JP2003524180A - 蛍光検出装置およびその検出方法 - Google Patents
蛍光検出装置およびその検出方法Info
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
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- G01N2021/6417—Spectrofluorimetric devices
Abstract
(57)【要約】
【解決手段】分子間の相互作用を分析するための測定箇所が、画像形成型の方法を利用することにより少なくとも二次元単位で計測および選定され、画像形成型顕微鏡ユニットも機器構成要素も共通の制御ユニットで操作され、そして少なくとも機器構成要素の分析結果が制御ユニット及びコンピュータを通じて画像表示される、少なくとも一つの画像形成型顕微鏡ユニットおよび少なくとも一つの少量単位での分子間相互作用分析用の機器構成要素を有する蛍光検出装置
Description
【０００１】
本発明は、少なくとも一つの画像形成型顕微鏡ユニットおよび少なくとも一つ
の少量単位での分子間相互作用分析用の機器構成要素を有する蛍光検出装置に関
するものである。
の少量単位での分子間相互作用分析用の機器構成要素を有する蛍光検出装置に関
するものである。
【０００２】
顕微鏡構成体（ＦＣＭ）に実現される蛍光相関性分光技術（ＦＣＳ）は、バイ
オ分子の相互作用に関する研究で、特にその検査が１μモル以下の非常な低濃度
領域および１０−１４以下の測定体積で行われる場合には有力であると確証され
ている。 検査対象の試料が均質である限り、測定箇所は副次的な意味しか持っていない
。しかし、例えば、生物の細胞などの構造を持った試料の場合は、測定箇所に関
する知識またはその選択が決定的な意味を持っている。測定箇所に関する知識と
言えば、これ迄は旧来の透過光式または反射光式顕微鏡検査を通じて取得してき
たが、この目的を達成するために、例えば、旧来型蛍光顕微鏡装置からＦＣＳ検
出ユニットへの切替が行われた。
オ分子の相互作用に関する研究で、特にその検査が１μモル以下の非常な低濃度
領域および１０−１４以下の測定体積で行われる場合には有力であると確証され
ている。 検査対象の試料が均質である限り、測定箇所は副次的な意味しか持っていない
。しかし、例えば、生物の細胞などの構造を持った試料の場合は、測定箇所に関
する知識またはその選択が決定的な意味を持っている。測定箇所に関する知識と
言えば、これ迄は旧来の透過光式または反射光式顕微鏡検査を通じて取得してき
たが、この目的を達成するために、例えば、旧来型蛍光顕微鏡装置からＦＣＳ検
出ユニットへの切替が行われた。
【０００３】
旧来の顕微鏡検査に関してはいくつかの欠点があった。一つは、試料が高い光
線負荷を被ることであり、また一つは、三次元座標系における測定位置の最適設
定、即ち、誤差１μｍ以下という所要精度での位置設定が行えないことである。
線負荷を被ることであり、また一つは、三次元座標系における測定位置の最適設
定、即ち、誤差１μｍ以下という所要精度での位置設定が行えないことである。
【０００４】
以下では特許請求項および図面に基づいて本発明の装置および方法について説
明するが、それらはいずれもＦＣＳ法を画像形成型の方法（Ｓ−ＦＣＭ）へ拡大
させる可能性を提供するもので有用である。それによって、検査対象である分子
間相互作用の立体分布について確かな事実が掌握できる。
明するが、それらはいずれもＦＣＳ法を画像形成型の方法（Ｓ−ＦＣＭ）へ拡大
させる可能性を提供するもので有用である。それによって、検査対象である分子
間相互作用の立体分布について確かな事実が掌握できる。
【０００５】
図１は有利な素子配置例を描いたものである。
顕微鏡ユニットＭＵ（この場合では、ｘ、ｙおよびｚ方向に移動可能なテーブ
ルＴ上に置かれた試料Ｐを、試料の下方に配置された対物レンズＯおよび鏡胴レ
ンズＴＬを通して観察する逆配置型顕微鏡）と走査ユニットＳＵとが組合わされ
ていて、単一または複数の波長を持つレーザ光源ＬＬＳからの光が直接、または
光ファイバーＬＦを通ってコリメーション光学系ＫＯに入り、そこから一次光線
分離器ＳＴＰＳを経由して試料に集束する。スキャナＳは、光線をｘ方向および
