ−１，２オリゴマンノシドの生体病理学
的重要性について得られていた情報を強化するものである。これはまた、Ｃ．ａ
ｌｂｉｃａｎｓの天然生成物の類似性に基づき、危険率の高い患者の消化管を除
染することを目指した予防措置の発展を予見させるものである。

【０２７０】 Ｉ−材料および方法 １）Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ株 血清型ＡのＣ．ａｌｂｉｃａｎｓの７株が用いられた。これらに対しては先の
実験で、ラットおよびハツカネズミの系統的カンジダ症モデルにおいて病原性の
違いを明らかにすることができた（Ｓｃｈｍｉｄｔ，１９９６ ＃２５５３）。
これは非毒性３株がＡＴＣＣ４４８３１、ＡＴＣＣ１８８０４、ＡＴＣＣ１０２
３１、毒性３株が４４５０５、ＡＴＣＣ６２３４２、ＡＴＣＣ１０２６１、およ
び中間毒性株のＡＴＣＣ３２３５４である。

【０２７１】 ２）モノクロール抗体抗β−１，２オリゴマンノシドにより免疫活性化された
ラテックス粒子による凝集 二つのモノクロール抗体がラテックス粒子を免疫活性化させるために使われた
。Ａ Ｃａｓｓｏｎｅ教授から提供されたモノクロール抗体ＡＦ１［Ｃａｓｓｏ
ｎｅ，１９８８ ＃３３３３］、およびＭ．Ｂｏｒｇ−ｖｏｎ−Ｚｅｐｅｌｉｎ
博士から提供されたモノクロール抗体ＤＦ９−３［Ｂｏｒｇ−ｖｏｎ−Ｚｅｐｅ
ｌｉｎ，１９９３ ＃２８３］である。これらのモノクロール抗体はβ−１，２
オリゴマンノシドエピトープに特異的である。これらは、一方で、新糖脂質に転
換され、マイクロタイトレーションプレートを免疫活性化するために使用される
、マンナンから派生するβ−１，２オリゴマンノシドエピトープと、他方で、こ
のエピトープ型しか発現しないＣ．ａｌｂｉｃａｎｓのＰＬＭと特異的に反応す
る［Ｔｒｉｎｅｌ，１９９２ ＃３６０３ ；Ｔｒｉｎｅｌ，１９９３ ＃３２
９２；Ｔｒｉｎｅｌ，１９９９ ＃３６９２］。

【０２７２】 上記の方法により免疫活性化されたラテックス粒子はｂｉｃｈｒｏ−ｌａｔｅ
ｘ(登録商標)タイプである。これらは着色され、読取りしやすくする追加の着色
がされた、酵母の自然凝集を阻止する溶液を含む緩衝液の中に懸濁される。［Ｑ
ｕｉｎｄｏｓ，１９９７ ＃３３２１］。テストの実施の際、ｓａｂｏｕｒａｕ
ｄ培地で２４℃で４８時間培養した後に得られた１ｍＬ当たり１０⁶酵母浮遊液
（マクファーランド度数）１５μＬがＢｉｃｈｒｏ−ｌａｔｅｘ１５μＬ存在下
に置かれ、撹拌機Ｋｌｉｎｅにより撹拌される。凝集スコアは、度数０．５〜２
、および累積度数に従って、撹拌１分後、２分後、３分後に肉眼により評価を行
った。この方法により、優れた繁殖性が証明された。凝集はＳｃｈｍｉｄｔによ
り提供された株に対して任意の数で無差別に行った。結果は後に示す。

【０２７３】 ３）動物 母ネズミおよびそれらの胎児（一腹当たり子ネズミ１０〜１５匹）が生後４日
目に届けられた（ＣＤｌ(登録商標)系統（Ｃｒｌ：ＣＤ−１(登録商標)（ＩＣＲ
）ＢＲ，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ，Ｓａｉｎｔ Ａｕｂｉｎ ｌｅｓ Ｅｌ
ｂｅｕｆ，フランス）。動物への接種は生後６日目に行われた。強制投与の前の
３時間の母ネズミからの分離、接種後１時間の待機を常に観察した。

