JP2003525253A

JP2003525253A - 抗ニューロトロフィン剤を用いる癌の治療方法

Info

Publication number: JP2003525253A
Application number: JP2001563144A
Authority: JP
Inventors: バクコビチ，カレン・ジエイ; デイオン，クレイグ・エイ; ミクニオツキ，シーラ・ジエイ; ラジエリ，ブルース・エイ
Original assignee: セフアロン・インコーポレーテツド
Priority date: 2000-02-29
Filing date: 2001-02-28
Publication date: 2003-08-26
Also published as: EP1261372A2; AU3991301A; CA2401604A1; HK1049961B; EP1261372B1; US6548062B2; US20010046959A1; CN1420785A; WO2001064247A2; CA2401604C; ES2286110T3; HK1049961A1; NZ521165A; ATE361100T1; WO2001064247A3; MXPA02008465A; CN1227033C; DE60128208D1; AU2001239913B2; DE60128208T2

Abstract

(57)【要約】治療上有効な量の最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺乳動物に投与することによる癌の治療もしくは予防方法を記述する。抗ニューロトロフィン剤は、好ましくは抗ニューロトロフィン抗体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結合する小型の有機分子、もしくはニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプターの優性ネガティブ変異体である。本方法は前立腺もしくは膵癌の治療にとりわけ好ましい。抗ニューロトロフィン剤はＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、ＮＴ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７を中和し、かつ、ヒト化抗体ならびにそれらのフラグメントを包含する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は腫瘍学の分野に関し、かつ、癌、とりわけ前立腺および膵癌の治療も
しくは予防方法に向けられる。本発明はまた、ニューロトロフィンの領域、なら
びに癌および／もしくは疼痛の治療もしくは予防における例えば抗体のような抗
ニューロトロフィン剤の使用にも関する。

【０００２】（発明の背景）ニューロトロフィン（ＮＴ）は４種の公知の構造的におよび機能的に関係した
タンパク質、すなわち神経成長因子（ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ
）、ニューロトロフィン−３（ＮＴ−３）、ニューロトロフィン−４／５（ＮＴ
−４／５）を包含する特定の神経栄養因子の一サブファミリーである。最近、２
種の付加的なＮＴ、すなわちニューロトロフィン−６（ＮＴ−６）およびニュー
ロトロフィン−７（ＮＴ−７）が発見された。ニューロトロフィンは、チロシン
キナーゼ活性を有する特定の細胞表面膜レセプターに結合しかつ活性化する。こ
れらのレセプターはｔｒｋレセプターとして知られており、そして３種のサブタ
イプｔｒｋＡ、ｔｒｋＢおよびｔｒｋＣに従って分類されている。各ｔｒｋレセ
プターサブタイプは１種もしくはそれ以上のＮＴに優先的に結合する（ＮＧＦは
ｔｒｋＡに、ＢＤＮＦおよびＮＴ−４／５はｔｒｋＢに、そしてＮＴ−３はｔｒ
ｋＣに）。しかしながら、ＮＴの交差反応性がレセプターサブタイプ間に存在す
ることが既知である。ＮＴによるｔｒｋレセプターの活性化は、レセプターのオ
リゴマー化および特定の細胞内物質のチロシンホスホリル化をもたらす。ｔｒｋ
レセプターに加え、第二の型の細胞表面膜レセプターがＮＴを結合することが既
知である。このレセプターは低親和性神経成長レセプターｐ７５^NTR（ｐ７５）
であり、より高親和性のｔｒｋレセプターへの結合に対するＮＴの親和性および
／もしくは利用可能性の調節に関与していると考えられている。しかしながら、
レセプターｐ７５の特別の生理学的役割は論争中のままである。

【０００３】中枢および末梢神経系の細胞の成長、分化および生存でＮＴが不可欠の役割を
演じていることは広く認識されている。しかしながら、ＮＴは神経系の外で腫瘍
の生物学にもまた寄与しているという最近の証拠が存在する。ニューロトロフィ
ンおよびそれらのレセプターのサブタイプは、前立腺、乳房、甲状腺、結腸およ
び肺癌を包含する多様な癌、ならびに悪性黒色腫、膵カルチノイドおよび膠芽腫
に関与している。とりわけ、ｔｒｋレセプターＡ、ＢおよびＣの異常な発現が膵
管腺癌（ＰＤＡＣ）で見出されており、そしてＮＴはこの腫瘍型の侵襲性に影響
する可能性がある（Ｍｉｋｎｙｏｃｚｋｉら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、１９
９９、８１、４１７）。加えて、ＮＧＦはＰＤＡＣに関連する神経周囲の侵襲お
よび疼痛と相互に関連づけられている（Ｚｈｕら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．
、１９９９、１７、２４１９）。ｔｒｋＡはまた前立腺の上皮組織中で発現され
ることも知られており、そして対応するニューロトロフィンＮＧＦは前立腺癌の
増殖の刺激に関与している。ＮＧＦに対する免疫反応性は、ヒト前立腺癌（Ｄｅ
Ｓｃｈｒｙｖｅｒ−Ｋｅｃｓｋｅｍｅｔｉら、Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈｏｌ．、１
９８７、１１１、８３３）および腫瘍由来の細胞系（ＭａｃＧｒｏｇａｎら、Ｊ
．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、１９９２、５９、１３８１）で立証されており、この
癌におけるＮＧＦの可能な有糸分裂促進もしくは生存の役割を示唆している。さ
らに、前立腺癌細胞は、インビトロでＮＧＦに応答して走化性（Ｄｊａｋｉｅｗ
ら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、１９９３、５３、１４１６）かつ侵襲性（Ｇｅｌ
ｄｏｆら、Ｊ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、１９９７、１
２３、１０７）であることが示されている。

【０００４】ｔｒｋは、前立腺癌（Ｄｅｌｓｉｔｅら、Ｊ．Ａｎｄｒｏｌ．、１９９６、１
７、４８１、Ｐｆｌｕｇら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１９９５、１３６、
２６２、Ｐｆｌｕｇら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、１９９２、５２、５４０３、
Ｄｊａｋｉｅｗら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、１９９１、５１、３３０４、Ｐａ
ｓｓａｎｉｔｉら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、１９９２、５１、３１８、Ｍａ
ｃＧｒｏｇａｎら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、１９９２、５９、１３８１、Ｇ
ｅｌｄｏｆら、Ｊ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９９７、
１２３、１０７、Ｐｆｌｕｇら、Ｍｏｌ．Ｃａｒｃｉｎ．、１９９８、１２、１
０６およびＧｅｏｒｇｅら、ＴｈｅＰｒｏｓｔｒａｔｅ、１９９８、３６、１
７２）ならびに膵癌（Ｏｉｋａｗａら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐａｎｃｒｅａｔ．、１９
９５、１８、１５、Ｏｈｔａら、Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１９９７、１８１、４０
５、Ｍｉｒａｌｌｅｓら、Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１９９８、１５６
、４３１、およびＭｉｋｎｙｏｃｚｋｉら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｇｅｎ
ｅｓｉｓ、１９９６、７、８９）の双方である役割を演じていることが示されて
いる。

【０００５】ある種の癌の発生および進行におけるｔｒｋの活性の可能な役割により、ＮＴ
−ｔｒｋ軸の選択的破壊が可能な治療手段として標的を定められている。とりわ
け、ｔｒｋレセプターを阻害する能力を示す小分子が開発かつ試験されている（
Ｒｕｇｇｅｒｉら、ＣｕｒｒｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ
、１９９９、６、８４５）。グリコシル化されたインドロカルバゾールアルカロ
イドＫ−２５２ａおよびＫ−２５２ｂは、ＮＧＦおよび他のニューロトロフィン
の生物学的作用を阻害することが知られている。Ｋ−２５２ａは、低いナノモル
濃度でｔｒｋＡならびにｔｒｋＢおよびｔｒｋＣ、ならびに他の関係するニュー
ロトロフィンレセプターの自己リン酸化を特異的に阻害することが報告されてい
る（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ、ＣｅｌｌＢｉｏｌ．、１９８８、１０７、１５３１
；Ｂｅｒｇら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、１９９２、２６７、１３；Ｔａｒｐ
ｌｅｙら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、１９９２、７、３７１；Ｏｈｍｉｃｈｉら、Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９２、３１、４０３４；Ｍｕｒｏｙａら、Ｂｉｏｃ
ｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．、１９９２、１１３５、３５３；およびＮ
ｙｅら、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ、１９９２、３、６７７）。Ｋ−２５２ａ
の糖部分の修飾により、２種の付加的な強力なｔｒｋ阻害剤が開発された。とり
わけ、Ｋ−２５２ａのヒドロキシメチル誘導体ＣＥＰ−７５１が、ｔｒｋＡ（Ｅ
ＬＩＳＡで３ｎＭのＩＣ₅₀）、ｔｒｋＢおよびｔｒｋＣの強力な阻害剤であるこ
とが見出されている。ジペプチド誘導体ＣＥＰ−２５６３もまた合成され、これ
は類似の活性および向上された水溶解性を示した。別の関連化合物ＣＥＰ−７０
１もまた良好なｔｒｋＡ阻害活性を有することが見出され、４ｎＭのＩＣ₅₀を示
した。ＣＥＰ−７５１およびＣＥＰ−７０１の双方が、前臨床モデルでヒトおよ
びラットの前立腺癌を有意に阻害することが示されている（Ｄｉｏｎｎｅら、Ｃ
ｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、１９９８、４、１８８７およびＧｅｏｒｇｅ
ら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ、１９９９、５９、２３９５）。ＣＥＰ−
７５１が、神経芽腫および神経髄芽腫の異種移植片（Ｅｖａｎｓら、Ｃｌｉｎ．
ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、１９９９、５、３５９４）、ならびに卵巣癌および黒
色腫モデルで抗腫瘍活性を表すこともまた示されている。さらに、ヒト膵管腺癌
の前臨床異種移植モデルにおけるＣＥＰ−７０１による有意の抗腫瘍活性もまた
示されている（Ｍｉｋｎｙｏｃｚｋｉら、Ｃｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、
１９９９、５、２２０５）。ＣＥＰ−７０１は現在ヒト臨床試験を受けている。

【０００６】これらの小分子ｔｒｋ阻害剤を前立腺、膵および他の癌を治療するための手段
として使用することができるとは言え、特定の標的分子に対する特異性をもつ小
分子を開発することは困難である。小分子に対する一般的な主な懸念の１つは標
的のレセプターもしくはレセプター経路に対する非特異性であり、他のレセプタ
ーの望ましくない活性化もしくは不活性化、および可能な毒性につながる。例え
ば、Ｋ−２５２ａはｔｒｋおよびタンパク質キナーゼＣ阻害活性とともに神経栄
養活性を包含する複数の生化学的特性を有することが示されている（Ｋａｎｅｋ
ｏら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９７、４０、１８６３）。従って、ｔｒｋ
レセプター活性に関与する生物学的標的に対する高い特異性をもつ治療薬が、前
立腺、膵および他の癌の治療のための潜在的な薬物候補として望ましい。この目
的のためには、特定のｔｒｋレセプターに向けられた抗体が小分子より少なく望
ましいことが示されている（ＬｅＳａｕｔｅｕｒら、ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅ
ｃｈ．、１９９６、１４、１１２０）。本発明は、哺乳動物に最低１種の中和ニ
ューロトロフィン抗体を投与することによる、例えば膵もしくは前立腺癌のよう
なｔｒｋレセプターに媒介される癌の治療方法を提供する。該抗体治療は、小分
子が実際に提供しないかもしれないずっと望ましい特異性を提供する。