ｙ方向に偏向させることができる。様々な試料内形成層の状態が、試料テーブル
Ｔまたは対物レンズＯの垂直移動によって把握することができる。
ルＴ上に置かれた試料Ｐを、試料の下方に配置された対物レンズＯおよび鏡胴レ
ンズＴＬを通して観察する逆配置型顕微鏡）と走査ユニットＳＵとが組合わされ
ていて、単一または複数の波長を持つレーザ光源ＬＬＳからの光が直接、または
光ファイバーＬＦを通ってコリメーション光学系ＫＯに入り、そこから一次光線
分離器ＳＴＰＳを経由して試料に集束する。スキャナＳは、光線をｘ方向および
ｙ方向に偏向させることができる。様々な試料内形成層の状態が、試料テーブル
Ｔまたは対物レンズＯの垂直移動によって把握することができる。
【０００６】
試料Ｐからの光は再びスキャナＳを通ったのち、二次光線分離器ＳＴＳＳ １
〜Ｎによって検出管路ＤＥＳ １〜Ｎに導かれ、さらに評価のため、コンピュー
タＣ内の制御ユニットＣＵを通じて電気信号に変換される。測定された信号は、
画像情報獲得のために利用される。
〜Ｎによって検出管路ＤＥＳ １〜Ｎに導かれ、さらに評価のため、コンピュー
タＣ内の制御ユニットＣＵを通じて電気信号に変換される。測定された信号は、
画像情報獲得のために利用される。
【０００７】
単一または複数の波長を持つ、レーザ光源からの光ＬＬＦは、ＦＣＳ用ユニッ
トＦＵ内の一次光線分離器ＳＴＰＦを通って試料に集束するが、その場合、例え
ば、内側および外側へ転向させる全面ミラーまたは部分透過ミラーの光線転向ユ
ニットＢＳが利用される。 光源ＬＬＳおよびＬＬＦは同一タイプのものでもよく、また適当な変換素子お
よび接続素子を用いてそれぞれユニットＳＵ、ＦＵに統合することもできる。
トＦＵ内の一次光線分離器ＳＴＰＦを通って試料に集束するが、その場合、例え
ば、内側および外側へ転向させる全面ミラーまたは部分透過ミラーの光線転向ユ
ニットＢＳが利用される。 光源ＬＬＳおよびＬＬＦは同一タイプのものでもよく、また適当な変換素子お
よび接続素子を用いてそれぞれユニットＳＵ、ＦＵに統合することもできる。
【０００８】
試料から発する蛍光は二次光線分離器ＳＴＳＦ １〜Ｎを通って、単一または
複数のＦＣＳ検出管路ＤＥＦ １〜Ｎに導かれ、評価のため電気信号に変換され
て制御ユニットＣＵに伝送される。その信号はＦＣＳ分析に使用される。
複数のＦＣＳ検出管路ＤＥＦ １〜Ｎに導かれ、評価のため電気信号に変換され
て制御ユニットＣＵに伝送される。その信号はＦＣＳ分析に使用される。
【０００９】
設置された検出管路の数によって、自己相関分析あるいは相互相関分析に分け
られる。 実測試料部位では、例えば、拡散時間、粒子数、寿命、構成成分の割合が測定
される。
られる。 実測試料部位では、例えば、拡散時間、粒子数、寿命、構成成分の割合が測定
される。
【００１０】
データ等価性の制御は、両検出ユニットそれぞれに同一制御ユニットＣＵおよ
びしかるべきプログラムの利用できるコンピュータＣを配備して行われる。試料
テーブルＴ、対物レンズＯの垂直位置調整装置および光線転向ユニットＢＳの制
御も、同様にコンピュータプログラミングによるこの制御ユニットにより行われ
る。 それと同時に、ＦＣＳ検出ユニットを共焦点レーザ走査顕微鏡システムに統合
することによって、様々な試料部位での測定について、そのＦＣＳ分析結果をも
画像系の結果に組み入れることが可能になる。
びしかるべきプログラムの利用できるコンピュータＣを配備して行われる。試料
テーブルＴ、対物レンズＯの垂直位置調整装置および光線転向ユニットＢＳの制
御も、同様にコンピュータプログラミングによるこの制御ユニットにより行われ
る。 それと同時に、ＦＣＳ検出ユニットを共焦点レーザ走査顕微鏡システムに統合
することによって、様々な試料部位での測定について、そのＦＣＳ分析結果をも
画像系の結果に組み入れることが可能になる。
【００１１】
そのようにして、試料を損傷することなしにＦＣＳ測定部位を高い精度で決定
することにも、また他方様々な部位の測定に対するＦＣＳ分析結果を画像形成に
取り込むことにも適した、有用な装置が生み出される。 好ましいことに、例えば拡散時間やその他分析結果を平面的あるいは立体的に
色分けして、様々な配色でカラー表示することが可能である。
することにも、また他方様々な部位の測定に対するＦＣＳ分析結果を画像形成に