【０２７４】 ４）株 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの二つの株が使用された。株４２７６はその表面でβ−
１，２オリゴマンノシドエピトープをほとんど発現せず、株４２７７は大量に発
現する。それぞれの使用前に、各株は、ＰＢＳ−グリセロール４０％内で−８０
℃で貯蔵されていた培地から、Ｓａｂｏｕｒａｕｄ−クロラムフェニコール（Ｓ
Ｃ）寒天上に移植された。３５℃で２４時間インキュベートした後、殺菌生理水
（ＮａＣｌ０．９％、水φ）により３回洗浄し、浮遊液を２×１０⁹／ｍｌに調
節した。接種体の生存率を、ペトリ箱における寒天ＳＣ上酵母浮遊液を適切に希
釈したものを播種して、実験毎に確認を行った。

【０２７５】 ５）合成糖類による処理 いくつかの実験に対して、合成糖類（β１−２オリゴマンノシド（βＭａｎ）
およびα１−２オリゴマンノシド（αＭａｎ）を、接種１時間前に強制投与した
。糖類は５０μＬ中で所望の濃度が得られるように、殺菌水中に希釈されている
（結果を参照）。二つの実験が別々に行われた。第１の実験では、株４２７７に
より感染させた４腹の子ネズミを、水（第１腹）、βＭａｎ５０μｇ（第２腹）
、βＭａｎ１５０μｇ（第３腹）、またはαＭａｎ１５０μｇ（第４腹）をそれ
ぞれ投与した後、比較を行った。第２の実験では、４腹を、水（第１および３腹
）またはβＭａｎ５０μｇ（第２および４腹）で処理した後、株４２７６（第１
および２腹）、あるいは４２７７（第３および４腹）で感染させた。

【０２７６】 ６）感染の監視 −死亡率：檻を１日一回監視して、子ネズミの数を記録する。

【０２７７】 −消化器系コロニー形成：接種後から連続して、各子ネズミからフンを採取し
て、殺菌水１００μｌ中で１．５ｍｌのエッペンドルフチューブに合わせた小型
ピストンを使って粉砕し、全量をペトリ箱の寒天ＳＣ上に播種した。３０℃で２
４時間インキュベートした後、コロニーを形成する単位の数を数えた。ＵＦＣの
密度が計数を妨げた場合は、統計的比較が可能なように、培地の外観に従って、
２または１０００ＵＦＣ、３または１０，０００ＵＦＣ、４または１００，００
０ＵＦＣのようにスコア（点数）が割り与えられた。

【０２７８】 ７）統計的分析 感染株によるおよび接種前の処理による消化器系コロニー形成を、マッキント
ッシュ用Ｓｔａｔｖｉｅｗ４．５ソフトを用いて、非パラメータテスト（グルー
プ数による、Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ ｏｕ Ｋｒｕｓｋａｌｌ−Ｗａｌｌｉ
ｓテスト）により比較した。１日目の陽性培地または死亡率のパーセンテージを
、Ｆｉｓｈｅｒ ｅｘａｃｔテストで比較した。

【０２７９】 ＩＩ−結果 １）Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの血清型Ａ株の毒性によるβ−１，２オリゴマンノ
シドの面発現。

【０２８０】 モノクロール抗体抗−β−１，２オリゴマンノシドにより免疫活性化されたｂ
ｉｃｈｒｏ−ｌａｔｅｘ粒子による、血清型Ａの７株に対して観察した凝集スコ
アは、系統的カンジダ症の実験モデルで観察されたそれらの毒性に応じて、表１
に示している。毒性のない株はすべて、毒性のある、または中間毒性のある株に
比べて凝集スコアが低かった。

【０２８１】 下記の表１は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ株の毒性に応じて、抗体ＤＦ９−３およ
びＡＦ１により免疫活性化させたｂｉｃｈｒｏ−ｌａｔｅｘ粒子を使うことで、
凝集スコアを示している。

【０２８２】

【表１】

【０２８３】 ２）非毒性株よりも多くのβ−１，２オリゴマンノシドを発現する毒性株のハ
ツカネズミへの接種により観察された死亡率および消化器系コロニー形成の差違
。

【０２８４】 ａ）死亡率 それぞれ独立した３つの実験で得られたデータを重ね合わせることで、株１０
２６１の接種後の早期死亡率（１日目）は、株１０２３１の接種後に観察された
死亡率よりも高いことが分かった（３／６３対１／６２、ｐ＝０．０５９ Ｆｉ
ｓｈｅｒ ｅｘａｃｔテスト）。