【０００７】（発明の要約）本発明は、治療上有効な量の最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺乳動物に
投与することを含んで成る、癌の治療もしくは予防方法に向けられる。抗ニュー
ロトロフィン剤は、好ましくは、抗ニューロトロフィン抗体、ニューロトロフィ
ンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結合する小型の有機分
子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプターの優性ネガティブ変
異体のいずれかである。本方法は前立腺もしくは膵癌の治療にとりわけ好ましい
。抗ニューロトロフィン剤は、ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３およびＮＴ−４／５
に向けられたものを包含し、かつ、ヒト化抗体ならびにそれらのフラグメントを
包含する。

【０００８】好ましい一態様において、癌の治療もしくは予防方法は、前立腺もしくは膵の
腫瘍への治療上有効な量の以下の中和ニューロトロフィン抗体、すなわちＮＧＦ
、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３およびＮＴ−４／５の最低１種の送達を必要とする。

【０００９】本発明の別の局面は、腫瘍を最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させる
ことを含んで成る、前立腺もしくは膵腫瘍の体積の低下方法に向けられる。

【００１０】本発明のさらなる一局面は、腫瘍を最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触
させることを含んで成る、前立腺もしくは膵腫瘍の増殖速度の低下方法を必要と
する。

【００１１】本発明の別の局面は、最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺乳動物に投与す
ることを含んで成る、疼痛(pain)の低下方法に向けられる。

【００１２】（好ましい態様の記述）本発明の方法は、治療上有効な量の最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺乳
動物に投与することによる、哺乳動物中の癌の治療および／もしくは予防に向け
られる。抗ニューロトロフィン剤は、好ましくは、抗ニューロトロフィン抗体、
ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結合
する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプターの
優性ネガティブ変異体のいずれかである。抗ニューロトロフィン剤はニューロト
ロフィンに高い特異性を伴い結合し、従って活性化するニューロトロフィンリガ
ンドの中和によるｔｒｋレセプターの阻害につながる。

【００１３】本文書を通じて多様な定義を行う。大部分の語は当業者によりそれらの語に帰
すことができる意味を有する。下もしくは本文書の別の場所のいずれかで特に定
義される語は、全体として本発明の情況で提供される、また、当業者により典型
的に理解されるところの意味を有する。

【００１４】本明細書で使用されるところの「抗ニューロトロフィン剤」という句は、ニュ
ーロトロフィンの合成を予防するかもしくはその合成の量を低下させるいかなる
分子、またはニューロトロフィンの生物活性を阻害するもしくは低下させるいか
なる分子も指すことを意味する。抗ニューロトロフィン剤の好ましい例は、限定
されるものでないが、抗ニューロトロフィン抗体、ニューロトロフィンに向けら
れたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結合する小型の有機分子、および
ニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプターの優性ネガティブ変異体を挙げ
ることができる。

【００１５】本明細書で使用されるところの「癌」という用語は生物学的生物体中のいずれ
かの組織の持続性の新生物を指すことを意味する。新生物は、一般に、悪性、も
しくは悪性になることがあるらしい、潜在的に侵襲性、または新たな部位に転移
することがあるらしいことを特徴とする。本発明の好ましい癌は、限定されるも
のでないが前立腺および膵癌を挙げることができるニューロトロフィンレセプタ
ーおよびニューロトロフィンの発現を伴うものを包含するである。

【００１６】本明細書で使用されるところの「腫瘍」という用語は、存在する組織から生じ
、それが生じた組織に比較して異常な速度で増殖し、そして正常な生理学的機能
を提供しない増殖を指すことを意味する。増殖は悪性であってももしくはなくて
もよいが、しかししばしば癌性もしくは前癌性状態と関連するかもしくはそれを
暗示する。

【００１７】本明細書で使用されるところの「哺乳動物」という用語は、癌に苦しめられて
いる、以前に癌に苦しめられた、もしくは癌の素因を作られたヒトもしくは非ヒ
トのいずれかの生存する生物体を指すことを意味する。

【００１８】本明細書で使用されるところの「治療上有効な量」という句は、本発明の一態
様に適切であるとみられるニューロトロフィン抗体のような治療的もしくは予防
的抗ニューロトロフィン剤の量を指すことを意味し、それは所望の治療レジメン
に従って投与される場合に所望の治療的もしくは予防的効果もしくは応答を導き
出すことができる。

【００１９】本明細書で使用されるところの「抗体」という用語は、完全な無傷の抗体、な
らびにそのＦ（ａｂ）フラグメントおよびＦ（ａｂ）₂フラグメントを指すこと
を意味する。完全な無傷の抗体は、マウスモノクローナル抗体のようなモノクロ
ーナル抗体、ポリクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、および前述の全部
の誘導体を包含する。

【００２０】本明細書で使用されるところの「ニューロトロフィン」もしくは「ＮＴ」とい
う用語は、限定されるものでないが、天然の供給源から精製されたか、組換えＤ
ＮＡ技術もしくは化学合成の方法またはこれらもしくは他の方法のいずれかの組
み合わせにより製造されたかのどちらかのＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、ＮＴ−
４／５、ＮＴ−６およびＮＴ−７、ならびにそれらの機能的誘導体もしくは同等
物を挙げることができる、いかなる天然のもしくは非天然のニューロトロフィン
も指すことを意味する。

【００２１】本明細書で使用されるところの「中和」という用語は一般に無効にすることを
意味し、そして、抗体を記述するのに使用される場合は、それが結合する分子を
無効にする抗体をさらに意味する。本発明の好ましい態様において、「中和」抗
体は特定のリガンドに結合し、そしてそのレセプターへのリガンドの結合を予防
もしくは妨害する。

【００２２】本明細書で使用されるところの「接触させること」という用語は、１種もしく
はそれ以上の分子を別のものと直接にもしくは間接的にのいずれかで一緒にして
それにより分子間相互作用を助長することを意味する。接触させることはインビ
トロ、エクスビボもしくはインビボで起こってよい。

【００２３】本明細書で使用されるところの「ニューロトロフィンレセプター」という用語
はニューロトロフィンリガンドを結合するレセプターを指すことを意味する。好
ましい態様において、ニューロトロフィンレセプターは、細胞表面上に発現され
る「ｔｒｋ」レセプターもしくは「ｔｒｋｓ」と一般に称されるレセプターのチ
ロシンキナーゼファミリーの１メンバーである。ｔｒｋファミリーは、限定され
るものでないがｔｒｋＡ、ｔｒｋＢ；およびｔｒｋＣを挙げることができる。他
の態様において、ニューロトロフィンレセプターは、ｐ７５もしくは低親和性神
経成長因子レセプターともまた呼ばれるｐ７５^NTRである。これらのレセプター
はいかなる動物種（例えばヒト、マウス、ウサギ、ブタ、ウマ、など）からであ
ってもよく、そして完全長のレセプター、選択的スプライシングおよび／もしく
は挿入により生じるもののようなそれらの短縮されたおよび変異体の形態、なら
びに天然に存在する対立遺伝子変異体、ならびにこうしたレセプターの機能的誘
導体を包含する。

【００２４】好ましい一態様において、本発明は前立腺もしくは膵癌の治療もしくは予防方
法に向けられる。ｔｒｋレセプターのようなニューロトロフィンレセプターの発
現を特徴とする可能性のある他の腫瘍性疾患状態は、本方法により治療もしくは
予防可能であるかもしれない。ニューロトロフィンレセプターを発現する新生物
は、限定されるものでないが、乳房、甲状腺、結腸、肺、卵巣、皮膚、筋、腎、
生殖器官、血液、免疫系組織（例えば脾、胸腺および骨髄）、ならびに脳および
末梢神経系組織に関連する癌を挙げることができる。

【００２５】他の好ましい態様において、非悪性腫瘍、前癌性損傷、前癌性腫瘍、またはニ
ューロトロフィンレセプターの発現を伴うもしくは前述の腫瘍性疾患状態を伴う
他の前癌状態もまた、本発明の方法により治療もしくは予防することができる。
こうした治療は、差し迫った癌の臨床的徴候もしくは癌の素因を伴う患者におけ
る癌の予防に寄与するとみられる。

【００２６】本発明の好ましい哺乳動物は、前立腺もしくは膵癌に対する感受性もしくはそ
の臨床診断をもつヒトである。もちろん、前立腺もしくは膵癌に苦しめられてい
る非ヒトの哺乳動物もまた本発明の範囲内に入る。さらに、前立腺および膵癌以
外の上に列挙された新形成に苦しめられているヒトおよび非ヒトの双方が本発明
に包含される。哺乳動物は、癌に苦しめられるようになることの素因を作られる
ヒトもしくは非ヒトもまた包含する。例は、既知の発癌物質に曝露されたヒト、
もしくは前立腺癌を発症する危険の年齢の雄性ヒトを包含する。癌の家族歴をも
つ、もしくはある型の癌の発症に対し遺伝的に素因をつくられている患者もまた
包含される。

【００２７】本発明のいくつかの態様において、抗ニューロトロフィ剤はニューロトロフィ
ンに向けられたアンチセンス分子である。ニューロトロフィンのヌクレオチド配
列は以下のとおりである。すなわち、ＮＧＦ（Ｂｏｒｓａｎｉら、Ｎｕｃ．Ａｃ
ｉｄｓＲｅｓ．、１９９０、１８、４０２０；受託番号ＮＭ００２５０６）、
ＢＤＮＦ（Ｍａｉｓｏｎｐｉｅｒｒｅら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、１９９１、１０、
５５８；受託番号Ｍ６１１８１）、ＮＴ−３（Ｊｏｎｅｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９９０、８７、８０６０；受託番号Ｍ３７７
６３；およびＭａｉｓｏｎｐｉｅｒｒｅら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、１９９１、１０
、５５８；受託番号Ｍ６１１８０）、ＮＴ−４（Ｉｐら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１９９２、８９、３０６０；受託番号Ｍ８６５２８
）ならびにＮＴ−５（Ｉｐら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
、１９９２、８９、３０６０およびＢｅｒｋｅｍｅｉｅｒら、Ｓｏｍａｔ．Ｃｅ
ｌｌＭｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．、１９９２、１８、２３３；受託番号ＮＭ００６１
７９）（参考文献のそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に
組み込まれる）。当業者は、他のポリヌクレオチドと交差反応することなく特定
のニューロトロフィンを特異的に結合することができるアンチセンスオリゴヌク
レオチド分子を製造することができる。好ましいターゲッティング部位は、限定
されるものでないが開始コドン、５’調節領域、コーディング配列および３’非
翻訳領域を挙げることができる。オリゴヌクレオチドは好ましくは長さが１０な
いし１００ヌクレオチド、より好ましくは長さが１５ないし５０ヌクレオチド、
そしてより好ましくは長さが１８ないし２５ヌクレオチドである。オリゴヌクレ
オチドは、例えばホスホロチオエート結合、および当業者に公知の２’−Ｏ糖修
飾のようなバックボーンの修飾を含んでもよい。オリゴヌクレオチドは、腹腔内
に、静脈内に、筋肉内に、皮下に、クモ膜下に、心室内に、経口で、腸内に、非
経口で、鼻内にもしくは皮膚に投与することができる。

【００２８】本発明の他の態様において、抗ニューロトロフィン剤はニューロトロフィンに
向けられた小型の有機分子である。当業者は、他のポリペプチドを結合すること
なく特定のニューロトロフィンを特異的に結合することができる小型の有機分子
を製造することができる。好ましいターゲッティング部位は、限定されるもので
ないがニューロトロフィンレセプターに結合するニューロトロフィンの部分、お
よびレセプター結合領域に隣接しかつ部分的にレセプター結合部分の正しい三次
元の形状の原因であるニューロトロフィン分子の部分を挙げることができる。小
型の有機分子は、好ましくは１００ないし２０，０００ダルトン、より好ましく
は５００ないし１５，０００ダルトン、およびより好ましくは１０００ないし１
０，０００ダルトンの分子量を有する。小型の有機分子のライブラリーが商業的
に入手可能である。小型の有機分子は、腹腔内に、静脈内に、筋肉内に、皮下に
、クモ膜下に、心室内に、経口で、腸内に、非経口で、鼻内にもしくは皮膚に投
与することができる。