取り込むことにも適した、有用な装置が生み出される。 好ましいことに、例えば拡散時間やその他分析結果を平面的あるいは立体的に
色分けして、様々な配色でカラー表示することが可能である。
【００１２】
さらには、記憶装置における分類に従い、ＦＣＳ撮影画像を、例えば補足色と
して追加彩色して、管路別に色分けされたＬＳＭ（レーザ走査顕微鏡）画像と組
み合わせることができる。 また、ＦＣＳ／ＬＳＭ間の示差画像、除法相関画像又はその他の組み合わせを
構成して表示することもできる。
して追加彩色して、管路別に色分けされたＬＳＭ（レーザ走査顕微鏡）画像と組
み合わせることができる。 また、ＦＣＳ／ＬＳＭ間の示差画像、除法相関画像又はその他の組み合わせを
構成して表示することもできる。
【００１３】
レーザ走査顕微鏡の本発明に基づく部分的変更およびＦＣＳ機器ユニットとの
機能結合は、然るべきコンピュータプログラミングのもと、すべての構成要素に
共通する機器ユニットを通じて行われる。走査ユニット、ＦＣＳユニット、顕微
鏡ユニットおよび試料ポジション設定システムは、機械的、光学的および電子的
に相互に調和し、連結している。
機能結合は、然るべきコンピュータプログラミングのもと、すべての構成要素に
共通する機器ユニットを通じて行われる。走査ユニット、ＦＣＳユニット、顕微
鏡ユニットおよび試料ポジション設定システムは、機械的、光学的および電子的
に相互に調和し、連結している。
【００１４】
試料の走査後には像点をマーキングし、ＦＣＳユニット用の測定ポジションに
設置して測定することができる。 検査対象点の選択は、設定基準（例えば、ラスタ、画像輪郭）に基づき自動的
に、あるいは走査ユニットで撮影された画像に対する使用者の個別評価によって
行うことができる。
設置して測定することができる。 検査対象点の選択は、設定基準（例えば、ラスタ、画像輪郭）に基づき自動的
に、あるいは走査ユニットで撮影された画像に対する使用者の個別評価によって
行うことができる。
【００１５】
本発明の構造によれば、ＦＣＳ法で検査される試料に対し、鏡検的に見ても小
さな測定単位の中から当該箇所を照準選択することが可能になる。しかも、ＦＣ
Ｓ測定の体系的結果からＦＣＳ分析結果における立体的変分を画像により掌握お
よび描写し、それをＬＳＭ画像に振り分けることが可能である。
さな測定単位の中から当該箇所を照準選択することが可能になる。しかも、ＦＣ
Ｓ測定の体系的結果からＦＣＳ分析結果における立体的変分を画像により掌握お
よび描写し、それをＬＳＭ画像に振り分けることが可能である。
【００１６】
図２では別な形態を持つ有利な配置例が描かれている。
ここでは共通のユニットＳＦＵに、共通のレーザユニットＬＬＳＦおよび共通
の一次光線分離器ＳＴＰＦＳが配備されている。ＬＳＭおよびＦＣＳにおける検
出用として、セパレート型の光線分離器および検出器、それぞれＳＴＳＦ、ＤＥ
ＦおよびＳＴＳＳ、ＤＥＳが描かれている。検出器ＤＥＦおよびＤＥＳは同一構
造にするのが好ましく、またそれが可能である。測定、評価モードの選択は制御
ユニットＣＵにより行える。
の一次光線分離器ＳＴＰＦＳが配備されている。ＬＳＭおよびＦＣＳにおける検
出用として、セパレート型の光線分離器および検出器、それぞれＳＴＳＦ、ＤＥ
ＦおよびＳＴＳＳ、ＤＥＳが描かれている。検出器ＤＥＦおよびＤＥＳは同一構
造にするのが好ましく、またそれが可能である。測定、評価モードの選択は制御
ユニットＣＵにより行える。
【００１７】
ＬＳＭ検出管路およびＦＣＳ検出管路を一つのユニット内に共同設置すること
で有利な配置が実現する。 図１の構造におけるのと同様、単一または複数の波長を持つレーザ光が、コリ
メーション光学系および一次光線分離器による補助のもと、走査ユニットを経由
して試料に集束する。この構造で特に有利なのは、ＦＣＳ測定における測定箇所
もスキャナで選択できることである。それによって、特にＦＣＳ分析法を画像形
成型の方法（走査式ＦＣＭ＝Ｓ−ＦＣＳＭ）へと有利に拡大することが可能にな
る。
で有利な配置が実現する。 図１の構造におけるのと同様、単一または複数の波長を持つレーザ光が、コリ
メーション光学系および一次光線分離器による補助のもと、走査ユニットを経由
して試料に集束する。この構造で特に有利なのは、ＦＣＳ測定における測定箇所