【０２８５】 ｂ）消化器系コロニー形成 存在するＵＦＣ数は、子ネズミが株２４７６を接種された場合よりも、株４２
７７が接種された場合の方が有意に高く、これは監視を行ったいずれの時間でも
同様であった（表１）。さらにコロニー形成は、有意に、より長期に持続した（
感染後３３日目にまだ感染フンであるのが、株１０２３１を接種された子ネズミ
が僅か５／１１に対して、株１０２６１で感染させた子ネズミは１１／１１であ
った。ｐ＝０．００６ Ｆｉｓｈｅｒ ｅｘａｃｔテスト）。

【０２８６】 ３）消化器系コロニー形成に対するアノマーａまたはｂ−１、２合成テトラマ
ンノシドの予防効果。

【０２８７】 病原性株４２７７の接種に先だって合成テトラマンノシドを投与することで、
使用する糖類の連結アノマーに従って異なる結果が得られた。結果は表２および
図１１に示した。

【０２８８】 下記の表２は感染性の株の変化に応じた消化器管の動態を表したものである。

【０２８９】

【表２】

【０２９０】 株１０２６１の接種前のαＭａｎの投与では消化器系コロニー形成の度合いを
変化させることはなかった（ＵＦＣの中央値＝２５８対１９６）が、βＭａｎの
投与では、有意に、かつ用量が多ければ多いほどより大きくこれを現象させた（
５０μｇでは比較標本に対し、ＵＦＣの中央値＝４８．５、ｐ＜０．０２、１５
０μｇでは比較標本に対し５、ｐ＜０．０００１）（図１）。

【０２９１】 ＩＩＩ−討議 消化器系コロニー形成は、入院患者のカンジダ症系統的疾患が非常に制御しに
くい原因と考えられている。ヒトのＣ．ａｌｂｉｃａｎｓによる自然コロニー形
成の生物学的および医学的重要性にもかかわらず、その詳しい分子メカニズムは
未知のままである。Ｇａｌｅｃｔｉｎｅ−３がβ−１，２オリゴマンノシドに対
して特異的レセプターの役割をするヒトの内因性レクチンであるという最近の思
いがけない発見は、この分野での新しい展望を開くものである。ｇａｌｅｃｔｉ
ｎｅ−３は大半が腸細胞上で発現するレクチンだからである。平行してβ−１，
２オリゴマンノシドはカンジダ症病原性にかかわる分子としてますます出現して
きているが、株の病原性と関係するそれらの表現型発現分析に関する研究はまっ
たく行われていない。この研究において、系統的カンジダ症モデルにおけるＣ．
ａｌｂｉｃａｎｓ株の間で観察された毒性の差違は、β−１，２オリゴマンノシ
ドの表面発現レベルに関係することが今回証明された。第二段階で、新生子ネズ
ミに、経口で、異なる毒性およびオリゴマンノシド発現レベルの二つの株に由来
する酵母を同量接種した。β−１，２オリゴマンノシドをより多く発現する毒性
株は、子ネズミのより高い死亡率ならびにより密度の高いかつより持続的なコロ
ニー形成をもたらした。これらの結果から、酵母株の細胞表面に存在するβ−１
，２オリゴマンノシドの毒性および／または量は子ネズミを死亡に至らせる、ま
たより強度にかつより長期にコロニー形成させるそれらの能力に関係すると考え
られる。腸内コロニー形成におけるβ−１，２オリゴマンノシドの役割の仮説を
検証すべく、予防としてこれらの残滓を、もっとも毒性の強い株を接種する前に
投与した。Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの接種前に、子ネズミにβ−１，２オリゴマン
ノシドを強制投与すると、投与用量に依存するコロニー形成が減少した。β−１
，２オリゴマンノシドを１５０μｇ投与してほとんど全面的な減少が観察された
のに対して、α−１．２テトラマンノシドが同じ条件で投与された場合には観察
されなかった。これらの結果は、入院中に系統的カンジダ症を進行させる恐れの
ある患者の消化管でのコロニー形成を阻止することを目指す措置を実現可能にす
るものである。これは、集中的化学治療、骨髄移植、人工臓器手段を受ける患者
、または経腸投与を受ける可能性のある医学的蘇生患者に関するものである。現
在まで、消化器官の脱コロニー形成を目標とする予防方法が幾度も試みられてき
た。消化器官のバリアを通らない、アンホテリシンＢの経口投与では実際の確か
な結果は得られていない。最近、抗Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ免疫グロブリンの投与
もまた提案されたが、既知のエピトープの性質もこの方法の本当の効果もまだ未
知である。Ｓ．ｂｏｕｌａｒｄｉｉ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）の投与は、腸
内生態的地位におけるＣ．ａｌｂｉｃａｎｓと競合する可能性のあるプロバイト
ティックの使用に対して長年知られてきた方法に一致するものである。その有効
性に関するデータには矛盾があり、Ｓ．ｂｏｕｌａｒｄｉｉにより測定される敗
血症の幾例かは−しかし治療を受けた患者の数に対してまれであるが−この予防
のあり方が再び問われる恐れがある。β−１，２オリゴマンノシドのような接着
における役割をもつ酵母分子を使用することは、プロバイトティック療法の範囲
に入るものである。これらのβ−１，２オリゴマンノシドは、自らの表面に自然
にβ−１，２オリゴマンノシドを発現させる酵母と共に本来腸の中に存在し、し
たがって通常有機体により容認される分子である。現在までのところ、これらの
残滓の生物学的役割に対する研究は、生物学材料の調製すなわち汚染する可能性
のあるあらゆる危険を伴って、長期にわたる手順を行って酵母から生物化学的に
調製した材料を使用することで行われてきた。この研究の独創性の一つは、Ｃ．
ａｌｂｉｃａｎｓ株の構造に完全に類似した構造の合成糖類を使用することにあ
る。この合成に用いられる手順により大量獲得が容易にできる。多くの問題合成
のβ−１，２オリゴマンノシドによる、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓのコロニー形成阻
止の本質的なメカニズム、ならびに化学的構成の用量の最適化に関するものであ
る。それでもこの研究が、生物学の面において、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓにより自
然宿主の細胞および内因性レクチンに特異的に存在するβ−１，２オリゴマンノ
シドの生体病理学重要性について得られている情報を強化するものであることに
変わりはない。同時に、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの天然生成物の類似を基にした革
新的なものであり、危険な状態にある患者の消化器系コロニー形成の除染を目指
した予防措置の発展を予見させるものである。この戦略は、すでに実施されてい
る他の方法を補って、感染力が、患者のホメオスタシスに影響を与える内外科技
術の進展と共に増大している日和見性因子の、入院患者の消化器官内での自然の
存在に関連した大きな感染問題の解決に貢献することができるであろう。