【００２９】本発明の他の態様において、抗ニューロトロフィン剤はｔｒｋレセプターの優
性ネガティブ変異体である。当業者は、レセプターが天然に存在するニューロト
ロフィンを結合しそして従ってニューロトロフィンを捕捉するための「たまり（
ｓｉｎｋ）」として作用することができるような特定のｔｒｋレセプターの優性
ネガティブ変異体を製造することができる。しかしながら、優性ネガティブ変異
体はニューロトロフィンへの結合に際してｔｒｋレセプターの正常な生物活性を
有しないことができる。好ましい優性ネガティブ変異体は、限定されるものでな
いが以下、すなわちＬｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、
１９９８、９５、１０８８４；Ｅｉｄｅら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、１９９６
、１６、３１２３；Ｌｉｕら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、１９９７、１７、８７４
９；Ｋｌｅｉｎら、Ｃｅｌｌ、１９９０、６１、６４７；Ｖａｌｅｎｚｕｅｌａ
ら、Ｎｅｕｒｏｎ、１９９３、１０、９６３；Ｔｓｏｕｌｆａｓら、Ｎｅｕｒｏ
ｎ、１９９３、１０、９７５；およびＬａｍｂａｌｌｅら、ＥＭＢＯＪ．、１
９９３、１２、３０８３（そのそれぞれはそっくりそのまま引用することにより
本明細書に組み込まれる）に記述される変異体を挙げることができる。優性ネガ
ティブ変異体は、タンパク質の形態で、もしくは突然変異体のｔｒｋレセプター
がインビボで発現されるような発現ベクターの形態で投与することができる。タ
ンパク質もしくは発現ベクターは、腹腔内に、静脈内に、筋肉内に、皮下に、ク
モ膜下に、心室内に、経口で、腸内に、非経口で、鼻内に、もしくは皮膚に投与
することができる。当業者は、インビボで外因性のタンパク質の発現を得るため
の発現ベクターの投与を熟知している。

【００３０】本発明のいくつかの態様において、抗ニューロトロフィン剤は最低１種の中和
ニューロトロフィン抗体を含んで成る。好ましい抗体は、限定されるものでない
が抗ＮＧＦ（カタログ番号５００−Ｐ８５、ペプロテックインク（Ｐｅｐｒ
ｏＴｅｃｈＩｎｃ．）；カタログ番号ＡＦ−２５６−ＮＡ、Ｒ＆Ｄシステ
ムズインク（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．））、抗ＢＤＮＦ（カタログ
番号５００−Ｐ８４、ペプロテックインク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈＩｎｃ
．）；カタログ番号ＭＡＢ２４８、Ｒ＆Ｄシステムズインク（Ｒ＆ＤＳｙ
ｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．））、抗ＮＴ−３（カタログ番号５００−Ｐ８２、ペプロ
テックインク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈＩｎｃ．）；カタログ番号ＡＦ−２
６７−ＮＡ、Ｒ＆Ｄシステムズインク（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．
））、抗ＮＴ４（カタログ番号５００−Ｐ８３、ペプロテックインク（Ｐｅ
ｐｒｏＴｅｃｈＩｎｃ．）；カタログ番号ＡＦ−２６８−ＮＡ、Ｒ＆Ｄシ
ステムズインク（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．））、抗ＮＴ−４／５、
抗ＮＴ−６および抗ＮＴ−７、ならびにそれらの機能的同等物を挙げることがで
きる全部の現在知られているニューロトロフィン抗体を包含する。好ましくは、
これらの抗体は親和性精製された形態で使用する。２種もしくはそれ以上の異な
る中和抗体の混合物もまた本発明の範囲内にある。例えば、１以上の型のニュー
ロトロフィンレセプターを発現する膵管腺癌のような癌は、１種以上のレセプタ
ーに対する抗体の混合物を用いてより効果的に治療してよい。

【００３１】本発明の抗体は、ペプロテックインク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．
）（ニュージャージー州ロッキーヒル）、Ｒ＆Ｄシステムズインク（Ｒ＆Ｄ
Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．）（ミネソタ州ミネアポリス）のような商業的供給
元から得てよいか、もしくは標準的手順に従って生成させてよい。商業的に入手
可能な中和ニューロトロフィン抗体は、ウサギ抗血清からの抗ヒトｂ−ＮＧＦ、
抗ヒトＢＤＮＦ、抗ヒトＮＴ−４および抗ヒトＮＴ−３を包含する。

【００３２】抗体の生成および精製は、Ａｕｓｕｂｅｌら、１９９９、ＳｈｏｒｔＰｒｏ
ｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ、第４版、グリーン
アンドワイリーインターサイエンス（ＧｒｅｅｎｅａｎｄＷｉｌｅｙ
−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）、ニューヨーク、およびＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏ
ｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ、１９９９、ジョン
ワイリーアンドサンズ（ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ）、ニュー
ヨーク（それらのそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組
み込まれる）に記述される標準的手順に従って実験室で実施してもまたよい。

【００３３】ニューロトロフィンもしくはそのフラグメントに特異的な抗体（例えばモノク
ローナルおよびポリクローナル抗体、一本鎖抗体、キメラ抗体、二官能性／二特
異性抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、ならびに本発明のポリペプチドを特異的に認
識する相補性決定領域（ＣＤＲ）配列を包含する化合物を包含するＣＤＲ移植（
ｇｒａｆｔｅｄ）抗体）もまた本発明により包含される。Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ
（ａｂ’）₂およびＦ_vを包含する抗体フラグメントもまた本発明により提供され
る。本発明の抗体の結合特異性を決定するためのスクリーニングアッセイは公知
であり、そして当該技術分野で慣例に実施される。こうしたアッセイの包括的論
考については、Ｈａｒｌｏｗら（編）、ＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＡＬａｂｏｒ
ａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ、コールドスプリングハーバーラボラトリー（
ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ）、ニューヨー
ク州コールドスプリングハーバー（１９９８）、第６章（そっくりそのまま引用
することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。ニューロトロフィン
のフラグメントを認識かつ結合する抗体もまた企図される。本発明の抗体は、公
知かつ当該技術分野で慣例に実施されるいずれの方法を使用しても製造すること
ができる。

【００３４】例えば、組換えもしくは天然に存在するニューロトロフィン、またはそのフラ
グメントを使用して、モノクローナル抗体の生成のためにマウスもしくは他の適
する動物を（またはポリクローナル抗体のためにウサギのようなより大きな哺乳
動物を）免疫化することができる。抗原性を増大させるために、ペプチドを、製
造元の推奨に従ってキーホールリンペットヘモシアニン（ピアース（Ｐｉｅｒｃ
ｅ））に結合することができる。最初の注入のため、フロイントの完全アジュバ
ントを用いて抗原を乳化させ、そして皮下に注入することができる。２ないし３
週の間隔で、ニューロトロフィン抗原の追加のアリコートをフロイントの不完全
アジュバントで乳化し、そして皮下に注入することができる。最後の追加抗原注
入前に、免疫化したマウスから血清サンプルを採取しそしてウェスタンブロット
によりアッセイして、ニューロトロフィンと免疫反応する抗体の存在を確認する
ことができる。免疫化された動物からの血清をポリクローナル抗血清として使用
することができるか、もしくは、ニューロトロフィンを認識するポリクローナル
抗体を単離するのに使用することができる。あるいは、マウスを殺すことができ
、そしてモノクローナル抗体の生成のためそれらの脾を取り出すことができる。

【００３５】モノクローナル抗体を生成させるためには、脾を１０ｍｌの血清を含まないＲ
ＰＭＩ１６４０中に入れることができ、そして２ｍＭＬ−グルタミン、１ｍ
Ｍピルビン酸ナトリウム、１００単位／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌ
ストレプトマイシンで補充された血清を含まないＲＰＭＩ１６４０（ＲＰＭＩ
）（ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）、カナダ）中で脾をすりつぶすことにより、単一細胞
懸濁液を形成させる。細胞懸濁液を濾過することができ、そして遠心分離により
洗浄しかつ血清を含まないＲＰＭＩに再懸濁することができる。３匹の薬物投与
を受けたことのないＢａｌｂ／ｃマウスから採取された胸腺細胞を、類似の様式
で調製し、そして供給層（ｆｅｅｄｅｒｌａｙｅｒ）として使用する。融合前
３日間、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（ハイクローンラボラトリーズイン
ク（ＨｙｃｌｏｎｅＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、ユタ州ローガン
）を含むＲＰＭＩ中で対数期に保たれたＮＳ−１骨髄腫細胞を、同様に遠心分離
かつ洗浄する。

【００３６】ハイブリドーマ融合物を製造するために、免疫化されたマウスからの脾細胞を
ＮＳ−１細胞と組み合わせかつ遠心分離し、そして上清を吸引する。チューブを
軽くたたくことにより細胞ペレットを移動させ、そして２ｍｌの３７℃のＰＥＧ
１５００（７５ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ８．０中５０％）（ベーリンガー−マ
ンハイム（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ））をペレット中に攪拌し
、次いで血清を含まないＲＰＭＩを添加する。その後、細胞を遠心分離し、１５
％ＦＢＳ、１００μＭヒポキサンチンナトリウム、０．４μＭアミノプテリン、
１６μＭチミジン（ＨＡＴ）（ギブコ（Ｇｉｂｃｏ））、２５単位／ｍｌＩＬ
−６（ベーリンガーマンハイム（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ）
）および１．５×１０⁶個の胸腺細胞／ｍｌを含有するＲＰＭＩに再懸濁し、そ
して１０枚のコーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）平底９６穴組織培養プレート（コー
ニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）、ニューヨーク州コーニング）にプレート培養する。

【００３７】融合後第２、４および６日に、１００μｌの培地を融合プレートのウェルから
除去しそして新鮮培地で置き換える。第８日に、融合をＥＬＩＳＡによりスクリ
ーニングして、ニューロトロフィンに結合するマウスＩｇＧの存在について試験
する。選択された融合ウェルを、抗ニューロトロフィン抗体を産生するモノクロ
ーナル培養物が得られるまで、希釈によりさらにクローン化する。

【００３８】非ヒト抗体は当該技術分野で既知の方法のいずれかによりヒト化してよい。一
方法において、非ヒトＣＤＲを、ヒト抗体もしくはコンセンサス抗体枠組み配列
（ｃｏｎｓｅｎｓｕｓａｎｔｉｂｏｄｙｆｒａｍｅｗｏｒｋｓｅｑｕｅｎ
ｃｅ）中に挿入する。その後、親和性もしくは免疫原性を調節するように抗体枠
組みにさらなる変化を導入することができる。以下は、ヒト宿主中でそれらの血
清の半減期を向上させかつそれらをより少なく免疫原性にするため（すなわち非
ヒト抗ニューロトロフィン抗体に対するヒト抗体の応答を予防するため）モノク
ローナル抗体を「ヒト化する」ことによりヒトにおける治療薬としての抗ニュー
ロトロフィンモノクローナル抗体の利用性を向上させるためのプロトコルである
。

【００３９】ヒト化の原理は文献に記述されており、そして抗体タンパク質のモジュールの
配置により促進される。補体を結合する可能性を最小限にするためにはＩｇＧ４
アイソタイプのヒト化抗体が好ましい。