もスキャナで選択できることである。それによって、特にＦＣＳ分析法を画像形
成型の方法（走査式ＦＣＭ＝Ｓ−ＦＣＳＭ）へと有利に拡大することが可能にな
る。
【００１８】
反射光および蛍光は対物レンズに捕らえられ、そこから再びスキャナを通り、
その後は単一または複数の二次光線分離器によって、単一または複数のＬＳＭ検
出器管路またはＦＣＳ検出器管路に導かれる。その際、スペクトル特性または偏
光特性に従って分離することが可能である。検出された光は、然るべきプログラ
ムを擁するコンピュータへと続く制御ユニットに導かれ、そこでＦＣＳ分析また
は画像再生に使用される電気信号を誘起する。
その後は単一または複数の二次光線分離器によって、単一または複数のＬＳＭ検
出器管路またはＦＣＳ検出器管路に導かれる。その際、スペクトル特性または偏
光特性に従って分離することが可能である。検出された光は、然るべきプログラ
ムを擁するコンピュータへと続く制御ユニットに導かれ、そこでＦＣＳ分析また
は画像再生に使用される電気信号を誘起する。
【００１９】
当該レーザ走査顕微鏡は、その構成要素および評価方法がＦＣＳ測定も実施で
きるように変更されている。走査素子とＦＣＳ素子とは、図１に描かれたような
光線分離または光線転向が不要になるように、本発明に基づき組み合わされてい
る。 この配置では、測定箇所がスキャナの使用および対物レンズの垂直移動によっ
て調整できるので、予備設定ポイントにおいてＦＣＳ分析を行なう際にはもはや
試料の移動が必要ないというところに長所がある。
きるように変更されている。走査素子とＦＣＳ素子とは、図１に描かれたような
光線分離または光線転向が不要になるように、本発明に基づき組み合わされてい
る。 この配置では、測定箇所がスキャナの使用および対物レンズの垂直移動によっ
て調整できるので、予備設定ポイントにおいてＦＣＳ分析を行なう際にはもはや
試料の移動が必要ないというところに長所がある。
【００２０】
操作モードにおける機能結合は、走査過程の最中にスキャナを止めて試料ポジ
ションを設定し、それに基づきＦＣＳ評価の追跡をすることにより、あるいは走
査過程終了後に、ミラーを調整した上で、またはスキャナミラーを特定ポイント
に設定したままテーブルを移動させた上で、ＦＣＳ評価を行うことにより実現さ
れる。
ションを設定し、それに基づきＦＣＳ評価の追跡をすることにより、あるいは走
査過程終了後に、ミラーを調整した上で、またはスキャナミラーを特定ポイント
に設定したままテーブルを移動させた上で、ＦＣＳ評価を行うことにより実現さ
れる。
【００２１】
図２に基づく配置によれば、高いポジション設定精度を持ったＦＣＳ測定がよ
り短い追跡時間で実施できる。 本発明のような構造を持つのが走査型蛍光相関性顕微鏡（Ｓ−ＦＣＭ）であり
、本発明に基づくものであれば、構造およびバイオケミカルに関する情報を画像
で表現することができる。
り短い追跡時間で実施できる。 本発明のような構造を持つのが走査型蛍光相関性顕微鏡（Ｓ−ＦＣＭ）であり
、本発明に基づくものであれば、構造およびバイオケミカルに関する情報を画像
で表現することができる。
【図１】走査型蛍光相関性顕微鏡における有利な素子配置例
【図２】走査型蛍光相関性顕微鏡における別の有利な素子配置例
ＬＬＦ レーザ光源
ＬＦ 光ファイバ
ＤＥＦ ＦＣＳ（蛍光相関性分光技術）用検出管路１〜Ｎ
ＫＯ コリメーション光学系
ＳＴＰＦ ＦＣＳ用一次光線分離器
ＳＴＳＦ ＦＣＳ用二次光線分離器
ＦＵ ＦＣＳ用ユニット
Ｐ 試料
Ｔ 試料テーブル
Ｏ 対物レンズ
ＭＵ 顕微鏡ユニット
ＴＬ 鏡胴レンズ
ＢＳ 光線転向ユニット
ＬＬＳ レーザ光源
ｘ／ｙ ｘ方向、ｙ方向
Ｓ スキャナ
ＬＦ 光ファイバ
ＳＴＰＳ 一次光線分離器
ＳＴＳＳ 二次光線分離器
ＤＥＳ １〜Ｎ 検出管路
ＳＵ 走査ユニット
ＣＵ 制御ユニット
Ｃ コンピュータ
ＬＬＳＦ 共通レーザユニット
ＳＴＰＦＳ 共通一次光線分離器
ＳＦＵ 共通ユニット
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 チロ ヤンコフスキイ
ドイツ国 14532 ゲーテルフェルデ ヴ
ィーセングルント ４
(72)発明者 フランク へクト
ドイツ国 99425 ワイマール シェンブ
リック 19