【０２９２】 （実施例９）膣カンジダ症に対する合成β−１，２オリゴマンノシドの治療
効果 膣カンジダ症は、害を及ぼさない限りは酵母である、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓに
より主に引き起こされる日和見感染症である。その本来の生息地はヒトの消化器
官（およそヒトの５０％）および女性の１０％の膣である。酵母は病気の症状を
まったく示さずに膣の中で増殖する。しかしこれらの存在は女性の生理的状態に
関係がある。たとえば、妊娠中には、膣がＣ．ａｌｂｉｃａｎｓによりコロニー
形成される女性のパーセンテージは３０％にまで増大する。 これらの関連以外に、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ表面における単純な繁殖が膣の中心
に広がり、かゆみ、痛み、白帯下を伴う非常に厄介な感染を引き起こすことがあ
る。それらが突発する原因は明らかではない。メカニズムは複雑であり、感染の
症状は防衛反応により増幅されることがかなり確実である。

【０２９３】 現在、女性の７５％がその生涯のうち少なくとも一度は膣カンジダ症の症状に
苦しんでいるとされている。そのうち２０％以上には理論的に非常に有効とされ
る抗真菌薬にもかかわらず、治療の難しい再発が起こっている。これらの再発は
、女性人口の予想外に多くの割合に肉体的、精神的影響を与えている。これは本
来の意味では性的に伝染しうる病気ではないが、数百万の女性および夫婦の生活
に影響を与えているものである。

【０２９４】 本発明人は、酵母の、腐性、無害および病原性の各形態間の変化の際に機能す
るメカニズムを研究した。病因論にかかわるＣ．ａｌｂｉｃａｎｓの主な生物学
的特性は、宿主の細胞に接着して、組織内に侵入し、防衛反応をかわすことがで
きることである。