【００４０】例えば、ヒト抗体分子の定常ドメインとともに目的の非ヒト抗体タンパク質の
可変ドメインを含んで成るキメラ抗体を生成させることにより、あるレベルのヒ
ト化が達成される。（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
、１９８９、４４、６５−９２（そっくりそのまま引用することにより本明細書
に組み込まれる）を参照されたい）。ニューロトロフィンを中和する抗ニューロ
トロフィン抗体の可変ドメインは、Ｂ細胞ハイブリドーマのゲノムＤＮＡもしく
は目的のハイブリドーマから単離されたｍＲＮＡから生成されたｃＤＮＡからク
ローン化する。Ｖ領域の遺伝子フラグメントを、ヒト抗体の定常ドメインをコー
ドするエキソンに連結し、そして結果として生じる構築物を、適する哺乳動物宿
主細胞（例えば骨髄腫もしくはＣＨＯ細胞）中で発現させる。

【００４１】より高レベルのヒト化さえ達成するためには、非ヒトモノクローナル抗体遺伝
子の抗原結合相補性決定領域（「ＣＤＲ」）をコードする可変領域の遺伝子フラ
グメントのそれらの部分のみを、ヒト抗体配列中にクローン化する。（例えば、
Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ、１９８６、３２１、５２２−５２５、Ｒｉｅｃｈ
ｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ、１９８８、３３２、３２３−３２７、Ｖｅｒｈｏｅ
ｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９８８、２３９、１５３４−３６、およびＴｅｍ
ｐｅｓｔら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１９９１、９、２６６−７１（そ
れらのそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる
）を参照されたい）。必要な場合は、ＣＤＲ３領域を取り巻くヒト抗体のβ−シ
ートの枠組みもまた、元のモノクローナル抗体の抗原結合ドメインの三次元構造
をより緊密に再現するように調節する。（Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈら、Ｐｒ
ｏｔｅｉｎＥｎｇｉｎ．、１９９１、４、７７３−７８３、およびＦｏｏｔｅ
ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９９２、２２４、４８７−４９９（それらのそ
れぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照
されたい）。

【００４２】代替の一アプローチにおいて、目的の非ヒトモノクローナル抗体の表面を、非
ヒト抗体の内部および接触残基の全部を保持しつつ、例えば部位特異的突然変異
誘発により非ヒト抗体の選択された表面残基を変えることによりヒト化する。Ｐ
ａｄｌａｎ、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＩｍｍｕｎｏｌ．、１９９１、２８、４８９
−９８（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照
されたい。

【００４３】本発明の抗体は多様な方法での哺乳動物への投与のため処方してよい。いくつ
かの態様において、抗体は滅菌水性溶液もしくは血清のような生物学的液体中に
ある。水性溶液は緩衝されてももしくはされなくてもよく、また、付加的な活性
もしくは不活性成分を有する。付加的な成分は、イオン強度を調節するための塩
、限定されるものでないが抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤などを挙げることがで
きる保存剤、ならびにブドウ糖、Ｄ−ブドウ糖、ビタミンおよびミネラルを包含
する栄養素を包含する。あるいは、抗体は固体の形態での投与のため調製しても
よい。抗体は、限定されるものでないが；微晶質セルロース、トラガカントガム
もしくはゼラチンのような結合剤；デンプンもしくは乳糖のような賦形剤；アル
ギン酸、プリモゲル（Ｐｒｉｍｏｇｅｌ）もしくはトウモロコシデンプンのよう
な分散剤；ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素
のような滑り剤（ｇｌｉｄａｎｔ）；ショ糖もしくはサッカリンのような甘味料
；またはペパーミントもしくはサリチル酸メチルのような着香料を挙げることが
できる多数の不活性の担体もしくは賦形剤と組み合わせてよい。

【００４４】抗体もしくはそれらの製剤は、病気の組織に抗体を送達させるのに有効ないず
れかの手段により哺乳動物に投与してよい。こうした手段は、限定されるもので
ないが、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、クモ膜下、心室内（ｉｎｔｒａｖｅｎ
ｔｒｉｃｕｌａｒ）、経口、腸内、非経口、鼻内もしくは皮膚を挙げることがで
きる。とりわけ、抗体もしくは抗体製剤は、液体製剤の非経口注入、または丸剤
、錠剤、カプセル剤中のような固体製剤もしくは乳剤および溶液のような液体製
剤の摂取により投与してよい。他の薬物送達系は、ヒドロゲル、ヒドロキシメチ
ルセルロース、マイクロカプセル、リポソーム、マイクロエマルジョン、ミクロ
スフェアなどを包含する。腫瘍のような病気の組織へ直接の抗体の局所的な注入
が、本発明の抗体の好ましい一投与方法である。リン酸緩衝生理的食塩水（ＰＢ
Ｓ）は注入可能な製剤の好ましい担体である。

【００４５】製薬学的に有効な量の治療薬を得るための抗体の投与は多様な因子に依存する
。例えば、患者の年齢、感受性、耐容性および他の特徴が投与量に影響を及ぼす
ことができる。新形成もしくは腫瘍の型、疾患の段階および腫瘍体積もまた投薬
量に影響を及ぼすことができる。さらに、使用された抗体の血漿レベルおよび半
減期、ならびにそれらの認識部位に対する親和性、ならびに主治医により慣例に
考慮される他の類似の因子を、有効な投与のため考慮する必要がある。ニューロ
トロフィン抗体の全身投与のため、約０．０５ｍｇ／ｋｇ患者／日から約５００
ｍｇ／ｋｇ患者／日までの範囲にわたる用量を使用することができるが、とは言
え範囲の下端の投薬量が単純に投与の容易さおよび費用効率のため好ましい。投
薬量は、例えば抗体の特定の一血漿レベルを提供するために例えば約５−３０ｍ
ｇ／ｍｌ、より好ましくは約１０−１５ｍｇ／ｍｌの範囲で、また、そのレベル
を例えばある時間の期間の間もしくは臨床結果が達成されるまで維持するために
調節してよい。よりゆっくりと排泄されることを期待することができるキメラお
よびヒト化抗体は、有効血漿レベルを維持するのにより低い投薬量を必要とする
とみられる。また、ニューロトロフィンに対する高親和性を有する抗体は、好ま
しくはより小さい親和性をもつ抗体より少なく頻繁にもしくはより低用量で投与
される。抗体の治療上有効な投薬量は、治療のクールの間に、腫瘍体積の低下、
腫瘍の成長速度の低下、もしくは理想的には癌性の疾患状態の完全な消失を示す
ことにより決定することができる。前立腺もしくは膵癌の段階の有効な測定もし
くは評価手段は、血中の前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）を測定すること、膵癌につ
いて生存時間を測定すること、前立腺および膵双方の癌について転移性の拡がり
の遅延もしくは阻害を測定すること、膵癌の組織学的格付けを測定すること、な
らびに膵癌についてＣＴによる。こうした手順は当業者に既知である。

【００４６】本発明はまた、腫瘍を最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させることに
よる前立腺もしくは膵の腫瘍体積の低下方法も企図する。本発明はまた、腫瘍を
最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させることによるさらなる腫瘍増殖の
予防方法もしくは腫瘍の増殖速度の低下方法も包含する。腫瘍部位への作用物質
の送達は、好ましくは腫瘍部位のもしくはその近くの組織中への直接の局所的な
注入により達成する。しかしながら、上に論考された手段による作用物質の全身
投与もまた本発明の範囲内にある。腫瘍の部位での局所注入は腫瘍内にもしくは
腫瘍周囲に、または双方の組み合わせで起こってよい。

【００４７】腫瘍部位での直接注入のためには、作用物質の投薬量は、他の変数のなかでも
腫瘍の型、腫瘍の段階および腫瘍体積を包含するいくつかの因子に依存する。腫
瘍体積による作用物質の典型的な治療的用量は、１注入あたり約０．０１ｍｇ／
ｍｍ³から約１０ｍｇ／ｍｍ³までの範囲にわたってよく、また、注入は必要とさ
れるくらい頻繁に投与してよい。例えば、腫瘍もしくは疾患状態が存在する時間
の間１日１回の注入は適切であるかもしれないが、しかし、癌の型、疾患の経過
および患者によって変動することができる。治療の治療的有効性は、治療のクー
ルの間の腫瘍体積の低下、もしくは腫瘍の増殖速度の阻害のいずれかにより示さ
れる。腫瘍の寸法からの腫瘍体積の測定は当業者に公知である。腫瘍体積の算出
は、以下の式：Ｖ（ｍｍ³）＝０．５２３６×長さ（ｍｍ）×幅（ｍｍ）［長さ
（ｍｍ）＋幅（ｍｍ）／２］で行うことができる。

【００４８】特定の治療の有効性の別の評価方法は、当該技術分野で公知の手段によりニュ
ーロトロフィンレセプターの阻害を評価することである。例えば、ｔｒｋＡは、
Ａｎｇｅｌｅｓら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１９９６、２３６、４９（そ
っくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）に示されるところ
のＥＬＩＳＡに基づく酵素アッセイを使用して活性について試験することができ
る。別の評価方法はラット基底前脳におけるＣｈＡＴ活性を測定することである
。

【００４９】本発明の他の態様において、抗ニューロトロフィン剤は疼痛を予防するもしく
は低下させるために哺乳動物に投与される。作用物質、量およびその投与は上述
されている。

【００５０】当業者は、本発明の好ましい態様に対し多数の変更および改変を行うことがで
きること、ならびにこうした変更および改変は本発明の技術思想から離れること
なく行うことができることを認識するであろう。従って、付属として付けられる
請求の範囲は、本発明の真の技術思想および範囲内にあるところの全部のこうし
た同等の変形物を包含することを意図している。

【００５１】以下の実施例は全部実際であり、そして本発明の範囲を制限することを意図し
ていない。実施例実施例１：抗ＮＧＦによるｔｒｋレセプターの中和ＣＥＰ−７５１に応答することが以前に示されている（Ｄｉｏｎｎｅら、Ｃｌ
ｉｎ．Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．、１９９８、４、１８７−１８９８）ＰＣ−３および
／もしくはＴＳＵ−ｐｒ１異種移植片に抗体を注入した。以下の実験を実施して
抗ニューロトロフィン抗体の中和能力を確認した。