Ｆターム(参考） 2G043 AA01 BA16 CA03 EA01 FA01
FA02 FA06 GA04 GB01 HA01
HA02 HA09 JA03 LA03 NA01
NA06
Claims (11)
- 【請求項１】少なくとも一つの画像形成型顕微鏡ユニットおよび少なくとも一
つの少量単位での分子間相互作用分析用の機器構成要素からなり、 ・ 分子間の相互作用を分析するための測定箇所が、画像形成型の方法を利用
することにより、少なくとも二次元単位で計測および選定されること ・ 画像形成型顕微鏡ユニットおよび機器構成要素が、共通の制御ユニットで
操作されること、 ・ 少なくとも機器構成要素の分析結果が、制御ユニットおよびコンピュータ
を通じて画像表示されること を特徴とする蛍光検出装置 - 【請求項２】分析結果が、画像形成型顕微鏡ユニットの画像に振り分けられる
ことを特徴とする請求項１に記載の装置 - 【請求項３】分子間相互作用の分析が、蛍光相関性分光技術（ＦＣＳ）によっ
て行われ、そして画像形成ユニットが、レーザ走査顕微鏡測定の原理に依拠して
いる請求項１または２に記載の装置 - 【請求項４】ＦＣＳ測定のための試料部位の選択が、移動可能な試料テーブル
により行なわれ、および／または対物レンズの垂直移動が手動的および／または
自動的に行なわれることを特徴とする請求項１〜３の一つに記載の装置 - 【請求項５】ＦＣＳ測定のための試料部位の選択が、少なくとも一つのスキャ
ナにより手動的および／または自動的に行なわれることを特徴とする請求項１〜
４の一つに記載の装置 - 【請求項６】レーザ走査顕微鏡（ＬＳＭ）と、ＬＳＭの照明光路内でＬＳＭの
スキャナと試料間にあって、ＬＳＭと共通の評価ユニットを通じて連結されてい
る励起およびＦＣＳ把握のための装置とから成り、特に照射された試料からの光
を検出するための請求項１〜５の一つに記載の装置 - 【請求項７】ＬＳＭ（レーザ走査顕微鏡）検出器のほかに、ＦＣＳ信号把握の
ための別の検出器が、検出方向への配列で言えば、ＬＳＭスキャナの後に配置さ
れていて、および／またはＬＳＭ検出器の操作モードが、共通の制御ユニットに
よりＦＣＳ評価に切り替えられるＬＳＭから成る、特に照射された試料からの光
を検出するための請求項１〜５の一つに記載の装置 - 【請求項８】試料が、照射光により少なくとも二次元単位で点毎に走査され、
試料から出た光が、少なくとも一つの第一検出器を通して検出され、走査過程の
間および／または走査過程後に、少なくとも一つの試料点についてＦＣＳ評価が
行なわれる、特に照射された試料からの光を検出するための請求項１〜７の一つ
に記載の方法 - 【請求項９】少なくとも一つの試料点を対象とし、そして走査時に検出される
値についてだけでなく、ＦＣＳ評価時に検出される少なくとも一つの値について
も保存および保存のための整理が行なわれることを特徴とする請求項８に記載の
方法 - 【請求項１０】自動的および／または手動的に予備選択した複数の試料点につ
いて、上記の操作過程が行なわれることを特徴とする請求項８または９に記載の
方法 - 【請求項１１】走査およびＦＣＳ評価において、求めた値に対する共通の画像
表示手段が配備されていることを特徴とする請求項８〜１０の一つに記載の方法
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| DE102004034987A1 (de) * | 2004-07-16 | 2006-02-02 | Carl Zeiss Jena Gmbh | Lichtrastermikroskop und Verwendung |
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7324200B2 (en) | 2004-06-24 | 2008-01-29 | Olympus Corporation | Fluorescence photometric apparatus |
| WO2006049180A1 (ja) * | 2004-11-01 | 2006-05-11 | Olympus Corporation | 発光測定装置及び発光測定方法 |
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