【０２９５】 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの変化をその病原性との関連において分析をすることで
、本発明人は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓが細胞に接着する仲立ちをし、免疫反応を
調製することのできる分子を突き止めることができた。これらの分子は、ある種
のカンジダ種、より詳細にはＣ．ａｌｂｉｃａｎｓに特別な糖：β−１，２オリ
ゴマンノシドを発現すると言う共通点がある。

【０２９６】 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓから精製されたこれらの糖類を使った複数の研究で、こ
れらがヒトの細胞に固定されること、特別なレセプターにより行われるこの固定
がターゲットとなる細胞の反応を引き起こすことが証明された。

【０２９７】 一方でカンジダ症の病原性におけるβ−１，２オリゴマンノシドの重要性、他
方で酵母からこれらを大量に得ることの困難さが、本発明による化学的合成によ
り得られる相同を調製し使用することに至らせることになった。

【０２９８】 調査作業により、膣分泌物内のβ−１，２オリゴマンノシドの存在はＣ．ａｌ
ｂｉｃａｎｓの病原性挙動の優れた標識であることを証明することができた。

【０２９９】 したがって、β−１，２オリゴマンノシドを識別する抗体抗マンナンおよびＡ
Ｆ１と呼ばれるモノクロール抗体は雌ラットを膣カンジダ症から守ることが証明
された。

【０３００】 これらの結果から、Ｃａｎｄｉａ ａｌｂｉｃａｎｓによるβ−１，２オリゴ
マンノシドの産出は、カンジダ症の病原性プロセスにおいて重要な要素であると
考えることができる。したがって、合成β−１，２オリゴマンノシドを（酵素と
して）投与することで、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓが相互作用を行う膣細胞の配位子
を飽和にすることができ、このようにして、特異的相互作用部位から酵母を除く
ことができると考えられた。

【０３０１】 国際社会で認められており、もっとも的確な動物実験が今日まで行われてきて
いる膣カンジダ症モデルが用いられた。

【０３０２】 二つの一連の試験で得られた結果は完全に一致した。接種後１時間、２４時間
、４８時間の合成β−１，２オリゴマンノシドの投与によるコロニー形成／感染
阻止と用量の関係が証明された。最大用量であっても、比較標本として同じ方法
で投与されたα−１，２オリゴマンノシドは、下記の表３にあるように何の効果
も示さなかった。したがって、β−１，２オリゴマンノシドを投与された動物は
、投与の第１日目から半分近くまでコロニー形成が減少し、実験の終了時にはＣ
．ａｌｂｉｃａｎｓはもはや保菌するものはなかった。

【０３０３】

【表３】

【０３０４】 したがって、たとえば、女性の卵細胞に含まれる天然物に完全に類似した無害
の糖類により、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓによる感染を阻止することが可能と思われ
る。

【０３０５】 （産業上の利用可能性） これらの結果は、たとえば従来の抗真菌薬治療を補うものとして、医学的にか
つ経済的に重要な影響及ぼすものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】式（Ｉ）のＤ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍ
ａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎの調製の反応概要を示す。

【図２】式（ＩＩ）のＤ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐
Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎの調製の反応概要を示す。

【図３】式（ＩＩＩ）のＤ‐Ｍａｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ
‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）の調製の反応概要を示す。

【図４】ジマンノシドＭａｎα（１‐２）Ｍａｎの調製の反応概要を示す。

【図５】および

【図６】は、アノマーα及びβ‐１，２の合成マンノテトラ
オースに関して、β‐１，２オリゴマンノシドに特異的な第５因子及びα‐１，
２オリゴマンノシドと反応する第１因子についてそれぞれＤ‐Ｍａｎα（１‐２
）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）及び
Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍ
ａｎで実施した試験を報告するものである。

【図７】Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１
‐２）Ｄ‐Ｍａｎのいくつかのモノクローナル抗体との反応性を示す。

【図８】合成マンノテトラオースＤ‐Ｍａｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１
‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎの抗原性因子３４に対する抗原反応性
を示す。