【００５２】抗ＮＧＦ抗体はＮＩＨ３Ｔ３−ｔｒｋＡ細胞中でｔｒｋのリガンドに刺激され
る自己リン酸化を低下させる。ＮＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）を、６ｍｌの組織培地
中で変動する濃度の抗体とともに前インキュベートした。ＮＧＦ／抗体混合物を
ＮＩＨ３Ｔ３−ｔｒｋＡ細胞に添加した。ｐａｎ−Ｔｒｋ抗体ＣＥＰ−２１を用
いてＴｒｋタンパク質をライセートから免疫沈降させ、そして、抗ホスホチロシ
ン抗体４Ｇ１０を用いてイムノブロット上でサンプルをプロービングした。デン
シトメーター走査値（積分されたＯＤ単位）は以下のとおりであった（ＮＧＦ（
１０ｎｇ／ｍｌ）／抗ＮＧＦ（μｇ／ｍｌ）として示される：−／−レーン、０
．３；＋／−レーン、６．５；０．００１ｍｇ／ｍｌ、５．０；０．０１ｍｇ／
ｍｌ、４．５；０．１ｍｇ／ｍｌ、２．５；１．０ｍｇ／ｍｌ、３．１；１０．
０ｍｇ／ｍｌ、２．１；１００ｍｇ／ｍｌ、１．１）。従って、１００μｇ／ｍ
ｌの抗ＮＧＦ（ペプロテックインク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、５０
０−Ｐ８５）は、１０ｎｇ／ｍｌのＮＧＦで５分間処理された細胞中で、抗ＮＧ
Ｆ処理なしに関してｔｒｋリン酸化をおよそ８０％低下させる。実施例２：抗ＮＴ−３によるｔｒｋレセプターの中和抗ＮＴ−３抗体はＮＩＨ３Ｔ３−ｔｒｋＣ細胞中でｔｒｋのリガンドに刺激さ
れる自己リン酸化を低下させる。ＮＴ−３（１０ｎｇ／ｍｌ）を、６ｍｌの組織
培地中で変動する濃度の抗体とともに前インキュベートした。ＮＴ−３／抗体混
合物をＮＩＨ３Ｔ３−ｔｒｋＣ細胞に添加した。ｐａｎ−Ｔｒｋ抗体ＣＥＰ−２
１を用いてＴｒｋタンパク質をライセートから免疫沈降させ、そして、抗ホスホ
チロシン抗体４Ｇ１０を用いてイムノブロット上でサンプルをプロービングした
。デンシトメーター走査値（積分されたＯＤ単位）は以下のとおりであった（Ｎ
Ｔ−３（１０ｎｇ／ｍｌ）／抗ＮＴ−３（μｇ／ｍｌ）として示される：−／−
レーン、０．１；＋／−レーン、４．０；ＩｇＧ、７．５；０．００１ｍｇ／ｍ
ｌ、６．２；０．０１ｍｇ／ｍｌ、４．０；０．１ｍｇ／ｍｌ、３．６；１．０
ｍｇ／ｍｌ、７．８；１０．０ｍｇ／ｍｌ、１．２）。従って、１０μｇ／ｍｌ
の抗ＮＴ−３（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８２）は、１０
ｎｇ／ｍｌのＮＴ−３で５分間処理された細胞中で、抗ＮＧＦ処理なしに関して
ｔｒｋリン酸化をおよそ７０％低下させる。

【００５３】以下の実施例は本発明の抗体の抗腫瘍活性についての実験の結果を示す。これ
らの実験で使用された腫瘍モデルは、好ましい前臨床動物モデルとして当業者に
公知であるヌードマウスでの前立腺癌および膵癌異種移植片であり、これらはイ
ンビボの臨床結果と相関する。対応するヒト疾患へのこれらの異種移植片モデル
の特定の関連性を示す現在の参考文献は、Ｐｌｏｎｏｗｓｋｉら、Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ．、１９９９、５９、１９４７、Ｊｏｓｅｐｈら、ＣａｎｃｅｒＲｅ
ｓ．、１９９７、５７、１０５４、Ｐｉｎｓｋｉら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ
、１９９３、５５、９６３、Ｇａｏら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、１９９８、５
８、１３９１およびＴａｎら、ＴｕｍｏｕｒＢｉｏｌｏｇｙ、１９８５、６、
８９を包含する。実施例３：ニューロトロフィン抗体によるＰＣ−３前立腺癌異種移植片の増殖の
阻害以下のニューロトロフィン抗体を使用した。すなわち、抗ＮＧＦ（ペプロテッ
ク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８５）、抗ＢＤＮＦ（ペプロテック（Ｐｅ
ｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８４）、抗ＮＴ−３（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴ
ｅｃｈ）５００−Ｐ８２）および抗ＮＴ４／５（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅ
ｃｈ）５００−Ｐ８３）。抗ＮＧＦおよび抗ＮＴ３抗体は、培養された細胞のニ
ューロトロフィン処理後にｔｒｋＡおよびｔｒｋＣ自己リン酸化を封鎖する。該
抗体のそれぞれは、バイオアッセイ（ＣｈＡＴ活性をラット基底前脳細胞培養物
中で測定する）でそのコグネイトのニューロトロフィンの活性を封鎖することが
示されている。

【００５４】ＰＣ−３ヒト前立腺腫瘍細胞（５×１０⁶個の細胞／マウス）を、８ないし１
０週齢の雌性無胸腺ヌードマウス（ｎｕ／ｎｕ；チャールズリバー（Ｃｈａｒｌ
ｅｓＲｉｖｅｒ）、ノースカロライナ州ローリー）の横腹に皮下に注入した。
マウスは、腫瘍埋植の日に２２〜２５グラムの間の体重があった。異種移植片が
１００〜５００ｍｍ³に達した際に、マウスを無作為化し、そして実験群に分割
した。いくつかの実験群には、滅菌１×ＰＢＳ（１００μｌの総容積）中のニュ
ーロトロフィン抗体のカクテル（抗ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３およびＮＴ４／
５の各４×２５μｇもしくは各４×１００μｇ）または正常ウサギＩｇＧ（１０
０μｇもしくは４００μｇ；ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ０
０）を投与した。全部の抗体は、５注入部位で腫瘍内に（５０μｌ）また、５注
入部位で腫瘍周囲に皮下に（５０μｌ）投与した。実験１において、マウスは第
１、３、５、８、１０、１２および１５日に１日１回抗体の注入を受領した。第
１５日の後は抗体を投与しなかった。実験２において、マウスは第１、３、６、
８、１０、１３日に１日１回抗体の注入を受領した。４×１００μｇのニューロ
トロフィン抗体を受領する１匹のマウスが、第１３日に説明できない原因で死亡
した。腫瘍の長さおよび幅を２ないし３日ごとに測定した。ＣＥＰ−７５１を、
異なる機関で増殖されたＰＣ−３異種移植片について以前に示されたとおり腫瘍
がＣＥＰ−７５１に応答性であったことを確かめるための対照として別個の実験
群に投与した。マウスは、２２日間、１週あたり７日、ベヒクル（４０％ポリエ
チレングリコール、１０％ポビドンＣ３０および２％ベンジルアルコール；１０
０μｌ）もしくはベヒクル（１００μｌ）中のＣＥＰ−７５１（１０ｍｇ／ｋｇ
ｓ．ｃ．１日２回）を受領した。腫瘍の長さおよび幅を２ないし３日ごとに測
定した（第１、３、５、８、１０、１２、１５、１７、１９および２２日）。

【００５５】腫瘍体積は、（長さ×幅（長さ＋幅）／２））×０．５２６（Ｉｓａａｃｓ、
Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．、１９８９、４９、６２９０−６２９４（そっくりそのまま
引用することにより本明細書に組み込まれる））として算出した。腫瘍体積の平
均および標準誤差を算出した（ＳｉｇｍａＳｔａｔ、ジャンデルサイエンティ
フィック（ＪａｎｄｅｌＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、カリフォルニア州サンラフ
ェル）。分析の最終日の腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだけ逸脱した
分析の最終日の腫瘍体積を伴ういかなるマウスも、すべてのデータ点での分析か
ら除去した。相対腫瘍体積を（平均ｖ_t／平均ｖ_o）として算出し、ここでｖ_tは
所定の日の腫瘍体積を指し、かつ、ｖ_oは投与の開始時（第１日）の同一の腫瘍
の体積である。分析の最終日の相対腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだ
け逸脱した分析の最終日の相対腫瘍体積を伴ういかなるマウスも、すべてのデー
タ点での分析から除去した。確率値はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ順位和検定（Ｓ
ｉｇｍａｓｔａｔ）により算出した。

【００５６】実験１ニューロトロフィン抗体の投与は、ＩｇＧ対照で処理された腫瘍に関
してＰＣ−３腫瘍の増殖を阻害した。ニューロトロフィン抗体で処理された腫瘍
の相対的体積は、第３日までにＩｇＧ対照群より有意により小さくなり（ｐ≦０
．０５）、そして第２２日の実験の終了までより小さいまま留まった（ｐ≦０．
０５、第５日、ｐ≦０．０１、第８日；ｐ≦０．００１、第１０−２２日）。腫
瘍の有意の退縮は第１０（３５％；ｐ≦０．００１）および１２日（２５％；ｐ
≦０．０５）で観察された。中和抗体処理を中止した（第１５日）後、腫瘍の再
増殖が第２２日までに観察された（０．９５の相対腫瘍体積、第２２日対０．７
７の相対腫瘍体積、第１５日）。ＩｇＧ対照群と比較したニューロトロフィン抗
体で処理された腫瘍の絶対的体積は第１５日まで有意により小さくなり（ｐ≦０
．０５）、実験の終了までより小さいまま留まり（ｐ≦０．０５、第１７日；ｐ
≦０．０１、第１９および２２日）、そして第１７日に０．３３の最小のＴ／Ｃ
に達した。

【００５７】ＣＥＰ−７５１の投与は、ベヒクル対照に関してＰＣ−３腫瘍の増殖を阻害し
た。ＣＥＰ−７５１で処理された腫瘍の相対的体積は、第１２（ｐ≦０．０５）
、１７（ｐ≦０．０１）、１９（ｐ≦０．０５）および２２日（ｐ≦０．０１）
にベヒクル対照群より有意により小さかった。ＣＥＰ−７５１で処理された腫瘍
の絶対的体積は、第１７日（ｐ≦０．０１）および第２２日（ｐ≦０．０５）に
ベヒクル対照群に比較して有意により小さく、また、第１９日までに０．４４の
最小のＴ／Ｃに達した。

【００５８】実験２抗体（抗ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３およびＮＴ４／５の各４×２５
μｇもしくは各４×１００μｇ）の投与はＩｇＧ対照で処理された腫瘍に関して
ＰＣ−３腫瘍の増殖を阻害した。ニューロトロフィン抗体で処理された腫瘍の相
対的体積は、第３日までにＩｇＧ対照群より有意により小さくなり（ｐ≦０．０
５；１００ｍｇニューロトロフィンカクテル対１００μｇ正常ＩｇＧ；４００μ
ｇニューロトロフィンカクテル対４００μｇ正常ＩｇＧ）、そして実験の終了ま
でより小さいまま留まった。腫瘍の有意の退縮（４００μｇニューロトロフィン
カクテル対４００μｇ正常ＩｇＧ）が、第１０日（３１％；ｐ≦０．０５）およ
び第１３日（１９％；ｐ≦０．０５）に観察された。ＩｇＧ対照群に比較したニ
ューロトロフィン抗体で処理された腫瘍の絶対的体積は、第８日（１００μｇニ
ューロトロフィンカクテル対１００μｇ正常ＩｇＧ）および第６日（４００μｇ
ニューロトロフィンカクテル対４００μｇ正常ＩｇＧ）までに有意により小さく
なり（ｐ≦０．０５）、実験の終了までより小さいまま留まり（ｐ≦０．００５
、１００μｇニューロトロフィンカクテル対１００μｇ正常ＩｇＧおよび４００
μｇニューロトロフィンカクテル対４００μｇ正常ＩｇＧの双方について第１０
、１３、１５日）、そして第１５日に０．２６の最小のＴ／Ｃ（１００μｇニュ
ーロトロフィンカクテル対１００μｇ正常ＩｇＧ）もしくは第１３日に０．１７
の最小のＴ／Ｃ（４００μｇニューロトロフィンカクテル対４００μｇ正常Ｉｇ
Ｇ）に達した。実施例４：ニューロトロフィン抗体によるＴＳＵ−Ｐｒ１前立腺癌異種移植片の
増殖の阻害実験１以下のニューロトロフィン抗体を使用した。すなわち、抗ＮＧＦ（ペ
プロテック（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８５）、抗ＢＤＮＦ（ペプロテッ
ク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８４）、抗ＮＴ−３（ペプロテック（Ｐｅ
ｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８２）および抗ＮＴ４／５（ペプロテック（Ｐｅｐ
ｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８３）。