【図９】クローン病を発症した患者の血清プールの合成マンノテトラオース
に対する血清反応性を示す。

【図１０】雌性ラットの実験的膣カンジダ症モデルにおける、本発明のテト
ラマンノシドによるコロニー形成の阻害を報告している。

【図１１】合成糖の事前投与に応じた菌株１０２６１による消化管コロニー
形成の比較を示す。水（コントロール）、５０μｇ（５０β）又は１５０μｇ（
１５０β）のβＭａｎ、若しくは１５０μｇのαＭａｎ（１５０α）を摂取した
マウスについて、ＣＦＵ／フンの測定により接種後７日目に消化管コロニー形成
を評価した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ， ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，Ｊ Ｐ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ， ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 レイナルド シェバリエ カナダ国 トロント エム５アール ３ピ ー６ 95 プリンス アーサー アベニュ ー アパートメント 819 (72)発明者 ジャン−フレデリック コロンベル フランス国 エフ−59110 ラ マドレー ヌ リュー フェデルブ 52 (72)発明者 ジャン−モーリス マレー フランス国 エフ−94270 ル クレムリ ン−ビセール リュー ダントン 44 (72)発明者 ブアレム センディ フランス国 エフ−59120 ルース リュ ー ジャン−ジャック ルソー 91 (72)発明者 ティエリー ジュオー フランス国 エフ−59650 ビルヌーブ ダスク アレ デ コクリコ 19 (72)発明者 ダニエル プラン フランス国 エフ−59242 タンプルーブ ４ カリエール サン−ジョゼフ (72)発明者 ピエール−アンドレ トリネル フランス国 エフ−59650 ビルヌーブ ダスク リュー ジュル ゲスド 291 Ｆターム(参考） 4C057 AA03 BB04 4C085 AA14 CC33 4C086 AA01 AA02 AA03 AA04 EA01 MA01 NA14 ZA81 ZB35 ZC54

Claims (28)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】化学合成によって調製されるオリゴマンノシドであって、感染
   性若しくは病原性生物またはその変異体の外膜のオリゴマンノシドに相同である
   ことを特徴とするオリゴマンノシド。
2. 【請求項２】その細胞エンベロープがオリゴマンノシドを含む酵母、真菌、
   ウイルス、細菌の外膜のオリゴマンノシドに相同であることを特徴とする、請求
   項１に記載の合成オリゴマンノシド。
3. 【請求項３】カンジダアルビカンス（Candida albicans）又はサッカロマイ
   セスセレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）の細胞エンベロープのオリゴマン
   ノシドに相同であることを特徴とする、請求項１または２に記載の合成オリゴマ
   ンノシド。
4. 【請求項４】官能基の１つがマーカー基又はコネクター基で置換されている
   ことを特徴とする前述の請求項のいずれかに記載の合成オリゴマンノシド。
5. 【請求項５】次式： ［Ｍａｎα（１‐３）］ｐ［Ｍａｎα（１‐２）］ｑ［Ｍａｎβ（１‐２）］
   ｒ（αまたはβ）‐Ｍａｎ‐ＯＲ ［式中、 Ｒは、水素原子、Ｃ₁〜Ｃ₂₀、好ましくはＣ₁₅〜Ｃ₂₀アルキル、又は場合によ
   って標識されたコネクター基、又はオリゴマンノシドを免疫原性にすることがで
   きる物質を表わし、 ｐ、ｑ及びｒは０〜１９まで、好ましくは０〜１１までの整数であって、ｐ＋
   ｑ＋ｒの合計が１〜１９まで、好ましくは１〜１１までであり、 ポリマー［Ｍａｎα（１‐３）］ｐ［Ｍａｎα（１‐２）］ｑ［Ｍａｎβ（１
   ‐２）］ｒの３つの部分は逆位にする又は反復することができる］ に対応することを特徴とする前述の請求項のいずれかに記載の合成オリゴマン
   ノシド。
6. 【請求項６】次式（Ｉ）： 【化１】 ［式中、Ｒは、水素原子、Ｃ₁〜Ｃ₂₀、好ましくはＣ₁₅〜Ｃ₂₀アルキル、又は
   場合によって標識されたコネクター基、又はオリゴマンノシドを免疫原性にする
   ことができる物質、又はヒドロキシル基の１個又はそれ以上が置換されているそ
   の誘導体を表わす］ に対応することを特徴とする前述の請求項のいずれかに記載の合成オリゴマン
   ノシド。
7. 【請求項７】次式（ＩＩ）： 【化２】 ［式中、Ｒは式（Ｉ）と同じ意味を表わす］ に対応することを特徴とする前述の請求項のいずれかに記載の合成オリゴマン
   ノシド。
8. 【請求項８】次式（ＩＩＩ）： 【化３】 ［式中、Ｒは式（Ｉ）と同じ意味を表わす］ に対応することを特徴とする前述の請求項のいずれかに記載の合成オリゴマン
   ノシド。
9. 【請求項９】コネクターが、好ましくは共有結合によって、合成オリゴマン
   ノシドをマイクロタイトレーションプレートのような保持体に結合することがで
   きる化学基であることを特徴とする前述の請求項のいずれかに記載の合成オリゴ
   マンノシド。
10. 【請求項１０】コネクターが、それ自体が活性化された表面上で結合のため
    に活性化することができるカルボン酸官能基を備えるタイプであることを特徴と
    する請求項９に記載の合成オリゴマンノシド。
11. 【請求項１１】保護された単糖類又は二糖類を、好ましくはジブロック（di
    bloc）による戦略に従って保護されたジマンノシドの縮合によって、縮合するこ
    とから成ることを特徴とする請求項１〜１０のいずれかに記載の合成オリゴマン
    ノシドの調製方法。
12. 【請求項１２】ａ）-２個のブロックのうちの少なくとも１個が、出発官能
    基によって活性化される他のジブロックとの縮合に必要なものを除いて、各々の
    単糖類の遊離ヒドロキシル官能基が同じか又は異なる１個又はそれ以上の保護基
    によって置換されている中間ブロックであり、 -２個のブロックのうちの少なくとも１個が、他のジブロックとの縮合に必要
    なもの及び場合によって保持体へのオリゴマンノシドの固定のための結合基で置
    換されているものを除いて、各々の単糖類の遊離ヒドロキシル官能基が同じか又
    は異なる１個又はそれ以上の保護基によって置換されている末端ブロックである
    ジブロックの調製、 ｂ）上記ジブロックを縮合し、次いでそのようにして調製したオリゴマンノシ
    ドを脱保護することを含むことを特徴とする請求項１１に記載の方法。
13. 【請求項１３】ステップ（ａ）で、次式（ＩＶ）： 【化４】 ［式中、 ‐Ｒは永久保護基であり、 ‐Ｒ１は一時保護基であり、 ‐Ｒ２は： ・中間ブロックの場合には出発基であり、この場合ブロックはα又はβとして
    ポリマーの残りの部分に結合していてもよく、 ・末端ブロックの場合には、α又はβとして、アルキル基、ベンジル基、又は
    コネクター基から選択される基である］ の少なくとも１個のジマンノシドＭａｎα（１‐２）Ｍａｎを調製することを
    特徴とする請求項１２に記載の方法。
14. 【請求項１４】ステップ（ａ）で、次式（Ｖ）： 【化５】 ［式中、 ‐Ｒ１は一時保護基であり、 ‐Ｒ２は： ・中間ブロックの場合には出発基であり、この場合ブロックはα又はβとして
    ポリマーの残りの部分に結合していてもよく、 末端ブロックの場合には、α又はβとして、アルキル基、ベンジル基、又はコ
    ネクター基から選択される基である］ の少なくとも１個のジマンノシドＭａｎβ（１‐２）Ｍａｎを調製することを
    特徴とする請求項１２に記載の方法。
15. 【請求項１５】ステップ（ａ）で、次式（ＶＩ）： 【化６】 ［式中、 ‐Ｒは永久保護基であり、 ‐Ｒ１は一時保護基であり、 ‐Ｒ２は： ・中間ブロックの場合には出発基であり、この場合ブロックはαとしてポリマ