【００５９】ＴＳＵ−Ｐｒ１ヒト前立腺腫瘍細胞を、雌性無胸腺ヌードマウス（ｎｕ／ｎｕ
；５×１０⁶個の細胞／マウス）の横腹に皮下に注入した。異種移植片が１００
〜５００ｍｍ³に達した際に、マウスを無作為化し、そして４実験群に分割した
。一群にはニューロトロフィン抗体（抗ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３およびＮＴ
４／５）のカクテルを投与した。抗体カクテル（１００μｌ）の各用量は１００
μｇの各ニューロトロフィン抗体を含有した。第二の実験群には対照として正常
ウサギＩｇＧ（４００μｇ／１００μｌ；ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）
５００−Ｐ００）を投与した。全部の抗体を、５注入部位で腫瘍内に（５０μｌ
）および５注入部位で腫瘍周囲に（５０μｌ）投与した。マウスは１週あたり３
日、第１、３、５、８、１０および１２日に１日１回の抗体の注入を受領した。
腫瘍の長さおよび幅を２ないし３日ごとに測定した（第１、３、５、８、１０、
１２および１５日）。

【００６０】第三の実験群は、１４日間、１週あたり５日、ベヒクル（４０％ポリエチレン
グリコール、１０％ポビドンＣ３０および２％ベンジルアルコール）中のＣＥＰ
−７０１、１０ｍｇ／ｋｇｓｃを１日２回受領した。第四の実験群は、第三の
実験群の投与スケジュールに従ってベヒクルのみ（１００μｌ）を受領した。腫
瘍の長さおよび幅を２ないし３日ごとに測定した（第１、３、５、８、１０、１
２および１５日）。

【００６１】腫瘍体積を上述されたとおり算出した。腫瘍体積の平均および標準誤差を上述
されたとおり算出した。腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだけ逸脱した
腫瘍体積を伴ういかなるマウスも、すべてのデータ点での分析から除去した。相
対腫瘍体積について、所定のマウスの各データ点を、投与の開始時（第１日）の
そのマウスの腫瘍体積に対し正規化した。確率値は上述されたとおり算出した。
実験群のいずれにおいても死亡もしくは病的状態は観察されず、ＣＥＰ−７０１
および中和抗体がこれらの動物で良好に耐えられることを示した。

【００６２】ニューロトロフィン抗体の投与は、ＩｇＧ対照群における腫瘍体積に関してよ
り小さい相対腫瘍体積をもたらした。ニューロトロフィン抗体で処理された腫瘍
の相対的腫瘍体積は、第５日までにＩｇＧ処理された対照群での相対腫瘍体積よ
り有意により小さくなり（ｐ≦０．０００１）、そして実験の残余の間中、より
小さいまま留まった（ｐ≦０．０１第８および１０日；ｐ≦０．０００１第
１２および１５日）。ＩｇＧ対照群と比較したニューロトロフィン抗体で処理さ
れた腫瘍の絶対的体積は第１０日までに有意により小さくなり（ｐ≦０．０５）
、実験の終了までより小さいまま留まり（ｐ≦０．００１、第１２日；ｐ≦０．
０１、第１５日）、そして第１５日に０．４１の最小のＴ／Ｃに達した。

【００６３】ＣＥＰ−７０１の投与はベヒクル対照群での腫瘍体積に関してより小さい相対
腫瘍体積をもたらした。ＣＥＰ−７０１で処理された腫瘍の相対腫瘍体積は、第
３日までにベヒクル処理された対照群より有意により小さくなり（ｐ≦０．０５
）、そして実験の終了までより小さいまま留まった（ｐ≦０．０１、第５日；ｐ
≦０．０５、第８日；ｐ≦０．０１第１０および１２日；ｐ≦０．００１第
１５日）。ＣＥＰ−７０１で処理された腫瘍の絶対的体積は、第８日にベヒクル
対照群に比較して有意により小さく（ｐ≦０．０５）、実験の終了までより小さ
いまま留まり（ｐ≦０．０５、第１０日；ｐ≦０．００１第１２および１５日
）、そして第１２および１５日に０．２９の最小のＴ／Ｃに達した。

【００６４】正常ＩｇＧで処理された腫瘍は、ＣＥＰ−７０１のベヒクルで処理されたもの
よりゆっくりと増殖していたようであるが；しかしながら、実験の間のいかなる
時点でも、これら二群間の腫瘍体積もしくは相対腫瘍体積の有意の（ｐ≦０．０
５）差異は存在しなかった。

【００６５】この実験は、ニューロトロフィン抗体がＴＳＵ−Ｐｒ１異種移植片の増殖を阻
害することを立証する。中和抗体で処理された腫瘍の相対腫瘍体積は、第５日（
ｐ≦０．０００１）、第８および１０日（ｐ≦０．０１）ならびに第１２および
１５日（ｐ≦０．０００１）に正常ＩｇＧ処理された対照群より有意により小さ
かった。ニューロトロフィン抗体が正常ＩｇＧに関して腫瘍増殖を阻害したため
、ニューロトロフィン抗体の効果は、腫瘍中へのＩｇＧの注入からの一般的効果
に反して、ｔｒｋニューロトロフィンレセプターによるニューロトロフィンシグ
ナル伝達を封鎖することによりことがありそうである。

【００６６】実験２以下のニューロトロフィン抗体を使用した。すなわち、抗ＮＧＦ（ペ
プロテック（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８５）、抗ＢＤＮＦ（ペプロテッ
ク（ＴｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８４）、抗ＮＴ−３（ペプロテック（Ｐｅ
ｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８２）および抗ＮＴ４／５（ペプロテック（Ｐｅｐ
ｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８３）。

【００６７】ＴＳＵ−Ｐｒ１ヒト前立腺腫瘍細胞を、雌性無胸腺ヌードマウス（ｎｕ／ｎｕ
；５×１０⁶個の細胞／マウス）の横腹に皮下に注入した。異種移植片が１００
〜５００ｍｍ³に達した際に、マウスを無作為化し、そして６実験群に分割した
。第一群には、用量あたり抗ＮＧＦ（１００μｇ）＋正常ウサギＩｇＧ（３００
μｇ）を投与した。第二群には、用量あたり抗ＮＴ−３（１００μｇ）＋正常ウ
サギＩｇＧ（３００μｇ）を投与した。第三群には、用量あたり抗ＮＴ４／５（
１００μｇ）＋正常ウサギＩｇＧ（３００μｇ）を投与した。第四群には、用量
あたり抗ＢＤＮＦ（１００μｇ）＋正常ウサギＩｇＧ（３００μｇ）を投与した
。第五群にはニューロトロフィン抗体のカクテル（抗ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−
３およびＮＴ４／５（用量あたり１００μｇの各抗体））を投与した。第六の実
験群には対照として正常ウサギＩｇＧ（用量あたり４００μｇ；ペプロテック（
ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ００）を投与した。各用量（１００μｌＰＢ
Ｓあたり４００μｇの総タンパク質）は、１週あたり３日、第１、３、６、８、
１０および１３日に１日１回、５注入部位で腫瘍内に（５０μｌ）および５注入
部位で腫瘍周囲に（５０μｌ）注入した。腫瘍の長さおよび幅を２ないし３日ご
とに測定した（第１、３、６、８、１０、１３および１５日）。

【００６８】腫瘍体積を上述されたとおり算出した。腫瘍体積の平均および標準誤差もまた
上述されたとおり算出した。腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだけ逸脱
した腫瘍体積を伴ういかなるマウスも、すべてのデータ点での分析から除去した
。相対腫瘍体積について、所定のマウスの各データ点を投与の開始時（第１日）
のそのマウスの腫瘍体積に対して正規化した。確率値は上述されたとおり算出し
た。実験群のいずれにおいても死亡もしくは病的状態は観察されず、中和抗体が
これらの動物で良好に耐えられることを示した。

【００６９】ニューロトロフィン抗体のカクテル（抗ＮＧＦ、抗ＮＴ−３、抗ＢＤＮＦおよ
び抗ＮＴ−４／５）、抗ＮＧＦもしくは抗ＮＴ−３は、正常ウサギＩｇＧに関し
て腫瘍増殖を阻害した。抗ＮＴ−４／５も抗ＢＤＮＦも正常ウサギＩｇＧに関し
て腫瘍増殖に対する有意の効果を有しなかった。ニューロトロフィン抗体カクテ
ルを受領した群の相対腫瘍体積は、第３日（ｐ≦０．０１）および第８日（ｐ≦
０．０５）までにＩｇＧ対照群の相対腫瘍体積より有意に小さくなり、その後実
験の残余の間中、より小さいまま留まった（ｐ≦０．０１第１０、１３および
１５日）。抗ＮＧＦで処理された腫瘍の相対腫瘍体積は、第３日までに、ＩｇＧ
処理された対照群での相対腫瘍体積より有意により小さくなり（ｐ≦０．００１
）、そして実験の残余の間中、より小さいまま留まった（ｐ≦０．００１第６
日；ｐ≦０．０１第８日；ｐ≦０．００１第１０日；ｐ≦０．０１第１３
日；ｐ≦０．００１第１５日）。抗ＮＴ−３で処理された腫瘍の相対腫瘍体積
は、第６日までにＩｇＧ対照群での腫瘍より有意により小さくなり（ｐ≦０．０
５）、そして実験の残余の間中、より小さいまま留まった（ｐ≦０．０１第８
日；ｐ≦０．００１第１０日；ｐ≦０．０１第１３日；ｐ≦０．００１第
１５日）。

【００７０】ニューロトロフィン抗体カクテル群の絶対腫瘍体積は、ＩｇＧ処理された対照
群に比較して有意により小さくなり（ｐ≦０．０５、第８日；ｐ≦０．０１、第
１０、１３および１５日）、そして第１３日に０．５２の最小のＴ／Ｃに達した
。抗ＮＧＦを受領した群の絶対腫瘍体積は、ＩｇＧ処理された対照群に比較して
有意により小さくなり（ｐ≦０．０５、第３日；ｐ≦０．００１、第６、８、１
０、１３日；およびｐ≦０．０１第１５日）、そして第１３日までに０．３４
の最小のＴ／Ｃに達した。退縮が第３日（２０％、ｐ≦０．００１）、第６日（
３１％、ｐ≦０．０１）、第８日（３５％、ｐ≦０．００１）、第１０日（３５
％、ｐ≦０．０１）および第１３日（３７％、ｐ≦０．０１）に抗ＮＧＦ群で観
察された。抗ＮＴ−３を受領した群の絶対腫瘍体積は、ＩｇＧ処理された対照に
比較して有意により小さくなり（ｐ≦０．０５、第６日；ｐ≦０．０１第８、
１０、１３および１５日）、そして第１３日までに０．３８の最小のＴ／Ｃに達
した。退縮が第８日（１６％、ｐ≦０．００１）、第１０日（３３％、ｐ≦０．
００１）および第１３日（２９％、ｐ≦０．０１）に抗ＮＴ−３群で観察された
。

【００７１】ニューロトロフィン抗体カクテルに関する抗ＮＧＦもしくは抗ＮＴ−３の効果
の比較は、これらの個々のニューロトロフィン抗体のそれぞれがニューロトロフ
ィン抗体カクテルより効果的に腫瘍増殖を一時的に阻害したことを立証した。抗
ＮＧＦ群の相対および絶対腫瘍体積は、第８日（ｐ≦０．０１）および第１０日
（ｐ≦０．０５）にニューロトロフィン抗体カクテル群より有意により小さかっ
た。抗ＮＧＦは第８および１０日に正常ウサギＩｇＧに関して腫瘍増殖をそれぞ
れ５７および６４パーセントだけ阻害した一方、ニューロトロフィン抗体カクテ
ルは第８および１０日に正常ウサギＩｇＧに関して増殖をそれぞれ３２および４
３パーセントだけ阻害した。抗ＮＴ−３群の相対腫瘍体積は、第１０日（ｐ≦０
．０５）にニューロトロフィン抗体カクテル群より有意により小さかった。抗Ｎ
Ｔ−３は第１０日に正常ウサギＩｇＧに関して腫瘍増殖を６０パーセントだけ阻
害した一方、ニューロトロフィン抗体カクテルは第１０日に正常ウサギＩｇＧに
関して増殖を４３パーセントだけ阻害した。この実験からの結果は、抗ＮＧＦも
しくは抗ＮＴ−３が、ニューロトロフィン抗体カクテル（抗ＮＧＦ、抗ＮＴ−３
、抗ＢＤＮＦおよび抗ＮＴ−４／５）と同じくらい良好に、そして一時的にはそ
れより良好にＴＳＵ−Ｐｒ１異種移植片の増殖を阻害することを立証する。