    ーの残りの部分に結合していてもよく、 ・末端ブロックの場合には、α又はβとして、アルキル基、ベンジル基、又は
    コネクター基から選択される基である］ の少なくとも１個のジマンノシドＭａｎα（１‐３）Ｍａｎを調製することを
    特徴とする請求項１２に記載の方法。
16. 【請求項１６】式（Ｖ）の２個のブロックＭａｎβ（１‐２）を縮合し、そ
    のうちの１個が、Ｒ２が出発基であり、β結合を形成する中間ジブロックであっ
    て、他の１個が、Ｒ２が‐ＳＰｈ基である末端ジブロックであることを特徴とす
    る、式（Ｉ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２
    ）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎの調製方法。
17. 【請求項１７】式（ＩＶ）の２個のブロックＭａｎα（１‐２）Ｍａｎを縮
    合し、そのうちの１個が、Ｒ２が出発基である中間ジブロックであり、他の１個
    が、Ｒ２が‐ＳＰｈ基である末端ジブロックであることを特徴とする、請求項１
    ３に記載の式（ＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα
    （１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎの調製方法。
18. 【請求項１８】式（ＶＩ）の１個のジブロックＭａｎα（１‐３）Ｍａｎと
    式（ＩＶ）の１個のジブロックＭａｎα（１‐２）Ｍａｎを縮合し、中間ジブロ
    ックが、Ｒ２が出発基である式（ＶＩ）のＭａｎα（１‐３）Ｍａｎであり、末
    端ジブロックが、Ｒ２が式（ＩＩＩ）で定義されるＲ基を表わすＭａｎα（１‐
    ２）Ｍａｎであることを特徴とする、式（ＩＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａ
    ｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（
    １‐２）の調製方法。
19. 【請求項１９】感染性又は病原性生物、特にその膜がオリゴマンノシドを含
    む酵母、真菌、ウイルス、細菌による感染の存在を患者のサンプルに関してイン
    ビトロで検出する方法であって、好都合にはあらかじめ保持体上に固定した、請
    求項１〜１０のいずれかに記載の少なくとも１個の合成オリゴマンノシドを、感
    染性又は病原性生物に対する抗体を含む可能性がある生物学的サンプルと接触さ
    せ、その後抗原‐抗体複合体の形成を検出することを特徴とする検出方法。
20. 【請求項２０】請求項１９に記載の、特にカンジダ症の診断のための、Ｃ．
    ａｌｂｉｃａｎｓによる感染の特異的検出方法であって、式（Ｉ）のテトラマン
    ノシドＤ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎβ（１‐２）
    Ｄ‐Ｍａｎ及び式（ＩＩ）のテトラマンノシドＤ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａ
    ｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎの少なくとも１個を生物学的
    サンプルと接触させることを特徴とする検出方法。
21. 【請求項２１】請求項１９に記載の、感染性及び／又は炎症性疾患の診断又
    は予測のための抗オリゴマンノシド抗体の検出方法であって、請求項１〜１０の
    いずれかに記載の合成オリゴマンノシドの少なくとも１個を生物学的サンプルと
    接触させることを特徴とする検出方法。
22. 【請求項２２】クローン病又はウイルス性肝炎の診断のための抗Ｓ．ｃｅｒ
    ｅｖｉｓｉａｅ抗体の検出方法であって、請求項１〜１０のいずれかに記載の合
    成オリゴマンノシドの少なくとも１個を生物学的サンプルと接触させることを特
    徴とする検出方法。
23. 【請求項２３】合成オリゴマンノシドが式（ＩＩＩ）のテトラマンノシドＤ
    ‐Ｍａｎα（１‐３）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａｎα（１‐２）Ｄ‐Ｍａ
    ｎα（１‐２）であることを特徴とする、請求項１９〜２２のいずれかに記載の
    方法。
24. 【請求項２４】好都合には保持体上に固定された、請求項１〜１０のいずれ
    かに記載の少なくとも１個の合成オリゴマンノシド、抗原‐抗体複合体の形成を
    検出するための手段、及び場合によって対照試薬を備えることを特徴とする、請
    求項１９〜２３のいずれかに記載の方法を実施するためのキット。
25. 【請求項２５】糖類を免疫原性にすることができる物質に結合した請求項１
    〜１０のいずれかに記載の合成オリゴマンノシドから形成されるコンジュゲート
    （conjugate）。
26. 【請求項２６】請求項２５に記載のコンジュゲートに対するポリクローナル
    又はモノクローナル抗体。
27. 【請求項２７】好都合には組成物において製薬上許容される賦形剤と組み合
    わせた、請求項１〜１０のいずれかに記載の少なくとも１個の合成オリゴマンノ
    シド又は請求項２５に記載のコンジュゲートを有効成分として備えることを特徴
    とする製薬組成物。
28. 【請求項２８】その膜がオリゴマンノシドを含む感染性又は病原性因子によ
    るコロニー形成を抑制するために使用される、請求項２７に記載の組成物。