【００７２】１００μｇの用量では、抗ＮＴ−４／５も抗ＢＤＮＦもヌードマウス中でのＴ
ＳＵ−Ｐｒ１腫瘍の増殖に対し有意の効果を有しなかったとは言え、異なるＮＴ
−４／５もしくはＢＤＮＦ中和抗体、またはこれらの抗体の異なる濃度が腫瘍増
殖に対する有意な効果をもたらすことができることが可能である。ＴＳＵ−Ｐｒ
１細胞中でのｔｒｋＢ発現を分析する以前のデータは、ｔｒｋＢがこの細胞系で
発現されていないことを示した（Ｄｉｏｎｎｅら、１９９８）。ＢＤＮＦおよび
ＮＴ−４／５は主としてｔｒｋＢによりシグナル伝達する（Ｂａｒｂａｃｉｄ、
１９９５；Ｉｂａｎｅｚ、１９９５）ため、われわれの実験で観察された効果の
欠如はレセプターの非存在と矛盾しない。実施例５：ニューロトロフィン抗体によるＡｓＰＣ−１膵癌異種移植片の増殖の
阻害以下のニューロトロフィン抗体を使用した。すなわち、抗ＮＧＦ（ペプロテッ
ク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８５）、抗ＢＤＮＦ（ペプロテック（Ｐｅ
ｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８４）、抗ＮＴ−３（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴ
ｅｃｈ）５００−Ｐ８２）および抗ＮＴ４／５（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅ
ｃｈ）５００−Ｐ８３）。

【００７３】ＡｓＰＣ−１ヒト膵腫瘍細胞を、雌性無胸腺ヌードマウス（ｎｕ／ｎｕ；５×
１０⁶個の細胞／マウス）の横腹に皮下に注入した。異種移植片が１００〜５０
０ｍｍ³に達した際に、マウスを無作為化し、そして４実験群に分割した。一群
にはニューロトロフィン抗体のカクテル（抗ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３および
ＮＴ４／５）を投与した。抗体カクテルの各用量（１００μｌ）は各ニューロト
ロフィン抗体１００μｇを含有した。第二の実験群には対照として正常ウサギＩ
ｇＧ（４００μｇ／１００μｌ；ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−
Ｐ００）を投与した。全部の抗体は、５注入部位で腫瘍内に（５０μｌ）および
５注入部位で腫瘍周囲に（５０μｌ）投与した。マウスは、１週あたり３日、第
１、３、５、８、１０および１２日に１日に１回抗体の注入を受領した。腫瘍の
長さおよび幅を２ないし３日ごとに測定した（第１、３、５、８、１０、１２お
よび１５日）。第三の実験群は、１４日間、１週あたり５日、ベヒクル（４０％
ポリエチレングリコール、１０％ポビドンＣ３０および２％ベンジルアルコール
）中のＣＥＰ−７０１、１０ｍｇ／ｋｇｓｃを１日２回受領した。第四の実験
群は、第三の実験群の投与スケジュールに従ってベヒクルのみ（１００μｌ）を
受領した。腫瘍の長さおよび幅を２ないし３日ごとに測定した（第１、３、５、
８、１０、１２および１５日）。

【００７４】腫瘍体積を上述されたとおり算出した。腫瘍体積の平均および標準誤差もまた
上述されたとおり算出した。腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだけ逸脱
した腫瘍体積を伴ういかなるマウスも、すべてのデータ点で分析から除去した。
相対腫瘍体積について、所定のマウスの各データ点を投与の開始時（第１日）の
そのマウスの腫瘍体積に対し正規化した。確率値は上述されたとおり算出した。
実験群のいずれでも死亡もしくは病的状態は観察されず、ＣＥＰ−７０１および
中和抗体がこれらの動物で良好に耐えられることを示した。

【００７５】ニューロトロフィン抗体の投与は、ＩｇＧ対照群での腫瘍体積に比較してより
小さい相対腫瘍体積をもたらした。ニューロトロフィン抗体で処理された腫瘍の
相対腫瘍体積は、ＩｇＧ処理された対照群より第５、１０、１２および１５日に
有意により小さかった（ｐ≦０．０５）。ＩｇＧ対照群と比較したニューロトロ
フィン抗体で処理された腫瘍の絶対的体積は、第５日までに有意により小さくな
り（ｐ≦０．０１）、実験の終了までより小さいまま留まり（ｐ≦０．０１、第
８、１０、１２および１５日）、そして第１５日に０．４３の最小のＴ／Ｃに達
した。

【００７６】ＣＥＰ−７０１の投与はベヒクル対照群での腫瘍体積に比較してより小さい相
対腫瘍体積をもたらした。ＣＥＰ−７０１で処理された腫瘍の相対腫瘍体積は、
第３日までにベヒクル処理された対照群より有意により小さくなり（ｐ≦０．０
１）、そして実験の終了までより小さいまま留まった（ｐ≦０．００１、第５日
；ｐ≦０．０１、第８日；ｐ≦０．００１第１０日、ｐ≦０．０１第１２日
；およびｐ≦０．００１第１５日）。ＣＥＰ−７０１で処理された腫瘍の絶対
的体積は、第５日にベヒクル対照群と比較して有意により小さく（ｐ≦０．０５
）、実験の終了までより小さいまま留まり（ｐ≦０．０５、第８、１０、１２お
よび１５日）、そして第１５日に０．２７の最小のＴ／Ｃに達した。

【００７７】この実験は、ニューロトロフィン抗体がＡｓＰＣ−１異種移植片の増殖を阻害
することを立証する。ニューロトロフィン抗体は正常ＩｇＧに関して腫瘍増殖を
阻害したため、ニューロトロフィン抗体の効果は、腫瘍中へのＩｇＧの注入から
の一般的効果に反して、ｔｒｋニューロトロフィンレセプターによるニューロト
ロフィンのシグナル伝達を封鎖することによることがありそうである。正常Ｉｇ
Ｇで処理された腫瘍は、ＣＥＰ−７０１のベヒクルで処理されたものよりゆっく
りと増殖していたようであるが；しかしながら、実験の間のいずれの時点でも、
これら２群間に腫瘍体積もしくは相対腫瘍体積に有意の（ｐ≦０．０５）差異は
存在しなかった。実施例６：ニューロトロフィン抗体で処理されたＣＦＰＡＣ膵腫瘍異種移植片の
比較の結果以下のニューロトロフィン抗体を使用した。すなわち、抗ＮＧＦ（ペプロテッ
ク（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８５）、抗ＢＤＮＦ（ペプロテック（Ｐｅ
ｐｒｏＴｅｃｈ）５００−Ｐ８４）、抗ＮＴ−３（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴ
ｅｃｈ）５００−Ｐ８２）および抗ＮＴ４／５（ペプロテック（ＰｅｐｒｏＴｅ
ｃｈ）５００−Ｐ８３）。

【００７８】ヒト膵癌細胞系ＡｓＰＣ−１およびＣＦＰＡＣを、１０％ウシ胎児血清（アト
ランタバイオロジカルズ（ＡｔｌａｎｔａＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）、ジョ
ージア州ノーコス）を含有するそれぞれＲＰＭＩもしくはＤＭＥＭ培地（セルグ
ロ／メディアテック（Ｃｅｌｌｇｒｏ／Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）、ワシントンＤＣ
）中、９５％空気／５％ＣＯ₂雰囲気をもつ加湿インキュベーター中３７℃で
増殖させた。細胞がマイコプラズマおよびげっ歯類ウイルスを含まないことを決
定した（ＭＡＰ試験）。指数的に増殖する細胞を、トリプシン／ＥＤＴＡ（ギブ
コＢＲＬ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）、メリーランド州ロックビル）を使用して収穫し
、そしてトリパンブルー（フィッシャーサイエンティフィック（Ｆｉｓｈｅｒ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、フィラデルフィア州マルバーン）を使用して計数し
た。細胞をマトリゲル（Ｍａｔｒｉｇｅｌ）（フィッシャーサイエンティフィ
ック（ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））と１：１で適切な増殖培地に再
懸濁した。

【００７９】雌性無胸腺ｎｕ／ｎｕマウス（８〜１０週齢；チャールズリバー（Ｃｈａｒｌ
ｅｓＲｉｖｅｒ）、ノースカロライナ州ローリー）を、マイクロアイソレータ
ー装置中でケージあたり５匹で維持した。動物に商業的飼料および水を随意に与
え、４８±２％湿度および２２±２℃で収容し、そして明−暗周期を１２時間間
隔に設定した。マウスを実験操作の前、最低１週間検疫した。マウスは腫瘍細胞
の接種の日に２２と２５ｇとの間の体重があった。上述されたとおり培養した指
数的に増殖する細胞を収穫し、そしてヌードマウスの右横腹に注入（５×１０⁶
個の細胞／マウス）した。接種後１０日の１００〜４００ｍｍ³（ＡｓＰＣ−１
）もしくは１００〜９００ｍｍ³（ＣＦＰＡＣ）の腫瘍を担持する動物を適切な
群に無作為化した。ニューロトロフィン中和抗体のカクテル（抗ＮＧＦ、抗ＢＤ
ＮＦ、抗ＮＴ−３および抗ＮＴ４／５；１００μｌの総容量中各抗体１００μｇ
、腫瘍内に５０μｌおよび腫瘍周囲に５０μｌ）もしくは正常ウサギＩｇＧ（４
００μｇ／１００μｌ、腫瘍内に５０μｌおよび腫瘍周囲に５０μｌ）で処理を
開始した。マウスは、抗体もしくは正常ウサギＩｇＧの注入を、１週あたり３日
、第１、３、５、８、１０および１２日に１日１回受領した。

【００８０】腫瘍はノギスを使用して２〜４日ごとに測定した。腫瘍体積を上述されたとお
り算出した。腫瘍体積の平均および標準誤差もまた上述されたとおり算出した。
分析の最終日の腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだけ逸脱した分析の最
終日の腫瘍体積をもついかなるマウスも、すべてのデータ点での分析から除去し
た。統計学的解析は上述されたとおり算出し、ｐ≦０．０５を有意と考えた。

【００８１】ＡｓＰＣ−１異種移植片へのニューロトロフィン抗体（抗ＮＧＦ、抗ＢＤＮＦ
、抗ＮＴ−３および抗ＮＴ４／５）の投与は、ＩｇＧ対照群での腫瘍体積に比較
してより小さい相対腫瘍体積をもたらした。ニューロトロフィン抗体で処理され
た腫瘍の相対腫瘍体積は、第５日に開始してＩｇＧ処理された対照群より有意に
より小さくなり（ｐ≦０．０５）、そして第１０日から実験の終了までより小さ
いまま留まった。ＩｇＧ処理された対照動物と比較したニューロトロフィン抗体
で処理された腫瘍の絶対的体積は、第５日までに有意により小さくなり（ｐ≦０
．０１）、実験の終了までより小さいまま留まり、そして第１５日に腫瘍増殖の
最大の５５パーセントの阻害に達した。

【００８２】ニューロトロフィン中和抗体の投与は、ＩｇＧ対照で処理された腫瘍に関して
ＣＦＰＡＣ腫瘍の増殖を阻害しなかった。ニューロトロフィン中和抗体による阻
害の欠如は、これらの異種移植片が増殖についてニューロトロフィンに依存しな
いことを示唆する。ＣＦＰＡＣの非応答性は、ＣＦＰＡＣ腫瘍の増殖がｐａｎ−
ｔｒｋ阻害剤ＣＥＰ−７０１での処理に非感受性であった一方、ＡｓＰＣ−１腫
瘍の増殖がＣＥＰ−７０１により阻害されたという以前に発表されたデータと矛
盾しない。

【００８３】実験群において中和抗体に関連した病的状態の兆候もしくは死亡は明らかでな
く、また、体重は中和抗体で処理された動物と正常ウサギＩｇＧで処理された動
物との間で比較可能であった（表２および４）。これらのデータは、中和抗体が
、有意の抗腫瘍の有効性が観察された用量で、動物により良好に耐えられたこと
を示す。

【００８４】

【表１】

【００８５】ＡＳＰＣ１腫瘍を担持するヌードマウスを、中和抗体（１００μｇの各抗体／１
００μｌ、第１、３、５、８、１０および１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日
１回）もしくは滅菌ＰＢＳ中の正常ウサギＩｇＧ（１００μｇ／１００μｌ、第
１、３、５、８、１０および１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日１回）で処理
した。腫瘍体積を２〜３日ごとに測定した。値は相対腫瘍体積の平均±ＳＥであ
る。カッコ内の値は実際の腫瘍体積の平均±ＳＥ（ｍｍ³）である。*ｐ≦０．０
５、**ｐ≦０．０１（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ順位和検定による）。

【００８６】

【表２】

【００８７】ＡＳＰＣ１腫瘍を担持するヌードマウスを、中和抗体（１００μｇの各抗体／１
００μｌ、第１、３、５、８、１０および１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日
１回）もしくは滅菌ＰＢＳ中の正常ウサギＩｇＧ（１００μｇ／１００μｌ、第
１、３、５、８、１０および１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日１回）で処理
した。値は体重の平均±ＳＥである。

【００８８】

【表３】

【００８９】ＣＦＰＡＣを担持するヌードマウスを、中和抗体（１００μｇの各抗体／１００
μｌ、第１、３、５、８、１０、１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日１回）も
しくは滅菌ＰＢＳ中の正常ウサギＩｇＧ（４００μｇ／１００μｌ、第１、３、
５、８、１０および１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日１回）で処理した。腫
瘍体積を３〜４日ごとに測定した。値は相対腫瘍体積の平均±ＳＥである。カッ
コ内の値は実際の腫瘍体積の平均±ＳＥ（ｍｍ³）である。

【００９０】

【表４】

【００９１】ＣＦＰＡＣを担持するヌードマウスを、中和抗体（１００μｇの各抗体／１００
μｌ、第１、３、５、８、１０、１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日１回）も
しくは滅菌ＰＢＳ中の正常ウサギＩｇＧ（４００μｇ／１００μｌ、第１、３、
５、８、１０および１２日に腫瘍内および腫瘍周囲に１日１回）で処理した。体
重を３〜４日ごとに測定した。値は体重の平均±ＳＥ（ｇ）である。実施例７：個々に算出された腫瘍体積および体重上述されたとおり培養した指数的に増殖する細胞を収穫し、そしてヌードマウ
スの右横腹に注入した（５×１０⁶個の細胞／マウス）。１００〜５００ｍｍ³の
大きさの腫瘍を担持する動物を、適切な群、ならびにニューロトロフィン（抗Ｎ
ＧＦ、抗ＢＤＮＦ、抗ＮＴ−３および抗ＮＴ−４／５）中和抗体のカクテル（１
００μｌの総容積中１００μｇの各抗体、腫瘍内に５０μｌおよび腫瘍周囲に５
０μｌ）もしくは正常ウサギＩｇＧ（４００μｇ／１００μｌ、腫瘍内に５０μ
ｌおよび腫瘍周囲に５０μｌ）を使用することを用いる投与に無作為化した。マ
ウスは、１週あたり３日、第１、３、５、８、１０および１２日に１日１回抗体
の注入を受領した。

【００９２】腫瘍はノギスを使用して２〜３日ごとに測定した。腫瘍体積、腫瘍体積の平均
および標準誤差もまた上述されたとおり算出した。相対腫瘍体積は以下の式、す
なわち平均ｖ_t／平均ｖ_oを使用してすべてのデータ点で決定し、ここでｖ_tは所
定の日の腫瘍体積を指し、また、ｖ_oは投与の開始時（第１日）の腫瘍体積を指
す。分析の最終日の腫瘍体積の平均から２標準偏差より大きいだけ逸脱した分析
の最終日の腫瘍体積を伴ういかなるマウスも、すべてのデータ点での分析から除
去した。統計学的解析は上述されたとおり算出し、ｐ≦０．０５を有意と考えた
。

【００９３】

【表５】

【００９４】

【表６】

【００９５】

【表７】

【００９６】

【表８】

【００９７】

【表９】

【００９８】

【表１０】

【００９９】

【表１１】

【０１００】

【表１２】

【０１０１】

【表１３】

【０１０２】

【表１４】

【０１０３】

【表１５】

【０１０４】

【表１６】

【０１０５】

【表１７】

【０１０６】

【表１８】

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１４年６月１０日（２００２．６．１０）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項２】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、Ｎ
Ｔ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項１記載の方法。

【請求項３】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメン
トもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項１記載の方法。

【請求項４】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１記載の方法
。

【請求項５】前記哺乳動物がヒトである、請求項１記載の方法。

【請求項６】腫瘍を治療上有効な量の最低１種の中和ニューロトロフィン
抗体と接触させることを含んで成り、前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮ
Ｆ、ＮＴ−３、ＮＴ−４／５、ＮＴ−６およびＮＴ−７より成る群から選択され
る、前立腺もしくは膵腫瘍の治療方法。

【請求項７】腫瘍を、抗ニューロトロフィン抗体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプターの優性ネガティブ変異体より成る群から選択される最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させること
を含んで成る、前立腺もしくは膵腫瘍の体積の低下方法。

【請求項８】前記抗ニューロトロフィン剤が抗ニューロトロフィン抗体である、請求項７記載の方法。

【請求項９】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、Ｎ
Ｔ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項７記載の方法。

【請求項１０】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメ
ントもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項８記載の方法。

【請求項１１】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項８記載の方
法。

【請求項１２】腫瘍を、抗ニューロトロフィン抗体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプターの優性ネガティブ変異体より成る群から選択される最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させるこ
とを含んで成る、前立腺もしくは膵腫瘍の増殖速度の低下方法。

【請求項１３】前記抗ニューロトロフィン剤が抗ニューロトロフィン抗体である、請求項１２記載の方法。

【請求項１４】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、
ＮＴ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項１２記載の方法。

【請求項１５】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメ
ントもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項１３記載の方法。

【請求項１６】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１３記載の
方法。

【請求項１７】治療上有効な量の最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺
乳動物に投与することを含んで成る、癌に関連する疼痛の治療方法。

【請求項１８】前記抗ニューロトロフィン剤が、抗ニューロトロフィン抗
体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを
結合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプタ
ーの優性ネガティブ変異体より成る群から選択される、請求項１７記載の方法。

【請求項１９】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、
ＮＴ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項１７記載の方法。

【請求項２０】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメ
ントもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項１７記載の方法。

【請求項２１】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１８記載の
方法。

【請求項２２】前記哺乳動物がヒトである、請求項１７記載の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 1/18 Ａ６１Ｐ 1/18 13/08 13/08 25/04 25/04 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１Ｃ１２Ｎ 5/06 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｅ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ミクニオツキ，シーラ・ジエイアメリカ合衆国ペンシルベニア州18045イーストン・ヒツコリーレーン701 (72)発明者ラジエリ，ブルース・エイアメリカ合衆国ペンシルベニア州19301パオリ・サンセツトドライブ66 Ｆターム(参考） 4B065 AA93X BD39 CA44 4C084 AA02 AA13 AA17 BA35 BA44 MA52 MA59 MA60 MA63 MA65 MA66 NA14 ZA082 ZA662 ZA812 ZB262 ZC412 4C085 AA13 AA14 AA16 BB07 BB24 BB41 BB43 CC02 CC05 CC13 DD23 DD63 DD86 DD88 EE01 EE03 FF03 FF20 GG02 GG03 GG04 GG06 GG08 4C086 AA01 AA02 EA16 MA01 MA04 MA13 MA17 MA22 MA23 MA24 MA28 MA35 MA37 MA38 MA52 MA59 MA60 MA63 MA66 NA14 ZA08 ZA66 ZA81 ZB26 ZC41

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】治療上有効な量の最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺乳
動物に投与することを含んで成る、癌の治療もしくは予防方法。
【請求項２】前記抗ニューロトロフィン剤が、抗ニューロトロフィン抗体
、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを結
合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプター
の優性ネガティブ変異体より成る群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項３】前記癌が前立腺もしくは膵癌である、請求項１記載の方法。
【請求項４】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、Ｎ
Ｔ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項１記載の方法。
【請求項５】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメン
トもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項２記載の方法。
【請求項６】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項２記載の方法
。
【請求項７】前記哺乳動物がヒトである、請求項１記載の方法。
【請求項８】前記腫瘍を治療上有効な量の最低１種の中和ニューロトロフ
ィン抗体と接触させることを含んで成り、前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、Ｂ
ＤＮＦ、ＮＴ−３、ＮＴ−４／５、ＮＴ−６およびＮＴ−７より成る群から選択
される、前立腺もしくは膵腫瘍の治療方法。
【請求項９】前記腫瘍を最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させる
ことを含んで成る、前立腺もしくは膵腫瘍の体積の低下方法。
【請求項１０】前記抗ニューロトロフィン剤が、抗ニューロトロフィン抗
体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを
結合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプタ
ーの優性ネガティブ変異体より成る群から選択される、請求項９記載の方法。
【請求項１１】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、
ＮＴ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項９記載の方法。
【請求項１２】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメ
ントもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項１０記載の方法。
【請求項１３】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１０記載の
方法。
【請求項１４】前記腫瘍を最低１種の抗ニューロトロフィン剤と接触させ
ることを含んで成る、前立腺もしくは膵腫瘍の増殖速度の低下方法。
【請求項１５】前記抗ニューロトロフィン剤が、抗ニューロトロフィン抗
体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを
結合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプタ
ーの優性ネガティブ変異体より成る群から選択される、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、
ＮＴ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項１４記載の方法。
【請求項１７】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメ
ントもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項１５記載の方法。
【請求項１８】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１５記載の
方法。
【請求項１９】治療上有効な量の最低１種の抗ニューロトロフィン剤を哺
乳動物に投与することを含んで成る、疼痛の治療方法。
【請求項２０】前記抗ニューロトロフィン剤が、抗ニューロトロフィン抗
体、ニューロトロフィンに向けられたアンチセンス分子、ニューロトロフィンを
結合する小型の有機分子、およびニューロトロフィンを結合するｔｒｋレセプタ
ーの優性ネガティブ変異体より成る群から選択される、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】前記ニューロトロフィンがＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、
ＮＴ−４／５、ＮＴ−６もしくはＮＴ−７である、請求項１９記載の方法。
【請求項２２】前記抗体がヒト化抗体、キメラ抗体、Ｆ（ａｂ）フラグメ
ントもしくはＦ（ａｂ）₂フラグメントである、請求項１９記載の方法。
【請求項２３】前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項２０記載の
方法。
【請求項２４】前記哺乳動物がヒトである、請求項１９記載の方法。